KR20080042151A

KR20080042151A - 조직 재생용 기재

Info

Publication number: KR20080042151A
Application number: KR1020087007675A
Authority: KR
Inventors: 요시토 이카다; 시게히코 스즈키; 츠구요시 다이라; 요시타케 다카하시; 겐지 도미하타
Original assignee: 군제 가부시키가이샤
Priority date: 2005-09-09
Filing date: 2006-09-05
Publication date: 2008-05-14
Also published as: KR101224927B1; EP1923078B1; EP1923078A4; CN101257933A; BRPI0615905A2; CA2619785C; JP2007068884A; CA2619785A1; JP5008284B2; BRPI0615905B8; WO2007029677A1; EP1923078A1; AU2006288336B2; US20090143287A1; BRPI0615905B1; US8889171B2; AU2006288336A1

Abstract

본 발명은 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF) 등의 세포 성장 인자의 서방출능을 갖고, 또한 세포가 침입하기 쉬워서 조직의 재생에 적합한 조직 재생용 기재를 제공한다. 구체적으로는, 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 세포 성장 인자를 함유하여 이루어지는 조직 재생용 기재 및 그 제조 방법에 관한 것이다.

염기성 섬유아 세포 성장 인자, 서방출능, 콜라겐, 젤라틴, 생체 흡수성 다공질 기재, 조직 재생용 기재

Description

조직 재생용 기재{TISSUE REGENERATION SUBSTRATE}

본 발명은 조직 재생용 기재에 관한 것이다. 구체적으로는, 열상, 외상 등의 급성 피부 결손창 및 욕창, 궤양 등의 만성 피부 결손창에 피부 조직을 재생시키기 위한 인공 진피 기재 등에 관한 것이다.

피부의 결손이 광범위하게 미치는 경우, 조기에 피부 결손부를 폐쇄할 필요가 있다. 결손된 피부의 재생 방법으로서는, 세포를 사용하지 않고 주형으로서의 콜라겐 스펀지를 생체에 이식하여 생체 내에서 유사 진피 조직을 재생시키는 방법(인공 진피)이 있다. 인공 진피의 경우에는 진피 형상 조직이 재생된 후에 얇은 분층 식피를 실시하거나 배양 표피를 이식할 필요가 있는데, 가능한 한 빨리 진피 성분을 재생시키는 것이 필요하다.

인공 진피의 제조 방법으로서는, 콜라겐 스펀지를 동결 건조하는 방법이 일반적이고, 생체 내에서의 분해 흡수 속도를 제어할 목적으로 가교를 실시하는 일이 많다.

피부 조직의 재생을 촉진시키는 방법으로서는, 어떤 종류의 성장 인자, 예를 들면 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF)를 피부 표면에 도포하는 것을 들 수 있다. 피부로부터 흡수됨으로써 효과는 있지만, 그 효과를 유지하기 위해서는 매일 도포할 필요가 있다. 그래서 성장 인자를 서방출(sustained release)시킴으로써 한 번의 투여로 효과를 지속시키는 방법이 시도되고 있다.

예를 들면 가와이 등은 bFGF함침 젤라틴 마이크로스피어(bFGF-impregnated gelatin microsphere)를 인공 진피에 주입함으로써 bGFG의 서방출 효과와 피부 조직의 생체 내에서의 구축이 촉진되는 것을 명백히 하고 있다(비특허 문헌 1). 또 세포 편입형(cell seeded-type)의 배양 피부를 제작하는 데 있어서도, bFGF함침 젤라틴 마이크로스피어를 첨가함으로써 조직의 구축이 촉진되는 것이 명백하게 되어 있다(비특허 문헌 2).

그러나 이 방법이라면 한 번 마이크로스피어에 bFGF를 함침시킬 필요가 있고, 또한 그 bFGF함침 젤라틴 마이크로스피어를 임상의 현장에서 인공 진피에 주입하는 작업이 필요하게 되어 번잡하다.

그래서 인공 진피 자체에 성장 인자 서방출능을 갖게 할 수 있으면 임상 현장에서 성장 인자를 인공 진피에 도포하는 것만으로 사용하는 것이 가능해져서 간편한 방법으로 될 수 있다.

현재 임상에서 가장 많이 사용되고 있는 세포 성장 인자는 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF)이다. bFGF는 등전점(isoelectric ponit)이 9.6이고, 예를 들면 등전점이 5.0인 젤라틴과 전기적 상호 작용에 의해 흡착한다. 이 특성을 이용하여 산성 젤라틴(등전점 5.0)으로 생긴 마이크로스피어에 bFGF를 흡착시켜서 bFGF 가 흡착된 마이크로스피어를 이용함으로써 생체 내에서 bFGF를 경시적으로 서방출시키는 것이 가능하다(특허 문헌 1, 비특허 문헌 3).

그러나 이 방법에서는 미립자인 마이크로스피어에 일단 bFGF를 흡착시킨 후에 bFGF를 흡착시킨 마이크로스피어를 기재에 주입시키는 등의 수조작이 필요하게 되어 임상 현장에서 이용하는 데는 번잡해서 사용하기 어려운 일면이 있었다.

한편 bFGF가 흡착하기 쉬운 산성 젤라틴으로 인공 진피 재료를 제작하고, 그곳에 bFGF를 흡착시키면 서방출능을 갖는 기재가 된다고 생각되지만, 생체 내에 있어서 젤라틴은 콜라겐과 비교하면 세포의 침입 등에서 뒤떨어지기 때문에 조직의 재생에는 부적합하다. bFGF를 적량 흡착시키는 것이 가능하고, 한편으로 주위의 세포가 침입하기 쉬운 기재가 요망된다.

또한 특허 문헌 2에는 젤라틴과 콜라겐을 필수 기재 구성 성분으로 하여 자외선이 조사되어 가교되어 있는 의료용 기재가 세포 배양 담체, 배양 피부 등에 이용되는 것이 기재되어 있다.

특허 문헌 1: 일본특허공개 2003-325652호 공보

특허 문헌 2: 일본특허공개 평11-47258호 공보

비특허 문헌 1: K.Kawai et al., Biomaterials, Vol.21, p.489-499(2000)

비특허 문헌 2: Saso et al.,, 일본 열상 학회지, 제 29권, p.24-30

비특허 문헌 3: Y.Tabata et al., J. Controlled Release, Vol.31, p.189- 199(1994)

본 발명은 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF) 등의 세포 성장 인자의 서방출능을 갖고, 또한 세포가 침입하기 쉬워 조직의 재생에 적합한 조직 재생용 기재를 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명자는 상기의 과제를 해결하기 위해 예의 연구를 실시한 결과, 콜라겐과 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 bFGF를 함유시켜서 얻어지는 기재가 bFGF의 양호한 서방출성을 갖고, 또한 세포가 침입하기 쉬워서 피부 조직을 재생시키기 위한 조직 재생용 기재로서 가장 적합한 것을 발견해냈다. 이 지견에 기초하여 더욱 연구를 거듭해서 본 발명을 완성하는 데 이르렀다.

즉 본 발명은 이하의 조직 재생용 기재 및 그 제조 방법을 제공한다.

항 1. 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 세포 성장 인자를 함유하여 이루어지는 조직 재생용 기재.

항 2. 생체 흡수성 다공질 기재의 젤라틴의 함유량이 1∼70중량％인 항 1에 기재된 조직 재생용 기재.

항 3. 세포 성장 인자가 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF)인 항 1 또는 2에 기재된 조직 재생용 기재.

항 4. 37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 3일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 조직 재생용 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 7중량％ 이하인 항 1∼3 중 어느 한 항에 기재된 조직 재생용 기재.

항 5. 37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 7일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 조직 재생용 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 15중량％ 이하인 항 1∼4 중 어느 한 항에 기재된 조직 재생용 기재.

항 6. 평균 구멍 직경 10∼500㎛의 연속 구멍을 갖는 항 1∼5 중 어느 한 항에 기재된 조직 재생용 기재.

항 7. 생체 내에서 3주일 이내에 분해 흡수되는 항 1∼6 중 어느 한 항에 기재된 조직 재생용 기재.

항 8. 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 수성 혼합물을 동결 건조하는 공정, 얻어지는 건조체를 가교 처리하는 공정 및 얻어지는 가교체에 세포 성장 인자를 함유시키는 공정을 포함하는 조직 재생용 기재의 제조 방법.

이하 본 발명을 상세히 서술한다.

Ⅰ. 조직 재생용 기재

본 발명의 조직 재생용 기재는 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성의 다공질 기재에 세포 성장 인자를 함유하여 이루어진다. 본 발명의 조직 재생용 기재란, 널리 재생 의료에 이용되는 기재를 의미하고, 예를 들면 피부, 뼈, 연골, 심근, 지방 등의 재생 의료에 이용되는 기재이다. 특히 피부(진피)의 조직 재생용 기재, 즉 인공 진피 기재로서 가장 적합하게 이용된다.

본 발명의 조직 재생용 기재에 사용되는 생체 흡수성 다공질 기재는 콜라겐 및 젤라틴을 필수 성분으로서 함유한다.

상기 젤라틴으로서는 특별히 한정은 없고, 예를 들면 소, 돼지, 닭, 연어 등의 뼈, 힘줄, 가죽 등에 유래하는 것을 이용할 수 있다. 상기 젤라틴은 산 처리 또는 알칼리 처리되어 있는 것이 바람직하다. 산 처리된 젤라틴은 양전하(positive charge)로, 알칼리 처리된 젤라틴은 음전하(negative charge)로 대전되는 것에서, 이 전하를 이용하면 양전하 또는 음전하를 갖는 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 정전 결합에 의해 각종 세포 성장 인자를 변성시키지 않고 결합시키는 것이 가능하게 된다. 그 때문에 세포 성장 인자(예를 들면 bFGF)의 양호한 서방출이 가능해진다.

상기 콜라겐으로서는 특별히 한정은 없고, 소, 돼지 등의 피부나 힘줄 등에 유래하는 것을 이용할 수 있다. 항원성을 배제하여 보다 안전성을 높이는 관점에서, 콜라겐을 프로테아제나 펩신 등의 효소로 처리하여 텔로펩티드(telopeptide)를 가능한 한 제거한 아텔로콜라겐(atelocollagen)이 바람직하다. 아텔로콜라겐에는 Ⅰ∼Ⅳ형이 있는데, 기재의 용도에 따라서 선택할 수 있다. 배양 피부나 창상 피복재로서 이용하는 경우 진피의 구성 성분에 가까운 Ⅰ 또는 Ⅲ형을 이용하는 것이 바람직하다. 생체 흡수성 다공질 기재에 콜라겐을 함유시킴으로써 해당 기재로의 세포의 침입이 용이하게 된다.

생체 흡수성 다공질 기재에 포함되는 젤라틴의 함유량은 1∼70중량％ 정도, 바람직하게는 20∼60중량％ 정도, 보다 바람직하게는 30∼50중량％ 정도이다. 젤라틴의 함유량이 지나치게 많아지면 생체 흡수성 다공질 기재에 주위의 조직이 들어가기 어려워지고, 한편 젤라틴의 함유량이 지나치게 적으면 젤라틴과 세포 성장 인자가 정전적 상호 작용에 의한 흡착이 약해져서 서방출 성능이 저하된다. 따라서 상기한 함유량의 범위이면 젤라틴 및 콜라겐의 효과가 유효하게 발휘되어 높은 치료 효과를 얻을 수 있다.

생체 흡수성 다공질 기재는 3차원적으로 조직을 재생하는 기재로 되기 때문에 다공질 구조를 갖고 있는 것이 바람직하다. 특히 다수의 연속 구멍(연속된 미세 소구멍)을 갖고 있는 것이 바람직하다. 이러한 구조인 것에 의해 본 발명의 조직 재생용 기재에 세포를 파종했을 때에는 세포가 미세 소구멍 내에 침입하여 접착해서 3차원적으로 확산되는 것이 가능하게 되고, 또 세포를 파종하지 않고 이식한 경우에도 주변의 세포가 용이하게 침입할 수 있다. 또한 접착된 세포에 충분한 영양을 공급하는 것이 가능하게 되어 세포를 정상적으로 증식 및 분화시킬 수 있다.

생체 흡수성 다공질 기재의 미세 소구멍의 평균 구멍 직경으로서는, 재생하고자 하는 조직 또는 기관에 의해 최적의 값을 선택할 수 있지만, 바람직하게는 10∼500㎛ 정도, 보다 바람직하게는 50∼300㎛ 정도이다. 10㎛ 미만이면 생체 흡수성 다공질 기재의 내부에 세포가 침입할 수 없어서 세포 접착성이 극단적으로 뒤떨어지거나, 접착된 세포가 3차원적으로 확산될 수 없는 경우가 있고, 500㎛를 넘으면 세포의 밀도가 낮아져서 조직 또는 기관을 재생할 수 없는 경우가 있다.

본 발명의 조직 재생용 기재는 상기의 생체 흡수성 다공질 기재의 다공질 구조가 그대로 반영된다.

본 발명의 조직 재생용 기재는 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 세포 성장 인자를 함유하여 이루어진다. 세포 성장 인자로서는, 혈관 신생을 촉진하고, 세포의 활성을 높이는 것이면 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 혈관 신생 작용을 갖는 세포 성장 인자, 구체적으로는, 염기성 섬유아 세포 증식 인자(basic fibroblast growth factor(bFGF)), 산성 섬유아 세포 증식 인자(acid fibroblast growth factor(aFGF)), 혈관 내피 세포 증식 인자(vascular endothelial cell growth factor(VEGF)), 간 세포 증식 인자(hepatocyte growth factor(HGF)), 혈장판 유래 증식 인자(plasma-derived growth factor(PDGF)), 엔지오포이에틴(angiopoietin), 트랜스포밍 증식 인자(transforming growth factor(TFG))를 들 수 있다. 본 발명의 특히 바람직한 실시 형태로서는, bFGF이다.

본 발명의 조직 재생용 기재에 있어서의 세포 성장 인자의 함유량은, 그 재생하는 대상 조직 등에 따라서 적절히 선택할 수 있어서 특별히 한정은 없다. 바람직하게는 1㎠에 대하여 0.1㎍∼100㎍ 정도, 바람직하게는 1㎍∼50㎍ 정도 함유하고 있으면 좋다.

본 발명의 조직 재생용 기재는 장시간에 걸쳐서 세포 성장 인자를 안정되게 서방출할 수 있다는 우수한 서방출 성능을 갖고 있다. 예를 들면 bFGF는 혈관 신생을 촉진하여 세포의 활성을 높이는 작용을 갖는데, 생체 내에서 불안정한 물질이고, 또한 수용액 상태에서 사용해도 기대되는 생물 효과는 거의 인정되지 않는다. 그러나 상기 생체 흡수성 다공질 기재에 소정량의 bFGF를 함침시킴으로써 bFGF를 서방출시켜서 bFGF의 작용을 안정적으로 지속시킬 수 있다.

본 발명의 조직 재생용 기재는 예를 들면 37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 3일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 조직 재생용 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 7중량％ 이하(바람직하게는 6중량％ 이하)라는 특징이 있다. 또 37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 7일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 해당 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 15중량％ 이하 (바람직하게는 13중량％ 이하)라는 특징이 있다. 특히 세포 성장 인자가 bFGF인 경우에 상기의 서방출 성능이 재현성 좋게 발휘된다.

또한 본 발명의 조직 재생용 기재는 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 기재로 이루어지기 때문에 생체 내에서 3주일 이내에 분해 흡수된다.

조직 재생용 기재의 함수율의 바람직한 하한은 90％, 바람직한 상한은 99.8％이다. 생체 흡수성 다공질 기재의 함수율은 해당 생체 흡수성 다공질 기재의 가교도에 대응해 있으며, 가교도가 높을수록 함수율은 낮아진다. 함수율이 90％ 미만이면 얻어지는 조직 재생용 기재가 이식에 적합한 유연성을 갖지 않는 경우가 있으며, 99.8％를 넘으면 얻어지는 조직 재생용 기재가 배양액이나 버퍼 중에서 강도를 유지할 수 없는 경우가 있다. 보다 바람직한 하한은 95％, 보다 바람직한 상한은 98％이다. 또한 함수율은 이하의 계산식에 의한다.

함수율(％)＝[(Ws－Wd)/Ws]×100(％)

식 중 Ws는 조직 재생용 기재를 25℃에서 인산 완충 생리 식염수 중에 1시간 침지했을 때의 중량(습윤 중량)을 나타내고, Wd는 유착 방지재를 진공 건조기를 이용하여 완전히 건조했을 때의 중량(건조 중량)을 나타낸다.

Ⅱ. 조직 재생용 기재의 제법

본 발명의 조직 재생용 기재는 콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 수성 혼합물을 동결 건조하는 공정, 얻어지는 건조체를 가교 처리하는 공정 및 얻어지는 가교체에 세포 성장 인자를 함유시키는 공정을 포함하는 제조 방법에 의해 제조된다.

우선 상기 젤라틴 및 콜라겐을 혼합하여 수용액으로 하고, 이것을 적당한 거푸집 안에 흘려 넣고, －40∼－80℃로 30분∼2시간 정도 동결한다. 이 동결물을 동결 건조함으로써 스펀지 형상의 생체 흡수성 다공질 기재를 제작한다.

다음으로 얻어진 동결 건조물을 가교 처리하여 생체 흡수성 다공질 기재를 제작한다. 동결 건조물의 가교 방법으로서는 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 열 가교법, γ선 조사법, 자외선 조사법, 전자선 조사법, X선 조사법, 가교제를 이용하는 화학 가교법 등을 들 수 있다. 그 중 기재의 전체가 균일한 가교도로 되도록 가교할 수 있는 것에서, 가교제를 이용하는 화학 가교법이 가장 적합하다.

화학 가교법으로서, 예를 들면 글루타르알데히드 등의 가교제를 포함하는 수용액에 동결 건조물을 침지하여 화학 가교를 실시할 수 있다. 물로 씻어서 과도한 글루타르알데히드를 제거하고, 필요에 따라서 다시 동결 건조함으로써 가교된 생체 흡수성 다공질 기재를 얻는다.

다음으로 얻어지는 가교된 기재에 세포 성장 인자를 함유시키는데, 그 방법으로서는 특별히 한정은 없고, 예를 들면 세포 성장 인자를 함유하는 수용액을 해당 가교체에 적하하는 것, 세포 성장 인자를 함유하는 수용액을 해당 가교체에 함침시키는 것 등이 예시된다. 그 후 필요에 따라서 건조 공정을 더 마련해도 된다.

발명의 효과

본 발명의 조직 재생용 기재(특히 인공 진피 기재)는 세포 성장 인자를 안정적으로 서방출할 수 있고, 또한 세포가 침입하기 쉽기 때문에 창상 치유가 촉진되어 치유 기간의 대폭적인 단축을 꾀할 수 있다.

도 1은 시험예 1에 있어서의 시험관 내(in vitro)에서의 bFGF의 서방출 시험의 결과를 나타내는 그래프이다.

도 2는 시험예 1에 있어서의 스펀지의 젤라틴 함량을 0중량％로 한 경우의 조직 절편상이다.

도 3은 시험예 1에 있어서의 스펀지의 젤라틴 함량을 10중량％로 한 경우의 조직 절편상이다.

도 4는 시험예 1에 있어서의 스펀지의 젤라틴 함량을 30중량％로 한 경우의 조직 절편상이다.

도 5는 시험예 1에 있어서의 스펀지의 젤라틴 함량을 50중량％로 한 경우의 조직 절편상이다.

도 6은 시험예 1에 있어서의 스펀지의 젤라틴 함량을 100중량％로 한 경우의 조직 절편상이다.

이하에 실시예를 나타내어 본 발명을 구체적으로 설명하는데, 본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니다.

[시험예 1]

(1) 콜라겐과 젤라틴의 혼합 스펀지의 제작

돼지 힘줄 유래의 I형 콜라겐과 돼지 피부 유래의 젤라틴을 혼합하여 수용액으로 했다. 수용액을 거푸집에 넣어서 －40℃로 1시간 동결하고, 그 후 동결 건조함으로써 스펀지를 제작했다.

이 스펀지를 진공하 110℃로 처리함으로써 열 가교를 실시했다. 또한 열 가교 후 0.2％ 글루타르알데히드 0.05N 아세트산 수용액에 침지하여 화학 가교를 실시했다. 물로 씻어서 과도한 글루타르알데히드를 제거하고, 다시 동결 건조함으로써 가교 콜라겐―젤라틴 스펀지를 얻었다. 이 가교 스펀지를 다음의 시험관 내의 서방출 시험에 이용했다.

(2) 시험관 내의 서방출 시험

실험에 사용한 스펀지는 젤라틴 함량이 0, 10, 30, 50중량％의 것을 이용했다. 이것을 직경(Φ) 12㎜ 두께 3mm의 스펀지로 하고, bFGF가 40㎍ 함침되도록 bFGF 수용액 100㎕을 스펀지에 적하했다.

서방출 시험은 37℃의 PBS 중에 스펀지를 침지시키고, 1, 3, 5, 7, 9일 후에 PBS 중에 방출된 bFGF를 ELISA법에 의해 정량하여 실시했다.

함침 후의 각 스펀지 중에 포함되는 bFGF의 중량을 100으로 했을 때의 경과 일수에 있어서의 bFGF방출량의 비율, 즉 bFGF 용출 비율(％)을 표 1 및 도 1에 나타낸다.

일	젤라틴 함량(중량％)
일	0	10	30	50
1	7.2	3.0	2.9	3.2
3	11.9	5.5	5.7	4.2
5	16.2	9.2	8.7	6.0
7	20.3	12.0	12.1	6.8
9	22.6	13.9	14.2	7.3

(3) 이식 시험

실험에 사용한 스펀지는 젤라틴 함량이 0, 10, 30, 50, 100중량％의 스펀지를 이용했다. 이것을 직경(Φ) 12㎜ 두께 3㎜의 스펀지로 하고, bFGF가 40㎍ 함침하도록 bFGF수용액 100㎕을 스펀지에 적하했다. 이 스펀지를 모르모트 등부분 전층 피부 결손층에 이식하여 2주일 경과 후의 조직 절편상을 도 2∼6에 나타낸다.

젤라틴 100중량％의 스펀지에서는 주위 조직의 세포의 침입이 적고, 또 스펀지 아래에 세포가 잠입하는 다운 그로스(downgrowth)의 상이 관찰되었다. 한편으로 콜라겐 함량이 높아짐에 따라서 세포의 침입이 많고, 조직의 재생도 양호했지만, 콜라겐 100중량％의 경우 세포 성장 인자의 서방출 성능이 저하되었다. 그 때문에 주위 조직의 침입을 방해하지 않고, 또한 세포 성장 인자의 서방출 기능을 발휘시키기 위해서는, 젤라틴을 최적의 혼합 비율로 혼합시키는 것이 필요하게 된다.

Claims

콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 생체 흡수성 다공질 기재에 세포 성장 인자를 함유하여 이루어지는 조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

생체 흡수성 다공질 기재의 젤라틴의 함유량이 1∼70중량％인

조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

세포 성장 인자가 염기성 섬유아 세포 성장 인자(bFGF)인

조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 3일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 조직 재생용 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 7중량％ 이하인

조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

37℃의 인산 완충 식염수(PBS)에 7일간 침지시킨 후의 해당 PBS 중으로의 세포 성장 인자의 방출량이 조직 재생용 기재 중에 함침시킨 초기의 세포 성장 인자의 총량에 대하여 15중량％ 이하인

조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

평균 구멍 직경 10∼500㎛의 연속 구멍을 갖는

조직 재생용 기재.
제 1 항에 있어서,

생체 내에서 3주일 이내에 분해 흡수되는

조직 재생용 기재.
콜라겐 및 젤라틴을 포함하는 수성 혼합물을 동결 건조하는 공정, 얻어지는 건조체를 가교 처리하는 공정 및 얻어지는 가교체에 세포 성장 인자를 함유시키는 공정을 포함하는

조직 재생용 기재의 제조 방법.