JPS5822199B2

JPS5822199B2 - γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法

Info

Publication number: JPS5822199B2
Application number: JP56031055A
Authority: JP
Inventors: 横地俊弘; 中里敏; 鈴木修
Original assignee: Agency of Industrial Science and Technology
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 1981-03-03
Filing date: 1981-03-03
Publication date: 1983-05-07
Also published as: JPS57144986A

Description

【発明の詳細な説明】本発明はモルテイエレラ属の糸状菌を炭化水素を炭素源
とする培地に培養し、培養物よりγ−リルン酸含量の高
い脂質〔中性脂質（油脂など）極性脂質（リン脂質、糖
脂質）〕を製造する方法に関するものである。

現在までに報告されているγ−リルン酸を含む微生物と
してはムコール・グロボサス（全脂肪酸に対する含すル
ン酸含量：中性脂質１２．３％極性脂質２５．７％、以
下、単に中性脂質と極性脂質の含量を示す）、ムコール
・プシリス（中性、脂質１．５％、極性脂質１．４％）
（Ｒ６０，ＭｕｍｍａｅｔａｌＬｉｐｉｄｓ、６，５８
４（１９７１））、ユアネホラ・ククルビタルム（全脂
質ｘｏ、ｓ％ｒ（Ｈ，Ｂ、Ｗｈｉｔｅ、Ｊｒ、、Ｓ、Ｓ
、Ｒｏｗｅｌｌ。

Ｂｉｏｃｈｉｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ、１１６，
３８８（１９６６））、ピチウム・テバリアナム（全脂
質４．５％）、サブロレグニア・リトラリス（全脂質２
．８％）、リゾパス・ストロニファ（全脂質１５．６％
）、リゾパス・アルヒザス（全脂質９．８係）、ピュミ
セス・ブラケエスレアヌス（全脂質５．４％）、ムコー
ル・ジャバニカス（全脂ｆｆ１３．７係）、ヘリュステ
イルム・ピリホルメ（全脂質８．５％）（Ｒ４Ｓｈａｗ
＋Ｂｉｏｃｈｉｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ａｃｔａ、９８，２３０（１９６５））、エントモフト
ラ・コロナタ（全脂質２．２％）（Ｒ，０゜Ｍｕｍｍａ
、Ｔ、Ｅ、Ｂｒｕｓｚｅｗｓｋｉ、Ｌｉｐｉｄｓ、５゜
９１５（１９７０））等が知られているが、これらはい
ずれも炭素源が炭水化物であし、含量も極性脂質で一部
高い値が出ているが、全脂質でのγＩＪルン酸含量は多
くて１０数係に過ぎない。

本発明はγ−リルン酸含量の高い脂質を生産する糸状菌
について研究した結果、モルテイエレラ・イサベリナ（
Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｉｓａｂｅｌｌｉｒａ）ＣＩＦ
ｏ、７８２４，７８８４）か炭水化物を炭素源とした培
地では窒素源濃度、培養温度等を変えて培養を行っても
、菌体内の全脂肪酸中に含まれるγ−リルン酸の含量か
一般には５係以下であり、多くて８係程度あったのに対
して炭化水素を炭素源とした培地で培養した菌体では、
γ−リルン酸含量が一般的に全脂質の脂肪酸組成の２０
係以上、極性脂質では３５係に達する脂質を生産するこ
とを見出し、本発明は完成するに到った。

すなわち、本発明はモルテイエレラ属に属するγ−リル
ン酸含量の高い脂質生産性の糸状菌を炭化水素を炭素源
とする培地に培養し、培養物によシγ−リルン酸含量の
高い脂質〔中性脂質（油脂など）、極性脂質（リン脂質
、糖脂質）〕を製造する方法である。

本発明の使用菌の具体例としては、上記した糸状菌か挙
げられるが、モルテイエレラ属菌であれば、すべて本発
明の使用菌として用いることができる。

なお、上記した菌はいずれも財団法人発酵研究所に保存
され、ＩＦＯカタログ（菌株目録）に記載されている糸
状菌である。

上記糸状菌を培養する培地の炭素源である炭化水素とし
ては、例えばケロセン（ｎ−デカン８０係含有）、ｎ−
アルカン（ＣＩＯ−Ｃ１０）、ｎ−デカン、ウンデカン
、ヘキサデカン、ペンタデカンなどが用いられる。

炭化水素は培地１を中に１０〜３０ｍ７！！用いるのが
好ましい。

また窒素源としては、例えばＮＨ４ＮＯ３，（ＮＨ４）
２８０４などのような無機窒素源、または尿素、ペプト
ン、酵母エキス、コーン・スチープ・リカーなどの有機
窒素源か用いられる。

無機塩としては、例えばＫＨ２ＰＯ４に２ＨＰＯ４＋Ｎ
ａＣ１，ＦｅＳＯ４”７Ｈ２０，Ｍｇ５０４７Ｈ２０，
ＺｎＳＯ４・７Ｈ２０などが用いられる。

その他必要に応じて微量要素、その他の栄養源を添加す
る。

上記糸状菌の培養は通常液体培地で静置培養、振とり培
養、通気攪拌培養などにより行われる。

培地のｐＨは４．０〜６．０が良く、通常１０〜３３０
Ｃで５日〜３０日位培養が行われる。

かくして、培養物中にγ−リルン酸含量の高い脂質が生
産されるので、培養物から脂質を採取する脂質の採取に
あたっては、脂質か糸状菌の菌体中に含まれるので、培
養物より菌体を分離し、この菌体よシ脂質を採取するの
が好適である。

脂質の採取は常法に従って例えば溶媒抽出などによって
行われるかくして、本発明によれば、炭化水素を炭素源
としてγ−リルン酸含量の高い脂質を生成することが可
能になる。

γ−リルン酸（１８：３（６，１２））はリノール酸と
共に補乳動物では体内で合成することのできない、食飼
として要求される脂肪酸（必須脂肪酸）である。

これはγ−リルン酸が体内でビスホモ−γ−リルン酸と
なり、さらにはアラキドン酸となる前駆体であること、
ビスホモ−γ−リルン酸、アラキドン酸はそれぞれグロ
スタグランジン、Ｅｌ、Ｆｌｄ及びＥ２．Ｆ１ａとなり
生体中で極めて重要な生理的な役割をはたしているから
である。

植物種子たとから生産されるリルン酸はα−リルン酸１
８：３（９，１２，１５）、ｌが大部分を占めており、
γ−リルン酸を生産するものは少なく、この意味でγ−
リルン酸含量の多い脂質の生産はγ−リルン酸の生産と
言う意味においても重要な意義を持っている。

次に本発明の実施例を示すか、本発明はこわにより制限
を受けるものではない。

実施例１ｎ−デカン１２．５ｙｄ、ＫＨ２ＰＯ４２ｇ、Ｍｇ５０
４−７Ｈ２００，３，Ｆ、ＮａＣ１０，１ｇ、ＦｅＳＯ
４・７Ｈ２０１０７％’、ＣａＣＡ２＃２Ｈ２０１０’
％’。

Ｃｕ５０４−５Ｈ２００，２７７１１ｐ、Ｚｎ５０４−
７Ｈ２０１，０７ｎ９＋ＭｎＣ７２・４Ｈ２０１，０７
７ｉｐ、Ｔｈｉａｍｉｎｅ−ＨＣｔ２ｍ？、ＤＢｉｏｔ
ｈｎｏ、０２ｍ９と窒素源としてＮＨ４Ｎ０３０．９１
ｇ、あるいは（ＮＨ４）ＳＯ４０，９ｉ、あるいは（Ｎ
Ｈ２）２ＣＯＯ，６８ｇｃｃｌＮ比（ｎ−デカン中の炭
素原子重量／窒素源中の窒素原子重量）はいずれも２４
．１）を脱イオン水１０００−に混合し、ｐＨを４．６
に調整した。

この合成培地４００ｙｄを１ｔの三角フラスコに入れ、
それぞれ菌株を接種し、所定の温度で所定の期間１５０
ｒｐｍで振とう培養を行った。

培養後、口過法あるいは遠心分離法で菌体を集めた。

その一部を含水率の定量の為、精秤し、恒温槽中１２０
°Ｃで一昼夜乾燥し、含水率を求め、残りの菌体につい
て脂質の抽出を行った。

菌体からの脂質の抽出は、残シ湿菌体にクロロホルム−
メタノール（２：１ｖ／ｖ）混液を加え、ガラスピーズ
存在下にホモジナイズすることによシ菌体の破砕と脂質
の抽出を同時に行った。

なお、抽出を完全に行うため、これを５回繰返し、全抽
出液を集めた。

上記抽出液をＦｌｏｃｈの分配洗浄法により精製した後
、溶媒を減圧留去し、重量法で全脂質量を測定した。

菌体から抽出し、精秤した生成脂質は一部を取ジメチル
エステル化の後、ガスクロマトグラフィーにより脂肪酸
組成を分析した。

残りの脂質について、ユニシルを充填剤とし、クロロホ
ルム及びメタノールを展開溶剤とするカラムクロマトグ
ラフィーにより中性脂質と極性脂質に分離し、それぞれ
の存在量を求めると共に、それぞれの脂質についてもガ
スクロマトグラフィーを行い。

脂肪酸組成を求めた。

このような方法により求めたモルテイエレラ属糸状菌の
培養条件としての窒素源の違いによる脂質生成量とγ−
リルン酸含量を次表に示した。

この表−１の結果から、菌株Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｉ
ｓａｂｅｌｌｉｎａＩＦＯ７８２４，７８８４ともに窒
素源にかかわらず、γ−リルン酸含量が全脂質に対する
場合で１８係以上であることが分る。

Claims

【特許請求の範囲】

１モルテイエレラ属に属するγ−リルン酸含量の高い脂
質生産菌を炭化水素を炭素源とする培地に培養し、培養
物よりγ−リルン酸含量の高い脂質を採取することを特
徴とする脂質の製造方法。