JPS59122939A - 生体試料液採取用具および試料中の特定成分濃度の測定法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、生体試料中の特定成分の濃度を測定する際の
試料採取用具および同用具を利用した特定成分の濃度の
測定方法に関するものである。

従来例の構成とその問題点 最近、酵素の固定化技術が進み、グルコースオキシタＬ
ゼやコレステロールオキシダーゼナトヲ固定化した酵素
電極を用いて、血液や尿中のグルコースやコレステロー
ルなどの濃度を測定する方法が開発されている。しかし
、酵素を固定化した膜やカラムに血液や尿を直接作用さ
せるため、試料中の成分、たとえば赤血球やタンパク質
が表面に付着して反応面積が減ったり、酵素の活性が低
下したりして、長期間初期の活性が保てないという問題
があった。

また、試料中に妨害物質、例えばアスコルビン酸や尿酸
があると、測定の精度を損うので、これを除去する必要
がある。妨害物質を除去する対策として、酵素反応で生
成した過酸化水素のみを選択的に通す膜を設置する方法
がある。しかし、膜を重ねることによシ応答速度が遅く
なるという欠点があった。

そこで、第１図のように妨害物質を前電解除去する試み
がなされた。第１図はバイオセンサの１つであるグルコ
ースセンサの模式図である。１はグルコーメオキシダー
ゼを固定化しかつ上面に白金層を有する多孔質電極で、
その被検液側には下面に白金層を有する多孔質電極２を
設置している。

そして電極１は白金リード３に、電極２は白金リード４
に各々接続しておシ、グルコースオキシダーゼ固定化電
極１に対するＡｑ／ＡｑＣ１参照極５と対極６を電極ホ
ルダー７の内部に、妨害物質除去電極２に対するＡｑ／
ＡｑＣ１参照極８と対極９を電極ホルダーの外にそれぞ
れ配して電極を構成している。ホルダー７の内部１ｏと
外部１１には緩衝液が存在している。

ホルダー外部の攪拌している緩衝液中に血液などの試料
液を添加すると、妨害物質であるアスコルビン酸や尿酸
は電極２に＋０．６　Ｖ　　ｖｓ　Ａｑ／ＡｑＣｔ印加
することにより電解酸化を受けて除去される。

試料中のグルコースは電極１のグルコースオキシダーゼ
と反応して、生成した過酸化水素により流れる酸化電流
値を濃度が既知のグルコース標準液を入れた時流れる電
流値と比較することにょ９グルコ一ス濃度が測定できる
。この方法によると、迅速に応答が得られるが、２つの
電極系を利用するだめ、構成が複雑で製造上困難であっ
た。

発明の目的 本発明は、上記の問題点を克服し、簡単に所定の成分を
採取できるとともに妨害物質を除去することができるよ
うにし、かつ、長期間測定が可能な生体試料中の特定成
分の濃度測定方法を確立することを目的とする。

発明の構成 本発明は、直接生体試料液を測定系に作用させるのでな
く、その前処理として、一度試料液を担体上に吸収させ
た後、攪拌中の緩衝液中にグルコースおよび低分子物質
のみ溶出させ測定することを特徴とする。さらに、試料
採取用具の担体上に酸化剤を保持させることにより、試
料中の妨害物質であるアスコルビン酸や尿酸を簡単に除
去できるようにするものである。

実施例の説明 試料採取用具の構成を第２図に示す。１２は支持棒で、
プラスチックよりなる。１３は親水性の多孔質樹脂又は
ガーゼ等の繊維を支持棒の一端に装着したみ親水性の層
で、試料液を吸収する担体である。１４はヨウ素、ヨウ
素酸、金属酸化物などの酸化剤で、アスコルビン酸など
の妨害物質を除去するだめのものであり、担体１３に塗
布又は含浸している。

この試料採取用具の担体上に、血液や尿など検体を定量
吸収させた後、攪拌中の溶液に入れると、赤血球やタン
パクのかたまりなどは担体に吸着され、グルコースやコ
レステロールの様な低分子量の物質のみ溶出し、酵素電
極の電極面をよごすことなく濃度が測定でき、長期にわ
たって初期の活性を維持することができる。又、担体に
含浸されだ酸化剤により妨害物質を除去できるだめ、酵
素電極の構造もより簡易に製造で６る。

バイオセンサの１つであるグルコースセンサを用いた場
合を例に説明する。プラスチックを支持チ 棒とし、担体として商会粉末、酸化剤としてＭｎＯ２八 を用い、両者の混合物の成形体を支持棒の一端に固定し
た。これに血液を一定量吸収させ攪拌されだ緩衝液中に
浸漬した。グルコースセンサは第３図に示したものを使
用した。センサは第１図に示したものから妨害物質を除
去する電極系をとり除いた構成で、非常に製造上簡易化
される。

まず、第１図の電極を用いて、血液を直接添加して測定
を繰り返した。電極を洗浄せずに使用した場合、２０回
以上連続使用するうちに、初期活性の７０係に応答が低
下した。電極を１回ずつ洗浄しても、１００回位から応
答の低下がみられた。

一方、第３図の電極を用いて、１回ずつ採取用具に血液
を吸収させた後測定すると、２００回以上連続的に使用
しても、初期活性の低下がみられなかった。また、アー
スコルビン酸を採取用具に吸収させて、第３図の電極で
測定した場合、電流の増加はみられなかった。

担体として、ガーゼを用いた場合も同様に良好な結果を
得た。

酸化剤としては、ＭｎＯ２の他にもＣｕｏ　、　Ｆ　ｅ
　２０３　。

ＭｏＯ２などの金属酸化物、ヨウ素、ヨウ素酸などが利
用できる。又グルコースの測定に限らず、コレステロー
ルやイノシンなどの測定にも利用でき゛る。

発明の効果 生体試料を酸化剤を含む担体に吸収後、緩衝液中に溶出
させて測定することによシ、基質濃度を長期間測定する
ことができるようになった。又、妨害物質を簡単に酸化
剤により除去できるため、酵素電極の構造も簡易化でき
る。

【図面の簡単な説明】

第１図は従来の電極の拡大模式図、第２図は本発明の試
料採取用具の構成例を示す模式図、第３図は本発明の実
施例に用いた電極の拡大模式図である。 １・・・・・・固定化酵素電極、２・・・・・妨害物質
除去用電極、６，８・・・・・・参照極、６，９・・・
・・・電極、７・・・・・・ホルダー、１２・・・・・
・支持体、１３・・・・・・担体、１４・・・・・・酸
化剤。 代理人の氏名　弁理士　中　尾　敏　男　ほか１名第１
図

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　支持体の一端に、生体試料液を吸収する担体
   を設け、この担体に酸化剤を保持させたことを特徴とす
   る生体試料液採取用具。
2. （２）　　生体試料液を吸収する担体に酸化剤を保持さ
   せた生体試料液採取用具によって生体試料液を採取後、
   測定系の緩衝液中に浸漬し、前記試料液を溶出させて測
   定することを特徴とする試料中の特定成分濃度の測定法
   。