JPS6161624A - 蛋白質系乳化剤の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔技術分野〕 本発明は、皮屑°等に対する刺激が少な（、かつ乳化作
用が強く、しかも保湿性を備えた蛋白質系乳化剤および
そのｙＡ法に関するものである。

〔背景技術〕

一般に、乳化剤は、化粧料や食品等に広く用いられてい
る。化粧料に用いられる乳化剤としては、アニオン界面
活性剤やノニオン界面活性剤があげられる。しかし、ア
ニオン界面活性剤は皮膚刺激があり、ノニオン界面活性
剤も乳化性が充分でなかったり、多少の皮膚刺激を有す
るという難点がある。さらに、この種の乳化剤は、クリ
ーム等に対して保水性を付与することができないため、
グリセリン等の保湿剤を添加しているのが現状であるが
、それによって乳化安定性や感触が変わるという問題点
がある。

また、食品の乳化剤としては、シューガーエステルや脂
肪酸のモノグリセライド等が用いられているが、これら
の乳化剤は乳化作用があまり強くないために充分な乳化
作用を発揮させるためには多量の乳化剤を使用しなけれ
ばならないという難点を有している。したがって、皮膚
に対する刺激が少なく、乳化作用が強（ごしかも保湿性
を備えた乳化剤の提供が強（望まれている。

本発明者らは、本願に先立って、親水性蛋白質分解物の
カルボキシ末端とアミノ酸アルキルエステル−Ｐ−１−
ルエンスルホン酸塩のアミド部分をアミド結合させて蛋
白質系乳化剤を製造する方法を提案している（昭和５８
年特許願第２０１８２３号）。この蛋白質系乳化剤は、
皮膚に対する刺激が少なく、乳化作用が強←、しかも保
湿性を備えている。しかし、この方法で用いられるアミ
ノ酸アルキルエステル−Ｐ−トルエンスルホン酸塩は、
エンドペプチダーゼの存在下において、親水性蛋白質と
反応するに際して、溶媒である緩衝液−アセトン混液に
対する溶解性が悪く、特にアルキル基の炭素数が１４よ
り大では、長鎖になる程、均−系になり難くなる。した
がって、蛋白質系乳化剤の反応収率が今一つとなってい
た。また、上記反応において、原料として使用するアミ
ノ酸アルキルエステル−Ｐ−１−ルエンスルホン酸塩は
、その製造に際し、エステル合成反応終了後、未反応の
不純物を除去するため、アセトン等の溶媒で、繰り返し
再結晶化して精製される。しかしながら、未反応のアミ
ノ酸、Ｐ−トルエンスルホン酸等の不純物を充分に除去
することは困難であり、それらが不純物として残存する
。このような不純物を含むアミノ酸アルキルエステル−
Ｐ−トルエンスルホン酸塩をグラフト剤として使用する
と、目的とする蛋白質系乳化剤への転化率が低くなるう
え、含有不純物が、得られる蛋白質系乳化剤に混入する
ため、蛋白質系乳化剤を最終工程において熱アセトン等
で何回も繰り返し洗浄しなければならなかった。

このような問題を解決するため、本発明者らは、さらに
研究を虫ねた結果、アミノ酸アルキルエステル−Ｐ−ト
ルエンスルホン酸塩を、アルカリ°　処理または塩析条
件下、アルカリ処理して遊回］のアミノ酸アルキルエス
テルを得、これを蛋白質のグラフト反応に適用すると、
前記アミノ酸やＰ−トルエンスルホン酸等の未反応不純
物の除去の問題および反応系における溶解性の問題か改
善され、蛋白質系乳化剤が好収率で得られることを見い
だし、これについても出願（昭和５９年特許願第３１２
７０号）している。

しかしながら、本願発明者らの継続的？ｉＪＦ究の結果
、アミノ酸アルキルエステルを構成するアミン酸の種類
によって、上記の効果にもばらつきかあり、かつ得られ
る蛋白質系乳化剤の乳化力等にもばらつきがあることが
明らかになった。

〔発明の目的〕

本発明は、最も優れた乳化力等をもち、高収率で製造し
うる蛋白質系乳化剤およびその製法の提供を目的とする
。

〔発明の開示〕

上記の目的を達成するため、本発明は、親水性蛋白質分
解物のカルボキシ末端に下記の一般式で示されるアラニ
ン脂肪族アルコールエステルのアミノ基部分がアミド結
合してなる蛋白質系乳化剤を第１の要旨とし、 ＣＨ３ＣＨＣＯＯＲ ＩＩ　２ ｒただし、式中Ｒは炭素数２〜２２のアルキ］親水性蛋
白質と、下記の−・般ｉ（で示されるアラニン脂肪族ア
ルコールエステルをエンドペプチダーゼの存在下で反応
せしめることを特徴とする蛋白質系乳化剤の製法を第２
の要旨とするものである。

ＣＨ３ＣＨＣＯＯＲ ■ 　Ｈ２ すなわち、本発明者らは、アミノ酸アルキルエステルを
構成するアミノ酸の種類によって、蛋白質系乳化剤の収
率にばらつきが生じ、また得られる蛋白質系乳化剤の乳
化力にもばらつきが生しる等の前記知見にもとづき研究
を重ねた結果、アミノ酸として、アラニンを用いると、
最も優れた効果が得られることを見いだし本発明に到達
した。

つぎに、本発明の詳細な説明する。

本発明の蛋白質系乳化剤は、親水性蛋白質分解物のカル
ボキシ末端に、下記の一般式で示されるアラニン脂肪族
アルコールエステルのアミノ基部分がアミド結合した構
造をもつものである。

Ｃ１）３ＣＨＣＯＯＲ Ｈ２ すなわち、本発明は、親水性蛋白質と反応させるアミノ
酸エステルとして、アラニンのエステルを用いることを
特徴とするものである。アラニン以外のアミノ酸、例え
ば、グリシン、千ロジン。

トリプトファン等を用いると、そのエステル化において
溶解性が悪（なり、反応収率が悪（なる。

また、バリン、ロイシン、イソロイシン等のβ位側鎖の
あるアミノ酸や、リジン、アルギニン、ヒスチジン等の
塩基性アミノ酸ならびにアスパラギン酸、グルタミン酸
等の２塩基酸等を用いると、酵素反応（エンドペプチダ
ーゼの存在下における親水性蛋白質との反応）時におけ
る溶解性の悪いアミノ酸エステルしか得られず、反応収
率が悪くなり、未反応不純物が残るようになる。

これに対して、本発明のように、エステルを構成するア
ミノ酸としてアラニンをｍｍいると、エステル化工程お
よび酵素反応における蛋白質系７Ｌ化剤の合成工程にお
いて、溶解性１反応収率が最ｉ５になるのである。

前記の一般式で示されるアラニン脂肪族アルコールエス
テルの、脂肪族の有８ｙＬ基構成用のアルコールとして
は、エタノール、プロパツール、ブタノール、ヘプタツ
ール、ヘキサノール、オククノール、デカノール、ドデ
カノール（これまでは炭素数１４未満）、ミリスチルア
ルコール、ペンタデシルアルコール。セチルアルコール
、ヘプタデシルアルコール、ステアリルアルコール、ア
ラキルアルコール、ベヘニルアルコール等の炭素数２〜
２２のアルコールがあげられる。また、２−ペンテノ−
ルー１．１）−ドブセノール−１，オレイルアルコール
等の不飽和アルコールもあげられる。

不飽和アルコールの場合、シス体よりもトランス体の力
が、親水性蛋白質のグラフト化反応におりる酵素反応（
アミツリシス反応）の反応性が高いので好ましい。さら
に、イソプロビルアルコール、イソフチルアルコール、
１ｒＢｒＬ−フナルアルコール等の分岐鎖アルコールも
あげられる。分岐鎖アルコールの場合は、余りバルキー
な構造のものは酵素反応（アミツリシス反応）の反応性
が悪くなるため、イソ体のアルコールの方が好ましい。

これらのアルコール 肪族アルコールエステルにおける脂肪族の有機基（脂肪
族アルコールの有機基にもとづく）の炭素数が１４〜２
２の範囲内になるようなアルコールを用いることが好ま
しい。すなわち、脂肪族の有機基の炭素数が１４未満の
、アラニン脂肪族アルコールエステルを用いると、得ら
れる蛋白質系乳化剤の乳化力が劣るようになり、またそ
れを配合した非乳化物が、高温における長期間の保存（
４５°ｃ，　　６力月）で若干の異臭を生じるようにな
る。逆に、脂肪族の有機基の炭素数が２２を超えるよう
なアルコールを用いると、アラニン脂肪族アルニ１ール
エステルの溶解性が悪（なり、親水性蛋白質のグラフト
反応における酵素反応（アミツリシス反応）性が低（な
る（噴量がある。したがりて、アラニンＩＩＷ　肪族ア
ルコールエステルにおける脂肪族の有機基の炭素数が１
４〜２２の範囲内になるようなアルコールを用いること
が好ましいのである。

アラニンには、Ｌ型とＤ型の二種類があるか、Ｌ型を用
いることが好ましい。Ｄ型を用いると、蛋白質系乳化剤
の収率が悪（なる。

上記アラニン脂肪族アルコールエステルと反応させる親
水性蛋白質としては、例えばカゼイン。

ゼラチン、セリシン、可溶性コラーゲン、ゼイン、血清
アルブミン、ラクトアルブミン、卵白アルブミン等があ
げられ、単独でもしくは併せて用いられる。これらの蛋
白質のうち、セリシン以外の蛋白質は、試薬として販売
されている。また、セリシンは切り繭から熱水抽出し凍
結乾燥することにより得ることができる。しかし、蛋白
質の親水性，安全性等の点、ならびに、酵素反応ｕｆに
おける反応系への溶解性や反応効率等の点からゼラチン
を用いることが最も好ましい。

つぎに、本発明の蛋白質系乳化剤の製法の一例について
説明する。まず、アラニン脂肪族アルコールエステル（
親水性蛋白質のグラフト剤）をつ（る。すなわち、アラ
ニンと脂肪族アルコール類とを原料とし、公知のエステ
ル化反応を適宜選択し適用することによってアラニン脂
肪族アルコールエステルを製造してもよいが、以下に述
べる遊離のアラニン脂肪族アルコールエステルのＰ−ト
ルエンスルホン酸を経由する方法によると一段と優れた
結果が得られる。すなわち、アラニンと脂肪族アルコー
ルとをブレンステッド酸触媒のＰ−トルエンスルホン酸
の存在下反応させ、アラニン１）ＦＪ　Ｕｉ　族アルコ
ールエステルのＰ−トルエンスルホン酸塩を得る。そし
て、このアラニン脂肪族アルコールエステル−Ｐ−トル
エンスルホン酸塩をアルカリ性媒質と接触させ、ｐ−＋
ールエンスルホン酸を脱離させる。アルカリ性媒質とし
ては、ＮａＯ　ｆｌまたはＫ　Ｏ　Ｉ−１水溶液を用い
ることが好ましい。アルカリ濃度は、好ましくは０．０
ＩＮ〜５Ｎ、さらに好ましくは０．　０　５　Ｎ〜’２
　Ｎである。また、上記アルカリ処理は塩類との共存下
で塩析により行うことが好ましい。塩析用の塩としては
、アルカリ金属塩，アンモニウム塩等があり、具体的に
は例えば塩化すトリウム、塩化カリウム、炭酸カリウム
、リン酸カリウム、硫酸アンモニウム、硫酸ナトリウム
等があげられるが、塩化ナトリウムおよび塩化カリウム
が好適である。塩析の塩濃度は、通常０．　５％〜２５
％の範囲であり、好ましくは１％〜１０％である。上記
アラニン脂肪族アルコールエステル−Ｐ−）ルエンスル
ホン酸塩は固体であるが、このようにして得られた遊Ａ
ｌｔのアラニン脂肪族アルコールエステルは、油状また
は融点の低い固体状態のものであり、後述する親水性蛋
白質との反応の際、反応系溶媒として用いられる緩衝液
−アセトン混液等に対し、／８解性が極めてよく、均一
系で反応し得るものである。

なお、上記のようにアラニン脂肪族アルコールエステル
−ｐ−トルエンスルボン酸塩からＰ−トルエンスルホン
酸を脱離させず、Ｐ−トルエンスルボン酸塩の形のまま
用いてもよい。ずなわら、アラニン脂肪族アルコールエ
ステルは、ｐ−トルエンスルボン酸塩の形であっても優
れた溶解性を発揮するため、他のアミノ酸のエステルと
は異なり、ｐ−トルエンスルホン酸塩の形のままで用い
ることができるのである。したがって、本発明にいうア
ラニン脂肪族アルコールエステルには、Ｐ−トルエンス
ルボン酸を脱離させたものと、脱離させていないものの
双方が含まれる。そして、上記生成系中の未反応アラニ
ンやＰ−トルエンスルホン酸等の残渣は、効果的に除去
され、非常に４？ｊ製された状態で目的物が得られる。

つぎに、上記のようにして得られたアラニン脂肪族アル
コールエステルを、親水性蛋白質と、下記に示すエンド
ペプチダーゼの存在下で反応させる。酵素反応に用いら
れるエンドペプチダーゼは蛋白質をその中央部分より切
断する作用を備えており、これには、セリンプロテアー
ゼ、チオールプロテアーゼ、カルボキシルプロテアーセ
、金属プロテアーセ、その他のエンドペプチダーゼか含
まれる。これらのうち、チオールプロテアーゼを用いる
ことが最も好ましい。この十オールプロテアーゼとして
、パパイン、キモパパイン、ブロメライン、フィシン、
キュウイフルーツプロテアーゼ、カテプシンＢ、ＬＳ、
酵母プロテアーゼＢまたはＴＺ−ペプチダーゼがあげら
れ、単独でもしくは併せて用いられる。このようなエン
ドペプチダーゼの存在下において、アラニン脂肪族アル
コールエステルと親水性蛋白質とを反応させると、親水
性蛋白質がエンドペプチダーゼの作用により中央から切
断されて分解し、同志にその生成分解物のカルボキシ末
端にアラニン脂肪族アルコールエステルのアミン部分が
アミド結合し、目的とする蛋白質系乳化剤が得られる。

この乳化剤の模式図を第１図に示す。図において、■は
親水性蛋白質分解物部分、２はアラニン脂肪族アルコー
ルエステル部分であり、そのアラニン脂肪族アルコール
エステル部分２の中で３はアラニン部分、４はアルコー
ルのアルコキシ基部分である。上記の模式図で表される
蛋白質系乳化剤は、親水性蛋白質分解物部分１が親水基
部分となり、アラニン脂肪族アルコールエステル部分２
が疎水基部分となる。

このようにして得られた蛋白質系乳化剤は、親水基部分
１が本質的に強い親水性をもつ蛋白質からなり、疎水基
部分２が疎水性のアラニン脂肪族アルコールエステルか
らなっていて、典型的な界面活性剤構造となっている（
親水基部分１の後端に疎水基部分２の前ｎ１が結合して
おり、中間部分等に余分な疎水基部分２が結合していな
い）ため、強力な乳化力を有する。しかも、この乳化作
用は、蛋白質部分の高分子構造にもとづき殆ど温度によ
る影響を受けない。したがって、この乳化剤では、特に
低温における乳化作用の低下現象が生じない。そして、
上記親水基部分１は分子量が比較的大きい（分子量約５
００以上、通常は数千）ため、乳化剤全体の分子量が大
きくなっており、皮Ｗ等に対する刺激を殆ど与えない。

そのうえ、特にこの乳化剤は、親水基部分１が本質的に
保湿力を有する蛋白質からなっているため、充分な保湿
性を備えている。したがって、これを化粧料、特にクリ
ームに用いると、これまでのような多価アルコール等の
保湿剤を用いることなく、充分な保水性を付与しうるよ
うになる。また、これを食品の乳化剤として利用する場
合には、その強力な乳化作用により乳化剤の使用量を低
減させうるようになる。しかも、こめ乳化剤は、その構
成部分の殆どが天然物由来物であるため、繰り返し摂取
しても何ら問題を生じない。特に上記蛋白質系乳化剤は
、アミノ酸として、アラニンを用いたアラニン脂肪族ア
ルコールエステルを用いて構成されているため、極めて
優れた乳化力を有している。

そのうえ、他のアミノ酸を用いたものにはみられない優
れた芳香をも有している。そして、その製造に際しては
、アラニン脂肪族アルコールエステルが優れた溶解性等
を有するため、これと親水性蛋白質との反応シフ率が大
幅に向上するようになり収率の大幅な向上効果が得られ
るようになる。

〔発明の効果〕

以上のように、本発明に係る蛋白質系乳化剤は、蛋白質
親水基部分の後端にアラニン脂肪族アルコールエステル
疎水基部分が結合しているという典型的な界面活性剤構
造を備えており、皮膚に対する刺激が極めて少なく、か
つ乳化作用は強く、しかも保湿性を有しているため、こ
れを化粧料、特にクリーム等に使用するときにはグリセ
リン等の多価アルコールを使用することなく保水性を付
与でき、かつ皮膚刺激に弱い人の皮膚疾患の発生を激減
させうるようになる。また、これを食品に利用する場合
には、その強力な乳化作用によって乳化剤使用量の低減
を実現できる。特に、本発明には、親水性蛋白質分解物
のカルボキシ末端に結合するアミノ酸エステルとして、
アラニンをアミノ酸として用いたアラニン脂肪族アルコ
ールエステルを用いているため、極めζ優れた乳化力を
有している。そのうえ、他のアミノ酸を用いたものには
みられない優れた芳香を有しており、化粧品用乳化剤等
として最適である。そして、アラニン脂肪族アルコ−′
ルエステルは、蛋白質系乳化剤の製造時に使用する溶媒
に対する溶解性等が優れているため、蛋白質系乳化剤の
製造に際して、反応系に対する／８）ｖＩ性がよくなり
、それによって蛋白質系乳化剤の収率の著しい向上が実
現できるようになる。また、本発明に係る製法によれば
、アラニン脂肪族アルコールエステルと親水性蛋白質を
エンドペプチダーゼの存在下に反応させ、親水性蛋白質
を切断すると同時にその切断部にアラニン脂肪族アルコ
ールエステルを結合させるようにするため、親水基部の
後端に疎水基部が結合した典型的な界面活性剤構造の乳
化剤を容易に、かつ極めて高収率で得ることができるよ
うになる。

つぎに、実施例について説明する。

〔実施例１〕 まずアラニン脂肪族アルコールエステルを下記のように
して製造し、つき′にこれを酵素反応に供した。

（Ｌ−アラニンアルキルエステル−Ｐ−１−ルエンスル
ホン酸塩の合成） Ｌ−アラニンを４．４６　ｇ　（０，０５ｍｏｌ　）採
取するとともに、Ｐ−トルエンスルホン酸−水化物を１
）．４　ｇ　（０，０６ｍｏｌ　）採取し、さらにアル
コールとしてミリスチルアルコールを１）．７９　ｇ　
　（０゜０５５ｍｏｌ）を採取し、これに溶剤としての
ベンゼンを２００ｍｌ加えて充分攪拌混合し、ベンゼン
の還流温度で加熱還流させエステル化反応を進めた。こ
の場合、そのエステル化反応の進行に伴って生じた水が
ベンゼンと共沸状態で出てくるので、それを反応系外に
除きながら約７〜１５時間で反応を完了させた。つぎに
、溶剤であるベンゼンを減圧濃縮して除去し、エーテル
と石油エーテルを添加して生成結晶を区数し、得られた
粗結晶をアセトン、エーテル、石油エーテル等から再結
晶させＬ−アラニン−ミリスチルエステル−Ｐ−トルエ
ンスルホン酸塩２１．７４　ｇ　（収率９５％）をｔ５
た。得られたＬ−アラニン−ミリスチルエステル−ｐ−
トルエンスルボン酸塩の赤外線吸収スペクトルを第２図
に示す。図において、ピーク５はパラ置換フェニル基、
ピーク６．７はエステル結合、ピーク８はスルボン酸、
９．１０は第一アミン塩、１）はエステル結合由来のＣ
＝０の伸縮振動の吸収を示す。

（酵素反応） １Ｍ？ａ度の炭Ｍ緩ｆｉ？ｆｆｌ　（ｐ　Ｈ９，０）　
２００　ｇニ親水性蛋白質であるゼラチン８０ｇを熔解
し、これに５０ｇのアセトンを添加し、３７℃の温水パ
スに浸漬し、充分に攪拌して均一化した。つぎに、これ
に前記のようにして得られたし一アラニンーミリスチル
エステルーＰ−トルエンスルホン酸塩３７ｇ（ゼラチン
１０００ｇに対して１ｍｏｌになる量）を添加して充分
に攪拌し均一化した。この場合、Ｌ−アラニン−ミリス
チルエステルのようなアミノ酸アルキルエステルは、ゼ
ラチンのような親水性蛋白質１０００ｇに対して１ｍｏ
ｌの割合になるように添加することが反応効率上望まし
い。ついで、これに、２−メルカプトエタノール２０■
を加え、さらに、エンドペプチダーゼである結晶パパイ
ン（シグマ社製）４０■を添加して攪拌しながら１５分
間反応させた。そして、２Ｎ塩酸を用いて全体のｐ　Ｉ
−１を２にして反応をとめ、これをセロハンチューブ（
透析チューブ）に入れて２昼夜流水中で透析し、その後
凍結乾燥した。

つぎに、これを熱アセトンで洗浄して未反応のし一アラ
ニンーミリスチルエステルを除去し、目的とする蛋白質
系乳化剤８３ｇを得た。

〔実施例２〕 遊離のし一アラニンアルキルエステルを下記のようにし
て製造し、つぎにこれをｆＵ！索反応に供した。

ｌｉｔのＬ−アラニンアルキルエステルの製造）ミリス
チルアルコールに代えζ、セチルアルコール１３．３　
ｇ　（０，０５５ｎ＋ｏｌ　）を用いた以外は、実施例
１におけるＬ−アラニンアルキルエステル−Ｐ−トルエ
ンスルホン酸塩の合成と同様にして、Ｌ−アラニンセチ
ルエステル−ｐ−＋−ルエンスルホン酸塩を合成した。

つぎに、得られたし一アラニンセチルエステルーｐ−ｔ
−ルエンスルホン酸塩を再度ベンゼン２００　ｒｎ　ｌ
に熔解し、０．ｌＮｌＮＮａＯＨ３Ｏ０で３度繰り返し
、処理した。その後、ベンゼン層を採取し、充分水洗い
した。水洗後、ベンゼン層を採取し、無水硫酸ナトリウ
ムにてｌ晩乾燥した。乾燥後、ヘンセンＩ−をｔ）！ｉ
敗した。このベンゼン１容液をエバポレーターでｔ容媒
除去し、精製された遊離の１．−アラニンセチルエステ
ルの油状物質１４．８６ｇ（収率９４．８％）を（ηた
。得られた遊離Ｌ−アラニンセチルエステルの赤外吸収
スペクトルを第３図に示す。図において、ピーク１２．
１３は、エステル結合由来のＣ＝０伸縮とＣ−０伸縮振
動を示す。ピーク１４，１５．１６はそれぞれ第１のア
ミンのＮＨ伸縮、ＮＨ変角振動、Ｃ−Ｎ伸縮振動を示す
。ピーク１７はＣＨ変角振動を示す。

（酵素反応） １Ｍ！！！度の炭酸緩衝液（ｐＨ９，０）２００ｍｌに
親水性蛋白質であるゼラチン５０ｇを熔解し、これに５
０ｍβのアセトンを添加し、３７℃の温水バスに浸漬し
、充分に攪拌して均一化した。つぎに、これに前記のよ
うにして得られたＬ−アラニンセチルエステル１５．７
ｇ（ゼラチン１０００ｇに対して１ｍｏｌになる量）を
添加して充分に攪拌し均一化した。この場合、Ｌ−アラ
ニンセチルエステルのようなアミノ酸アルキルエステル
は、ゼラチンのような親水性蛋白ｆｆｌｏｏＯｇに対し
て１ｍｏｌの割合になるように添加することが反応効率
上好ましい。ついで、これに、し−システィン塩酸塩（
和光純薬製）４３８ｍｇを加え、さらに、エンドペプチ
ダーゼであるパパイン（シグマ社製）２５曙を添加して
攪拌しながら１５分間反応させた。そして、２Ｎ塩酸を
用いて全体のｐＨを２にして反応をとめ、これをセロフ
ァンチューブ（透析チューブ）に入れて２昼夜流水中で
透析し、その後凍結乾燥した。つぎに、これを熱アセト
ンで洗浄して未反応のし一アラニンセチルエステルを除
去し、目的とする蛋白質系乳化剤４８．９　ｇを得た。

このようにして、得られた蛋白質系乳化剤の赤外吸収ス
ペクトルを第４図に示す。第４図において、ピーク１８
は蛋白の吸収を示し、ピーク１９は水素の吸収を示す。

〔実施例３〕 遊甜１のＬ−アラニンアルキルエステルとして、下記の
ようにして製造したものを用いた。それ以外は実施例２
と同様にして蛋白質系乳化剤を得た。

（遊離のＬ−アラニンアルキルエステルの製造）Ｌ−ア
ラニンを４．４６　ｇ　（０，０５ｍｏｌ　）採取する
とともに、アルコールとしてセチルアルコールを１３．
３　ｇ　（０，０５５ｍｏｌ　）を採取し、これに溶剤
としてベンゼン２００ｍｆｆを加えて攪拌混合し、さら
に酸触媒として硫酸４．９　ｇ　（０，０５ｍｏｌ　）
を加え加熱還流した。この場合、エステル化反応の進行
に伴って生じた水がベンゼンと共沸状態で出て（るので
、それを反応系外に除きながら約７時間（内温８０．５
℃）で反応を完了させた。つぎに、これを室温で冷却し
たのち、反応液を分液漏斗に注ぎ、さらに、０．２　Ｎ
　Ｎ　ａ　ＯＨ／　６％ＮａＣｌ混合溶液を３００　ｒ
ｎ　ｌ加えて３回繰り返し処理した。ついで、ベンゼン
層を採取して充分水洗した。水洗後、ベンゼン層を無水
硫酸ナトリウムで１晩乾燥したのち、ベンゼン層を濾取
した。そして、濾取したベンゼン溶液からエバボレーク
ーで溶媒を除去し、ネｎ製された油状の遊離し一アラニ
ンセチルエステル１３．５ｇ（収率８６．１％）を得た
。

〔実施例４］ 遊離のし一アラニンアルキルエステルを下記のようにし
て製造し、つぎにこれを酵素反応に供した。

（遊離のし一アラニンアルキルエステルの製造）ミリス
チルアルコールに代えてステアリルアルコール１）．４
ｇ（０，０６ｍｏｌ　、）を用いた以外は実施例１にお
けるし一アラニンアルキルエステルーｐ−トルエンスル
ホン酸塩の合成と同様にして、Ｌ−アラニンステアリル
エステル−Ｐ−１−ルエンスルボン酸塩を合成した。つ
ぎに、得られたし−アラニンステアリルエステルーｐ−
トルエンスルホン酸塩を再度ベンゼン２００　ｍ　ｌに
／８１’ｒｊＬ、０゜４ＮＮａＯｆ（３００ｍＡで３度
繰り返し、処理した。その後、ベンゼン層を採取し、充
分水洗した。水６し後、ベンゼン層を採取し、無水硫酸
ナトリウムにて１晩乾燥した。乾燥後、ベンゼン層を濾
取した。このベンゼンｌ容を夜をエバポレーターでｌ８
媒除去し、積装された遊離のし一アラニンステアリルエ
ステルの油状物質１６．１５　ｇ　（９４，−１％）を
得た。

（酵素反応） ’ｉ？′４′Ｍ水４８０ｍｌにアセトン１２０ｍｆｆ１
を加え、攪拌下において３７°Ｃに保温しておき、そこ
に親水性蛋白質であるゼラチンを１２０ｇ添加するとと
もに、前記のようにして得られたし一アラニンステアリ
ルエステルを４１ｇ　（ゼラチン１０００ｇに対して１
ｍｏｌになる量）添加し充分に攪拌し均一化し反応液を
つくった。そして、この反応２夜のｐＨをｌＮＮａ２Ｃ
Ｏ３で９．０Ｇこ調整した。

他方、Ｌ−システィン塩酸塩Ｉ水化物１．０５　ｇとパ
パイン（シグマ社り６２．５ｍｇとを精製水５ｍｌに添
加し、攪拌しながら３７℃で１時間ブレインキュベーシ
ョンして酵素溶液をｊｌ！ＩＩＭした。つぎに、この酵
素溶液を前記のようにして得られた反応液に添加して攪
拌しなから３７°Ｃで２０分間反応させた。そして、２
Ｎ塩酸を用い全体のｐ　）［を２．０にして反応を止め
た。このとき、ｌ８液全体として約１．５ｊｌ！となる
。つぎに、Ｌ記の溶液を約４０℃に保温し、ホロファイ
バー型限外濾過装置（クプロファン膜、ファイバー内径
２００μ、膜厚１）μ、有効膜面積１．５ｍ）に約１０
　ｍ　ｌ　／ｍｉｎの流速で送液し、外液には約４０℃
の温水をほぼ１）７ｍ１ｎの流速で送液し透析した。透
析後、そのホロファイバー型限外Ｊと過装置の内圧を約
２ｋｇ／−に設定し、前記と同条件下で透析溶液を濃縮
し最終的に濃縮液を約８００ｍβ得た。得られた濃縮液
を噴霧乾燥装置で乾燥させ、無臭蛋白質系乳化剤約１２
３ｇを得た。

〔比較例〕

し−アラニンに代えＬ−ロイシンを用いて蛋白質系乳化
剤を製造した。すなわぢ、し−アラニンに代えて、１．
−ロイシンを用いた以外は実施例１の、し−アラニンア
ルキルエステル−Ｐ−）ルエンスルホン酸塩の合成と同
様にしてＬ−ロイシンミリスチルエステル−１）−トル
エンスルホン酸塩を合成した。つぎに、得られたｐ−ト
ルエンスルホン酸塩を、ベンゼン２００ｍ６に溶解し、
０．ｌＮＮａ０８３００ｍβで３度繰り返し、処理した
。

その後、ベンゼン層を採取し、充分水洗いした。

水洗後、ベンゼン層を採取し、無水硫酸ナトリウムにて
１晩乾燥した。乾燥後、ベンゼン層を濾取した。このベ
ンゼン溶？（Ｅをエバポレーターでｌ８媒除去し、＋Ｎ
’ＪＪされた遊離のし一ロイシンミリスチルエステルの
油状物質を得た。そして、このものを用い、実施例１と
同様にして酵素反応を行い蛋白質系乳化剤を得た。

つぎに、以上の実施例で得られた蛋白質系乳化剤の芳香
性と、比較例で得られた蛋白質系乳化剤をそれぞれ対照
例として２０名のパネルによる官能試験に供した。その
結果と次表のとおりであり、実施例のものが圧倒的に優
れていた。

また、以上の実施例で得られた蛋白質系乳化剤の表面張
力を、（測定温度３０度）比較例のものならびにゼラチ
ンを対照例として第５図に示した。第５図において、曲
線Ａば実施例１）曲線Ｂは実施例２１曲線Ｃは実施例３
でｉＵられた蛋白質系乳化剤の濃度−表面張力曲線、曲
線りはゼラチン、曲線Ｅは比較例のもののそれである。

曲線Ａ。

Ｂ、Ｃ，Ｄの対比より、実施例１，２．３で得られた蛋
白質系乳化剤はいずれも活性能か比・絞例のものやセラ
チンよりも著しく優れており、優秀な乳化力をもってい
ることがわかる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明にかかる蛋白質系乳化剤の模式図、第２
図は本発明にかかる蛋白質系乳化剤の製造に用いるＬ−
アラニンミリスチルエステル−１）−トルエンスルホン
酸塩の赤外線吸収スペクトル図、第３図は同しく遊離Ｌ
−アラニンセチルエステルの赤外線吸収スペクトル図、
第４図は本発明にかかる蛋白質系乳化剤の赤外線吸収ス
ペクトル図、第５図は同じくその表面張力曲線図である
。 １・・・親水性蛋白質分解物部分　２・・・アミノ酸ア
ルキルエステル部分　３・・・アミノ酸部分　４・・・
アルキル基部分 特許出願人　　　鐘　紡　株　式　会　社代理人　弁理
士　　西　　藤　　征　　彦第１図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）親水性蛋白質分解物のカルボキシ末端に下記の一
   般式で示されるアラニン脂肪族アルコールエステルのア
   ミノ基部分がアミド結合してなる蛋白質系乳化剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔ただし、式中Ｒは炭素数２〜２２のアルキル基、アル
   ケニル基またはアルカジエニル基を表す〕 （２）アラニン脂肪族アルコールエステルが下記式で示
   されるアラニンアルキルエステルである特許請求の範囲
   第１項記載の蛋白質系乳化剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔ただし、式中ｎは１４〜２２の整数を表す〕（３）ア
   ラニン脂肪族アルコールエステルが、Ｌ−アラニンと脂
   肪族アルコールとの反応により得られたものである特許
   請求の範囲第１項または第２項記載の蛋白質系乳化剤。 （４）親水性蛋白質分解物が、カゼイン、ゼラチン、セ
   リシン、可溶性コラーゲン、ゼイン、血清アルブミン、
   ラクトアルブミンおよび卵白アルブミンからなる群から
   選ばれた少なくとも一つの蛋白質の分解物である特許請
   求の範囲第１項ないし第３項のいずれかに記載の蛋白質
   系乳化剤。 （５）親水性蛋白質と、下記の一般式で示されるアラニ
   ン脂肪族アルコールエステルとをエンドペプチダーゼの
   存在下で反応せしめることを特徴とする蛋白質系乳化剤
   の製法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔ただし、式中Ｒは炭素数２〜２２のアルキル基、アル
   ケニル基またはアルカジエニル基を表す〕 （６）アラニン脂肪族アルコールエステルが、Ｌ−アラ
   ニンと脂肪族アルコールとの反応により得られたもので
   ある特許請求の範囲第５項記載の蛋白質系乳化剤の製法
   。 （７）エンドペプチダーゼが、チオールプロテアーゼで
   ある特許請求の範囲第５項または第６項記載の蛋白質系
   乳化剤の製法。 （８）チオールプロテアーゼが、パパイン、キモパパイ
   ン、ブロメライン、フイシン、キュウイフルーツプロテ
   アーゼ、カテプシンＢ、Ｌ、Ｓ、酵母プロテアーゼＢま
   たはＴＺ−ペプチダーゼである特許請求の範囲第７項記
   載の蛋白質系乳化剤の製法。 （９）エンドペプチダーゼの存在下における反応が、ｐ
   Ｈ５〜１０で行われる特許請求の範囲第５項ないし第８
   項のいずれかに記載の蛋白質系乳化剤の製法。