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KR20010040726A - 지질성 물질 및 양친매성 물질을 포함하는 나노입자형태의 약학적 조성물 및 관련 제조방법 - Google Patents

지질성 물질 및 양친매성 물질을 포함하는 나노입자형태의 약학적 조성물 및 관련 제조방법 Download PDF

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KR20010040726A
KR20010040726A KR1020007008610A KR20007008610A KR20010040726A KR 20010040726 A KR20010040726 A KR 20010040726A KR 1020007008610 A KR1020007008610 A KR 1020007008610A KR 20007008610 A KR20007008610 A KR 20007008610A KR 20010040726 A KR20010040726 A KR 20010040726A
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KR
South Korea
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nanoparticles
acid
composite
composition
water
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Withdrawn
Application number
KR1020007008610A
Other languages
English (en)
Inventor
에스포시토피에란드레아
콜롬보이탈로
코케아니니콜레타
델쿠르토마리아돌리
카를리파비오
Original Assignee
유란드 인터내셔날 에스.피.아.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 유란드 인터내셔날 에스.피.아. filed Critical 유란드 인터내셔날 에스.피.아.
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Abstract

적어도 하나의 지질성 물질 및 적어도 하나의 양친매성 물질, 및 약학적 활성 성분으로 이루어지는 복합물을 포함하는 나노입자 형태의 약학적 조성물. 상기 복합물의 표면 및 중심부 성질로 인해 상기 조성물은 활성성분의 혼입 효율이 향상되고, 거의 흡수되지 않는 활성 성분의 생체 적합성이 향상된다.

Description

지질성 물질 및 양친매성 물질을 포함하는 나노입자 형태의 약학적 조성물 및 관련 제조방법{Pharmaceutical compositions in form of nanoparticles comprising lipidic substances and amphiphilic substances and related preparation process}
통상 사용되는 폴리머 중에서, 폴리알킬시아노아크릴레이트, 폴리락트산(poly-lactic acid: PLA) 및 폴리-락트 글리콜산(poly-lactic glycolic acid: PLA-PLGA) 유도체를 예로 들 수 있다. 그러나 이와 같은 시스템은 일부 문제점을 나타낸다.
예를 들어, 폴리알킬시아노아크릴레이트는 유기체에 의해 24시간 간격으로 대사가 이루어져, 잠재적 독성 유도체인 포름알데히드를 방출한다; PLA 및 PLA-PLGA 는 독성 대사산물을 제공하지는 않지만, 수주에서 수개월에 이를 정도로 분해시간이 길기 때문에 위험한 축적 현상을 나타낼 수 있다.
또한 이들 시스템의 제조방법은, 최종 형태에 미량 잔류할 수 있는 잠재적 독성 유기 용매의 사용을 필요로 한다.
결국, 혈관 내에 주입된 5㎛ 이상의 크기를 갖는 외부 이물질이 색전증(embolism)을 유발할 수 있으므로 상기 시스템 대부분은 정맥 주사 형태로는 사용하기 어려운 크기이다.
이와 같은 문제점들은 생체적합성이 우수하고 독성이 낮은 투여 시스템에 대한 더 큰 관심을 불러 일으켰다: 이 모든 것들 중에서 우선적인 시스템은 수중유(oil/water) 에멀젼, 리포오좀, 지질성 마이크로입자 및 나노입자 등의 지질성 콜로이드 시스템이다.
나노미터 범위의 크기를 갖는 지질성 비적(droplet)으로 이루어지며, 외부 수상(aqueous phase)에 분산된 수중유 에멀젼은 비경구적 투여를 위한 담체로서 사용되어 왔다(일본 특허 제55,476호, 1979년, 오카모타, 쯔다 및 요코아마).
활성성분을 포함하는 수중유 에멀젼은 국제특허 공개공보 제91/02517호(1991년, 데이비스 및 와싱톤)에 개시되어 있다. 이와 같은 시스템은 내부 지질상(lipidic phase)에 활성성분을 포함할 정도로 고용량을 가지고 있지만, 활성성분은 이러한 상으로부터 외부 상으로 쉽게 확산되어 서방형의 선택적인 개발을 위한 한계 및 안정성 문제를 유발한다.
리포오좀은 한개 이상의 인지질층으로 둘러쌓인 내부 수상을 갖는 콜로이드 구조이다. 약의 투여를 위한 담체로서 리포오좀을 사용하는 것은 예를 들어, 미국특허 제3,993,754호(1976년, 라아만 및 체르니)에 개시되어 있다.
그러나 통상적으로 이러한 시스템은 보관중의 안정성 문제, 재현성이 나쁜 제조방법 및 활성성분을 혼입하고 유지하기 어려운 문제점을 나타낸다.
파운틴(Fountain) 등은 활성성분 투여를 위한 담체로서 0.5 ~ 100 ㎛ 범위의 크기를 갖는 구형의 지질성 마이크로입자를 발명하였다. 이 발명은 미국특허 제4,610,868(1986)호에 개시되어 있다.
돔(domb) 등(미국특허 제435,546호)은 수성(aqueous) 환경에 현탁되어 있으며, 조성물에 첨가되어 입자 자신의 표면에 흡착된 외부 인지질층에 의해 둘러 쌓여 있는 내부 친지질상으로 이루어진 조성물에 첨가되어 입자 자신의 표면에 흡착되는 약 40㎛ 정도의 크기를 갖는 불용성 입자인 리포셰어(LiposheresTM)를 발명하였다. 이들 시스템은 살충효과를 갖는 활성성분(돔 등, 미국특허 제5,227,535호) 및 마취약(돔 등, 미국특허 제5,227,165호)의 방출을 제어하기 위해 개발되었다. 그러나 이러한 시스템의 제조를 위한 기술은 최종형태에 미량 잔존하는 용매의 도움을 필요로 한다.
잘 녹지 않으며, 위장관에서 잘 흡수되지 않거나 pH 또는 단백질 분해효소 (단백질 및 펩티드)의 활성에 민감한 활성성분에 대해서는 경구투여가 어렵다고 이미 판명되었다. 지질성 나노입자 내에 이러한 물질을 혼입함으로써 이들 나노입자 시스템이 위장관을 따라 흡수될 수 있으므로 이러한 곤란함을 극복할 수 있게 한다. 이들의 감소된 크기는 수동적인 경점막 흡수 메카니즘을 활용하거나, 세포간 결합 또는 이온 채널을 통과하거나, 세포내 이입(endocytosis) 메카니즘을 사용하거나, 림프 플럭스에 들어가게 할 수 있다.
나노펠렛으로 이루어지는 지질성 고체 시스템은 스페이서 등에 의해 개발되었으며(미국특허 제4,880,634호, 1989년), 잘 흡수되지 않는 약의 경구 투여에 사용되었다. 고에너지 믹서로 수성 환경에서 지질성 물질을 에멀젼화시켜 지질성 펠렛을 얻은 후, 상온에서 에멀젼을 냉각하고 초음파처리로 펠렛을 얻는다.
가스코(유럽특허 제0526666A1호, 05/08/1991)는 지질성 나노입자를 제조하기 위한 기술을 발명하였다. 계면활성제와 조계면활성제의 존재하에 용해된 지질을 수상에 첨가하여 마이크로에멀젼을 얻은 후, 10℃ 정도의 온도에서 유지되는 수성 환경에서 분산시킨다. 고체 나노입자는 수성 현탁액에서 얻어지지만, 바로 이어서 한외여과기로 잔류하는 계면활성제가 제거되고 여과 또는 동결건조로 회수될 수 있다.
이러한 기술은 많은 에너지를 필요로 하는 균질화 처리와 비교하여 에너지 절감의 차원에서 유리한 것으로 판명되었으며, 평균 직경이 90 ~ 900nm이고, 더욱 균일한 크기 분포 및 낮은 다분산 인덱스(polydispersion index)를 갖는 더 작은 나노입자를 얻게 할 수 있다. 그러나 마이크로에멀젼의 제조는 지질성 물질의 용융을 필요로 하며, 가장 많이 사용되는 지질성 물질에 대해서는 약 70℃이므로, 열에 약한 물질에 대해서는 이러한 기술의 사용이 제한된다.
활성성분(active principles)을 투여하기에 적합한 새로운 담체를 연구하는 분야에서, 마이크로미터 범위의 크기를 갖는 폴리머 시스템 및 나노미터 범위의 크기를 갖는 폴리머 시스템에 큰 관심이 모아지고 있다.
본 발명은 적어도 하나의 지질성 물질 및 적어도 하나의 양친매성 물질로 이루어지는 복합물 및 약학적 활성성분을 포함하는, 1000nm 이하, 바람직하게는 50 ~ 500nm 의 직경을 갖는 나노입자 형태의 약학적 조성물에 관한 것이다.
뜻밖에도 본 발명자들은 본 발명에 따르는 상기 혼합물 및 관련 입자들이 지질성 물질과 양친매성 물질의 일상적인 혼합에 의해서 또는 지질성 입자에 양친매성 물질을 흡착시킴으로써 달성될 수 없는 특징을 갖는다는 것을 발견하였다.
바람직하게는 양친매성 물질은 나노입자의 표면에 분산되거나, 바람직하게는 나노입자 내부에 분산되거나, 나노입자의 표면 및 내부에 균일하게 분산될 수 있다.
복합물의 형성은:
1. 순환계에서 경구 투여 흡수 및 반감기를 돕는 표면 특성을 갖는;
2. 낮은 융점과 같이 열불안정성 약품의 혼입을 가능하게 하는 중심부(mass) 특성을 갖는;
3. 복합물 내의 친지질성 영역 및 부분적 친수성 영역의 존재로 인해 수용성 및 지용성 약품 모두를 운반하기에 적합한;
4. 본질적으로 친지질성 매트릭스 내부에 친수성 약품(예를 들어 펩티드)을 균일하게 혼입할 수 있는;
나노입자를 제공할 수 있다.
본 발명은, 지질성 또는 폴리머 종류인 양친매성 물질 및 지질성 물질로 이루어지는 복합물을 포함하는 1 마이크로미터(나노미터) 이하의 크기를 갖는 약학적 용도의 입자 형태 조성물의 제조에 관한 것이다.
일반적으로 본 발명에 따르는 나노입자는 지질성 물질 및 양친매성 물질의 공융 또는 공용해에 의해 얻어지는 복합물로부터 출발하여 제조된다. 공융 혼합물은, 이어지는 냉각 단계에서, 두가지 출발물질에 대하여 나노입자 표면을 향해 또는 중심부 내부로 양친매성 물질의 분리 또는 구성성분의 역배열로 인해 더 친수성인 영역 및 더 친지질성인 영역을 나타내는 새로운 특성을 갖는 복합물이 생성된다. 이들 특징은 친지질성 표면 위에서 일어나는 양친매성 물질의 흡착과는 실질적으로 다르다. 이러한 성질은 하기에 기재된 특성 실험 실시예에서 보다 상세히 기술될 것이다.
약품은 제조 공정에서 상기 공융된 혼합물에 용해되거나 현탁(suspend)될 수 있으며, 복합물의 새로운 성질로 인해, 바람직하게는 더 친수성인 영역 또는 더 친지질성인 영역 내부에서 그 특성에 따라 분류될 수 있다. 더구나 나노입자 위에 채워진 친수성 약품(예를 들어 펩티드)은 뜻밖에도 나노입자 자신의 내부에 균일하게 분산될 수 있는 반면, 표면에 흡착된 펩티드 비율은 매우 낮으며, 종래기술의 실시예(지질 코어 및 흡착된 양친매성 물질로 이루어지는 입자)와 비교하여 더 낮다.
공융된 혼합물로부터 얻어진 나노입자는 출발물질인 복합물과 같은 특징을 유지한다.
나노입자는 하기와 같은 다른 제조기술을 사용하여 얻어질 수 있다.
- 1. 온도 구배를 사용하여 수성 매질에서 수중유 마이크로에멀젼(복합물 및 하나 이상의 계면활성제 및 조계면활성제의 융점보다 높은 온도에서 방치된, 오일상으로서 지질성 및 양친매성 물질로 이루어지는)의 분산을 제공하는 기술.
- 2. 계면활성제의 존재하에, 복합물을 형성하는 물질의 융점보다 높은 온도에서 복합물의 순수 에멀젼, 또는 복합물의 융점 이하에서 복합물의 순수 현탁액의 고압 균일화를 위해 제공되는 기술.
마이크로에멀젼-분산 공정(기술 1)에 따르는 본 발명의 제조방법은 둘 이상의 지질성 및 양친매성 성분의 초기 공융 또는 공용해를 위해 제공되며, 구성성분 자신의 융점, 또는 후자가 전자에 녹는 경우에는 두 성분 중의 하나의 융점까지 올려진다; 용융된 복합물과 같은 온도에서 가열된, 하나 이상의 계면활성제 및 조계면활성제를 포함하는 적절한 양의 수용액을 약하게 교반하면서 상기와 같은 용융된 복합물에 첨가한다.
마이크로에멀젼 자체의 형성에 필요한 물, 계면활성제 및 조계면활성제의 존재하에 지질성 및 양친매성 성분을 융점까지 올려서 동시에 마이크로에멀젼을 형성하는 것도 가능하다. 약학적 활성 성분은 활성 성분 자체의 성질에 따라서 출발 물질인 용융된 복합물에 용해 또는 분산되거나 마이크로에멀젼 자체의 제조시 마이크로에멀젼에 직접 첨가될 수 있다. 활성 성분의 분산은 복합물 내에서 일어나며, 표면에 흡착된 약품 함량의 의외의 감소를 유발하고, 효소와 외부환경의 분해작용을 받게 된다.
이어서 이와 같이 형성된 수중유 마이크로에멀젼은 통상 +1 ~ +10℃의 온도 범위에서 조절된 양과 교반 조건하에 물 또는 수성 매질에서 분산되지만, 물과 혼합될 수 있는 비수성 용매를 사용해서 -15 ~ -30℃의 온도범위에서도 가능하며, 이와 같이 하여 수성 현탁액에서 고체 형태의 복합 나노입자를 얻는다. 상기 나노입자는 1000nm 이하의 직경을 갖는다. 나노입자는 지질성 입자의 표면상에 양친매성 물질이 흡착되는 기술(돔) 또는 지질성 나노입자를 형성하기 위한 계면활성제로서 양친매성 입자를 사용하여(가스코) 얻어지는 시스템과 비교하여 다른 것으로 판명되었다.
이어서 계면활성제, 조계면활성제 및 과량의 유리 약품을 제거할 수 있는 한외여과 시스템(또는 투석)을 사용하여 물 또는 수용액으로 나노입자 현탁액을 세척할 수 있다. 따라서 이와 같은 과정은 약학적 형태로 존재하는 계면활성제에 기인한 원하지 않는 효과를 제거할 수 있다. 또한 이와 같은 공정과 함께 나노입자에 혼입되지 않거나 흡착되지 않은 활성 성분의 백분율을 정량적으로 결정할 수 있다.
상기 기재된 조성물은 수성 현탁액으로 투여될 수 있으며, 동결건조, 여과, 수성 용매의 감압증류 및 스프레이-건조 기술에 의해 고체로서 회수된다.
본 발명에 따르는 나노입자는 하기 정량적인 중량 조성을 갖는다.
- 0.5 ~ 99.5%, 바람직하게는 10 ~ 90%의 지질성 물질;
- 0.5 ~ 99.5%, 바람직하게는 10 ~ 90%의 양친매성 물질;
- 지질성 물질 및 양친매성 물질의 합과 비교하여 0.001 ~ 99%, 바람직하게는 0.01 ~ 50%의 약리학적 활성 성분.
기술(1)에 따르는 나노입자의 제조방법에서, 하기 중량비로 성분 물질을 사용한다:
마이크로에멀젼에서
- 0.1 ~ 50 중량%, 바람직하게는 10 ~ 25 중량%의 지질성 물질;
- 0.1 ~ 50 중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 25 중량%의 양친매성 물질;
- 5 ~ 30 중량%, 바람직하게는 10 ~ 20 중량%의 계면활성제;
- 40 ~ 75 중량%, 바람직하게는 50 ~ 70 중량%의 물 또는 수용액;
- 혼입 효과 및 바람직한 투여량을 기초로 하고, 지질성 성분 및 양친매성 성분의 합과 비교하여 0.001 ~ 99 중량%, 바람직하게는 0.001 ~ 50 중량%의 농도로 복합물에 직접 혼입되거나 마이크로에멀젼에 용해되는 약학적 활성성분.
분산액에서:
- 상기 기재와 같이 제조된 마이크로에멀젼은 1 : 2 ~ 1: 200, 바람직하게는 1 : 5 ~ 1 : 50 의 양으로 희석된 수성 환경(물 또는 수용액)에서 분산된다.
분산액에
- 0.05 ~ 5 중량%의 분산 보조제
- 0.05 ~ 5 중량%의 폴리머 종류의 점성화제
를 첨가할 수 있다.
수성 환경에서 하나 이상의 보조물질이 첨가된 복합물의 분산을 위하여 고압 균일화 기술에 따르는 제조방법이 제공된다. 복합물은 균일화되어 물질 자체의 융점이나 그러한 온도 바로 아래("연화(softening)") 또는 복합물이 고체상태를 유지하는 온도에서 시스템을 유지하는 나노입자를 형성한다.
지질성 및 양친매성 물질의 공융을, 구성성분의 융점, 또는 후자가 전자에 녹는 경우 두 성분 중 하나의 융점까지 올려서 수행하는 기술 1에 보고된 방법과 유사하게 융용 또는 공용해에 의해 초기에 복합물을 제공할 수 있다.
복합물은 분산 또는 저에너지 균일화기술(예를 들어 Silverson L2R 또는 Ultra-Turrax 종류의 장비를 사용하여)에 의해 계면활성제, 안정화제 및/또는 점성화제를 포함하는 수용액에서 폭넓게 분산될 수 있다. 복합물이 수중에서의 분산을 도울 정도의 표면 특성을 나타낸다면 불필요할 수 있는 그와 같은 처리 후, 시스템은 나노입자 분산을 유발할 수 있는 반복된 균일화 순환 공정을 위해 고압 균일화기(예를 들면 APV Gaulin, APV Rannie Mini-Lab, Microfluidizer 종류)에 보내진다. 고압력 균일화처리는 복합물 융점, "연화" 온도, 또는 물질이 미세화된 형태의 고체 상태로 존재하는 온도에서 발생할 수 있다.
활성성분은 시스템의 공융 과정시 복합물에, 또는 구성성분 각각에 공융, 공용해 또는 분산되거나, 그 자체로서, 또는 나노입자 내로의 혼입 또는 이들 표면으로의 흡착을 돕는 계면활성제의 존재하에 이후 공정에 첨가될 수 있다.
이어서, 나노입자 현탁액은 기술 (1)에 기재된 바와 유사하게 한외여과 시스템을 사용하여 물 또는 수용액으로 세척할 수 있다.
마찬가지로 조성물은 수성 현탁액으로서 투여되거나, 또는 동결건조, 여과, 수성 용매 감압 증류 또는 스프레이-건조기술을 사용하여 고체로서 회수될 수 있다.
기술 (2)에 따르는 나노구체의 제조방법에서, 본 발명을 형성하는 물질은 다음 중량비로 사용된다.
- 0.1 ~ 50 중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 15 중량%의 지질성 성분;
- 0.1 ~ 50 중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 15 중량%의 양친매성 성분;
- 0.05 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 5 중량%의 계면활성제;
- 45 ~ 99.5 중량%, 바람직하게는 50 ~ 80 중량%의 물, 또는 물에 녹을 수 있는 성분의 수용액;
- 0.05 ~ 5 중량%의 분산 보조제;
0.05 ~ 1 중량%의 점성화제
- 혼입 효과 및 바람직한 투여량을 기초로 하고, 지질성 성분 및 양친매성 성분의 합과 비교하여 0.001 ~ 99 중량%, 바람직하게는 0.001 ~ 50 중량%의 농도로 복합물에 직접 혼입되거나 마이크로에멀젼에 용해되는 약학적 활성성분.
본 발명에 따라서 사용가능한 지질성 물질 중에서, 물과 섞일 수 없거나 부분적으로만 섞일 수 있다는 점에서 "지방(fats)"으로 정의할 수 있는 천연물, 및 합성물 또는 반합성물 모두를 예로 들 수 있다.
1) 포화 또는 불포화된 천연 지방, 및 부분적으로 또는 전체적으로 수소화된 식물유, 예를 들어 수소화된 면실유(LubritabTM), 수소화된 팜유(DynasanTMP60) 및 수소화된 두유(SterotexTMHM);
2) 포화 및/또는 불포화 지방산(C10~ C22의 지방족 사슬을 갖는)을 포함하는 반합성 및 합성 모노-, 디- 및 트리글리세라이드 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체, 예를 들어 트리스테아린, 카프리코카프릴 트리글리세라이드(MygliolTM, CaptexTM, LabrafacTMLipo), 베헨 트리글리세라이드 (CompritolTM), 글리세릴 모노스테아레이트(MyvaplexTM600) 또는 글리세릴 팔미토스테아레이트(PrecirolTM) 등의 모노글리세라이드, 및 포화 또는 불포화 폴리히드록실 트리글리세라이드(LabarfilTM, LabrafacTMHydro, GelucireTM시리즈);
3) "액체 왁스", 예를 들어 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필-카프리네이트, -카프릴레이트, -라우레이트, -팔미테이트, -스테아레이트, 및 에틸 올레에이트 및 올레일 올레에이트 등의 지방산 에스테르;
4) "고체 왁스", 예를 들어 카르나우바(carnauba) 왁스 및 밀납(bees-wax);
지방족 알콜, 예를 들어 세틸 알콜, 스테아릴 알콜, 라우릴 알콜, 세틸스테아릴 알콜 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체;
6) 바람직하게는, 중쇄 및 장쇄(C10~ C22)을 갖는 지방족 카르복실산, 포화(데칸산, 라우르산, 팔미트산, 스테아르산, 도코산산 등), 불포화(올레산, 리놀레산 등) 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체.
지질성 종류의 양친매성 물질중에서, 예를 들어 하기와 같은 일부 친수성 성분을 구조 내에 갖는 지질을 사용할 수 있다:
1) 하기 시리즈에 속해 있는 인지질: 포스파티딜 글리세롤, 포스포티딜콜린 및 포스파티드산(예를 들어 디미리스토일 포스파티딜 글리세롤);
2) 글리세릴 모노스테아레이트(MyvaplexTM600) 또는 글리세릴 팔미토스테아레이트(PrecirolTM) 등의 모노- 및 디-글리세라이드;
3) 트리글리세라이드, 및 포화 또는 불포화 폴리히드록실 트리글리세라이드 (예를 들어, LabrafilTM, LabrafacTMHydro, GelucireTM);
4) 올레산의 데실에스테르: CetiolTMV 및 이소프로필미리스테이트와 같은 지방산 에스테르;
5) 중쇄 지방산 (카프르산, 카프론산 및 라우르산).
폴리머 종류의 양친매성 물질 중에서, 다음과 같은 폴리머가 사용될 수 있다:
1) 폴리에틸렌글리콜(PEG), 액체(PEG 200 에서 PEG 1000 까지) 및 고체 (PEG 1500 에서 PEG 20,000 까지) 모두
2) 폴리-(프로필렌옥사이드) 폴리-(에틸렌옥사이드) 코폴리머, 폴록사머(LutrolTM188, LutrolTM407);
3) 폴리비닐 알콜;
4) 폴리아크릴레이트(CarbopolTM, PemulenTM, NoveonTM);
5) 폴리-(메틸비닐 에테르)-말레산 무수물(GantrezTM) 코폴리머;
6) 키토산 및 유도체, 이알루론산 및 유도체, 크산탄(xanthan), 스크레로글루칸(scleroglucan), 겔란(gellan), 구아 검(guar gum), 로커스트 빈 검(locust bean gum), 알기네이트(alginate) 및 덱스트란(dextran);
7) 예를 들어 폴리-ε-카프로락톤과 같은 폴리에스테르.
상기 기술한 바와 같이, 본 발명의 복합물은 지질성 물질, 및 지질성 또는 폴리머 종류의 양친매성 물질 사이에서 선택된 성분을 혼합, 공융 또는 공용해하여 얻어질 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 복합물은 지방산 혼합물(스테아르산-데카논산), 지방산과 인지질의 혼합물(스테아르산-디미리스토일 포스파티딜 글리세롤 또는 디미리스토일 포스파티딜콜린), 지방산 및 트리글리세라이드 또는 폴리히드록실화 트리글리세라이드(스테아르산 및 LabrafilTM2130), 지방산과 모노- 및 디-글리세라이드(스테아르산과 글리세릴 팔미토스테아레이트), 폴리에틸렌글리콜과 지방산(스테아르산-PEG), 폴리에틸렌 옥사이드-폴리프로필렌 옥사이드의 코폴리머와 모노 및 디글리세라이드(폴록사머와 글리세릴팔미토스테아레이트).
본 발명의 수상(aqueous phases)으로서(기술 1에 따르는 마이크로에멀젼의 수상 및/또는 기술 1 및 2에 따르는 분산상) 다음을 언급할 수 있다:
1) 물 자체 또는 다른 pH 및 이온강도로 완충된 물
2) 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리아크릴산 및 유도체(예를 들어 Carbopol, Pemulen등), 폴리메타크릴산 및 유도체(예를 들어 Eudragit), 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 코폴리머(예를 들어 폴록사머, Lutrol), 예를 들어 덱스트란, 크산탄, 스클레로글루칸, 아라비아 검(arabic gum), 구아 검, 키토산, 셀룰로스 및 스타치 유도체 등의 다양한 천연 폴리사카라이드와 같은 친수성, 수용성 또는 수분산성 폴리머의 수용액;
3) 사카라이드의 수용액(예를 들어, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨);
3) 바람직하게는 단쇄(C2~ C4)를 갖는 모노 또는 폴리히드록실 지방족 알콜;
4) 폴리에틸렌글리콜(예를 들어 PEG 200, PEG 400, PEG 600, PEG 1000)
5) 폴리글리콜 글리세라이드(예를 들어 LabrasolTM);
6) 예를 들어 프로필렌글리콜, 테트라글리콜, 에톡시디글리콜 등의 폴리글리콜(TranscutolTM).
기술 1 및 2에서 사용하기 위한 계면활성제 중에서, 통상의 HLB 값을 갖지만 반드시 7 이상의 값을 가질 필요는 없는 모든 비이온계 계면활성제를 완전하게 예를 들 수는 없으나, 예를 들어: 지방산의 소르비탄-에스테르(예를 들어 Span, Arlacel, Brij), 지방산의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르(예를 들어 Tween, Capmul, Liposorb), 폴리프로필렌옥사이드-폴리에틸렌옥사이드의 코폴리머(폴록사머), 폴리에틸렌글리콜(PEG)-글리세롤의 에스테르(HLB 6 ~ 7 을 갖는 Labrasol, Labrafil), 폴리글리세라이드 에스테르(Plurol), 사카라이드 및 지방산의 에스테르(슈크로-에스테르). 필요한 경우, 낮은 HLB 값을 갖는 계면활성제, 레시틴 자체(Lipoid S75) 및 수소화된 레시틴(예를 들어 Lipoid S75, S75-3), 인지질 및 이들의 반합성 또는 합성 유도체 뿐만 아니라 심지어는 음이온성 계면활성제(예를 들어 소듐 라우릴 설페이트, 소듐 스테아레이트, 소듐 올레에이트), 담즙산염(bile salt)(예를 들어 소듐 글리코콜레이트, 타우로데옥시콜레이트, 타우로콜레이트, 우르소데옥시콜레이트) 또는 양이온성 계면활성제(예를 들어 트리세톨)가 사용될 수 있다.
마이크로에멀젼의 형성을 위해 필요한 조계면활성제 중에서, 예를 들어 에탄올, 2-프로판올, n-부탄올, 이소프로판올 등의 단쇄 알콜; 단쇄 또는 중쇄 지방산(예를 들어 부티르산, 발레르산 및 카프론산), 방향족 알콜(예를 들어, 벤질 알콜); 데카논산, 라우르산, 카프리닐 알콜 및 라우릴 알콜 등의 중쇄 알콜 및 지방산(C8~ C12)을 언급할 수 있다. 또한 조계면활성제로서 모노- 또는 폴리히드록실화 알콜을 갖는 산의 에스테르 또는 에테르, 또는 중쇄 길이의 지방족 알콜을 사용할 수 있다. 조계면활성제들 중에서 언급된 성분의 일부는 동시에 마이크로에멀젼의 오일상을 형성할 수 있다.
본 발명에서 사용할 수 있는 약학적 활성성분은 두 담체에 잘 녹지 않을 수 있을 뿐만 아니라(예를 들어 아사이클로비르), 물에도 녹고(예를 들어 펩티드 또는 단백질) 및 지질에도(예를 들어 스테로이드성 호르몬) 모두 녹을 수 있다. 본 발명에 따르는 나노입자의 표면과 중심부(mass) 성질은 다음의 예와 같은 장점을 갖는다:
1) 통상 이와 같은 방법으로는 흡수되지 않는 분자들(예를 들어 폴리펩티드 및 단백질)을 경구 또는 경점막 방법으로 투여하는 가능성;
2) 거의 녹지 않고 흡수도 되지 않는 친지질성 분자들을 경구 및/또는 비경구 투여하는 가능성;
3) 활성 성분의 생약학적 특성(예를 들어 혈장성 반감기의 증대 및 조절되거나 연장된 방출)의 향상;
4) 점막 또는 피부 단계에서 활성 분자(예를 들어 항바이러스제, 항진균제, 항건선제)를 국소 투여하는 가능성;
5) 즉각적인 방출 제제로 투여할 수 있는, 불쾌한 향을 갖는 활성성분의 캡슐화 가능성.
본 발명에서 사용될 수 있는 활성성분 그룹은 비스테로이드성(NSAID) 및 스테로이드성(SAID) 항염증제, 에스트로겐 또는 황체호르몬, 심장혈관제, 항바이러스제, 항진균제, 악성 종양 억제제, 다른 활성을 갖는 펩티드 및 단백질을 포함한다.
상기 활성 성분 중에서 하기와 같은 예를 들 수 있으나, 완전한 것은 아니다.
에르곳(ergot) 알카로이드 및 유도체: 디히드로에르고타민, 디히드로에르고톡신 및 브로모크립틴.
진통제 및 비스테로이드성 항염증제 및 이들의 염: 디클로페낙 소듐, 디클로페낙 히드록시에틸 피롤리딘, 디클로페낙 디에틸아민, 이부프로펜, 플루비프로펜, 케토프로펜, 인도메타신, 메페남산, 나프록센, 니메슐리드(nimesulide) 및 피록시캄.
항부정맥제: 아미오다로네, 디이소피라미드, 프로프라놀롤 및 베라파밀.
항박테리아제: 아목시실린, 플루콕사실린, 젠타미신, 리팜피신, 에리스로마이신 및 세팔로스포린.
항균 및 항건선제: 암포테리신, 부토코나졸 니트레이트, 케토코나졸, 에코나졸, 에트레티네이트, 플루코나졸, 플루시토신, 그리세오풀빈, 이트라코나졸, 미코나졸, 나이스타틴, 술코나졸 및 티오코나졸.
항바이러스제: 아사이클로비르(Acyclovir), 간시클로비르(ganciclovir), AZT 및 프로테아제 억제제.
항고혈압제: 암로디핀, 클로니딘, 딜티아젬, 펠로디핀, 구아나벤즈 아세테이트, 이스라디핀, 미녹시딜, 니카르디핀 히드로클로라이드, 니모디핀, 니페디핀, 프라조신 히드로클로라이드 및 파파베린.
항우울제: 카바마제핀.
항히스타민제: 디페닐히드라민, 클로로페닐아민, 피릴아민, 클로로시클리진, 프로메타진, 아크리바스틴, 신나리진, 로라타딘 및 테르페나딘.
악성 종양 억제 및 면역 억제제: 사이클로스포린, 다카르바진, 에트레티네이트, 에토포시드, 로무스틴, 멜파란, 미토마이신, 미톡산트론, 파클리탁셀, 프로카르바진, 타목시펜, 탁솔 및 유도체 및 탁소테레.
항불안제, 진정제, 최면제: 알프라졸람, 브로마제팜, 디아제팜, 로라제팜, 옥사제팜, 테마제팜, 술피리드 및 트리아졸람.
β-차단제: 알프레놀롤, 아테놀롤, 옥스프레놀롤, 핀돌롤 및 프로파놀롤.
β-길항제: 살부타몰, 살메테롤.
심장 및 심장혈관의 근육수축제: 암리논, 디지톡신, 디곡신, 라나토시드 C, 메디곡신 및 우비데카레논.
코르티코스테로이드: 베클로메타손, 베타메타손, 부데소니드, 코르티손 아세테이트, 데속시메타손, 덱사메타손, 플루드로코르티손 아세테이트, 플루니솔리드, 히드로코르티손, 메틸프레드니솔론, 메틸프레드니손 및 트리암시놀론.
위장 및 항 H2-히스타민제: 시메티딘, 시사프라이드, 돔페리돈, 파모티딘, 로페라미드, 메살라진, 오메프라졸, 온단세트론 히드로클로라이드 및 라니티딘.
저지질혈제: 베자피브레이트, 클로피브레이트, 젬피브로질, 프로부콜 및 로바스타틴.
항앙기나제: 아밀 니트레이트, 글리세릴 트리니트레이트, 이소소르비드 디니트레이트 및 모노니트레이트 및 펜타에리스리톨 테트라니트레이트.
중추신경 작용제: 예를 들어 니코틴.
비타민 및 영양제: 베타카로틴, 비타민 A, 비타민 B2, 비타민 D 및 유도체, 비타민 E 및 유도체 및 비타민 K.
오피오이드 진통제: 코데인, 덱스트로프로폭시펜, 디히드로코데인, 모르핀, 펜타조신 및 메타돈.
성 호르몬: 다나졸, 에티닐 에스트라디올, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메틸테스토스테론, 테스토스테론, 노레디스트론, 노르게스트렐, 에스트라디올, 에스트리올, 프로게스테론, 스틸베스트롤 및 디에틸스틸베스트롤.
다른 활성을 갖는 펩티드, 단백질 또는 폴리사카라이드 분자: 로이프롤리드 및 LH-RH 유사체, 칼시토닌, 글루타티온, 소마토트로핀(GH), 소마토스타틴, 데스모프레신(DDAVP), 인터페론, 몰그라모스틴, 표피성 성장 인자(EGF), 신경 성장 인자(NGF), 인슐린, 글루카곤, 톡신 또는 톡소이드(예를 들어 테타누스 톡신), 단백질 또는 폴리사카라이드 종류의 안티겐 인자, 헤파린, 저분자량을 갖는 헤파린 및 헤파리노이드.
특정 국소적 활성을 갖는 분자: 예를 들어 햇빛 보호제(UV 흡수제); 피부 영양제, 세라미드 및 글리콜산.
본 발명의 따르는 성분들의 특징은 몇가지 물리화학적 방법, 예를 들어 다음과 같은 방법으로 측정될 수 있다.
- 중심부 성질의 변화를 확인하기 위한 열 분석(DSC, TGA 및 "핫 스테이지(hot stage)" 현미경법),
- 표면 성질의 표면의 변화를 측정하기 위한 표면 분석(접촉각법)
- 나노입자의 크기 분포를 측정하기 위한 레이져광 산란(LLS) 기술,
- 나노입자의 표면 전하 성질을 측정하기 위한 제타 전위 측정 기술,
- 활성 성분 혼입 효율 측정 기술(형광 분자로 마킹해서 분리 및 분석하는 기술),
- 구조 관찰 기술(전자 전달 현미경: TEM).
이러한 기술은 본 발명에 따르는 나노입자를 형성하는 복합물 및 나노입자 자신이 혁신적이고 유익한 성질을 나타내는 것을 입증한다. 지질성 및 양친매성 물질을 적절하게 조합하여 사용하면, 다음과 같은 물질 및 복합 나노입자를 얻을 수 있다.
- 나노입자 자신의 가장 큰 친수성 영역에서 활성 성분의 용해/분산을 돕는, 지질성 매트릭스에서 친수성 약품(예를 들어, 펩티드)의 혼입 효율을 증가시킴,
- 나노입자에 혼합된 분자의 지역화를 기대하지 않은 방법으로 개질함: 예를 들어 친지질성 나노입자 내부에서, 일반적으로 표면에서 흡수되는 펩티드 분자의 균일한 분산을 가능하게 함,
- 출발 성분과 비교하여 더 낮은 표면에너지를 나타내므로, 그 결과 더 우수한 생체적합성을 보임,
- 단일 성분보다 더욱 친지질성인 표면을 나타내므로, 그 결과 경구 방법으로 더 잘 흡수됨,
- 적용시, 단일 성분보다 더 친수성인 표면을 나타내고, 비경구 방법으로 주입되는 입자의 플라즈마 반감기를 증가시킴,
- 양친매성 및 지질성 물질의 특정 비율에서, 독특한 특징과 함께 두개의 상(phases)을 유발함:
1) 양친매성 화합물이 바람직하게는 나노입자의 표면에 위치함("표면에서 분리됨")
2) 양친매성 화합물이 바람직하게는 나노입자의 내부에 위치함("내부에서 분리됨")
3) 양친매성 화합물이 나노구체 자신의 표면과 내부에서 균일하게 위치함,
- 특정 비율에서, 단일한 본래의 물질에 대하여 독특하고 다른 성질을 갖는 복합물로 이루어지는 나노입자는 생리학적 온도에서 융융하여 빠른 방법으로 활성성분을 방출할 수 있다(예를 들어 국소/경피 치료 및 풍미 차폐),
- 다른 비율에서, 나노입자는 나노입자 자신의 확산 및/또는 분해에 의해 활성 성분의 방출을 확보하면서 생리적 온도에서 그대로 머물 수 있다,
- 제조 기술 (1)에서, 지질성 및 양친매성 물질의 특정 비율에서, 복합물의 유-수(oil-water) 마이크로에멀젼에 기초하는 마이크로에멀젼 그 자체가 존재하는 열적 간격을 더 낮은 온도로 확장시켜 열불안정성 분자의 혼입을 가능하게 할 수 있다.
나노입자의 제조방법과는 독립적으로, 본 발명의 토대를 이루는 우수한 특징은 단일 성분과 비교하여 새롭고 다른 표면 및 중심부 특성을 갖는 복합물의 기대 밖의 형성이다. 선택된 출발물질의 정성적인 특징에 기초하고(예를 들어 화학적 구조, 융점, 소수성 및 습윤성), 결정된 혼합물 내의 물질의 상대 백분율에서, 다량의 복합물을 얻는 것이 가능하며, 그 결과 다른 특징을 갖는 다량의 나노입자를 얻을 수 있다.
본 발명의 장점은 친지질성 나노입자 내부의 친수성 활성 성분의 혼입을 증가시키고, 그 분포를 개질할 수 있다는 것이다.
그 결과 본 발명의 중요한 장점은 성분 물질의 배타적인 물리적 변화에 근거한 새로운 물질로 이루어지는 벡터시스템(복합 나노입자)을 가질 가능성에 있으며, 따라서 긴 독물학적인 실험 테스트 과정을 필요로 하지 않는다는 것이다.
상세한 설명을 위해 본 발명에 따르는 조성물의 제조방법의 예를 기술 1 (실시예 1 ~ 36), 기술 2 (실시예 37 ~ 45) 및 선행기술 (A ~ E)에 따르는 제조방법의 비교예와 함께 나타낸다. 선행기술의 생성물과 비교하여 얻어진 생성물의 특징 및 생체내에서의 유리한 행동을 실시예 (F ~ Z1)에 나타낸다.
실시예 1
스테아르산 4g 및 디-미리스토일-포스파티딜 글리세롤 19.9mg(혼합물 내 DMPG 백분율: 0.5%)을 혼합하고, 약 72℃까지 가열하여 용융된 복합물을 형성하고, 여기에 n-부탄올 4ml를 첨가한다. pH 3으로 산성화시킨 물 20ml에 소듐 타우로디옥시콜레이트 2g 및 새먼 칼시토닌(salmon calcitonin) 3.85mg을 용해하고, 이 용액을 72℃까지 가열하여 상기 용융된 복합 혼합물에 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 3ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 약 60℃에서 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서 (250rpm), 3 ~ 5℃로 냉각된 pH 3의 물 5 볼륨에서 확산시켜 칼시토닌을 포함하는 스테아르산-디미리스토일-포스파티딜 글리세롤로 이루어지는 복합 고체 지질성 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다. 형광 기술 및 크로마토그래프 기술로 측정한, 나노입자 내의 칼시토닌 혼입 효율은 약 10.5%이다. 나노입자의 평균 직경은 226nm 이고, 다분산 인덱스는 0.200이다.
실시예 2
복합 혼합물 내의 DMPG 백분율을 1.0%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 10.2%이고, 나노입자의 평균 직경은 220nm이며 다분산 인덱스는 0.268이었다.
실시예 3
복합 혼합물 내의 DMPG 백분율을 4.5%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 13.2%이고, 나노입자의 평균 직경은 199nm이며 다분산 인덱스는 0.212이었다.
실시예 4
복합 혼합물 내의 DMPG 백분율을 5.2%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 13.4%이고, 나노입자의 평균 직경은 195nm이며 다분산 인덱스는 0.200이었다.
실시예 5
복합 혼합물 내의 DMPG 백분율을 9.5%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 9.19%이고, 나노입자의 평균 직경은 231nm이며 다분산 인덱스는 0.186이었다.
실시예 6
복합 혼합물 내의 DMPG 백분율을 25%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 9.51%이고, 나노입자의 평균 직경은 205nm이며 다분산 인덱스는 0.275이었다.
실시예 7
복합 혼합물 내의 양친매성 물질로서 디스테아로일 포스파티드산(DSPA) 인지질 백분율을 1.2%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 9.9%이고, 나노입자의 평균 직경은 245nm이며 다분산 인덱스는 0.261이었다.
실시예 8
복합 혼합물 내의 양친매성 물질로서 DSPA 백분율을 5.2%로 하여 실시예 7의 제조방법을 반복하였다. 칼시토닌 혼입 효율은 14.4%이고, 나노입자의 평균 직경은 324nm이며 다분산 인덱스는 0.341이었다.
실시예 9
복합 혼합물 내의 활성성분으로 저분자량 헤파린(평균 분자량 4000 Da) 및 양친매성 물질로서 디미리스토일 포스파티딜콜린(DMPC) 인지질 백분율을 4.0%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 헤파린 혼입 효율은 약 1.0%이고, 나노입자의 평균 직경은 213nm이며 다분산 인덱스는 0.186이었다.
실시예 10
복합 혼합물 내의 디미리스토일 포스파티딜콜린(DMPC) 인지질 백분율을 8.0%로 하여 실시예 9의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 179nm이고, 다분산 인덱스는 0.249이다.
실시예 11
복합 혼합물 내의 디미리스토일 포스파티딜콜린(DMPC) 인지질 백분율을 10%로 하여 실시예 9의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 290nm이고, 다분산 인덱스는 0.270이다.
실시예 12
복합 혼합물 내의 디미리스토일 포스파티딜콜린(DMPC) 인지질 백분율을 14%로 하여 실시예 9의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 369nm이고, 다분산 인덱스는 0.360이다.
실시예 13
복합 혼합물 내의 양친매성 물질로서 라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드 백분율을 1.0%로 하여 실시예 1의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 307nm이고, 다분산 인덱스는 0.234이다.
실시예 14
복합 혼합물 내의 라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드 백분율을 2.5%로 하여 실시예 13의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 307nm이고, 다분산 인덱스는 0.234이다.
실시예 15
복합 혼합물 내의 라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드 백분율을 50%로 하여 실시예 13의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 310nm이고, 다분산 인덱스는 0.332이다.
실시예 16
복합 혼합물 내의 라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드 백분율을 10.0%로 하여 실시예 13의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 326nm이고, 다분산 인덱스는 0.325이다.
실시예 17
복합 혼합물 내의 라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드 백분율을 10.0%로 하고, 3.8g의 혼합물에 대하여 칼시토닌 3.87mg을 복합 혼합물 내에 혼합하여 실시예 13의 제조방법을 반복하였다. 나노입자의 평균직경은 326nm이고, 다분산 인덱스는 0.325이다.
실시예 18
스테아르산 2.18g 및 라브라필(LabarafilTM) M 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 67mg(복합 혼합물 내의 라브라필 백분율: 3.1%)을 혼합하고, 약 75 ℃까지 가열하여 용융된 복합물을 형성한다. 혼합물을 냉각시켜 고형화시킨다. pH 3으로 산성화시킨 물 10 ml에 소듐 타우로디옥시콜레이트 1.34 g 및 새먼 칼시토닌(salmon calcitonin) 3.85 mg을 용해하고, 용액을 72℃까지 가열한 후, 약 72℃에서 용융된 복합 혼합물에 가하고, 여기에 n-부탄올 1ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 4ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 약 50℃까지 가열된 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250 rpm), 약 3 ~ 5 ℃로 냉각된 pH 3의 물 50 볼륨에서 확산시켜 칼시토닌을 포함하는 고체 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다.나노입자 내의 칼시토닌 혼입 효율은 약 11.5 %이다. 나노입자의 평균 직경은 185nm이고, 다분산 인덱스는 0.300이다.
실시예 19
칼시토닌의 혼합없이 실시예 18의 제조방법을 반복한다. 복합 나노입자의 평균 직경은 182nm이고 다분산 인덱스는 0.295이다.
실시예 20
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 8.9%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 약 70℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 173nm이고 다분산 인덱스는 0.268이다.
실시예 21
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 10%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 약 66℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 216nm이고 다분산 인덱스는 0.287이다.
실시예 22
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 15%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복한다. 나노입자의 평균 직경은 188nm이고 다분산 인덱스는 0.247이다.
실시예 23
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 50%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복하고, 복합 혼합물을 60℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 312nm이고 다분산 인덱스는 0.424이다.
실시예 24
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 75%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복하고, 복합 혼합물을 54℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 162nm이고 다분산 인덱스는 0.315이다.
실시예 25
복합 혼합물 내에서 라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 95%로 하여 실시예 18의 제조방법을 반복하고, 복합 혼합물을 35℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 205nm이고 다분산 인덱스는 0.281이다.
실시예 26
스테아르산 1.5g 및 데카논산 0.5g(혼합물 내의 데카논산 백분율: 25%)을 혼합하고, 약 75 ℃까지 가열하여 복합 혼합물을 형성한다. 혼합물을 냉각시켜 고형화시킨다. pH 3으로 산성화시킨 물 10 ml에 소듐 타우로디옥시콜레이트 1.30g을 용해하고, 55℃까지 가열된 용액을 약 55℃에서 용융된 복합 혼합물에 가하고, 여기에 n-부탄올 1ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 2.6ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 약 45℃에서 유지된 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250 rpm), 약 3 ~ 5 ℃로 냉각된 pH 3의 물 50 볼륨에서 확산시켜 낮은 온도에서 용융하는 고체 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다. 나노입자의 평균 직경은 280nm이다.
실시예 27
복합 혼합물내의 데카논산을 50%로 하여 실시예 26의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 50℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 310nm이고 다분산 인덱스는 0.280이다.
실시예 28
복합 혼합물내의 데카논산을 75%로 하여 실시예 26의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 35℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 300nm이고 다분산 인덱스는 0.250이다.
실시예 29
스테아르산 1.8g 및 폴리에틸렌글리콜 PEG 4000 0.2g(혼합물 내의 PEG 4000 백분율: 10.0%)을 혼합하고, 약 75 ℃까지 가열하여 복합 혼합물을 형성한다. pH 3으로 산성화시킨 물 10 ml에 소듐 타우로디옥시콜레이트 1.30g을 용해하고, 50℃까지 가열된 용액을 약 50℃에서 용융된 복합 혼합물에 가하고, 여기에 n-부탄올 1ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 2.4ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 약 45℃에서 유지된 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250 rpm), 약 3 ~ 5 ℃로 냉각된 pH 3의 물 50 볼륨에서 확산시켜 복합 지질성 고체 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다. 나노입자의 평균 직경은 184nm이고 다분산 인덱스는 0.302이다.
실시예 30
복합 혼합물내의 폴리에틸렌글리콜 PEG 4000을 20%로 하여 실시예 29의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 50℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 263nm이고 다분산 인덱스는 0.334이다.
실시예 31
복합 혼합물내의 양친매성 물질로서 폴리-(프로필렌옥사이드) 폴리-(에틸렌옥사이드) 코폴리머인 루트롤(LutrolTM) 188을 10%로 하여 실시예 29의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 50℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 353nm이고 다분산 인덱스는 0.314이다.
실시예 32
복합 혼합물 내의 루트롤(LutrolTM) 188을 20%로 하여 실시예 29의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 50℃에서 용융한다. 나노입자의 평균 직경은 375nm이고 다분산 인덱스는 0.300이다.
실시예 33
스테아르산 1.4g 및 라브라필(LabrafilTM) M2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 607mg(혼합물 내의 라브라필 백분율: 30.1%)을 혼합하고, 약 70 ℃까지 가열하여 복합 혼합물을 형성한다. 이와 같은 혼합물에 부분적으로 수소화된 대두 레시틴(Lipoid S75-35)을 첨가한다. 약 70℃에서 용융된 복합 혼합물에 pH 3의 수용액 10ml를 첨가하고, 여기에 n-부탄올 1ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 6ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 마이크로에멀젼에 사이클로스포린 약 200mg을 첨가한다. 약 50℃로 가열된 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250 rpm), 약 3 ~ 5 ℃로 냉각된 pH 3의 물 50 볼륨에서 확산시켜 사이클로스포린을 함유하는 고체 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다. 사이클로스포린을 포함하는 나노입자의 평균 직경은 304nm이고 다분산 인덱스는 0.365이다.
실시예 34
마이크로에멀젼에 에토포시드 100mg을 혼합시키고 실시예 33의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물은 50℃에서 용융된다. 복합 나노입자의 평균 직경은 288nm이고 다분산 인덱스는 0.211이다.
실시예 35
복합 혼합물 내의 루트롤(LutrolTM) 188을 20%로 하여 실시예 29의 제조방법을 반복한다. 복합 혼합물을 50℃에서 용융하고 복합 혼합물 그램당 100mg 의 양으로 아사이클로비르를 첨가한다. 아사이클로비르를 함유하는 나노입자의 평균직경은 360nm이고 다분산 인덱스는 0.302이다.
실시예 36
스테아르산 980mg 및 라브라필(LabrafilTM) M2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 510mg (혼합물 내의 라브라필 백분율: 30%)을 혼합하고, 약 70 ℃까지 가열하여 복합 혼합물을 형성한다. 이와 같은 혼합물에 Q10 조효소 300mg(우비데카레논: Ubidecarenone) 및 부분적으로 수소화된 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 1.06g을 첨가한다. 약 70℃에서 용융된 복합 혼합물에 pH 3의 수용액 10ml를 첨가하고, 여기에 n-부탄올 1ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하면서 6ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성인 마이크로에멀젼을 얻었다. 약 50℃로 가열된 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250 rpm), 약 3 ~ 5 ℃로 냉각된 pH 3의 물 50 볼륨에서 확산시켜 우비데카레논을 함유하는 고체 나노입자를 형성하였다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거하였다. 나노입자에서 우비데카레논 혼입 백분율은 99%이고, 나노입자의 평균 직경은 195nm이며, 다분산 인덱스는 0.214이다.
실시예 37
스테아르산 6g 및 라브라필(LabrafilTM) M2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 0.9g(혼합물의 15%)을 혼합하고, 약 70 ℃에 달하는 온도에서 융용시킨다. 용융된 복합 혼합물에 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 1.5g을 가하고, 3g의 트윈 20을 함유하는 pH 5.5의 수용액 300ml를 첨가한다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 0 ~ 15분간에 걸쳐 70℃의 온도와 750 bar의 압력에서 고압 라니미니랩(Rannie-MiniLab) 8.30 균일화 장치를 통과시킨다. 분산액을 회수하여 자동 온도 조절되는 중탕에서 250 rpm으로 계속 교반함으로써 바로 4℃로 냉각시키고, 복합 지질성 고체 나노입자를 얻는다. 평균 직경은 다음과 같다:
공정 시간(분) 직경(nm) 다분산 인덱스
5 257 0.36
10 264 0.392
15 282 0.400
실시예 38
공융에 의해 복합물이 얻어지면 시스템의 온도를 유지하면서, 복합물 자체의 융점 이하에서(T 〈 50℃) 실시예 37의 제조방법을 반복한다. 얻어진 분산액은 저에너지 균일화장치-믹서(Silverson mod. L2R)에서 5분간 예비-균일화하고, 이어서 일정한 온도(45℃) 및 고압(750 bar)에서 균일화시킨다.
실시예 39
스테아르산 0.39g 및 라브라필(LabrafilTM) M2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 5.5g(혼합물의 65%)을 혼합하고, 약 75 ℃에 달하는 온도에서 융용시킨다. 용융된 복합 혼합물에 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 3g을 가하고, 12g의 트윈 20을 함유하는 pH 5.5의 수용액 300ml를 첨가한다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 0 ~ 15분간에 걸쳐 70℃의 온도와 750 bar의 압력에서 고압 라니미니랩 8.30 균일화 장치를 통과시킨다. 분산액은 자동 온도 조절되는 중탕에서 250 rpm으로 계속 교반함으로써 바로 4℃로 냉각하여 복합 지질성 고체 나노입자를 얻는다. 평균 직경은 다음과 같다:
공정 시간(분) 직경(nm) 다분산 인덱스
3 106 0.205
5 72 0.161
10 91 0.176
실시예 40
공융에 의해 복합물이 얻어지면 시스템의 온도를 유지하면서, 복합물 자체의 융점 이하에서(T 〈 35℃) 실시예 39의 제조방법을 반복한다. 얻어진 분산은 저에너지 균일화장치-믹서(Silverson mod. L2R)에서 5분간 예비-균일화되고, 이어서 일정한 온도(30℃) 및 고압(750 bar)에서 균일화된다.
실시예 41
스테아르산 3.75g 및 폴리에틸렌글리콜 20000(PEG 20000) 3.75g(혼합물의 50%)을 혼합하고, 75 ℃에 달하는 온도에서 융용시킨다. 용융된 복합 혼합물에 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 3g을 가하고, 6g의 트윈 20을 함유하는 pH 5.5의 수용액 300ml를 첨가한다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 1 ~ 10분간에 걸쳐 70℃의 온도와 750 bar의 압력에서 고압 Rannie-MiniLab 8.30 균일화 장치를 통과시킨다. 분산액을 자동 온도 조절되는 중탕에서 250 rpm으로 계속 교반함으로써 바로 4℃로 냉각하여 고체 나노입자를 얻는다. 평균 직경은 다음과 같다:
공정시간(분) 직경(nm) 다분산 인덱스
5 156 0.274
10 188 0.308
실시예 42
공융에 의해 복합물이 얻어지면 시스템의 온도를 유지하면서, 복합물 자체의 융점 이하에서(T 〈 45℃) 실시예 41의 제조방법을 반복한다. 얻어진 분산액을 저에너지 균일화장치-믹서(Silverson mod. L2R)에서 예비-균일화하고, 이어서 일정한 온도(45℃) 및 고압(750 bar)에서 균일화시킨다.
실시예 43
복합 혼합물 내의 PEG 백분율 15% 와 함께, 새먼 칼시토닌 300mg을 복합 혼합물 자체에 혼합시키고, 실시예 41의 제조방법을 반복한다. PEG-스테아르산 혼합물 내의 칼시토닌 혼입 효율은 35%이다.
실시예 44
공융에 의해 복합물이 얻어지면 시스템의 온도를 유지하면서, 복합물 자체의 융점 이하에서(T 〈 45℃) 실시예 42의 제조방법을 반복한다. 얻어진 분산은 실버슨으로 예비-균일화되고, 이어서 일정한 온도(45℃) 및 고압(750 bar)에서 균일화된다.
실시예 45
공융 및 냉각으로 5% 스테아르산 및 95% 라브라필(LabrafilTM) M2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드를 포함하는 복합 혼합물을 얻는다. 용융된 복합 혼합물에 복합 혼합물 + 그램당 이부프로펜 1g 및 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 240mg 및 1.2%의 트윈 20을 포함하는 pH 5.5의 수용액 40ml를 용융된 복합 혼합물(75℃)에 가한다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 0 ~ 10분간 70℃의 온도 및 750 bar의 압력에서 고압 Rannie-MiniLab 8.30 균일화 장치에서 처리한다. 자동 열조절되는 중탕에서 250rpm으로 꾸준히 교반하여 분산액을 4℃로 즉시 냉각시켜 고체 나노입자를 얻는다. 평균 직경은 다음과 같다:
공정시간(분) 직경(nm) 다분산 인덱스
2 224 0.304
5 264 0.364
10 253 0.352
실시예 A (선행기술 유럽특허 제0526666A1호에 따르는)
스테아르산 4.2g을 융융하고 약 72℃로 가열하였다. pH 3으로 산성화시킨 물 20ml에 소듐 타우로디옥시콜레이트 2.6g을 용해하고 72℃로 가열한 용액을 용융된 스테아르산에 가한 후, 여기에 n-부탄올 2ml를 가하였다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 믹서에서 교반하에 유지하면서 5ml의 트윈 20을 가하여 투명하고 이방성의 마이크로에멀젼을 얻는다. 약 60℃로 가열한 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250rpm) 약 3 ~ 5℃에서 pH 3의 물 5 볼륨에 용해하여 유럽특허 제0526666A1호에 사용된 기술에 따르는 나노입자를 형성한다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거한다. 나노입자의 평균직경은 209nm이고 다분산 인덱스는 0.155이다.
실시예 B
새먼 칼시토닌 3.85 mg을 가하여 실시예 A의 제조방법을 반복한다. 나노입자 내의 칼시토닌 혼입 효율은 1.82%이다. 나노입자의 평균 직경은 193nm이고 다분산인덱스는 0.235이다.
실시예 C
실시예 B의 제조방법을 반복한다. 이와 같이 얻어진 나노입자를 믹서에서 교반하면서 스테아르산의 지질성 질량에 대하여 1 : 10의 비율로 양친매성 물질(디미리스토일 포스파티딜 글리세롤, DMPG)을 가하여, 나노입자 자신의 표면에 흡수시킨다. 나노입자 상의 칼시토닌의 흡수 효율은 1.75%이다. 선행기술에 따르는 이와 같은 조성물을 본 발명의 실시예 5와 직접 비교하면, 나노입자를 형성하는 복합물의 성분으로서가 아니라 표면상에 흡수되는 양친매성 성분을 갖는다는 점에서만 다르다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거한다. 나노입자의 평균 직경은 215nm이고 다분산 인덱스는 0.175이다.
실시예 D
스테아르산 1.7g 및 우비데카레논 300mg을 혼합하고 약 70℃로 가열하여 용융한다. 70℃로 가열된 pH 3의 수용액 10ml에 n-부탄올 0.5ml, 소듐 타우로디옥시콜레이트 1.30g을 가하여 공융시킨다. 이와 같이 형성된 에멀젼을 교반하에 유지하면서 3.25g의 트윈 20을 가하여 마이크로에멀젼을 형성한다. 약 70℃로 가열한 마이크로에멀젼을 꾸준히 교반하면서(250rpm) 약 3 ~ 5℃에서 pH 3의 물 50 볼륨에 분산시켜 유럽특허 제0526666A1호 기술에 따르는 지질성 나노입자를 형성한다. 현탁액을 한외여과로 세척하여 과량의 계면활성제를 제거한다. 나노입자 내의 우비데카레논의 혼입 백분율은 약 80%이며, 나노입자의 평균 직경은 205nm이고 다분산 인덱스는 0.244이다.
실시예 E (선행기술 국제공개 제WO 93/05768호에 따르는)
스테아르산 7.5g을 75℃ 온도에서 용융시킨다. 대두 레시틴(Lipoid S75-35) 3g을 가하고, 6g의 트윈 20을 포함하는 pH 5.5의 수용액 300ml를 가한다. 이와 같이 얻어진 에멀젼을 0 ~ 10분간 70℃의 온도 및 750bar의 압력에서, 고압 Rannie-MiniLab 8.30 균일화장치로 처리한다. 분산액을 4℃로 즉시 냉각시켜 국제공개 제WO 93/05768호에 개시된 기술에 따르는 고체 나노입자를 얻는다.
평균 직경은 다음과 같다:
공정시간(분) 직경(nm) 다분산 인덱스
5 190 0.254
10 178 0.308
특성실험 실시예
- 친수성 약품(펩티드)의 혼입 특성의 향상
본 발명의 우수한 특징 중의 하나는 친수성 약품(펩티드)의 혼입 효율을 향상시키고 복합 나노입자 내부의 분포를 향상시킬 가능성이 있다는 것이다. 이러한 점은 형광 분석을 통해 나타내었다.
공지 기술(Biochem. J., 272, 713 ~ 719, [1990])에 따라서, 발형광단(7-니트로벤즈-2-옥사-1,3-디아졸, NBD)으로 칼시토닌 펩티드를 표시하고, 이어서 본 발명의 실시예 1~8 및 비교예 B ~ C에 나타낸 바와 같이 나노입자 내에 혼입하였다. 시료를 실시예에 나타낸 한외여과공정에 따라 세척하였다.
● 나노입자 내에 혼입된 펩티드의 백분율
● 입자 자신의 표면에 흡착된 펩티드 부분만을 용해하고 분해시킬 수 있는, 단백분해 효소 트립신을 사용한 현탁액의 처리 전후에 형광을 측정하면, 혼입된 전체량에 대하여 표면에 흡착된 펩티드의 백분율은, 표준 곡선 및 한외여과 이전에 방출된 100%의 형광에 대한 형광 방출값을 측정하여 계산되었다.
실시예 F, 표 1에 개시된 결과는 복합 나노입자가 그 표면에 위치한 비율(단백분해 효소에 의해 흡착되고 공격받을 수 있는)을 감소시키고, 복합 매트릭스 내부 대부분을 유지하면서 어떻게 펩티드의 혼입 효과를 증가시키는가를 보여준다.
실시예 F
복합 지질성 나노입자 내의 칼시토닌 혼입 효율과 나노입자 자신의 표면 위에 흡착된 펩티드의 백분율
실시예 물질 조성 혼입 효율 흡착된 펩티드(%)
1 스테아르산DMPG 99.50.5 10.5 n.d.
2 스테아르산DMPG 99.01.0 10.2 0.11
3 스테아르산DMPG 95.54.5 13.2 0.05
4 스테아르산DMPG 94.85.2 13.4 0.04
5 스테아르산DMPG 91.59.5 9.19 0.49
6 스테아르산DMPG 7525 9.51 3.98
7 스테아르산DSPA 98.81.2 9.9 n.d.
8 스테아르산DSPA 94.85.2 14.4 n.d.
43 스테아르산PEG 8515 35 n.d.
B 스테아르산 100 1.82 0.93
C 스테아르산DMPG 90.010.0 1.75 0.95
- 중심부 특성의 개질
본 발명의 생성물의 또 다른 우수한 특징은 나노입자를 형성하는 복합물의 중심부 성질의 변경이다. 중심부 성질의 개질은 시차주사 열량계(differential scanning calorimeter), DSC, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer mod.) DSC7에 의한 열분석기술로 정량적으로 측정된다. 본 발명에 따르는 나노입자는 균일한 복합물 또는 다른 성질을 갖는 분리된 상에 존재하는 복합물 중 어느 하나에 의해 형성될 수 있다. 전자의 경우, 예를 들어, 균일한 복합물이 조성에 따라 열적 현상(융점)의 개질을 나타내는 것을 관찰할 수 있다(실시예 G)(표 2). 후자의 경우에는, 열적 전이 또는 분리된 상의 용융과 관련하여, 각각의 조성 백분율에 대한 열적 현상 발생 온도 및 비엔탈피 변화가 구별되게 나타난다(실시예 H, I)(표 3 및 4).
성분 백분율의 함수로서 복합 나노입자의 열역학적인 행동의 개질은 또한 현탁액 내의 나노입자에 대하여, 예를 들어 레이져광 산란("laser light scattering")으로 관찰할 수 있다. 복합 나노입자의 상전이는 브루쿠하벤(Brookhaven mod.) Bl-90 입자 크기 측정기로 측정되는 산란 강도 변화를 온도의 함수로서 알아낼 수 있다. 이 기술을 이용하면, 복합 나노입자가 어떻게 상전이를 나타내고, 형성된 물질의 조성에 따라서 달라지는 온도에서 용융하는가를 지적할 수 있다. 참조: 실시예 L, 도 1.
실시예 G
실시예 26 ~ 28과 부분적으로 유사한 스테아르산 및 평균 사슬 지방산(양친매성)의 이성분계 복합 혼합물의 융점(℃)
양친매성 % 0 10 20 30 50 65 70 75 85 90 100
데카논산 71 60 56 50 43 35 28 26 32
라우르산 71 69 62 56 44 43 42 45
미리스트산 71 68 64 56 50 51 53 54
팔미트산 71 68 66 60 56 60 61 63
실시예 H
실시예 1 ~ 8과 부분적으로 유사한, 스테아르산-디미리스토일-포스파티딜 글리세롤(DMPG)의 복합물 및 일부 의미있는 조성물의 상전이 및 엔탈피.
DMPG % T1(℃) △H(J/g) Tf(℃) △H(J/g)
0 - - 73.3 210.5
6 55.3 0.55 72.2 185.95
12 55.0 5.811 71.8 160.02
18 55.2 6.71 71.5 146.09
30 56.2 nd 70.2 nd
40 56.4 nd 68.8 nd
50 57.2 35.15 69.7 56.9
100 - - 125.21 nd
실시예 I
실시예 18 ~ 25와 유사한, 스테아르산-라브라필 2130 CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드의 복합물의 상전이 및 엔탈피.
라브라필 % T1(℃) △H(J/g) Tf(℃) △H(J/g)
0 - - 73.9 210.5
2 24. 0.01 74.1 210.2
5 25.1 0.4 73.3 204.4
10 25.2 1.5 71.6 189.8
15 25.1 2.5 72.0 180.5
50 25.3 6.3 65.4 99.3
78 25.0 8.4 56.0 25.0
85 26.0 8.5 55.1 15.2
90 27.1 10.2 52.0 5.2
100 29.1 13.8 38.6 0.77
실시예 L
도 1. 실시예 3 ~ 5 및 비교예 A에 기재된 생성물과 유사한, 산란기술로 측정된, 복합 나노입자(스테아르산-DMPG)의 상전이. 상전이(용융)는 온도의 기능으로서 레이져광 산란("scattering")의 강도의 감소로 나타낸다. 이러한 변화(곡선 정상(curve platau)으로부터의 감소)의 시작은 전이의 시작에 해당한다. 본 발명에 따르는 조성물에서, 나노입자를 형성하는 물질의 조성을 변화시킴으로써 이러한 전이가 어떻게 변화되고 조절될 수 있다는 것이 명백하다. 입자의 융점(실시예 A에서 63℃)은 사실상 실시예 3, 4 및 5에서 각각 55℃, 53℃ 및 49℃로 감소한다.
- 제조방법 특성(기술 1)의 개질: 마이크로에멀젼의 존재 간격
본 발명에 따르는 복합물의 성질은, 단일 성분 물질의 융점보다 훨씬 더 낮은 온도에서 기술 1(실시예 M)(도 2)에 따라서 복합 나노입자의 제조시 중간체로서 사용되는, 낮은 융점을 갖는 조성물을 얻게하고 마이크로에멀젼의 열적 존재 간격을 확장시킨다. 이러한 간격은 산란 진동수를 측정하여 결정되었으며, 마이크로에멀젼의 존재시 최소값(〈 10 KHz)이다. 본 발명의 확실하고 주요한 장점은 복합 나노입자 내에 열불안정성 활성 성분을 구성할 수 있다는 것이다; 다른 장점은 나노입자의 제조시 이들의 융점보다 낮은 온도를 갖는 일부 물질을 사용할 수 있다는 것이다.
실시예 M
도 2. 오일상으로 스테아르산과 데카논산으로 이루어지는 마이크로에멀젼의 존재의 열적 간격(기술 1로 제조, 참조 실시예 26 ~ 28 및 실시예 A)
- 표면 특성의 개질
본 발명의 생성물의 우수한 특성 중의 하나는 나노입자를 형성하는 복합물 및 그 결과 나노입자 자신의 표면성질을 조절할 수 있는 가능성이다. 본 발명의 기술과 물질에 따라서 얻어지는 나노입자의 표면 특성은 이들이 복합물의 형성에 의존적이므로 선행기술에 기재된 양친매성 성분의 표면흡착과 비교하여 실질적인 방법에서 달라진다. 그래서 본 발명의 장점은 달성하고자 하는 치료 목적에 따라서 생체적합성, 소수성, 친수성 및 극성의 바람직한 특성을 갖는 복합 나노입자를 얻을 수 있는 가능성이다.
나노입자를 형성하는 복합물의 표면 성질은 Lorentzen ＆ Wettre 기구를 사용하여 접촉각법으로 측정될 수 있다. 이러한 방법은 하기 수학식 (1)을 통해서, 습윤성과 연관지을 수 있는 물질의 표면에너지를 계산할 수 있다.
γsv= γsl+ γlv(cosθ) (1)
여기서 지수 sv, sl, lv 는 각각 고체-증기, 고체-액체 및 액체-증기 표면의 표면 에너지(γ)를 나타내며, θ는 고체 표면과 액체가 접촉하는 각이다. 각 물질의 표면 자유 에너지는 (2)에 따라서 극성 성분 및 분산 성분으로 나누어질 수 있다.
γt= γp+ γd(2)
하기 백분율로 표시되는 표면의 극성 뿐만 아니라, 일련의 수학식으로 얻어지는 실험적 측정값, 이러한 성분 및 전체 자유 에너지의 값으로부터 계산할 수 있다.
%P = (γp/ γt) * 100 (3)
본 발명에 따르는 복합물의 표면 에너지 측정값으로부터, 양친매성 성분이 다음과 같다는 것을 결정할 수 있었다:
1) 복합물에 의해 형성된 나노입자의 표면 상에 배열되는 것이 바람직함("표면 상에 분리됨")
2) 복합물에 의해 형성된 나노입자 내부에 배열되는 것이 바람직함("내부에 분리됨")
3) 나노 구체 자신의 표면 상 및 내부에 균일하게 배열됨.
복합 혼합물의 표면 에너지의 다이아그램: 실시예 1 ~ 6에 기재된 나노입자를 형성하는 스테아르산-DMPG(실시예 N), 실시예 13 ~ 17에 기재된 나노입자를 형성하는 스테아르산-라브라팍 하이드로(Labrafac HydroTM) 폴리히드록실화 트리글리세라이드(실시예 O), 스테아르산-라브라팍 리포카프릴릭-카프릭 트리글리세라이드 (실시예 P) 는 도 3, 4 및 5에서 실증을 위한 목적으로 나타낸다. 도 3, 4 및 5에서 곡선 A, B 및 C는 각각 분산 성분 및 극성 성분에 대한 총 표면 자유 에너지를 나타낸다.
실시예 N
도 3. 실시예 1 ~ 6에 속하는 스테아르산-DMPG 조성물의 표면 에너지의 경향. 전체 에너지의 감소로 특정지워지는 복합 혼합물 내의 양친매성 성분 DMPG 의 "우선적인 표면 분리"를 나타낸다.
실시예 O
도 4. 실시예 13 ~ 17에 속하는, 스테아르산-라브라팍 하이드로 조성물의 표면 에너지 경향. 경향은 복합 혼합물 내의 양친매성 성분 라브라팍 하이드로(및 내부의 스테아르산 성분)의 "우선적인 내부 분리"를 나타낸다.
실시예 P
도 5. 스테아르산-라브라팍 리포 조성물의 표면에너지 경향. 변함없는 경향은 복합 혼합물 내의 양친매성 성분 라브라팍 리포의 균일한 분포를 나타낸다.
사용된 복합물 조성물의 기능으로서 복합 나노입자의 표면성질의 변화는 복합 나노입자의 수성 현탁액 상에서, 레이져광 산란 전기영동 분석기로 수행된 제타 전위 측정값으로 또한 정량화될 수 있다. 제타 전위(전단면 전위)는 현탁액 내의 나노입자의 표면전하의 측정값이다. 복합물에서 양친매성 물질 백분율의 함수로서 나타나는 나노입자의 제타 전위 및 그 결과 표면 성질이 각 조성물에 대하여 적절한 경향을 갖는다는 것은 실시예 Q ~ T에서 명백하다.
본 발명의 나노입자의 표면 성질 및 제타전위를 개질할 수 있는 가능성은 또한 현탁액의 침전 및 응집 경향을 감소시키거나 제거해서 안정성을 증가시킬 수 있는 중요한 장점을 가지고 있다. 이러한 장점은 나노입자 자신을 형성하는 물질의 조성을 개질하여 얻어질 수 있다.
표 5. (실시예 Q ~ T)
실시예 Q
스테아르산-DMPG 나노입자 상에서 제타 전위(mV)가 측정되고, 실시예 2 ~ 5 및 A와 유사하게 제조되었다.
실시예 R
스테아르산-DMPG 나노입자 상에서 제타 전위(mV)가 측정되고, 실시예 9 ~ 11 및 A와 유사하게 제조되었다.
실시예 S
스테아르산-라브라팍 하이드로 폴리히드록실화 트리글리세라이드 나노입자 상에서 제타 전위(mV)가 측정되고, 실시예 13 ~ 16 및 A와 유사하게 제조되었다.
실시예 T
스테아르산-라브라필 2130CS 폴리히드록실화 트리글리세라이드 나노입자 상에서 제타 전위(mV)가 측정되고, 실시예 19 ~ 24 및 A와 유사하게 제조되었다.
성분 DMPG DMPC 라브라팍 하이드로 라브라필 2130CS
실시예 Q R S T
복합물내 % 제타전위(mV) 제타전위(mV) 제타전위(mV) 제타전위(mV)
0 -30.3(실시예 A) -30.3(실시예 A) -30.3(실시예 A) -30.3(실시예 A)
1 -30.0(실시예 2) -30.1 -31.4(실시예 13)
1.5 -33.7
2 -34.1
2.5 -30.3 -34.0(실시예 14)
3 -31.7 -21.2(실시예 19)
4 -32.2(실시예 9)
4.5 -34(실시예 3)
5 -35.4(실시예 4) -34.2(실시예 15) -13.6
7 -38.2 -31.9(실시예 10)
10 -40.4(실시예 5) -33.7(실시예 11) -33.6(실시예 16) -11.3(실시예 21)
12 -34.3
15 -14.1(실시예 22)
50 -19.8(실시예 23)
75 -18.9(실시예 24)
100 -25.4
- 본 발명 및 선행기술에 따르는 복합 나노입자 구조
본 발명 및 선행기술에 따르는 나노입자 사이의 실질적인 차이점을 확인하기 위하여, 나노입자 시료의 제조를 위한 "음성 채색법"(우라실 시트레이트) 공정을 사용하여 일부 중요한 시료의 구조를 전자전달 현미경 기술(TEM)로 관찰하였다(실시예 6 및 실시예 A에 상응). 도 6에서, 선행기술(실시예 A, 도 6a)에 따라서 제조된 것들과 비교하여 복합 나노입자의 구조가 다르는 것이 명백하다: 복합물의 상("우선적인 분리"에 대응하는 6a 내의 입자 상에서 사실상 구조적으로 다르며, 맑고 어두운 영역이 관찰되는 반면에, 시스템 6b는 균일하게 나타난다. 게다가 실시예 1(도 7a 및 7b)에 대응하는 시료의 함유물은 표면상에 존재하는 물질이 입자의 표면상에 흡수되는 양친매성 물질층과는 다르다는 것을 암시하지만, 이것은 입자 자신의 총체를 이루는 부분이다.
- 펩티드의 경구 흡수의 향상(약물 생체 반응 및 치료 효율)
본 발명의 중요한 장점을 나타내기 위하여, 활성 성분으로서 새먼 칼시토닌을 함유하는 복합 지질성 나노입자가 "생체내" 투여되었고(실시예 2, 4, 5), 칼시토닌을 함유하는 나노입자가 선행기술(실시예 A, B, C)에 따라 제조되었다.
투여량 프로토콜 및 시료 분석
칼시토닌(비활성: 4000 Ul/mg; 통상 투여량: 600 Ul/kg, 나노입자에 혼합된 유효 투여량: 60 ~ 80 Ul/kg) 을 함유하는 본 발명에 따르는 복합 나노입자 현탁액(20ml)을 4마리의 원숭이(Rhesus macaques)에게 경구투여하였다. 혈액 시료(1.5ml)를 정해진 시간에 채취하고, 채취 후 바로 분석하였다.
약물 생체 반응: 플라즈마 내의 펩티드 농도는 밀리유닛/ml(mUl/ml)으로 표시되는 비방사선 면역 측정법으로 결정하였다.
치료 효율: 플라즈마 내의 전체 칼슘 레벨은 비색 킷(Cobas Mira, Roche, CH)으로 측정하였다. 이온화된 칼슘 레벨은 이온-선택 멤브레인(IG Radiometer, Copenhagen, DK)이 장착된 장치에 주입하여 측정하였다. 결과는 베이스라인에 대하여 칼슘 레벨의 퍼센트 변화로 나타내었다.
결과를 하기 기재된 실시예 U ~ Z1과 관련된 도 8 ~ 11에 기재하였다.
실시예 U
도 8. 경구 투여 후, 본 발명(실시예 2, 4, 5)에 따르는 조성물 및 선행기술(실시예 A, B, C)에 따르는 조성물 내에 조제된 칼시토닌의 흡수 역학.
실시예 V
도 9. 본 발명(실시예 2, 4, 5)에 따르는 조성물 및 선행기술(실시예 A, B, C)에 따르는 조성물 내에 조제된 칼시토닌의 경구 투여후 혈액내의 총 칼슘 변화의 역학.
실시예 Z
도 10. 본 발명(실시예 2, 4, 5)에 따르는 조성물 및 선행기술(실시예 A, B)에 따르는 조성물 내에 조제된 칼시토닌의 경구 투여 후 혈액 내의 이온화된 칼슘 변화의 역학.
실시예 Z1
도 11. 본 발명(실시예 2, 4, 5, 7) 및 선행기술(실시예 A, B, C)에 따르는 조성물 내에 조제된 칼시토닌의 경구 투여에 관련된 AUC(0 ~ 8시간)(혈장 역학 곡선에 대한 면적)로서 표시되는 생체 이용 효율.
본 발명에 따르는 복합 나노입자 내에 조제되고, 경구 투여된 칼시토닌의 생체 이용 효율이 선행기술의 제제와 비교하여 현저하게 증가했다(13.5배)는 것은 기재되어 있는 약물 생체 반응 시험을 통해서 명백하게 입증되었다. 또한, 본 발명에 따르는 나노입자는 흡수 증가 외에도, 투여 후 8시간 동안 플라즈마 내에 활성 형태로 존재하는 펩티드 흡수의 조절을 허용하는 것이 명백하다. 더구나 치료 효율 시험은 혈액에 작용하는 칼슘상의 효과가 선행기술(A, B, C)에 따르는 제제에 대하여 본 발명(실시예 2, 4, 5)에 대하여 더 크고, 구성 성분의 단순한 혼합물(실시예 C)이 아니라 존재하는 복합물에 의존한다는 것을 나타낸다.

Claims (20)

  1. 적어도 하나의 지질성 물질 및 적어도 하나의 양친매성 물질로 이루어지는 복합물, 및 수용성, 지용성 또는 난용성 활성 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 고체 나노입자 형태의 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 지질성 물질이 0.5 내지 99.5 중량%의 양으로 존재하고, 상기 양친매성 물질이 0.5 내지 99.5 중량%의 양으로 존재하며, 상기 지질성 물질 및 양친매성 물질의 합에 대하여 상기 활성성분이 0.001 내지 99 중량%의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 나노입자의 직경이 1000 nm 이하, 바람직하게는 50 내지 500 nm인 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    1) 복합물을 형성하는 적어도 하나의 지질성 물질 및 적어도 하나의 양친매성 물질을 둘 이상 갖는 혼합물;
    2) 하나 이상의 계면활성제 및 조계면활성제;
    3) 분산/현탁 수성상 또는 비수성상;
    4) 하나 이상의 약학적 활성 물질;
    을 포함하는 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 단일 성분의 융점 이하의 온도에서 존재 시간 간격을 갖는 마이크로에멀젼 형태의 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 지질성 물질이 천연지방, 부분 또는 전체가 수소화된 식물성유, C10내지 C22의 지방족 사슬을 갖는 포화 및/또는 불포화 지방산을 함유하는 반-합성 및 합성 모노-, 디- 및 트리-글리세라이드 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 카프리네이트, -카프릴레이트, -라우레이트, -팔미테이트, -스테아레이트로부터 선택되는 액체왁스, 에틸올레에이트, 올레일올리에이트로부터 선택되는 지방산 에스테르, 카르나우바 왁스 및 밀납에서 선택되는 고체 왁스, 세틸 알콜, 스테아릴 알콜, 라우릴 알콜, 세틸스테아릴 알콜 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체로부터 선택되는 지방족 알콜, 데카논산, 라우르산, 팔미트산, 스테아르산, 도코산산, 올레산, 리놀레산 및 이들의 폴리히드록시에틸화 유도체로부터 선택되는 지방족 카르복실산(C10내지 C22)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 양친매성 물질이 포스파티딜 글리세롤, 포스파티딜콜린, 포스파티드산, 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세릴 모노올레에이트, 글리세틸 팔미토스테아레이트, 트리글리세라이드 및 폴리히드록실화 트리글리세라이드, 지방산 및 중쇄 지방산(C6내지 C12)의 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 폴리-(프로필렌옥사이드) 폴리-(에틸렌옥사이드) 코폴리머, 폴록사머, 폴리비닐 알콜, 폴리아크릴레이트, 폴리-(메틸비닐 에테르)-말레산 무수물 코폴리머, 키토산, 히알루론산, 셀룰로오즈, 스타치, 크산탄, 스클레로글루칸, 겔란, 구아검, 로커스트 빈 검, 알기네이트, 덱스트란, 폴리-ε-카프로락톤, 폴리-히드록시부티레이트, 폴리락트산, 폴리글리콜산 및 코폴리머로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제4항에 있어서, 상기 분산상이 물 그 자체, 또는 다른 pH 또는 이온강도에서 완충된 물, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리아크릴산, 폴리메타크릴산, 폴리옥시에틸렌의 코폴리머, 폴리옥시프로필렌, 덱스트란, 크산탄, 스클레로글루칸, 아라비아 검, 구아 검, 키토산, 셀룰로오즈 및 스타치 유도체로부터 선택되는 친수성, 수용성 또는 수분산성 폴리머의 수용액, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 단쇄 모노 또는 폴리히드록실 지방족 알콜, 액체 폴리에틸렌글리콜, 폴리글리콜 글리세라이드, 프로필렌글리콜, 테트라글리콜, 및 에톡시디글리콜을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제4항에 있어서, 상기 계면활성제가 지방산의 소르비탄-에스테르, 지방산의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르, 폴리프로필렌옥사이드-폴리에틸렌옥사이드의 코폴리머, 폴리에틸렌글리콜-글리세롤의 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 및 산 또는 장쇄 지방족 알콜의 에스테르, 폴리글리세라이드 에스테르, 사카라이드 및 지방산의 에스테르, 소듐 라우릴 설페이트, 소듐 스테아레이트, 소듐 올리에이트, 소듐 글리코콜레이트, 타우로디옥시콜레이트, 타우로콜레이트, 우르소디옥시콜레이트, 레시틴 자체, 수소화된 및 부분 수소화된 레시틴, 인지질 및 이들의 반합성 또는 합성 유도체 및 지방산의 소르비탄 에스테르로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제4항에 있어서, 상기 조계면활성제가 에탄올, 2-프로판올, n-부탄올, 이소프로판올, 부티르산, 발레산, 카프론산, 벤질 알콜, 데카논산, 라우르산, 카프리닐 알콜, 라우릴 알콜, 산 또는 모노- 또는 폴리히드록실화 알콜을 갖는 중쇄 지방족 알콜의 에스테르 또는 에테르로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제1항에 있어서, 상기 활성 수용성 성분이 칼시토닌, 소마토스타틴, 소마토트로핀(GH), LH-RH 유사체, 데스모프레신(DDAVP), 인터페론, 몰그라모스틴, 표피 성장 인자(EGF), 신경 성장 인자(NGF), 인슐린, 글루카곤, 톡신 또는 톡소이드, 단백질 또는 폴리사카라이드 종류의 안티겐 인자, 헤파린, 저분자량을 갖는 헤파린 및 헤파리노이드를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제1항에 있어서, 상기 활성 지용성 성분이 사이클로스포린, 류프롤라이드, 탁솔 및 유도체 및 에토포시드를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제1항에 있어서, 상기 난용성 활성 성분이 아사이클로비르 및 글란시클로비르인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. a) 적어도 하나의 양친매성 물질과 함께 적어도 하나의 지질성 물질을 물질 자신의 융점에서, 또는 후자가 전자에 용해 또는 분산될 수 있는 경우에는 적어도 두 물질중 하나의 융점에서 초기 공융 또는 공용해하여 복합물을 제조하는 단계;
    b) 상기 용융된 복합물에, 하나 이상의 계면활성제 및 조계면활성제를 함유하는 수용액을 상기 용융된 복합물과 동일한 온도로 가열하여 첨가함으로써, 마이크로에멀젼을 형성하거나, 또는 마이크로에멀젼 자체의 형성에 유용한 물, 계면활성제 및 조계면활성제의 존재하에 지질성 및 양친매성 성분을 융점까지 가열하여 마이크로에멀젼을 형성하는 단계;
    c) 초기 공융된 물질 내에 활성성분을 용해 또는 분산시키거나, 또는 마이크로에멀젼에 활성성분을 첨가하는 단계;
    d) +1℃ 내지 +10℃의 온도범위의 물 또는 수성 매질에서 또는 -15 내지 -30℃의 온도범위에서 물과 섞일 수 있는 비수성 용매에서 마이크로에멀젼을 분산시켜 나노입자 현탁액을 얻는 단계;
    e) 선택적으로 한외여과 또는 투석 시스템을 사용하여 나노입자를 물 또는 수용액으로 세척하여, 현탁액 내에 존재하는 계면활성제, 조계면활성제 및 유리 약품을 제거하고, 동결건조, 여과, 스프레이 건조 또는 용매의 증발을 통해 건조 분말 형태를 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제4항에 따르는 약학적 조성물의 제조방법.
  15. a) 적어도 하나의 양친매성 물질과 함께 적어도 하나의 지질성 물질을 물질 자신의 융점에서 또는 후자가 전자에 용해 또는 분산될 수 있는 경우에는 적어도 물질들 중 하나의 융점에서 공융 또는 공용해하여 복합물을 제조하는 단계;
    b) 복합물의 융점 또는 그 "연화" 온도를 유지하면서 또는 고체상태로 복합물을 유하는 온도에서 고압 균일화 기술을 사용하여, 계면활성제, 안정화제 및/또는 점성화제를 함유하는 수용액 내에 복합물을 분산시키는 단계;
    c) +10℃ 내지 -30℃의 온도에서 냉각 순환 과정으로 혼합물을 냉각하여 나노입자를 제조하고;
    d) 선택적으로, 한외여과 또는 투석 시스템을 사용하여 물 또는 수용액으로 나노입자를 세척함으로써 현탁액 내에 존재하는 계면활성제, 조계면활성제 및 유리 약품을 제거하고, 동결건조기술, 여과기술, 스프레이 건조기술 또는 용매 증발 기술을 사용하여 고체로서 복합 나노입자를 회수하는 단계를 포함하며, 활성 성분을 그 자체, 또는 나노입자 내로의 혼입 또는 이들 표면상으로의 흡착을 돕는 표면 활성을 갖는 물질과 혼합하여 공융 또는 공용해 단계, 또는 공정의 후속 단계에서 첨가하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제4항에 따르는 약학적 조성물의 제조방법.
  16. 제1항에 있어서, 상기 나노입자가 0.1 내지 50% w/v 의 농도로 수성 현탁액 내에 분산되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제1항에 있어서, 상기 나노입자가 수성 현탁액을 내부에 포함하는 약학적 용도의 캡슐 또는 글로블로서 제형화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  18. 제1항에 있어서, 상기 나노입자가 시럽 형태로 제형화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  19. 제1항에 있어서, 상기 나노입자가 약학적 용도의 캡슐 내의 산제로서 제형화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  20. 제1항에 있어서, 상기 나노입자가 약학적 용도의 산제, 정제, 펠렛 또는 과립으로 제형화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100422763B1 (ko) * 2002-01-17 2004-03-12 주식회사 태평양 경피흡수 촉진 능력이 우수한 식물성 나노입자의 제조 및이를 함유하는 화장료 및 의약용 외용제 조성물
KR20040084240A (ko) * 2003-03-27 2004-10-06 (주) 코스메디 고형지질나노입자, 이를 함유하는 활성성분 전달용약학조성물 및 이의 제조방법
KR100593861B1 (ko) * 2001-09-24 2006-06-30 한국과학기술원 칼시토닌을 함유한 경구투여용 나노입자의 제조방법
KR100984801B1 (ko) * 2001-12-11 2010-10-04 코스모 테크놀러지스 리미티드 헤파린 또는 그의 유도체를 경구 투여하기 위한 약학적조성물

Families Citing this family (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8895064B2 (en) 1999-06-14 2014-11-25 Cosmo Technologies Limited Controlled release and taste masking oral pharmaceutical composition
ES2208349T3 (es) 1999-06-14 2004-06-16 Cosmo S.P.A. Composiciones farmaceuticas administrables por via oral de liberacion controlada y enmascaradoras del sabor.
US6309663B1 (en) * 1999-08-17 2001-10-30 Lipocine Inc. Triglyceride-free compositions and methods for enhanced absorption of hydrophilic therapeutic agents
AU6595900A (en) 1999-08-18 2001-03-13 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Hair growth stimulants
US6656504B1 (en) * 1999-09-09 2003-12-02 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions comprising amorphous cyclosporine and methods of making and using such compositions
PT1225897E (pt) * 1999-11-01 2005-01-31 John Rhodes Composicao para o tratamento da obstipacao e do sindroma do intestino irritavel
AU2001247244B2 (en) * 2000-02-28 2005-06-02 Genesegues, Inc. Nanocapsule encapsulation system and method
AU5967101A (en) 2000-05-10 2001-11-20 Rtp Pharma Inc Media milling
US9700866B2 (en) 2000-12-22 2017-07-11 Baxter International Inc. Surfactant systems for delivery of organic compounds
KR100508695B1 (ko) * 2001-02-13 2005-08-17 한국과학기술연구원 인슐린의 경구투여용 제형과 그의 제조방법
US6855270B2 (en) * 2001-06-07 2005-02-15 The University Of Kentucky Research Foundation Nanoscintillation systems for aqueous-based liquid scintillation counting
MXPA04002446A (es) * 2001-09-26 2004-07-23 Baxter Int Preparacion de nanoparticulas de tamano de submicras mediante dispersion y remocion de la fase liquida o solvente.
US20060003012A9 (en) * 2001-09-26 2006-01-05 Sean Brynjelsen Preparation of submicron solid particle suspensions by sonication of multiphase systems
US9308220B2 (en) 2001-12-11 2016-04-12 Cosmo Technologies Limited Pharmaceutical compositions for the oral administration of heparin or derivatives thereof
NZ534061A (en) * 2001-12-14 2006-01-27 Jagotec Ag Pharmaceutical formulation comprising cyclosporin and use thereof
SE0104421D0 (sv) 2001-12-21 2001-12-21 Ponsus Pharma Ab New composition
JP2003342196A (ja) * 2002-05-31 2003-12-03 Mukku:Kk 静脈注射用組成物、その製造法およびその製剤
ITMI20022323A1 (it) * 2002-10-31 2004-05-01 Maria Rosa Gasco Composizioni farmaceutiche atte al trattamento di malattie oftalmiche.
KR100507771B1 (ko) * 2002-11-08 2005-08-17 한미약품 주식회사 난용성 감기약 활성 성분의 경구투여용 조성물 및 그의제조 방법
US7731947B2 (en) 2003-11-17 2010-06-08 Intarcia Therapeutics, Inc. Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle
US7438903B2 (en) * 2003-06-06 2008-10-21 Nbty, Inc. Methods and compositions that enhance bioavailability of coenzyme-Q10
WO2005016386A1 (en) * 2003-08-19 2005-02-24 Meditech Research Limited Improved therapeutic protocols
WO2005051356A1 (en) * 2003-10-31 2005-06-09 Elan Pharma International Ltd. Novel nimesulide compositions
WO2005053660A2 (en) * 2003-12-03 2005-06-16 Lifecycle Pharma A/S Pharmaceutical compositions comprising danazol
US7803366B2 (en) 2004-05-07 2010-09-28 Nbty, Inc. Methods and compositions that enhance bioavailability of coenzyme-Q10
EP1674077A1 (en) * 2004-12-27 2006-06-28 Université de Liège Mucoadhesive pharmaceutical compositions comprising chemoattractants
WO2006083761A2 (en) 2005-02-03 2006-08-10 Alza Corporation Solvent/polymer solutions as suspension vehicles
US11246913B2 (en) 2005-02-03 2022-02-15 Intarcia Therapeutics, Inc. Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide
US8252326B2 (en) 2005-06-01 2012-08-28 Catalent Australia Pty Ltd. Self-microemulsifying dosage forms of low solubility active ingredients such as co-enzyme Q10
DK2020990T3 (da) 2006-05-30 2010-12-13 Intarcia Therapeutics Inc Strømningsmodulator med en indre kanal til et todelt osmotisk fremføringssystem
KR100946275B1 (ko) * 2006-09-26 2010-03-08 주식회사 삼양사 수 난용성 캄토테신 유도체의 미세 나노입자 및 그의제조방법
ES2402172T3 (es) 2007-04-23 2013-04-29 Intarcia Therapeutics, Inc Formulación en suspensión de péptidos insulinotrópicos y usos de los mismos
KR20100020459A (ko) 2007-06-08 2010-02-22 아드레넥스 파마슈티컬스, 아이엔씨. 지연 방출형 제제 및 아드레날린 조절부전의 치료방법
DK2240155T3 (da) 2008-02-13 2012-09-17 Intarcia Therapeutics Inc Indretninger, formuleringer og fremgangsmåder til levering af flere gavnlige midler
FR2943545B1 (fr) * 2009-03-31 2011-06-03 Univ Claude Bernard Lyon Nanoparticules lipidiques solides encapsulant du minoxidil et suspension aqueuse les contenant.
RU2753280C2 (ru) 2009-09-28 2021-08-12 Интарсия Терапьютикс, Инк. Быстрое достижение и/или прекращение существенной стабильной доставки лекарственного средства
FR2958150B1 (fr) 2010-04-01 2012-06-15 Univ Claude Bernard Lyon Elements orthodontiques elastiques aptes a liberer de la chlorhexidine faiblement soluble dans la salive
CN102247320B (zh) * 2010-05-21 2013-03-13 天津药物研究院 一种依托泊苷长循环乳剂及其制备方法
BRPI1002601E2 (pt) * 2010-06-01 2020-06-30 Embrapa Pesquisa Agropecuaria composição nanoestruturada de uso veterinário para administração de fármacos
CN101912363A (zh) * 2010-07-29 2010-12-15 蔡海德 溶解超滤-喷雾干燥-分子分散包衣-水化制粒-冷冻干燥生产脂质体组合药物
US20120208755A1 (en) 2011-02-16 2012-08-16 Intarcia Therapeutics, Inc. Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers
US10154964B2 (en) 2011-09-07 2018-12-18 Cosmo Technologies Limited Controlled release and taste masking oral pharmaceutical composition
US9301920B2 (en) 2012-06-18 2016-04-05 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
EP3936133A1 (en) 2011-11-23 2022-01-12 TherapeuticsMD, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US10806740B2 (en) 2012-06-18 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Natural combination hormone replacement formulations and therapies
US20130338122A1 (en) 2012-06-18 2013-12-19 Therapeuticsmd, Inc. Transdermal hormone replacement therapies
US10806697B2 (en) 2012-12-21 2020-10-20 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US20150196640A1 (en) 2012-06-18 2015-07-16 Therapeuticsmd, Inc. Progesterone formulations having a desirable pk profile
FR2995222B1 (fr) * 2012-09-11 2016-05-20 Creathes Procede alternatif de microencapsulation de principe actif
CA2898729C (en) * 2012-11-14 2018-05-08 Abon Pharmaceuticals, Llc Oral transmucosal drug delivery system
CN102988285B (zh) * 2012-12-13 2014-02-19 哈药集团技术中心 一种多西他赛注射液组合物及其制备方法
US11246875B2 (en) 2012-12-21 2022-02-15 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10568891B2 (en) 2012-12-21 2020-02-25 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US11266661B2 (en) 2012-12-21 2022-03-08 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US10471072B2 (en) 2012-12-21 2019-11-12 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
US9180091B2 (en) 2012-12-21 2015-11-10 Therapeuticsmd, Inc. Soluble estradiol capsule for vaginal insertion
US10537581B2 (en) 2012-12-21 2020-01-21 Therapeuticsmd, Inc. Vaginal inserted estradiol pharmaceutical compositions and methods
EP3010489A1 (en) * 2013-06-20 2016-04-27 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Nanoparticulate formulation comprising a trpa1 antagonist
EP2821077A1 (en) * 2013-07-04 2015-01-07 Praxis Biopharma Research Institute Lipid nanoparticles for wound healing
AR100562A1 (es) 2014-05-22 2016-10-12 Therapeuticsmd Inc Composición farmacéutica de estradiol y progesterona para terapia de reemplazo hormonal
MX387735B (es) 2014-06-11 2025-03-11 SpecGx LLC Composiciones secadas por pulverización que tienen diferentes perfiles de disolución y procesos para su preparación.
AU2015296609A1 (en) 2014-07-29 2016-12-22 Therapeuticsmd, Inc. Transdermal cream
TR201906040T4 (tr) * 2014-08-01 2019-05-21 Glenmark Pharmaceuticals Sa Bir mPGES-1 inhibitörü içeren nanopartikülat formülasyon.
SG11201701571UA (en) 2014-09-03 2017-03-30 Genesegues Inc Therapeutic nanoparticles and related compositions, methods and systems
US9889085B1 (en) 2014-09-30 2018-02-13 Intarcia Therapeutics, Inc. Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c
KR102650751B1 (ko) 2015-06-03 2024-03-22 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 임플란트 배치 및 제거 시스템들
US10328087B2 (en) 2015-07-23 2019-06-25 Therapeuticsmd, Inc. Formulations for solubilizing hormones
AU2017239645A1 (en) 2016-04-01 2018-10-18 Therapeuticsmd, Inc. Steroid hormone pharmaceutical composition
WO2017173044A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Therapeuticsmd Inc. Steroid hormone compositions in medium chain oils
TWI814219B (zh) 2016-05-16 2023-09-01 美商因塔希亞治療公司 升糖素受體選擇性多肽和彼之使用方法
USD860451S1 (en) 2016-06-02 2019-09-17 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant removal tool
USD840030S1 (en) 2016-06-02 2019-02-05 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant placement guide
US10835580B2 (en) 2017-01-03 2020-11-17 Intarcia Therapeutics, Inc. Methods comprising continuous administration of a GLP-1 receptor agonist and co-administration of a drug
EP3999043A4 (en) * 2019-07-19 2023-06-21 SPI Pharma, INC. PREPARATION OF LIPOPHILIC ACTIVE INGREDIENTS

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3421468A1 (de) * 1984-06-08 1985-12-19 Dr. Rentschler Arzneimittel Gmbh & Co, 7958 Laupheim Lipidnanopellets als traegersystem fuer arzneimittel zur peroralen anwendung
US5250236A (en) * 1991-08-05 1993-10-05 Gasco Maria R Method for producing solid lipid microspheres having a narrow size distribution
CA2091152C (en) * 1993-03-05 2005-05-03 Kirsten Westesen Solid lipid particles, particles of bioactive agents and methods for the manfuacture and use thereof

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100593861B1 (ko) * 2001-09-24 2006-06-30 한국과학기술원 칼시토닌을 함유한 경구투여용 나노입자의 제조방법
KR100984801B1 (ko) * 2001-12-11 2010-10-04 코스모 테크놀러지스 리미티드 헤파린 또는 그의 유도체를 경구 투여하기 위한 약학적조성물
KR100422763B1 (ko) * 2002-01-17 2004-03-12 주식회사 태평양 경피흡수 촉진 능력이 우수한 식물성 나노입자의 제조 및이를 함유하는 화장료 및 의약용 외용제 조성물
KR20040084240A (ko) * 2003-03-27 2004-10-06 (주) 코스메디 고형지질나노입자, 이를 함유하는 활성성분 전달용약학조성물 및 이의 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
AU2723899A (en) 1999-08-23
BR9907683A (pt) 2000-11-14
IT1298575B1 (it) 2000-01-12
CA2319565A1 (en) 1999-08-12
WO1999039700A1 (en) 1999-08-12
ITMI980234A1 (it) 1999-08-06
JP2002502813A (ja) 2002-01-29
EP1051160A1 (en) 2000-11-15
AU747129B2 (en) 2002-05-09

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