KR20000035861A

KR20000035861A - Ａｉｄｓ 치료용 약제를 제조하기 위한 ｐｋｃ 억제제의 사용 방법

Info

Publication number: KR20000035861A
Application number: KR1019997001556A
Authority: KR
Inventors: 마이클 알. 지로세크; 더글라스 케이. 웨이스; 로렌스 이. 스트람
Original assignee: 피터지.스트링거; 엘리릴리앤드캄파니
Priority date: 1996-08-30
Filing date: 1997-08-28
Publication date: 2000-06-26
Also published as: HUP0002531A2; CA2263133A1; US6107327A; CZ52099A3; BR9711329A; NO990949L; EP0830860A1; PL331760A1; NO990949D0; CN1228696A; WO1998008509A1; IL128107A0; JP2002514177A; AU4179497A; EA199900245A1

Abstract

본 발명은 HIV 감염을 치료하는 방법에 관한 것이며, 특히 이소자임 선택적 PKC 억제제, (S)-3,4-[N,N'-1,1'-(2"-에톡시)-3"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온 또는 이의 산염을 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

ＡＩＤＳ 치료용 약제를 제조하기 위한 ＰＫＣ 억제제의 사용 방법 {USE OF PKC INHIBITORS FOR THE MANUFACTURE OF A MEDICAMENT FOR THE TREATMENT OF AIDS}

HIV 전염병은 급속도로 계속 증가하며, 이 바이러스 감염과 관련된 임상적 증상은 점차 보다 복잡한 의학적 문제 및 사회 경제적 문제를 나타낸다. 급성 HIV 감염은 일정한 기간 동안 빠른 바이러스 복제를 유발시켜 바이러스의 일차 표적인 순환성 T 림프구를 1% 이상 감염시키는 바이러스혈증을 수반한다. 그러나, 바이러스혈증은 HIV 감염된 세포가 HIV 감염된 T 세포에서 10 내지 100배 감소되는 효과적인 숙주 면역반응에 의해 계산으로부터 제거될 수 있기 때문에 일시적이다. 불운하게도, 노출 후에 바이러스 활성을 억제하기 위해 어떠한 효과적인 치료도 아직 없었다. 이와 같이, 초기 숙주 반응이 HIV 감염된 세포수를 감소시키고 조절하는데 효과적임에도 불구하고, 순환성 CD4+ T 림프구 및 단구/대식세포와 같은 숙주 저장기 세포의 포스트인티그레이션 (postintegration) 잠복성 또는 저수준의 장기 잠복성(LLP) 무증상 감염을 억제하는 것은 충분하지 않다. 이와 같이, HIV의 궁극적인 발병 효과는 억제되지 않으며 잠복성 또는 LLP 상태로부터 유도된 후, 후천성 면역 결핍증(AIDS)이 나타난다.

아직은 HIV 감염에 대한 어떠한 치료법도 발견되지 않았다. HIV 감염에 대한 현재의 치료는 질병의 진행을 지연시키거나 이의 증상을 경감시키려는 시도이다. 오늘날 사용중인 치료법은 디데옥시이노신(ddI, 브리스톨-마이어스 스퀴브(Bristol-Myers Squibb)), 디데옥시시티딘(ddC, 호프만-라로케(Hoffman-LaRoche) 또는 아지도티미딘(AZT 또는 지도부딘, 버로우프스 웰컴(Burroughs Wellcome))과 같은 특정의 디데옥시누클레오티드를 포함한다. 이들 제제는 유독할 수 있다. 이들의 적용은 일부 환자에게서 불평하면서 때로는 치명적인 부작용의 모습을 드러내기 때문에 제한된다. 이들의 부작용으로는 골수 감소증, 말초 신경병, 및 췌염이 있다. 일부 환자의 경우에, AZT는 장기간 사용 후 이의 효력을 상실하였다. 수가지 HIV 프로테아제 억제제의 최근 도입을 포함하여 HIV 감염의 치료용으로 그 밖의 약제가 제안되었지만, 아직은 어떠한 것도 완전하게 효력이 있는지의 여부는 입증되지 않았다. 그러므로, HIV 감염을 치료하기 위한 또 다른 치료제를 개발해야 하는 요건은 여전히 남아있다.

본 발명은 넓게는 잠복성 사람 면역 결핍 바이러스(HIV)의 활성을 억제하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 HIV의 복제를 억제하기 위한 방법에 관한 것이다. 본 발명은 특히 HIV 감염을 치료하기 위한 특정 부류의 이소자임 선택적 단백질 키나아제 C (PKC) 억제제를 사용하는 방법에 관한 것이다.

발명의 요약

그러므로, 본 발명의 목적은 감염된 세포에서의 사람 면역 결핍 바이러스 복제를 억제하기 위한 방법을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 감염된 세포에서의 사람 면역 결핍 바이러스 활성을 억제하기 위한 방법을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 더욱 또 다른 목적은 사람 면역 결핍 바이러스에 감염된 포유동물을 치료하기 위한 방법을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 이들 및 그 밖의 목적은 이하에 기술된 하나 이상의 구체예에 의해 제공된다.

본 발명의 하나의 구체예는 세포를 바이러스 복제 억제량의 단백질 키나아제의 β 이소자임의 억제제와 접촉시키는 것을 포함하여 감염된 세포내에서 사람 면역 결핍 바이러스 복제를 억제하는 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 구체예는 세포를 바이러스 활성 억제량의 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제와 접촉시키는 것을 포함하여 감염된 세포내에서 사람 면역 결핍 바이러스의 활성화를 억제하기 위한 방법을 제공한다.

본 발명의 더욱 또 다른 구체예는 치료적 유효량의 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제를 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여 사람 면역 결핍 바이러스에 감염된 포유동물을 치료하기 위한 방법을 제공한다.

이와 같이, 본 발명은 HIV 감염을 치료하는데 효과적인 화합물의 확인과 관련된 기술을 제공한다.

발명의 상세한 설명

특정 부류의 단백질 키나아제 C 억제제, 즉, 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제, 및 특히 PKC의 β 이소자임 선택적 억제제의 치료적 사용이 특히 PKC 시그날 변환 경로와 관련된 활성화 및 복제와 같은 HIV의 활성화 및 복제를 억제하는 것이 본 발명이 발견하고자 하는 것이다. 특정 부류의 PKC 억제제는 cAMP 시그날 변환 경로와 관련된 HIV 활성화 및 복제를 억제할 수 있다. 따라서, 이러한 화합물은 HIV 감염된 환자를 치료하는데 치료적으로 사용될 수 있다.

HIV의 감염 경로는 짧은 절정기의 바이러스 감염에 의해 특성화된 후, 일반적으로 질병의 어떠한 증상도 없이 장기간, 완전한 가변 기간 잠복성 감염에 의해 특성화된다. HIV 프로바이러스는 말초 단핵 세포 및 T 림프구와 같은 세포내에서 잠복한다. 단핵 세포 및 T 림프구내에서 잠복성 HIV 프로바이러스의 활성화는 AIDS와 관련된 임상적인 증후의 발병을 개시시키는데 있어 중요한 단계이다. HIV 활성화는 감염 유발 상태 및 잠복성 감염의 재활성화를 포함한다. HIV 복제는 감염이 되고 잠복성 감염이 재활성화되는 동안 HIV 게놈의 증가를 포함한다. 일체화된 잠복성 HIV 게놈의 재활성화는 감염성 HIV 입자 및 HIV 단백질을 방출시킬 뿐만 아니라 HIV 복제, 예를 들어, HIV 게놈의 다수 전사를 형성시키는 HIV 복제, HIV 발현, 예를 들어 p24와 같은 바이러스 특이적 단백질의 번역, 및 바이러스 어셈블링을 포함한다.

본 출원인은 본 발명의 화합물이 PKC 및 cAMP 시그날 변환 경로 활성체에 의해 야기되는 HIV 발현, HIV-1 p24 생성을 블로킹할 수 있음을 보여주었다. 어떠한 기술 설명에도 제한되기를 원치 않지만, 본 출원인은 PKC가 숙주 세포 전사 요소 및 바이러스 트랜스-활성체 단백질을 경유하여 바이러스 활성에 영향을 미친다고 믿는다. 잠복성 프로바이러스 또는 LLP 상태로부터 바이러스 발현의 유도는 미토겐, 항원 및 시토킨을 포함하는 다양한 세포 요소에 의해 개시될 수 있다.

PMA, 공지된 PKC 활성체로 잠복하여 감염된 세포의 자극이 농도 의존 방식으로 바이러스 복제를 유발시키므로, 바이러스 발현은 숙주 세포의 활성 상태에 의존하고 세포 PKC의 활성화를 포함한다[참고문헌: Laurence, et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 166:349-357 (1990); Kinter, et al., J. Virol., 64:4306-4312 (1990)]. PKC 억제제, 및 만성 포르볼 에스테르 치료에 의한 PKC의 세포 감소는 포르볼 에스테르, 종양 회저 요소-알파, IL-6 또는 리포폴리사카라이드에 의해 야기된 만성적으로 감염된 단핵세포내에서 HIV 복제를 감소시킨다[참고문헌: Kinter et al., J Virol., 64:4306-4312 (1990)].

바이러스 게놈에 대한 PKC의 효과는 숙주세포 전사 인자, 예를 들어 NF-κB, 및 바이러스 트랜스 활성화제 단백질 tat의 조절에 의해 중재되는 것으로 제안되었다[참고문헌: Gosh, et al., Nature, 344:678-682 (1990); Jakobovits, et al., EMBO, 9:1165-1170 (1990)]. TPA는 만성적으로 감염된 MOLT-4 HIV 세포주에 있어서 HIV-1 복제를 증가시키는 것으로 나타났으며, 이것이 HIV LTR의 강화 영역에 결합하는 NF-κB의 유도에 의해 수행된다는 것은 명백하다[참고문헌: Nabel, et al., Nature, 326:711-713 (1987)]. 기초 및 미토겐 자극된 HIV 복제의 활성화시에 PKC-β 이소형에 대한 특이적 역할은 HIV 복제의 전사 활성화를 유발시키기 위해 PKC-β로 재구성되는 PKC가 없는 세포의 능력에 의해 포함된다[참고문헌: Jakobovits, et al., EMBO, 9:1165-1170 (1990)].

HIV tat 단백질은 생산적인 감염 동안 유전자 발현을 100배까지 증가시킨다. PKC 결핍된 세포가 tat 단백질에 대하여 어떠한 현저한 효과도 없이 HIV-1 트랜스 활성화시에 현저한 감소를 보여주는 것은 명백하다. 이들 PKC 결핍 세포에서의 트랜스 활성화는 야생형 PKC 발현 벡터와의 트렌스펙션에 의해 복구될 수 있다.

DNA 토포이소머라아제 II 포스포릴화 상태 및 활성은 HIV 증식과도 상관된다. PKC 억제제(O-알킬글루세로포스포리피드 유사체)와의 포스포릴화 억제는 HIV 증식을 감소시킨다[참고문헌: Matthes et al., Antiviral Res., 13:273-286 (1990)]. 더욱이, 그 밖의 PKC 활성화제, OAG 및 브리오스타틴-1은 만성적으로 감염된 U1 세포에서 HIV 발현을 유발시킨다[참고문헌: Kinter, et al., J. Virol., 64:4306-4312 (1990)].

따라서, 본원에 기술된 바와 같은 PKC 억제제 화합물은 바이러스 활성화를 억제하면서 바이러스 복제를 억제함으로써 HIV 감염을 치료하는데 치료적으로 사용될 수 있다. PKC 억제제 화합물은 PKC 및/또는 cAMP 시그날 변환 경로를 조절하거나 PKC 및/또는 cAMP 경로를 조절하는 단백질 인자와 상호 작용시킴으로써 HIV 감염의 치료에도 치료적으로 효과적일 수 있다.

본 발명의 방법은 β 이소자임을 효과적으로 억제하는 단백질 키나아제 C 억제제를 이용하는 것이 바람직하다. 하나의 적합한 군의 화합물은 일반적으로 비스-인돌릴말레이미드 또는 매크로고리 비스-인돌릴말레이미드로서 종래에 공지되어 있다. 종래에 널리 인지된 비스인돌릴말레이미드는 미국 특허 제5,621,098호, 제5,545,636호, 제5,481,003호, 제5,491,242호 및 제5,057,614호에 기술된 화합물을 포함하며, 이들 특허는 모두 본원에 참고문헌으로 인용되어 있다. 매크로고리 비스-인돌릴말레이미드는 특히 하기 화학식(I)의 화합물로 표현된다. 이들 화합물 및 이들의 제조방법은 본원에 참고문헌으로 인용된 미국 특허 제5,552,396호에 기술되어 있다. 이들 화합물은 사람에게 치료적 유효량으로 투여되어, HIV에 감염된 HIV의 복제 및 잠복성 HIV의 활성화를 억제하거나 HIV 감염을 치료한다. 이들 화합물은 또한 상기 언급된 질병에 걸릴 위험이 있는 환자에게 예방제로서 투여될 수 있다.

본 발명의 방법에 사용하기 위한 하나의 바람직한 부류의 화합물은 하기 화학식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르이다 :

(I)

상기 식에서,

W는 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -CO-, C₂-C₆알킬렌, 치환된 알킬렌, C₂-C₆알케닐렌, -아릴-, 아릴(CH₂)_mO-, -헤테로사이클-, -헤테로사이클-(CH₂)_mO-, -융합된 비사이클릭-, 융합된 비사이클릭-(CH₂)_mO-, -NR³-, -NOR³-, -CONH- 또는 -NHCO-이고;

X 및 Y는 독립적으로 C₁-C₄알킬렌 또는 치환된 알킬렌이거나, X, Y 또는 W는 함께 결합하여 -(CH₂)_n-AA-를 형성하며;

R¹은 수소, 또는 할로, C₁-C₄알킬, 히드록시, C₁-C₄알콕시, 할로알킬, 니트로, -NR⁴R⁵또는 -NHCO(C₁-C₄알킬)로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 임의적 치환기이고;

R²는 수소, CH₃CO-, -NH₂또는 히드록시이고;

R³는 수소, -(CH₂)_m아릴, -C₁-C₄알킬, -COO(C₁-C₄알킬), -CONR⁴R⁵, -(C=NH)NH₂, -SO(C₁-C₄알킬), -SO₂(NR⁴R⁵) 또는 -SO₂(C₁-C₄알킬)이고;

R⁴및 R⁵는 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬, 페닐 또는 벤질이거나, 이들을 결합시키는 질소와 결합되어 포화 또는 불포화 5원 또는 6원 고리를 형성하며;

AA는 아미노산 잔기이고;

m은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3이고;

n은 독립적으로 2, 3, 4 또는 5이다.

본 발명에 사용하기에 더욱 바람직한 화합물은, -X-W-Y- 부분이 치환되거나 비치환될 수 있는 4 내지 8개의 원자를 함유하는 화학식(I)로 표현된다. 가장 바람직하게는, -X-W-Y- 부분이 6개 원자를 함유한다.

본 발명의 방법에 사용하기 위한 다른 바람직한 화합물은 R¹및 R²가 수소이고, W가 치환된 알킬렌, -O-, -S-, -CONH-, -NHCO- 또는 -NR³-인 화학식(I)의 화합물이다. 본 발명에 사용하기 위한 특히 바람직한 화합물은 하기 화학식(Ia)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르이다 :

(Ia)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-O-(CH₂)_p-이고;

R⁴는 히드록시, -SH, C₁-C₄알킬, (CH₂)_m아릴, -NH(아릴), -N(CH₃)(CF₃), -NH(CF₃) 또는 -NR⁵R⁶이고;

R⁵는 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

R⁶는 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.

일반식(Ia)의 가장 바람직한 화합물은 Z가 CH₂이고, R⁴가 -NH₂, -NH(CH₃) 또는 -N(CH₃)₂인 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르이다.

본 발명의 방법에 사용하기 위한 다른 바람직한 화합물은 화학식(I) 중의 W가 -O-이고, Y가 치환된 알킬렌이고, X가 알킬렌인 화합물이다. 이들 바람직한 화합물은 하기 화학식(Ib)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르이다 :

(Ib)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p-이고;

R⁴는 -NR⁵R⁶, -NH(CF₃) 또는 -N(CH₃)(CF₃)이고;

R⁵및 R⁶는 독립적으로 H 또는 C₁-C₄알킬이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.

화학식(Ib)의 가장 바람직한 화합물은 p가 1이고, R⁵및 R⁶가 메틸인 화합물이다.

이들 화합물은 염기성 부분을 함유하기 때문에, 화학식(I), (Ia) 및 (Ib)의 화합물은 또한 약제학적으로 허용되는 산부가염으로서 존재할 수 있다. 이러한 염을 생성시키기 위해 통상적으로 사용되는 산으로는, 염화수소산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산 및 인산과 같은 무기산, 및 파라톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 옥살산, 파라브로모페닐술폰산, 탄산, 숙신산, 시트르산, 벤조산 및 아세트산과 같은 유기산, 및 관련된 유기 및 무기산이 있다. 따라서, 이러한 약제학적으로 허용되는 염으로는, 황산염, 피로황산염, 중황산염, 아황산염, 중아황산염, 인산염, 인산 일수소, 인산 이수소, 메타인산염, 피로인산염, 염화물, 브롬화물, 요오드화물, 아세트산염, 프로피온산염, 데칸산염, 카프릴산염, 아크릴산염, 포름산염, 이소부티르산염, 헵탄산염, 프로피올산염, 옥살산염, 말론산염, 숙신산염, 수베르산염, 세바스산염, 푸마르산염, 말레산염, 2-부틴-1,4-디오산염, 3-헥신-2,5-디오산염, 벤조산염, 클로로벤조산염, 히드록시벤조산염, 메톡시벤조산염, 프탈산염, 크실렌술폰산염, 페닐아세트산염, 페닐프로피온산염, 페닐부티르산염, 시트르산염, 락트산염, 힙푸르산염, β-히드록시부티르산염, 글리콜산염, 말레산염, 타르타르산염, 메탄술폰산염, 프로판술폰산염, 나프탈렌-1-술폰산염, 나프탈렌-2-술폰산염, 만델산염 등이 있다. 특히, 염화수소산 및 메실산염이 사용된다.

약제학적으로 허용되는 염 이외에, 다른 염이 또한 존재할 수 있다. 이들은 화합물의 정제에서, 다른 염의 제조에서, 또는 화합물 또는 중간생성물의 확인 및 특징화에서 중간생성물로서 사용될 수 있다.

화학식(I), (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 또한 물, 메탄올, 에탄올, 디메틸포름아미드, 에틸 아세테이트 등과 같은 다양한 용매화물로서 존재할 수 있다. 이러한 용매화물의 혼합물이 또한 제조될 수 있다. 이러한 용매화물의 공급원은 제조 및 결정화의 용매에서 고유한 결정화 용매이거나, 이러한 용매에 대해 우생적이다.

화학식(I), (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 다양한 입체 이성질체가 존재할 수 있으며; 예를 들어, W는 치환된 알킬렌 부분 중에 키랄 탄소 원자를 함유할 수 있음이 인지된다. 화합물은 라세미체로서 제조되는 것이 통상적이며, 그 자체로 사용하는 것이 편리할 수 있다. 대안적으로, 2개의 개별적 거울상 이성질체가 모두 단리되거나, 바람직한 경우에는 통상적인 기술에 의해 합성될 수 있다. 이러한 라세미체 및 개별적 거울상 이성질체 및 이들의 혼합물이 본 발명의 방법에 사용되는 화합물의 일부를 형성한다.

본 발명에 사용되는 화합물은 또한, 화학식(I), (Ia) 및 (Ib)의 화합물의 약제학적으로 허용되는 프로드러그를 포함한다. 프로드러그는 화학적으로 변형되고 작용 부위에서 생물학적으로 불활성일 수 있지만, 어미 생활성 형태에 대해 하나 이상의 효소적 처리 또는 생체내 처리에 의해 분해되거나 변형될 수 있는 드러그이다. 상기 프로드러그는 또한, 어미 형태와는 상이한 약동학적 프로파일을 가져서, 점막 상피를 가로지르는 흡수가 더 용이해질 수 있고, 염 형성 및 용해도가 더 우수해지고/거나 전신적 안정성(예를 들어, 혈장 반감기의 증가)이 개선될 수 있다. 전형적으로, 이러한 화학적 변형물은 하기 화합물을 포함함한다 :

1) 에스테라아제 또는 리파아제에 의해 분해될 수 있는 에스테르 또는 아미드 유도체;

2) 특이적 또는 비특이적 프로테아제에 의해 확인될 수 있는 펩티드; 또는

3) 프로드러그 형태 또는 변형된 프로드러그 형태의 막 선택을 통해 작용 자리에서 축적되는 유도체; 또는 이들의 임의의 조합물.

적합한 프로드러그 유도체의 선택 및 제조를 위한 통상적인 방법은 예를 들어 문헌[H. Bundgaard, Design of Prodrugs, (1985)]에 기재되어 있다.

다양한 비스-인돌-N- 말레이미드 유도체의 합성은 데이비스(Davis) 등의 미국 특허 제5,057,614호에 기술되어 있고, 본 발명에 사용하기에 적합한 바람직한 화합물의 합성은 상기 인용된 미국 특허 제5,552,396호 및 파울(Foul) 등의 EP 공보 0 657 411 A1에 기술되어 있으며, 이들 문헌은 모두 본원에 참고로 인용되어 있다.

본 발명의 방법에 사용하기 위한 하나의 특히 바람직한 단백질 키나아제-β 억제제는 상기 언급된 미국 특허 제5,552,396호의 실시예 5g에 기술된 화합물 ((S)-3,4-[N,N'-1,1'-(2"-에톡시)-3"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온 하이드로클로라이드염)이다. 상기 화합물은 유효한 단백질 키나아제 C 억제제이다. 이것은 다른 키나아제보다 단백질 키나아제 C에 대해 선택성이고, 고도의 이소자임 선택성이며, 즉 베타-1 및 베타-2 이소자임에 대해 선택성이다. 상기 화합물의 다른 염, 특히 메실레이트 염이 또한 바람직하다.

바람직한 메실레이트 염은 하기 화학식(II)의 화합물을 비반응성 유기 용매, 바람직하게는 유기물질/물 혼합물, 가장 바람직하게는 물-아세톤 중에서 메탄술폰산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다:

메탄올, 아세톤, 에틸아세테이트 및 이들의 혼합물과 같은 다른 용매가 사용될 수 있다. 용매 대 물의 비는 임계적이지 않고, 시약의 용해도에 의해 결정되는 것이 일반적이다. 바람직한 용매 대 물의 비는 0.1:1 내지 100:1 부피비(용매 대 물)가 일반적이다. 바람직하게는, 비는 1:1 내지 20:1, 가장 바람직하게는 5:1 내지 10:1이다. 최적비는 선택된 용매에 의존하며, 아세톤의 경우 9:1의 용매 대 물의 비가 바람직하다.

반응은 다른 비, 특히 메탄술폰산이 과량인 비가 적용될 수도 있지만, 거의 등몰량의 2가지 시약을 수반하는 것이 일반적이다. 메탄술폰산의 첨가비는 반응에 대해 임계적이지 않고, 6시간 이상에 걸쳐 신속하게(5분 미만) 또는 서서히 첨가될 수 있다. 반응은 0℃ 내지 환류온도에서 수행된다. 반응 혼합물은 X-선 분말 회절에 의해 측정하여 염의 형성이 완결될 때까지 교반되며, 5분 내지 12시간 동안 교반될 수 있다.

본 발명의 염은 결정 형태로서 바람직하고 용이하게 제조된다. 염의 3수화물 형태는 건조 또는 20-60% 습도에 대한 노출시에 1수화물로 용이하게 전환될 수 있다. 염은 실질적으로, 규정된 융점, 굴절 및 X-선 회절 패턴을 나타내는 결정이다. 일반적으로, 결정은 비정질 고형물이 10% 미만, 바람직하게는 5% 미만, 가장 바람직하게는 1% 미만이다.

메실레이트 염은 반응 혼합물로부터 직접 당분야에 공지된 여과 또는 다른 분리 기술에 의해 50 내지 100% 수율로 단리된다. 바람직한 경우에 염을 추가로 정제하기 위해, 당분야에 공지된 재결정화 및 다른 정제 기술이 사용될 수 있다.

당업자는 본 발명의 단백질 키나아제 C 억제제의 치료적 유효량이 HIV 복제 및/또는 활성화를 억제하거나 HIV 효과를 억제하기에 충분한 양임을 인지할 것이다. T 세포 카운트, 바이러스 카운트, 바이러스 특이적 단백질, 및 이의 활성 등과 같은 널리 공지된 마아커를 사용하여 HIV 활성 및 복제를 측정하는 것은 당업자의 능력이다. 투여되는 양은 특히, 치료 제형 중의 화합물의 농도 및 환자의 체중에 따라 달라진다. 일반적으로, HIV 감염을 치료하기 위한 치료제로서 투여하려는 단백질 키나아제 C 억제제의 양은 개개의 사례에 따라 주치의에 의해 결정될 것이다. 지침으로서, 감염의 정도, 면역계의 세기, 환자의 체중 및 연령이 적절한 투여량을 설정할 경우에 고려될 것이다.

일반적으로, 적합한 투여량은 치료 부위에서 단백질 키나아제 C 억제제의 농도가 0.5 nM 내지 200 μM, 더욱 일반적으로는 0.5 nM 내지 200 nM이 되게하는 용량이다. 대부분의 경우에 혈청 농도는 0.5 nM 내지 20 nM이면 충분한 것으로 예측된다.

이러한 치료 농도를 얻기 위해, 치료를 필요로 하는 환자에게는 또한 체중 1㎏당 약 0.001㎎ 내지 50.0㎎이 투여될 것이다. 일반적으로, 체중 1㎏당 약 10.0㎎ 이하의 단백질 키나아제 C 억제제가 필요하다. 상기 기재된 바와 같이, 상기 양은 개개의 사례에 따라 변할 수 있다.

본 발명의 화합물의 효능은 시험관내 및 생체내 둘 모두에서 시험될 수 있다. 시험관내 시험에 있어서, 만성적으로 HIV 감염된 단핵세포 및 T 림프구 개체가 문헌[Kinter et al., J. Virology 64:4306-4312, 1990 및 Sardoroski et al., Science 227: 171-173, 1985]에 기술된 바와 같이 사용될 수 있다. 문헌 둘 모두 본원에 인용된다. 시험관내 시험 시스템으로부터 수득된 결과는 포르볼 에스테르, 종양 회저 인자-알파, IL-6 및 리포폴리사카라이드에 의해 자극된 HIV 복제를 감소시키기 위한 화합물 효능 뿐만 아니라 기초 상태에서 HIV 복제를 감소시키기 위한 화합물 효능의 전조가 된다. 생체내 시험에 있어서, HIV 감염된 사람화 엄격하게 조합된 면역 결핍(SCID) 마우스 모델이 사용될 수 있다[참고문헌: Mosier et al., Immunology Today 15:332-339, 1994]. 이러한 모델에서, SCID 마우스는 HIV 감염된 사람의 단구 또는 CD4+ T 림프구로 접종된다. 일차 종말점으로서, 질병 진행이 CD+ 4 T 세포의 결핍을 평가함으로써 모니터링된다. HIV 감염된 단구 또는 CD+ 4 T 세포에 감염되는 경우에 이러한 모델에서 소모성 질환을 늦추는 본 발명의 화합물의 능력은 AIDS의 임상적 진행을 지연시키거나 잠복기를 연장시키는 데에 HIV에 감염된 사람의 양성 반응의 전조가 된다.

화학식(I)의 화합물, 및 화학식(Ia) 및 (Ib)의 바람직한 화합물은 투여 전에 제형화되는 것이 바람직하다. 적합한 약제 제형은 공지되고 용이하게 입수할 수 있는 성분을 사용하여 공지된 방법에 의해 제조된다. 본 발명의 방법에 사용하기에 적합한 조성물을 제조하는 데에 있어서, 활성 성분은 담체와 혼합되거나, 담체에 의해 희석되거나, 캡슐, 작은 봉지, 종이 또는 다른 용기의 형태를 가질 수 있는 담체 내에 함유되는 것일 일반적일 것이다. 담체가 희석제로서 사용되는 경우, 이것은 활성 성분에 대한 비히클, 부형제 또는 매질로서 작용하는 고체, 반고체 또는 액체 물질일 수 있다. 따라서, 조성물은 정제, 알약, 분말, 함당정제, 작은 봉지, 카세제, 엘릭서, 현탁액, 에멀션, 용액, 시럽, 에어로졸(고체 또는 액체 매질로서), 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌약, 무균 주사액, 및 경구 또는 국소 투여용 무균 포장 분말의 형태를 가질 수 있다.

적합한 담체, 부형제 및 희석제의 일부 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 슈크로오스 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알긴산염, 트래거컨트, 젤라틴, 규산 칼슘, 단결정 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸 및 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 스테아르산 마그네슘 및 광유가 있다. 제형은 추가로, 윤활제, 습윤제, 유화제, 현탁제, 방부제, 풍미제 또는 향미제를 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 환자에게 투여된 후에 신속하거나, 지속적이거나 지연된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 조성물은 단위 투여량 형태로 제형화되는 것이 바람직하며, 각각의 투여량은 활성 성분을 약 0.05㎎ 내지 3g, 더욱 일반적으로는 약 750㎎ 함유한다. 그러나, 치료적 투여량은 치료하려는 질병의 병세, 투여하려는 화합물의 선택 및 선택된 투여 경로를 포함하는 실제 상황에 따라 의사에 의해 결정될 것으로 이해될 것이다. 따라서, 상기 투여량 범위는 어떠한 경우에도 본 발명의 범위를 제한하려고 하는 것은 아니다. 용어 "단위 투여량 형태"는 사람 및 다른 포유동물에 대한 단위 투여량으로서 적합한 물리적으로 불연속적인 단위를 의미하며, 각가의 단위는 적합한 약제학적 담체와 관련하여 바람직한 치료 효과를 발생시키도록 계산된 예정된 양의 활성 물질을 함유한다.

대부분 경구적으로 투여되는 상기 제형 이외에, 본 발명의 방법에 사용되는 화합물은 또한 국소적으로 투여될 수 있다. 국소 제형은 연고, 크림 및 겔을 포함한다.

연고는 (1) 유성 기재, 즉 백색 석유 또는 광유와 같은 고정유 또는 탄화수소로 구성된 기재, 또는 (2) 흡수성 기재, 즉 물을 흡수할 수 있는 무수 물질(들), 예를 들어 무수 라놀린으로 구성된 기재를 사용하여 제조하는 것이 일반적이다. 통상적으로, 유성인 지 또는 흡수성인 지에 상관없이, 기재의 형성 후에, 활성 성분(화합물)은 바람직한 농도를 제공하는 양으로 첨가된다.

크림은 유성/수성 에멀션이다. 이들은 대표적으로 왁스, 석유, 광유 등과 같은 고정유, 탄화수소 등을 포함하는 유상(내부상), 및 물 및 부가염과 같은 임의의 수용성 물질을 포함하는 수성상(연속상)으로 구성된다. 2가지 상은 유화제, 예를 들어 라우릴 황산 나트륨과 같은 표면활성제; 및 아카시아 콜로이드성 클레이, 베에검(veegum) 등과 같은 친수성 콜로이드로 구성된다. 에멀션의 생성시에, 활성 성분(화합물)은 바람직한 농도를 달성시키는 양으로 첨가되는 것이 통상적이다.

겔은 유성 기재, 물 또는 에멀션-현탁액 기재로부터 선택되는 기재를 포함한다. 기재에는 겔화제가 첨가되어, 기재 중의 매트릭스를 형성하여 점도를 증가시킨다. 겔화제의 예로는 히드록시프로필 셀룰로오스, 아크릴산 중합체 등이 있다. 통상적으로, 활성 성분(화합물)은 겔화제의 첨가 전에 바람직한 농도로 제형에 첨가된다.

국소용 제형 내로 혼입되는 화합물의 양은 임계적이 아니며; 농도는 바람직한 치료 자리에 바람직한 양의 화합물을 전달할 양으로 감염된 조직 부위에 제형을 용이하게 적용시키기에 충분한 범위 내에 있어야 한다.

감염된 조직에 적용시키려는 국소용 제형의 통상적인 양은 제형 중의 화합물의 농도에 의존할 것이다. 일반적으로, 제형은 감염된 조직 1㎠당 화합물 약 1 내지 약 500㎍을 제공하는 양으로 감염된 조직에 적용될 것이다. 바람직하게는, 화합물의 적용되는 양은 약 30 내지 약 300㎍/㎠, 더욱 바람직하게는 약 50 내지 약 200㎍/㎠, 가장 바람직하게는 약 60 내지 약 100㎍/㎠일 것이다.

하기의 제형화 실시예는 단지 예시적이며, 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.

제형 1

경질 젤라틴 캡슐을 하기의 성분들을 사용하여 제조하였다 :

	양(㎎/캡슐)
활성제	5
건조된 전분	200
스테아르산 마그네슘	10
합계	215㎎

상기 성분들을 혼합하고, 경질 젤라틴 캡슐 중에 460㎎의 양으로 충전시켰다.

제형 2

정제를 하기의 성분들을 사용하여 제조하였다 :

	양(㎎/캡슐)
활성제	15
셀룰로오스, 미세결정	10
발연된 이산화규소	10
스테아르산	5
합계	40㎎

상기 성분들을 배합시키고 압축시켜서, 각각 중량이 665㎎인 정제를 제조하였다.

제형 3

각각 60㎎의 활성 성분을 함유하는 정제를 하기와 같이 제조하였다 :

	양(㎎/캡슐)
활성제	60㎎
전분	45㎎
미세결정 셀룰로오스	35㎎
폴리비닐피롤리돈(물 중의 10% 용액)	4㎎
나트륨 카르복시메틸 전분	4.5㎎
스테아르산 마그네슘	0.5㎎
탈크	1㎎
합계	150㎎

활성 성분, 전분 및 셀룰로오스를 No. 45 메쉬 U.S. 체를 통해 통과시키고, 골고루 혼합시켰다. 폴리비닐피롤리돈의 용액을 생성된 분말과 혼합시킨 후, No. 14 메쉬 U.S. 체를 통해 통과시켰다. 이렇게 해서 생성된 과립을 50℃에서 건조시키고, No. 18 메쉬 U.S. 체를 통해 통과시켰다. 그 다음, No. 60 메쉬 U.S. 체를 통해 사전에 통과시킨 나트륨 카르복시메틸 전분, 스테아르산 마그네슘 및 탈크 과립에 첨가하고, 혼합시킨 후에, 정제 기계에서 압축시켜서 각각 중량이 150㎎인 정제를 수득하였다.

이들 실시예 모두는 (S)-3,4-[N,N'-1,1-((2"-에톡시)-3-"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온을 사용하여 U1 세포에서의 HIV의 발현을 억제하는 것을 보여준다.

실시예 1

본 실시예에서는, PKC 활성화제 자극 HIV 발현에 대한 목적 화합물의 억제 효과를 조사하였다. U1 세포를 PMA 또는 목적 화합물과 조합된 PMA로 처리하였다. HIV-1 p24의 생성 여부를 통해 HIV 발현을 측정하였다. 표 1에 기재된 결과는 목적 화합물이 PKC 활성화제 유도된 HIV 발현에 대하여 억제 효과를 가짐을 보여준다.

처리	HIV-1 p24 증식 (pg/ml)
PMA (10㎍/ml)	3974
PMA (10㎍/ml) + PKC 억제제 (1nM)	1899
PMA (10㎍/ml) + PKC 억제제 (10nM)	36
PMA (10㎍/ml) + PKC 억제제 (100nM)	1.8
PMA (10㎍/ml) + PKC 억제제 (500nM)	9.1

실시예 2

본 실시예에서는, 콜레라 독소 자극된 HIV 발현에 대한 목적 화합물의 억제 효과를 조사하였다. 콜레라 독소는 cAMP의 세포 수준을 증가시키는 것으로 공지되어 있다. U1 세포를 콜레라 독소 또는 목적 화합물과 조합된 콜레라 독소로 처리하였다. HIV-1 p24의 생성 여부를 통해 HIV 발현을 측정하였다. 표 2에 기재된 결과는 목적 화합물이 PKC 활성화제 유도된 HIV 발현에 대하여 억제 효과를 가짐을 보여준다.

처리	HIV-1 p24 증식 (pg/ml)
콜레라 독소 (CT) (10ng/ml)	55
CT (10㎍/ml) + PKC 억제제 (1nM)	21
CT (10㎍/ml) + PKC 억제제 (10nM)	10
CT (10㎍/ml) + PKC 억제제 (100nM)	6
CT (10㎍/ml) + PKC 억제제 (500nM)	22

실시예 3

본 실시예는 TNF 유도된 HIV 발현에 대한 목적 화합물의 효과를 보여준다. U1 세포를 TNF 또는 목적 화합물과 조합된 TNF로 처리하였다. HIV-1 p24의 생성 여부를 통해 HIV 발현을 측정하였다. 표 3에 기재된 결과는 TNF가 non-PKC 관련된 경로를 통해 HIV 발현을 활성화시킬 수 있음을 제안한다.

처리	HIV-1 p24 증식 (pg/ml)
TNF (10 U/ml)	176
TNF (10 U/ml) + PKC 억제제 (1nM)	269
TNF (10 U/ml) + PKC 억제제 (10nM)	176
TNF (10 U/ml) + PKC 억제제 (100nM)	185
TNF (10 U/ml) + PKC 억제제 (500nM)	167

본 발명의 원리, 바람직한 구체예 및 조작 방식을 앞서 명세서에 기재하였다. 그러나, 본원에서 보호하려는 발명은, 이들이 제한적이기보다는 예시적인 것으로 간주되기 때문에, 기술된 특정 형태로 제한하는 것으로 구성되지는 않는다. 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않으면서 변형 및 변경이 당업자들에 의해 이루질 수 있다.

Claims

세포를 바이러스 활성 억제량의 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제와 접촉시키는 것을 포함하여, 감염된 세포에서 사람 면역 결핍 바이러스 활성화를 억제하기 위한 방법.
제 1항에 있어서, 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제가 비스-인돌릴말레이미드 또는 매크로고리 비스-인돌릴말레이미드임을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 억제제가 이소자임 선택적이며, 이소자임 선택성이 베타-1 및 베타-2 이소자임으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
제 3항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(I)

상기 식에서,

W는 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -CO-, C₂-C₆알킬렌, 치환된 알킬렌, C₂-C₆알케닐렌, -아릴-, 아릴(CH₂)_mO-, -헤테로사이클-, -헤테로사이클-(CH₂)_mO-, -융합된 비사이클릭-, 융합된 비사이클릭-(CH₂)_mO-, -NR³-, -NOR³-, -CONH- 또는 -NHCO-이고;

X 및 Y는 독립적으로 C₁-C₄알킬렌 또는 치환된 알킬렌이거나, X, Y 및 W는 함께 결합하여 -(CH₂)_n-AA-를 형성하며;

R¹은 수소, 또는 할로, C₁-C₄알킬, 히드록시, C₁-C₄알콕시, 할로알킬, 니트로, -NR⁴R⁵또는 -NHCO(C₁-C₄알킬)로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 임의적 치환기이고;

R²는 수소, CH₃CO-, -NH₂또는 히드록시이고;

R³는 수소, -(CH₂)_m아릴, -C₁-C₄알킬, -COO(C₁-C₄알킬), -CONR⁴R⁵, -(C=NH)NH₂, -SO(C₁-C₄알킬), -SO₂(NR⁴R⁵) 또는 -SO₂(C₁-C₄알킬)이고;

R⁴및 R⁵는 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬, 페닐 또는 벤질이거나, 이들을 결합시키는 질소와 결합되어 포화 또는 불포화 5원 또는 6원 고리를 형성하며;

AA는 아미노산 잔기이고;

m은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3이고;

n은 독립적으로 2, 3, 4 또는 5이다.
제 4항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ia)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ia)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-O-(CH₂)_p-이고;

R⁴는 히드록시, -SH, C₁-C₄알킬, (CH₂)_m아릴, -NH(아릴), -N(CH₃)(CF₃), -NH(CF₃) 또는 -NR⁵R⁶이고;

R⁵는 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

R⁶는 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 4항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ib)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ib)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p-이고;

R⁴는 -NR⁵R⁶, -NH(CF₃) 또는 -N(CH₃)(CF₃)이고;

R⁵및 R⁶는 독립적으로 H 또는 C₁-C₄알킬이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 4항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 (S)-3,4-[N,N'-1,1'-(2"-에톡시)-3"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온 또는 약제학적으로 허용되는 이것의 산염을 포함함을 특징으로 하는 방법.
제 7항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 산염이 하이드로클로라이드 염 및 메실레이트 염으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
세포를 바이러스 복제 억제량의 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제와 접촉시키는 것을 포함하여, 감염된 세포에서 사람 면역 결핍 바이러스 복제를 억제하기 위한 방법.
제 9항에 있어서, 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제가 비스-인돌릴말레이미드 또는 매크로고리 비스-인돌릴말레이미드임을 특징으로 하는 방법.
제 9항에 있어서, 억제제가 이소자임 선택적이며, 이소자임 선택성이 베타-1 및 베타-2 이소자임으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
제 11항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(I)

상기 식에서,

W는 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -CO-, C₂-C₆알킬렌, 치환된 알킬렌, C₂-C₆알케닐렌, -아릴-, 아릴(CH₂)_mO-, -헤테로사이클-, -헤테로사이클-(CH₂)_mO-, -융합된 비사이클릭-, 융합된 비사이클릭-(CH₂)_mO-, -NR³-, -NOR³-, -CONH- 또는 -NHCO-이고;

X 및 Y는 독립적으로 C₁-C₄알킬렌 또는 치환된 알킬렌이거나, X, Y 및 W는 함께 결합하여 -(CH₂)_n-AA-를 형성하며;

R¹은 수소, 또는 할로, C₁-C₄알킬, 히드록시, C₁-C₄알콕시, 할로알킬, 니트로, -NR⁴R⁵또는 -NHCO(C₁-C₄알킬)로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 임의적 치환기이고;

R²는 수소, CH₃CO-, -NH₂또는 히드록시이고;

R³는 수소, -(CH₂)_m아릴, -C₁-C₄알킬, -COO(C₁-C₄알킬), -CONR⁴R⁵, -(C=NH)NH₂, -SO(C₁-C₄알킬), -SO₂(NR⁴R⁵) 또는 -SO₂(C₁-C₄알킬)이고;

R⁴및 R⁵는 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬, 페닐 또는 벤질이거나, 이들을 결합시키는 질소와 결합되어 포화 또는 불포화 5원 또는 6원 고리를 형성하며;

AA는 아미노산 잔기이고;

m은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3이고;

n은 독립적으로 2, 3, 4 또는 5이다.
제 12항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ia)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ia)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-O-(CH₂)_p-이고;

R⁴는 히드록시, -SH, C₁-C₄알킬, (CH₂)_m아릴, -NH(아릴), -N(CH₃)(CF₃), -NH(CF₃) 또는 -NR⁵R⁶이고;

R⁵는 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

R⁶는 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 12항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ib)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ib)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p-이고;

R⁴는 -NR⁵R⁶, -NH(CF₃) 또는 -N(CH₃)(CF₃)이고;

R⁵및 R⁶는 독립적으로 H 또는 C₁-C₄알킬이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 12항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 (S)-3,4-[N,N'-1,1'-(2"-에톡시)-3"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온 또는 약제학적으로 허용되는 이것의 산염을 포함함을 특징으로 하는 방법.
제 15항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 산염이 하이드로클로라이드 염 및 메실레이트 염으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
포유동물에게 치료적 유효량의 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제를 투여하는 것을 포함하여, 사람 면역 결핍 바이러스에 감염된 포유동물을 치료하는 방법.
제 17항에 있어서, 단백질 키나아제 C의 β 이소자임의 억제제가 비스-인돌릴말레이미드 또는 매크로고리 비스-인돌릴말레이미드임을 특징으로 하는 방법.
제 17항에 있어서, 억제제가 이소자임 선택적이며, 이소자임 선택성이 베타-1 및 베타-2 이소자임으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.
제 19항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(I)

W는 -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -CO-, C₂-C₆알킬렌, 치환된 알킬렌, C₂-C₆알케닐렌, -아릴-, 아릴(CH₂)_mO-, -헤테로사이클-, -헤테로사이클-(CH₂)_mO-, -융합된 비사이클릭-, 융합된 비사이클릭-(CH₂)_mO-, -NR³-, -NOR³-, -CONH- 또는 -NHCO-이고;

X 및 Y는 독립적으로 C₁-C₄알킬렌 또는 치환된 알킬렌이거나, X, Y 및 W는 함께 결합하여 -(CH₂)_n-AA-를 형성하며;

R¹은 수소, 또는 할로, C₁-C₄알킬, 히드록시, C₁-C₄알콕시, 할로알킬, 니트로, -NR⁴R⁵또는 -NHCO(C₁-C₄알킬)로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 임의적 치환기이고;

R²는 수소, CH₃CO-, -NH₂또는 히드록시이고;

R³는 수소, -(CH₂)_m아릴, -C₁-C₄알킬, -COO(C₁-C₄알킬), -CONR⁴R⁵, -(C=NH)NH₂, -SO(C₁-C₄알킬), -SO₂(NR⁴R⁵) 또는 -SO₂(C₁-C₄알킬)이고;

R⁴및 R⁵는 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬, 페닐 또는 벤질이거나, 이들을 결합시키는 질소와 결합되어 포화 또는 불포화 5원 또는 6원 고리를 형성하며;

AA는 아미노산 잔기이고;

m은 독립적으로 0, 1, 2 또는 3이고;

n은 독립적으로 2, 3, 4 또는 5이다.
제 20항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ia)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ia)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p- 또는 -(CH₂)_p-O-(CH₂)_p-이고;

R⁴는 히드록시, -SH, C₁-C₄알킬, (CH₂)_m아릴, -NH(아릴), -N(CH₃)(CF₃), -NH(CF₃) 또는 -NR⁵R⁶이고;

R⁵는 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

R⁶는 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 20항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 하기 화학식(Ib)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 이들의 염, 프로드러그 또는 에스테르임을 특징으로 하는 방법:

(Ib)

상기 식에서,

Z는 -(CH₂)_p-이고;

R⁴는 -NR⁵R⁶, -NH(CF₃) 또는 -N(CH₃)(CF₃)이고;

R⁵및 R⁶는 독립적으로 H 또는 C₁-C₄알킬이고;

p는 0, 1 또는 2이고;

m은 독립적으로 2 또는 3이다.
제 20항에 있어서, 단백질 키나아제 C 억제제가 (S)-3,4-[N,N'-1,1'-(2"-에톡시)-3"'(O)-4"'-(N,N-디메틸아미노)-부탄)-비스-(3,3'-인돌릴)]-1(H)-피롤-2,5-디온 또는 약제학적으로 허용되는 이것의 산염을 포함함을 특징으로 하는 방법.
제 23항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 산염이 하이드로클로라이드 염 및 메실레이트 염으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법.