JPH05502219A - 安定な治療用放射性核種およびそれを調製する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 安定な治療用放射性核種およびそれを調製する方法発明の技術分野 本発明は、一般に安定な治療用（ｓｔａｂｌｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）放射 性核種−標識組成物に、およびその調製およびその安定化方法に放射線標識組成 物は医学診断および治療において重要な道具である。この組成物は深い静脈血栓 の診断、リンパ節病理学の研究、および新生物の検出、期（ｓｔａｇｉｎｇ）お よび処理を包含する多くの技術に用いられている。インビボ診断または治療適用 についての放射線標識組成物を用いる場合には、放射性核種標的組織に選択的に 局在することが重要である。それ故、一般に、放射性核種か標的剤（ｔａｒｇｅ ｔｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ）に結合して、興味ある特定の細胞または組織により選 択的に結合または吸着させる。

一般的に、放射性核種はキレート化剤に結合し、キレート化剤は標的部分（ｔａ ｒｇｅｔｉｎｇ　ｍｏｉｅｔｙ）に結合して標的細胞または組織の特異集団に選 択的に結合することのできる放射線標識組成物を生成する。

＊　＊　ｖａ　Ｔ　ｃ　、　Ｉコ１　■、１２コ　Ｉ、　Ｉ　Ｉ　７　ｍ　Ｓｎ 、　ｌ１ｌ（ｎ　、　ＩＩコＩｎ　ｓ　ｇ７Ｒｕ、７１Ｂｒ、）７Ｂｒ、２１ｐ ｌ、　、＋１）’、　＠７Ｇａ、　＊＊Ｚｒおよび＠４ｃｕのような放射性核種 は診断画像化剤（ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｉｍａｇｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ）とし て用いるのに提案されている。＊　Ｉ　ｍＴ　ｃは特に有望な１種の診断画像化 剤である。テクネチウム−９９ｍは、生理食塩水をモリブデン含有マトリックス を介して溶離することによって発生器において工業的に作られている。かかる溶 出液において、準安定性テクネチウム同位体は化学的に安定な酸化過テクネチウ ム酸塩形態９９°ＴｃＯ，−で確められている。過テクネチウム酸塩９９　ｍ　 ’［’ｃは＋７の原子価状態を有しているために、放射性核種組織画像化のため のもっとも一般的に使用されているキャリヤーと複合しない。それ故、　Ｉ　９ 　ａ　Ｔｃ　０４−は、　′＠“ＴｃＯａ−等優性食塩水と第一錫、第一鉄およ び第一クロム塩のようなテクネチウム還元体および硫酸および塩化水素酸のよう な酸とを混合することによって、　９９“ＴｃＯ”＋および９９　ｍ　Ｔ　ｃ　 Ｏ□“のような低い酸化状態に、一般に還元される。

２Ｐおよび＋３１１のような治療用（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）放射性核種は真 性赤血球増加性および転移性（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ）甲状腺がん腫のような悪 性腫瘍の治療に用いられている。多くの放射性核種は、α−エミッター（ｅｍｉ ｔｔｅｒｓ）、低い、中間のおよび高い範囲のβ−エミッター、および電子捕獲 および／または内部転移（オージェを子）を介して作用する放射性核種を包含す る治療適用に用いられている。　２１１　Ａ　ｔのようなα−エミッター源は比 較的に限られているけｎども、β−源ははるかに多い。４７ｓｃ、＠７ｃｕ、１ ３１■、＋５２５ｍ、　ＩＱＱｐｄ　、１０５Ｒｈおよびｌ＠ａＲｅを包含する 多くの中間範囲のβ−源は治療適用に提案されている。１３１１は抗体−指向治 療（ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ　ｔｈｅｒａｐｙ）にしばしば用いら れているが、しかし放射した多量の高エネルギーγ−線および脱ハロゲン化のた めに高い非標的毒性を受ける。　１３１１治療用組成物の脱ハロゲン化に関連し た関係は、欧州公告特許第０２０３．７６４号明細書に記載されているようにバ ラ−ヨードフェニル部分の付着によって実質的に減少されている。治療投与に潜 在的に適当な広い範囲のβ−粒子源は２２Ｐ、ｓｏｙおよび１１１１７ｅを含ん ている。また、１８＄１１７ｅおよび１■Ｒｅは、普通のγ−カメラ器機を用い て容易に監視するレニウム放射性薬品の生物分配を与える９９“Ｔｃのγ−放射 と実質的に同じエネルギーでγ−線を放射する。

β−放射する（ｂｅｔａ　ｅｍｉｔｔｉｎｇ）放射性核種を含む治療用組成物は 調製中およびインビトロ貯蔵中に放射分解を受ける。放射分解中、放射性核種か らの放射は分子間−および分子内−分解を生ずる錯体または化合物、または近似 の他の化合物の他の成分を侵す。放射性核種キレート、放射性核種キレート標的 剤結合、または標的剤の特異性付与部分の分解または破壊は非標的放射能を生ず るから、放射線分解崩壊は重大な安全関係を提起する。機能標的剤に結合しない 放射能は非標的組織に蓄積し、および投与前または投与中における放射性核種組 成物の分解は標的ポテンシャルを著しく低下し、このために治療用放射性核種組 成物の毒性を高めることになる。特に、インビボ投与に試みる治療用の放射性核 種調剤に関して、放射性部分を標的部分に安定して結合し、標的剤の特異性を保 護することか重要である。

９９′″Ｔｃ、および１Ｉ１６Ｒｅおよびｌｌ５Ｒｅを含む放射性レニウムは■ Ａ族同族体である。レニウムおよびテクネチウムは大きさ、形状、双極子モーメ ント、形式電荷、イオン移動度、親油性などのような多くの物理的特性を共有し ている。例えば、９９　ｍ７　ｃについて開発されたおよび／または使用された 多くのキレート化剤はレニウム放射性核種と用いるのに適当である。しかしなが ら、レニウム放射性核種を含む研究は、まだ比較的予備段階であることから放射 性レニウム治療組成物の特性についてあまり知られていない。高酸化状態に移動 する低酸化状悪の不安定なレニウム錯体の結果として形成する過レニウム酸塩（ Ｒｅ０４−　）はレニウム放射性核種組成物の一次分解生成物である。

Ｅ、　Ｄｅｕｔｓｃｈ氏らによる［治療および診断核医学におけるレニウムおよ びテクネチウム元素の同位体の使用に関するレニウムおよびテクネチウムの化学 」と題する文献、ｒ　Ｎｕｃｌ、　Ｍｅｄ。

Ｂｉｏｌ、　Ｊ　Ｖｏｌ、　１３．　Ｎｏ、　４　、４６５〜４７７　（１９８ ６）ｌ：は、テクネチウムおよびレニウム放射性核種の比較特性、および治療お よび診断核医学についての適用について記載されている。テクネチウムおよびレ ニウムはいずれもレドックス化学的性質を示し、過テクネチウム酸塩および過レ ニウム酸塩のそれぞれはキレート化剤との化学反応の前に低酸化状態に転換する 必要かある。レニウムの化学的性質はテクネチウムの性質と異なるが、しかしな がらレニウム放射性薬品の開発はしばしば９Ｑ″″Ｔｃ放射性薬品の既知の化学 的および生物学的挙動において断定することができない。極めて関連する化学的 相違点は、レニウム錯体が、過レニウム酸塩の形態において、テクネチウム類似 体より高酸化状態で熱力学的に極めて安定であることである。それ故、レニウム 組成物はそのテクネチウム類似体より還元し難く、および還元レニウム放射性薬 品は類似のテクネチウム放射性薬品より極めて容易に過レニウム酸塩に後方に再 酸化する傾向かあり、還元レニウム放射性薬品は過テクネチウム酸塩に後方に再 酸化する。

Ｄｅｕｔｓｃｈ氏らにより、　”’Ｒｅ（Ｓｎ）−ＨＥＤＰ　（ＨＥＤＰ＝（１ −ヒドロキシエチルインデン）ジホスホネートおよび（’　”Ｒｅ（ＤＭＰＥ） ｚ）“、ＣＤＭＰＥ＝１．２−ビス（ジメチルホスフィノ）エタン〕を包含する ＊　＊　＠ＴｃＴｃ骨素探索ｏｎｅ−ｓｅｅｋｉｎｇ）用放射性薬品のレニウム 放射性核種類似体を調製している。これらの共役体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ）に おいて、放射性核種は無機ジホスホン酸塩標的剤に直接に結合する。研究者はレ ニウム製剤の特性およびそのインビボ生物分配を相当する９　９　ｖａ　Ｔ　ｃ 類似体と比較している。レニウム錯体の過レニウム酸塩への分解はテクネチウム 類似体の過テクネチウム酸塩への分解よりはるかに優勢であった。過レニウム酸 塩の存在は最初の合成における過レニウム酸塩の不完全還元、付随的酸素による レニウム錯体の過レニウム酸塩の再酸化、およびレニウム放射性核種錯体の不均 化に帰因した。Ｄｅｕｔｓｃｈ氏らは、レニウム放射性核種調剤のクロマトグラ フ精製が満足な純度レベルを得るのに必要であることを見出している。アスコル ビン酸を酸化防止剤として用いるのに提案されたが、しかし精製調剤は嫌気処理 を必要とし、発生後、できるたけ速やく用いるようにしている。Ｄｅｕｔｓｃｈ 氏らは、準安定な骨かんの診断に用いた０ｓ″Ｔｃ（Ｓｎ）　−ＨＥＤＰ放射性 医薬品に類似する骨への転移かんの軽減治療における”’Ｒｅ（Ｓｎ）−ＨＥＤ Ｐ放射性医薬品の好結果の展開はレニウム放射性核種のレドックス特性を制御す る能力に影響することを確めている。

治療用放射性核種の安定化は治療用の放射性核種共役体の分野に繰り返し挑戦さ れている。一般に、放射性組成物の安定化は、他の構造的に類似する化学組成物 の安定化より所望とする特性を失なわないで達成することが極めて困難である。

治療用放射性核種組成物は診断用の放射性核種組成物と異なる挙動をし、かつ一 般に安定性が乏しい。

治療用放射性核種組成物の分解は、一般に速やがてあり、臨床用の放射性核種製 剤は投与の直前に調製されている。この事は、治療の容易さか実験容易さを有し ており、および当業技術者か放射性核種をキレート化し、かつ放射性核種を標的 部分に共役することを含む放射性材料の取扱いに必要であることを要求している 。さらに、有意な供給源は、治療用放射性核種組成物の精製後、ただちに患者に 与えられるようにする。製剤が汚染され、または純度要件を満たさない場合には 、患者は二回目の製剤についての相当な時間待つか、または外傷を受けるしばら くの間を待つようにする。この遅延は患者に外傷を与え、かつ有効な容易さおよ び個人の力量を浪費することになる。治療用放射性核種組成物の効果的なインビ トロ安定化は治療用の放射性核種組成物の中心的に制御された製剤にし、これに より高純度レベルの治療用組成物に著しく影響をうけやすくする。

発明の概要 本発明の方法は有効量の安定剤を加えることによって治療用放射性核種を安定化 することである。治療用放射性核種組成物の効果的なインビトロ安定化は、組成 物をインビボ患者投与に試みる場合に臨界的である。放射性核種組成物の純度レ ベルは、一般に標的に結合した放射性核種対調剤中の全放射性核種の比として測 定する。ヒトに投与できる放射性核種調剤の純度に関する制限は厳格にする。一 般に、調剤は少なくとも９０％純粋にし、少なくとも９５％純粋にするのが好ま しい。勿論、高純度レベルは好ましいが、しかし約９０％以下の純度レベルはイ ンビボヒト投与に適当でない。

治療用放射線標識化合物と用いる安定剤は次に示す特性を有するのが好ましい： すなわち、使用条件下で毒物学的に許容しうること；インビボ投与に適当である こと：化合物を標的細胞または組織に与えるのに妨げないこと；および使用前の 調製および貯蔵中の適度な期間において調剤が安定であることである。

本発明において用いる安定剤の重要な利益の１つは調製し、精製した放射線標識 組成物を少なくとも数時間にわたって、および数日間にわたってインビトロ貯蔵 できると共に、許容しうる純度レベルを維持できることである。

本明細書において用いられている「治療用放射性核種組成物」とは標的部分と錯 化したまたは結合した治療特性を有する放射性核種を意味する。本発明の治療用 放射性核種組成物はレニウム放射性核種のようなレドックス化学的性質を示す治 療用の放射性核種を組合わせるのが好ましく、および／または過酸化物のような 放射線分解生成物、および１３１１のような遊離基を生ずるように分解する傾向 がある。本発明の治療用放射性核種組成物はｌ＠６Ｒｅ、ｌ１１８Ｒｅなどのよ うなβ−線放射同位体を含むのか好ましく、かかる同位体はキレート化剤のよう な種々の他の成分および標的部分と錯化または結合することかてきる。蛋白質標 的部分に結合するキレート化剤に結合した治療用放射性核種を含む治療用放射線 免疫共役体（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｒａｄｉｏ−ｉｍｍｕｎｏ−ｃｏｎ　ｊ ｕｇａｔｅｓ）は特に好ましい。β−およびγ−線を放射するレニウム放射性核 種、１１８Ｒｅおよび１ｇ８Ｒｅは本発明の安定な治療用組成物に用いるのに好 ましい。

安定剤は、好ましくはヒト患者にインビボ投与するのに適当な水溶液の状態の治 療調剤に導入する。適当な安定剤としては酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、 ゲンチシン酸および機能的に類似する化合物、および攻撃剤（ｃｈａｌｌｅｎｇ ｉｎｇ　ａｇｅｎｔｓ）、例えばインビボ投与できるＤＴＰＡ　（ＤＴＰＡ＝ジ エチレントリアミンペンタアセテート）　、ＥＤＴＡ　（ＥＤＴＡ＝エチレンジ アミンテトラアセテート〕などを例示することかできる。一般に、酸化防止剤は 放射性核種をその還元状態に維持するか、攻撃剤は酸化、例えばＦｅ＋３／Ｆｅ ＋２を促進する結合しないまたはゆるく結合した金属を有する錯体を形成する。

安定剤を治療調剤の精製中に用いた溶出液に含有する場合に、安定性か高められ ることを観察した。

アスコルビン酸は好ましい安定剤である。また、相容性のアルブミン部分および 血清蛋白質を本発明における安定剤に混合することかできる。酸化防止剤または 攻撃剤と組合わせたＨ３Ａを含む安定剤は、治療用放射性核種組成物を１日また は２日以上にわたる長期間の安定化を与えることができる。

放射性レニウム化合物の既知のまたは予期する特性を考慮して、安定剤、例えば アスコルビン酸、単独または他の安定剤との組合わせは治療用放射性核種組成物 の長期にわたる安定化を与えることは予期しないことである。本発明における安 定剤の使用は、嫌気条件下て結合（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）および／または精 製を実施し、および精製後たゾちに調剤を使用するきびしい安定化手段を適用す る必要性を除去することかできる。本発明における安定剤は、放射性成分（例え ばＩＬＪｅ、ｌ１ｌＲｅ）を再酸化するおよび放射線分解の作用に帰因する治療 用放射性核種組成物の分解を効果的に減少する。数時間から数日間にわたる長期 インビトロ安定性は本発明による安定剤により得ることかでき、および治療調剤 の有効性および効力を高めると共に、通常の非標的細胞および組織における毒性 を軽減する。

本発明の安定な治療用放射性核種組成物は種々の放射線標識組成物を含んでいる 。放射線免疫共役体は、治療用放射性部分（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｒａｄｉ ｏａｃｔｉｖｅ　ｍｏｉｅｔｙ）かある標的細胞および／または組織についての 特異性を有する蛋白質標的部分に結合する１種の好ましいクラスの組成物である 。本発明の組成物に用いるのを企図する治療用放射性核種はＩａＪｅ、　＋８８ Ｒｅ、１５３３ｍ１”Ｙ、１°５Ｒｈ、　１３１工なとのようなβ（およびγ） 放射放射性核種を包含している。また、ランタニド系列の放射性同位体は治療効 果を示し、かつ本発明の治療用放射性核種組成物に適当に使用できることが確め られている。＋７以下の酸化状態を有する＋　８６　ＲｅおよびＩｓ＊Ｒｅを包 含する還元レニウム放射性核種は本発明の治療用組成物に用いるのに好ましい。

本発明の治療用放射性核種組成物に混合する適当な標的部分は蛋白質およびポリ ペプチドを含む標的部分を含んでおり、これらは炭水化物部分、例えば多糖、糖 蛋白質または炭水化物部分を有する他の化合物を含んでいる。好ましい蛋白質標 的剤は抗体、受容体（特に、レクチンのような細胞表面受容体）、酵素（例えば 、繊維素溶解酵素）、生物的応答変性剤（ｂｉｏｌｏｇｉｃｒｅｓｐｏｎｓｅ　 ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ）　（例えば、インターロイキン、インターフェロン、リン フ才力イン、エリトロポエチン、成長因子、コロ二刺激因子なと）、ペプチドホ ルモンおよびそのフラグメントを包含している。また、徴集台アルブミン（ＭＡ Ａ）などのような徴集台蛋白質（ｍｉｃｒｏａｇｇｒｅｇａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅ ｉｎｓ）は標的部分として用いることができる。単クローン性抗体またはそのフ ラグメントは特に好ましい蛋白質標的部分である。多くのうち、使用できる上記 単クローン性抗体は抗−ＴＡＣ、または他のインターロイキン−２受容体抗体、 　９．２．２７およびＮＲん化−０５〜２５０キロダルトンのヒト黒色腫−結合 プロテオグリカン、　ＮＲＬＵ−１０〜３７−４０キロダルトンの全がん腫（ｐ ａｎｃａｒｃｉｎｏｍａ）糖蛋白質２クロニ特異性を有するＮＲＣＯ−０２、お よび０ＶＢ−３〜未確認の腫瘍−結合抗原を例示できる。また、既知のまたはま だ分離されていない多くの抗体は本発明において適当に用いることができる。ハ イブリドーマから、または遺伝蛋白質工学技術により誘導した抗体は用いること ができる。

標的部分（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｍｏｉｅｔｉｅｓ）は必要により変えることが でき、意図する治療適用に必要なできるだけ長い生物活性を維持する。例えば、 組変えＲＮＡ技術により生成し、かつ非ヒト源から誘導した特異性決定蛋白質、 およびヒト源から誘導した他の蛋白質を有するキメラ抗体は治療用放射性材料に 共役して本発明による放射線免疫共役体を得ることがてきる。本発明において用 いる抗体は完全な（ｉｎｔａｃｔ）分子、そのフラグメント、またはその機能同 等物（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｓ）を含んでいる。抗体フ ラグメントとしては、例えば普通の方法によって、または遺伝または蛋白質工学 技術によって生成できるＦ（ａｂ’　）ｚ、Ｆａｂ　’、ＦａｂおよびＦｖフラ グメントを挙げることができる。また、単鎖抗体と称する工業的（ｅｎｇｉｎｅ ｅｒｅｄ）抗体を用いることができる。

レニウム放射性核種を含む放射線免疫共役体は、一般に放射性核種をキレート化 剤において安定に結合し、次いて放射性核種金属キレートの部分を蛋白質標的部 分に結合することによって生成する。多くの金属キレート化剤はｓ９“Ｔｃのよ うな診断剤をキレート化する技術において知られており、多くのキレート化剤は １８６Ｒｅおよび１ｓｓＲｅなどのような治療用放射性核種をキレート化するの に適当である。窒素および硫黄供与体原子を有する金属キレート化合物、例えば ジチオジアミノカルボン酸およびジチオジアミドカルボン酸（Ｎ＝Ｓ２キレート 化剤として知られている）、およびチオトリアサ　キレート化合物（Ｎ３Ｓキレ ート化剤として知られている）が好ましい。次の一般式を有するキレート化合物 が好ましい： 式中： ＴはＨまたは硫黄保護基を示し； ＸはそれぞれＨ２または０を示し： Ｍは放射性核種イオンを示し、これには１または２個の酸素原子を結合すること ができ； Ｒはそれぞれ水素、アルキル、ジェミナル　ジアルキル、システィン以外のアミ ノ酸の非アルキル側鎖（Ｒがアルキル基である場合に、アルキル側鎖をおおう） 、および−（ＣＨ２）、　−Ｚを示し； Ｚは−Ｃ００Ｈ１共役基、または標的化合物を示し：ｎは１〜約４の整数を示し ： Ｒ′はＨ２、−（ＣＨ２）。−Ｚ、または１または２個以上の置換極性基を有す るアルキル基を示し；および化合物は、Ｚが共役基または標的化合物である少な くとも１個の−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ置換基を示す。

共役基は所望の標的部分の基と反応して放射性核種金属キレートを標的剤に結合 する官能基である。蛋白質標的部分は種々の官能基、例えばキレート化剤の適当 な共役基との反応に役に立つカルボン酸（ＣＯＯＨ）または遊離アミン（−ＮＨ ２）基を含んでいる。例えば、キレート化剤の活性エステルは蛋白質のりシン残 基の遊離アミン基と反応してアミド基を形成する。あるいは、また蛋白質および ／またはキレート化剤は付加反応性官能基を露出または付着するように誘導する ことができる。誘導は任意の多くの結合分子を付着することを含んでいる。ある いは、また誘導は、例えばキレート化剤のマレイミド共役基と反応する遊離スル ホヒドリル基を生ずる蛋白質の化学処理を含んでいる。

蛋白質標的剤と反応する好ましい共役基にはエステルが存在する。「Ｚ」で示す 共役基として利用できるエステル水性媒質においてポリペプチドと共有アミド結 合を与えるエステルである。いずれかの反応エステルは、特定の放射性核種によ って、ペプチド化学の技術において知られているような蛋白質、および共役の条 件を与える。使用される一般のエステルとしては〇−オよびｐ−ニトロフェニル 、２−クロロ−４−二トロフェニル、シアノメチル、２−メルカプトピリジル、 ヒドロキシベンズトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシ　サクシンイミド、トリクロロ フェニル、テトラフルオロフェニル、チオフェニル、テトラフルオロチオフェニ ル、０−ニトロ−ｐ−スルホフェニル、Ｎ−ヒドロキシフタルイミドなどを挙げ ることかできる。

あるいは、また標的剤か炭水化物部分を有する場合には、誘導は炭水化物の化学 処理、例えば糖蛋白質抗体の糖部分を過ヨウ素酸塩により遊離アルデヒド基を生 成するグリコール開裂を含んでいる。抗体の遊離アルデヒド基はキレート化剤の 遊離アミンまたはヒドラジン共役基と反応してこれに放射性核種金属キレートを 結合する。

適当な金属キレート化剤は欧州公開特許第０１８８２５６号および第０２８４０ ７１号明細書、および米国特許出願第０７／３６７、５０２号明細書（１９８９ 年６月１６日出願）に記載されている（これらの文献を引用例としてこ−に加え る。）。また、当業技術において知られている他の金属キレート化剤は本発明の 治療用放射性核種組成物に適当に用いることができる。

キレート化剤は相当する放射性核種金属キレートを形成するように放射線標識し 、次いでキレートを「予備形成キレート手段」において標的部分に付着する。放 射線標識標的部分を作る他の手段は「後形成キレート手段（ｐｏｓｔ−ｆｏｒｍ ｅｄ　ｃｈｅｌａｔｅ　ａｐｐｒｏ−ａｃｈ）　Ｊであり、この場合キレート化 合物を、先づ蛋白質または炭水化物標的分子に付着する。次いで、生成する共役 体（ｃｏｎｊｕ−ｇａｔｅ）を放射性核種金属と反応して標的分子に結合した放 射性核種金属キレートを生成する。

放射線標識レニウム免疫共役体を次のようにして作ることかてきる：使用する治 療用放射性核種によるが、多くの技術を放射性核種金属キレートを作るのに利用 することができる。過レニウム酸塩（ＲｅＯ，−）は、一般にキレート化剤と反 応する前にＲｅｄ”　、ＲｅＯ□“などに還元する。本発明の１例において、過 レニウム酸塩は第一錫化合物などと反応して還元し、くえん酸のような転移剤（ ｔｒａｎｓｆｅｒ　ａｇｅｎｔ）と反応して弱いくえん酸レニウム錯体を生成す る。次いで、還元レニウム放射性核種くえん酸塩錯体をキレート化剤と反応させ 、放射性核種をリガンド（キレート化剤）に転移する。この反応は活性エステル 部分または他の共役基を有する放射性核種キレート中間体を生成する。

キレート化反応が完了した後、緩衝剤（ｐＨ９，５〜１０）を導入したキレート 化放射性核種溶液のｐＨを上げる。次いで、標的部分の緩衝溶液をキレート化放 射性核種と混合する。放射性核種金属キレート中間体の活性エステル部分は、一 般に蛋白質標的剤のりシン残留物にアミド結合により結合するが、しかし、また 他のタイプの結合を用いることができる。

共役反応が完了した後、放射性核種組成物を精製して未反応成分、望ましくない 反応副生物および分解生成物を除去する。

分子量によって分離するゲル透過カラム、および帯電特性によって分離するイオ ン交換クマロトグラフィー、例えばＱＡＥ陰イオン交換を包含する種々の精製技 術を用いることができる。

本発明の好適例を抗体に結合したレニウム放射性核種キレートを含む放射性免疫 共役体について記載したけれども、他のタイプの標的部分を本発明の安定な治療 用放射性核種組成物に用いることかできる。治療用放射性核種は、当業技術にお いて知られている技術を用いて他の蛋白質標的部分に結合することかできる。キ レート化剤および／または既知の結合分子を用いて放射性核種を他の標的剤に結 合することができ、また直接標識技術を用いることができる。

放射性ハロゲン標識標的剤を含む放射線免疫共役体は、一般に小さい放射線標識 分子により生成し、次いて小さい放射性ハロゲン化分子を蛋白質標的剤に結合す る。例えば、治療用放射性核種１２１１１は式”ｘ−Ａｒ−Ｒを有する小さい分 子に混入するのか好ましい。この式において、　９Ｘは放射性ハロゲン（”’Ｉ ）を示し：Ａｒは芳香族またはへテロ芳香族環を示し；およびＲは放射性ハロゲ ンを置換する環Ａｒを著しく活性化しない、および蛋白質標的剤の生物活性を保 護する、ゆるやかな、例えばアシル化条件下で蛋白質標的部分に結合するのに適 当な官能基を有する短鎖の置換基を示す。Ａｒ環としては、例えばベンゼン、ピ リジン、フランおよびチオフェンか好ましい。放射性ハロゲン３Ｘは、放射性ハ ロゲンを脱ハロゲナーセ酵素により異化作用を受けやすくしない、置換基Ｒに関 するＡｒ環のｐ−またはｍ−位が好ましい。Ａｒ環における放射性ハロゲンの炭 素原子への付着は、芳香族またはへテロ芳香族環の炭素−炭素結合の高められた 結合強さのために、アルキル炭素原子に付着するのか好ましい。Ａｒ環の性質は 臨界的てなく、単環、二環式、三環式にすることができ、または多くの環を含む ことができるが、しかじ単環が好ましい。Ａｒ環はすべての炭素原子からなり、 または窒素、酸素または硫黄のようなヘテロ原子を含有することができる。　” ｘおよびＲを除いて、Ａｒ環におけるニトロ、スルホン酸、カルボン酸またはジ アルキルアミノ基のような極性置換基による置換は水溶液における溶解性を高め るので好ましい。

ｒＲ，＋は次の要件に合った任意の置換基を示す。第１に、Ｒ置換基は、Ａｒ環 を電子性置換基に向は著しく活性にしないようにする。換言すると、Ｒは、Ａｒ に結合した場合に、遊離ヒドロキシまたは第一アミノ置換によって生じた増加の 程度にＡｒの電子密度が増加する置換基にすることができない。第２に、Ｒを短 鎖の置換基にする必要かあり、このために結合しないまたは開裂した放射性ハロ ゲン化分子は腎臓により速やかに除去することができる。それ故、Ｒはアリール 結合と蛋白質共役についての官能基との間にアルキルまたは他のスペーサー鎖（ ｓｐａｃｅｒｃｈａｉｎ）を含めることができるか、しかしこのスペーサー鎖は ５個以下、好ましくは３個以下の直鎖炭素原子を含有することが好ましい。第３ に、Ｒ置換基は、ゆるやかな共役条件下で、蛋白質のアミノ酸または炭水化物残 留物、糖蛋白質、または他の蛋白質標的部分における相当する官能基（または共 役付着位置）に共有付着するのに利用される官能基（こ＼に「Ｑ」と称する）を 有する必要かある。代表的なＲ置換基はイミド　エステル、アルキルイミド　エ ステル、アミドアルキルイミド　エステル、イミダート（ｉｍｉｄａｔｅ）エス テル、アルキルイミダート　エステルおよびアミドアルキルイミダート　エステ ルを包含している。

蛋白質部分への共役のために適当な官能基Ｑはフェノールエステル（例えばｐ− 二トロフェノール）、イミドエステル（例えばスクシンイミド　エステル）、イ ミダート　エステル、無水物、アシルスクシンイミド、アルデヒド、イソチオシ アネート、チオール、ジアゾ、アミン、ヒドラジン、アルキル　ハロゲン化物、 ミハエリ受容体（Ｍｉｃｈａｅｌ　ａｃｃｅｐｔｏｒ）　ａ　、　β−不不飽和 力水ボニル化合物例えばマレイミド、および分子が蛋白質に共有結合を介して付 着するのに使用できる他の基を包含している。また、Ｒ置換基が官能基Ｑの先駆 物質を有する式■の小さい放射性ハロゲン化分子を与えることができる。適当な 先駆物質はＱかフェノールエステルであるカルボン酸、イミドエステル、無水物 、アシルスクシンイミドまたはマレイミド：Ｑがイミダートエステルであるニト リル：Ｑがアルデヒドであるアルコール、Ｑかイソチオシアネート、チオール、 ヒドラジンまたはアミンであるハロゲン化物；およびＱかジアゾまたはマレイミ ドであるアミンを包含している。

本発明において代表的な小さい放射性ハロゲン化分子は次の式を有する化合物を 包含している： （式中、Ｘは１３１■のような放射性ハロゲン；ｎは整数；およびＱは上述する 官能基を示す） 放射性ハロゲンは芳香族環Ａｒのどこにでも位置することができるが、しかしｐ −またはｍ−置換は、デョーデナーゼ（ｄｅｉｏｄｉｎａｓｅ）酵素によりステ アリンネ安定（ｓｔｅａｒｉｃ　１ｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ）および異化作用に影 響されやすくない放射性ハロゲンにするために好ましい。スペーサー成分（ＣＨ ２）、、は１２個まで、好ましくは５個以下の直鎖炭素原子を有する直鎖または 側鎖アルキルまたはヘテロアルキル基にすることができる。もっとも好ましい例 においては、３個以上の直鎖炭素原子が官能基を芳香族環から分離する（すなわ ち、ｎ＝０．１．２または３）。診断画像についてのバックグランド活性を速や かに明確にするために、および生体器官への放射線量を最小にするために、アル キル　スペーサ−成分を短くする必要があり、このために非共役および化学的ま たは酵素的に開裂した放射性ハロゲン化化合物は、心臓または肝臓における脂肪 酸分解通路を経由するより、むしろ、腎臓を介して速やかにきれいにすることが できる。他方において、ある適用において、放射線標識アリール環と蛋白質との 間の短いアルキルまたはヘテロアルキル　スペーサーか望ましい。

本発明における小さい放射性ハロゲン化分子を次に例示するが、これに制限され るものでない二Ｎ−スクシンイミジル−３−（４’　−（１３’Ｉ）ヨードフェ ニル）−プロピオネート；メチル−３−（４’　−（＋３’Ｉ）ヨードフェニル ）プロピオイミダート二Ｎ−スクシンイミジル−４−（”’Ｉ）ヨードベンゾエ ート、メチル−４−（”’Ｉ）ヨードベンズゴミダート：Ｎ−スクシンイミジル −４−［：　＋２’Ｉ）ヨードベンズアミドアセテートまたはＮ−スクシンイミ ジル−４−（”’ｒ）ヨードヒブチート（ｉｏｄｏｈｉｐｐｕｒａｔｅ）　；メ チル−４−（”’Ｉ）ヨードベンズアミドアセトイミダート、および４−　（” りヨードベンズアミドアセトニトリル。

また、式”ｘ　−Ａｒ　−Ｒを有する化合物を合成する方法について記載する。

簡単に云うと、以下に記載する方法学を官能基Ｑまたは官能基Ｑについての先駆 物質を有するハロ芳香族誘導体のメタレート任意位置異性体に用いることができ る。メタレーションには５ｎ（ｎ−Ｂｕ）ｚまたはＳｎＭｅｚのようなトリアル キル錫試薬が用いられる。生成アリール錫化合物を位置−特異的反応において、 次の有機水銀または有機硼素試薬、すなわち、ＨｇＸ２、Ｈｇ（ＯＡｃ）２、Ｂ Ｚ３またはＢＺ、　（こ＼にＸはＢｒ、■または好ましくはＣ１を示し、および Ｚはアルキルまたはアルコキシを示す）の１種でトランスメタレート化する（ｔ ｒａｎｓｍｅｔａｌａｔｅｄ）ことができる。スタニル化（ｓｔａｎｎｙｌａｔ ｅｄ）またはメタレート化（ｍｅｔａｌａｔｅｄ）化合物は、好ましくは官能基 Ｑを形成した後、メタレーション反応を介して放射性ハロゲン化する。

蛋白質剤に結合する小さい放射性ハロゲン化分子は欧州公告特許出願第０２０３ ．７６４および０２８９．１８７号明細書に記載されている（これらの文献を引 用例としてこ＼に加える）。

また、次の式を有する小さいビニル放射性ハロゲン化分子は蛋白質標的剤に結合 することができる：式中、。Ｘは放射性ハロゲン、例えば＋２１１を示し、　Ｃ ＝Ｃは二重結合を示し；Ｒ１およびＲ２は水素原子、アルキルまたは置換アルキ ル基、アリールまたは置換アリール基、ヘテロアルキル基、ヘテロアリール基、 または混合アルキルアリール基を示し；およびＹはＹが水素原子にできない以外 はＲ１およびＲ２についての任意の基を示し、かつ蛋白質の生物活性を保護する 条件下で蛋白質に結合するのに適当な官能基を有する。

これらの化合物は上述する単クローン性抗体のような蛋白質に結合して診断およ び治療適用についての試薬を得ることかできる。

安定剤は本発明の治療用放射性核種組成物に混合する。適当な安定剤としては、 例えばインビトロ　ヒト投与に適当な酸化防止剤および攻撃剤を示すことができ る。酸化防止剤、例えばアスコルビン酸、ゲンチシン酸；その誘導体、例えばそ のニコチンアミド錯体、および機能的に類似する化合物：攻撃剤、例えばＤＴＰ Ａ、ＥＤＴＡなと；および製薬的に許容しうる塩、エステル、アミドおよびその 混合物を含む安定剤が好ましい安定剤である。アスコルビン酸は、適当な高い純 度レベルで入手しやすく、広い濃度範囲にわたってインビボ投与することができ 、治療用放射線標識化合物と化学的または物理的に反応しなく、かつ高レベルの 安定活性が得られるから、特に好ましい安定剤である。

本発明の安定組成物は有効量の安定剤を含み、この有効量の安定剤は治療用放射 性核種を還元状態に維持し、かつ蛋白質標的部分に安定結合するのに十分な量の 安定剤を示す。一般に、放射線免疫共役体を含む治療用放射性核種組成物は患者 に約２０〜３０ｍ１の容量で注射することかできる。この調剤は約１〜約１５ｍ ｇ／ｆｆｉの安定剤、例えば酸化防止剤または攻撃剤、特に好ましくは約７〜ｌ ｏｍｇ／ｍｌの安定剤を含めることかできる。それ故、各放射性核種調剤におけ る安定剤全量は約２０〜約５００ｍｇ　、好ましくは約１２０〜約３００ｍｇに することができる。一般に、所望の安定性を得るのに要求される量の安定剤は全 体として高められ、放射性核種の活性を高める。

本発明における安定剤は精製後、治療用放射性核種組成物に加えることができる 。しかしながら、好適例によると、精製カラムを放射性核種組成物の溶離前に、 安定剤を含む水溶液で調整し、精製生成物を安定剤を含む溶液て溶離する。一般 に、約１ｍｇ／ｍｌまたはこれ以上、好ましくは約２０ｍｇ／ｍｌの濃度のアス コルビン酸水溶液は精製カラムの調整および溶離に好ましい。

また、ＤＴＰＡおよびＥＤＴＡの水溶液はカラム調整および溶離について約２０ ｍｇ／ｍｌまでの濃度にするのが好ましい。

上述する安定剤のほかに、相溶しうるアルブミン部分および／または血清蛋白質 、特にヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を１または２種以上の上述する安定剤と組 合わせて用いる場合に、長時間にわたる安定性を得ることができてる。相溶しつ るアルブミン部分および血清蛋白質は患者に投与する際に、実質的に有害な免疫 応答を誘導しない。適当なアルブミン部分としては、例えば全（天然の）ヒト血 清アルブミン（ＨＳＡ＞　、および自然源および工業源から誘導した非ヒト　ア ルブミン部分：天然の（全またはフラグメント）アルブミン部分に類似するまた は優れている特性を示す変性第１、第２、第３または第４構造を有するアルブミ ン部分；機能的に重要なＨＳＡ　ドメインを含むアルブミン誘導体；、および米 国特許出願第０７／４５９．０６８号明細書に記載されているように天然アルブ ミンと異なる第２および／または第３および／または第４構造を有する「再生Ｊ アルブミン部分を挙げることができる。また、多くの血清蛋白質は安定効果を示 し、本発明における安定剤として用いることができる。

ＨＳＡを酸化防止剤または攻撃剤と組合わせることは安定効果を高めることが研 究により確められている。ＨＳＡ　、同様にアスコルビン酸は十分に高い純度レ ベルで入手しゃすく；治療用放射性核種化合物と反応しなく、および広い投与レ ベルにわたって患者にインビボ投与することかできる。調剤について約５０〜約 ５００ｍｇ　、好ましくは約２２０ｍｇの投与レベルか好ましい。ＨＳＡは精製 後、放射性核種組成物と混合するのが好ましい。

本発明の治療用放射性核種組成物はヒトまたは他の哺乳類宿主に注射することを 意図している。従って、適当な製造手段およびインビトロ貯蔵手段は適当に無菌 で、発熱物質を含まない組成物を得るようにする。必要としないけれども、製薬 的に許容されうる増量剤または充填剤を用いて安定剤および（随意の）キャリヤ ーを稀釈して必要な少量の上記化合物を簡単に秤量することができる。塩化ナト リウムおよびグリコースは好ましいキャリヤーであり、塩化ナトリウムは等張溶 液が得やすいために、特に好ましい。

本発明の安定な治療用放射性核種組成物は必要に応じて稀釈し、哺乳類宿主に、 種々の環境に影響するが、静脈内に、動脈内に、腹膜に、腫瘍内に注射すること によって投与することができる。インビボ投与に適当な治療用１ｔ＠Ｒｅ組成物 は約２５〜約６０Ｏｎ＋Ｃｉ活性、一般に約１００〜約３００ｍＣ１活性の放射 能レベルを有するのが好ましい。インビボ患者治療に調製された治療用組成物は 標的部分、一般に抗体（Ａｂ）またはフラグメントに関して約４μＣｉ／μｇ　 Ａｂ〜約８μＣｉ／μｇ　Ａｂの比較的に高い比活性を有するのが好ましい。患 者に投与するのに望ましい調剤の放射能および比活性のレベルは標的部分、物理 的特性、患者の健康、治療条件などを含む多くのファクターに影響される。

溶離治療用放射性核種組成物の純度は、患者に投与する前に調へて、純度レベル か製薬的に許容しうろことを確める必要かある。純度測定は瞬間薄層クロマトグ ラフィー（ＩＴＬＣ）および高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を包含す る種々の技術によって行うことができる。１２％ＴＣＡ溶剤を用いるＩＴＬＣは 速やかに測定でき、溶液において抗体または他の標的部分に錯化および結合した レニウムの割合を正確に測定することかできる。移動相としてｐＨ７で、０．２ Ｍりん酸緩衝剤を用いるゾルパックス　ジオール（Ｚｏｒｂａｘ　ｄｉａｌ）に よるＨＰＬＣは不純物および分解生成物を確認するのに、および純度レベルを確 めるのに用いることができる。

実験計画案および結果について次の記載はレニウム放射性核種を抗体に結合して 治療用放射性核種組成物およびこの組成物の安定化を得る放射線標識および共役 技術について説明している。本発明は制限されるものでないが、しかし、むしろ 本明細書の特許請求の範囲を維持する目的のための特定実験計画案および結果に ついて記載している。

＋５ｓＲｅについての放射線標識および共役技術臨床治療適用についての１″Ｒ ｅ放射性核種組成物の調製は次のユニのプロセス段階を含んでいる；　（１）　 ”’Ｒｅリガンド　エステルの形成；　（２）　”’Ｒｅリガンド　エステルの 標的部分への共役：（３）　１１Ｒｅ反応混合物の精製：および（４）患者投与 前における最終稀釈および試験。放射性核種の取扱いを含むすべての手順は適当 な遮蔽環境、例えば透明な鉛ガラス煉瓦、鉛煉瓦および鉛シートで遮蔽した層流 フードで行って放射線標識プロセス中、放射線にさらされるのを少なくする。さ らに、調剤はインビボ投与するようにするから、厳格な無菌技術で観察する。

一般に約５０〜約８００ｍＣ１の所望活性および約０．０１〜約０．３ｍｇの所 望の質量を有する可溶性過レニウム酸塩の形態の１１′Ｒｅを反応ガラスびんに 移す。可溶性過レニウム酸塩（”’Ｒｅ０４−）はユニバーシティ　オブ　ミズ ーリ　リサーチ　リアクターから得ることができる。可溶性過レニウム酸塩は約 １ｍｇの塩化第一錫、２５ｍｇのくえん酸、１ｍｇのゲンチシン酸および７５ｍ ｇのラクトースを含む転移剤組成物と反応する。塩化第−錫還元剤対レニウムの 比はモル基準で約１：１〜約１０：１にして効果的な還元を得るようにし、およ びくえん酸対レニウムの比は約２５コ１〜約５００：１にしてくえん酸塩／レニ ウム中間体を効果的に生ずるようにする。キレート化剤はイソプロパツールのよ うな有機溶剤に溶解し、約２５０〜約８００μｇの量で導入して約１＝１〜約１ ＝１．５、好ましくは約１：１．３のｌｌ６Ｒｅ対キレート化剤提供比を達成す るようにする。キレート化反応混合物を８５〜９５°Ｃに加熱し、反応を約３０ 分間にわたり行う。キレート化反応の所望生成物は活性エステル部分を有するキ レート化放射性核種（１８＄１１７ｅ）である。

レニウム放射性核種組成物についての１種の好ましいキレート化剤はＭＡＧＧ　 −ＧＡＢＡと称され、次に示すキレート化活性エステル形態の構造を有している ： 反応混合物のエステル純度はクロマトグラフ技術により定めることができる。

次いで、キレート化放射性核種の活性エステル部分を蛋白質標的部分のリジン残 留物に共役する。約１００μｍの炭酸ナトリウム緩衝剤（ｌ　Ｍ、　ｐＨ＝　１ ０．０）を＋８６１１７ｅ−リガンド　エステル反応混合物に導入し、標的部分 （一般に全またはフラグメント抗体）の水溶液を導入して約０．１：１〜約２５ ．１、好ましくは約２．１〜約５＝１のレニウム対抗体提供比を得る。付加炭酸 塩緩衝剤を導入して兵役反応混合物のｐＨを約９．０〜９．５に上げる。共役反 応は撹拌しながら室温で約１０〜約１２分間にわたって行う。５０μｍのリジン （２５０μｌ／ｍｌ）を（必要に応じて）加えて共役反応を停止する。次いで、 反応混合物を、例えばセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）　Ｇ　−２５カラム を用いるサイズ排除により、またはイオン交換クロマトグラフィーにより精製す る。本発明の好適例により安定な放射性核種組成物を得るために、精製カラムを 安定剤を含む水溶液で予備調整しくｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）、安定化溶 液を精製放射性核種共役体の溶離に用いるのが好ましい。

共役反応混合物を、患者投与のために、必要に応じて稀釈するか、または試験目 的のために数個の部分に分けることができる。

例工 ”’Ｒｅ　ＭＡＧＧ　ＧＡＢＡ　ＮＲＣＯ０２Ｆ（ａｂ’　）２放射線免疫共役 体調剤のインビトロ安定性を全時間にわたって監視した。２種の放射線免疫共役 体調剤を上述する標準放射線標識および共役技術を用いて作った。各放射線標識 免疫共役体調剤をＰＢＳ溶液を用いて溶離し、精製溶離共役体を安定剤として５ ％Ｈ３Ａ溶液（約２２０ｍｇ　ＨＳＡ　）を収容したガラスびんに収集した。調 剤■の全活性は約２５ｍＣｉであり、調剤■の全活性は約１００ｍｃｉであった 。

調剤■を２つのグループに分け、１つのグループの試料を精製し、収集し、４° Ｃに貯蔵し、および他の試料を精製し、収集し、３７°Ｃて貯蔵して温度か放射 線免疫共役体の分解割合に影響するかとうかを調へた。

放射性核種調剤の安定性を種々の時間間隔て調へて調剤の純度レベルを監視した 。安定性をＩＴＬＣ（１２％ＴＣＡ溶剤Ｊ）　ｉ二より、放射線免疫共役体調剤 に結合を残留する放射能の害Ｉ合としてｆｆ、ｌｌ定した。約９０％以下、好ま しくは約９５％以下の純度レベル（よイ放射線免疫共役体純度 ”Ｉ′Ｒｅ　ＭＡＧＧ　ＧＡＢＡ　ＮＲＣＯ０２Ｆ（ａｂ’　）２調剤Ｉ＝２５ ｍＣｉ　調剤Ｋ　＝　１００ｍＣ１時間　４°Ｃ３７°Ｃ時間　３７°Ｃ 上記結果は、高いレベルの放射能を有する放射線免疫共役体調剤は時間にわたっ て有意に低い安定性を示している。調剤Ｉ（２５ｍＣｉ）は約２４時間までの時 間にわたって満足な安定性を存しているか、調剤ＩＩ　（１００ｍＣｉ）は約４ 時間までだけ満足な安定性を示しているだけであった。精製し、収集しかつ４° Ｃおよび３７°Ｃで貯蔵した調剤間には、有意な相違は見られなかった。ＨＳＡ は低い放射能レベルで満足な安定化を与えるか、しかし適度なレベルの安定性を 有する放射性核種組成物（１００ｍＣｉ）は満足な安定性を示さなかった。一般 に、高い全および比活性調剤は極めて著しい分解問題がある。

例■ 安定性を時間にわたって調べた。ＮＲ２ＡＤは非標的特異的（不適切な）単クロ ーン性抗体である。全（最初の）調剤活性は約１３７ｍＣ１、および６．Ｏａｃ ｉ／　μｇ　Ａｂの比活性を有する２、６７：１生成共役体を与える”’Ｒｅ　 ：　Ａｂであった。調剤は上述する標準放射線標識および共役技術を用いて作っ た。共役反応混合物を３種の試料に分け、ＰＤ−１０カラムで精製した。

調剤■は、放射線免疫共役体温合物をＰＢＳて溶離した対照調剤であり、安定剤 は使用しなかった。調剤■は精製放射性核種共役体のカラム調整（ｃｏｌｕｍｎ 　ｃｏｎｄｉｔｉｏ旧ｎｇ）および溶離について用いた安定剤として１−０ｍｇ ／ｍｌのアスコルビン酸を用いた。

調剤■は精製共役体のカラム調整および溶離についての２０ｍｇ／ｍｌのアスコ ルビン酸溶液を用いた。さら」こ、調剤■は別に調製し、調剤■の条件と同じ条 件下で精製したか、しかし２２０ｍｇのＨ３Ａを収集ガラスびんに加えた。結果 を次の表に示す：放射線標疫共役体純度 ”’Ｒｅ　ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲ２ＡＤ時間　調剤■　調剤■　調剤■　調 剤■上記試験結果は、高い濃度のアスコルビン酸（２０ｍｇ／ｍｌは１ｍｇ／ｍ ｌに匹敵する）は高い安定化効果を与え、およびアスコルビン酸およびＨ３Ａの 組合わせは高い長時間安定化効果を示している。精製カラムを調製するのにおよ びカラム溶出液として用いたｉｏｎｇ／ｍｌのアスコルビン酸を含む安定化溶液 は約１８時間まで満足な安定性を示している。調剤■に用いた２０倍の高い濃度 のアスコルビン酸は調剤Ｉおよび■と比べて有意に向上した安定性を示しており 、および調剤■に用いた２０ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸／２２０ｍｇのＨ３Ａ 安定剤は少なくとも９６時間にわたって９５９６以上の放射性核種組成物純度を 維持することを示している。

例■ 比較的に高い比活性を有するＩｓ＠Ｒｅ−〜！ＡＧＧ　−ＧＡＢＡ　−ＮＲＣＯ −０２Ｆ（ａｂ’　）２放射線免疫共役体を上述する標準放射線標識および結合 技術（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）により調製した。全（ 初期の）調剤活性は約２１６ｍＣ１であり、および比活性は７．３μＣｉ／μｇ 　Ａｂであった。調剤を２種の試料に分け、安定性を時間にわたって測定するよ うに監視した。調剤■は安定剤を用いて、しかも共役反応混合物をＰＢＳで溶離 した標準対照調剤であり、および調剤■は上述する例■に記載した調剤■に類似 させた。試験結果を次の表に示す： 放射線標疫共役体純度 ”’Ｒｅ　ＭＡＧＧ　ＧＡＢＡ　ＮＲＣＯ０２Ｆ（ａｂ’　）２時　間　調剤Ｉ 　調剤■ 上記結果は、例■において得た結果、すなわち、精製カラムを調整し、かつ収集 ガラスびんに供給したＨ３Ａとの組合わせの放射線免疫共役体温合物を溶離する のに２０ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸溶液を用いる安定化技術が有意に高められ た長期安定性を与えることを確めた。安定剤を含有しない対照調剤は精製後、た だちに限界的に許容しうる程度の純度を示したにすぎなかった。放射線標識免疫 共役体の長時間安定性（はぼ６日）か７．３μＣｉ／μｇ　Ａｂの高いＩｕＲｅ 比活性で得られた。

例■ 例■に記載した試験を”’Ｒｅ−ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲＬＬＩ−１０放射線 免疫共役体の安定性を試験するのに繰返し行った。調剤を２種の試料に分け、調 剤Ｉおよび■を例■に記載したように精製した。試験結果を次の表に示す。

放射線免疫共役体純度 ”’Ｒｅ−ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲＬＵ−１０時　間　調剤Ｉ　調剤■ 精製カラムを予備調整し、かつＨＳＡと組合わせの放射線免疫共役体反応混合物 を溶離するのに２０ｍｇ／ｍｌのアスコルピ°ン酸溶液を用いる安定化技術か６ 日までの著しく高められた長時間安定性を示し、および高い初期調剤純度を得ｊ こ。結果（ま調剤１の高い比活性の観点において、特に有意である。

例■ ３種の安定剤、アスコルビン酸、ゲンチシン酸およびＤＴＰＡを類似条件下で試 験して放射線免疫共役体のインビトロ安定イヒ（こついての効力を調べた。　” ’Ｒｅ−ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲ２ＡＤ放射線免疫共役体を上述する標準放射 線標識および結合技術により作った。調剤は約５．１μＣｉ／μｇ　Ａｂの活性 を有していた。各精製カラムを安定剤を含有する調整溶液で処理し、放射線免疫 共役体温合物を安定剤溶液を用いて溶離した。安定剤としては、調剤Ｉては２０ ｍｇ／ｍｌのアスコルビン酸；調剤■では２０ｍｇ／ｍｌのゲンチシン酸：およ び調剤■ては２０ｍｇ／ｍｌのＤＴＰＡを用いた。試験結果を次の表に示す： 放射線免疫共役体純度 ’　”　’　Ｒｅ　−ＭＡＧＧ　−ＧＡＢＡ　−ＮＲ２ＡＤ時間　調剤工　調剤 ■　調剤■ （アスコルビン酸）　（ゲンチシン酸）　（ＤＴＰＡ）上記結果は、アスコルビ ン酸か長時間安定化を与えるか、しかしゲンチシン酸が約２４時間にわたる満足 な安定化を与えることを示している。ＤＴＰＡ調剤は満足な安定性が約４時間に わたる程度であることを示している。各安定剤は、放射線免疫共役体を溶離しお よびＰＢＳで貯蔵した調剤と比べた安定化効果を示している。アスコルビン酸は 好ましい長時間安定剤である。

例■ アスコルビン酸、ゲンチシン酸およびＤＴＰＡを含む安定剤におけるＨＳＡの効 果を評価するために、例■に記載したと同じ安定化試験を繰返し行った。　”６ Ｒｅ−ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲＬＵ−１０放射線免疫共役体を上述する標準放 射線標識および結合技術により作った。調剤の比活性は約６．１μＣｉ／μｇ　 Ａｂであった。調剤工、■および■に用いた安定剤は、例■（「Ａ」欄）に記載 するようにして、ＨＳＡ　（２２０ｍｇ）を収集ガラスびんに追加供給した。「 Ｂ欄」はＨＳＡを加えない場合を示している。試験結果を次の表に示す： 放射線免疫共役体純度 ”’Ｒｅ−ＭＡＧＧ−ＧＡＢＡ−ＮＲＬＬＩ−１０時間　調剤工　調剤■　調剤 ■ （アスコルビン酸）（ゲンチノン酸’）　（ＤＴＰＡ）上記結果は、ＨＳＡを他 の安定剤、例えばアスコルビン酸、ゲンチシン酸またはＤＴＰＡと組合わせて用 いた場合に、放射線免疫上述するように、本発明をある好適例について記載して いるが、本発明は追加具体例を実施でき、および本発明の基本原理を逸脱しない かぎり種々変更を加えることができる。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条７の第１項）平成４年　３月 １９日

Claims (25)

【特許請求の範囲】
1. １．標的部分に結合した１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１５３Ｓｍおよび１ ０５Ｒｈからなる群から選択した治療用放射性核種およびその混合物、および酸 化防止剤および攻撃剤からなる群から選択した有効量の安定剤およびその混合物 を含み、治療用放射性核種組成物の純度を少なくとも約４時間にわたり少なくと も約９０％のレベルに維持するようにしたことを特徴とする安定な治療用放射性 核種組成物。
2. ２．治療用放射性核種が１８６Ｒｅまたは１８８Ｒｅである請求の範囲１記載の 組成物。
3. ３．治療用放射性核種を１８６Ｒｅとし、組成物が約４μＣｉ／μｇの標的剤対 約８μＣｉ／μｇの比活性を有する請求の範囲２記載の組成物。
4. ４．前記安定剤が、さらに相容性アルブミン部分および相容性血清蛋白質からな る群から選択した成分およびその混合物を含む請求の範囲１記載の組成物。
5. ５．前記安定剤が、 さらにＨＳＡを含む請求の範囲１記載の組成物。
6. ６．前記安定剤がアスコルビン酸および機能的に類似するその誘導体を含む請求 の範囲１記載の組成物。
7. ７．前記安定剤が、 さらにＨＳＡを含む請求の範囲６記載の組成物。
8. ８．約１〜約１５ｍｇ／ｍｌの安定剤を含む請求の範囲１記載の組成物。
9. ９．約５０〜約５００ｍｇのヒト血清アルブミンを含む請求の範囲８記載の組成 物。
10. １０．治療用放射性核種組成物が約２０〜約５００ｍｇの安定剤を含む請求の範 囲１記載の組成物。
11. １１．標的部分に結合した１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１５３Ｓｍおよび １０５Ｒｈからなる群から選択した治療用放射性核種およびその混合物を含む安 定な治療用放射性核種組成物の調製方法において、前記治療用放射性核種組成物 を精製し；および精製中および精製後、酸化防止剤および攻撃剤からなる群から 選択した有効量の安定剤およびその混合物を導入して精製治療用放射性核種組成 物を少なくとも約４時間にわたり少なくとも約９０％の純度レベルに維持するよ うにすることを特徴とする安定な治療用放射性核種組成物の調製方法。
12. １２．前記精製を、共役放射性核種反応混合物を精製カラムを介してカラム溶出 液が溶離することにより行い、前記カラム溶出液が有効量の前記安定剤を含む請 求の範囲１１記載の方法。
13. １３．前記共役放射性核種反応混合物を精製カラムを介して溶離する前に、前記 精製カラムを有効量の前記安定剤を含む調整溶液で処理する請求の範囲１２記載 の方法。
14. １４．前記調整溶液および前記カラム溶出液が少なくとも約１ｍｇ／ｍｌのアス コルビン酸を含む請求の範囲１３記載の方法。
15. １５．前記調整溶液および前記カラム溶出液が約２０ｍｇ／ｍｌのアスコルビン 酸を含む請求の範囲１４記載の方法。
16. １６．前記安定剤に、 さらにＨＳＡを含む請求の範囲１１記載の方法。
17. １７．前記安定剤に、さらに相溶性アルブミンおよび相溶性ヒト血清蛋白質から なる群から選択した成分およびその混合物を含有させる請求の範囲１１記載の方 法。
18. １８．少なくとも約４時間のインビトロ貯蔵期間中、少なくとも約９０％純度を 維持する、標的部分に安定に結合したレニウム放射性核種を含む治療用放射性核 種組成物。
19. １９．酸化防止剤および攻撃剤からなる群から選択した安定剤およびその混合物 を含む請求の範囲１８記載の組成物。
20. ２０．前記安定剤がアスコルビン酸または機能的に類似するその誘導体をＨＳＡ と組合わせて含ませた請求の範囲１９記載の組成物。
21. ２１．標的部分に結合した１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１５３Ｓｍおよび １０５Ｒｈからなる群から選択した治療用放射性核種およびその混合物、酸化防 止剤および攻撃剤からなる群から選択した有効量の安定剤およびその混合物、お よび製薬的に許容しうるキャリヤーまたは稀釈剤を含むことを特徴とする治療特 性を有する薬剤。
22. ２２．請求の範囲２１に規定した治療的に有効量の薬剤を患者に投与することを 特徴とする腫瘍性疾病の治療方法。
23. ２３．標的部分に結合した１３１Ｉおよび有効量の攻撃剤を含む安定な治療用放 射性核種組成物。
24. ２４．さらに、ＨＳＡを含む請求の範囲２３記載の組成物。
25. ２５．標的部分に結合した１３１Ｉ、および酸化防止剤をＨＳＡと組合わせて含 有する有効量の安定剤を含む安定な治療用放射性核種組成物。