JPH05502727A - バイオセンサシステム及びこれに用いられる方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （翻訳文） バイオセンシング機器および方法 発明の分野 本発明は、流体サンプルに含まれる分析対象物の濃度を定量するためのバイオセ ンシング機器に係り、特に血液などの体液に含まれる例えばグルコース、コレス テロールなどの生体化合物の濃度を電流滴定により測定するための方法および装 置に関する。

関連出願の表示 本発明は、以下の発明に関連する。

１９８９年１２月１５日出願のバークス（Ｐａ、ｒｋｓ）およびホワイト（Ｗｈ ｉｔｅ）による［微調二股電源（Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　Ｂｉｆｕｒｃａｔｅｄ　 Ｐｏｖｅｒ　Ｓｕｌ］ｐＩＹ）Ｊと称する米国特許出願第０７／４５１．１０７ 号１９８９年１２月１５日出願のバークス（Ｐａｒｋｓ）による「ノイズの減少 を伴うアナログディジタル変換（Ａｎａｌｏｇ　ｔｏ　Ｄｉｇｌｔａｌ　Ｃｏｎ ｖｅｒｓｉｏｎνｉｔｈ　Ｎｏ１ｓｅ　Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）Ｊと称する米国特 許出願第０７／４５１，２１２号、ならびに１９８９年１２月１５日出願のバー クス（Ｐａｒｋｓ）およびホワイト（Ｗｈｉｔｅ）による「バイオセンサ電極用 励起回路（Ｂｉｏｓｅｎｓ。

ｒ　Ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ　Ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ　Ｃ１ｒｃｕＩｔ）　Ｊと称す る米国特許出願第０７／４５１　、１０８号 発明の背景 近年、酵素を利用したバイオセンサが血液サンプルのグルコースとコレステロー ルの両方の濃度の測定に利用されている。ナンカイ（Ｎａｎｋａｉ）らの欧州特 許出願公開第０２３０４７２号には、電流滴定を利用して血液サンプルのグルコ ースの濃度を測定するバイオセンシング機器が開示されている。この機器では、 測定電極、リファレンス電極およびカウンタ電極を備えたテストセルが用いられ ている。これらの電極は、グルコースオキシダーゼ、フェリシアン化カリウムお よびその他の成分を含有するインサートで覆われている。血液サンプルをインサ ートに接触させて入れると、サンプル中のグルコースが（グルコースオキシダー ゼの作用を介して）フェリシアン化カリウムと反応してフェロシアン化カリウム を形成する。その後で電極に電圧を印加すると、逆反応が生じて、最初の反応で 生じたフェロシアン化カリウムの濃度に比例した電流が流れる。この電流の測定 値がサンプル中のグルコースの濃度に対応すると言われている。

グルコースとコレステロールの両方の濃度を測定する同様なシステムが、ボット ゲン（Ｐｏｔｔｇｅｎ）らのＰＣＴ国際出願第Ｗ０８９１０８７１．３号に開示 されている。ナンヵイらのシステム及びボットゲンらのシステムは、いずれも同 一の化学反応を用いてグルコース濃度の電流滴定による検出を行っている。グル コースの場合、いずれのシステムも、グルコ特表平５−５０２７２７　（３） 一スに対するグルコースオキシダーゼの触媒作用によって、フェリシアン化カリ ウム（＋３）をフェロシアン化カリウム（＋４）にすることができる（すなわち 、足反応）。その後で反応体に電位を与えると、電気化学的に反応の逆行が生じ る（すなわち、逆反応）。グルコースオキシダーゼによってグルコースが酸化さ れると、電子はフェリシアン化物を還元してフェロシアン化物を生しながらフェ リシアン化物に移動する。電極に与えられた電位は、電極に移動される電子とと もに、電気化学的にフェロシアン化物を酸化してフェリシアン化物に戻す。これ によって、微量ではあるが検出可能な電流が流れる。この電流量は、サンプル中 のグルコース濃度に比例する。逆反応時に流れる電流は、コットレル電流として 知られ、以下の式によって表される。

ただし、ｎ−移動電子の数 Ｆ−ファラデ一定数 Ａ−測定電極の面積 Ｃ−分析対象物の濃度 り一電気活性種の拡散係数 を一時間 式（１）は、多くの因子が特定のテストシステムに対して定数になっていること が判れば、より簡略化した式に直すことができる。このように、コットレル電流 は、逆反応時のいかなる時点においても、以下の式で表せる。

ｔ 式（２）は、コットレル電流が分析対象物の濃度に比例し、測定時間の平方根に 反比例することを示す。図３の四分割された右上領域にグルコース濃度が異なる 場合の各コットレル電流を曲線で示す。

先行技術の特徴は、逆反応時に特定の時間を選択してコットレル電流を読取り、 その読取り値をグルコースまたはコレステロールの濃度の測定値に変換すること である。ナンカイらおよびポットゲンらはいずれも、テストセルの使用中に生じ る現実的な問題を扱ってはいない。例えば、血液サンプルが検出電極の表面全体 を覆わなければ、読取り値にエラーが生じる。さらに、テスト前またはテスト中 に反応域が水和すれば、読取り値にエラーが生じる。同様に、電極の長手方向に 沿ってリークが生じて血液サンプルが反応域内の電極だけてなく反応域の外部を も覆うならば、やはり、読取り値にエラーが生じる。これらのエラーは、コット レル電流のベースラインのシフトや測定時の面積の変調となって表れる。

従って、本発明の目的は、分析対象物の濃度の読取りを行うとともに誤７た読取 り値が正しいものとして報告されることを防止した電流滴定バイオセンサおよ秒 その方法を提供することにある。

本発明のもう一つの目的は、間違った電流曲線が得られた場合に、エラー表示を 行うグルコース濃度用の電流滴定バイオセンサおよびその方法を提供することに ある。

発明の概要 測定された電流が所定のコットレル電流の関係に従って変化しているかどうかを 測定するバイオセンシングシステムを説明する。このシステムは、反応域に伸長 する少なくとも一対の電極を備えたテストセルを含む。この反応域は、分析対象 反応体を含む。サンプルを反応域に分析対象反応体と接触させて入れた後で、ア ナログ信号検出器をマイクロプロセッサに組み合わせて、連続した測定時間にわ たって電極間の電流測定を複数回行なう。また、マイクロプロセッサは、複数の 比較定数を記憶する。この比較定数は、ある測定時間の平方根を次の測定時間の 平方根で割ったものの逆数を採ることによって算出される。マイクロプロセッサ は、連続する２つの測定時間を選択し、これらの時間に測定された各電流の比を 算出し、これらの電流の比を、一対の連続する２つの測定時間に対してあらかじ め算出された比較定数と比較する。この比較によって、測定された電流比が比較 定数に類似しないことが判った場合、電極間の電流がコットレル関係に従って変 化していないという指示が現れる。

図面の説明 図１は、バイオセンシング機器とともに用いられるテストセルの斜視図である。

図２は、図１に示す線２−２の断面図である。

図３は、図１に示すテストセルのグルコースの濃度が異なる場合に得られる電流 の時間的な変化を示すグラフである。

図４は、流体サンプル中の分析対象物の濃度を測定するために使用されるテスト ンステムのブロック図である。

図５および図６は、図４のシステムにて使用される測定プロセスを説明するフロ ーチャートである。

発明の詳細な説明 図１を参照すると、差込み型のテストセル１０は一対の電極１２および１４を含 む。電極１２は「作用」電極と呼ばれ、望ましくは白金、パラジウムまたは他の 貴金属からなるものである。電極１４はリファレンス電極であり、望ましくは銀 ／酸化銀または銀／塩化銀からなるものである。電極１２および１４は、一対の ポリマーシート材１６および１８によって挟まれ、シート材１８には、電極が露 出する開口部２０および２２が設けられている。実際は、この開口部２０は、反 応域または「くほみ」になって、体液のサンプルを入れて反応を起こすようにな っている。開口部２２では電極１２および１４が露特表千５−５０２７２７　（ ４） 出するので、テストセル１０を雌コネクタに差し込むと雌コネクタを電極に電気 的に接続することができる。

図２にテストセル１０の断面を示す。製造時に、反応層２４がくぼみ２０に形成 されて、バイオセンシング機器のための反応体を形成される。機器をグルコース 濃度の測定に使用する場合、層２４は、酵素、電解質、媒介物質、成膜剤および 緩衝体を含む。例えば、酵素はグルコースオキシダーゼ（またはグルコースデヒ ドロゲナーゼ）であり、緩衝剤は有機物質や無機物質であり、電解質は塩化カリ ウムや塩化ナトリウムであり、媒介物質はてきればフェリシアン化カリウムが好 ましく、成膜剤はゼラチンおよびプロピオフィン（ｐｒＯｐｔｏＮｎ）を含む。

テストセルをコレステロール濃度の測定に使用する場合、酵素は、コレステロー ルエステラーゼ添加剤の有無にかかわらずコレステロールオキシダーゼが望まし い。緩衝剤は、無機物質が望ましく、塩化カリウムまたは塩化テトリウムなどの 電解質を含む。この場合、２種類の媒介物質としてはフニリシアン化物およびキ ノンを用いて上述のようにゼラチン膜に入れる。

本明細書の導入部分に述べたように、このシステムで用いられる化学反応は、当 該技術分野においては公知であり、詳細は説明しない。最初に血液サンプルをく ぼみ２０の中に入れてグルコース濃度を測定すると言えば十分である。サンプル 中のグルコースによって、フェリシアン化カリウムがフェロシアン化カリウムに なる正反応が生じる。正反応が進行して完了した時、端子１２および１４間に電 圧を印加すると、フェロシアン化カリウムがフエリンン化カリウムに応待の電子 の流れは、検出して測定され、グルコース濃度に対して周知の関係を有すること がわかっている。

図３に、グルコース濃度が異なる場合の電流の変化の様子を説明する。縦軸にマ イクロアンペア単位の電流を採り、横軸に時間を採る。曲線３０．３２．３４お よび３６は、電極１２と電極１４との間に電位を与えて逆反応が生じた後の時間 の経過に伴う電流の変化を表す。各曲線は、血液サンプルのグルコースの濃度に 依存して互いに異なる軌跡をたどっていることが判る。

上述したように、電流曲線３０．３２．３４．３６などの各形状は、式（１）に 基づいて決まる。もちろん、これは、テスト条件が厳密に定められたとおりに遵 守されたと仮定した場合である。図１のテストセルおよびこのセルに関連した測 定機器（以下、図４と関連させて説明する）は、熟練者以外の人によって使用さ れるように企画されているので、必要なテスト条件を満たしていないことがしば しば起こりうる。例えば、グルコースの測定を正確なものにするためには、血液 サンプルをくぼみ２０の中に正しく入れることが大切である。サンプルが電極面 積の一部しか覆わないならば、読取り値のエラーが生じる。電極間に電圧が印加 された時、電極１２と電極１４との間のくぼみ２０が汚染されていれば、測定さ れた電流曲線は、グルコース濃度に対して何の関係も有しないことかある。さら に、テストセルに欠陥があり、そこから血液サンプルの一部か漏れてシート１６ とシート１８との間に（例えば、導体１２または１４の側面に沿って）浸透する ならば、読取り値のエラーか生じる。コットレル電流の測定を利用した先行技術 のテストセルは、このような問題を考慮しておらず、１回の測定によってコット レル電流と時間との関係が得られるものと仮定している。

上記の問題は、機器を制御するマイクロプロセッサにアルゴリズムに適した複雑 な曲線を含ませることによって解決できるであろうか、フェールセーフ測定表示 を有してはるかに簡単で複雑でない技術が見いだされた。式（２）から判るよう に、コットレル電流はいつでも測定された時間の平方根に反比例する。従って、 連続する２つの測定時間ｔ１およびｔ２で測定されたコットレル電流測定値は、 次のように表される。

測定されたコットレル電流値の比は、次のように表される。

式（５）から、連続する２つの時間（例え′ばｔｌ、ｔ２）で測定されたコット レル電流の比（例えばｘ１□）は、測定が行なわれた時間の平方根の比の逆数と 同しになっていることがわかる。従って、測定時間の平方根の比の逆数（Ｘｌ、 ２または′比較比゛　と呼ばれる）は、すべてのグルコース１度曲線に対して。

；敗になっている。

式（５）によって、連続した各？ｌＪ定時間にて測定された測定電流か前もって 判らなくても、その時間の比がコットレル曲線をたどると仮定すれば定数となり 、測定時間の平方根の比と同じ値を示すことを示している。もちろん、電流測定 値はテスト条件によりいくらか変動するので、この比は正確に同一になることは あまりない。その結果、比を比較する際はいつでも標準偏差を考慮する必要があ る。

図４にバイオセンシング機器の高水準ブロック図を示す。

システム全体の制御はマイクロプロセッサ５０からシステムバス５２を介して出 される。システムのコミュニケーションは、システムバス５２とそれを介しての 機器のインターフェース内の各操作ユニットに亘って生じる。信号電圧モジュー ル５４は、マイクロプロセッサ５０からのデジタルコマンドをアナログ出力に変 換してライン５６を介してセル１０に伝える。（実施例においては、セル１０は 差込み型であり、雌プラグに挿入されたときに信号電圧モジュール５４からの刺 激特表平５−５０２７２７　（５） 電圧を受けるだけである。） 電流は信号検出器６０によってセル１０を流れ、導体５８を介して戻る。この信 号検出器は、順番に電流を連続的に測定し、読取り値をデジタル出力に変換する 。信号検出器６０は、マイクロプロセッサ５０からのクロック人力によって制御 され、テスト電圧がセル１０に印加されると、電流読取り値を連続的に出力する 。例えば、逆反応が完了するのに１０秒を要する場合、この１０秒間に信号検出 モジュール６０は５００ミリ秒毎に１回の電流読取りを行なう。

ランダムアクセスメモリ（ＲＡＭ）６２および６４は機器の操作メモリを形成す る。ＲＡＭ８２は操作パラメータを記憶する。ＲＡＭ６４は、前の測定サイクル を比較の目的や入出カポ−トロ６を介して別のプロセッサに後で読み出すために 保持することができる付加的な記憶容量になっている。差込み型のリードオンリ ーメモリ　（ＲＣ）Ｍ）８８は、バス５２を介してインターフェースし、他のデ ータとともにテストセル１０が取り出されたテストセルのバッチについてあらか じめ計算された比較定数（Ｘｌ、２１　Ｘ２．３など）を記憶している。プログ ラムＲＯＭ７２は、マイクロプロセッサを操作するソフトウェアを記憶している 。さらに、一つの測定時間で測定されるコットレル電流測定値は、グルコース濃 度に対して線形関係を有することが知られている。しかし、この線形関係は、セ ルのバッチが異なればいくらか変化する。従って、ＲＯＭ６８はセルのバッチご とに設けることがてき、さらに較正定数を記憶して、コットレル電流と濃度との 間の線形関係を、セルの特定のパンチごとにマイクロプロセッサ５０に対して正 確に定めることができる。最後に、ディスプレイ７０により、ユーザーは、セル １０を使用して、ＩＩＩ定された濃度測定の結果を確認することができる。

システム全体の操作は、図３を図４に組み合わせて検討すると理解できる。まず 、セル１０を機器に差し込み、キー（図示せず）を押すとテストがまもなく始ま ることが表示される。すると、マイクロプロセッサ５０は、信号電圧モジュール ５４を起動させて、ライン５６を介してセルに　′オートドロップ”電位を与え る。次に、血液のサンプルないし小滴をくぼみ２０に入れると、ただちに電流ス パイクが発生して血液サンプルがあることを示して信号検出モジュール６０が検 出する。この電流スパイクを図３に曲線８０で示す。マイクロプロセッサ５０は 、電流スパイク８０を検出すると、信号電圧モジュール５４を起動させてオート ドロップ電位をライン５Ｂから除去する。

この時から正反応が始まり進行して完了する（例えば約２０秒）。正反応が終了 した時に、マイクロプロセッサ５０は信号電圧モジュール５４を起動してセルＩ Ｏに測定電位を与えて逆反応を開始させる。ここでもまた、最初にサージ電流が 発生するが、ｍＪ定定路路このサージ電流を無視する。サージ期間（例えば１０ ）が終わると、最初の電流測定が行なわれ、その後間隔をおいて連続的に測定か 行われる（例えばｔｌ、ｔ２．ｔ３．、、）。以下に述べるように、マＭ６８に て得られた定数を用いてあらかじめ較正された線形関係に基づいてグルコース濃 度を計算する。さらに、マイクロプロセッサ５０はすべての電流測定値を記憶し 、測定時間に亘って電流測定値を積分して、逆反応時に移動した全電荷量をめる 。この値は濃度に変換されて、１つの測定値に対する比較値になる。さらに、マ イクロプロセッサ５０は、システム中の他のモジュールと組合わせられて一連の テストを実行して、信号検出器８０によって検出された信号がコットレル電流の 関係に従うことを判定する。

これらの手順を図５および図６に基づいて説明する。まず、あらかじめ計算した 各比較比（Ｘｌ−２＋　Ｘ　２．３など）がアクセスされて（ステップ１００） 記憶される。すなわち、複数の測定時間ｉａ、Ｌ４１のそれぞれに対する比較比 Ｘカ、　ＢＡＨがアクセスされて記憶される。次に、テストセルが挿入されてテ ストキーが押される。すると、システムの回路が初期化され（ステップ１０２） 、オートドロップ電圧がセル１０に印加される（ステップ１０４）。それから、 信号検出器６０は、血液サンプルがくぼみ２０の中に入れられたことを示す電流 スパイクに備えて待機する（ステップ１０６）。

電流スパイクが検出されなければ、プログラムは電流スパイクが検出されるまで 単に循環を繰返す（ステップ１０６）。

この時点で、オートドロップ電圧は除去され（ステップ１０８）、システムは反 応が終了するまで待機する（ステップ１１０）。そして、測定電圧が信号電圧モ ジュール５４からセル１０に印加されて、ｔｏにて最初の電流読取りが行われて 記録される（ステップ１１６）。次に（図６）、次の電流読取りが行われて（例 えばｔｌ）記録される（ステップ１１８）。

この時点で、ｔｏおよびｔ７，１にて測定された電流値がアクセスされて、それ らの比が算出される。そして、この比があらかしめ記憶された比較定数Ｘ。、６ ．１と比較される。

これらの比か類似していなければ、測定した電流値が所定のコットレル電流の関 係に従っていないことがわかる。

「類似」とは、計算した電流比があらかじめ計算した比較定数Ｘから所定の誤差 値を含む値以外にならないことである（ステップ１２０）。

比較がうまく行かない場合、エラーが報告される（ステップ１２２）。比較がう まく行った場合、マイクロプロセッサ５０が時間（１−＋）　（１ヨ）にわたっ てｔｏおよびｔ６１．て測定された電流値を積分してその数値を記憶しながら、 プロセスは進行する（ある期間の電流の積分値は、その期間に移動した電荷量に なることを覚えておくべきである。ステップ１２１３を参照）。測定サイクル中 のある時間にサンプル測定時間が指定される。そのような時間に、その時間に測 定された電流読取り値（ステップ１２７）を、引続き「サンプル」すなわちグル コースの濃度値に変換する特表平５−５０２７２７　（６） （ステップ１３４）。

次に、システムが測定サイクルの最後の時間に達したかば、システムは、ｎの数 値を増加させた後ステップ１１８に戻り（ステップ１２４　）　、次の時間にて 次の電流読み取りを行なう。そして１１．、と１１ｏｌとの比が計算され、あら かじめ記憶された比較定数などと比較される。比較定数は、連続した測定時間で 測定された電流比のためたけに計算する必要はないか、測定時間が異なる場合に は計算しなければならないことを理解すべきである。

最後の電流値か測定されたと判断されると（ステップ１２８　）　、システムは 積分したグルコース濃度と（ステップ１３０）抽出されたグルコース濃度（ステ ップ１３４）とを計算する。そして、システムは、積分計算したグルコース濃度 と抽出したグルコース濃度とを比較しくステップ１３６）、それらの類似性を判 断しくステップ１３８　）　、その結果をステップ１４０または１４２に示す。

上述から、−回のサンプル測定を行うことに加え、積分したサンプル測定値を算 出して読取り値の信頼性を確認するための比較が行こなえることがわかる。さら に、電流比を所定の比較定数と比較することによって、このシステムが、測定さ れた電流値が予測されたコットレル電流との関係に従ったことを正しく判定でき る。従って、テストシステムまたはセルに異常があった場合、読取り値のエラー を回避することができる。

上述は本発明の一実施例を示したにすぎないことを理解すべきである。当業者で あれば、本発明から逸脱することなく種々の変形例および適用例を考案すること ができる。

従って、本発明は、添付の請求項に定める範囲に該当する変形例および適用例を すべて包含するものである。

ｎ 特表平５−５０２７２７　（７） 図５ 図６ 要　約　書　（翻訳文） 測定した電流が所定のコットレル関係との関係に従って変化しているかどうかを 判定するバイオセンシングシステムを説明する。二のシステムは、反応域に伸長 する少なくとも一対の電極を備えたテストセルを含む。この反応域は、分析対象 物を含む。サンプルを反応域に分析対象反応体と接触させて入れた後、アナログ 信号検出器をマイクロプロセッサと組み合わせて、連続する複数の測定時間にお いて電極間の電流測定を複数回行なう。また、マイクロプロセッサは、ある測定 時間の平方根を後続の測定時間の平方根で割ったものの逆数をめて算出された連 続する複数の比較定数を記憶する。マイクロプロセッサは、対をなす連続する測 定時間を選択し、これらの時間にて測定された電流の比を算出し、これらの電流 の比を対をなす連続する測定時間についてあらかじめ算出された比較定数と比較 する。

この比較によって、測定された電流の比が比較定数に類似していないことがわか った場合、電極間の電流がコットレル関係に従って変化していないという表示が 出される。

また、複数の電流測定値を利用して、移動した総電荷量Ｑが計算される。そして 、Ｑは最終的な結果を計算する第２の手段として用いることができる。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）匿 平成４年５月１３日

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．反応域を流れる電流が所定のコットレル電流との関係に従って変化している かどうかを判定するためのバイオセンサシステムであって、 分析対象反応体を有する反応域及び電極手段を含むテストセルと、 分析対象物を含有するサンプルを前記反応域に入れた後で複数の測定時間におい て前記反応域を流れる電流読取り値を複数回測定する手段と、 連続する２つの測定時間について、一方の測定時間の平方根を後続の測定時間の 平方根で割ったものの逆数を示す比較定数を少なくとも１つ記憶する手段と、前 記対をなして連続する２つの測定時間において測定された電流読取り値の比を算 出する手段と、前記電流読取り値の前記比と、前記対をなして連続する２つの測 定時間の前記比較定数と、の類似性を比較して表示する手段と、 を含むことを特徴とするシステム。
2. ２．前記記憶手段は複数の連続する測定時間についての複数の比較定数を含み、 前記算出手段は前記連続する測定時間にて測定された電流読取り値の比を算出し 、前記比較手段は前記比を対応する比較定数と比較し、前記システムは前記電流 読取り値が前記コットレル電流との関係に従っているかどうかを判定することを 特徴とする請求項１記載のシステム。
3. ３．前記テストセルは反応域で伸長する２つの電極を含み、前記電極は分析対象 反応体を含有する層によって覆われていることを特徴とする請求項２記載のシス テム。
4. ４．前記サンプルが前記反応域に入れられる前に検出オートドロップ電圧を電極 に印加する手段と、前記オートドロップ電圧を前記電極から除去するとともにバ イオセンシングテストシーケンスを開始させる出力信号を発生させ、前記反応域 に前記サンプルが存在することを示す電流スパイクを前記テストセルから検出す る手段と、 を含むことを特徴とする請求項３記載のシステム。
5. ５．反応域を流れて、その反応域の分析対象物の濃度に依存するとともに、コッ トレル方程式にて定義された形状を有する曲線の一つに従って変化する電流ｉを 測定するシステムにおいて、前記電流がコットレル方程式に従って変化している ことを判定する方法であって、（ａ）電流値ｉｎ，ｉｎ＋１，１ｎ＋２・・・を 算出するために複数の測定時間ｔｎ，ｔｎ＋１，ｔｎ＋２・・・にて前記電流ｉ を測定する工毛呈と、 （ｂ）比較定数を得るために、√ｔｎ＋１／√ｔｎの比の値を少なくとも算出す る工程と、 （ｃ）ｉｎ／ｉｎ＋１の比の値を計算する工程と、（ｄ）工程（ｂ）で計算した 比較定数を工程（ｃ）で計算した比と比較する工程と、 （ｅ）前記比較が非類似を示した場合に、前記測定電流が前記コットレル方程式 に従って変化していないことを示す信号を発する工程と、 を有することを特徴とする方法。
6. ６．複数の比較定数を求めるために、工程（ｂ）で定められた比は複数の測定時 間ごとに計算されることを特徴とする請求項５記載の方法。
7. ７．工程（ｃ）で定められた比は、請求項６の比較定数を算出するために用いら れた各測定時間ごとに測定される電流のために計算されることを特徴とする請求 項６記載の方法。
8. ８．工程（ｄ）は、比較定数と対応する測定時間で工程（ｃ）にて算出された比 とを比較し、工程（ｅ）は、前記比較のいずれもが類似していない場合に信号を 発することを特徴とする請求項７記載の方法。
9. ９．工程（ｂ）で定められた前記比較定数はあらかじめ計算されて記憶されるこ とを特徴とする請求項８記載の方法。
10. １０．反応域を流れて、その反応域にある分析対象物の濃度に依存するとともに 、前記分析対象物の濃度値を示すコットレル方程式によって定義される曲線の一 つに沿って変化する電流ｉを測定するためのシステムにおいて、測定期間中に測 定される前記分所対象物の濃度測定の正確さを確認する方法であって、 （ａ）前記測定期間中の所定時間での前記電流ｉの値を測定する工程と、 （ｂ）前記測定期間中の複数の測定時間で前記電流ｉの値を測定する工程と、 （ｃ）前記測定期間中に移動した全電荷量の表示を導き出すために前記連続する 測定時間において前記電流値を積分する工程と、 （ｄ）工程（ｂ）および工程（ｃ）で算出された前記値が、分析対象物の濃度値 と類似していない場合にエラーの表示を発する工程と、 を有することを特徴とする方法。
11. １１．工程（ｄ）が、 ｄ１）工程（ａ）で測定された前記電流ｉの測定値を分析対象物の濃度値に変換 する工程と、 ｄ２）前記移動した総電荷量を示す値を分析対象物の濃度値に変換する工程と、 ｄ３）工程ｄ１）および工程ｄ２）から得られた濃度値の類似性を判定するため にこれらを比較する工程と、を含むことを特徴とする請求項１０記載の方法。
12. １２．一対の電極間と通常は高インピーダンスを有する中間化学反応域を流れる 電流ｉを測定するシステムにおいて、流体サンプルを含有する分析対象物が前記 反応域に存在することを判定する方法であって、 前記電極間に電位を与える工程と、 前記電極間のサージ電流を検出する工程と、前記流体サンプルが前記反応域に存 在することを示す前記サージ電流を検出すると同時に前記電極から前記電位を除 去する工程と、 を有することを特徴とする方法。