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JP7326319B2 - Ｓｔｉｎｇアゴニストとしてのベンゾチオフェン類及び関連する化合物 - Google Patents

Ｓｔｉｎｇアゴニストとしてのベンゾチオフェン類及び関連する化合物 Download PDF

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Description

本開示は、ＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）経路を活性化するＳＴＩＮＧアゴニストとして有用であり得る化合物及びその誘導体に関する。本開示は、そのような化合物を含む組成物、そのような化合物を合成する方法、及び、免疫応答を誘発させるために、ＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロンの産生を誘発させるために、及び／又は、癌などの細胞増殖性疾患を治療するために、そのような化合物を投与することを包含する、そのような化合物の使用にも関する。
電子提出配列表への言及
本出願の配列表は、ファイル名「２４５７８ ＳＥＱＬＩＳＴ－ＦＥＢ２０１９」を有するＡＳＣＩＩ書式配列表（作成日：２０１９年３月１日、サイズ：２５ＫＢ）として、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に提出されたものである。ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出されたこの配列表は、本明細書の一部であり、そして、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
免疫系は、宿主の恒常性を維持するためにさまざまなタイプの脅威を認識して無力化するように進化しており、一般に、適応型と先天性の２種類の能力に分けられる。適応型免疫系は、宿主体内で自然に発現されることのない抗原を外来物として認識すること、及び、多くの白血球サブセットの協調作用を介して抗抗原応答を開始することに特殊化している。適応型免疫応答の特徴は、遭遇した抗原に対する「記憶」又は長期間持続する免疫を提供する能力である。この特異的で長期間持続する効果は、宿主の健康及び生存にとって重要であるが、適応型免疫応答は、本格的な応答を生じるのに時間を要する。
先天性免疫系はこの時間遅延を補い、そして、さまざまな傷害又は危険シグナルに対して迅速に作用することに特殊化している。それは、細菌、ウィルス、寄生生物及び別の感染性脅威に対する防御の第一戦を提供するが、細胞又は組織の損傷に関連した特定の危険シグナルにも強く応答する。先天性免疫系は、抗原特異性を有さないが、種々のエフェクター機構に応答する。オプソニン作用、食作用、補体系の活性化及び可溶性生理活性分子（例えば、サイトカイン又はケモカイン）の産生は、全て、それにより先天性免疫系がその応答に介在する機序である。上記で記載したこれら損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）又は病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）に応答することにより、先天性免疫系は、宿主への広範囲の脅威に対する広範な保護を提供することが可能である。
遊離サイトゾルＤＮＡ及びＲＮＡは、これらＰＡＭＰ及びＤＡＭＰに含まれる。近年、サイトゾルＤＮＡに対する主要なセンサーはｃＧＡＳ（環状ＧＭＰ－ＡＭＰシンターゼ）であることが示された。サイトゾルＤＮＡを認識すると、ｃＧＡＳは、ＥＲ膜貫通アダプタータンパク質ＳＴＩＮＧに強く結合する異型のセカンドメッセンジャーである環状ジヌクレオチド２’３’－ｃＧＡＭＰの生成を触媒する。ｃＧＡＭＰが結合したＳＴＩＮＧによって構造変化が起き、これは核周辺区画に移行して、必須転写因子ＩＲＦ－３及びＮＦ－κＢの活性化を誘発する。これによって、Ｉ型インターフェロンが強力に誘発され、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α及びＩＦＮ－γのような炎症誘発性サイトカインが産生される。
免疫系の各種細胞に対するＩ型インターフェロン及び炎症誘発性サイトカインの重要性は、充分に確立されている。特に、これらの分子は、抗原を取り込み、プロセシングし、Ｔ細胞に提示及び交差提示する樹状細胞及びマクロファージの能力を増大させることにより、Ｔ細胞活性化を強力に助長する。これらの抗原提示細胞のＴ細胞刺激能は、ＣＤ８０又はＣＤ８６などの重要な共刺激分子を上方制御することによって増大される。最後に、Ｉ型インターフェロンは、それらの同族受容体と迅速に関与して、適応型免疫細胞の活性化に大きく寄与することが可能なインターフェロン応答性遺伝子の活性化を引き起こすことができる。
治療的観点から、Ｉ型インターフェロンは、ヒトＢ型肝炎ウィルス及びヒトＣ型肝炎ウィルスの複製を直接阻害することによって、並びに、ウィルスに感染した細胞に対する免疫応答を刺激することによって、抗ウィルス活性を示すことが示されている。Ｉ型インターフェロンの産生を誘発させることが可能な化合物は、ワクチン中で用いられ、ここで、それらは、アジュバントとして作用して、抗原に対する特異的免疫応答を増強し、そして、投与量を低減させること及び免疫応答を広げることによって、副作用を最低限にする。
加えて、インターフェロン、及び、インターフェロンの産生を誘発することが可能な化合物は、ヒト癌の治療において使用できる可能性を有する。そのような分子は、複数の活性経路を有する抗癌剤として潜在的に有用である。インターフェロンは、ヒト腫瘍細胞の増殖を直接阻害することが可能であり、そして、認可されているさまざまな化学療法薬と相乗作用を示し得る。Ｉ型インターフェロンは、適応型免疫細胞及び先天性免疫細胞の両方の活性化を誘発することによって、抗腫瘍免疫応答を著しく増強することができる。最後に、腫瘍の侵襲性は、インターフェロンにより組織再構築に関連する酵素の発現を調節することによって阻害され得る。
抗ウィルス剤及び抗癌剤としてのＩ型インターフェロン及びＩ型インターフェロン誘発性化合物の可能性を考慮すると、強力なＩ型インターフェロン産生を誘発することができる新たな薬剤が依然として求められている。ｃＧＡＳ－ＳＴＩＮＧサイトゾルＤＮＡセンサー経路がＩ型インターフェロンを誘発する際立った能力を有していることを実証するデータの増加に伴い、ＳＴＩＮＧ活性化剤の開発は、今日の抗腫瘍療法の状況において急速に重要な位置を占めつつある。
本開示は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物、及び、それらの薬学的に許容される塩を包含する。これらの化合物及びそれらの薬学的に許容される塩は、免疫応答を誘発させるための、ＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロンの産生を誘発させるための、及び／又は、細胞増殖性疾患を治療するための薬剤として有用であり得る。
本開示は、一般式（Ｉ）で表される新規化合物に関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（Ｉ）：
Figure 0007326319000001
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（Ｉ）で表される化合物の使用及び一般式（Ｉ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本開示は、一般式（ＩＩ）で表される新規化合物にも関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（ＩＩ）：
Figure 0007326319000002
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（ＩＩ）で表される化合物の使用及び一般式（ＩＩ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本開示は、一般式（ＩＩＩ）で表される新規化合物にも関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（ＩＩＩ）：
Figure 0007326319000003
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（ＩＩＩ）で表される化合物の使用及び一般式（ＩＩＩ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本開示は、一般式（ＩＶ）で表される新規化合物にも関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（ＩＶ）：
Figure 0007326319000004
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（ＩＶ）で表される化合物の使用及び一般式（ＩＶ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本開示は、一般式（Ｖ）で表される新規化合物にも関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（Ｖ）：
Figure 0007326319000005
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（Ｖ）で表される化合物の使用及び一般式（Ｖ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本開示は、一般式（Ｖ）で表される新規化合物にも関する。特に、本開示は、本明細書中に記載されている、一般構造式（ＶＩ）：
Figure 0007326319000006
で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩に関する。一般式（ＶＩ）で表される化合物の使用及び一般式（ＶＩ）で表される化合物を製造する方法も開示されている。
本発明の別の実施形態、態様及び特徴は、以下の記載、実施例及び添付されている特許請求の範囲の中にさらに記載されているか又はそれらから明らかになるでなろう。
本開示は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及びそれらの薬学的に許容される塩を包含する。これらの化合物及びそれらの薬学的に許容される塩は、免疫応答を誘発させるための、ＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロンの産生を誘発させるための、及び／又は、細胞増殖性疾患を治療するための薬剤として有用であり得る。
第１の実施形態は、一般式（Ｉ）：
Figure 0007326319000007
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、及び、ここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に、３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に、３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000008
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第１の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000009
は、独立して、
Figure 0007326319000010
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000011
は、独立して、
Figure 0007326319000012
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第１の実施形態の一般式（Ｉ）において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記第１の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第３の態様においては、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ３アルケニル及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦＨ２、ＯＣＦ２Ｈ、ＯＣＦ３及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＯＣＨ３及びＯＣＦ２Ｈからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１若しくは第２の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第４の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特別な例では、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この例では、一般式（Ｉ）の構造は、式（Ｉａ）：
Figure 0007326319000013
〔式中、全ての基は、一般式（Ｉ）において与えられているとおりである〕
である。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第５の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に、３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になってそれらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になってそれらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になってそれらが結合している原子と一緒に、３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第８の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000014
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000015
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第９の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（Ｉ）又は上記で記載した第１～８の態様において与えられているとおりである。
第１の実施形態の第１０の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第１の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の上記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第１の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第１の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の上記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第１の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第１の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第１の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第１の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第１の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第１の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第１の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第１の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第１の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第１の実施形態の第１８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１１の態様の組成物を投与することを含む。第１の実施形態のこの第１８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第１の実施形態の各態様において、第１の実施形態の一般式（Ｉ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第２の実施形態は、一般式（ＩＩ）：
Figure 0007326319000016
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、及び、ここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000017
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第２の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000018
は、独立して、
Figure 0007326319000019
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000020
は、独立して、
Figure 0007326319000021
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第２の実施形態の一般式（ＩＩ）において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第３の態様においては、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ３アルケニル及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦＨ２、ＯＣＦ２Ｈ、ＯＣＦ３及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＯＣＨ３及びＯＣＦ２Ｈからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１若しくは第２の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第４の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特別な例では、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この例では、一般式（ＩＩ）の構造は、式（ＩＩａ）：
Figure 0007326319000022
〔式中、全ての基は、一般式（ＩＩ）において与えられているとおりである〕
である。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第５の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第８の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000023
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000024
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第９の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）又は上記で記載した第１～８の態様において与えられているとおりである。
第２の実施形態の第１０の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第２の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の上記一般式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第２の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第２の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の上記一般式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第２の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第２の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第２の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第２の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第２の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第２の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第２の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第２の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の一般式（ＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第２の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第２の実施形態の第１８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１１の態様の組成物を投与することを含む。第２の実施形態のこの第１８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第２の実施形態の各態様において、第２の実施形態の一般式（ＩＩ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第３の実施形態は、一般式（ＩＩＩ）：
Figure 0007326319000025
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ３は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｇを形成することができ、ここで、該環Ｇは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＧからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｇ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ４への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000026
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第３の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000027
は、独立して、
Figure 0007326319000028
からなる群から選択され；そして、
Figure 0007326319000029
は、
Figure 0007326319000030
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000031
は、独立して、
Figure 0007326319000032
からなる群から選択され、そして、各
Figure 0007326319000033
は、
Figure 0007326319000034
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第３の態様においては、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ３アルケニル及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦＨ２、ＯＣＦ２Ｈ、ＯＣＦ３及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＯＣＨ３及びＯＣＦ２Ｈからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１若しくは第２の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第４の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；場合により、Ｒ３は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｇを形成することができ、ここで、該環Ｇは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＧからＲ４への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｇ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ ３ への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特別な例では、Ｒ３は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｇを形成することができ、ここで、該環
Ｇは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＧからＲ４への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｇ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この例では、一般式（ＩＩＩ）の構造は、式（ＩＩＩａ）：
Figure 0007326319000035
〔式中、全ての基は、一般式（ＩＩＩ）において与えられているとおりである〕
である。この第４の態様の特別なさらなる例では、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよい。この例では、一般式（ＩＩＩ）の構造は、式（ＩＩＩｂ）：
Figure 0007326319000036
〔式中、全ての基は、一般式（ＩＩＩ）において与えられているとおりである〕
である。この態様では、他の全ての基は、第１の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第５の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第８の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000037
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000038
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第９の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第３の実施形態の第１０の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第３の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第３の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第３の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第３の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第３の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第３の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第３の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第３の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第３の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第３の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第３の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の一般式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第３の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第３の実施形態の第１８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１１の態様の組成物を投与することを含む。第３の実施形態のこの第１８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第３の実施形態の各態様において、第３の実施形態の一般式（ＩＩＩ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第４の実施形態は、一般式（ＩＶ）：
Figure 0007326319000039
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000040
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第４の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000041
は、独立して、
Figure 0007326319000042
からなる群から選択され；そして、
Figure 0007326319000043
は、
Figure 0007326319000044
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000045
は、独立して、
Figure 0007326319000046
Figure 0007326319000047
からなる群から選択され；そして、
Figure 0007326319000048
は、
Figure 0007326319000049
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第４の実施形態の一般式（ＩＶ）において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第３の態様においては、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ１－Ｃ３ハロアルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ３アルケニル及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦＨ２、ＯＣＦ２Ｈ、ＯＣＦ３及びＮ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＯＣＨ３及びＯＣＦ２Ｈからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１若しくは第２の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第４の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択される。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第５の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第８の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000050
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000051
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第９の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）又は上記で記載した第１～８の態様において与えられているとおりである。
第４の実施形態の第１０の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第４の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＶ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第４の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第４の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＶ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第４の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第４の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第４の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＶ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第４の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第４の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第４の実施形態若しくは上記で記載した第１～９の態様の一般式（ＩＶ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第４の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１０の態様の組成物を投与することを含む。
第４の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の一般式（ＩＶ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第４の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第４の実施形態の第１８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第１１の態様の組成物を投与することを含む。第４の実施形態のこの第１８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第４の実施形態の各態様において、第４の実施形態の一般式（ＩＶ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第５の実施形態は、一般式（Ｖ）：
Figure 0007326319000052
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000053
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；並びに、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第５の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000054
は、独立して、
Figure 0007326319000055
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000056
は、独立して、
Figure 0007326319000057
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第５の実施形態の一般式（Ｖ）において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１の態様においてにおいて与えられているとおりである。
第５の実施形態の第３の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択される。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１及び第２の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第４の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第５の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000058
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000059
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第８の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第５の実施形態の第９の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第５の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（Ｖ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第５の実施形態の第１０の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第５の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（Ｖ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第５の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第５の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第５の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（Ｖ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第５の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第５の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第５の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（Ｖ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第５の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第５の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第５の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（Ｖ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第５の実施形態のこの第１６の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第５の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。第５の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第５の実施形態の各態様において、第５の実施形態の一般式（Ｖ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第６の実施形態は、一般式（ＶＩ）：
Figure 0007326319000060
〔式中、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000061
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩に関する。
第６の実施形態の第１の態様においては、各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各
Figure 0007326319000062
は、独立して、
Figure 0007326319000063
からなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各
Figure 0007326319000064
は、独立して、
Figure 0007326319000065
からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第６の実施形態の一般式（ＶＩ）において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第２の態様においては、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群から選択される。この態様のさらに特定の例では、各Ｒ１は、独立して、Ｈ及びＦからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、上記第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第３の態様においては、Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択される。この第４の態様の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－８－、－Ｏ（ＣＨ２）１－７－、－Ｏ（ＣＨ２）１－６Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）１－７－及び－ＮＨ（ＣＨ２）１－６Ｏ－からなる群から選択される。この第４の態様の特定の例では、Ｒ３－Ｒ４は、－（ＣＨ２）２－、－（ＣＨ２）３－、－（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２－、－Ｏ（ＣＨ２）３－、－Ｏ（ＣＨ２）４－、－Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）３Ｏ－、－ＯＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）４Ｏ－、－Ｏ（ＣＨ２）５Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ２）２－、－ＮＨ（ＣＨ２）３－及び－ＮＨ（ＣＨ２）３Ｏ－からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１及び第２の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第４の態様においては、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｒ６は、独立して、Ｈ、ＣＨ３及びＣＨＦ２からなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１～３の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第５の態様においては、各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択される。この態様の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏ及び－ＣＨ２－からなる群から選択される。この態様の特定の例では、Ｘ１は、Ｃ＝Ｏである。この実施形態では、他の全ての基は、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１～４の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第６の態様においては、各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に、３～６員のスピロ環を形成することができる。この態様の第１の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択される。この第１の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２ＣＨＲ８であり、ここで、Ｒ８は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＯＣＨ３及びシクロプロピルからなる群から選択される。この態様の第２の例では、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この第２の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨＲ８ＣＨＲ８であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成する。この態様の第３の例では、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ３アルキル、ＯＨで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル、ＯＣ１－Ｃ３アルキルで置換されているＣ１－Ｃ３アルキル及びＣ３－Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この第３の例の特定の場合には、各Ｘ２は、ＣＨ２Ｃ（Ｒ８）２であり、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ及びＣ１－Ｃ３アルキルからなる群から選択され、そして、場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成する。この態様では、他の全ての基は、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１～５の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第７の態様においては、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
Figure 0007326319000066
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、
Figure 0007326319000067
、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択される。この態様の一層さらに特定の例では、各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＮＨ２及びＣＮからなる群から選択される。この態様では、他の全ての基は、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）又は上記で記載した第１～６の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第８の態様においては、各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される。この態様の例では、各Ｒ９は、独立して、Ｈである。この態様では、他の全ての基は、第５の実施形態の一般式（Ｖ）又は上記で記載した第１～７の態様において与えられているとおりである。
第６の実施形態の第９の態様は、医薬組成物に関し、ここで、該医薬組成物は、（ａ）第６の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（ＶＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩；及び、（ｂ）薬学的に許容される担体を含む。
第６の実施形態の第１０の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の第６の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（ＶＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第６の実施形態の第１１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第６の実施形態の第１２の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第６の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（ＶＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第６の実施形態の第１３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第６の実施形態の第１４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第６の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（ＶＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第６の実施形態の第１５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。
第６の実施形態の第１６の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第６の実施形態若しくは上記で記載した第１～８の態様の一般式（ＶＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第６の実施形態のこの第１６の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第６の実施形態の第１７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記で記載した第９の態様の組成物を投与することを含む。第６の実施形態のこの第１７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本明細書中に記載されている第６の実施形態の各態様において、第６の実施形態の一般式（ＶＩ）の可変部分Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ａ、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３並びにそれらのさまざまな態様及び例は、それぞれ互いに独立して選択されるが、但し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの少なくとも１は、Ｈではない。
第７の実施形態は、
Figure 0007326319000068
Figure 0007326319000069
Figure 0007326319000070
Figure 0007326319000071
Figure 0007326319000072
Figure 0007326319000073
Figure 0007326319000074
Figure 0007326319000075
Figure 0007326319000076
Figure 0007326319000077
Figure 0007326319000078
Figure 0007326319000079
Figure 0007326319000080
Figure 0007326319000081
Figure 0007326319000082
Figure 0007326319000083
Figure 0007326319000084
からなる群から選択される化合物及びそれらの薬学的に許容される塩に関する。
この第７の実施形態の特定の態様は、
Figure 0007326319000085
Figure 0007326319000086
Figure 0007326319000087
Figure 0007326319000088
Figure 0007326319000089
Figure 0007326319000090
からなる群から選択される化合物及びそれらの薬学的に許容される塩に関する。
第７の実施形態の第１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第７の実施形態の第２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第７の実施形態の第３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。 第７の実施形態の第４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第７の実施形態の第５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第７の実施形態の第６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第７の実施形態の第７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第７の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第７の実施形態の第７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第７の実施形態の第８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第７の実施形態の化合物を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。第７の実施形態のこの第８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第８の実施形態は、下記に示されている実施例１～実施例１９０において示されている代表的な化学種から選択される化合物に関する。
第８の実施形態の第１の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第８の実施形態の第２の態様は、治療を必要とする患者において免疫応答を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第８の実施形態の第３の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。 第８の実施形態の第４の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第８の実施形態の第５の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
第８の実施形態の第６の態様は、治療を必要とする患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。
第８の実施形態の第７の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に治療有効量の上記第８の実施形態の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む。第８の実施形態の第７の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
第８の実施形態の第８の態様は、治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法に関し、ここで、該方法は、その患者に上記第８の実施形態の化合物を含む治療有効量の組成物を投与することを含む。第８の実施形態のこの第８の態様の例においては、該細胞増殖性疾患は、癌である。
本開示の別の実施形態は、以下のものを包含する。
（ａ） 有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
（ｂ） ＳＴＩＮＧアゴニスト化合物、抗ウイルス化合物、抗原、アジュバント、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト及び別の免疫調節剤、脂質、リポソーム、ペプチド、抗癌剤及び化学療法薬からなる群から選択される活性薬剤をさらに含む、（ａ）の医薬組成物。
（ｃ） （ｉ）一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩、及び、（ｉｉ）ＳＴＩＮＧアゴニスト化合物、抗ウイルス化合物、抗原、アジュバント、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト及び別の免疫調節剤、脂質、リポソーム、ペプチド、抗癌剤及び化学療法薬からなる群から選択される活性薬剤の、医薬組み合わせ； ここで、前記一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩及び前記活性薬剤は、それぞれ、その組み合わせが患者において免疫応答を誘発させるのに有効であるような量で使用される。
（ｄ） 患者において免疫応答を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
（ｅ） 患者において免疫応答を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の（ａ）の組成物、（ｂ）の組成物又は（ｃ）の組み合わせを投与することを含む、前記方法。
（ｆ） 患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
患者においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の（ａ）の組成物、（ｂ）の組成物又は（ｃ）の組み合わせを投与することを含む、前記方法。
（ｈ） 患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
（ｉ） 患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる方法であって、治療を必要とするその患者に治療有効量の（ａ）の組成物、（ｂ）の組成物又は（ｃ）の組み合わせを投与することを含む、前記方法。
（ｊ） 治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法あって、その患者に治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又はそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
（ｋ） 前記細胞増殖性疾患が癌である、（ｊ）の方法。
（ｌ） 治療を必要とする患者において細胞増殖性疾患を治療する方法あって、その患者に治療有効量の（ａ）の組成物、（ｂ）の組成物又は（ｃ）の組み合わせを投与することを含む、前記方法。
（ｍ） 前記細胞増殖性疾患が癌である、（ｌ）の方法。
本開示は、さらにまた、：（ａ）患者において免疫応答を誘発させること、又は、（ｂ）患者においてＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させることにおいて、（ｉ）そのための、（ｉｉ）薬物として使用するための、又は、（ｉｉｉ）薬物の調製おいて使用するための、化合物を包含する。これらの使用において、本開示の化合物は、場合により、ＳＴＩＮＧアゴニスト化合物、抗ウイルス化合物、抗原、アジュバント、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト及び別の免疫調節剤、脂質、リポソーム、ペプチド、抗癌剤及び化学療法薬から選択される１種類以上の活性薬剤と組み合わせて使用することができる。
本開示の付加的な実施形態は、上記（ａ）～（ｍ）に記載されている医薬組成物、組み合わせ及び方法、並びに、先行する段落中に記載されている使用を包含し、ここで、その中で使用されている本開示の化合物は、上記で記載されている化合物の実施形態、態様、例、場合又は特徴のうちの１の化合物である。これらの実施形態の全てにおいて、該化合物は、適切な場合には、薬学的に許容される塩の形態で用いることができる。
上記で提供されている化合物の実施形態において、各実施形態は、組み合わせが安定な化合物を提供し且つその実施形態の説明と調和しているかぎり、１以上の別の実施形態と組み合わせることができることは理解されるべきである。さらに、上記で（ａ）～（ｍ）として提供されている組成物及び方法の実施形態が化合物の全ての実施形態（これは、実施形態の組み合わせから生じる実施形態を包含する）を包含するものと理解されることも理解されるべきである。
本明細書中で使用される用語「対象」（あるいは、「患者」）は、処置、観察又は実験の対象となった哺乳動物を示す。その哺乳動物は、雄又は雌であり得る。その哺乳動物は、ヒト、ウシ（例えば、雌ウシ）、豚（例えば、ブタ）、羊（例えば、ヒツジ）、山羊（例えば、ヤギ）、馬（例えば、ウマ）、犬（例えば、飼い犬）、猫（例えば、飼い猫）、兎（ウサギ）、齧歯類（例えば、ラット又はマウス）、アライグマ（例えば、アライグマ）からなる群から選択される１以上であり得る。特定の実施形態において、該対象はヒトである。
本明細書中で使用される場合、用語「免疫応答」は、以下のいずれか１以上に関する：特異的免疫応答、非特異的免疫応答、特異的及び非特異的の両方の応答、先天性応答、一次免疫応答、適応型免疫、二次免疫応答、記憶免疫応答、免疫細胞活性化、免疫細胞増殖、免疫細胞分化、及び、サイトカイン発現。特定の実施形態では、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、抗ウィルス化合物、１種類以上の所定の抗原への免疫応答を刺激することが意図されるワクチン、アジュバント、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト及び別の免疫調節剤、脂質、リポソーム、ペプチド、抗癌剤及び化学療法薬などを包含する１種類以上の付加的な治療薬と一緒に投与される。特定の実施形態では、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、抗ウィルス化合物、１種類以上の所定の抗原への免疫応答を刺激することが意図されるワクチン、アジュバント、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト及び別の免疫調節剤、脂質、リポソーム、ペプチド、抗癌剤及び化学療法薬などを包含する１種類以上の付加的な組成物と一緒に投与される。
化合物
本明細書中で使用される場合、用語「アルキル」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有する一価の直鎖又は分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素基を示す。従って、例えば、「Ｃ１－６アルキル」（又は、「Ｃ１－Ｃ６アルキル」）は、ヘキシルアルキル及びペンチルアルキル異性体、並びに、ｎ－、イソ－、ｓｅｃ－及びｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－及びイソ－プロピル、エチル及びメチルを示す。別の例として、「Ｃ１－４アルキル」は、ｎ－、イソ－、ｓｅｃ－及びｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－及びイソプロピル、エチル及びメチルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルキレン」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有する二価の直鎖飽和脂肪族炭化水素ラジカルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルケニル」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有し、１以上の二重結合を包んでいる一価の直鎖又は分枝鎖の不飽和脂肪族炭化水素ラジカルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルケニレン」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有し、１以上の二重結合を包んでいる二価の直鎖不飽和脂肪族炭化水素ラジカルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルキニル」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有し、１以上の三重結合を包んでいる一価の直鎖又は分枝鎖の不飽和脂肪族炭化水素ラジカルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルキニレン」は、指定されている範囲内の数の炭素原子を有し、１以上の三重結合を包んでいる二価の直鎖不飽和脂肪族炭化水素ラジカルを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロゲン」（又は、「ハロ」）は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を示す（あるいは、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨード、又は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩ）。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルキル」は、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルキル基を示す。従って、例えば、「Ｃ１－６ハロアルキル」（又は、「Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル」）は、１以上のハロゲン置換基を有する、上記で定義したＣ１～Ｃ６の直鎖又は分枝鎖のアルキル基を示す。用語「フルオロアルキル」は、ハロゲン置換基がフルオロに限定される以外は同様の意味を有する。適切なフルオロアルキルとしては、一連の（ＣＨ２）０－４ＣＦ３（即ち、トリフルオロメチル、２，２，２－トリフルオロエチル、３，３，３－トリフルオロ－ｎ－プロピルなど）などを含む。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルキレン」は、上記で定義したハロアルキルにおけるように、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルキレン基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルケニル」は、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルケニル基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルケニレン」は、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルケニレン基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルキニル」は、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルキニル基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「ハロアルキニレン」は、水素原子のうちの１個以上がハロゲンで置き換えられている、上記で定義したアルキニレン基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「アルコキシ」は、単独で又は組み合わされて、オキシ連結原子に連結されたアルキル基を包含する。用語「アルコキシ」は、アルキルエーテル基も包含し、ここで、用語「アルキル」は上記で定義されており、及び、「エーテル」は、中間に酸素原子を有する２つのアルキル基を意味する。適切なアルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、ｉ－プロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｓ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、メトキシメタン（「ジメチルエーテル」とも称される）及びメトキシエタン（「エチルメチルエーテル」とも称される）を含む。
本明細書中で使用される場合、用語「シクロアルキル」は、指定されている数の炭素原子を有する１つの環を含む飽和炭化水素を示す。シクロアルキルの例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルを含む。
本明細書中で使用される場合、用語「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」又は「ヘテロ環式」は、本明細書中で使用される場合、飽和若しくは不飽和であり、そして、炭素原子と、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される１個又は２個のヘテロ原子で構成される安定な３～６員の単環式化合物を表す。ヘテロ環式環は、安定な構造を生じさせるのであれば、いずれのヘテロ原子又は炭素原子で結合していてもよい。該用語は、ヘテロアリール部分を包含する。そのようなヘテロ環式要素の例としては、限定するものではないが、アゼピニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、１，３－ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２－オキソアゼピニル、オキサゾリル、２－オキソピペラジニル、２－オキソピペリジニル（２－ｏｘｏｐｉｐｅｒｄｉｎｙｌ）、２－オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、トリアゾリル及びチエニルを含む。
本明細書中で使用される場合、用語「縮合環」は、直鎖若しくは分枝鎖のアルカンの中の離れた原子上の置換基によって形成された環状基、又は、別の環の中の離れた原子上の置換基によって形成された環状基を示す。
本明細書中で使用される場合、用語「スピロ環」又は「スピロ環式環」は、単一の原子上の置換基によって形成されたペンダント環状基を示す。
相反するように明瞭に示されていない限り、本明細書中で引用されている全ての範囲は、包括的である、即ち、その範囲は、その範囲の上限及び下限の値、並びに、中間にある全ての値を包含する。一例として、本明細書中に記載されている温度範囲、パーセント、当量の範囲などは、その範囲の上限及び下限並びにその中間にある連続した任意の値を包含する。本明細書中で提供されている数値、及び、用語「約」の使用は、±１％、±２％、±３％、±４％、±５％、±１０％、±１５％及び±２０％並びにそれらの数値的等価物の変動を包含し得る。
本明細書中で使用される場合、用語「１以上の」項目は、リストから選択される単一の項目、並びに、リストから選択される２以上の項目を混合したものを包含する。
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩において、当該原子は、それらの天然の同位体存在度を示していてもよく、又は、当該原子のうちの１個以上は、原子番号は同じだが原子質量又は質量数が天然において主に見出される原子質量又は質量数と異なる特定の同位体が人工的に濃縮されていてもよい。本開示は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の全ての適切な同位体変異体を包含することが意図されている。例えば、水素（Ｈ）の異なる同位体形態としては、プロチウム（１Ｈ）、重水素（２Ｈ）及び三重水素（３Ｈ）を含む。プロチウムは、天然において見出される主要な水素同位体である。重水素の富化は、特定の治療的利点、例えば、インビボ半減期の向上又は必要用量の低減などをもたらし得るか、又は、生物学的サンプルの特性決定のための標準として有用な化合物を提供し得る。同位体富化された一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、当業者によく知られている慣習的な技術によって、又は、本明細書中の「スキーム」及び「実施例」において記載されている調製方法と類似した調製方法によって、適切な同位体富化された試薬及び／又は中間体を用いて、過度の実験を行うことなく調製することができる。
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の特定の実施形態においては、当該化合物を重水素で同位体富化させる。これらの実施形態の複数の態様においては、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ８及びＲ９のうちの１以上に重水素を含ませることができる。
本明細書中で提供されている一般構造式及び具体的な化合物の構造において示されているように、キラル中心における直線は、（Ｒ）と（Ｓ）の両方の立体異性体及びそれらの混合物を含む。さらにまた、別途（例えば、１００％精製化合物）示されていない限り、ある位置における特定の立体化学への言及は、示されている立体化学を有する化合物を提供するが、これは指示された位置において異なる立体化学を有する立体異性体の存在を排除するものではない。
具体的な立体配置が明示されていない又は全てのキラル中心についてそのような明示がされているわけではない特許請求の範囲の中の具体的な化合物（即ち、化学種）の記述又は描写は、そのような明示されていないキラル中心に関して、当該化合物のラセミ化合物、ラセミ混合物、各個別のエナンチオマー、ジアステレオ異性体混合物及び各個別のジアステレオマーを包含することが意図されており、ここで、そのような形態は、１以上の不斉中心が存在することに起因して可能である。立体異性体の混合物の分離は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の合成の際の中間体段階において実施することができるか、又は、それは、最終的なラセミ生成物に対して実施することができる。絶対立体化学は、結晶質生成物又は結晶質中間体（これらは、必要に応じて、立体配置が知られている立体中心を含む試薬で誘導体化される）のＸ線結晶学によって決定することが可能である。あるいは、絶対立体化学は、振動円二色性（ＶＣＤ）分光分析により決定されることができる。本発明は、そのような全ての異性体、並びに、そのようなラセミ化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体の塩、溶媒和物（これは、水和物を包含する）及び溶媒和塩、並びに、それらの混合物を包含する。
本発明は、全ての可能なエナンチオマー及びジアステレオマー、並びに、全ての比率における２種類以上の立体異性体の混合物（例えば、エナンチオマー及び／又はジアステレオマーの混合物）を包含する。従って、エナンチオマーは、左旋性対掌体及び右旋性対掌体の両方としてのエナンチオマー的に純粋な形において、ラセミ化合物の形態において、及び、全ての比率における２種類のエナンチオマーの混合物の形態において、本発明の対象である。シス／トランス異性の場合、本発明は、シス型及びトランス型の両方、並びに、全ての比率におけるこれらの型の混合物を包含する。個々の立体異性体の調製は、必要に応じて、慣習的な方法で混合物を分離させることによって、例えば、クロマトグラフィー又は結晶化によって、当該合成のために立体化学的に均一な出発物質を使用することによって、又は、立体選択的な合成によって実施することができる。場合により、立体異性体を分離させる前に誘導体化を行うことができる。立体異性体の混合物の分離は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記化合物の薬学的に許容される塩の合成の際の中間段階で行うことができるか、又は、それは、最終的なラセミ生成物に対して行うことができる。絶対立体化学は、結晶質生成物又は結晶質中間体（これらは、必要に応じて、立体配置が知られている立体中心を含む試薬で誘導体化される）のＸ線結晶学によって決定することが可能である。そのようなラセミ化合物、エナンチオマー又はジアステレオマーの特定の異性体、塩、溶媒和物（これは、水和物を包含する）又は溶媒和塩が示されていない限り、本発明は、そのような全ての異性体、並びに、そのようなラセミ化合物、エナンチオマー、ジアステレオマーの塩、溶媒和物（これは、水和物を包含する）及び溶媒和塩、並びに、それらの混合物を包含する。
用語「化合物」は、その化合物、及び、特定の実施形態においては、安定である範囲において、任意の水和物又は溶媒和物を示す。水和物は、水と錯体を形成している化合物であり、溶媒和物は、溶媒（これは、有機溶媒又は無機溶媒であり得る）と錯体を形成している化合物である。
「安定な」化合物は、調製及び単離することが可能で、且つ、当該化合物を本明細書中に記載されている目的（例えば、患者への治療的投与）に関して使用することを可能とするのに充分な期間にわたって、その構造及び特性が本質的に変化しないでいるか又はその構造及び特性を本質的に変化させないでおくことが可能な化合物である。本発明の化合物は、一般式（Ｉ）、一般式（ＩＩ）、一般式（ＩＩＩ）、一般式（ＩＶ）、一般式（Ｖ）、一般式（ＶＩ）に包含される安定な化合物又はその薬学的に許容される塩に限定される。
塩
上記で示したように、本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態で使用することができる。当業者は、本発明の化合物が塩を形成し得る場合を理解するであろう。そのような化合物の例は、可能な塩に言及して、本明細書中に記載されている。そのような言及は、例証することのみを目的としている。薬学的に許容される塩は、患者を治療するための化合物とともに用いることができる。しかしながら、非薬学的な塩も、中間体化合物の調製において有用であり得る。
用語「薬学的に許容される塩」は、親化合物と同様の有効性を有し、且つ、生物学的にも又は他の点でも望ましくないものではない（例えば、その受容者にとって毒性でなく、他の点でも有害でない）、塩（これは、両性イオンのような内部塩を包含する）を示す。従って、本発明の一実施形態は、本発明の化合物の薬学的に許容される塩を提供する。用語「塩（類）」は、本明細書中で使用される場合、以下のもののうちのいずれかを示す：無機酸及び／又は有機酸で形成される酸性塩、並びに、無機塩基及び／又は有機塩基で形成される塩基性塩。本発明の化合物の塩は、当業者には既知の方法によって、例えば、本発明の化合物を、媒体（例えば、当該塩がその中で沈殿する媒体）又は水性媒体の中で、ある量（例えば、相当量）の酸又は塩基と反応させ、次いで凍結乾燥させることによって形成させることができる。
代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩（「メシラート」）、ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、リン酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩（「トシラート」）などを含む。適切な塩としては、酸付加塩を含み、これは、例えば、化合物の溶液を薬学的に許容される酸（例えば、塩酸、硫酸、酢酸、トリフルオロ酢酸又は安息香酸）の溶液と混合させることによって形成され得る。さらに、塩基性医薬化合物から医薬的に有用な塩を形成させるのに適していると一般に考えられる酸については、例えば、「Ｐ． Ｓｔａｈｌ ｅｔ ａｌ， Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ． （ｅｄｓ．）， Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ． Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ， Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ． （２００２） Ｚｕｒｉｃｈ： Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ」、「Ｓ． Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （１９７７） ６６（１） １－１９」、「Ｐ． Ｇｏｕｌｄ， Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊ． ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ （１９８６） ３３ ２０１－２１７」、「Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ， Ｔｈｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （１９９６）， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ」及び「Ｔｈｅ Ｏｒａｎｇｅ Ｂｏｏｋ （Ｆｏｏｄ ＆ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ， Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， Ｄ．Ｃ． ｏｎ ｔｈｅｉｒ ｗｅｂｓｉｔｅ）」によって論じられている。これらの開示内容は、それらを参照することによって本明細書に組み込まれる。
代表的な塩基性塩としては、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム塩、リチウム塩及びカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩及びマグネシウム塩、有機塩基（例えば、有機アミン）、例えば、ジシクロヘキシルアミン、ｔ－ブチルアミン、コリンとの塩、及び、アミノ酸、例えば、アルギニン、リジンとの塩などを含む。塩基性窒素含有基は、低級アルキルハロゲン化物（例えば、メチル、エチル及びブチルの塩化物、臭化物及びヨウ化物）、硫酸ジアルキル（例えば、硫酸ジメチル、硫酸ジエチル及び硫酸ジブチル）、長鎖ハロゲン化物（例えば、デシル、ラウリル及びステアリルの塩化物、臭化物及びヨウ化物）、アラルキルハロゲン化物（例えば、臭化ベンジル及び臭化フェネチル）などの作用物質で四級化することができる。酸性部分を有している化合物は、適切な薬学的に許容される塩と混合させて、例えば、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩又はカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩又はマグネシウム塩）及び適切な有機配位子と形成された塩（例えば、４級アンモニウム塩）を提供することができる。さらにまた、酸基（－ＣＯＯＨ）又はアルコール基が存在している場合、当該化合物の溶解性又は加水分解特性を改変するために、薬学的に許容されるエステルを用いることもできる。
そのような全ての酸塩及び塩基塩は、本発明の範囲内における薬学的に許容される塩であることが意図されており、そして、全ての酸塩及び塩基塩は、本発明に目的に関して相当する化合物の遊離形態と等価であると考えられる。
さらに、本発明の化合物が塩基性部分（例えば、限定するものではないが、脂肪族の１級アミン、２級アミン、３級アミン若しくは環状アミン、芳香族アミン又はヘテロアリールアミン、ピリジン又はイミダゾール）及び酸性部分（例えば、限定するものではないが、テトラゾール又はカルボン酸）の両方を含む場合、両性イオン（「内部塩」）が形成される場合があり、そして、その両性イオン（「内部塩」）は、本明細書中で使用される用語「塩」に包含される。本発明の特定の化合物が、同一の化合物内にアニオン性中心とカチオン性中心の両方を有し且つ正味の中性電荷を有する両性イオン形態で存在することができる、ということは理解される。そのような両性イオンは、本発明の範囲内に包含される。
化合物を調製する方法
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩を調製するための幾つかの方法が、以下の「スキーム」及び「実施例」に記載されている。出発物質及び中間体は、商業的供給元から購入するか、既知方法で製造するか、又は、そうでなければ例証されている。場合により、反応を容易にするために、又は、望ましくない反応生成物を回避するために、反応スキームの段階を実施する順序を変更することができる。
以下の「方法」及び「スキーム」において、ＬＧは脱離基を表し、この脱離基は、ハロゲン化物基又はトリフラート基であることができる。該「方法」及び「スキーム」に含まれている可変部分は、与えられている当該意味を有する；代表的な触媒は、「略号」（下記）において定義されている。
方法１
ベンゾチオフェン二量体１Ｄ及び１Ｅ並びにそれらの薬学的に許容される塩は、複数の方法で調製することができる。１つの方法が、スキーム１に示されている。その反応順序は、アリル－ベンゾチオフェン１Ａで開始する。グラブス触媒２Ｇを用いた交差メタセシスに付して、オレフィン二量体１Ｂ及び１Ｃが生成される。水素化に付し、次いで、加水分解に付して、結合の長さが異なる二量体１Ｄ及び１Ｅが生成される。
スキーム１
Figure 0007326319000091
方法２
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム２において詳述されている。その反応順序は、適切に置換されたハロゲン化アリール２Ａで開始する。ＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３を用いたベンゾチオフェン含有第１級アルコール（２Ｂ）とのクロスカップリングに付した後、加水分解に付して、二量体２Ｃが生成される。
スキーム２
Figure 0007326319000092
方法３
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム３において詳述されている。アルキルブロミドベンゾチオフェン３Ａと臭化アリール３Ｂのクロスカップリングによって、エステルニトリル二量体３Ｃが生成される。水性水酸化ナトリウムを用いる加水分解に付して、二量体３Ｄが生成される。
スキーム３
Figure 0007326319000093
方法４
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム４において詳述されている。パラジウム触媒の存在下における臭化アリール４ａとアルキルボロン酸エステル４Ｂのアルキルスズキ反応に続いて、該エステルを加水分解することによって、二量体４Ｃが生成される。
スキーム４
Figure 0007326319000094
方法５
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム５において詳述されている。アルキルブロミドベンゾチオフェン５Ａと臭化アリール５Ｂのクロスカップリングによって、二量体５Ｃが生成される。加水分解に付して、二量体５Ｄが生成される。同様に、ハロゲン化アリール５Ｅを臭化アルキル５Ｆとカップリングさせて、中間体５Ｇを製造することができる。加水分解に付して、酸５Ｈが生成される。
スキーム５
Figure 0007326319000095
方法６
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム６において詳述されている。その反応順序は、ハロゲン化アルキル６Ａで開始する。そのハライドを塩基性条件下で適切に置換されているフェノール６Ｂで置き換え、その後、加水分解に付して、二量体６Ｃが生成される。同様に、塩化アルキル６Ｄを、塩基性条件下でフェノール６Ｅで置き換えることができ、二酸に変換させた後、６Ｆを生成させることができる。さらにまた、フェノール６Ｇを用いて塩化アルキル６Ｄを置き換え、二酸に変換させた後、所望の６Ｈを生成させることもできる。最後に、臭化アルキル６Ｉをフェノール６Ｊで置き換え、二酸に変換させた後、６Ｋを生成させることができる。
スキーム６
Figure 0007326319000096
方法７
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム７において詳述されている。その反応順序は、第１級アルコール７Ａとフェノール７Ｂの間のミツノブ反応で開始して、得られたジエステルを加水分解した後、７Ｃが生成される。あるいは、フェノール７Ｄをミツノブ条件下でアルコール７Ｅと反応させることができる。次に鹸化に付して、二酸７Ｆが生成される。さらにまた、フェノール７Ｇを７Ｈとのミツノブ反応に使用して、ジエステルを二酸に変換させた後、７Ｉを生成させることも可能である。
同様に、ビス－フェノールベンゾチオフェン７Ｊと適切に置換されているジオール（７Ｋ）をミツノブ条件に付して、７Ｌと７Ｍの混合物を生成させることができる。加水分解に付して、二酸７Ｎと７Ｏの混合物が生成される。
スキーム７
Figure 0007326319000097
方法８
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム８において詳述されている。その反応順序は、適切に置換されている臭化アリール８Ａで開始する。パラジウム触媒の存在下でアルキルアミン８Ｂと反応させて、アルキルアミノ二量体ジエステル８Ｃが生成される。加水分解に付して、所望の二酸８Ｄが生成される。
スキーム８
Figure 0007326319000098
方法９
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム９において詳述されている。その反応順序は、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムの存在下におけるアルデヒド９Ａとアミノアザベンゾチオフェン９Ｂの間の還元的アミノ化で開始する。その粗製混合物にＴＦＡを添加して、所望の二酸９Ｃが生成される。
スキーム９
Figure 0007326319000099
方法１０
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム１０において詳述されている。その反応順序は、適切に置換されているフェノール性ベンゾチオフェン１０Ａを用いたアルキルジハライドのビス－アルキル化で開始して、二量体ジエステル１０Ｂが生成される。加水分解に付して、所望の二酸１０Ｃが生成される。同様にして、ジハライドを１０Ｄを用いてビス－アルキル化して、ジエステルを二酸に変換させた後、二酸１０Ｅを生成させることができる。
スキーム１０
Figure 0007326319000100
方法１１
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム１１において詳述されている。その反応順序は、臭化アルキル１１Ａを用いるアニリン１１Ｂのアルキル化で開始して、１１Ｃが生成される。そのジエステルを加水分解して、１１Ｄが生成される。
スキーム１１
Figure 0007326319000101
方法１２
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム１２において詳述されている。その反応順序は、臭化アルキル１２Ａを用いるフェノール１２Ｂのアルキル化で開始して、１２Ｃが生成される。塩基が介在する選択的加水分解に付して、一酸１２Ｄが生成される。１２Ｄをスルホンアミド又はスルファミドとカップリングさせて、１２Ｅが生成される。酸が介在する加水分解に付して、１２Ｆが生成される。
スキーム１２
Figure 0007326319000102
方法１３
ベンゾチオフェン二量体及びその薬学的に許容される塩を調製するための別の方法が、スキーム１３において詳述されている。その反応順序は、臭化アルキル１３Ａを用いるフェノール１３Ｂのアルキル化で開始して、１３Ｃが生成される。このジエステルを加水分解に付し、その後、そのメトキシメチルアセタール（ＭＯＭ）で保護されたフェノールを酸が介在する脱保護に付して、１３Ｄが生成される。
スキーム１３
Figure 0007326319000103
使用方法
治療用途を有する本明細書中に記載されている化合物、例えば、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物、実施例１～実施例１９０の化合物、及び、前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、免疫応答を誘発させる、ＳＴＩＮＧ依存性サイトカイン産生を誘発させる及び／又は抗腫瘍活性を誘発させるために、患者に投与することができる。用語「投与」及びその変形表現（例えば、化合物を「投与すること」）は、治療の必要がある個体に該化合物を提供することを意味する。化合物を１種類以上のさらなる活性薬剤（例えば、ＨＣＶ感染の治療に有用な抗ウィルス剤又は癌の治療のための抗腫瘍剤）と組み合わせて提供する場合、「投与」及びその変形表現は、それぞれ、その化合物又は塩と別の薬剤の同時的及び逐次的な提供を包含するものと理解される。
本明細書中で開示されている化合物は、ＳＴＩＮＧアゴニストであり得る。これらの化合物は、細胞増殖性疾患（これに限定されるものではない）を包含する疾患又は障害の治療において有用であり得る。細胞増殖性疾患としては、限定するものではないが、癌、良性乳頭腫症、妊娠性絨毛性疾患、及び、良性腫瘍性疾患、例えば、皮膚乳頭腫（いぼ）及び性器乳頭腫を含む。
具体的な実施形態では、治療されるべき疾患又は障害は、細胞増殖性疾患である。特定の実施形態では、細胞増殖性疾患は癌である。特定の実施形態では、癌は、脳及び脊髄の癌、頭頸部の癌、白血病及び血液の癌、皮膚癌、生殖器系の癌、消化管系の癌、肝臓及び胆管の癌、腎臓及び膀胱の癌、骨の癌、肺癌、悪性中皮腫、肉腫、リンパ腫、腺癌、甲状腺癌、心臓腫瘍、胚細胞腫瘍、悪性神経内分泌（カルチノイド）腫瘍、正中線癌、及び原発未知の癌（即ち、転移癌が認められるが、元の癌部位が不明である癌）から選択される。特定の実施形態では、癌は、成人患者に存在し；別の実施形態では、癌は、小児患者に存在する。特定の実施形態では、癌は、ＡＩＤＳ関連のものである。
具体的な実施形態では、癌は、脳及び脊髄の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、未分化星状細胞腫、神経膠芽腫、星細胞腫及び鼻腔神経芽細胞腫（嗅神経芽腫とも称される）からなる群から選択される。特定の実施形態では、脳の癌は、星状細胞腫瘍（例として毛様細胞性星状細胞腫、上衣下巨細胞星状細胞腫、広汎性星状細胞腫、多形性黄色星状膠細胞腫、退形成性星状細胞腫、星状細胞腫、巨細胞神経膠芽腫、神経膠芽腫、二次性神経膠芽腫、原発性成人神経膠芽腫及び原発性小児神経膠芽腫）；乏突起膠細胞腫瘍（例として乏突起膠細胞腫及び退形成性乏突起膠細胞腫）；乏突起星細胞腫瘍（例として乏突起星細胞腫及び退形成性乏突起星細胞腫）；上衣腫（例として粘液乳頭状上衣腫及び退形成性上衣腫）；髄芽腫；原始神経外胚葉性腫瘍、シュワン腫、髄膜腫、非定型髄膜腫、退形成性髄膜腫、脳下垂体腺腫、脳幹グリオーマ、小脳星細胞腫、大脳星細胞腫／悪性グリオーマ、視覚伝導路及び視床下部膠腫、及び原発性中枢神経系リンパ腫からなる群から選択される。これら実施形態の具体的な例において、脳癌は、神経膠腫、多形神経膠芽腫、傍神経節腫又はテント上（ｓｕｐｒａｎｔｅｎｔｏｒｉａｌ）原始神経外胚葉性腫瘍（ｓＰＮＥＴ）からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、頭頸部の癌、例えば上咽頭癌、鼻腔及び副鼻腔癌、下咽頭癌、口腔癌（例えば、扁平上皮癌、リンパ腫、及び肉腫）、口唇癌、口咽頭癌、唾液腺腫瘍、喉頭の癌（例えば、喉頭扁平上皮癌、横紋筋肉腫）、及び、眼の癌又は眼癌から選択される。特定の実施形態では、眼癌は、眼内メラノーマ及び網膜芽細胞腫からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、白血病及び血液の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、骨髄増殖性腫瘍、骨髄異形成症候群、脊髄形成異常／骨髄増殖性腫瘍、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄増殖性新生物（ＭＰＮ）、ｐｏｓｔ－ＭＰＮＡＭＬ、ｐｏｓｔ－ＭＤＳＡＭＬ、ｄｅｌ（５ｑ）を伴う高リスクＭＤＳ又はＡＭＬ、急性転化期慢性骨髄性白血病、血管免疫芽細胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、ランゲルハンス細胞組織球増加症、ヘアリー細胞白血病、及び形質細胞腫、例えば形質細胞腫及び多発性骨髄腫からなる群から選択される。本明細書中で言及されている白血病は、急性又は慢性であり得る。
具体的な実施形態では、癌は、皮膚癌から選択される。特定の実施形態では、皮膚癌は、メラノーマ、扁平上皮癌及び基底細胞癌からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、生殖器系の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、乳癌、子宮頸癌、膣癌、卵巣癌、前立腺癌、陰茎癌及び精巣癌からなる群から選択される。これらの実施形態の具体的な例において、癌は、腺管癌及び葉状腫瘍からなる群から選択される乳癌である。これらの実施形態の具体的な例において、前記乳癌は、男性乳癌又は女性乳癌であり得る。これらの実施形態の具体的な例において、癌は、扁平上皮癌及び腺癌からなる群から選択される子宮頸癌である。これらの実施形態の具体的な例において、癌は、上皮癌からなる群から選択される卵巣癌である。
具体的な実施形態では、癌は、消化管系の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、食道癌、胃の癌（胃癌とも称される）、消化管カルチノイド腫瘍、膵臓癌、胆嚢癌、結腸直腸癌及び肛門癌からなる群から選択される。これらの実施形態の例では、癌は、食道扁平上皮癌、食道腺癌、胃腺癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、胃リンパ腫、消化管リンパ腫、膵臓の充実性偽乳頭腫瘍、膵芽腫、島細胞腫瘍、腺房細胞癌及び導管腺癌などの膵臓癌種、胆嚢腺癌、結腸直腸腺癌及び肛門扁平上皮癌からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、肝臓及び胆管の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、肝臓癌（肝細胞癌とも称される）である。特定の実施形態では、癌は、胆管癌（胆管癌とも称される）であり；これらの実施形態の例では、胆管癌は、肝内胆管癌及び肝外胆管癌からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、腎臓及び膀胱の癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、腎細胞癌、ウィルムス腫瘍及び移行細胞癌からなる群から選択される腎臓癌である。特定の実施形態では、癌は、尿路上皮癌（移行細胞癌）、扁平上皮癌及び腺癌からなる群から選択される膀胱癌である。
具体的な実施形態では、癌は、骨癌から選択される。特定の実施形態では、前記骨癌は、骨肉腫、骨の悪性線維性組織球腫、ユーイング肉腫、索腫（脊髄に沿った骨の癌）からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、肺癌から選択される。特定の実施形態では、前記肺癌は、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、気管支腫瘍及び胸膜肺芽腫からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、悪性中皮腫から選択される。特定の実施形態では、癌は、上皮型中皮腫及び肉腫様癌（ｓａｒｃｏｍａｔｏｉｄｓ）からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、肉腫から選択される。特定の実施形態では、前記肉腫は、中央軟骨肉腫、中央及び骨膜性軟骨種、線維肉腫、腱鞘の明細胞肉腫及びカポジ肉腫からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、リンパ腫から選択される。特定の実施形態では、癌は、ホジキンリンパ腫（例えば、リードスタンバーグ細胞）、非ホジキンリンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、菌状息肉腫、セザリー症候群、原発性中枢神経系リンパ腫）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、腺癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、副腎皮質癌（副腎皮質癌又は副腎皮質細胞癌とも称される）、褐色細胞腫、傍神経節腫、下垂体部腫瘍、胸腺腫及び胸腺癌からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、甲状腺癌から選択される。特定の実施形態では、前記甲状腺癌は、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌及び濾胞性甲状腺癌からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、胚細胞腫瘍から選択される。特定の実施形態では、癌は、悪性頭蓋外胚細胞腫瘍及び悪性性腺外胚細胞腫瘍からなる群から選択される。これらの実施形態の具体的な例では、前記悪性性腺外胚細胞腫瘍は、非セミノーマ及びセミノーマからなる群から選択される。
具体的な実施形態では、癌は、心臓腫瘍から選択される。特定の実施形態では、前記心臓腫瘍は、悪性奇形腫、リンパ腫、横紋筋肉腫、血管肉腫、軟骨肉腫、乳児線維肉腫及び滑膜肉腫からなる群から選択される。
具体的な実施形態では、前記細胞増殖性疾患は、良性乳頭腫症、良性腫瘍性疾患及び妊娠性絨毛性疾患から選択される。特定の実施形態では、前記良性腫瘍性疾患は、皮膚乳頭腫（いぼ）及び性器乳頭腫から選択される。特定の実施形態では、前記妊娠性絨毛性疾患は、胞状奇胎、及び妊娠性絨毛性腫瘍（例えば、侵入奇胎、絨毛腫、胎盤部トロホブラスト腫瘍及び類上皮性トロホブラスト腫瘍）からなる群から選択される。
本明細書中で使用される場合、用語「治療」及び「治療すること」は、本明細書に記載されている疾患又は障害の進行の緩徐化、中断、阻止、制御又は停止であり得る全てのプロセスを示す。この用語は、あらゆる疾患又は障害の症候の完全な除去を示すとは限らない。
用語 化合物「の投与」及び又は化合物「を投与すること」は、本明細書中に記載されている化合物又はその薬学的に許容される塩及び前述の組成物を患者に提供することを包含するものと理解されるべきである。
患者に投与される化合物の量は、患者において免疫応答を誘発する及び／又はＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発するのに充分な量である。一実施形態では、化合物の量は、「有効量」又は「治療的有効量」であることができ、それによって、対象化合物は、研究者、獣医、医師又は他の臨床関係者が求める組織、系、動物又はヒトのそれぞれ生理的又は医学的（即ち、治療目的の）応答を誘発する量で投与される。有効量は、化合物の投与に関連する毒性及び安全性の考慮を必ずしも包含しない。
化合物の有効量は、選択される特定の化合物（例えば、化合物の効力、有効性及び／又は半減期を考慮して）；選択される投与経路；治療される症状；治療される症状の重度；治療される患者の年齢、サイズ、体重及び健康状態；治療される患者の病歴；治療の期間；同時治療の性質；所望の治療効果；並びに、同様の要因に応じて変わり、当業者が通常のように決定することができる。
本明細書中で開示されている化合物は、経口投与及び非経口投与を含む任意の適切な経路により投与され得る。非経口投与は、代表的には注射又は点滴によるものであり、静脈、筋肉及び皮下への注射又は注入を含む。
本明細書中で開示されている化合物は、単回で投与され得るか、又は、多数の用量が所定の期間内に各種時間間隔で投与される投与計画に従って投与され得る。例えば、用量は、１日あたり１回、２回、３回又は４回投与され得る。用量は、所望の治療効果が達せられるまで又は所望の治療効果を維持するため制限なく投与され得る。本明細書中で開示されている化合物に適した投与計画は、化合物の薬物動態特性、例えば、吸収、分布及び半減期によって決まり、当業者が決定することができる。加えて、本明細書中で開示されている化合物についての、そのような投与計画が行われる期間を含めた適切な投与計画は、治療される疾患又は症状、疾患又は症状の重度、治療される患者の年齢及び健康状態、治療される患者の病歴、同時治療の性質、所望の治療効果並びに当業者の知識及び専門性の範囲内の同様の要因によって決まる。その投与計画に対する個々の患者の応答を考慮して又は個々の患者のニーズ変化に応じて経時的に、適切な投与計画を調節する必要があり得ることをそのような当業者はさらに理解するであろう。代表的な１日投薬量は、選択される特定の投与経路に応じて変動し得る。
本開示の一実施形態は、治療的有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩を、治療を必要とする患者に投与することを含む、細胞増殖性疾患の治療方法を提供する。実施形態では、治療される疾患又は障害は、細胞増殖性疾患である。これらの実施形態の態様において、前記細胞増殖性疾患は、癌である。これら実施形態のさらなる態様において、癌は、脳及び脊髄の癌、頭頸部の癌、白血病及び血液の癌、皮膚癌、生殖器系の癌、消化管系の癌、肝臓及び胆管の癌、腎臓及び膀胱の癌、骨癌、肺癌、悪性中皮腫、肉腫、リンパ腫、腺癌、甲状腺癌、心臓腫瘍、胚細胞腫瘍、悪性神経内分泌（カルチノイド）腫瘍、正中線癌及び原発不明の癌から選択される。
一実施形態では、本明細書中で開示されているのは、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の、治療における使用である。その化合物は、有効量の化合物をそのような阻害の必要がある患者（例えば、哺乳動物）に投与することを含む、前記患者において免疫応答を誘発させる及び／又はＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる方法において有用であり得る。
一実施形態では、本明細書中で開示されているのは、免疫応答を誘発させる及び／又はＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させるための可能な治療において使用するための、一般式（Ｉ）で表される少なくとも一種類の化合物、一般式（ＩＩ）で表される少なくとも１種類の化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される少なくとも１種類の化合物、一般式（ＩＶ）で表される少なくとも１種類の化合物、一般式（Ｖ）で表される少なくとも１種類の化合物、一般式（ＶＩ）で表される少なくとも１種類の化合物又は前記で記載した化合物の少なくとも１種類の薬学的に許容される塩を含む医薬組成物である。
本明細書中で開示されている一実施形態は、免疫応答を誘発させる及び／又はＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させるための薬剤の製造における、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の使用である。実施形態では、治療される疾患又は障害は、細胞増殖性疾患である。これらの実施形態の態様において、前記細胞増殖性疾患は、癌である。これら実施形態のさらなる態様において、癌は、脳及び脊髄の癌、頭頸部の癌、白血病及び血液の癌、皮膚癌、生殖器系の癌、消化管系の癌、肝臓及び胆管の癌、腎臓及び膀胱の癌、骨癌、肺癌、悪性中皮腫、肉腫、リンパ腫、腺癌、甲状腺癌、心臓腫瘍、胚細胞腫瘍、悪性神経内分泌（カルチノイド）腫瘍、正中線癌及び原発不明の癌から選択される。
組成物
本明細書中で使用される用語「組成物」は、指定された化合物を指定量の含む投与形態、及び、指定された化合物の指定量の組み合わせから直接的又は間接的に生じる任意の投与形態を包含することが意図される。そのような用語は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩及び１種類以上の薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む投与形態を包含することが意図されている。従って、本開示の組成物は、本開示の化合物及び１種類以上の薬学的に許容される担体又は賦形剤を混合させることにより製造される任意の組成物を包含する。「薬学的に許容される」は、当該担体又は賦形剤が、本明細書中で開示されている化合物及び該組成物の他の成分と適合性があることを意味する。
免疫応答を誘発させる及び／又はＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させる目的のため、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、活性薬剤とその剤の作用部位との接触を生み出す手段により投与することができる。該化合物は、個々の治療剤として、又は、治療剤と組み合わせて、医薬と合わせた使用のために利用可能な慣習的な手段により投与することができる。当該化合物は、単独で投与することもできるが、典型的には、選択される投与経路及び標準的な薬務に基づいて選択される医薬担体と共に投与することができる。
一実施形態では、本明細書中で開示されているのは、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と、１種類以上の薬学的に許容される担体又は賦形剤とを含む組成物である。該組成物は、バルク形態で調製及び包装されることができ、ここでは、治療上有効量の本開示の化合物を取り出し、次いで、例えば粉末又はシロップと共に患者に与えることができる。あるいは、当該組成物は、単位投与形態に調製及び包装されることができ、ここでは、各々の物理的に分離した単位は、治療上有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩を含む。
本明細書中で開示されている化合物及び薬学的に許容される担体又は賦形剤（類）は、典型的には、所望の投与経路による患者への投与に適合させた投与形態に製剤される。例えば、投与形態としては、（１）経口投与に適合させた投与形態、例えば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、粉剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁液剤、溶液剤、エマルション剤、サシェ剤及びカシェ剤；及び、（２）非経口投与に適合させた投与形態、例えば、滅菌溶液剤、懸濁液剤及び再生用粉剤、を含む。適切な薬学的に許容される担体又は賦形剤は、選択される特定の投与形態に応じて変わる。加えて、適切な薬学的に許容される担体又は賦形剤は、組成物中で作用し得る特定の機能により選ばれ得る。例えば、特定の薬学的に許容される担体又は賦形剤は、均一な投与形態の生産を容易にする能力により選ぶことができる。特定の薬学的に許容される担体又は賦形剤は、安定な投与形態の生産を容易にする能力により選ぶことができる。特定の薬学的に許容される担体又は賦形剤は、患者に投与された際の身体の一つの臓器又は部分から身体の別の臓器又は別の部分への本明細書中で開示されている化合物の送達又は輸送を容易にする能力により選ぶことができる。特定の薬学的に許容される担体又は賦形剤は、患者コンプライアンスを高める能力によって選ぶことができる。
適切な薬学的に許容される賦形剤としては、以下のタイプの賦形剤を含む：希釈剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、増量剤、滑沢剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁剤、乳化剤、甘味料、香味剤、香味マスキング剤、着色料、凝固防止剤、保水剤（ｈｅｍｅｃｔａｎｔ）、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化剤、保存料、安定剤、界面活性剤及び緩衝剤。
当業者は、本開示の組成物における使用のために適切な量の適切な薬学的に許容される担体及び賦形剤を選ぶ上での、当該技術分野における知識及び技能を有する。加えて、当業者に利用可能な多数のリソースがあり、これらは薬学的に許容される担体及び賦形剤を記載していて、適切な薬学的に許容される担体及び賦形剤の選択において有用であり得る。その例としては、「ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）」、「ＴＨＥ ＨＡＮＤＢＯＯＫ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＡＤＤＩＴＩＶＥＳ （Ｇｏｗｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｌｉｍｉｔｅｄ）」及び「ＴＨＥ ＨＡＮＤＢＯＯＫ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＥＸＣＩＰＩＥＮＴＳ （ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ）を含む。
本開示の組成物は、当業者に既知の技術及び方法を用いて調製する。当該技術分野において一般に用いられるいくつかの方法は、「ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’ＳＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）」に記載されている。
一実施形態では、本開示は、治療有効量の一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩及び希釈剤又は増量剤を含む固形経口製剤（例えば、錠剤又はカプセル）を対象にする。適切な希釈剤及び増量剤としては、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビトール、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン及びアルファ化デンプン）、セルロース及びその誘導体（例えば、微結晶性セルロース）、硫酸カルシウム及びリン酸水素カルシウムを含む。固形経口製剤は、さらに結合剤を含み得る。適切な結合剤としては、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン及びアルファ化デンプン）、ゼラチン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、トラガカント、グアーガム、ポビドン並びにセルロース及びその誘導体（例えば、微結晶性セルロースを含む。固形経口製剤は、さらに崩壊剤を含み得る。適切な崩壊剤としては、クロスポビドン、グリコール酸デンプンナトリウム、クロスカメロース、アルギン酸及びカルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。固形経口製剤は、さらに滑沢剤を含み得る。適切な滑沢剤としては、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム及びタルクを含む。
適切な場合には、経口投与のための用量単位製剤は、マイクロカプセル化することができる。該組成物は、さらにまた、例えば、ポリマー、ワックスなどの中で粒子状材料をコーティングする又はこれらに埋め込むことによって、放出を延長する又は持続させるように調製することもできる。
本明細書中で開示されている化合物は、さらにまた、標的化可能な薬物担体としての可溶性ポリマーとカップリングさせることができる。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール又はパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリジンを挙げることができる。さらに、本開示の化合物は、薬物の制御放出の達成において有用なクラスの生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリε－カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアンアクリレート、及び、ヒドロゲルの架橋ブロックコポリマー又は両親媒性ブロックコポリマーなどと、カップリングさせることができる。
一実施形態では、本開示は、液体経口製剤を対象とする。溶液剤、シロップ剤及びエリキシル剤のような経口液体は、所定の量が所定量の本明細書に開示されている化合物又はその薬学的に許容される塩を含有するように、投与単位形態に調製することができる。シロップ剤は、本開示の化合物を適切に風味を付けた水溶液中に溶解させることによって調製することができ；エリキシル剤は、無毒性のアルコール性ビヒクルを用いて調製する。懸濁液剤は、本明細書中で開示されている化合物を無毒性のビヒクルの中に分散させることによって製剤することができる。可溶化剤及び乳化剤、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール及びポリオキシエチレンソルビトールエーテル、保存料、香味添加剤、例えば、ペパーミントオイル若しくは他の天然甘味料又はサッカリン若しくは他の人工甘味料なども加えることができる。
一実施形態では、本開示は、非経口投与のための組成物を対象とする。非経口投与に適合させた組成物としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び、製剤を意図された患者の血液と等張にする溶質を含有し得る、水性及び非水性の滅菌注射液；並びに、懸濁化剤及び増粘剤を含有し得る水性及び非水性の滅菌懸濁液を含む。該組成物は、単一用量又は複数用量の容器（例えば、密閉されたアンプル及びバイアル）の中に存在させることができ、そして、使用直前に滅菌液体担体（例えば、注射用水）の添加のみを必要とする冷凍乾燥（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ））状態で保存することができる。即時注射液及び懸濁液は、滅菌粉末、粒剤及び錠剤から調製することができる。
組み合わせ
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物及び／又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩は、１種類以上の付加的な活性薬剤と組み合わせて投与することができる。実施形態では、一般式（Ｉ）で表される１種類以上の化合物、一般式（ＩＩ）で表される１種類以上の化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される１種類以上の化合物、一般式（ＩＶ）で表される１種類以上の化合物、一般式（Ｖ）で表される１種類以上の化合物、一般式（ＶＩ）で表される１種類以上の化合物又は前記で記載した化合物の１種類以上の薬学的に許容される塩と１種類以上の付加的な活性薬剤は、共投与することができる。前記付加的な活性薬剤（類）は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と一緒の単一投与形態で投与することができ、又は、前記付加的な活性薬剤（類）は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩を含む投与形態とは分離した投与形態（類）で投与することもできる。
前記付加的な活性薬剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
前記別の活性薬剤（類）は、ＳＴＩＮＧアゴニスト化合物、抗ウィルス化合物、抗原、アジュバント、抗癌剤、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３及びＰＤ－１経路のアンタゴニスト、脂質、リポソーム、ペプチド、細胞傷害剤、化学療法剤、免疫調節性細胞株、チェックポイント阻害剤、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、スムーズン（ｓｍｏｏｔｈｅｎ）阻害剤、アルキル化剤、抗腫瘍抗生物質、代謝拮抗剤、レチノイド及び免疫調節剤（これは、限定するものではないが、抗癌ワクチンを包含する）からなる群から選択される１種類以上の活性薬剤であり得る。そのような付加的な活性薬剤（類）は、薬学的に許容される塩として提供することができることは理解される。上記の付加的な活性薬剤の説明は重複し得ることは理解される。さらにまた、治療の組み合わせが最適化されることも理解され、そして、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩及び１種類以上の付加的な活性薬剤の使用のための最良の組み合わせが個々の患者のニーズに基づいて決定されることは理解される。
本明細書中で開示されている化合物は、１種類以上の他の活性薬剤と組み合わせて用いることができ、ここで、該活性薬剤としては、限定するものではないが、特定の疾患又は症状（例えば、細胞増殖性疾患）の予防、治療、制御、寛解又はリスク低減において用いられる他の抗癌剤を含む。一実施形態では、本明細書中で開示されている化合物は、本明細書中で開示されている化合物が有用な特定の疾患又は症状の予防、治療、制御、寛解又はリスク低減における使用のための１種類以上の他の抗癌剤と組み合わされる。そのような他の活性薬剤は、その活性薬剤に関して通常用いられる経路及び量で、本開示の化合物と同時に又は順次に、投与することができる。
本明細書中で開示されている化合物が１種類以上の他の活性薬剤と同時に用いられる場合、本明細書中で開示されている化合物に加えてそのような他の活性薬剤を含有する組成物が意図される。従って、本開示の組成物は、本明細書中で開示されている化合物に加えて１種類以上の他の活性成分も含有する組成物を包含する。本明細書中で開示されている化合物は、１種類以上の他の活性薬剤と同時に、又は、前若しくは後に投与することができる。本明細書中で開示されている化合物は、同一又は異なる投与経路によって、別々に投与することができるか、又は、他の活性薬剤（類）と同じ医薬組成物中で一緒に投与することができる。
組み合わせとして提供される製品は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と１種類以上の他の活性薬剤を同じ医薬組成物中に一緒に含む組成物を包含し得るか、又は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と１種類以上の他の活性薬剤含有組成物を、別々の形態で、例えば、キットの形態で、又は、同時若しくは別々の投薬スケジュールで別々に投与できるように設計された任意の形態で含む組成物を包含し得る。
第２の活性薬剤に対する一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の重量比は変えることができ、そして、それは、各薬剤の治療有効用量に依存する。一般に、各々の治療上有効な用量が用いられる。本明細書中で開示されている化合物と他の活性薬剤の組み合わせは、一般に、前述の範囲内にあるが、各々の場合において、各活性薬剤の治療上有効な用量が用いられるべきである。そのような組み合わせにおいて、本明細書中で開示されている化合物と他の活性薬剤は、別々に投与することができるか、又は、合わせて投与することができる。加えて、一方の要素の投与は、他方の剤（類）の投与の前、同時又は後であり得る。
一実施形態では、本開示は、治療において同時、別々又は順次に使用するための組み合わせ調製物としての、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と少なくとも１種類の他の活性薬剤を含む組成物を提供する。一実施形態では、治療は、癌のような細胞増殖性疾患の治療である。
一実施形態では、本開示は、キットを提供し、ここで、該キットは、２以上の別々の医薬組成物を含み、その医薬組成物のうちの少なくとも１は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩を含む。一実施形態では、キットは、前記組成物を別々に保持する手段、例えば、容器、分割されたボトル又は分割されたホイルパックを含む。そのようなキットの例は、錠剤、カプセル剤などのパッケージングに典型的に用いられるブリスターパックである。
本開示のキットは、異なる投与形態（例えば、経口及び非経口の投与形態）の投与のために、別々の組成物の異なる投与間隔での投与のために、又は、別々の組成物の互いに対する用量設定のために用いることができる。服薬順守を支援するため、本開示のキットは、典型的には投与のための指示書を含む。
本明細書中で開示されているのは、細胞増殖性疾患を治療するための一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の使用であって、ここで、当該医薬は別の活性薬剤と一緒に投与されるように調製される。本開示は、さらにまた、細胞増殖性疾患を治療するための別の活性薬剤の使用も提供し、ここで、当該医薬は、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と一緒に投与される。
本開示は、さらにまた、細胞増殖性疾患を治療するための一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩の使用を提供し、ここで、当該患者は、前もって（例えば、２４時間以内に）別の活性薬剤で治療されている。本開示は、さらにまた、細胞増殖性疾患を治療するための別の活性薬剤の使用を提供し、ここで、当該患者は、前もって（例えば、２４時間以内に）一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩で治療されている。第２の薬剤は、本明細書中で開示されている化合物の投与の１週間後、数週間後、１ヶ月又は数ヶ月後に投与することができる。
本明細書中で開示されている、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができるＳＴＩＮＧアゴニスト化合物としては、限定するものではないが、環状ジヌクレオチド化合物、例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１４０９３９３６、ＷＯ２０１４１８９８０５、ＷＯ２０１４１８９８０６、ＷＯ２０１５１８５５６５、ＷＯ２０１６１２０３０５、ＷＯ２０１６０９６１７４、ＷＯ２０１６０９６５７７、ＷＯ２０１７０２７６４５、ＷＯ２０１７０２７６４６、ＷＯ２０１７０７５４７７、ＷＯ２０１７０９３９３３及びＷＯ２０１８００９４６６において開示されている環状ジヌクレオチド化合物などがある。
本明細書中で開示されている、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができる抗ウィルス化合物としては、Ｂ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）阻害剤、Ｃ型肝炎ウィルス（ＨＣＶ）プロテアーゼ阻害剤、ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤、ＨＣＶ ＮＳ４Ａ阻害剤、ＨＣＶ ＮＳ５Ａ阻害剤、ＨＣＶ ＮＳ５ｂ阻害剤及びヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）阻害剤を含む。そのような抗ウィルス化合物は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができる抗原及びアジュバントとしては、Ｂ７補助刺激分子、インターロイキン－２、インターフェロン－ｙ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＴＬＡ－４アンタゴニスト、ＯＸ－４０／０Ｘ－４０リガンド、ＣＤ４０／ＣＤ４０リガンド、サルグラモスチム、レバミゾール、ワクシニアウィルス、カルメット・ゲラン桿菌（ＢＣＧ）、リポソーム、ミョウバン、フロイント完全又は不完全アジュバント、無毒化エンドトキシン、ミネラルオイル、界面活性物質、例えば、リポレシチン（ｌｉｐｏｌｅｃｉｔｈｉｎ）、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド及び油又は炭化水素エマルションを含む。アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム又はリン酸アルミニウム）は、免疫応答を引き起こす、増強する又は延長するワクチンの能力を向上させるために加えることができる。上記組成物と別々に又は組み合わせて用いられる付加的な材料、例えば、サイトカイン、ケモカイン及び細菌核酸配列、例えば、ＣｐＧ、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）９アゴニスト、並びに、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９に対する付加的なアゴニスト、例えば、リポタンパク質、ＬＰＳ、モノホスホリルリピドＡ、リポテイコ酸、イミキモド、レシキモド、さらに、レチノイン酸誘発性遺伝子Ｉ（ＲＩＧ－Ｉ）アゴニスト、例えば、ｐｏｌｙＩ：Ｃも、潜在的なアジュバントである。そのような抗原及びアジュバントは、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
ＣＬＴＡ－４経路及びＰＤ－１経路は、免疫応答の重要な負の制御因子である。活性化Ｔ細胞はＣＴＬＡ－４を上昇制御させ、これが抗原提示細胞上に結合して、Ｔ細胞刺激、ＩＬ－２遺伝子発現及びＴ細胞増殖を阻害する；これらの抗腫瘍効果は、結腸癌、転移性前立腺癌及び転移性黒色腫のマウスモデルにおいて観察されている。ＰＤ－１は、活性Ｔ細胞に結合し、Ｔ細胞活性化を抑制し；ＰＤ－１アンタゴニストは、同様に抗腫瘍効果が実証されている。本明細書中で開示されている、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができるＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１経路のアンタゴニストとしては、イピリムマブ、トレメリムマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＣＴ－０１１、ＡＭＰ－２２４及びＭＤＸ－１１０６を含む。
「ＰＤ－１アンタゴニスト」又は「ＰＤ－１経路アンタゴニスト」は、癌細胞上に発現したＰＤ－Ｌ１が免疫細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞又はＮＫＴ細胞）上に発現したＰＤ－１に結合することを遮断し、好ましくは、癌細胞上に発現したＰＤ－Ｌ２が免疫細胞上に発現したＰＤ－１に結合することをも遮断する任意の化合物又は生物学的分子を意味する。ＰＤ－１及びそのリガンドの別名又は同義語としては、以下のものを含む：ＰＤ－１について、ＰＤＣＤ１、ＰＤ１、ＣＤ２７９及びＳＬＥＢ２；ＰＤ－Ｌ１について、ＰＤＣＤ１Ｌ１、ＰＤＬ１、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７－４、ＣＤ２７４及びＢ７－Ｈ；並びに、ＰＤ－Ｌ２についてＰＤＣＤ１Ｌ２、ＰＤＬ２、Ｂ７－ＤＣ、Ｂｔｄｃ及びＣＤ２７３。ヒト個体を治療する本開示の治療方法、薬剤及び使用のいずれにおいても、ＰＤ－１アンタゴニストは、ヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合を遮断し、好ましくは、ヒトＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２の両方のヒトＰＤ－１への結合を遮断する。ヒトＰＤ－１アミノ酸配列は、ＮＣＢＩ Ｌｏｃｕｓ Ｎｏ．：ＮＰ＿００５００９中に見出すことができる。ヒトＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２のアミノ酸配列は、それぞれ、ＮＣＢＩ ＬｏｃｕｓＮｏ．：ＮＰ＿０５４８６２及びＮＰ＿０７９５１５中に見出すことができる。
本開示の治療方法、薬剤及び使用のいずれにおいても有用なＰＤ－１アンタゴニストとしては、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する、好ましくは、ヒトＰＤ－１又はヒトＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）又はその抗原結合断片を含む。ｍＡｂは、ヒト抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体であることができ、そして、ヒト定常領域を包含し得る。いくつかの実施形態では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択され、好ましい実施形態では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４の定常領域である。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ及びＦｖ断片からなる群から選択される。
ヒトＰＤ－１に結合し、本開示の治療方法、薬剤及び使用において有用なｍＡｂの例は、米国特許番号ＵＳ７４８８８０２、ＵＳ７５２１０５１、ＵＳ８００８４４９、ＵＳ８３５４５０９及びＵＳ８１６８７５７、ＰＣＴ国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／００４７７１、ＷＯ２００４／０７２２８６及びＷＯ２００４／０５６８７５、並びに、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１１／０２７１３５８に記載されている。
ヒトＰＤ－Ｌ１に結合し、本開示の治療方法、薬剤及び使用において有用なｍＡｂの例は、ＰＣＴ国際特許出願番号ＷＯ２０１３／０１９９０６及びＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１並びに米国特許番号ＵＳ８３８３７９６に記載されている。本開示の治療方法、薬剤及び使用におけるＰＤ－１アンタゴニストとして有用な特異的抗ヒトＰＤ－Ｌ１ｍＡｂとしては、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ－９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、並びに、ＷＯ２０１３／０１９９０６のそれぞれ配列番号２４及び配列番号２１の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗体を含む。
本開示の治療方法、薬剤及び使用のいずれにおいても有用な他のＰＤ－１アンタゴニストとしては、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する、好ましくは、ヒトＰＤ－１又はヒトＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する免疫接着物質、例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン分子のＦｃ領域）と融合したＰＤ－Ｌ１又はＰＤ－Ｌ２の細胞外又はＰＤ－１結合部分を含有する融合タンパク質を含む。ＰＤ－１に特異的に結合する免疫接着分子の例は、ＰＣＴ国際特許出願公開番号ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２の中に記載されている。本開示の治療方法、薬剤及び使用においてＰＤ－１アンタゴニストとして有用な特異的融合タンパク質としては、ＰＤ－Ｌ２－ＦＣ融合タンパク質であってヒトＰＤ－１に結合するＡＭＰ－２２４（Ｂ７－ＤＣＩｇとしても知られる）を含む。
本開示は、さらに、ヒト患者において癌を治療する方法にも関し、ここで、該方法は、その患者に本明細書中に開示されている化合物（即ち、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩）及びＰＤ－１アンタゴニストを投与することを含む。本開示の化合物及びＰＤ－１アンタゴニストは、同時に又は順次に投与することができる。
特定の実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、抗ＰＤ－１抗体又はその抗原結合断片である。代替的な実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡＴＭ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．， Ｉｎｃ．， Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ， ＮＪ， ＵＳＡ）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯＴＭ、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ， ＮＪ， ＵＳＡ）、セミプリマブ（ＬＩＢＴＡＹＯＴＭ、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ．， Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ ， ＮＹ， ＵＳＡ）、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱＴＭ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ， Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ， ＣＡ， ＵＳＡ）、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩＴＭ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ， Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ， ＤＥ）又はアベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯＴＭ、Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ， Ｄａｒｍｓｔａｄｔ， Ｇｅｒｍａｎｙ）である。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、ペムブロリズマブである。特定のサブ実施形態では、該方法は、患者に２００ｍｇのペムブロリズマブを約３週間毎に投与することを含む。別のサブ実施形態では、該方法は、患者に４００ｍｇのペムブロリズマブを約６週間毎に投与することを含む。
さらなるサブ実施形態では、該方法は、患者に２ｍｇ／ｋｇのペムブロリズマブを約３週間毎に投与することを含む。特定のサブ実施形態では、患者は、小児患者である。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、ニボルマブである。特定のサブ実施形態では、該方法は、患者に２４０ｍｇのニボルマブを約２週間毎に投与することを含む。別のサブ実施形態では、該方法は、患者に４８０ｍｇのニボルマブを約４週間毎に投与することを含む。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、セミプリマブである。特定の実施形態では、該方法は、患者に３５０ｍｇのセミプリマブを約３週間毎に投与することを含む。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、アテゾリズマブである。特定のサブ実施形態では、該方法は、患者に１２００ｍｇのアテゾリズマブを約３週間毎に投与することを含む。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１は、デュルバルマブである。特定のサブ実施形態では、該方法は、患者に１０ｍｇ／ｋｇのデュルバルマブを約２週間毎に投与することを含む。
一部の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、アベルマブである。特定のサブ実施形態では、該方法は、患者に８００ｍｇのアベルマブを約２週間毎に投与することを含む。
一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができる細胞傷害剤の例としては、限定するものではないが、三酸化ヒ素（商品名「ＴＲＩＳＥＮＯＸ（登録商標）」で販売されている）、アスパラギナーゼ（Ｌ－アスパラギナーゼ及びエルウィニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）Ｌ－アスパラギナーゼとしても知られており、商品名「ＥＬＳＰＡＲ（登録商標）」及び「ＫＩＤＲＯＬＡＳＥ（登録商標）」で販売されている）を含む。
本明細書中で開示されている、一般式（Ｉ）で表される化合物、一般式（ＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物、一般式（ＩＶ）で表される化合物、一般式（Ｖ）で表される化合物、一般式（ＶＩ）で表される化合物又は前記で記載した化合物の薬学的に許容される塩と組み合わせて用いることができる化学療法剤としては、酢酸アビラテロン、アルトレタミン、無水ビンブラスチン、オーリスタチン、ベキサロテン、ビカルタミド、ＢＭＳ１８４４７６、２，３，４，５，６－ペンタフルオロ－Ｎ－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、ブレオマイシン、Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｌ－バリル－Ｌ－バリル－Ｎ－メチル－Ｌ－バリル－Ｌ－プロリル－１－Ｌプロリン－ｔブチルアミド、カケクチン、セマドチン、クロラムブシル、シクロホスファミド、３’，４’－ジデヒドロ－４’デオキシ－８’－ノルビン－カロイコブラスチン、ドセタキソール、ドセタキセル、シクロホスファミド、カルボプラチン、カルムスチン、シスプラチン、クリプトフィシン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デシタビンドラスタチン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エトポシド、５－フルオロウラシル、フィナステリド、フルタミド、ヒドロキシウレア及びヒドロキシウレア・アンドタキサン類（ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ ａｎｄｔａｘａｎｅｓ）、イホスファミド、リアロゾール、ロニダミン、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ＭＤＶ３１００、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、メルファラン、イセチオン酸ミボブリン、リゾキシン、セルテネフ（ｓｅｒｔｅｎｅｆ）、ストレプトゾシン、マイトマイシン、メトトレキセート、タキサン類、ニルタミド、ニボルマブ、オナプリストン、パクリタキセル、ペンブロリズマブ、プレドニムスチン、プロカルバジン、ＲＰＲ１０９８８１、リン酸ストラムスチン（ｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、タモキシフェン、タソネルミン、タキソール、トレチノイン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンスルフェート及びビンフルニンを含む。そのような化学療法剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体阻害剤の例としては、限定するものではないが、ベバシズマブ（商品名「アバスチン」で販売されている）、アキシチニブ（ＰＣＴ国際特許公開番号ＷＯ０１／００２３６９の中に記載されている）、ブリバニブアラニネート（（Ｓ）－（（Ｒ）－１－（４－（４－フルオロ－２－メチル－１Ｈ－インドール－５－イルオキシ）－５－メチルピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－６－イルオキシ）プロパン－２－イル）２－アミノプロパノエート、ＢＭＳ－５８２６６４としても知られている）、モテサニブ（Ｎ－（２，３－ジヒドロ－３，３－ジメチル－１Ｈ－インドール－６－イル）－２－［（４－ピリジニルメチル）アミノ］－３－ピリジンカルボキサミド、ＰＣＴ国際特許出願公開番号ＷＯ０２／０６８４７０の中に記載されている）、パシレオチド（ＳＯ２３０としても知られており、ＰＣＴ国際特許公開番号ＷＯ０２／０１０１９２の中に記載されている）及びソラフェニブ（商品名「ＮＥＸＡＶＡＲ」で販売されている）を含む。そのような阻害剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤の例としては、限定するものではないが、エトポシド（ＶＰ－１６及びリン酸エトポシドとしても知られており、商品名「ＴＯＰＯＳＡＲ」、「ＶＥＰＥＳＩＤ」及び「ＥＴＯＰＯＰＨＯＳ」で販売されている）及びテニポシド（ＶＭ－２６としても知られており、商品名「ＶＵＭＯＮ」で販売されている）などがある。そのような阻害剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
アルキル化剤の例としては、限定するものではないが、５－アザシチジン（商品名「ＶＩＤＡＺＡ」で販売されている）、デシタビン（商品名「ＤＥＣＯＧＥＮの」で販売されている）、テモゾロミド（商品名「ＴＥＭＣＡＤ」、「ＴＥＭＯＤＡＲ」及び「ＴＥＭＯＤＡＬ」で販売されている）、ダクチノマイシン（アクチノマイシン－Ｄとしても知られており、商品名「ＣＯＳＭＥＧＥＮ」で販売されている）、メルファラン（Ｌ－ＰＡＭ、Ｌ－サルコリシン及びフェニルアラニンマスタードとしても知られており、商品名「ＡＬＫＥＲＡＮ」で販売されている）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られており、商品名「ＨＥＸＡＬＥＮ」で販売されている）、カルムスチン（商品名「ＢＣＮＵ」で販売されている）、ベンダムスチン（商品名「ＴＲＥＡＮＤＡ」で販売されている）、ブスルファン（商品名「ＢＵＳＵＬＦＥＸ（登録商標）」及び「ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標）」で販売されている）、カルボプラチン（商品名「ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標）」で販売されている）、ロムスチン（ＣＣＮＵとしても知られており、商品名「ＣＥＥＮＵ（登録商標）」で販売されている）、シスプラチン（ＣＤＤＰとしても知られており、商品名「ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）」及び「ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）－ＡＱ」で販売されている）、クロラムブシル（商品名「ＬＥＵＫＥＲＡＮ（登録商標）」で販売されている）、シクロホスファミド（商品名「ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）」及び「ＮＥＯＳＡＲ（登録商標）」で販売されている）、ダカルバジン（ＤＴＩＣ、ＤＩＣ及びイミダゾールカルボキサミドとしても知られており、商品名「ＤＴＩＣ－ＤＯＭＥ（登録商標）」で販売されている）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られており、商品名「ＨＥＸＡＬＥＮ（登録商標）」で販売されている）、イホスファミド（商品名「ＩＦＥＸ（登録商標）」で販売されている）、プロカルバジン（商品名「ＭＡＴＵＬＡＮＥ（登録商標）」で販売されている）、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード、ムスチン及びメクロロエタミン塩酸塩（ｍｅｃｈｌｏｒｏｅｔｈａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）としても知られており、商品名「ＭＵＳＴＡＲＧＥＮ（登録商標）」で販売されている）、ストレプトゾシン（商品名「ＺＡＮＯＳＡＲ（登録商標）」で販売されている）、チオテパ（チオホスホアミド、ＴＥＳＰＡ及びＴＳＰＡとしても知られており、商品名「ＴＨＩＯＰＬＥＸ（登録商標）」で販売されている）を含む。そのようなアルキル化剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
抗腫瘍抗生物質の例としては、限定するものではないが、ドキソルビシン（商品名「ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）」及び「ＲＵＢＥＸ（登録商標）」で販売されている）、ブレオマイシン（商品名「ＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標）」で販売されている）、ダウノルビシン（ダウオルビシン塩酸塩（ｄａｕｏｒｕｂｉｃｉｎ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ダウノマイシン及びルビドマイシン塩酸塩としても知られており、商品名「ＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標）」で販売されている）、ダウノルビシンリポソーム（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ）（クエン酸ダウノルビシンリポソーム、商品名「ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標）」で販売されている）、ミトキサントロン（ＤＨＡＤとしても知られており、商品名「ＮＯＶＡＮＴＲＯＮＥ（登録商標）」で販売されている）、エピルビシン（商品名「ＥＬＬＥＮＣＥＴＭ」で販売されている）、イダルビシン（商品名「ＩＤＡＭＹＣＩＮ（登録商標）」、「ＩＤＡＭＹＣＩＮ ＰＦＳ（登録商標）」で販売されている）及びマイトマイシンＣ（商品名「ＭＵＴＡＭＹＣＩＮ（登録商標）」で販売されている）を含む。そのような抗腫瘍抗生物質は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
代謝拮抗剤の例としては、限定するものではないが、クラリビン（ｃｌａｒｉｂｉｎｅ）（２－クロロデオキシアデノシン、商品名「ＬＥＵＳＴＡＴＩＮ（登録商標）」で販売されている）、５－フルオロウラシル（商品名「ＡＤＲＵＣＩＬ（登録商標）」で販売されている）、６－チオグアニン（商品名「ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標）」で販売されている）、ペメトレキセド（商品名「ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）」で販売されている）、シタラビン（アラビノシルシトシン（Ａｒａ－Ｃ）としても知られており、商品名「ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ（登録商標）」で販売されている）、シタラビンリポソーム（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ）（リポソームＡｒａ－Ｃとしても知られており、商品名「ＤＥＰＯＣＹＴＴＭ」で販売されている）、デシタビン（商品名「ＤＡＣＯＧＥＮ（登録商標）」で販売されている）、ヒドロキシウレア（商品名「ＨＹＤＲＥＡ（登録商標）」、「ＤＲＯＸＩＡＴＭ」及び「ＭＹＬＯＣＥＬＴＭ」で販売されている）、フルダラビン（商品名「ＦＬＵＤＡＲＡ（登録商標）」で販売されている）、フロクスウリジン（商品名「ＦＵＤＲ（登録商標）」で販売されている）、クラドリビン（２－クロロデオキシアデノシン（２－ＣｄＡ）としても知られており、商品名「ＬＥＵＳＴＡＴＩＮＴＭ」で販売されている）、メトトレキセート（アメトプテリン、メトトレキセートナトリウム（ＭＴＸ）としても知られており、商品名「ＲＨＥＵＭＡＴＲＥＸ（登録商標）」及び「ＴＲＥＸＡＬＬ（商標）」で販売されている）及びペントスタチン（商品名「ＮＩＰＥＮＴ（登録商標）」で販売されている）を含む。そのような代謝拮抗剤は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
レチノイドの例としては、限定するものではないが、アリトレチノイン（商品名「ＰＡＮＲＥＴＩＮ（登録商標）」で販売されている）、トレチノイン（全トランス型レチノイン酸、ＡＴＲＡとしても知られている、商品名「ＶＥＳＡＮＯＩＤ（登録商標）」で販売されている）、イソトレチノイン（１３－ｃ／ｓ－レチノイン酸、商品名「ＡＣＣＵＴＡＮＥ（登録商標）」、「ＡＭＮＥＳＴＥＥＭ（登録商標）」、「ＣＬＡＲＡＶＩＳ（登録商標）」、「ＣＬＡＲＵＳ（登録商標）」、「ＤＥＣＵＴＡＮ（登録商標）」、「ＩＳＯＴＡＮＥ（登録商標）」、「ＩＺＯＴＥＣＨ（登録商標）」、「ＯＲＡＴＡＮＥ（登録商標）」、「ＩＳＯＴＲＥＴ（登録商標）」及び「ＳＯＴＲＥＴ（登録商標）」で販売されている）及びベキサロテン（商品名「ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標）」で販売されている）を含む。そのような化合物は、適切な場合には、薬学的に許容される塩として提供することができる。
活性： ＳＴＩＮＧ生化学的［３Ｈ］ｃＧＡＭＰ競合アッセイ
本明細書中の実施例において記載されている個々の化合物は、（ｉ）ＳＴＩＮＧタンパク質に結合すること〔これは、ＳＴＩＮＧ生化学的［３Ｈ］ｃＧＡＭＰ競合アッセイにおいて、トリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドのＳＴＩＮＧタンパク質への結合が２０μＭ（被験化合物の濃度）で少なくとも２０％低減されることによって立証される〕、及び／又は、（ｉｉ）ＴＨＰ１細胞アッセイ（３０μＭのｃＧＡＭＰによって生じる誘発を１００％に設定）において３０μＭでＩＦＮ－β分泌の６％以上の誘発を伴うインターフェロン産生を示すこと、によって、ＳＴＩＮＧアゴニストであると定義される。
化合物がＳＴＩＮＧに結合する能力は、放射性フィルター結合アッセイを用いて、ヒトＳＴＩＮＧ受容体膜についてのトリチウム標識ｃＧＡＭＰリガンドとの競合能によって定量される。該結合アッセイでは、社内で調製した全長ＨＡＱ ＳＴＩＮＧを過剰発現するＨｉ－Ｆｉｖｅ細胞膜から得られるＳＴＩＮＧ受容体、及び、同様に社内で精製したトリチウム標識ｃＧＡＭＰリガンドを使用している。
以下の実験手順は、本開示の具体例の調製について詳細に説明している。実施例の化合物は、下記の手順及び表においては中性形態で描かれている。場合により、それらの化合物は、それらの最終的な精製に使用される方法及び／又は固有の分子特性に応じて、塩として単離した。該実施例は、例証することのみを目的としており、決して本開示の範囲を限定することを意図するものではない。
実施例
Figure 0007326319000104
Figure 0007326319000105
Figure 0007326319000106
Figure 0007326319000107
Figure 0007326319000108
調製１： ３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロパン酸マグネシウム
Figure 0007326319000109
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロパン酸（１０．０ｇ、６２．４ｍｍｏｌ）の混合物に、２０℃で、マグネシウムエタノラート（３．５７ｇ、３１．２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を、アルゴン下、２０℃で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣を減圧下で乾燥させて、３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロパン酸マグネシウムが得られた。
1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 2.96 (s, 4H), 1.39 (s, 18H)。
調製２： ３－（２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－イル）－３－オキソプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000110
段階１： ３－ブロモ－５，６－ジメトキシピラジン－２－カルバルデヒド
Figure 0007326319000111
２，２，６，６－テトラメチルピペリジン（５．１２ｍＬ、３０．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中の溶液に、－７８℃で、ｎ－ＢｕＬｉの溶液（Ｈｅｘ中２．５Ｍ、１１．５ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を－７８℃で１０分間撹拌し、次いで、０℃まで昇温させ、２０分間撹拌した。次いで、その反応混合物を冷却して－７８℃に戻し、５－ブロモ－２，３－ジメトキシピラジン（３．００ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中の溶液を５分間かけて添加した。その反応混合物を－７８℃で１時間撹拌し、次いで、ＤＭＦ（１．０６ｍＬ、１３．７ｍｍｏｌ）でクエンチした。その反応混合物を０℃まで昇温させ、さらに２０分間撹拌した。ＡｃＯＨ（３．０ｍＬ）を０℃で添加し、その反応混合物を室温まで昇温させ、一晩撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、次いで、Ｈ２Ｏ（２×１５０ｍＬ）及び飽和水性ＮａＣｌで洗浄した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、３－ブロモ－５，６－ジメトキシピラジン－２－カルバルデヒドが得られた。
LCMS (C7H8BrN2O3) (ES, m/z): 247, 249 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 10.19 (s, 1H), 4.17 (s, 3H), 4.14 (s, 3H)。
段階２： ２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000112
２－スルファニル酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（４２４μＬ、２．９２ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（２．９ｍＬ）を、３－ブロモ－５，６－ジメトキシピラジン－２－カルバルデヒド（６５０ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）に室温で添加した。次いで、その反応混合物に、室温で、Ｋ２ＣＯ３（１０９０ｍｇ、７．８９ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。その反応混合物を８０℃に加熱し、一晩撹拌した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、Ｅｔ２Ｏで希釈し、Ｈ２Ｏでクエンチした。その反応混合物をＥｔ２Ｏで抽出し、合わせた有機物を飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C13H17N2O4S) (ES, m/z): 297 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.89 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 1.55 (s, 9H)。
段階３： ２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸
Figure 0007326319000113
２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４００ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６．０ｍＬ）中の撹拌溶液に、ＨＣｌ（ジオキサン中４．０Ｍ、１．７ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）を室温で添加した。その反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、Ｈｅｘ（５０ｍＬ）を滴下して加えることによって希釈し、室温で１時間撹拌した。その反応混合物を濾過し、収集した物質をＨｅｘ（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮して、２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸が得られた。
LCMS (C9H9N2O4S) (ES, m/z): 241 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (br s, 1H), 7.90 (s, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.99 (s, 3H)。
段階４： ３－（２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－イル）－３－オキソプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000114
ＴＨＦ（５．５ｍＬ）中の２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－カルボン酸（８０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）とＣＤＩ（３２４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）の混合物を室温で３時間撹拌した。その混合物にマグネシウムビス（３－ｔｅｒｔ－ブトキシ－３－オキソプロパノエート）（６２８ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の（ＥｔＯＡｃ中の２５％ＥｔＯＨ）で溶離）で精製して、３－（２，３－ジメトキシチエノ［２，３－ｂ］ピラジン－６－イル）－３－オキソプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C15H19N2O5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 1.41 (s, 9H)。
調製３： ５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000115
段階１： ５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000116
ＤＭＦ（８．３ｍＬ）中、３－クロロ－５，６－ジメトキシピコリンアルデヒド（５７５ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）と２－スルファニル酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．４５６ｍＬ、３．１４ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、Ｋ２ＣＯ３（１１８０ｍｇ、８．５６ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、３日間６０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、Ｅｔ２ＯとＨ２Ｏで希釈した。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 1.54 (s, 9H)。
段階２： ５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000117
５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４９３ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７．４ｍＬ）中の溶液に，室温で、ＨＣｌ（Ｈ２Ｏ中の４．０Ｍ、２．１ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、Ｈｅｘ（５０ｍＬ）を滴下して加えることによって希釈した。その混合物を１時間撹拌し、次いで、濾過した。収集した物質をＨｅｘ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、次いで、減圧下で乾燥させて、５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸が得られた。
LCMS (C10H10NO4S) (ES, m/z): 240 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (s, 3H)。
調製４： ３－（５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－３－オキソプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000118
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸（５００ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）の混合物に、ＣＤＩ（５０８ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した。その反応混合物を３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロパン酸マグネシウム（１２２０ｍｇ、３．５５ｍｍｏｌ）を含む別のフラスコに加えた。その反応混合物を追加のＴＨＦ（４ｍＬ）で希釈し、室温で一晩撹拌した。次いで、その反応混合物を１時間５０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。クエン酸ナトリウム三塩基二水和物（２ｇ）及びＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を添加した。その有機層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、３－（５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－３－オキソプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H20NO5S) (ES, m/z): 338 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.97 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 1.48 (s, 9H)。
調製５： Ｃ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４
Figure 0007326319000119
Figure 0007326319000120
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の（２’－メチルアミノ－１，１’－ビフェニル－２－イル）メタンスルホナトパラジウム（ＩＩ）二量体（４３９ｍｇ、０．５７３ｍｍｏｌ）と２’－（ジシクロヘキシルホスフィノ）－Ｎ２，Ｎ２，Ｎ６，Ｎ６－テトラメチル－［１，１’－ビフェニル］－２，６－ジアミン（５００ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）の混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、その溶液をＥｔ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈した。その溶液を濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、その残渣をペンタン中でスラリー化し、再度減圧下で濃縮して、Ｃ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４が得られた。「Ｂｒｕｎｏ， Ｎ． Ｃ．；Ｎｉｌｊｉａｎｓｋｕｌ， Ｎ．；Ｂｕｃｈｗａｌｄ， Ｓ． Ｌ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ２０１４， ７９， ４１６１」を参照されたい。
中間体１： （Ｓ）－４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000121
段階１： ５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000122
ＤＭＦ（１０．４５ｍＬ）中の５，６－ジメトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸（１．００ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、０℃で、ＰＯＣｌ３（１．１７ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、その反応混合物を室温まで昇温させた。次いで、その反応混合物を１００℃に加熱し、４５分間撹拌した。その反応混合物を氷水（１００ｍＬ）に添加し、撹拌した。その混合物を濾過し、その収集した物質を水（２×３０ｍＬ）及びＨｅｘ（５０ｍＬ）で洗浄した。その収集した物質をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。その収集した物質をＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）に溶解させ、その混合物を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリドが得られた。
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.32 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 4.06 (s, 3H)。
段階２： （Ｓ）－４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000123
ＣｕＩ（０．０７３ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を減圧下に置き、ヒートガンを用いて１分間加熱した。そのフラスコを室温まで冷却し、次いで、Ｎ２に開放した。さらに２回、そのフラスコを排気し、次いで、Ｎ２を再充填した。そのフラスコは、ゴム製隔膜とＮ２注入口を用いて正のＮ２圧下に維持した。そのフラスコにＴＨＦ（２ｍＬ）を添加し、その反応混合物を氷水浴内で冷却した。その反応混合物に、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドのＴＨＦ（０．５０Ｍ、１．６８ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）中の溶液を５分間かけて滴下して加えた。その反応混合物を０℃で１０５分間撹拌した。次いで、ＮＭＰ（３ｍＬ）中の５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド（０．２００ｇ、０．７６３ｍｍｏｌ）の混合物を５分間かけて滴下して加えた。次いで、その反応混合物を０℃で３時間撹拌した。次いで、その反応混合物を、酢酸イソプロピル（５０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム（水中２０％（ｗ／ｖ）、５０ｍＬ）の撹拌混合物に添加した。２０分間撹拌した後、層を分離し、その水層を酢酸イソプロピル（３０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C14H15ClNO4S) (ES, m/z): 328 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.99 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.51 (dd, J=17.2, 7.9Hz, 1H), 3.21-3.12 (m, 1H), 3.06 (dd, J=17.2, 5.2Hz, 1H), 1.32 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000124
段階１： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000125
４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．７５ｇ、４．３８ｍｍｏｌ；純度８１％）及びＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（０．１７７ｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）を、隔膜を含むねじ蓋を有する４０ｍＬ容バイアルに添加した。そのバイアルを排気及びＮ２の再充填に３回付した。Ｎ２下で撹拌しながら、そのバイアルにＴＨＦ（１５．７ｍＬ）を添加した。得られた懸濁液を室温で撹拌しながら、（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１７．５ｍＬ、８．７５ｍｍｏｌ）を撹拌しながら滴下して加えた。その混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応物をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）と１０％水性クエン酸ナトリウム（７５ｍＬ）の間で分配させ、５分間強く撹拌した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の０→４０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C26H40NaO5SSi) (ES, m/z): 515 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.89 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.67 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.28 (t, J=6.8Hz, 2H), 2.76 (t, J=7.2Hz, 2H), 2.72 (t, J=7.2Hz, 2H), 1.85 (p, J=6.5Hz, 2H), 1.46 (s, 9H), 0.94 (s, 9H), 0.08 (s, 6H)。
段階２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000126
ＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）中の４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．４５ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）の混合物に、水（５．０ｍＬ）及びＨＯＡｃ（５．０ｍＬ）を添加した。得られた懸濁液を室温で１８時間撹拌した。その反応物をＥｔＯＡｃと水性ＮａＣｌの間で分配させた。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。その得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C20H26NaO5S) (ES, m/z): 401 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.89 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.68 (t, J=5.5Hz, 2H), 3.28 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.82 (t, J=7.3Hz, 2H), 2.72 (t, J=6.6Hz, 2H), 1.96-1.83 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体３： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000127
ＴＨＦ（２．８ｍＬ）中の４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．２２ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の混合物に、トリフェニルホスフィン（０．２４ｇ、０．９１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を０℃まで冷却し、ＮＢＳ（０．１５ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を一度に添加した。０℃で３０分間撹拌した後、その反応物を飽和水性ＡｌＣｌ３及びＥｔＯＡｃで希釈した、その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、得られた生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H18BrO4S) (ES, m/z): 385, 387 [M-C4H8]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.60-3.49 (m, 2H), 3.30-3.21 (m, 2H), 2.88-2.75 (m, 2H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.18-2.06 (m, 2H), 1.38 (s, 9H)。
中間体４： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000128
段階１： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000129
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（５．０ｇ、１７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中の懸濁液に、濃Ｈ２ＳＯ４（３．０ｍＬ、５６ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を４．５日間７０℃に加熱した。次いで、その混合物を室温まで冷却し、水で稀釈した。その混合物にＣＨＣｌ３中の３０％ＩＰＡを添加した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチルが得られた。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (s, 3H)。
段階２： （５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メタノール
Figure 0007326319000130
ＴＨＦ（９．０ｍＬ）中の５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（０．７８ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＬＡＨ（ＴＨＦ中１．０Ｍ、２．８ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。４０分間経過した後、その反応混合物を飽和水性ＡｌＣｌ３で希釈した。ＥｔＯＡｃを添加し、その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた物質をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メタノールが得られた。
LCMS (C10H8BrOS) (ES, m/z): 255, 257 [M-OH]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.01 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.69-5.59 (m, 1H), 4.73-4.64 (m, 2H), 3.89 (s, 3H)。
段階３： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒド
Figure 0007326319000131
ＤＣＭ（９７ｍＬ）中の（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）メタノール（４．０ｇ、１５ｍｍｏｌ）の混合物に、二酸化マンガン（６．３ｇ、７３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で２０時間撹拌し、次いで、ＣＥＬＩＴＥのプラグで濾過した。その濾液を減圧下で濃縮した。得られた生成物をＭｅＯＨ中で摩砕し、その混合物をグラスフリットに通して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒドを収集した。
LCMS (C10H8BrO2S) (ES, m/z): 271, 273 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.07 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 3.97 (s, 3H)。
段階４： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000132
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒド（０．３０ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、２－メシチル－２，５，６，７－テトラヒドロ－ピロロ［２，１－ｃ］［１，２，４］トリアゾール－４－イウムクロリド（０．０２９ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びＫ３ＰＯ４（０．２４ｇ、１．１ｍｍｏｌ）のトルエン（２．２ｍＬ）中の懸濁液に、ＡＣＮ（０．１５ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物をアルゴン下に置き、室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリルが得られた。
LCMS (C13H11BrNO2S) (ES, m/z): 324, 326 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.33-8.22 (m, 2H), 7.84 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.59-3.44 (m, 2H), 2.88-2.73 (m, 2H)。
中間体５： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000133
段階１： ５－ブロモ－２－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒド
Figure 0007326319000134
Ｂｒ２（６．０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中の溶液に、０℃で、２－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒド（９．０ｇ、５８ｍｍｏｌ）をゆっくりと（少量ずつ）添加した。その反応混合物を０℃で２時間撹拌した。その反応混合物に、０℃で、ＮａＨＳＯ３（２４．３ｇ、２３４ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３００ｍＬ）中の溶液をゆっくりと添加した。次いで、得られた懸濁液を０℃で３０分間撹拌した。その反応混合物を濾過し、その濾液をさらなるＨ２Ｏ（３×２５ｍＬ）で洗浄した。次いで、その濾液を減圧下で乾燥させて、５－ブロモ－２－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒドが得られた。その生成物は、精製することなく使用した。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 10.02 (s, 1H), 7.98 (d, J=7.5Hz, 1H), 7.26 (d, J=13.0Hz, 1H), 3.97 (s, 3H)。
段階２： ５－ブロモ－６－メトキシ（ｍｅｈｏｘｙ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000135
５－ブロモ－２－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒド（１０．７ｇ、４５．８ｍｍｏｌ）と２－メルカプト酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（６．６５ｍＬ、４５．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中の溶液に、アルゴン下、２０℃で、Ｋ２ＣＯ３（１９．０ｇ、１３７ｍｍｏｌ）をゆっくりと（少量ずつ）添加した。その反応混合物を撹拌し、１６時間１００℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、Ｅｔ２Ｏ（１０００ｍＬ）で希釈した。次いで、その混合物をＨ２Ｏ（５００ｍＬ、次いで、２×２５０ｍＬ）で洗浄し、合わせた水層をＥｔ２Ｏ（２×２００ｍＬ）で抽出した。次いで、その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。その生成物は、精製することなく使用した。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.26 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.55 (s, 9H)。
段階３： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000136
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１５．５ｇ、４５．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２００ｍＬ）中の溶液に、２０℃で、ＨＣｌ（５６ｍＬ、１，４－ジオキサン中４．０Ｍ、２３０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を２０℃で３日間撹拌した。次いで、その反応混合物を、Ｈｅｘ（５００ｍＬ）を滴下して加えることによって希釈した。室温での添加後、得られた懸濁液をさらに２時間撹拌した。その反応混合物を濾過し、収集した物質をＨｅｘ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥させて、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸が得られた。これは、精製することなく使用した。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 13.42 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 3.93 (s, 3H)。
段階４： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000137
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（６．０ｇ、２１ｍｍｏｌ）と（ＣＯＣｌ）２（５．５ｍＬ、６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中の溶液に、アルゴン下、０℃で、ＤＭＦ（０．０４９ｍＬ、０．６３ｍｍｏｌ）をゆっくりと（滴下して）加えた。その反応混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させた。その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドが得られた。その生成物は、精製することなく使用した。
段階５： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000138
オーブンで乾燥させた、（（チオフェン－２－カルボニル）オキシ）銅（１．３１ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、アルゴン下、０℃で、（３－エトキシ－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドの溶液（１３．８ｍＬ、ＴＨＦ中０．５０Ｍ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を、アルゴン下、０℃で２０分間撹拌した。次いで、その反応混合物に、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（１．５２ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５．０ｍＬ）中のＡｒ脱ガス溶液を０℃でカニューレを介して添加した；得られた懸濁液を室温まで昇温させ、３時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）でクエンチした。その混合物を室温まで昇温させ、１０分間撹拌した。その混合物を濾過し、その濾液をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）と飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌ（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C15H16BrO4S) (ES, m/z): 371, 373 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.27 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 4.07-4.02 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.35-3.25 (m, 2H), 2.68-2.64 (m, 2H), 1.20-1.14 (m, 3H)。
中間体６： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000139
中間体６は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記で中間体５に関して略述した手順と同様の手順に従って調製することができる。
中間体７： ４－（６－メトキシ－５－（３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000140
段階１： ４－（５－アリル－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000141
４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（５．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（１．６ｇ、１．３ｍｍｏｌ）及びジオキサン（１５ｍＬ）を含むバイアルに、アリルトリ－ｎ－ブチルスズ（５．４ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を１８時間９０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＤＣＭで希釈し、ＣＥＬＩＴＥで濾過し、水性ＫＦ（０．５Ｍ、２００ｍＬ）を含むフラスコに添加した。その混合物を撹拌し、次いで、その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－アリル－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C18H21O4S) (ES, m/z): 333 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 5.96 (dq, J=15.9, 6.6Hz, 1H), 5.04 (d, J=4.5Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.01 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.37 (d, J=6.3Hz, 2H), 3.27 (dd, J=11.0, 4.3Hz, 2H), 2.62 (t, J=6.1Hz, 2H), 1.13 (t, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： ４－（６－メトキシ－５－（３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000142
１，４－ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン（０．４５ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、クロロ（１，５－シクロオクタジエン）イリジウム（ｉ）二量体（０．３５ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、４－（５－アリル－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（３．５ｇ、１１ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（２０ｍＬ）の混合物に、ピナコールボラン（ＴＨＦ中１．０Ｍ、１５．８ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を室温で４時間撹拌した。次いで、その溶媒を減圧下で除去し、その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→２０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－メトキシ－５－（３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.02 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.27 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.62 (t, J=6.1Hz, 2H), 2.58 (t, J=7.4Hz, 2H), 1.58 (p, J=7.4Hz, 2H), 1.16-1.11 (m, 15H), 0.67 (t, J=7.6Hz, 2H)。
中間体８： ４－（６－（３－ブロモプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000143
段階１： ６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000144
４－ブロモ－２－フルオロ－５－メトキシベンズアルデヒド（５．００ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）中の撹拌溶液に、２－メルカプト酢酸メチル（２．５１ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（８．９０ｇ、６４．４ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物をＮ２を用いて３回脱ガスした。次いで、得られた混合物を室温で１５時間撹拌した。その反応混合物に、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１２００ｍＬ）を添加した。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌ（２×２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ中ＥｔＯＡｃ）で精製し、６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチルが得られた。
LCMS (C11H10BrO3S) (ES, m/z): 301, 303 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CDCl3): δ=8.01 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.94 (s, 3H)。
段階２： ６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000145
６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（１．４５ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）とＴＨＦ（２０ｍＬ）とＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の懸濁液に、ＮａＯＨ（１．９３ｇ、４８．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を０．５時間５０℃に加熱した。その反応混合物を減圧下で濃縮して溶媒を除去した。その残渣にＨ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加し、そして、クエン酸を添加してその溶液をｐＨ＝６に調節した。残った水性懸濁液をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸が得られた。これは、それ以上精製することなく使用した。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ=13.52 (br s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 3.90 (s, 3H)。
段階３： ６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000146
６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（８００ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（６ｍＬ）中の撹拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（１．０６ｇ、８．３６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下して加えた。次いで、その混合物を７５℃で１５時間加熱し、次いで、室温まで冷却した。その溶媒を減圧下で除去して、粗製６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドが得られた。これは、それ以上精製することなく使用した。
段階４： ４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000147
丸底フラスコにＣｕＩ（０．２４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。そのフラスコを排気し、次いで、Ｎ２に開放した。これを、３回繰り返した。ＴＨＦ（４．０ｍＬ）を添加し、その混合物を０℃まで冷却した。（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドの混合物（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、９．６ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）を０℃で１０分間かけて滴下して加えた。得られた混合物を３０分間撹拌した。６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（０．７３ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を氷浴から取り出し、室温まで昇温させた。その混合物を２時間撹拌した。次いで、その混合物を０℃まで冷却し、濃ＮＨ４ＯＨ（４．５ｍＬ）を添加した。得られた懸濁液に、水（２４０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（６０ｍＬ）を添加した。その混合物を５分間撹拌し、バスソニケーター内で超音波処理した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C17H19BrO4S) (ES, m/z): 421, 423 [M+Na]+。
段階５： ４－（６－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000148
４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．１６ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（２．０ｍＬ）を含むフラスコに、［（２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，６’－ビス（Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノ）－１，１’－ビフェニル）－２－（２’－アミノ－１，１’－ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）メタンスルホネート（Ｃ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３、１６ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を添加した。そのフラスコを排気し、３回、Ｎ２を再充填した。（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、２．４ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で２．５時間撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃと１０％水性クエン酸ナトリウムの混合物でクエンチした。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗製残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（６－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C26H41O5SSi-C4H8) (ES, m/z): 437 [M-C4H8]+。
段階６： ４－（６－（３－ヒドロキシプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000149
４－（６－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．１１ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）、水（１．５ｍＬ）及びＨＯＡｃ（１．５ｍＬ）を添加した。その混合物を４時間撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで、水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗製残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、４－（６－（３－ヒドロキシプロピル）－５－メトキシ－ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C20H27O5S-C4H8) (ES, m/z): 323 [M-C4H8]+。
段階７： ４－（６－（３－ブロモプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000150
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の４－（６－（３－ヒドロキシプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７４ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（８２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＮＢＳ（５２ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１５分間経過した後、その混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗製残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、４－（６－（３－ブロモプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C20H26BrO4S-C4H8) (ES, m/z): 385, 387 [M-C4H8]。
中間体９： ４－（４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000151
段階１： ２－ブロモ－６－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒド
Figure 0007326319000152
ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中の１－ブロモ－３－フルオロ－５－メトキシベンゼン（７．５ｇ、３７ｍｍｏｌ）の混合物に、－７８℃で、ＬＤＡ（ＴＨＦ中２．０Ｍ、２２ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を－７８℃で３０分間撹拌した。３０分間経過した後、ＤＭＦ（３．４ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を滴下して加え、次いで、その混合物を３０分間撹拌した。次いで、その混合物を水でクエンチし、室温まで昇温させ、次いで、ＥｔＯＡｃを添加した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃでさらに２回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、２－ブロモ－６－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒドが得られた。
LCMS (C8H7BrFO2) (ES, m/z): 233, 235 [M+H]+。
段階２： ４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000153
ＤＭＳＯ（５４ｍＬ）中の２－ブロモ－６－フルオロ－４－メトキシベンズアルデヒド（２．５ｇ、１１ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＥＡ（３．０ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間経過した後、チオグリコール酸メチル（３．１ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で３０分間撹拌した。３０分間経過した後、その混合物を１時間６０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ３とＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチルが得られた。
LCMS (C11H10BrO3S) (ES, m/z): 301, 303 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.93 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.87 (s, 3H)。
段階３： ４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000154
ＴＨＦ（１４ｍＬ）中の４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（１．７ｇ、５．５ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（７．０ｍＬ）と水（７．０ｍＬ）の混合物に、ＬｉＯＨ（０．６６ｇ、２８ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を２時間４０℃に加熱した。２時間経過した後、その混合物を室温まで冷却した。その混合物を水性ＨＣｌ（水中２．０Ｍ、１４ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）でクエンチした。その混合物を濾過し、その残渣をＥｔＯＡｃで洗浄した。次いで、その残渣を減圧下で乾燥させ、それ以上精製することなく使用した。
LCMS (C10H8BrO3S) (ES, m/z): 287, 289 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 13.57 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.38 (d, J=1.7Hz, 1H), 3.86 (s, 3H)。
中間体１０： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000155
段階１： ４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000156
４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（１３ｇ、３５ｍｍｏｌ）とＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（１．４ｇ、１．７ｍｍｏｌ）の混合物に、（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１００ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を一度に添加した。その反応物を２時間４０℃に加熱した。次いで、その混合物を室温まで冷却し、ＣＥＬＩＴＥで濾過した。その濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C23H31O6S) (ES, m/z): 435 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.02 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.70 (t, J=8.1Hz, 1H), 3.65-3.58 (m, 1H), 3.40-3.34 (m, 1H), 3.33-3.29 (m, 3H), 2.73-2.59 (m, 4H), 1.79 (p, J=6.7Hz, 2H), 1.69 (d, J=8.7Hz, 1H), 1.58 (t, J=7.9Hz, 1H), 1.48-1.34 (m, 4H), 1.14 (t, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000157
４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタノエート（６．２ｇ、１４ｍｍｏｌ）とＤＣＭ（１００ｍＬ）の混合物に、０℃で、トリフェニルホスフィンジブロミド（９．０３ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。その混合物を室温まで昇温させ、次いで、１時間撹拌した。次いで、その混合物を水でクエンチし、ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C18H22BrO4S) (ES, m/z): 413, 415 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 4.02 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.50 (t, J=6.5Hz, 2H), 3.27 (d, J=6.4Hz, 2H), 2.75 (t, J=7.3Hz, 2H), 2.63 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.07 (p, J=6.7Hz, 2H), 1.14 (t, J=7.1Hz, 3H)。
中間体１１： ４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000158
段階１： ４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000159
ＡＣＮ（１ｍＬ）中の５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１－クロロメチル－４－フルオロ－１，４－ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（ＳＥＬＥＣＴＦＬＵＯＲＴＭ、７７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を４５℃で１５時間撹拌した。その混合物を室温まで冷却し、飽和水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性ＮａＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣を分取ＴＬＣ（ＳｉＯ２、ＰＥ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチルが得られた。
LCMS (C12H12FO4S) (ES, m/z): 293 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.05 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.94 (s, 3H)。
段階２： ４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000160
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（４６ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（１ｍＬ）とＨ２Ｏ（１ｍＬ）の混合物に、室温で、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（７１．４ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。次いで、その混合物を１５時間撹拌した。その混合物を、１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ＝５に調節し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和水性ＮａＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸が得られた。
LCMS (C11H9FO4S) (ES, m/z): 257 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, CDCl3): δ 8.12 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.97 (s, 3H)。
段階３： ４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000161
４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（１５３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の撹拌溶液に、（ＣＯＣｌ）２（０．２１ｍＬ、２．４０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下して加えた。その混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温で１時間撹拌した。その溶媒を減圧下で除去して、４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドが得られ、これは、それ以上精製することなく使用した。
段階４： ４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000162
チオフェン－２－カルボン酸銅（Ｉ）（１２５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の懸濁液に５分間Ｎ２をスパージし、次いで、０℃まで冷却した。（３－エトキシ－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドの溶液（１７．７ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ、８．８３ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下、０℃で添加し、その反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。次いで、４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（１３０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）のＮ２ガスをスパージしたＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を０℃で添加した。得られた懸濁液を室温まで昇温させ、８時間撹拌した。その混合物を、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）を撹拌しながら、その中に添加した。その混合物をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＨ２Ｏと飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃ）で精製して、４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.02 (d, J=0.7Hz, 1H), 7.10 (t, J=1.0Hz, 1H), 4.19 (q, J=7.2Hz, 2H), 4.05-3.97 (m, 6H), 3.36 (t, J=6.7Hz, 2H), 2.81 (t, J=6.7Hz, 2H), 1.29 (t, J=7.2Hz, 3H)。
段階５： ４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000163
４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（３．６ｇ、１１ｍｍｏｌ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）の混合物に、ＡｌＣｌ３（５．６４ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応容器に添加漏斗を連結し、その混合物を強く撹拌しながら、それに水（５０ｍＬ）をゆっくりと添加し、その後、水性ＨＣｌ（１Ｎ、５０ｍＬ）を添加した。次いで、その混合物を２０％ＩＰＡ／ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００％ＤＣＭ）で精製して、４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C15H16FO5S) (ES, m/z): 327 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 9.53 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 4.06 (q, J=7.1Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.39-3.34 (m, 2H), 2.68-2.63 (m, 2H), 1.18 (t, J=7.1Hz, 3H)。
中間体１２： （Ｓ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000164
段階１： （２Ｓ）－メチル－４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000165
（Ｓ）－メチル－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（７．０ｇ、１９ｍｍｏｌ）とＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．７６ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）の混合物に、（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１００ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を２時間４０℃に加熱した。次いで、その混合物を室温まで冷却し、ＣＥＬＩＴＥで濾過した。その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（２Ｓ）－メチル－４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C23H31O6S) (ES, m/z): 435 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.70 (dd, J=13.2, 5.3Hz, 1H), 3.64-3.58 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.42-3.35 (m, 2H), 3.35-3.29 (m, 1H), 3.15 (dd, J=17.4, 4.9Hz, 1H), 2.94 (dt, J=12.9, 7.1Hz, 1H), 2.67 (hept, J=7.6, 7.1Hz, 2H), 1.79 (p, J= 6.7Hz, 2H), 1.69 (d, J=8.7Hz, 1H), 1.58 (t, J=7.9Hz, 1H), 1.48-1.35 (m, 4H), 1.18-1.11 (m, 3H)。
段階２： （Ｓ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000166
（２Ｓ）－メチル－４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２．６２ｇ、６．０３ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（５０ｍＬ）の混合物に、ｐＴｓＯＨ（１．７２ｇ、９．０４ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、その混合物を水でクエンチし、ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、次いで、水性飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。次いで、その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｓ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C18H23O5S) (ES, m/z): 351 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 4.44 (t, J=5.0Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.42-3.35 (m, 3H), 3.15 (dd, J=17.4, 4.9Hz, 1H), 2.93 (h, J=7.0Hz, 1H), 2.64 (t, J=7.6Hz, 2H), 1.68 (p, J=6.6Hz, 2H), 1.15 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体１３： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000167
段階１： ５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000168
ＤＭＳＯ（１２０ｍＬ）中の５－ブロモ－２－フルオロ－４－メチルベンズアルデヒド（５．０ｇ、２３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＥＡ（６．４ｍＬ、４６ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間経過した後、チオグリコール酸メチル（６．７ｍＬ、６９ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、その混合物を１８時間６０℃に加熱した。１８時間経過した後、その混合物を室温まで冷却し、その混合物をＥｔＯＡｃと水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その混合物をＤＣＭで希釈した。その混合物を濾過し、その残渣を減圧下で乾燥させた。その母液にシリカゲル（５０ｇ）を添加し、その混合物を濃縮した。次いで、その混合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチルが得られた。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.48 (s, 3H)。
段階２： ５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000169
５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸メチル（２．７６ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（２４ｍＬ）、水（１２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）の混合物に、ＬｉＯＨ（１．１６ｇ、４８．４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、その混合物をＨＣｌ（水中１．０Ｍ、４８ｍＬ、４８ｍｍｏｌ）を用いて酸性化してほぼ中性とした。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃと水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸が得られた。その生成物は、精製することなく使用した。
LCMS (C10H8BrO2S) (ES, m/z): 271, 273 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 13.56 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 2.47 (s, 3H)。
段階３： ５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン
Figure 0007326319000170
５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（５．７ｇ、２１ｍｍｏｌ）にＤＭＡ（１００ｍＬ）を添加した。次いで、その混合物を５つのバイアルに均等に分けた。ＤＢＵ（１．６ｍＬ）を各バイアルに添加し、次いで、マイクロ波オーブンの中で各バイアルを２時間照射して２００℃とした。完了後、その５つのバイアルを合し、次いで、ＥｔＯＡｃと飽和水性ＮａＨＣＯ３で希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェンが得られた。
1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.75 (d, J=5.4Hz, 1H), 7.39 (d, J=5.3Hz, 1H), 2.45 (s, 3H)。
段階４： ４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000171
ＤＣＭ（８８ｍＬ）中の５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン（２．０ｇ、８．８ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、無水コハク酸（１．１ｇ、１１ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＡｌＣｌ３（２．３ｇ、１８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温まで昇温させ、１８時間撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃとＨＣｌ（水中１．０Ｎ）で希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。その濾液にシリカゲル（１０ｇ）を添加し、その混合物を減圧下で濃縮した。その混合物を減圧下に１８時間置き、次いで、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C13H12BrO3S) (ES, m/z): 327, 329 [M+H]+。
段階５： ４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000172
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（０．９９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（１．０ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間経過した後、ＣＨ３Ｉ（０．９５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を、ＬＣＭＳによって完結するまで撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃと水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H14BrO3S) (ES, m/z): 341, 343 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.37 (t, J=6.3Hz, 2H), 2.70 (t, J=6.3Hz, 2H), 2.48 (s, 3H)。
段階６： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000173
４－（５－ブロモ－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（０．４０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（５．９ｍＬ）を含むフラスコにＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（４７ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を排気及びＮ２の再充填に３回付した。（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、７．０ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で２．５時間撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃと１０％水性クエン酸ナトリウムの混合物でクエンチした。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C23H35O4SSi) (ES, m/z): 435 [M+H]+。
段階７： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000174
ＴＨＦ（２．７ｍＬ）中の４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メチル－ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（０．２３ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ１．０Ｍ、１．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間経過した後、その混合物をＥｔＯＡｃと飽和水性ＮＨ４Ｃｌで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→７０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H21O4S) (ES, m/z): 321 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 4.55 (t, J=5.1Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.51-3.46 (m, 2H), 3.38-3.34 (m, 2H), 2.77-2.66 (m, 4H), 2.41 (s, 3H), 1.79-1.67 (m, 2H)。
段階８： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000175
ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（９７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）とＰｈ３Ｐ（１３０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、０℃で、ＮＢＳ（８１ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を一度に添加した。３０分間経過した後、その反応物を飽和水性ＮＨ４ＣｌとＥｔＯＡｃでクエンチした。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→２５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H20BrO3S) (ES, m/z): 383, 385 [M+H]+。
中間体１４： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000176
段階１： ４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000177
撹拌棒を備えた２５０ｍＬ容丸底フラスコに、ＣｕＣｌ（０．７２１ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）を添加した。そのフラスコを、排気及びその後のＮ２によるパージに３回付した。そのフラスコにＴＨＦ（１４．６ｍＬ）を添加し、次いで、撹拌し、氷水浴で０℃に冷却した。次いで、０℃で撹拌しながら、（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）（０．５０Ｍ ＴＨＦ、３０ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下して加えた。得られた混合物を０℃で３５分間撹拌した。５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド（１．９１ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＮＭＰ（１４．６ｍＬ）を添加した。得られた混合物を０℃で７時間撹拌した。その反応物を高速撹拌しながら、それに、０℃で濃ＮＨ４ＯＨ（４ｍＬ）を添加した。この懸濁液に、水：ＭｅＯＨ（４：１ １４０ｍＬ）を約２０ｇのクエン酸ナトリウム三塩基二水和物と一緒に添加した。その混合物を２０分間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、その濾過ケーキを水で洗浄した。次いで、そのケーキをＨｅｘの中に懸濁させ、２回濾過した。該ケーキを７２時間にわたってＮ２で掃引して減圧にすることによって、４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H19ClNO4S) (ES, m/z): 356 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.30 (t, J=6.5Hz, 2H), 2.87-2.59 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
段階２： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000178
４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．００ｇ、２．８１ｍｍｏｌ）及びＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（０．１１３ｇ、０．１４１ｍｍｏｌ）を、隔膜を含むねじ蓋を有する４０ｍＬ容バイアルに添加した。そのバイアルを、排気及びＮ２の再充填に３回付した。そのバイアルに、Ｎ２下、撹拌しながらＴＨＦ（１０．０ｍＬ）を添加した。得られた懸濁液を室温で撹拌しながら、（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１１．２ｍＬ、５．６０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。得られた混合物を室温で３時間撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）と１０％水性クエン酸ナトリウム（７５ｍＬ）の間で分配させ、５分間強く撹拌した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→４０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C25H40NO5SSi) (ES, m/z): 494 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.75 (t, J=6.5Hz, 2H), 3.30 (t, J=6.6Hz, 2H), 3.02-2.95 (m, 2H), 2.73 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.03-1.96 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 0.07 (s, 6H)。
段階３： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000179
ＭｅＯＨ（３．０ｍＬ）中の４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．７３５ｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の混合物に、水（３．０ｍＬ）を添加し、次いで、ＨＯＡｃ（３．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（２５ｍＬ）と飽和水性ＮａＣｌ（２５ｍＬ）の間で分配させた。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配、その後、１００％ＥｔＯＡｃで定組成）で精製して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C19H26NO5S) (ES, m/z): 380 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.73 (t, J=5.8Hz, 2H), 3.28 (t, J=6.6Hz, 2H), 3.10 (t, J=6.9Hz, 2H), 2.72 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.06 (p, J=6.5Hz, 2H), 1.45 (s, 9H).
中間体１５： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000180
段階１： ２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソ酢酸メチル
Figure 0007326319000181
Ｎ２でパージし、Ｎ２の不活性雰囲気に維持した５Ｌ容４つ首丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（３．０Ｌ）中の３－ブロモ－４－メトキシアニリン（２３２ｇ、１．１５ｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（１７１ｇ、１．３２ｍｏｌ）と２－クロロ－２－オキソ酢酸メチル（１４８ｇ、１．２１ｍｏｌ）の混合物を入れた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、その混合物を、水／氷（２Ｌ）を添加することによってクエンチした。得られた混合物をＤＣＭ（３×１Ｌ）で抽出した。その有機層を合し、減圧下で濃縮して、２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソ酢酸メチルが得られた。これは、精製又は特徴付けを行うことなく使用した。
段階２： Ｏ－メチル２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソエタンチオエート
Figure 0007326319000182
Ｎ２でパージし、Ｎ２の不活性雰囲気に維持した３Ｌ容４つ首丸底フラスコ中に、トルエン（１．５Ｌ）中の２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソ酢酸メチル（１１１ｇ、３８６ｍｍｏｌ）とローソン試薬（８６．４ ｇ、２１４ｍｍｏｌ）の混合物を入れた。得られた混合物を１６時間８５℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却した。生じた物質を濾過によって取り除き、ＤＣＭ（３×５００ｍＬ）で洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮し、その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ（１：２０））で精製して、Ｏ－メチル２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソエタンチオエートが得られ、これは、特徴付けすることなく使用した。
段階３： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩及び７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩（２：１ 異性体の混合物）
Figure 0007326319000183
Ｎ２でパージし、Ｎ２の不活性雰囲気に維持した２Ｌ容４つ首丸底フラスコ中に、メチルＯ－メチル２－（（３－ブロモ－４－メトキシフェニル）アミノ）－２－オキソエタンチオエート（８４．５ｇ、２７８ｍｍｏｌ）を入れた。その反応混合物に、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）中のＫＯＨ（５０ｇ、９０ｍｍｏｌ）の混合物を１０分間かけて加えた。次いで、その反応混合物に、Ｈ２Ｏ（２Ｌ）中のフェリシアン化カリウム（ＩＩＩ）水和物（２４２ｇ、７３５ｍｍｏｌ）の混合物を１０分間かけて加えた。得られた混合物のｐＨを、水性ＨＣｌ（２．０Ｍ）を用いて２に調節した。次いで、水（５００ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、生じた生成物を濾過によって収集し、ＤＣＭ（１Ｌ）で洗浄した。そのケーキを水性ＫＯＨ（２．０Ｍ、５００ｍＬ、１ｍｏｌ）中に０．５時間懸濁させた。次いで、生じた生成物を濾過によって収集し、Ｈ２Ｏ（２×５００ｍＬ）で洗浄して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩と７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩の（２：１）混合物が得られた。
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩（主要な異性体）に関する特徴付けデータ：1H NMR (400MHz, DMSO-d6, ppm) δ 8.13 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 3.80 (s, 3H)。
７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩（少量の異性体）に関する特徴付けデータ：1H NMR (400MHz, DMSO-d6, ppm) 7.90 (d, J=8.9Hz, 1H), 7.26 (d, J=8.9Hz, 1H), 3.91 (s, 3H)。
段階４： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸及び７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸（２：１ 異性体の混合物）
Figure 0007326319000184
１Ｌ容フラスコに、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩及び７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸カリウム塩（２：１ 異性体の混合物）（２２．４ｇ、４９．４ｍｍｏｌ）、水（３００ｍＬ）、ＡＣＮ（１８０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１２０ｍＬ）及びＴＦＡ（１１．４ｍＬ、１４８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で１５分間強く撹拌した。生じた生成物を濾過によって収集し、水（２×２０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（２×５ｍＬ）及びＥｔ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸と７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸の（２：１）混合物が得られた。
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸（主要な異性体）に関する特徴付けデータ：1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 3.96 (s, 3H)
７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸（少量の異性体）に関する特徴付けデータ：1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (d, J=9.0Hz, 1H), 7.51 (d, J=9.0Hz, 1H), 4.00 (s, 3H)。
段階５： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000185
２５０ｍＬ容フラスコに、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸及び７－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸（２：１ 異性体の混合物）（１７．２ｇ、４１．８ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）を添加した。その混合物を強く撹拌し、０℃まで冷却した。その撹拌混合物に、ＳＯＣｌ２（６．１ｍＬ、８４ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下して加えた。次いで、その混合物を１８時間加熱環流した。室温まで冷却した後、生じた生成物を濾過によって収集し、ＭｅＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄した。その生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸メチルが単一の異性体として得られた。
LCMS (C10H9BrNO3S) (ES, m/z): 302, 304 (M+H)+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 4.09 (s, 3H), 4.02 (s, 3H)。
段階６： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸
Figure 0007326319000186
５００ｍＬ容丸底フラスコに、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸メチル（７．３ｇ、２４ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）を添加した。その混合物を強く撹拌しながら、それに、水性ＮａＯＨ（２．０Ｍ、３７ｍＬ、７４ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を３０分間加熱環流した。室温まで冷却した後、水性ＨＣｌ（２．０Ｍ、３７ｍＬ、７４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その混合物を室温で１８時間強く撹拌した。生じた生成物を濾過によって収集し、水（２×５０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸が得られた。
LCMS (C9H7BrNO3S) (ES, m/z): 288, 290 (M+H). 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 3.96 (s, 3H)。
段階７： ５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000187
１００ｍＬ容丸底フラスコに、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボン酸（１．４６ｇ、５．０７ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（２５ｍＬ）及びＤＭＦ（０．０８０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物に（ＣＯＣｌ）２（５．３２ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）を１分間かけて滴下して加え、その混合物を室温で１５分間強く撹拌した。次いで、その混合物をＣＥＬＩＴＥで濾過した。その濾液を減圧下で濃縮して、５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボニルクロリドが得られ、これは、それ以上精製又は特徴付けを行うことなく使用した。
段階８： ４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000188
２５０ｍＬ容丸底フラスコにＣｕＣｌ（０．４５ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を添加した。そのフラスコを、排気及びＮ２の再充填に３回付した。ＴＨＦ（１０ｍＬ）を添加し、その混合物を撹拌し、０℃まで冷却した。その混合物に（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１８ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間経過した後、ＮＭＰ（３０ｍＬ）中の５－ブロモ－６－メトキシ－ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－カルボニルクロリド（１．４ｇ、４．６ｍｍｏｌ）の混合物を５分間かけて滴下して加えた。５分後、その混合物を室温まで昇温させ、次いで、１時間撹拌した。その混合物に水（３０ｍＬ）及び濃ＮＨ４ＯＨ（１５ｍＬ）を添加した。その混合物をＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）で抽出し、その有機層を水（２×７５ｍＬ）で洗浄した。その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→７５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H18BrNO4S + Na) (ES, m/z): 422, 424 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.51 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.6Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体１６： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000189
段階１： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000190
４ｍＬ容バイアルに４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２３３ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）及びＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（１４ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルを、排気及びＮ２の再充填に３回付した。そのバイアルにＴＨＦ（０．６０ｍＬ）を添加し、その後、（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、２．９０ｍＬ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で２０分間撹拌した。その混合物に追加の（３－（（ｔｅｒｔ－ブチル ジメチルシリル）オキシ）－プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１．４ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加した。３０分間経過した後、その混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、１０％水性三塩基性クエン酸ナトリウム（３０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→４０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C25H40NO5SSi) (ES, m/z): 494 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.93 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.70 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.53 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.86-2.78 (m, 2H), 2.74 (t, J=6.6Hz, 2H), 1.94-1.84 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 0.93 (s, 9H)。
段階２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000191
１００ｍＬ容フラスコに、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２２９ｍｇ、０．４６４ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）、水（５．０ｍＬ）及びＡｃＯＨ（５．０ｍＬ）を添加した。その混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C19H26NO5S) (ES, m/z): 380 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.70 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.52 (t, J=6.7Hz, 2H), 2.87 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
段階３： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000192
４ｍＬ容バイアルに、ＣＢｒ４（７２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（６２ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）及び４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルを０℃まで冷却し、ＤＣＭ（１．０ｍＬ）を添加した。その混合物を９０分間室温まで昇温させた。次いで、その混合物を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C19H25BrNO4S) (ES, m/z): 442, 444 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 3.52 (t, J=6.6Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.45 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.93 (t, J=7.2Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.30-2.19 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体１７： ４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000193
ＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（０．１０５ｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）とベンズアルドキシム（３．０３ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）と４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（１２．２ｇ、３７．６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＭＦ（４０ｍＬ）を添加した。その反応物を１８時間８０℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、水性ＨＣｌ（０．５Ｍ、１００ｍＬ）を含むフラスコの中に注ぎ入れた。得られた混合物をＤＣＭで抽出した。次いで、その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C17H20O5SNa) (ES, m/z): 359 [M+Na]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 9.35 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.18 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.52 (t, J=6.2Hz, 2H), 1.33 (s, 9H)。
中間体１８： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000194
４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（５．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）とＥｔＯＨ（１００ｍＬ）の混合物に、ｐＴｓＯＨ（４．４ｇ、２３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、その反応物を水でクエンチし、ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、次いで、水性飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。次いで、その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C18H23O5S) (ES, m/z): 351 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 4.44 (t, J=5.0Hz, 1H), 4.02 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.40 (q, J=6.0Hz, 2H), 3.27 (d, J=6.4Hz, 2H), 2.63 (q, J=7.0, 5.9Hz, 4H), 1.68 (p, J=6.6Hz, 2H), 1.14 (t, J=7.1Hz, 3H)。
中間体１９： （２Ｓ）－４－［５－（２－アミノエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000195
段階１： （２Ｓ）－４－（５－｛２－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000196
脱ガスしたＤＭＥ（１．７ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１２４ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）とトリス（トリメチルシリル）シラン（１０３μＬ、０．３３４ｍｍｏｌ）と無水Ｎａ２ＣＯ３（７１ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、脱ガスしたＤＭＥ（１．２ｍＬ）中のＩｒ（２－（２，４－ジフルオロフェニル）－５－（トリフルオロメチル）ピリジン）２（４，４’－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン）ＰＦ６（３．８ｍｇ、３．３μｍｏｌ）の混合物を添加した。塩化ニッケル（ＩＩ）エチレングリコールジメチルエーテル錯体（０．３７ｍｇ、１．７μｍｏｌ）と４，４’－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン（０．４５ｍｇ、１．７μｍｏｌ）の脱ガスしたＤＭＥ（４４５μＬ）懸濁液を添加し、得られた混合物を、Ｎ２下、室温で１５分間撹拌した。Ｎ２下、Ｎ－（２－ブロモエチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１５０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を一度に添加し、その反応混合物を、室温で１８時間撹拌し、２つの３４Ｗ青色ＬＥＤランプ（両側に７ｃｍ離れている）で照射した。次いで、その混合物を、直接、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃ）で精製して、（２Ｓ）－４－（５－｛２－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C22H30NO6S) (ES, m/z): 436 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.86 (br, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.43 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.19 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.15 (t, J=7.0Hz, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.77 (t, J=7.0Hz, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： （２Ｓ）－４－［５－（２－アミノエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000197
（２Ｓ）－４－（５－｛２－［（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（５４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２．８ｍＬ）中の撹拌溶液に、ＴＦＡ（４７６μＬ、６．１８ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加し、その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その混合物を濃縮し、その残渣をＣＨ３ＣＮと水に溶解させ、一晩凍結乾燥させて、（２Ｓ）－４－［５－（２－アミノエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H22NO4S) (ES, m/z): 336 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.29 (s, 1H), 7.80 (br, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.45-3.39 (m, 1H), 3.20 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.10-3.01 (m, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.95 (t, J=7.0Hz, 2H), 1.20 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体２０： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル
Figure 0007326319000198
４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（０．０６５ｇ、０．２ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（０．３２６ｇ、１．００ｍｍｏｌ）とＡＣＮ（２ｍＬ）の混合物に、１，３－ジブロモプロパン（１．０ｍＬ、９．９ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を２時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を濾過し、その濾過された物質をＴＨＦで洗浄した。その濾液をＨｅｘで希釈し、次いで、その混合物を減圧下で濃縮して、４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチルが得られた。
LCMS (C18H21BrFO5S) (ES, m/z): 447, 449 [M+H]+。
下記表１に示されている中間体２１～中間体２３及び中間体６２～中間体８６は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体２０において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000199
Figure 0007326319000200
Figure 0007326319000201
Figure 0007326319000202
中間体２４： （Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000203
段階１： （Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000204
４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（４．３ｇ、１６ｍｍｏｌ）とＣ－Ｐｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．２６ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（２５ｍＬ）の混合物に、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、２５．０ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を室温で２時間撹拌した。次いで、その反応物を水性飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.50 (dd, J=17.7, 8.7Hz, 1H), 3.25 (dd, J=17.7, 5.0Hz, 1H), 3.00-2.92 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.3Hz, 3H)。
段階２： （Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000205
（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（４．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）の混合物に、ＡｌＣｌ３（６．２７ｇ、４７．０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応に添加漏斗を加え、その混合物を強く撹拌しながら、それに、水（５０ｍＬ）をゆっくりと添加し、その後、水性ＨＣｌ（１Ｎ、５０ｍＬ）を添加した。次いで、その混合物を分液漏斗の中に注ぎ入れ、２０％ＩＰＡ／ＤＣＭを添加した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、その濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００％ＤＣＭ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H16FO5S) (ES, m/z): 327 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 9.53 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.48 (dd, J=17.7, 8.7Hz, 1H), 3.24 (dd, J=17.7, 5.0Hz, 1H), 3.01-2.89 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体２５： （Ｒ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000206
段階１： ５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000207
５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（５．０ｇ、２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）中の撹拌溶液に、アルゴン下、０℃で、（ＣＯＣｌ）２（５．５ｍＬ、６３ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＤＭＦ（０．１ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させ、一晩撹拌した。その反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドは、精製することなく使用した。
1H NMR (600MHz, CH3CN-d3): δ 8.25 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.88 (s, 3H)。
段階２： （Ｓ）－４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000208
チオフェン－２－カルボン酸銅（Ｉ）（７９７ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）を含む、オーブンで乾燥させてＡｒでパージした丸底フラスコに、０℃で、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（７．８ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ、３．９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。その反応混合物に、５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（７７７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中の懸濁液を滴下して加えた。その反応混合物を室温まで昇温させ、６時間撹拌した。その反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５ｍＬ）で希釈し、その後、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈した。沈澱物を濾過によって除去し、その後、抽出した。層を分離し、その水層をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の（ＥｔＯＡｃ中２５％ＥｔＯＨ））で精製して、（Ｓ）－４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H19O5S) (ES, m/z): 323 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3): δ 7.89 (s, 1H), 7.26 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.48 (dd, J=16.9, 7.6Hz, 1H), 3.22-3.16 (m, 1H), 3.05 (dd, J=16.9, 6.0Hz, 1H), 1.31 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階３： （Ｒ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000209
ＡｌＣｌ３（１．０ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中の（Ｒ）－メチル４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）に０℃で添加した。その反応混合物を１８時間で室温まで昇温させた。次いで、その反応混合物を０℃まで冷却し、ＭｅＯＨ（８５ｍＬ）を添加した。その混合物を０℃で３０分間撹拌した。次いで、その混合物を室温まで昇温させ、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、不純物を含むメチル（Ｒ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。次いで、その混合物をキラル－ＳＦＣ（カラム ＡＤ－Ｈ（２１×２５０ｍｍ）、ＣＯ２中の３０％ＭｅＯＨ（０．２５％ＤＭＥＡ含有）で精製して、保持時間４．７分の（Ｒ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H17O5S) (ES, m/z): 309 [M+H]+. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9.41 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.40 (dd, J=17.4, 8.6Hz, 1H), 3.17 (dd, J=17.5, 5.1Hz, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
下記表２に示されている中間体２６～中間体２７は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体２５において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000210
中間体２８： （Ｓ）－４－（５－（２－クロロエトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000211
段階１： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000212
ＣｕＣｌ（２．５ｇ、２５ｍｍｏｌ）を含むフラスコにＡｒをスパージし、次いで、０℃まで冷却した。３－メトキシ－（２Ｒ）－（＋）－メチル－３－オキソプロピル亜鉛ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、５０ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を撹拌しながら、それに、ＴＨＦ（２５ｍＬ）とＮＭＰ（２５ｍＬ）中の４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（５．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）の混合物を滴下して加えた。次いで、その反応混合物を１８時間で室温まで昇温させた。次いで、その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を順相シリカカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+. 1H NMR (CDCl3) δ: 7.99 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.51 (dd, J=17.0, 7.9Hz, 1H), 3.24-3.12 (m, 1H), 3.06 (dd, J=17.0, 5.6Hz, 1H), 1.32 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： （Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000213
（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）とＣＨ＝ＣＣｌ２（４０ｍＬ）の混合物に、ＡｌＣｌ３（１．０ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物を０℃まで冷却し、ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）で希釈した。次いで、その混合物を室温まで昇温させ、次いで、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H16FO5S) (ES, m/z): 327 [M+H]+. 1H NMR (methanol-d4) δ: 8.11 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.50 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 3.11-3.02 (m, 1H), 1.28 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階３： （Ｓ）－４－（５－（２－クロロエトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000214
（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２００ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（２．７ｍＬ）の撹拌混合物に、Ｋ２ＣＯ３（１７０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌しながら、それに、１－ブロモ－２－クロロエタン（５０μＬ、０．６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、その反応混合物を１８時間８０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（２－クロロエトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H19ClFO5S) (ES, m/z): 389 [M+H]+。
下記表３に示されている中間体２９～中間体３１及び中間体８７は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体２８において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000215
中間体３２： ４－（５－（２－ヒドロキシエチル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル、酢酸塩
Figure 0007326319000216
段階１： ４－（６－メトキシ－５－（２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エチル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000217
４ｍＬ容バイアルに、ビス（ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（４－ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）ジクロロ－パラジウム（ＩＩ）（５．０ｍｇ、７．０μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１３７ｍｇ、０．４２２ｍｍｏｌ）、４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５０．０ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ（２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エチル）ホウ酸カリウム（３９．８ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルにトルエン（０．５０ｍＬ）及び水（０．１０ｍＬ）を添加した。そのバイアルをＮ２を用いて５分間脱ガスした。その混合物を１８時間１００℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＣＥＬＩＴＥで濾過し、そのＣＥＬＩＴＥをＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→７５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－メトキシ－５－（２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エチル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C23H32NO6S) (ES, m/z): 450 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.26-4.15 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.78 (t, J=8.3Hz, 1H), 3.65-3.42 (m, 4H), 3.33 (t, J=6.3Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.3Hz, 2H), 1.64-1.48 (m, 6H), 1.46 (s, 9H)。
段階２： ４－（５－（２－ヒドロキシエチル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル、酢酸塩
Figure 0007326319000218
４ｍＬ容バイアルに、４－（６－メトキシ－５－（２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エチル）－チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２８ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｃ（０．５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（０．５０ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）を添加した。その混合物を７５分間５０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２×３０ｍＬ）で洗浄した。その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－（２－ヒドロキシエチル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル、酢酸塩が得られた。
LCMS (C18H24NO5S) (ES, m/z): 366 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.22 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 4.13 (t, J=5.4Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.39-3.22 (m, 4H), 2.74 (t, J=6.5Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体３３： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000219
段階１： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000220
磁気撹拌棒を備えた２０ｍＬ容ねじ蓋バイアル中に、４－（５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（０．２０７ｇ、０．５６１ｍｍｏｌ）及びクロロ（２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピル－１，１’－ビフェニル）［２－（２’－アミノ－１，１’－ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（０．０２２ｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を入れた。そのバイアルを、排気及びＮ２の再充填に３回付した。そのバイアルをＮ２注入口で覆い、次いで、ＴＨＦ（２．０ｍＬ）を添加した。撹拌しながら、（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、３．４ｍＬ、１．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。添加が完了した後、その反応物を、Ｎ２下、室温で１．５時間撹拌した。次いで、その反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と１０％水性クエン酸ナトリウム（１０ｍＬ）の間で分配させ、３０分間撹拌した。次いで、層を分離し、その有機層を飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C25H38NaO4SSi) (ES, m/z): 485 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 7.78 (d, J=8.2Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.33 (d, J=8.2Hz, 1H), 3.66 (t, J=5.8Hz, 2H), 3.31 (t, J=6.5Hz, 2H), 2.82 (t, J=7.5Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.5Hz, 2H), 1.93-1.86 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 0.94 (s, 9H), 0.08 (s, 6H)。
段階２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000221
ＴＨＦ（１．３ｍＬ）中の４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１０２ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、室温で、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ１．０Ｍ、０．４４ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で４．５時間撹拌した。次いで、その反応物を、Ｅｔ２Ｏと飽和水性ＮＨ４Ｃｌの間で分配させ、室温で１時間撹拌した。層を分離し、その有機層を飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→６０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C19H24NaO4S) (ES, m/z): 371 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 7.77 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.33 (d, J=8.3Hz, 1H), 3.71 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.30 (t, J=6.7Hz, 2H), 2.84 (t, J=7.7Hz, 2H), 2.72 (t, J=6.7Hz, 2H), 1.98-1.91 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体３４： （Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000222
ＡＣＮ（２．０ｍＬ）中、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（０．０６５ｇ、０．２ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（０．３３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の混合物に、（３－ブロモプロポキシ）（ｔｅｒｔ－ブチル）ジメチルシラン（０．１０ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応物を２時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を濾過し、ＴＨＦ（５ｍＬ）で洗浄した。得られた濾液に水（２ｍＬ）を添加し、その後、ＭＰ－ＴｓＯＨ（４．３８ｍｍｏｌ／ｇローディング、１．００ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その混合物を３０分間６０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を濾過し、ＴＨＦで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。これは、それ以上精製することなく使用した。
LCMS (C18H22FO6S) (ES, m/z): 385 [M+H]+。
下記表４に示されている中間体３５～中間体３６は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体３４において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000223
中間体３７： （２Ｓ）－４－［５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000224
ＴＨＦ（２．７ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－［５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１８７ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）とＰｈ３Ｐ（２２４ｍｇ、０．８５４ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、０℃で、ＮＢＳ（１４２ｍｇ、０．８００ｍｍｏｌ）を一度に添加した。その反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。その混合物を、直接、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、（２Ｓ）－４－［５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H22BrO4S) (ES, m/z): 413, 415 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.27 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.54 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.43 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.19 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.79 (t, J=7.0Hz, 2H), 2.10 (pentet, J=6.9Hz, 2H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体３８： ４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000225
段階１： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000226
磁気撹拌棒を備えた２０ｍＬ容ねじ蓋バイアルに、４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２６５ｍｇ、０．７４５ｍｍｏｌ）、３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン－１－オール（１５６ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）、ＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（３１ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（３６４ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルに蓋をし、Ｎ２注入口ニードルを挿入した。このニードルを介して、そのバイアルを排気及びＮ２の再充填に３回付した。Ｎ２下、トルエン（２．５ｍＬ）を添加し、そのＮ２注入口を取り除き、密閉したそのバイアルを１８時間１１０℃に加熱した。その反応物を室温まで冷却し、ＭｅＯＨ（３．０ｍＬ）、水（３．０ｍＬ）及びＨＯＡｃ（３．０ｍＬ）を添加した。その反応混合物を室温で７時間撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃと飽和水性ＮａＣｌの間で分配させた。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合し、水性ＮａＣｌで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％（３：１）ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯＨの勾配）で精製して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C25H40NO6SSi) (ES, m/z): 510 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.56 (t, J=6.5Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.83 (t, J=6.0Hz, 2H), 3.26 (t, J=6.7Hz, 2H), 2.70 (t, J=6.7Hz, 2H), 2.12-2.05 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 0.89 (s, 9H), 0.07 (s, 6H。
段階２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000227
４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を含むバイアルに、ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）、水（１．０ｍＬ）を添加し、次いで、ＨＯＡｃ（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）を添加し、撹拌を続けた。３０分間経過した後、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）を添加し、その混合物を室温で１８時間撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）と水性ＮａＣｌ（２５ｍＬ）の間で分配させ、撹拌した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌで２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配、次いで、１００％ＥｔＯＡｃで定組成）で精製して、４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C19H26NO6S) (ES, m/z): 396 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.93 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.69 (t, J=5.6Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.80-3.76 (m, 2H), 3.31-3.20 (m, 2H), 2.71 (t, J=6.5Hz, 2H), 2.14-2.07 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
下記表５に示されている中間体３９は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体３８において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000228
中間体４０： ４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000229
段階１： ６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン
Figure 0007326319000230
ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中のベンゾ［ｂ］チオフェン－６－オール（１．９ｇ、１３ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（１．５１ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、２０℃で、Ｋ２ＣＯ３（２．６２ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、１８時間５０℃に加熱した。次いで、室温まで冷却した後、その反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェンが得られた。
LCMS (C15H13OS) (ES, m/z): 241 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.77 (d, J=8.6Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.54 (d, J=5.2Hz, 1H), 7.49 (d, J=7.2Hz, 2H), 7.44-7.38 (m,2H), 7.37-7.32 (m, 2H), 7.08 (d, J=8.5Hz, 1H), 5.17 (s, 2H)。
段階２： ６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒド
Figure 0007326319000231
ＴＨＦ（１０．０ｍＬ）の中の６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン（２．９２ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、－７８℃で、ＬＤＡ（ＴＨＦ中２．０Ｍ、７．３ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を－７８℃で２０分間撹拌した。その反応混合物に－７８℃でＤＭＦ（２．４ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、その反応混合物を室温までゆっくりと昇温させた。その反応混合物を室温で１５分間撹拌した。その反応混合物を０℃でクエン酸（水中１．０Ｍ、２４ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈した。その懸濁液を１５分間撹拌した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製残渣が得られた。その粗製残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒドが得られた。
LCMS (C16H13O2S) (ES, m/z): 269 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.01 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.50 (d, J=7.3Hz, 2H), 7.42 (t, J=7.3Hz, 2H), 7.40-7.33 (m, 1H), 7.20 (d, J=8.4Hz, 1H), 5.23 (s, 2H)。
段階３： ４－（６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000232
６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルバルデヒド（２．０２ｇ、７．５３ｍｍｏｌ）と２－メシチル－６，７－ジヒドロ－５Ｈ－ピロロ［２，１－ｃ］［１，２，４］トリアゾール－２－イウムクロリド（０．０９９ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）と三塩基性リン酸カリウム（１．６ｇ、７．５ｍｍｏｌ）の混合物に、２０℃で５分間Ａｒを流した。次いで、トルエン（１５ｍＬ）及びアクリル酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．２ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を２０℃で添加した。その反応混合物を２０℃で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、濾過して無機塩を除去した。その濾液を減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C23H25O4S) (ES, m/z): 397 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.35 (s, 1H), 7.96 (d, J=7.0Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.56-7.39 (m, 2H), 7.47-7.33 (m, 3H), 7.25-7.15 (m, 1H), 5.24 (s, 2H), 3.34-3.23 (m, 2H), 2.65-2.55 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。
段階４： ４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000233
ジオキサン（１００ｍＬ）中の４－（６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．３６ｇ、５．９６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＣｌ（水中３７％、１９．６ｍＬ、２３８ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を２日間９０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、次いで、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られ、これは、それ以上精製することなく使用した。
LCMS (C12H11O4S) (ES, m/z): 251 [M+H]+。
段階５： ４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000234
ＤＣＭ（２５ｍＬ）とＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（１．５ｇ、６．０ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（Ｈｅｘ中２．０Ｍ、３．０ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１５分間（ガスの発生が止むまで）撹拌した。ＨＯＡｃ（数滴）を添加して、残留しているＴＭＳ－ジアゾメタンをクエンチした。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C13H13O4S) (ES, m/z): 265 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.17 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.7Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.97 (d, J=8.2Hz, 1H), 3.76-3.65 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54-3.44 (m, 1H), 2.72-2.67 (m, 2H)。
下記表６に示されている中間体４１は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体４０において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000235
中間体４２： （Ｓ）－４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000236
段階１： ６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000237
ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中、４－（ベンジルオキシ）－２－ブロモ－５－メトキシベンズアルデヒド（１３ｇ、４１ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（１１ｇ、８１ｍｍｏｌ）と１８－クラウン－６（２．１ｇ、８．１ｍｍｏｌ）と２－メルカプト酢酸メチル（６．０ｍＬ、６７ｍｍｏｌ）の混合物を、アルゴン下、１４時間９０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その反応混合物を水（４００ｍＬ）でクエンチし、１Ｎ ＨＣｌで酸性化して約ｐＨ５とし、ＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を１０％水性ＬｉＣｌ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（５０ｍＬ／５０ｍＬ）で希釈し、２０℃で、水性ＬｉＯＨ（２．０Ｍ、８０ｍＬ、１６０ｍｍｏｌ）で処理した。その反応混合物を２時間６０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を減圧下で濃縮した。その残渣を水性ＮａＯＨ（１．０Ｍ、５０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）、水（３００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃ（３×２００ｍＬ）で洗浄した。次いで、その水層を６Ｎ ＨＣｌで酸性化して約ｐＨ５とし、ＥｔＯＡｃ（３×３００ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣を１：１のＥｔＯＡｃ／ＰＥ（３×３０ｍＬ）と１：１のＤＣＭ／ＰＥ（３×３０ｍＬ）を用いて摩砕して、６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸が得られた。
LCMS (C17H15O4S) (ES, m/z): 315 [M+H]+. 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 13.16 (br s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.44-7.32 (m, 3H), 5.17 (s, 2H), 3.83 (s, 3H)。
段階２： ６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000238
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（３．０５ｇ、９．７０ｍｍｏｌ）と（ＣＯＣｌ）２（２．５５ｍＬ、２９．１ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、０℃で、ＤＭＦ（０．０２３ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を０℃で３０分間撹拌し，次いで、室温まで昇温させた。次いで、その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その反応混合物を減圧下で濃縮して、６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドが得られ、これは、精製することなく使用した。
段階３： （Ｓ）－４－（６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000239
（（チオフェン－２－カルボニル）オキシ）銅（２．３８ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、アルゴン下、０℃で、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドの混合物（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、２５ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。その反応混合物を、アルゴン下、０℃で２０分間撹拌した。次いで、その混合物に、０℃で、カニューレを介して、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（３．２ｇ、９．６ｍｍｏｌ）のＡｒで脱ガスした混合物をゆっくりと添加した。その混合物を室温まで昇温させ、次いで、室温で１６時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）、水（１００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を添加することによってクエンチした。得られた二相混合物を室温まで昇温させ、室温で１時間撹拌した。次いで、その混合物をＣＥＬＩＴＥフリットを通して濾過し、その濾液を分液漏斗の中で分配させた。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、所望の生成物が得られ、これを、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０－５０％ＥｔＯＡｃで溶離）で再精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C22H23O5S) (ES, m/z): 399 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.52-7.47 (m, 3H), 7.42 (t, J=7.3Hz, 2H), 7.38-7.34 (m, 1H), 5.19 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.42 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.19 (dd, J=17.4, 4.9Hz, 1H), 3.04-2.91 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階４： （Ｓ）－４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000240
（Ｓ）－メチル４－（６－（ベンジルオキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１．６０ｇ、４．０２ｍｍｏｌ）とＰｄ／Ｃ（１．０７ｇ、１．００ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物に、アルゴン流下、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）及びＨＣｌ（水中３７％、０．６６ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。その反応混合物の上部のヘッドスペースを減圧によって脱ガスし、Ｈ２を再充填した。その反応混合物を、Ｈ２下、３時間撹拌した。その反応混合物をＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０－１００％ＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H17O5S) (ES, m/z): 309 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.93 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.44-3.38 (m, 1H), 3.16 (dd, J=17.3, 4.7Hz, 1H), 3.01-2.92 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.0Hz, 3H)。
段階５： （Ｓ）－４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000241
（Ｓ）－メチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１４１ｍｇ、０．４５７ｍｍｏｌ）と１－ブロモ－３－クロロプロパン（３６０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（３７９ｍｇ、２．７４ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物にＡＣＮ（４．０ｍＬ）を添加し、その反応混合物を１８時間５０℃に加熱した。次いで、室温まで冷却した後、その反応混合物をＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、濾過した。その濾液を減圧下で濃縮し、次いで、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C18H22ClO5S) (ES, m/z): 385 [M+H]+。
下記表７に示されている中間体４３は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体４２において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000242
中間体４４： （２Ｓ）－４－［５－（２－ヒドロキシエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000243
脱ガスしたＤＭＥ（１６．５ｍＬ）中、（２Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．２４ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）とトリス（トリメチルシリル）シラン（１．０ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）と無水Ｎａ２ＣＯ３（７０８ｍｇ、６．６８ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、脱ガスしたＤＭＥ（１２ｍＬ）中のＩｒ（２－（２，４－ジフルオロフェニル）－５－（トリフルオロメチル）ピリジン）２（４，４’－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン）ＰＦ６（３８ｍｇ、３３μｍｏｌ）の混合物を添加した。塩化ニッケル（ＩＩ）エチレングリコールジメチルエーテル錯体（３．７ｍｇ、１７μｍｏｌ）と４，４’－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン（４．５ｍｇ、１７μｍｏｌ）の脱ガスしたＤＭＥ（４．５ｍＬ）中の懸濁液を添加し、得られた混合物を、Ｎ２下、室温で１５分間撹拌した。Ｎ２下、２－ブロモエタノール（８３５ｍｇ、６．６８ｍｍｏｌ）を一度に添加し、その反応混合物を、２０％光強度を有するフォトリアクターの中で、室温で２４時間撹拌及び照射した。次いで、その混合物を濾過し、その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、（２Ｓ）－４－［５－（２－ヒドロキシエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H21O5S) (ES, m/z): 337 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.26 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 4.64 (t, J=5.2Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.64-3.55 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.42 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.19 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.01-2.92 (m, 1H), 2.81 (t, J=6.9Hz, 2H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体４５： ４－（６－メトキシ－５－（３－オキソプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000244
４ｍＬ容バイアルに、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３０ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）、デス・マーチンペルヨージナン（１，１，１－トリアセトキシ－１，１－ジヒドロ－１，２－ベンズヨードキソール－３（１Ｈ）－オン；５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（１．０ｍＬ）を添加した。その混合物を室温で１時間撹拌した。その混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（６－メトキシ－５－（３－オキソプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C20H24O5SNa) (ES, m/z): 399 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.85 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 3.27 (t, J=6.8Hz, 2H), 3.05 (t, J=7.4Hz, 2H), 2.80 (t, J=7.2Hz, 2H), 2.72 (t, J=6.7Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体４６： ４－（５－アミノ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000245
段階１： ４－（５－（（ジフェニルメチレン）アミノ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000246
４ｍＬ容バイアルに、Ｃｓ２ＣＯ３（２５２ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）、ジフェニルメタンイミン（１２９μＬ、０．７７３ｍｍｏｌ）、４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１３８ｍｇ、０．３８７ｍｍｏｌ）、Ｒａｃ ＢＩＮＡＰ Ｐｄ Ｇ３（１９ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）及びトルエン（２．０ｍＬ）を添加した。その混合物を３．５時間１２０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－（（ジフェニルメチレン）アミノ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C29H29N2O4S) (ES, m/z): 501 [M+H]+。
段階２： ４－（５－アミノ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000247
２０ｍＬ容バイアルに、４－（５－（（ジフェニルメチレン）アミノ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１４６ｍｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）、ＡｃＯＨ（２．０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）、水（２．０ｍＬ）及びＴＨＦ（６．０ｍＬ）を添加した。その混合物を１時間５０℃に加熱した。次いで、室温まで冷却した後、その混合物を室温で２４時間撹拌した。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水性飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→５０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－アミノ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H21N2O4S) (ES, m/z): 337 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.24 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.74-2.70 (m, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体４７： （Ｓ）－４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000248
（Ｓ）－メチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２５ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）と３－クロロプロパン－１－オール（１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（２２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物にＤＭＦ（０．５０ｍＬ）を添加し、その反応混合物をマイクロ波オーブンの中で照射して１時間１００℃とした。その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、追加の水（５ｍＬ）で洗浄し、次いで、飽和水性ＮａＣｌ（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０－１００％［ＥｔＯＡｃ中の５％ＭｅＯＨ］で溶離）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C18H23O6S) (ES, m/z): 367 [M+H]+。
下記表８に示されている中間体４８は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体４７において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000249
中間体４９： ４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000250
段階１： ４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000251
４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．０ｇ、８．９ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（７．４ｇ、５４ｍｍｏｌ）とＡＣＮ（２０ｍＬ）の混合物に、２－（３－ブロモプロポキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン（３．８ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応物を４時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を濾過し、ＡＣＮで洗浄し、次いで、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解させ、Ｈｅｘ（１００ｍＬ）をゆっくりと添加した。生じた沈澱物を濾過し、Ｈｅｘで洗浄し、風乾させて、４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C25H34O7SNa) (ES, m/z): 501 [M+Na]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.16 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.06 (t, J=6.2Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.78 (dt, J=9.6, 6.4Hz, 1H), 3.69 (dd, J=13.5, 5.5Hz, 1H), 3.52-3.45 (m, 1H), 3.41-3.35 (m, 1H), 3.20 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.54 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.02-1.95 (m, 2H), 1.71-1.62 (m, 1H), 1.58 (t, J=7.8Hz, 1H), 1.47-1.39 (m, 3H), 1.36 -1.33 (m, 10H)。
段階２： ４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000252
４－（６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．７８ｇ、７．９０ｍｍｏｌ）とＥｔＯＨ（５０ｍＬ）の混合物にｐＴｓＯＨ（２．２ｇ、１２ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、その混合物をＤＣＭで希釈し、水性飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチした。次いで、その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C20H26O6SNa) (ES, m/z): 417 [M+Na]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.53 (t, J=4.7Hz, 1H), 4.05 (t, J=6.2Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.55 (q, J=5.4Hz, 2H), 3.20 (t, J=6.1Hz, 2H), 2.54 (t, J=6.1Hz, 2H), 1.88 (p, J=5.8Hz, 2H), 1.33 (s, 9H)。
下記表９に示されている中間体５０は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体４９において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000253
中間体５１： ４－（５－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000254
４－（５－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．４３ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）とＰｄ／Ｃ（１０％ ｗ／ｗ、１．５ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物に、アルゴン流下、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）及びＨＣｌ（水中３７％、０．５９ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。その反応混合物の上部のヘッドスペースを減圧によって脱ガスし、Ｈ２を充填した。得られた混合物を、Ｈ２下、２４時間撹拌した。次いで、その反応混合物をＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、そのＣＥＬＩＴＥをＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、４－（５－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C13H13O4S) (ES, m/z): 265 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.85 (d, J=8.5Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.07 (d, J=8.0Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.75-2.67 (m, 2H); 2つの脂肪族プロトンが溶媒のピークの下に埋もれていて識別できない。
中間体５２： （２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000255
段階１： （２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000256
（２Ｓ）－４－（５，６－ジメトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸（２．０ｇ、６．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６５ｍＬ）中の撹拌溶液に、０℃で、ＢＢｒ３（ＤＣＭ中１Ｍ、１９．５ｍＬ、１９．５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を２．５時間室温まで昇温させた。次いで、その混合物を０℃まで冷却し、水で処理し、減圧下で濃縮した。その残渣を濾過し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させて、（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られ、これは、それ以上精製することなく使用した。
LCMS (C13H13O5S) ES, m/z): 281 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.18 (s, 1H), 9.78 (brs, 1H), 9.49 (brs, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 3.39-3.33 (m, 1H), 3.03 (dd, J=17.2, 5.2Hz, 1H), 2.91-2.84 (m, 1H), 1.16 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： （２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000257
（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸（１．３５ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２４ｍＬ）とＭｅＯＨ（２４ｍＬ）中の撹拌溶液に、ＴＭＳ－ジアゾメタン（Ｈｅｘ中２Ｍ、３．６ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を３０分間撹拌し、ＨＯＡｃ（０．２８ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）で処理し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０→１０％ＭｅＯＨの勾配）で精製して、（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H15O5S) (ES, m/z): 295 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.85 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.41-3.34 (m, 1H), 3.17-3.11 (m, 1H), 2.98-2.91 (m, 1H), 1.17 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体５３： （２Ｓ）－４－［５，６－ビス（３－ヒドロキシプロポキシ）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000258
ＤＭＦ（７．８ｍＬ）中、（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２３０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）と３－クロロ－１－プロパノール（１９６μＬ、２．３４ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（４３２ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波オーブンの中で照射して、１時間１００℃とした。室温まで冷却した後、その混合物をＥｔＯＡｃ及び飽和水性ＮａＣｌで希釈した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０→１０％ＭｅＯＨの勾配）で精製して、（２Ｓ）－４－［５，６－ビス（３－ヒドロキシプロポキシ）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C20H27O7S) (ES, m/z): 411 [M+H]+。
中間体５４： （２Ｓ）－４－［６－（ジフルオロメトキシ）－５－ヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000259
ＡＣＮ（５．５ｍＬ）と水（０．５５ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１７７ｍｇ、０．６０１ｍｍｏｌ）とＫＯＨ（水中１．０Ｍ、１２０μＬ、１．２ｍｍｏｌ）の凍結混合物に、－７８℃で、（ブロモジフルオロメチル）ホスホン酸ジエチル（１７０μＬ、０．９６ｍｍｏｌ）を添加した。冷却浴を除去し、その反応混合物を４時間撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃ（×３）で再抽出した。合わせた有機物をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。得られた混合物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０－５０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、粗製（２Ｓ）－４－［６－（ジフルオロメトキシ）－５－ヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。所望のフラクションをＳＦＣ（ＣＯ２中の１５％ＭｅＯＨ（＋０．２５％ＤＭＥＡ））で精製して、（２Ｓ）－４－［６－（ジフルオロメトキシ）－５－ヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが４．４分の保持時間で得られた。
LCMS (C15H15F2O5S) (ES, m/z): 345 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.25 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.18 (t, J=74.4Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.44 (dd, J=17.6, 8.7Hz, 1H), 3.20 (dd, J=17.6, 4.9Hz, 1H), 3.01-2.94 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
中間体５５： ４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000260
段階１： ４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000261
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン（３．８ｇ、１８ｍｍｏｌ）とＡｌＣｌ３（３．１ｇ、２３ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、０℃で、３，３－ジメチルジヒドロフラン－２，５－ジオン（４．６ｇ、３６ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させ、１６時間撹拌した。次いで、その反応混合物を水（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）の混合物に０℃でゆっくりと添加することによって、その反応混合物をクエンチした。得られた混合物を２０℃で１時間撹拌し、次いで、ＨＣｌ（水中２．０Ｍ、３６ｍＬ、７２ｍｍｏｌ）で希釈した。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、その混合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+。
段階２： ４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000262
ＤＭＦ（４５ｍＬ）中の４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸（２．３ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（２．３ｇ、１７ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間経過した後、ＣＨ３Ｉ（２．１ｍＬ、３４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、その混合物を水及びＥｔ２Ｏで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、その混合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C17H20FO5S) (ES, m/z): 355 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.44 (s, 2H), 1.23 (s, 6H)。
段階３： ４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000263
４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチル（１．１ｇ、３．１ｍｍｏｌ）とＤＣＭ（２０ｍＬ）の混合物に、ＡｌＣｌ３（１．７ｇ、１２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を氷と１Ｎ ＨＣｌを含むフラスコの中に注ぎ入れ、５分間撹拌した。次いで、ＥｔＯＡｃを添加した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。次いで、その混合物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２，２－ジメチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 1.23 (s, 6H)。
中間体５６： （１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000264
段階１： （１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸
Figure 0007326319000265
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン（４．１ｇ、１７ｍｍｏｌ）とＡｌＣｌ３（２．９２ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、０℃で、３－オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２，４－ジオン（３．７８ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させた。その反応混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、その反応混合物を、水（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）の混合物に０℃でゆっくりと添加することによって、その反応混合物をクエンチした。得られた混合物を室温まで昇温させ、１時間撹拌した。次いで、その混合物をＨＣｌ（水中２．０Ｍ、３４ｍＬ、６８ｍｍｏｌ）で希釈した。その有機層を分離し、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０－１００％［ＥｔＯＡｃ中の５％ＭｅＯＨ］で溶離）で精製して、（１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸が得られた。
LCMS (C14H12BrO4S) (ES, m/z): 355, 357 [M+H]+。
段階２： （１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000266
ＤＣＥ（３０ｍＬ）中のＢＯＣ－無水物（６．３ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）とＤＭＡＰ（０．３３ｇ、２．７ｍｍｏｌ）と（１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸（４．８ｇ、１４ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、室温で、ｔｅｒｔ－ブタノール（２５．８ｍＬ、２７０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、２時間５０℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボキシレートが得られた。
LCMS (C18H20BrO4S-C4H8) (ES, m/z): 355, 357 [M+H-tBu]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.10-3.03 (m, 1H), 2.32-2.25 (m, 1H), 1.57-1.52 (m, 1H), 1.32-1.28 (m, 1H), 1.14 (s, 9H)。
段階３： （１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－２－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000267
（１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボキシレート（１．６４ｇ、３．９９ｍｍｏｌ）とＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（０．１００ｇ、０．１２０ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（３．９０ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）と（Ｅ）－ベンズアルデヒドオキシム（０．７２５ｇ、５．９８ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。アルゴン下、ＤＭＦ（１０．０ｍＬ）を添加し、次いで、その混合物をＡｒを用いて５分間脱ガスした。その反応混合物を撹拌し、１８時間８０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、水（１００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→７５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（１Ｓ，２Ｒ及び１Ｒ，２Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボキシレートが得られた。
LCMS (C18H20O5SNa) (ES, m/z): 371 [M+Na]+。
中間体５７： （Ｓ）－メチル－４－（５－アミノ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートキシレート
Figure 0007326319000268
段階１： （Ｓ）－４－（５－（（ジフェニルメチレン）アミノ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000269
（Ｓ）－メチル４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）とベンゾフェノンイミン（０．４５ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）とＲａｃ ＢＩＮＡＰ Ｐｄ Ｇ３（０．０６７ｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（０．８７８ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。アルゴン下、２０℃で、トルエン（１０．０ｍＬ）を添加し、次いで、その混合物をＡｒを用いて５分間脱ガスした。その反応混合物を、アルゴン下、撹拌し、１８時間１１０℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈した。その混合物を濾過し、その濾液を減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（５－（（ジフェニルメチレン）アミノ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られ、これは、精製することなく使用した。
LCMS (C28H26NO4S) (ES, m/z): 472 [M+H]+.
段階２： （Ｓ）－メチル４－（５－アミノ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート
Figure 0007326319000270
ＤＣＭ（５．０ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（５－（（ジフェニル メチレン）アミノ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（６３５ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の混合物に、２０℃で、ＴＦＡ（２．１ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を２０℃で３０分間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０→１００％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（５－アミノ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H18NO4S) (ES, m/z): 308 [M+H]+。
中間体５８： ４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000271
４－（６－（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２５６ｍｇ、０．６４６ｍｍｏｌ）とＰｄ／Ｃ（１７２ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物に、アルゴン下、ＥｔＯＡｃ（５．０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）及びＨＣｌ（水中３７％、０．０５３ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。その反応混合物の上部のヘッドスペースを減圧を介して脱ガスし、Ｈ２を再充填した。得られた混合物をＨ２下で２４時間撹拌した。次いで、その反応混合物をＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、粗製生成物残渣が得られた。その粗製生成物残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０－１００％ＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H19O4S-C4H8) (ES, m/z): 251 [M+H-tBu]+。
中間体５９： ４－（５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000272
段階１： ５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000273
ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中の５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボン酸（０．７５０ｇ、２．９２ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で撹拌しながら、（ＣＯＣｌ）２（０．３０ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）を３分間かけて滴下して加えた。その反応物にＤＭＦ（０．０２３ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加し、その後、追加の（ＣＯＣｌ）２（０．２０ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応フラスコを氷水浴から取り出し、撹拌を室温で１．５時間続けた。その反応物を濃縮して、５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリドが得られ、これは、さらに精製又は特徴付けを行うことなく使用した。
段階２： ４－（５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000274
撹拌棒を備えた１００ｍＬ容丸底フラスコに、ＣｕＣｌ（０．２６９ｇ、２．７２ｍｍｏｌ）を添加した。そのフラスコを、排気及びその後Ｎ２の再充填に３回付した。そのフラスコにＴＨＦ（６．０ｍＬ）を添加し、それを、次いで、撹拌し、氷水浴を用いて０℃まで冷却した。そのＣｕＣｌ混合物に、０℃で撹拌しながら、（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、１１ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）を３分間かけて滴下して加えた。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌した。その混合物に、０℃で撹拌しながら、ＮＭＰ（２４ｍＬ）中の５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（０．７５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）の混合物を７分間かけて滴下して加えた。得られた混合物を０℃で２時間撹拌した。その反応混合物を、次いで、酢酸イソプロピル（３００ｍＬ）と１０％水性クエン酸ナトリウム（３００ｍＬ）の間で分配させた。得られた混合物を２０分間撹拌した。層を分離し、その水層を酢酸イソプロピル（１５０ｍＬ）で抽出した。その有機層を合し、水性ＮａＣｌで洗浄し、次いで、飽和水性ＮａＣｌで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、その濾液を一晩放置した。次いで、その濾液を濾過し、その濾液を濃縮して、粗製残渣が得られた。その粗製残渣をアセトンと一緒にシリカゲルカラムに装入した。そのカラムを、加圧されたＮ２を吹き込むことによって乾燥させた。次いで、その乾燥したカラムをＨｅｘでの０→３０％ＥｔＯＡｃの勾配に付した。全ての生成物含有フラクションを収集し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中０→２５％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製した。その生成物含有フラクションを濃縮し、キラルＳＦＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ビフェニル、２１ｍｍ×２５０ｍｍカラム、９０：１０ ＣＯ２：ＭｅＯＨ ｗ／０．２５％ＤＭＥＡ、７０ｍＬ／分、排出口圧力１００ｂａｒ、ローディング濃度１８．５ｍｇ／ｍＬ（ＭｅＯＨ／ＭｅＣＮ）、注入体積１．６ｍＬ、検出２１５ｎｍ）で精製して、４－（５－ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H17BrNaO3S) (ES, m/z): 391, 393 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.75 (d, J=8.6Hz, 1H), 7.57 (d, J=8.6Hz, 1H), 3.31 (t, J=6.6Hz, 2H), 2.74 (t, J=6.6Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体６０： ４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000275
ＣｕＣｌ（０．７６ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を含むフラスコを、排気し、次いで、Ｎ２で３回パージした。ＴＨＦ（１５ｍＬ）を添加し、その混合物を０℃まで冷却した。（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、３１ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下して加えた。３０分間経過した後、５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド（２．０ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＮＭＰ（１５ｍＬ）を添加した。次いで、その混合物を室温まで昇温させた。１時間経過した後、その混合物を０℃まで冷却し、濃水性ＮＨ４ＯＨ（４．５ｍＬ）を添加した。この混合物に、水（２４０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（６０ｍＬ）を添加した。その混合物を５分間撹拌し、ウォーターバスソニケーター内で超音波処理に付した。得られた混合物を濾過し、その沈澱物を水で洗浄し、次いで、Ｈｅｘで洗浄した。その沈澱物を単離し、減圧下で乾燥させた。次いで、その沈澱物をＥｔＯＡｃと１０％水性クエン酸ナトリウムの間で分配させた。層を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。濃縮中に沈澱物が生じ、その沈澱物を濾過によって収集し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、減圧下で乾燥させて、４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C16H19ClNO4S) (ES, m/z): 356 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.30 (t, J=6.4Hz, 2H), 2.74 (t, J=6.4Hz, 2H), 1.46 (s, 9H)。
中間体６１： （Ｓ）－４－（２－（３－ブロモプロピル）－４－メトキシチエノ［２’，３’：５，６］ベンゾ［１，２－ｄ］オキサゾール－７－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000276
段階１： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシ－４－ニトロベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000277
２０ｍＬ容バイアルに、（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）及びＥｔＯＡｃ（３．０ｍＬ）を添加した。ＨＮＯ３（０．０１７ｍＬ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を１時間撹拌した。１時間後、その混合物を減圧下で濃縮し、次いで、Ｅｔ２Ｏ（３．０ｍＬ）を用いて摩砕した。生じた物質を濾過によって収集して、（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシ－４－ニトロベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 12.08 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.59 (dd, J=17.1, 7.9Hz, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 3.16-3.09 (m, 1H), 1.35 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： （Ｓ）－４－（２－（３－ブロモプロピル）－４－メトキシチエノ［２’，３’：５，６］ベンゾ［１，２－ｄ］オキサゾール－７－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000278
４ｍＬ容バイアルに、（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシ－４－ニトロベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（４５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（０．０４０ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（０．６０ｍＬ）を添加した。その混合物に、４－ブロモ－１，１，１－トリメトキシブタン（０．６１ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物をＨ２下で１時間撹拌した。次いで、その混合物を濾過し、その濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中の０→７０％ＥｔＯＡｃの勾配）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（２－（３－ブロモプロピル）－４－メトキシチエノ［２’，３’：５，６］ベンゾ［１，２－ｄ］オキサゾール－７－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C19H21BrNO5S) (ES, m/z): 454, 456 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.62 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.55 (dd, J=16.7, 7.5Hz, 1H), 3.24 (t, J=7.3Hz, 2H), 3.18 (dd, J=13.5, 6.8Hz, 1H), 3.12 (dd, J=16.7, 5.8Hz, 1H), 2.53 (p, J=6.8Hz, 2H), 1.32 (d, J=7.0Hz, 3H)。
中間体８８： （Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチルブタン酸メチル
Figure 0007326319000279
（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（０．６３７ｇ、１．７２ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（１５ｍＬ）中の冷却溶液に、ＴＭＳ－Ｃｌ（１．３２ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を添加した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．６５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を０℃で２時間撹拌した。その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチルブタン酸メチルが得られた。
1H NMR (600MHz, DMSO-δ6) δ 7.96 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.87-2.83 (m, 2H), 2.57-2.52 (m, 1H), 2.00-1.94 (m, 1H), 1.82-1.73 (m, 1H), 1.14 (d, J=7.0Hz, 3H)。
下記表１０に示されている中間体８９～中間体９３は、「調製」として記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記中間体８８において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000280
中間体９４： （２Ｓ）－４－（５－（３－ヒドロキシ－２－メチルプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000281
ＮＭＰ（０．３０ｍＬ）中の２－メチルプロパン－１，３－ジオール（１４６ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）と（Ｅ）－ビス（４－クロロベンジル）ジアゼン－１，２－ジカルボキシレート（６０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（４３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物をＡｒを用いて脱ガスし、次いで、撹拌し、３時間１００℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、直接、逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（２Ｓ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシ－２－メチルプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C19H25O6S) (ES, m/z): 381 [M+H]+。
中間体９５： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000282
段階１： ４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000283
４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（１６１ｍｇ、０．４９６ｍｍｏｌ）及びＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（２０ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２．５ｍＬ）に添加した。その反応混合物を密閉し、その反応混合物の上部のヘッドスペースを排気し、窒素を再充填（３×）した。その反応混合物に３－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシロキシ）プロピル亜鉛ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、３．０ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を室温で９６時間撹拌した。その反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで、水性ＮａＨＣＯ３で抽出した。その水層を分離し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。その有機層を合し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシ－ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリルが得られた。
LCMS (C22H32NO3SSi) (ES, m/z): 418 [M+H]+。
段階２： ４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000284
４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（１６５ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）と水（２．０ｍＬ）とＨＯＡｃ（２．０ｍＬ）の混合物に懸濁させた。得られた懸濁液を室温で１９時間撹拌した。その反応混合物を水性ＮａＨＣＯ３で希釈し、次いで、ＥｔＯＡｃ（３×）で希釈した。その有機層を合し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリルが得られた。
LCMS (C16H18NO3S) (ES, m/z): 304 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 4.50-4.47 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.53-3.40 (m, 4H), 2.79 (t, J=6.5Hz, 2H), 2.68 (t, J=7.4Hz, 2H), 1.79-1.66 (m, 2H)。
段階３： ４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル
Figure 0007326319000285
４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（４５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の溶液にトリフェニルホスフィン（３９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を０℃まで冷却し、次いで、ＮＢＳ（２６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。１時間経過した後、その反応混合物に追加のトリフェニルホスフィン（２３ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）及びＮＢＳ（１３ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を０℃でさらに１０分間撹拌した。その反応混合物を水性飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシ－ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリルが得られた。
LCMS (C16H17BrNO2SNa) (ES, m/z): 388, 390 [M+Na]+。
中間体９６： （Ｓ）－４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000286
段階１： ６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン
Figure 0007326319000287
２－ブロモマロンアルデヒド（３．５６ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）とチオフェン－３－イルカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．７０ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）の混合物に、空気雰囲気下、室温で、ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、２４時間１００℃に加熱した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。ガスの発生が止むまで、飽和水性ＮａＨＣＯ３を添加した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中ＥｔＯＡｃで溶離）で精製して、６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジンが得られた。
LCMS (C7H5BrNS) (ES, m/z): 214, 216 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.18 (d, J=5.4Hz, 1H), 7.58 (d, J=5.4Hz, 1H)。
段階２： ６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン４－オキシド
Figure 0007326319000288
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン（１．４２ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）の混合物に、アルゴン下、０℃で、ｍＣＰＢＡ（１．４９ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を室温まで昇温させ、さらに２４時間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の［ＥｔＯＡｃ中の５％ＭｅＯＨ］で溶離）で精製して、６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン４－オキシドが得られた。
LCMS (C7H5BrNOS) (ES, m/z): 230, 232 [M+H]+。
段階３： ６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－イルアセテート
Figure 0007326319000289
６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン４－オキシド（１．３８ｇ、６．００ｍｍｏｌ）に、Ｎ２（ｇ）下、室温で、無水酢酸（２０ｍＬ、２１０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を１４０℃に加熱し、４時間撹拌した。次いで、その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈した。その反応混合物に、ガスの発生が止むまで、ＮａＨＣＯ３を少量ずつゆっくりと添加した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の［ＥｔＯＡｃ中５％ＭｅＯＨ］で溶離）で精製して、６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－イルアセテートが得られた。
LCMS (C9H7BrNO2S-C2H2O) (ES, m/z): 230, 232 [M+H-acetate]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.04 (s, 1H), 8.29 (d, J=5.2Hz, 1H), 7.54 (d, J=5.4Hz, 1H), 2.41 (s, 3H)。
段階４： ６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－オール
Figure 0007326319000290
６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－イルアセテート（４３１ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）中の溶液に、Ｎ２（ｇ）下、２０℃で、ＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中２．０Ｍ、４．０ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。その反応混合物をＨＣｌ（Ｈ２Ｏ中１．０Ｍ、８．０ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）でクエンチし、次いで、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加することによって希釈した。その反応混合物を３０分間撹拌し、次いで、濾過した。収集した物質を追加のＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、次いで、減圧下で乾燥させて、６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－オールが得られた。
LCMS (C7H5BrNOS) (ES, m/z): 230, 232 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.91 (d, J=5.3Hz, 1H), 6.99 (d, J=5.1Hz, 1H)。
段階５： ６－ブロモ－５－クロロチエノ［３，２－ｂ］ピリジン
Figure 0007326319000291
６－ブロモチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－５－オール（３７５ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）に、Ｎ２（ｇ）下、２０℃で、オキシ塩化リン（１５．２ｍＬ、１６３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を撹拌し、２日間１００℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、その反応混合物を水性飽和ＮａＨＣＯ３溶液に滴下して加えることによってクエンチした。その反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）でさらに希釈し、撹拌した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、６－ブロモ－５－クロロチエノ［３，２－ｂ］ピリジンが得られ、これは、精製することなく使用した。
LCMS (C7H4BrClNS) (ES, m/z): 248, 250 [M+H]+.
段階６： ６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン
Figure 0007326319000292
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の６－ブロモ－５－クロロチエノ［３，２－ｂ］ピリジン（３５２ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２（ｇ）下、２０℃で、ＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中２５％、３．２４ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、マイクロ波反応器の中で１時間１００℃に加熱した。その反応混合物をクエン酸（Ｈ２Ｏ中１．０Ｍ、２８ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の［ＥｔＯＡｃ中の５％ＭｅＯＨ］で溶離）で精製して、６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジンが得られた。
LCMS (C8H7BrNOS) (ES, m/z): 244, 246 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (s, 1H), 8.09 (d, J=5.3Hz, 1H), 7.44 (d, J=5.2Hz, 1H), 3.99 (s, 3H)。
段階７： ６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸
Figure 0007326319000293
６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン（５．０ｇ、２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中の溶液に、－７８℃で、ＬＤＡ（ＴＨＦ中２．０Ｍ、１２．３ｍＬ、２４．６ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１５分間熟成させ、次いで、－７８℃でＣＯ２（ｇ）を添加することによってクエンチした。次いで、その反応混合物を１０分間かけて０℃まで昇温させた。その反応混合物を０℃でＨＣｌ（水中２．０Ｍ、１２．３ｍＬ、２４．６ｍｍｏｌ）でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をＤＣＭ（９０ｍＬ）に懸濁させ、１時間撹拌した。次いで、Ｈｅｘ（２５０ｍＬ）を、添加ロートを介して室温で４時間かけて滴下して加えた。次いで、得られた懸濁液を室温でさらに１６時間撹拌した。次いで、その懸濁液を濾過し、その残渣をＨｅｘ／ＤＣＭ（５０ｍＬ）の（４：１）混合物で洗浄した。その残渣を減圧下で乾燥させて、６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸が得られた。
LCMS (C9H7BrNO3S) (ES, m/z): 288, 290 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 13.79 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 4.01 (s, 3H)。
段階８： ６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド
Figure 0007326319000294
６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボン酸（１．０５ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）と塩化オキサリル（０．６４ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中の溶液に、アルゴン下、０℃で、ＤＭＦ（８μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応混合物を減圧下で濃縮して、６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリドが得られ、これは、直接、次の段階で使用した。
段階９： （Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000295
塩化銅（Ｉ）（０．３６１ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）を含む、オーブンで乾燥させたフラスコに、アルゴン下、０℃で、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミドの溶液（ＴＨＦ中０．５Ｍ、１４．６ｍＬ、７．２９ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。その反応混合物を、アルゴン下、０℃で、２０分間撹拌した。次いで、その反応混合物に、０℃で、６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－カルボニルクロリド（１．１２ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）とＮＭＰ（５．０ｍＬ）のＡｒ脱ガス溶液をカニューレを介してゆっくりと添加し；得られた溶液を室温まで昇温させ、室温でさらに１８時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）の溶液を添加することによってクエンチした。得られた二相混合物を室温まで昇温させ、さらに１時間撹拌した。次いで、その混合物を濾過し、その濾液を追加のＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、追加のブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C14H15BrNO4S) (ES, m/z): 372, 374 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.87 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.52 (dd, J=17.9, 8.7Hz, 1H), 3.27 (dd, J=18.0, 4.5Hz, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階１０： （Ｓ）－（５－メトキシ－２－（４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－６－イル）ボロン酸
Figure 0007326319000296
（Ｓ）－メチル４－（６－ブロモ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（７００ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）と４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（５９７ｍｇ、２．３５１ｍｍｏｌ）とＰｄ２（ｄｂａ）３（４３ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）とトリシクロヘキシルホスフィン（５３ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）と酢酸カリウム（オーブンで乾燥させたもの）（２９５ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。ジオキサン（１５ｍＬ）を室温で添加し、得られた混合物をＡｒを用いて５分間脱ガスした。次いで、その反応混合物を８０℃まで加熱し、アルゴン下、１８時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。その懸濁液を室温で１０分間撹拌し、次いで、ＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、（Ｓ）－（５－メトキシ－２－（４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－６－イル）ボロン酸が得られ、これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C14H17BNO6S) (ES, m/z): 338 [M+H]+。
段階１１： （Ｓ）－４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000297
ＯＸＯＮＥ（登録商標）の溶液（ＫＨＳＯ５・１／２ＫＨＳＯ４・１／２Ｋ２ＳＯ４；水中０．２Ｍ、１４．１０ｍＬ、２．８２ｍｍｏｌ）を、アセトン（２０ｍＬ）中の（Ｓ）－（５－メトキシ－２－（４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－６－イル）ボロン酸（６３４ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）の混合物に室温で添加した。その反応混合物を室温で３０分間撹拌した。その反応混合物を、重亜硫酸ナトリウム（５８７ｍｇ、５．６４ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液を添加することによってクエンチし、次いで、５分間撹拌した。その反応混合物をＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、その水層を追加のＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を合し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C14H16NO5S) (ES, m/z): 310 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 10.46 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.44 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.20 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.00-2.92 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階１２： （Ｓ）－４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000298
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（９６ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（２５７ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１－ブロモ－３－クロロプロパン（２４４ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、４時間５０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、濾過し、次いで、その溶媒和物を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（６－（３－クロロプロポキシ）－５－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C17H21ClNO5S) (ES, m/z): 386 [M+H]+。
中間体９７： （Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000299
段階１： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000300
（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（７５０ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）、ヒューニッヒ塩基（２．０ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）及びトリフルオロメタンスルホン酸無水物（ＤＣＭ中１．０Ｍ、３．５ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を合した。その反応混合物を室温で２０分間撹拌した。次いで、その反応混合物を水でクエンチし、ＤＣＭで希釈した。その有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C16H15F4O7S2) (ES, m/z): 459 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.53 (dd, J=17.8, 8.7Hz, 1H), 3.27 (dd, J=17.8, 5.0Hz, 1H), 3.05-2.92 (m, 1H), 1.21 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階２： （２Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000301
（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ベンゾ－［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１．００ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）、ＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．０８８ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及び（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、８．７ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）をバイアルの中で合した。その反応混合物を４０℃で２時間加熱した。その反応混合物をＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（２Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C23H30FO6S) (ES, m/z): 453 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 4.54 (t, J=3.4Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.69-3.62 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.49 (dd, J=17.7, 8.7Hz, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.38-3.28 (m, 1H), 3.25 (dd, J=17.6, 5.0Hz, 1H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.80-2.70 (m, 2H), 1.84-1.76 (m, 2H), 1.76-1.67 (m, 1H), 1.63-1.57 (m, 1H), 1.50-1.40 (m, 4H), 1.20-1.17 (m, 3H)。
段階３： （Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000302
（２Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（３５０ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（５ｍＬ）をバイアル中で合した。その反応混合物にトリフェニルホスフィンジブロミド（６５３ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した。その反応混合物を水でクエンチした。その有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H21BrFO4S) (ES, m/z): 431, 433 [M+H]+。
中間体９８： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000303
（２Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－メトキシ－５－（３－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（３５０ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）及びＭｐ－ＴｓＯＨ（１．００ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）をバイアルの中で合した。その反応混合物を２時間振盪した。次いで、その反応混合物を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H22FO5S) (ES, m/z): 369 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.50 (dd, J=17.7, 8.7Hz, 1H), 3.44 (t, J=6.5Hz, 2H), 3.25 (dd, J=17.4, 4.7Hz, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.71 (t, J=7.4Hz, 2H), 1.69-1.63 (m, 2H), 1.20 (d, J=7.0Hz, 3H)。
中間体９９： ２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000304
段階１： ２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸
Figure 0007326319000305
ＤＣＭ（２０．０ｍＬ）中、４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン（１．１３ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）と３－オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２，４－ジオン（１．１９ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、塩化アルミニウム（０．９２３ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温まで昇温させ、次いで、１８時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、水（５０ｍＬ）でクエンチした。次いで、その混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸が得られた。これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C15H14FO5S) (ES, m/z): 325 [M+H]+。
段階２： ２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000306
ＤＣＭ（２０ｍＬ）とＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸（１．４０ｇ、４．３２ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（ジエチルエーテル中２．０Ｍ、４．３ｍＬ、８．６ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチした。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.48 (s, 3H), 3.31-3.25 (m, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 1.62-1.58 (m, 1H), 1.44-1.40 (m, 1H)。
段階３： ２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000307
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中の２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸メチル（１．５０ｇ、４．４３ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、塩化アルミニウム（２．６６ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。その反応混合物を、アルゴン下、室温で６時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、水（５０ｍＬ）でゆっくりとクエンチした。その反応混合物を追加のＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロプロパンカルボン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H14FO5S) (ES, m/z): 325 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.48 (s, 3H), 3.30-3.23 (m, 1H), 2.45-2.39 (m, 1H), 1.61-1.57 (m, 1H), 1.43-1.38 (m, 1H)。
中間体１００： （Ｒ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000308
段階１： （Ｒ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000309
５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（３．００ｇ、９．８２ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（９８ｍＬ）を合した。次いで、その反応混合物をＡｒを用いて１０分間脱ガスした。その反応混合物に、ＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．０８１ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を０℃まで冷却した。次いで、その反応混合物に、（Ｓ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、２１ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を添加漏斗を介して添加した。その混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ｈｅｘ）で精製して、（Ｒ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H16BrO4S) (ES, m/z): 371, 373 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.28-8.26 (m, 2H), 7.82 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.44 (dd, J=17.6, 8.6Hz, 1H), 3.21 (dd, J=17.6, 5.1Hz, 1H), 3.03-2.93 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階２： （Ｒ）－４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000310
ＴＨＦ（１３．５ｍＬ）中の（Ｒ）－メチル４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１．００ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）の混合物に、ＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（１７４ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、９．７ｍＬ、４．９ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を４０℃で３時間加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｒ）－４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C24H37O5SSi) (ES, m/z): 465 [M+H]+。
段階３： （Ｒ）－４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000311
ＭｅＯＨ（４ｍＬ）と水（４ｍＬ）とＨＯＡｃ（４ｍＬ）の混合物に、（Ｒ）－メチル４－（５－（３－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１．０４ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を懸濁させた。その反応混合物を室温で３．５時間撹拌した。その反応混合物をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。その水層を分離し、追加のＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。その有機層を合し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｒ）－４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H23O5S) (ES, m/z): 351 [M+H]+。
段階４： （Ｒ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000312
ＴＨＦ（９．７ｍＬ）中の（Ｒ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（６８０ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（８１４ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＮＢＳ（５１８ｍｇ、２．９１ｍｍｏｌ）を添加した。１．５時間経過した後、その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｒ）－４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H22BrO4S) (ES, m/z): 413, 415 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.55 (t, J=6.6Hz, 2H), 3.43 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.20 (dd, J=17.5, 5.1Hz, 1H), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.83-2.77 (m, 2H), 2.14-2.08 (m, 2H), 1.20 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体１０１、中間体１０２、中間体１０３、及び、中間体１０４：（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000313
段階１：（シス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸
Figure 0007326319000314
ＤＣＭ（２０．０ｍＬ）中の４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン（９５０ｍｇ、４．４８ｍｍｏｌ）と３－オキサビシクロ［３．２．０］ヘプタン－２，４－ジオン（１１３０ｍｇ、８．９５ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、塩化アルミニウム（７７６ｍｇ、５．８２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温まで昇温させ、次いで、１８時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、水（５０ｍＬ）を滴下して加えることによってクエンチした。次いで、その混合物を追加のＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（シス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸が得られ、これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+.
段階２： （シス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000315
ＤＣＭ（２０ｍＬ）とＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の（シス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボン酸（１．３５ｇ、３．９９ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（ジエチルエーテル中２．０Ｍ、４．０ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチした。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（シス）－メチル２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボキシレートが得られた。
LCMS (C17H18FO5S) (ES, m/z): 353 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 4.59-4.50 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.68 (q, J=8.9, 8.5Hz, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.34-2.10 (m, 4H)。
段階３： （トランス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸
Figure 0007326319000316
ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の（シス）－メチル２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボキシレート（６５０ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＮａＯＨ（５．０Ｍ、１．８ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で４時間撹拌した。その反応混合物をＴＦＡ（０．８５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）でクエンチし、次いで、ＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製して、（トランス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボン酸が得られた。
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+.
段階４： （トランス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000317
ＤＣＭ（２０ｍＬ）とＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の（トランス）－２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボン酸（５７０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（ジエチルエーテル中２．０Ｍ、１．７ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチした。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（トランス）－メチル２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボキシレートが得られた。
LCMS (C17H18FO5S) (ES, m/z): 353 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 4.42 (q, J=9.0Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.58-3.48 (m, 1H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.26-2.18 (m, 1H), 2.17 -2.10 (m, 2H)。
段階５： （１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル、（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
Figure 0007326319000318
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中の（トランス）－メチル２－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタンカルボキシレート（５３０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＡｌＣｌ３（１．１０ｇ、８．２７ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を、アルゴン下、室温で６時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、水（５０ｍＬ）でゆっくりとクエンチした。次いで、その反応混合物を追加のＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（＋／－トランス）－メチル－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボキシレートと（＋／－トランス）－メチル－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボキシレートの混合物が得られた。そのラセミ位置異性体の混合物をキラルＳＦＣ（ＣＣＡカラム、ＣＯ２中の２０％［ＭｅＯＨ（０．２５％ＤＭＥＡ含有）］）で精製して、以下のものが得られた：
ピーク１（３．０分）：（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 10.58 (br s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 4.45-4.34 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.56-3.47 (m, 1H), 2.36-2.24 (m, 1H), 2.25-2.16 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 2H).
ピーク２（３．５分）：（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+.
ピーク３（３．９分）：（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.45-4.38 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.58-3.49 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 1H), 2.25-2.19 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 2H).
ピーク４（５．０分）：（１Ｒ，２Ｒ又は１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニル）シクロブタン－１－カルボン酸メチル
LCMS (C16H16FO5S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.54 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.44-4.38 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.55-3.49 (m, 1H), 2.38-2.26 (m, 1H), 2.26-2.17 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 2H)。
中間体１０５： （Ｒ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000319
段階１： （Ｒ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000320
４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（１．００ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（３６．４ｍＬ）の混合物を、Ａｒを用いて１０分間脱ガスした。その混合物にＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．０３０ｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を０℃まで冷却した。次いで、その反応混合物に、（Ｓ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、８．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）を、添加漏斗を介して添加した。その混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｒ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H18FO5S) (ES, m/z): 341 [M+H]+。
段階２： （Ｒ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000321
ＤＣＭ（２２ｍＬ）中の（Ｒ）－メチル４－（４－フルオロ－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（０．７４２ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＡｌＣｌ３（１．１６ｇ、８．７２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物を０℃まで冷却し、水（５０ｍＬ）及びＨＣｌ（水中１．０Ｍ、５０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を添加することによってクエンチした。次いで、その反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｒ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られ、これは、精製することなく使用した。
LCMS (C15H16FO5S) (ES, m/z): 327 [M+H]+。
中間体１０６： （Ｓ）－４－（４－クロロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000322
ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２５ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＮＣＳ（１１ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を４０℃に加熱し、２時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡＣ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－クロロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H16ClO5S) (ES, m/z): 343 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.78 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.50 (dd, J=17.8, 8.7Hz, 1H), 3.31-3.23 (m, 1H), 3.02-2.92 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体１０７： （Ｓ）－４－（４－ブロモ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000323
ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中、（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２５ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＮＢＳ（１４ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を４０℃に加熱し、２時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、（Ｓ）－メチル４－（４－ブロモ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエートが得られた。
LCMS (C15H16BrO5S) (ES, m/z): 387, 389 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.82 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.50 (dd, J=17.8, 8.7Hz, 1H), 3.31-3.24 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 1.21 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体１０８： ４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000324
段階１： ４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000325
ＤＣＭ（５０ｍＬ）とＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（２．１５ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（ジエチルエーテル中２．０Ｍ、５．５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。その反応混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチした。その反応混合物を減圧下で濃縮して、４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られ、これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C15H17O5S) (ES, m/z): 309 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.35-3.30 (m, 2H), 2.71-2.66 (m, 2H)。
段階２： ４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル 及び ４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000326
ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中の４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（２．２０ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＡｌＣｌ３（５．７１ｇ、４２．８ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で２４時間撹拌した。その反応混合物を０℃まで冷却し、水（５０ｍＬ、添加漏斗を介して滴下して加えた）でクエンチした。次いで、その反応混合物を室温まで昇温させ、追加のＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（７７％）と４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（２３％）の混合物が得られた。
LCMS (C14H15O5S) (ES, m/z): 295 [M+H]+。
段階３： ４－（５－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）オキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル 及び ４－（６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）オキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000327
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中の４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（７７％）と４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（２３％）（１．８２ｇ、６．１８ｍｍｏｌ）とＴＥＡ（１．２９ｍＬ、９．２８ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＣＢＺ－Ｃｌ（１．０６ｍＬ、７．４２ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を室温まで昇温させ、さらに２時間撹拌した。その反応混合物を減圧下で濃縮し、その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、以下のものが得られた：
ピーク１：４－（５－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）オキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
LCMS (C22H21O7S) (ES, m/z): 429 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.48-7.38 (m, 5H), 5.30 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.40-3.33 (m, 2H), 2.69 (t, J=6.4Hz, 2H)。
ピーク２：４－（６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）オキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
LCMS (C22H21O7S) (ES, m/z): 429 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.47-7.37 (m, 5H), 5.31 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.41-3.36 (m, 2H), 2.74-2.68 (m, 2H)。
段階４： ４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000328
ＤＭＦ（５ｍＬ）とＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の４－（６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）オキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（１．８４ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１－メチルピペラジン（１．４ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を５０℃に加熱し、さらに３０分間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で部分的に濃縮した。その粗製混合物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で精製して、４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H15O5S) (ES, m/z): 295 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.88 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.33-3.29 (m, 2H), 2.71-2.66 (m, 2H)。
中間体１０９： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000329
段階１： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000330
ＭｅＯＨ（９７ｍＬ）とＴＨＦ（９７ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（３．００ｇ、９．７３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮａＯＨ（水中５．０Ｍ、３９ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１．５時間５０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＨＣｌ（水中２．０Ｍ、１００ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）を用いて酸性化して約ｐＨ３とした。その混合物をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C14H15O5S) (ES, m/z): 295 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 12.18 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.38 (dd, J=17.3, 8.5Hz, 1H), 3.07 (dd, J=17.3, 5.3Hz, 1H), 2.94-2.83 (m, 1H), 1.18 (d, J=7.2Hz, 3H)。
段階２： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000331
ＤＭＦ（６．８ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸（１．００ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、２－ｔｅｒｔ－ブチル－１，３－ジイソプロピルイソ尿素（２．３ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その混合物をＥｔＯＡｃ及び水で希釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C18H23O5S + Na) (ES, m/z): 373 [M+Na]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.36-3.30 (m, 1H), 3.05 (dd, J=17.1, 5.0Hz, 1H), 2.90-2.79 (m, 1H), 1.35 (s, 9H), 1.16 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体１１０： （Ｓ）－４－（４，７－ジクロロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000332
ＤＭＦ（４．０ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（５００ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）の混合物に、２０℃で、ＮＣＳ（４３３ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を４０℃に加熱し、２時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。その混合物を水（３×２５ｍＬ）及びブライン（１×２５ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製し、その後、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）でさらに精製して、（Ｓ）－４－（４，７－ジクロロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H15Cl2O5S) (ES, m/z): 377, 379 [M+H]+。
中間体１１１： （Ｓ）－４－（５－（３－ブロモ－２，２－ジメチルプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000333
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２５ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（４２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１，３－ジブロモ－２，２－ジメチルプロパン（１７６ｍｇ、０．７６６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を撹拌し、２４時間１００℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭ（２ｍＬ）で希釈し、濾過した。その濾液を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－ブロモ－２，２－ジメチルプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C20H25BrFO5S) (ES, m/z): 475, 477 [M+H]+。
中間体１１２： （Ｓ）－４－（５－（（１－（ブロモメチル）シクロプロピル）メトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000334
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（２５ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（４２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１，１－ビス（ブロモメチル）シクロプロパン（１７５ｍｇ、０．７６６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を撹拌し、４時間４０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭ（２ｍＬ）で希釈し、濾過した。その濾液を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（（１－（ブロモメチル）シクロプロピル）メトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C20H23BrFO5S) (ES, m/z): 473, 475 [M+H]+。
中間体１１３： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000335
段階１： （Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000336
ＤＣＭ（３５ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．５０ｇ、４．０４ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＡｌＣｌ３（３．２３ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を撹拌し、２４時間３５℃に加熱した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、水（１０ｍＬ）をゆっくりと添加することによってクエンチした。次いで、その混合物を室温まで昇温させ、さらに１５分間撹拌した。その反応混合物をＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈し、その有機層を分離した。その有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H14BrO4S) (ES, m/z): 357, 359 [M+H]+。
段階２： （Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000337
ＤＣＭ（２５ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．４２ｇ、３．９８ｍｍｏｌ）とヒューニッヒ塩基（４．２ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＭＯＭ－Ｃｌ（０．９１ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させ、さらに２４時間撹拌した。その反応混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を添加することによってクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H18BrO5S) (ES, m/z): 401, 403 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 5.41 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.48-3.42 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.22 (dd, J=17.6, 5.1Hz, 1H), 3.04-2.93 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.4Hz, 3H)。
段階３： （Ｓ）－４－（６－（メトキシメトキシ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000338
（Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．５７ｇ、３．９１ｍｍｏｌ）と４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（１．１９ｇ、４．７０ｍｍｏｌ）とＰｄ２（ｄｂａ）３（０．１７９ｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）とトリシクロヘキシルホスフィン（０．２１９ｇ、０．７８３ｍｍｏｌ）と酢酸カリウム（０．６１４ｇ、６．２６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。ジオキサン（２０ｍＬ）を室温で添加し、得られた混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。次いで、その反応混合物を９０℃に加熱し、アルゴン下、６時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。その懸濁液を室温で１０分間撹拌し、次いで、ＣＥＬＩＴＥを通して濾過し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（６－（メトキシメトキシ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C22H30BO7S) (ES, m/z): 449 [M+H]+。
段階４： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000339
（Ｓ）－４－（６－（メトキシメトキシ）－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１．７５ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）のアセトン（５０ｍＬ）中の溶液に、室温で、ＯＸＯＮＥ（登録商標）の溶液（水中０．２０Ｍ、２１ｍＬ、４．３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で６０分間撹拌した。その反応混合物を、水（５ｍＬ）中の重亜硫酸ナトリウム（０．８１ｇ、７．８ｍｍｏｌ）の溶液を添加することによってクエンチし、次いで、５分間撹拌した。その反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、その水層を追加のｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で洗浄した。その有機層を合し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、ピナコール副生物で汚染されている（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。その単離された物質をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）で再精製して、（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）－ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H19O6S) (ES, m/z): 339 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.52 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.44 (s, 3H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.18 (dd, J=17.5, 5.1Hz, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 3H)。
中間体１１４： （Ｓ）－４－（４－クロロ－５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000340
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＮＣＳ（９９ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、２時間４０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（４－クロロ－５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H18ClO6S) (ES, m/z): 373 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.51 (dd, J=17.8, 8.7Hz, 1H), 3.46 (s, 3H), 3.27 (dd, J=17.8, 5.0Hz, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 1.20 (d, J=7.2Hz, 3H).
中間体１１５： （Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000341
段階１： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000342
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２．０ｇ、６．１ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、三臭化ホウ素（ＤＣＭ中１．０Ｍ、３１ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、２時間３０℃に加熱した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を滴下して加えることによってクエンチした。その反応混合物をさらに１５分間撹拌した。次いで、その反応混合物を水（１００ｍＬ）及び追加のＤＣＭ（５００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られ、これは、精製することなく次の段階で使用した。
LCMS (C13H12FO5S) (ES, m/z): 299 [M+H]+.
段階２： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000343
ＤＣＭ（１０ｍＬ）とＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸（１．８３ｇ、６．１４ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＴＭＳ－ジアゾメタン（ジエチルエーテル中２．０Ｍ、３．１ｍＬ、６．２ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を０℃で１５分間撹拌した。その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチし、次いで、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、所望の生成物が得られた。その単離された物質をシリカゲルクロマトグラフィー（［ＥｔＯＡｃ中の２５％ＥｔＯＨ］／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H14FO5S) (ES, m/z): 313 [M+H]+。
段階３： （Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル 及び （Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000344
ＤＣＭ（２５ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５，６－ジヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（４６０ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）とヒューニッヒ塩基（０．５２ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃で、ＭＯＭ－Ｃｌ（０．１２ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させ、さらに２４時間撹拌した。その反応混合物を、飽和水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を添加することによってクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルと（Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルの分離できない混合物が得られた。その混合物は、それ以上精製することなく次の反応において使用した。
LCMS (C18H18FO6S) (ES, m/z): 357 [M+H]+。
段階４： （Ｓ）－４－（６－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル 及び （Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000345
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル及び（Ｓ）－４－（４－フルオロ－６－ヒドロキシ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２７０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（２６０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、１，３－ジブロモプロパン（０．５８ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で１８時間撹拌した。その反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、位置異性体の混合物が得られた。その位置異性体の混合物を逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、以下のものが得られた：
最初に溶出したＨＰＬＣ上のピーク：（Ｓ）－４－（６－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
LCMS (C19H23BrFO6S) (ES, m/z): 477, 479 [M+H]+.
二番目に溶出したＨＰＬＣ上のピーク：（Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
LCMS (C19H23BrFO6S) (ES, m/z): 477, 479 [M+H]+。
中間体１１６： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メチルアミノ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000346
段階１： （Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000347
６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－カルボニルクロリド（５．９６ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）及びＣＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ４（０．１６０ｇ、０．１９５ｍｍｏｌ）をフラスコの中で合し、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。アルゴン流下、ＴＨＦ（７５ｍＬ）を添加し、その混合物を０℃まで冷却した。次いで、（Ｒ）－（３－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）亜鉛（ＩＩ）ブロミド（ＴＨＦ中０．５０Ｍ、４０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を滴下して加え、得られた混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで、室温まで昇温させた。その混合物を室温で３日間撹拌した。
その反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（２５ｍＬ）でクエンチし、次いで、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。その有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H16BrO4S) (ES, m/z): 371, 373 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.52-3.43 (m, 1H), 3.28-3.18 (m, 1H), 3.05-2.95 (m, 1H), 1.23-1.18 (m, 3H)。
段階２： （Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000348
ＤＣＭ（３５ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１７０ｍｇ、０．４５８ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＡｌＣｌ３（３６６ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、３日間４５℃に加熱した。その反応混合物を０℃まで冷却し、次いで、水（１０ｍＬ）をゆっくりと添加することによってクエンチした。次いで、その混合物を室温まで昇温させ、さらに１５分間撹拌した。その反応混合物をＤＣＭ（２５０ｍＬ）で希釈し、その有機層を分離した。その有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C14H14BrO4S) (ES, m/z): 357, 359 [M+H]+。
段階３： （Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000349
ＤＣＭ（５．０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１５０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）とＭＯＭ－Ｃｌ（０．０９６ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）の混合物に、０℃でヒューニッヒ塩基（０．４４ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を０℃で１時間撹拌した。その反応混合物を、直接、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C16H18BrO5S) (ES, m/z): 401, 403 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.53-3.42 (m, 4H), 3.23 (dd, J=17.7, 3.0Hz, 1H), 3.07-2.95 (m, 1H), 1.21 (d, J=5.0Hz, 3H)。
段階４： （Ｓ）－４－（６－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000350
（Ｓ）－４－（６－ブロモ－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１４４ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）とメチルカルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７１ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）とＰｄ２（ｄｂａ）３（１６ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）とＸＡＮＴＰＨＯＳ（３１ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（２３４ｍｇ、０．７１８ｍｍｏｌ）のＡｒ脱ガス混合物に、室温でＡｒを用いて脱ガスしながらジオキサン（４．０ｍＬ）を添加した。その混合物を、Ａｒを用いて脱ガスしながら５分間撹拌し、その後、その混合物を９０℃に加熱し、アルゴン下で１８時間撹拌した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。得られた懸濁液をＣＥＬＩＴＥを通して濾過した。その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、当該生成物が得られた。
LCMS (C22H30NO7S) (ES, m/z): 452 [M+H]+。
段階５： （Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メチルアミノ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000351
ＤＣＭ（２．０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（６－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）－５－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１８ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＴＦＡ（１．０ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その反応混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）をゆっくりと添加することによってクエンチした。得られた混合物を１０分間撹拌した。その有機層を分離し、ブラインで洗浄し（５ｍＬ）、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メチルアミノ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C15H18NO4S) (ES, m/z): 308 [M+H]+。
実施例１： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸） 及び
実施例２： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000352
段階１： （２Ｓ）－４－［６－メトキシ－５－（プロパ－２－エン－１－イル）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000353
トルエン（０．４９ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１２０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）とビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（７．１ｍｇ、１２μｍｏｌ）とアリルトリブチルスタンナン（１２０μＬ、０．３９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｎ２下、トリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン（トルエン中１．０Ｍ、２６μＬ、２６μｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を１８時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＥｔ２Ｏで希釈し、次いで、ＣｓＦを添加した。その粗製混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、その混合物を濾過し、その濾液を、直接、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、（２Ｓ）－４－［６－メトキシ－５－（プロパ－２－エン－１－イル）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C18H21O4S) (ES, m/z): 333 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 8.27 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 6.06-5.94 (m, 1H), 5.07 (d, J=12.5Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.46-3.38 (m, 3H), 3.19 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 1H), 3.02-2.92 (m, 1H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 3H)。
段階２： ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタ－２－エン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート） 及び ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパ－１－エン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）
Figure 0007326319000354
ＣＨ２Ｃｌ２（１．３ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－［６－メトキシ－５－（プロパ－２－エン－１－イル）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（４４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下、ＣＨ２Ｃｌ２（１．３ｍＬ）中のグラブス触媒２Ｇ（１１ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を一度に添加した。その反応混合物を１８時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を、直接、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタ－２－エン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパ－１－エン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の混合物が得られた。
ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタ－２－エン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の特徴付け：
LCMS (C34H37O8S2) (ES, m/z): 637 [M+H]+。
ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパ－１－エン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の特徴付け：
LCMS (C33H35O8S2) (ES, m/z): 623 [M+H]+。
段階３： ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート） 及び ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）
Figure 0007326319000355
ＥｔＯＡｃ（０．５ｍＬ）中のジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタ－２－エン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパ－１－エン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の混合物（５７．０ｍｇ、１Ｈ－ＮＭＲによる約３／２の混合物）に、Ｎ２下、室温で、１０％Ｐｄ／Ｃ（６．０ｍｇ、５．４μｍｏｌ）を一度に添加した。その反応混合物を脱ガス及びＨ２の再充填に付し（３回）、Ｈ２（バルーン）下、室温で１８時間撹拌した。次いで、その混合物を減圧下で濃縮して、ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の粗製混合物が得られた。その混合物は、それ以上精製又は特徴付けをすることなく使用した。
段階４： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸） 及び （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000356
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）とＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）と水（０．２０ｍＬ）中、ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）（５７ｍｇ）の混合物に、室温で、ＬｉＯＨ（２６ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水性ＨＣｌ（２Ｎ、０．５２ｍＬ）でクエンチした。その混合物をＤＭＳＯで希釈し、得られた混合物を濾過した。その濾液をＲＰ－ＨＰＬＣ［Ｃ１８カラム、水（０．１％ＴＦＡ）－ＣＨ３ＣＮ］で精製して、（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）及び（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）が得られた。
（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［ブタン－１，４－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）に関する特徴付けデータ：
LCMS (C32H34O8S2Na) (ES, m/z): 633 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (br, 2H), 8.21 (s, 2H), 7.72 (s, 2H), 7.57 (s, 2H), 3.87 (s, 6H), 3.39 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 2H), 3.07 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 2H), 2.94-2.84 (m, 2H), 2.69 (br, 4H), 1.62 (br, 4H), 1.18 (d, J=7.1Hz, 6H)。
（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－［プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシ－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル）］ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）に関する特徴付けデータ：
LCMS (C31H32O8S2Na) (ES, m/z): 619 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 12.21 (br, 2H), 8.23 (s, 2H), 7.76 (s, 2H), 7.59 (s, 2H), 3.88 (s, 6H), 3.40 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 2H), 3.08 (dd, J=17.5, 5.0Hz, 2H), 2.94-2.85 (m, 2H), 2.71 (t, J=7.1Hz, 4H), 1.91 (pentet, J=7.1Hz, 2H), 1.18 (d, J=7.1Hz, 6H)。
実施例３： （Ｓ）－４－（５－（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000357
磁気撹拌棒を備えた１ドラムねじ蓋バイアルに、（Ｓ）－メチル４－（５－クロロ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（６０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、ＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（７．７ｍｇ、９．２μｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（８９ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を装入し、隔膜含有蓋で密閉した。そのバイアルを排気し、Ｎ２を３回再充填した。トルエン（０．６１ｍＬ）を添加し、その懸濁液を渦撹拌し（ｖｏｒｔｅｘｅｄ）、超音波処理し、次いで、撹拌しながら２．２５時間１１０℃に加熱した。次いで、その反応物を室温まで冷却した。ＴＦＡ（０．６０ｍＬ、７．８ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで、その混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣にＴＨＦ（１．０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（０．５０ｍＬ）を添加した。水性ＮａＯＨ（２．０Ｍ、０．５０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を５時間４０℃に加熱した。室温まで冷却した後、追加の水性ＮａＯＨ（２．０Ｍ、０．５０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物をさらに２．５時間４０℃に加熱した。次いで、その反応物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。ＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）を添加し、得られた混合物をシリンジフィルターを通して濾過した。次いで、その濾液をＲＰ－ＨＰＬＣ（Ｃ１８、ＭｅＣＮ／水の勾配、調節剤ＮＨ４ＯＨ）で精製した。その生成物含有フラクションを減圧下で濃縮し、次いで、ＲＰ－ＨＰＬＣ（Ｃ１８、ＭｅＣＮ／水の勾配、調節剤ＴＦＡ）でさらに精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロポキシ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C29H30NO9S2) (ES, m/z): 600 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.18 (s, 2H), 8.22 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 4.39 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.43 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 1H), 3.29-3.22 (m, 2H), 3.15-3.06 (m, 1H), 2.91-2.80 (m, 3H), 2.63-2.56 (m, 2H), 2.18-2.06 (m, 2H), 1.17 (d, J=7.2Hz, 3H)。
下記表１１に示されている実施例４～実施例２３及び実施例８１－実施例８３は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例３において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000358
Figure 0007326319000359
Figure 0007326319000360
Figure 0007326319000361
実施例２４： ４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000362
段階１： ４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000363
バイアルに、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（３３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（７．６ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）、ニッケル（ＩＩ）ブロミドエチレングリコールジメチルエーテル錯体（９．４ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）、Ｍｎ（２２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及び４，４’－ジメトキシ－２，２’－ビピリジン（６．６ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルにＤＭＰＵ（１．０ｍＬ）を添加し、その後、Ｐｙ（８２μＬ、０．０５１ｍｍｏｌ）とＴＭＳ－Ｃｌ（７８μＬ、０．０３１ｍｍｏｌ）のＤＭＰＵ中の５％ｖ／ｖ溶液を添加した。そのバイアルを、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。その混合物を２時間９０℃に加熱した。２時間経過した後、その混合物を室温まで冷却し、直接、分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）含有）で精製して、４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C33H35NO6S2Na) (ES, m/z): 628 [M+Na]+。
段階２： ４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000364
４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８．５ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（５００μＬ）とＡＣＮ（５００μＬ）の混合物に、ＮａＯＨ（水中５．０Ｍ、０．５６μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を４時間４０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、４－（５－（３－（２－（３－シアノプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C29H28NO6S2) (ES, m/z): 550 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.20 (s, 1H), 8.30-8.20 (m, 2H), 7.82-7.75 (m, 2H), 7.65-7.56 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.54-3.46 (m, 2H), 2.82-2.76 (m, 2H), 2.76-2.58 (m, 8H), 1.99-1.86 (m, 2H)。
実施例２５： ４，４’－（５，５’－（プロパン－１，３－ジイル）ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000365
４－（６－メトキシ－５－（３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（６９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）と４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（８４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）とＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）－ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（１９５ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン（０．８０ｍＬ）及び水（０．２ｍＬ）を添加した。その反応物を１８時間１００℃に加熱した。次いで、室温まで冷却した後、その混合物を濾過し、その残留物をジオキサンで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮した。次いで、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＮＨ４ＯＨ含有））で精製して、４，４’－（５，５’－（プロパン－１，３－ジイル）ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタン酸）が得られた。
LCMS (C29H27O8S2) (ES, m/z): 566 [M-H]-. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 2H), 7.68 (s, 2H), 7.50 (s, 2H), 3.82 (s, 6H), 3.16-3.09 (m, 4H), 2.66 (t, J=6.6Hz, 4H), 2.40 (s, 4H), 1.93-1.83 (m, 2H)。
実施例２６： ４－（４－（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000366
段階１： ４－（５－メトキシ－６－（３－（６－メトキシ－２－（４－メトキシ－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－４－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000367
バイアルに、４－（６－（３－ブロモプロピル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、４－（４－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（５８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（１２ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）、ニッケル（ＩＩ）ブロミドエチレングリコールジメチルエーテル錯体（１５ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）、Ｍｎ（３６ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）及び４，４’－ジメトキシ－２，２’－ビピリジン（１１ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）を添加した。そのバイアルにＤＭＰＵ（１．６ｍＬ）を添加し、その後、Ｐｙ（１３０μＬ、０．０８２ｍｍｏｌ）とＴＭＳ－Ｃｌ（１３０μＬ、０．０４９ｍｍｏｌ）のＤＭＰＵの中の５％ｖ／ｖ溶液を添加した。そのバイアルを、Ａｒを用いて５分間脱ガスした。その混合物を１時間９０℃に加熱した。１時間経過した後、その混合物を室温まで冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃ及び水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた混合物は、それ以上精製又は特徴付けを行うことなく使用した。
段階２： ４－（４－（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000368
４－（５－メトキシ－６－（３－（６－メトキシ－２－（４－メトキシ－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－４－イル）プロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１００ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とＭｅＯＨ（１．６ｍＬ）の混合物に、ＮａＯＨ（水中５Ｍ、０．６５ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を１時間５０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、４－（４－（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C29H29O8S2) (ES, m/z): 569 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.23 (s, 2H), 8.27 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 3.89-3.79 (m, 6H), 3.34-3.19 (m, 4H), 3.03 (t, J=7.3Hz, 2H), 2.82-2.74 (m, 2H), 2.66-2.55 (m, 4H), 2.06-1.96 (m, 2H)。
下記表１２に示されている実施例２７～実施例３１は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例２６において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000369
実施例３２： ４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000370
４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（８３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）と４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（７８ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（２８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の混合物に、ＡＣＮ（１ｍＬ）を添加した。その反応物を１８時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＡＣＮ（４ｍＬ）で希釈し、濾過した。次いで、その濾液を減圧下で濃縮した。次いで、ＴＨＦ（２．０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（０．５０ｍＬ）、水（１．０ｍＬ）及びＬｉＯＨ（４８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、その混合物をＡｃＯＨ（０．４０ｍＬ）でクエンチし、その混合物を減圧下で濃縮した。次いで、得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C29H28FO9S2) (ES, m/z): 603 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.28 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.73 (d, J=13.7Hz, 1H), 7.55 (d, J=11.4Hz, 2H), 4.06-4.00 (m, 2H), 3.90-3.81 (m, 6H), 3.28 (t, J=6.1Hz, 2H), 3.23 (t, J=6.2Hz, 2H), 2.82 (s, 2H), 2.58-2.56 (m, 4H), 1.95-193 (m, 2H)。
下記表１３に示されている実施例３３～実施例４０及び実施例８４～実施例１５７は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例３２において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000371
Figure 0007326319000372
Figure 0007326319000373
Figure 0007326319000374
Figure 0007326319000375
Figure 0007326319000376
Figure 0007326319000377
Figure 0007326319000378
Figure 0007326319000379
Figure 0007326319000380
Figure 0007326319000381
Figure 0007326319000382
Figure 0007326319000383
Figure 0007326319000384
Figure 0007326319000385
実施例４１： （２Ｓ）－４－｛５－［３－（｛２－［（３Ｓ）－３－カルボキシブタノイル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝オキシ）プロピル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000386
（２Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１０７ｍｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）とＲｏｃｋＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（１１ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（１２８ｍｇ、０．３９２ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下、トルエン（８７０μＬ）中の（２Ｓ）－４－［５－（３－ヒドロキシ－プロピル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（９２ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の混合物を添加した。その反応混合物にＮ２を５分間スパージし、次いで、２時間１１０℃に加熱した。室温まで冷却した後、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）及び水（０．２５ｍＬ）を添加し、その後、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１５７ｍｇ、３．７５ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加した。その反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、水性ＨＣｌ（２．０Ｎ、１．３５ｍＬ）でクエンチした。ＤＭＳＯを添加し、得られた混合物を濾過した。その濾液をＲＰ－ＨＰＬＣ［Ｃ１８カラム、水（０．１％ＴＦＡ）－ＣＨ３ＣＮ］で精製して、（２Ｓ）－４－｛５－［３－（｛２－［（３Ｓ）－３－カルボキシブタノイル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝オキシ）プロピル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C31H32O9S2Na) (ES, m/z): 635 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 12.19 (br, 2H), 8.23 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.05 (d, J=6.2Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.06 (dt, J=17.5, 4.3Hz, 2H), 2.94-2.80 (m, 4H), 2.10 (pentet, J=6.9Hz, 2H), 1.17 (d, J=7.1Hz, 6H)。
下記表１４に示されている実施例４２、実施例１５８及び実施例１５９は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例４１において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000387
実施例４３： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000388
段階１： （Ｓ）－４－（６－メトキシ－５－（３－（（２－（４－メトキシ－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000389
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の（Ｓ）－メチル４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１６ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）と４－（６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸メチル（１４ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）と（Ｅ）－ジアゼン－１，２－ジイルビス（ピペリジン－１－イルメタノン）（２８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）とＰｈ３Ｐ（２９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の混合物をＡｒを用いて脱ガスし、次いで、２０℃で１８時間撹拌した。次いで、その反応混合物をＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）で希釈し、濾過した。次いで、その混合物を、直接、逆相ＨＰＬＣ（水中ＡＣＮ、調節剤０．１％ＴＦＡ、Ｃ－１８固定相）で精製して、（Ｓ）－４－（６－メトキシ－５－（３－（（２－（４－メトキシ－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C31H33O9S2) (ES, m/z): 613 [M+H]+。
段階２： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000390
ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（６－メトキシ－５－（３－（（２－（４－メトキシ－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（６．３ｍｇ、１０μｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＮａＯＨ（水中５．０Ｍ、２１μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を撹拌し、２時間５０℃に加熱した。その粗製反応混合物を室温まで冷却し、ＴＦＡ（１６μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）でクエンチし、ＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）で希釈し、次いで、濾過した。次いで、その濾液を直接、逆相ＨＰＬＣ（水中ＡＣＮ、調節剤０．１％ＴＦＡ、Ｃ－１８固定相）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C29H29O9S2) (ES, m/z): 585 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.22 (s, 2H), 8.33 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.94 (d, J=7.8Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.15 (d, J=7.6Hz, 1H), 4.34-4.18 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.44-3.25 (m, 3H), 3.13-3.05 (m, 1H), 2.95-2.87 (m, 1H), 2.66-2.60 (m, 2H), 2.34-2.27 (m, 2H), 1.25-1.14 (m, 3H)。
下記表１５に示されている実施例４４～実施例５９及び実施例１６０は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例４３において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000391
Figure 0007326319000392
Figure 0007326319000393
実施例６０： （２Ｓ）－４－｛５－［２－（｛２－［（３Ｓ）－３－カルボキシブタノイル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000394
段階１： （２Ｓ）－４－｛６－メトキシ－５－［２－（｛６－メトキシ－２－［（３Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル］－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000395
（２Ｓ）－４－（５－ブロモ－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（５４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）とＲａｃ ＢＩＮＡＰ Ｐｄ Ｇ３（１２ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（１１７ｍｇ、０．３６０ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下、（２Ｓ）－４－［５－（２－アミノエチル）－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（５４ｍｇ、０．１２０ｍｍｏｌ）のトルエン（１．６ｍＬ）中の懸濁液を添加した。その反応混合物にＮ２を４５分間スパージし、次いで、１２時間１１０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ中のＥｔＯＡｃ）で精製して、（２Ｓ）－４－｛６－メトキシ－５－［２－（｛６－メトキシ－２－［（３Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル］－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸メチルが得られた。
LCMS (C32H35NO8S2Na) (ES, m/z): 648 [M+Na]+。
段階２： （２Ｓ）－４－｛５－［２－（｛２－［（３Ｓ）－３－カルボキシブタノイル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000396
ＴＨＦ（２８０μＬ）とＭｅＯＨ（２８０μＬ）と水（７０μＬ）中の（２Ｓ）－４－｛６－メトキシ－５－［２－（｛６－メトキシ－２－［（３Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル］－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（１３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を一度に添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、水性ＨＣｌ（２Ｎ、１７０ｕＬ）でクエンチした。その混合物をＤＭＳＯで希釈し、得られた混合物を濾過した。その濾液をＲＰ－ＨＰＬＣ［Ｃ１８カラム、水（０．１％ＴＦＡ）－ＣＨ３ＣＮ］で精製して、（２Ｓ）－４－｛５－［２－（｛２－［（３Ｓ）－３－カルボキシブタノイル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－５－イル｝アミノ）エチル］－６－メトキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル｝－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C30H32NO8S2) (ES, m/z): 598 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6): δ 12.12 (br, 2H), 8.27 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.41 (dd, J=17.5, 8.6Hz, 2H), 3.36 (t, J=6.5Hz, 2H), 3.14-2.96 (m, 4H), 2.94-2.84 (m, 2H), 1.18 (d, J=7.1Hz, 6H)。
下記表１６に示されている実施例６１は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例６０において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000397
実施例６２： ４，４’－（（プロパン－１，３－ジイルビス（オキシ））ビス（４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000398
４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（０．０２４ｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）と４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（０．０２５ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）とＣｓ２ＣＯ３（０．０９１ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の混合物にＡＣＮ（１．０ｍＬ）を添加した。次いで、その反応混合物を１時間６５℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＴＨＦで希釈し、濾過し、その濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に、ＴＨＦ（１．０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（０．２０ｍＬ）、水（０．５ｍＬ）及びＬｉＯＨ（０．０１３ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、その混合物をＡｃＯＨでクエンチし、その混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、４，４’－（（プロパン－１，３－ジイルビス（オキシ））ビス（４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタン酸）が得られた。
LCMS (C29H27F2O10S2) (ES, m/z): 637 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (s, 2H), 7.55 (s, 2H), 4.31-4.24 (m, 4H), 3.99-3.80 (m, 6H), 3.34-3.32 (m, 4H), 2.60 (q, J=6.4Hz, 4H), 2.09 (dt, J=11.5, 5.8Hz, 2H)。
下記表１７に示されている実施例６３～実施例６５及び実施例１６１～実施例１６４は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例６２において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000399
実施例６６： （Ｒ）－４－（５－（２－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）エトキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000400
（Ｓ）－４－（５－（２－クロロエトキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（ＤＭＦ中０．２０Ｍ、５００μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（３０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、（Ｒ）－メチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（ＤＭＦ中０．２０Ｍ、５００μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を１８時間１００℃に加熱した。室温まで冷却した後、ＤＭＳＯ（５００μＬ）を添加し、その反応混合物を濾過した。水（５００μＬ）を添加し、その後、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を室温で１８時間撹拌した。その混合物を濾過し、その生成物を質量指向性（ｍａｓｓ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ）逆相Ｃ－１８カラムクロマトグラフィー（ＡＣＮ／水＋０．１％ＴＦＡ）で精製して、（Ｒ）－４－（５－（２－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）エトキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C30H29FO10S2Na) (ES, m/z): 655 [M+Na]+. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 12.18 (s, 2H), 8.31 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.58 (s, 2H), 7.50 (s, 1H), 4.50-4.41 (m, 2H), 4.36-4.30 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.46 (dd, J=18, 9Hz, 1H), 3.40 (dd, J=17, 9Hz, 1H), 3.10 (ddd, J=22, 18, 5Hz, 2H), 2.95-2.81 (m, 2H), 1.24-1.14 (m, 6H)。
下記表１８に示されている実施例６７～実施例７４及び実施例１６５～実施例１７１は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例６６において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000401
Figure 0007326319000402
Figure 0007326319000403
実施例７５： ４－（５－（（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）アミノ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000404
４ｍＬ容バイアルに、４－（６－メトキシ－５－（３－オキソプロピル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）、４－（５－アミノ－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８．９ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（０．５０ｍＬ）を添加した。そのスラリーに、ＡｃＯＨ（０．０１５ｍＬ、０．２７ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を１０分間５５℃に加熱した。室温まで冷却した後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１７ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その混合物を３時間５５℃に加熱した。室温まで冷却した後、ＴＦＡ（１ｍＬ）を添加し、その混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、その混合物減圧下で濃縮し、次いで、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）で稀釈した。その混合物を分取ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏｗ／０．１％ＴＦＡ）で精製して、４－（５－（（３－（２－（３－カルボキシプロパノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）プロピル）アミノ）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C28H29N2O8S2) (ES, m/z): 585 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.18 (br, 2H), 8.22 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.55 (br s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.48-3.43 (m, 2H), 3.27-3.24 (m, 4H), 2.73 (t, J=7.3Hz, 2H), 2.61-2.56 (m, 4H), 1.98-1.91 (m, 2H)。
実施例７６： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000405
段階１： ジメチル４，４’－（（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））（２Ｓ，２’Ｓ）－ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）
Figure 0007326319000406
（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（４７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＦ（７５０μＬ）で稀釈した。１－ブロモ－２－クロロエタン（１８μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を１８時間１００℃に加熱した。その反応混合物を減圧下で濃縮し、それ以上精製又は特徴付けを行うことなく使用した。
段階２： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000407
ジメチル４，４’－（（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））（２Ｓ，２’Ｓ）－ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３４０μＬ）／水（８０μＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（１６ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で４時間撹拌した。その反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をＤＭＳＯ（４ｍＬ）に溶解させ、濾過した。その生成物を質量指向性（ｍａｓｓ ｄｉｒｅｃｔｅｄ）逆相Ｃ１８カラムクロマトグラフィー（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（５，５’－（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）が得られた。
LCMS (C30H30O10S2Na) (ES, m/z): 637 [M+Na]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 12.21 (br s, 2H), 8.20 (s, 2H), 7.64 (s, 2H), 7.59 (s, 2H), 4.44 (s, 4H), 3.87 (s, 6H), 3.41 (dd, J=17, 9Hz, 2H), 3.09 (dd, J=17, 5Hz, 2H), 3.05-2.58 (m, 2H), 1.19 (d, J=7Hz, 6H)。
実施例７７： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸） 及び
実施例７８： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000408
段階１： ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート） 及び ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）
Figure 0007326319000409
ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の（２Ｓ）－４－（５，６－ジヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（６０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）と（２Ｓ）－４－［５，６－ビス（３－ヒドロキシプロポキシ）－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（１２０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とＰｈ３Ｐ（１９３ｍｇ、０．７３７ｍｍｏｌ）と１，１’－（アゾジカルボニル）ジピペリジン（１８６ｍｇ、０．７３７ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１８時間撹拌した。次いで、その混合物を濾過し、逆相ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有）の勾配）で精製して、ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の（１：１）混合物が得られた。
LCMS (C34H36O10S2Na) (ES, m/z): 691 [M+Na]+。
段階２： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸） 及び （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000410
ジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）とジメチル（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタノエート）の（１：１）混合物（６７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）とＴＨＦ（１．０ｍＬ）と水（０．２ｍＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ（２４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を４時間撹拌し、次いで、逆相ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有）の勾配）で精製して、（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：５’，６’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）と（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（７，８，１７，１８－テトラヒドロ－６Ｈ，１６Ｈ－ビス［１］ベンゾチエノ［５，６－ｂ：６’，５’－ｉ］［１，４，８，１１］テトラオキサシクロテトラデシン－２，１２－ジイル）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）の（１：１）混合物が得られた。
LCMS (C32H33O10S2) (ES, m/z): 641 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.20 (brs, 2H), 8.18 (s, 2H), 7.52 (s, 2H), 7.40 (s, 2H), 4.27-4.18 (m, 8H), 3.42-3.34 (m, 2H), 3.10-3.03 (m, 2H), 2.92-2.85 (m, 2H), 2.29 (brs, 4H), 1.17 (d, J=6.8Hz, 6H)。
実施例７９： （２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（１，３－プロパンジイルビス｛オキシ［６－（ジフルオロメトキシ）－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル］｝）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）
Figure 0007326319000411
（２Ｓ）－４－［６－（ジフルオロメトキシ）－５－ヒドロキシ－１－ベンゾチオフェン－２－イル］－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（５４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とＫ２ＣＯ３（１０９ｍｇ、０．７８８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の撹拌溶液に、１，３－ジブロモプロパン（８μＬ、０．０８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を４時間５０℃に加熱した。室温まで冷却した後、その混合物をＬｉＯＨ（水中２Ｍ、７９０μＬ、１．５８ｍｍｏｌ）で処理し、室温で４時間撹拌した。次いで、その混合物を減圧下で濃縮し、ＲＰ－ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有）の勾配）で精製して、（２Ｓ，２’Ｓ）－４，４’－（１，３－プロパンジイルビス｛オキシ［６－（ジフルオロメトキシ）－１－ベンゾチエン－５，２－ジイル］｝）ビス（２－メチル－４－オキソブタン酸）が得られた。
LCMS (C31H28F4O10S2Na) (ES, m/z): 723 [M+23]+. 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.25 (s, 2H), 8.27 (s, 2H), 7.94 (s, 2H), 7.73 (s, 2H), 7.20 (t, J=74.0Hz, 2H), 4.33-4.29 (m, 4H), 3.46-3.40 (m, 2H), 3.12 (dd, J=17.5, 4.9Hz, 2H), 2.94-2.87 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 2H), 1.19 (d, J=7.1Hz, 6H)。
下記表１９に示されている実施例８０及び実施例１７２は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例７９において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000412
実施例１７３： （４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000413
４－（４－フルオロ－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸エチル（２５０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、ＰＳ－ＴＰＰ（３１９ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）、ＤＩＡＤ（０．１１７ｍＬ、０．６００ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（３ｍＬ）を含むバイアルに、４－（５－（３－ヒドロキシプロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した。その反応混合物を濾過し、ＴＨＦ（５ｍＬ）で洗浄した。ＭｅＯＨ（２ｍＬ）、水（３ｍＬ）及びＬｉＯＨ（４８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物をさらに２時間撹拌した。次いで、その反応混合物をＨＯＡｃでクエンチし、減圧下で濃縮した。その残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）に懸濁させ、ＴＦＡ（１ｍＬ）を添加した。その反応混合物を１時間撹拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮し、その残渣を逆相ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水の勾配（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（４－（５－（３－（（２－（３－カルボキシプロパノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）－６－メトキシチエノ［３，２－ｂ］ピリジン－２－イル）－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C28H27FNO9S2) (ES, m/z): 604 [M+H]+. 1H NMR (600MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 4.17 (t, J=6.3Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.35-3.29 (m, 4H), 3.10-3.04 (m, 2H), 2.63-2.58 (m, 4H), 2.18-2.13 (m, 2H)。
下記表２０に示されている実施例１７４は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例１７３において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000414
実施例１７５： ４，４’－（プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタンニトリル）
Figure 0007326319000415
４－（５－ブロモ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（３５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ニッケル（ＩＩ）ブロミドエチレングリコールジメチルエーテル錯体（１０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）、マンガン（２４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（８ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）及び４，４’－ジメトキシ－２，２’－ビピリジン（７ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）をバイアルの中で合した。そのバイアルに、４－（５－（３－ブロモプロピル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタンニトリル（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＰＵ（１．１ｍＬ）中の溶液を添加した。その反応混合物に、Ｐｙ（８８μＬ、０．０５５ｍｍｏｌ）とＴＭＳ－Ｃｌ（８４μＬ、０．０３３ｍｍｏｌ）のＤＭＰＵの中の５％ｖ／ｖ溶液を添加した。その反応混合物を、Ａｒを用いて５分間脱ガスし、次いで、撹拌し、２時間９０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）で稀釈し、濾過した。その濾液を逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（調節剤ＴＦＡ含有））で精製して、４，４’－（プロパン－１，３－ジイルビス（６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５，２－ジイル））ビス（４－オキソブタンニトリル）が得られた。
LCMS (C29H27N2O4S2) (ES, m/z): 531 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (s, 2H), 7.78 (s, 2H), 7.61 (s, 2H), 3.89 (s, 6H), 3.55-3.45 (m, 4H), 2.81-2.76 (m, 4H), 2.74-2.69 (m, 4H), 1.95-1.90 (m, 2H)。
実施例１７６： （Ｓ）－４－（５－（（３－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）アミノ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000416
（Ｓ）－メチル４－（５－アミノ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（３７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－メチル４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（５４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（６７ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物にＤＭＦ（１．０ｍＬ）を添加し、その反応混合物を撹拌し、６０℃で２日間加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、その反応混合物にＮａＯＨ（水中１．０Ｍ、０．４８ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物をさらにＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）で稀釈し、次いで、室温で１時間撹拌した。その反応混合物をＴＦＡ（０．０５６ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）でクエンチし、濾過した。その濾液を逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（Ｓ）－４－（５－（（３－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロピル）アミノ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C31H33FNO9S2) (ES, m/z): 646 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.17 (t, J=5.9Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.47 (dd, J=17.6, 8.6Hz, 1H), 3.43-3.34 (m, 3H), 3.17-3.05 (m, 2H), 2.94-2.95 (m, 2H), 2.09-2.02 (m, 2H), 1.20-1.15 (m, 6H)。
下記表２１に示されている実施例１７７は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例１７６において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000417
実施例１７８： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（（Ｎ，Ｎ－ジメチルスルファモイル）アミノ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000418
段階１： （Ｓ）－４－（５－（３－（（４－フルオロ－６－メトキシ－２－（（Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチル
Figure 0007326319000419
（Ｓ）－メチル４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１１１ｍｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（８７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（１３７ｍｇ、０．９９３ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物にＤＭＦ（１．Ａｒ）を添加し、その反応混合物を撹拌し、４０℃で１８時間加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、ＥｔＯＡｃ及び水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－（（４－フルオロ－６－メトキシ－２－（（Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸ｔｅｒｔ－ブチルが得られた。
LCMS (C36H42FO10S2) (ES, m/z): 739 [M+Na]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 4.26 (q, J=5.9Hz, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.48 (dd, J=17.7, 8.7Hz, 1H), 3.39-3.33 (m, 1H), 3.23 (dd, J=17.7, 5.0Hz, 1H), 3.07 (dd, J=17.1, 5.0Hz, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.91-2.81 (m, 1H), 2.23-2.18 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.20-1.15 (m, 6H)。
段階２： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000420
ＴＨＦ（０．９４ｍＬ）とＭｅＯＨ（０．９４ｍＬ）中の（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル４－（５－（３－（（４－フルオロ－６－メトキシ－２－（（Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）－ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタノエート（１３５ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＮａＯＨ（水中１．０Ｍ、０．９４ｍＬ、０．９４ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で１時間撹拌した。その反応混合物をＨＣｌ（水中２．０Ｍ、０．４７ｍＬ、０．９４ｍｍｏｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ及び水で稀釈した。その有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、（Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C35H40FO10S2) (ES, m/z): 725 [M+Na]+。
段階３： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（（Ｎ，Ｎ－ジメチルスルファモイル）アミノ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000421
ＤＣＭ（０．７ｍＬ）中の（Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－６－メトキシ－ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸（５０ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）の混合物に、ヒューニッヒ塩基（０．０６２ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）及びＴＢＴＵ（２３ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）を添加した。その混合物を室温で３０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ－ジメチルスルファミド（１１ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物をさらに４時間撹拌した。次いで、ＴＦＡ（０．０５５ｍＬ、０．７１ｍｍｏｌ）を添加し、その混合物を撹拌し、２時間４５℃に加熱した。その混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。その残渣を逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－４－（（Ｎ，Ｎ－ジメチルスルファモイル）アミノ）－３－メチル－４－オキソブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C33H38FN2O11S3) (ES, m/z): 775 [M+Na]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 11.50 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 4.26 (q, J=5.9Hz, 4H), 3.87 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.48 (dd, J=17.8, 9.8Hz, 1H), 3.40 (dd, J=17.3, 8.4Hz, 1H), 3.16 (dd, J=17.8, 4.4Hz, 1H), 3.09 (dd, J=17.3, 5.3Hz, 1H), 3.00-2.94 (m, 1H), 2.94-2.87 (m, 1H), 2.79 (s, 6H), 2.23-2.17 (m, 2H), 1.21-1.15 (m, 6H)。
下記表２２に示されている実施例１７９は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例１７８において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000422
実施例１８０： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000423
段階１： （Ｓ）－４－（５－（３－（（４－フルオロ－６－メトキシ－２－（（Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル
Figure 0007326319000424
（Ｓ）－４－（５－（３－ブロモプロポキシ）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（３０ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－４－（５－ヒドロキシ－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（２３ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（３８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の混合物を、Ａｒを用いて脱ガスした。その混合物にＤＭＦ（０．５ｍＬ）を添加し、その反応混合物を撹拌し、２４時間４０℃に加熱した。その反応混合物を室温まで冷却し、次いで、後処理又は精製に付すことなく次の段階で使用した。
LCMS (C34H38FO11S2) (ES, m/z): 705 [M+H]+。
段階２： （Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸
Figure 0007326319000425
（Ｓ）－４－（５－（３－（（４－フルオロ－６－メトキシ－２－（（Ｓ）－４－メトキシ－３－メチル－４－オキソブタノイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－（メトキシメトキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸メチル（４８ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２．５ｍＬ）中の溶液に、２０℃で、ＮａＯＨ（０．５５ｍＬ、水中１．０Ｍ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その反応混合物をＨＣｌ（０．２８０ｍＬ、水中３７％、３．４１ｍｍｏｌ）でクエンチした。その反応混合物を２０℃で２０時間撹拌した。その反応混合物を濾過した。その残渣を逆相ＨＰＬＣ（ＡＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））で精製して、（Ｓ）－４－（５－（３－（（２－（（Ｓ）－３－カルボキシブタノイル）－４－フルオロ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－メチル－４－オキソブタン酸が得られた。
LCMS (C30H30FO10S2) (ES, m/z): 633 [M+H]+. 1H NMR (499MHz, DMSO-d6) δ 12.17 (s, 2H), 9.70 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 4.31-4.26 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 3.46 (dd, J=17.6, 8.6Hz, 1H), 3.38 (dd, J=17.2, 8.4Hz, 1H), 3.13 (dd, J=17.6, 5.1Hz, 1H), 3.06 (dd, J=17.2, 5.3Hz, 1H), 2.91-2.85 (m, 2H), 2.24-2.18 (m, 2H), 1.19 (d, J=7.2Hz, 6H)。
下記表２３に示されている実施例１８１～実施例１９０は、上記で「調製」若しくは「中間体」において記載した適切な出発物質又は商用の供給元から入手した適切な出発物質を使用して、上記実施例１８０において略述した手順と同様の手順に従って調製したか又は調製することができる。
Figure 0007326319000426
Figure 0007326319000427
生物学的評価
本明細書中の実施例において記載されている個々の化合物は、ｉ）ＳＴＩＮＧ生化学［３Ｈ］ｃＧＡＭＰ競合アッセイにおいて、トリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドのＳＴＩＮＧタンパク質への結合が２０μＭ（被験化合物の濃度）で少なくとも２０％低減されることによって立証されるＳＴＩＮＧタンパク質に結合すること、および、（ｉｉ）ＴＨＰ１細胞アッセイ（３０μＭのｃＧＡＭＰによって生じる誘発を１００％に設定）において３０μＭでＩＦＮ－β分泌の６％以上の誘発を伴うインターフェロン産生を示すこと、によって、ＳＴＩＮＧアゴニストであると定義される。
［ ３ Ｈ］－ｃＧＡＭＰ合成
プラスチック製５０ｍＬ容ＡＭＩＣＯＮ管に、２．３ｍＬの緩衝液（これは、８０ｍＭ ＴｒｉｓＣｌ、２００ｍＭ ＭｇＣｌ２及び２０ｍＭ ＮａＣｌを含む）を添加し、その後、０．３２ｍＬの１０ｍＭ ＧＴＰ水溶液を添加した。次いで、［３Ｈ］ＡＴＰ（２１Ｃｉ／ｍｍｏｌ、４５ｍＣｉ）の０．５ｍＬのＨ２Ｏの溶液を添加し、その後、１ｍＬの１ｍｇ／ｍＬ ＤＮＡ溶液（ニシン精巣アクティベーターＤＮＡ、Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ６８９８）及び５３μＬの４７ｍＭ ｃＧＡＳ酵素溶液を添加した。追加のＨ２Ｏを加えて、総体積を１０ｍＬにした。
その反応物を３７℃で２時間撹拌し、次いで、Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ－１５ １０Ｋ遠心管に直接添加し、４，０００ｇで１時間回転させた。次いで、その収集した溶液を、半分取Ｍｏｎｏ Ｑカラムで、以下の移動相を用いて精製した：
Ａ： ０．０５Ｍ ＴｒｉｓＣｌ ｐＨ８．５（１Ｍ ＮａＯＨを用いて調節）；
Ｂ： ０．０５Ｍ ＴｒｉｓＣｌ、０．５Ｍ ＮａＣｌ ｐＨ８．５（１Ｍ ＮａＯＨを用いて調節）；
勾配： ５分間１００％Ａ、その後、２５分間かけて５０：５０（Ａ：Ｂ）への直線勾配、３ｍＬ／分、２５４ｎｍ。
その収集した生成物画分をプールし、緩衝液Ａを用いて総体積を３０ｍＬに調節した。総収量１５．５ｍＣｉの［３Ｈ］ｃＧＡＭＰを、２１．５Ｃｉ／ｍｍｏｌの比放射能で、９８．０％の放射化学的純度で、単離した。
ｃＧＡＳ酵素
組換えＤＮＡベクターを化学的に合成して、切断ヒトｃＧＡＳ酵素（残基１６１－５２２）を発現させた。発現及び精製を促進するために、そのアミノ末端はヘキサヒスチジンタグ、ＳＵＭＯタグ及びＴＥＶ開裂部位を含む。その組換え酵素をＲＯＳＥＴＴＡＴＭ２（ＤＥ３） Ｓｉｎｇｌｅ Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ Ｃｅｌｌｓ（Ｎｏｖａｇｅｎ）で過剰発現させた。ＨＩＳ－Ｓｅｌｅｃｔ ＨＦ Ｎｉｃｋｅｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｇｅｌ（Ｓｉｇｍａ）を用いてアフィニティー精製を行い、その後、Ｈｉ－Ｌｏａｄ ２６／６０ ＳＵＰＥＲＤＥＸ２００分取グレードカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いてサイズ排除クロマトグラフィーを行った。画分をプールし、濃縮し、液体窒素中で急速冷凍し、必要になるまで－８０℃で保存した。
３ Ｈ－ｃＧＡＭＰ濾過結合アッセイ（ＨＡＱ ＳＴＩＮＧ）
化合物がＳＴＩＮＧに結合する能力は、放射性フィルター結合アッセイを用いて、ヒトＳＴＩＮＧ受容体膜に対してトリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドと競合する能力によって定量する。該結合アッセイは、全長ＨＡＱ ＳＴＩＮＧを過剰発現するイラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ）細胞膜（Ｔ． ｎｉ；Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ＃９４－００２Ｆ、ｗｗｗ．ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ．ｃｏｍ）から得られるＳＴＩＮＧ受容体、及び、トリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドを使用する。
基本的なＨＡＱ ＳＴＩＮＧ濾過アッセイのプロトコルは、以下のとおりである。
該化合物について、１：３ １０点用量応答フォーマットを用いて、９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、＃６５１２０１）内でＨａｍｉｌｔｏｎ ＳＴＡＲＰｌｕｓ ＣＯＲＥによって連続的に力価測定（ｔｉｔｒａｔｅ）した。化合物を調製した後、濃厚な膜をアッセイ緩衝液（１×ＰＢＳ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃ＳＨ３００２８．０２）で希釈し、手動組織ホモジナイザー（Ｗｈｅａｔｏｎ、＃３５７５４６）を用いて７回ダウンシング（ｄｏｕｎｃｉｎｇ）することによって、２．２μｇ／ｍＬの作業濃度のＳＴＩＮＧ膜（配列番号１）を調製した。次いで、調製した１４８μＬの膜を、手作業で、９６ウェルディープウェルポリプロピレンプレート（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃１２－５６６－１２１）の各ウェルに添加した。膜を添加した後、２μＬの力価測定した試験化合物、ＤＭＳＯ対照（Ｓｉｇｍａ ＃２７６８５５）又はコールドｃＧＡＭＰ対照のいずれかを、ＢＩＯＭＥＫ ＦＸを用いて適切なウェルに加えた。次いで、化合物及び膜を室温で６０分間プレインキュベートして、化合物の結合を平衡化させた。平衡化後、８ｎＭの［３Ｈ］ｃ－ＧＡＭＰリガンドをアッセイ緩衝液で希釈することによって調製し、次いで、この作業用原液の５０μＬをアッセイプレートの各ウェルに手作業で加えた。次いで、プレートを室温で６０分間インキュベートし、次いで、各アッセイプレートの内容物を、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液を備えたＴＯＭＴＥＣ ＭＡＣＨ ＩＩＩ Ｃｅｌｌ Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃ＢＰ２９９５００）を用いて、９６ウェル ＧＦ／Ｂフィルタープレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃６００５２５０）で濾過した。次いで、該フィルタープレートを、加圧されたオーブンを用いて５５℃で３０分間乾燥させた後、各ウェルに、３０μＬのＵＬＴＩＭＡ ＧＯＬＤ Ｆシンチレートを加えた。次いで、各反応ウェルについてのトリチウムレベルを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＴｏｐＣｏｕｎｔプレートリーダーを用いて、測定した。
対照に対して正規化した後、残存放射能の量を測定することによって、各化合物濃度に関する活性（％）を計算した。化合物濃度の対数に対する活性（％）のプロットに４パラメータ用量反応式を適合させて、ＥＣ５０値を計算した。
最終的な反応条件は、以下のとおりであった：
Figure 0007326319000428
試験した化合物の濃度は、２０．０００、６３７．００、２．２００、０．７４０、０．２４７、０．０８２、０．０２７、０．００９、０．００３、及び、０．００１μＭであり、これらは、１．０％の残留ＤＭＳＯを含んでいた。
全長ＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）ウィルスの生成
ＳＴＩＮＧウィルスを、昆虫細胞バキュロウィルス系を用いて生成させた。ツマジロクサヨトウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ２１細胞（Ｋｅｍｐｂｉｏ，Ｉｎｃ．）を、抗生物質を含まないＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＃１０９０２０８８）で希釈して、５ｅ５細胞／ｍＬとした。その細胞懸濁液を、処理した６ウェルプレートの各ウェルに加え（２ｍＬ／ウェル、合計１ｅ６細胞）、該細胞を少なくとも３０分間付着させた。その間に、５００ｎｇのＨＡＱ ＳＴＩＮＧ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｒ７１Ｈ，Ｇ２３０Ａ，Ｈ２３２Ｒ，Ｒ２９３Ｑ－ＧＧ－ＡｖｉＴａｇ－ＧＳ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８／ｐＢＡＣ１］ＤＮＡ（Ｇｅｎｅｗｉｚ 委託合成）を１ｍＬのＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（これは、１０μＬのＣｅｌｌｆｅｃｔｉｎ（登録商標）ＩＩ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃１０３６２１００）及び１００ｎｇのウィルス骨格ＢｅｓｔＢａｃ ２．０、ｖ－ｃａｔｈ／ｃｈｉＡ Ｄｅｌｅｔｅｄ Ｌｉｎｅａｒｉｚｅｄ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ＤＮＡ（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ ＃９１－００２）を含む）と合することによって、１ｍＬの共トランスフェクションミックスを構築した。そのトランスフェクション混合物を３０分間インキュベートした。インキュベート後、６ウェルプレートの中の付着細胞から培地を穏やかに除去し、１ｍＬのトランスフェクション混合物を加え（１ｍＬ／ウェル）、そのプレートを２７℃の加湿インキュベーターの中に入れた。翌日、１ｍＬのＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（抗生物質非含有）を該６ウェルプレートの各ウェルに添加した。培地を添加した後、その細胞を、２７℃で５～７日間、ＤＮＡ（配列番号２）と一緒にインキュベートして、Ｐ０ウィルスストックを生成させた。Ｐ１ウィルスストックを生成させるために、０．５ｍＬのＰ０ウィルス上清を、５μｇ／ｍＬのゲンタマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃１５７１００７２）を含むＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地の中の５０ｍＬの感染していないＳｆ２１細胞（感染前日に５×１０５細胞／ｍＬの密度で播種して、一晩倍増させたもの）に加えた。次いで、感染した細胞を１１０ｒｐｍで振盪しながら（ＡＴＲ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｍｕｌｔｉｔｒｏｎ Ｉｎｆｏｒｓ ＨＴ ＃ＡＪ１１８）、２７℃で３日間インキュベートした。第３日に、Ｐ１培養物を、ＶｉＣｅｌｌ ＸＲ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃３８３５５６）を用いてカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８５～９５％）。培養物を５０ｍＬ容円錐管の中に回収し、４℃で、２０００×ｇで１０分間遠心分離した。Ｐ１ウィルス上清をきれいな５０ｍＬ容遠心管の中に注ぎ入れ、残ったＰ１細胞ペレットを用いて、バキュロウィルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成させた。１０％熱不活化ＦＢＳ、１０％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ ＃Ｄ２６５０）及び５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含有するＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地を含む凍結保存培地を調製し、使用直前に０．２２μＭフィルターを通して滅菌した。Ｐ１細胞ペレットを２ｅ７細胞／ｍＬの密度に再懸濁させ、クライオバイアル内に等分した（１ｍＬ／バイアル）。クライオバイアルをＭＲ．ＦＲＯＳＴＹＴＭ細胞凍結機内に－８０℃で一晩置き、翌日、長期保存のために液体窒素に移した。Ｐ２ウィルスストックを生成させるために、０．５ｍＬのＰ１ウィルス上清を、５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地の中の５０ｍＬの感染していないＳｆ２１細胞（感染前日に５×１０５細胞／ｍＬの密度で播種し、一晩倍増させたもの）に加えた。これらの細胞を１１０ｒｐｍで振盪しながら２７℃で３日間インキュベートし、その後、４℃で、２０００×ｇで１０分間遠心分離に付して、Ｐ２ストックを回収した。Ｐ２ウィルス上清を注ぎ出して廃棄し、Ｐ２細胞ペレットを用いて、上記で記載したのと同じプロトコルに従って、Ｐ２ ＢＩＩＣを生成させた。該バキュロウィルス生成プロトコルは、２ｅ９ｐｆｕ／ｍＬ（２ｅ７細胞／ｍＬ×１００ｐｆｕ／細胞）の力価を有するＰ１／Ｐ２ ＢＩＩＣを一貫して生成することが実証されている。
全長ＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）の発現
ＳＴＩＮＧ膜を生成させるために、１．０×１０６細胞／ｍＬの密度で播種したＳｆ２１細胞に解凍させたＢＩＩＣを加えることによって、Ｐ１／Ｐ２ ＢＩＩＣを一晩増幅させた。該培養物を感染させるに用いたＢＩＩＣの体積は、２ｅ９ｐｆｕ／ｍＬの推定ＢＩＩＣ力価を用いて、一晩の増幅で１０のＭＯＩを達成するように計算した。一晩培養した後、細胞をＶｉＣｅｌｌ ＸＲ上でカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８０～９０％）。ＭＯＩ＝２．０における、細胞培地（５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＥＳＦ９２１ ＳＦＭ）の中に１．０×１０６の密度で播種したイラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ）（Ｔ．ｎｉ；Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ ＃９４－００２Ｆ、ｗｗｗ．ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ．ｃｏｍ）の大規模発現の感染に用いた一晩増幅からの感染Ｓｆ２１細胞の体積は、（１００ｐｆｕ／感染Ｓｆ２１細胞）に基づいて算出した。細胞を２７℃で４８時間発現させた後、４℃で３，４００×ｇで１０分間遠心分離することによって、細胞ペレットを回収した。回収前に、イラクサギンウワバ（Ｔ．ｎｉ）細胞をＶｉＣｅｌｌ ＸＲ上でカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８０～９０％）。
全長ＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）膜作成
緩衝液原液試薬：
（１） １Ｍ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、Ｔｅｋｎｏｖａ、Ｃａｔ＃Ｈ１０３５；
（２） ５Ｍ ＮａＣｌ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃａｔ＃Ｓ５１５０－１Ｌ；
（３） ＫＣｌ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃａｔ＃３１９３０９－５００ＭＬ；
（４） 完全ＥＤＴＡフリープロテアーゼ阻害薬錠剤、Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｃａｔ＃１１８７３５８０００１；
（５） Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｎｕｃｌｅａｓｅ、Ｐｉｅｒｃｅ、Ｃａｔ＃８８７０２。
溶解緩衝液［２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ ＫＣｌ、（Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ １：５０００、完全プロテアーゼ阻害薬錠剤／５０ｍＬ）］を、上記で調製した全長ＳＴＩＮＧ（ＨＡＱ）を発現する細胞のペレットに、細胞ペレット１ｇ当たり５ｍＬの溶解緩衝液／ｇで添加した。そのペレットを再懸濁させ、Ｗｈｅａｔｏｎ Ｄｏｕｎｃｅ Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒを用いて２０回ダウンス（ｄｏｕｎｃｅ）させて、細胞膜を破壊した。次いで、ホモジナイズした溶解物を、５０００ＰＳＩに近い圧力でＥＭＵＬＳＩＦＬＥＸ－Ｃ５マイクロフルイダイザーに通した。再懸濁させたペレットを、４５Ｔｉローター超高速遠心機の中で３６，０００ｒｐｍ（１００，０００×ｇ）で、４℃で４５分間遠心分離した。上清を除去した。次いで、そのペレットを、５０ｍＬペレット／遠心管の体積の洗浄緩衝液［（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ ＫＣｌ、１Ｍ ＮａＣｌ（完全プロテアーゼ阻害薬錠剤／５０ｍＬ）］の中に再懸濁させた。次いで、そのペレット／洗浄緩衝液混合物を氷上でガラスホモジナイザーを用いてホモジナイズし（２０ストローク）、その後、４℃で、３６，０００ｒｐｍで４５分間遠心分離した。上清を除去した。洗浄段階をもう１回繰り返した。得られた膜を、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、５００ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、ＥＤＴＡフリープロテアーゼ阻害薬（１錠／５０ｍＬ）の中に再懸濁させた。そのタンパク質濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ、Ｃａｔ＃５００－０００６）によって測定し、タンパク質濃縮をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって測定し、ウエスタンブロットによって確認した。再懸濁させた膜を－８０℃で保存した。
全長ＨＡＱ ＳＴＩＮＧ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｒ７１Ｈ，Ｇ２３０Ａ，Ｈ２３２Ｒ，Ｒ２９３Ｑ－ＧＧ－ＡｖｉＴａｇ－ＧＳ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８］アミノ酸配列：
ＭＰＨＳＳＬＨＰＳＩＰＣＰＲＧＨＧＡＱＫＡＡＬＶＬＬＳＡＣＬＶＴＬＷＧＬＧＥＰＰＥＨＴＬＲＹＬＶＬＨＬＡＳＬＱＬＧＬＬＬＮＧＶＣＳＬＡＥＥＬＨＨＩＨＳＲＹＲＧＳＹＷＲＴＶＲＡＣＬＧＣＰＬＲＲＧＡＬＬＬＬＳＩＹＦＹＹＳＬＰＮＡＶＧＰＰＦＴＷＭＬＡＬＬＧＬＳＱＡＬＮＩＬＬＧＬＫＧＬＡＰＡＥＩＳＡＶＣＥＫＧＮＦＮＶＡＨＧＬＡＷＳＹＹＩＧＹＬＲＬＩＬＰＥＬＱＡＲＩＲＴＹＮＱＨＹＮＮＬＬＲＧＡＶＳＱＲＬＹＩＬＬＰＬＤＣＧＶＰＤＮＬＳＭＡＤＰＮＩＲＦＬＤＫＬＰＱＱＴＡＤＲＡＧＩＫＤＲＶＹＳＮＳＩＹＥＬＬＥＮＧＱＲＡＧＴＣＶＬＥＹＡＴＰＬＱＴＬＦＡＭＳＱＹＳＱＡＧＦＳＲＥＤＲＬＥＱＡＫＬＦＣＱＴＬＥＤＩＬＡＤＡＰＥＳＱＮＮＣＲＬＩＡＹＱＥＰＡＤＤＳＳＦＳＬＳＱＥＶＬＲＨＬＲＱＥＥＫＥＥＶＴＶＧＳＬＫＴＳＡＶＰＳＴＳＴＭＳＱＥＰＥＬＬＩＳＧＭＥＫＰＬＰＬＲＴＤＦＳＧＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥＧＳＬＥＶＬＦＱＧＰＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１）。
全長ＨＡＱ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｒ７１Ｈ，Ｇ２３０Ａ，Ｈ２３２Ｒ，Ｒ２９３Ｑ－ＧＧ－ＡｖｉＴａｇ－ＧＳ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８／ｐＢＡＣ１］プラスミドＤＮＡ配列：
ＧＧＡＡＣＧＧＣＴＣＣＧＣＣＣＡＣＴＡＴＴＡＡＴＧＡＡＡＴＴＡＡＡＡＡＴＴＣＣＡＡＴＴＴＴＡＡＡＡＡＡＣＧＣＡＧＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＡＴＴＴＧＴＡＴＧＡＡＡＧＡＡＴＧＣＧＴＡＧＡＡＧＧＡＡＡＧＡＡＡＡＡＴＧＴＣＧＴＣＧＡＣＡＴＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＡＡＧＡＴＴＡＡＴＡＴＧＣＣＴＣＣＧＴＧＴＡＴＡＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＧＡＡＣＧＡＴＴＴＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＡＴＧＴＡＣＣＧＣＧＣＧＧＣＧＧＴＡＴＧＴＡＣＡＧＧＡＡＧＡＧＧＴＴＴＡＴＡＣＴＡＡＡＣＴＧＴＴＡＣＡＴＴＧＣＡＡＡＣＧＴＧＧＴＴＴＣＧＴＧＴＧＣＣＡＡＧＴＧＴＧＡＡＡＡＣＣＧＡＴＧＴＴＴＡＡＴＣＡＡＧＧＣＴＣＴＧＡＣＧＣＡＴＴＴＣＴＡＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＴＣＣＡＡＧＴＧＴＧＴＧＧＧＴＧＡＡＧＴＣＡＴＧＣＡＴＣＴＴＴＴＡＡＴＣＡＡＡＴＣＣＣＡＡＧＡＴＧＴＧＴＡＴＡＡＡＣＣＡＣＣＡＡＡＣＴＧＣＣＡＡＡＡＡＡＴＧＡＡＡＡＣＴＧＴＣＧＡＣＡＡＧＣＴＣＴＧＴＣＣＧＴＴＴＧＣＴＧＧＣＡＡＣＴＧＣＡＡＧＧＧＴＣＴＣＡＡＴＣＣＴＡＴＴＴＧＴＡＡＴＴＡＴＴＧＡＡＴＡＡＴＡＡＡＡＣＡＡＴＴＡＴＡＡＡＴＧＣＴＡＡＡＴＴＴＧＴＴＴＴＴＴＡＴＴＡＡＣＧＡＴＡＣＡＡＡＣＣＡＡＡＣＧＣＡＡＣＡＡＧＡＡＣＡＴＴＴＧＴＡＧＴＡＴＴＡＴＣＴＡＴＡＡＴＴＧＡＡＡＡＣＧＣＧＴＡＧＴＴＡＴＡＡＴＣＧＣＴＧＡＧＧＴＡＡＴＡＴＴＴＡＡＡＡＴＣＡＴＴＴＴＣＡＡＡＴＧＡＴＴＣＡＣＡＧＴＴＡＡＴＴＴＧＣＧＡＣＡＡＴＡＴＡＡＴＴＴＴＡＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＡＡＣＴＡＧＡＣＧＣＣＴＴＧＴＣＧＴＣＴＴＣＴＴＣＴＴＣＧＴＡＴＴＣＣＴＴＣＴＣＴＴＴＴＴＣＡＴＴＴＴＴＣＴＣＴＴＣＡＴＡＡＡＡＡＴＴＡＡＣＡＴＡＧＴＴＡＴＴＡＴＣＧＴＡＴＣＣＡＴＡＴＡＴＧＴＡＴＣＴＡＴＣＧＴＡＴＡＧＡＧＴＡＡＡＴＴＴＴＴＴＧＴＴＧＴＣＡＴＡＡＡＴＡＴＡＴＡＴＧＴＣＴＴＴＴＴＴＡＡＴＧＧＧＧＴＧＴＡＴＡＧＴＡＣＣＧＣＴＧＣＧＣＡＴＡＧＴＴＴＴＴＣＴＧＴＡＡＴＴＴＡＣＡＡＣＡＧＴＧＣＴＡＴＴＴＴＣＴＧＧＴＡＧＴＴＣＴＴＣＧＧＡＧＴＧＴＧＴＴＧＣＴＴＴＡＡＴＴＡＴＴＡＡＡＴＴＴＡＴＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＡＡＴＴＴＧＧＧＡＴＣＧＴＣＧＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＡＴＡＴＧＴＴＧＣＣＧＧＣＡＴＡＧＴＡＣＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＴＡＧＴＴＣＡＡＴＴＡＣＡＣＣＡＴＴＴＴＴＴＡＧＣＡＧＣＡＣＣＧＧＡＴＴＡＡＣＡＴＡＡＣＴＴＴＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＧＴＡＣＧＡＡＣＣＧＴＴＡＡＡＣＡＡＡＡＡＣＡＧＴＴＣＡＣＣＴＣＣＣＴＴＴＴＣＴＡＴＡＣＴＡＴＴＧＴＣＴＧＣＧＡＧＣＡＧＴＴＧＴＴＴＧＴＴＧＴＴＡＡＡＡＡＴＡＡＣＡＧＣＣＡＴＴＧＴＡＡＴＧＡＧＡＣＧＣＡＣＡＡＡＣＴＡＡＴＡＴＣＡＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＡＴＧＴＣＴＡＴＣＡＡＴＡＴＡＴＡＧＴＴＧＣＴＧＡＴＣＡＧＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＧＧＡＧＡＴＡＡＴＴＡＡＡＡＴＧＡＴＡＡＣＣＡＴＣＴＣＧＣＡＡＡＴＡＡＡＴＡＡＧＴＡＴＴＴＴＡＣＴＧＴＴＴＴＣＧＴＡＡＣＡＧＴＴＴＴＧＴＡＡＴＡＡＡＡＡＡＡＣＣＴＡＴＡＡＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＣＣＣＣＡＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＣＡＴＣＣＡＴＣＣＡＴＣＣＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＧＧＴＣＡＣＧＧＧＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＣＡＧＣＣＴＴＧＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＧＴＧＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＣＴＴＴＧＧＧＧＧＣＴＡＧＧＡＧＡＧＣＣＡＣＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＣＴＣＣＧＧＴＡＣＣＴＧＧＴＧＣＴＣＣＡＣＣＴＡＧＣＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＴＴＡＡＡＣＧＧＧＧＴＣＴＧＣＡＧＣＣＴＧＧＣＴＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＡＣＣＡＣＡＴＣＣＡＣＴＣＣＡＧＧＴＡＣＣＧＧＧＧＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＧＧＡＣＴＧＴＧＣＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＣＧＣＣＧＴＧＧＧＧＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＣＴＧＴＣＣＡＴＣＴＡＴＴＴＣＴＡＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＡＡＴＧＣＧＧＴＣＧＧＣＣＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＴＴＧＧＡＴＧＣＴＴＧＣＣＣＴＣＣＴＧＧＧＣＣＴＣＴＣＧＣＡＧＧＣＡＣＴＧＡＡＣＡＴＣＣＴＣＣＴＧＧＧＣＣＴＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＡＧＡＴＣＴＣＴＧＣＡＧＴＧＴＧＴＧＡＡＡＡＡＧＧＧＡＡＴＴＴＣＡＡＣＧＴＧＧＣＣＣＡＴＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＧＧＴＣＡＴＡＴＴＡＣＡＴＣＧＧＡＴＡＴＣＴＧＣＧＧＣＴＧＡＴＣＣＴＧＣＣＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＧＣＣＣＧＧＡＴＴＣＧＡＡＣＴＴＡＣＡＡＴＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＡＣＡＡＣＣＴＧＣＴＡＣＧＧＧＧＴＧＣＡＧＴＧＡＧＣＣＡＧＣＧＧＣＴＧＴＡＴＡＴＴＣＴＣＣＴＣＣＣＡＴＴＧＧＡＣＴＧＴＧＧＧＧＴＧＣＣＴＧＡＴＡＡＣＣＴＧＡＧＴＡＴＧＧＣＴＧＡＣＣＣＣＡＡＣＡＴＴＣＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＴＡＡＡＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＣＣＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＧＣＡＴＣＡＡＧＧＡＴＣＧＧＧＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＣＡＧＣＡＴＣＴＡＴＧＡＧＣＴＴＣＴＧＧＡＧＡＡＣＧＧＧＣＡＧＣＧＧＧＣＧＧＧＣＡＣＣＴＧＴＧＴＣＣＴＧＧＡＧＴＡＣＧＣＣＡＣＣＣＣＣＴＴＧＣＡＧＡＣＴＴＴＧＴＴＴＧＣＣＡＴＧＴＣＡＣＡＡＴＡＣＡＧＴＣＡＡＧＣＴＧＧＣＴＴＴＡＧＣＣＧＧＧＡＧＧＡＴＡＧＧＣＴＴＧＡＧＣＡＧＧＣＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＧＣＣＡＧＡＣＡＣＴＴＧＡＧＧＡＣＡＴＣＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＣＣＴＧＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＣＡＡＣＴＧＣＣＧＣＣＴＣＡＴＴＧＣＣＴＡＣＣＡＧＧＡＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＣＡＧＣＡＧＣＴＴＣＴＣＧＣＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＣＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＡＡＡＡＧＧＡＡＧＡＧＧＴＴＡＣＴＧＴＧＧＧＣＡＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＴＣＡＧＣＧＧＴＧＣＣＣＡＧＴＡＣＣＴＣＣＡＣＧＡＴＧＴＣＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＡＧＴＧＧＡＡＴＧＧＡＡＡＡＧＣＣＣＣＴＣＣＣＴＣＴＣＣＧＣＡＣＧＧＡＴＴＴＣＴＣＴＧＧＣＧＧＴＧＧＣＣＴＧＡＡＣＧＡＣＡＴＣＴＴＣＧＡＡＧＣＣＣＡＧＡＡＡＡＴＣＧＡＡＴＧＧＣＡＴＧＡＡＧＧＣＡＧＣＣＴＧＧＡＡＧＴＧＣＴＧＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＣＡＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＣＡＴＴＡＡＴＧＡＧＣＧＧＣＣＧＣＡＣＴＣＧＡＧＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＴＡＡＣＣＴＡＧＧＴＡＧＣＴＧＡＧＣＧＣＡＴＧＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＧＧＧＴＴＡＴＴＡＧＴＡＣＡＴＴＴＡＴＴＡＡＧＣＧＣＴＡＧＡＴＴＣＴＧＴＧＣＧＴＴＧＴＴＧＡＴＴＴＡＣＡＧＡＣＡＡＴＴＧＴＴＧＴＡＣＧＴＡＴＴＴＴＡＡＴＡＡＴＴＣＡＴＴＡＡＡＴＴＴＡＴＡＡＴＣＴＴＴＡＧＧＧＴＧＧＴＡＴＧＴＴＡＧＡＧＣＧＡＡＡＡＴＣＡＡＡＴＧＡＴＴＴＴＣＡＧＣＧＴＣＴＴＴＡＴＡＴＣＴＧＡＡＴＴＴＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＴＣＣＴＣＡＡＴＡＧＡＴＴＴＧＴＡＡＡＡＴＡＧＧＴＴＴＣＧＡＴＴＡＧＴＴＴＣＡＡＡＣＡＡＧＧＧＴＴＧＴＴＴＴＴＣＣＧＡＡＣＣＧＡＴＧＧＣＴＧＧＡＣＴＡＴＣＴＡＡＴＧＧＡＴＴＴＴＣＧＣＴＣＡＡＣＧＣＣＡＣＡＡＡＡＣＴＴＧＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＡＧＣＡＧＣＡＡＴＣＴＡＧＣＴＴＴＧＴＣＧＡＴＡＴＴＣＧＴＴＴＧＴＧＴＴＴＴＧＴＴＴＴＧＴＡＡＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＡＣＧＴＣＧＴＴＣＡＡＡＡＴＡＴＴＡＴＧＣＧＣＴＴＴＴＧＴＡＴＴＴＣＴＴＴＣＡＴＣＡＣＴＧＴＣＧＴＴＡＧＴＧＴＡＣＡＡＴＴＧＡＣＴＣＧＡＣＧＴＡＡＡＣＡＣＧＴＴＡＡＡＴＡＧＡＧＣＴＴＧＧＡＣＡＴＡＴＴＴＡＡＣＡＴＣＧＧＧＣＧＴＧＴＴＡＧＣＴＴＴＡＴＴＡＧＧＣＣＧＡＴＴＡＴＣＧＴＣＧＴＣＧＴＣＣＣＡＡＣＣＣＴＣＧＴＣＧＴＴＡＧＡＡＧＴＴＧＣＴＴＣＣＧＡＡＧＡＣＧＡＴＴＴＴＧＣＣＡＴＡＧＣＣＡＣＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＴＧＴＣＧＧＣＴＡＡＣＡＣＧＴＣＣＧＣＧＡＴＣＡＡＡＴＴＴＧＴＡＧＴＴＧＡＧＣＴＴＴＴＴＧＧＡＡＴＴＡＴＴＴＣＴＧＡＴＴＧＣＧＧＧＣＧＴＴＴＴＴＧＧＧＣＧＧＧＴＴＴＣＡＡＴＣＴＡＡＣＴＧＴＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＡＣＡＡＣＡＣＧＴＴＡＧＡＡＡＧＣＧＡＴＧＧＴＧＣＡＧＧＣＧＧＴＧＧＴＡＡＣＡＴＴＴＣＡＧＡＣＧＧＣＡＡＡＴＣＴＡＣＴＡＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＴＧＧＡＧＣＴＧＡＴＧＡＴＡＡＡＴＣＴＡＣＣＡＴＣＧＧＴＧＧＡＧＧＣＧＣＡＧＧＣＧＧＧＧＣＴＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＣＧＧＡＧＧＣＧＧＡＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＴＧＣＡＧＡＣＧＧＣＧＧＴＴＴＡＧＧＣＴＣＡＡＡＴＧＴＣＴＣＴＴＴＡＧＧＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＧＣＡＣＣＴＣＡＡＣＴＡＴＴＧＴＡＣＴＧＧＴＴＴＣＧＧＧＣＧＣＣＧＴＴＴＴＴＧＧＴＴＴＧＡＣＣＧＧＴＣＴＧＡＧＡＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＴＴＴＴＴＴＣＧＴＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＴＴＣＣＡＡＣＡＡＴＴＧＴＴＧＴＣＴＧＴＣＧＴＣＴＡＡＡＧＧＴＧＣＡＧＣＧＧＧＴＴＧＡＧＧＴＴＣＣＧＴＣＧＧＣＡＴＴＧＧＴＧＧＡＧＣＧＧＧＣＧＧＣＡＡＴＴＣＡＧＡＣＡＴＣＧＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＧＧＣＧＣＴＧＧＡＡＴＧＴＴＡＧＧＣＡＣＧＧＧＡＧＡＡＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＣＣＧＣＣＧＧＴＡＴＡＡＴＴＴＧＴＴＣＴＧＧＴＴＴＡＧＴＴＴＧＴＴＣＧＣＧＣＡＣＧＡＴＴＧＴＧＧＧＣＡＣＣＧＧＣＧＣＡＧＧＣＧＣＣＧＣＴＧＧＣＴＧＣＡＣＡＡＣＧＧＡＡＧＧＴＣＧＴＣＴＧＣＴＴＣＧＡＧＧＣＡＧＣＧＣＴＴＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＡＴＴＣＡＡＴＡＴＴＡＴＡＡＴＴＧＧＡＡＴＡＣＡＡＡＴＣＧＴＡＡＡＡＡＴＣＴＧＣＴＡＴＡＡＧＣＡＴＴＧＴＡＡＴＴＴＣＧＣＴＡＴＣＧＴＴＴＡＣＣＧＴＧＣＣＧＡＴＡＴＴＴＡＡＣＡＡＣＣＧＣＴＣＡＡＴＧＴＡＡＧＣＡＡＴＴＧＴＡＴＴＧＴＡＡＡＧＡＧＡＴＴＧＴＣＴＣＡＡＧＣＴＣＧＧＡＴＣＧＡＴＣＣＣＧＣＡＣＧＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＣＣＴＴＴＴＣＡＴＴＴＴＴＡＣＴＡＣＡＧＣＡＴＴＧＴＡＧＴＧＧＣＧＡＧＡＣＡＣＴＴＣＧＣＴＧＴＣＧＴＣＧＡＧＧＴＴＴＡＡＡＣＧＣＴＴＣＣＴＣＧＣＴＣＡＣＴＧＡＣＴＣＧＣＴＧＣＧＣＴＣＧＧＴＣＧＴＴＣＧＧＣＴＧＣＧＧＣＧＡＧＣＧＧＴＡＴＣＡＧＣＴＣＡＣＴＣＡＡＡＧＧＣＧＧＴＡＡＴＡＣＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＡＧＡＡＴＣＡＧＧＧＧＡＴＡＡＣＧＣＡＧＧＡＡＡＧＡＡＣＡＴＧＴＧＡＧＣＡＡＡＡＧＧＣＣＡＧＣＡＡＡＡＧＧＣＣＡＧＧＡＡＣＣＧＴＡＡＡＡＡＧＧＣＣＧＣＧＴＴＧＣＴＧＧＣＧＴＴＴＴＴＣＣＡＴＡＧＧＣＴＣＣＧＣＣＣＣＣＣＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＣＡＣＡＡＡＡＡＴＣＧＡＣＧＣＴＣＡＡＧＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＣＧＡＡＡＣＣＣＧＡＣＡＧＧＡＣＴＡＴＡＡＡＧＡＴＡＣＣＡＧＧＣＧＴＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＡＡＧＣＴＣＣＣＴＣＧＴＧＣＧＣＴＣＴＣＣＴＧＴＴＣＣＧＡＣＣＣＴＧＣＣＧＣＴＴＡＣＣＧＧＡＴＡＣＣＴＧＴＣＣＧＣＣＴＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＧＧＧＡＡＧＣＧＴＧＧＣＧＣＴＴＴＣＴＣＡＴＡＧＣＴＣＡＣＧＣＴＧＴＡＧＧＴＡＴＣＴＣＡＧＴＴＣＧＧＴＧＴＡＧＧＴＣＧＴＴＣＧＣＴＣＣＡＡＧＣＴＧＧＧＣＴＧＴＧＴＧＣＡＣＧＡＡＣＣＣＣＣＣＧＴＴＣＡＧＣＣＣＧＡＣＣＧＣＴＧＣＧＣＣＴＴＡＴＣＣＧＧＴＡＡＣＴＡＴＣＧＴＣＴＴＧＡＧＴＣＣＡＡＣＣＣＧＧＴＡＡＧＡＣＡＣＧＡＣＴＴＡＴＣＧＣＣＡＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＡＣＡＧＧＡＴＴＡＧＣＡＧＡＧＣＧＡＧＧＴＡＴＧＴＡＧＧＣＧＧＴＧＣＴＡＣＡＧＡＧＴＴＣＴＴＧＡＡＧＴＧＧＴＧＧＣＣＴＡＡＣＴＡＣＧＧＣＴＡＣＡＣＴＡＧＡＡＧＧＡＣＡＧＴＡＴＴＴＧＧＴＡＴＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＣＡＧＴＴＡＣＣＴＴＣＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＴＴＧＧＴＡＧＣＴＣＴＴＧＡＴＣＣＧＧＣＡＡＡＣＡＡＡＣＣＡＣＣＧＣＴＧＧＴＡＧＣＧＧＴＧＧＴＴＴＴＴＴＴＧＴＴＴＧＣＡＡＧＣＡＧＣＡＧＡＴＴＡＣＧＣＧＣＡＧＡＡＡＡＡＡＡＧＧＡＴＣＴＣＡＡＧＡＡＧＡＴＣＣＴＴＴＧＡＴＣＴＴＴＴＣＴＡＣＧＧＧＧＴＣＴＧＡＣＧＣＴＣＡＧＴＧＧＡＡＣＧＡＡＡＡＣＴＣＡＣＧＴＴＡＡＧＧＧＡＴＴＴＴＧＧＴＣＡＴＧＡＧＡＴＴＡＴＣＡＡＡＡＡＧＧＡＴＣＴＴＣＡＣＣＴＡＧＡＴＣＣＴＴＴＴＡＡＡＴＴＡＡＡＡＡＴＧＡＡＧＴＴＴＴＡＡＡＴＣＡＡＴＣＴＡＡＡＧＴＡＴＡＴＡＴＧＡＧＴＡＡＡＣＴＴＧＧＴＣＴＧＡＣＡＧＴＴＡＣＣＡＡＴＧＣＴＴＡＡＴＣＡＧＴＧＡＧＧＣＡＣＣＴＡＴＣＴＣＡＧＣ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本開示の特定の化合物について、上記で記載したＨＡＱ ＳＴＩＮＧインビトロ結合アッセイにおいて評価した。下記表は、これらの化合物に関する生物学的データをＥＣ５０値として表にしたものである。
Figure 0007326319000429
Figure 0007326319000430
３ Ｈ－ｃＧＡＭＰ濾過結合アッセイ（ＷＴ ＳＴＩＮＧ）
化合物がＳＴＩＮＧに結合する能力は、放射性フィルター結合アッセイを用いて、ヒトＳＴＩＮＧ受容体膜に対してトリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドと競合する能力によって定量する。該結合アッセイは、全長ＷＴ ＳＴＩＮＧを過剰発現するイラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ）細胞膜（Ｔ． ｎｉ；Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ＃９４－００２Ｆ、ｗｗｗ．ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ．ｃｏｍ）から得られるＳＴＩＮＧ受容体、及び、トリチウム化ｃＧＡＭＰリガンドを使用する。
基本的なＷＴ ＳＴＩＮＧ濾過アッセイのプロトコルは、以下のとおりである。
アッセイ緩衝液で希釈することによって、１６ｎＭの［３Ｈ］ｃ－ＧＡＭＰリガンドを調製し、この作業用原液の５０μＬを、アッセイプレートの各ウェルに手動で加えた。リガンドを添加した後、２μＬの力価測定した試験化合物、ＤＭＳＯ対照（Ｓｉｇｍａ＃２７６８５５）又はコールドｃＧＡＭＰ対照のいずれかを、ＢＩＯＭＥＫ ＦＸを用いて適切なウェルに加えた。連続的に力価測定した化合物を、１：３ １０点用量応答フォーマットを用いて、９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、＃６５１２０１）内でＨａｍｉｌｔｏｎ ＳＴＡＲＰｌｕｓ ＣＯＲＥで調製した。。化合物を添加した後、濃厚な膜をアッセイ緩衝液（１×ＰＢＳ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃ＳＨ３００２８．０２）で希釈し、手動組織ホモジナイザー（Ｗｈｅａｔｏｎ、＃３５７５４６）を用いて７回ダウンシング（ｄｏｕｎｃｉｎｇ）することによって、２．２μｇ／ｍＬの作業濃度のＳＴＩＮＧ膜（配列番号３）を調製した。次いで、調製した１４８μＬの膜を、手作業で、９６ウェルディープウェルポリプロピレンプレート（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃１２－５６６－１２１）の各ウェルに添加した。次いで、化合物、リガンド及び膜を室温で６０分間インキュベートした後、各アッセイプレートの内容物を、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液を備えたＴＯＭＴＥＣ ＭＡＣＨ ＩＩＩ Ｃｅｌｌ Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃ＢＰ２９９５００）を用いて、９６ウェル ＧＦ／Ｂフィルタープレート（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、＃６００５２５０）で濾過した。次いで、該フィルタープレートを、加圧されたＶＷＲオーブンを用いて５５℃で３０分間乾燥させた後、各ウェルに、３０μＬのＵＬＴＩＭＡ ＧＯＬＤ Ｆシンチレートを加えた。次いで、各反応ウェルについてのトリチウムレベルを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＴｏｐＣｏｕｎｔプレートリーダーを用いて測定した。
対照に対して正規化した後、残存放射能の量を測定することによって、各化合物濃度に関する活性（％）を計算した。化合物濃度の対数に対する活性（％）のプロットに４パラメータ用量反応式を適合させて、ＥＣ５０値を計算した。
最終的な反応条件は、以下のとおりであった：
Figure 0007326319000431
試験した化合物の濃度は、２０．０００、６３７．００、２．２００、０．７４０、０．２４７、０．０８２、０．０２７、０．００９、０．００３、及び、０．００１μＭであり、これらは、１．０％の残留ＤＭＳＯを含んでいた。
全長ＳＴＩＮＧ（ＷＴ）ウィルスの生成
ＳＴＩＮＧウィルスを、昆虫細胞バキュロウィルス系を用いて生成させた。ツマジロクサヨトウ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）Ｓｆ２１細胞（Ｋｅｍｐｂｉｏ，Ｉｎｃ．）を、抗生物質を含まないＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＃１０９０２０８８）で希釈して、５ｅ５細胞／ｍＬとした。その細胞懸濁液を、処理した６ウェルプレートの各ウェルに加え（２ｍＬ／ウェル、合計１ｅ６細胞）、該細胞を少なくとも３０分間付着させた。その間に、５００ｎｇのＷＴ ＳＴＩＮＧ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｈ２３２Ｒ－ｇｇ－ＡｖｉＴａｇ－ｇｓ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８／ｐＢＡＣ１］（Ｇｅｎｅｗｉｚ 委託合成）を１ｍＬのＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（これは、１０μＬのＣｅｌｌｆｅｃｔｉｎ（登録商標）ＩＩ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃１０３６２１００）及び１００ｎｇのウィルス骨格ＢｅｓｔＢａｃ ２．０、ｖ－ｃａｔｈ／ｃｈｉＡ Ｄｅｌｅｔｅｄ Ｌｉｎｅａｒｉｚｅｄ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ＤＮＡ（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ ＃９１－００２）を含む）と合することによって、１ｍＬの共トランスフェクションミックスを構築した。そのトランスフェクション混合物を３０分間インキュベートした。インキュベート後、６ウェルプレートの中の付着細胞から培地を穏やかに除去し、１ｍＬのトランスフェクション混合物を加え（１ｍＬ／ウェル）、そのプレートを２７℃の加湿インキュベーターの中に入れた。翌日、１ｍＬのＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地（抗生物質非含有）を該６ウェルプレートの各ウェルに添加した。培地を添加した後、その細胞を、２７℃で５～７日間、ＤＮＡ［（配列番号４）及び線形化ウィルス骨格ＢｅｓｔＢａｃ ２．０］と一緒にインキュベートして、Ｐ０ウィルスストックを生成させた。Ｐ１ウィルスストックを生成させるために、０．５ｍＬのＰ０ウィルス上清を、５μｇ／ｍＬのゲンタマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＃１５７１００７２）を含むＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地の中の５０ｍＬの感染していないＳｆ２１細胞（感染前日に５×１０５細胞／ｍＬの密度で播種して、一晩倍増させたもの）に加えた。次いで、感染した細胞を１１０ｒｐｍで振盪しながら（ＡＴＲ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｍｕｌｔｉｔｒｏｎ Ｉｎｆｏｒｓ ＨＴ ＃ＡＪ１１８）、２７℃で３日間インキュベートした。第３日に、Ｐ１培養物を、ＶｉＣｅｌｌ ＸＲ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ＃３８３５５６）を用いてカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８５～９５％）。培養物を５０ｍＬ容円錐管の中に回収し、４℃で、２０００×ｇで１０分間遠心分離した。Ｐ１ウィルス上清をきれいな５０ｍＬ容遠心管の中に注ぎ入れ、残ったＰ１細胞ペレットを用いて、バキュロウィルス感染昆虫細胞（ＢＩＩＣ）を生成させた。１０％熱不活化ＦＢＳ、１０％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ ＃Ｄ２６５０）及び５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含有するＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地を含む凍結保存培地を調製し、使用直前に０．２２μＭフィルターを通して滅菌した。Ｐ１細胞ペレットを２ｅ７細胞／ｍＬの密度に再懸濁させ、クライオバイアル内に等分した（１ｍＬ／バイアル）。クライオバイアルをＭＲ．ＦＲＯＳＴＹＴＭ細胞凍結機内に－８０℃で一晩置き、翌日、長期保存のために液体窒素に移した。Ｐ２ウィルスストックを生成させるために、０．５ｍＬのＰ１ウィルス上清を、５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＳｆ－９００ＩＩ ＳＦＭ培地の中の５０ｍＬの感染していないＳｆ２１細胞（感染前日に５×１０５細胞／ｍＬの密度で播種し、一晩倍増させたもの）に加えた。これらの細胞を１１０ｒｐｍで振盪しながら２７℃で３日間インキュベートし、その後、４℃で、２０００×ｇで１０分間遠心分離に付して、Ｐ２ストックを回収した。Ｐ２ウィルス上清を注ぎ出して廃棄し、Ｐ２細胞ペレットを用いて、上記で記載したのと同じプロトコルに従って、Ｐ２ ＢＩＩＣを生成させた。該バキュロウィルス生成プロトコルは、２ｅ９ｐｆｕ／ｍＬ（２ｅ７細胞／ｍＬ×１００ｐｆｕ／細胞）の力価を有するＰ１／Ｐ２ ＢＩＩＣを一貫して生成することが実証されている。
全長ＳＴＩＮＧ（ＷＴ）の発現
ＳＴＩＮＧ膜を生成させるために、１．０×１０６細胞／ｍＬの密度で播種したＳｆ２１細胞に解凍させたＢＩＩＣを加えることによって、Ｐ１／Ｐ２ ＢＩＩＣを一晩増幅させた。該培養物を感染させるに用いたＢＩＩＣの体積は、２ｅ９ｐｆｕ／ｍＬの推定ＢＩＩＣ力価を用いて、一晩の増幅で１０のＭＯＩを達成するように計算した。一晩培養した後、細胞をＶｉＣｅｌｌ ＸＲ上でカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８０～９０％）。ＭＯＩ＝２．０における、細胞培地（５μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＥＳＦ９２１ ＳＦＭ）の中に１．０×１０６の密度で播種したイラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ）（Ｔ．ｎｉ；Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ｃａｔ ＃９４－００２Ｆ、ｗｗｗ．ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ．ｃｏｍ）の大規模発現の感染に用いた一晩増幅からの感染Ｓｆ２１細胞の体積は、（１００ｐｆｕ／感染Ｓｆ２１細胞）に基づいて算出した。細胞を２７℃で４８時間発現させた後、４℃で、３，４００×ｇで１０分間遠心分離することによって、細胞ペレットを回収した。回収前に、イラクサギンウワバ（Ｔ．ｎｉ）細胞をＶｉＣｅｌｌ ＸＲ上でカウントして、感染が起きていることを確認した（細胞サイズが感染していない細胞より≧３μｍ大きく、生存率は約８０～９０％）。
全長ＳＴＩＮＧ（ＷＴ）膜作成
緩衝液原液試薬：
（１） １Ｍ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、Ｔｅｋｎｏｖａ、Ｃａｔ＃Ｈ１０３５；
（２） ５Ｍ ＮａＣｌ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃａｔ＃Ｓ５１５０－１Ｌ；
（３） ＫＣｌ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃａｔ＃３１９３０９－５００ＭＬ；
（４） 完全ＥＤＴＡフリープロテアーゼ阻害薬錠剤、Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｃａｔ＃１１８７３５８０００１；
（５） Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｎｕｃｌｅａｓｅ、Ｐｉｅｒｃｅ、Ｃａｔ＃８８７０２。
溶解緩衝液［２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ ＫＣｌ、（Ｂｅｎｚｏｎａｓｅ １：５０００、完全プロテアーゼ阻害薬錠剤／５０ｍＬ）］を、上記で調製した全長ＳＴＩＮＧ（ＷＴ）を発現する細胞のペレットに、細胞ペレット１ｇ当たり５ｍＬの溶解緩衝液／ｇで添加した。そのペレットを再懸濁させ、Ｗｈｅａｔｏｎ Ｄｏｕｎｃｅ Ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒを用いて２０回ダウンス（ｄｏｕｎｃｅ）させて、細胞膜を破壊した。次いで、ホモジナイズした溶解物を、５０００ＰＳＩに近い圧力でＥＭＵＬＳＩＦＬＥＸ－Ｃ５マイクロフルイダイザーに通した。再懸濁させたペレットを、４５Ｔｉローター超高速遠心機の中で３６，０００ｒｐｍ（１００，０００×ｇ）で、４℃で、４５分間遠心分離した。上清を除去した。次いで、そのペレットを、５０ｍＬペレット／遠心管の体積の洗浄緩衝液［（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、２０ｍＭ ＫＣｌ、１Ｍ ＮａＣｌ（完全プロテアーゼ阻害薬錠剤／５０ｍＬ）］の中に再懸濁させた。次いで、そのペレット／洗浄緩衝液混合物を氷上でガラスホモジナイザーを用いてホモジナイズし（２０ストローク）、その後、４℃で、３６，０００ｒｐｍで４５分間遠心分離した。上清を除去した。洗浄段階をもう１回繰り返した。得られた膜を、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、５００ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、ＥＤＴＡフリープロテアーゼ阻害薬（１錠／５０ｍＬ）の中に再懸濁させた。そのタンパク質濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ、Ｃａｔ＃５００－０００６）によって測定し、タンパク質濃縮をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって測定し、ウエスタンブロットによって確認した。再懸濁させた膜を－８０℃で保存した。
全長ＳＴＩＮＧ ＷＴ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｈ２３２Ｒ－ｇｇ－ＡｖｉＴａｇ－ｇｓ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８］アミノ酸配列：
ＭＰＨＳＳＬＨＰＳＩＰＣＰＲＧＨＧＡＱＫＡＡＬＶＬＬＳＡＣＬＶＴＬＷＧＬＧＥＰＰＥＨＴＬＲＹＬＶＬＨＬＡＳＬＱＬＧＬＬＬＮＧＶＣＳＬＡＥＥＬＲＨＩＨＳＲＹＲＧＳＹＷＲＴＶＲＡＣＬＧＣＰＬＲＲＧＡＬＬＬＬＳＩＹＦＹＹＳＬＰＮＡＶＧＰＰＦＴＷＭＬＡＬＬＧＬＳＱＡＬＮＩＬＬＧＬＫＧＬＡＰＡＥＩＳＡＶＣＥＫＧＮＦＮＶＡＨＧＬＡＷＳＹＹＩＧＹＬＲＬＩＬＰＥＬＱＡＲＩＲＴＹＮＱＨＹＮＮＬＬＲＧＡＶＳＱＲＬＹＩＬＬＰＬＤＣＧＶＰＤＮＬＳＭＡＤＰＮＩＲＦＬＤＫＬＰＱＱＴＧＤＲＡＧＩＫＤＲＶＹＳＮＳＩＹＥＬＬＥＮＧＱＲＡＧＴＣＶＬＥＹＡＴＰＬＱＴＬＦＡＭＳＱＹＳＱＡＧＦＳＲＥＤＲＬＥＱＡＫＬＦＣＲＴＬＥＤＩＬＡＤＡＰＥＳＱＮＮＣＲＬＩＡＹＱＥＰＡＤＤＳＳＦＳＬＳＱＥＶＬＲＨＬＲＱＥＥＫＥＥＶＴＶＧＳＬＫＴＳＡＶＰＳＴＳＴＭＳＱＥＰＥＬＬＩＳＧＭＥＫＰＬＰＬＲＴＤＦＳＧＧＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥＧＳＬＥＶＬＦＱＧＰＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号３）。
全長ＷＴ ＳＴＩＮＧ［ＳＴＩＮＧ（１－３７９）Ｈ２３２Ｒ－ｇｇ－ＡｖｉＴａｇ－ｇｓ－ＨＲＶ３Ｃ－ＨＩＳ８／ｐＢＡＣ１］プラスミド配列：
ＧＧＡＡＣＧＧＣＴＣＣＧＣＣＣＡＣＴＡＴＴＡＡＴＧＡＡＡＴＴＡＡＡＡＡＴＴＣＣＡＡＴＴＴＴＡＡＡＡＡＡＣＧＣＡＧＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＡＴＴＴＧＴＡＴＧＡＡＡＧＡＡＴＧＣＧＴＡＧＡＡＧＧＡＡＡＧＡＡＡＡＡＴＧＴＣＧＴＣＧＡＣＡＴＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＡＡＧＡＴＴＡＡＴＡＴＧＣＣＴＣＣＧＴＧＴＡＴＡＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＧＡＡＣＧＡＴＴＴＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＡＴＧＴＡＣＣＧＣＧＣＧＧＣＧＧＴＡＴＧＴＡＣＡＧＧＡＡＧＡＧＧＴＴＴＡＴＡＣＴＡＡＡＣＴＧＴＴＡＣＡＴＴＧＣＡＡＡＣＧＴＧＧＴＴＴＣＧＴＧＴＧＣＣＡＡＧＴＧＴＧＡＡＡＡＣＣＧＡＴＧＴＴＴＡＡＴＣＡＡＧＧＣＴＣＴＧＡＣＧＣＡＴＴＴＣＴＡＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＴＣＣＡＡＧＴＧＴＧＴＧＧＧＴＧＡＡＧＴＣＡＴＧＣＡＴＣＴＴＴＴＡＡＴＣＡＡＡＴＣＣＣＡＡＧＡＴＧＴＧＴＡＴＡＡＡＣＣＡＣＣＡＡＡＣＴＧＣＣＡＡＡＡＡＡＴＧＡＡＡＡＣＴＧＴＣＧＡＣＡＡＧＣＴＣＴＧＴＣＣＧＴＴＴＧＣＴＧＧＣＡＡＣＴＧＣＡＡＧＧＧＴＣＴＣＡＡＴＣＣＴＡＴＴＴＧＴＡＡＴＴＡＴＴＧＡＡＴＡＡＴＡＡＡＡＣＡＡＴＴＡＴＡＡＡＴＧＴＣＡＡＡＴＴＴＧＴＴＴＴＴＴＡＴＴＡＡＣＧＡＴＡＣＡＡＡＣＣＡＡＡＣＧＣＡＡＣＡＡＧＡＡＣＡＴＴＴＧＴＡＧＴＡＴＴＡＴＣＴＡＴＡＡＴＴＧＡＡＡＡＣＧＣＧＴＡＧＴＴＡＴＡＡＴＣＧＣＴＧＡＧＧＴＡＡＴＡＴＴＴＡＡＡＡＴＣＡＴＴＴＴＣＡＡＡＴＧＡＴＴＣＡＣＡＧＴＴＡＡＴＴＴＧＣＧＡＣＡＡＴＡＴＡＡＴＴＴＴＡＴＴＴＴＣＡＣＡＴＡＡＡＣＴＡＧＡＣＧＣＣＴＴＧＴＣＧＴＣＴＴＣＴＴＣＴＴＣＧＴＡＴＴＣＣＴＴＣＴＣＴＴＴＴＴＣＡＴＴＴＴＴＣＴＣＴＴＣＡＴＡＡＡＡＡＴＴＡＡＣＡＴＡＧＴＴＡＴＴＡＴＣＧＴＡＴＣＣＡＴＡＴＡＴＧＴＡＴＣＴＡＴＣＧＴＡＴＡＧＡＧＴＡＡＡＴＴＴＴＴＴＧＴＴＧＴＣＡＴＡＡＡＴＡＴＡＴＡＴＧＴＣＴＴＴＴＴＴＡＡＴＧＧＧＧＴＧＴＡＴＡＧＴＡＣＣＧＣＴＧＣＧＣＡＴＡＧＴＴＴＴＴＣＴＧＴＡＡＴＴＴＡＣＡＡＣＡＧＴＧＣＴＡＴＴＴＴＣＴＧＧＴＡＧＴＴＣＴＴＣＧＧＡＧＴＧＴＧＴＴＧＣＴＴＴＡＡＴＴＡＴＴＡＡＡＴＴＴＡＴＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＡＡＴＴＴＧＧＧＡＴＣＧＴＣＧＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＡＴＡＴＧＴＴＧＣＣＧＧＣＡＴＡＧＴＡＣＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＣＴＡＧＴＴＣＡＡＴＴＡＣＡＣＣＡＴＴＴＴＴＴＡＧＣＡＧＣＡＣＣＧＧＡＴＴＡＡＣＡＴＡＡＣＴＴＴＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＧＴＡＣＧＡＡＣＣＧＴＴＡＡＡＣＡＡＡＡＡＣＡＧＴＴＣＡＣＣＴＣＣＣＴＴＴＴＣＴＡＴＡＣＴＡＴＴＧＴＣＴＧＣＧＡＧＣＡＧＴＴＧＴＴＴＧＴＴＧＴＴＡＡＡＡＡＴＡＡＣＡＧＣＣＡＴＴＧＴＡＡＴＧＡＧＡＣＧＣＡＣＡＡＡＣＴＡＡＴＡＴＣＡＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＡＴＧＴＣＴＡＴＣＡＡＴＡＴＡＴＡＧＴＴＧＣＴＧＡＴＣＡＧＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＧＧＡＧＡＴＡＡＴＴＡＡＡＡＴＧＡＴＡＡＣＣＡＴＣＴＣＧＣＡＡＡＴＡＡＡＴＡＡＧＴＡＴＴＴＴＡＣＴＧＴＴＴＴＣＧＴＡＡＣＡＧＴＴＴＴＧＴＡＡＴＡＡＡＡＡＡＡＣＣＴＡＴＡＡＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＣＣＣＣＡＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＣＡＴＣＣＡＴＣＣＡＴＣＣＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＧＧＴＣＡＣＧＧＧＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＣＡＧＣＣＴＴＧＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＧＴＧＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＣＴＴＴＧＧＧＧＧＣＴＡＧＧＡＧＡＧＣＣＡＣＣＡＧＡＧＣＡＣＡＣＴＣＴＣＣＧＧＴＡＣＣＴＧＧＴＧＣＴＣＣＡＣＣＴＡＧＣＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＴＴＡＡＡＣＧＧＧＧＴＣＴＧＣＡＧＣＣＴＧＧＣＴＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＧＣＣＡＣＡＴＣＣＡＣＴＣＣＡＧＧＴＡＣＣＧＧＧＧＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＧＧＡＣＴＧＴＧＣＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＣＧＣＣＧＴＧＧＧＧＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＣＴＧＴＣＣＡＴＣＴＡＴＴＴＣＴＡＣＴＡＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＡＡＴＧＣＧＧＴＣＧＧＣＣＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＴＴＧＧＡＴＧＣＴＴＧＣＣＣＴＣＣＴＧＧＧＣＣＴＣＴＣＧＣＡＧＧＣＡＣＴＧＡＡＣＡＴＣＣＴＣＣＴＧＧＧＣＣＴＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＡＧＡＴＣＴＣＴＧＣＡＧＴＧＴＧＴＧＡＡＡＡＡＧＧＧＡＡＴＴＴＣＡＡＣＧＴＧＧＣＣＣＡＴＧＧＧＣＴＧＧＣＡＴＧＧＴＣＡＴＡＴＴＡＣＡＴＣＧＧＡＴＡＴＣＴＧＣＧＧＣＴＧＡＴＣＣＴＧＣＣＡＧＡＧＣＴＣＣＡＧＧＣＣＣＧＧＡＴＴＣＧＡＡＣＴＴＡＣＡＡＴＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＡＣＡＡＣＣＴＧＣＴＡＣＧＧＧＧＴＧＣＡＧＴＧＡＧＣＣＡＧＣＧＧＣＴＧＴＡＴＡＴＴＣＴＣＣＴＣＣＣＡＴＴＧＧＡＣＴＧＴＧＧＧＧＴＧＣＣＴＧＡＴＡＡＣＣＴＧＡＧＴＡＴＧＧＣＴＧＡＣＣＣＣＡＡＣＡＴＴＣＧＣＴＴＣＣＴＧＧＡＴＡＡＡＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＣＣＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＧＣＡＴＣＡＡＧＧＡＴＣＧＧＧＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＣＡＧＣＡＴＣＴＡＴＧＡＧＣＴＴＣＴＧＧＡＧＡＡＣＧＧＧＣＡＧＣＧＧＧＣＧＧＧＣＡＣＣＴＧＴＧＴＣＣＴＧＧＡＧＴＡＣＧＣＣＡＣＣＣＣＣＴＴＧＣＡＧＡＣＴＴＴＧＴＴＴＧＣＣＡＴＧＴＣＡＣＡＡＴＡＣＡＧＴＣＡＡＧＣＴＧＧＣＴＴＴＡＧＣＣＧＧＧＡＧＧＡＴＡＧＧＣＴＴＧＡＧＣＡＧＧＣＣＡＡＡＣＴＣＴＴＣＴＧＣＣＧＧＡＣＡＣＴＴＧＡＧＧＡＣＡＴＣＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＣＣＴＧＡＧＴＣＴＣＡＧＡＡＣＡＡＣＴＧＣＣＧＣＣＴＣＡＴＴＧＣＣＴＡＣＣＡＧＧＡＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＣＡＧＣＡＧＣＴＴＣＴＣＧＣＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＣＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＡＡＡＡＧＧＡＡＧＡＧＧＴＴＡＣＴＧＴＧＧＧＣＡＧＣＴＴＧＡＡＧＡＣＣＴＣＡＧＣＧＧＴＧＣＣＣＡＧＴＡＣＣＴＣＣＡＣＧＡＴＧＴＣＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＡＧＴＧＧＡＡＴＧＧＡＡＡＡＧＣＣＣＣＴＣＣＣＴＣＴＣＣＧＣＡＣＧＧＡＴＴＴＣＴＣＴＧＧＣＧＧＴＧＧＣＣＴＧＡＡＣＧＡＣＡＴＣＴＴＣＧＡＡＧＣＣＣＡＧＡＡＡＡＴＣＧＡＡＴＧＧＣＡＴＧＡＡＧＧＣＡＧＣＣＴＧＧＡＡＧＴＧＣＴＧＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＣＡＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＣＡＴＴＡＡＴＧＡＧＣＧＧＣＣＧＣＡＣＴＣＧＡＧＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＣＡＣＴＡＡＣＣＴＡＧＧＴＡＧＣＴＧＡＧＣＧＣＡＴＧＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＧＧＧＴＴＡＴＴＡＧＴＡＣＡＴＴＴＡＴＴＡＡＧＣＧＣＴＡＧＡＴＴＣＴＧＴＧＣＧＴＴＧＴＴＧＡＴＴＴＡＣＡＧＡＣＡＡＴＴＧＴＴＧＴＡＣＧＴＡＴＴＴＴＡＡＴＡＡＴＴＣＡＴＴＡＡＡＴＴＴＡＴＡＡＴＣＴＴＴＡＧＧＧＴＧＧＴＡＴＧＴＴＡＧＡＧＣＧＡＡＡＡＴＣＡＡＡＴＧＡＴＴＴＴＣＡＧＣＧＴＣＴＴＴＡＴＡＴＣＴＧＡＡＴＴＴＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＴＣＣＴＣＡＡＴＡＧＡＴＴＴＧＴＡＡＡＡＴＡＧＧＴＴＴＣＧＡＴＴＡＧＴＴＴＣＡＡＡＣＡＡＧＧＧＴＴＧＴＴＴＴＴＣＣＧＡＡＣＣＧＡＴＧＧＣＴＧＧＡＣＴＡＴＣＴＡＡＴＧＧＡＴＴＴＴＣＧＣＴＣＡＡＣＧＣＣＡＣＡＡＡＡＣＴＴＧＣＣＡＡＡＴＣＴＴＧＴＡＧＣＡＧＣＡＡＴＣＴＡＧＣＴＴＴＧＴＣＧＡＴＡＴＴＣＧＴＴＴＧＴＧＴＴＴＴＧＴＴＴＴＧＴＡＡＴＡＡＡＧＧＴＴＣＧＡＣＧＴＣＧＴＴＣＡＡＡＡＴＡＴＴＡＴＧＣＧＣＴＴＴＴＧＴＡＴＴＴＣＴＴＴＣＡＴＣＡＣＴＧＴＣＧＴＴＡＧＴＧＴＡＣＡＡＴＴＧＡＣＴＣＧＡＣＧＴＡＡＡＣＡＣＧＴＴＡＡＡＴＡＧＡＧＣＴＴＧＧＡＣＡＴＡＴＴＴＡＡＣＡＴＣＧＧＧＣＧＴＧＴＴＡＧＣＴＴＴＡＴＴＡＧＧＣＣＧＡＴＴＡＴＣＧＴＣＧＴＣＧＴＣＣＣＡＡＣＣＣＴＣＧＴＣＧＴＴＡＧＡＡＧＴＴＧＣＴＴＣＣＧＡＡＧＡＣＧＡＴＴＴＴＧＣＣＡＴＡＧＣＣＡＣＡＣＧＡＣＧＣＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＴＧＴＣＧＧＣＴＡＡＣＡＣＧＴＣＣＧＣＧＡＴＣＡＡＡＴＴＴＧＴＡＧＴＴＧＡＧＣＴＴＴＴＴＧＧＡＡＴＴＡＴＴＴＣＴＧＡＴＴＧＣＧＧＧＣＧＴＴＴＴＴＧＧＧＣＧＧＧＴＴＴＣＡＡＴＣＴＡＡＣＴＧＴＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＡＣＡＡＣＡＣＧＴＴＡＧＡＡＡＧＣＧＡＴＧＧＴＧＣＡＧＧＣＧＧＴＧＧＴＡＡＣＡＴＴＴＣＡＧＡＣＧＧＣＡＡＡＴＣＴＡＣＴＡＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＧＴＧＧＡＧＣＴＧＡＴＧＡＴＡＡＡＴＣＴＡＣＣＡＴＣＧＧＴＧＧＡＧＧＣＧＣＡＧＧＣＧＧＧＧＣＴＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＣＧＧＡＧＧＣＧＧＡＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＧＴＧＡＴＧＣＡＧＡＣＧＧＣＧＧＴＴＴＡＧＧＣＴＣＡＡＡＴＧＴＣＴＣＴＴＴＡＧＧＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＧＣＡＣＣＴＣＡＡＣＴＡＴＴＧＴＡＣＴＧＧＴＴＴＣＧＧＧＣＧＣＣＧＴＴＴＴＴＧＧＴＴＴＧＡＣＣＧＧＴＣＴＧＡＧＡＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＴＴＴＴＴＴＣＧＴＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＴＴＣＣＡＡＣＡＡＴＴＧＴＴＧＴＣＴＧＴＣＧＴＣＴＡＡＡＧＧＴＧＣＡＧＣＧＧＧＴＴＧＡＧＧＴＴＣＣＧＴＣＧＧＣＡＴＴＧＧＴＧＧＡＧＣＧＧＧＣＧＧＣＡＡＴＴＣＡＧＡＣＡＴＣＧＡＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＧＧＣＧＣＴＧＧＡＡＴＧＴＴＡＧＧＣＡＣＧＧＧＡＧＡＡＧＧＴＧＧＴＧＧＣＧＧＣＧＧＴＧＣＣＧＣＣＧＧＴＡＴＡＡＴＴＴＧＴＴＣＴＧＧＴＴＴＡＧＴＴＴＧＴＴＣＧＣＧＣＡＣＧＡＴＴＧＴＧＧＧＣＡＣＣＧＧＣＧＣＡＧＧＣＧＣＣＧＣＴＧＧＣＴＧＣＡＣＡＡＣＧＧＡＡＧＧＴＣＧＴＣＴＧＣＴＴＣＧＡＧＧＣＡＧＣＧＣＴＴＧＧＧＧＴＧＧＴＧＧＣＡＡＴＴＣＡＡＴＡＴＴＡＴＡＡＴＴＧＧＡＡＴＡＣＡＡＡＴＣＧＴＡＡＡＡＡＴＣＴＧＣＴＡＴＡＡＧＣＡＴＴＧＴＡＡＴＴＴＣＧＣＴＡＴＣＧＴＴＴＡＣＣＧＴＧＣＣＧＡＴＡＴＴＴＡＡＣＡＡＣＣＧＣＴＣＡＡＴＧＴＡＡＧＣＡＡＴＴＧＴＡＴＴＧＴＡＡＡＧＡＧＡＴＴＧＴＣＴＣＡＡＧＣＴＣＧＧＡＴＣＧＡＴＣＣＣＧＣＡＣＧＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＣＣＴＴＴＴＣＡＴＴＴＴＴＡＣＴＡＣＡＧＣＡＴＴＧＴＡＧＴＧＧＣＧＡＧＡＣＡＣＴＴＣＧＣＴＧＴＣＧＴＣＧＡＧＧＴＴＴＡＡＡＣＧＣＴＴＣＣＴＣＧＣＴＣＡＣＴＧＡＣＴＣＧＣＴＧＣＧＣＴＣＧＧＴＣＧＴＴＣＧＧＣＴＧＣＧＧＣＧＡＧＣＧＧＴＡＴＣＡＧＣＴＣＡＣＴＣＡＡＡＧＧＣＧＧＴＡＡＴＡＣＧＧＴＴＡＴＣＣＡＣＡＧＡＡＴＣＡＧＧＧＧＡＴＡＡＣＧＣＡＧＧＡＡＡＧＡＡＣＡＴＧＴＧＡＧＣＡＡＡＡＧＧＣＣＡＧＣＡＡＡＡＧＧＣＣＡＧＧＡＡＣＣＧＴＡＡＡＡＡＧＧＣＣＧＣＧＴＴＧＣＴＧＧＣＧＴＴＴＴＴＣＣＡＴＡＧＧＣＴＣＣＧＣＣＣＣＣＣＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＣＡＣＡＡＡＡＡＴＣＧＡＣＧＣＴＣＡＡＧＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＣＧＡＡＡＣＣＣＧＡＣＡＧＧＡＣＴＡＴＡＡＡＧＡＴＡＣＣＡＧＧＣＧＴＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＡＡＧＣＴＣＣＣＴＣＧＴＧＣＧＣＴＣＴＣＣＴＧＴＴＣＣＧＡＣＣＣＴＧＣＣＧＣＴＴＡＣＣＧＧＡＴＡＣＣＴＧＴＣＣＧＣＣＴＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＧＧＧＡＡＧＣＧＴＧＧＣＧＣＴＴＴＣＴＣＡＴＡＧＣＴＣＡＣＧＣＴＧＴＡＧＧＴＡＴＣＴＣＡＧＴＴＣＧＧＴＧＴＡＧＧＴＣＧＴＴＣＧＣＴＣＣＡＡＧＣＴＧＧＧＣＴＧＴＧＴＧＣＡＣＧＡＡＣＣＣＣＣＣＧＴＴＣＡＧＣＣＣＧＡＣＣＧＣＴＧＣＧＣＣＴＴＡＴＣＣＧＧＴＡＡＣＴＡＴＣＧＴＣＴＴＧＡＧＴＣＣＡＡＣＣＣＧＧＴＡＡＧＡＣＡＣＧＡＣＴＴＡＴＣＧＣＣＡＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＡＣＡＧＧＡＴＴＡＧＣＡＧＡＧＣＧＡＧＧＴＡＴＧＴＡＧＧＣＧＧＴＧＣＴＡＣＡＧＡＧＴＴＣＴＴＧＡＡＧＴＧＧＴＧＧＣＣＴＡＡＣＴＡＣＧＧＣＴＡＣＡＣＴＡＧＡＡＧＧＡＣＡＧＴＡＴＴＴＧＧＴＡＴＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＡＡＧＣＣＡＧＴＴＡＣＣＴＴＣＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＴＴＧＧＴＡＧＣＴＣＴＴＧＡＴＣＣＧＧＣＡＡＡＣＡＡＡＣＣＡＣＣＧＣＴＧＧＴＡＧＣＧＧＴＧＧＴＴＴＴＴＴＴＧＴＴＴＧＣＡＡＧＣＡＧＣＡＧＡＴＴＡＣＧＣＧＣＡＧＡＡＡＡＡＡＡＧＧＡＴＣＴＣＡＡＧＡＡＧＡＴＣＣＴＴＴＧＡＴＣＴＴＴＴＣＴＡＣＧＧＧＧＴＣＴＧＡＣＧＣＴＣＡＧＴＧＧＡＡＣＧＡＡＡＡＣＴＣＡＣＧＴＴＡＡＧＧＧＡＴＴＴＴＧＧＴＣＡＴＧＡＧＡＴＴＡＴＣＡＡＡＡＡＧＧＡＴＣＴＴＣＡＣＣＴＡＧＡＴＣＣＴＴＴＴＡＡＡＴＴＡＡＡＡＡＴＧＡＡＧＴＴＴＴＡＡＡＴＣＡＡＴＣＴＡＡＡＧＴＡＴＡＴＡＴＧＡＧＴＡＡＡＣＴＴＧＧＴＣＴＧＡＣＡＧＴＴＡＣＣＡＡＴＧＣＴＴＡＡＴＣＡＧＴＧＡＧＧＣＡＣＣＴＡＴＣＴＣＡＧＣ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本開示の特定の化合物について、上記で記載したＷＴ ＳＴＩＮＧインビトロ結合アッセイにおいて評価した。下記表は、これらの化合物に関する生物学的データをＥＣ５０値として表にしたものである。
Figure 0007326319000432
Figure 0007326319000433
ＴＨＰ１細胞培養（５時間）におけるＩＦＮ－β分泌
化合物がＴＨＰ１細胞からのインターフェロン－ベータの分泌を刺激する能力は、ヒトＩＦＮ－β ＡｌｐｈａＬＩＳＡキット（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ＡＬ２６５Ｆ）を用いて測定した。基本的なプロトコルは、以下とおりである。
Ｌａｂｃｙｔｅ Ｅｃｈｏ ５５０アコースティックディスペンサーを用いて、ＤＭＳＯに溶解させた化合物１２０ｎＬを、空の滅菌３８４ウェルマイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、Ｃａｔ．Ｎｏ．３７１２）のウェルに移した。Ｒｅｃｏｖｅｒｙ Ｍｅｄｉｕｍ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔ．Ｎｏ．１２６４８－０１０）の中で予め凍結させたＴＨＰ１細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ＴＩＢ２０２）を解凍し、直ちに、３７℃アッセイ培地（ＲＰＭＩ １６４０＋Ｌ－グルタミン＆フェノールレッド、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔ．Ｎｏ．１１８７５－０８５；０．５％熱不活化ウシ胎仔血清、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｆ４１３５；１ｍＭ ピルビン酸ナトリウム、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔ．Ｎｏ．１１３６０－０７０；１×非必須アミノ酸；Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔ．Ｎｏ．１１１４０－０５０）で１０倍希釈した。細胞生存度及びカウントを、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｖ－Ｃｅｌｌ ＸＲ細胞カウンターを用いて確認した。細胞懸濁液を、室温で、２００×ｇで５分間遠心分離した。細胞を３７℃アッセイ培地の中に再懸濁させて、０．８×１０６／ｍＬの密度とした。次いで、液体の移動を、Ｍａｔｒｉｘ電子的マルチチャネルピペット又はＡｇｉｌｅｎｔ Ｂｒａｖｏ Ａｕｔｏｍａｔｅｄ Ｌｉｑｕｉｄ Ｈａｎｄｌｉｎｇ Ｐｌａｔｆｏｒｍのいずれかを用いて行った。
該アッセイは、先に調製した細胞懸濁液の４０μＬを、化合物を含有しているプレートのウェルに分配することにより開始させた。加湿された雰囲気の中、３７℃、５％ＣＯ２で５時間のインキュベートした後、細胞及び化合物のプレートを、室温で、２００×ｇで５分間遠心分離した。各ウェルから、５μＬの上清を白色３８４ウェルプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｃａｔ．Ｎｏ．６００５６２０）の対応するウェルに移した。これらの上清含有ウェルに、１０μＬの５×Ａｎｔｉ－Ａｎａｌｙｔｅ Ａｃｃｅｐｔｏｒビーズ（５０μｇ／ｍＬのＡｌｐｈａＬＩＳＡ ＨｉＢｌｏｃｋ Ｂｕｆｆｅｒ）を加え、オービタルプレートシェーカー上で振盪しながら、室温で３０分間インキュベートした。各ウェルに、１０μＬの５×Ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｎｔｉ－Ａｎａｌｙｔｅ（ＡｌｐｈａＬＩＳＡ ＨｉＢｌｏｃｋ Ｂｕｆｆｅｒの中５ｎＭ）を加え、室温で６０分間又は４℃で一晩、オービタルプレートシェーカー上でインキュベートした。各ウェルに、２５μＬの２×ＳＡ－Ｄｏｎｏｒビーズ（ＡｌｐｈａＬＩＳＡ ＨｉＢｌｏｃｋ Ｂｕｆｆｅｒの中８０μｇ／ｍＬ）を加え、オービタルプレートシェーカー上で振盪しながら、暗所で、室温で３０～４５分間インキュベートした。次いで、そのプレートを、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（λｅｘ＝６８０ｎｍ、λｅｍ＝５７０ｎｍ）で読み取った。各化合物濃度におけるＡｌｐｈａＬＩＳＡシグナルの効果（％）を、３０μＭ ｃＧＡＭＰ陽性対照及び０．３％ＤＭＳＯ陰性対照に基づいて計算した。化合物濃度の対数に対する効果（％）のプロットに４パラメータ濃度反応式を適合させて、ＥＣ５０値を計算した。試験化合物は、濃度３００００、１００００、３３３３、１１１１、３７０．４、１２３．４、４１．２、１３．７、４．６及び１．５ｎＭ（０．３％の残留ＤＭＳＯ含有）で試験した。対照化合物、ｃＧＡＭＰは、濃度１０００００、３３３３３、１１１１１、３７０４、１２３５、４１２、１３７、４６及び１５ｎＭ（０．３％の残留ＤＭＳＯ含有）で試験した。
本開示の化合物を、上記で記載したＴＨＰ１細胞培養におけるＩＦＮ－β分泌について評価した。下記表は、これらの化合物に関する生物学的データを、３０μＭ濃度における２’３’－ｃＧＡＭＰと比較した活性化（％）として表にしたものである。
Figure 0007326319000434
Figure 0007326319000435
さまざまな上記で記載した特徴及び機能並びに他の特徴及び機能又はその代替態様を、所望のように組み合わせて他の多くの異なる系又は応用形態とすることが可能であることは理解される。さらにまた、現在はまだ予期も予想もされていないそれらにおけるさまざまな代替態様、改変態様、変形態様又は改善態様が、今後、当業者によってなされ得ること、及び、それらの態様も下記特許請求の範囲に包含されることが意図されているということは理解される。

Claims (39)

  1. 一般式（Ｉ）：
    Figure 0007326319000436
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；
    各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000437
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  2. 各
    Figure 0007326319000438
     が、独立して、
    Figure 0007326319000439
     からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  3. 一般式（ＩＩ）：
    Figure 0007326319000440
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ３への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；
    各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000441
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  4. 各
    Figure 0007326319000442
     が、独立して、
    Figure 0007326319000443
     からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  5. 一般式（ＩＩＩ）：
    Figure 0007326319000444
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    場合により、Ｒ３は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｇを形成することができ、ここで、該環Ｇは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＧからＲ ４ への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｇ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；
    場合により、Ｒ４は、隣接するＣ－Ｒ１及びそれらが結合している原子と一緒になって、縮合環Ｅを形成することができ、ここで、該環Ｅは、フェニル又は５員若しくは６員のヘテロ環式環（ここで、該ヘテロ環式環は、Ｏ、Ｓ、Ｎ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）から選択され、ここで、該環ＥからＲ ３ への結合は、置換のための開いた原子価を有する前記環Ｅ上の原子からのものであり、そしてここで、該フェニル又はヘテロ環式環は、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ３アルキル及びＣ１－Ｃ３ハロアルキルからなる群の１以上のメンバーで置換されていてもよく；
    各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000445
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  6. Figure 0007326319000446
     が、独立して、
    Figure 0007326319000447
     からなる群から選択され、そして、
    Figure 0007326319000448
     が、
    Figure 0007326319000449
     からなる群から選択される、請求項５に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  7. 一般式（ＩＶ）：
    Figure 0007326319000450
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    各Ｒ２は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルケニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルケニル、Ｃ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ２－Ｃ６ハロアルキニル、ＯＲ６で置換されているＣ２－Ｃ６アルキニル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル及び３～６員のヘテロ環式環（ここで、該環は、Ｏ、Ｓ及びＮ（Ｒ６）からなる群から選択される１～２の環員を含む）からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000451
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  8. Figure 0007326319000452
     が、独立して、
    Figure 0007326319000453
     からなる群から選択され、そして、
    Figure 0007326319000454
     が、
    Figure 0007326319000455
     からなる群から選択される、請求項７に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  9. 一般式（Ｖ）：
    Figure 0007326319000456
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000457
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  10. 各
    Figure 0007326319000458
     が、独立して、
    Figure 0007326319000459
     からなる群から選択される、請求項９に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  11. 一般式（ＶＩ）：
    Figure 0007326319000460
     〔式中、
    各Ａ－Ｒ１は、独立して、Ｃ－Ｒ１及びＮからなる群から選択され；
    ここで、各Ｒ１は、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、Ｎ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、ＣＯＯＲ６及びＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２からなる群から選択され；
    Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｏ－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）、Ｃ１－Ｃ５アルキレン又はハロアルキレン及びＮ（Ｒ６）－（Ｃ１－Ｃ４アルキレン又はハロアルキレン）からなる群から選択され；
    各Ｒ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル及びＣ１－Ｃ６ハロアルキルからなる群から選択され；
    各Ｘ１は、独立して、Ｃ＝Ｏ、－ＣＨ２－、－ＣＨＦ－及び－ＣＦ２－からなる群から選択され；
    各Ｘ２は、独立して、（Ｃ（Ｒ８）２）（１－３）から選択され、ここで、各Ｒ８は、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ６シクロアルキル、ＯＲ６で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル及びＮ（Ｒ６）２で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルからなる群から選択され；
    場合により、異なる炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員の縮合環を形成することができ；そして、
    場合により、単一の炭素原子上の２つのＲ８は、一緒になって、それらが結合している原子と一緒に３～６員のスピロ環を形成することができ；
    各Ｘ３は、独立して、ＣＯＯＲ６、Ｃ（Ｏ）ＳＲ６、Ｃ（Ｓ）ＯＲ６、
    Figure 0007326319000461
     、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２及びＣＮからなる群から選択され；そして、
    各Ｒ９は、独立して、Ｈ、ＣＯＯＲ６及びＳＯ２Ｒ６からなる群から選択される〕
    で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
  12. 各
    Figure 0007326319000462
     が、独立して、
    Figure 0007326319000463
     からなる群から選択される、請求項１１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  13. 以下の
    Figure 0007326319000464
    Figure 0007326319000465
    Figure 0007326319000466
    Figure 0007326319000467
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    Figure 0007326319000481
    及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物。
  14. 請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む、前記医薬組成物。
  15. 対象において免疫応答を誘発させるための医薬の調製における、請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
  16. 対象における免疫応答の誘発用である、請求項１４に記載の医薬組成物。
  17. 対象においてＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生を誘発させるための医薬の調製における、請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
  18. 対象におけるＳＴＩＮＧ依存性Ｉ型インターフェロン産生の誘発用である、請求項１４に記載の医薬組成物。
  19. 対象において細胞増殖性疾患を治療するための医薬の調製における、請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
  20. 前記細胞増殖性疾患が癌である、請求項１９に記載の使用。
  21. 対象における細胞増殖性疾患の治療用である、請求項１４に記載の医薬組成物。
  22. 前記細胞増殖性疾患が癌である、請求項２１に記載の医薬組成物。
  23. 療法に用いるための、請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  24. 対象において細胞増殖性疾患の治療における使用のための請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩であって、該使用は、対象に治療有効量の請求項１～１３のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、化合物。
  25. 請求項２４に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容される塩であって、細胞増殖性疾患が癌である、化合物。
  26. 対象において細胞増殖性疾患の治療における使用のための請求項１４に記載の医薬組成物であって、該使用は、対象に治療有効量の請求項１４に記載の医薬組成物を投与することを含む、医薬組成物。
  27. 細胞増殖性疾患が癌である、請求項２６の使用のための医薬組成物。
  28. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  29. 化合物が
    である、請求項２８に記載の化合物。
  30. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  31. 化合物が、
    である、請求項３０に記載の化合物。
  32. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  33. 化合物が、
    である、請求項３２に記載の化合物。
  34. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  35. 化合物が、
    である、請求項３４に記載の化合物。
  36. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  37. 化合物が、
    である、請求項３６に記載の化合物。
  38. 及びその薬学的に許容される塩よりなる群から選択される化合物。
  39. 化合物が、
    である、請求項３８に記載の化合物。
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