KR20220027062A

KR20220027062A - Dna-의존적 단백질 키나제 억제제

Info

Publication number: KR20220027062A
Application number: KR1020217039462A
Authority: KR
Inventors: 창허 치; 혼충 추이; 칭베이 정; 전판 양; 샤오린 장
Original assignee: 디잘 (지앙수) 파마슈티칼 씨오., 리미티드
Priority date: 2019-05-27
Filing date: 2020-05-26
Publication date: 2022-03-07
Also published as: US20220242884A1; CN113924305A; BR112021023824A2; EP3976624A4; BR112021023824A8; CA3137598A1; EP3976624A1; JP2022534261A; AU2020281332A8; AU2020281332A1; TW202110849A; MX2021014455A; WO2020238900A1; JP7696834B2; AR119018A1

Abstract

DNA-PK 억제제로서 유용한 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염이 본원에 개시된다. 또한, 하나 이상의 화학식 I의 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 DNA-PK 관련된 장애(예컨대, 암)를 치료하기 위해 이러한 화합물 또는 조성물을 사용하는 방법이 개시된다.

Description

DNA-의존적 단백질 키나제 억제제

본 명세서는 일반적으로 DNA-의존적 단백질 키나제("DNA-PK")를 선택적으로 조절하는 신규 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 활성 성분으로서 하나 이상의 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 암을 포함한 DNA-PK 관련된 질환의 치료에서의 화합물의 용도에 관한 것이다.

DNA-PK는 촉매적 서브유닛 DNA-PKcs 및 Ku 단백질의 이종이량체(Ku70/Ku80)로 구성된 핵 세린/트레오닌 단백질 키나제 복합체이다. 기능적으로, DNA-PK는 DNA 이중 가닥 파손(DSB)의 복구에서 중요한 성분으로, 게놈 통합성을 유지하는 역할을 하며, V(D)J 재조합 과정에서 각각 B- 및 T-세포에서 발견되는 항체/면역글로불린 및 T 세포 수용체의 매우 다양한 레퍼토리를 생성한다. 또한, DNA-PK 및 이의 성분은 염색질 구조의 조정, 텔로미어 유지, 전사 조절 및 복제 스트레스에 대한 반응을 포함한 다양한 생리학적 과정에 관여한다(Smith and Jackson, 1999; Goodwin and Knudsen, 2014).

DNA 형태의 인간 게놈은 주로 산화 대사의 부산물인 반응적 산소 종(ROS)의 맹공격에 지속적으로 노출된다. ROS는 단일 가닥 파손의 형태로 DNA 손상을 일으킬 수 있다. DSB는 이전의 단일 가닥 파손이 근접하여 발생한 경우 발생할 수 있다. 또한, DNA 복제 포크가 손상된 염기 패턴을 만나는 경우 단일 및 단일-이중 가닥 파손이 발생한다. 또한, 이온화 방사선(예컨대, 감마 또는 입자 방사선) 및 특정 항암제(예컨대, 비. 블레오마이신(B. Bleomycin))와 같은 외부 영향이 DSB를 유발할 수 있다. DSB는 또한 모든 척추동물의 기능적 면역계의 형성에 중요한 과정인 체세포 재조합의 중간체로 발생할 수 있다.

DSB가 수정되지 않거나 잘못 수정되는 경우, 돌연변이 및/또는 염색체 이상이 발생하여 세포 사멸을 초래할 수 있다. DSB가 제기되는 심각한 위협을 해결하기 위해, 진핵 세포는 DNA-PK가 핵심 역할을 하는 복구를 중재하기 위해 여러 메커니즘(예컨대, DNA 비-상동성 말단 결합(NHEJ) 및 상동성 재조합(HR))을 전개시킨다. 생화학적 연구에 따르면 DNA-PK는 DNA DSB의 출현에 의해 가장 효율적으로 활성화되는 것으로 밝혀졌다. DNA-PK 성분이 돌연변이되어 기능을 하지 않는 세포주는 방사선에 민감한 것으로 밝혀졌다(Smith and Jackson, 1999). DNA-PK 억제제는 또한 높은 내인성 수준의 DNA 손상을 갖는 종양에서 단일 작용제로 효과적일 수 있다. DNA-PK 억제제는, 단일 요법으로 또는 전립선암(Goodwin et al., 2013) 및 유방암(Medunjanin et al., 2010)에서 다른 작용제와의 조합으로, 높은 수준의 복제 스트레스를 갖는 종양을 표적으로 하는 것을 포함할 수 있는 종양학에 유용한 것으로 입증되었다(Lin et al., 2014; Ashley et al., 2014; Buisson et al., 2015).

따라서, DNA-PK를 억제하는 화합물은 약리학적 도구로서 필요하며, 암과 같은 DNA-PK 관련된 장애를 치료하기 위한 약물로서 상당한 관심을 받고 있다.

일 측면에서, 본 개시내용은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

상기 식에서, X₁, X₂, X₃, R¹, R², R³, R⁴ 및 고리 A는 본원에서 정의되는 바와 같다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 Ia의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

상기 식에서, R¹, R², R³, R⁴, n 및 고리 A는 본원에서 정의되는 바와 같다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 Ib의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

상기 식에서, R¹, R², R³, R⁴ 및 고리 A는 본원에서 정의되는 바와 같다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 Ic의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 Id의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 Ie의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다:

상기 식에서, X₁, X₃, Y₁, Y₂, Y₃, R¹, R², R⁵, 및 R⁶은 본원에서 정의되는 바와 같다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 활성 성분으로서 하나 이상의 화학식 I, 화학식 Ia, 화학식 Ib, 화학식 Ic, 화학식 Id, 화학식 Ie의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 또한 DNA-PK 키나제를 억제하는 데 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 전술된 것 중 하나 이상의 약학 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 대상체에서 DNA-PK 키나제를 억제하기 위한 약제의 제조에서 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 전술된 것 중 하나 이상의 약학 조성물의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 하나 이상의 화학식 I의 화합물 또는 이의 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 전술된 것 중 하나 이상의 약학 조성물을 사용하여 DNA-PK 키나제를 억제하는 방법을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 전술된 것 중 하나 이상의 약학 조성물을 사용하여 DNA-PK 관련된 장애(예컨대, 암)을 치료하는 방법을 제공한다. 추가의 측면에서, 본 개시내용은 제2 치료제, 바람직하게는 항종양제와 조합되는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 개시내용은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제, 바람직하게는 항종양제의 조합된 사용을 제공한다.

화합물

상기 식에서,

X₁, X₂, 및 X₃은 각각 독립적으로 C 또는 N이고, 단 X₁, X₂, 및 X₃ 중 적어도 하나는 N이고, X₁, X₂, 및 X₃ 중 적어도 하나는 C이고;

대시 선 "

"은 X₁와 X₂사이 및 X₂와 X₃사이의 결합이 단일 또는 이중 결합일 수 있음을 의미하고, 단 X₁와 X₂사이 및 X₂와 X₃사이의 결합 중 적어도 하나는 단일 결합이고;

R¹은 부재, 할로겐, 또는 C_1-6 알킬이고, 여기서 상기 C_1-6 알킬은 임의적으로 히드록실, 할로겐, 또는 중수소로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고;

각각의 R², R³ 및 R⁴는 독립적으로 부재, 할로겐, 히드록실, 시아노, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕실, -(CH₂)_n-Q로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 중수소, 히드록실, 아미노, 시아노, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, (C≡N)-C_1-6 알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, C_3-8 사이클로알킬, C_3-8 사이클로알콕실, 3-8원 아릴, 또는 3-8원 헤테로사이클릴로 일- 또는 독립적으로 다중 치환될 수 있고,

여기서, n은 0, 1 또는 2이고, Q는 3-8원의 포화 또는 불포화된 카르보사이클릴, 또는 3-8원의 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴이고;

고리 A는 5-12원 아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 1-5개의 고리 헤테로원자를 갖는 5-12원 헤테로아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 0-5개의 고리 헤테로원자를 갖는 8-10원 바이사이클릭 고리이고, 여기서 고리 A는 페닐이 아니다.

일부 실시양태에서, R²는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 옥세타닐, 사이클로펜타닐, 테트라히드로푸릴, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐, 사이클로헵타닐, 피페리디닐, 페닐, 피리디닐, 피리도닐, 옥소카닐, 테트라히드로피라닐, 디히드로피라닐, 스피로[3.3]헵타닐, 스피로[2.5]옥타닐, 바이사이클로[1.1.1]펜타닐, 바이사이클로 [3.2.1]옥타닐, 8-옥사 바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 히드록실, 시아노, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, C_3-8 사이클로알킬, C_3-8 사이클로알콕실, 3-8원 아릴, 또는 3-8원 헤테로사이클릴로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고, 이들은 추가로 임의적으로 할로겐, 중수소, 히드록실, 아미노, 시아노, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, 또는 C_1-6 할로알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, R²는

로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 히드록실, 시아노, 플루오로, 클로로, 브로모, 메틸, 에틸, 메톡실, 디플루오로메틸, 디플루오로메톡실, 또는 트리플루오로메톡실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, R²는 사이클로헥사닐, 또는 테트라히드로피라닐이고, 이들은 임의적으로 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_1-6 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다

일부 실시양태에서, R¹은 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, sec-부틸, tert-부틸, 또는 이소부틸이고, 이들은 임의적으로 히드록실, 할로겐, 또는 중수소로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, R¹은 메틸, 에틸, 트리-플루오로-메틸, 또는 트리-중수소-메틸이다.

일부 실시양태에서, 고리 A는 1개의 고리 헤테로원자 질소를 갖는 6원 헤테로아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 2-3개의 고리 헤테로원자를 갖는 9원 바이사이클릭 고리이고, 임의적으로, 9원 바이사이클릭 고리는 페닐- 또는 피리디닐-융합된 바이사이클릭 고리이고, 임의적으로, 고리 A는

로부터 선택된다.

일부 실시양태에서, 각각의 R³ 및 R⁴는 독립적으로 부재, 할로겐, 히드록실, 시아노, C_1-6 알킬, CN- C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, 3 내지 8원의 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 상기 헤테로사이클릴은 임의적으로 추가로 C_1-3 알킬로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, 고리 A는

이고, 각각의 R³ 및 R⁴는 독립적으로 부재, 메틸, 시아노, 메톡실, 클로로, 시아노-메틸, 피라졸릴, 옥사졸릴로부터 선택되고, 상기 피라졸릴 또는 옥사졸릴은 임의적으로 추가로 C_1-3 알킬로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 화학식 Ia 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는다:

상기 식에서, R₁, R₂, R₃, R₄, 고리 A는 본원에서 정의되는 바와 같다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 화학식 Ib 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는다:

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 화학식 Ic 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는다:

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 화학식 Id 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는다:

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 화학식 Ie 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는다:

상기 식에서,

X₁ 및 X₃ 중 하나는 N이고 다른 하나는 C이고, 대시 선 "

"은 X₁와 N 사이 및 N과 X₃사이의 결합이 단일 또는 이중 결합일 수 있음을 의미하고, 단 X₁와 N사이 및 N과 X₃사이의 결합 중 적어도 하나는 단일 결합이고;

R¹은 C_1-3 알킬이고,

R²는 사이클로펜틸, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐 또는 8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일이고, 이들은 임의적으로 할로겐 또는 C_1-3 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고,

Y₁, Y₂, 및 Y₃은 각각 독립적으로 C 또는 N이고, 단 Y₁, Y₂, 및 Y₃ 중 적어도 하나는 N이고;

R⁵는 할로겐 또는 C_1-3 알킬이고,

R⁶은 C_1-3 알킬이다.

일부 실시양태에서, 화학식 Ie의 R²는 비-치환된 사이클로펜틸, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐 또는 8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일이고, 이들은 임의적으로 할로겐 또는 C_1-3 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있다.

일부 실시양태에서, 화학식 Ie의 Y₃은 N이고, Y₁ 및 Y₂ 중 적어도 하나는 N이다.

일부 실시양태에서, 화학식 Ie의 R⁵는 메틸이다.

화학식 I의 예시적인 화합물 1-149는 하기 표 1에 제시된다.

명료함을 위해 별도의 실시양태의 맥락에서 설명된 본 개시내용의 특정 특징은 단일 실시양태에서 조합하여 제공될 수도 있다는 것이 이해된다. 역으로, 간결함을 위해 단일 실시양태의 맥락에서 설명된 본 개시내용의 다양한 특징은 또한 개별적으로 또는 임의의 적합한 하위 조합으로 제공될 수 있다.

본 개시내용의 다양한 위치에서, 연결 치환체가 기재된다. 구조가 연결기를 분명히 요구하는 경우, 그 기에 대해 나열된 마쿠시 변수는 연결기로 이해된다. 예컨대, 구조가 연결기를 필요로 하고 그 변수에 대한 마쿠시기 정의가 "알킬"을 나열하는 경우, "알킬"은 연결 알킬렌기를 나타내는 것으로 이해된다.

본원에 사용된 용어 "치환된"은, 화학기를 지칭할 때, 화학기가 제거되고 치환체에 의해 대체되는 하나 이상의 수소 원자를 갖는 것을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "치환체"는 당해 분야에 공지된 통상적인 의미를 가지며, 모(parent) 기에 공유적으로 부착되거나 적절한 경우 융합된 화학적 모이어티를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "임의적으로 치환된" 또는 "임의적으로… 치환된"은 화학기가 치환체를 갖지 않거나(즉, 비치환되거나) 하나 이상의 치환체를 가질 수 있음(즉, 치환됨)을 의미한다. 주어진 원자에서의 치환은 원자가에 의해 제한된다는 것을 이해해야 한다.

본원에 사용된 용어 "C_i-j"는 탄소 원자 수의 범위를 나타내며, i 및 j는 정수이고 탄소 원자 수의 범위는 끝점(즉, i 및 j) 및 그 사이의 각각의 정수 지점을 포함하고, j는 i보다 크다. 예컨대, C_1-6은 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자, 4개의 탄소 원자, 5개의 탄소 원자 및 6개의 탄소 원자를 포함하는 1 내지 6개의 탄소 원자의 범위를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 용어 "C_1-12"는 1 내지 10개, 1 내지 8개, 1 내지 6개, 1 내지 5개, 1 내지 4개, 1 내지 3개 또는 1 내지 2개의 탄소 원자를 포함하는 1 내지 12개의 탄소 원자를 나타낸다.

본원에 사용된 용어 "알킬"은 또 다른 용어의 일부로서 또는 독립적으로 사용되든 상관 없이 포화 또는 불포화된 탄화수소 쇄를 지칭하며, 후자는 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 갖는 탄화수소 쇄(알케닐 또는 알키닐)로 더욱 세분될 있다. 일부 실시양태에서, 알킬은 포화된 탄화수소 쇄를 지칭한다. 상기 언급된 탄화수소 쇄는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 용어 "C_i-j 알킬"은 i 내지 j개의 탄소 원자를 갖는 알킬을 지칭한다. 포화된 알킬기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 이소부틸, sec-부틸; 2-메틸-1-부틸, n-펜틸, 3-펜틸, n-헥실, 1,2,2-트리메틸프로필 등과 같은 더 높은 동족체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 불포화된 알킬기의 예는 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, n-부테닐, sec-부테닐, 에티닐, 프로핀-1-일, 프로핀-2-일 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "C_1-6 알킬"의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소-부틸 및 tert-부틸을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "C_1-3 알킬"의 예는 메틸, 에틸, 프로필 및 이소프로필을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

"알킬"이 연결 알킬렌기를 나타낼 때, 알킬렌기의 예는 메틸렌, 1,1-에틸렌, 1,2-에틸렌, 1,1-프로필렌, 1,2-프로필렌, 1, 3-프로필렌, 2,2-프로필렌, tert-부타닐렌 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 용어 "아미노"는 화학식 "-NH₂"의 기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "카르바모일"은 아미노카르보닐기(즉, NH₂-C(=O)-)를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "시아노"는 화학식 "-C≡N"의 기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "할로" 및 "할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "히드록실"은 화학식 "-OH"의 기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "알콕시"는 또 다른 용어의 일부로서 또는 독립적으로 사용되든 상관 없이 화학식 -O-알킬의 기를 지칭한다.

용어 "C_i-j 알콕시"는 알콕시기의 알킬 모이어티가 i 내지 j개의 탄소 원자를 갖는 것을 의미한다. 알콕시기의 예는 메톡실, 에톡실, 프로폭실(예컨대, n-프로폭시 및 이소프로폭시), t-부톡시 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "C_1-12 알콕실"의 예는 메톡실, 에톡실 및 프로폭실이다.

본원에 사용된 용어 "히드록시 C_1-12 알킬"은 화학식 "-C_1-12 알킬-OH"의 기를 지칭하며, 이 기의 알킬 모이어티는 1 내지 12개의 탄소 원자를 갖고, 하나 이상의 히드록실기는 알킬 모이어티의 임의의 탄소 원자에 연결될 수 있다. 일부 실시양태에서, "C_i-j 알킬-OH"는 1개의 히드록실기를 갖는다. "C_1-12 알킬-OH"의 예는 히드록시메틸, 1-히드록시에틸, 2-히드록시에틸 및 1-히드록시이소프로필이다.

본원에 사용된 용어 "C_i-j 할로알킬"은 할로겐 치환된(일-치환 또는 다중-치환된) C_i-j 알킬기를 지칭한다. "C_1-12 할로알킬"의 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 플루오로에틸, 디플루오로에틸, 트리플루오로에틸, 클로로에틸 및 브로모이소프로필이다. "디플루오로에틸"의 예는 1,1-디플루오로에틸이다. "트리플루오로에틸"의 예는 2,2,2-트리플루오로에틸 및 1,2,2-트리플루오로에틸이다.

"C_i-j 할로알콕실"의 예는 플루오로메톡실, 디플루오로메톡실 또는 트리-플루오로메톡실이다. "트리플루오로에톡시"의 예는 2,2,2-트리플루오로에톡시 및 1,2,2-트리플루오로에톡시이다.

본원에 사용된 용어 "아릴" 또는 "방향족"은 또 다른 용어의 일부로서 또는 독립적으로 사용되든 상관 없이 고리를 형성하는 원자 사이에 이중 결합 및 단일 결합이 교대로 있는 고리 시스템을 지칭한다. 본 개시내용에서, 용어 "아릴" 또는 "방향족"은 또한 슈도방향족을 포함하는 것으로 의도된다. 용어 "슈도방향족"은 엄격하게는 방향족은 아니지만 전자의 비국지화에 의해 안정화되고 방향족 고리와 유사한 방식으로 거동하는 고리 시스템을 지칭한다. 아릴 또는 방향족기는 일- 또는 다중-고리(들)를 가질 수 있다. 아릴기의 예는 페닐, 나프틸, 테트라히드로나프틸, 인다닐 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 O, S, N, P 등으로부터 선택되는 적어도 하나의 고리 형성 헤테로원자를 함유하는 아릴을 지칭한다. 헤테로아릴은 푸릴, 티에닐, 피리디닐, 트리아지닐, 피리딜, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 인돌리지닐, 인돌릴, 이소인돌릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸-5-온, 1,2,3-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 퀴나졸리닐, 이소퀴나졸리닐, 1,3,5-트리아지닐, 1H 티에노[2,3-c]피라졸릴, 티에노[2,3-b]푸릴, 3H-인돌릴, 벤조[b]푸라닐, 벤조[b]티오페닐, 1H-인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 테트라졸릴, 우리디닐 및 시토시닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 용어 "카르보사이클릴"은, 다른 용어의 일부로서 또는 독립적으로 사용되든 상관 없이 모노- 또는 폴리-사이클릭 고리(들)(예컨대, 2 또는 3개의 융합된, 브릿지된 또는 스피로 고리를 가짐)를 포함하는 임의의 고리를 지칭하며, 모든 고리 원자는 탄소이고 적어도 3개의 고리 형성 탄소 원자를 함유한다. 본원에 사용된 용어 "스피로" 고리는 하나의 단일 공통 원자를 통해 연결된 2개의 고리를 갖는 고리 시스템을 지칭하고; 용어 "융합된" 고리는 2개의 인접한 원자를 공유하는 2개의 고리를 갖는 고리 시스템을 지칭하고; 용어 "브릿지된" 고리는 용어는 3개 이상의 원자를 공유하는 2개의 고리를 갖는 고리 시스템을 지칭한다.

일부 실시양태에서, 카르보사이클릴은 3 내지 12개의 고리 형성 탄소 원자(즉, 3-12원 탄소 원자), 3 내지 10개의 고리 형성 탄소 원자, 3 내지 9개의 고리 형성 탄소 원자 또는 3 내지 8개의 고리 형성 탄소 원자를 함유할 수 있다. 카보사이클릴 그룹은 포화, 부분 불포화 또는 완전 불포화일 수 있다. 일부 실시양태에서, 카르보사이클릴기는 포화된 사이클릭 알킬기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 카르보사이클릴기는 그의 고리 시스템에 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 불포화된 사이클릭 알킬기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 불포화된 카르보사이클릴기는 하나 이상의 방향족 고리를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 포화 또는 불포화된 카르보사이클릴의 -CH₂- 기를 형성하는 하나 이상의 고리는 -C(O)- 기로 대체될 수 있다.

일부 실시양태에서, 카르보사이클릴기는 모노사이클릭 알킬기이다. 일부 실시양태에서, 카르보사이클 기는 포화된 모노사이클릭 알킬기이다. 포화된 모노사이클릭 알킬기의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

3-8"원 포화 또는 불포화된 카르보사이클릴"은 각각 3 내지 8, 3 내지 6, 또는 5 내지 8개의 고리 형성 탄소 원자를 갖는 포화, 부분 불포화 또는 완전 불포화된 모노-또는 폴리-사이클릭 고리 시스템이며, 하나 이상의 고리 형성 -CH₂- 기는 -C(O)- 기로 임의적으로 대체될 수 있다.

"3-8원 포화 또는 불포화된 카르보사이클릴"의 예는 C_3-6 사이클로알킬, 사이클로헥실, 사이클로헥세닐, 사이클로펜틸, 페닐, 나프틸 및 바이사이클로[1.1.1]펜탄-1-일이다. "C_3-8 사이클로알킬"의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 및 사이클로옥틸이다. 용어 "C_3-8 사이클로알콕실"은 화학식 "C_3-8 사이클로알킬-O-"의 기를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "헤테로사이클릴"은 카르보사이클릴기를 지칭하며, 하나 이상(예컨대, 1, 2 또는 3개)의 고리 원자는 O, S, N, P 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 헤테로원자에 의해 대체된다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 포화된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 그의 고리 시스템에 하나 이상의 이중 결합을 갖는 불포화된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 부분적으로 불포화된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 완전 불포화된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시양태에서, 불포화된 헤테로사이클릴기는 하나 이상의 방향족 고리를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴의 하나 이상의 고리 형성 -CH₂- 기는 -C(O)-, -S-, -S(O)-, 또는 -S(O)₂- 기로 임의적으로 대체될 수 있다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴이 그의 고리 시스템에 황을 함유하는 경우, 상기 고리 형성 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-옥사이드를 형성할 수 있다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 그의 고리 형성 탄소를 통해 화합물의 다른 부분에 연결된다. 일부 실시양태에서, 헤테로사이클릴은 그의 고리 형성 질소를 통해 화합물의 다른 부분에 연결된다.

일부 실시양태에서, N, O, 또는 S로부터 선택되는 1, 2, 또는 3개의 헤테로원자를 갖는 3-8원의 포화 또는 불포화된 모노- 또는 폴리-사이클릭 헤테로사이클릴.

3-8"원의 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴"은, 각각 3 내지 8개의 고리 형성 원자를 갖고, 이 중 적어도 하나의 고리 형성 원자는, 달리 명시되지 않는 한, 고리 형성 탄소 또는 질소를 통해 화합물의 다른 부분에 연결될 수 있는, 질소, 황 또는 산소로부터 선택되는, 포화, 부분 불포화 또는 완전 불포화된 모노- 또는 폴리-사이클릭 고리(들)(예컨대, 2 또는 3개의 융합된, 브릿지된 또는 스피로 고리를 가짐) 시스템이고, 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴의 하나 이상의 고리 형성 -CH₂- 기는 -C(O)-, -S-, -S(O)-, 또는 -S(O)₂-로 대체될 수 있고, 헤테로사이클릴은 그의 고리 시스템에 황을 함유하는 경우, 상기 고리 황 원자는 임의적으로 산화되어 S-옥사이드를 형성할 수 있다.

예시적인 모노사이클릭 헤테로사이클릴기는 옥세타닐, 피라닐, 1,1-디옥소티에타닐피롤리딜, 테트라히드로푸릴, 테트라히드로티에닐, 피롤릴, 푸라닐, 티에닐, 피라졸릴, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 피페리딜, 피페리딜, 피페라지닐, 모르폴리닐, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 피리도닐, 피리미도닐, 피라지노닐, 피리미도닐, 피리다조닐, 트리아지노닐 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

스피로 헤테로사이클릴의 예는 스피로피라닐, 스피로옥사진 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 융합된 헤테로사이클릴의 예는 페닐 융합된 고리 또는 피리디닐 융합된 고리, 예컨대 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴놀리지닐, 퀴나졸리닐, 아자인돌리지닐, 프테리디닐, 크로메닐, 이소크로메닐, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리지닐, 인다졸릴, 푸리닐, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조티에닐, 벤조티아졸릴, 카르바졸릴, 페나지닐, 페노티아지닐, 페난트리디닐, 이미다조[1,2-a]피리디닐, [1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리디닐, [1,2,3]트리아졸로[4,3-a]피리디닐기 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 브릿지된 헤테로사이클릴의 예는 모르파닐, 헥사메틸렌테트라미닐, 8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥탄, 1-아자-바이사이클로[2.2.2]옥탄, 1,4-디아자바이사이클로[2.2.2]옥탄(DABCO) 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본 개시내용의 "화합물"은 달리 명시되지 않는 한 도시된 구조의 모든 입체 이성질체, 기하 이성질체 및 호변 이성질체를 포괄하는 것으로 의도된다.

용어 "입체 이성질체"는 비대칭 화합물(예컨대, 하나 이상의 비대칭 치환된 탄소 원자 또는 "비대칭 중심"을 갖는 것들)의 다양한 입체 이성질체 배열(예컨대, 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 및 라세미체) 중 임의의 것을 지칭한다. 비대칭 중심을 함유하는 본 개시내용의 화합물은 광학적으로 활성(거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체) 또는 광학적으로 불활성인(라세미체) 형태로 단리될 수 있다. 용어 "거울상 이성질체"는 서로 겹쳐질 수 없는 거울상인 입체 이성질체 쌍을 포함한다. 한 쌍의 거울상 이성질체의 1:1 혼합물은 "라세미체 혼합물"이다. "부분입체 이성질체 또는 부분적 입체 이성질체"는 적어도 2개의 비대칭 원자를 갖지만 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 포함한다. 하나 이상의 비대칭 중심을 함유하는 특정 화합물은 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체 또는 칸-인골드-프렐로그(Cahn-Ingold-Prelog) R-S 시스템에 따라 각각의 비대칭 중심에서 절대 배열의 관점에서 (R)- 또는 (S)-로 정의될 수 있는 다른 입체 이성질체 형태를 생성할 수 있다. 절대 배열이 알려지지 않은 분해된 화합물은 비대칭 중심에 용어 "또는"을 사용하여 지정될 수 있다. 라세미체 혼합물로부터 광학 활성 형태를 제조하는 방법은 HPLC 또는 입체선택적 합성에 의한 분해와 같이 당해 분야에 공지되어 있다.

용어 "기하 이성질체" 또는 "시스 및 트랜스 이성질체"는 동일한 화학식을 갖지만 그들의 작용기가 3차원 공간에서 상이한 배향으로 회전하는 화합물을 지칭한다.

용어 "호변이성질체"는 동일한 화학식 및 총 전하를 갖는 화합물의 이성질적 양성자화 상태인 프로토트로픽(prototropic) 호변이성질체를 포함한다. 프로토트로픽 호변이성질체의 예는 케톤-에놀 쌍, 아미드-이미드산 쌍, 락탐-락팀 쌍, 엔아민-이민 쌍, 및 양성자가 헤테로사이클릭 시스템의 2개 이상의 위치를 차지할 수 있는 환상 형태, 예컨대, 1H- 및 3H-이미다졸, 1H-, 2H- 및 4H-1,2,4-트리아졸, 1H- 및 2H-이소인돌, 및 1H- 및 2H-피라졸을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 호변이성질체는 평형 상태에 있거나 적절한 치환에 의해 하나의 형태로 입체적으로 고정될 수 있다. 하나의 특정 호변이성질체 형태로서 명칭 또는 구조에 의해 확인된 본 개시내용의 화합물은 달리 명시되지 않는 한 다른 호변이성질체 형태를 포함하는 것으로 의도된다.

본 개시내용의 "화합물"은 또한 화합물 내 원자의 모든 동위원소를 포괄하는 것으로 의도된다. 원자의 동위원소는 원자번호는 같지만 질량수가 상이한 원자를 포함한다. 예컨대, 달리 명시되지 않는 한, 본 개시내용의 "화합물"에서 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소, 염소, 브롬화물 또는 요오드는 이들의 동위원소, 예컨대 ¹H, ²H, ³H, ¹¹C, ¹²C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁴N, ¹⁵N, ¹⁶O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³²S, ³³S,³⁴S, ³⁶S, ¹⁷F, ¹⁹F, ³⁵Cl, ³⁷Cl, ⁷⁹Br, ⁸¹Br, ¹²⁷I 및 ¹³¹I를 포함하지만 이에 제한되지 않는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 수소는 프로튬, 중수소 및 삼중수소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 용어 "중수소에 의해 치환된" 또는 "중수소 치환된"은 화학기에서 수소의 다른 이소형(예컨대, 프로튬)을 중수소로 대체한다. 일부 실시양태에서, 탄소는 ¹²C 및 ¹³C를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 "화합물"은 화합물 내 수소의 동위원소만을 포괄한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 "화합물"은 자연적으로 풍부한 원자의 동위원소만을 포괄한다.

또한, 본 개시내용의 "화합물"은 용매화된 형태 및 비용매화된 형태, 예컨대, 수화된 형태, 고체 형태로 존재할 수 있고, 본 개시내용은 이러한 모든 용매화된 형태 및 비용매화된 형태를 포괄하는 것으로 의도되는 것이 이해되어야 한다.

또한, 본 개시내용의 "화합물"은 약학적으로 허용되는 염의 형태로 존재할 수 있다는 것이 이해되어야 한다.

본원에 사용된 용어 "약학적으로 허용되는"은 적절한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하고 합리적인 이익/위험 비율의 균형이 잡힌 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투여 형태를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 약학적으로 허용되는 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 투여 형태는 규제 기관(예컨대, 미국 식품 의약청, 중국 식품 의약청 또는 유럽 의약청)에 의해 승인되거나 일반적으로 동물, 특히 인간에서 사용하기 위해 승인된 약전(예컨대, 미국 약전, 중국 약전 또는 유럽 약전)에 나열된 것들을 지칭한다.

본원에 사용된 "약학적으로 허용되는 염"은 모 화합물이 기존의 산성 모이어티(예컨대, 카르복실 등) 또는 염기성 모이어티(예컨대, 아민, 알칼리 등)를 그의 염 형태로 변환시킴으로써 변형되는 본 개시내용의 화합물의 유도체를 지칭한다. 많은 경우에, 본 개시내용의 화합물은 아미노 및/또는 카르복실기 또는 이와 유사한 기의 존재로 인해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다. 약학적으로 허용되는 염은 모 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 산 및/또는 염기 염이며, 이는 통상적으로 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않지 않다. 본 개시내용의 화합물의 적합한 약학적으로 허용되는 염은, 예컨대 무기산(예컨대, 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등) 또는 유기산(예컨대, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 트리메스산, 시트르산, 락트산, 페닐아세트산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 나파디실산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산, 살리실산, 술포살리실산 등)으로부터 유도될 수 있는 산-부가염을 포함한다.. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 포름산염이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 TFA 염이다.

본 개시내용의 화합물의 적합한 약학적으로 허용되는 염은 또한, 예컨대 무기 염기(예컨대, 나트륨, 칼륨, 암모늄 염 및 주기율표의 I 내지 XII족으로부터의 금속, 예컨대 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연, 구리 등의 히드록사이드, 카르보네이트, 바이카르보네이트 염) 또는 유기 염기(예컨대, 1차, 2차 및 3차 아민, 자연 발생 치환 아민을 포함하는 치환된 아민, 사이클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등)로부터 유도될 수 있는 염기 부가염을 포함한다. 특정 유기 아민은 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 당업자는 예시에 나타낸 것 이외의 산/염기-부가염을 형성하기 위해 산 또는 염기를 첨가하는 것도 가능할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 추가의 적합한 염의 목록은, 예컨대 문헌("Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); and "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002))에서 찾을 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물의 적합한 약학적으로 허용되는 염은 무기 염기염이다.

본 개시내용은 또한 본 개시내용의 화합물의 활성 중간체, 활성 대사물 및 전구약물을 포함한다. 본원에 사용된 "활성 중간체"는 최종 합성 화합물과 동일하거나 본질적으로 동일한 생물학적 활성을 나타내는 합성 과정의 중간체 화합물을 지칭한다.

본원에 사용된 "활성 대사물"은, 특정 화합물과 동일하거나 본질적으로 동일한 생물학적 활성을 나타내는, 동물 또는 인간 신체에서 대사 또는 생체변환을 통해 생성된 본 개시내용의 화합물 또는 이의 염 또는 전구약물의 분해 또는 최종 생성물을 지칭한다. 이러한 대사물은, 예컨대 투여된 화합물 또는 염 또는 전구약물의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 탈아미드화, 에스테르화, 탈에스테르화, 효소적 절단 등으로부터 발생할 수 있다.

본원에 사용된 "전구약물"은 동물 또는 인간 대상체에게 투여될 때 활성 모 약물을 방출하는 임의의 화합물 또는 접합체를 지칭한다. 전구약물은 변형이 통상적인 조작에서 또는 생체내에서 모 화합물로부터 절단될 수 있는 방식으로 화합물에 존재하는 작용기를 변형함으로써 제조될 수 있다. 전구약물은 히드록실, 아미노, 술프히드릴, 또는 카르복실기가 포유동물 대상체에게 투여될 때 절단되어 각각 유리 히드록실, 아미노, 술프히드릴, 또는 카르복실기를 형성할 수 있는 임의의 기에 결합된 화합물을 포함한다. 전구약물의 예는 본 개시내용의 화합물의 알콜 및 아민 작용기의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트 유도체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 전구약물의 제조 및 사용은 문헌(THiguchi and V. Stella, "pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, and Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, 둘 다 전체가 참조로 본원에 포함됨)에 논의되어 있다.

DNA-PK를 선택적으로 억제할 수 있는 신규 화합물 또는 약학적으로 허용되는 염이 본원에 개시된다. 다른 임상적으로 이용 가능한 DNA-PK 억제제와 비교할 때, 본 개시내용의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 특정 개선된 특성, 예컨대 더 높은 BBB 투과(따라서 CNS로 전이된 암, 특히 뇌 전이 및 연수막 전이의 치료에 잠재적으로 유용함), 더 나은 효능 등을 나타낸다. 이들은 또한 공지된 DNA-PK 억제제와 비교하여 유리한 독성 프로파일 및/또는 유리한 대사 또는 약동학적 프로파일을 가질 수 있다.

따라서, 이러한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 암, 특히 뇌 전이를 갖는 암의 치료에 특히 유용할 수 있다.

합성 방법

본원에 제공된 화합물의 염, 에스테르, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체를 포함하는 본원에 제공된 화합물의 합성은 실시예의 합성 반응식에 예시되어 있다. 본원에 제공된 화합물은 임의의 공지된 유기 합성 기술을 이용하여 제조될 수 있고, 많은 가능한 합성 경로 중 임의의 것에 따라 합성될 수 있으며, 따라서 이러한 반응식은 단지 예시적이며, 본원에 제공된 화합물을 제조하는 데 이용될 수 있는 다른 가능한 방법을 제한하려는 것이 아니다. 또한, 반응식의 단계는 더 나은 예시를 위한 것이며, 적절하게 변경될 수 있다. 실시예의 화합물의 실시양태는 연구 및 잠재적으로 규제 기관에 제출할 목적으로 중국에서 합성되었다.

본 개시내용의 화합물을 제조하기 위한 반응은 유기 합성 분야의 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있는 적합한 용매 중에서 수행될 수 있다. 적합한 용매는 반응이 수행되는 온도, 예컨대 용매의 동결 온도 내지 용매의 비등 온도 범위일 수 있는 온도에서 출발 물질(반응물), 중간체 또는 생성물과 실질적으로 비-반응성일 수 있다. 주어진 반응은 하나의 용매 또는 하나 초과의 용매의 혼합물에서 수행될 수 있다. 특정 반응 단계에 따라, 특정 반응 단계에 적합한 용매는 당업자에 의해 선택될 수 있다.

본 개시내용의 화합물의 제조는 다양한 화학기의 보호 및 탈보호를 수반할 수 있다. 보호 및 탈보호의 필요성 및 적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호기의 화학은, 예컨대 문헌(T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999), 전체가 참조로 본원에 포함됨)에서 찾을 수 있다.

반응은 당해 분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 모니터링될 수 있다. 예컨대, 생성물 형성은 핵 자기 공명 분광법(예컨대, ¹H 또는 ¹³C), 적외선 분광법, 분광광도측정법(예컨대, UV-가시선), 질량 분광측정법과 같은 분광학 수단에 의해 또는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LCMS) 또는 박층 크로마토그래피(TLC)와 같은 크로마토그래피 방법에 의해 모니터링될 수 있다. 화합물은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)("Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization" Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs J. Combi. Chem. 2004, 6(6), 874-883, 전체가 참조로 본원에 포함됨) 및 순상 실리카 크로마토그래피를 포함하는 다양한 방법에 의해 당업자에 의해 정제될 수 있다.

본원에 사용된 약어는 하기와 같이 정의된다: "1 ×" 또는 "× 1"은 1회, "2 ×" 또는 "× 2"는 2회, "3 ×" 또는 "× 3"은 3회, "4 ×" 또는 "× 4"는 4회, "5 ×" 또는 "× 5"는 5회, "℃"는 섭씨, "eq" 또는 "eq."는 당량, "g"는 그램, "mg"는 밀리그맬, "L"는 리터, "mL" 또는 "ml"는 밀리리터, "μL"는 마이크로리터, "N"는 노르말, "M"은 몰, "mmol"은 밀리몰," min"은 분, "h" 또는 "hr"은 시간, "r.t." 또는 "rt"는 실온, "atm"는 대기, "psi"는 평방 인치당 파운드, "conc."는 농도, "sat" 또는 "sat'd"는 포화된, "MS" 또는 "Mass Spec"는 질량 분광측정법, "ESI"는 전자분무 이온화 질량 분광법, "LCMS"는 액체 크로마토그래피 질량 분광측정법, "HPLC"는 고압 액체 크로마토그래피, "RP"는 역상, "TLC" 또는 "tlc"는 박층 크로마토그래피, "SM"은 출발 물질, "NMR"은 핵자기 공명 분광법, "¹H"는 양성자, "δ"는 델타, "s"는 단일선, "d"는 이중선, "t"는 삼중선, "q"는 사중선, "m"은 다중선, "br"은 광역, "Hz"는 헤르츠, "α", "β", "R", "S", "E", 및 "Z"는 당업자에게 친숙한 입체화학적 명칭이다.

약학 조성물

본 개시내용은 본 개시내용의 적어도 하나의 화합물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 약학 조성물은 본 개시내용의 하나 초과의 화합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 약학 조성물은 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다.

약학적으로 허용되는 담체는 약학 분야에서 널리 공지된 방식으로 제조될 수 있는 당해 분야의 통상적인 의약 담체이다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 화합물은 약학 조성물의 제조를 위해 약학적으로 허용되는 담체와 혼합될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "약학적으로 허용되는 담체"는 하나의 위치, 체액, 조직, 기관(내부 또는 외부), 또는 신체의 일부로부터 또 다른 위치, 체액, 조직, 기관 또는 신체의 일부로 본원에 제공된 화합물을 운반 또는 수송하는 데 관여되는 약학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질을 지칭한다. 약학적으로 허용되는 담체는 비히클, 희석제, 부형제, 또는 과도한 독성 또는 부작용 없이 동물의 조직과 접촉하는 데 사용될 수 있는 다른 물질일 수 있다. 예시적인 약학적으로 허용되는 담체는 당, 전분, 셀룰로스, 맥아, 트라가칸트, 젤라틴, 링거액, 알긴산, 등장 식염수, 완충제 등을 포함한다. 본 개시내용에서 사용될 수 있는 약학적으로 허용되는 담체는 당해 분야에 일반적으로 공지된 것, 예컨대 문헌("Remington Pharmaceutical Sciences" Mack Pub. Co., New Jersey (1991), 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 포함한다.

약학적으로 허용되는 담체로 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 하기를 포함한다: (1) 당, 예컨대 락토스, 글루코스 및 슈크로스; (2) 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; (3) 셀룰로스 및 이의 유도체, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스 및 셀룰로스 아세테이트; (4) 트라가칸트 분말; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 활석; (8) 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌약 왁스; (9) 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유; (10) 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; (11) 폴리올, 예컨대 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜; (12) 에스테르, 예컨대 에틸 올레이트 및 에틸 라우레이트; (13) 한천; (14) 완충제, 예컨대 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; (15) 알긴산; (16) 발열원 없는 물; (17) 등장 식염수; (18) 링거액; (19) 알콜, 예컨대 에틸 알콜, 프로판 알콜; (20) 포스페이트 완충 용액; 및 (21) 아세톤과 같은 약학적 제형에 사용되는 다른 무독성의 상용성 물질.

약학 조성물은 pH 조절제 및 완충제, 독성 조절제 등과 같은 생리학적 조건을 근사화하기 위해 필요한 약학적으로 허용되는 보조 물질, 예컨대 나트륨 아세테이트, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 나트륨 락테이트 등을 함유할 수 있다.

약학 조성물의 형태는 투여 경로, 질환의 정도, 또는 투여되는 용량을 포함하나 이에 제한되지 않는 다수의 기준에 의존한다. 약학 조성물은 경구, 비강, 직장, 경피, 정맥내 또는 근육내 투여용으로 제형화될 수 있다. 예컨대, 비강 투여용 투여 형태는 에어로졸, 용액, 점적제, 겔 또는 건조 분말로서 편리하게 제형화될 수 있고; 비강내 투여용 제형은 유체 제형으로 제형화될 수 있다. 원하는 투여 경로에 따라, 약학 조성물은 정제, 캡슐, 환제, 당의정, 분말, 과립, 사셰, 카셰, 로젠지, 현탁액, 에멀젼, 용액, 시럽, 에어로졸(고체로서 또는 액체 매질 중에), 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 패치, 흡입제 또는 좌제의 형태로 제형화될 수 있다.

약학 조성물은 또한 당해 분야에 공지된 절차를 이용하여 환자에게 투여한 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 일부 실시양태에서, 약학 조성물은 지속 방출 형태로 제형화된다. 본원에 사용된 용어 "지속 방출 형태"는 대상체, 주로 대상체의 위장관에서 연장된 기간(연장된 방출)에 걸쳐 또는 특정 위치에서(제어된 방출) 생체흡수에 이용 가능하도록 약학 조성물로부터 활성제를 방출하는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 연장된 기간은 약 1시간 내지 24시간, 2시간 내지 12시간, 3시간 내지 8시간, 4시간 내지 6시간, 1 내지 2일 또는 그 초과일 수 있다. 특정 실시양태에서, 연장된 기간은 적어도 약 4시간, 적어도 약 8시간, 적어도 약 12시간, 또는 적어도 약 24시간이다. 약학 조성물은 정제의 형태로 제형화될 수 있다. 예컨대, 활성제의 방출 속도는 위장관액에서 활성제의 용해 및 pH와 무관한 정제 또는 알약 외부로의 후속 확산에 의해 제어될 수 있을 뿐만 아니라, 정제의 붕해 및 침식의 물리적 과정에 의해서도 영향을 받을 수 있다. 일부 실시양태에서, 문헌("Medical Applications of Controlled Release," Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974); "Controlled Drug Bioavailability," Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball(eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J MacromolSci. Rev. Macromol Chem. 23:61; Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105)에 기재된 중합체 물질이 지속 방출에 사용될 수 있다. 상기 참조문은 전체가 참조로 본원에 포함된다.

특정 실시양태에서, 약학 조성물은 약 0.0001 mg 내지 약 100 mg의 본 개시내용의 화합물(예컨대, 약 0.0001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.01 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 4 mg, 약 0.1 mg 내지 약 3 mg, 약 0.1 mg 내지 약 2 mg, 약 0.1 mg 내지 약 1 mg, 약 0.1 mg 내지 약 0.5 mg, 약 1 mg 내지 약 10 mg, 약 1 mg 내지 약 5 mg, 약 5 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 20 mg, 약 5 mg 내지 약 30 mg, 약 5 mg 내지 약 40 mg, 약 5 mg 내지 약 50 mg, 약 10 mg 내지 약 100 mg, 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 30 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg)을 포함한다. 1일당 대상체당 적합한 용량은 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 바람직하게는 약 0.1 mg 내지 약 5 mg, 약 5 mg 내지 약 10 mg, 또는 약 1 mg 내지 약 5 mg일 수 있다.

특정 실시양태에서, 약학 조성물은 단위 투여 형태로 제형화될 수 있고, 각각의 용량은 약 0.0001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.001 mg 내지 약 10 mg, 약 0.01 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 약 0.1 mg 내지 약 5 mg, 약 0.1 mg 내지 약 4 mg, 약 0.1 mg 내지 약 3 mg, 약 0.1 mg 내지 약 2 mg, 약 0.1 mg 내지 약 1 mg, 약 0.1 mg 내지 약 0.5 mg, 약 1 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 10 mg, 약 5 mg 내지 약 20 mg, 약 5 mg 내지 약 30 mg, 약 5 mg 내지 약 40 mg, 약 5 mg 내지 약 50 mg, 약 10 mg 내지 약 100 mg, 약 20 mg 내지 약 100 mg, 약 30 mg 내지 약 100 mg, 약 40 mg 내지 약 100 mg, 약 50 mg 내지 약 100 mg의 본 개시내용의 화합물을 함유한다. 용어 "단위 투여 형태"는 인간 대상체 및 다른 포유동물을 위한 단일 용량으로 적합한 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며, 각각의 단위는 적절한 약학적 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 활성 물질의 미리 결정된 양을 함유한다.

일부 실시양태에서, 약학 조성물은 제1 활성 성분으로서 본 개시내용의 하나 이상의 화합물을 포함하고, 제2 활성 성분을 추가로 포함한다. 제2 활성 성분은 화학요법제, 면역요법제, 세포 신호 변환 억제제, 세포 신호 변환 억제제, 알킬화제, 토포이소머라제 억제제, 유사분열 억제제, 항호르몬제 등을 포함하지만 이에 제한되지 않은 당해 분야에 공지된 임의의 면역조절제 또는 항종양제일 수 있다. 이러한 면역조절제 또는 항종양제의 예는 백금 기반 화학요법제(예컨대, 시스플라틴(DDP), 카르보플라틴(CBP), 술파토-1,2-디아미노사이클로헥산 백금(SHP), 네다플라틴, 옥살리플라틴(OXA), 라보플라틴), 도세탁셀, 파클리탁셀, 독소루비신, 에토포시드, 미톡산트론, CTLA-4 억제제, 항-CTLA-4 항체, PD-1 억제제, PD-L1 억제제, 항-PD-1/PD-L1 항체, CD39 억제제, 항-CD39 항체, CD73 억제제, 항-CD73 항체, CCR2 억제제, 항-CCR2 항체, EGFR 억제제, CDK 4/6 억제제, MELK 억제제, OX40 효능제, 항안드로겐 억제제, IgG4 이소형 항체, 티로신 키나제 억제제, DNA 메틸트랜스퍼라제 억제제, Hsp90 억제제, FGFR 억제제, mTOR 억제제, 아로마타제 억제제, VEGF 억제제, LHRH 길항제, PI3K 억제제, AKT 억제제, 오로라 키나제 억제제, MEK 억제제, HDAC 억제제, BET 억제제, PIK3CA 억제제, 프로테아좀 억제제, 다른 SERD, 파네실트랜스퍼라제 억제제, VEGF-A 항체, ErbB3(Her3) 항체, 프로테아좀 억제제, 단백질 키나제 Cβ 억제제, 항-IGF-1R 항체, 항-HER2 항체, SERM, IGF 억제제, 항-IgG 항체 등이다. 암 또는 종양을 치료하기 위한 항종양제의 대표적인 예는 시스플라틴, 카보플라틴, SHP, 네다플라틴, 옥살리플라틴, 라보플라틴, 도세탁셀, 파클리탁셀, 독소루비신, 에토포사이드, 미톡산트론, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 젬시타빈, 사이클로포스파미드, 클로르마부실, 카무스틴, 메토트렉세이트, 플루오로우라실, 악티노마이신, 에피루비신, 안트라사이클린, 블레오마이신, 미토마이신-C, 이리노테칸, 토포테칸, 테니포사이드 인터루킨, 인터페론, 트레멜리무맙, 이필리무맙, 펨브롤리주맙, 니볼루맙, 아벨루맙, 더발루맙, 아테졸리주맙, IPH 52, IPH 53, CPI-006, 플로잘리주맙, MLN1202, 세툭시맙, 라파티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네라티닙, 트라스투주맙, 아도-트라스투주맙 엠탄신, 페르투주맙, MCLA-128, 아나스트로졸, 랄록시펜, G1T38, 타목시펜, 고세렐린, 엔잘루타미드, 보리노스타트, 엔티노스타트, 수니티닙, 파조파닙, 베바시주맙, 라니비주맙, 페갑타닙, 세디라닙, 다사티닙, GDC-0980, 게다톨리십, 알펠리십, BKM120, 코판리십, AZD8835, GDC-0941, 타셀리십, 템시롤리무스, 에베롤리무스, 사파니세르팁, AZD5363, MK2206, 파니투무맙, 펨브롤리주맙, 소라페닙, 팔보시클립, 아베마시클립, 리보시클립, 크리조티닙, 도비티닙, 룩솔리티닙, 아자시티딘, CC-486, HSP90 가네테스핍, 데비오 1347, 에르다피티닙, 비투제르팁, 알리세르팁, 셀루메티닙, GS-5829, GSK525762, MLN9708, GDC-0810, AFP464, 티피파르닙, 세리반투맙, 보르테조밉, 엔자스타우린, AVE1642, 크센투주맙, 달로투주맙, AMG 479 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

이러한 항종양의 예는 또한 문헌(Cancer Principles and Practice of Oncology by V. T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (Feb. 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers)에서 찾을 수 있다. 당업자는 또한 관련된 약물 및 암의 특정 특징에 기초하여 작용제의 어떤 조합이 유용할 것인지를 식별할 수 있을 것이다.

본 개시내용의 이러한 측면에 따라, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 및 상기 열거된 면역조절제 또는 항종양제 중 임의의 하나를 포함하는, 암의 치료에 사용하기에 적합한 조합물이 제공된다.

따라서, 본 개시내용의 추가 측면에서, 상기 열거된 것으로부터 선택되는 면역조절제 또는 화학요법제와 조합된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염이 제공된다.

본원에서, 용어 "조합"이 사용되는 경우, 이는 동시, 개별 또는 순차적 투여를 지칭하는 것으로 이해되어야 한다. 일부 실시양태에서, "조합"은 동시 투여를 지칭한다. 본 개시내용의 다른 측면에서, "조합"은 개별 투여를 지칭한다. 본 개시내용의 추가 측면에서, "조합"은 순차적 투여를 지칭한다. 투여가 순차적이거나 개별적인 경우, 제2 성분 투여의 지연은 조합의 유익한 효과를 상실할 정도의 지연이 되어서는 안된다.

본 개시내용의 추가 측면에 따라, 상기 열거된 것들로부터 선택되는 면역조절제 또는 항종양제와 조합하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 공동으로 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

본 개시내용의 추가 측면에 따라, 면역조절 또는 항암 효과를 생성하는 데 사용하기 위한, 상기 열거된 것으로부터 선택되는 면역조절제 또는 항종양제와 조합하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 공동으로 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

본 개시내용의 추가 측면에 따라, DNA-PK 관련된 장애, 예컨대 NSCLC, RCC, 전립선암, 또는 유방암 등을 치료하는 데 사용하기 위한, 상기 열거된 것으로부터 선택되는 면역조절제 또는 항종양제와 조합하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 공동으로 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

본 개시내용의 추가 측면에 따라, 상기 열거된 것으로부터 선택되는 면역조절제 또는 항종양제와 조합하여 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 키트가 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태에 따라, 하기를 포함하는 키트가 제공된다:

a) 제1 단위 투여 형태의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염;

b) 제2 단위 투여 형태의 상기 열거된 것으로부터 선택되는 면역조절제 또는 항종양제; 및

c) 상기 제1 및 제2 투여 형태를 담기 위한 용기.

치료 의약에서의 이들의 용도 이외에, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 또한 새로운 치료제 탐색의 일환으로 고양이, 개, 토끼, 원숭이, 래트 및 마우스와 같은 실험 동물에서 DNA-PK의 활성 또는 발현의 평가를 위한 시험관내 및 생체내 시험 시스템의 개발 및 표준화에서 약리학적 도구로 유용하다.

상기 다른 약학 조성물, 공정, 방법, 용도 및 약제 제조 특징에서, 본원에 기재된 본 개시내용의 화합물의 대안적이고 바람직한 실시양태가 또한 적용된다.

치료 방법

본 개시내용은 유효량의 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, DNA-PK 관련된 장애를 치료하는 방법을 제공한다.

본 개시내용은 또한 DNA-PK 관련된 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 방법은 유효량의 본 개시내용의 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "DNA-PK 관련된 장애"는 발병 또는 발달 또는 둘 모두가 DNA-PK의 발현 또는 활성과 관련된 질환을 지칭한다. 예는 과증식성 장애(예컨대, 암)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

일부 실시양태에서, DNA-PK 관련된 장애는 암, 바람직하게는 DNA-PK 과발현 암이다. "DNA-PK 과발현 암"은 동일한 조직 유형의 비암성 세포와 비교하여 암 또는 종양 세포에서 상당히 더 높은 수준의 DNA-PK 단백질을 갖는 것이다. 이러한 과발현은 유전자 증폭 또는 증가된 전사 또는 번역에 의해 유발될 수 있다. DNA-PK 과발현은 진단 또는 예후 분석에서 세포에 존재하는 DNA-PK 단백질의 증가된 수준을 (예컨대, 면역조직화학 검정; IHC를 통해) 평가함으로써 결정될 수 있다. 대안적으로, 또는 추가로, 세포에서, 예컨대 형광 계내 혼성화(FISH; 1998년 10월 공개된 WO98/45479 참조), 서던 블롯팅, 또는 실시간 정량적 PCR(RT-PCR)과 같은 중합효소 연쇄 반응(PCR) 기술(Methods 132: 73-80(1990)을 통해 DNA-PK 코딩 핵산의 수준을 측정할 수 있다. 상기 검정 외에도, 다양한 생체내 검정이 당업자에게 이용 가능하다. 예컨대, 검출 가능한 표지, 예컨대 방사성 동위원소로 선택적으로 표지된 항체에 환자의 신체 내의 세포를 노출시킬 수 있고, 환자의 세포에 대한 항체의 결합을, 예컨대 방사능에 대한 외부 스캐닝에 의해 또는 이전에 항체에 노출된 환자로부터 취한 생검을 분석함으로써 평가할 수 있다.

특히, 암은 폐암(예컨대, 비-소세포 폐암(NSCLC), 소세포 폐암, 폐 선암종, 대세포 폐암, 편평세포 폐암), 신세포 암종(RCC), 전립선암, 유방암, 난소암, 자궁내막암, 자궁경부암, 골암, 자궁암, 결장암, 백혈병, 교모세포종, 흑색종, 연골육종, 뇌암, 담관암, 골육종, 림프종, 선종, 골수종, 간세포 암종, 부신피질 암종, 췌장암, 방광암, 간암, 위암, 결장직장암, 식도암, 고환암, 피부암, 신장암, 중피종, 신경모세포종, 갑상선암, 두경부암, 식도암, 눈암, 비인두암 또는 구강암을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 실시양태에서, 암은 NSCLC, RCC, 전립선암 또는 유방암이다. 본원에 언급된 암은 달리 명시되지 않는 한 임의의 단계에 있을 수 있다. 일부 실시양태에서, 암은 초기 단계 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 국소적으로 진행된 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 국소적으로 진행된 암 및/또는 전이성 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 침윤성 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 기존 요법에 내성이 있는 암이다.

본원에 사용된 용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본원에 기재된 바와 같은 질환 또는 장애, 또는 이의 하나 이상의 증상을 역전시키거나, 완화시키거나, 발병을 지연시키거나, 진행을 억제하는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발생한 후에 투여될 수 있다. 다른 실시양태에서, 치료는 증상의 부재 하에 투여될 수 있다. 예컨대, 치료는 (예컨대, 증상의 병력에 비추어 및/또는 유전적 또는 다른 감수성 인자에 비추어) 증상의 발병 이전에 감수성인 개체에게 투여될 수 있다. 예컨대, 증상의 재발을 나타내거나 지연시키기 위해 증상이 해결된 후에도 치료를 계속할 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 약학 조성물은 비경구 경로 또는 비-비경구 경로를 통해 투여된다. 일부 실시양태에서, 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물 또는 입체 이성질체 또는 약학 조성물은 경구로, 장으로, 협측으로, 비강으로, 비강내로, 경점막으로, 표피로, 경진피로, 피부로, 눈으로, 폐로, 직장으로, 설하로, 질로, 국소적으로, 피하로, 정맥내로, 근육내로, 동맥내로, 경막내로, 피막내로, 안와내로, 심장내로, 진피내로, 복강내로, 경기관으로, 표피하로, 관절내로, 피막하로, 척추내로, 지주막하로, 또는 흉골내로 투여된다.

본원에 제공된 화합물은 순수한 형태로, 다른 활성 성분과 조합하여 또는 본 개시내용의 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 당해 분야에 공지된 하나 이상의 항암제 또는 항염증제(들)와 공동으로 또는 순차적으로 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 수 있다. 이러한 조합의 개별 화합물은 개별 또는 조합된 약학 조성물로 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 바람직하게는, 개별 화합물은 조합된 약학 조성물로 동시에 투여될 것이다. 공지된 치료제의 적절한 용량은 당업자에 의해 용이하게 인식될 것이다.

일부 실시양태에서, 투여는 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 또는 2일마다 1회, 3일마다 1회, 4일마다 1회, 5일마다 1회, 6일마다 1회, 주 1회 수행된다.

본원에 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 치료학적 유효량은 체중, 연령, 과거 병력, 현재 약물, 대상체의 건강 상태 및 교차 반응, 알레르기, 과민성 및 부작용의 가능성 뿐만 아니라, 투여 경로 및 질병 발환 정도와 같은 당해 분야에 공지된 다양한 인자에 따라 달라질 것이다. 용량은 이들 및 다른 상황 또는 요건에 의해 지시된 바와 같이 당업자(예컨대, 의사 또는 수의사)에 의해 비례적으로 감소 또는 증가될 수 있다.

일부 실시양태에서, 본원에 제공된 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 약학 조성물은 경구로 투여된다. 경구 투여의 경우, 원하는 목표를 달성하는 어떠한 용량도 적절하다. 일부 실시양태에서, 적합한 1일 용량은 약 0.001-100 mg, 바람직하게는 0.1 mg 내지 5 g, 더욱 바람직하게는 5 mg 내지 1 g, 더욱 바람직하게는 10 mg 내지 500 mg이고, 투여는 1일 1회, 1일 2회, 1일 3회, 매일, 또는 주 3-5일 수행된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 하나 이상의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염 또는 약학 조성물의 용량은 하루당 약 0.0001 mg, 바람직하게는 0.001 mg, 0.01 mg, 0.1 mg, 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg의 범위이다.

화합물의 용도

특정 실시양태에서, 본 개시내용은 DNA-PK 관련된 장애를 치료하기 위한 약제의 제조에서의 본 개시내용의 화합물, 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 약학 조성물의 용도를 제공한다. 특정 실시양태에서, DNA-PK 관련된 장애는 암을 포함한다.

본 개시내용에서 화합물 및 이의 약학 조성물은 포유동물, 특히 인간에서 임의의 DNA-PK 관련된 장애(발현 또는 활성)의 발병 또는 발달의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

이러한 상황에서, 본 개시내용은 또한 본 개시내용의 화합물 또는 약학 조성물을 단독으로 또는 다른 성분(예컨대, 제2 활성 성분, 예컨대 항염증제 또는 항암제)과 조합하여 치료하기에 적합한 환자를 스크리닝하는 방법을 제공한다. 방법은 환자로부터 조직 샘플을 시퀀싱하는 단계 및 환자에서 DNA-PK의 축적을 검출하는 단계를 포함한다.

실시예

하기는 본 개시내용의 일반적인 방법을 추가로 설명한다. 본 개시내용의 화합물은 당해 분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 하기는 본 개시내용의 바람직한 화합물의 상세한 제조 방법을 예시한다. 그러나, 이들은 본 개시내용의 화합물의 제조 방법을 결코 제한하지 않는다.

합성 실시예

본원에 제공된 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하여 본원에 제공된 화합물의 합성은 실시예의 합성 반응식에 예시되어 있다. 본원에 제공된 화합물은 임의의 공지된 유기 합성 기술을 이용하여 제조될 수 있고 많은 가능한 합성 경로 중 임의의 것에 따라 합성될 수 있으며, 따라서 이러한 반응식은 단지 예시적이며 본원에 제공된 화합물을 제조하는 데 이용될 수 있는 다른 가능한 방법을 제한하려는 것이 아니다. 또한, 반응식에서 단계는 더 나은 설명을 위한 것이며 적절하게 변경될 수 있다. 실시예의 화합물의 실시양태는 연구 및 잠재적으로 규제 기관에 제출할 목적으로 합성되었다.

본 개시내용의 화합물의 제조는 다양한 화학기의 보호 및 탈보호를 수반할 수 있다. 보호 및 탈보호의 필요성 및 적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 보호기의 화학은, 예컨대 문헌(T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999), 전체가 참조로 본원에 포함됨)에서 찾을 수 있다.

실시예에서 화합물의 구조는 핵 자기 공명(NMR) 또는/및 액체 크로마토그래피-질량 분광측정법(LC-MS)에 의해 특징화된다. NMR 화학적 이동(δ)은 10^-6(ppm) 단위로 표시된다. ¹H-NMR 스펙트럼은 내부 표준으로 테트라메틸실란과 함께 (TopSpin 프로그램 제어 하에) ICON-NMR을 이용하여 브루커(Bruker) AVANCE NMR(300 MHz 또는 400 MHz) 분광측정기에서 디메틸 술폭사이드-d6(DMSO-d6) 또는 CDCl₃ 또는 CD₃OD 또는 D₂O 또는 아세톤_d₆ 또는 CD₃CN(Innochem 또는 Sigma-Aldrich 또는 Cambridge Isotope Lab., Inc.)에서 기록된다.

MS 측정은 양이온 및 음이온 방식으로 전자분무 소스와 함께 시마주(Shimadzu) 2020 질량 분광측정기를 사용하여 수행된다.

고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 측정은 심-팩(Shim-pack) XR-ODS C18 컬럼(3.0×50 mm, 2.2 μm), 또는 아센티스 익스프레스(Ascentis Express) C18 컬럼(2.1×50 mm, 2.7 μm), 또는 아질렌트 포로쉘(Agilent Poroshell) HPH-C18 컬럼(3.0×50 mm, 2.7 μm)을 사용하여 시마주 LC-20AD 시스템 또는 시마주 LC-20ADXR 시스템 또는 시마주 LCl-30AD 시스템에서 수행된다.

박막 크로마토그래피는 시노팜 케미칼 리에이즌트 베이징 코. 엘티디.(Sinopharm Chemical Reagent Beijing Co., Ltd.) 및 지노우 케미칼(Xinnuo Chemical) 실리카 겔 플레이트를 사용하여 수행된다. 박층 크로마토그래피(TLC)에 사용된 실리카 겔 플레이트는 175-225 μm이다. TLC에 의해 생성물을 분리 및 정제하는 데 사용된 실리카 겔 플레이트는 1.0 mm이다.

정제된 크로마토그래피 컬럼은 캐리어로서 실리카겔(100~200, 200~300 또는 300~400 메쉬, Rushanshi Shangbang Xincailiao Co., Ltd. 또는 Rushan Taiyang Desiccant Co., Ltd. 등에서 생산), 또는 아젤라 테크놀로지즈 플래시 시스템의 플래시 컬럼(역상 C18 컬럼 20-45 μm, Agela Technologies에서 생산)을 사용한다. 컬럼의 크기는 화합물의 양에 따라 조정된다.

본 개시내용의 공지된 출발 물질은 당해 분야에 공지된 방법을 이용하거나 이에 따라 합성될 수 있거나, 알파 애사르(Alfa Aesar), TCI, 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 베팜(Bepharm), 비드 파마텍(Bide pharmatech), 파마블록(PharmaBlock), 엔아민(Enamine), 인노켐(Innochem) 및 JW&Y 팜랩(JW&Y PharmLab) 등으로부터 구입될 수 있다.

달리 명시되지 않는 한, 모든 반응은 아르곤 또는 질소 분위기 하에서 수행된다. 아르곤 또는 질소 분위기는 반응 플라스크가 약 1 L 부피의 아르곤 또는 질소 풍선에 연결되어 있는 것을 지칭한다. 수소화는 일반적으로 압력 하에서 수행된다. 달리 명시되지 않는 한, 실시예에서 반응온도는 10℃~30℃인 주위 온도이다. 반응 진행은 TLC 또는/및 LC-MS에 의해 모니터링된다. 반응에 사용된 용출 시스템은 디클로로메탄-메탄올 시스템 및 석유 에테르-에틸 아세테이트 시스템을 포함한다. 용매의 부피 비율은 화합물의 상이한 극성에 따라 조정된다.

화합물 정제에 사용된 컬럼 크로마토그래피의 용출 시스템 및 TLC의 용출 시스템은 디클로로메탄-메탄올 시스템 및 석유 에테르-에틸 아세테이트 시스템을 포함한다. 용매의 부피 비율은 화합물의 상이한 극성에 따라 조정된다. 조정을 위해 포름산, 아세트산, TFA, 암모니아와 같은 소량의 알칼리성 또는 산성 작용제(0.1%~1%)를 첨가할 수 있다.

본원에 제공된 화합물의 합성에 사용된 화학 물질의 약어는 하기에 나열되어 있다:

실시예 1

1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 1)의 제조

단계 1. 5-클로로-3-요오도-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

DMF(60.00 mL) 중의 5-클로로-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(3.00 g, 19.410 mmol, 1.00 당량) 및 NIS (7.86 g, 34.936 mmol, 1.80 당량)의 혼합물을 공기 분위기 하에서 0℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수(3 x 200 mL)로 세척하였다. 합한 유기층을 Na₂S₂O₃(3 x 200 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, PE/EtOAc(20:1)로 용출시켜 5-클로로-3-요오도-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(2.4 g, 44.09%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 281.0.

단계 2. 5-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

DMF(20.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(3.49 g, 10.697 mmol, 3 당량), CH₃I(2.53 g, 17.828 mmol, 5.00 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(1.00 g, 3.566 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(100 mL)로 세척하고, EtOAc(3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수(3 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 EtOAc/PE(1:5 300 mL)로부터 재결정화시켜 5-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(850 mg,80.95%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 295.0.

단계 3. 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(15.00 mL) 및 H₂O(3.00 mL) 중의 K₂CO₃(1210.85 mg, 8.761 mmol, 3 당량), Pd(dppf)Cl₂ CH₂Cl₂(476.98 mg, 0.584 mmol, 0.2 당량), 2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(797.57 mg, 3.797 mmol, 1.3 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(860.00 mg, 2.920 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(100 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂/MeOH=12:1(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수(2 x 100 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=12:1)로 정제하여 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(380 mg, 51.90%)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 251.2.

단계 4. 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(20.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(2599.38 mg, 7.978 mmol, 2.50 당량), XantPhos(553.94 mg, 0.957 mmol, 0.30 당량), Pd(OAc)₂(143.29 mg, 0.638 mmol, 0.20 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(567.40 mg, 3.829 mmol, 1.20 당량) 및 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(800.00 mg, 3.191 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(200 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂/MeOH=(12:1) (3 x 200 mL)로 추출하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 EtOAc/PE(1:6 300 mL)로부터 재결정화시켜 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(600 mg, 51.88%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 363.3.

단계 5. 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-(옥산-4-일)-1H-피라졸로 [4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 1)

MeOH(200 mL) 및 THF(100 mL) 중의 Pd/C(47.92 mg, 0.450 mmol, 1.36 당량) 및 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(120 mg, 0.331 mmol, 1 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(3 x 100 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물(120 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 25 B 내지 51 B, 7분) 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-(옥산-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(55 mg,45.12%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 2

1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 2) 및 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 6)의 제조

단계 1. 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일] 피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 6)

디옥산(6.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(682.34 mg, 2.094 mmol, 2.5 당량), XantPhos(96.94 mg, 0.168 mmol, 0.2 당량), Pd(OAc)₂(37.61 mg, 0.168 mmol, 0.2 당량), 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(147.95 mg, 1.005 mmol, 1.2 당량) 및 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(210.00 mg, 0.838 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 밤새 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(3 x 50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 26 B 내지 36 B, 7분) 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(100 mg, 57.65%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-3-(옥산-4-일)피라졸로[4,3-d] 피리미딘-5-아민(실시예 2)

MeOH(20.00 mL) 중의 Pd/C(70.67 mg, 0.664 mmol, 3.00 당량) 및 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(80.00 mg, 0.221 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(3 x 10 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물(50 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 22 B 내지 33 B, 7분; RT1:6.63) 1-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-3-(옥산-4-일)피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(20 mg, 24.61%)을 황색 고체로서 수득하였다.

실시예 3

7-메틸-N-(5-메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-2-일)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(실시예 3)의 제조

단계 1. 2-클로로-7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘

디옥산(6.00 mL) 및 H₂O(1.20 mL) 중의 2-클로로-7-요오도-5-메틸피롤로[3,2-d]피리미딘(300.00 mg, 1.022 mmol, 1.00 당량), 2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(279.16 mg, 1.329 mmol, 1.30 당량), Pd(dppf)Cl₂(149.59 mg, 0.204 mmol, 0.2 당량) 및 K₂CO₃(423.81 mg, 3.067 mmol, 3 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 1:3)로 정제하여 2-클로로-7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸피롤로[3,2-d]피리미딘(196 mg, 76.79%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 250.2.

단계 2. 7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피롤로[3,2-d]피리미딘-2-아민

디옥산(3.00 mL) 중의 2-클로로-7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸피롤로[3,2-d]피리미딘(196.00 mg, 0.785 mmol, 1.00 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(139.56 mg, 0.942 mmol, 1.20 당량), Pd(AcO)₂(35.25 mg, 0.157 mmol, 0.20 당량), XantPhos(136.25 mg, 0.235 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(639.37 mg, 1.962 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 10:1)로 정제하여 7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피롤로[3,2-d]피리미딘-2-아민(170 mg, 59.93%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 362.3.

단계 3. 7-메틸-N-(5-메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-2-일)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(실시예 3)

MeOH(20.00 mL) 및 THF(50.00 mL) 중의 7-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피롤로[3,2-d]피리미딘-2-아민(170.00 mg, 0.470 mmol, 1.00 당량) 및 Pd/C(250.29 mg, 2.352 mmol, 5.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(5x30 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 25 mL/min; 구배: 30 B 내지 45 B, 7분; RT1:6.02) 5-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-7-(옥산-4-일)피롤로[3,2-d]피리미딘-2-아민(29 mg, 16.96%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 4

3-이소프로필-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 4)의 제조

단계 1. 5-클로로-1-메틸-3-(프로프-1-엔-2-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(5.00 mL) 및 H₂O(1.00 mL) 중의 Pd(dppf)Cl₂(124.24 mg, 0.170 mmol, 0.2 당량), K₂CO₃(293.33 mg, 2.122 mmol, 2.5 당량), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(프로프-1-엔-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(213.99 mg, 1.273 mmol, 1.5 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(250.00 mg, 0.849 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 1:3)로 정제하여 5-클로로-1-메틸-3-(프로프-1-엔-2-일)피라졸로[4,3-d]피리미딘(130 mg,73.39%)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(프로프-1-엔-2-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(4.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(468.47 mg, 1.438 mmol, 2.5 당량), XantPhos(66.56 mg, 0.115 mmol, 0.2 당량), Pd(AcO)₂(25.82 mg, 0.115 mmol, 0.2 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(127.82 mg, 0.863 mmol, 1.50 당량) 및 5-클로로-1-메틸-3-(프로프-1-엔-2-일)피라졸로[4,3-d]피리미딘(120.00 mg, 0.575 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 15:1)로 정제하여1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-(프로프-1-엔-2-일)피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(90 mg, 48.85%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3. 3-이소프로필-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 4)

MeOH(10.00 mL) 중의 Pd/C(89.69 mg, 0.843 mmol, 3 당량) 및 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-(프로프-1-엔-2-일)피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(90.00 mg, 0.281 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 실온에서 밤새 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(4x50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂: MeOH 12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(80 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: MeOH ; 유속: 25 mL/min; 구배 58 B 내지 70 B, 7분; RT1 5.57) 3-이소프로필-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(50 mg, 54.66%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 5

3-사이클로헥실-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 5)의 제조

단계 1. 5-클로로-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(5.00 mL) 및 H₂O(1.00 mL) 중의 K₂CO₃(293.33 mg, 2.122 mmol, 2.50 당량), 2-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(265.01 mg, 1.273 mmol, 1.50 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(250.00 mg, 0.849 mmol, 1.00 당량)을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 1:2)로 정제하여 5-클로로-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(150 mg, 71.04%)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(4.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(458.51 mg, 1.407 mmol, 2.5 당량), XantPhos(65.14 mg, 0.113 mmol, 0.2 당량), Pd(AcO)₂(25.28 mg, 0.113 mmol, 0.2 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(125.11 mg, 0.844 mmol, 1.5 당량) 및 5-클로로-3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(140.00 mg, 0.563 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 15:1)로 정제하여 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(140 mg, 69.00%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3. 3-사이클로헥실-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 5)

THF(40.00 mL) 및 MeOH(80.00 mL) 중의 3-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(160.00 mg, 0.444 mmol, 1.00 당량) 및 Pd/C(236.21 mg, 2.220 mmol, 5.00 당량)의 용액을 수소 분위기 하에서 실온에서 3일 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과시켜 수집하고, MeOH(5x30 mL)로 세척하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물(150 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 40 B 내지 50 B, 7분; RT1:6.55) 3-사이클로헥실-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(17.41 mg, 10.82%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 8

3-((1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,55-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 7) 및 3-((1s,4s)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 8)의 제조

단계 1. 5-클로로-3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(5.00 mL) 및 H₂O(1.00 mL) 중의 K₂CO₃(234.66 mg, 1.698 mmol, 2.5 당량), Pd(dppf)Cl₂ CH₂Cl₂(110.93 mg, 0.136 mmol, 0.2 당량), 2-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(194.07 mg, 0.815 mmol, 1.2 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(200.00 mg, 0.679 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 1:2)로 정제하여 5-클로로-3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(175 mg, 92.44%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(5.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(496.78 mg, 1.525 mmol, 2.5 당량), XantPhos(70.58 mg, 0.122 mmol, 0.2 당량), Pd(AcO)₂(27.39 mg, 0.122 mmol, 0.2 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(99.40 mg, 0.671 mmol, 1.1 당량) 및 5-클로로-3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(170.00 mg, 0.610 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(100 mg, 41.99%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 3. 3-((1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 7) 및 3-((1s,4s)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 8)

MeOH(150.00 mL) 및 THF(80.00 mL) 중의 Pd/C(65.41 mg, 0.615 mmol, 3 당량) 및 3-(4-메톡시사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(80.00 mg, 0.205 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 실온에서 밤새 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(3 x 50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(80 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 25 mL/min; 구배: 37 B 내지 41 B, 7분; RT1:5.30/5.92) 3-((1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 7, 60 mg, 22.73%)을 백색 고체로서 수득하고:

3-((1s,4s)-4-메톡시사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,55-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 8, 10 mg, 12.19%)을 백색 고체로서 수득하였다:

실시예 9

3-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 9)의 제조

단계 1. 5-클로로-3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(3.00 mL) 및 H₂O(0.60 mL) 중의 5-클로로-3-요오도-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(200.00 mg, 0.679 mmol, 1.00 당량), 2-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(198.93 mg, 0.815 mmol, 1.20 당량), Pd(dppf)Cl₂(99.39 mg, 0.136 mmol, 0.2 당량) 및 K₂CO₃(234.66 mg, 1.698 mmol, 2.5 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 2:3)로 정제하여 5-클로로-3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(100 mg, 51.72%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 285.3.　

단계 2. 3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(2.50 mL) 중의 5-클로로-3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(100.00 mg, 0.351 mmol, 1.00 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(62.45 mg, 0.421 mmol, 1.20 당량), Pd(OAc)₂(15.77 mg, 0.070 mmol, 0.20 당량), XantPhos(60.97 mg, 0.105 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(286.12 mg, 0.878 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(110 mg, 79.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.　LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 397.3.

단계 3. 3-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 9)

MeOH(60.00 mL) 및 THF(30.00 mL) 중의 3-(4,4-디플루오로사이클로헥스-1-엔-1-일)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(130.00 mg, 0.328 mmol, 1.00 당량) 및 Pd/C(174.50 mg, 1.640 mmol, 5.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 30℃에서 5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 CH₂Cl₂(3 x 40 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하였다. 조 생성물(70 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 34 B 내지 48 B, 7분; RT1:5.97) 3-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(17 mg, 13.01%)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

실시예 10

1-(메틸-d₃)-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 10)의 제조

단계 1. 5-클로로-3-요오도-1-(메틸-d ₃ )-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

DMF(6.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(1045.60 mg, 3.209 mmol, 3 당량), CD₃I(775.31 mg, 5.349 mmol, 5 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(300.00 mg, 1.070 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 포화 식염수(3 x 50 mL) 및 Na₂S₂O₃(3 x 50 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과물을 감압 하에서 농축시켜 5-클로로-3-요오도-1-(메틸-d₃)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(260 mg, 81.70%)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d ₃ )-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

디옥산(5.00 mL) 및 물(1.00 mL) 중의 K₂CO₃(313.58 mg, 2.269 mmol, 2.5 당량), Pd(dppf)Cl₂ CH₂Cl₂(148.23 mg, 0.182 mmol, 0.2 당량), 2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(228.79 mg, 1.089 mmol, 1.2 당량) 및 5-클로로-3-요오도-1-(메틸-d₃)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(270.00 mg, 0.908 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(헥산/EtOAc 1:2)으로 정제하여 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d₃)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(100 mg, 43.43%)을 분홍색 고체로서 수득하였다.

단계 3. 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d ₃ )-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

디옥산(3.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(385.28 mg, 1.182 mmol, 3 당량), XantPhos(45.61 mg, 0.079 mmol, 0.2 당량), Pd(OAc)₂(17.70 mg, 0.079 mmol, 0.2 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(70.08 mg, 0.473 mmol, 1.20 당량) 및 5-클로로-3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d₃)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘(100.00 mg, 0.394 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d₃)-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(100 mg, 69.43%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4. 1-(메틸-d ₃ )-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 10)

MeOH(10.00 mL) 및 THF(10.00 mL) 중의 Pd/C(87.37 mg, 0.821 mmol, 3 당량) 및 3-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-1-(메틸-d₃)-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(100.00 mg, 0.274 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 수소 분위기 하에서 35℃에서 2시간 동안 교반하였다. 원하는 생성물을 LCMS로 검출할 수 있었다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 MeOH(3 x 30 mL) 및 DCM(3 x 30 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(40 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 15 B 내지 35 B, 7분; RT1:6.4) 1-(메틸-d₃)-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(10 mg, 9.85%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 11/12

1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1s,4s)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 11) 및 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1r,4r)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 12)의 제조

단계 1. 4-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-3-일)사이클로헥스-3-엔-1-올

40 mL 바이알에 실온에서 5-클로로-3-요오도-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(500.00 mg, 1.698 mmol, 1.00 당량), 및 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔-1-올(570.78 mg, 2.547 mmol, 1.50 당량), Pd(dppf)Cl₂(248.47 mg, 0.340 mmol, 0.20 당량), K₂CO₃(938.64 mg, 6.792 mmol, 4 당량), 디옥산(10.00 mL) 및 H₂O(2.00 mL)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 질소 분위기 하에서 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE:EA=1:4)로 정제하여 4-[5-클로로-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘-3-일]사이클로헥스-3-엔-1-올(253 mg, 56.29%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 265.2.

단계 2. 5-클로로-3-(4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-에닐)-1-메틸-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘

40 mL 바이알에 50℃에서 4-[5-클로로-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘-3-일]사이클로헥스-3-엔-1-올(253.00 mg, 0.956 mmol, 1.00 당량), CuI(63.71 mg, 0.335 mmol, 0.35 당량), MeCN(10.00 mL)을 첨가하고, 2,2-디플루오로-2-(플루오로술포닐)아세트산(510.61 mg, 2.867 mmol, 3.00 당량)을 혼합물에 적가하였다. 이어서, 혼합물을 공기 분위기 하에서 3시간 동안 50℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(10 mL)로 희석하였다. 수층을 DCM(3 x 30 mL)로 추출하였다. 생성된 혼합물을 DCM(5 mL)으로 희석하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(10 mL*3)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 1:1)로 정제하여 5-클로로-3-[4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-엔-1-일]-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(180 mg, 47.87%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ =315.2.

단계 3. 3-(4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-에닐)-1-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민

40 mL 바이알에 실온에서 5-클로로-3-[4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-엔-1-일]-1-메틸피라졸로[4,3-d]피리미딘(180.00 mg, 0.572 mmol, 1.00 당량), 및 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(101.69 mg, 0.686 mmol, 1.20 당량), Pd(OAc)₂(38.52 mg, 0.172 mmol, 0.30 당량), XantPhos(99.28 mg, 0.172 mmol, 0.30 당량), Cs₂CO₃(559.05 mg, 1.716 mmol, 3.00 당량) 및 디옥산(10.00 mL)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 질소 분위기 하에서 3시간 동안 70℃에서 교반하였다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM:MeOH 15:1)로 정제하여 3-[4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-엔-1-일]-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(135 mg, 55.35%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 4. 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1s,4s)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 11) 및 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1r,4r)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(실시예 12)의 제조　

MeOH(20 mL) 중의 3-[4-(디플루오로메톡시)사이클로헥스-1-엔-1-일]-1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(135.00 mg, 0.317 mmol, 1.00 당량)의 교반된 혼합물에 공기 분위기 하에서 Pd/C(168.45 mg, 1.583 mmol, 5.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소 분위기 하에서 40℃에서 4시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 여과시키고, 필터 케이크를 DCM(8 x 100 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켜 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 34 B 내지 54 B, 7분; RT1:5.93) 고체를 수득하였다. 이어서, 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1s,4s)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-아민(Ex.11, 15 mg, 50.00%)을 백색 고체로서 수득하고, 1-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-[(1r,4r)-4-(디플루오로메톡시)사이클로헥실]피라졸로 [4,3-d]피리미딘-5-아민(Ex.12, 5 mg,16.67%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 13

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 13)의 제조

단계 1. 6-클로로-3-메틸-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF(5.00 mL) 중의 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(500.00 mg, 2.618 mmol, 1.00 당량) 및 DIPEA(1353.26 mg, 10.471 mmol, 4.00 당량)의 교반된 혼합물에 옥산-4-일히드라진(364.89 mg, 3.141 mmol, 1.20 당량)을 질소 분위기 하에서 실온에서 나누어 첨가하였다. 혼합물을 질소 분위기 하에서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(3 x 10 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 2:1)로 정제하여 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘(350 mg, 52.91%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 253.2

단계 2. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 13)

디옥산(20 mL) 중의 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(200 mg, 0.791 mmol, 1 당량), Cs₂CO₃(644.68 mg, 1.979 mmol, 2.5 당량) 및 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(140.72 mg, 0.950 mmol, 1.2 당량)의 교반된 혼합물에 BrettPhos Pd G₃(143.49 mg, 0.158 mmol, 0.2 당량)을 질소 분위기 하에서 실온에서 나누어 첨가하였다. 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 물(3 x 50 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: X select CSH OBD 컬럼 30 x 150 mm 5 um n; 이동상 A: 물(0.05% TFA), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 18% B 내지 29% B, 7분; t_R: 6.30 min) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-(옥산-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(74 mg, 25.66%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 14

3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 14)의 제조

THF(10.00 mL) 중의 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(250.00 mg, 1.309 mmol, 1.00 당량) 및 옥산-4-일히드라진(182.45 mg, 1.571 mmol, 1.20 당량), DIPEA(338.32 mg, 2.618 mmol, 2.00 당량)의 용액을 질소 분위기 하에서 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(20 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수(10 mL x 3)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EtOAc 5:1)로 정제하여 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘(230 mg, 69.54%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 253.2.

단계 2. 3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 14)

디옥산(5.00 mL) 중의 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(139.78 mg, 0.950 mmol, 1.50 당량) 및 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘(160 mg, 0.633 mmol, 1.00 당량), BrettPhos Pd G₃(57.40 mg, 0.063 mmol, 0.10 당량), Cs₂CO₃(412.59 mg, 1.266 mmol, 2.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, CH₂Cl₂/MeOH=(10:1)로 용출시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 Prep-HPLC로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 17 B 내지 37 B, 7분; RT1:6.75) 3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d] 피리미딘-6-아민(140 mg, 60.84%)을 회백색 고체로서 수득하였다.

실시예 15

7-메틸-N-(5-메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(실시예 15)의 제조

단계 1. 2-클로로-5-메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘

DMSO(50.00 mL, 12.922 mmol) 중의 2-클로로-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(400.00 mg, 2.387 mmol, 1.00 당량), 4-브로모옥산(3.94 g, 23.874 mmol, 10.00 당량) 및 K₂CO₃(824.62 mg, 5.967 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 120℃에서 밤새 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(150 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수(3 x 30 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 10:1)로 정제하였다. 조 생성물(70 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 28 B 내지 48 B, 7분; RT1:5.80) 2-클로로-5-메틸-7-(옥산-4-일)피롤로[2,3-d]피리미딘(40 mg, 6.66%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 7-메틸-N-(5-메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일)-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(실시예 15)

디옥산(1.50 mL) 중의 2-클로로-5-메틸-7-(옥산-4-일)피롤로[2,3-d]피리미딘(30.00 mg, 0.119 mmol, 1.00 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(21.19 mg, 0.143 mmol, 1.20 당량), Pd(AcO)₂(5.35 mg, 0.024 mmol, 0.20 당량), XantPhos(20.69 mg, 0.036 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(97.08 mg, 0.298 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(40 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 26 B 내지 46 B, 7분; RT1:6.37) 5-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-7-(옥산-4-일)피롤로[2,3-d]피리미딘-2-아민(6 mg,13.85%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 16

N-(7-클로로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 16)의 제조

단계 1. N-(7-클로로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-3-메틸-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 16)

디옥산(4.00 mL) 중의 7-클로로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(50.00 mg, 0.297 mmol, 1.00 당량), 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘(74.95 mg, 0.297 mmol, 1.00 당량), Pd(AcO)₂(13.32 mg, 0.059 mmol, 0.2 당량), XantPhos(51.48 mg, 0.089 mmol, 0.3 당량) 및 Cs₂CO₃(241.59 mg, 0.741 mmol, 2.5 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하였다. 조 생성물(90 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 25 mL/min; 구배: 30 B 내지 40 B, 7분; RT1:6.62) N-[7-클로로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(32.77mg, 28.71%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 17

N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 17)의 제조

단계 1. 6-클로로-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF(2.50 mL) 중의 6-클로로-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(340.00 mg, 1.528 mmol, 1.00 당량), 옥산-4-올(624.11 mg, 6.111 mmol, 4.00 당량) 및 PPh₃(1442.48 mg, 5.500 mmol, 3.60 당량)의 교반된 혼합물에 DIAD(1112.07 mg, 5.500 mmol, 3.60 당량)를 질소 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=10:1)로 정제하여 6-클로로-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘(370 mg, 78.98%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 307.3.

단계 2. N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(트리플루오로메틸)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 17)

디옥산(3.00 mL) 중의 6-클로로-1-(옥산-4-일)-3-(트리플루오로메틸)피라졸로[3,4-d]피리미딘(70.00 mg, 0.228 mmol, 1.00 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(33.82 mg, 0.228 mmol, 1.00 당량), Pd(AcO)₂(10.25 mg, 0.046 mmol, 0.20 당량), XantPhos(39.62 mg, 0.068 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(185.93 mg, 0.571 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH2Cl2/MeOH= 12:1)로 정제하였다. 조 생성물(90 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 30 B 내지 50 B, 7분; RT1:6.67) N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-(옥산-4-일)-3-(트리플루오로메틸)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(54.44 mg, 53.86%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 18

1-(4-메톡시벤질)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 18)의 제조

단계 1. 6-클로로-1-(4-메톡시벤질)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF 중의 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(640.00 mg, 3.351 mmol, 1.00 당량) 및 DIPEA(433.04 mg, 3.351 mmol, 1.00 당량)의 교반된 혼합물에 [(4-메톡시페닐)메틸]히드라진(764.93 mg, 5.026 mmol, 1.50 당량)을 공기 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE:EA 1:1)로 정제하여 6-클로로-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(623 mg, 64.40%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-(4-메톡시벤질)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 18)

디옥산(5 mL) 중의 6-클로로-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(100.00 mg, 0.346 mmol, 1.00 당량) 및 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(76.97 mg, 0.519 mmol, 1.50 당량)의 교반된 혼합물에 Cs₂CO₃(338.53 mg, 1.039 mmol, 3.00 당량) 및 XantPhos(40.08 mg, 0.069 mmol, 0.20 당량), Pd(AcO)₂(15.55 mg, 0.069 mmol, 0.20 당량)를 공기 분위기 하에서 실온에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=10:1)로 정제하여 황색 고체를 수득하였다. 조 생성물(70 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 26 B 내지 46 B, 7분; RT1:7.07) 1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(20 mg, 28.57%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 20

1-사이클로헥실-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 20)의 제조

단계 1. 6-클로로-1-사이클로헥실-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF(10 mL) 중의 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(180.00 mg, 0.942 mmol, 1.00 당량) 및 DIPEA(487.17 mg, 3.769 mmol, 4.00 당량)의 교반된 혼합물에 사이클로헥실히드라진 히드로클로라이드(184.56 mg, 1.225 mmol, 1.30 당량)를 공기 분위기 하에서 0℃에서 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에서 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE/EA 1:2)로 정제하여 6-클로로-1-사이클로헥실-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(145 mg, 61.37%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-사이클로헥실-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 20)

디옥산(6 mL) 중의 6-클로로-1-사이클로헥실-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(120.00 mg, 0.479 mmol, 1.00 당량) 및 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(106.37 mg, 0.718 mmol, 1.5 당량)의 교반된 혼합물에 Cs₂CO₃(467.81 mg, 1.436 mmol, 3 당량) 및 XantPhos(55.39 mg, 0.096 mmol, 0.2 당량), Pd(AcO)₂(21.49 mg, 0.096 mmol, 0.2 당량)를 공기 분위기 하에서 실온에서 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 10:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물(80 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30*150 mm 5 um; Phase A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: % B; 254;220 nm; RT1: 6.50) 1-사이클로헥실-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(60 mg, 34.59%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 21

1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 21)의 제조

단계 1. 6-클로로-1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF(5.00 mL) 중의 DIPEA(338.32 mg, 2.618 mmol, 5 당량), (4,4-디플루오로사이클로헥실)히드라진(86.48 mg, 0.576 mmol, 1.10 당량) 및 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(100.00 mg, 0.524 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(헥산/EtOAc 1:1)로 정제하여 6-클로로-1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(80 mg, 53.30%)을 백색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 21)

디옥산(3.00 mL) 중의 Cs₂CO₃(227.28 mg, 0.698 mmol, 2.5 당량), XantPhos(32.29 mg, 0.056 mmol, 0.2 당량), Pd(AcO)₂(12.53 mg, 0.056 mmol, 0.2 당량), 7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(45.48 mg, 0.307 mmol, 1.1 당량) 및 6-클로로-1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(80.00 mg, 0.279 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 31 B 내지 51 B, 7분; RT1: 6.30) 1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(80 mg, 71.96%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 22

1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 22)의 제조

단계 1. 1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 22)

디옥산(5.00 mL) 중의 6-클로로-1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(67.00 mg, 0.234 mmol, 1.00 당량), 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(68.79 mg, 0.467 mmol, 2 당량), Pd(AcO)₂(10.49 mg, 0.047 mmol, 0.20 당량), XantPhos(40.56 mg, 0.070 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(190.35 mg, 0.584 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH2Cl2/MeOH= 12:1)로 정제하였다. 조 생성물(50 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH4HCO3+0.1%NH₃.H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 38 B 내지 50 B, 7분; RT1:5.63) 1-(4,4-디플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(20 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 26

1-((1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 26)의 제조

단계 1. 1-(4-메톡시벤질)-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-6-아민

디옥산(3 mL) 중의 6-클로로-1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(200.00 mg, 0.693 mmol, 1.00 당량), 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(152.92 mg, 1.039 mmol, 1.50 당량), XantPhos(120.24 mg, 0.208 mmol, 0.30 당량), Pd(AcO)₂(31.10 mg, 0.139 mmol, 0.20 당량) 및 Cs₂CO₃(564.21 mg, 1.732 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 12:1)로 정제하여 1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(200 mg,72.28%)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 400.3.

단계 2. 3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민

1-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(190.00 mg, 0.476 mmol, 1.00 당량) 및 TFA(70.00 mL, 613.910 mmol, 1981.34 당량)의 용액을 공기 분위기 하에서 80℃에서 2일 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 혼합물을 DCM(10 mL)로 희석하였다. 혼합물을 여과에 의해 포화 NaHCO₃(aq.)로 pH 8로 조정하고, DCM(2 x 3 mL)으로 세척하였다. 침전된 고체를 수집하여 3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(160 mg, 80.00%)을 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 280.2

단계 3. 1-((1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 26)

THF(2.50 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(150.00 mg, 0.537 mmol, 1.00 당량), 4-메톡시사이클로헥산-1-올(174.79 mg, 1.343 mmol, 2.50 당량) 및 PPh₃(422.58 mg, 1.611 mmol, 3.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 0℃에서 20분 동안 교반한 후, DIAD(325.78 mg, 1.611 mmol, 3.00 당량)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/EtOAc=12:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물(60.00 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH₄HCO₃+0.1%NH₃.H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 29 B 내지 39 B, 9분; RT1:6.22,7.43) 3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]-1-[(1r,4r)-4-메톡시사이클로헥실]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(16 mg, 26.67%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 27

1-((1s,4s)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 27) 및 1-((1r,4r)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 28)의 제조

단계 1. 4-플루오로사이클로헥산-1-올

4-플루오로사이클로헥산-1-온(1.00 g, 8.611 mmol, 1.00 당량) 및 MeOH(100.00 mL)의 교반된 혼합물에 NaBH₄(0.98 mg, 0.026 mmol, 3.0 당량)를 0℃에서 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 생성물을 0℃에서 물로 ??칭시켰다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 생성된 혼합물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켜 4-플루오로사이클로헥산-1-올(800 mg, 78.63%)을 담황색 고체로서 수득하였다.　

단계 2. 4-플루오로사이클로헥실 메탄술포네이트

DCM(10.00 mL) 중의 4-플루오로사이클로헥산-1-올(400.00 mg, 3.385 mmol, 1.00 당량) 및 TEA(1027.74 mg, 10.156 mmol, 3.00 당량)의 교반된 혼합물에 메탄술포닐 클로라이드(581.66 mg, 5.078 mmol, 1.5 당량)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(50 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켜 4-플루오로사이클로헥실 메탄술포네이트(650 mg, 97.84%)을 담황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 추가의 정제 없이 직접적으로 다음 단계에 사용하였다.

단계 3. 1-((1s,4s)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 27) 및 1-((1r,4r)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 28)

DMF(20.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(150.00 mg, 0.535 mmol, 1.00 당량), 4-플루오로사이클로헥실 메탄술포네이트(1050.18 mg, 5.352 mmol, 10.00 당량) 및 Cs₂CO₃(523.09 mg, 1.605 mmol, 3.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(20 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 39 B 내지 59 B, 7분; RT1:6.4)

1-((1s,4s)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 27, 6.8 mg,3.34%)을 백색 고체로서 수득하고:

1-((1r,4r)-4-플루오로사이클로헥실)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 28, 18.8 mg, 9.23%)을 백색 고체로서 수득하였다:

실시예 42

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(2-옥사스피로[3.3]헵탄-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 42)의 제조

단계 1. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(2-옥사스피로[3.3]헵탄-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 42)

THF(10 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(70.00 mg, 0.250 mmol, 1.00 당량) 및 2-옥사스피로[3.3]헵탄-6-올(57.01 mg, 0.499 mmol, 2.00 당량) 및 PPh₃(196.51 mg, 0.749 mmol, 3.00 당량)의 교반된 혼합물에 DIAD(151.50 mg, 0.749 mmol, 3.00 당량)를 N₂ 분위기 하에서 0℃에서 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM/MeOH = 15:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물(80 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH₄HCO₃+0.1%NH₃.H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 26 B 내지 36 B, 7분; RT1:5.88) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[2-옥사스피로[3.3]헵탄-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(40 mg, 50.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.

하기 표 2의 화합물을 실시예 42에 기재된 유사한 방법으로 합성한다.

실시예 37

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(스피로[2.5]옥탄-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 37)의 제조

단계 1. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(스피로[2.5]옥탄-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 37)

THF(25.00 mL) 중의 TMAD (276.43 mg, 1.605 mmol, 3.00 당량), n-Bu₃P(324.81 mg, 1.605 mmol, 3.00 당량), 스피로[2.5]옥탄-6-올(202.61 mg, 1.605 mmol, 3.00 당량) 및 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(150.00 mg, 0.535 mmol, 1.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(100 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂(3 x 50 mL)로 추출하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 MeOH(20 mL)로부터 재결정화시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(60 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 19*250 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: MeOH ; 유속: 25 mL/min; 구배 58 B 내지 70 B, 7분) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[스피로[2.5]옥탄-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(30 mg, 14.29%)을 백색 고체로서 수득하였다.

하기 표 3의 화합물을 실시예 37에 기재된 유사한 방법으로 합성한다.

실시예 43

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(스피로[3.3] 헵탄-2-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 43)의 제조

단계 1. 스피로[3.3]헵탄-2-일 메탄술포네이트

DCM(50.00 mL) 중의 스피로[3.3]헵탄-2-올(300.00 mg, 2.674 mmol, 1.00 당량) 및 TEA(811.89 mg, 8.023 mmol, 3.00 당량)의 교반된 혼합물에 메탄술포닐 클로라이드(459.50 mg, 4.012 mmol, 1.50 당량)를 질소 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 물(20 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 CH₂Cl₂(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 이에 따라 스피로[3.3]헵탄-2-일 메탄술포네이트(500 mg, 98.26%)를 담황색 오일로서 수득하였다.

단계 2. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(스피로[3.3]헵탄-2-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 43)

DMF(20.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(100.00 mg, 0.357 mmol, 1.00 당량), 스피로[3.3]헵탄-2-일 메탄술포네이트(678.78 mg, 3.568 mmol, 10.00 당량) 및 Cs₂CO₃(348.73 mg, 1.070 mmol, 3.00 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 물(40 mL)로 희석하였다. 생성된 혼합물을 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 식염수로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 여과 후, 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05% NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 39 B 내지 59 B, 7분; RT1:6.4) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[스피로[3.3]헵탄-2-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(31.8 mg, 23.80%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 44

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 44)의 제조

단계 1. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(옥세탄-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 44)

DMF(10 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(80.00 mg, 0.285 mmol, 1.00 당량) 및 3-요오도옥세탄(78.76 mg, 0.428 mmol, 1.50 당량)의 교반된 혼합물에 K₂CO₃(118.34 mg, 0.856 mmol, 3.00 당량)을 공기 분위기 하에서 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂: MeOH 12:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 12 B 내지 32 B, 7분; RT1:6.62) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-(옥세탄-3-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 44, 40 mg, 41.67%)을 백색 고체로서 수득하였다.

하기 표 4의 화합물을 실시예 44에 기재된 유사한 방법으로 합성한다.

실시예 59

1-이소프로필-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 59)의 제조

단계 1. 6-클로로-1-이소프로필-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘

THF 중의 1-(2,4-디클로로피리미딘-5-일)에탄온(150.00 mg, 0.785 mmol, 1.00 당량) 및 DIPEA(54.13 mg, 0.419 mmol, 4.00 당량)의 교반된 혼합물에 이소프로필히드라진(15.26 mg, 0.136 mmol, 1.30 당량)을 공기 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(PE:EA 1:1)로 정제하여 6-클로로-1-이소프로필-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(120 mg, 72.53%)을 황색 고체로서 수득하였다.

단계 2. 1-이소프로필-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H- 피라졸로 [3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 59)

디옥산(10 mL) 중의 6-클로로-1-이소프로필-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(120.00 mg, 0.570 mmol, 1.00 당량) 및 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(108.99 mg, 0.740 mmol, 1.30 당량)의 교반된 혼합물에 XantPhos(65.92 mg, 0.114 mmol, 0.20 당량), Pd(AcO)₂(25.58 mg, 0.114 mmol, 0.20 당량) 및 Cs₂CO₃(556.77 mg, 1.709 mmol, 3.00 당량)을 공기 분위기 하에서 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=10:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; RT1:6.67) 1-이소프로필-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(62 mg, 33.76%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 60

1-이소프로필-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로 [3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 60)의 제조

단계 1. 1-이소프로필-3-메틸-N-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 60)

디옥산(10.00 mL) 중의 -클로로-1-이소프로필-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘(80.00 mg, 0.380 mmol, 1.00 당량), 7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-아민(67.07 mg, 0.456 mmol, 1.20 당량), Pd(AcO)₂(17.05 mg, 0.076 mmol, 0.20 당량), XantPhos(65.92 mg, 0.114 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(309.32 mg, 0.949 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH2Cl2/MeOH= 10:1)로 정제하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 21 B 내지 41 B, 7분; RT1:7.02) 1-이소프로

-3-메틸-N-[7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(55.77 mg, 45.70%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 72

3-(3-메틸-6-((7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)아미노)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)프로판니트릴(실시예 72)의 제조

단계 1. 3-(3-메틸-6-((7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)아미노)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)프로판니트릴(실시예 72)

DMF(10 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(70.00 mg, 0.250 mmol, 1.00 당량) 및 프로판니트릴, 3-브로모- (66.92 mg, 0.499 mmol, 2.00 당량)의 교반된 혼합물에 K₂CO₃(103.55 mg, 0.749 mmol, 3.00 당량)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 공기 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM: MeOH=15:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 8 B 내지 28 B, 7분; RT1:7.70) 3-[3-메틸-6-([7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]아미노)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]프로판니트릴(40 mg, 48.05%)을 백색 고체로서 수득하였다.

하기 표 5의 화합물을 실시예 72에 기재된 유사한 방법으로 합성한다.

실시예 73

4-(3-메틸-6-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일아미노)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일)벤조니트릴(실시예 73)의 제조

단계 1. 4-(3-메틸-6-(7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일아미노)-1H-피라졸로[3,4-d] 피리미딘-1-일)벤조니트릴(실시예 73)

DMF(50.00 mL) 중의 7-메틸-N-[3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일]-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-아민(150.00 mg, 0.535 mmol, 1.00 당량), 벤조니트릴, 4-플루오로- (97.57 mg, 0.806 mmol, 1.50 당량), 벤조니트릴(97.22 mg, 0.803 mmol, 1.50 당량) 및 K₂CO₃(221.88 mg, 1.605 mmol, 3.0 당량)의 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH= 10:1)로 정제하여 4-[3-메틸-6-([7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]아미노)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]벤조니트릴(40 mg, 조)을 담황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물(40 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 19*250 mm,10um; 이동상 A: 물(10MMOL/L NH₄HCO₃+0.1% NH₃ㆍH₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 20 mL/min; 구배: 36 B 내지 46 B, 7분; RT1:5.73) 4-[3-메틸-6-([7-메틸이미다조[1,2-a]피리딘-6-일]아미노)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]벤조니트릴(8.8 mg, 4.31%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 89

6-메톡시-4-메틸-N-[3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일] 피리딘-3-아민의 제조

단계 1. 6-메톡시-4-메틸-N-[3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일]피리딘-3-아민(실시예 89)

디옥산(2.50 mL) 중의 6-클로로-3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘(80.00 mg, 0.317 mmol, 1.00 당량), 6-메톡시-4-메틸피리딘-3-아민(52.49 mg, 0.380 mmol, 1.20 당량), Pd(AcO)₂(14.22 mg, 0.063 mmol, 0.20 당량), XantPhos(54.95 mg, 0.095 mmol, 0.30 당량) 및 Cs₂CO₃(257.87 mg, 0.791 mmol, 2.50 당량)의 혼합물을 질소 분위기 하에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH 15:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물(100 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05% NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 25 B 내지 55 B, 7분; 254; 220 nm; RT1:5.20) 6-메톡시-4-메틸-N-[3-메틸-1-(옥산-4-일)피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일]피리딘-3-아민(70 mg, 62.39%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 106

1-((1R,3r,5S)-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민의 제조

단계 1.　1-((1R,3r,5S)-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민

THF(10.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(100.00 mg, 0.357 mmol, 1.00 당량), (1R,3S,5S)-8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-올(137.18 mg, 1.070 mmol, 3.00 당량) 및 PPh₃(280.72 mg, 1.070 mmol, 3 당량)의 교반된 혼합물에 DIAD(216.42 mg, 1.070 mmol, 3 당량)를 질소 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH 12:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 37 B 내지 57 B, 7분) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[(1R,3R,5S)-8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 106, 50 mg, 50.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 107

1-((1R,3s,5S)-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4] 트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민의 제조

단계 1. 1-((1R,3s,5S)-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민

THF(16.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(80.00 mg, 0.285 mmol, 1.00 당량), (1R,3R,5S)-8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-올(109.75　mg,　0.856　mmol,　3.00　당량) 및 PPh₃(224.58 mg, 0.856 mmol, 3.00 당량)의 교반된 혼합물에 DIAD(173.14 mg, 0.856 mmol, 3.00 당량)를 질소 분위기 하에서 0℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH 12:1)로 정제하여 조 고체를 수득하였다. 조 생성물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150 mm 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 37 B 내지 50 B, 7분) 1-((1R,3s,5S)-8-옥사-바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 107, 45 mg, 45.00%)을 백색 고체로서 수득하였다.

실시예 108/109/110/111

1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 108, 이성질체 1)/ 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 109, 이성질체 2)/ 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 110, 이성질체 3)/ 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 111, 이성질체 4)

단계 1. 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(108/109의 혼합물)의 제조 및 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(110/111의 혼합물)의 제조

THF(20.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(220.00 mg, 0.785 mmol, 1.00 당량), PPh₃(617.59 mg, 2.355 mmol, 3.00 당량) 및 3-메톡시사이클로펜탄-1-올(273.52 mg, 2.355 mmol, 3.00 당량)의 교반된 혼합물에 THF(3 mL) 중의 DIAD(476.13 mg, 2.355 mmol, 3.00 당량)를 0℃에서 10분 동안 적가하였다. 생성된 혼합물을 질소 분위기 하에서 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH 10:1)로 정제하여 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(150 mg)을 담황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물(150 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: YMC-Actus Triart C18, 30*250, 5 um; 이동상 A: 물(0.05%NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 34 B 내지 46 B, 8.5분) 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 108/109의 혼합물, 25 mg, 16.67%)을 백색 고체로서 수득하고:

1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 110/111의 혼합물, 80 mg, 53.33%)을 백색 고체로서 수득하였다:

단계 2. 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 108, 이성질체 1)/ 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 109, 이성질체 2)의 제조

실시예 108/109 (25 mg)의 혼합물을 하기 조건으로 키랄-Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: CHIRALPAK AD-H, 2.0cm I.D.*25cm L; 이동상 A: Hex(8mmol/L NH₃.MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유속: 40 mL/min; 구배: 20 B 내지 20 B, 18분)1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 108, 4.5 mg, 18.00%) (이성질체 1)을 백색 고체로서 수득하고:

1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 109, 3.8 mg, 12.00%) (이성질체 2)을 백색 고체로서 수득하였다:

단계 4. 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 110, 이성질체 3)/ 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 111, 이성질체 4)

실시예 110/111(80 mg)의 혼합물을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: CHIRALPAK AD-H, 2.0cm I.D.*25cm L; 이동상 A: Hex(8mmol/L NH3.MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유속: 40 mL/min; 구배: 30 B 내지 30 B, 12분) 1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 110, 39.1mg,48.87%) (이성질체 3)을 백색 고체로서 수득하고:

1-(3-메톡시사이클로펜틸)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 111, 35.2mg) (이성질체 4)을 백색 고체로서 수득하였다:

실시예 112/113/114/115.

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라 히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112, 이성질체 1)/ 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 113, 이성질체 2)/ 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4] 트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d] 피리미딘-6-아민(실시예 114, 이성질체 3)/ 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 115, 이성질체 4)의 제조

단계 1. 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[3-메틸옥산-4-일] 피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112/113의 혼합물) 및 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[3-메틸옥산-4-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 114/115의 혼합물)

THF(10.00 mL) 중의 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(200.00 mg, 0.714 mmol, 1.00 당량), 3-메틸옥산-4-올(248.65 mg, 2.141 mmol, 3.00 당량) 및 PPh₃(561.45 mg, 2.141 mmol, 3.00 당량)의 혼합물을 교반하고, DIAD(432.85 mg, 2.141 mmol, 3.00 당량)를 질소 분위기하에서 70℃에서 적가하고, 2시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep_TLC(CH₂Cl₂/MeOH 15:1)로 정제하여 조 고체를 생성하였다. 조 생성물(120 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30*150 mm, 5 um; 이동상 A: 물(0.05% NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 18 B 내지 48 B, 7분) 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[3-메틸옥산-4-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112/113의 혼합물, 30 mg, 25.00%)을　백색 고체로서 수득하고:

3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1-[-3-메틸옥산-4-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 114/115의 혼합물, 70 mg, 57.75%)을 백색 고체로서 수득하였다:

단계 2. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112, 이성질체 1) 및 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 113, 이성질체 2)

조　생성물　3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112/113의 혼합물, 30.00　mg,　0.079　mmol,　1.00　당량)을 하기 조건으로 Prep-CHIRAL-HPLC로 정제하여(컬럼: CHIRALPAK IE-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA):EtOH=50:50)　3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 112, 이성질체 1, 12.22　mg,　40.73%)을 백색 고체로서 수득하고:

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 113, 이성질체 2, 8.37　mg,　27.90%)을　백색 고체로서 수득하였다:

단계 3. 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 114, 이성질체 3) 및 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 115, 이성질체 4)

조 생성물 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸 테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 114/115의 혼합물, 70.00　mg,　0.185　mmol,　1.00　당량)을 하기 조건으로 Prep-CHIRAL-HPLC로 정제하여(컬럼: CHIRALPAK IE-3, 4.6*50 mm 3 um; 이동상 A: Hex(0.1%DEA):EtOH=50:50) 3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a] 피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 114, 이성질체 3, 32.98 mg, 47.11%)을　백색 고체로서 수득하고:

3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1-(3-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 115, 이성질체 4, 33.45 mg, 41.39%)을　백색 고체로서 수득하였다:　

실시예 116/117

1-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4] 트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 116, 이성질체 1) 및 1-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a] 피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 117, 이성질체 2)의 제조

단계 1. 1-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민

250 mL 둥근-바닥 플라스크에 THF(60.00 mL) 중의 2,2-디메틸옥산-4-올(627.03 mg, 4.816 mmol, 3.00 당량) 및 3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(450.00 mg, 1.605 mmol, 1.00 당량), PPh₃(1263.26 mg, 4.816 mmol, 3.00 당량)을 0℃에서 첨가하였다. THF(10 mL) 중의 DIAD(973.90 mg, 4.816 mmol, 3.00 당량)의 용액을 상기 용액에 N₂ 하에서 0℃에서 적가하고, 3분 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 생성된 혼합물을 DCM(20 mL)로 희석하고, 여과하고, 필터 케이크를 DCM(2 x 5 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 Prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH 15:1)로 정제하여 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물(250 mg)을 하기 조건으로 Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: YMC-Actus Triart C18, 30*250,5 um; 이동상 A: 물(0.05% NH₃H₂O), 이동상 B: ACN; 유속: 60 mL/min; 구배: 37 B 내지 57 B, 7분) 1-[2,2-디메틸옥산-4-일]-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(170 mg, 26.98%)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: m/z (ESI), [M+H]⁺ = 393.2

단계 2. 1-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로 [1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 116, 이성질체1)/1-(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-메틸-N-(7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 117, 이성질체 2)

조 생성물(170 mg)을 하기 조건으로 키랄-Prep-HPLC로 정제하여(컬럼: CHIRALPAK-AD-H-UL001, 20*250 mm, 5 um; 이동상 A: Hex(8mmol/L NH₃.MeOH)--HPLC, 이동상 B: IPA--HPLC; 유속: 20 mL/min; 구배: 25 B 내지 25 B, 15분; RT1:10.12; RT2:11.691) rel-1-[(4R)-2,2-디메틸옥산-4-일]-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 116, 이성질체 1) (70 mg, 41.18%)을 수득하고:

rel-1-[(4R)-2,2-디메틸옥산-4-일]-3-메틸-N-[7-메틸-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일]피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-아민(실시예 117, 이성질체 2) (70 mg, 41.18%)을 백색 고체로서 수득하였다:

생물학적 실시예

본원에 개시된 예시적인 화합물은 하기 생물학적 검정 중 하나 이상에서 특성화되었다.

생물학적 실시예 1:

효소 검정

DNA-PK에 대한 화합물의 억제 활성은 포스포릴화된 생성물로 전환되는 형광 표지된 펩티드 기질을 측정함으로써 TR-FRET에 의해 결정되었다. 모든 검정은 6 μL의 총 반응 부피 및 0.5%(v/v) 최종 DMSO 농도에서 블랙 그라이너(Greiner) 384 웰 저부피 플레이트(그라이너)에서 수행되었다. 전장 인간 DNAPK 단백질, 플루오레세인-P53(Ser15) 펩티드 기질(플루오레세인-EPPLSQEAFADLWKK) 및 LanthaScreen™ Tb-항-포스포-p53[pSer15] 항체 키트는 써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific)에서 구입하였다. 초기에, DNA-PK 단백질은 반응 버퍼(50 mM HEPES pH 7.5, 0.01% Brij-35, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM DTT, 10 μg/ml 송아지 흉선 DNA)에서 실온에서 30분 동안 화합물과 함께 인큐베이션되었다. 이어서, ATP 및 플루오레세인-P53(Ser15) 펩티드 기질을 첨가하여 반응을 개시하였다. 키나제 반응(10 μM ATP, 1.6 μM 펩티드 기질)을 60분 후 20 mM EDTA, 4 nM Tb 항-포스포-p53[Serl5] 항체를 함유하는 6 μl의 정지 버퍼를 첨가하여 ??칭하였다. 반응물을 추가 1시간 동안 인큐베이션하고, 플레이트를 Spark 20M(Tecan)에서 판독하였다. 데이터를 분석하고 각각의 키나제의 50% 억제를 생성하는 화합물의 농도(IC₅₀)를 XLfit과 함께 4-파라미터 로지스틱 피트를 사용하여 계산하였다. 예시적인 화합물의 DNA-PK 억제 활성이 하기 표 5에 나타나 있다. 본 개시내용의 화합물이 강력한 DNA-PK 억제 활성을 나타내었다는 것을 알 수 있다.

[표 5]

생물학적 실시예 2:

대사 안정성 검정(래트 간세포 Clint)

냉동보존된 간세포의 생존력은 트립판 블루를 사용하여 결정되고, 세포 농도는 버퍼를 사용하여 106개 세포/mL로 조정되었다. 1 μM 화합물(아세토니트릴; 0.01% DMSO 중)을 96 딥 웰 플레이트에서 250 μL의 간세포(1,000,000개 세포/mL)와 함께 인큐베이션하였다. 3 부피의 냉각된 아세토니트릴을 20 μL의 반응 혼합물에 첨가하여 상이한 시점(0, 0.5, 5, 15, 30, 45, 60, 80, 100 및 120분)에서 반응을 중단시키고, 15분 동안 4℃에서 원심분리하였다. 40 μL의 상층액을 순수한 물로 200 μL로 희석하고, LC-MS/MS를 사용하여 분석하였다.

시험관내 간세포 청소율은 초기 농도로부터 화합물 소실의 제거 반감기(T_1/2) 측정을 기반으로 추정되었다. IS에 대한 각각의 화합물(시험 또는 대조군)의 피크 면적비를 계산하였다. 약물 제거 속도 상수 k(min-1), T_1/2(min) 및 시험관내 고유 청소율 CL_int(μL/min/E6)은 하기 수학식에 따라 계산되었다:

k = - 기울기

T_1/2 = 0.693/k

CL_int = k/C_hep

여기서, C_hep(세포×μL^-1)는 인큐베이터 시스템에서의 세포 농도이다.

데이터는 표 6에 하기와 같이 나타나 있다

대사 안정성 검정(인간 마이크로좀 Clint)

1 μM 화합물을 1 mM NADPH 용액을 함유하는 250 μL의 버퍼(100 mM 포스페이트 버퍼, pH-7.4)에서 37℃에서 1mg/mL의 마이크로좀(20 mg/ml 단백질 코운(cone)을 갖는 풀링된 HLM)과 함께 인큐베이션하였다. 20 μL의 인큐베이션 혼합물을 새로운 96 웰 플레이트에서 상이한 시점 0, 0.5, 5, 10, 15, 20 및 30분에 5 부피의 냉각된 아세토니트릴로 ??칭하였다. ??치 플레이트를 4000 rpm에서 15분 동안 원심분리하였다. 40 μL의 상층액을 순수한 물로 200 μL로 희석하고, LC-MS/MS를 사용하여 분석하였다.

마이크로좀에서 약물의 시험관내 고유 청소율 CL_int(μl/min/mg)은 간세포에서의 CL_int와 유사한 방식으로 계산되었다. 데이터는 또한 하기와 같이 표 6에 나타나 있다.

MDCKII-MDR1-BCRP 유출 검정

HBSS(25 mM HEPES, pH 7.4)에서 화합물의 정점-기저측(A-B) 및 기저측-정점(B-A) 수송은 MDCKII-MDR1-BCRP 세포 단층에 걸쳐 측정되었다. 인큐베이션은 약 37℃에서 120분 동안 수행되었으며, 시험 시스템의 기능은 양성 대조군 기질로 5 μM 디곡신을 사용하여 확인되었다. 5 μM 화합물 및 대조군 화합물의 수송은 인큐베이션 기간이 시작될 때는 공여자 구획 및 인큐베이션 기간이 끝날 때는 공여자 및 수용자 구획 모두의 인큐베이션 배지에서 기질 농도를 정량화하여 결정되었다. 데이터는 겉보기 투과율(Papp)을 계산하는 데 사용되었다. 모든 인큐베이션은 3중으로 수행되었고, 세포 단층의 통합성은 마커 루시퍼(Lucifer) 옐로우를 사용하여 확인되었다.

투과율 계수 Pexact(cm/s)는 하기 수학식을 사용하여 계산되었다:

Papp = (dCr/dt) x Vr / (A x C0)

Pexact = -(Vd×Vr)/(Vd+Vr)/A/t×ln(1-(Vd+Vr)×Cr/(Vd×Cd +Vr×Cr))

Pexact 비율은 하기 수학식을 사용하여 계산되었다:

Pexact 또는 Papp 비율 = Pexact 또는 Papp(+억제제)/Pexact 또는 Papp(-억제제)

유출비는 하기 수학식을 사용하여 계산되었다:

유출비 = Pexact 또는 Papp(BA)/Pexact 또는 Papp(AB)

여기서, dCr/dt는 시간의 함수로 수용자 챔버의 화합물의 누적 농도이고(μM/s); Vr은 수용자 챔버의 용액 부피이고(정점측에서 0.1 mL, 기저측에서 0.3 mL); A는 수송을 위한 표면적, 즉 단층의 면적에 대해 0.11 cm2이고; CO는 공여자 챔버의 초기 농도이다(μM). 데이터는 하기 표 6에 나타나 있다.

생물학적 실시예 3:

뇌혈액장벽 투과 검정

뇌 및 혈장에서 결합되지 않은 약물의 농도 사이의 관계인 Kp,uu는 CNS 작용 예측의 핵심이며, 약물 발견 시 측정되고 최적화되는 주요 파라미터가 되어야 한다고 믿어진다(Di L et al., Journal of Medicinal Chemistry [2013], 56: 2-12).

시험관내 혈장 및 뇌 결합 검정은 반투막을 사용한 평형 투석법을 이용하여 수행되었다. 혈장 및 희석된 뇌 균질물(DPBS pH 7.4로 1:4)에 5μM 시험 화합물을 스파이킹하고(3중), 천천히 회전하는 플레이트에서 동일한 부피의 150 μL 100 mM PBS 버퍼(pH7.4)에 대해 37℃에서 18시간 동안 투석하였다. 인큐베이션이 끝나면, 수용자 측으로부터 50 μL 분취액 및 공여자로부터 5 μL를 취하였다. 5μL 샘플을 45 μL의 블랭크 혈장 또는 뇌 균질물로 추가 희석하였다. 쌍을 이루는 샘플을 버퍼 또는 블랭크 혈장/뇌 균질물과 매트릭스-일치시키고, 2분 동안 혼합한 다음, 내부 표준으로 100 ng/mL 톨부타미드를 갖는 150 μL의 냉각된 아세토니트릴로 침전시켰다. 4000 rpm에서 20분 동안 원심분리한 후, 상층액을 0.1% 포름산 수용액으로 희석하고, LC/MS/MS(API 4000, Applied Biosystems, Foster City)에 대해 분석하였다. 뇌 균질물 및 희석된 혈장에서 시험 화합물의 비결합 분율(fu)은 뇌 균질물/혈장 측 반응에 대한 버퍼 측 반응의 비율에 의해 계산되었고, 비-희석된 혈장 및 조직에서 시험 화합물의 비결합 분율(fu,pl 및 fu,br)은 하기 수학식으로 균질물 및 혈장에서 측정된 fu로부터 계산되었다: fu,bl (fu,br) = (1/D) / [(1/fu -1) + 1/D)]. D는 희석 계수이다.

단시간 경구 흡수(SOA) 모델은 화합물의 뇌 투과를 확인하기 위한 싱체내 스크리닝 모델이다. 베이징 바이탈 리버(Beijing Vital River)에서 구입된 6마리의 수컷 한 위스타(Han Wistar) 래트에게 1% 메틸셀룰로오스 중의 10 mg/kg의 화합물을 경구 투여하였다. 투여 후 0.5, 1, 2, 4, 7 및 16시간에 뇌척수액(CSF)을 대수조로부터 수집하였다. 혈장 샘플은 수집 후 30분 이내에 약 4℃, 3,000 g에서 원심분리하여 혈장으로 처리될 것이다. 혈장 샘플은 라벨링된 튜브로 제거되고, 분석할 때까지 -80도에서 저장될 것이다. 뇌 조직이 수거되고, 3X 부피의 100 mM 포스페이트 완충된 식염수(pH7.4)에서 균질화되었다. 모든 샘플은 LC/MS/MS 분석 전에 ~-70℃에서 저장되었다.

표준물은 0.5 내지 500 ng/mL를 커버하는 블랭크 혈장, 뇌 균질물 및 인공 CSF를 스파이킹하여 제조되었다. 혈장 샘플과 함께 균질화된 뇌 조직을 내부 표준물(40 ng/mL 덱사메타손 및 40 ng/mL 디클로페낙)을 함유하는 3배 부피의 냉각된 아세토니트릴을 첨가하여 침전시키고, 100 μL의 CSF 샘플을 내부 표준물을 함유하는 100 μL의 냉각된 아세토니트릴로 침전시켰다. 2분 볼텍싱 및 14,000 rpm에서 5분 원심분리 후, 상층액을 LC/MS/MS(API 4000, Applied Biosystems, Foster City)로 분석하였다. 2세트의 표준 곡선이 혈장 샘플 분석으로부터 각각의 배치의 시작 및 끝에서 실행되었다. 뇌 및 CSF 샘플의 경우, 시험 샘플과 함께 하나의 표준 곡선이 분석되었다.

뇌/혈장 비율(Kp)로 표현되는 총 뇌 수준은 경구 투여 후 설치류에서 AUC뇌/AUC혈장에 의해 측정되었다. 생물학적 매트릭스에서 시험 화합물의 유리 분율은 시험관내 혈장 및 뇌 결합 검정에 의해 결정되었다. Kp,uu는 하기 수학식에 의해 계산되었다: Kp,uu = AUC(뇌)/AUC(혈장) x (fu,뇌/fu.혈장). 데이터는 표 7에 나타나 있다.

본 개시내용은 특정 실시양태(일부는 바람직한 실시양태임)를 참조하여 구체적으로 도시 및 설명되었지만, 당업자는 본원에 개시된 본 개시내용의 취지 및 범위를 벗어나지 않으면서 형태 및 세부사항의 다양한 변경이 이루어질 수 있다는 것을 이해해야 한다.

Claims

하기 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,
X₁, X₂, 및 X₃은 각각 독립적으로 C 또는 N이고, 단 X₁, X₂, 및 X₃ 중 적어도 하나는 N이고, X₁, X₂, 및 X₃ 중 적어도 하나는 C이고;
대시 선 "
"은 X₁와 X₂사이 및 X₂와 X₃사이의 결합이 단일 또는 이중 결합일 수 있음을 의미하고, 단 X₁와 X₂사이 및 X₂와 X₃사이의 결합 중 적어도 하나는 단일 결합이고;
R¹은 부재 또는 C_1-6 알킬이고, 여기서 상기 C_1-6 알킬은 임의적으로 히드록실, 할로겐, 또는 중수소로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고;
각각의 R², R³ 및 R⁴는 독립적으로 부재, 할로겐, 히드록실, 시아노, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕실, -(CH₂)_n-Q로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 중수소, 히드록실, 아미노, 시아노, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, (C≡N)-C_1-6 알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, C_3-8 사이클로알킬, C_3-8 사이클로알콕실, 3-8원 아릴, 또는 3-8원 헤테로사이클릴로 일- 또는 독립적으로 다중 치환될 수 있고,
여기서, n은 0, 1 또는 2이고, Q는 3-8원의 포화 또는 불포화된 카르보사이클릴, 또는 3-8원의 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴이고;
고리 A는 5-12원 아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 1-5개의 고리 헤테로원자를 갖는 5-12원 헤테로아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 0-5개의 고리 헤테로원자를 갖는 8-10원 바이사이클릭 고리이고, 여기서 고리 A는 페닐이 아니다.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Ia 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는 화합물:

.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Ib 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는 화합물:

.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Ic 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는 화합물:

.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Id 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는 화합물:

.
제1항에 있어서, R²가 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 옥세타닐, 사이클로펜타닐, 테트라히드로푸릴, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐, 사이클로헵타닐, 피페리디닐, 페닐, 피리디닐, 피리도닐, 옥소카닐, 디히드로피라닐, 스피로[3.3]헵타닐, 스피로[2.5]옥타닐, 바이사이클로[1.1.1]펜타닐, 바이사이클로[3.2.1]옥타닐, 8-옥사 바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 히드록실, 시아노, 할로겐, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, C_3-8 사이클로알킬, C_3-8 사이클로알콕실, 3-8원 아릴, 또는 3-8원 헤테로사이클릴로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고, 이들은 추가로 임의적으로 할로겐, 중수소, 히드록실, 아미노, 시아노, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, 또는 C_1-6 할로알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, R²가

로부터 선택되고, 이들은 임의적으로 히드록실, 시아노, 플루오로, 클로로, 브로모, 메틸, 에틸, 메톡실, 디플루오로메틸, 디플루오로메톡실, 또는 트리플루오로메톡실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, R²가 사이클로헥사닐, 또는 테트라히드로피라닐이고, 이들은 임의적으로 할로겐, C_1-6 알킬 또는 C_1-6 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, sec-부틸, tert-부틸, 또는 이소부틸이고, 이들은 임의적으로 히드록실, 할로겐, 또는 중수소로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 메틸, 에틸, 트리-플루오로-메틸, 또는 트리-중수소-메틸인 화합물.
제1항에 있어서, 고리 A가 1개의 고리 헤테로원자 질소를 갖는 6원 헤테로아릴, 산소, 황 및 질소로부터 선택되는 2-3개의 고리 헤테로원자를 갖는 9원 바이사이클릭 고리이고, 임의적으로, 9원 바이사이클릭 고리는 페닐- 또는 피리디닐-융합된 바이사이클릭 고리이고, 임의적으로, 고리 A는

로부터 선택되는 것인 화합물.
제1항에 있어서, 각각의 R³ 및 R⁴가 독립적으로 부재, 할로겐, 히드록실, 시아노, C_1-6 알킬, CN- C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_1-6 알콕실, C_1-6 할로알콕실, 3 내지 8원의 포화 또는 불포화된 헤테로사이클릴로부터 선택되고, 상기 헤테로사이클릴은 임의적으로 추가로 C_1-3 알킬로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, 고리 A가
이고, 각각의 R³ 및 R⁴가 독립적으로 부재, 메틸, 시아노, 메톡실, 클로로, 시아노-메틸, 피라졸릴, 옥사졸릴로부터 선택되고, 상기 피라졸릴 또는 옥사졸릴은 임의적으로 추가로 C_1-3 알킬로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Ie 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 구조를 갖는 화합물:

상기 식에서,
X₁ 및 X₃ 중 하나는 N이고 다른 하나는 C이고, 대시 선 "
"은 X₁와 N 사이 및 N과 X₃사이의 결합이 단일 또는 이중 결합일 수 있음을 의미하고, 단 X₁와 N사이 및 N과 X₃사이의 결합 중 적어도 하나는 단일 결합이고;
R¹은 C_1-3 알킬이고,
R²는 사이클로펜틸, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐 또는 8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일이고, 이들은 임의적으로 할로겐 또는 C_1-3 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있고,
Y₁, Y₂, 및 Y₃은 각각 독립적으로 C 또는 N이고, 단 Y₁, Y₂, 및 Y₃ 중 적어도 하나는 N이고;
R⁵는 할로겐 또는 C_1-3 알킬이고,
R⁶은 C_1-3 알킬이다.
제14항에 있어서, R²가 비-치환된 사이클로펜틸, 사이클로헥사닐, 테트라히드로피라닐 또는 8-옥사바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일이고, 이들은 임의적으로 할로겐 또는 C_1-3 알콕실로 일-치환 또는 독립적으로 다중-치환될 수 있는 것인 화합물.
제14항에 있어서, Y₃이 N이고, Y₁ 및 Y₂ 중 적어도 하나가 N인 화합물.
제14항에 있어서, R⁵가 메틸인 화합물.
제1항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물:
결정형의 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.
제1 활성 성분으로서 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 하나 이상의 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 약학적으로 허용되는 희석제, 부형제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물.
DNA-의존적 단백질 키나제(DNA-PK)를 억제하기 위한, 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제20항의 약학 조성물.
제1항 내지 제19항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제20항의 약학 조성물을 사용하여 DNA-PK를 억제하는 방법.
대상체에서 DNA-PK 관련된 장애를 치료하는 방법으로서, 유효량의 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항의 하나 이상의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 또는 제20항의 약학 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 DNA-PK 관련된 장애를 치료하는 방법.
제23항에 있어서, 대상체가 인간과 같은 온혈 동물인 방법.
제23항에 있어서, DNA-PK 관련된 장애가 암인 방법.
제2 치료제, 바람직하게는 항암제와 조합되는 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염.