[go: up one dir, main page]

KR20150127203A - Mek 억제제 화합물과 her3/egfr 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법 - Google Patents

Mek 억제제 화합물과 her3/egfr 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20150127203A
KR20150127203A KR1020157028135A KR20157028135A KR20150127203A KR 20150127203 A KR20150127203 A KR 20150127203A KR 1020157028135 A KR1020157028135 A KR 1020157028135A KR 20157028135 A KR20157028135 A KR 20157028135A KR 20150127203 A KR20150127203 A KR 20150127203A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
gdc
cancer
mehd7945a
antibody
administered
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
KR1020157028135A
Other languages
English (en)
Inventor
마크 엑스. 슬리브코우스키
울프강 마이클 코른
Original Assignee
제넨테크, 인크.
더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 제넨테크, 인크., 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 filed Critical 제넨테크, 인크.
Publication of KR20150127203A publication Critical patent/KR20150127203A/ko
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 MEK 억제제 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623) 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 HER3/EGFR 억제제 (예컨대 MEHD7945A)를 포함하는 조합물을 제공한다. 조합물은 과다증식성 장애, 예컨대 암을 치료하는데 특히 유용하다.

Description

MEK 억제제 화합물과 HER3/EGFR 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법 {COMBINATIONS OF A MEK INHIBITOR COMPOUND WITH AN HER3/EGFR INHIBITOR COMPOUND AND METHODS OF USE}
본 발명은 일반적으로 MEK 경로를 억제하는 화합물과 HER3/EGFR을 차단하는 화합물의 조합물을 포함하는, 과다증식성 장애, 예컨대 암에 대해 활성을 갖는 화합물의 제약 조합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 포유동물 세포 또는 연관된 병리학적 병태의 시험관내, 계내 및 생체내 진단 또는 치료를 위해 상기 조합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
단백질 키나제 (PK)는 ATP로부터의 말단 (감마) 포스페이트의 전달에 의한 단백질의 티로신, 세린 및 트레오닌 잔기 상의 히드록시 기의 인산화를 촉매하는 효소이다. 신호 전달 경로를 통해, 이들 효소는 세포 성장, 분화 및 증식을 조절하며, 즉, 사실상 세포 생명의 모든 측면은 어떻게든 PK 활성에 의존한다 (Hardie, G. and Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Book. I and II, Academic Press, San Diego, CA). 게다가, 비정상적 PK 활성은 상대적으로 생명을 위협하지 않는 질환, 예컨대 건선에서부터 극히 치명적인 질환, 예컨대 교모세포종 (뇌암)에 이르는 다수의 장애에 관련되어 왔다. 단백질 키나제는 치료적 조절을 위한 중요한 표적 부류이다 (Cohen, P. (2002) Nature Rev. Drug Discovery 1:309).
MEK는 ERK 1 및 2에 대한 활성화를 위해 필요한 티로신 및 트레오닌을 인산화하는 이중-특이성 키나제이다. 2개의 관련 유전자는 ERK에 대한 그의 결합이 상이한 MEK1 및 MEK2를 코딩한다. HER3은 뉴레귤린 및 NTAK에 의해 결합되고 활성화될 수 있는 수용체 티로신 키나제이다. EGFR은 표피 성장 인자 패밀리의 구성원을 위한 수용체인 막횡단 당단백질이다.
현재, 과다증식성 질환, 예컨대 암을 치료하는데 사용될 수 있는 개선된 방법 및 조성물에 대한 필요성이 남아있다.
시험관내 및 생체내에서 암 세포의 성장을 억제하는데 개선된 효과는 MEK, HER3 및 EGFR을 억제함으로써 달성될 수 있는 것으로 결정되어 있다. 예를 들어, 시험관내 및 생체내에서 암 세포의 성장을 억제하는데 개선된 효과는 과다증식성 장애의 치유적 치료를 위해, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A의 조합물을 투여함으로써 달성될 수 있음이 밝혀졌다. 조합물 및 방법은 과다증식성 장애, 예컨대 암의 치료에 유용할 것이다. 특정 실시양태에서, 조합물의 투여는 상승작용적 효과를 제공할 수 있다.
따라서, 본 발명의 특정 실시양태는 하기 구조를 갖는 소분자 MEK 억제제 GDC-0973 (화학식 I) 또는 그의 제약상 허용되는 염 (WO 2007/044515 참조):
<화학식 I>
Figure pct00001
또는 하기 구조를 갖는 소분자 MEK 억제제 GDC-0623 (화학식 II) 또는 그의 제약상 허용되는 염 (WO2009/085983 참조):
<화학식 II>
Figure pct00002
을, 2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함하며, 그 각각이 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 이중-작용 항체인 MEHD7945A (WO 2010/108127 (예를 들어, 도 33)에서 DL11f 및 문헌 [Schaefer et al., Cancer Cell, 20, 472-486 (2011)] 참조)와 조합하여 포함하는 치료 조합물을 제공한다. MEHD7945A 및 GDC-0973 또는 GDC-0623은 2개의 개별 제약 조성물로 또는 함께 단일 제약 조성물로 존재할 수 있다.
따라서, 본 발명의 특정 실시양태는 과다증식성 장애의 치유적 치료를 위한, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A의 조합물에 관한 것이다.
특정 실시양태에서, 과다증식성 장애는 암이다.
특정 실시양태에서, 암은 KRAS 돌연변이와 연관된다.
특정 실시양태에서, 암은 결장직장암, 중피종, 자궁내막암, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 흑색종, 위암, 결장암, 신장암, 두경부암 및 교모세포종으로부터 선택된다.
특정 실시양태에서 GDC-0973 또는 그의 제약상 허용되는 염은 MEHD7945A와 조합되어 투여된다.
특정 실시양태에서, GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염은 MEHD7945A와 조합되어 투여된다.
특정 실시양태에서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염은 MEHD7945A와 동시에 투여된다.
특정 실시양태에서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A는 순차적으로 투여된다.
본 발명의 특정 실시양태는 과다증식성 장애를 가진 환자의 삶의 질을 개선시키기 위한 치료적 사용을 위한 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A의 조합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 과다증식성 장애를 치료하기 위한 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 조합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 환자에서의 과다증식성 장애의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 조합물의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 과다증식성 장애를 치료하기 위한, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A, 용기, 및 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 투여를 지시하는 포장 삽입물 또는 표지를 포함하는 키트에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 과다증식성 장애 (예를 들어, 암)의 치료에서의 개별, 동시 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A를 포함하는 제품에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 환자에게 GDC-0973 및 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 조합물을 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 과다증식성 장애 (예를 들어, 암)를 치료하는 방법에 관한 것이다.
도 1은 MEHD7945A가 HER3-ECD 및 EGFR-ECD 둘 다에 결합함을 나타내는 그래프이다.
도 2a 및 b는 MEHD7945A가 EGFR 및 HER2/HER3-의존적 신호전달을 억제함을 나타내는 그래프이다.
도 3은 MEHD7945A에 의한 FaDu 암 모델에서의 종양 성장의 억제를 나타내는 그래프이다.
도 4는 수많은 뮤린 이종이식편 모델에서 세툭시맙 또는 항-HER3과 비교된 MEHD7945A의 종양 성장 억제 효과의 요약이다.
도 5는 GDC-0973 및 GDC-0623이 B-RAF 돌연변이 종양 세포의 성장을 억제하는데 효과적임을 나타내는 그래프이다.
도 6은 GDC-0973 및 GDC-0623이 KRAS 돌연변이 종양 세포의 성장을 억제하는데 효과적임을 나타내는 그래프이다.
도 7은 단일 작용제 및 조합 치료가 뮤린 이종이식편 CRC KRAS DLD-1 (a) 및 LS180 (b) 모델에서 pAkt 및 pERK 수준에 미치는 영향을 나타내는 그래프이다.
도 8은 MEHD7945A, GDC-0973 및 GDC-0623의 단일 작용제 및 조합 치료의 종양 성장 억제 효과를 나타내는 그래프이다.
도 9는 코비메티닙으로 처리된 TGFα-자극 LS180 또는 DLD-1 세포가 AKT의 증가된 인산화를 나타냈음을 나타낸다.
도 10은 MEHD7945A 및 코비메티닙 조합에 의한 KRAS-돌연변이 세포주, LS180, 증식의 억제를 나타내는 그래프이다.
도 11a은 MEHD7945A와 조합된 코비메티닙이 CD-1 누드 마우스에서 LS180 결장직장 선암종 종양 이종이식편에 미치는 영향을 나타내는 그래프이고; 도 11b는 도 11a로부터의 데이터를 요약하는 표이다.
도 12a는 MEHD7945A와 조합된 코비메티닙이 C.B-17 SCID 베이지색 마우스에서 KRAS-돌연변이 DLD-1 결장직장 선암종 종양 이종이식편에 미치는 영향을 나타내는 그래프이고; 도 12b는 도 12a로부터의 데이터를 요약하는 표이다.
도 13a는 MEHD7945A와 조합된 코비메티닙이 NCr 누드 마우스에서 BxPC3 췌관 이종이식편 종양에 미치는 영향을 나타내는 그래프이고; 도 13b는 본 연구를 위한 항-종양 활성을 요약하는 표이고; 도 13c는 본 연구를 위한 종양 진행까지의 시간 및 반응을 요약하는 표이다.
I. 정의
본원에서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태는 문맥상 달리 명백하게 나타내지 않는다면 복수 지시대상을 포함함을 주목해야 한다.
본 명세서 및 청구범위 전체에 걸쳐, 단어 "포함하다", 또는 "포함한다" 또는 "포함하는"과 같은 변형은 언급된 정수 또는 정수들의 군을 포함하고자 하나, 임의의 다른 정수 또는 정수들의 군을 배제하려는 것은 아닌 것으로 이해될 것이다.
본원에서의 용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체, 및 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 항체 단편을 포함한다. 용어 "다중특이적 항체"는 가장 넓은 의미로 사용되고, 구체적으로 다중에피토프 특이성을 갖는 (즉, 하나의 생물학적 분자 상의 2개 이상의 상이한 에피토프에 특이적으로 결합가능하거나, 2개 이상의 상이한 생물학적 분자 상의 에피토프에 특이적으로 결합가능한) 항원-결합 도메인을 포함하는 항체를 포함한다. 항원-결합 도메인의 한 구체적 예는 중쇄 가변 도메인 (VH) 및 경쇄 가변 도메인 (VL)으로 구성된 VHVL 단위이다. 이러한 다중특이적 항체는 전장 항체, 2개 이상의 VL 및 VH 도메인을 갖는 항체, 항체 단편, 예컨대 Fab, Fv, dsFv, scFv, 디아바디, 이중특이적 디아바디 및 트리아바디, 공유결합적으로 또는 비-공유결합적으로 연결된 항체 단편을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. "이중특이적 항체"는 하나의 생물학적 분자 상의 2종의 상이한 에피토프에 특이적으로 결합가능하거나, 2종의 상이한 생물학적 분자 상의 에피토프에 특이적으로 결합가능한 항원-결합 도메인을 포함하는 다중특이적 항체이다. 또한, 이중특이적 항체를 본원에서는 "이중 특이성"을 갖는 것 또는 "이중 특이적"인 것으로 지칭한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 항체는 그의 표적 HER 또는 HER들에 대해 ≤ 1 μM, ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, ≤ 1 nM, ≤ 0.1 nM, ≤ 0.01 nM, 또는 ≤ 0.001 nM (예를 들어 10-8 M 이하, 예를 들어 10-8 M 내지 10-13 M, 예를 들어 10-9 M 내지 10-13 M)의 해리 상수 (Kd)를 갖는다.
기본 4-쇄 항체 단위는 2개의 동일한 경쇄 (L) 및 2개의 동일한 중쇄 (H)로 구성된 헤테로사량체 당단백질이다 (IgM 항체는 J쇄라 불리는 추가적 폴리펩티드와 함께 5개의 기본 헤테로사량체 단위로 이루어지며, 따라서 10개의 항원-결합 부위를 함유하며, 한편 분비형 IgA 항체는 중합되어 J쇄와 함께 기본 4-쇄 단위를 2-5개 포함하는 다가 조립체를 형성할 수 있음). IgG의 경우에, 4-쇄 단위는 일반적으로 약 150,000 달톤이다. 각각의 L 쇄는 1개의 공유 디술피드 결합에 의해 H 쇄에 연결되며, 한편 2개의 H 쇄는 H 쇄 이소형에 따라 1개 이상의 디술피드 결합에 의해 서로 연결된다. 또한, 각각의 H 쇄 및 L 쇄는 일정한 간격을 두고 이격된 쇄내 디술피드 브릿지를 갖는다. 각각의 H 쇄는 N-말단에 가변 도메인 (VH)을 가지며, 이어서 α 및 γ 쇄 각각의 경우에 3개의 불변 도메인 (CH), μ 및 ε 이소형의 경우에 4개의 CH 도메인을 갖는다. 각각의 L 쇄는 N-말단에 가변 도메인 (VL), 이어서 다른쪽 말단에 불변 도메인 (CL)을 갖는다. VL은 VH와 정렬되고, CL은 중쇄의 제1 불변 도메인 (CH1)과 정렬된다. 특정 아미노산 잔기는 경쇄와 중쇄 가변 도메인 사이의 계면을 형성한다고 여겨진다. VH 및 VL의 쌍형성은 함께 단일 항원-결합 부위를 형성한다. 상이한 부류의 항체의 구조 및 특성에 대해서는, 예를 들어 문헌 [Basic and Clinical Immunology, 8th edition, Daniel P. Stites, Abba I. Terr and Tristram G. Parslow (eds.), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, page 71 and Chapter 6]을 참조한다.
임의의 척추동물 종의 L 쇄는 이들의 불변 도메인의 아미노산 서열을 기초로 하여, 카파 및 람다라고 불리는 명백히 구별되는 2가지 유형 중 하나에 배정될 수 있다. 이뮤노글로불린은 그의 중쇄의 불변 도메인 (CH)의 아미노산 서열에 따라 상이한 부류 또는 이소형으로 배정될 수 있다. 5가지 부류의 이뮤노글로불린 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM이 존재하고, 각각 α, δ, γ, ε, 및 μ로 지정된 중쇄를 갖는다. γ 및 α 부류는 추가로 CH 서열 및 기능에 있어서의 비교적 작은 차이를 기초로 하여 하위부류로 분류되는데, 예를 들어 인간은 다음과 같은 하위부류: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2를 발현한다.
용어 "가변"은 가변 도메인의 특정 분절의 서열이 항체마다 크게 상이하다는 사실을 지칭한다. V 도메인은 항원-결합을 매개하고, 특정 항체의 그의 특정 항원에 대한 특이성을 규정한다. 그러나, 가변성이 가변 도메인의 110개 아미노산 전폭에 걸쳐 고르게 분포되어 있는 것은 아니다. 대신에, V 영역은 "초가변 영역" 또는 HVR이라 불리는 가변성이 극도로 높은 보다 짧은 영역에 의해 분리된, 15-30개의 아미노산의 프레임워크 영역 (FR)이라 불리는 비교적 불변성인 스트레치로 이루어진다. 천연 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인은 각각, 베타-시트 형태를 주로 채택하는 4개의 FR을 포함하고, 이들은 상기 베타-시트 구조를 연결하며 일부 경우에는 베타-시트 구조의 일부를 형성하는 루프를 형성하는 3개의 초가변 영역에 의해 연결된다. 각각의 쇄의 초가변 영역은 FR에 의해 함께 근접하게 모여있고, 다른 쇄의 초가변 영역과 함께 항체의 항원-결합 부위의 형성에 기여한다 (문헌 [Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)] 참조). 불변 도메인은 항원에 대한 항체 결합에 직접 관여되지는 않지만, 다양한 이펙터 기능, 예컨대 항체 의존적 세포 세포독성 (ADCC)에 있어서의 항체의 관여를 나타낸다.
용어 "초가변 영역", "HVR" 또는 "HV"는, 본원에서 사용되는 경우, 서열에서 초가변이고/이거나 구조적으로 규정된 루프를 형성하는 항체 가변 도메인의 영역을 지칭한다. 일반적으로, 항체는 6개의 HVR; VH 내에 3개 (HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3), 및 VL 내에 3개 (HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3)를 포함한다. 천연 항체에서, H3 및 L3은 6개의 HVR 중에서 가장 높은 다양성을 나타내고, 특히 H3은 항체에 정밀한 특이성을 부여하는데 특유의 역할을 한다고 여겨진다. 예를 들어, 문헌 [Xu et al., Immunity 13:37-45 (2000)]; [Johnson and Wu, in Methods in Molecular Biology 248:1-25 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003)]을 참조한다. 실제로, 중쇄만으로 이루어진 자연 발생 카멜리드(camelid) 항체는 경쇄의 부재 하에 기능적이고 안정하다. 예를 들어, 문헌 [Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993)]; [Sheriff et al., Nature Struct. Biol. 3:733-736 (1996)]을 참조한다.
HVR은 일반적으로 초가변 루프로부터의 및/또는 "상보성 결정 영역" (CDR)으로부터의 아미노산 잔기를 포함하며, 후자는 서열 가변성이 가장 높고/거나 항원 인식에 관여된다. 많은 HVR 설명이 사용되고 있고 본원에 포함된다. 카바트 상보성 결정 영역 (CDR)은 서열 가변성에 기초한 것이며, 가장 흔히 사용되고 있다 (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). 코티아(Chothia)는 구조적 루프의 위치를 대신 지칭한다 (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). AbM HVR은 카바트 HVR과 코티아 구조적 루프 사이의 절충안을 나타내고, 옥스포드 몰레큘라(Oxford Molecular)의 AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된다. "접촉" HVR은 이용가능한 복합 결정 구조의 분석을 기초로 한다. 이들 HVR 각각으로부터의 잔기를 이하에 나타냈다.
Figure pct00003
HVR은 다음과 같이 "확장된 HVR"을 포함할 수 있다: VL에서 24-36 또는 24-34 (L1), 46-56 또는 50-56 (L2) 및 89-97 또는 89-96 (L3), 및 VH에서 26-35 (H1), 50-65 또는 47-65 (H2) 및 93-102, 94-102, 또는 95-102 (H3). 가변 도메인 잔기는 이들 정의 각각에 대해 문헌 [Kabat et al., 상기 문헌]에 따라 넘버링된다.
"프레임워크" 또는 "FR" 잔기는 본원에 정의된 바와 같은 HVR 잔기 이외의 그러한 가변 도메인 잔기이다.
용어 "카바트에서와 같은 가변 도메인 잔기 넘버링" 또는 "카바트에서와 같은 아미노산 위치 넘버링" 및 이들의 변형은 문헌 [Kabat et al., 상기 문헌]에서 항체 편집의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인에 사용된 넘버링 시스템을 지칭한다. 이러한 넘버링 시스템을 사용하여, 실제 선형 아미노산 서열은 가변 도메인의 FR 또는 HVR의 단축 또는 이것으로의 삽입에 상응하는 보다 적은 또는 추가의 아미노산을 함유할 수 있다. 예를 들어, 중쇄 가변 도메인은 H2의 잔기 52 뒤에 단일 아미노산 삽입 (카바트에 따른 잔기 52a), 및 중쇄 FR 잔기 82 뒤에 삽입된 잔기 (예를 들어, 카바트에 따른 잔기 82a, 82b 및 82c 등)를 포함할 수 있다. 잔기의 카바트 넘버링은 주어진 항체에 대해, 항체 서열의 상동성 영역에서 "표준" 카바트 넘버링된 서열과 정렬하여 결정할 수 있다.
카바트 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인 내의 잔기 (대략 경쇄의 잔기 1-107 및 중쇄의 잔기 1-113)를 지칭할 때 사용된다 (예를 들어, 문헌 [Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]). "EU 넘버링 시스템" 또는 "EU 지수"는 일반적으로 이뮤노글로불린 중쇄 불변 영역 내의 잔기를 지칭할 때 사용된다 (예를 들어, 문헌 [Kabat et al., 상기 문헌]에 보고된 EU 지수). "카바트에서와 같은 EU 지수"는 인간 IgG1 EU 항체의 잔기 넘버링을 지칭한다. 본원에서 달리 언급되지 않는다면, 항체의 가변 도메인 내의 잔기 번호에 대한 언급은 카바트 넘버링 시스템에 의한 잔기 넘버링을 의미한다. 본원에서 달리 언급하지 않는다면, 항체의 불변 도메인 내의 잔기 번호에 대한 언급은 EU 넘버링 시스템에 의한 잔기 넘버링을 의미한다 (예를 들어, WO 2006/073941 참조).
"친화도"는 분자 (예를 들어, 항체)의 단일 결합 부위와 그의 결합 파트너 (예를 들어, 항원) 사이의 비공유 상호작용의 총합의 강도를 지칭한다. 달리 나타내지 않는다면, 본원에서 사용된 바와 같이, "결합 친화도"는 결합 쌍의 구성원들 (예를 들어, 항체 및 항원) 사이의 1:1 상호작용을 반영하는 내재적 결합 친화도를 지칭한다. 분자 X의 그의 파트너 Y에 대한 친화도는 일반적으로 해리 상수 (Kd)로 표시될 수 있다. 친화도는 본원에 기재된 방법을 포함한, 관련 기술분야에 공지된 통상의 방법으로 측정할 수 있다.
"친화도 성숙" 항체는 하기 변경(들)을 보유하지 않은 모 항체와 비교하여, 항원에 대한 항체의 친화도가 개선된, 하나 이상의 HVR 또는 그의 프레임워크 영역에 하나 이상의 변경을 갖는 항체이다. 한 실시양태에서, 친화도 성숙 항체는 표적 항원에 대한 나노몰 또는 심지어 피코몰의 친화도를 갖는다. 친화도 성숙 항체는 관련 기술분야에 공지된 특정 절차를 사용하여 생성시킬 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992)]은 VH 및 VL 도메인 셔플링에 의한 친화도 성숙을 기재한다. HVR 및/또는 프레임워크 잔기의 무작위 돌연변이유발은, 예를 들어 문헌 [Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91:3809-3813 (1994)]; [Schier et al. Gene 169:147-155 (1995)]; [Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995)]; [Jackson et al., J. Immunol. 154(7):3310-9 (1995)]; 및 [Hawkins et al., J. Mol. Biol. 226:889-896 (1992)]에 기재되어 있다.
항체의 "부류"는 그의 중쇄가 보유하는 불변 도메인 또는 불변 영역의 유형을 지칭한다. 5가지 주요 부류의 항체: IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM이 존재하고, 이들 중 몇몇은 하위부류 (이소형), 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, 및 IgA2로 추가로 분류될 수 있다. 상이한 부류의 이뮤노글로불린에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 α, δ, ε, γ 및 μ라 불린다.
용어 "환자" ("개체" 및 "대상체"로 교체가능하여 칭해짐)는 인간 환자이다. 환자는 "암 환자"일 수 있고, 즉 암의 하나 이상의 증상을 앓을 위험이 있거나 앓고 있는 환자일 수 있다.
용어 "치료하다" 및 "치료"는 치유적 치료를 지칭하며, 여기서 목표는 원하지 않는 생리학상의 변화 또는 장애, 예를 들면 암의 성장, 발달 또는 확산을 예방 또는 둔화시키는 것이다. 본 발명의 목적을 위해, 유익하거나 원하는 임상 결과는 검출가능하거나 검출가능하지 않음의 여부와 관계없이, 증상의 경감, 질환의 정도의 약화, 질환의 안정화된 (즉, 악화는 아님) 상태, 질환 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태의 개선 또는 일시적 완화, 및 차도 (부분적이든 전체이든)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. "치료"는 또한 치료를 받지 않는 경우 예상되는 생존과 비교하여 생존의 연장을 의미할 수 있다. 치료를 필요로 하는 이들은 병태 또는 장애를 이미 가진 이들, 예를 들어 암 환자를 포함한다.
어구 "치료 유효량"은 (i) 특정 질환, 병태, 또는 장애를 치료하거나, (ii) 특정 질환, 병태, 또는 장애의 하나 이상의 증상을 약화, 개선, 또는 소실시키거나, (iii) 본원에 기재된 특정 질환, 병태, 또는 장애의 하나 이상의 증상의 발병을 예방 또는 지연시키는 양을 의미한다. 암의 경우에, 치료 유효량은 암 세포의 수를 감소시키고; 종양 크기를 감소시키고; 말초 기관 내의 암 세포 침윤을 억제하고 (예를 들어, 어느 정도까지로 둔화, 바람직하게는 정지시키고); 종양 전이를 억제하고 (예를 들어, 어느 정도까지 둔화, 바람직하게는 정지시키고); 종양 성장을 어느 정도까지 억제하고/하거나; 암과 연관된 하나 이상의 증상을 어느 정도까지 경감시킬 수 있다. 조합물이, 존재하는 암 세포의 성장을 예방하고/하거나 사멸시킬 수 있는 정도까지는, 세포증식억제적 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 요법의 경우, 예를 들어 질환 진행까지의 시간 (TTP)을 평가하고/하거나 반응률(RR)을 결정함으로써 효능이 측정될 수 있다.
용어 "암" 및 "암성"은 전형적으로 비조절된 세포 성장에 의해 특징지어지는 포유동물에서의 생리학상 병태를 지칭하거나 기재한다. "종양"은 하나 이상의 암성 세포를 포함한다. 암의 예는 암종, 림프종, 모세포종, 육종, 및 백혈병 또는 림프성 악성종양을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 이러한 암의 보다 특정의 예는 편평세포암 (예를 들어, 상피 편평세포암), 소세포 폐암, 비-소세포 폐암 ("NSCLC"), 폐의 선암종 및 폐의 편평세포 암종을 포함한 폐암, 복막암, 간세포성암, 위장암을 포함한 위암 또는 위의 암, 췌장암, 교모세포종, 자궁경부암, 난소암, 간암, 방광암, 간세포암, 유방암, 결장암, 직장암, 결장직장암, 자궁내막 또는 자궁 암종, 타액선 암종, 신장암 또는 신암, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종, 뿐만 아니라 두경부암을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같은 위암은 위의 임의의 부분에서 발달될 수 있고, 위 전체에 걸쳐, 그리고 다른 기관; 특히 식도, 폐, 림프절, 및 간으로 확산될 수 있는 위의 암을 포함한다.
"화학요법제"는 작용의 메카니즘에 상관없이 암의 치료에 유용한 생물학적 (대분자) 또는 화학적 (소분자) 화합물이다.
"백금 작용제"는 백금, 예를 들어 카르보플라틴, 시스플라틴, 및 옥살리플라틴을 포함하는 화학요법제이다.
용어 "포유동물"은 인간, 마우스, 래트, 기니 피그, 원숭이, 개, 고양이, 말, 소, 돼지, 양, 및 가금류를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 한 실시양태에서 환자는 인간이다.
용어 "포장 삽입물"은 이러한 치료 제품의 사용에 관한 지시사항, 용법, 투여량, 투여, 금기 및/또는 경고에 관한 정보를 함유하는 관례상 치료 제품의 상업 포장에 포함된 사용설명서를 지칭하는데 사용된다.
본원에 사용된 바와 같은 어구 "제약상 허용되는 염"은 화합물의 제약상 허용되는 유기 또는 무기 염을 지칭한다. 예시적인 염은 비메실레이트, 술페이트, 시트레이트, 아세테이트, 옥살레이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 니트레이트, 비술페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 락테이트, 살리실레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 올레에이트, 탄네이트, 판토테네이트, 비타르트레이트, 아스코르베이트, 숙시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄술포네이트 "메실레이트", 에탄술포네이트, 벤젠술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 및 파모에이트 (즉, 1,1'-메틸렌-비스-(2-히드록시-3-나프토에이트)) 염을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 제약상 허용되는 염은 또 다른 분자, 예를 들어 아세테이트 이온, 숙시네이트 이온 또는 다른 반대 이온의 포함을 포함할 수 있다. 반대 이온은 모 화합물 상의 전하를 안정화시키는 임의의 유기 또는 무기 모이어티일 수 있다. 더욱이, 제약상 허용되는 염은 그의 구조 내에 하나 초과의 하전된 원자를 가질 수 있다. 다수의 하전된 원자가 제약상 허용되는 염의 부분인 경우는 다수의 반대 이온을 가질 수 있다. 따라서, 제약상 허용되는 염은 하나 이상의 하전된 원자 및/또는 하나 이상의 반대 이온을 가질 수 있다.
원하는 제약상 허용되는 염은 관련 기술분야에 이용가능한 임의의 적합한 방법, 예를 들어 무기 산, 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 메탄술폰산, 인산 등, 또는 유기 산, 예컨대 아세트산, 말레산, 숙신산, 만델산, 푸마르산, 말론산, 피루브산, 옥살산, 글리콜산, 살리실산, 피라노시딜산, 예컨대 글루쿠론산 또는 갈락투론산, 알파 히드록시산, 예컨대 시트르산 산 또는 타르타르산, 아미노산, 예컨대 아스파르트산 또는 글루탐산, 방향족 산, 예컨대 벤조산 또는 신남산, 술폰산, 예컨대 p-톨루엔술폰산 또는 에탄술폰산 등을 이용한 유기 염기의 처리에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로 염기성 제약 화합물로부터 제약상 유용하거나 허용되는 염의 형성에 적합하다고 고려되는 산은, 예를 들어 문헌 [P. Stahl et al., Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al., Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1 19]; [P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201 217]; [Anderson et al., The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York]; [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., (1995) Mack Publishing Co., Easton PA]에 의해; 그리고 문헌 [The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. 그의 웹사이트 상에 있음)]에서 논의된다. 이들 개시는 그에 대해 본원에 참조로 포함된다.
어구 "제약상 허용되는"은 물질 또는 조성물이 제제를 포함하는 다른 성분, 및/또는 그로 치료되는 환자와 화학적으로 및/또는 독성학적으로 적합성이어야 함을 나타낸다.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "상승작용적"은 2종 이상의 단일 작용제의 상가적 효과보다 더 효과적인 치료 조합물을 지칭한다. 상승작용적 상호작용의 결정은 관련 기술분야에 공지된 검정으로부터 얻은 결과에 기초할 수 있다. 이들 검정의 결과는 조합 지수(Combination Index)를 얻기 위해 초우(Chou) 및 탈랄라이(Talalay) 조합 방법 및 칼쿠신(CalcuSyn) 소프트웨어를 이용한 용량-효과 분석을 사용하여 분석될 수 있다 (Chou and Talalay, 1984, Adv. Enzyme Regul. 22:27-55). 본원에서 제공되는 조합물은 항암제 중에서 상승작용, 상가작용 및 길항작용을 정량하기 위한 표준 프로그램을 이용하여 분석될 수 있다. 예는 초우 및 탈랄라이의 문헌 ["New Avenues in Developmental Cancer Chemotherapy," Academic Press, 1987, Chapter 2]에 기재된 프로그램이다. 0.8 미만의 조합 지수 값은 상승작용을 나타내고, 1.2 초과의 값은 길항작용을 나타내고, 0.8 내지 1.2의 값은 상가적 효과를 나타낸다. 조합 요법은 "상승작용"을 제공하고 "상승작용적"임을 입증할 수 있으며, 즉, 활성 성분을 함께 사용하는 경우 달성되는 효과가 화합물을 개별적으로 사용하여 생긴 효과의 합보다 크다. 따라서, 실시양태에서, 활성 성분의 합한 양은 상승작용적 효과를 제공하는데 효과적이다 (상승작용적으로 효과적인 양으로도 본원에서 지칭됨). 상승작용적 효과는 활성 성분이, (1) 공동-제제화되고 조합된 단위 투여 제제로 동시에 투여되거나 전달되는 경우; (2) 개별 제제로서 교대로 또는 동시에 전달되는 경우; 또는 (3) 몇몇 다른 요법에 의해 전달되는 경우 달성될 수 있다. 대체 요법으로 전달되는 경우, 상승작용적 효과는 화합물이 순차적으로, 예를 들어 개별 시린지로 상이한 주사에 의해 투여되거나 전달되는 경우 달성될 수 있다. 일반적으로, 대체 요법 동안, 유효 투여량의 각각의 활성 성분은 순차적으로, 즉, 연속적으로 투여되며, 한편 조합 요법에서 유효 투여량의 2종 이상의 활성 성분은 함께 투여된다. 조합 효과는 BLISS 독립성 모델 및 최고 단일 작용제 (HSA) 모델 둘 다를 사용하여 평가되었다 (Lehar et al. 2007, Molecular Systems Biology 3:80). BLISS 스코어는 단일 작용제로부터의 강화작용의 정도를 정량하고, 양의 BLISS 스코어 (0 초과)는 단순 상가성보다 크다는 것을 제안한다. 250 초과의 누적 양성 BLISS 스코어는 시험된 농도 범위 내에서 관찰된 강한 상승작용으로 간주된다. HSA 스코어 (0 초과)는 상응하는 농도에서 단일 작용제 반응의 최대치보다 큰 조합 효과를 제안한다.
주어진 과다증식성 장애에 대한 개선된 치료를 제공하는 것 이외에도, 본 발명의 특정 조합물의 투여는 상이한 치료를 받는 동일한 환자에 의해 경험되는 삶의 질과 비교하여 환자의 삶의 질을 개선시킬 수 있다. 예를 들어, 조합물의 환자에의 투여는 동일한 환자가 요법으로서 개별 작용제 중 하나만을 받는 경우 경험하는 삶의 질과 비교하여 개선된 삶의 질을 제공할 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 조합물을 이용하는 조합 요법은 필요한 치료제의 용량을 낮출 수 있다. 조합 요법은 화학요법제의 사용에 대한 필요성 및 고-용량 화학요법제와 연관된 부작용 (예를 들어, 오심, 구토, 탈모, 발진, 감소된 식욕, 체중 감소 등)을 감소시키거나 제거할 수 있다. 조합물은 또한 감소된 종양 부담 및 연관된 유해 사례, 예컨대 통증, 기관 기능장애, 체중 감소 등을 야기할 수 있다. 따라서, 본 발명의 한 측면은 본원에 기재된 작용제로 과다증식성 장애에 대해 치료받는 환자의 삶의 질을 개선시키기 위한 치료적 사용을 위한 조합물을 제공한다.
한 측면은 본원에 기재된 조합물을 암을 앓고 있는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 종양 성장 억제 (TGI)의 방법을 포함한다. 특정 실시양태에서, 조합물은 상승작용적 효과를 제공한다.
특정 실시양태에서, 조합물의 TGI는 GDC-0973 및 GDC-0623 또는 MEHD7945A 단독 중 어느 하나의 TGI보다 크다. 특정 실시양태에서, 조합물의 TGI는 작용제 단독의 TGI보다 약 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 또는 75% 크다.
TGI의 측정 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 한 예시적인 방법에서, 치료 전후의 환자로부터 평균 종양 부피를 측정하고 비교한다. 종양 부피는 관련 기술분야의 임의의 방법, 예를 들어 울트라칼(UltraCal) IV 캘리퍼 (프레드 브이.(Fred V.) 포울러 컴퍼니(Fowler Company))를 사용하여, 또는 PET (양전자 방출 단층촬영)에 의해, 또는 일부 다른 방법에 의해 2차원적으로 (길이 및 폭) 측정할 수 있다. 식: 종양 부피 (mm3) = (길이 x 폭2) x 0.5를 사용할 수 있다. 다중 시간대에 걸친 종양 부피의 측정을 혼합-모델링 선형 혼합 효과 (LME) 접근법 (Pinheiro et al. 2009)을 사용하여 수행할 수 있다. 이러한 접근법은 반복 측정 (및 다중 환자) 둘 다를 해결할 수 있다. 입방 회귀 스플라인을 사용하여 각각의 용량 수준에서 종양 부피의 시간 과정에 대한 비-선형 프로파일을 피팅할 수 있다. 그 다음에, 이들 비-선형 프로파일을 혼합 모델내에서 용량과 관련시킬 수 있다. 하기 식을 사용하여, 비히클에 대해 1일 당 피팅된 곡선하 면적 % (AUC)로서 비히클의 %로서의 종양 성장 억제를 계산할 수 있다:
Figure pct00004
이 식을 사용하면, 100%의 TGI 값은 종양 정체를 나타내고, 약 1% 초과 약 100% 미만은 종양 성장 억제를 나타내며, 약 100% 초과는 종양 퇴축을 나타낸다.
II. MEK 및 HER3/EGFR 억제제
A. MEK 억제제
본 발명은 MEK 억제제에 관한 것이고 HER3 및 EGFR 억제제의 조합 요법에서의 그의 용도에 관한 것이다. MEK 억제제가 광범위하게 검토되어 있다 (S. Price, Putative Allosteric MEK1 and MEK 2 inhibitors, Expert Opin. Ther. Patents, 2008 18(6):603; J.I. Trujillo, MEK Inhibitors: a patent review 2008-2010 Expert Opin. Ther. Patents 2011 21(7):1045). 바람직하게는 MEK 억제제는 GDC-0973 (코비메티닙), GDC-0623, AZD6244 (셀루메티닙), AZD8330, BAY 86-9766 (레파메티닙), GSK-1120212 (트라메티닙), ARRY-162, MSC1936369, MK162, TAK733 및 PD-325901로부터 선택된다. 가장 바람직하게는 MEK 억제제는 GDC-0973 (코비메티닙) 또는 GDC-0623이다.
GDC-0973은 RAS/RAF 경로의 중심성 구성성분, MEK1 및 MEK2의 경구 이용가능한, 강력하고 고도로 선택적인 억제제이다. GDC-0973은 화학물질 색인 등록 번호(Chemical Abstract Registration Number) (CAS) 934660-93-2 및 하기 화학 구조를 갖는다:
<화학식 I>
Figure pct00005
GDC-0623은 화학물질 색인 등록 번호 (CAS) 1168091-68-6 및 하기 화학 구조를 갖는다:
<화학식 II>
Figure pct00006
A. MEK 억제제: GDC-0973 및 GDC-0623의 제조
MEK 억제제 GDC-0973 (화학식 I), 또는 그의 제약상 허용되는 염은 WO2007044515의 실시예 22에 기재된 바와 같이 제조되거나, 대안적으로, 라이스 등(Rice, et al.)에 의해 기재된 바와 같이 제조될 수 있다 (K. D. Rice et al., Novel Carboxamide-Based Allosteric MEK inhibitors: Discovery and Optimization Efforts toward XL518 (GDC-0973, Med. Chem. Lett. 2012 3:416).
MEK 억제제 GDC-0623 (화학식 II), 또는 그의 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 WO2009/085983의 실시예 5에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다.
B. HER3/EGFR 억제제
본 발명은 HER3, EGFR, 또는 HER3 및 EGFR 둘 다를 억제하는 화합물 및 MEK 억제제의 조합 요법에서의 그의 용도에 관한 것이다. HER3, EGFR, 및 이중 HER3/EGFR 억제제는 항체 또는 다른 항원-결합 단백질, 소분자, 핵산 (예컨대 siRNA), 또는 임의의 다른 이러한 분자일 수 있다.
한 실시양태에서, 조합 요법은 HER3 억제제에 관한 것이다. 예시적 항-HER3 항체는 WO2011076683 (Mab205.10.1, Mab205.10.2, Mab205.10.3), US7846440; US7705130 및 US5968511에 기재되어 있다.
한 실시양태에서, 조합 요법은 EGFR 억제제에 관한 것이다. EGFR 억제제의 예는 MAb 579 (ATCC CRL HB 8506), MAb 455 (ATCC CRL HB8507), MAb 225 (ATCC CRL 8508), MAb 528 (ATCC CRL 8509) (미국 특허 번호 4,943, 533 (Mendelsohn et al.) 참조) 및 그의 변형, 예컨대 키메라 225 (C225 또는 세툭시맙; 에르비툭스(ERBITUX)®) 및 재 개조된 인간 225 (H225) (WO 96/40210 (임클론 시스템즈 인크.(Imclone Systems Inc.) 참조); IMC-11F8, 완전(fully) 인간, EGFR-표적화 항체 (임클론); 유형 II 돌연변이 EGFR을 결합하는 항체 (미국 특허 번호 5,212,290); 미국 특허 번호 5,891,996에 기재된 바와 같이 EGFR을 결합하는 인간화 및 키메라 항체; 및 EGFR, 예컨대 ABX-EGF 또는 파니투무맙을 결합하는 인간 항체 (WO98/50433 (아브게닉스(Abgenix)/암젠(Amgen)) 참조); EMD 55900 (Stragliotto et al. Eur. J. Cancer 32A:636-640 (1996)); EGFR 결합에 대해 EGF 및 TGF-알파 둘 다와 경쟁하는 EGFR을 겨누는 EMD7200 (마투주맙) 인간화 EGFR 항체 (EMD/머크(Merck)); 인간 EGFR 항체, HuMax-EGFR (젠맙(GenMab)); E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6. 3 및 E7.6. 3으로서 공지되어 있고 미국 특허 번호 6,235,883에 기재된 완전 인간 항체; MDX-447 (메다렉스 인크(Medarex Inc)); 및 mAb 806 또는 인간화 mAb 806 (Johns et al., J. Biol. Chem. 279(29):30375-30384 (2004))를 포함한다. 항-EGFR 항체는 세포독성제와 접합할 수 있고, 따라서 면역접합체를 생성할 수 있다 (예를 들어, EP659,439A2 (머크 패턴트 게엠베하(Merck Patent GmbH)) 참조). EGFR 억제제는 소분자, 예컨대 미국 특허 번호: 5,616,582, 5,457,105, 5,475,001, 5,654,307, 5,679,683, 6,084,095, 6,265,410, 6,455,534, 6,521,620, 6,596,726, 6,713,484, 5,770,599, 6,140,332, 5,866,572, 6,399,602, 6,344,459, 6,602,863, 6,391,874, 6,344,455, 5,760,041, 6,002,008, 및 5,747,498, 뿐만 아니라 하기 PCT 공보: WO98/14451, WO98/50038, WO99/09016, 및 WO99/24037에 기재된 화합물을 포함한다. 특정 소분자 EGFR 억제제는 OSI-774 (CP-358774, 에를로티닙, 타르세바(TARCEVA)® 제넨테크(Genentech)/OSI 파마슈티칼즈(Pharmaceuticals)); PD 183805 (CI 1033, 2-프로펜아미드, N-[4-[(3-클로로-4-플루오로페닐)아미노]-7-[3-(4-모르폴리닐)프로폭시]-6-퀴나졸리닐]-, 디히드로클로라이드, 화이자 인크.(Pfizer Inc.)); ZD1839, 게피티닙 (이레싸(IRESSA)®) 4-(3'-클로로-4'-플루오로아닐리노)-7-메톡시-6-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린, 아스트라제네카(AstraZeneca)); ZM 105180 ((6-아미노-4-(3-메틸페닐-아미노)-퀴나졸린, 제네카(Zeneca)); BIBX-1382 (N8-(3-클로로-4-플루오로-페닐)-N2-(1-메틸-피페리딘-4-일)-피리미도[5,4-d]피리미딘-2,8-디아민, 베링거 잉겔하임(Boehringer Ingelheim)); PKI-166 ((R)-4-[4-[(1-페닐에틸)아미노]-1H-피롤로[2,3-d]피리미딘-6-일]-페놀); (R)-6-(4-히드록시페닐)-4-[(1-페닐에틸)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘); CL-387785 (N-[4-[(3-브로모페닐)아미노]-6-퀴나졸리닐]-2-부틴아미드); EKB-569 (N-[4-[(3-클로로-4-플루오로페닐)아미노]-3-시아노-7-에톡시-6-퀴놀리닐]-4-(디메틸아미노)-2-부텐아미드) (와이어쓰(Wyeth)); AG1478 (수겐(Sugen)); 및 AG1571 (SU 5271; 수겐)을 포함한다.
한 실시양태에서, 조합 요법은 이중특이적 HER3/EGFR 억제제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 억제제는 이중특이적 항체이다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 억제제는 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이적 항체이다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 억제제는 2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함하며, 이들 각각은 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체이다. 이러한 항체는 WO2010108127, US20100255010 및 문헌 [Schaefer et al., Cancer Cell, 20: 472-486 (2011)]에 기재되어 있다. HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하는 이러한 한 특정 이중특이적 HER3/EGFR 억제제는 DL11f (MEHD7945A로도 공지됨)이다. MEHD7945A는 EGFR의 도메인 III 및 HER3의 도메인 III에 결합가능하다. MEHD7945A는 또한 Fcγ 수용체에 결합가능하고 항체-의존적 세포-매개 세포독성 (ADCC)을 도출하는 가능성을 갖는다. MEHD7945A는 항-EGFR 치료제에 반응이 없는 모델을 포함한, 다양한 비임상 모델에서 강력한 항-종양 활성을 나타낸다.
2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함하며, 이들 각각은 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 것인 이중-작용 항체 MEHD7945A는 WO 2010/108127 (DL11f, 예를 들어 도 33 참조) 및 문헌 [Schaefer et al., Cancer Cell, 20, 472-486 (2011)]에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다. MEHD7945A의 중쇄 가변 도메인에 대한 아미노산 서열은 서열 1로서 제공되고 MEHD7945A의 경쇄 가변 도메인에 대한 아미노산 서열은 서열 2로서 제공된다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하며, 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열의 1, 2, 및/또는 3개의 HVR을 포함하는 VH를 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하며, 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열의 1, 2, 및/또는 3개의 HVR을 포함하는 VH 및 서열 2의 아미노산 서열의 1, 2, 및/또는 3개의 HVR을 포함하는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 EGFR 및 HER3에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인을 포함하며, 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열의 모든 3개의 HVR을 포함하는 VH 및 서열 2의 아미노산 서열의 모든 3개의 HVR을 포함하는 VL을 포함한다. 일부 실시양태에서, HVR는 확장된 HVR이다. 한 구체적 실시양태에서, HVR-H1은 아미노산 서열 LSGDWIH (서열 3)을 포함하고, HVR-H2는 아미노산 서열 VGEISAAGGYTD (서열 4)를 포함하고, HVR-H3은 아미노산 서열 ARESRVSFEAAMDY (서열 5)을 포함하고, HVR-L1은 아미노산 서열 NIATDVA (서열 6)를 포함하고, HVR-L2는 아미노산 서열 SASF (서열 7)를 포함하고, HVR-L3은 아미노산 서열 SEPEPYT (서열 8)를 포함한다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열에 대한 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VH를 포함한다. 한 구체적 실시양태에서, 서열 1의 아미노산 서열에 대한 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VH를 포함하는 이중특이적 HER3/EGFR은 아미노산 서열 LSGDWIH (서열 3)를 포함하는 HVR-H1, 아미노산 서열 VGEISAAGGYTD (서열 4)를 포함하는 HVR-H2, 및 아미노산 서열 ARESRVSFEAAMDY (서열 5)를 포함하는 HVR-H3을 포함한다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 2의 아미노산 서열에 대한 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VL을 포함한다. 한 구체적 실시양태에서, 서열 2의 아미노산 서열에 대한 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 VL을 포함하는 이중특이적 HER3/EGFR은 아미노산 서열 NIATDVA (서열 6)를 포함하는 HVR-L1, 아미노산 서열 SASF (서열 7)를 포함하는 HVR-L2, 및 아미노산 서열 SEPEPYT (서열 8)를 포함하는 HVR-L3을 포함한다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 1의 아미노산 서열에 대한 서열 동일성을 갖는 VH 및 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 2의 아미노산 서열에 대한 서열 동일성을 갖는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 1의 아미노산 서열에 대한 서열 동일성을 갖는 VH 및 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 이상의 서열 2의 아미노산 서열에 대한 서열 동일성을 갖는 VL을 포함하는 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 아미노산 서열 LSGDWIH (서열 3)를 포함하는 HVR-H1, 아미노산 서열 VGEISAAGGYTD (서열 4)를 포함하는 HVR-H2, 및 아미노산 서열 ARESRVSFEAAMDY (서열 5)를 포함하는 HVR-H3, 아미노산 서열 NIATDVA (서열 6)를 포함하는 HVR-L1, 아미노산 서열 SASF (서열 7)를 포함하는 HVR-L2, 및 아미노산 서열 SEPEPYT (서열 8)를 포함하는 HVR-L3을 포함한다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 2의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 1의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열 2의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다.
한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 한 실시양태에서, 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 HER3 및 EGFR에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하고 여기서 항체는 서열 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, EGFR 및 HER3에 특이적으로 결합하는 항원-결합 도메인을 포함하는 이중특이적 HER3/EGFR 항체는 전장 IgG1 항체이다.
C. 항체 제조
1. 항체 친화도
특정 실시양태에서, 본원에서 제공된 항체는 ≤ 1 μM, ≤ 100 nM, ≤ 10 nM, ≤ 1 nM, ≤ 0.1 nM, ≤ 0.01 nM, 또는 ≤ 0.001 nM (예를 들어 10-8 M 이하, 예를 들어 10-8 M 내지 10-13 M, 예를 들어 10-9 M 내지 10-13 M)의 해리 상수 (Kd)를 갖는다.
한 실시양태에서, Kd는 하기 검정에 의해 기재된 바와 같은 관심 항체 및 그의 항원의 Fab 버전 및 그의 항원으로 수행된 방사성표지된 항원 결합 검정 (RIA)에 의해 측정된다. 항원에 대한 Fab의 용액 결합 친화도는 비표지 항원의 연속 적정물의 존재 하에 (125I)-표지 항원의 최소 농도로 Fab를 평형화한 다음에, 결합된 항원을 항-Fab 항체-코팅된 플레이트로 포획함으로써 측정된다 (예를 들어, 문헌 [Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881(1999)] 참조). 검정의 조건을 확립하기 위해, 마이크로타이터(MICROTITER)® 다중-웰 플레이트 (써모 사이언티픽(Thermo Scientific))를 50 mM 탄산나트륨 (pH 9.6) 중 5 ㎍/ml의 포획 항-Fab 항체 (카펠 랩스(Cappel Labs))에서 밤새 코팅하고, 그 후에 PBS 중 2% (w/v) 소 혈청 알부민으로 실온 (대략 23℃)에서 2 내지 5시간 동안 차단한다. 비흡착 플레이트 (Nunc #269620)에서, 100 pM 또는 26 pM [125I]-항원을 관심 Fab의 연속 희석물과 혼합한다 (예를 들어, 문헌 [Presta et al., Cancer Res. 57:4593-4599 (1997)]에서 항-VEGF 항체, Fab-12의 평가와 일치). 그 다음에, 관심 Fab를 밤새 인큐베이션하지만; 평형에 도달하는 것을 보장하기 위해 인큐베이션은 보다 장기간 (예를 들어, 약 65시간) 계속할 수 있다. 그 후에, 혼합물을 포획 플레이트에 옮겨 실온에서 인큐베이션한다 (예를 들어, 1시간 동안). 그 다음에 용액을 제거하고 플레이트를 PBS 중 0.1% 폴리소르베이트 20 (트윈(TWEEN)-20®)으로 8회 세척한다. 플레이트가 건조된 후, 150 μl/웰의 신틸레이션제 (마이크로신트(MICROSCINT)-20 ™; 팩커드(Packard))를 첨가하고, 플레이트를 탑카운트(TOPCOUNT) ™ 감마 계수기 (팩커드) 상에서 10분 동안 계수한다. 최대 결합의 20% 이하를 제공하는 각각의 Fab의 농도를 경쟁 결합 검정에서 사용하기 위해 선택한다.
또 다른 실시양태에 따르면, Kd는 ~10 반응 단위 (RU)에서 고정화된 항원 CM5 칩과 함께 25℃에서 비아코어(BIACORE)®-2000 또는 비아코어®-3000 (비아코어, 인크.(BIAcore, Inc.), 뉴저지주 피스카타웨이)을 사용하는 표면 플라스몬 공명 검정을 사용하여 측정한다. 간결히 설명하면, 카르복시메틸화 덱스트란 바이오센서 칩 (CM5, 비아코어, 인크.)을 공급자의 사용설명서에 따라 N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)-카르보디이미드 히드로클로라이드 (EDC) 및 N-히드록시숙신이미드 (NHS)로 활성화한다. 항원을 10 mM 아세트산나트륨 (pH 4.8)으로, 5 ㎍/ml (~0.2 μM)로 희석한 후 5 μl/분의 유량으로 주입하여 대략 10 반응 단위 (RU)의 커플링된 단백질을 달성한다. 항원의 주입 후, 1 M 에탄올아민을 주입하여 미반응 기를 차단한다. 반응속도의 측정을 위해, Fab의 2배 연속 희석물 (0.78 nM 내지 500 nM)을 대략 25 μl/min의 유량에서 25℃에서 0.05% 폴리소르베이트 20 (트윈-20™) 계면활성제 (PBST)를 갖는 PBS에 주입한다. 회합 속도 (kon) 및 해리 속도 (koff)는 단순 1-대-1 랭뮤어(Langmuir) 결합 모델 (바이아코어® 평가 소프트웨어 버전 3.2)을 사용하여 회합 및 해리 센서그램을 동시에 피팅함으로써 계산한다. 평형 해리 상수 (Kd)는 비 koff/kon으로서 계산된다. 예를 들어, 문헌 [Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)] 참조. 온(on)-속도가 상기 표면 플라스몬 공명 검정에 의해 106 M- 1 s-1을 초과한다면, 온-속도는 분광계, 예컨대 스톱-플로우(stop-flow)를 갖춘 분광광도계 (아비스 인스트루먼츠(Aviv Instruments)) 또는 교반 큐벳을 갖춘 8000-시리즈 SLM-아민코(AMINCO)™ 분광광도계 (써모스펙트로닉(ThermoSpectronic))에서 측정된 바와 같은, 항원의 증가 농도의 존재 하에, PBS, pH 7.2에서의 20 nM 항-항원 항체 (Fab 형태)의 25℃에서의 형광 방출 강도 (여기 = 295 nm; 방출 = 340 nm, 16 nm 밴드-통과)에서의 증가 또는 감소를 측정하는 형광 켄칭 기술을 사용함으로써 측정될 수 있다.
2. 항체 단편
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 항체 단편이다. 항체 단편은 Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, 및 scFv 단편, 및 이하에 기재된 다른 단편을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 특정 항체 단편의 검토를 위해, 문헌 [Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)]을 참조한다. scFv 단편의 검토를 위해, 예를 들어 문헌 [Pluckthuen, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York), pp. 269-315 (1994)]을 참조하고; 또한 WO 93/16185; 및 미국 특허 번호 5,571,894 및 5,587,458을 참조한다. 샐비지 수용체 결합 에피토프 잔기를 포함하고 증가된 생체내 반감기를 갖는 Fab 및 F(ab')2 단편의 논의에 대해서는 미국 특허 번호 5,869,046을 참조한다.
디아바디는 이가 또는 이중특이적일 수 있는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 항체 단편이다. 예를 들어, EP 404,097; WO 1993/01161; 문헌 [Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)]; 및 [Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)]을 참조한다. 트리아바디 및 테트라바디가 또한 문헌 [Hudson et al., Nat. Med. 9:129-134 (2003)]에 기재되어 있다.
단일-도메인 항체는 항체의 중쇄 가변 도메인의 모두 또는 일부 또는 경쇄 가변 도메인의 모두 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 특정 실시양태에서, 단일-도메인 항체는 인간 단일-도메인 항체이다 (도만티스, 인크.(Domantis, Inc.), 매사추세츠주 월섬; 예를 들어, 미국 특허 번호 6,248,516 B1 참조).
항체 단편은 본원에 기재된 바와 같이, 무손상 항체의 단백질 가수분해 소화뿐만 아니라 재조합 숙주 세포에 의한 생성 (예를 들어 이. 콜라이 또는 파지)을 포함하나 이에 제한되지는 않는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있다.
3. 키메라 및 인간화 항체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 키메라 항체이다. 특정 키메라 항체는, 예를 들어 미국 특허 번호 4,816,567; 및 문헌 [Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984))에 기재되어 있다. 한 예에서, 키메라 항체는 비-인간 가변 영역 (예를 들어, 마우스, 래트, 햄스터, 토끼, 또는 비-인간 영장류, 예컨대 원숭이로부터 유래된 가변 영역) 및 인간 불변 영역을 포함한다. 추가 예에서, 키메라 항체는 "부류 교체된" 항체이고 여기서 부류 또는 하위부류는 모 항체의 것으로부터 변화된 것이다. 키메라 항체는 그의 항원-결합 단편을 포함한다.
특정 실시양태에서, 키메라 항체는 인간화 항체이다. 전형적으로, 비-인간 항체는, 모 비-인간 항체의 특이성 및 친화도를 보유하면서, 인간화되어 인간에 대한 면역원성을 감소시킨다. 일반적으로, 인간화 항체는 HVR, 예를 들어 CDR (또는 그의 일부)이 비-인간 항체로부터 유래되고, FR (또는 그의 일부)이 인간 항체 서열로부터 유래되는 하나 이상의 가변 도메인을 포함한다. 인간화 항체는 임의로 또한 적어도 일부의 인간 불변 영역을 포함할 것이다. 일부 실시양태에서, 인간화 항체 중 일부 FR 잔기는 비-인간 항체 (예를 들어, HVR 잔기가 유래되는 항체)로부터의 상응하는 잔기로 치환되어, 예를 들어 항체 특이성 또는 친화도를 수복 또는 개선시킨다.
인간화 항체 및 이를 제조하는 방법은, 예를 들어 문헌 [Almagro and Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)]에서 검토되며, 추가로 예를 들어, 문헌 [Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988)]; [Queen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86:10029-10033 (1989)]; 미국 특허 번호 5, 821,337, 7,527,791, 6,982,321, 및 7,087,409; [Kashmiri et al., Methods 36:25-34 (2005) (SDR (a-CDR) 그래프팅을 기재)]; [Padlan, Mol. Immunol. 28:489-498 (1991) ("재생(resurfacing)"을 기재)]; [Dall'Acqua et al., Methods 36:43-60 (2005) ("FR 셔플링"을 기재)]; 및 [Osbourn et al., Methods 36:61-68 (2005)] 및 [Klimka et al., Br. J. Cancer, 83:252-260 (2000) (FR 셔플링에 대한 "유도 선택" 접근법을 기재)]에 기재되어 있다.
인간화를 위해 사용될 수 있는 인간 프레임워크 영역은, "베스트-피트" 방법을 사용하여 선택된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Sims et al. J. Immunol. 151:2296 (1993)] 참조); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정 하위군의 인간 항체의 컨센서스 서열로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Carter et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992)] ; 및 [Presta et al. J. Immunol., 151:2623 (1993)] 참조); 인간 성숙 (신체적으로 돌연변이된) 프레임워크 영역 또는 인간 배선 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Almagro and Fransson, Front.Biosci. 13:1619-1633 (2008)] 참조); 및 스크리닝 FR 라이브러리로부터 유래된 프레임워크 영역 (예를 들어, 문헌 [Baca et al., J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)] 및 [Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)] 참조)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
4. 인간 항체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 인간 항체이다. 인간 항체는 관관련 기술분야에 공지된 다양한 기술을 사용하여 생성될 수 있다. 인간 항체는 일반적으로 문헌 [van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5:368-74 (2001)] 및 [Lonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)]에 기재되어 있다.
인간 항체는 항원 투여에 대한 반응으로 인간 가변 영역을 갖는 고유 항체 또는 고유 인간 항체를 생성하도록 변형된 트렌스제닉 동물에게 이뮤노겐을 투여함으로써 제조될 수 있다. 이러한 동물은 전형적으로 인간 이뮤노글로불린 유전자자리의 모두 또는 일부를 함유하며, 이는 내인성 이뮤노글로불린 유전자자리를 대체하거나, 염색체외에 존재하거나 동물의 염색체 내로 무작위로 통합된다. 이러한 트랜스제닉 마우스에서, 내인성 이뮤노글로불린 유전자자리는 일반적으로는 비활성화되어 있다. 트랜스제닉 동물로부터 인간 항체를 얻는 방법에 관한 검토는 문헌 [Lonberg, Nat. Biotech. 23:1117-1125 (2005)]을 참조한다. 또한, 예를 들어 미국 특허 번호 6,075,181 및 6,150,584 (제노마우스(XENOMOUSE)™ 기술을 기재); 미국 특허 번호 5,770,429 (후맙(HUMAB)® 기술을 기재); 미국 특허 번호 7,041,870 (K-M 마우스(MOUSE)® 기술을 기재), 및 미국 특허 출원 공개 번호 2007/0061900 (벨로시마우스(VELOCIMOUSE)® 기술을 기재)을 참조한다. 이러한 동물에 의해 생성된 고유 항체로부터의 인간 가변 영역은, 예를 들어 상이한 인간 불변 영역과 조합함으로써 추가로 변형될 수 있다.
인간 항체는 또한 하이브리도마-기반 방법에 의해 제조될 수 있다. 인간 모노클로날 항체의 생성을 위한 인간 골수종 및 마우스-인간 이종골수 세포주가 기재되어 있다. (예를 들어, 문헌 [Kozbor J. Immunol., 133: 3001 (1984)]; [Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)]; 및 [Boerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991) 참조.) 인간 B-세포 하이브리도바 기술을 통해 생성된 인간 항체가 또한 문헌 [Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006)]에 기재되어 있다. 추가 방법은, 예를 들어 미국 특허 번호 7,189,826 (하이브리도마 세포주로부터 모노클로날 인간 IgM 항체의 생성을 기재) 및 문헌 [Ni, Xiandai Mianyixue, 26(4):265-268 (2006)] (인간-인간 하이브리도마를 기재)에 기재된 것들을 포함한다. 인간 하이브리도마 기술 (트리오마(Trioma) 기술)은 또한 문헌 [Vollmers and Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3):927-937 (2005)] 및 [Vollmers and Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3):185-91 (2005)]에 기재되어 있다.
인간 항체는 또한 인간-유래 파지 디스플레이 라이브러리로부터 선택된 Fv 클론 가변 도메인 서열을 단리함으로써 생성될 수 있다. 그 다음에 이러한 가변 도메인 서열은 원하는 인간 불변 도메인과 조합될 수 있다. 항체 라이브러리로부터 인간 항체를 선택하는 기술은 이하에 기재된다.
5. 라이브러리-유래 항체
본 발명의 항체는 원하는 활성 또는 활성들을 갖는 항체에 대한 결합 라이브러리를 스크리닝함으로써 단리될 수 있다. 예를 들어, 파지 디스플레이 라이브러리를 생성하기 위한 및 원하는 결합 특성을 갖는 보유한 항체에 대한 이러한 라이브러리를 스크리닝하기 위한 다양한 방법이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 이러한 방법은, 예를 들어 문헌 [Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)]에서 검토되어 있고 추가로, 예를 들어 문헌 [McCafferty et al., Nature 348:552-554; Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991)]; [Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992)]; [Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003)]; [Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004)]; [Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004)]; [Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004)]; 및 [Lee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)]에 기재되어 있다.
특정 파지 디스플레이 방법에서, VH 및 VL 유전자의 레퍼토리는 중합효소 연쇄 반응 (PCR)에 의해 개별적으로 클로닝되고 파지 라이브러리에서 무작위로 재조합된 다음에, 이를 문헌 [Winter et al., Ann. Rev. Immunol., 12: 433-455 (1994)]에 기재된 바와 같이 항원-결합 파지에 대해 스크리닝할 수 있다. 파지는 전형적으로 단일-쇄 Fv (scFv) 단편으로서 또는 Fab 단편으로서, 항체 단편을 디스플레이한다. 면역화된 공급원으로부터의 라이브러리는 하이브리도마 구축의 필요 없이 이뮤노겐에 대해 고-친화도 항체를 제공한다. 대안적으로, 나이브 레퍼토리는 문헌 [Griffiths et al., EMBO J,12: 725-734 (1993)]에 기재된 바와 같이 클로닝시켜 (예를 들어, 인간으로부터) 임의의 면역화 없이 광범위한 비-자가(non-self) 및 또한 자가 항원으로 항체의 단일 공급원을 제공한다. 최종적으로, 나이브 라이브러리는 또한, 문헌 [Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227: 381-388 (1992)]에 기재된 바와 같이, 비정렬 V-유전자 분절을 줄기 세포로부터 클로닝하고, 무작위 서열 함유 PCR 프라이머를 사용하여 고도 가변 CDR3 영역을 코딩하고 시험관내에서 재정렬을 완수함으로써 합성적으로 제조될 수 있다. 인간 항체 파지 라이브러리를 기재하는 특허 공보는, 예를 들어 미국 특허 번호 5,750,373, 및 미국 특허 공개 번호 2005/0079574, 2005/0119455, 2005/0266000, 2007/0117126, 2007/0160598, 2007/0237764, 2007/0292936, 및 2009/0002360를 포함한다.
인간 항체로부터 단리되는 항체 또는 항체 단편은 본원에서 인간 항체 또는 인간 항체 단편으로 간주된다.
6. 다중특이적 항체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 다중특이적 항체, 예를 들어 구별되는 표적에 각각 특이적인 두개의 항원 결합 도메인을 포함하는 전통적인 이중특이적 항체이다. 이중특이적 항체는 두개 이상의 상이한 부위에 대해 결합 특이성을 갖는 모노클로날 항체이다. 특정 실시양태에서, 결합 특이성 중 하나는 HER3에 대한 것이고 다른 하나는 임의의 다른 항원에 대한 것이다. 특정 실시양태에서, 이중특이적 항체는 HER3의 두개의 상이한 에피토프에 결합할 수 있다. 이중특이적 항체를 또한 사용하여 세포독성제를 HER3을 발현하는 세포에 국소화할 수 있다. 이중특이적 항체는 전장 항체 또는 항체 단편으로서 제조될 수 있다.
다중특이적 항체를 제조하는 기술은 상이한 특이성을 갖는 두개의 이뮤노글로불린 중쇄-경쇄 쌍의 재조합 공-발현 (문헌 [Milstein and Cuello, Nature 305: 537 (1983)], WO 93/08829, 및 [Traunecker et al., EMBO J.10: 3655 (1991)] 참조), 및 "놉-인-호울(knob-in-hole)" 조작 (예를 들어, 미국 특허 번호 5,731,168 참조)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 다중-특이적 항체는 또한, 항체 Fc-이종이량체 분자를 제조하기 위한 정전기 스티어링 효과를 조작하고 (WO 2009/089004A1); 두개 이상의 항체 또는 단편을 가교-결합하고 (예를 들어, 미국 특허 번호 4,676,980, 및 [Brennan et al., Science, 229: 81 (1985)] 참조); 이중-특이적 항체를 생성하는 류신 지퍼를 사용하고 (예를 들어, 문헌 [Kostelny et al., J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992)] 참조); 이중특이적 항체 단편을 제조하기 위한 "디아바디" 기술을 사용하고 (예를 들어, 문헌 [Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993)] 참조); 단일-쇄 Fv (sFv) 이량체를 사용하고 (예를 들어 문헌 [Gruber et al., J. Immunol.,152:5368 (1994)] 참조); 예를 들어, 문헌 [Tutt et al.J. Immunol.147: 60 (1991)]에 기재된 바와 같이 삼중특이적 항체를 제조함으로써 제조될 수 있다.
"옥토퍼스 항체"를 포함한 3개 이상의 관능적 항원 결합 부위를 갖는 조작된 항체가 또한 본원에 기재된다 (예를 들어, US 2006/0025576A1 참조).
본원에서의 항체 또는 분획은 또한 HER3뿐만 아니라 또 다른, 상이한 항원에 결합하는 항원 결합 부위를 포함하는 "이중적 작용 FAb" 또는 "DAF" (예를 들어, US 2008/0069820 참조)를 포함한다. 이러한 이중특이적 HER3/EGFR 억제제의 예는 본원에 기재되어 있고 예시적 DL11f (MEHD7945A) 항체를 포함한다.
7. 항체 변이체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체의 아미노산 서열 변이체가 고려된다. 예를 들어, 항체의 결합 친화도 및/또는 다른 생물학적 특성을 개선하기에 바람직할 수 있다. 항체의 아미노산 서열 변이체는, 항체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열에 적절한 변형을 도입함으로써, 또는 펩티드 합성에 의해 제조될 수 있다. 이러한 변형은, 예를 들어 항체의 아미노산 서열 내에 잔기로부터의 결실, 및/또는 잔기로의 삽입 및/또는 잔기의 치환을 포함한다. 결실, 삽입, 및 치환의 임의의 조합이 이루어질 수 있어, 최종 구축물이 원하는 특성, 예를 들어 항원-결합을 보유한다면, 최종 구축물에 도달될 수 있다.
a) 치환, 삽입, 및 결실 변이체
특정 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 항체 변이체가 제공된다. 치환적 돌연변이유발을 위한 관심 부위는 HVR 및 FR을 포함한다. 보존적 치환은 "보존적 치환"의 표제 하에 표 1에 나타낸다. 보다 실질적인 변화는 "예시적인 치환"의 표제 하에 표 1에 제공되며, 아미노산 쇄 부류를 언급하며 이하에 추가로 기재된 바와 같다. 아미노산 치환을 관심 항체 내로 도입하고, 생성물을 원하는 활성, 예를 들어 보유된/개선된 항원 결합, 감소된 면역원성, 개선된 ADCC 또는 CDC 등에 대해 스크리닝할 수 있다.
<표 1>
Figure pct00007
아미노산은 공통적인 측쇄 특성에 따라 하기 군으로 나뉠 수 있다:
(1) 소수성: 노르류신, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) 중성 친수성: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) 산성: Asp, Glu;
(4) 염기성: His, Lys, Arg;
(5) 사슬 배향에 영향을 미치는 잔기: Gly, Pro;
(6) 방향족: Trp, Tyr, Phe.
비-보존적 치환은 이들 부류 중의 하나의 구성원을 또 다른 부류로 교환하는 것을 수반할 것이다.
치환 변이체의 한 유형은 모 항체 (예를 들어, 인간화 또는 인간 항체)의 하나 이상의 초가변 영역 잔기를 치환하는 것을 포함한다. 일반적으로, 추가 연구를 위해 선택된 생성된 변이체(들)는 모 항체와 비교하여 변형된 (예를 들어 개선된) 특정 생물학적 특성 (예를 들어 증가된 친화도, 감소된 면역원성)을 가질 것이고/거나 모 항체의 실질적으로 보유된 특정 생물학적 특성을 가질 것이다. 예시적 치환 변이체는 친화도 성숙 항체이고, 이는, 예를 들어 본원에 기재된 것들과 같은, 파지 디스플레이에 기초한 친화도 성숙 기술을 사용하여 편리하게 생성될 수 있다. 간략하게 설명하면, 하나 이상의 HVR 잔기를 돌연변이시키고 변이체 항체를 파지 상에 디스플레이하고 특정 생물학적 활성 (예를 들어, 결합 친화도)에 대해 스크리닝한다.
변경 (예를 들어, 치환)은 HVR에서, 예를 들어 항체 친화도를 개선시키기 위해 이루어질 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟"에서, 즉, 체세포 성숙 과정 동안 고 빈도로 돌연변이를 겪는 코돈에 의해 코딩된 잔기 (예를 들어, 문헌 [Chowdhury, Methods Mol. Biol. 207:179-196 (2008)] 참조), 및/또는 SDR (a-CDR)에서 이루어질 수 있고, 여기서 생성 변이체 VH 또는 VL은 결합 친화도에 대해 검사된다. 2차 라이브러리로부터 재선택되고 구축됨으로 인한 친화도 성숙은, 예를 들어 문헌 [Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, (2001)]에 기재되어 있다. 친화도 성숙의 일부 실시양태에서, 다양성을 성숙에 대해 선택된 가변 유전자에 다양한 방법 중 어느 하나에 의해 도입한다 (예를 들어, 오류 발생하기 쉬운 PCR, 쇄 셔플링, 또는 올리고뉴클레오티드-지향 돌연변이유발). 그 다음에 제2 라이브러리를 생성한다. 그 다음에 라이브러리를 스크리닝하여 원하는 친화도를 갖는 임의의 항체 변이체를 확인한다. 다양성을 도입하는 또 다른 방법은 HVR-지향 접근법을 포함하며, 여기서 몇몇 HVR 잔기 (예를 들어, 한번에 4-6개 잔기)를 무작위화한다. 항원 결합에 관여하는 HVR 잔기는, 예를 들어 알라닌 스캐닝 돌연변이유발 또는 모델링을 사용하여 특이적으로 확인될 수 있다. CDR-H3 및 CDR-L3은 특히 자주 표적화된다.
특정 실시양태에서, 치환, 삽입, 또는 결실은 하나 이상의 HVR 내에서 일어날 수 있는데, 이러한 변경이 항원을 결합하는 항체의 능력을 실질적으로 감소시키지 않는 한이다. 예를 들어, 실질적으로 결합 친화도를 감소시키지 않는 보존적 변경 (예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 보존적 치환)은 HVR에서 이루어질 수 있다. 이러한 변경은 HVR "핫스팟" 또는 SDR의 외부일 수 있다. 상기 제공된 변이체 VH 및 VL 서열의 특정 실시양태에서, 각각의 HVR은 어느 것이든 변경되지 않거나, 단지 1, 2, 3개의 아미노산 치환을 함유할 수 있다.
돌연변이유발에 표적이 될 수 있는 항체의 잔기 또는 영역을 확인하는데 유용한 방법은 문헌 [Cunningham and Wells (1989) Science, 244:1081-1085]에 기재된 바와 같이 "알라닌 스캐닝 돌연변이유발"이라 불린다. 이 방법에서, 잔기 또는 표적 잔기들의 군 (예를 들어, 하전된 잔기, 예컨대 arg, asp, his, lys 및 glu)이 확인되고, 중성 또는 음으로 하전된 아미노산 (예를 들어, 알라닌 또는 폴리알라닌)으로 대체되어 항체와 항원과의 상호작용에 영향을 미치는지를 측정한다. 초기 치환에 대해 기능적 감수성을 나타내는 아미노산 위치에서 추가 치환을 도입할 수 있다. 대안적으로, 또는 추가로, 항체와 항원 간의 접촉점을 확인하기 위해 항원-항체 복합물의 결정 구조. 이러한 접촉 잔기 및 인접 잔기는 치환을 위한 후보로서 표적화 또는 소실될 수 있다. 변이체를 스크리닝하여 이들이 원하는 특성을 함유하는지를 측정할 수 있다다.
아미노산 서열 삽입은 길이가 하나의 잔기 내지 100개 이상의 잔기를 함유하는 폴리펩티드에 이르는 범위인 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합, 뿐만 아니라 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 항체를 포함한다. 항체 분자의 다른 삽입 변이체는 항체의 혈청 반감기를 증가시키는 폴리펩티드 또는 효소 (예를 들어, ADEPT의 경우)가 항체의 N- 또는 C-말단에 융합된 것을 포함한다.
b) 글리코실화 변이체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는 항체가 글리코실화되는 정도를 증가시키거나 감소시키도록 변경된다. 항체에 대한 글리코실화 부위의 부가 또는 결실은 하나 이상의 글리코실화 부위가 생성되거나 제거되도록 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 완수될 수 있다.
항체가 Fc 영역을 포함하는 경우, 이에 부착된 탄수화물이 변경될 수 있다. 포유동물 세포에 의해 생성된 천연 항체는 전형적으로 Fc 영역의 CH2 도메인의 Asn297에 대한 N-연결에 의해 일반적으로 부착되는 분지된 이중안테나 올리고사카라이드를 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Wright et al., (1997) TIBTECH 15:26-32]을 참조한다. 올리고사카라이드는 다양한 탄수화물, 예를 들어 만노스, N-아세틸 글루코사민 (GlcNAc), 갈락토스 및 시알산, 뿐만 아니라 이중안테나 올리고사카라이드 구조의 "줄기" 내의 GlcNAc에 부착된 푸코스도 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체 내의 올리고사카라이드의 변형은 특정의 개선된 특성을 지닌 항체 변이체를 생성하기 위해 이루어질 수 있다.
한 실시양태에서, Fc 영역에 (직접적으로 또는 간접적으로) 부착된 푸코스가 결여되어 있는 탄수화물 구조를 갖는 항체 변이체가 제공된다. 예를 들어, 그러한 항체에서 푸코스의 양은 1% 내지 80%, 1% 내지 65%, 5% 내지 65% 또는 20% 내지 40%일 수 있다. 푸코스의 양은 예를 들어 WO 2008/077546에 기재된 바와 같이, MALDI-TOF 질량 분석법에 의해 측정된 바, Asn 297에 부착되어 있는 모든 글리코구조 (예를 들어 복합체, 하이브리드 및 고 만노스 구조)의 합과 비교하여 Asn297에서의 당 쇄 내 푸코스의 평균 양을 계산함으로써 측정한다. Asn297은 Fc 영역 내의 위치 약 297에 위치하는 아스파라긴 잔기를 지칭하지만 (Fc 영역 잔기는 Eu 넘버링함); Asn297은 또한 항체에서의 사소한 서열 변이로 인해, 위치 297의 약 ± 3 아미노산 상류 또는 하류, 즉 위치 294 내지 300 사이에 위치될 수 있다. 이러한 푸코실화 변이체는 개선된 ADCC 기능을 가질 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 공개 번호 US 2003/0157108 (프레스타, 엘.(Presta, L.)); US 2004/0093621 (교와 핫꼬 고교 코포레이션, 엘티디(Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd))을 참조한다. "탈푸코실화된" 또는 "푸코스-결핍된" 항체 변이체와 관련 있는 간행물의 예는 US 2003/0157108; WO 2000/61739; WO 2001/29246; US 2003/0115614; US 2002/0164328; US 2004/0093621; US 2004/0132140; US 2004/0110704; US 2004/0110282; US 2004/0109865; WO 2003/085119; WO 2003/084570; WO 2005/035586; WO 2005/035778; WO2005/053742; WO2002/031140; 문헌 [Okazaki et al. J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004)]; [Yamane-Ohnuki et al. Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)]을 포함한다. 탈푸코실화된 항체를 생성할 수 있는 세포주의 예는 단백질 푸코실화가 결핍된 Lec13 CHO 세포 (문헌 [Ripka et al., Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986)]; 미국 특허 출원 번호 US2003/0157108 A1, (프레스타, 엘); 및 WO 2004/056312 A1, 아담스(Adams) 등, 특히 실시예 11), 및 녹아웃 세포주, 예컨대 알파-1,6-푸코실트랜스퍼라제 유전자, FUT8, 녹아웃 CHO 세포 (예를 들어, 문헌 [Yamane-Ohnuki et al., Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)]; [Kanda, Y. et al., Biotechnol. Bioeng., 94(4):680-688 (2006)]; 및 WO2003/085107 참조)를 포함한다.
이등분된 올리고사카라이드를 수반한 항체 변이체가 추가로 제공되며, 예를 들어 여기서 항체의 Fc 영역에 부착된 이중안테나 올리고사카라이드가 GlcNAc에 의해 이등분된다. 이러한 항체 변이체에서는 푸코실화가 감소되고/되거나 ADCC 기능이 개선될 수 있다. 이러한 항체 변이체의 예가, 예를 들어 WO 2003/011878 (장-마이레트(Jean-Mairet) 등); 미국 특허 제6,602,684호 (움마나(Umana) 등); 및 US 2005/0123546 (움마나 등)에 기재되어 있다. Fc 영역에 부착된 올리고사카라이드 내에 적어도 하나의 갈락토스 잔기를 갖는 항체 변이체가 또한 제공된다. 이러한 항체 변이체에서는 CDC 기능이 개선될 수 있다. 이러한 항체 변이체는, 예를 들어 WO1997/30087 (파텔(Patel) 등); WO 1998/58964 (라주, 에스.(Raju, S.)); 및 WO 1999/22764 (라주, 에스.)에 기재되어 있다.
c) Fc 영역 변이체
특정 실시양태에서, 하나 이상의 아미노산 변형이 본원에 제공된 항체의 Fc 영역에 도입되어, Fc 영역 변이체가 생성될 수 있다. Fc 영역 변이체는 하나 이상의 아미노산 위치에서 아미노산 변형 (예를 들어, 치환)을 포함하는 인간 Fc 영역 서열 (예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 Fc 영역)을 포함할 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 모든 이펙터 기능은 아니지만, 몇몇 이펙터 기능을 보유하고 있으므로, 생체 내에서의 항체의 반감기는 중요하지만 특정 이펙터 기능 (예컨대 보체 및 ADCC)이 불필요하거나 해로운 적용 분야에 대한 바람직한 후보가 되는 항체 변이체를 고려한다. CDC 및/또는 ADCC 활성의 감소/고갈을 확인하기 위해 시험관내 및/또는 생체내 세포독성 검정을 수행할 수 있다. 예를 들어, 항체에 FcγR 결합은 없지만 (따라서, 아마도 ADCC 활성이 없을 것임), FcRn 결합 능력은 보유함을 보장하기 위해 Fc 수용체 (FcR) 결합 검정을 수행할 수 있다. ADCC를 매개하는 주요 세포인 NK 세포는 FcγRIII 만을 발현하지만, 단핵구는 FcγRI, FcγRII 및 FcγRIII을 발현한다. 조혈 세포상에서의 FcR 발현은 문헌 [Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)]의 페이지 464, 표 3에 요약되어 있다. 관심 분자의 ADCC 활성을 평가하기 위한 시험관내 검정의 비제한적 예는 미국 특허 번호 5,500,362 (예를 들어 문헌 [Hellstrom, I. et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986)] 참조) 및 문헌 [Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985)]; 5,821,337 (문헌 [Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987)] 참조)에 기재되어 있다. 대안적으로, 비방사성 검정 방법을 이용할 수 있다 (예를 들어, 유동세포계수를 위한 악티(ACTI)™ 비방사성 세포독성 검정 (셀테크놀로지, 인크.(CellTechnology, Inc.), 캘리포니아주 마운틴 뷰); 및 사이토톡스(CytoTox) 96® 비방사성 세포독성 검정 (프로메가(Promega), 위스콘신주 매디슨) 참조). 이러한 검정에 유용한 이펙터 세포는 말초혈 단핵 세포 (PBMC) 및 천연 킬러 (NK) 세포를 포함한다. 대안적으로, 또는 추가로, 관심 분자의 ADCC 활성은 생체내에서, 예를 들어 문헌 [Clynes et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998)]에 개시된 바와 같은 동물 모델에서 평가할 수 있다. 항체가 C1q에 결합하지 못하여 CDC 활성이 결여되어 있음을 확인하기 위해 또한 C1q 결합 검정을 수행할 수 있다. 예를 들어, C1q및 C3c 결합 ELISA를 WO 2006/029879 및 WO 2005/100402에서 참조한다. 보체 활성화를 평가하기 위해, CDC 검정을 수행할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996)]; [Cragg, M.S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003)]; 및 [Cragg, M.S. and M.J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)] 참조). FcRn 결합 및 생체내 청소율/반감기 결정 또한 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 수행할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Petkova, S.B. et al., Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)] 참조).
이펙터 기능이 감소된 항체는 하나 이상의 Fc 영역 잔기 238, 265, 269, 270, 297, 327 및 329의 치환을 갖는 것이 포함된다 (미국 특허 제6,737,056호). 이러한 Fc 돌연변이체는, 잔기 265 및 297이 알라닌으로 치환된 소위 "DANA" Fc 돌연변이체 (미국 특허 번호 7,332,581)를 포함한, 2개 이상의 아미노산 위치 265, 269, 270, 297 및 327에서 치환을 갖는 Fc 돌연변이체를 포함한다.
FcR에 대한 결합이 개선되거나 감소된 특정 항체 변이체가 기재되어 있다 (예를 들어, 미국 특허 번호 6,737,056; WO 2004/056312, 및 문헌 [Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)] 참조).
특정 실시양태에서, 항체 변이체는 ADCC를 개선시키는 하나 이상의 아미노산 치환, 예를 들어 Fc 영역의 위치 298, 333, 및/또는 334 (잔기는 Eu 넘버링함)에서의 치환을 갖는 Fc 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, 예를 들어 미국 특허 번호 6,194,551, WO 99/51642, 및 문헌 [Idusogie et al., J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)]에 기재된 바와 같이 C1q 결합 및/또는 보체 의존적 세포독성 (CDC)을 변경 (즉, 개선 또는 약화)시키는 변경을 Fc 영역에서 행한다.
모체 IgG를 태아에게 전달하는 것을 담당하는 신생아 Fc 수용체 (FcRn) (문헌 [Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976)] 및 [Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994)])에 대한 결합이 개선되고 반감기가 증가된 항체가 US2005/0014934A1 (힌톤(Hinton) 등)에 기재되어 있다. 이들 항체는 FcRn에 대한 Fc 영역의 결합을 개선시키는 하나 이상의 치환을 갖는 Fc 영역을 포함한다. 이러한 Fc 변이체는 하나 이상의 Fc 영역 잔기 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 또는 434에서의 치환, 예를 들어 Fc 영역 잔기 434의 치환을 갖는 것을 포함한다 (미국 특허 번호 7,371,826).
또한, Fc 영역 변이체의 다른 예에 관해 문헌 [Duncan & Winter, Nature 322:738-40 (1988)]; 미국 특허 번호 5,648,260; 미국 특허 번호 5,624,821; 및 WO 94/29351을 참조한다.
d) 시스테인 조작된 항체 변이체
특정 실시양태에서, 항체의 하나 이상의 잔기를 시스테인 잔기로 치환시킨 시스테인 조작된 항체, 예를 들어 "티오MAb"를 생성시키는 것이 바람직할 수 있다. 특정 실시양태에서, 치환된 잔기는 항체의 접근가능한 부위에서 일어난다. 그러한 잔기를 시스테인으로 치환시킴으로써, 반응성 티올 기가 항체의 접근가능한 부위에 배치되게 되고, 이를 이용하여 항체를, 본원에서 추가로 기재하는 바와 같이, 다른 모이어티, 예컨대 약물 모이어티 또는 링커-약물 모이어티에 접합시켜 면역접합체를 생성시킬 수 있다. 특정 실시양태에서, 하기 잔기 중 어느 하나 이상의 잔기가 시스테인으로 치환될 수 있다: 경쇄의 V205 (카바트 넘버링); 중쇄의 A118 (EU 넘버링); 및 중쇄 Fc 영역의 S400 (EU 넘버링). 시스테인 조작된 항체는, 예를 들어 미국 특허 번호 7,521,541에 기재된 바와 같이 생성시킬 수 있다.
e) 항체 유도체
특정 실시양태에서, 본원에 제공된 항체는, 관련 기술분야에 공지되어 있고 용이하게 이용가능한 부가적인 비단백질성 모이어티를 함유하도록 추가로 변형될 수 있다. 항체의 유도체화에 적합한 모이어티는 수용성 중합체를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 수용성 중합체의 비제한적 예는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜의 공중합체, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐피롤리돈, 폴리-1,3-디옥솔란, 폴리-1,3,6-트리옥산, 에틸렌/말레산 무수물 공중합체, 폴리아미노산 (단독중합체 또는 무작위 공중합체), 및 덱스트란 또는 폴리(n-비닐 피롤리돈)폴리에틸렌 글리콜, 프로프로필렌 글리콜 단독중합체, 폴리프로필렌 옥시드/에틸렌 옥시드 공중합체, 폴리옥시에틸화 폴리올 (예를 들어, 글리세롤), 폴리비닐 알콜, 및 그의 혼합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 폴리에틸렌 글리콜 프로피온알데히드는 물에서의 그의 안정성으로 인해 제조에 유리할 수 있다. 중합체는 임의의 분자량일 수 있고, 분지되거나 분지되지 않을 수 있다. 항체에 부착되는 중합체의 수는 다양할 수 있으며, 1개 초과의 중합체가 부착될 경우에, 이들은 동일하거나 상이한 분자일 수 있다. 일반적으로, 유도체화에 사용되는 중합체의 수 및/또는 유형은 개선될 항체의 특정 특성 또는 기능, 항체 유도체가 규정된 조건 하에 요법에서 사용될 것인지의 여부 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는 고려사항을 기초로 결정될 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 항체, 및 방사선 노출에 의해 선택적으로 가열될 수 있는 비단백질성 모이어티의 접합체가 제공된다. 한 실시양태에서, 비단백질성 모이어티는 탄소 나노튜브이다 (Kam et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605 (2005)). 방사선은 임의의 파장일 수 있고, 통상적인 세포에는 해를 끼치지 않지만, 항체-비단백질성 모이어티에 근접한 세포는 사멸되는 온도로 비단백질성 모이어티를 가열하는 파장을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
f.) 재조합 방법 및 조성물
항체는 재조합 방법 및 조성물을 이용하여, 예를 들어 미국 특허 4,816,567에 기재된 바와 같이 생성시킬 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 항-HER3/항-EGFR 항체 (이중특이적 항체 포함)를 코딩하는 단리된 핵산이 제공된다. 이러한 핵산은 항체의 VL을 포함하는 아미노산 서열 및/또는 VH를 포함하는 아미노산 서열 (예를 들어, 항체의 경쇄 및/또는 중쇄)을 코딩할 수 있다. 추가의 실시양태에서, 이러한 핵산을 포함하는 1종 이상의 벡터 (예를 들어, 발현 벡터)가 제공된다. 추가의 실시양태에서, 이러한 핵산을 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 이러한 하나의 실시양태에서, 숙주 세포는 (1) 항체의 VL을 포함하는 아미노산 서열 및 항체의 VH를 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터, 또는 (2) 항체의 VL을 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 제1 벡터 및 항체의 VH를 포함하는 아미노산 서열을 코딩하는 핵산을 포함하는 제2 벡터 (예를 들어 이로 형질전환됨)를 포함한다. 한 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵생물, 예를 들어 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포 또는 림프양 세포 (예를 들어, Y0, NS0, Sp20 세포)이다. 한 실시양태에서, 상기에서 제공한 바와 같은 항체를 코딩하는 핵산을 포함하는 숙주 세포를 항체가 발현하는데 적합한 조건 하에 배양하는 단계, 및 숙주 세포 (또는 숙주 세포 배양 배지)로부터 항체를 임의로 회수하는 단계를 포함하는, 항체 (이중특이적 항체 포함)를 제조하는 방법을 제공한다.
항체 (이중특이적 항체 포함)의 재조합적 생성을 위해, 예를 들어 상기에서 기재한 바와 같은 항체를 코딩하는 핵산을 단리하고, 추가의 클로닝 및/또는 숙주 세포에서의 발현을 위해 하나 이상의 벡터에 삽입한다. 이러한 핵산은 종래의 절차를 사용하여 용이하게 단리하고 시퀀싱할 수 있다 (예를 들어, 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하는 것에 의함).
항체-코딩 벡터의 클로닝 또는 발현에 적합한 숙주 세포는 원핵생물 또는 본원에 기재된 진핵생물 세포를 포함한다. 예를 들어, 특히 글리코실화 및 Fc 이펙터 기능이 필요하지 않을 경우, 항체는 박테리아에서 생성될 수 있다. 박테리아에서의 항체 단편 및 폴리펩티드의 발현에 대해서는, 예를 들어 미국 특허 번호 5,648,237호, 5,789,199, 및 5,840,523를 참조한다. (또한 이. 콜라이에서의 항체 단편의 발현을 기재하는 문헌 [Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003) pp. 245-254]를 참조한다.) 발현 이후, 가용성 분획 내의 박테리아 세포 페이스트로부터 항체를 단리할 수 있고, 추가로 정제할 수 있다.
원핵생물 이외에도, 진핵 미생물, 예컨대 글리코실화 경로가 "인간화"되어 항체를 부분적으로 또는 전체적으로 인간 글리코실화 패턴으로 생성되게 하는, 진균 및 효모 균주를 포함하여, 사상 진균 또는 효모가 항체-코딩 벡터의 클로닝 또는 숙주 발현에 적합하다. 문헌 [Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004)], 및 [Li et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)]을 참조한다.
글리코실화된 항체의 발현에 적합한 숙주 세포는 또한 다세포 유기체 (무척추동물 및 척추동물)로부터 유래된다. 무척추동물 세포의 예는 식물 및 곤충 세포를 포함한다. 수많은 바큘로바이러스 균주가 곤충 세포와 함께, 특히 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda) 세포를 형질감염시키는데 사용될 수 있는 것으로 확인되어 있다.
식물 세포 배양물을 또한 숙주로서 이용할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 5,959,177, 6,040,498, 6,420,548, 7,125,978, 및 6,417,429 (트랜스제닉 식물에서 항체를 생성하는 플랜티바디즈(PLANTIBODIES)™ 기술을 기재함)를 참조한다.
척추동물 세포를 또한 숙주로서 사용할 수 있다. 예를 들어, 현탁액 중에서 성장시키는데 적합화된 포유동물 세포주가 유용할 수 있다. 유용한 포유동물 숙주 세포주의 다른 예는 SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 라인 (COS-7); 인간 배아 신장 라인 (예를 들어, 문헌 [Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)]에 기재된 바와 같은 293 또는 293 세포); 새끼 햄스터 신장 세포 (BHK); 마우스 세르톨리 세포 (예를 들어, 문헌 [Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)]에 기재되어 있는 TM4 세포); 원숭이 신장 세포 (CV1); 아프리카 녹색 원숭이 신장 세포 (VERO-76); 인간 자궁경부 암종 세포 (HELA); 개 신장 세포 (MDCK; 버팔로 래트 간 세포 (BRL 3A); 인간 폐 세포 (W138); 인간 간 세포 (Hep G2); 마우스 유방 종양 (MMT 060562); 예를 들어, 문헌 [Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)]에 기재된 바와 같은 TRI 세포; MRC 5 세포; 및 FS4 세포이다. 다른 유용한 포유동물 숙주 세포주는 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포, 예를 들어 DHFR- CHO 세포 (문헌 [Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)]); 및 골수종 세포주, 예컨대 Y0, NS0 및 Sp2/0을 포함한다. 항체 생성에 적합한 특정 포유동물 숙주 세포주의 검토를 위해, 예를 들어 문헌 [Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255-268 (2003)]을 참조한다.
III. 조성물
본 발명의 제약 조성물 또는 제제는 본원에 기재된 바와 같은 조합물을 포함함한다.
본원에 기재된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 제약상 허용되는 용매, 예컨대 물, 에탄올 등과 용매화된 형태뿐만 아니라 비용매화된 형태로도 존재할 수 있고, 본 발명은 용매화된 형태 및 비용매화된 형태 둘 다를 포함하도록 의도된다.
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 또한 상이한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있고, 이러한 모든 형태가 본 발명의 범위 내에 포함된다. 용어 "호변이성질체" 또는 "호변이성질체 형태"는 저에너지 장벽을 통해 상호전환가능한 상이한 에너지의 구조 이성질체를 지칭한다. 예를 들어, 양성자 호변이성질체 (또한 양성자성 호변이성질체로 공지됨)는 양성자의 이동을 통한 상호전환, 예컨대 케토-에놀 및 이민-엔아민 이성질체화를 포함한다. 원자가 호변이성질체는 결합 전자 중 일부의 재구성에 의한 상호전환을 포함한다.
제약 조성물은 임의의 제약상 불활성 부형제, 희석제, 담체, 또는 활택제와 함께, 1종 초과 (예를 들어, 2종)의 제약 활성제가 포함된 개별 투여 단위 및 벌크 조성물 둘 다를 포함한다. 벌크 조성물 및 각각의 개별 투여 단위는 고정된 양의 전술한 제약 활성제를 함유할 수 있다. 벌크 조성물은 아직 개별 투여 단위로 형성되지 않은 물질이다. 예시적인 투여 단위는 경구 투여 단위, 예컨대 정제, 환제, 캡슐 등이다. 유사하게, 본 발명의 제약 조성물을 투여함으로써 환자를 치료하는 본원에 기재된 방법은 벌크 조성물 및 개별 투여 단위의 투여를 포함하도록 또한 의도된다.
1개 이상의 원자가 자연에서 통상적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된다는 사실을 제외하고는, 제약 조성물은 또한 본원에 열거된 것들과 동일한 동위원소-표지된 화합물을 포함한다. 명시된 바와 같은 임의의 특정 원자 또는 원소의 모든 동위원소가 본 발명의 화합물, 및 그의 용도의 범위 내인 것으로 의도된다. 화합물로 혼입될 수 있는 예시적인 동위원소는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린, 염소 및 아이오딘의 동위원소, 예컨대 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 32P, 33P, 35S, 18F, 36Cl, 123I 및 125I를 포함한다. 본 발명의 특정 동위원소-표지된 화합물 (예를 들어, 3H 및 14C로 표지된 것들)은 화합물 및/또는 기질 조직 분포 검정에서 유용하다. 삼중수소 (3H) 및 탄소-14 (14C) 동위원소는 그의 제조 및 검출능의 용이성 때문에 유용하다. 추가로, 보다 무거운 동위원소, 예컨대 중수소 (2H)로의 치환은 더 높은 대사 안정성으로부터 생긴 특정 치료 이점 (예를 들어, 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건)을 제공할 수 있고, 이에 따라 일부 상황에서 바람직할 수 있다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대 15O, 13N, 11C 및 18F는 기질 수용체 점유율을 검사하는 양전자 방출 단층촬영 (PET) 연구에 유용하다.
화합물의 제약상 허용되는 염은 인간 (예컨대 인간 남성 또는 여성)을 포함한 포유동물에서 과다증식성 장애 (예컨대 암, 예컨대 삼중 음성 유방암)의 치유적 치료를 위해 치료 조합물에서 사용하기 위한 표준 제약 실시에 따라 제제화된다. 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 조합물을 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 활택제, 희석제, 또는 부형제과 함께 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
적합한 담체, 희석제 및 부형제는 통상의 기술자에게 주지되어 있고, 이는 물질, 예컨대 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등을 포함한다. 사용되는 특정 담체, 희석제 또는 부형제는 본 발명의 화합물을 적용하는 수단 및 목적에 좌우될 것이다. 용매는 일반적으로 포유동물에 투여되기에 안전한 것으로 통상의 기술자에게 인식되어 있는 용매 (GRAS)를 기준으로 선택된다. 일반적으로, 안전한 용매는 비-독성 수성 용매, 예컨대 물 및 수용성 또는 수혼화성인 다른 비-독성 용매이다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 (예를 들어, PEG 400, PEG 300) 등 및 그의 혼합물을 포함한다. 제제는 또한 하나 이상의 완충제, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 유화제, 현탁화제, 보존제, 항산화제, 불투명화제, 활택제, 가공 조제, 착색제, 감미제, 방향제, 향미제 및 다른 공지된 첨가제를 포함하여 약물 (즉, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약 조성물)의 명쾌한 제시를 제공하거나 제약 제품 (즉, 의약)의 제조를 보조할 수 있다.
제제는 종래의 용해 및 혼합 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 벌크 약물 물질 (즉, 본 발명의 화합물 또는 화합물의 안정화된 형태) (예를 들어, 시클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착화제를 이용한 착물)은 상기 기재된 하나 이상의 부형제의 존재 하에 적합한 용매에 용해된다. 본 발명의 화합물은 전형적으로 제약 투여 형태로 제제화되어 용이하게 조절가능한 약물의 투여량을 제공하고 처방된 요법에 환자가 순응할 수 있게 한다.
적용을 위한 제약 조성물 (또는 제제)은 약물을 투여하는데 사용되는 방법에 따라 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 분배를 위한 물품은 적절한 형태로 그 안에 배치된 제약 제제를 갖는 용기를 포함한다. 적합한 용기는 통상의 기술자에게 주지되어 있으며 물질, 예컨대 병 (플라스틱 및 유리), 사쉐, 앰플, 비닐 봉지, 금속 실린더 등을 포함한다. 용기는 포장재의 내용물에 대한 무분별한 접근을 예방하기 위해 부정 조작 방지 조립체를 또한 포함할 수 있다. 게다가, 용기의 상부에는 용기의 내용물이 기재되어 있는 표지가 배치되어 있다. 표지는 또한 적절한 경고문을 포함할 수 있다.
본 화합물의 제약 제제는 다양한 경로 및 유형의 투여를 위해 제조될 수 있다. 예를 들어, 원하는 정도의 순도를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 임의로, 동결건조 제제, 밀링된 분말, 또는 수용액의 형태로, 제약상 허용되는 희석제, 담체, 부형제 또는 안정화제와 혼합될 수 있다 (Remington's Pharmaceutical Sciences (1995) 18th edition, Mack Publ. Co., Easton, PA). 주위 온도에서, 적절한 pH에서, 및 원하는 순도로, 생리학상 허용되는 담체, 즉 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비-독성인 담체와 혼합함으로써 제제화를 수행할 수 있다. 제제의 pH는 주로 화합물의 특정 용도 및 농도에 좌우되며, 약 3 내지 약 8의 범위일 수 있다.
제약 제제는 바람직하게는 멸균된다. 특히, 생체내 투여용으로 사용될 제제는 멸균되어야 한다. 이러한 멸균은 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다.
제약 제제는 통상적으로 고체 조성물, 동결건조 제제 또는 수용액으로서 보관될 수 있다.
제약 제제는 양호한 의료 행위와 일치되는 방식으로, 예를 들어 투여의 양, 농도, 일정, 코스, 비히클 및 경로로 복용 및 투여될 것이다. 이와 관련하여 고려해야 할 인자는 치료될 특정 장애, 치료될 특정 포유동물, 개별 환자의 임상적 상태, 장애의 원인, 작용제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 일정, 및 의료 전문인에게 공지된 다른 인자를 포함한다. 투여될 "치료 유효량"은 이러한 고려사항에 좌우될 것이며, 이는 응고 인자 매개 장애를 예방, 개선, 또는 치료하는데 필요한 최소량이다. 이러한 양은 바람직하게는 숙주에 독성이거나 숙주가 출혈에 유의하게 더 민감성이 되게 하는 양보다 적은 양이다.
허용되는 희석제, 담체, 부형제 및 안정화제는 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이며, 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함한 항산화제; 보존제 (예컨대, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 이뮤노글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신; 모노사카라이드, 디사카라이드 및 글루코스, 만노스, 덱스트린을 포함한 다른 탄수화물; 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염-형성 반대-이온, 예컨대 나트륨; 금속 착물 (예를 들어, Zn-단백질 복합체); 및/또는 비-이온성 계면활성제, 예컨대 트윈™, 플루로닉스(PLURONICS)™ 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)을 포함한다. 예를 들어, 콜로이드성 약물 전달 시스템 (예를 들어, 리포솜, 알부민 마이크로구체, 마이크로에멀젼, 나노-입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼 각각에서, 히드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐을, 예를 들어 코아세르베이션 기술에 의해 또는 계면 중합에 의해, 제조된 마이크로캡슐에 활성 제약 성분을 또한 넣을 수 있다. 이러한 기술은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences 18th edition, (1995) Mack Publ. Co., Easton, PA]에 개시되어 있다.
지속-방출형 제제를 제조할 수 있다. 지속-방출형 제제의 적합한 예는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함하며, 이러한 매트릭스는 성형품, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐의 형태이다. 지속-방출형 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 히드로겔 (예를 들어, 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트), 또는 폴리(비닐 알콜)), 폴리락티드 (US 3773919), L-글루탐산 및 감마-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예컨대 루프론 데포우(LUPRON DEPOT)™ (락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세테이트로 이루어진 주사가능한 마이크로구체) 및 폴리-D (-) 3-히드록시부티르산을 포함한다.
제약 제제는 본원에 상세히 설명된 투여 경로에 적합한 것들을 포함한다. 제제는 편리하게는 단위 투여 형태로 존재할 수 있고 제약의 관련 기술분야에 주지된 어느 방법에 의해서도 제조될 수 있다. 기술 및 제제는 일반적으로 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences 18th Ed. (1995) Mack Publishing Co., Easton, PA]에 수록되어 있다. 이러한 방법은 활성 성분을 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로 제제는 활성 성분을 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 둘 다와 균일하고 균질하게 회합시킨 다음, 필요한 경우 생성물로 성형함으로써 제조된다.
경구 투여에 적합한 조합물의 제제는 각각 미리결정된 양의 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A를 함유하는 별개 단위, 예컨대 환제, 경질 또는 연질, 예를 들어 젤라틴 캡슐, 사쉐, 트로키, 로젠지, 수성 또는 오일 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 시럽 또는 엘릭시르로서 제조될 수 있다. GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 양은 조합된 제제로서의 환제, 캡슐, 용액 또는 현탁액으로 제제화될 수 있다. 대안적으로, 조합물은 교대로 투여하기 위한 환제, 캡슐, 용액 또는 현탁액으로 개별적으로 제제화될 수 있다.
제제는 제약 조성물의 제조에 대해 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 따라 제조될 수 있고, 이러한 조성물은, 맛이 좋은 제제를 제공하기 위해, 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제를 포함한 하나 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 압축 정제는 자유-유동 형태, 예컨대 분말 또는 과립으로의 활성 성분을 적합한 기계에서 압축하고, 임의로 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 표면 활성제 또는 분산제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 성형 정제는 불활성 액체 희석제로 습윤시킨 분말 활성 성분의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조될 수 있다. 정제는 임의로 코팅시키거나 자국을 낼 수 있고, 임의로 그로부터 활성 성분의 서방출 또느린 또는 제어 방출을 제공하도록 제제화된다. 제약 제제의 정제 부형제는, 정제를 구성하는 분말 약물의 벌크 부피를 증가시키기 위한 충전제 (또는 희석제); 정제가 섭취되었을 때 그것을 작은 단편, 이상적으로는 개개의 약물 입자로 분해하여 약물의 신속한 용해 및 흡수를 촉진하는 것을 돕기 위한 붕해제; 과립 및 정제가 요구되는 기계적 강도로 확실히 형성될 수 있도록 하고, 정제가 압축된 후에 그것이 함께 뭉치도록 하여 포장, 운송 및 일상적인 취급 동안 정제가 그것의 구성성분 분말로 분해되지 못하도록 하는 결합제; 제조 동안 정제를 구성하는 분말의 유동성을 향상시키는 활택제; 정제화 분말이 제조 동안 정제를 압축하는 데 사용되는 장치에 확실히 부착되지 않도록 해주는 윤활제를 포함할 수 있다. 이들은 압축기를 통한 분말 혼합물의 흐름을 개선시키고, 완성된 정제가 장치로부터 튀어나올 때 마찰 및 파손을 최소화하며; 활택제와 유사한 기능을 갖는 부착방지제는 제조 동안 정제의 형상을 찍어내는 데 사용되는 기계와 정제를 구성하는 분말 사이의 부착을 감소시키고; 정제에 혼입된 향미제는 정제에 보다 기분 좋은 맛을 부여하거나 불쾌한 맛을 차폐하며, 착색제는 식별성 및 환자 순응도에 도움을 준다.
정제의 제조에 적합한 비-독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합된 활성 성분을 함유하는 정제가 허용된다. 이들 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘 또는 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분, 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석일 수 있다. 정제는 코팅되지 않을 수 있고, 위장관에서의 붕해 및 흡착을 지연시킴으로써 보다 긴 기간에 걸쳐 지속 작용을 제공하는 마이크로캡슐화를 포함한 공지된 기술에 의해 코팅될 수 있다. 예를 들어, 시간 지연 물질, 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트가 단독으로 또는 왁스와 함께 사용될 수 있다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예를 들어 구강 및 피부의 치료를 위해, 제제는 바람직하게는 활성 성분(들)을, 예를 들어 0.075 내지 20% w/w의 양으로 함유하는 국소 연고 또는 크림으로서 도포된다. 연고로 제제화되는 경우, 활성 성분은 파라핀계 또는 수-혼화성 연고 베이스와 함께 사용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 베이스와 함께 크림으로 제제화될 수도 있다.
원하는 경우에, 크림 베이스의 수성 상은 다가 알콜, 즉 2개 이상의 히드록실 기를 갖는 알콜, 예컨대 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-디올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜 (PEG 400 포함) 및 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 국소 제제는 바람직하게는 피부 또는 다른 이환 부위를 통한 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증진시키는 화합물을 포함할 수 있다. 이러한 피부 침투 증진제의 예는 디메틸 술폭시드 및 관련 유사체를 포함한다.
본 발명의 에멀젼의 유성 상은 공지된 성분으로부터 공지된 방식으로 구성될 수 있고, 지방 또는 오일, 또는 지방 및 오일 둘 다와 하나 이상의 유화제의 혼합물을 포함한다. 바람직하게는, 친수성 유화제가 안정화제로 작용하는 친지성 유화제와 함께 포함된다. 이와 함께, 안정화제(들)를 포함하거나 포함하지 않는 유화제(들)는 유화 왁스를 구성하고, 왁스는 오일 및 지방과 함께 크림 제제의 유성 분산 상을 형성하는 유화 연고 베이스를 포함한다. 제제에서 사용하기에 적합한 유화제 및 에멀젼 안정화제는 트윈® 60, 스팬(Span)® 80, 세토스테아릴 알콜, 벤질 알콜, 미리스틸 알콜, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 나트륨 라우릴 술페이트를 포함한다.
제약 제제의 수성 현탁액은 수성 현탁액의 제조에 적합한 부형제와 혼합된 활성 물질을 함유한다. 이러한 부형제는 현탁화제, 예컨대 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 크로스카르멜로스, 포비돈, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 알긴산나트륨, 폴리비닐피롤리돈, 트라가칸트 검 및 아카시아 검, 및 분산제 또는 습윤제, 예컨대 자연 발생 포스파티드 (예를 들어, 레시틴), 지방산과 알킬렌 옥시드의 축합 생성물 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 장쇄 지방족 알콜과 에틸렌 옥시드의 축합 생성물 (예를 들어, 헵타데카에틸렌옥시세탄올), 지방산 및 헥시톨 무수물 및 으로부터 유도된 부분 에스테르와 에틸렌 옥시드의 축합 생성물 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트)을 포함한다. 수성 현탁액은 또한 하나 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-히드록시벤조에이트, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 향미제 및 하나 이상의 감미제, 예컨대 수크로스 또는 사카린을 함유할 수 있다.
제약 조성물은 주사가능한 멸균 제제, 예컨대 주사가능한 멸균 수성 또는 유성 현탁액의 형태일 수 있다. 이 현탁액은 상기 언급된 그러한 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 주사가능한 멸균 제제는 비-독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중 용액 또는 현탁액, 예컨대 1,3-부탄디올 중 용액 또는 동결건조 분말로부터 제조된 용액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 게다가, 멸균 고정 오일을 통상적으로 용매 또는 현탁 배지로서 사용할 수 있다. 이 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함하는 임의의 무자극 고정 오일을 사용할 수 있다. 게다가, 지방산, 예컨대 올레산을 주사제의 제조에 마찬가지로 사용할 수 있다.
단일 투여 형태를 제조하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분(들)의 양 (들)은 치료되는 숙주 및 특정의 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 인간에게 경구 투여하기 위한 지속-방출형 제제는 대략 1 내지 1000 mg의 활성 물질 화합물을 총 조성물의 약 5 내지 약 95% (중량:중량)로 다양할 수 있는 적절하고 편리한 담체 물질의 양과 배합되어 함유할 수 있다. 제약 조성물은 용이하게 측정가능한 투여량을 제공하도록 제조될 수 있다. 예를 들어, 정맥내 주입하기 위한 수용액은 약 30 mL/hr의 속도로 적합한 부피의 주입이 일어날 수 있도록 용액의 밀리리터 당 약 3 내지 500 ㎍의 활성 성분을 함유할 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제제는 항산화제, 완충제, 정박테리아제, 및 제제를 의도된 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 주사 용액; 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다.
눈에 대한 국소 투여에 적합한 제제는 또한, 활성 성분이 적합한 담체, 특히 활성 성분을 위한 수성 용매에 용해 또는 현탁되어 있는 점안제를 포함한다. 활성 성분은 바람직하게는 이러한 제제에 약 0.5 내지 20% w/w, 예를 들어 약 0.5 내지 10% w/w, 예를 들어 약 1.5% w/w의 농도로 존재한다.
구강으로의 국소 투여에 적합한 제제는 활성 성분을 향미 베이스, 일반적으로는 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 중에 포함하는 로젠지; 활성 성분을 불활성 베이스, 예컨대 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아 중에 포함하는 파스틸; 및 활성 성분을 적합한 액체 담체 중에 포함하는 구강세정제를 포함한다.
직장 투여를 위한 제제는, 예를 들어 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적합한 베이스를 갖는 좌제로서 존재할 수 있다.
폐내 또는 비강 투여에 적합한 제제는, 예를 들어 0.1 내지 500 마이크로미터 범위의 입도 (마이크로미터, 예컨대 0.5, 1, 30 마이크로미터, 35 마이크로미터 등의 증분으로 0.1 내지 500 마이크로미터 범위의 입도 포함)를 가지며, 비도를 통한 신속한 흡입에 의해 또는 구강을 통한 흡입에 의해 투여되어 폐포에 도달하게 된다. 적합한 제제는 활성 성분의 수성 또는 유성 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 건조 분말 투여에 적합한 제제는 종래의 방법에 따라 제조될 수 있고, 다른 치료제, 예컨대 이하에 기재된 바와 같은 장애의 치료 또는 예방에서 종전에 사용된 화합물과 함께 전달될 수 있다.
질 투여에 적합한 제제는 활성 성분에 더하여 적절한 것으로 관련 기술분야에 공지되어 있는 바와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 발포체 또는 스프레이 제제로서 존재할 수 있다.
제제는 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰플 및 바이알에 포장될 수 있고, 사용 직전 주사용 멸균 액체 담체, 예를 들어 물의 첨가만을 필요로 하는 냉동-건조 (동결건조) 조건으로 보관될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 이전에 기재한 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조된다. 바람직한 단위 투여 제제는 활성 성분의, 본원에서 상기 열거된 바와 같은 1일 용량 또는 단위 1일 분할-용량, 또는 그의 적절한 분획을 함유하는 것들이다.
본 발명은 추가로 본원에 기재된 조합물을 그를 위한 수의학적 담체와 함께 포함하는 수의학적 조성물을 제공한다. 수의학적 담체는 조성물의 투여 목적에 유용한 물질이며, 수의학적 분야에서 달리 불활성이거나 허용되고 활성 성분과 상용성인 고체, 액체 또는 기체 물질일 수 있다. 이들 수의학적 조성물은 비경구로, 경구로 또는 임의의 다른 바람직한 경로에 의해 투여될 수 있다.
IV. 조합 요법
본 발명의 한 측면은 환자에서 암의 치료를 위한 조합 치료를 제공하며 여기서 조합 요법은 환자에게로 MEK 억제제, EGFR 억제제, 및 HER3 억제제의 투여를 포함한다.
한 실시양태에서, 조합 요법의 MEK 억제제는 GDC-0973 또는 GDC-0623 중 하나이다. GDC-0973 및 GDC-0623은 ERK 1/2를 활성화하는 키나제인, MEK 1/2의 강력하고 고도로 선택적인 소분자 알로스테릭 억제제이다. MEK 1/2의 억제는 MEK/ERK 경로에서 이상 신호전달에 의존하는 종양의 성장을 제어하기 위한 유망한 전략이다. 임상전 연구는 두 억제제 모두 많은 종양 유형과 연관되는 활성화 B-RAF 돌연변이 보유 종양 세포의 성장을 억제하는데 효과적이고, GDC-0973은 이 모델에서 더 큰 활성을 나타냄을 입증하였다. 도 5. 임상전 연구는 두 억제제 모두 많은 종양 유형과 연관되는 활성화 Ras 돌연변이 보유 종양 세포의 성장을 억제하는데 효과적이고, GDC-0623은 이 모델에서 더 큰 활성을 나타냄을 입증하였다. 도 6.
한 실시양태에서, HER3 억제제 및 EGFR 억제제 기능은 소분자, 예를 들어 HER3 및 EGFR 둘 다의 생물학적 활성 둘 다를 억제하고 이에 결합할 수 있는 이중특이적 항체로 존재한다. 한 실시양태에서, HER3 및 EGFR 억제제는 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 이중특이적 항체이다. 한 실시양태에서, HER3 및 EGFR 억제제는 2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함하며, 이들 각각은 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 것인 이중특이적 항체이다.
한 실시양태에서, 2개의 동일한 항원 결합 도메인을 포함하며, 이들 각각은 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적으로 결합하는 HER3 및 EGFR 이중특이적 항체는 항체 MEHD7945A이다. MEHD7945A는 그의 EGFR 및 HER3 표적에 리간드 결합을 차단한다. MEHD7945A 항체는 EGFR에 결합하고 (Kd 약 1.9 nM)이고 HER3에 결합한다 (Kd 약 0.4 mM). (WO 2010/108127 및 문헌 [Schaefer, et al. Cancer Cell, 20: 472-486 (2011)] 참조). MEHD7945A는 EGFR 및 HER2/HER3-의존적 신호전달을 억제한다. 더욱이 단일 작용제로서 MEHD7945A는 MAPK 및 PI3K 신호전달을 억제한다.
MEK 억제제와 HER3 및 EGFR 억제제 또는 억제제들의 조합물은 RAS/MEK 및 PI3K/AKT 경로 둘 다를 억제하는 방법을 제공하고 따라서 보다 효과적인 항암 요법을 제공한다. 조합 요법은 또한 MEK 억제로 관찰된 PI3K/AKT 경로의 활성화에 기인하는 고유 또는 획득 내성을 예방 또는 지연시키고 RAS 경로 활성화를 통해 매개된 고유 또는 획득 내성을 예방 또는 지연시키는 역할을 할 것이다. 더욱이, 조합 요법은 두개의 확립된 EGFR-내성 메커니즘 - KRAS 돌연변이 및 HER3 활성화를 차단하는 역할을 할 것이다.
MEK 억제제, HER3 억제제 및 EGFR 억제제는 단일 제약 조성물로 제제화될 수 있다. 대안적으로, 조합물은 두개의 제약 조성물로서 존재할 수 있고 여기서 제1 제약 조성물은 MEK 억제제, HER3 억제제 및 EGFR 억제제 중 하나를 포함하고 제2 제약 조성물은 MEK 억제제, HER3 억제제 또는 EGFR 억제제 중 둘을 포함하고, 여기서 MEK 억제제, HER3 억제제 및 EGFR 억제제가 제1 제약 조성물 및 제2 제약 조성물 둘 다에 존재하는 것은 아니다. 실시양태에서, 조합물은 2개의 제약 조성물로서 존재할 수 있고 여기서 제1 제약 조성물은 MEK 억제제를 포함하고 제2 제약 조성물은 HER3 억제제 및 EGFR 억제제를 포함한다. 실시양태에서, 조합물은 3개의 제약 조성물로서 존재할 수 있고, 여기서 세 제약 조성물 중 각각은 MEK 억제제, HER3 억제제 또는 EGFR 억제제 중 하나를 포함한다.
조합물이 이중 HER3/EGFR 억제제, 예컨대 MEHD7945A를 포함하는 경우, MEK 억제제 및 이중 HER3/EGFR 억제제는 단일 제약 조성물로 제제화될 수 있거나 MEK 억제제는 제1 제약 조성물로 제제화될 수 있고 이중 HER3/EGFR 억제제는 제2 제약 조성물로 제제화될 수 있다.
실시예에서 입증된 바와 같이, MEHD7945A와 코비메티닙 (GDC-0973)의 조합물은 시험관내 및 생체내에서 강건한 활성을 초래한다. 결장직장 세포주에서의 시험관내 신호전달 연구는 MEHD7945A와 코비메티닙의 조합물이 AKT 및 ERK 신호전달에 미치는 영향이 단일-작용제 활성과 비교하여 우세함을 입증한다. 증식의 억제가 조합 군에서 또한 증진되었다. 증가된 생체내 효능은 조합 군에서 결장 암의 KRAS-돌연변이 이종이식편 모델에서 단일-작용제 군과 비교시 입증되었으며, 이는 보상적 경로 활성화를 예방하고 그로 인한 효능을 증진시키기 위해 신호전달 수용체 EGFR과 HER3의 조합된 억제 및 RAS/RAF/MEK 경로의 동시 억제가 필요하다는 가설을 뒷받침한다. 증가된 생체내 효능은 췌장 야생형 KRAS 이종이식편 모델에서 단일-작용제 치료와 비교시 조합 군에서 보여졌고, 이는 MEHD7945A와 코비메티닙과의 조합물이 췌장 암에서 또한 유익함을 시사한다.
조합물은 전암성 및 비-신생물성 또는 비-악성 과다증식성 장애와 함께, 종양, 암 및 신생물성 조직을 포함한 과다증식성 질환 또는 장애의 치료를 위한 다른 화학요법제와 조합하여 사용될 수 있다. 특정 실시양태에서, 조합물은 조합 요법으로서의 투여 요법에서, 항-과다증식성을 갖거나 과다증식성 장애를 치료하는 데 유용한 또 다른 화합물과 조합된다. 투여 요법의 추가적 화합물은 바람직하게는 조합물에 대해 상보적 활성을 갖고, 이에 따라 이들은 서로에게 부정적인 영향을 미치지 않는다. 이러한 화합물은 의도된 목적에 효과적인 양으로 투여될 수 있다. 한 실시양태에서, 치료 조합물은 치료 유효량의 MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1일 2회 내지 3주마다 1회 (q3wk)의 범위로 투여하고, 치료 유효량의 HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)를 1일 2회 내지 3주마다 1회의 범위로 투여하는 투여 요법에 의해 투여된다.
조합 요법은 공동 또는 순차적 요법으로서 투여될 수 있다. 순차적으로 투여되는 경우, 조합물은 2회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 조합 투여는 개별 제제를 사용하는 공동 투여, 및 바람직하게는 시간대가 존재하지만 둘 다의 (또는 모든) 활성제가 동시에 그들의 생물학적 활성을 발휘하는 어떤 순서로든 연속 투여를 포함한다.
본 발명의 한 구체적 측면에서, MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염은 HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)의 투여 개시 후 약 1 내지 약 10일의 기간 동안 투여될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체적 측면에서, MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623)은 HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)의 투여 개시 전 약 1 내지 10일의 기간 동안 투여될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체적 측면에서, MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 및 HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)의 투여는 동일한 날에 개시한다.
발명의 한 구체적 측면에서 HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)은 MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 개시 후 약 1 내지 약 10일의 기간 동안 투여될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체적 측면에서, HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)은 MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 개시 전 약 1 내지 약 10일의 기간 동안 투여될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구체적 측면에서, HER3/EGFR 억제제 또는 억제제들 (예컨대 MEHD7945A)의 투여 및 MEK 억제제 화합물 (예컨대 GDC-0973 또는 GDC-0623), 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여는 동일한 날에 개시한다.
상기 공동투여되는 작용제 중 어느 한 작용제에 적합한 투여량은 현재 사용되는 것들이며, 예컨대 치료 지수를 증가시키거나 독성 또는 다른 부작용 또는 결과를 완화시키기 위해, 새롭게 규명된 작용제 및 다른 화학요법제 또는 치료의 조합 작용 (상승작용)에 기인하여 낮출 수 있다.
항암 요법의 특정의 실시양태에서, 치료 조합물은 외과적 요법 및 방사선요법과 조합될 수 있다. 조합물의 양 및 관련 투여 시기는 원하는 조합 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 것이다.
V. 조합 요법을 위한 투여 요법
인간 환자를 치료하기 위한 화학식 I 또는 II의 MEK 억제제 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용량은 화합물 약 20 mg 내지 약 1600 mg에 이르는 범위일 수 있다. 전형적인 용량은 화합물 약 50 mg 내지 약 800 mg일 수 있다. 용량은 특정의 화합물의 흡수, 분포, 대사 및 배출을 포함한, 약동학 (PK) 및 약역학 (PD) 특성에 따라, 1일 1회 (QD), 1일 2회 (BID), 또는 더 빈번하게 투여될 수 있다. 게다가, 독성 인자가 투여량 및 투여 요법에 영향을 줄 수 있다. 경구 투여되는 경우, 환제, 캡슐 또는 정제는 명시된 기간 동안 1일 2회, 매일 또는 덜 빈번하게, 예컨대 주 1회 또는 2주나 3주에 1회 섭취될 수 있다. 투여 요법은 다수의 요법 주기 동안 반복될 수 있다.
항체, 예컨대 MEHD7945A로 인간 환자를 치료하는 용량은, 약 0.05 mg/kg 내지 약 30 mg/kg에 이르는 범위일 수 있다. 따라서, 하나 이상의 용량 약 0.5 mg/kg, 2.0 mg/kg, 4.0 mg/kg, 10 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 15 mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 또는 30 mg/kg (또는 그의 임의의 조합)을 환자에게 투여할 수 있다. 이러한 용량은 매일 또는 간헐적으로, 예를 들어 매주, 2주 마다, 또는 3주 마다 투여될 수 있다.
한 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 1100 mg의 MEHD7945A 및 매일 (QD) 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 이들 특정의 실시양태에서, 환자는 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W를 받으며; GDC-0973 (코비메티닙)은 21일 동안 연속 투여 후 7일 투여하지 않게 될 것이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 1100 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 1100 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 1100 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 2주 마다 (Q2W) IV 투여되는 1100 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1100 mg의 MEHD7945A IV Q2W 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 1주 1회 (QW) IV 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 1회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 2회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 3회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 4회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 5회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 40 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 50 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 60 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 70 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다. 또 다른 특정의 실시양태에서, 인간 환자에 대한 용량은 IV QW로 투여되는 400 mg의 MEHD7945A 및 1주 6회 경구 투여되는 경구로 QD 80 mg의 GDC-0973 (코비메티닙)이다.
VI. 치료 방법
본원에 제공된 치료 조합물은 환자에서 AKT 키나제에 의해 조절되는 것들을 포함하나 이에 제한되지는 않는 질환, 병태 및/또는 장애를 치료하는 데 유용하다. 본 발명의 방법에 따라 치료할 수 있는 암은 결장직장, 중피종, 자궁내막암, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 흑색종, 위암, 결장암, 신장암, 두경부암 및 교모세포종을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 조합물은 특정 암 표현형에 대해 개선된 효과를 제공할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 특정 조합물은 RAS 돌연변이 (예컨대 KRAS 돌연변이), EGFR 돌연변이 (예컨대 T790M), PTEN 돌연변이 (또는 낮음 또는 없음 상태), AKT 돌연변이 (또는 높은 pAKT 발현 또는 증폭 수준), PI3K 돌연변이, 또는 상기의 조합과 연관된 암에 대해 개선된 효과를 제공한다. 한 실시양태에서, 암은 KRAS 돌연변이를 위치 12 또는 13에서 포함한다. 특정 실시양태에서, KRAS 돌연변이는 G12A, G12C, G12D, G12R, G12S, G12V, G13C, 또는 G13D이다.
따라서, 본원에 기재된 특정 조합물은 이들 유형의 암에 대해 특히 유용할 수 있다. GDC-0973은 결장, 췌장 및 폐 종양에서 흔한 KRAS 유도 종양에 대해 개선된 효능을 갖는 것으로 나타났다.
Figure pct00008
PTEN 없음 (또는 낮음) 상태는 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 임의의 적합한 수단에 의해 측정될 수 있다. 한 예에서, IHC가 사용된다. 대안적으로, 웨스턴 블롯 분석이 사용될 수 있다. PTEN에 대한 항체는 시판되고 있다 (셀 시그널링 테크놀로지(Cell Signaling Technology) (미국 매사추세츠주 비벌리), 캐스케이드 바이오사이언시즈(Cascade Biosciences) (미국 매사추세츠주 윈체스터). PTEN 상태에 대한 IHC 및 웨스턴 블롯 분석에 대한 예시적 절차는 문헌 [Neshat, M. S. et al. Enhanced sensitivity of PTEN-deficient tumors to inhibition of FRAP/mTOR, Proc. Natl Acad. Sci. USA 98, 10314-10319 (2001)] 및 [Perren, A., et. al. Immunohistochemical Evidence of Loss of PTEN Expression in Primary Ductal Adenocarcinomas of the Breast, American Journal of Pathology, Vol. 155, No. 4, October 1999]에 기재되어 있다. 게다가, AKT 돌연변이 또는 PI3K 돌연변이와 연관된 암은 관련 기술분야에 공지된 기술을 이용하여 확인할 수 있다.
소정의 샘플에서 비-활성화되거나 비-인산화된 AKT의 수준과 비교하여 AKT 활성화 또는 인산화 ("pAKT")의 수준은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 측정될 수 있다. pAKT 상태는 비 (예를 들어, 종양 세포에서의 pAKT의 양 나누기 동일한 유형의 비-종양성 세포에서의 pAKT 양) 또는 감산 (예를 들어, 종양 세포에서의 pAKT의 양 마이너스 상기 세포에서의 또는 동일한 유형의 비-종양성 세포에서의 pAKT 양)의 면에서 표기될 수 있다. pAKT 프로파일은 또한 AKT의 인산화된 하류 표적 (예를 들어, pGSK 또는 PRAS40)의 양을 측정함으로써 경로의 활성화 수준의 면에서 표기될 수 있다. 높은 pAKT는 기준선 값보다 높은 샘플에서의 전반적인 AKT의 활성화 또는 인산화 수준을 지칭한다. 한 예에서, 기준선 값은 소정의 세포 유형에 대한 pAKT의 기준 수준이다. 또 다른 예에서, 기준선 값은 샘플 세포, 예를 들어 비-암성 또는 세포의 소정의 군집에서의 pAKT의 평균 수준이다. 또 다른 예에서, 높은 pAKT는 동일한 포유동물 또는 환자 군집 중 하나로부터의 동일한 유형의 정상인, 건강한 (예컨대 비-종양성) 세포의 평균과 비교시, 종양 세포 내에 인산화 또는 활성화된 AKT를 과다-발현하거나 -증폭한 종양 세포를 지칭한다. pAKT 프로파일은 또한 특정 PI3k/AKT 키나제 경로 억제제의 효능을 예측하기 위한 다른 마커, 예를 들어 FOXO3a 국재화 프로파일과 함께 사용될 수 있다. PI3k, KRAS 및 AKT 돌연변이의 존재를 시험하기 위한 키트는 시판되고 있다 (퀴아젠(Qiagen)).
한 구체적 측면에서, 본 발명은 본 발명의 조합물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, PTEN 돌연변이 또는 발현의 소실, AKT 돌연변이 또는 증폭, PI3K 돌연변이 또는 증폭, 또는 그의 조합과 연관된 암을 가진 환자의 치료 방법을 제공한다. 또 다른 측면에서, 본 발명은 PTEN 돌연변이 또는 발현의 소실, AKT 돌연변이 또는 증폭, PI3K 돌연변이 또는 증폭, 또는 그의 조합과 환자의 암의 연관성이 본 발명의 조합물로 치료될 수 있는 암의 지표인, 환자의 암이 PTEN 돌연변이 또는 발현의 소실, AKT 돌연변이 또는 증폭, PI3K 돌연변이 또는 증폭, 또는 그의 조합과 연관되는지를 측정하는 것을 포함하는, 본 발명의 조합물로 치료될 수 있는 암을 가진 환자의 식별 방법을 제공한다. 추가 측면에서, 본 발명은 본 발명의 조합물로 이렇게 식별되는 환자를 치료하는 것을 추가로 포함하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 암은 난소암, 유방암, 흑색종, 결장암, 두경부암, 또는 비-소세포 폐암이다.
VII. 제조 물품
본 발명의 또 다른 실시양태에서, 상기 기재된 질환 및 장애의 치료에 유용한 조합물을 함유하는, 제조 물품 또는 "키트"가 제공된다. 한 실시양태에서, 키트는 용기 및 본원에 기재된 조합물을 포함한다.
키트는 용기 상에 또는 용기와 결합하여 표지 또는 포장 삽입물을 추가로 포함할 수 있다. 용어 "포장 삽입물"은 이러한 치료 제품의 사용에 관한 지시사항, 용법, 투여량, 투여, 금기 및/또는 경고에 관한 정보를 함유하는 관례상 치료 제품의 상업 포장에 포함된 사용설명서를 지칭하는데 사용된다. 적합한 용기는, 예를 들어 병, 바이알, 시린지, 블리스터 팩 등을 포함한다. 용기는 다양한 재료, 예컨대 유리 또는 플라스틱으로 형성될 수 있다. 용기는 병태를 치료하는 데 효과적이고 멸균 접근 포트를 가질 수 있는, 조합물, 또는 그의 제제를 담고 있을 수 있다 (예를 들어, 용기는 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 바이알 또는 정맥내 용액 백일 수 있음). 표지 또는 포장 삽입물은 조성물이 선택된 병태, 예컨대 암을 치료하는 데 사용됨을 지시한다. 한 실시양태에서, 표지 또는 포장 삽입물은 조합물을 포함하는 조성물이 비정상적 세포 성장으로부터 생긴 장애를 치료하는 데 사용될 수 있음을 지시한다. 표지 또는 포장 삽입물은 또한 조성물이 다른 장애를 치료하는 데 사용될 수 있음을 지시할 수 있다. 대안적으로, 또는 추가로, 제조 물품은 제약상 허용되는 완충제, 예컨대 정박테리아 주사용수 (BWFI), 포스페이트-완충 염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 포함하는 제2 용기를 추가로 포함할 수 있다. 그것은 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘 및 시린지를 포함한, 상업적 및 사용자 관점에서 바람직한 다른 물질을 추가로 포함할 수 있다.
키트는 조합물, 및 존재하는 경우, 제2 제약 제제의 투여를 위한 설명서를 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어, 키트가 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제1 조성물, 및 MEHD7945A를 포함하는 제2 제약 제제를 포함하는 경우, 키트는 제1 및 제2 제약 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 동시, 순차적 또는 개별 투여하기 위한 설명서를 추가로 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 키트는 조합물의 고체 경구 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐의 전달에 적합하다. 이러한 키트는 바람직하게는 다수의 단위 투여량을 포함한다. 이러한 키트는 투여량을 그들의 의도된 사용 순서로 배열하여 갖는 카드를 포함할 수 있다. 이러한 키트의 한 예는 "블리스터 팩"이다. 블리스터 팩은 포장 산업에서 주지되어 있으며, 제약 단위 투여 형태를 포장하는 데 널리 사용된다. 원하는 경우에는, 기억 보조장치가, 예를 들어 숫자, 문자 또는 다른 표시 형태로, 또는 투여량이 투여될 수 있는 치료 일정 상의 날짜를 지정하는 달력 삽입물과 함께 제공될 수 있다.
한 실시양태에 따르면, 키트는 (a) GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염을 그 안에 담고 있는 제1 용기; (b) MEHD7945A를 갖는 제2 용기 및 c) 제3 제약 제제를 그 안에 담고 있는 제3 용기를 포함할 수 있으며, 여기서 제3 제약 제제는 항-과다증식 활성을 갖는 또 다른 화합물을 포함한다. 대안적으로, 또는 추가로, 키트는 제약상 허용되는 완충제, 예컨대 정박테리아 주사용수 (BWFI), 포스페이트-완충 염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 포함하는 제3 용기를 추가로 포함할 수 있다. 그것은 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘 및 시린지를 포함한, 상업적 및 사용자 관점에서 바람직한 다른 물질을 추가로 포함할 수 있다.
키트가 GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A의 조성물을 포함하는 경우, 키트는 개별 조성물을 함유하기 위한 용기, 예컨대 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함할 수 있지만, 개별 조성물은 또한 단일의 분할되지 않은 용기에 함유될 수 있다. 전형적으로, 키트는 개별 구성성분의 투여를 위한 설명서를 포함한다. 키트 형태는 개별 구성성분이 바람직하게는 다른 투여 형태 (예를 들어, 경구 및 비경구)로 투여되거나, 또 다른 투여 간격으로 투여되는 때, 또는 조합물의 개개 구성성분의 적정이 처방 의사에 의해 요구되는 때 특히 유리하다.
VIII. 실시예
본 발명을 설명하기 위해, 하기 실시예가 포함된다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 제한하지 않으며 본 발명을 실행하는 방법을 제안하려는 의도일뿐임을 이해해야 한다.
실시예 1
MEHD7945A는 HER3 및 EGFR 둘 다에 특이적이다
MEHD7945A는 EGFR 및 HER3 둘 다에 결합 특이성을 갖는 항원-결합 도메인을 포함하는 항체이다. WO 2010/108127 및 문헌 [Schaefer, et al. Cancer Cell, 20: 472-486 (2011)]. 전형적으로, 이중표적제는 두개의 구별되는 항원-결합 모듈을 연결함으로써 구축되며, 여기서 각각의 모듈은 단지 하나의 항원을 결합할 수 있다. 그에 반해서, MEHD7945A에서, 각각의 모듈 (Fab)은 두 항원 중 어느 한쪽이든 결합할 수 있고, 따라서 결합력 효과로부터 증진된 결합 친화도를 도출하는 가능성을 갖는다. MEHD7945A의 두개의 동일한 Fab 각각은 EGFR 또는 HER3 중 하나를 결합할 수 있음을 확인하기 위해, 경쟁적 결합 검정을 수행하였다. 고정화된 HER3-ECD에 결합하는 MEHD7945A는 EGFR-ECD의 양이 증가됨에 따라 용량-의존적 방식으로 감소되었다. 역으로, MEHD7945A는 고정화된 EGFR-ECD로부터 가용성 HER3-ECD 단백질에 의해 경쟁되었다. 예상된 바와 같이, 그의 상대 결합 상수를 고려하면, 고정화된 HER3-ECD에 MEHD7945A의 결합과 경쟁하기 위해 더 높은 농도의 가용성 EGFR-ECD가 필요하였다 (도 1). 도 1에서의 결과는 MEHD7945A 농도 대 OD로 표기되었다. 검정은, 명시된 바와 같이, 명시된 가용성 경쟁자의 존재 하에 고정화된 HER3-ECD 또는 EGFR-ECD에 MEHD7945A의 결합을 조사하였다: 1× = 0.02 ㎍/ml, 10× = 0.2 ㎍/ml, 100× = 2 ㎍/ml, 1000× = 20 ㎍/ml. 도 1에서의 결과는 DL11f 농도 대 OD로서 표기하였다.
실시예 2
MEHD7945A는 EGFR 및 HER2 / HER3 -의존적 신호전달을 억제한다
세포 신호전달 검정에서 MEHD7945A의 이중 활성을 측정하였다. HER3에 대한 억제 기능을 평가하기 위해, NRG 처리가 HER2/HER3 경로를 강력하게 활성화하는 MCF-7 세포를 사용하였다. NRG 자극 전에 MEHD7945A를 이용한 처리는 용량-의존적 방식으로 HER3의 인산화를 강력하게 억제하였고, AKT 및 ERK1/2의 인산화를 현저히 감소시켰다 (도 2a). MEHD7945A는 HER3의 인산화를 억제하였고 (IC50 0.05 ㎍/ml), AKT의 인산화를 억제하였고 (IC50 값 0.19 ㎍/ml), ERK1/2의 인산화를 억제하였다 (IC50 값 1.13 ㎍/ml). HER3에 대한 필적하는 결합 친화도를 갖는, HER3에 대한 단일특이적 항체, 항-HER3를 이용한 처리는 유사한 결과를 달성하였다. 항-HER3은 HER3의 인산화를 억제하였고 (IC50 0.12 ㎍/ml), AKT의 인산화를 억제하였고 (IC50 값 0.74 ㎍/ml), ERK1/2의 인산화를 억제하였다 (IC50 값 1.83 ㎍/ml). EGFR-NR6 세포를 MEHD7945A로 전처리한 후에 리간드 자극하였고 DL11f는 EGFR 및 ERK1/2의 인산화를 억제한 (IC50 값 각각 0.03 및 0.16 ㎍/ml) 것으로 측정되었다 (도 2b). 단일특이적 EGFR 항체 세툭시맙이 EGFR의 인산화 및 하류 신호전달 분자를 억제하는데 더 효과적이었고, 이는 EGFR에 대한 더 높은 결합 친화도로 인한 것일 수 있었다. 게다가, 베타셀룰린- 및 암피레귤린-유도 EGFR 인산화가 또한 MEHD7945A에 의해 억제되었다. MEHD7945A는 ERK1/2 및 AKT 경로를 A431 및 BxPC3 세포에서 항-HER3과 세툭시맙의 조합물과 같이 강력하게 억제하였다.
검정을 다음과 같이 수행하였다. 명시된 농도의 MEHD7945A 또는 항-HER3으로 처리된 MCF-7 세포를 10분 동안 0.5 nM NRG로 자극하였다. 세포 용해물을 면역블롯팅하여 pHER3 (Tyr1289), pAKT (Ser473), pERK1/2 (Thr202/Tyr204), 및 총 HER3을 검출하였다. 도 2a. EGFR-NR6 세포를 1시간 동안 명시된 농도로 MEHD7945A 또는 세툭시맙으로 처리한 후에 10분 동안 5 nM TGF-α로 자극하였다. 세포 용해물을 면역블롯팅에 적용시켜, pERK1/2 (Thr202/Tyr204), 총 EGFR, 및 인산화 EGFR을 검출하였다. EGFR-NR6 세포는 단지 EGFR을 발현하기 때문에 EGFR의 모든 가능한 인산화 부위를 pTyr 항체를 사용하여 검출하였다.
실시예 3
MEHD7945A는 수많은 암 모델에서 활성이다
Fadu 이종이식편 모델, 두경부 편평세포 암종 모델에서 생체내 활성
MEHD7945A, 시판되는 항-EGFR 항체, 및 항-HER3 항체를 Fadu 세포 (ATCC HTB-43, 버지니아주 매너서스) 유래의 확립된 종양을 가진 마우스에서 시험하였다. 5x106개의 FaDu 세포를 CB17 SCID 마우스에 피하로 접종하였다. 종양의 크기가 유사한 동물을 다음과 같이 치료 코호트 (n=9/군)로 무작위화하였다: 비히클 (MEHD7945A 제제 완충제), 항-EGFR 항체 (25 mg/kg), 항-HER3 항체 (50 mg/kg), 및 MEHD7945A (25 mg/kg). 치료는 복강내로 투여하였고, 무작위화한 당일에 2x 부하 용량 (각각 50 또는 100 mg/kg)으로 시작하여 총 4회의 치료 동안 매주 계속하였다. 도 3에 나타낸 바와 같이, MEHD7945A는 FaDu 두경부 암 모델에서 활성이고, 항-EGFR 특이적 또는 항-HER3 특이적 항체 중 어느 하나보다 종양 성장을 억제하는데 더 효과적이다.
MEHD7945A는 추가적 암 유형에서 활성이다
도 4는 MEHD7945A가 암 유형에 대해 세툭시맙 또는 단일특이적 항-HER3 항체의 상대 활성뿐만 아니라 활성을 나타내는 추가적 암 유형의 일부의 요약을 제공한다. 이 요약을 생성하는데 사용된 검정의 세부 사항은 WO 2010/108127에 제공되어 있다. 간결히 설명하면, 마우스를 25 mg/kg MEHD7945A, 25 mg/kg 세툭시맙, 50 mg/kg 항-HER3 또는 25 mg/kg 세툭시맙 플러스 50 mg/kg 항-HER3의 조합물로, 4 주기 동안 1주 1회 치료하였다. MAXF449, OVXF550 및 LX983을 30 mg/kg MEHD7945A, 30 mg/kg 세툭시맙, 60 mg/kg 항-HER3 또는 30 mg/kg 세툭시맙 플러스 60 mg/kg 항-HER3의 조합물로, 4 주기 동안 1주 1회 치료하였다. 초기 용량은 모든 치료에 대해 2x 부하 용량이었다. 퍼센트 종양 성장 억제 (TGI)를 연구의 마지막 날을 기초로 하여 각각의 연구에 대해 계산하였고, 여기서 대부분의 마우스는 비히클 군에 유지되었다. 25% 미만의 TGI는 -로서 나타내고, 25-50 % 사이의 TGI는 +로 나타내고, 51-75% 사이의 TGI는 ++로서 나타내고, 76% 초과의 TGI는 +++로서 나타냈다. NSCLC= 비-소세포 폐암, HNSSC= 두경부 편평세포 암종, CRC= 결장직장 암, n/a= 적용 불가능. OVXF550, MAXF449 및 LXF983 모델은 인간 환자 유래된 이식 모델이다.
실시예 4
MEHD7945A와 GDC -0973 또는 GDC - 0623 중 어느 하나의 조합물은 단일 작용제 요법에 의해 제공된 pERK 억제보다 더 양호한 pERK 억제를 초래한다.
단일 작용제로서 MEK 억제제 중 어느 하나를 이용한 치료는 pAkt 수준을 증가시켰으며, 한편 조합 요법은 pAKT 수준을 기준선 수준으로 감소시켰다. 더욱이, MEHD7945A와 GDC-0973 또는 GDC-0623 중 어느 하나의 조합물은 단일 작용제 요법보다 더 양호한 Kras 돌연변이 모델에서의 pERK 억제를 초래하였다. 도 7. 이 검정에서 MEHD7945A는 10 ㎍/ml, GDC-0973은 1 μM, GDC-0623은 μM, 및 헤레귤린 (HRG)은 10 nM로 존재하였다.
실시예 5
MEHD7945A 및 GDC -0973 또는 GDC - 0623 중 어느 하나를 이용한 조합 요법은 CRC KRAS 돌연변이 암의 임상전 모델에서 단독요법보다 더 우세하였다.
KRAS 돌연변이 결장직장 암의 마우스 LS180 이종이식편 종양 모델을 단일 작용제로서 MEHD7945A, GDC-0973 및 GDC-0623로 및 MEHD7945A와 GDC-0973 및 MEHD7945A와 GDC-0623로 이루어진 조합물로 치료하였다. 치료 군은 다음과 같았다: 01 - 비히클 대조군; 03- GDC-0973 (10 mg/kg, PO, QD); 04-GDC-0623 (5 mg/kg, PO, QD); 06 - MEHD7945A (25 mg/kg, IV, QW); 08- GDC-0973 (10 mg/kg, PO, QD) + MEHD7945A (25 mg/kg, IV, QW); 09- GDC-0623 (5 mg/kg, PO, QD) + MEHD7945A (25 mg/kg, IV, QW).
종양 부피를 치료 과정에 걸쳐 측정하고 결과는 도 8에 나타냈다. 도 8에 나타낸 바와 같이, MEHD7945A와 GDC-0973 또는 GDC-0623 중 어느 하나의 조합물은 단일 작용제 치료보다 더 우세하였다.
실시예 6
KRAS 돌연변이 결장직장 세포주에서 MEHD7945A와 GDC -0973의 조합물의 시험관내 효과
RAS/RAF/MEK 및 PI3K/AKT 경로의 억제를 KRAS-돌연변이 결장직장 세포주에서 MEHD7945A 및 코비메티닙 또는 두 작용제의 조합물을 사용하여 시험관내에서 탐구하였다. 두개의 KRAS 돌연변이 결장직장 세포주를 선택하여 네거티브 피드백 루프의 억제로 인해 코비메티닙에 의한 인산화 AKT (pAKT)의 잠재적인 상향조절을 평가하였다. MEK 억제에 대한 pAKT의 상향조절은 몇몇 세포계에 기재되어 있다 (Mirzoeva et al. 2009; Diep et al 2011; Turke et al. 2012). 게다가, 본 발명자들은 코비메티닙 처리에 MEHD7945A의 부가가 pAKT 및 pERK1/2 억제를 증진시킬 수 있는지를 조사하였다. LS180 세포를 10 ㎍/mL MEHD7945A, 0.05 μM 코비메티닙, 또는 그의 조합물로 1시간 동안 전처리한 후에 12분 동안 5 nM TGFα로 자극하였다. DLD-1 세포를 10 ㎍/mL MEHD7945A, 0.025 μM 코비메티닙, 또는 그의 조합물로 1시간 동안 전처리한 후에 12분 동안 5 nM TGFα로 자극하였다. 세포 용해물을 면역블롯팅하여 EGFR (pEGFR1068)의 인산화, AKT (pAKTS473)의 인산화, 및 ERK1/2 (pERK1/2 T202/Y204)의 인산화, 및 EGFR, AKT, 또는 ERK1/2의 총 단백질 수준을 검출하였다. 결과는 도 9에 나타냈다 (좌측 패널 = LS180 세포, 우측 패널 = DLD-1 세포) (EGFR = 표피 성장 인자 수용체; ERK = 세포외 신호전달 조절된 키나제; p = 인산화됨; TGFα= 형질전환 성장 인자 α)
코비메티닙으로 처리된 TGFα-자극 LS180 또는 DLD-1 세포는 AKT의 증가된 인산화를 나타냈다 (도 9, 대조군 용해물 (레인 2)과 비교된 레인 4, MEK 억제제-유도 피드백 루프의 존재를 시사함 (Mirzoeva et al. 2009; Diep et al 2011; Turke et al. 2012)).
저용량의 코비메티닙 (LS180 세포의 경우 0.05 μM 및 DLD-1 세포의 경우 0.025 μM) (도 9의 좌측 및 우측 패널 각각 참조)을 이용한 ERK1/2 인산화의 단지 부분적 억제가 달성되었다. 그러나, 저용량의 조합된 코비메티닙 플러스 MEHD7945A는 두 세포주 모두에서 pERK 및 pAKT의 강한 하향조절을 초래하였다 (도 9, 레인 5 참조). 도 9에서, 좌측 패널은 1시간 동안 10 ㎍/mL MEHD7945A, 0.05 μM 코비메티닙, 또는 조합물로 전처리한 후에 12분 동안 5 nM TGFα로 자극한 LS180 세포를 디스플레이한다. 우측 패널은 1시간 동안 10 ㎍/mL MEHD7945A, 0.025 μM 코비메티닙, 또는 조합물로 전처리한 후에 12분 동안 5 nM TGFα로 자극한 DLD-1 세포를 디스플레이한다. 세포 용해물을 면역블롯팅하여 EGFR (pEGFR1068)의 인산화, AKT (pAKTS473)의 인산화, 및 ERK1/2 (pERK1/2 T202/Y204)의 인산화, 및 EGFR, AKT, 또는 ERK1/2의 총 단백질 수준을 검출하였다.
KRAS-돌연변이 세포주에서 MEK1/2 및 EGFR/HER3의 조합된 억제의 항-증식 효과를 시험하기 위해, LS180 세포를 5 ㎍/mL의 MEHD7945A의 존재 또는 부재 하에 증가 농도의 코비메티닙 (0.17-10,000 nM)으로 처리하였다. MEHD7945A와 코비메티닙의 조합물은 코비메티닙 단독의 항-증식 효과와 비교시 세포 생존력의 더 강한 감소를 초래하였다. 결과를 도 10에 나타냈다 (결과는 SMI (소분자 억제제) 농도에 대해 플롯팅된 RFU (상대 형광 단위)로서 표기하였다. 데이터 분석을 위해 4-파라미터 곡선-피팅 프로그램을 사용하였다. 데이터는 3개의 독립적인 실험을 나타낸다).
실시예 7
LS180 및 DLD -1 이종이식편 모델에서 MEHD7945A와 코비메티닙의 조합물 연구
MEHD7945A와 코비메티닙의 조합물을 KRAS-돌연변이 결장직장 이종이식편 모델 LS180 및 DLD-1에서 수행하였다. 이들 모델 둘 다를 선택하였는데, 그 이유는 그의 KRAS-돌연변이 상태 및 그의 EGFR 및 HER3 발현 때문이었다. 코비메티닙을 수용액으로서 21일 동안 1일 1회, 3 또는 10 mg/mL로 경구로 투여하였다. MEHD7945A를 21일에 이를 때까지 1주 1회 IV 투여하였다. 종양 크기 및 체중을 연구 과정에 걸쳐 주 2회 기록하였다. 종양 부피가 2000 mm3을 초과하였을 때 또는 체중 감소가 그의 개시 중량의 ≥ 20%인 경우 마우스를 신속히 안락사시켰다.
시간 경과에 따른 동일 동물로부터의 종양 부피의 반복 측정을 적절히 분석하기 위해, 혼합-모델 접근법을 사용하였다 (Pinheiro et al. 2009). 이러한 접근법은 연구 종료 전에 동물의 미-치료-관련 종결로 인한 보통의 드롭-아웃 속도 및 반복 측정 둘 다를 해결하였다. 이 분석을 사용하여 종양 성장 억제를 비히클의 백분율 (%TGI) 또는 종양 진행까지의 시간 (TTP)으로서 측정하였다.
LS180 모델
무작위화 후에, LS180 종양 보유 마우스에게 21일 동안 1일 1회 (QD) 경구 (PO) 위관영양 용량의 0 (비히클), 3, 또는 10 mg/kg 코비메티닙 (유리-염기 당량으로서 표기)을 제공하였다. 마우스에게 총 3회 주사 동안 1주당 1회 (QW) 정맥내 (IV) 볼루스 주사를 통해 25 mg/kg의 MEHD7945A를 제공하였다. 두 작용제 모두를 받은 군에서, 코비메티닙을 먼저 투여한 직후에 MEHD7945A를 투여하였다.
코비메티닙을 3 또는 10 mg/kg으로 또는 MEHD7945A를 25 mg/kg으로 투여하여 각각 28%, 63%, 및 44% TGI를 초래하였다. 조합물 중의 코비메티닙 및 MEHD7945A는 단일-작용제 활성과 비교하여 더 강한 항-종양 활성을 가졌다. 코비메티닙 3 및 10 mg/kg과 MEHD7945A 25 mg/kg은 각각 48% 및 79% TGI를 초래하였다. 데이터는 도 11a에 나타냈고, 연구는 도 11b에 요약하였다. 도 11에서 CI = 신뢰 구간; HB#8 = 히스티딘 완충제 8; MCT = 0.5% (w/v) 메틸셀룰로스, 0.2% (w/v) 폴리소르베이트 80; TGI =종양 성장 인자; w/v =부피당 중량이다.
DLD -1
무작위화 후에, DLD-1 종양 보유 마우스에게 21일 동안 QD PO 위관영양 용량의 0 (비히클), 3, 또는 10 mg/kg 코비메티닙 (유리-염기 당량으로서 표기)을 제공하였다. 마우스는 총 3회 주사 동안 QW IV 볼루스 주사를 통해 25 mg/kg의 MEHD7945A를 공급 받았다. 두 작용제 모두를 받은 군에서, 코비메티닙을 먼저 투여한 직후에 MEHD7945A를 투여하였다.
코비메티닙을 3 또는 10 mg/kg으로 또는 MEHD7945A를 25 mg/kg으로 투여하여 각각 39%, 62%, 및 62% TGI를 초래하였다. 그러나, 코비메티닙 3 및 10 mg/kg과 MEHD7945A 25 mg/kg의 조합물은 각각 90% 및 108% TGI를 초래하였다. 데이터는 도 12a에 나타냈고, 연구는 도 12b에 요약하였다.
실시예 8
췌장 BxPC3 이종이식편 모델에서 MEHD7945A와 코비메티닙의 조합물 연구
무작위화 후에, 마우스에게 21일 동안 QD PO 위관영양 용량의 0 (비히클), 1, 또는 5 mg/kg 코비메티닙 (유리-염기 당량으로서 표기)을 제공하였다. 마우스에게 총 3회 주사 동안 QW IV 볼루스 주사를 통해 25 mg/kg의 MEHD7945A를 제공하였다. 두 작용제 모두를 받은 군에서, 코비메티닙을 먼저 투여한 직후에 MEHD7945A를 투여하였다.
코비메티닙을 1 및 5 mg/kg으로 및 MEHD7945A를 25 mg/kg으로 투여하여 각각 88%, 109%, 및 107% TGI를 초래하였다. 조합된 코비메티닙 1 또는 5 mg/kg과 MEHD7945A 25 mg/kg은 각각 113% 및 114% TGI를 초래하였다. 데이터는 도 13a에 나타냈고, 연구는 도 13b에 요약하였다. 투여 21일 후에 2배의 (2x) 초기 종양 부피에 대한 종양 진행까지의 시간 (TTP)을 각각의 군에 대해 모니터링하였다 (도 13c 참조). 비히클-대조군 부문에서, TTP 2x는 4.5일이었다. 단일 작용제 코비메티닙을 이용한 마우스의 치료는 TTP 2x를 1 mg/kg에서 22일 및 5 mg/kg에서 33일로 연장하였다. 단일 작용제 MEHD7945A를 이용한 마우스의 치료는 TTP 2x를 39.5일로 연장하였다. MEHD7945A 플러스 코비메티닙의 조합물 (1 mg/kg에서)은 TTP 2x를 50.5일로 연장하였다. 마찬가지로, MEHD7945A 플러스 코비메티닙의 조합물 (5 mg/kg)은 TTP 2x를 56일로 연장하였다. 완전 반응 (CR)으로서 정의된, 종양 부피에서의 100% 감소는 5 mg/kg 코비메티닙 플러스 MEHD7945A 군에서 3마리 동물에서 나타났으나, 임의의 다른 치료 군에서는 나타나지 않았다 (도 13c 참조). 도 13에서 CI = 신뢰 구간; CR = 완전 반응 (종양 부피에서의 100% 감소); HB#8 = 히스티딘 완충제; MCT = 0.5% (w/v) 메틸셀룰로스, 0.2% (w/v) 폴리소르베이트 80; NA = 달성되지 않음; PR = 부분 반응 (종양 부피에서의 ≥ 50-99% 감소); TTP = 2배 (2x) 또는 5배 (5x)의 초기 종양 부피에 대한 종양 진행까지의 시간은 군을 일 수의 평균으로 나타낸다.
본원에 인용된 모든 문서는 참조로 포함된다. 본 발명의 특정 실시양태가 기재되고, 많은 세부 사항이 예시를 목적으로 제시되어 있지만, 특정의 세부 사항은 본 발명의 기본 원리에서 벗어나지 않으면서 변화될 수 있다. 수많은 변형 및 변경이 통상의 기술자에게 용이하게 명백할 것이기 때문에, 본 발명을 상기 기재된 바와 같이 나타낸 정확한 구성 및 방법으로 제한하고자 하는 것이 아니다. 따라서, 모든 적합한 변형 및 등가물은 하기 청구범위에 의해 정의된 바와 같은 범위 내에 있는 것으로 간주될 수 있다.
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
Figure pct00012
SEQUENCE LISTING <110> GENENTECH, INC. THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA <120> COMBINATIONS OF A MEK INHIBITOR COMPOUND WITH AN HER3/EGFR INHIBITOR COMPOUND AND METHODS OF USE <130> P5587R1-WO <150> 61/782734 <151> 2013-03-14 <150> 61/902870 <151> 2013-11-12 <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain Variable Domain <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Gly Asp 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Glu Ile Ser Ala Ala Gly Gly Tyr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Ser Arg Val Ser Phe Glu Ala Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 2 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light Chain Variable Domain <400> 2 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Ala Thr Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Glu Pro Glu Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 3 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-H1 <400> 3 Leu Ser Gly Asp Trp Ile His 1 5 <210> 4 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-H2 <400> 4 Val Gly Glu Ile Ser Ala Ala Gly Gly Tyr Thr Asp 1 5 10 <210> 5 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-H3 <400> 5 Ala Arg Glu Ser Arg Val Ser Phe Glu Ala Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-L1 <400> 6 Asn Ile Ala Thr Asp Val Ala 1 5 <210> 7 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-L2 <400> 7 Ser Ala Ser Phe 1 <210> 8 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> HVR-L3 <400> 8 Ser Glu Pro Glu Pro Tyr Thr 1 5 <210> 9 <211> 451 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain <400> 9 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Gly Asp 20 25 30 Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Glu Ile Ser Ala Ala Gly Gly Tyr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Ser Arg Val Ser Phe Glu Ala Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 10 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light Chain <400> 10 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Ala Thr Asp 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Glu Pro Glu Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210

Claims (32)

  1. 과다증식성 장애의 치료에서의 공동 또는 순차적 사용을 위한 (i) GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 (ii) MEHD7945A를 포함하는 제약 제품.
  2. 제1항에 있어서, 과다증식성 장애가 암인 제약 제품.
  3. 제2항에 있어서, 암이 KRAS 돌연변이와 연관된 것인 제약 제품.
  4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 암이 AKT 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 제약 제품.
  5. 제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 PI3K 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 제약 제품.
  6. 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 결장직장암, 중피종, 자궁내막암, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 흑색종, 위암, 결장암, 신장암, 두경부암 및 교모세포종으로부터 선택되는 것인 제약 제품.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 제약 제품.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 제약 제품.
  9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 동시에 투여되는 것인 제약 제품.
  10. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A가 순차적으로 투여되는 것인 제약 제품.
  11. 과다증식성 장애를 가진 환자의 삶의 질을 개선시키기 위한 공동 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 (i) GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 (ii) MEHD7945A를 포함하는 제약 제품.
  12. 과다증식성 장애의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, (i) GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제1 조성물; 및 (ii) MEHD7945A를 포함하는 제2 조성물을 포함하는 제약 제품의 용도.
  13. 제12항에 있어서, 과다증식성 장애가 암인 용도.
  14. 제13항에 있어서, 암이 KRAS 돌연변이와 연관된 것인 용도.
  15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 암이 AKT 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 용도.
  16. 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 PI3K 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 용도.
  17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 결장직장암, 중피종, 자궁내막암, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 흑색종, 위암, 결장암, 신장암, 두경부암 및 교모세포종으로부터 선택되는 것인 용도.
  18. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 용도.
  19. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 용도.
  20. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 동시에 투여되는 것인 용도.
  21. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A가 순차적으로 투여되는 것인 용도.
  22. 환자에서 과다증식성 장애를 치료하기 위한,
    GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A,
    용기, 및
    GDC-0068 또는 GDC-0941 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 MEHD7945A의 투여를 지시하는 포장 삽입물 또는 표지
    를 포함하는 키트.
  23. 환자에게 치료 유효량의 (i) GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 (ii) MEHD7945A를 투여하는 것을 포함하는, 환자에서 과다증식성 장애를 치료하는 방법.
  24. 제23항에 있어서, 과다증식성 장애가 암인 방법.
  25. 제24항에 있어서, 암이 KRAS 돌연변이와 연관된 것인 방법.
  26. 제24항 또는 제25항에 있어서, 암이 AKT 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 방법.
  27. 제24항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 PI3K 돌연변이, 과다발현 또는 증폭과 연관된 것인 방법.
  28. 제24항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 암이 결장직장암, 중피종, 자궁내막암, 췌장암, 유방암, 폐암, 난소암, 전립선암, 흑색종, 위암, 결장암, 신장암, 두경부암 및 교모세포종으로부터 선택되는 것인 방법.
  29. 제23항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 방법.
  30. 제23항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 조합되어 투여되는 것인 방법.
  31. 제23항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염이 MEHD7945A와 동시에 투여되는 것인 방법.
  32. 제23항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, GDC-0973 또는 GDC-0623 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 MEHD7945A가 순차적으로 투여되는 것인 방법.
KR1020157028135A 2013-03-14 2014-03-14 Mek 억제제 화합물과 her3/egfr 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법 Withdrawn KR20150127203A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361782734P 2013-03-14 2013-03-14
US61/782,734 2013-03-14
US201361902870P 2013-11-12 2013-11-12
US61/902,870 2013-11-12
PCT/US2014/027250 WO2014152358A2 (en) 2013-03-14 2014-03-14 Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20150127203A true KR20150127203A (ko) 2015-11-16

Family

ID=50942306

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020157028135A Withdrawn KR20150127203A (ko) 2013-03-14 2014-03-14 Mek 억제제 화합물과 her3/egfr 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20140271634A1 (ko)
EP (1) EP2968540A2 (ko)
JP (1) JP2016515132A (ko)
KR (1) KR20150127203A (ko)
CN (1) CN105246508A (ko)
AU (1) AU2014239903A1 (ko)
BR (1) BR112015022576A2 (ko)
CA (1) CA2903480A1 (ko)
IL (1) IL240664A0 (ko)
MX (1) MX2015010854A (ko)
RU (1) RU2015138576A (ko)
SG (1) SG11201507477XA (ko)
WO (1) WO2014152358A2 (ko)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR105483A1 (es) 2015-06-30 2017-10-11 Exelixis Inc Sal de fumarato cristalina de (s)-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-yodofenilamino)fenil][3-hidroxi-3-(piperidin-2-il)azetidin-1-il]-metanona
JP7313684B2 (ja) 2016-11-21 2023-07-25 キュレアブ ゲーエムベーハー 抗ｇｐ７３抗体及びイムノコンジュゲート
WO2018218633A1 (en) * 2017-06-02 2018-12-06 Beijing Percans Oncology Co. Ltd. Combination therapies for treating cancers
WO2019195959A1 (en) 2018-04-08 2019-10-17 Cothera Biosciences, Inc. Combination therapy for cancers with braf mutation
SG11202101397TA (en) 2018-08-13 2021-03-30 Beijing Percans Oncology Co Ltd Biomarkers for cancer therapy
AU2022320304A1 (en) * 2021-07-27 2024-02-29 Toray Industries, Inc. Medicament for treatment and/or prevention of cancer

Family Cites Families (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
CU22545A1 (es) 1994-11-18 1999-03-31 Centro Inmunologia Molecular Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4943533A (en) 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
WO1990005144A1 (en) 1988-11-11 1990-05-17 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
WO1991003489A1 (en) 1989-09-08 1991-03-21 The Johns Hopkins University Structural alterations of the egf receptor gene in human gliomas
US5959177A (en) 1989-10-27 1999-09-28 The Scripps Research Institute Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5571894A (en) 1991-02-05 1996-11-05 Ciba-Geigy Corporation Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor
JP4124480B2 (ja) 1991-06-14 2008-07-23 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体
GB9114948D0 (en) 1991-07-11 1991-08-28 Pfizer Ltd Process for preparing sertraline intermediates
WO1993006217A1 (en) 1991-09-19 1993-04-01 Genentech, Inc. EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES
FI941572L (fi) 1991-10-07 1994-05-27 Oncologix Inc Anti-erbB-2-monoklonaalisten vasta-aineiden yhdistelmä ja käyttömenetelmä
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
AU661533B2 (en) 1992-01-20 1995-07-27 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
ATE503496T1 (de) 1992-02-06 2011-04-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Biosynthetisches bindeprotein für tumormarker
CA2163345A1 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Susan Adrienne Morgan Antibodies
GB9314893D0 (en) 1993-07-19 1993-09-01 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
PT659439E (pt) 1993-12-24 2002-04-29 Merck Patent Gmbh Imunoconjugados
IL112249A (en) 1994-01-25 2001-11-25 Warner Lambert Co Pharmaceutical compositions containing di and tricyclic pyrimidine derivatives for inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family and some new such compounds
IL112248A0 (en) 1994-01-25 1995-03-30 Warner Lambert Co Tricyclic heteroaromatic compounds and pharmaceutical compositions containing them
US5654307A (en) 1994-01-25 1997-08-05 Warner-Lambert Company Bicyclic compounds capable of inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family
US5789199A (en) 1994-11-03 1998-08-04 Genentech, Inc. Process for bacterial production of polypeptides
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
GB9508538D0 (en) 1995-04-27 1995-06-14 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
US5747498A (en) 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
JPH11507535A (ja) 1995-06-07 1999-07-06 イムクローン システムズ インコーポレイテッド 腫瘍の成長を抑制する抗体および抗体フラグメント類
TR199800012T1 (xx) 1995-07-06 1998-04-21 Novartis Ag Piroloprimidinler ve preparasyon i�in tatbikler.
US5760041A (en) 1996-02-05 1998-06-02 American Cyanamid Company 4-aminoquinazoline EGFR Inhibitors
GB9603095D0 (en) 1996-02-14 1996-04-10 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
GB9603256D0 (en) 1996-02-16 1996-04-17 Wellcome Found Antibodies
US5968511A (en) 1996-03-27 1999-10-19 Genentech, Inc. ErbB3 antibodies
DE69710712T3 (de) 1996-04-12 2010-12-23 Warner-Lambert Co. Llc Umkehrbare inhibitoren von tyrosin kinasen
EP0912559B1 (en) 1996-07-13 2002-11-06 Glaxo Group Limited Fused heterocyclic compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
ID18494A (id) 1996-10-02 1998-04-16 Novartis Ag Turunan pirazola leburan dan proses pembuatannya
US6002008A (en) 1997-04-03 1999-12-14 American Cyanamid Company Substituted 3-cyano quinolines
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
AU7165698A (en) 1997-05-06 1998-11-27 American Cyanamid Company Use of quinazoline compounds for the treatment of polycystic kidney disease
ES2244066T3 (es) 1997-06-24 2005-12-01 Genentech, Inc. Procedimiento y composiciones de glicoproteinas galactosiladas.
TW436485B (en) 1997-08-01 2001-05-28 American Cyanamid Co Substituted quinazoline derivatives
US6040498A (en) 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
WO1999022764A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Genentech, Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
HUP0004286A3 (en) 1997-11-06 2002-01-28 American Cyanamid Co Madison Use of quinazoline derivatives for producing pharmaceutical compositions for treating colonic polyps
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
WO1999029888A1 (en) 1997-12-05 1999-06-17 The Scripps Research Institute Humanization of murine antibody
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
ATE375365T1 (de) 1998-04-02 2007-10-15 Genentech Inc Antikörper varianten und fragmente davon
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
JP3687900B2 (ja) 1998-11-19 2005-08-24 ワーナー−ランバート・カンパニー、リミテッド、ライアビリティ、カンパニー チロシンキナーゼの不可逆的阻害剤であるｎ−［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）キナゾリン−６−イル］アクリルアミド
EP1141024B1 (en) 1999-01-15 2018-08-08 Genentech, Inc. POLYPEPTIDE COMPRISING A VARIANT HUMAN IgG1 Fc REGION
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
ES2601882T5 (es) 1999-04-09 2021-06-07 Kyowa Kirin Co Ltd Procedimiento para controlar la actividad de una molécula inmunofuncional
KR100797667B1 (ko) 1999-10-04 2008-01-23 메디카고 인코포레이티드 외래 유전자의 전사를 조절하는 방법
US7125978B1 (en) 1999-10-04 2006-10-24 Medicago Inc. Promoter for regulating expression of foreign genes
CA2388245C (en) 1999-10-19 2012-01-10 Tatsuya Ogawa The use of serum-free adapted rat cells for producing heterologous polypeptides
AU784983B2 (en) 1999-12-15 2006-08-17 Genentech Inc. Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes
DK2857516T3 (en) 2000-04-11 2017-08-07 Genentech Inc Multivalent antibodies and uses thereof
HU231090B1 (hu) 2000-10-06 2020-07-28 Kyowa Kirin Co., Ltd. Antitest-kompozíciót termelő sejt
US7064191B2 (en) 2000-10-06 2006-06-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
EP1916303B1 (en) 2000-11-30 2013-02-27 Medarex, Inc. Nucleic acids encoding rearranged human immunoglobulin sequences from transgenic transchromosomal mice
EP1423510A4 (en) 2001-08-03 2005-06-01 Glycart Biotechnology Ag ANTIBODY GLYCOSYLATION VARIANTS WITH INCREASED ANTIBODY-DEPENDENT CELLULAR CYTOTOXICITY
HUP0600342A3 (en) 2001-10-25 2011-03-28 Genentech Inc Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
CN102911987B (zh) 2002-04-09 2015-09-30 协和发酵麒麟株式会社 基因组被修饰的细胞
WO2003084569A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Drug containing antibody composition
US20050031613A1 (en) 2002-04-09 2005-02-10 Kazuyasu Nakamura Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa
CA2481656A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells in which activity of the protein involved in transportation of gdp-fucose is reduced or lost
WO2003085119A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. METHOD OF ENHANCING ACTIVITY OF ANTIBODY COMPOSITION OF BINDING TO FcϜ RECEPTOR IIIa
CA2481837A1 (en) 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Production process for antibody composition
CA2488441C (en) 2002-06-03 2015-01-27 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
US7361740B2 (en) 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
DK2289936T3 (en) 2002-12-16 2017-07-31 Genentech Inc IMMUNGLOBULIN VARIATIONS AND APPLICATIONS THEREOF
EP1585767A2 (en) 2003-01-16 2005-10-19 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
WO2005035586A1 (ja) 2003-10-08 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 融合蛋白質組成物
WO2005035778A1 (ja) 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. α1,6-フコシルトランスフェラーゼの機能を抑制するRNAを用いた抗体組成物の製造法
DK2380910T3 (en) 2003-11-05 2015-10-19 Roche Glycart Ag Antigen binding molecules with increased Fc receptor binding affinity and effector function
WO2005053742A1 (ja) 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
MXPA06011199A (es) 2004-03-31 2007-04-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta humanizados.
US7785903B2 (en) 2004-04-09 2010-08-31 Genentech, Inc. Variable domain library and uses
PL1737891T3 (pl) 2004-04-13 2013-08-30 Hoffmann La Roche Przeciwciała przeciw selektynie p
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
NZ553500A (en) 2004-09-23 2009-11-27 Genentech Inc Genentech Inc Cysteine engineered antibodies and conjugates withCysteine engineered antibodies and conjugates with a free cysteine amino acid in the heavy chain a free cysteine amino acid in the heavy chain
EP1838735A2 (en) 2004-12-31 2007-10-03 Genentech, Inc. Polypeptides that bind br3 and uses thereof
SI1934174T1 (sl) 2005-10-07 2011-08-31 Exelixis Inc Inhibitorji MEK in postopki za njihovo uporabo
EP1957531B1 (en) 2005-11-07 2016-04-13 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
US20070237764A1 (en) 2005-12-02 2007-10-11 Genentech, Inc. Binding polypeptides with restricted diversity sequences
AR056857A1 (es) 2005-12-30 2007-10-24 U3 Pharma Ag Anticuerpos dirigidos hacia her-3 (receptor del factor de crecimiento epidérmico humano-3) y sus usos
AR060871A1 (es) 2006-05-09 2008-07-16 Genentech Inc Union de polipeptidos con supercontigos optimizados
WO2008027236A2 (en) 2006-08-30 2008-03-06 Genentech, Inc. Multispecific antibodies
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
DK2716301T3 (en) 2007-02-16 2017-07-31 Merrimack Pharmaceuticals Inc ANTIBODIES AGAINST ERBB3 AND APPLICATIONS THEREOF
CN100592373C (zh) 2007-05-25 2010-02-24 群康科技(深圳)有限公司 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法
CL2008003810A1 (es) 2007-12-19 2009-05-22 Genentech Inc Compuestos derivados de 5-anilino imidazol[1,5-a]piridina o pirazina, inhibidores de la actividad mek quinasa; composiciones farmaceuticas que los contienen; y su uso para tratar trastornos hiperproliferativos y una enfermedad inflamatoria.
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
ES2572728T3 (es) 2009-03-20 2016-06-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Anticuerpos anti-HER biespecíficos
CA2776944A1 (en) * 2009-10-12 2011-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Combinations of a pi3k inhibitor and a mek inhibitor
UA107821C2 (en) 2009-12-22 2015-02-25 Roche Glycart Ag Antibody her3 and its application
BR112013012175A2 (pt) * 2010-11-17 2019-09-24 Hoffmann La Roche combinação, coadministração, uso e método
KR20190133790A (ko) * 2011-08-01 2019-12-03 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 mek 억제제를 사용하는 암 치료 방법
JP2015505959A (ja) * 2011-12-05 2015-02-26 ネステク ソシエテ アノニム 癌を有する患者に治療を選択する方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20140271634A1 (en) 2014-09-18
WO2014152358A2 (en) 2014-09-25
WO2014152358A3 (en) 2014-11-13
CN105246508A (zh) 2016-01-13
JP2016515132A (ja) 2016-05-26
RU2015138576A (ru) 2017-04-19
BR112015022576A2 (pt) 2017-10-24
SG11201507477XA (en) 2015-10-29
IL240664A0 (en) 2015-10-29
EP2968540A2 (en) 2016-01-20
AU2014239903A1 (en) 2015-09-17
MX2015010854A (es) 2016-07-20
CA2903480A1 (en) 2014-09-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6588461B2 (ja) 抗血管新生剤及びｏｘ４０結合アゴニストを含む併用療法
CN115315256A (zh) 用抗tigit拮抗剂抗体治疗癌症的方法
CN110418851A (zh) 癌症的治疗和诊断方法
CN107810011A (zh) 使用抗ox40抗体治疗癌症的方法
US20240424092A1 (en) Methods for treatment of cancer with an anti-tigit antagonist antibody
CN116406291A (zh) 用抗fcrh5/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
JP2016509045A (ja) がんを治療し、薬剤耐性を防止する方法
JP7762198B2 (ja) 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体及び抗ｃｄ７９ｂ抗体薬物コンジュゲートによる処置のための投与
JP2021094022A (ja) 抗ｌｙ６ｇ６ｄ抗体及び使用方法
US10857230B2 (en) Co-therapy comprising a small molecule CSF-1R inhibitor and an agonistic antibody that specifically binds CD40 for the treatment of cancer
KR20150127203A (ko) Mek 억제제 화합물과 her3/egfr 억제제 화합물의 조합물 및 사용 방법
KR20230095119A (ko) 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체를 사용한 치료를 위한 투약
US20220380466A1 (en) Methods for treatment of b cell proliferative disorders with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
US20250228858A1 (en) Anti-cancer combination therapy
TW202448508A (zh) 治療癌症之方法及組成物
CN117440826A (zh) 用抗cd20/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
WO2026019990A1 (en) Methods of treating cancer with anti-ccr8/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023056403A1 (en) Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
KR20250008898A (ko) 항-fcrh5/항-cd3 이중특이성 항체로 치료하기 위한 투약법
HK40056589A (en) Dosing for treatment with anti-tigit and anti-cd20 or anti-cd38 antibodies
HK40102568A (zh) 用於使用抗cd20/抗cd3双特异性抗体和抗cd79b抗体药物缀合物的治疗的给药
HK40019947A (en) Co-therapy comprising a small molecule csf-1r inhibitor and an agonistic antibody that specifically binds cd40 for the treatment of cancer
HK1226956A1 (en) Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20151008

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
PC1203 Withdrawal of no request for examination
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid