KR101827655B1 - 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하는 것일 수 있다.
상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물에 의하는 경우 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력을 나타내는 천연조성물을 활용하여 백발을 예방하고, 흑모 생성을 촉진시킬 수 있다.
특히, 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 천연물 유래의 추출 조성물이 복합조성물로 제공되면서 피부 또는 모발 손상의 부작용이 없으면서도 백발 예방 및 흑모유발 촉진에 상당한 효과를 낼 수 있게 할 수 있다.

Description

바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물{A COMPOSITION COMPRISING BANANA HAVING INHIBITORY EFFECT ON INDUCTION OF GREY HAIR AND POSITIVE EFFECT ON INDUCTION OF BLACK HAIR}

본 발명은 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력을 나타내는 천연조성물을 활용하여 모낭주위에 축적되는 H₂O₂를 감소시키면서 멜라닌(melamin) 합성을 촉진함으로써, 백발을 예방하고, 흑모를 유발할 수 있도록 하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.

모발은 크게 모표피, 모피질, 모수질의 3부분으로 구성되어 있다. 모수질을 감싸고 있는 모피질은 모발에서 가장 두터운부분(80 내지 90%)으로서 멜라노좀이라는 멜라닌색소 및 지질막과 TRP-1(Tyrosinase Related Protein-1), TRP-2(Tyrosinase Related Protein-2) 및 기타단백질로 구성된 과립을 포함하고 있다. 멜라닌 색소는 멜라노사이트내의 소기관인 멜라노좀에서 합성되며, 멜라노사이트의 수지강 돌기를 통하여 주위의 케라티노사이트로 이행한다. 멜라닌의 합성경로를 보면, 먼저 아미노산인 타이로신이 산화되어 도파로, 다시 산화하여 도파퀴논이 생성되는 단계에서 타이로시나제가 관여하며 그 후의 반응은 자동 산화적으로 진행되지만, TRP-1 및 TRP-2와 같은 효소가 관여하여 반응을 가속화 시키는 것으로 알려져 있다. 모발의 색상은 아미노산인 타이로신을 원료로 하여 형성되는 유멜라닌 및 페오멜라닌의 유형과 분포양에 따른 정도 등의 요인에 의해 모발의 밝기를 결정시켜 사람마다 독특한 모발색을 드러낸다. 다시 말해 멜라닌의 유형과 과립의 크기에 따른 흑색, 적색, 금발 등의 다양한 모발색상을 결정한다고 볼 수 있다. 모발의 색은 모발의 가운데층인 모피질(cortex)에 있는 두 종류의 멜라닌(melanin) 색조 알갱이인 유멜라닌은 가장 흔하고 제일 진한 색소로서 갈색과 검정 머리의 색을 만든다. 페오멜라닌은 보다 옅은 색의 색조로서 금발머리를 띄게 한다. 붉은 머리의 색상은 붉은 색소와 검정 색소에 의해 나타나며, 금발머리는 붉은 색소와 노랑색소가 혼합된 결과의 색이다. 모래빛 갈색머리는 붉은 색, 갈색, 검정색 색소의 혼합에 의해 색소가 나타나며 짙은 갈색머리는 모래빛 갈색머리보다 검정색 색소가 더 많이 들어있다. 그리고 흰머리에는 색소 알갱이가 없어 나타나는 머리색이다. 모발색깔은 모발내에 존재하는 색소에 의해 결정이 되며 이러한 색소는 그사람의 유전 정보 인자에 의해 결정된다.

멜라닌은 물에 용해되지 않는 단백질로서 모발에 색상을 부여한다. 모유두에서 생성된 아미노산인 타이로신은 멜라닌의 기질이며. 백모는 도파퀴논에서 그 작용을 멈추므로 모발이 케라틴화 되어 각화 위로 올라가면서 형성된 백발로서 타이로사나제 효소를 만들지 못하기 때문에 산화작용이 이루어지지 못한 상태이다. 백모는 특히 흑갈색계의 모발을 갖는 인종에서 더욱 명료하게 나타나며, 멜라노사이트에서 멜라닌 생성이 멈추기 때문에 일어나는 현상으로 일종의 노화현상이다.

도파퀴논은 두 가지 경로로 반응이 진행된다. 도파크롬을 거쳐 흑갈색의 유멜라닌을 생성하는 경로와 도파퀴논이 케라틴단백질에 존재하는 시스테인과 결합한 후 적갈색의 페오멜라닌을 생성하는 경로가 있다. 이와 같이 모발의 산화 염색반응은 모발에서의 중합반응의 결과이다. 이 반응에서는 방향족 아민과 페놀모노머(phenolmonoer)가 산화 중합하고, 또한 모발중의 아미노산 잔기와 결합한다. 유멜라닌은 비교적 크기가 크고 화학적으로 쉽게 파괴될 수 있는데 반하여 페오멜라닌은 비교적 크기가 작고 화학적으로 안정된 구조를 하고 있다. 시스테인 함량이 많은 모발에는 페오멜라닌이 많이 존재하며, 흑갈색의 모발을 과산화수소로 탈색시켰을 때 색상이 약간 붉게 보이는 것은 바로 유멜라닌이 먼저 파괴되고 페오멜라닌이 남아 있기 때문이다.

모발에 있어서의 멜라닌은 모발의 색조를 결정하는 중요한 인자로서, 모발상부에 존재하는 멜라노사이트 내에서 생성된 모발피질세포 케라티노사이트에 전달된 후, 모발의 성장과 함께 위쪽으로 이동한다. 생리적 노화의 한 현상으로서 인식되는 백발은 모발 멜라노사이트의 수적 감소 및 멜라노사이트의 기능저하에 의한 멜라닌 생성의 감소에 의해 유발된다.

백발은 일반적으로 연령이 높아지면 발생하는 것으로, 노령이라는 느낌을 인상을 깊게하고, 특히 젊은 나이에 있어서의 백발은 일반적으로 싫어한다. 그 때문에 백발을 감추기 위하여 백발 염색 등에 의해 발발을 검게 염색하는 염색제가 많이 연구되고, 또한 널리 시판되고 있다. 그러나, 흑발염색은 일시적인 방법으로 백발의 성장에 의해 다시 염색하지 않으면 안되고, 또한 현재 널리 사용되고 있는 산화형 흑발염색은 산화제 등의 사용에 의해 피부에 손상을 준다. 따라서, 백발의 발생을 방지하는 백발 방지제 또는 흑모 생성을 유도하는 흑모 촉진제에 대하여 각종 연구가 행해지고 있다.

그러나, 합성물을 사용하는 경우 모발 또는 피부를 손상시키는 등 부작용이 문제되며, 세포독성 등으로 그 사용량에 일정한 제한을 받는다는 문제가 있고, 천연물의 경우 현재까지 알려진 천연물 유래의 조성물은 백발 억제 및 흑모 유발효과가 상대적으로 미미하다는 한계를 가진다.

따라서, 보다 다양한 천연성분 유래의 조성물을 활용하여 조성물 사용에 따른 모발 또는 피부 손상 등의 부작용의 문제를 해소하면서도 백발을 예방 및 흑모의 생성을 보다 효과적으로 촉진시킬 수 있는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 개발 및 발굴이 절실하게 요구되고 있다.

관련된 선행기술을 보면, KR 10-2002-0059906 A(선행기술 1, 공개일자: 2002년 7월 16일)는 검정참깨, 호도살, 한련초, 꿀에 보조성분으로 숙지황, 천문동, 맥문동을 배합하여 이용하는 방법을 개시하고 있다. 또한, KR 10-2002-0059905 A(선행기술 2, 공개일자: 2002년 7월 16일)는 적하수오, 측백나무잎, 여정자, 한련초, 석염과 숙지황, 천문동, 맥문동과 함께 검정콩과 함께 용기에 넣은 후 50℃의 온도에서 끓여 약액이 검정콩을 흑모 유지하는 방법을 개시하고 있고, 일본 특허공보 JP 56-087515 A(선행기술 3, 공개일자: 1981년 7월 16일)는 검정깨, 흑송 이파리, 다시마를 이용한 방법을 개시하고 있다. 또한, 일본 공개번호 JP 60-178805 A(선행기술 4, 공개일자: 1985년 9월 12일)에서는 오갈피추출 엑기스를 이용한 식물 추출물을 유효성분으로 하는 방법을 개시하고 있다. 또한, 그 밖에 뇌하수체 호르몬을 이용하거나(일본 공보 62-63510호), C-AMP(아데노신-3,5' 사이클릭포스 페이트)를 이용하거나(일본 공보 62-45527호), 비타민 D3을 이용하는 방법(일본 공보 60-174705호) 등이 알려져 있다.

KR 10-2002-0059906 A KR 10-2002-0059905 A JP 56-087515 A JP 60-178805 A

본 발명의 목적은 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력을 나타내는 천연조성물을 활용하여 백발을 예방하고, 흑모 생성을 촉진시킬 수 있도록 하는 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.

특히, 천연물 유래의 추출 조성물을 활용함으로써 피부 또는 모발 손상의 부작용이 없으면서도 백발 예방 및 흑모유발 촉진에 상당한 효과를 낼 수 있도록 하는 복합조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 바나나 추출 조성물을 일정범위로 제공하여 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진시키면서 이와 함께 우수한 향미를 통하여 모발 외용제로 사용할 수 있는 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 이용하여 제조한 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 외용제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하는 것이다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 흑임자 추출물 및 적하수오 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 흑미 추출물 및 현미 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 상기 바나나 추출물, 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물은 10 내지 99 중량%의 에탄올을 용매로 추출된 것일 수 있다.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 식품 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 외용제 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 또 다른 일 실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 세정용 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법은 바나나를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 바나나 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 바나나 추출물을 제조하는 바나나 추출물 제조단계; 흑임자를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑임자 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑임자 추출물을 제조하는 흑임자 추출물 제조 단계; 적하수오를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 적하수오 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 적하수오 추출물을 제조하는 적하수오 추출물 제조 단계; 흑미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑미 추출물을 제조하는 흑미 추출물 제조 단계; 현미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 현미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 현미 추출물을 제조하는 현미 추출물 제조 단계; 서목태를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 서목태 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 서목태 추출물을 제조하는 서목태 추출물 제조 단계; 그리고, 상기 바나나 추출물, 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물의 혼합단계를 포함하는 것일 수 있다.

이하 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하는 것이다.

상기 바나나란, 열대 및 아열대지역의 습윤한 저지대에서 재배되고 있는 바나나는 인류 역사와 더불어 지구상에서 가장 오래된 대표적인 야생 과일중 하나이다. 바나나는 칼슘, 카로틴, 비타민 A 등 영양분을 풍부하게 함유하고 있으며, 과일 중 열량이 높은 편에 속한다.

바나나는 껍질과 그 내부의 과육으로 구성되지만, 일반적으로 바바나는 식용으로 사용되는 과육을 지칭하는 의미로 사용되는 것이 일반적이다. 다만 본 발명의 명세서 전체에 걸쳐서 사용한 '바나나'는 바나나 과육에 한정하는 것이 아니며, 바나나 과육과 그 껍질을 모두 포함하는 의미로 정의한다. 따라서 바나나 추출물은 바나나 과육 추출물 및 바나나 껍질 추출물에 대한 상위개념에 속하는 것으로 정의한다.

바나나 추출물은 멜라노사이트의 세포활성 뿐만 아니라 멜라닌 합성을 촉진시켜 백모를 예방하고, 흑모 유발을 촉진하는 효과가 상당히 높다.

바람직하게 상기 바나나 추출물은 바나나 껍질 추출물인 것일 수 있다.

백모를 다시 흑모로 되돌리기 위해서는 모낭에 있는 melanocyte가 melanin 색소를 생성해야 한다. 뿐만 아니라 피부 기저층에 있는 melanocyte 는 자외선과 같은 유해한 자극으로부터 피부를 보호하기 위하여 방어기전으로 멜라닌을 합성한다.

멜라닌 합성 기전에서 tyrosinase 효소는 멜라닌 합성반응의 초기속도를 결정하는 중요한 촉매효소이다. 멜라닌을 합성하기 위해 tyrosinase는 tyrosine에 hydroxyl 작용기를 결합시켜 3,4-dihydroxy phenylalanine (DOPA)를 생성하고 동시에 DOPA를 산화시켜 dopaquinon으로 전환시킨다. 그 다음 단계로 dopaquinon이 산화되어 생성된 dopachrome은 두번째 효소인 tyrosinase related protein-2 (TRP-2) 에 의하여 5,6-Dihydroxy-2-indolycarboxylic acid (DHICA)로 전환된다. 이러한 DHICA는 세번째 효소인 tyrosinase related protein-1(TRP-1)에 의해 indole-5,6-quinone caboxylic acid로 전환되고 이것이 산화되어 eumelanin을 생성한다

또 다른 melanin 합성기전으로는 hydrogen peroxide, superoxide ion, hydroxyl radical등과 같은 불안정한 활성산소종(ROS, reactive oxygen species)의 산화반응에 의해 melanin이 합성된다. 그러므로 모낭세포에 있는 melanocyte에 의해서 melanin생성이 촉진되면 백모가 흑모로 전환 될 수 있다. 최근에 Melanin 생성을 증가시키는 물질로서는 α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH), imatinib mesylate, 3-isobutyl-1-methylxanthine(IBMX)가 알려져 있다. α-MSH는 피부 색소 침착 조절에 중요한 메신저 역할을 하는 cAMP를 증폭시키고 protein kinase A(PKA)가 활성화 시킨다. protein kinase A(PKA)가 활성화 시킨다. 이에 따라 tyrosinase 활성을 조절해 melanin 세포의 증식과 색소증가에 영향을 미친다.

Imatinib mesylate는 tyrosine kinase에 의해 유발되는 만성 골수성 백혈병 (CML)의 치료제로 알려져 있는 tyrosine kinase 억제제이다. Imatinib mesylate는 또한 c-kit tyrosinase kinase를 억제하며 c-kit와 그 리간드 줄기 세포 인자의 melanin 세포의 생존과 발생에 관여한다. IBMX는 cAMP phosphodiesterase를 억제함으로써 세포 내 cAMP 함량을 증가시켜 PKA를 활성화 시키며, PKA는 전사인자인 CREB를 인산화시키고 melanin 생성촉진과정의 주요 효소인 tyrosinase와 MITF를 상향 조절할 수 있다.

또한 흑모가 백모로 변화되는 주요 원인으로 H₂O₂가 모낭주위에 축적되어 멜라닌(melanin) 합성이 저하되어 백모가 유발된다. 따라서 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력을 가지므로, 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 사용하는 경우 활성산소인 H₂O₂의 감소로 멜라닌의 합성 촉진시켜 백발을 예방하고 흑모생성을 촉진할 수 있다.

바나나 껍질 추출물에 의하는 경우 바나나 과육 추출물에 비하여 흑모를 유발하는 효과가 월등히 높다는 것을 확인할 수 있었다. 이는 바나나 껍질은 멜라닌 합성의 전구체가 되는 타이로신, 트립토판, 철분, 칼륨, B 비타민, 비타민 C와 K, 마그네슘, 섬유질, 항산화물질, 구리를 함유하며, 산화될 때 바나나에 포함된 타이로신이 멜라닌으로 전환되어 검은 색으로 변하는 특징을 가지는데, 이러한 점 때문에 바나나 껍질 추출물이 흑모 유발을 촉진하는 효과가 상당히 높게 하는 역할을 수행하는 것으로 추정된다.

또한 상기 바나나 추출물은 백발방지 및 흑모 유발 촉진효과가 우수할 뿐만 세포녹성이 낮아 부작용 등의 문제가 거의 없다. 또한 아니라 향미가 우수하여 바나나 추출물을 포함하는 조성물을 다양한 제형으로 제공하여 백박방비 및 흑모 유발 촉진효과를 내는 기능성 제품으로 활용하게 할 수 있는 장점을 가진다.

즉, 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 함유하는 샴푸, 린스, 헤어젤, 연고, 크림, 로션, 화장수, 스프레이, 앰플 등으로 제공되어 백모를 사전에 예방하고, 흑모 생성을 촉진하는 모발 노화방지용 모발 화장품으로 유용하게 활용될 수 있다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 흑임자 추출물 및 적하수오 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 흑임자는 검은참깨를 한방에서 이르는 용어이다.

상기 적하수오란, 여뀌과 식물인 붉은조롱 Polygonum multiflorum Thunb.의 덩이뿌리를 말린 것이다. 붉은 조롱은 각지에서 심는다. 가을이나 봄에 덩이뿌리를 캐 잔뿌리를 다듬어 버리고 물에 씻어 햇볕에 말리거나 증기에 쪄서 말린다. 맛은 달고 쓰며 성질은 약간 따뜻하다. 간경(肝經), 신경(腎經)에 작용한다. 간(肝), 신(腎)을 강화하고 정혈(精血)을 보충하며 뼈와 근육을 튼튼하게 한다. 또한 대변이 통하게 하고 헌데를 잘 아물게 한다. 약리 실험에서 강심(强心) 작용, 장(腸) 연동 운동 강화 작용, 장(腸)에서의 콜레스테롤 흡수 억제 작용, 항균 작용 등이 알려진바 있다.

상기 바나나 추출물이 상기 흑임자 추출물 및 적하수오 추출물을 더 포함하는 경우 흑모 유발 촉진효과가 높아지기 때문에 더 적은 사용량으로 높은 효과를 낼 수 있다. 따라서 효과를 기준으로 보다 적은 용량을 사용할 수 있으므로 세포독성을 낮게 유지할 수 있는 장점을 가진다.

바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 상기 흑임자 추출물 10 내지 1000 중량부 및 적하수오 추출물 10 내지 1000 중량부를 포함하는 것이 있다, 상기 범위에 의하는 경우 혼합사용에 의한 흑모유발 촉진효과가 향상될 수 있다.

더 바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 상기 흑임자 추출물 200 내지 400 중량부 및 적하수오 추출물 50 내지 130 중량부를 포함하는 것이 있다, 상기 범위에 의하는 경우 흑임자 추출물 및 적하수오 추출물의 혼합사용에 따른 흑모 유발 촉진효과가 상당히 높아질 뿐만 아니라 세포독성이 더 낮아지게 때문에 부작용의 문제 없이 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물로 활용할 수 있는 장점을 가진다.

상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물 흑미 추출물 및 현미 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 흑미는 검은 쌀을 말한다.

상기 현미란, 수확한 벼를 건조, 탈곡한 후 고무 롤러로 된 기계로 왕겨를 벗긴 쌀을 말한다.

상기 바나나 추출물에 상기 흑미 추출물과 현미 추출물을 더 포함하는 경우 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력이 높아질 뿐만 아니라, 멜라닌 생성을 촉진함으로서 흑모 유발 효과가 보다 촉진될 수 있다.

바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 상기 흑미 추출물 10 내지 1000 중량부 및 현미 추출물 10 내지 1000 중량부를 포함하는 것이 있다, 상기 범위에 의하는 경우 혼합사용에 의한 흑모유발 촉진효과가 향상될 수 있다.

더 바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 상기 흑미 추출물 50 내지 200 중량부 및 현미 추출물 50 내지 200 중량부를 포함하는 것이 있다,

상기 범위에 의하는 경우 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력이 크게 향상되고, 세포독성이 낮아지기 때문에 적은 양으로 사용하여도 흑모 유발을 촉진하는데 높은 효과를 낼 수 있다.

상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물을 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 서목태란, 쥐눈이콩 또는 여두라고도 한다. 콩과의 다년생 만초(蔓草)로 줄기와 잎은 갈색이다. 7월에 노란 꽃이 피어 타원형의 깍지 속에 지름 5 내지 7㎜ 정도의 검고 둥근 열매가 여물면 수확한다. 본초강목에 의하면 빛이 검으면서 반들반들하고 작은 수콩(雄豆)을 약으로 쓰는 것이 더 좋다고 한다. 또한, 유황을 뿌리고 재배하면 약성이 더욱 좋아지는 것으로 알려져 있고, 성질이 따뜻하고, 맛은 달며, 독이 없다.

바나나 추출물과 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물을 혼합하여 사용하는 경우 멜라닌이 생성되는 과정에 관여하는 효소인 TRP-2 발현을 촉진하는 유효성분이 증가하고, H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능이 높아지므로 보다 높은 흑모 유발효과를 낼 수 있다.

바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 흑임자 추출물 200 내지 400 중량부 상기 적하수오 추출물 50 내지 130 중량부; 상기 흑미 추출물 50 내지 200 중량부; 상기 현미 추출물 50 내지 200 중량부 및 상기 서목태 추출물 30 내지 150 중량부로 포함하는 것일 수 있다.

상기 범위에 혼합되어 사용되는 경우 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능이 크게 높아질 뿐만 아니라, 멜라닌 합성을 촉진하여 흑모 유발 효과를 상당히 높게 낼 수 있다.

또한, 더 바람직하게는 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하고, 상기 바나나 추출물 100 중량부에 대하여 흑임자 추출물 250 내지 350 중량부 상기 적하수오 추출물 80 내지 110 중량부; 상기 흑미 추출물 90 내지 150 중량부; 상기 현미 추출물 90 내지 150 중량부 및 상기 서목태 추출물 50 내지 100 중량부로 포함하는 것일 수 있다.

상기 범위에 의하는 경우 H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거하고 활성산호에 대한 높은 환원력으로 모낭에 축적된 H₂O₂를 효과적으로 제거할 수 있을 뿐만 아니라, 멜라닌이 생성되는 과정에 관여하는 효소인 TRP-2 발현을 촉진시켜 멜라닌 합성이 유도되는 효과가 가장 탁월하다.

상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물에 있어서, 상기 바나나 추출물, 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물은 10 내지 99중량%의 에탄올을 용매로 추출된 것일 수 있다.

용매의 에탄올 함량이 10 중량% 미만인 경우 멜라닌 생성을 촉진하는 유효성분이 거의 수득되지 않으며, 에탄올의 함량이 99 중량%를 초과하는 경우에는 추출성분 중 세포독성이 높은 성분이 추출되어 조성물의 사용량에 제한이 생기며, 유효성분 이외의 성분 추출에 의하여 멜라닌 합성 효과가 저해되는 문제를 가진다.

바람직하게 상기 용매는 75 내지 95 중량%의 에탄올 추출물인 것일 수 있다. 상기 범위의 에탄올을 용매로 사용하는 경우 멜라닌 생성을 촉진하고 모낭에 축적되는 H₂O₂을 효과적으로 제거할 수 있는 유효성분을 수득하는데 유리할 수 있다.

본 발명의 다른 일실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 식품 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명에서 말하는 식품 조성물은 기능성 또는 기호성 등을 원인으로 음식, 음료 기타 섭취할 수 있는 것을 의미하는 것으로 정의한다.

바람직하게 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 식품 조성물은 상기 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물 100 중량부에 대하여 앵두 추출물 11 내지 20 중량부, 곤달비 추출물 8 내지 20 중량부, 으름덩굴 추출물 1 내지 5 중량부를 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 앵두 추출물, 곤달비 추출물 및 으름덩굴 추출물을 상기 범위로 포함하는 경우 바나나 추출물의 달고 은은한 향과 전체적으로 잘 조화를 이루면서 깊은 향미를 낼 수 있다, 특히 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물을 바나나 추출물과 함께 사용하는 경우에도 상기 범위에 의하는 경우 적하수오의 쓴 향미와 서목태의 텁텁한 향미를 제거하고, 달고, 향긋하면서도 깊은 향이 전체적으로 조화를 이루면서 기호성 높은 식품조성물로 제공될 수 있다.

상기 앵두 추출물이 11 중량부 미만으로 포함된 경우 바나나 추출물의 달고 흐린 향미와 흐린 앵두 향으로 전체적으로 밋밋한 향미를 가지게 되며, 바나나 추출물을 포함하는 복합 추출물로 제공하는 경우 적하수오 추출물의 쓴 향미가 제거되지 않는 문제가 있다. 또한 20 중량부를 초과하는 경우 앵두의 향과 신맛이 강해지면서 바나나의 단맛 및 그 향과 잘 어우러지지 않고 전체적으로 조화로운 향미가 어우러질 수 없어 기호성이 낮아지는 문제가 있다.

상기 곤달비는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀로, 상기 곤달비 추출물은 8 중량비 미만으로 혼합하는 경우 바나나 향과 함께 전체적으로 밋밋한 향미가 남아 기호성이 높지 않으며 곤달비의 은은한 향미도 느껴지지 않는다. 또한 바나나 추출물을 포함하는 복합추출물로 제공하는 경우에도 적하수오의 향이 제거되지 않는 문제를 가진다. 또한 상기 곤달비 추출물이 20 중량부를 초과하는 경우 곤달비의 쌉싸릅한 향이 강해지면서 전체적으로 쓰고 쌉사한 향이 되어 기호성이 낮아지는 문제가 있다.

상기 으름덩굴은 쌍떡잎식물 미나리아재비목 으름덩굴과의 낙엽 덩굴식물을 말하며, 상기 으름덩굴 추출물을 사용하는 경우 적하수오의 쓴맛과 서목태의 텁텁한 향을 제거하는데 효과가 있다. 다만, 상기 으름덩굴 추출물을 1 중량부 미만으로 사용하는 경우 전체적으로 바나나와 함께 밋밋한 향으로 남으며 바나나 추출물을 포함하는 복합추출물로 사용하는 경우 상기 적하수오의 쓴맛과 서목태의 텁텁한 향을 중화시키는 효과를 낼 수 없다. 또한, 5 중량부를 초과하는 경우에는 으름덩굴 자체의 향이 강해지면서 전체적으로 밋밋한 향이 강해지므로 기호성이 떨어지는 문제가 있다.

따라서 상기 범위에 의하는 경우 기호성이 높으면서도 백발을 예방하고 흑모유발 촉진시킬 수 있는 기능성 식품을 제공하는 유리할 수 있다.

상기 앵두 추출물, 곤달비 추출물 및 으름덩굴 추출물은 에탄올 추출물을 사용한 것일 수 있다. 에탄올 추출물을 사용하는 경우 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물과 혼합되어 상기 효과를 내는데 유리할 수 있다.

본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 외용제 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명에서 말하는 모발 외용제 조성물은 기능성 또는 심미성을 위하여 모발에 뿌리거나 바를 수 있는 등의 형태로 제공되는 외용제 조성물을 말하며, 모발 에센스, 모발 영양유액, 모발 크림, 모발 화장수, 모발 연고, 헤어 겔, 헤어 스프레이 등이 여기에 포함되며, 위 나열한 상품에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 세정용 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명에서 말하는 모발 세정용 조성물은 모발의 세정 또는 세척 등의 목적으로 사용하는 조성물을 말하며, 샴푸, 린스, 모발 비누, 모발 클리너 등이 여기에 포함되며, 위 나열한 상품에 한정되는 것은 아니다.

바람직하게 상기 바나나를 포함하는 모발 외용제 조성물 및 모발 세정용 조성물은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물 100 중량부에 대하여 민들레 1 내지 10 중량부, 으름덩굴 1 내지 5중량부 및 포도씨 추출물 5 내지 10 중량부를 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 민들레 추출물, 으름덩굴 추출물 및 포도씨 추출물을 포함하는 경우 두피와 모발을 보호하여 두피 및 모발 건강을 높이는 효과를 낼 수 있을 뿐만 아니라, 우수한 천연물을 사용하여 우수한 향 발산효과를 낼 수 있다는 장점을 가진다.

상기 민들레 추출물이 1 중량부 미만으로 포함된 경우 전체적으로 외용제 조성물 또는 세정조성물의 향 증진 효과가 미미할 뿐만 아니라 두피 보호효과가 낮아지는 문제가 있다. 또한 10 중량부를 초과하는 경우 강한 민들레 향이 잘 어우러지지 않을 뿐만 아니라 민들레 추출물의 함량이 상대적으로 증가하여 두피 및 모발 개선효과가 오히려 감소하는 문제가 있다.

상기 으름덩굴 추출물을 상기 범위로 사용하는 경우 서목태의 텁텁한 향을 제거하는 효과를 낼 수 있다.

상기 포도씨 추출물을 5 중량부 미만으로 사용하는 경우 두피 및 모발 개선효과가 낮아지는 문제가 있고, 10 중량부를 초과하는 경우 상대적으로 유분이 증가하여 사용감이 좋지 못하고, 두피 세정효과가 낮아지고 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물에 의해 모낭의 H₂O₂ DPPH radical을 제거하는데 방해가 될 수 있다.

따라서 상기 범위에 의하는 경우 향이 우수하면서도 백발을 예방하고 흑모유발 촉진시킬 수 있을 뿐만 아니라 두피와 모발 개선효과가 높은 기능성 모발 외용제 또는 기능성 모발 세정용 조성물을 제공하는 유리할 수 있다.

상기 민들레 추출물, 으름덩굴 추출물 및 포도씨 추출물은 에탄올 추출물을 사용한 것일 수 있다. 에탄올 추출물을 사용하는 경우 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물과 혼합되어 상기 효과를 내는데 유리할 수 있다.

본 발명의 또 다른 일실시예에 따른 바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법은 바나나를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 바나나 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 바나나 추출물을 제조하는 바나나 추출물 제조단계; 흑임자를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑임자 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑임자 추출물을 제조하는 흑임자 추출물 제조 단계; 적하수오를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 적하수오 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 적하수오 추출물을 제조하는 적하수오 추출물 제조 단계; 흑미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑미 추출물을 제조하는 흑미 추출물 제조 단계; 현미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 현미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 현미 추출물을 제조하는 현미 추출물 제조 단계; 서목태를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 서목태 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 서목태 추출물을 제조하는 서목태 추출물 제조 단계; 그리고, 상기 바나나 추출물, 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물의 혼합단계를 포함하는 것일 수 있다.

본 발명에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 바나나 추출물을 포함하며, H₂O₂ DPPH radical에 대한 소거능력과 활성산소에 대한 환원력을 나타내는 천연조성물을 활용하여 백발을 예방하고, 흑모 생성을 촉진시킬 수 있다.

특히, 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물은 천연물 유래의 추출 조성물이 복합조성물로 제공되면서 피부 또는 모발 손상의 부작용이 없으면서도 백발 예방 및 흑모유발 촉진에 상당한 효과를 낼 수 있게 할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 외용제는 바나나 추출물을 일정범위의 포함되도록 하여 백발 예방 및 흑모유발 촉진와 함께 우수한 향미를 통하여 모발 외용제로 사용될 수 있다. 그리고 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 이용하여 제조할 수 있다.

그리고, 본 발명은 상기 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 DPPH radical 소거능과 환원력에 관한 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 세포 내 H₂O₂ 생성억제 실험결과에 관한 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 B16F1 세포 내 멜라닌 생성 실험결과에 관한 것이다.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.

[재료 및 시료의 제조]

세포배양을 위한 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), Trypsin-EDTA, penicillin (10,000 U/ml) / streptomycin (10,000 μg/ml) / amphotericin (2,500 μg/ml), fetal bovine serum (FBS) 시약은 Gibco BRL, Life Technologies (Paisley, Scotland)로 부터 구입하였다. B16F1 cell line은ATCC (American Type Culture Collection, USA)로부터 구입하였다. α-MSH, imatinib mesylate, IBMX, MTT reagent와 기타시약은 Sigma Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)로 부터 구입하였다.

[ 제조예 : 추출물의 제조]

본 발명의 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법에 따라 80중량%의 에탄올을 용매로 하여 바나나 껍질, 흑임자, 적하수오, 흑미, 현미, 서목태를 각각 3일 간 추출하여 여과한 뒤 감압농축하여 바나나 껍질 추출물(S1), 흑임자 추출물(A), 적하수오 추출물(B), 흑미 추출물(C), 현미 추출물(D), 서목태 추출물(E), 바나나 과육 추출물(S2)을 제조하였다.

또한 상기 각 추출물을 하기의 표 1과 같이 단독 추출물인 실시예(EXCS), 혼합추출물 실시예(MIXEE)를 제조하였다.

	S1	A	B	C	D	E	S2
EXCS 1	100	-	-	-	-	-	-
EXCS 2	-	100	-	-	-	-	-
EXCS 3	-	-	100	-	-	-	-
EXCS 4	-	-	-	100	-	-	-
EXCS 5	-	-	-	-	100	-	-
EXCS 6	-	-	-	-	-	100	-
EXCS 7	-	-	-	-	-	-	100
MIXEE 1	100	150	30	-	-	-
MIXEE 2	100	250	80	-	-	-	-
MIXEE 3	100	350	110	-	-	-	-
MIXEE 4	100	450	200	-	-	-	-
MIXEE 5	100	350	110	50	50	-	-
MIXEE 6	100	350	110	90	90	-	-
MIXEE 7	100	350	110	150	150	-	-
MIXEE 8	100	350	110	200	200	-	-
MIXEE 9	100	350	110	150	150	30	-
MIXEE 10	100	350	110	150	150	50	-
MIXEE 11	100	350	110	150	150	100	-
MIXEE 12	100	350	110	150	150	200	-
MIXEE 13	-	350	110	150	150	100	100

(단위: 중량부)

[ 실험예 1: 바나나 추출물의 멜라노사이트 세포 활성 측정]

본 발명의 추출조성물에 대한 기본적인 효과를 확인하기 위하여 하기와 같은 실험을 진행하였다. 하기의 실험에서는 EXCS 1을 사용하여 바나나 껍질 추출물(S1)이가지는 흑발 유발 촉진효과를 시험하였다.

모발이식술시 후두부에서 모낭이 포함된 두피를 채취한 다음 주위조직을 최대한 제거하여 의 모낭을 분리하고 피지선 부착부위를 확대경으로 확인하면서 모낭의 상부를 제거하고 하부 1/2을 취하여 200nM Phorbol myristate acetate 및 10% 소태아 혈청을 함유하고 있는 DMEM (Dulbeccos Modification of Eagles Medium)배지에서 제 1차 배양한 멜라노사이트 세포를 0.25% Trypsin/EDTA로 떼어내어 혈구계수기로 세포수를 세어 소태아 혈청 10중량%를 함유하는 24-well plate의 각 well당 1×10⁴개의 세포가 들어가도록 분주하였다. 세포들이 부착할 수 있도록 1일간 5% CO2, 100% 습도의 37℃ 배양기에서 배양한 후 대조군에는 식염수를 첨가하고 실험군에는 EXCS 1을 각각 5, 1, 0.5, 0.1, 0.05, 0.01, 0.005 및 0.001 중량%의 시험 농도로 첨가하고 7일 동안 배양하였다. 각각의 시간이 경과된 후 생리 식염수로 용해한 MTT (3-(4,5-dimethyl- 2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, Sigma Chemical Co. USA) 용액 300㎕씩을 각각의 well에 첨가하여 4시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 200㎕의 DMSO(dimethyl sulfoxide, Junsei,Japan)를 첨가하여 형성된 formazan 결정을 용해시킨 후, 세포 활성도를 보기 위해 96-well plate 상으로 옮겨서 ELISA analyser (Spectra MAX 250,Molecular Devices Co., USA)로 540nm에서 흡광도를 측정하였다. EXCS 1을 처리하지 않은 군을 대조군의 세포활성을 100%로 하여 실험군과 비교하여 세포활성 효과를 %로 표시하여 하기의 표 2에 나타내었다.

바나나껍질 추출물	대조군	0.001%	0.01%	0.05%	0.1%	0.5%	1%	10%
세포활성도(%)	100	120%	135%	165%	170%	175%	185%	195%

(단위: 대조군 대비 %)

상기 표 2를 참조하면 바나나 껍질 추출물을 사용하는 경우 그 농도가 증가함에 따라 멜라노사이트의 세포활성도가 높아지는 것을 알 수 있다. 따라서 바나나 껍질 추출물을 사용하는 경우 멜로노사이트 활성을 증가하여 흑모 유발효과를 낼 수 있다는 것을 알 수 있다.

[ 실험예 2: 바나나 추출물의 멜라닌 생합성 촉진 효과 시험]

모발이식술시 후두부에서 모낭이 포함된 두피를 채취한 다음 주위조직을 최대한 제거하여 의 모낭을 분리하고 피지선 부착부위를 확대경으로 확인하면서 모낭의 상부를 제거하고 하부 1/2을 취하여 200nM Phorbol 12-myristate 13-acetate 및 10% 소태아 혈청을 함유하고 있는 DMEM 배지에서 모발로부터 제 1차 배양한 멜라노사이트 세포를 0.25% Trypsin/EDTA로 떼어내어 혈구계수기로 세포수를 세어 　6-well　plate에　well당　1×10⁵　개로　접종한　후　5　%　CO_2,37　℃하에서　세포가　well　바닥에　약　80　%　이상　부착될　때까지　배양한다.　 1일 배양　후　 멜라닌 색소의 전구체인 도파를 0.08mM되게 첨가한 다음 바나나껍질 추출물을 각각 5, 1, 0.5, 0.1, 0.05, 0.01, 0.005 및 0.001 중량%의 시험 농도로 첨가하고 3일 동안 배양하여 대조군에는 식염수를 넣었다. 배지를　제거한　세포를　PBS (Phosphate　buffer saline) 으로　 세척하고,　 이것을　트립신으로　처리하여　세포를　회수한다. 　회수된　세포는 Hematocytometer를　이용하여　세포수를　측정한　후　5,000내지10,000　rpm으로10분간　원심분리한　다음　상등액을　제거하여　pellet을　얻는다.　이　세포　pellet은　60℃에서　건조한　후　10%　DMSO가　함유된　1M　수산화나트륨액　100　㎕　또는　적량의　cell　lysis　buffer를　넣어　60　℃　항온조에서　세포내　멜라닌을　얻는다.　이　액을　가지고　microplate　reader로　490　nm에서　흡광도를　측정하여　세포수당　멜라닌함량을 소디움 페닐부 틸레이트를 처리하지 않은 대조군과 실험군을 비교하여 %로 표시하였고 그 결과를 하기의 표 3에 나타내었다.

바나나껍질 추출물	대조군	0.001%	0.01%	0.05%	0.1%	0.5%	1%	10%
멜라닌함량(%)	100%	120%	145%	160%	175%	180%	195%	210%

(단위: 대조군 대비 %)

상기 표 3을 참조하면, 바나나 껍질 추출물을 사용하는 경우 그 농도에 의존적으로 멜라노사이트의 멜라닌 생합성이 촉진된다는 것을 알 수 있다. 따라서 바나나 껍질을 사용하는 경우 멜라닌 생합성을 촉진시켜 백발을 예방하고 흑모 유발효과를 낼 수 있다.

[ 실험예 3: 단독 추출물별 비교]

1: DPPH radical 소거능과 환원력에 대한 MIXEE 3의 효과

본 실험에서는 각 단독 추출물(EXCS)의 항산화 효과를 알아보기 위해 먼저 EXCS 1 내지 7의 DPPH radical의 소거능력을 조사하였다.

Brand-Williams(Han, K.-H., Oh, J.-C. and Ryu, C.-H. 2004. A study on the optimization for preparation conditions of germinated brown rice gruel. Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition 33, 1735-1741.) 실험방법을 변형하여 EXCS 1 내지 7의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical 소거능력을 각각 측정하였다. 각 시료를 동일한 농도로 맞추고 10초 동안 잘 혼합한 다음, 실온에서 20분 동안 반응시킨 후 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. DPPH radical 함량은 시료 첨가군과 대조군의 흡광도 비를 % 값으로 환산하여 나타내었다.

그 결과 도 1에서 보는 바와 같이 EXCS 1이 가장 우수한 DPPH radical 감소효과를 내는 것을 알 수 있었고, 양성 대조군인 vitamin C와 거의 대등한 수준의 효과를 낼 수 있다는 것을 확인하였다.

2. D세포 내 H ₂ O ₂ 생성억제에 대한 효과

DCFH-DA가 B16F1세포 내에서 H₂O₂와 반응하게 되면 DCF가 생성되면서 형광을 띄게 된다. DMEM 배지에 DCFH-DA를 20μM 농도로 제조하여 B16F1세포에 처리한 후 37℃에서 20분 방치하여 DCFH-DA를 세포 내로 침투시킨다. 여기에 음성대조군인 0.1% vitamin C와 각 EXCS를 시험농도로 1 시간 동안 처리하였다. PBS로 4번 세척후 H₂O₂를 250μM 농도를 함유한 HBSS 완충용액 100 μl를 세포에 처리하였다. 세포내에서 H₂O₂는 DCFH-DA와 반응하여 형광을 띄는 DCF를 생성한다. 이를 multi-detection microplate reader (SynergyHtx)를 이용하여 excitation: 488 nm, emission: 530 nm 조건에서 형광정도를 측정하였다.

형광 측정을 통해 각 단독 추출물이 세포내의 H₂O₂를 얼마나 소거하는지를 확인해 보았다. 도 2에서 공시험군에 비하여 대조군의 형광이 100% 이상 증가하였음을 볼 수 있고, EXCS 1에 의하는 경우 세포내의 H₂O₂의 소거능이 가장 우수하다는 것을 알 수 있다.

2. 환원력 Assay

Oyaizu(Kim, S.-R., Ahn, J.-Y., Lee, H.-Y. and Ha, T.-Y. 2004. Various properties and phenolic acid contents of rices and rice brans with different milling fractions. Korean Journal of Food Science and Technology 36, 930-936)의 방법에 따라 측정하였다. MIXEE 3 1ml에 pH 6.6의 200 mM 인산 완충용액 및 1%의 potassium ferricyanide를 각 1ml씩 차례로 가하여 교반 한 후 50℃의 수욕상에서 20 분 동안 반응시켰다. 여기에 10% TCA 용액 1ml를 가하여 13,500×g에서 15분 동안 원심분리하여 얻은 상등액 1 ml에 증류수 및 ferric chloride 각 1ml를 가하여 혼합한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로 0.01% vitamin C를 사용하였다. 시료의 환원력은 시료 첨가군와 대조군의 흡광도 비를 % 값으로 환산하여 나타내었다.

3. B16F1 세포 내 melanin 생성에 대한 효과

DOPA자극을 통한 melanin 생성에 대한 각 단독 추출물의 효과를 조사하기 위해 B16F1 세포를 사용하여 melanin 함량을 측정 하였다. 6-well plate에 3×105cells/well로 세포를 분주하였고, 시료를 처리하고 1시간 후에 L-DOPA로 melanin 생성을 자극 후 48시간 동안 세포를 배양 하였다. 세포를 수집하여 1,200rpm에서 5분간 원심 분리하여 침전한 후, 1 ml homogenization buffer (50 mM sodium phosphate pH 6.5, 1% Triton X-100, 2 mM phenyl methyl sulfonyl fluoride)로 용해시켰다. 여기서 얻은 pellet에 1N NaOH (10% DMSO) 200 μl를 첨가하고 vortex 후 405 nm에서 흡광도를 측정 하였다. melanin 표준품(Sigma, USA)으로 얻은 표준 검량선을 이용하여 각 well에 서 생성된 멜라닌 양을 산출하였다. 멜라닌은 단위세포(104cells)에서의 멜라닌 생성량을 비교하였다.

그 결과 도 3에서 보는 바와 같이 각 단독 추출물이 전반적으로 멜라닌 생성에 긍정적인 작용을 하는 것을 알 수 있는데, EXCS 1에 의하는 경우 그 효과가 가장 우수하여 백모 예방 및 흑모 유발 효과가 가장 우수할 수 있는 것을 확인하였다.

[ 실험예 4: 복합추출물에 대한 시험]

복합추출물 사용에 따른 상승효과 및 복합추출물의 각 함량별로 임계적 의의가 나타는지 여부를 확인하기 위하여 각 실시예(MIXEE 1 내지 13)과 비교예(COMP 1 내지 4)를 농도를 16 μg으로 동일하게 희석하여 하기의 실험을 진행하였다. 구체적인 실험방법은 상기 실험예 1과 동일하게 구성하여 진행하였다.

또한, 상기 실험예 1에서 실험을 진행한 EXCS 1의 단독 추출물과 데이터 값이 직접적으로 비교될 수 있도록 각 실험에서 EXCS 1의 데이터 값을 100으로 고정하고, 상기 실시예(MIXEE 1 내지 13) 및 비교예(COMP 1 내지 4)를 비율로 표현하여 그 결과 값이 직접 비교될 수 있도록 하였다.

1. DPPH radical 소거능과 환원력에 대한 효과

상기 실험예 3과 동일한 방법으로 실험을 진행하였으며, 그 결과를 EXCS 1과 비교하고 비율로 표현하여 그 결과를 하기의 표 4에 나타내었다. 하기의 결과는 그 숫자가 낮을수록 DPPH radical 소거능이 우수하고, 그 숫자가 높을 수록 환원력이 우수한 것이다.

	MIXEE 1	MIXEE 2	MIXEE 3	MIXEE 4	MIXEE 5	MIXEE 6	MIXEE 7	MIXEE 8	MIXEE 9	MIXEE 10	MIXEE 11	MIXEE 12	MIXEE 13
소거능	100	105	110	89	90	100	113	102	99	105	118	112	78
환원력	97	110	114	90	95	102	118	98	103	104	122	55	56

(단위: 지수)

2. In vitro melanin합성 효과

상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 진행하였으며, 그 결과를 EXCS 1과 비교하고 비율로 표현하여 그 결과를 하기의 표 5에 나타내었다. 하기의 결과는 그 숫자가 높을수록 멜라닌 합성 효과가 우수한 것이다.

	MIXEE 1	MIXEE 2	MIXEE 3	MIXEE 4	MIXEE 5	MIXEE 6	MIXEE 7	MIXEE 8	MIXEE 9	MIXEE 10	MIXEE 11	MIXEE 12	MIXEE 13
멜라닌생성	98	103	108	98	97	105	117	103	89	107	127	110	66

(단위: 지수)

3. 세포내 H ₂ O ₂ 생성억제 효과

상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 진행하였으며, 그 결과를 EXCS 1과 비교하고 비율로 표현하여 그 결과를 하기의 표 6에 나타내었다. 하기의 결과는 그 숫자가 낮을수록 H₂O₂ 생성억제 효과가 우수한 것이다.

	MIXEE 1	MIXEE 2	MIXEE 3	MIXEE 4	MIXEE 5	MIXEE 6	MIXEE 7	MIXEE 8	MIXEE 9	MIXEE 10	MIXEE 11	MIXEE 12	MIXEE 13
DCF 형광	110	91	56	81	76	64	50	56	64	54	44	53	120

(단위: 지수)

4. 흑모 촉진효과 실험

백발이 많아서 고민하는 40대 내지 50대의 건강한 여성 및 남성 대상으로 실시예 각 본 발명 조성물 당 임의로 실시예 및 비교예 별로 각 10명을 선정하고, 양쪽 미간과 정수리 부분을 기준으로, 두피에 상기 실시예(MIXEE 1 내지 13)를 아침, 저녁으로 하루에 2회씩, 2달간 적용하게 하였다. 백발생성 억제 및 흑모유발 촉진효과의 판정은 본 발명 조성물을 사용한 후, 피험자 개인의 주관적 평가로 하기의 평가점수를 통해 백발 생성 억제 정도를 평가하도록 하였다. 그 결과는 하기의 표 7과 같다.

	사람의 수
	0점	1점	2점	3점
MIXEE 1	1	4	2	3
MIXEE 2		1	5	4
MIXEE 3	1		4	5
MIXEE 4	2		5	3
MIXEE 5		3	4	3
MIXEE 6		3	2	5
MIXEE 7		1	2	7
MIXEE 8		2	3	5
MIXEE 9		1	3	6
MIXEE 10	1	3	3	5
MIXEE 11	1		4	8
MIXEE 12		4	1	5
MIXEE 13	3	2	1	3

(평가점수)

3 : 도포개시 전의 백발의 수에 대해 도포 후의 백발의 수가 백발이 90%이하로 감소하였다.

2 : 도포개시 전의 백발의 수에 대해 도포 후의 백발의 수가 백발이 60%이하로 감소하였다.

1 : 도포개시 전의 백발의 수에 대해 도포 후의 백발의 수가 백발이 30%이하로 감소하였다.

0 : 백발이 전혀 감소하지 않았다.

흑모기전은 노화가 진행됨에 따라 흑모가 백모로 변화되는 원인으로 catalase, methionine sulfoxide reductase A 및 B 단백질 발현이 감소함으로 인하여 H₂O₂가 모낭주위에 축적되어 melanin 합성에 관여하는 tyrosinase의 methionine 잔기를 산화시킴으로써 효소구조를 변형시켜 melanin 합성이 저하되어 백모가 유발되는 것이다.

따라서 본 발명에 따른 실시예는 항산화 효과가 탁월하고 멜라닌 합성을 촉진시킬 뿐만 아니라, H₂O₂를 효과적으로 제거할 수 있다는 것을 확인할 수 있었다. 특히 MIXEE 2, 3, 6, 7, 11 및 12에 의하는 경우 그 효과가 상당히 우수하다는 것을 알 수 있었다. 특히 실제 백발 억제 여부에 대한 평가에서도 가장 우수한 효과가 나타난다는 것을 확인할 수 있었다.

한편, 일반적으로 피부 melanocyte에서는 tyrosine에서 melanin으로 생성되는 전체과정이 산화과정이므로 활성산소로 자극하면 melanin생성이 증가된다. 그러므로 항산화제를 처리하면 환원과정을 일으켜 melanin 생성을 억제하여 피부 미백 효과를 볼 수 있다. 반면에 모발 melanocyte에서는 활성산소의 자극 여부와 상관없이 지속적으로 melanin이 생성되어 흑모가 발생된다. 노화되면 모낭세포에 H₂O₂가 축적됨으로 인하여 tyrosinase의 효소활성이 저해됨으로 인하여 melanin 합성이 감소하여 백모로 전환됨으로 항산화제를 백모에 처리하면 H₂O₂를 제거하여 백모가 흑모로 전환 될 수 있는 가능성이 있다. 본 연구에서 MIXEE는 모낭에 축적된 H2O2를 제거하여 tyrosinasee 효소를 정상적으로 작동시켜 melanin 생성을 촉진시켰다. 이러한 추론을 뒷받침하기 위하여 세포내에 H₂O₂를 처리하여 MIXEE의 항산화 효능을 세포내에서 조사한 결과 탁월한 H₂O₂ 제거 효능을 확인하여 이상의 추론이 입증됨을 확인하였다.

[제조예 1] 샴푸조성물 1

구 분 (중량%)	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4
라우릴황산나트륨(30%)	20.0	20.0	20.0	20.0
폴리옥시에틸렌라우릴 황산나트륨(30%)	20.0	20.0	20.0	20.0
야자유지방산디에탄올아미드	2.0	2.0	2.0	2.0
프로필렌글리콜	2.0	2.0	2.0	2.0
바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물	0.001	0.01	0.1	1
색소(청색 1호)	적량	적량	적량	적량
파라옥시안식향산에스테르	0.2	0.2	0.2	0.2
향료(조합향 SKP-3473)	적량	적량	적량	적량
구연산	적량	적량	적량	적량
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량

(단위: 중량 %)

[ 제조예 2] 염모제 후처리제 조성물

성분명	제조예 5	실시예 6
리퀴드파라핀	3.00	8.00
세토스테아릴알코올	2.00	0.60
베헨트리모늄클로라이드	1.0	2.5
메틸파라벤	0.15	2.5
바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물	0.001	1
조합향	적량	적량
정제수	잔량	잔량

(단위: 중량 %)

[ 제조예 3] 헤어 젤 조성물

성분명	제조예 7	제조예 8	제조예 9	제조예 10
바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물	0.001	0.01	0.1	1
에탄올	10	10	10	10
아크릴레이트계 중합체	2	3	4	5
폴리비닐피롤리돈	0.2	0.2	0.2	0.2
카르복시비닐폴리머	0.3	0.3	0.3	0.3
트리에탄올아민	2	3	4	5
향	0.2	0.2	0.2	0.2
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량

(단위: 중량 %)

[제조예 4] 연고의 제조

바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 0.01%, 쾨르세틴(Sigma사) 0.01%, 디에틸세바케이트 8.0%, 경납 5.0%, 폴리옥시에틸렌올레일-에테르 포스페이트(EO 4) 6.0%, 파라옥시안식향산에스테르 적량, 바세린 잔량으로 통상의 연고제조방법에 따라 제조할 수 있다.

[제조예 5] 유연화장수의 제조

바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 0.01%, 쾨르세틴 0.01%, 글리세린 2.0%, 히알루론산 1.0%, 폴리옥시에틸렌올레일에테르 (EO20) 0.1%, 폴리옥시에틸렌경화피마자유(EO40) 0.1%, 파라옥시안식향산에스테르 적량, 향료 적량, 색소 적량, 정제수 잔량으로 통상의 유연화장수 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

[제조예 6] 영양유액의 제조

바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 0.01%, 쾨르세틴 0.01%, 세탄올 1.0%, 밀납 0.5%, 바세린 2.0%, 스쿠알란 6.0%, 에탄올 3.0%, 1,3-부틸렌글리콜 4.0%, 폴리솔베이트60 1.0%, 솔비탄 세스퀴 올레이트 0.3%, 카르복시 비닐폴리머 0.3%, 트리에탄올아민 0.3%, 파라옥시안식향산에스테르 적량, 향료 적량, 색소 적량, 정제수 잔량으로 통상의 영양유액 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

[제조예 7] 크림의 제조

바나나를 포함하는 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 0.01%, 스테아릴알콜 6.0%, 스테아린산 2.0%, 농글리세린 1.0%, 스쿠알란 9.0%, 1,3-부틸렌글리콜6.0%, 폴리솔베이트60 1.5%, 폴리에틸렌글리콜1000 4.0%, 경화 라놀린 4.0%, 옥틸 도데카놀 10.0%, 솔비탄 스테아레이트 0.8%, 트리에탄올아민 0.5%, 파라옥시안식향산에스테르 적량, 향료 적량, 색소 적량, 정제수 잔량으로 통상의 크림 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

[제조예 8] 에센스의 제조

사이클로메티콘 15.0%, 카프릴릭카프릭트리글리세라이드 3.0%, 미네랄오일 3.0%, 밀납 1.0%, 세틸디메티콘코폴리올 3.0%, MIXEE를 1.0%, 레스베라트톨 0.001%, 글리세린 5.0%, 황산마그네슘 3.0%, 파라옥시안식향산에스테르 적량, 향료 적량, 색소 적량, 정제수 잔량으로 통상의 에센스 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

[제조예 9] 식품 조성물

상기 실시예 MIXEE 11를 사용하여 하기의 표 11과 같이 천연물을 혼합하여 차 조성물을 제조하였다. 상기 차 조성물은 통상의 방법에 따라 제조할 수 있다.

	제조예 9-1	제조예 9-2	제조예 9-3	제조예 9-4	제조예 9-5	제조예 9-6	제조예 9-7	제조예 9-8	제조예 9-9
MIXEE 11	100	100	100	100	100	100	100	100	100
앵두 추출물	-	15	-	-	5	11	15	20	30
곤달비 추출물	-	-	10	-	4	8	12	20	30
으름덩굴 추출물	-	-	-	5	0.5	1	3	5	7

(단위: 중량부)

상기 표 9에 따른 제조예를 임의로 10인을 선정하여 시음한 뒤 향미와 맛을 주관적으로 평가하여 1 내지 10의 지수로 표현하도록 하였고, 그 결과를 하기의 표 10에 나타내었다. 하기의 표 12에 나타난 지수는 그 숫자가 높을수록 향과 맛이 우수한 것이다. 한편 기호성은 상기 향과 맛의 평균값으로 정한 것이다.

	제조예 9-1	제조예 9-2	제조예 9-3	제조예 9-4	제조예 9-5	제조예 9-6	제조예 9-7	제조예 9-8	제조예 9-9
향	3.1	6.6	4.5	4.5	6.1	8.3	8.8	8.5	6.7
맛	4.5	6.1	5.1	3.9	5.2	7.9	7.5	8.1	5.8
기호도	3.8	6.4	4.8	4.2	5.7	8.1	8.2	8.3	6.3

상기 표 12를 참조하면, 제조예 9-6 내지 9-8의 범위에 의하는 경우 향미와 맛이 우수해진다는 것을 알 수 있다. 따라서 상기 범위에 따라 기호성이 높은 식품조성물로 제공하는 경우 흑모 유발 촉진의 기능성 있는 식품조성물의 보급에 유리할 수 있다.

[제조예 10] 샴푸조성물 2

상기 제조예 1의 샴푸조성물의 표 8에서 향료를 하기의 표 13으로 이루어진 조성물을 사용하여 샴푸조성물을 제조하였다. 그 이외의 조성을 동일하게 하였다.

	제조예 10-1	제조예 10-2	제조예 10-3	제조예 10-4	제조예 10-5	제조예 10-6	제조예 10-7	제조예 10-8	제조예 10-9
MIXEE 11	100	100	100	100	100	100	100	100	100
민들레 추출물	-	5	-	-	0.5	1	5	10	15
으름덩굴 추출물	-	-	5	-	0.5	1	3	5	7
포도씨 추출물	-	-	-	5	3	5	7	10	15

(단위: 중량부)

상기 표 13에 따른 제조예로 만들어진 샴푸를 사용하여 헤어 왁스제품을 사용하는 10인을 임의로 선정하여 한달 동안 사용하도록 한 뒤 세정력, 피부자극, 모발탄력 및 향을 주관적으로 평가하여 1 내지 10의 지수로 표현하도록 하였고, 그 결과를 하기의 표 14에 나타내었다. 하기의 표 12에 나타난 세정력 지수는 그 숫자가 높을 수록 효과가 우수하고, 자극지수와 향 지수는 그 숫자가 낮을수록 그 효과가 우수한 것이다.

	제조예 10-1	제조예 10-2	제조예 10-3	제조예 10-4	제조예 10-5	제조예 10-6	제조예 10-7	제조예 10-8	제조예 10-9
세정력	8.6	8.1	8.1	7.9	8.3	7.8	8.3	9.1	9.1
피부자극	6.4	5.6	6.5	5.7	5.4	2.8	2.1	3.4	4.9
모발자극	5.5	5.5	7.8	5.7	6.1	3.7	4.1	4.2	5.2
향	3.1	4.4	5.1	4.8	4.1	3.1	2.4	3.6	5.1

상기 표 14를 참조하면, 제조예 10-1 내지 10-9에서 민들레, 으름덩굴, 포도씨 추출물의 사용에 따라 세정력에 대한 상승효과는 없다는 것을 알 수 있다. 다만. 제조예 10-6 내지 10-8의 범위에 의하는 경우 피부자극이 적고, 모발자극이 적어 샴푸 사용에 따른 두피 또는 모발 손상을 억제할 수 있다는 것을 확인할 수 있다. 또한 상기 범위에 의하는 상대적으로 향이 우수하여 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 모발 외용제 조성물 또는 모발 세정용 조성물로 활용하는데 유리할 수 있다는 것을 확인하였다.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (9)

1. 바나나 껍질 추출물을 포함하고
   상기 바나나 껍질 추출물의 용매는 에탄올인 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물.
2. 제 1항에 있어서,
   흑임자 추출물 및
   적하수오 추출물을 더 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물.
3. 제 1항에 있어서,
   흑미 추출물 및
   현미 추출물을 더 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물.
4. 제 1항에 있어서,
   흑임자 추출물,
   적하수오 추출물,
   흑미 추출물,
   현미 추출물 및
   서목태 추출물을 더 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물.
5. 제4항에 있어서,
   상기 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물은 10 내지 99 중량%의 에탄올을 용매로 추출된 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 식품 조성물.
7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 외용제 조성물.
8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물을 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 모발 세정용 조성물.
9. 바나나 껍질을 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 바나나 껍질 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 바나나 껍질 추출물을 제조하는 바나나 껍질 추출물 제조단계;
   흑임자를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑임자 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑임자 추출물을 제조하는 흑임자 추출물 제조 단계;
   적하수오를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 적하수오 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 적하수오 추출물을 제조하는 적하수오 추출물 제조 단계;
   흑미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 흑미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 흑미 추출물을 제조하는 흑미 추출물 제조 단계;
   현미를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 현미 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 현미 추출물을 제조하는 현미 추출물 제조 단계;
   서목태를 건조하고, 분쇄한 뒤 10 내지 99 중량%의 에탄올 용매와 상기 서목태 분쇄물을 10 : 1 내지 1 : 1 중량부로 혼합하여 서목태 추출물을 제조하는 서목태 추출물 제조 단계; 그리고,
   상기 바나나 껍질 추출물, 흑임자 추출물, 적하수오 추출물, 흑미 추출물, 현미 추출물 및 서목태 추출물의 혼합단계를 포함하는 것인
   백발 예방 및 흑모유발 촉진용 조성물의 제조방법.

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