[go: up one dir, main page]

KR20050067174A - 신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제를 투여함에 의해통증을 치료하는 방법과 그를 함유한 조성물 - Google Patents

신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제를 투여함에 의해통증을 치료하는 방법과 그를 함유한 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20050067174A
KR20050067174A KR1020057006105A KR20057006105A KR20050067174A KR 20050067174 A KR20050067174 A KR 20050067174A KR 1020057006105 A KR1020057006105 A KR 1020057006105A KR 20057006105 A KR20057006105 A KR 20057006105A KR 20050067174 A KR20050067174 A KR 20050067174A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ngf
pain
antibody
antagonist
antibodies
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
KR1020057006105A
Other languages
English (en)
Inventor
데이비드 엘. 셸톤
저먼 제이. 버가라
Original Assignee
리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=33415832&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20050067174(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션 filed Critical 리나트 뉴로사이언스 코퍼레이션
Publication of KR20050067174A publication Critical patent/KR20050067174A/ko
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/485—Morphinan derivatives, e.g. morphine, codeine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 신경성장인자 길항제의 양과 아편유사 진통제의 양을 투여함으로써 이들이 함께 효과적인 통증 완화를 제공하도록 하는 것을 포함하는 통증을 치료 또는 예방하는 방법을 특징으로 한다. 본 발명은 또한 신경성장인자 길항제와 아편유사 진통제를 포함하는 조성물 및 이들을 함유하는 키트를 특징으로 한다.

Description

신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제를 투여함에 의해 통증을 치료하는 방법과 그를 함유한 조성물{METHODS FOR TREATING PAIN BY ADMINISTERING A NERVE GROWTH FACTOR ANTAGONIST AND AN OPIOID ANALGESIC AND COMPOSITIONS CONTAINING THE SAME}
본 발명은 신경성장인자 길항제와 아편유사 진통제의 조합을 투여함에 의해 환자에서 통증을 예방 또는 치료하는 방법 및 조성물에 관한 것이다.
심한 통증은 통상 위운동의 감소, 신장 급통증, 정신 흐림, 및 호흡 억제를 포함하는 불행히도 많은 바람직하지 않은 부작용을 가지는 아편유사 진통제로 치료된다. 신경성장인자(NGF)는 최초로 확인된 뉴로트로핀이며, 말초 뉴런과 중추 뉴런의 발생 및 생존에서의 역할이 잘 특성화되어 있다. NGF는 말초 교감 및 배아 감각 뉴런과 기저 전뇌 콜린성 뉴런의 발생에서 중요한 생존 및 유지 인자인 것으로 나타났다(Smeyne, 등, Nature 368:246-249(1994); Crowley, 등, Cell 76:1001-1011 (1994)). NGF는 감각 뉴런에서 뉴로펩티드의 발현을 상향조절하는데(Lindsay 등, Nature 337:362-364 (1989)), 그것의 활성은 두 가지 상이한 멤브레인-결합 수용체인 TrkA 티로신 키나제 수용체와 종양괴사인자 수용체 패밀리의 다른 멤버와 구조적으로 관련된 p75 수용체를 통해 매개된다(Chao 등, Science 232:518-521 (1986)).
신경계통에서의 효과에 더하여 NGF는 신경계통 외부의 과정에도 더욱 연루되었다. 예를 들어, NGF는 혈관 투과성을 증진시키고(Otten, 등, Eur J Pharmacol. 106:199-201(1984)), T- 및 B-세포 면역반응을 증진시키고(Otten, 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:10059-10063(1989)), 림프구 분화와 비만세포 증식을 유도하고, 비만세포에서 가용성 생물학적 신호의 방출을 일으키는 것으로 나타났다(Matsuda, 등, Proc. Natl. Acad. ScL USA 85:6508-6512(1988); Pearce, 등, J Physio. 372: 379-393(1986); Bischoff, 등, Blood 79:2662-2669(1992); Horigome, 등, J Biol. Chem. 268:14881-14887(1993)).
NGF는 비만세포(Leon, 등, Proc. Natl. Acad. Sci USA 91:3739-3743(1994)), B-림프구(Torcia 등 Cell 85:345-356(1996), 각질세포(Di Marco 등, J Biol. Chem. 268:22838-22846), 평활근세포(Ueyama 등 J Hypertens. 11:1061-1065(1993)), 섬유모세포(Lindholm 등, Eu. I. Neuosci. 2:795-801(1990)), 기관지 상피세포(Kassel, 등, Clin, Exp. Allergy 31:1432-40(2001)), 신장 혈관사이세포(Steiner, 등, Am. J Physiol. 261:F792-798(1991)) 및 골격근 근육대롱(Schwartz, 등, J Photochem, Photobiol. B 66:195-200(2002))을 포함하는 다양한 세포 종류들에 의해 생성된다. NGF 수용체는 신경계통 이외의 다양한 세포 종류에서 발견되었다. 예를 들어 TrkA는 사람 단구, T- 및 B-림프구 및 비만세포에서 발견되었다.
증가된 NGF 수준과 다양한 감염성 상태간의 관계가 사람 환자에서 뿐만 아니라 몇몇 동물 모델에서 관찰되었다. 이들은 전신홍반성루프스(Bracci-Laudiero 등 Neuroreport 4:563-565(1993)), 다발성 경화증(Bracci-Laudiero 등 Neurosci.Lett. 147:9-12(1992)), 건선(Raychaudhuri 등, Acta Derm. l'enereol. 78:84-86(1998)), 관절염(Falcimi, 등, Ann. Rheum. Dis. 55:745-748(1996)), 사이질방광염(Okragly, 등, J. Urology 161:438-441(1999)) 및 천식(Braun, 등, Eur. Jlmmunol. 28:3240-3251(1998))을 포함한다.
일관되게 말초 조직에서 NGF의 상승된 수준은 염증과 관련되며 많은 형태의 관절염에서 관찰되었다. 류마티스관절염에 걸린 환자의 활액막은 높은 수준의 NGF를 발현하며 염증이 없는 활액막에서는 NGF가 검출되지 않았다고 보고되었다(Aloe, 등, Arch. Rheum. 35:351-355(1992)). 유사한 결과가 류마티스관절염을 실험적으로 유발시킨 래트에서 나타났다(Aloe 등 Clin.Exp. Rheumatol. 10:203-204(1992)). NGF의 상승된 수준이 비만세포 수의 증가와 함께 관절염에 걸린 트랜스제닉 마우스에서 보고되었다(Aloe, 등, Int. J. Tissue Reactions-Exp. Clin. Aspects 15:139-143(1993)).
통증을 치료하는 약에는 일반적으로 두 가지 카테고리가 있는데, 이들은 모두 단점을 가진다. 첫번째 카테고리는 가벼운 통증이나 중간 정도의 통증을 치료하는데 사용되는 비스테로이드계 항염제(NSAID)를 포함하는데, 이들의 치료적 용도는 위 미란, 소화궤양의 형성 또는 십이지장 및 결장의 염증과 같은 바람직하지 않은 위장 효과에 의해 제한된다. 두번째 카테고리는 중간 정도 통증 내지 심한 통증을 치료하는데 사용되는 모르핀 및 관련된 아편유사제들을 포함하는데, 이들의 치료적 용도는 변비, 진정작용, 혼돈, 호흡억제, 정신 흐림, 신장 급통증, 오랜 사용에 대한 내성 및 중독의 위험과 같은 바람직하지 않은 효과로 인해 제한된다.
아편유사 진통제는 잘 확립된 부류의 진통제이다. 그들은 때로 아편제제라고 칭해지기도 한다. 용어 "아편유사제"(용어 "아편유사 진통제"와 상호교환가능함)는 일반적 의미로서 모르핀-유사 작용을 갖는 천연 또는 합성의 모든 약물을 언급하는 것으로 일반적으로 받아들여진다. 합성 및 반-합성 아편유사 진통제는 5가지의 화학적 부류의 화합물, 즉 페난트렌, 페닐헵틸아민, 페틸피페리딘, 모르피난, 및 벤조모르판의 유도체이다. 제약학적으로 이들 화합물은 다양한 활성을 가지며, 따라서 일부는 아편유사제 수용체에서의 강한 작용제이고(예를 들어, 모르핀); 다른 것들은 중간 정도 내지는 가벼운 작용제이며(예를 들어, 코데인); 또 다른 것들은 작용제-길항제의 혼합된 활성을 나타내고(예를 들어, 날부핀); 또 다른 것들은 부분적 작용제이다(예를 들어, 날로르핀). 날로르핀(모르핀의 N-알킬 유사체)과 같은 아편유사제 부분적 작용제는, 그것이 단독으로 주어졌을 때 그 자체로서 효능있는 진통제라면 모르핀의 진통 효과를 길항할 수 있다.
모든 아편유사 진통제 중에서도 모르핀이 가장 널리 사용되고 있다. 불행히도 그것의 유용한 치료 특성은 별도로 하고도 모르핀은 많은 부작용을 가진다. 다른 불행한 특징은 그러한 화합물의 임상적 사용을 제한할 수 있는 내성 및 신체적 의존성의 발생이다. 따라서, 모르핀과 같은 아편유사 진통제를 더 적은 용량으로 사용함으로써 부작용의 발생과 내성 및 의존성의 가능성을 줄이고, 이로써 투여 중단에 관련된 약물 금단의 주된 문제를 피할 수 있는 치료 방법을 개발할 필요가 있다. 아편유사제 통증 치료의 다른 형태의 증강을 개발할 필요가 크다.
도 1은 NGF 길항제인 마우스 항-NGF 항체 911과 모르핀으로 함께 치료된 동물에서의 누적 통증 점수가 감소되었음을 나타낸다. Hongo 등 Hybridoma 19:215-227(2000). 0.3mg/kg의 항-NGF 항체("911")만을 사용한 수술 전 치료는 0.3mg/kg의 모르핀만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 있어서 더욱 효과적이었고, 항-NGF 항체와 모르핀을 함께 사용한 치료는 모르핀이나 항-NGF 항체만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 있어서 더욱 효과적이었다.
도 2는 NGF 길항제인 항-NGF 항체 911과 모르핀으로 함께 치료된 동물에서의 누적 통증 점수가 감소되었음을 나타낸다. 항-NGF 항체와 모르핀을 함께 사용한 치료는 모르핀이나 항-NGF 항체만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 있어서 더욱 효과적이었다.
도 3은 수술 및 항-NGF 항체 및/또는 모르핀을 사용한 치료 후 관찰된 휴식중 통증 점수를 나타낸다. 동물들은 수술 15시간 전에 NGF 길항제인 항-NGF 항체 911로 치료했고 수술 1일 후에 통증 거동에 대해 시험했다. 동물들은 모르핀 없음(굵은선), 0.3mg/kg 모르핀(긴점선) 또는 1.0mg/kg 모르핀(점선)으로 시험했다. 모르핀 0.3mg/kg과 항-NGF 항체 0.3mg/kg 또는 항-NGF 항체 1mg/kg을 병용하여 사용한 치료는 0.3mg/kg 모르핀만을 사용한 치료와 비교했을 때 통증 완화를 유의하게 감소시켰다(즉, 휴식중 통증이 감소되었다). 게다가, 항-NGF 항체만을 사용한 치료는 0.3mg/kg 용량의 모르핀과 동일한 통증 완화를 제공했다. 항-NGF 항체 0.1 mg/kg과 0.3mg/kg 모르핀을 함께 사용한 치료는 1mg/kg의 모르핀만을 사용하여 얻어진 것과 적어도 동일한 통증 완화를 제공했다.
발명의 상세한 설명
우리는 통증이 유효량의 NGF의 길항제(항-NGF 항체와 같은)와 아편유사 진통제를 병용하여 투여함에 의해서 치료 또는 예방될 수 있다는 것을 발견했다. 본 발명의 방법 및 조성물은 일반적으로 아편유사 진통제의 사용이 처방되는 통증의 치료 또는 예방에 유용하다. 본 발명에 따라 신경성장인자 길항제와 아편유사 진통제를 병용하여 사용함에 의해서, 더 적은 용량의 아편유사 진통제를 사용하여 통증을 치료함으로써 아편유사 진통제의 사용에 관련된 부작용(예를 들어, 호흡억제, 변비, 신장 급통증, 메스꺼움 및 구토, 내성 및 의존성 그리고 약물 금단에 관련된 문제)의 가능성을 줄이는 것이 이제 가능하다. 어떤 구체예에서는, 동일한 정도의 통증 개선을 행하는데 필요한 아편유사 진통제의 정상 용량을, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90% 이상까지 감소시키는 것을 허용하도록 충분한 NGF 길항제가 투여될 것이다.
또한, 아편유사 진통제와 NGF 길항제의 병용 투여에 의해 아편유사 진통제를 사용한 통증의 치료가 본원에 설명된 대로 증강될 수 있다.
한 양태로서, 본 발명은 유효량의 NGF 길항제와 유효량의 아편유사 진통제를 병용하여 투여하는 것을 포함하는 개체(사람 및 사람이 아닌 포유동물을 모두 포함함)에서 통증을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 다른 양태로서, 본 발명은 유효량의 NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은)와 유효량의 아편유사 진통제를 병용하여 투여하는 것을 포함하는 개체에서 아편유사 진통제를 사용한 통증의 치료 또는 예방을 증강시키는 방법을 제공한다. 다른 양태로서, 본 발명은 통증의 진전이나 진행을 예방, 개선 및/또는 예방하는 방법을 제공한다.
어떤 구체예에서, 항-NGF 항체는 NGF와 결합할 수 있고, NGF와 그것의 TrkA 및/또는 p75 수용체의 생체내 결합을 효과적으로 억제하거나, 및/또는 NGF의 TrkA 및/또는 p75 수용체가 활성화되는 것을 효과적으로 억제할 수 있다.
다른 양태로서, 본 발명은 통증을 개선하거나, 통증의 진전을 지연시키거나, 및/또는 통증의 진행을 예방하는 방법을 제공한다.
본 발명의 전형적인 아편유사 진통제는, 제한은 없지만 모르핀, 코데인, 디히드로코데인, 디아세틸모르핀, 히드로코돈, 히드로모르폰, 레보르파놀, 옥시모르폰, 알펜타닐, 부프레노르핀, 부토르파놀, 펜타닐, 수펜타닐, 메페리딘, 메타돈, 날부핀, 프로폭시펜 및 펜타조신; 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 어떤 구체예에서, 어편유사 진통제는 모르핀 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염이다.
본 발명에서 사용되는 아편유사 진통제의 전형적인 염은 모르핀 황산염, 모르핀 염산염, 모르핀 주석산염, 코데인 인산염, 코데인 황산염, 디히드로코데인 이주석산염, 디아세틸모르핀 염산염, 히드로코돈 이주석산염, 히드로모르폰 염산염, 레보르파놀 주석산염, 옥시모르폰 염산염, 알펜타닐 염산염, 부프레노르핀 염산염, 부토르파놀 주석산염, 펜타닐 구연산염, 메페리딘 염산염, 메타돈 염산염, 날부핀 염산염, 프로폭시펜 염산염, 프로폭시펜 냅실레이트(2-나프탈렌술폰산(1:1) 일수화물), 및 펜타조신 염산염을 포함한다. 한 구체예에서, 아편유사 진통제는 모르핀 황산염이다.
본 발명의 방법 및 조성물은 급성 및 만성 통증, 염증 성분을 갖는 어떤 통증, 그리고 아편유사 진통제가 통상 처방되는 어떤 통증을 포함하는, 어떤 병인을 갖는 통증의 치료에 유용하다. 통증의 예는 외과수술-후 통증, 수술-후 통증(이의 통증을 포함함), 편두통, 두통 및 삼차신경통, 화상 관련 통증, 상처 또는 콩팥돌, 외상 관련 통증(외상성 두부손상을 포함함), 신경병증성 통증, 근골격계통 장애 관련 통증, 예를 들어 류마티스 관절염, 골관절염, 방광염, 췌장염, 염증 장질환, 강직척추염, 음성혈청반응(비-류마티스) 관절병증, 비-관절 류마티즈 및 관절주변 장채, 암 관련 통증("파탄성 통증" 및 말기암 관련 통증을 포함함), 그리고 말초신경병증 및 대상포진 후 통증을 포함한다. 염증 성분을 갖는 통증의 예는(상기 설명된 것들 중 일부에 더하여) 류마티스성 통증, 점막염 관련 통증 및 생리통을 포함한다. 어떤 구체예에서, 본 발명의 방법 및 조성물은 수술 후 통증 및 암 통증의 치료 또는 예방에 사용된다.
NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제는 어떤 적합한 경로를 통해 개체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 이들은 함께 또는 분리하여, 및/또는 동시에 및/또는 연속하여, 경구, 정맥내, 혀밑, 피하, 동맥내, 근육내, 직장, 척수내, 흉부내, 복강내, 심실내, 혀밑, 경피 방식이나 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 투여는 전신적, 예를 들어 정맥내 방식으로 투여되거나, 또는 국소적일 수 있다.
다른 양태로서, 본 발명은 본원에 설명된 방법 중 어느 것에 사용하기에 적합한 NGF 길항제(항-NGF 항체, 항-NGF 모노클로날 항체와 같은) 및/또는 아편유사 진통제를 포함하는 통증을 치료하기 위한 조성물 및 키트를 제공한다. 어떤 구체예에서, 항-NGF 항체는 NGF와 그것의 TrkA 및/또는 p75 수용체(들)의 결합을 효과적으로 억제할 수 있거나 및/또는 NGF의 TrkA 및/또는 p75 수용체(들)의 활성화를 효과적으로 억제할 수 있다.
일반적 기술
다른 지시가 없다면 본 발명의 실시예는 본 분야에 속한 분자생물학(재조합 기술을 포함함), 미생물학, 세포생물학, 생화학 및 면역학에 관한 종래의 기술들을 사용한다. 그러한 기술들은 아래의 문헌들에 충분히 설명된다.
정의
"항체"(복수형태로 사용되기도 한다)는 면역글로불린 분자의 가변영역에 위치한 적어도 하나의 항원인식부위를 통해 탄수화물, 폴리뉴클레오티드, 지질, 폴리펩티드 등과 같은 표적에 특이적으로 결합할 수 있는 면역글로불린 분자이다. 여기 설명된 이 용어는 완전한 폴리클로날 또는 모노클로날 항체 뿐만 아니라 이들의 단편(예를 들어, Fab, Fab', F(ab')2, Fv), 단쇄(ScFv), 이들의 돌연변이, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 사람화된 항체, 키메라 항체, 디아체, 선형 항체, 단쇄 항체, 다중특이성 항체(예를 들어, 2-특이적 항체), 그리고 필요한 특이성을 갖는 항원인식부위를 포함하는 면역글로불린 분자의 어떤 다른 변형된 구조를 포함한다. 항체는 IgG, IgA, 또는 IgM(또는 이들의 하위-부류)와 같은 어떤 부류의 항체와 어떤 특정한 부류에 속하지 않는 항체를 포함한다. 중쇄의 불변 도메인의 항체 아미노산 서열에 따라서 면역글로불린은 상이한 부류에 배정될 수 있다. 면역글로불린은 IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM의 5개 주요 부류로 나눠지며, 이들 중 몇 가지는 하위-부류(동형), 예를 들어 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2으로 더 나눠질 수 있다. 면역글로불린의 상이한 부류에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 알파, 델타, 엡실론, 감마, 및 뮤라고 칭해진다. 면역글로불린의 상이한 부류들의 서브유닛 구조 및 3-차원 입체배치는 잘 공지되어 있다.
"모노클로날 항체"는 동종성 항체 집단을 말하며, 모노클로날 항체는 항원의 선택적 결합에 연루되는 아미노산(천연발생 및 비-천연발생)으로 이루어진다. 모노클로날 항체 집단은 고도로 특이적이며 단 하나의 항원 부위에 대해서만 지정된다. 용어 "모노클로날 항체"는 완전한 모노클로날 항체 및 전길이 모노클로날 항체 뿐만 아니라 이들의 단편(예를 들어, Fab, Fab', F(ab')2, Fv), 단쇄(ScFv), 이들의 돌연변이, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 사람화된 모노클로날 항체, 키메라 모노클로날 항체, 및 항원과 결합하는데 필요한 특이성과 능력을 갖는 항원인식부위를 포함하는 면역글로불린 분자의 어떤 다른 변형된 구조를 포함한다. 항체의 공급원이나 그것이 제조된 방식(예를 들어, 하이브리도마, 파지선택, 재조합 발현, 트랜스제닉 동물 등에 의한)에 관하여 제한하는 것을 의도하지 않는다.
"사람화된" 항체는 비-사람 종들의 면역글로불린으로부터 실질적으로 유래된 항원결합부위를 가지면서 사람 면역글로불린의 구조 및/또는 서열에 기초한 분자의 면역글로불린 구조를 유지하고 있는 분자를 말한다. 항원결합부위는 불변 도메인 상에서 융합된 완전한 가변 도메인이나, 또는 가변 도메인 내의 적합한 프레임워크 영역 상에서 그래프트된 상보성 결정 영역(CDR)만을 포함할 수 있다. 항원결합부위는 야생형이거나, 또는 하나 이상의 아미노산 치환에 의해 변형될 수 있는데, 예를 들어 사람 면역글로불린과 더욱 밀접하게 닮도록 변형될 수 있다. 어떤 형태의 사람화된 항체는 모든 CDR 서열을 간직한다(예를 들어, 마우스 항체로부터의 6개의 CDR을 전부 함유하는 사람화된 마우스 항체). 다른 형태의 사람화된 항체는 원 항체에 관하여 변형된 1개 이상의 CDR(1, 2, 3, 4, 5, 6개)를 가진다. 어떤 예에서, 프레임워크 영역(FR) 잔기 또는 사람 면역글로불린의 다른 잔기는 상응하는 비-사람 잔기로 대체된다. 또한, 사람화된 항체는 수용자 항체나 제공자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "신경성장인자" 및 "NGF"는 신경성장인자 및 NGF 활성의 적어도 일부를 보유한 이들의 변이체를 말한다. 본원에 사용된 NGF는 사람, 개과, 고양이과, 말과, 또는 소과를 포함하는 모든 포유동물 종들의 자생 서열 NGF를 포함한다.
"NGF 수용체"는 NGF에 의해 결합되거나 또는 활성화되는 폴리펩티드를 말한다. NGF 수용체는 제한은 없지만 사람, 개과, 고양이과, 말과, 영장류, 또는 소과를 포함하는 어떤 포유동물 종들의 TrkA 수용체 및 p75 수용체를 포함한다.
"NGF" 길항제는 NGF와 수용체의 결합 및/또는 NGF에 대한 세포 반응의 유도와 같은, NGF 신호화에 의해 매개되는 하류 경로를 포함하는, NGF 생물학적 활성을 차단, 억제 또는 감소(현저한 것을 포함한다)시키는 어떤 분자를 말한다.
용어 "길항제"는 어떤 생물학적 작용의 특이적 메카니즘도 내포하지 않으며, 직접적이든 간접적이든, 또는 NGF, 그것의 수용체, 또는 다른 메카니즘을 통한 상호작용이든 아니든, NGF와의 모든 가능한 약물학적, 생리학적, 및 생화학적 상호작용 및 여러 가지 상이한, 그리고 화학적으로 다른 조성물들에 의해 달성될 수 있는 결과를 명백히 포함하고 포괄하는 것으로 간주한다. 제한은 없지만, 전형적인 NGF 길항제는 항-NGF 항체, NGF에 대한 안티-센스 분자(NGF를 암호화하는 핵산에 대한 안티-센스 분자를 포함함), NGF 억제성 화합물, NGF 구조 유사체, NGF와 결합하는 TrkA 수용체의 도미넌트-네가티브 돌연변이, TrkA 면역부착소, 항-TrkA 항체, 항-p75 항체 및 키나제 억제인자를 포함한다. 본 발명의 목적을 위해서, 용어 "길항제"는 이전에 확인된 용어, 표제, 그리고 NGF 자체, NGF 생물학적 활성(제한은 없지만 수술-후 통증의 어떤 양태를 매개하는 능력을 포함) 또는 생물학적 활성의 결과가 어떤 의미 있는 정도로 실질적으로 무효화, 감소, 또는 중화되는 기능적 상태와 특징들을 모두 포함하는 것으로 명백히 이해될 것이다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제(예를 들어, 항체)는 NGF와 결합(물리적 상호작용)하고, NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체와 같은)와 결합하고, 하류 NGF 수용체 신호화를 감소(저해 및/또는 차단)시키고 및/또는 NGF 합성, 생성 또는 방출을 억제(감소)한다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 NGF와 결합하며 TrkA 수용체 다이머화 및/또는 TrkA 자동인산화를 방지한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 NGF 합성 및/또는 생성(방출)을 억제 또는 감소시킨다. NGF 길항제 종류의 예들이 본원에 제공된다.
본원에 사용된 "항-NGF 항체"는 NGF와 결합해서 NGF 생물학적 활성 및/또는 NGF 신호화에 의해 매개되는 하류 경로(들)을 억제할 수 있는 항체를 말한다.
"TrkA 면역부착소"는 TrkA 수용체의 단편, 예를 들어 TrkA 수용체의 세포외 도메인과 면역글로불린 서열을 포함하는 가용성 키메라 분자를 말하며 이것은 TrkA 수용체의 결합 특이성을 유지하고 있다.
NGF의 "생물학적 활성"은 일반적으로 NGF 수용체에 결합하고 및/또는 NGF 수용체 신호화 경로를 활성화하는 능력을 말한다. 제한은 없지만, 생물학적 활성은 NGF 수용체(p75 및/또는 TrkA와 같은)와 결합하는 능력; TrkA 수용체 다이머화 및/또는 자동인산화를 촉진하는 능력; NGF 수용체 신호화 경로를 활성화하는 능력; 세포 분화, 증식, 생존, 성장, 및 신경 형태학, 시냅스 형성, 시냅스 기능, 신경전달 및/또는 뉴로펩티드 방출 및 손상 후 재생의 변화를 포함하여(뉴런의 경우 말초 및 중추 뉴런을 포함함) 세포 생리학에 다른 변화를 촉진하는 능력; 및 통증을 매개하는 능력 중 어느 하나 이상을 포함한다.
용어 "에피토프"는 단백질 항원에 있는 항체(모노클로날 또는 폴리클로날)의 결합 부위를 말한다.
본원에 사용된 "치료"는 유리한 또는 바람직한 임상적 결과를 얻기 위한 접근법이다. 본 발명의 목적을 위해서, 제한은 없지만, 유리한 또는 바람직한 임상적 결과는 급성, 만성, 염증성, 신경병증성 또는 수술-후 통증을 포함하는 어떤 양태의 통증의 개선 또는 완화 중 하나 이상을 포함한다. 본 발명의 목적을 위해서, 제한은 없지만, 유리한 또는 바람직한 임상적 결과는 심한 정도의 감소, 어떤 양태의 통증을 포함하는 통증에 관련된 하나 이상의 증상의 완화(예를 들어, 통증 지속기간의 단축 및/또는 통증 감수성 또는 감각의 감소) 중 하나 이상을 포함한다.
통증의 "발생 감소"는 심한 정도(예를 들어 아편제제를 포함하는 이런 상태에 일반적으로 사용되는 다른 약 및/또는 치료(예를 들어, 이들에 대한 노출)의 필요 및/또는 양의 감소를 포함할 수 있다), 지속기간, 및/또는 빈도(예를 들어, 개체에서 수술-후 통증까지의 시간의 지연 또는 증가를 포함한다)의 감소 중 어느 것을 의미한다. 당업자에게 이해되는 대로, 개체는 치료에 대한 그들의 반응에 있어서 다양할 수 있으며, 예를 들어 "개체에서 수술-후 통증의 발생을 감소시키는 방법"은 약물의 투여가 특정한 개체에서 통증 발생의 감소를 일으킬 수 있을 것이라는 합리적인 예상에 기초하여 여기 설명된 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 병용하여 투여하는 것을 반영한다.
수술-후 통증 또는 수술-후 통증의 하나 이상의 증상의 "개선"은 NGF 길항제를 투여하지 않았을 때와 비교하여 수술-후 통증의 하나 이상의 증상의 축소 또는 개선을 의미한다. "개선"은 또한 증상의 지속기간의 단축이나 감소를 포함한다.
수술-후 통증 또는 수술-후 통증의 하나 이상의 증상의 "완화"는 본 발명에 따르는 NGF 길항제로 치료된 개체 또는 개체의 집단에서 수술-후 통증의 하나 이상의 바람직하지 않은 임상적 징후의 범위의 축소를 의미한다.
본원에 설명된, 수술-후 통증의 진전의 "지연"은 수술-후 통증 진행의 유예, 방해, 늦춰짐, 저지, 안정, 및/또는 연기를 의미한다. 이런 지연은 병력 및/또는 치료될 개체에 따라서 다양한 길이의 시간일 수 있다. 당업자에게 자명한 대로 충분한 또는 현저한 지연은 개체가 수술-후 통증을 발생시키지 않는다는 점에서 사실상 예방을 포함할 수 있다. 증상의 진전을 "지연"시키는 방법은, 이 방법을 사용하지 않았을 때와 비교했을 때, 주어진 시간 프레임 내에 증상이 발생할 가능성을 감소시키거나 및/또는 주어진 시간 프레임 내에 증상의 범위를 감소시키는 방법이다. 그러한 비교는 전형적으로 통계적으로 유의한 수의 피험자를 사용한 임상연구를 기초로 한다.
수술-후 통증의 "진전" 또는 "진행"은 장애의 초기 징후 및/또는 뒤이은 진행을 의미한다. 수술-후 통증의 진전은 당업계에 잘 공지된 표준 임상기술을 사용하여 검출 및 평가될 수 있다. 그러나, 진전은 또한 검출될 수 없는 진행을 말하기도 한다. 본 발명의 목적을 위해서, 진전 또는 진행은 증상의 생물학적 경과과정을 말한다. "진전"은 발생, 재발, 및 개시를 포함한다. 본원에 사용된 통증의 "개시" 또는 "발생"은 초기 개시 및/또는 재발을 포함한다.
"유효량"은 통증의 개선 또는 감소를 포함하는 유리한 또는 바람직한 임상적 결과를 행하는데 충분한 양이다. 본 발명의 목적을 위해서, NGF 길항제 및 아편유사제의 유효량은, 급성, 만성, 염증성, 신경병증성 또는 수술-후 통증을 포함하는 어떤 종류의 통증(통각 및 통증 감각을 포함함)을 치료, 개선, 통증 강도의 감소, 또는 예방하는데 충분한 양을 포함한다. 어떤 구체예에서 아편유사 진통제 및 NGF 길항제의 유효량은, 외부 자극에 대한 감수성 역치를 건강한 피험자에서 관찰된 것과 비슷한 수준까지 조절할 수 있는 NGF 길항제 및 아편유사 진통제의 양이다. 다른 구체예에서, 이 수준은 건강한 피험자에서 관찰된 것과는 비슷하지 않을 수 있지만, 병용 치료를 받지 않은 피험자와 비교해서는 감소된다. 또한, NGF 길항제의 유효량은 본원에 설명된 대로 통증의 아편유사제 치료(치료 효과)를 증강시키거나, 또는 본원에 설명된 대로 통증의 치료 또는 예방에 필요한 아편유사제의 용량을 감소시키는데 충분한 NGF 길항제의 양을 포함한다. 본 분야에서 이해되는 대로, 아편유사제와 병용되는 NGF 길항제의 유효량은, 특히 통증의 종류(및 환자 병력 뿐만 아니라 사용된 NGF 길항제 및/또는 아편유사제의 종류(및/또는 용량)과 같은 다른 요인들)에 따라서 변할 수 있다. 본 발명의 문맥에서, 유효량은 또한 상승작용이 달성될 수 있도록 하는 NGF 길항제와 아편유사 진통제의 양일 수 있다. 본 발명의 문맥에서, 길항제의 유효량은 일반적으로 통증에 대한 아편유사제의 치료 효과의 증강을 가져오거나(이것은 차례로 용량이 감소되거나 및/또는 어떤 다른 유리한 효과가 관찰된다는 것을 의미한다), 및/또는 아편유사제만으로 치료했을 때와 비교하여 유리한 효과를 가져오는데 충분한 양을 의미한다. NGF 길항제의 "유효량"은 또한 NGF 길항제나 아편유사제만을 투여했을 때와 비교하여 상승작용적 효과를 가져올 수 있다. 어떤 구체예에서, "유효량"은 통증의 진전을 지연시키는데 충분한 양이다.
"개체"는 척추동물, 바람직하게는 포유동물, 더 바람직하게는 사람이다. 포유동물은 제한은 없지만 사육용 동물, 경기용 동물, 애완동물, 영장류, 말, 개, 고양이, 마우스 및 래트를 포함한다.
용어 "아편유사 진통제"는 모르핀-유사 작용을 갖는 천연 또는 합성의 모든 약물을 말한다. 합성 및 반-합성 아편유사 진통제는 5가지의 화학적 부류의 화합물, 즉 페난트렌, 페닐헵틸아민, 페틸피페리딘, 모르피난, 및 벤조모르판의 유도체이며, 이들 전부는 이 용어의 범위 내이다. 전형적인 아편유사 진통제는 코데인, 디히드로코데인, 디아세틸모르핀, 히드로코돈, 히드로모르폰, 레보르파놀, 옥시모르폰, 알펜타닐, 부프레노르핀, 부토르파놀, 펜타닐, 수펜타닐, 메페리딘, 메타돈, 날부핀, 프로폭시펜 및 펜타조신; 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염을 포함한다.
본원에 사용된 "병용"은 동시 투여 및/또는 상이한 시간에서의 투여를 포함한다. 또한, 병용 투여는 공-제제(즉, NGF 길항제와 아편유사 진통제가 동일한 조성물에 존재한다)로서 투여하는 것 및/또는 분리된 조성물로서 투여하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 병용 투여는 아편유사 진통제와 NGF 길항제가 개체에게 투여되며, 이것이 동시에 및/또는 개별적으로 일어날 수 있는 어떤 환경을 포함하여 의미한다. 본원에서 더 논의된 대로, NGF 길항제와 아편유사 진통제는 상이한 용량, 빈도 또는 간격으로 투여될 수 있음이 이해된다. 예를 들어, 항-NGF 항체가 매주 투여될 수 있으며 아편유사 진통제는 더 자주 투여될 수 있다. NGF 길항제 및 아편유사 진통제는 동일한 또는 상이한 투여 경로를 사용하여 투여될 수 있음이 이해된다.
"수술-후 통증"("절개-후 통증" 또는 "외상-후 통증"이라고도 함)은 개체의 조직의 절단, 관통, 절개, 열개, 또는 상처와 같은 외부의 외상으로부터 발생하는 또는 결과인 통증을 말한다(침습성 또는 비-침습성인 모든 수술과정으로부터 발생하는 것을 포함한다). 본원에 설명된 "수술-후 통증"은 외부의 물리적 외상 없이 발생하는(일어나는 또는 기원하는) 통증은 포함하지 않는다. 어떤 구체예에서, 수술-후 통증은 내부 또는 외부(주변부를 포함함) 통증이며, 상처, 절단, 외상, 열개 또는 절개는 우연히(외상성 상처) 또는 고의로(수술 절개) 일어날 수 있다. 본원에 사용된 "통증"은 통각 및 통증에 대한 감각을 포함하며, 통증은 통증 점수 및 본 분야에 잘 공지된 다른 방법을 사용하여 객관적으로 그리고 주관적으로 평가될 수 있다. 본원에 사용된 수술-후 통증은 무해자극통증(즉, 보통의 무해 자극에 대한 증가된 반응) 및 통각과민(즉, 보통의 유해 또는 불쾌한 자극에 대한 증가된 반응)을 포함하며, 이것은 차례로 자연적인 열 또는 기계적(촉각) 통증이 될 수 있다. 어떤 구체예에서, 통증은 열 감수성, 기계적 감수성 및/또는 휴식중 통증에 의해 특성화된다. 어떤 구체예에서 수술-후 통증은 기계적으로 유발된 통증이나 휴식중 통증을 포함한다. 다른 구체예에서 수술-후 통증은 휴식중 통증을 포함한다. 통증은 본 분야에 잘 공지된 대로 일차 또는 이차 통증일 수 있다.
통증의 아편유사제 치료는 아편유사제 치료의 양태가 개선될 때 "증강"된다(NGF 길항제를 투여하지 않고 아편유사제를 투여했을 때와 비교하여). 예를 들어, 통증의 아편유사제 치료의 효능은 NGF 길항제가 없을 때의 아편유사 진통제의 효능에 비해서 NGF 길항제가 존재할 때 증가될 수 있다. 다른 예로서, 아편유사제를 사용한 통증의 치료 또는 예방은, 병용 사용이 보다 나은 통증 완화를 허락할 때(예를 들어, 통증의 효과적인 치료 또는 예방을 허락하지 않는 아편유사제의 용량이 사용될 때), 아편유사 진통제와 병용하여 NGF 길항제를 사용함에 의해 "증강"될 수 있다.
본 발명의 방법
본원에 설명된 모든 방법에 관해서, NGF 길항제 및 아편유사 진통제에 대한 언급은 이들 제제 중 하나 이상을 포함하는 조성물들도 포함한다. 본 발명은 사람 및 사람이 아닌 모든 포유동물을 포함하는 개체에서 통증을 치료하는데 유용하다.
한 양태로서, 본 발명은 유효량의 아편유사 진통제와 유효량의 NGF 길항제를 병용하여 투여하는 것을 포함하는 개체에서 통증을 치료하는 방법을 제공한다. 어떤 구체예에서, 동일한 정도의 통증 개선을 행하는데 필요한 아편유사 진통제의 정상 용량을, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90% 이상까지 감소시키는 것을 허용하도록 충분한 NGF 길항제가 투여될 것이다.
다른 양태로서, 본 발명은 유효량의 아편유사 진통제와 유효량의 NGF 길항제를 병용하여 투여하는 것을 포함하는 개체에서 통증에 대한 아편유사 진통제 치료를 증강시키는 방법을 제공한다.
어떤 구체예에서, 통증은 급성 및/또는 만성 통증, 염증 성분을 갖는 어떤 통증, 외과수술-후 통증, 수술-후 통증(이의 통증을 포함함), 편두통, 두통 및 삼차신경통, 화상 관련 통증, 상처 또는 콩팥돌, 외상 관련 통증(외상성 두부손상을 포함함), 신경병증성 통증, 및 암 관련 통증("파탄성 통증" 및 말기암 관련 통증을 포함함) 중 어느 하나 이상을 포함한다. 다른 구체예에서, 통증은 아편유사 진통제(모르핀과 같은)로 통상 치료되는 어떤 통증, 예를 들어 췌장염, 콩팥돌, 두통, 생리통, 근골격계통 통증(예를 들어, 등 아래 통증), 염좌, 내장 통증, 난소위체낭, 전립선염, 방광염, 화학적 또는 열 화상, 또는 암(예를 들어, 뼈로 전이된 전립선암, 뼈로 전이된 유방암, 뼈로 전이된 폐암, 췌장암)에서의 통증이다.
다른 양태로서, 본 발명은 통증의 진전이나 진행을 예방, 개선 및/또는 예방하는 방법을 제공한다. 따라서, 어떤 구체예에서, 항-NGF 항체와 같은 NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제가 통증을 유발하는 사건(수술 같은) 전에 투여된다. 예를 들어, NGF 길항제는 통증을 가져오거나 통증을 일으킬 위험이 있다고 생각되는 행위의 30분, 1시간, 5시간, 10시간, 15시간, 24시간 전이나 또는 그 이상의 시간 전에, 예를 들어 1일, 수일, 또는 심지어 2주, 3주 또는 그 이상의 시간 전에 투여될 수 있다.
통증의 치료 또는 예방은 본 분야에 잘 공지된 방법을 사용하여 평가된다. 평가는 자극에 대한 반응, 표정 등과 같은 행동의 관찰과 같은 객관적 측정을 기초로 수행될 수 있다. 평가는 또한 다양한 통증 점수를 사용한 통증의 환자 특성화와 같은 주관적 측정을 기초로 할 수 있다. 예를 들어, Katz 등, Surg Clin North Am. (1999) 79(2):231-52; Caraceni 등, J Pain Symptom Manage (2002) 23(3):239-55 참조.
단일 또는 분리된 조성물(들)로서 NGF 길항제와 아편유사 진통제가 병용 투여될 때, 신경성장인자 길항제와 아편유사 진통제는 바람직한 효과의 징후와 일치되는 비로 존재한다. 어떤 구체예에서, 신경성장인자 길항제 대 아편유사 진통제의 중량비는 대략 1 대 1 일 수 있다. 어떤 구체예에서, 이 비는 약 0.001 대 약 1 내지 약 1000 대 약 1 이거나, 또는 약 0.01 대 약 1 내지 약 100 대 약 1 일 수 있다. 다른 비들도 고려된다.
통증의 치료 또는 예방에 사용하기 위해 필요한 신경성장인자(NGF) 길항제와 아편유사 진통제의 양은 선택된 특정한 화합물 또는 조성물에 따라서 뿐만 아니라 투여 경로, 치료될 상태의 성질, 그리고 환자의 나이와 상태에 따라서 다양할 것이며, 궁극적으로는 주치의의 재량에 따를 것임이 인정될 것이다.
NGF 길항제
본 발명의 방법은 NGF와 수용체의 결합 및/또는 NGF에 대한 세포 반응의 유도와 같은, NGF 신호화에 의해 매개되는 하류 경로를 포함하는, NGF 생물학적 활성을 차단, 억제 또는 감소(현저한 것을 포함한다)시키는 어떤 분자를 말하는 NGF 길항제를 사용한다. 용어 "길항제"는 어떤 생물학적 작용의 특이적 메카니즘도 내포하지 않으며, NGF와의 모든 가능한 약물학적, 생리학적, 및 생화학적 상호작용 및 여러 가지 상이한, 그리고 화학적으로 다른 조성물들에 의해 달성될 수 있는 결과를 명백히 포함하고 포괄하는 것으로 간주한다. 제한은 없지만, 전형적인 NGF 길항제는 항-NGF 항체, NGF에 대한 안티-센스 분자(NGF를 암호화하는 핵산에 대한 안티-센스 분자를 포함함), NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체와 같은)에 대한 안티-센스 분자(TrkA 및/또는 p75를 암호하하는 핵산에 대한 안티-센스 분자를 포함함), NGF 억제성 화합물, NGF 구조 유사체, NGF와 결합하는 TrkA 수용체의 도미넌트-네가티브 돌연변이, TrkA 면역부착소, 항-TrkA 항체, 항-p75 항체 및 키나제 억제인자를 포함한다. 본 발명의 목적을 위해서 용어 "길항제"는 이전에 확인된 용어, 표제, 그리고 NGF 자체, NGF 생물학적 활성(제한은 없지만 통증의 어떤 양태를 매개하는 능력을 포함함) 또는 생물학적 활성의 결과가 어떤 의미 있는 정도로 실질적으로 무효화, 감소 또는 중화되는 기능적 상태와 특징들을 모두 포함하는 것으로 명백히 이해될 것이다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제(예를 들어, 항체)는 NGF와 결합(물리적으로 상호작용)하고, NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체와 같은)와 결합하고, 및/또는 하류 NGF 수용체 신호화를 감소(저해 및/또는 차단)시킨다. 따라서, 어떤 구체예에서 NGF 길항제는 NGF와 결합(물리적으로 상호작용)한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체와 같은)와 결합한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 하류 NGF 수용체 신호화를 감소(저해 및/또는 차단)시킨다(예를 들어, 키나제 신호화의 억제인자). 다른 구체예에서, NGF 길항제는 NGF 합성 및/또는 방출을 억제(감소)한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 TrkA 면역부착소이다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체 이외의 다른 것다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 NGF(hNGF와 같은)와 결합하고, NT-3, NT4/5, 및/또는 BDNF와 같은 관련된 뉴로트로핀과는 유의할 만하게 결합하지 않는다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체이다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 사람화된다(본원에 설명된 항체 E3와 같이). 어떤 구체예에서, 항-NGF 항체는 항체 E3(본원에 설명된 바와 같은)이다. 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 항체 E3의 하나 이상의 CDR(들)을 포함한다(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5개, 또는 어떤 구체예에서는 E3로부터의 6개 CDR 전부). 다른 구체예에서 항체는 사람이다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 표 1에 나타낸 중쇄 가변영역의 아미노산 서열(SEQ ID NO:1) 및 표 2에 나타낸 경쇄 가변영역의 아미노산 서열(SEQ ID NO:2)을 포함한다. 다른 구체예에서, 항체는 면역학적으로 불활성인 영역, 예를 들어 보체 매개 리시스(lysis)를 개시시키지 않거나 항체-의존성 세포 매개 세포독성(ADCC)을 자극하지 않는 불변영역과 같은 변형된 불변영역을 포함한다. 다른 구체예에서, 불변영역은 Eur.J.Immunol. (1999)29:2613-2624; PCT 출원 No. PCT/GB99/01441; 및/또는 UK 특허출원 No. 9809951.8에 설명된 대로 변형된다.
항-NGF 항체
본 발명의 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체를 포함한다. 항-NGF 항체는 다음 특징들 중 하나 이상을 나타내야 한다: (a) NGF와 결합한다; (b) NGF 생물학적 활성 또는 NGF 신호화 기능에 의해 매개된 하류 경로를 억제한다; (c) 특히 아편유사 진통제와 병용했을 때 통증의 어떤 양태를 예방, 개선 또는 치료한다; (d) NGF 수용체 활성화(TrkA 수용체 다이머화 및/또는 자동인산화를 포함함)를 차단 또는 감소시킨다; (e) NGF 클리어런스를 증가시킨다; (f) NGF 합성, 생성, 또는 방출을 억제(감소)한다; (g) 통증에 대한 아편유사제 치료를 증강시킨다.
항-NGF 항체는 본 분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 PCT 공보 No. WO 01/ 78698, WO 01/64247, U.S. 특허 Nos. 5,844,092, 5,877,016, 및 6,153,189; Hongo 등, Hybridoma, 19:215-227(2000); Cell. Molec. Biol. 13:559-568(1993); GenBank 기탁 Nos. U39608, U39609, LI 7078, 또는 L 17077를 참조한다.
어떤 구체예에서 항-NGF 항체는 항체 "E3"로 명명된 사람화된 마우스 항-NGF 모노클로날 항체이며, 이것은 돌연변이 A330P331에서 S330S331(야생형 IgG2a 서열을 참조하여 번호 매긴 아미노산; Eur. J. Immunol. (1999) 29:2613-2624 참조)를 함유하는 사람 중쇄 IgG2a 불변영역; 사람 경쇄 kappa 불변영역; 및 표 1과 2에 나타낸 중쇄 및 경쇄 가변영역을 포함한다.
중쇄 가변영역 또는 경쇄 가변영역을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오티드가 2003년 1월 8일자로 ATCC에 기탁되었다.
벡터 Eb.911.3E는 표 2에 나타낸 경쇄 가변영역을 암호화하는 폴리뉴클레오티드이고, 벡터 Eb.pur.911.3E는 표 2에 나타낸 경쇄 가변영역을 암호화하는 폴리뉴클레오티드이고, 그리고 벡터 Db.911.3E는 표 1에 나타낸 중쇄 가변영역을 암호화하는 폴리뉴클레오티드이다.
다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 항체 E3의 하나 이상의 CDR(들)을 포함한다(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5개, 또는 어떤 구체예에서는 E3의 6개 CDR 전부). CDR 영역의 측정은 본 분야의 범위 내이다.
본 발명에서 유용한 항체는 모노클로날 항체, 폴리클로날 항체, 항체 단편(예를 들어, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, Fc 등), 2-특이적 항체, 헤테로콘쥬게이트 항체, 단쇄(ScFv), 이들의 돌연변이, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 사람화된 항체, 및 항체의 글리코실화 변이체, 항체의 아미노산 서열 변이체 및 공유결합 변성 항체를 포함하는 필요한 특이성을 갖는 항원인식부위를 포함하는 면역글로불린 분자의 어떤 다른 변형된 구조를 포함한다. 항체는 뮤린, 래트, 사람, 또는 어떤 다른 기원일 수 있다(키메라 또는 사람화된 항체를 포함한다). 본 발명의 목적을 위해서, 항체는 NGF 및/또는 NGF 신호화 기능에 의해 매개된 하류 경로를 억제하는 방식으로 NGF와 반응한다. 한 구체예에서, 항체는 사람 NGF 상의 하나 이상의 에피토프를 인식하는 사람 항체이다. 다른 구체예에서, 항체는 사람 NGF 상의 하나 이상의 에피토프를 인식하는 마우스 또는 래트 항체이다. 다른 구체예에서, 항체는 영장류, 개과, 고양이과, 말과 및 소과로 구성되는 군으로부터 선택된 NGF 상의 하나 이상의 에피토프를 인식한다. 다른 구체예에서, 항체는 면역학적으로 불활성인 영역, 예를 들어 보체 매개 리시스를 개시시키지 않거나 또는 항체-의존성 세포 매개 세포독성(ADCC)을 자극하지 않는 불변영역과 같은 변형된 불변영역을 포함한다. ADCC 활성은 U.S. 특허 5,500,362에 개시된 방법을 사용하여 평가될 수 있다. 다른 구체예에서, 불변영역은 Eur.J.Immunol.(1999)29:2613-2624; PCT 출원 No.PCT /GB99/01441; 및/또는 UK 특허출원 No. 9809951.8에 설명된 대로 변형된다.
NGF(hNGF 같은)에 대한 항-NGF 항체의 결합 친화성은 약 0.10 내지 약 0.80 nM, 약 0.15 내지 약 0.75nM 그리고 약 0.18nM 내지 약 0.72nM일 수 있다. 한 구체예에서, 결합 친화성은 약 2pM 내지 22pM이다. 어떤 구체예에서, 결합 친화성은 약 10nM이다. 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 10nM 미만이다. 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 0.1nM 또는 약 0.07nM이다. 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 0.1nM 미만, 또는 약 0.07nM 미만이다. 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나 내지는 약 2pM, 약 5pM, 약 10pM, 약 15pM, 약 20pM, 또는 약 40pM 중 어느 하나이다. 어떤 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나이거나, 또는 약 50pM 미만이다. 어떤 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나 미만이다. 또 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 2pM, 약 5pM, 약 10pM, 약 15pM, 약 20pM, 약 40pM, 또는 약 40pM 이상이다.
NGF에 대한 항체의 결합 친화성을 측정하는 한 방식은 항체의 1-작용성 Fab 단편의 결합친화성을 측정하는 것이다. 1-작용성 Fab 단편을 얻기 위해 항체(예를 들어, IgG)는 파파인을 사용하여 절단되거나 재조합 발현될 수 있다. 항체의 항-NGF Fab 단편의 친화성은 표면 플라즈몬 공명(BlAcore3000TM 표면 플라즈몬 공명(SPR) 시스템, BIAcore, INC, 뉴저지 피스카웨이)에 의해 측정될 수 있다. CM5 칩이 공급자의 지시에 따라 N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)-카르보디이니드 염산염(EDC)과 N-히드록시숙신아미드(NHS)로 활성화될 수 있다. 사람 NGF(또는 어떤 다른 NGF)가 10mM 아세트산 나트륨 pH 4.0으로 희석되고 0.005mg/mL의 농도로 활성화된 칩에 주입될 수 있다. 개별 칩 채널을 가로질러 다양한 유속을 사용하여 두 가지 범위의 항원 밀도가 달성된다: 상세한 키네틱 연구를 위한 100-200 반응단위(RU) 및 스크리닝 분석을 위한 500-600 RU. 칩은 에탄올아민으로 차단될 수 있다. 재생 연구는 Pierce 용리 완충액(제품 No. 21004, Pierce Biotechnology, 일리노이 락포드)과 4M NaCl의 혼합물(2:1)이 200회 주사에 걸쳐 칩상의 hNGF 활성을 유지하면서 결합된 Fab를 제거한다는 것을 나타낸다. HBS-EP 완충액(0.O1M HEPES, pH 7.4, 0.15 NaCl, 3mM EDTA, 0.005% 계면활성제 P29)가 BIAcore 분석용 러닝 완충액으로서 사용된다. 정제된 Fab 샘플의 연속 희석물(0.1-1Ox 추정된 KD)이 100㎕/분으로 1분동안 주입되고 2시간까지의 해리시간이 허락된다. Fab 단백질의 농도는 표준으로 기지 농도(아미노산 분석에 의해 측정)의 Fab를 사용하여 ELISA 및/또는 SDS-PAGE에 의해 측정된다. BIA 평가 프로그램을 사용하여 데이타를 1:1 랑뮈르 결합 모델(Karlsson, R. Roos, H. Fagerstam, L. Petersson, B. (1994). Methods Enzymology 6. 99-110)로 피팅함으로써 키네틱 결합속도(Kon)와 해리속도(Koff)가 얻어진다. 평형해리상수(KD) 값은 Koff/Kon으로서 계산된다. 이 프로토콜은 사람 NGF, 다른 척추동물(어떤 구체예에서 포유동물)의 NGF(예를 들어, 마우스 NGF, 래트 NGF, 영장류 NGF)를 포함하는 모든 NGF에 대한 항체의 결합 친화성을 측정하는데서 사용하기 적합할 뿐만 아니라 관련된 뉴로트로핀 NT3, NT4/5 및/또는 BDNF 같은 다른 뉴로트로핀과 함께 사용하는데도 적합하다.
어떤 구체예에서, 항체는 사람 NGF와 결합하고, 다른 척추동물 종들(어떤 구체예에서는 포유동물)로부터의 NGF와는 유의하게 결합하지 않는다. 어떤 구체예에서, 항체는 사람 NGF와 결합할 뿐만 아니라 다른 척추동물 종들(어떤 구체예에서는 포유동물)로부터의 하나 이상의 NGF와 결합한다. 또 다른 구체예에서, 항체는 NGF와 결합하고, 다른 뉴로트로핀(예를 들어, 관련된 뉴로트로핀 NT3, NT4/5 및/또는 BDNF)과는 유의하게 교차반응하지 않는다. 어떤 구체예에서, 항체는 NGF 뿐만 아니라 적어도 하나의 다른 뉴로트로핀과 결합한다. 어떤 구체예에서, 항체는 말이나 개와 같은 포유동물 종의 NGF와 결합하지만, 다른 포유동물 종으로부터의 NGF와는 유의하게 결합하지 않는다.
에피토프(들)은 연속하거나 또는 비연속할 수 있다. 한 구체예에서, 항체는 Hongo 등, Hybridoma, 19:215-227(2000)에 설명된 대로 MAb 911, MAb 912, 및 MAb 938로 구성된 군으로부터 선택된 항체와 동일한 hNGF 에피토프와 본질적으로 결합한다. 다른 구체예에서, 항체는 MAb 911과 동일한 hNGF 에피토프와 본질적으로 결합한다(Hongo 등, 상동). 예를 들어, 에피토프는 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: hNGF의 가변영역 1(아미노산 23-35)안의 잔기 K32, K34 및 E35; hNGF의 가변영역 4(아미노산 81-88)안의 잔기 F79 및 T81; 가변영역 4안의 잔기 H84 및 K88; hNGF의 가변영역 5(아미노산 94-98)와 hNGF의 C-말단(아미노산 111-118) 사이의 잔기 R103; hNGF의 전-가변영역 1(아미노산 10-23)안의 잔기 E11; hNGF의 가변영역 2(아미노산 40-49)와 hNGF의 가변영역 3(아미노산 59-66) 사이의 Y52; hNGF의 C-말단안의 잔기 L112 및 S113; hNGF의 가변영역 3안의 잔기 R59 및 R69; 또는 hNGF의 전-가변영역 1안의 잔기 V18, V20, 및 G23. 이에 더하여, 에피토프는 가변영역 1, 가변영역 3, 가변영역 4, 가변영역 5, N-말단 영역, 및/또는 hNGF의 C-말단 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 또 다른 구체예에서, 항체는 hNGF의 잔기 R103의 용매 접근성을 현저히 감소시킨다. 상기 설명된 에피토프는 사람 NGF에 관한 것이지만 당업자는 다른 종들의 NGF에 대해 사람 NGF의 구조를 정렬하고 이들 에피토프에 대한 대응물일 가능성을 확인할 수 있다는 것이 이해된다.
한 양태로서, NGF를 억제할 수 있는 항체(예를 들어, 사람, 사람화된, 마우스, 키메라)는 NGF의 전길이 또는 부분 서열을 발현하는 면역원을 사용하여 만들어질 수 있다. 다른 양태로서, NGF를 과발현하는 세포를 포함하는 면역원이 사용될 수 있다. 사용될 수 있는 면역원의 다른 예는 전길이 NGF를 함유하는 NGF 단백질 또는 이 NGF 단백질의 일부이다.
항-NGF 항체는 본 분야에 공지된 어떤 방법에 의해 만들어질 수 있다. 숙주 동물의 면역화 경로 및 일정은 일반적으로 항체 자극 및 생성에 대한 확립된 종래의 기술에 따르고 있으며 이는 본원에서 더 설명된다. 사람 및 마우스 항체의 생성에 대한 일반적인 기술은 본 분야에 공지되어 있으며 여기 설명된다.
사람을 포함하는 어떤 포유동물 피험자 또는 이들로부터의 항체 생성 세포는 사람을 포함하는 포유동물의 하이브리도마 셀라인의 생성을 위한 토대로서 사용하기 위해 조작될 수 있다. 전형적으로, 숙주 동물은 본원에 설명된 것을 포함하는 양의 면역원을 사용하여 복강내, 근육내, 경구, 피하, 족내, 및/또는 피내로 접종된다.
하이브리도마는 Kohler, B. 및 Milstein, C. (1975) Nature 256:495-497의 또는 Buck, D. W. 등 In Vitro, 18:377-381(1982)에 의해 변형된 일반적인 체강 세포 혼성화 기술을 사용하여 림프구와 불멸화된 골수종 세포로부터 제조될 수 있다. 제한은 없지만 X63-Ag8.653 및 Salk Institute, Cell Distribution Center(미국 캘리포니아 샌프란시스코)의 것들을 포함하는 입수가능한 골수종 세포가 혼성화에 사용될 수 있다. 일반적으로, 이 기술은 폴리에틸렌 글리콜과 같은 푸소겐을 사용하거나 또는 당업자에게 잘 공지된 전기적 수단에 의해서 골수종 세포와 림프양 세포를 융합하는 것을 포함한다. 융합 후 세포는 융합 배지로부터 분리되고, 하이포크산틴-아미노프테린-티미딘(HAT)와 같은 선택적 성장 배지에서 성장시켜 혼성화되지 않은 모세포를 제거한다. 혈청으로 보충되든 그렇지 않든 여기 설명된 배지 중 어느 것도 모노클로날 항체를 분비하는 하이브리도마를 배양하는데 사용될 수 있다. 세포융합기술에 대한 다른 대안으로서 EBV 불멸화 B 세포를 사용하여 본 발명의 항-NGF 모노클로날 항체를 생성할 수 있다. 하이브리도마는 확장되고 서브클로닝되며, 원한다면 상청액이 종래의 면역분석 과정(예를 들어, 방사성면역분석, 효소면역분석, 또는 형광면역분석)에 의해 항-면역원 활성에 대해 분석된다.
항체의 공급원으로서 사용될 수 있는 하이브리도마는 모든 유도체, NGF에 특이적인 모노클로날 항체를 생성하는 모 하이브리도마의 자손 세포, 또는 이들의 부분을 포함한다.
그러한 항체를 생성하는 하이브리도마는 공지의 과정에 의해 시험관내 또는 생체내에서 성장될 수 있다. 모노클로날 항체는 원한다면 황산암모늄 침전, 겔 전기영동, 투석, 크로마토그래피 및 한외여과와 같은 종래의 면역글로불린 정제 과정에 의해 배양 배지 또는 체액으로부터 분리될 수 있다. 원하지 않는 활성이 만일 존재한다면, 예를 들어 고체상 부착된 면역원으로 만들어진 흡착제 위에서 제조를 수행하고 원하는 항체를 면역원 밖으로 용리시키거나 방출함에 의해 제거될 수 있다. 2-작용성 또는 유도화제, 예를 들어 말레이미도벤조일 술포숙신이미드 에스테르(시스테인 잔기를 통해 콘쥬게이션), N-히드록시숙신이미드(리신 잔기를 통해), 글리타르알데히드, 무수숙신산, SOCl2 또는 R1N=C=NR(여기서 R 및 R1은 상이한 알킬기이다)를 사용한, 사람 NGF, 또는 면역화될 종들에 있는 면역원성인 단백질, 예를 들어 열쇠구멍 삿갓조개 헤모시아닌, 혈청 알부민, 소 티로글로불린 또는 대두 티로신 억제제에 콘쥬게이트된 표적 아미노산 서열을 함유하는 단편을 갖는 숙주 동물의 면역화로 항체(예를 들어, 모노클로날 항체) 집단을 얻을 수 있다.
원한다면, 관심의 항-NGF 항체(모노클로날 또는 폴리클로날)가 서열화될 수 있으며, 다음에 폴리뉴클레오티드 서열이 발현이나 증식용 벡터로 클로닝될 수 있다. 관심의 항체를 암호화하는 서열은 숙주세포의 벡터안에 유지될 수 있고, 다음에 숙주세포는 앞으로의 사용을 위해서 팽창되고 냉동될 수 있다. 대안으로서, 폴리뉴클레오티드 서열이 항체를 "사람화"하고 친화성이나 항체의 다른 특징들을 개선하기 위한 유전 조작에 사용될 수 있다. 예를 들어, 임상 시험 및 사람의 치료에 사용되는 경우 면역반응을 피하기 위해서 불변영역이 사람 불변영역과 더 유사하게 조작될 수 있다. NGF에 대한 더 큰 친화성과 NGF를 억제하는데 있어서의 더 큰 효과를 얻기 위해서 항체 서열을 유전적으로 조작하는 것이 바람직할 수 있다. 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 변화가 항-NGF 항체에 대해 만들어질 수 있으며 NGF에 대한 결합 친화성은 그대로 유지된다는 것이 당업자에게 자명할 것이다.
모노클로날 항체를 사람화하는 4개의 일반적 단계가 있다: (1) 출발 항체 경쇄 및 중쇄 가변 도메인의 뉴클레오티드 및 예상 아미노산 서열을 측정하는 단계, (2) 사람화된 항체의 디자인, 즉 사람화 과정 동안 사용할 항체 프레임워크 영역을 결정하는 단계, (3) 실제 사람화 방법/기술 단계, (4) 사람화된 항체의 트랜스펙션 및 발현 단계. 예를 들어, U.S. 특허 Nos. 4,816,567; 5,807,715; 5,866,692; 6, 331,415; 5,530,101; 5,693,761; 5,693,762; 5,585,089; 및 6,180,370 참조.
설치류 또는 변성 설치류 V 영역과 사람 불변 도메인과 융합된 이들의 관련된 상보성 결정 영역(CDR)을 갖는 키메라 항체를 포함하여, 비-사람 면역글로불린으로부터 유래된 항원결합부위를 포함하는 많은 "사람화된" 항체 분자가 설명되어 있다. 예를 들어, Winter 등 Nature 349:293-299(1991), Lobuglio 등 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86:4220-4224(1989), Shaw 등 J lmmunol. 138:4534-4538(1987), 및 Brown 등 Cancer Res. 47:3577-3583(1987) 참조. 다른 참고자료는 적합한 사람 항체 불변 도메인과 융합하기 전에 사람의 지지 프레임워크 영역(FR)으로 그래프트된 설치류 CDR을 설명한다. 예를 들어, Riechmann 등, Nature, 332:323-327 (1988), Verhoeyen 등 Science 239:1534-1536(1988) 및 Jones 등 Nature 321:522-525(1986) 참조. 다른 참고자료는 재조합에 의해 덧대진 설치류 프레임워크 영역에 의해 지지된 설치류 CDR을 설명한다. 예를 들어, 유럽특허공보 No. 0519596 참조. 이들 "사람화된" 분자는 사람 수용자에 있는 이들 부분의 지속기간 및 치료 적용의 효능을 제한하는 항-사람 항체 분자에 대한 원하지 않는 면역반응을 최소화하도록 디자인된다. 예를 들어, 항체 불변영역은 그것이 면역적으로 불활성이도록(예를 들어, 보체 리시스를 매개하지 않도록) 조작될 수 있다. 예를 들어, PCT 공보 No. PCT/ GB99/01441; UK 특허출원 No. 9809951.8 참조. 항체를 사람화하는 이용할 수 있는 다른 방법들이 Daugherty 등 Nucl. Acids Res. 19:2471-2476(1991) 및 U. S. 특허 Nos. 6,180,377; 6,054,297; 5,997,867; 5,866,692; 6,210,671; 및 6,350,861; 그리고 PCT 공보 No. WO01/27160에 개시되어 있다.
또 다른 대안으로서, 특이적 사람 면역글로불린 단백질을 발현하도록 조작된 상업적으로 입수가능한 마우스를 사용함에 의해 완전한 사람 항체가 얻어질 수 있다. 또, 더 바람직하거나(예를 들어, 완전한 사람 항체) 또는 더 많은 설치류 면역반응을 생성하도록 디자인된 트랜스제닉 동물이 사람화된 또는 사람 항체의 발생을 위해 사용될 수 있다. 그러한 기술의 예들은 Abgenix, Inc.(캘리포니아 프레몬트)사의 XenomouseTM 및 Medarex, Inc.(뉴저지 프린스톤)사의 HuMAb-Mouse 및 TC MouseTM이다.
상기 논의는 사람화된 항체에 속하지만, 논의된 일반적인 원리는, 예를 들어 개, 고양이, 영장류, 말 및 소에서 사용하기 위한 주문제작 항체에도 적용될 수 있음이 자명하다. 더 나아가, 본원에 설명된 항체를 사람화하는 한 가지 이상의 양태는, 예를 들어 CDR 그래프팅, 프레임워크 돌연변이 및 CDR 돌연변이와 조합될 수 있음이 자명하다.
대안으로서 항체는 본 분야에 공지된 어떤 방법을 사용하여 재조합적으로 제조되고 발현될 수 있다. 다른 대안으로서 항체는 파지 디스플레이 기술에 의해 재조합적으로 제조될 수 있다. 예를 들어, U.S. 특허 No. 5,565,332; 5,580,717; 5, 733,743; 및 6,265,150; 및 Winter 등, Annu. Rev. Immunol. 12:433-455(1994) 참조. 또는 달리, 파지 디스플레이 기술(McCafferty 등, Nature 348:552-553(1990))을 사용하여 비면역화된 제공자의 면역글로불린 가변(V) 도메인 유전자 레퍼터리로부터 시험관내에서 사람 항체 및 항체 단편들을 생성할 수 있다. 이 기술에 따르면, 항체 V 도메인 유전자가 M13 또는 fd 같은 사상형 박테리오파지의 메이저 또는 마이너 코트 단백질 유전자로 인-프레임 클로닝되고, 파지 입자의 표면 위에 기능적 항체 단편으로 디스플레이된다. 사상형 입자가 파지 게놈의 단일-가닥 DNA 카피를 함유하기 때문에, 항체의 기능적 특성에 기초한 선택은 또한 이들 특성을 나타내는 항체를 암호화하는 유전자의 선택을 가져온다. 따라서 파지는 B 세포 특성 중의 일부를 의태한다. 파지 디스플레이는 다양한 포맷으로 수행될 수 있다. 예를 들어, Johnson Kevin S. 및 Chiswell, David J. Current Opinion in Structural Biology 3, 564-571(1993) 참조. V-유전자 세그먼트의 몇몇 공급원이 파지 디스플레이에 사용될 수 있다. Clackson 등, Nature 352:624-628(1991)은 면역화된 마우스의 비장으로부터 유래된 V 유전자의 적은 무작위 조합 라이브러리로부터 항-옥사졸론 항체들의 다른 종류의 어레이를 분리했다. 비면역화된 사람 제공자의 V 유전자 레퍼토리가 구성될 수 있으며, 항원(자기-항원을 포함함)들의 다른 종류의 어레이에 대한 항체가 Mark 등 J Mol. Biol. 222:581-597(1991) 또는 Griffith 등 EMBO J. 12:725-734(1993)에 설명된 기술에 따라서 본질적으로 분리될 수 있다. 자연적 면역반응에서 항체 유전자는 높은 비율로 돌연변이를 축적한다(체세포 과돌연변이). 도입된 변화의 일부는 더 높은 친화성을 부여하고, 고-친화성 표면 면역글로불린을 디스플레이하는 B 세포가 우선적으로 복제되어 후속 항원 챌린지 동안 분화된다. 이런 자연적 과정은 "사슬 셔플링"으로 알려진 기술을 사용하여 모방될 수 있다(Marks, 등, Biol Techrzol. 10:779-783(1992)). 이 방법에서 파지 디스플레이에 의해 얻어진 "일차" 사람 항체의 친화성은 중쇄 및 경쇄 V 영역 유전자를 비면역화된 제공자로부터 얻어진 V 도메인 유전자의 천연발생 변이체(레퍼토리들)의 레퍼토리로 연속적으로 대체함에 의해서 개선될 수 있다. 이 기술은 pM 내지 nM 범위의 친화성을 갖는 항체 및 항체 단편의 생성을 허용한다. 매우 많은 파지 항체 레퍼토리("모든 라이브러리의 어머니"라고도 함)를 제조하기 위한 전략이 Waterhouse 등, Nucl. Acids Res. 21:2265-2266 (1993)에 의해 설명되었다. 유전자 셔플링을 사용하여 설치류 항체로부터 사람 항체를 유도할 수 있으며, 여기서 사람 항체는 출발 설치류 항체와 유사한 친화성 및 특이성을 가진다. "에피토프 임프린팅"이라고도 하는 이 방법에 따르면, 파지 디스플레이 기술에 의해 얻어진 설치류 항체의 중쇄 또는 경쇄 V 도메인 유전자가 사람 V 도메인 유전자의 레퍼토리로 대체되며, 이로써 설치류-사람 키메라가 만들어진다. 항원에 대한 선택은 기능적 항원결합부위를 복원할 수 있는 사람 가변영역의 분리를 가져오는데, 즉 에피토프가 파트너의 선택을 좌우한다. 남아 있는 설치류 V 도메인을 대체하기 위해서 이 과정이 반복될 때 사람 항체가 얻어진다(PCT 공보 No. WO 93/06213, 1993. 4. 1. 공개 참조). 종래의 CDR 그래프팅에 의한 설치류 항체의 사람화와 달리, 이 기술은 설치류 기원의 프레임워크나 CDR 잔기를 갖지 않는 완벽한 사람 항체를 제공한다. 상기 논의는 사람화된 항체에 속하지만, 논의된 일반적인 원리는, 예를 들어 개, 고양이, 영장류, 말 및 소에서 사용하기 위한 주문제작 항체에 적용할 수 있음이 자명하다.
항체는 먼저 숙주 동물로부터 항체 및 항체 생성 세포를 분리한 다음 유전자 서열을 얻고 이 유전자 서열을 사용하여 숙주 세포(예를 들어, CHO 세포)에서 재조합적으로 항체를 발현함에 의해서 재조합적으로 제조될 수 있다. 사용될 수 있는 다른 방법은 식물(예를 들어, 담배) 또는 트랜스제닉 밀크에서 항체 서열을 발현하는 것이다. 식물이나 밀크에서 재조합적으로 항체를 발현하는 방법은 개시되어 있다. 예를 들어, Peeters, 등, Vaccine 19:2756(2001); Lonberg, N. 및 D. Huszar Int. Rev. Immunol 13:65(1995); 및 Pollock, 등, Immunol Methods 231:147(1999) 참조. 항체의 유도체, 예를 들어 사람화된 항체, 단쇄 항체 등을 제조하는 방법이 본 분야에 공지되어 있다.
또, 면역분석 및 형광 활성화 세포 분리(FACS)와 같은 유세포분석 분리 기술을 사용하여 NGF에 특이적인 항체를 분리할 수 있다.
항체는 많은 상이한 캐리어에 결합될 수 있다. 캐리어는 활성 및/또는 불활성일 수 있다. 잘 공지된 캐리어의 예는 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리에틸렌, 덱스트란, 나일론, 아밀라제, 유리, 천연 및 변성 셀룰로스, 폴리아클릴아미드, 아가로스 및 마그네타이트를 포함한다. 캐리어의 성질은 본 발명의 목적에 맞게 가용성이거나 불용성일 수 있다. 당업자는 항체를 결합시키기 위한 다른 적합한 캐리어를 알고 있거나, 또는 루틴한 실험을 사용하여 그러한 것을 확인할 수 있을 것이다.
모노클로날 항체를 암호화하는 DNA는 종래의 과정(예를 들어, 모노클로날 항체의 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하는)을 사용하여 쉽게 분리되고 서열화된다. 하이브리도마 세포가 그러한 DNA의 바람직한 공급원으로서 사용된다. 일단 분리되면 DNA는 발현 벡터(PCT 공보 No. WO 87/04462에 개시된 발현 벡터와 같은)안에 두어진 다음 면역글로불린 단백질을 생성하지 않는 E. coli 세포, 유인원 COS 세포, 중국 햄스터 난소(CHO) 세포, 또는 골수종 세포와 같은 숙주 세포로 트랜스펙트되어 재조합 숙주 세포에서 모노클로날 항체의 합성이 얻어진다. 예를 들어, PCT 공보 No. WO 87/04462 참조. 또, DNA는, 예를 들어 동종성 뮤린 서열 대신에 사람 중쇄 및 경쇄 불변 도메인의 코딩 서열로 치환함에 의해(Morrison 등, Proc. Nat. Acad. Sci. 81:6851(1984)), 또는 비-면역글로불린 폴리펩티드의 코딩 서열의 전부 또는 일부를 면역글로불린 코딩 서열에 공유결합시킴에 의해서 변형될 수 있다. 이 방식으로, 본원의 항-NGF 모노클로날 항체의 결합특이성을 갖는 "키메라" 또는 "하이브리드" 항체가 제조된다.
항-NGF 항체는 본 분야에 잘 공지된 방법을 사용하여 특성화될 수 있다. 예를 들어, 한 방법은 그것이 결합하는 에피토프를 확인하는 것, 또는 "에피토프 맵핑"이다. 단백질 상의 에피토프의 위치를 맵핑하거나 특성화하기 위한 본 분야에 공지된 많은 방법이 있으며, 이들은 항체-항원 복합체 결정 구조의 용해, 경쟁 분석, 유전자 단편 발현 분석 및 합성 펩티드-기초 분석을 포함하며, 이들은 예를 들어 Harlow 및 Lane의 Using Antibodies(a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, 뉴욕, 1999)의 11장에 설명된다. 추가의 예로서, 에피토프 맵핑을 사용하여 항-NGF 항체가 결합하는 서열을 결정할 수도 있다. 에피토프 맵핑은 다양한 공급원, 예를 들어 Pepscan Systems(네덜란드 피에이치 렐리스타드 8219 에델헤르트베그 15)로부터 상업적으로 입수가능하다. 에피토프는 선형 에피토프, 즉 아미노산의 단일 스트레치에 함유된 에피토프이거나, 또는 반드시 단일 스트레치에 함유되지 않을 수도 있는 아미노산의 3-차원 상호작용에 의해 형성된 입체구조적 에피토프일 수 있다. 다양한 길이(예를 들어, 적어도 4-6개 아미노산 길이)의 펩티드가 분리되거나 합성(예를 들어, 재조합에 의해서)될 수 있으며, 항-NGF 항체와의 결합 분석에 사용된다. 다른 예에서, 항-NGF 항체가 결합하는 에피토프는, NGF 서열로부터 유래된 중복 펩티드를 사용하여 계통적으로 스크리닝하고 항-NGF 항체에 의한 결합을 측정하는데서 결정될 수 있다. 유전자 단편 발현 분석에 따르면, NGF를 암호화하는 오픈리딩프레임이 무작위적으로 또는 특이적 유전자 구성물에 의해 단편화되고, 시험될 항체를 갖는 NGF의 발현된 단편의 반응성이 측정된다. 유전자 단편은, 예를 들어 PCR에 의해 제조된 다음, 방사성활성 아미노산의 존재하에 시험관내에서 단백질로 형질전환되고 변역될 수 있다. 다음에 항체와 방사성활성 표지된 NGF 단편의 결합이 면역침전과 겔 전기영동에 의해 측정된다. 또한, 어떤 에피토프는 파지 입자(파지 라이브러리)의 표면 위에 디스플레이된 무작위 펩티드 서열의 큰 라이브러리를 사용하여 확인될 수 있다. 또는 달리, 중복 펩티드 단편의 한정된 라이브러리가 간단한 결합 분석으로 시험 항체와의 결합에 대해 시험될 수 있다. 추가의 예로서, 항원 결합 도메인의 돌연변이생성, 도메인 스와핑 실험 및 알라딘 스캐닝 돌연변이생성이 에피토프 결합에 필요한, 충분한 및/또는 필수적인 잔기를 확인하기 위해서 수행될 수 있다. 예를 들어, 도메인 스와핑 실험은 NGF 폴리펩티드의 다양한 단편이, 밀접하게 관련되지만 항원적으로는 별개인 단백질(뉴로트로핀 단백질 패밀리의 또 다른 구성원과 같은)로부터의 서열로 대체된 돌연변이 NGF를 사용하여 수행될 수 있다. 항체와 돌연변이 NGF의 결합을 평가함에 의해서, 항체 결합에 대한 특정한 NGF 단편의 중요성이 평가될 수 있다.
항-NGF 항체를 특성화하는데 사용될 수 있는 또 다른 방법은 동일한 항원과 결합한다고 알려진 다른 항체, 즉 NGF에 대한 다양한 단편들을 사용하는 경쟁 분석을 사용하는 것이며, 이로써 항-NGF-항체가 다른 항체와 동일한 에피토프에 결합하는지를 측정할 수 있다. 경쟁 분석은 당업자에게 잘 공지되어 있다. 본 발명에서 경쟁 분석에 사용될 수 있는 항체의 예는 Hongo, 등 Hybridoma 19:215-227(2000)에 설명된 MAb 911, 912, 938을 포함한다.
다른 NGF 길항제
항-NGF 항체 이외의 다른 NGF 길항제가 사용될 수 있다. 본 발명의 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 기능적 NGF의 발현을 차단 또는 감소시킬 수 있는 적어도 하나의 안티센스 분자이다. NGF의 뉴클레오티드 서열은 공지되어 있으며 공개적으로 이용할 수 있는 데이타베이스로부터 쉽게 입수가능하다. 예를 들어, Borsani 등, Nuc. Acids Res. 1990, 18, 4020; Accession Number NM 002506; Ullrich 등, Nature 303:821-825(1983) 참조. 다른 폴리뉴클레오티드와의 교차-반응 없이 NGF mRNA와 특이적으로 결합하는 안티센스 올리고뉴클레오티드를 제조하는 것이 일반적이다. 전형적인 표적화 부위는, 제한은 없지만 개시 코돈, 5' 조절 영역, 코딩 서열 및 3' 미번역 영역을 포함한다. 어떤 구체예에서, 올리고뉴클레오티드는 약 10 내지 100 뉴클레오티드 길이, 약 15 내지 50 뉴클레오티드 길이, 약 18 내지 25 뉴클레오티드 길이, 또는 그 이상의 길이이다. 올리고뉴클레오티드는 본 분야에 잘 공지된, 포스포로티오에이트 결합 및 2'-O 당 변형과 같은 백본 변형을 포함할 수 있다. 전형적인 안티센스 분자는 U.S. 공보 No. 20010046959에 설명된 NGF 안티센스 분자를 포함한다(http://www.ma-tec.com/repair.htm. 참조).
다른 구체예에서, NGF 길항제는 기능적 NGF 수용체(TrkA 및/또는 p75 같은)의 발현을 차단 또는 감소시킬 수 있는 적어도 하나의 안티센스 분자를 포함한다. Woolf 등 J. Neuroscie (2001)21(3):1047-55; Taglialetela 등 J Neurochem (1996) 66(5):1826-35. TrkA 및 p75의 뉴클레오티드 서열은 공지되어 있으며, 공개적으로 이용할 수 있는 데이타베이스로부터 쉽게 입수가능하다.
또는 달리, NGF 발현 및/또는 방출 및/또는 NGF 수용체 발현은 유전자 녹다운, 모르폴리노 올리고뉴클레오티드, RNAi, 또는 리보짐, 본 분야에 잘 공지된 방법들을 사용하여 감소될 수 있다. 다음의 사이트를 참조한다.
http://www.macalester.edu/-montgomery/RNAi.html
http://pub32.ezboard.com/finorpholinosfrm19.showMessage?topicID=6.topic
http://www.highveld.com/ribozyme.html.
다른 구체예에서, NGF 길항제는 적어도 하나의 NGF 억제성 화합물을 포함한다. 본원에 사용된 "NGF 억제성 화합물"은 NGF 생물학적 활성을 직접적으로 또는 간접적으로 감소, 억제, 중화 또는 제거하는 항-NGF 항체 이외의 다른 화합물을 말한다. NGF 억제성 화합물은 다음 특징들 중 어느 하나 이상을 나타내야 한다: (a) (a) NGF와 결합한다; (b) NGF 생물학적 활성 또는 NGF 신호화 기능에 의해 매개된 하류 경로를 억제한다; (c) 특히 아편유사 진통제와 병용했을 때 통증의 어떤 양태를 예방, 개선 또는 치료한다; (d) NGF 수용체 활성화(TrkA 수용체 다이머화 및/또는 자동인산화를 포함함)를 차단 또는 감소시킨다; (e) NGF 클리어런스를 증가시킨다; (f) NGF 합성, 생성, 또는 방출을 억제(감소)한다; (g) 통증에 대한 아편유사제 치료를 증강시킨다. 전형적인 NGF 억제성 화합물은 U.S. 공보 No. 20010046959에 설명된 소분자 NGF 억제제; PCT 공보 No.WO 00/69829에 설명된 p75와 결합하는 NGF를 억제하는 화합물; PCT 공보 No.WO 98/17278에 설명된 TrkA 및/또는 p75와 결합하는 NGF를 억제하는 화합물을 포함한다. NGF 억제성 화합물의 추가의 예는 PCT 공보 No. WO 02/17914 및 WO 02/20479 그리고 U.S. 특허 No.5,342,942; 6,127,401; 및 6,359,130에 설명된 화합물을 포함한다. 더 이상의 전형적인 NGF 억제성 화합물은 NGF의 경쟁 억제제인 화합물이다. U.S. 특허 No. 6,291,247 참조. 더 이상으로, 당업자는 다른 소분자 NGF 억제성 화합물을 제조할 수 있다.
어떤 구체예에서 NGF 억제성 화합물은 NGF와 결합한다. 전형적인 표적화(결합) 부위는, 제한은 없지만 TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체와 결합하는 NGF 부분, 및 수용체-결합 영역에 인접해 있고 수용체-결합 부분의 정확한 3-차원 모양을 일부 가져오는 NGF 부분들을 포함한다. 다른 구체예에서, NGF 억제성 화합물은 NGF 수용체(TrkA 및/또는 p75와 같은)와 결합하고 NGF 생물학적 활성을 억제한다. 전형적인 표적화 부위는 NGF와 결합하는 TrkA 및/또는 p75의 부분들이다.
소분자를 포함하는 구체예에서, 작은 분자는 100 내지 20,000달톤, 500 내지 15,000달톤 또는 1000 내지 10,000달톤 중 어떤 분자량을 가질 수 있다. 소분자의 라이브러리는 상업적으로 입수가능하다. 소분자는 흡입, 복강내, 정맥내, 근육내, 피하, 경막내, 심실내, 경구, 장관내, 비경구, 비강내 또는 피내를 포함하는 본 분야에 공지된 어떤 수단을 사용하여 투여될 수 있다. 일반적으로, 본 발명에 따른 NGF 길항제가 소분자일 때, 그것은 1회 내지 3회 이상의 용량으로 나누어져 환자의 체중 kg 당 0.1 내지 300mg의 비율로 투여될 것이다. 정상 체중의 성인 환자에 대해서 용량 당 1mg 내지 5g의 용량 범위가 투여될 수 있다.
다른 구체예에서, NGF 길항제는 적어도 하나의 NGF 구조 유사체를 포함한다. 본 발명에서 "NGF 구조 유사체"는 NGF의 구조의 일부와 유사한 3-차원 구조를 가지며 시험관내 또는 생체내에서 생리학적인 조건하에서 NGF 수용체와 결합하는 화합물을 말하고, 이 경우 결합은 NGF 생물학적 활성을 적어도 부분적으로 억제한다. 한 구체예에서, NGF 구조 유사체는 TrkA 및/또는 p75 수용체와 결합한다. 전형적인 NGF 구조 유사체는, 제한은 없지만 PCT 공보 No. WO 97/15593에 설명된 2-고리 펩티드; U.S. 특허 No. 6,291,247에 설명된 2-고리 펩티드; U.S. 특허 No. 6,017, 878에 설명된 고리 화합물; 및 PCT 공보 No. WO 89 /09225에 설명된 NGF-유도 펩티드를 포함한다. 또한, 적합한 NGF 구조 유사체가, 예를 들어 PCT 공보 No. WO 98/ 06048에 설명된 방법에 의해, NGF-수용체의 분자 모델링을 통해 디자인되고 합성될 수 있다. NGF 구조 유사체는 모노머이거나, 또는 개선된 친화성 및 생물학적 효과를 얻기 위해서 동일한 또는 상이한 구조들의 어떤 바람직학 조합의 형태로 다이머/올리고머일 수 있다.
다른 구체예에서, 본 발명은 TrkA 수용체 및/또는 p75 수용체의 적어도 하나의 도미넌트-네가티브 돌연변이를 포함하는 NGF 길항제를 제공한다. 당업자는, 예를 들어 TrkA 수용체의 도미넌트-네가티브 돌연변이를 제조할 수 있고, 이로써 이 수용체는 NGF와 결합하게 됨으로써 NGF를 포획하는 "싱크"로서 작용하게 된다. 그러나, 도미넌트-네가티브 돌연변이는 NGF와의 결합시 TrkA 수용체의 정상적인 생체활성을 갖지 않을 것이다. 전형적인 도미넌트-네가티브 돌연변이는, 제한은 없지만 다음의 참고자료에 설명된 돌연변이들을 포함한다: Li 등, Proc.Natl.Acad.Sci. USA 1998, 95, 10884; Eide 등, J. Neurosci. 1996, 16, 3123; Liu 등, J Neurosci 1997, 17, 8749; Klein 등, Cell 1990, 61, 647; Valenzuela 등, Neuron 1993, 10, 963; Tsoulfas 등, Neuron 1993, 10, 975; 및 Lamballe 등, EMBOJ 1993, 12, 3083, 이들은 모두 본원에 그 전체가 참고자료로서 포함된다. 도미넌트-네가티브 돌연변이는 단백질 형태나 발현 벡터의 형태로 투여될 수 있으며, 이로써 도미넌트-네가티브 돌연변이(예를 들어, 돌연변이 TrKA 수용체)가 생체내에서 발현된다. 단백질 또는 발현 벡터는 복강내, 정맥내, 근육내, 피하, 경막내, 심실내, 경구, 장관내, 비경구, 비강내, 피내, 또는 흡입에 의한 것과 같은 본 분야에 공지된 어떤 수단을 사용하여 투여될 수 있다. 예를 들어, 발현 벡터의 투여는 국부 또는 전신 투여를 포함하며, 이들은 주사, 경구 투여, 입자 총 또는 카테테르 투여, 그리고 국소 투여를 포함한다. 당업자는 생체내에서 외인성 단백질의 발현을 얻기 위한 발현 벡터의 투여에 익숙하다. 예를 들어, U.S. 특허 No. 6,436,908; 6,413,942; 및 6,37 6,471 참조.
또한, 안티센스 폴리뉴클레오티드, 발현 벡터, 또는 서브게놈 폴리뉴클레오티드를 함유하는 치료 조성물의 표적 송달이 사용될 수 있다. 수용체-매개 DNA 송달 기술은, 예를 들어 Findeis 등, Trends Biotechnol. (1993)11:202; Chiou 등, Gene Therapeutics: Methods And Applications Of Direct Gene Transfer(J. A. Wolff 편저)(1994); Wu 등, J. Biol. Chem. (1988) 263:621 ; Wu 등, J BioL Chem. (1994) 269:542; Zenke 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1990) 87:3655; Wu 등, J. Biol. Chem. (1991) 266:338에 설명된다. 폴리뉴클레오티드를 함유하는 치료 조성물은 유전자 치료 프로토콜에서의 국소 투여에 대해 약 100ng 내지 200mg의 범위로 투여된다. 어떤 구체예에서, 약 500ng 내지 약 50mg, 약 1㎍ 내지 2mg, 약 5㎍ 내지 약 500㎍, 그리고 약 20㎍ 내지 100㎍의 DNA 농도, 또는 그 이상의 농도가 유전자 치료 프로토콜 동안 사용될 수 있다. 본 발명의 치료 폴리뉴클레오티드 및 폴리펩티드는 유전자 송달 비히클을 사용하여 송달 수 있다. 유전자 송달 비히클은 바이러스 기원이거나 비-바이러스 기원일 수 있다(일반적으로, Jolly, Cancer Gene Therapy (1994) 1:51; Kimura, Human Gene Therapy (1994) 5:845; Connelly, Human Gene Therapy(1995) 1:185; 및 Kaplitt, Nature Genetics (1994) 6:148 참조). 그러한 코딩 서열의 발현은 내인성 포유동물 또는 이종성 프로모터 및/또는 인핸서를 사용하여 유도될 수 있다.
원하는 폴리뉴클레오티드의 송달과 원하는 세포에서의 발현을 위한 바이러스-기제 벡터는 본 분야에 잘 공지되어 있다. 전형적인 바이러스-기제 비히클은, 제한은 없지만 재조합 레트로바이러스(예를 들어, PCT 공보 No. WO 90/07936; WO 94/ 03622; WO 93/25698; WO 93/25234; WO 93/11230; WO 93/10218; WO 91/02805; U. S. 특허 No. 5,219,740 및 4,777,127; GB 특허 No. 2,200,651; 및 EP 특허 No. 0 345 242 참조), 알파바이러스-기제 벡터(예를 들어, Sindbis 바이러스 벡터, Semliki 포레스트 바이러스(ATCC VR-67; ATCC VR-1247), Ross River 바이러스(ATCC VR-373; ATCC VR-1246) 및 베네수엘라 말 뇌염 바이러스(ATCC VR-923; ATCC VR-1250; ATCC VR 1249; ATCC VR-532)), 및 아데노-관련 바이러스(AAV) 벡터(예를 들어, PCT 공보 No. WO 94/12649, WO93/03769; WO93/19191; WO 94/28938; WO 95/11984 및 WO 95/ 00655 참조)를 포함한다. 또한, Curiel, Hum. GeneTher.(1992) 3:147에 설명된 죽은 아데노바이러스에 연결된 DNA의 투여가 사용될 수 있다.
또한, 비-바이러스 송달 비히클 및 방법이 사용될 수 있으며, 이들은 제한은 없지만, 죽은 아데노바이러스에만 연결되거나 또는 연결되지 않은 다가양이온 축합된 DNA(예를 들어, Curiel, Hum. Gene Ther.(1992) 3:147 참조); 리간드-결합 DNA(예를 들어, Wu, J Biol. Chem.(1989) 264:16985 참조); 진핵세포 송달 비히클 세포(예를 들어, U. S. 특허 No. 5,814,482; PCT 공보 No. WO 95/07994; WO 96/17072; WO 95/30763; 및 WO 97/42338 참조) 그리고 핵 전하 중화 또는 세포 멤브레인과의 융합을 포함한다. 또한, 네이키드 DNA가 사용될 수 있다. 전형적인 네이키드 DNA는 PCT 공보 No. WO 90/11092 및 U. S. 특허 No. 5,580,859에 설명된다. 유전자 송달 부형제로서 작용할 수 있는 리포좀은 U.S. 특허 No. 5,422,120; PCT 공보 No. WO95/13796; WO94/23697; WO 91/14445; 및 EP 특허 No. 0524968에 설명된다. 추가의 접근법이 Philip, Mol. Cell Biol. (1994) 14:2411 및 Woffendin, Proc. Natl. Acad. Sci. (1994) 91:1581에 설명된다.
발현 벡터는 본원에 설명된 단백질-기제 NGF 길항제 중 어느 것의 직접 발현에 사용될 수 있다는 것이 또한 자명하다(예를 들어, 항-NGF 항체, TrkA 면역부착소 등). 예를 들어, NGF 및/또는 NGF 생물학적 활성을 차단(부분 차단 내지는 완전 차단)할 수 있는 다른 TrkA 수용체 단편이 본 분야에 공지되어 있다.
다른 구체예에서, NGF 길항제는 적어도 하나의 TrkA 면역부착소를 포함한다. 본원에 사용된 TrkA 면역부착소는 TrkA 수용체의 세포외 도메인과 면역글로불린 서열을 포함하는 가용성 키메라 분자를 말하며, 이것은 TrkA 수용체의 결합 특이성을 보유하고(TrkA 수용체의 결합 특이성을 실질적으로 보유한다) NGF와 결합할 수 있다. TrkA 면역부착소는 본원에 설명된 바와 같이 NGF 생물학적 활성을 차단(감소 및/또는 억제)할 수 있다.
TrkA 면역부착소는 본 분야에 공지되어 있으며, NGF와 TrkA 수용체의 결합을 차단(감소 또는 억제)한다고 알려져 있다. 예를 들어, U.S.특허 No. 6,153,189 참조. 한 구체예에서, TrkA 면역부착소는 NGF와 결합할 수 있는 TrkA 세포외 도메인으로부터의 TrkA 수용체 아미노산 서열(또는 TrkA 수용체의 결합 특이성을 실질적으로 보유하고 있는 아미노산 서열)과 면역글로불린 서열(또는 TrkA 수용체의 결합 특이성을 실질적으로 보유하고 있는 아미노산 서열)의 융합체를 포함한다. 어떤 구체예에서, TrkA 수용체는 사람 TrkA 수용체 서열이고, 융합체는 면역글로불린 불변 도메인 서열을 가진다. 다른 구체예에서, 면역글로불린 불변 도메인 서열은 면역글로불린 중쇄 불변 도메인 서열이다. 다른 구체예에서, 2개의 TrkA 수용체-면역글로불린 중쇄 융합체(예를 들어, 이황화결합(들)에 의한 공유결합을 통한)의 결합은 동종성 다이머 면역글로불린-유사 구조를 가져온다. 면역글로불린 경쇄가 이황화-결합 다이머에 있는 TrkA 수용체-면역글로불린 키메라 중 1개 또는 2개 모두와 더 결합될 수 있으며, 이로써 호모트리머 또는 호모테트라머 구조가 얻어진다. 적합한 TrkA 면역부착소의 예는 U.S. 특허 No. 6,153,189에 설명된 것들을 포함한다.
다른 구체예에서, NGF 길항제는 TrkA 수용체 및/또는 하류 신호화와 NGF 물리적 상호작용을 차단, 억제, 변경, 및/또는 감소시킬 수 있는 적어도 하나의 항-TrkA 항체를 포함하며, 이로써 NGF 생물학적 활성이 감소 및/또는 차단된다. 항-TrkA 항체는 본 분야에 공지되어 있다. 전형적인 항-TrkA 항체는 PCT 공보 No. WO 97/21732, WO 00/73344, WO 02/15924 및 U.S. 공보 No. 20010046959에 설명된 것들을 포함한다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 p75 수용체 및/또는 하류 신호화와 NGF 물리적 상호작용을 차단, 억제 및/또는 감소시킬 수 있는 적어도 하나의 항-p75 항체를 포함하며, 이로써 NGF 생물학적 활성이 감소 및/또는 차단된다.
다른 구체예에서, NGF 길항제는 TrkA 및/또는 p75 수용체 활성과 관련된 하류 키나제 신호화를 억제할 수 있는 적어도 하나의 키나제 억제제를 포함한다. 전형적인 키나제 억제제는 K252a 또는 K252b이며, 이들은 본 분야에 공지되어 있고, Knusel 등, J. Neurochem. 59:715-722(1992); Knusel 등, J Neurochemistry 57:955 -962(1991); Koizumi 등, J. Neuroscience 8:715-721(1988); Hirata 등, Chemical Abstracts 111:728, XP00204135, 요약 및 Collective Chemical Substance Index 12판 참조, p. 34237, c.3(5-7), (55-60, 66-69), p. 34238, c.1(41-44), c.2(25-27, 32-33), p.3423, c.3(48-50, 52-53); 및 U.S. 특허 No. 6,306,849에 설명된다.
임상의의 조사에 의해 많은 다른 카테고리의 NGF 길항제가 확인될 것이라고 예상된다.
NGF 길항제의 확인
항-NGF 항체 및 다른 NGF 길항제가 본 분야에 공지된 방법을 사용하여 확인되거나 특성화될 수 있으며, 이로써 NGF 생물학적 활성의 감소, 개선, 또는 중화가 검출 및/또는 측정된다. 예를 들어, U.S. 특허 No. 5,766,863 및 5,891,650에 설명된 키나제 수용체 활성화(KIRA) 분석을 사용하여 NGF 길항제를 확인할 수 있다. 이 ELISA-타입 분석은 수용체 단백질 티로신 키나제(이후 "rPTK"라고 함), 예를 들어 TrkA 수용체의 키나제 도메인의 자동인산화를 측정함에 의해서 키나제 활성화를 정성적 또는 정량적 측정하는데 적합하며, 또한 선택된 rPTK, 예를 들어 TrkA의 잠재적 길항제를 확인 및 특성화에도 적합하다. 분석의 제 1 단계는 키나제 수용체, 예를 들어 TrkA 수용체의 키나제 도메인의 인산화를 포함하며, 여기서 수용체는 진핵세포의 세포막에 존재한다. 수용체는 내인성 수용체거나, 또는 이 수용체를 암호화하는 핵산, 또는 수용체 구성물이 세포로 형질전환될 수 있다. 전형적으로, 제 1 고체상(예를 들어, 제 1 분석 플레이트의 웰)은 그러한 세포(통상 포유동물 셀라인)의 실질적으로 동종성 집단으로 코팅되어 이 세포들이 고체상에 부착된다. 주로 세포는 점착성이며 따라서 제 1 고체상에 자연적으로 부착한다. 만일 "수용체 구성물"이 사용된다면 그것은 통상 키나제 수용체와 플래그 폴리펩티드의 융합체를 포함한다. 플래그 폴리펩티드는 이 분석의 ELISA 부분에서 주로 포획 항체인 포획제에 의해 인식된다. 다음에, 후보 항-NGF 항체 또는 다른 NGF 길항제와 같은 분석물질이 NGF와 함께 부착 세포를 갖는 웰에 첨가되며, 이로써 티로신 키나제 수용체(예를 들어, TrkA 수용체)가 NGF와 분석물질에 노출(또는 접촉)된다. 이 분석은 그것의 리간드 NGF에 의해 TrkA의 활성화를 억제하는 항체(또는 다른 NGF 길항제)의 확인을 가능하게 한다. NGF와 분석물질에 노출된 다음 부착 세포는 리시스 완충액(이것은 가용성 세제를 가진다)을 사용하여 용해되고 부드럽게 교반되며, 이로써 세포 용해물을 농축이나 정화할 필요 없이 이 분석의 ELISA 부분을 직접 수행할 수 있는 세포 용해물이 나온다.
다음에, 이와 같이 제조된 세포 용해물은 이 분석의 ELISA 단계를 수행할 준비가 된다. ELISA 단계의 제 1 단계로서 제 2의 고체상(보통 ELISA 마이크로타이터 플레이트의 웰)이 티로신 키나제 수용체, 또는 수용체 구성물의 경우 플래그 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는 포획제(주로 포획 항체)로 코팅된다. 제 2 고체상의 코팅은 포획제가 제 2 고체상에 부착되도록 수행된다. 포획제는 일반적으로 모노클로날 항체이지만, 본원의 실시예에 설명된 바와 같이 폴리클로날 항체도 사용될 수 있다. 다음에, 얻어진 세포 용해물이 부착된 포획제에 노출되거나 접촉되며, 이로써 수용체 또는 수용체 구성불이 제 2 고체상에 부착(또는 포획)된다. 다음에, 세척 단계를 수행하여 포획된 수용체나 수용체 구성물을 남긴 채로 결합되지 않은 세포 용해물을 제거한다. 다음에, 부착 또는 포획된 수용체 또는 수용체 구성물이 티로신 키나제 수용체에 있는 인산화된 티로신 잔기를 확인하는 항-포스포티로신 항체에 노출되거나 접촉된다. 한 구체예에서, 항-포스포티로신 항체는 비-방사성활성 착색 시약의 색 변화를 촉매하는 효소와 콘쥬게이트된다(직접적으로 또는 간접적으로). 따라서, 수용체의 인산화가 뒤이은 시약의 색 변화에 의해 측정될 수 있다. 효소는 항-포스포티로신 항체에 직접 결합될 수 있거나, 또는 콘쥬케이트 분자(예를 들어, 비오틴)이 항-포스포티로신 항체에 콘쥬게이트될 수 있고 이어서 효소가 콘쥬게이트 분자를 통해 항-포스포티로신 항체에 결합될 수 있다. 마지막으로, 항-포스포티로신 항체와 포획된 수용체나 수용체 구성물의 결합이, 예를 들어 착색 시약의 색 변화에 의해 측정된다.
또한, NGF 길항제는 후보 제제와 NGF를 함께 인큐베이션 하고 다음의 특징들 중 하나 이상을 모니터함에 의해서 확인될 수 있다: (a) NGF와 결합한다; (b) NGF 생물학적 활성 또는 NGF 신호화 기능에 의해 매개된 하류 경로를 억제한다; (c) NGF 수용체 활성화(TrkA 수용체 다이머화 및/또는 자동인산화를 포함함)를 차단 또는 감소시킨다; (d) NGF 클리어런스를 증가시킨다; (e) 특히 아편유사 진통제와 병용했을 때 통증의 어떤 양태를 치료, 개선 또는 예방한다; (f) NGF 합성, 생성, 또는 방출을 억제(감소)한다; (g) 통증에 대한 아편유사제 치료를 증강시킨다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 NGF와 함께 후보 제제를 인큐베이션하고 결합 및 NGF의 생물학적 활성의 감소나 중화를 모니터함에 의해서 확인된다. 결합 분석은 정제된 NGF 폴리펩티드(들)을 사용하거나, NGF 폴리펩티드(들)을 자연적으로 발현하거나 발현하도록 트랜스펙트된 세포를 사용하여 수행될 수 있다. 한 구체예에서 결합 분석은 경쟁 결합 분석이며, 이 경우 NGF 결합에 대한 기지의 NGF 길항제와 경쟁하는 후보 항체의 능력이 평가된다. 이 분석은 ELISA 포맷을 포함하는 다양한 포맷으로 수행될 수 있다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 후보 화합물과 NGF를 함께 인큐베이션하고 TrkA 수용체 다이머화 및/또는 자동인산화의 억제를 모니터함에 의해서 확인된다.
초기 확인 후, 후보 항-NGF 길항제의 활성은 표적의 생물학적 활성을 시험하기 위해 공지된 생체분석법에 의해 더 확인되고 정제된다. 또는 달리, 생체분석법을 사용하여 후보를 직접 스크리닝할 수 있다. 예를 들어, NGF는 반응성 세포에서 형태학적으로 인식가능한 많은 변화를 촉진한다. 이들은 제한은 없지만, PC12 세포의 분화 촉진 및 이들 세포로부터 신경돌기의 성장 증진(Urfer 등, Biochem. 36: 4775-4781(1997); Tsoulfas 등, Neuro 7 10:975-990(1993)), 반응성 감각 및 교감 신경절의 체외이식편으로부터 신경돌기의 파생 촉진(Levi-Montalcini, R. 및 Angel etti, P. Nerve growth factor. Physiol. Rev. 48, 534-569, 1968) 그리고 배아 등쪽 뿌리 신경절, 삼차 신경절, 또는 교감 신경절 뉴런과 같은 NGF 의존성 뉴런의 생존 촉진(예를 들어, Chun & Patterson, Dev. Biol. 75:705-711, (1977); Buchman & Davies, Development 118:989-1001, (1993))을 포함한다. 따라서, NGF 생물학적 활성의 억제에 대한 분석은 NGF 반응성 세포를 후보 항-NGF 항체 및 후보 NGF 길항제와 같은 분석물질 및 NGF와 함께 배양하는 것을 수반한다. 적합한 시간 후 세포 반응이 분석될 것이다(세포 분화, 신경돌기 파생 또는 세포 생존).
또한, NGF의 생물학적 활성을 차단 또는 중화하는 후보 NGF 길항제의 능력이 Hongo 등, Hybridoma 19:215-227(2000)에 설명된 대로 배아 래트 등쪽 뿌리 신경절 생존 생체분석에서 NGF 매개 생존을 억제하는 후보 제제의 능력을 모니터함에 의해 평가될 수 있다.
조성물
본 발명의 조성물은 본원의 다양한 구체예에 설명된 바와 같이 유효량의 NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은) 및/또는 아편유사 진통제를 포함한다. 어떤 구체예에서, 조성물은 제약학적으로 허용되는 부형제를 더 포함한다. 어떤 구체예에서, 조성물은 본원에 설명된 방법들(수술-후 통증을 치료하는 방법과 같은) 중 어느 것에 사용된다. 그러한 조성물의 예와 제조방법이 또한 앞 절과 하기에 설명된다. NGF 길항제와 아편유사제는 단일 조성물로 존재하거나 분리된 조성물로서 존재할 수 있다. 따라서, 어떤 구체예에서, NGF 길항제와 아편유사 진통제는 동일한 조성물에 존재한다. 다른 구체예에서, NGF 길항제와 아편유사 진통제는 분리된 조성물에 존재한다.
다른 양태로서, 본 발명은 NGF 길항제와 아편유사 진통제의 상승작용적 조성물을 제공한다.
어떤 구체예에서, 본 발명은 통증(수술-후 통증과 같은)의 치료에 사용하기 위한 NGF 길항제를 포함하는 제약학적 조성물을 제공하며, 여기서 상기 사용은 아편유사 진통제의 동시 및/또는 연속 투여를 포함한다. 어떤 구체예에서, 본 발명은 통증의 치료에서 사용하기 위한 아편유사 진통제를 포함하는 제약학적 조성물을 제공하며, 여기서 상기 사용은 NGF 길항제의 동시 및/또는 연속 투여를 포함한다. 어떤 구체예에서, 본 발명은 통증의 치료를 위한 분리, 동시 및/또는 연속 사용을 위한 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 포함하는 제약학적 조성물을 제공한다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체(본원에 설명된 항체 E3와 같은)이다. 다른 구체예에서, 아편유사 진통제는 모르핀이다. 또 다른 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체이고 아편유사 진통제는 모르핀이다.
조성물은 하나 이상의 NGF 길항제를 포함할 수 있다는 것이 이해된다. 예를 들어, 조성물은 한 부류의 NGF 길항제에 속한 하나 이상의 구성원(예를 들어, 상이한 NGF 에피토프들을 인식하는 항-NGF 항체들의 혼합물), 및 상이한 부류의 NGF 길항제에 속한 구성원들(예를 들어, 항-NGF 항체 및 NGF 억제성 화합물)을 포함할 수 있다. 다른 전형적인 조성물은 동일한 에피토프(들)을 인식하는 하나 이상의 항-NGF 항체들, 상이한 NGF 에피토프와 결합하는 상이한 종의 항-NGF 항체들, 또는 상이한 NGF 억제성 화합물들을 포함한다. 다른 구체예에서, 조성물은 NGF와 결합하는(물리적 상호작용하는) 길항제(예를 들어, 항체), NGF 수용체(TrkA 수용체 또는 p75 수용체와 같은)와 결합하는 길항제 및/또는 하류 NGF 수용체 신호화를 감소(저해 및/또는 차단)하는 길항제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 NGF 길항제를 포함한다.
본 발명에 사용되는 조성물은 동결건조 제제나 수용액의 형태로, 제약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정제를 더 포함할 수 있다(Remington: The Scien ce and Practice of Pharmacy 20판. (2000) Lippincott Williams and Wilkins, Ed. K. E. Hoover.). 허용되는 담체, 부형제 또는 안정제는 그 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이며, 인산염, 시트르산염, 및 다른 유기산과 같은 완충액; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(예를 들어, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이트, 페놀, 부틸 또는 벤질알콜; 메틸 또는 프로필 파라벤과 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥사놀; 3-펜타놀; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 잔기 미만) 폴리펩티드; 단백질, 예를 들어 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 폴리비닐피롤리돈 같은 친수성 폴리머; 아미노산, 예를 들어 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트란을 포함하는 다른 탄수화물; EDTA와 같은 착물화제; 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨과 같은 당; 나트륨 같은 염-형성 카운터 이온; 금속 착물(예를 들어, Zn-단백질 착물); 및/또는 비-이온계 계면활성제, 예를 들어 TWEEN TM, PLURONICSTM 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함할 수 있다. 제약학적으로 허용되는 부형제가 본원에 더 설명된다.
본원에 설명된 조성물은 통증의 치료에 유용하다고 알려진 추가의 화합물을 함유할 수 있다. 또한, NGF 길항제 및 아편유사 진통제, 그리고 이들의 조성물은 제제의 효능을 증강 및/또는 보완하도록 작용하는 다른 제제와 병용하여 사용될 수 있다.
키트
또, 본 발명은 본 방법에서 사용하기 위한 키트를 제공한다. 본 발명의 키트는 NGF 길항제(항-NGF 항체, 예를 들어 본원에 설명된 사람화된 항체 E3와 같은) 및 아편유사 진통제를 포함하는 하나 이상의 용기를 포함하며, 어떤 구체예에서는 본원에 설명된 발명의 방법 중 어느 것에 따라 사용하기 위한 지침을 더 포함한다. 어떤 구체예에서, 키트는 항-NGF 항체(본원에 설명된 항체 E3와 같은)를 포함한다. 다른 구체예에서, 키트는 항체 E3의 하나 이상의 CDR(들)(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5개, 또는 어떤 구체예에서는 E3의 6개 CDR 전부)를 포함하는 항-NGF 항체를 포함한다. 키트는 개체가 통증을 가지는지 아니면 개체가 통증의 위험이 있는지 확인하는 것에 기초하여 치료에 적합한 개체를 선택하는 것에 대한 설명을 더 포함한다. 어떤 구체예에서, 본 발명은 본원에 설명된 방법들 중 어느 것고 함께 사용하기 위한 키트를 제공하며, 상기 키트는 NGF 길항제를 포함한다. 또 다른 구체예에서, 키트는 사람화된 항체(본원에 설명된 항체 E3와 같은)를 포함한다. 또 다른 구체예에서, 지침은 어떤 통증(수술-후 통증과 같은)의 치료, 예방 및/또는 개선을 위해 아편유사 진통제와 병용하여 NGF 길항제를 투여하는 것에 대한 설명을 포함한다.
어떤 구체예에서, 키트는 NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은), 아편유사 진통제 및 통증의 효과적인 치료를 위해 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 동시에 및/또는 연속하여 투여하는 것에 관한 지침을 포함한다. 다른 구체예에서, 키트는 NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은)와 통증의 효과적인 치료를 위해 NGF 항체와 아편유사 진통제를 동시에 및/또는 연속하여 투여하는 것에 대한 지침을 포함한다. 다른 구체예에서, 키트는 NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은), 및 아편유사 진통제(모르핀과 같은), 및 통증의 효과적인 치료를 위해 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 분리하여, 동시에 및/또는 연속하여 투여하는 것에 관한 지침을 포함한다.
어떤 구체예에서 키트는 항-NGF 항체를 포함한다. 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 표 1에 나타낸 중쇄 가변영역과 표 2에 나타낸 경쇄 가변영역을 포함하는 항체이다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 본원에 설명된 항체 E3이다.
NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은)와 아편유사 진통제는 분리된 용기 또는 단일 용기에 존재할 수 있다. 키트가 하나의 별도의 조성물 또는 둘 이상의 조성물을 포함할 수 있으며, 여기서 한 조성물은 NGF 길항제를 포함하고 한 조성물을 아편유사 진통제를 포함한다는 것이 이해된다.
본 발명의 키트는 적합하게 포장된 상태로 있다. 적합한 포장은, 제한은 없지만 바이알, 바틀, 병, 가요성 포장(예를 들어, 밀봉 마일라 또는 플라스틱백) 등을 포함한다. 키트는 선택적으로 완충액 및 해석 정보와 같은 추가의 성분을 제공할 수 있다.
NGF 길항제의 사용과 관련된 지침은 일반적으로 투여량, 투약 일정, 및 의도된 치료에 맞는 투여 경로에 관한 정보를 포함한다. 용기는 단위 용량, 벌크 포장(예를 들어, 다수-용량 포장) 또는 하위-단위 용량일 수 있다. 본 발명의 키트에 제공된 지침은 전형적으로 라벨 또는 포장 삽입물에 대한 서면 지침(예를 들어, 키트에 포함된 인쇄지)이지만, 기계로 읽을 수 있는 지침(예를 들어, 자기 또는 광 저장 디스크에 수록된 지침)도 허용된다.
라벨 또는 포장 삽입물은 조성물이 수술-후 통증을 치료, 개선 및/또는 예방하는데 사용됨을 나타낸다. 지침은 본원에 설명된 방법 중 어느 것을 수행하기 위해서 제공될 수 있다.
본 발명의 키트는 적합하게 포장된 상태로 있다. 적합한 포장은, 제한은 없지만 바이알, 바틀, 병, 가요성 포장(예를 들어, 밀봉 마일라 또는 플라스틱백) 등을 포함한다. 또한, 특정한 장치, 예를 들어 흡입기, 비강투여장치(예를 들어, 분무기) 또는 주입장치, 예를 들어 미니펌프와 함께 사용하기 위한 포장도 고려된다. 키트는 멸균된 엑세스 포트를 가질 수 있다(예를 들어, 용기는 피하주사바늘에 의해 관통될 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액용의 백 또는 바이알일 수 있다). 또한, 용기가 멸균된 엑세스 포트를 가질 수 있다(예를 들어, 용기는 피하주사바늘에 의해 관통될 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액용의 백 또는 바이알일 수 있다). 조성물 중 적어도 하나의 활성제는 NGF 길항제, 예를 들어 항-NGF 항체이다. 용기는 제 2의 제약학적 활성제를 더 포함할 수 있다.
키트는 선택적으로 완충액 및 해석 정보와 같은 추가 성분을 제공할 수 있다. 통상 키트는 용기 및 용기에 대한 또는 용기와 관련된 라벨 또는 포장 삽입물(들)을 포함한다.
NGF 길항제 및 아편유사 진통제의 투여, 및 치료 평가
NGF 길항제 및 아편유사 진통제는 어떤 적합한 경로에 의해 개체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 이들은 함께 또는 개별적으로 경구, 정맥내, 혀밑, 피하, 동맥내, 근육내, 직장, 척수내, 흉막내, 복강내, 심실내, 혀밑, 경피 또는 흡입 방식에 의해 투여될 수 있다. 이들은 경구적으로, 예를 들어 본 분야에 인정된 과정에 의해 제조된 정제, 트로우키, 캡슐, 엘리시르, 현탁액, 시럽, 웨이퍼, 츄잉검, 롤리팝, 좌약 등의 형태로 투여된다. 본원에 설명된 예들은 제한하려는 의도는 없으며 이용가능한 기술을 예시한다는 것이 당업자에게 자명해야 한다.
따라서, 어떤 구체예에서, NGF 길항제, 예를 들어 항-NGF 항체는 정맥내 투여와 같은 공지된 방법에 따라서 개체에게 투여되며, 예를 들어 볼루스로서, 또는 근육내, 복강내, 뇌척수내, 피하, 동맥내, 활막내, 경막내, 경구, 흡입 또는 국소 경로에 의해 어떤 시간 기간에 걸쳐 연속 주입함에 의해 투여된다. 제트 분무기 및 초음파 분무기를 포함하는 액체 제제에 알맞은 상업적으로 입수가능한 분무기가 투여에 유용하다. 액체 제제가 직접 분무될 수 있으며, 동결건조된 분말이 복원 후에 분무될 수 있다. 또는 달리, NGF 길항제는 불화탄소 제제와 계량 용량 흡입기를 사용하여 에어로졸로 만들 수 있거나, 또는 동결건조되고 분쇄된 분말로서 흡입될 수 있다.
또한, 부위-특이적 또는 표적화된 국소 송달 기술이 투여에 유용하다. 부위-특이적 또는 표적화된 국소 송달 기술의 예는 NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제의 다양한 이식형 저장소 공급원이나, 또는 국소 송달 카테테르, 예를 들어 주입 카테테르, 유치 카테테르, 또는 바늘 카테테르, 합성 이식편, 외부 싸개, 션트 및 스텐트 또는 다른 이식형 장치, 부위 특이적 캐리어, 직접 주사, 환자 조절식 무통(PCA) 기술 또는 장치, 및/또는 직접 도포를 포함한다. 예를 들어, PCT 공보 No. WO 00/53211 및 U.S. 특허 No. 5,981,568 참조.
항-NGF 항체와 같은 NGF 길항제의 다양한 제제들이 투여에 사용될 수 있다. 어떤 구체예에서 NGF 길항제는 순수하게 투여될 수 있다. 어떤 구체예에서 NGF 길항제는 항-NGF를 포함하며, 제약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 제제를 포함하여 다양한 제제일 수 있다. 제약학적으로 허용되는 부형제는 본 분야에 공지되어 있으며, 제약학적으로 효과적인 물질의 투여를 용이하게 하는 상대적으로 불활성인 물질이다. 예를 들어, 부형제는 형태나 경도를 제공할 수 있거나, 또는 희석제로서 작용할 수 있다. 적합한 부형제는, 제한은 없지만 안정제, 습윤 및 유화제, 삼투성을 변화시키는 염, 캡슐화제, 완충액, 및 피부침투 증진제를 포함한다. 비경구 및 경구 약물 송달을 위한 부형제 및 제제가 Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20판(Mack Publishing (2000))에 제시된다.
어떤 구체예에서, NGF 길항제는 주사(예를 들어, 복강내, 정맥내, 피하, 근육내 등)에 의한 투여에 알맞게 제조된다. 따라서, 이들 제제는 식염수, 링거액, 덱스트로스 용액 등과 같은 제약학적으로 허용되는 비히클과 조합될 수 있다. 특정한 투약 섭생, 즉 용량, 시기 및 반복회수는 특정한 개체 및 그 개체의 병력에 의존할 것이다. 투약 섭생(사용된 NGF 길항제(들)을 포함하는)은 시간에 따라 변할 수 있다.
항-NGF 항체는 주사(예를 들어, 복강내, 정맥내, 피하, 근육내 등)에 의한 것을 포함하여 어떤 적합한 방법을 사용하여 투여될 수 있다. 또한, 항-NGF 항체는 본원에 설명된 대로 흡입에 의해 투여될 수 있다. 일반적으로, 항-NGF 항체의 투여를 위해서, 초기 후보 제제의 용량은 약 2mg/kg일 수 있다. 어떤 구체예에서, 전형적인 일일 용량은 상기 언급된 요인들에 따라서 3㎍/kg 내지 30㎍/kg 내지 300㎍/kg 내지 3mg/kg 내지 30mg/kg 내지 100mg/kg 또는 그 이상 중 어느 것의 범위일 수 있다. 상태에 따라 수일 또는 더 오랜 기간에 걸친 반복 투여에 대해서, 원하는 증상 억제가 일어날 때까지 또는 통증이 감소될 만큼 충분한 치료 수준이 달성될 때까지 치료가 지속된다. 전형적인 투약 섭생은 약 2mg/kg의 초기 용량을 투여한 후, 항-NGF 항체 약 1mg/kg의 용량을 매주 유지하거나, 또는 격주로 약 1mg/kg의 용량을 유지한다. 그러나, 의사가 달성하기 원하는 약물동력학적 붕괴의 패턴에 따라서 다른 투약 섭생도 유용할 수 있다. 예를 들어, 주 당 1 내지 4회의 투약이 고려된다. 다른 투약 섭생은 1일 당 1회 이하, 주 당 1 내지 4회 또는 더 적은 빈도의 섭생을 포함한다. 어떤 구체예에서, 화합물은 주 당 약 1회, 월 당 약 1 내지 4회 투여된다. 항-NGF 항체의 투약은 본원에 설명된다. 이 치료법의 진행과정은 종래의 기술 및 분석에 의해 쉽게 모니터된다.
어떤 구체예에서, NGF 길항제가 항체가 아닐 때, 본 발명에 따르는 NGF 길항제는 (어떤 구체예에서) 1 내지 3회 용량으로 나누어져 환자의 체중 당 약 0.1 내지 300mg/kg의 비율로, 또는 본원에 개시된 대로 투여될 수 있다. 보통 체중의 어떤 성인 환자에 대해서, 약 0.3 내지 5.00mg/kg의 용량 범위가 투여될 수 있다. 특정한 투약 섭생, 즉 용량, 시기 및 반복회수는 특정한 개체 및 이 개체의 병력, 그리고 각 제제의 특성(제제의 반감기, 및 본 분야에 잘 공지된 다른 고려사항과 같은)에 따를 것이다.
아편유사 진통제는 그러한 진통제에 대한 종래의 투약 수준 이하의 투약 수준으로 투여될 수 있다. 어떤 구체예에서, 아편유사 진통제는 감소된 수준으로 투여된다. 적합한 투약 수준은 선택된 아편유사 진통제의 진통 효과에 따를 것이지만, 전형적으로 적합한 수준은 일일 당 약 0.001 내지 25mg/kg, 일일 당 약 0.005 내지 10mg/kg, 또는 일일 당 약 0.05 내지 1mg/kg, 또는 그 미만의 수준일 것이다. 화합물은 일일(또는 그 이상) 당 6회 이하, 일일 당 1 내지 4회의 섭생으로 투여될 수 있거나, 또는 더 적은 빈도로 투여될 수 있다. 어떤 구체예에서, 아편유사 진통제는 연속하여, 또는 매우 자주(예를 들어, PCA) 투여된다.
단일 또는 분리된 조성물(들)로서 병용 투여할 때, 신경성장인자 길항제와 아편유사 진통제는 바람직한 효과의 징후와 일치되는 비로 존재한다. 어떤 구체예에서, 신경성장인자 길항제 대 아편유사 진통제의 중량비는 대략 1 대 1 일 수 있다. 어떤 구체예에서, 이 비는 약 0.001 대 약 1 내지 약 1000 대 약 1 이거나, 또는 약 0.01 대 약 1 내지 약 100 대 약 1 일 수 있다. 다른 비들도 고려된다.
통증의 치료 또는 예방에 사용하기 위해 필요한 신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제의 양은 선택된 특정한 화합물 또는 조성물에 따라서 뿐만 아니라 투여 경로, 치료될 상태의 성질, 및 환자의 나이와 상태, 치료의 진행과정이나 단계에 따라서 다양할 것이며, 궁극적으로는 주치의의 재량에 따를 것임이 인정될 것이다. 예를 들어, NGF 길항제(항-NGF 항체와 같은)의 적합한 용량은 사용된 NGF 길항제(들)(또는 이들의 조성물), 치료될 통증의 종류 및 심한 정도, 제제가 예방의 목적으로 투여되는지 치료의 목적으로 투여되는지의 여부, 선행된 치료, 환자의 임상적 병력 및 제제에 대한 반응, 그리고 주치의의 재량에 따를 것이다. 전형적으로, 임상의는 항-NGF 항체와 같은 NGF 길항제를 바람직한 결과를 달성하는 용량에 도달할 때까지 투여할 것이다.
반감기와 같은 실험적인 고려사항이 일반적으로 용량의 결정에 기여할 것이다. 예를 들어, 사람화된 항체나 완전한 사람 항체와 같은 사람 면역 시스템과 양립가능한 항체가 항체의 반감기를 연장시키고 항체가 숙주의 면역 시스템에 의해 공격 받는 것을 방지하기 위해 사용될 수 있다. 투여 빈도는 치료의 진행과정에 따라서 결정되어 조절될 수 있으며, 반드시 그런 것은 아니지만 일반적으로는 통증의 치료 및/또는 억제 및/또는 개선 및/또는 지연에 기초한다. 또는 달리, NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제의 지속적인 연속 방출 제제가 적합할 수 있다. 지속 방출을 달성하기 위한 다양한 제제들 및 장치가 본 분야에 공지되어 있다.
한 구체예에서, NGF 길항제의 용량은 통증을 치료하기 위해 NGF 길항제의 1회 이상의 투여(들)이 제공된 개체에서 실험적으로 결정될 수 있다. 개체는 아편유사 진통제와 병용하여 NGF 길항제, 예를 들어 항-NGF 항체를 증분 용량으로 제공받는다. 치료의 효능을 평가하기 위해서 통증의 척도에 따를 수 있다.
본 발명의 방법에 따른 NGF 길항제와 아편유사 진통제의 투여는, 예를 들어 수용자의 생리학적 상태, 치료의 목적이 치료인지 예방인지의 여부, 그리고 숙련된 전문의에게 알려진 다른 요인들에 따라서 연속식 또는 간헐식일 수 있다. NGF 길항제의 투여는 본질적으로 미리 선택된 시간 기간에 걸쳐 연속적으로 투여될 수 있거나, 또는 일련의 용량을 간격을 두어서, 예를 들어 통증 발생 전에, 동안에 또는 후에; 통증 발생 전에; 통증 발생 동안에; 또는 통증 발생 후에; 통증 발생 전후 모두에; 통증 발생 동안과 후에; 통증 발생 전과 동안에; 또는 통증 발생 전에, 동안 및 후에 모두 투여될 수 있다. 예를 들어, 투여는 상처, 절개, 외상, 수술, 및 통증을 발생시킬 가능성이 있는 어떤 다른 사건 전에, 동안에 및/또는 후에 행해질 수 있다.
어떤 구체예에서, 하나 이상의 NGF 길항제, 예를 들어 항체가 존재할 수 있다. 길항제는 서로 동일하거나 상이할 수 있다. 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개, 또는 그 이상의 상이한 NGF 길항제가 존재할 수 있다. 일반적으로 이들 NGF 길항제는 서로 부정적인 영향을 미치지 않는 보완적인 활성을 가진다. 또한, NGF 길항제는 제제의 효능을 증강 및/또는 보완하는 작용을 하는 다른 제제와 함께 사용될 수 있다.
어떤 구체예에서, 하나 이상의 아편유사 진통제가 존재할 수 있다. 아편유사 진통제는 서로 동일하거나 상이할 수 있다. 적어도 1개, 적어도 2개, 적어도 3개, 적어도 4개, 적어도 5개, 또는 그 이상의 상이한 아편유사 진통제가 존재할 수 있다. 일반적으로 이들 아편유사 진통제는 서로 부정적인 영향을 미치지 않는 보완적인 활성을 가진다. 또한, 아편유사 진통제는 제제의 효능을 증강 및/또는 보완하는 작용을 하는 다른 제제와 함께 사용될 수 있다.
본 발명에 따라서 사용되는 NGF 길항제(항체와 같은) 및 아편유사 진통제의 치료제는 원하는 정도의 순도를 갖는 항체와 선택적인 제약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정제(Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20판(Mack Publishing(2000) )를 혼합함에 의해서, 동결건조 제제나 수용액의 형태로 저장에 알맞게 제조된다. 허용되는 담체, 부형제 또는 안정제는 사용되는 용량 및 농도에서 수용자에게 비독성이며, 인산염, 시트르산염, 및 다른 유기산과 같은 완충액; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(예를 들어, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드; 벤제토늄 클로라이트, 페놀, 부틸 또는 벤질알콜; 메틸 또는 프로필 파라벤 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥사놀; 3-펜타놀; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 잔기 미만의) 폴리펩티드; 단백질, 예를 들어 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 폴리머; 아미노산, 예를 들어 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트란을 포함하는 다른 탄수화물; EDTA와 같은 착물화제; 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨과 같은 당; 나트륨 같은 염-형성 카운터 이온; 금속 착물(예를 들어, Zn-단백질 착물); 및/또는 비-이온계 계면활성제, 예를 들어 TWEENTM, PLURONICSTM 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함할 수 있다.
NGF 길항제(항체와 같은)를 함유하는 리포솜이 본 분야에 공지된 방법에 의해 제조되며, 이것은 Epstein 등 Proc.Natl.Acad. Sci. USA 82:3688(1985); Hwang, 등, Proc. Natl Acad. Sci. USA 77:4030(1980); 및 U. S. 특허 No. 4,485,045 및 4,544,545에 설명된다. 증진된 순환 시간을 갖는 리포솜이 U.S. 특허 No. 5,013, 556에 개시된다. 특히 유용한 리포솜은 포스파티딜콜린, 콜레스테롤 및 PEG-유도체화 포스파티딜에탄올아민(PEG-PE)를 포함하는 지질 조성물을 사용한 역상 증발법에 의해 생성될 수 있다. 리포솜은 정해진 공극 크기의 필터를 통해 압출되어 원하는 직경을 갖는 리포솜을 얻는다.
또한, 활성 성분은, 콜로이드상 약물 송달 시스템(예를 들어, 리포솜, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노-입자 및 나노캡슐) 또는 마이크로에멀젼 중에서, 예를 들어 코아세르베이션 기술, 또는 계면중합에 의해서 제조된 마이크로캡슐에, 예를 들어 각각 히드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐에 포획될 수 있다. 그러한 기술은 Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20판(Mack Publishing (2000))에 개시된다.
지속-방출 제제가 제조될 수 있다. 지속-방출 제제의 적합한 예는 항체를 함유하는 고체 소수성 폴리머의 반투과 매트릭스를 포함하며, 이 매트릭스는 형상화된 물품, 예를 들어 필름이나 마이크로캡슐의 형태이다. 지속-방출 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 히드로겔(예를 들어, 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트), 또는 폴리(비닐알콜)), 폴리락티드(U.S. 특허 No. 3,773,919), L-글루탐산과 7-에틸 L-글루타메이트의 코폴리머, 비-변성 에틸렌-비닐 아세테이트, 변성 락트산-글리콜산 코폴리머, 예를 들어 LUPRON DEPOTTM(락트산 글리콜산 코폴리머와 로이프롤리드 아세테이트로 이루어진 주사가능한 마이크로스피어), 수크로스 아세테이트 이소부티레이트, 및 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산을 포함한다.
생체내 투여에 사용되는 제제는 멸균되어야 한다. 이것은, 예를 들어 멸균 여과 멤브레인을 통한 여과에 의해 쉽게 달성된다. 치료용 항-NGF 항체 조성물은 일반적으로 멸균 엑세스 포트를 갖는 용기, 예를 들어 피하 주사 바늘에 의해 관통될 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액용 백이나 바이알에 넣어진다.
본 발명에 따르는 조성물은 정제, 알약, 캡슐, 분말, 과립, 용액 또는 현탁액 또는 좌약과 같은 단위 제형, 경구용, 비경구용 또는 직장 투여용의 단위 제형, 또는 흡입이나 취입에 의한 투여용의 단위 제형일 수 있다.
정제와 같은 고체 조성물을 제조하는데 있어서, 주된 활성 성분이 제약학적 담체, 예를 들어 종래의 정제화 성분, 예를 들어 콘스타치, 락토스, 수크로스, 소르비톨, 탈크, 스테아르산, 스테아르산 마그네슘, 인산이칼슘 또는 검, 및 다른 제약학적 희석제, 예를 들어 물과 혼합되어, 본 발명의 화합물 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 비독성 염의 균질한 혼합물을 함유하는 고체 예비제제 조성물을 형성한다. 이들 예비제제 조성물이 균질하다고 말할 때, 그것은 활성 성분이 조성물 전체에 균일하게 분산되어 조성물이 정제, 알약 및 캡슐과 같은 동등하게 효과적인 단위 제형으로 다시 나눠질 수 있다는 의미이다. 다음에, 이 고체 예비제제 조성물은 본 발명의 활성 성분을 약 0.01mg 내지 약 0.1mg 내지 약 500mg 함유하는 상기 설명된 타입의 단위 제형으로 다시 나눠진다. 이 신규한 조성물의 정제 또는 알약은 코팅되거나 그렇지 않으면 연장된 작용의 이점을 제공하는 제형을 제공하도록 조제된다. 예를 들어, 정제 또는 알약은 내부 투약 성분과 외부 투약 성분을 포함할 수 있으며, 후자는 전자의 겉을 둘러싼 형태이다. 두 성분은 위에서의 붕해에 대항하도록 작용하고 내부 성분이 십이지장을 그대로 통과하거나 방출이 지연되도록 허락하는 장관층에 의해 분리될 수 있다. 그러한 장관층이나 코팅으로서 다양한 재료가 사용될 수 있으며, 그러한 재료는 많은 폴리머 산 및 셰랙, 세틸알콜 및 셀룰로스 아세테이트로서 폴리머 산과 그러한 재료의 혼합물을 포함한다.
본 발명의 조성물이 경구나 주사 방식에 의한 투여에 알맞게 혼합될 수 있는 액체 형태는 수용액, 적합하게는 풍미가 있는 시럽, 수성 또는 유성 현탁액, 및 면실유, 참기름, 코코넛 오일 또는 땅콩기름과 같은 식용기름을 갖는 풍미가 있는 에멀젼, 뿐만 아니라 엘리시르 및 유사한 제약학적 부형제를 포함한다. 수성 현탁액에 알맞은 적합한 분산 또는 현탁제는 합성 및 천연 검, 예를 들어 트래거캔스, 아카시아, 알기네이트, 덱스트란, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈 또는 젤라틴을 포함한다. 또한, 활성 성분은 고도로 점성인 제어 방출 제품, 예를 들어 수쿠로스 아세테이트 이소부티레이트 등에서 혼합될 수 있다. 이들 제제는 경구 복용 또는 주사를 위해 사용될 수 있다. 주사는 약물의 국소 저장을 가져올 수 있으며, 이것은 1일 내지 3개월의 과정에 걸쳐 국소적으로 방출된다.
주사에 의한 투여에 알맞은 조성물은 표면활성제(또는 습윤제 또는 계면활성제)와 함께 또는 에멀젼(유중수 또는 수중유 에멀젼)의 형태로 활성 성분으로 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 포함하는 것들을 포함한다.
적합한 표면활성제는, 특히 비-이온계 제제, 예를 들어 폴리옥시에틸렌소르비탄(예를 들어, TweenTM 20, 40, 60, 80 또는 85) 및 다른 소르비탄(예를 들어, SpanTM 20, 40, 60, 80 또는 85)를 포함한다. 표면활성제를 갖는 조성물은 편리하게 0.05 내지 5% 표면활성제를 포함할 것이며, 이것은 0.1 내지 2.5%일 수도 있다. 필요하다면 다른 성분, 예를 들어 만니톨 또는 다른 제약학적으로 허용되는 부형제가 첨가될 수 있음이 자명할 것이다.
적합한 에멀젼은 상업적으로 입수가능한 지방 에멀젼, 예를 들어 Intralipid TM, LiposynTM, InfonutrolTM, LipofundinTM 및 LipiphysanTM을 사용하여 제조될 수 있다. 활성 성분이 미리 혼합된 에멀젼 조성물에 용해되거나, 또는 활성 성분이 오일(예를 들어, 대두유, 해바라기유, 면실유, 참기름, 옥수수유 또는 아몬드기름)에 용해된 다음 인지질(예를 들어, 달걀 인지질, 대두 인지질 또는 대두 레시틴)과 물을 함께 혼합하여 에멀젼이 형성된다. 에멀젼의 등장성을 조절하기 위해 다른 성분, 예를 들어 글리세롤 또는 글루코스가 첨가될 수 있음이 자명할 것이다. 적합한 에멀젼은 전형적으로 20% 이하, 예를 들어 5 내지 20%의 오일을 함유할 것이다. 지방 에멀젼은 0.1 내지 1.0㎛, 특히 0.1 내지 0.5㎛의 지방 방울을 포함할 수 있으며, 5.5 내지 8.0 범위의 pH를 가진다.
어떤 구체예에서, 에멀젼 조성물은 신경성장인자 길항제와 IntralipidTM 또는 이들의 성분들(대두유, 달걀 인지질, 글리세롤 및 물)을 혼합함으로써 제조된 것들일 수 있다.
흡입 또는 취입용 조성물은 제약학적으로 허용되는 수성 또는 유기 용매, 또는 이들의 혼합물 중의 용액 및 현탁액, 그리고 분말을 포함한다. 액체 또는 고체 조성물은 상기 제시된 적합한 제약학적으로 허용되는 부형제들을 함유할 수 있다. 조성물은 국소 또는 전신 효과에 알맞은 경구 또는 비강 호흡기 경로에 의해 투여된다. 바람직하게 멸균된 제약학적으로 허용되는 용매 중의 조성물은 기체의 사용에 의해 분무될 수 있다. 분무된 용액은 분무 장치로부터 직접 호흡될 수 있거나, 또는 분무 장치가 안면 보호구, 산소 텐트 또는 간헐적 양압 호흡기에 부착될 수 있다. 용액, 현탁액 또는 분말 조성물은 적합한 방식으로 제제를 송달하는 장치로부터 투여될 수 있다(경구 또는 비강 투여 방식을 포함함).
치료 효능이 본 분야에 잘 공지된 방법에 의해 평가될 수 있다.
다음의 실시예들은 본 발명을 예시하며 제한하지 않는다.
발명의 간단한 개요
본 발명은 NGF의 길항제가 아편유사 진통제와 함께 통증을 치료하는데 효과적이라는 발견을 기초로 한다. 그러한 치료법은 일반적으로 감소된 용량의 아편유사 진통제로 동일한 양의 통증 감소 및/또는 아편유사제 통증 치료의 다른 형태의 증강을 행하는 것을 허용한다.
제 1 양태로서, 본 발명은 그들이 함께 효과적인 통증 완화를 제공하도록 신경성장인자 길항제의 양과 아편유사 진통제의 양을 투여하는 것을 포함하는 통증을 치료하는(또는 다른 구체예에서는 예방하는) 방법을 특징으로 한다. NGF 길항제와 아편유사 진통제의 상대량 및 비는 다양할 수 있다. 어떤 구체예에서, 동일한 정도의 통증 개선을 행하는데 필요한 아편유사 진통제의 정상 용량을 적어도 약 50%까지 감소시키는 것을 허용하도록 충분한 NGF 길항제가 투여될 것이다. 어떤 구체예에서는, 동일한 정도의 통증 개선을 행하는데 필요한 아편유사 진통제의 정상 용량을, 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 또는 적어도 약 90% 이상까지 감소시키는 것을 허용하도록 충분한 NGF 길항제가 투여될 것이다.
다른 양태로서, 본 발명은 유효량의 NGF 길항제와 병용하여 유효량의 아편유사 진통제를 투여하는 것을 포함하는 아편유사 진통제 통증 치료를 증강시키는 방법을 제공한다. 본원에 사용된 함께 병용 투여는 연속 투여하는 것 및/또는 상이한 시간에 투여하는 것을 포함한다. 또한, 병용 투여는 공-제제(즉, NGF 길항제와 아편유사 진통제가 동일한 조성물에 존재한다(조합된다))로서 투여하는 것 및/또는 분리된 조성물로서 투여하는 것을 포함한다. 본원에 사용된 "병용 투여"는 아편유사 진통제와 NGF 길항제가 개체에게 유효량으로 투여되는 어떤 환경을 포함하여 의미한다. 본원에서 더 논의된 대로, NGF 길항제와 아편유사 진통제는 상이한 용량, 빈도 및/또는 간격으로 투여될 수 있음이 이해된다. 예를 들어, 항-NGF 항체가 매주 투여될 수 있으며 아편유사 진통제는 더 자주 투여될 수 있다. NGF 길항제 및 아편유사 진통제는 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로를 사용하여 투여될 수 있음이 이해되며, 상이한 투약 섭생들이 투여(들)의 경과과정에 따라 변할 수 있음이 이해된다.
다른 양태로서, 본 발명은 개체에서 통증 발생의 감소, 통증 개선, 통증 완화 및/또는 통증 진전이나 진행의 지연 방법을 제공하며, 상기 방법은 유효량의 아편유사 진통제와 유효량의 NGF 길항제를 병용하여 투여하는 것을 포함한다.
본 발명의 방법은 아편유사 진통제의 사용이 일반적으로 처방되는 경우의 통증, 예를 들어 췌장염, 콩팥돌, 두통, 생리통, 근골격계통 통증(예를 들어, 등 아래 통증), 염좌, 내장 통증, 난소위체낭, 전립선염, 방광염, 화학적 또는 열 화상, 또는 암(예를 들어, 뼈로 전이된 전립선암, 뼈로 전이된 유방암, 뼈로 전이된 폐암, 췌장암)에서의 통증을 포함하는 어떤 병인을 갖는 어떤 통증을 치료 또는 예방하는데 적합하다.
본 발명의 방법에 사용하기 위한 적합한 NGF 길항제는 NGF 생물학적 활성을 직접적으로 또는 간접적으로 감소시킬 수 있는 어떤 제제이다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제(예를 들어, 항체)는 NGF와 결합(물리적으로 상호작용)하고, NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75와 같은)에 결합하고, 및/또는 하류 NGF 수용체 신호화를 감소(저해 및/또는 차단)시킨다(예를 들어, 키나제 신호화 억제인자). 따라서, 어떤 구체예에서 NGF 길항제는 NGF와 결합(물리적으로 상호작용)한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 NGF 수용체(TrkA 수용체 및/또는 p75)에 결합한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 하류 NGF 수용체 신호화(예를 들어, 키나제 신호화의 억제인자)를 감소(저해 및/또는 차단)시킨다. 다른 구체예에서, NGF 길항제는 NGF 합성 및/또는 방출을 억제(감소)한다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 TrkA 면역부착소이다. 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 항-NGF 항체, NGF에 대한 안티-센스 분자(NGF를 암호화하는 핵산에 대한 안티-센스 분자를 포함함), NGF 수용체(TrkA 및/또는 p75와 같은)에 대한 안티-센스 분자(NGF 수용체를 암호화하는 핵산에 대한 안티-센스 분자를 포함함), NGF 억제성 화합물, NGF 구조 유사체, NGF와 결합하는 TrkA 및/또는 p75 수용체의 도미넌트-네가티브 돌연변이, 항-TrkA 항체, 항-p75 항체 및 키나제 억제인자 중 어느 하나 이상으로부터 선택된다. 다른 구체예에서 NGF 길항제는 항-NGF 항체이다. 또 다른 구체예에서 항-NGF 항체는 사람 NGF를 인식한다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 사람 NGF와 특이적으로 결합한다. 또 다른 구체예에서, 항체는 마우스 모노클로날 항체 MAb 911, MAb 912 및 MAb 938의 어느 하나 이상에서 선택된 항체와 동일한 NGF 에피토프 6과 본질적으로 결합한다(Hongo등 Hybridoma 19:215-227(2000)). 어떤 구체예에서, NGF 길항제는 NGF(hNGF와 같은)와 결합하지만 Nt-3, NT4/5 및/또는 BDNF와 같은 관련된 뉴로트로핀과는 유의하게 결합하지 않는다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 사람화된다(본원에 설명된 항체 E3와 같이). 어떤 구체예에서 항-NGF 항체는 항체 E3(본원에 설명된 바와 같은)이다. 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 항체 E3(본원에 설명된)이다. 다른 구체예에서, 항-NGF 항테는 항체 E3의 하나 이상의 CDR(들)을 포함한다(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5개, 또는 어떤 구체예에서는 E3로부터의 6개 CDR 전부). 다른 구체예에서 항체는 사람이다. 또 다른 구체예에서, 항-NGF 항체는 표 1에 나타낸 중쇄 가변영역의 아미노산 서열(SEQ ID NO:1) 및 표 2에 나타낸 경쇄 가변영역의 아미노산 서열(SEQ ID NO:2)을 포함한다. 다른 구체예에서, 항체는 면역학적으로 불활성인 영역, 예를 들어 보체 매개 리시스(lysis)를 개시시키지 않거나 항체-의존성 세포 매개 세포독성(ADCC)을 자극하지 않는 불변영역과 같은 변형된 불변영역을 포함한다. 다른 구체예에서, 불변영역은 Eur.J.Immunol. (1999)29:2613-2624; PCT 출원 No. PCT /GB99/01441; 및/또는 UK 특허출원 No. 9809951.8에 설명된 대로 변형된다.
어떤 구체예에서, NGF 길항제는 NGF 분자와 결합한다. 또 다른 구체예에서, NGF 길항제는 NGF(사람 NGF와 같은)와 특이적으로 결합하는 항체이다. 그러나, 대안으로서 NGF 길항제는 TrkA 수용체와 결합할 수도 있다. NGF 길항제는 hNGF와 결합할 수 있고, hNGF와 사람 TrkA(hTrkA)의 결합을 효과적으로 억제하거나 및/또는 TrkA 수용체의 활성화를 효과적으로 억제할 수 있는 항-사람 NGF(항-hNGF) 모노클로날 항체일 수 있다.
NGF(hNGF 같은)에 대한 항-NGF 항체의 결합 친화성은 약 0.10 내지 0.80nM, 약 0.15 내지 약 0.75nM, 그리고 약 0.18 내지 약 0.72nM일 수 있다. 한 구체예에서 결합 친화성은 약 2pM 내지 22pM이다. 어떤 구체예에서 결합 친화성은 약 10nM이다. 다른 구체예에서 결합 친화성은 약 10nM 미만이다. 다른 구체예에서 결합 친화성은 약 0.1nM 또는 약 0.07nM이다. 다른 구체예에서 결합 친화성은 약 0.1nM 미만, 또는 약 0.07nM 미만이다. 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나 내지는 약 2pM, 약 5pM, 약 10pM, 약 15pM, 약 20pM, 또는 약 40pM 중 어느 하나이다. 어떤 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나이거나, 또는 약 50pM 미만이다. 어떤 구체예에서, 결합 친화성은 약 100nM, 약 50nM, 약 10nM, 약 1nM, 약 500pM, 약 100pM, 또는 약 50pM 중 어느 하나 미만이다. 또 다른 구체예에서, 결합 친화성은 약 2pM, 약 5pM, 약 10pM, 약 15pM, 약 20pM, 약 40pM, 또는 약 40pM 이상이다. 본 분야에 잘 공지된 바와 같이, 결합 친화성은 KD, 또는 해리상수로서 표현될 수 있으며, 결합 친화성의 증가는 KD의 감소에 상응한다. 사람 NGF에 대한 마우스 모노클로날 항체 911(Hongo 등 Hybridoma 19:215-227(2000))의 결합 친화성은 약 10nM이고, 사람 NGF에 대한 사람화된 항-NGF 항체 E3(본원에 설명된)의 결합 친화성은 약 0.07 nM이다.
NGF 길항제가 항체인 경우의 예에서, 항체는 Fab, Fab', F(ab')2, Fv 단편, 디아체, 항체 단편으로부터 형성된 단쇄 항체 분자 및 다중특이적 항체 그리고 단쇄 Fv(scFv) 분자로 구성된 군으로부터 선택된 항체 단편을 포함하는 항체 단편일 수 있다.
아편유사 진통제는 모르핀-유사 생물학적 활성을 나타내는 어떤 화합물일 수 있다. 어떤 구체예에서, 아편유사 진통제는 모르핀, 코데인, 디히드로코데인, 디아세틸모르핀, 히드로코돈, 히드로모르폰, 레보르파놀, 옥시모르폰, 알펜타닐, 부프레노르핀, 부토르파놀, 펜타닐, 수펜타닐, 메페리딘, 메타돈, 날부핀, 프로폭시펜 및 펜타조신; 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염 중 하나 이상이다.
NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제는 어떤 적합한 경로에 의해 개체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 이들은 함께 또는 분리하여, 및/또는 동시에 및/또는 연속하여, 경구, 정맥내, 혀밑, 피하, 동맥내, 근육내, 직장, 척수내, 흉부내, 복강내, 심실내, 혀밑, 경피 방식이나 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다.
제 2 양태로서, 본 발명은 신경성장인자 길항제 및/또는 아편유사 진통제를 포함하는 조성물을 특징으로 한다. 신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제는 하나 이상의 제약학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 존재할 수 있거나, 또는 이들은 분리된 조성물로 존재할 수 있다. 다른 양태로서, 본 발명은 NGF 길항제와 아편유사 진통제의 상승작용적 조성물을 제공한다.
제 3 양태로서, 본 발명은 본원에 설명된 방법 중 어느 것에서 사용하기 위한 키트를 특징으로 하며, 상기 키트는 NGF 길항제 및/또는 아편유사 진통제를 포함한다. 키트는 본원에 설명된 방법 중 어느 것을 위한 지침을 더 포함한다. 지침은 아편유사제와 병용하여 NGF 길항제를 투여하는 것을 포함할 수 있다(즉, 동시 투여 및/또는 상이한 시간에서의 투여). 어떤 구체예에서, NGF 길항제와 아편유사 진통제는 함께 포장되며, 이들은 동일한 용기에 있을 수도 상이한 용기에 있을 수도 있다. 따라서, 어떤 구체예에서, 키트는 동일한 용기에 존재하는 NGF 길항제와 아편유사 진통제, 그리고 본원에 설명된 방법 중 어느 것에서 사용하기 위한 지침을 포함한다. 다른 구체예에서, 키트는 분리된 용기에 존재하는 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 포함한다.
실시예 1
수술-후 통증 치료를 위해 항-NGF 모노클로날 항제와 아편유사 진통제를 병용하여 사용한 치료
우리는 아편유사 진통제 모르핀과 병용하여 사용한 항-NGF 항체의 효능을 평가하기 위해서 수술-후 통증을 의태하는 통증 모델을 사용했다. 각 실험은 16마리의 동물(n=그룹 당 8마리)을 포함했다.
동물. 각 실험에 대해서 16마리의 200-220g의 수컷 성인 Sprague Dawley 래트(Harlan; 인디애나 인디애나폴리스)를 정상 일광 조건하에서 음식과 물을 임의대로 제공하면서 사용하기 전 적어도 1주간 우리에 두었다. 수술 전날 시험 챔버에서 2시간 적응시킨 후 래트를 두 그룹으로 나누었다: 한 그룹은 수술 15시간 전에 항체를 받았고, 나머지 그룹은 이 때 부형제(5% 덱스트로스/0.45% 식염수 USP)를 받았다. 항-NGF 길항제 항체 Mab 911(Hongo 등, Hybridoma 19:215-227 (2000))을 0.3 내지 20mg/kg의 범위의 농도로 복강내(i.p.) 투여했다. 모르핀 황산염을 모든 동물에게 수술 24시간 후에 0.1, 0.3, 1 및 3mg/kg의 범위의 다양한 농도로 피하(s.c) 투여했다. 어떤 동물도 2회 이상 상이한 모르핀 용량을 받지 않았으며, 용량들은 적어도 2시간 간격으로 투여되었고, 더 많은 용량은 항상 두 번째로 투여되었다. 예를 들어, 전형적인 실험에서, 동물의 반은 수술 15시간 전에 항-NGF 항체의 용량을 복강내(i.p.) 투여받았고, 이 동물들의 한 쪽 뒷발에서 수술을 행했으며 회복되도록 두었다. 수술 22시간 후에 "베이스라인" 휴식중 통증에 대해 래트를 시험했고, 2시간 후에 더 낮은 용량의 모르핀(통상 0.3mg/kg)을 투여했다. 모르핀 투야 30분 후에 전과 마찬가지로 휴식중 통증을 측정했고, 초기 모르핀 투약 2시간 후에 더 높은 용량을 투여했다.
수술은 Brennan 등, Pain 64:493-501(1996)에 설명된 과정을 기초로 했다. 동물을 노즈 콘을 통해 수술하는 동안 내내 2% 이소플루란과 공기 혼합물로 마취시켰다. 오른쪽 뒷발의 발바닥 표면을 포비돈-요오드 패드로 준비하고, 뒷꿈치 가장자리에서 0.5cm 떨어진 곳에서 시작하여 발가락을 향해 피부와 근막을 통과하여 중앙에 세로방향으로 1cm 절개했다. 관절 위치에 고정된 발부분을 자를 사용하여 측정했다. 발바닥 근육을 구부러진 겸자를 사용하여 들어올려 세로방향으로 절개했다. 이 근육은 착점과 삽입점 사이의 전깊이를 통과하여 절개했다. 가제 패드를 통해 압력을 가하여 수술 동안 출혈을 제어했다. 상처를 2개의 매트리스 봉합으로 밀봉했다(5-0 에틸론 블랙 모노필라멘트). 이들 봉합은 5-6회 매듭지었으며 첫번째 매듭은 좀 느슨하게 묶었다. 상처 부위를 바시트라신 용액으로 닦았다. 동물을 행동 시험을 시작하기 전에 2시간 이상 깨끗한 우리에 두어 회복시키고 쉬게 했다.
휴식중 통증 평가. 누적 통증 점수를 사용하여 체중부하에 관련된 통증을 평가했다. 동물을 발의 아래쪽을 검사할 수 있도록 플랫폼(h: 18") 위에 들어올려진 깨끗한 플라스틱 우리안의 플라스틱 메시(격자: 8mm2)에 두었다. 20분의 적응 기간 후 체중부하를 0에서 2의 규모로 평가했다. 발이 하얗게 되거나 메시에 대해 압박되는 경우 점수 0을 주었으며, 이는 전체 체중부하를 나타낸다. 발이 피부가 메시와 겨우 접촉하는 것을 더 선호하고 피부가 하얗게 되거나 오목한 자국이 없을 때 점수 1을 준다. 발이 메시와 완전히 떨어져서 유지될 때 점수 2를 준다. 래트가 여전히 휴식 중인 때에 발을 움찔하는 것은 점수 2로 생각한다. 각 동물은 30분 동안 5분마다 1분간 관찰했다. 30분 동안 얻어진 6회 점수의 합(0-12)을 사용하여 절개된 발의 통증을 평가한다. 점수 2의 빈도를 계산하여 심한 통증의 발생 또는 동물에 의한 발의 전체적인 보호를 평가했다. 각 동물은 수술 24시간 전(베이스라인), 그리고 수술 2시간 및 24시간 후에 시험했다. 체중부하는 동물이 사지를 얼마나 자유로이 사용할 수 있었는지와 잘 상호관련되었으며, 따라서 통증 완화에 대한 효과적인 측정이다.
다음의 프로토콜을 도 1, 2, 및 3에 나타낸 실험에 대해 사용했다. 동물은 두 그룹(대조군 및 항체치료군)으로 나누었다. 마우스 항-NGF 항체 Mab 911(Hongo 등, 상동)을 수술 15시간 전에 복강내 투여했다(실험에 따라 0.3mg/kg 체중 및/또는 1mg/kg 체중). 대조군은 항체를 받지 않았고, 본원에 설명된 대로 모르핀을 받지 않거나, 0.3mg/kg 또는 1mg/kg의 모르핀을 받았았다. 수술을 상기 설명된 대로 행하고 휴식중 통증을 두 그룹에서 수술 22시간 후에 평가했다("베이스라인"). 수술 24시간 후에 모든 동물을 0.3mg/kg의 모르핀으로 치료하고 모르핀 치료 30분 후부터 시작하여 휴식중 통증을 평가했다. 수술 26시간 후에 모르핀 0.1mg/kg을 더 제공하고 이 마지막 모르핀 투약 30분 후부터 시작하여 휴식중 통증을 평가했다. 모든 모르핀 치료는 동물의 목덜미 아래에서 피하 투여되었다. 이들 실험의 결과를 도 1, 2 및 3에 나타낸다.
도 1은 0.3mg/kg의 항-NGF 항체 911과 0, 0.3mg/kg 체중 또는 1.0mg/kg 체중의 모르핀을 받은 동물에서 측정한 휴식중 통증 점수를 나타낸다. 이 실험은 모르핀이나 항-NGF 항체만으로 치료된 동물과 비교하여, 모르핀과 NGF 길항제인 항-NGF 항체 911로 병용 치료된 동물에서 누적 통증 점수가 감소되었음을 증명했다. 따라서, 모르핀을 사용한 치료와 항-NGF 항체를 사용한 치료의 병용은 모르핀이나 항-NGF 항체만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 더욱 효과적이었다. 이들 결과는 또한 수술 전에 0.3mg/kg의 NGF 길항제를 사용한 치료가 0.3mg /kg의 모르핀만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 더욱 효과적이었음을 나타냈다.
도 2는 1.0mg/kg의 항-NGF 항체 911과 0, 0.3mg/kg 체중 또는 1.0mg/kg 체중의 모르핀을 받은 동물에서 측정한 휴식중 통증 점수를 나타낸다. 이들 결과는 모르핀이나 항-NGF 항체만으로 치료된 동물과 비교하여, 모르핀과 항-NGF 항체로 병용 치료된 동물에서 누적 통증 점수가 감소되었음을 증명했다. 따라서, 항-NGF 항체와 모르핀을 함께 사용한 치료가 모르핀이나 항-NGF 항체만을 사용한 치료에 비해 휴식중 통증을 감소시키는데 더욱 효과적이었다. 이들 결과는 또한 수술 전에 1mg/kg의 NGF 길항제를 사용한 치료가 0.3mg /kg의 모르핀만을 사용한 치료보다 휴식중 통증을 감소시키는데 더욱 효과적이었음을 나타냈다.
도 3은 0.3mg/kg 또는 1mg/kg의 항-NGF 항체 911과 0, 0.3mg/kg 체중 또는 1.0mg/kg 체중의 모르핀을 받은 동물에서 측정한 휴식중 통증 점수를 나타낸다. 0.3mg/kg의 모르핀과 0.3mg/kg 항-NGF 항체 또는 1mg/kg 항-NGF 항체를 병용하여 사용한 치료는 0.3mg/kg의 모르핀만을 사용한 치료와 비교하여 통증 완화를 현저하게 개선시켰다. 도 3에 나타낸 결과는 또한 0.3mg/kg 또는 1mg/kg 항-NGF 항체만을 사용한 치료가(즉, 모르핀 치료가 없는) 0.3mg/kg 용량의 모르핀을 사용한 치료 후의 통증 완화와 동일한 통증 완화를 제공했음을 증명했다. 더 나아가, 1.0mg/kg의 항-NGF 항체를 사용한 치료와 0.3mg/kg의 모르핀을 사용한 치료의 병용은 1mg/ kg의 모르핀만을 사용했을 때 얻어진 것과 적어도 동일한 통증 완화를 제공했다. 이들 결과는 항-NGF 항체를 사용한 치료가 효과적인 통증 완화에 필요한 모르핀의 양을 감소시켰음을 증명했다.
이들 실험은 항-NGF 항체와 모르핀을 사용한 치료가 모르핀이나 항체만을 사용한 치료에 비해 휴식중 통증을 감소시키는데 더욱 효과적임을 증명한다.
전술한 발명은 이해를 명확히 할 목적으로 예시 및 실시예의 방식으로 일부 상세하게 설명되었지만, 설명 및 실시예들이 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

Claims (14)

  1. 신경성장인자(NGF) 길항제의 양과 아편유사 진통제의 양을 개체에게 투여하는 것을 포함하며, 여기서 NGF 길항제와 아편유사 진통제가 함께 효과적인 통증 완화를 제공하는 것을 특징으로 하는 개체에서 통증을 치료하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 아편유사 진통제는 모르핀, 코데인, 디히드로코데인, 디아세틸모르핀, 히드로코돈, 히드로모르폰, 레보르파놀, 옥시모르폰, 알펜타닐, 부프레노르핀, 부토르파놀, 펜타닐, 수펜타닐, 메페리딘, 메타돈, 날부핀, 프로폭시펜 및 펜타조신으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제2항에 있어서, 아편유사 진통제는 모르핀인 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, NGF 길항제는 항-NGF 항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제3항에 있어서, NGF 길항제는 항-NGF 항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 항-NGF 항체는 사람 NGF와 결합하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제6항에 있어서, 항-NGF 항체는 약 10nM 또는 약 10nM 미만의 결합 친화성으로 사람 NGF와 결합하는 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제5항에 있어서, 항-NGF 항체는 사람 항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 제5항에 있어서, 항-NGF 항체는 사람화된 항체인 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 제1항에 있어서, 통증은 수술-후 통증인 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 제4항에 있어서, 통증은 수술-후 통증인 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 유효량의 NGF 길항제와 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 통증을 치료하는데 사용하기 위한 제약학적 조성물로서, 여기서 상기 사용은 아편유사 진통제의 동시 또는 연속 투여를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제12항에 있어서, NGF 길항제는 항-NGF 항체인 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
  14. NGF 길항제, 및 통증의 효과적인 치료를 위해 NGF 길항제와 아편유사 진통제를 동시에 또는 연속하여 투여하는 것에 대한 지침을 포함하는 통증을 치료하기 위한 키트.
KR1020057006105A 2002-10-08 2003-10-08 신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제를 투여함에 의해통증을 치료하는 방법과 그를 함유한 조성물 Ceased KR20050067174A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US41734702P 2002-10-08 2002-10-08
US60/417,347 2002-10-08

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20050067174A true KR20050067174A (ko) 2005-06-30

Family

ID=33415832

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020057006105A Ceased KR20050067174A (ko) 2002-10-08 2003-10-08 신경성장인자 길항제 및 아편유사 진통제를 투여함에 의해통증을 치료하는 방법과 그를 함유한 조성물

Country Status (18)

Country Link
US (1) US20040131615A1 (ko)
EP (2) EP1575522B1 (ko)
JP (1) JP2006517524A (ko)
KR (1) KR20050067174A (ko)
CN (1) CN1878794B (ko)
AT (1) ATE434625T1 (ko)
AU (1) AU2003304060A1 (ko)
BR (1) BR0315167A (ko)
CA (1) CA2501694A1 (ko)
DE (1) DE60328128D1 (ko)
ES (2) ES2767744T3 (ko)
MX (1) MXPA05003501A (ko)
NO (1) NO20052221L (ko)
PL (1) PL379989A1 (ko)
RU (1) RU2005113996A (ko)
UA (1) UA80447C2 (ko)
WO (1) WO2004096122A2 (ko)
ZA (1) ZA200502611B (ko)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1684708A (zh) * 2001-05-30 2005-10-19 基因技术股份有限公司 抗ngf抗体用于治疗各种疾病
US20060147450A1 (en) * 2002-10-04 2006-07-06 Shelton David L Methods for treating cardiac arrhythmia and preventing death due to cardiac arrhythmia using ngf antagonists
WO2005000194A2 (en) * 2002-10-08 2005-01-06 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating post-surgical pain by administering an anti-nerve growth factor antagonist antibody and compositions containing the same
ZA200502612B (en) 2002-10-08 2007-07-25 Rinat Neuroscience Corp Methods for treating post-surgical pain by administering a nerve crowth factor antagonist and compositions containing the same
ES2382918T3 (es) 2002-12-24 2012-06-14 Rinat Neuroscience Corp. Anticuerpos anti-NGF y procedimientos que usan los mismos
US9498530B2 (en) 2002-12-24 2016-11-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating osteoarthritis pain by administering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
AU2011201157C1 (en) * 2002-12-24 2017-09-07 Rinat Neuroscience Corp. Anti-NGF antibodies and methods using same
US7569364B2 (en) * 2002-12-24 2009-08-04 Pfizer Inc. Anti-NGF antibodies and methods using same
MXPA05008815A (es) 2003-02-19 2006-05-25 Rinat Neuroscience Corp Metodos para tratar el dolor al administrar un antagonista del factor de crecimiento de nervios y un farmaco antiinflamatorio no esteroidal y composiciones que contienen los mismos.
ITRM20030601A1 (it) 2003-12-24 2005-06-25 Lay Line Genomics Spa Metodo per l'umanizzazione di anticorpi e anticorpi umanizzati con esso ottenuti.
KR101504729B1 (ko) 2004-04-07 2015-03-19 리나트 뉴로사이언스 코프. 신경성장인자 길항제의 투여에 의한 골암 통증 치료용 약학적 조성물
ITRM20050290A1 (it) * 2005-06-07 2006-12-08 Lay Line Genomics Spa Uso di molecole in grado di inibire il legame tra ngf e il suo recettore trka come analgesici ad effetto prolungato.
ITRM20050332A1 (it) * 2005-06-24 2006-12-25 Lay Line Genomics Spa Uso di molecole in grado di bloccare l'attivita' di trka per potenziare gli effetti di analgesici oppiacei sul dolore.
CA2862540C (en) 2005-09-21 2018-07-31 The Regents Of The University Of California Systems, compositions, and methods for local imaging and treatment of pain
EP2129401B8 (en) * 2006-12-21 2020-01-15 Amgen Inc. Stable buffered formulations containing polypeptides
PL2187964T3 (pl) * 2007-08-10 2015-03-31 Regeneron Pharma Ludzkie przeciwciała o wysokim powinowactwie przeciw ludzkiemu czynnikowi wzrostu nerwu
US8309088B2 (en) 2007-08-10 2012-11-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of treating osteoarthritis with an antibody to NGF
BRPI0822049B1 (pt) * 2007-12-17 2021-11-16 Pfizer Limited Composiqao farmaceutica compreendendo anticorpo antagonista anti-ngf, kit e uso de um anticorpo antingf
AP2929A (en) 2008-02-04 2014-06-30 Lay Line Genomics Spa Anti-TRKA antibodies and derivatives thereof
US20090286832A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 Kiichiro Nabeta Narcotic emulsion formulations for treatment of surgical pain
BRPI0919268B8 (pt) 2008-09-24 2021-05-25 Fujimoto Seiyaku Kk aptâmero que se liga ao ngf e medicamento
BRPI0922224A2 (pt) * 2008-12-08 2016-08-02 Vm Pharma Llc composições de inibidores de proteína tirosina quiinase receptora.
WO2010128398A1 (en) 2009-05-04 2010-11-11 Pangenetics 110 B.V. Antibodies against nerve growth factor (ngf) with enhanced in vivo stability
PL2551346T3 (pl) 2010-03-24 2016-07-29 Ribomic Inc Aptamer dla NGF i jego zastosowanie
ES2910305T3 (es) 2010-08-19 2022-05-12 Zoetis Belgium S A Anticuerpos anti-NGF y su uso
JP6105838B2 (ja) * 2010-08-24 2017-03-29 国立大学法人 岡山大学 疼痛の治療剤
US11214610B2 (en) 2010-12-01 2022-01-04 H. Lundbeck A/S High-purity production of multi-subunit proteins such as antibodies in transformed microbes such as Pichia pastoris
CA2821515A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-ngf compositions and use thereof
US9539324B2 (en) 2010-12-01 2017-01-10 Alderbio Holdings, Llc Methods of preventing inflammation and treating pain using anti-NGF compositions
US9067988B2 (en) 2010-12-01 2015-06-30 Alderbio Holdings Llc Methods of preventing or treating pain using anti-NGF antibodies
US9884909B2 (en) 2010-12-01 2018-02-06 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF compositions and use thereof
US9078878B2 (en) 2010-12-01 2015-07-14 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF antibodies that selectively inhibit the association of NGF with TrkA, without affecting the association of NGF with p75
PE20141787A1 (es) 2011-05-20 2014-12-07 Alderbio Holdings Llc Composiciones anti-cgrp y uso de las mismas
SMT202400511T1 (it) 2011-05-20 2025-01-14 H Lundbeck As Uso di anticorpi anti-cgrp e frammenti di anticorpi per prevenire o inibire la fotofobia o l'avversione alla luce in soggetti che ne hanno bisogno, in particolare nei soggetti che soffrono di emicrania
SG194974A1 (en) 2011-05-20 2013-12-30 Alderbio Holdings Llc Use of anti-cgrp or anti-cgrp-r antibodies or antibody fragments to treat or prevent chronic and acute forms of diarrhea
EP2731439A4 (en) 2011-07-12 2014-12-03 Merck Sharp & Dohme TRKA KINASE INHIBITORS, COMPOSITIONS AND METHOD THEREFOR
US20130295170A1 (en) * 2012-05-03 2013-11-07 Kydes Pharmaceuticals Llc Compositions for control of drug abuse
US9181261B2 (en) 2012-05-22 2015-11-10 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA kinase inhibitors, compositions and methods thereof
ES2894852T3 (es) 2012-06-06 2022-02-16 Zoetis Services Llc Anticuerpos anti-NGF caninizados y métodos de los mismos
US8999992B2 (en) 2013-03-15 2015-04-07 Vm Pharma Llc Crystalline forms of tryosine kinase inhibitors and their salts
US20170114122A1 (en) 2015-10-23 2017-04-27 Alderbio Holdings Llc Regulation of glucose metabolism using anti-cgrp antibodies
WO2015039334A1 (en) 2013-09-22 2015-03-26 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS, COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
WO2015039333A1 (en) 2013-09-22 2015-03-26 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS, COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
RU2659068C1 (ru) 2014-02-05 2018-06-28 Вм Онколоджи Ллк Композиции соединений и пути их применения
WO2015143653A1 (en) 2014-03-26 2015-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS,COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
WO2015143654A1 (en) 2014-03-26 2015-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS,COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
WO2015143652A1 (en) 2014-03-26 2015-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS,COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
JP2017529356A (ja) 2014-09-17 2017-10-05 ムンディファーマ インターナショナル コーポレイション リミテッド チロシンキナーゼ阻害剤及びその塩の結晶形態
WO2016161572A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS, COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
CN105944084B (zh) * 2016-05-19 2024-05-03 丽珠集团丽珠制药厂 一种神经生长因子组合物及其制备方法
MX2020009526A (es) 2018-03-12 2020-10-28 Zoetis Services Llc Anticuerpos anti-ngf y metodos de estos.
JP2021525251A (ja) * 2018-05-21 2021-09-24 イプセン バイオファーム リミテッドＩｐｓｅｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍ Ｌｉｍｉｔｅｄ 骨癌誘発性アロディニアの抑制
JOP20210156A1 (ar) 2019-01-08 2023-01-30 H Lundbeck As علاج إسعافي وعلاج سريع للصداع باستخدام أجسام مضادة لـ cgrp

Family Cites Families (108)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) * 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
SU975016A1 (ru) * 1979-12-17 1982-11-23 Московский научно-исследовательский онкологический институт им.П.А.Герцена Болеутол ющее средство
US4485045A (en) * 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4544545A (en) * 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US4754065A (en) * 1984-12-18 1988-06-28 Cetus Corporation Precursor to nucleic acid probe
US4683195A (en) * 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) * 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4676980A (en) * 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US4777127A (en) 1985-09-30 1988-10-11 Labsystems Oy Human retrovirus-related products and methods of diagnosing and treating conditions associated with said retrovirus
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US4800159A (en) * 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
US6548640B1 (en) * 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
GB8702816D0 (en) 1987-02-07 1987-03-11 Al Sumidaie A M K Obtaining retrovirus-containing fraction
US5219740A (en) * 1987-02-13 1993-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy
WO1989009225A1 (en) 1988-03-28 1989-10-05 The Regents Of The University Of California Nerve growth factor peptides
US5422120A (en) 1988-05-30 1995-06-06 Depotech Corporation Heterovesicular liposomes
AP129A (en) 1988-06-03 1991-04-17 Smithkline Biologicals S A Expression of retrovirus gag protein eukaryotic cells
US5047335A (en) * 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
EP0454781B1 (en) 1989-01-23 1998-12-16 Chiron Corporation Recombinant cells for therapies of infection and hyperproliferative disorders and preparation thereof
ATE277193T1 (de) 1989-03-21 2004-10-15 Vical Inc Expression von exogenen polynukleotidsequenzen in wirbeltieren
US6673776B1 (en) 1989-03-21 2004-01-06 Vical Incorporated Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate, mammal, fish, bird or human
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
EP0487587A1 (en) 1989-08-18 1992-06-03 Chiron Corporation Recombinant retroviruses delivering vector constructs to target cells
US5585362A (en) 1989-08-22 1996-12-17 The Regents Of The University Of Michigan Adenovirus vectors for gene therapy
US5656435A (en) * 1989-08-28 1997-08-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibodies to peptides having NGF-like activity, said antibodies having no substantial cross-reactivity with NGF, and use thereof
US5013556A (en) * 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
NZ237464A (en) 1990-03-21 1995-02-24 Depotech Corp Liposomes with at least two separate chambers encapsulating two separate biologically active substances
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US5147294A (en) 1990-10-01 1992-09-15 Trustees Of Boston University Therapeutic method for reducing chronic pain in a living subject
FR2669336B1 (fr) * 1990-11-20 1993-01-22 Adir Nouveaux derives d'oxazolo pyridines, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5278299A (en) * 1991-03-18 1994-01-11 Scripps Clinic And Research Foundation Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
GB9115364D0 (en) 1991-07-16 1991-08-28 Wellcome Found Antibody
JP3534749B2 (ja) 1991-08-20 2004-06-07 アメリカ合衆国 アデノウイルスが介在する胃腸管への遺伝子の輸送
AU669124B2 (en) 1991-09-18 1996-05-30 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Process for producing humanized chimera antibody
WO1993006213A1 (en) 1991-09-23 1993-04-01 Medical Research Council Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
WO1993010218A1 (en) 1991-11-14 1993-05-27 The United States Government As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Vectors including foreign genes and negative selective markers
GB9125623D0 (en) 1991-12-02 1992-01-29 Dynal As Cell modification
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
FR2688514A1 (fr) 1992-03-16 1993-09-17 Centre Nat Rech Scient Adenovirus recombinants defectifs exprimant des cytokines et medicaments antitumoraux les contenant.
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
WO1993025234A1 (en) 1992-06-08 1993-12-23 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for targeting specific tissue
US5342942A (en) * 1992-06-09 1994-08-30 Warner-Lambert Company Pyrazoloquinazolone derivatives as neurotrophic agents
WO1993025698A1 (en) 1992-06-10 1993-12-23 The United States Government As Represented By The Vector particles resistant to inactivation by human serum
GB2269175A (en) 1992-07-31 1994-02-02 Imperial College Retroviral vectors
US6210671B1 (en) 1992-12-01 2001-04-03 Protein Design Labs, Inc. Humanized antibodies reactive with L-selectin
JPH08503855A (ja) 1992-12-03 1996-04-30 ジェンザイム・コーポレイション 嚢胞性線維症に対する遺伝子治療
US5604260A (en) * 1992-12-11 1997-02-18 Merck Frosst Canada Inc. 5-methanesulfonamido-1-indanones as an inhibitor of cyclooxygenase-2
US5981568A (en) 1993-01-28 1999-11-09 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US5409944A (en) * 1993-03-12 1995-04-25 Merck Frosst Canada, Inc. Alkanesulfonamido-1-indanone derivatives as inhibitors of cyclooxygenase
JP3545403B2 (ja) 1993-04-22 2004-07-21 スカイファルマ インコーポレイテッド 医薬化合物を被包しているシクロデキストリンリポソーム及びその使用法
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
EP0705344B8 (en) 1993-06-24 2006-05-10 Advec Inc. Adenovirus vectors for gene therapy
DE69435233D1 (de) 1993-09-15 2009-10-08 Novartis Vaccines & Diagnostic Rekombinante Alphavirus Vektoren
US6015686A (en) 1993-09-15 2000-01-18 Chiron Viagene, Inc. Eukaryotic layered vector initiation systems
ES2328585T3 (es) 1993-10-25 2009-11-16 Canji, Inc. Vector de adenovirus recombinante y metodo de utilizacion.
RO116341B1 (ro) 1993-11-16 2001-01-30 Depotech Corp La Jolia Lipozom multivezicular si procedeu de obtinere a acestuia
DE69408541T2 (de) 1993-11-23 1998-08-06 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Kinaserezeptoraktivierungstest
WO1995014776A1 (en) 1993-11-23 1995-06-01 Genentech, Inc. PROTEIN TYROSINE KINASES NAMED Rse
GB9402331D0 (en) 1994-02-07 1994-03-30 Univ Mcgill Nerve growth factor structural analogs and their uses
US5877016A (en) * 1994-03-18 1999-03-02 Genentech, Inc. Human trk receptors and neurotrophic factor inhibitors
US5844092A (en) 1994-03-18 1998-12-01 Genentech, Inc. Human TRK receptors and neurotrophic factor inhibitors
US6436908B1 (en) 1995-05-30 2002-08-20 Duke University Use of exogenous β-adrenergic receptor and β-adrenergic receptor kinase gene constructs to enhance myocardial function
ES2297831T3 (es) 1994-05-09 2008-05-01 Oxford Biomedica (Uk) Limited Vectores retroviricos que presentan una tasa de recombinacion reducida.
US6291247B1 (en) 1994-05-11 2001-09-18 Queen's University At Kingston Methods of screening for factors that disrupt neurotrophin conformation and reduce neurotrophin biological activity
GB9514160D0 (en) * 1994-07-25 1995-09-13 Zeneca Ltd Aromatic compounds
AU4594996A (en) 1994-11-30 1996-06-19 Chiron Viagene, Inc. Recombinant alphavirus vectors
US6265150B1 (en) 1995-06-07 2001-07-24 Becton Dickinson & Company Phage antibodies
WO1997015593A1 (en) 1995-10-25 1997-05-01 Queen's University At Kingston Neurotrophin antagonists
GB9525180D0 (en) 1995-12-08 1996-02-07 Univ Mcgill Design of hormone-like antibodies with agonistic and antagonistic fuctions
AU2998597A (en) 1996-05-06 1997-11-26 Chiron Corporation Crossless retroviral vectors
UA67725C2 (en) 1996-06-03 2004-07-15 Cephalon Inc K-252a derivatives and a method for improvement of functioning and cell survival enhancement
GB9616105D0 (en) 1996-07-31 1996-09-11 Univ Kingston TrkA binding site of NGF
CA2268450C (en) 1996-10-21 2008-08-05 Allelix Biopharmaceuticals, Inc. Neurotrophin antagonist compositions
US6284794B1 (en) * 1996-11-05 2001-09-04 Head Explorer Aps Method for treating tension-type headache with inhibitors of nitric oxide and nitric oxide synthase
DE19732928C2 (de) * 1997-07-31 2000-05-18 Gruenenthal Gmbh Verwendung substituierter Imidazolidin-2,4-dion-Verbindungen als Schmerzmittel
WO1999018792A1 (en) 1997-10-10 1999-04-22 Johns Hopkins University Gene delivery compositions and methods
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
US6127401A (en) 1998-06-05 2000-10-03 Cephalon, Inc. Bridged indenopyrrolocarbazoles
US6652864B1 (en) 1998-12-21 2003-11-25 Asilomar Pharmaceuticals, Inc. Compounds for intracellular delivery of therapeutic moieties to nerve cells
CA2364484A1 (en) 1999-03-09 2000-09-14 University Of Southern California Method of promoting myocyte proliferation and myocardial tissue repair
US6468990B1 (en) 1999-05-17 2002-10-22 Queen's University At Kingston Method of inhibiting binding of nerve growth factor to p75 NTR receptor
US6492380B1 (en) * 1999-05-17 2002-12-10 Queen's University At Kingston Method of inhibiting neurotrophin-receptor binding
IT1306704B1 (it) 1999-05-26 2001-10-02 Sirs Societa Italiana Per La R Anticorpi monoclonali e suoi derivati sintetici o biotecnologici ingrado di agire come molecole antagoniste per il ngf.
US6399780B1 (en) * 1999-08-20 2002-06-04 Cephalon, Inc. Isomeric fused pyrrolocarbazoles and isoindolones
US6849425B1 (en) 1999-10-14 2005-02-01 Ixsys, Inc. Methods of optimizing antibody variable region binding affinity
US6548062B2 (en) 2000-02-29 2003-04-15 Cephalon, Inc. Method of treating cancer with anti-neurotrophin agents
FR2807660A1 (fr) * 2000-04-13 2001-10-19 Warner Lambert Co Utilisation d'antagonistes du ngf pour la prevention ou le traitement de douleurs viscerales chroniques
US7022484B2 (en) * 2000-06-08 2006-04-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for treating neuropathological states and neurogenic inflammatory states and methods for identifying compounds useful therein
GB0020504D0 (en) 2000-08-18 2000-10-11 Univ Bristol Therapeutic method
US6630500B2 (en) 2000-08-25 2003-10-07 Cephalon, Inc. Selected fused pyrrolocarbazoles
AU2001288374A1 (en) 2000-09-01 2002-03-22 Glaxo Group Limited Substituted oxindole derivatives as tyrosine kinase inhibitors
CN1684708A (zh) 2001-05-30 2005-10-19 基因技术股份有限公司 抗ngf抗体用于治疗各种疾病
US20030008807A1 (en) * 2001-06-14 2003-01-09 The Regents Of The University Of California Novel signaling pathway for the production of inflammatory pain and neuropathy
EP1434576A4 (en) * 2001-09-13 2006-03-29 Kenneth E Miller METHOD FOR RELIEVING PAIN
US20040038874A1 (en) * 2002-08-22 2004-02-26 Osemwota Omoigui Method of treatment of persistent pain
US6919426B2 (en) * 2002-09-19 2005-07-19 Amgen Inc. Peptides and related molecules that modulate nerve growth factor activity
ZA200502612B (en) * 2002-10-08 2007-07-25 Rinat Neuroscience Corp Methods for treating post-surgical pain by administering a nerve crowth factor antagonist and compositions containing the same
ES2382918T3 (es) * 2002-12-24 2012-06-14 Rinat Neuroscience Corp. Anticuerpos anti-NGF y procedimientos que usan los mismos
MXPA05008815A (es) * 2003-02-19 2006-05-25 Rinat Neuroscience Corp Metodos para tratar el dolor al administrar un antagonista del factor de crecimiento de nervios y un farmaco antiinflamatorio no esteroidal y composiciones que contienen los mismos.
PT1648509E (pt) * 2003-07-15 2012-10-18 Amgen Inc Anticorpos neutralizantes anti-ngf humanos como inibidores selectivos da via de ngf
KR101504729B1 (ko) * 2004-04-07 2015-03-19 리나트 뉴로사이언스 코프. 신경성장인자 길항제의 투여에 의한 골암 통증 치료용 약학적 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
UA80447C2 (en) 2007-09-25
CA2501694A1 (en) 2004-11-11
ES2767744T3 (es) 2020-06-18
EP2100902A1 (en) 2009-09-16
BR0315167A (pt) 2005-08-23
CN1878794B (zh) 2011-11-30
NO20052221L (no) 2005-07-07
AU2003304060A1 (en) 2004-11-23
ES2326881T3 (es) 2009-10-21
US20040131615A1 (en) 2004-07-08
DE60328128D1 (de) 2009-08-06
EP2100902B1 (en) 2019-12-18
MXPA05003501A (es) 2005-10-19
WO2004096122A2 (en) 2004-11-11
ATE434625T1 (de) 2009-07-15
PL379989A1 (pl) 2006-11-27
JP2006517524A (ja) 2006-07-27
ZA200502611B (en) 2006-06-28
RU2005113996A (ru) 2005-10-27
NO20052221D0 (no) 2005-05-06
EP1575522A2 (en) 2005-09-21
EP1575522B1 (en) 2009-06-24
EP1575522A4 (en) 2007-05-30
WO2004096122A3 (en) 2006-06-01
CN1878794A (zh) 2006-12-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101080716B1 (ko) 신경성장인자 길항제를 투여함에 의한 수술-후 통증의치료방법 및 그를 함유하는 조성물
EP1575522B1 (en) Methods for treating pain by administering an antagonist antibody against the nerve growth factor and an opioid analgesic and compositions containing the same
EP1594441B1 (en) Method for treating pain by administering a nerve growth factor antagonist and an nsaid and composition containing the same
US7255860B2 (en) Methods for treating post-surgical pain by administering an anti-nerve growth factor antagonist antibody
JP2006517524A5 (ko)
JP2006504744A5 (ko)
ES2355558T3 (es) Procedimiento para tratar el dolor administrando un antagonista del factor de crecimiento neuronal y un aine y la composición que contiene los mismos.
HK1074173B (en) Methods for treating post-surgical pain by administering an antibody against nerve growth factor and compositions containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20050408

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
A201 Request for examination
PA0201 Request for examination

Patent event code: PA02012R01D

Patent event date: 20080725

Comment text: Request for Examination of Application

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20100927

Patent event code: PE09021S01D

E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

Patent event date: 20110524

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PE06012S01D

Patent event date: 20100927

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event code: PE06011S01I