JPS6087225A - フイブリン形成促進材料の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、切傷、擦傷等の傷口、火傷による創面１手術
側面１体表面に生じた潰傷、抜歯窩等の創傷部の治療又
は血管閉塞療法に用いられる塞栓材料又は穿刺療法に用
いられる注入材料に関し。

さらに詳しくは長時間有効に安定化フィブリンの生成を
促進しろるフィブリン形成促進材料に関する。

本発明者らは、血液凝固箱ｘｍ因子（以降［ＦＸＩ［Ｉ
Ｊと略記する。）及びトロンドを固定化した材料につい
ては、トロンドのみを固定化した材料すなわち非安定化
フィブリンの形成のみを促進する材料に比べて安定化フ
ィブリンの形成を促進し得るため創傷部治療用材料とし
て優れていることを見い出し、先に提案した（特開昭５
５−５８１６３号）が、引続き一般に止血剤としてよく
使用されているところの酸化セルロースを素材として用
いるべく研究を続けたところ、酸化セルロースをそのま
まＦＸＩＩＴとトロピンの固定化に用いると、安定化フ
ィブリンの生成促進に悪影響を及ぼすことが判明した。

本発明者らは、″かかる現況に鑑み、上記ごとくの問題
点を解消すべく、引続き検討を重ねた結果酸化セルロー
スを中和した後ＦＸＩＩ［とトロンビンを固定化すれば
安定化フィブリンの形成促進能力は良好に保たれること
を見い出し３本発明に到達したものである。

すなわち９本発明は酸化セルロースを素材とした繊維集
合体、スポンジ、粉末、モノフィラメン１・、フィルム
、マイクロカプセル等の性状を有する構造物を中和した
後、該構造物にＦＸＩＩ［とトロンビンを固定化するこ
とを特徴とする長時間有効に安定化フィブリンの生成を
促進し得るフィブリン形成促進材料の製造法である。

これまでに、酸化セルロースを中和してから固定化の担
体として用いることに関しては１例えば米国特許第２，
５１７，７７２号明細書に、酸化セルロースを一部中和
してからトロンビン処理を行うことにより、トロンビン
の失活を防ぎうることが示されている。しかるに、酸化
セルロースをＦＸＩＩＩで処理したごと（の前例はなく
５さるには本発明のごとくに安定化ツブリン形成促進能
力を考慮した前例などは全くない。

本発明に用いる酸化セルロースとは２例えばウッドパル
プ、綿、綿リンター、ラミー、ジュート紙、ヘムプ、再
生セルロース、レーヨン等のセルロース材料をオゾン、
過酸化水素、過ヨウ素酸塩。

二酸化窒素等を用いて公知の方法にて酸化したもノヲい
うが１本発明においては、セルロースの−ＣＩ＋２０１
１基の１０〜３０％が−ＣＯＯ１１基に酸化されたもの
が生体吸収性良好のため好ましく用いられ、１５〜２５
％のものが特に好ましく用いられる。

本発明においては、かかる酸化セルロースを中和して用
いるが、ここにいう中和とは酸化セルロースの−ＣＯＯ
ＩＩなる酸基を塩に変換させることを意味する。中和を
行うには、酸化セルロースを例えばナトリウムやカルシ
ウム等の金属の水酸化物やあるいはナトリウム、カルシ
ウム、アンモニウム等の各種の塩２例えばアセテート塩
やカーボネート塩にて酸化セルロースを処理すればよい
。中和の度合は、過ぎれば構造物は水溶性となり固定化
しにく（なり、一方３足らずば良好な徐放性を得ること
ができにくくなるので、構造物がゲル状となってその形
を失う手前にて行うのが好ましく。

その目安としては、中和された酸化セルロースを水中に
浸漬した際の１１１が３〜７．好ましくは５〜６の間に
なるように中和を行うのが好ましい。

中和は、構造物について行ってよいし、構造物に加工す
る前の素材を中和してから構造物としてもよい。

本発明に用いるトロンドは、フィブリノーゲンをフィブ
リンに転化することができる蛋白分解酵素である。トロ
ンビンは１人、牛、豚等の血液より分解されるが１人の
治療に適用する場合には人トロンビンを用いるのが好ま
しい。

本発明に用いるＦＸＩＩＩはフィブリン安定化因子と呼
ばれ、非安定化フィブリンに直接作用し、ツブリン分子
間のイソペプチド結合の生成に関与する因子である。Ｆ
ＸＩは人、牛等の血液あるいは胎盤より分離されるが２
人の治療に適用する場合には人由来のＦＸｎＩを用いる
のが好ましい。

ＦＸＩ及びトロンビンは、中和した酸化セルロースに結
合させるか、又は吸着させることにより固定化すること
ができる。結合させるには１例えば０．ＺａｂｏｒｓＫ
ｙ＋″Ｉｎ＋ｍｏｂｉｌｉｚｅｄ　Ｅｎｚｙｍｅｓ″　
Ｃｌ１ＣＰｒｅｓｓ、　１９７３に記載されているよう
な従来より公知の共有結合やイオン結合法を採用するこ
とができる。

中和した酸化セルロースにＦＸＩＩＩおよびトロン５− ビンを共有結合させるには、ジシクロへキシルカーポジ
イミド、１−シクロへキシル−３−（２−モルホリノエ
チル）−カーポイミドーメトートルエンスルホネート等
の脱水縮合剤を用いる方法。

酸化セルロースをグルタルアルデヒド、ジアルデヒドで
んぷん等のポリアルデヒドにより処理して。

ホルミル基を導入した後ＦＸＩＩＩ及びトロンビンによ
り処理する方法、ポリアルデヒドの代わりにブロムシア
ンによりイミノカーボネート基、ブロモアセチル基、無
水マレイン酸共重合体等のポリ無水マレイン酸により酸
無水物基、トルエンジイソシアネートへキサメチレンジ
イソシアナート等のポリイソシアナートによりイソシア
ナート基。

エチレングリコール、テトラメチルグリコール。

グリセリン等のポリグリシジル誘導体等によりエポキシ
基、塩化シアヌルによりクロルトリアジニル基を構造物
に導入することができるので、これらの共有結合を形成
うしる官能基を用いてＦＸＩ及びトロンビンを結合させ
る方法等を採用すことができる。

６− 中和した酸化セルロースにＦＸＩＵ及びトロンビンをイ
オン結合させるには、酸化セルロースのもつカルボキシ
ル基を利用してもよいし、また上記のごとくホルミル基
、イミノカーボネート基、ブロモアセチル基、酸無水物
基、イソシアネート基。

エポキシ基、クロルトリアジニル基が導入された酸化セ
ルロースは、ポリエチレンイミン等のポリアミンにより
処理することによりアミノ化され２グリシン等のアミノ
カルボン酸により処理することによりカルボキシル化さ
れるので、このようにしてイオン交換基であるアミノ基
、カルボキシル基が導入された構造物にＦＸｌ［及びト
ロンビンをイオン結合させることができる。

中和した酸化セルロースにＦＸＩ［及びトロンビンを物
理的吸着法や包括法等により吸着する場合には次のよう
にして行うことができる。すなわち中和した酸化セルロ
ースを湿潤しうる溶媒にＦＸＴＩ［及びトロンビンを溶
解し、この溶液により構造物を処理することによりＦＸ
ＩＩｒ及びトロンビンを物理的に吸着することができる
。包括法はＦＸ■及びトロンビンをゲルの細微な格子の
中に包み込んで脱離できないようにする方法である。

上記のいずれの方法によりＦＸＩＩＩ及びトロンビンを
固定化する場合も、ＦＸＩ及びトロンビンを同時に固定
化してもよいし、あるいは先にＦＸＩを固定化しておい
てから、引き続きトロンビンを固定化してもよいし、そ
の逆であってもよい。また、ＦＸＩＩＩを固定化したも
のとトロンビンを固定化したものを別個に製造しておき
、これらを均一に混合したり、積層したりしてもよい。

また９本発明の材料の製造に際しては、構造物にＦＸＩ
［［の活性化に関与するカルシウムイオンを固定化する
ことができる。さらに９本発明の材料の製造に際しては
、必要に応じてＦＸＩ［［及びトロンビンとともに構造
物にアンチプラスミン剤、殺菌剤、抗生物質、ホルモン
等の医薬品を構造物に固定化することができる。アンチ
プラスミンは。

フィブリン熔解酵素であるプラスミンの阻害剤であり５
　したがってプラスミンを阻害することによりフィブリ
ン溶解活性、すなわち線維素溶解活性を抑制する。した
がって、ＦＸＩ及びトロンビンとともにアンチプラスミ
ンが固定化された材料は線維素溶解活性を抑制すること
によりフィブリンの生成を促進することができる。アン
チプラスミンとしては５例えばウシの肺臓より抽出され
るアプロチニン、微生物の培養液から分離されるベブス
クチン、ロイペプシン、アンチパイン、キモスタチン等
の天然物質、ε−アミノカプロン酸、トラネキサム酸、
メシル酸ガベキサートがあげられるが、特にε−アミノ
カプロン酸、トラネキサム酸が好適に用いられる。

本発明の材料は、切傷、擦傷等の傷口、火傷による創面
１体表面に生じた潰傷、抜歯窩、吻合部等の創傷部の保
護又は血管司塞療法に用いられる塞栓材料や穿刺療法に
用いられる注入材料に用いられ、長期間有効に安定化フ
ィブリンの生成を促進することができる。したがって１
本発明の材料が創傷部保護剤として用いられた場合は、
創傷の治癒を著しく早めると同時に局所の痛みを和らげ
る硬化があり、また塞栓物質として用いられた場９− 合は、迅速かつ強固に血栓を形成し、血管の再開通が起
こらず、また注入材料として用いられた場合には迅速か
つ確かな止血を可能とする。

以下、実施例を示し２本発明をさらに具体的に説明する
。なお、トロンビンとしては株式会社ミドリ十字の人血
漿トロンビンを、ＦＸＩ［［としてはＦＸＩ濃縮乾燥製
剤を用いた。ＦＸＩＩ［製剤は１ビン当り新鮮人血漿４
ｍｌ中に存在する量の６０倍に相当するＦＸＩ［［活性
を有する。

また、安定化フィブリンの形成能試験は次のようにして
行った。すなわち、ＦＸＩ［［及びトロンビンを固定化
した構造物を固定化直後及び１２力月後においてＣａ＋
ｔｈを含む水溶液により処理してＦＸＩＩＩを活性化せ
しめたのち、その構造物を０．５％フィブリノーゲン水
溶液に投入し、３７℃で１０分間放置した。しかるのち
、構造物表面に生成したフィブリンが安定化フィブリン
か否かを確認した。非安定化フィブリンは１％モノクロ
ル酢酸に熔解するが安定化フィブリンは１％モノクロル
酢酸に溶解しないので、上記のようにして形成されたフ
イブ１０−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１酸化セルロースを素材とした繊維集合体、スポン
   ジ、粉末、モノフィラメント、フィルム。 マイクロカプセル等の形状を有する構造物を中和した後
   、該構造物に血液凝固箱ｘｍ因子及びトロンビンを固定
   化することを特徴とする長時間有効に安定化フィブリン
   の生成を促進し得るフィブリン形成促進材料の製造法。