JP4251913B2

JP4251913B2 - Liquid contact member having phosphorylcholine group on the surface

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Publication number: JP4251913B2
Application number: JP2003133418A
Authority: JP
Inventors: 綾大久保; 修城田; 和之宮沢
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 2003-05-12
Filing date: 2003-05-12
Publication date: 2009-04-08
Anticipated expiration: 2023-05-12
Also published as: JP2004330167A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は親水性基を有するポリマーでコーティングした接液部材に関する。さらに詳しくは、主に分析装置用配管等の接液部材の表面を、ホスホリルコリン基を有するポリマーで強固にコーティングした接液部材に関する。
【０００２】
【従来の技術】
タンパク吸着防止を目的とした分析装置配管等の接液部材は一般的な親水性基をコーティングしたものである。例えば、特許文献１にはビニル化合物により内壁面に高分子膜を形成させることにより、タンパク質が吸着しにくく、高分離かつ高信頼性分析が可能で、長寿命を図ったキャピラリーカラムが記載されている。また、特許文献２には、タンパク質の除去を容易に行うことができ、使用寿命の長い電気泳動キャピラリー管が記載され、シリカ基材のキャピラリー管の内壁面にアガロースが共有結合している。これにより、分離効率を劣化させることなく、再現性のよいタンパク質の分離に成功し、さらに使用寿命ものばすことが可能になることが記載されている。さらに、特許文献３には、血液中のタンパク質や血小板の付着、吸着を制御した臨床検査用器具器材が提案され、その表面がビニルアルコール等の親水性高分子でコーティングされたプラスチック製のポリプロピレンスピッツ管が具体的に開示されている。
【０００３】
一方、ホスホリルコリン基を有するポリマーは生体適合性高分子として検討されており、このポリマーを各種基剤にコーティングした生体適合性材料が開発されている。例えば、特許文献４及び特許文献５には、ホスホリルコリン基を有するポリマーでコーティングした医療用材料や分離剤が開示されている。これらは、ホスホリルコリン構造を有するモノマーを合成し、これを重合して得られるポリマーによりその表面を被覆してコーティングされたものである。これらのポリマーの製造方法については、特許文献６に２−メタクロイルオキシエチルホスホリルコリンとメタクリル酸エステルの共重合体が製造され、特許文献７に２−メタクロイルオキシエチルホスホリルコリンの単独重合体が製造されている。
【０００４】
【特許文献１】
特開平５−２８８７１６号公報
【特許文献２】
特開平６−２８８９８４号公報
【特許文献３】
特開昭６２−１６９０５２号公報
【特許文献４】
特開２０００−２７９５１２号公報
【特許文献５】
特開２００２−９８６７６号公報
【特許文献６】
特開平９−３１３２号公報
【特許文献７】
特開平１０−２９８２４０号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、親水性基を有するポリマーでコーティングした接液部材を提供するものであって、分析装置用の配管等の表面を、単に親水性ポリマーのキャストにより物理的に被覆しただけに過ぎない接液部材よりも、はるかに強固に親水性ポリマーがコーティングした接液部材を提供するものである。しかも、その親水性基はタンパク質吸着防止効果が高いホスホリルコリン基であり、再現性が良好で高い回収率のタンパク分析を可能とする接液部材を提供するものである。
【０００６】
また、従来技術に見られるように、ホスホリルコリン基を有するポリマーを先に得てこのポリマーにより接液部材を被覆して表面を改質する方法では、接液部材の形状によっては内壁面全体を効果的に若しくは均一に被覆することは難しい。
【０００７】
また、被覆した重合体が素材表面から剥離するため、耐久性に問題が生じる場合がある。一方、ホスホリルコリン基を有するモノマーの製造は厳密な無水条件下にて行う必要があり、手法が煩雑という問題もある。さらには、このモノマーの重合条件により被覆ポリマーに結合しているホスホリルコリン基の安定性にも問題が生じる。
【０００８】
本発明は、上記の観点からも、手法が煩雑でなく、かつ、ホスホリルコリン基の安定性にも優れた方法により製造できる。すなわち、あらかじめホスホリルコリン基を有するモノマーを重合したポリマーを接液部材内壁面に被覆するのではなく、接液部材の内壁面にアルコキシシリル基含有ポリマーを用いて極めて強固なポリマーコーティングを行なった後、ホスホリルコリン基を含有する化合物を結合させて、ホスホリルコリン基をその表面に導入した接液部材である。さらに、本発明の接液部材は、その材質を選ばず、金属、プラスチック、ガラスなどの材質で構成される接液部材に対して広い汎用性を持って応用可能である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、下記式（２）及び／又は（３）のホスホリルコリン基含有化合物を、アルコキシシリル基含有ポリマーで表面をコーティングした接液部材に結合させたことを特徴とする上記の接液部材を提供するものである。
【化９】
（２）

【化１０】
（３）

【００１１】
さらに、本発明は、前記アルコキシシリル基含有ポリマーが、下記式（４）のモノマーと、式（５）〜（７）の少なくとも１つのモノマーを共重合して得られるポリマーであることを特徴とする上記の接液部材を提供するものである。
【化１１】
（４）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、Ｒ₂は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である）
【化１２】
（５）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【化１３】
（６）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【化１４】
（７）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【００１２】
また、本発明は、前記接液部材が分離分析装置用配管であることを特徴とする上記の接液部材を提供するものである。
【００１３】
【発明の実施の形態】
以下本発明について詳述する。
【００１４】
本発明において接液部材とは液体が接触する部材を意味する。例えば、分離若しくは分析装置用の配管、配管接続部品、サンプリングのためのニードル、サンプルバイアル、検出器セル等の試験液が接触する部材である。これらの接液部材において、試験液が接触する部分の表面がアルコキシシリル基含有ポリマーでコーティングされる。配管、配管接続部品、サンプリングのためのニードル、サンプルバイアル、検出器セルなどにおいては、試験液が接触するその内面がコーティングされていれば良い。特に、ＨＰＬＣ、ＭＳ、ＮＭＲの接続配管や電気泳動装置のキャピラリー配管等が具体的な好ましい態様である。
【００１５】
本発明の接液部材の材質や形状は限定されない。例えば、金属、プラスチック、ガラス、セラミック等の各種材料で構成される接液部材である。
テフロン（登録商標）管、テフゼル管、ピーク樹脂管、フューズドシリカ管等の分離分析装置用配管が本発明の好ましい態様である。
【００１６】
アルコキシシリル基含有ポリマーは、接液部材にコーティング可能であれば特に限定されない。コーティングされた接液部材の表面上にてアルコキシシランの架橋反応により強固な被膜が形成される。例えば、（メタ）アクリル酸や（メタ）アクリル酸アルキルエステルなどの（メタ）アクリル酸系モノマーに、アルコキシシリル基が置換した公知若しくは今後開発されるモノマーが好ましい。具体的には、下記一般式（４）のアルコキシシリル基含有（メタ）アクリル酸系若しくは（メタ）アクリルアミド系モノマーを重合したポリマーを溶剤に溶解させて接液部材の表面を処理し、常法によりに架橋させてコーティングさせる。
【化１５】
（４）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、Ｒ₂は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である）
【００１７】
接液部材をコーティングするアルコキシシリル基含有ポリマーは、下記式（１）で示されるホスホリルコリン基を導入するためには、ホスホリルコリン基含有化合物と反応して導入可能な何らかの反応性基を有していなければならない。好ましい反応性基はアミノ基である。アミノ基は一級アミン若しくは二級アミンである。公知の方法若しくは今後開発される方法にてアミノ基を導入すれば良い。最も簡便で好ましい方法は、アミノ基を有するアミン系モノマーや、アミノ基を生じるイソシアネート基やエポキシ基を有するモノマーと共重合したコポリマーを用いることである。
【化１６】
（１）

【００１８】
なお、アミン系モノマーとの共重合体でなくても、エポキシ基のように、例えばジアミンとの反応により簡単にアミノ基を導入可能な官能基を有するモノマーと、アルコキシシリル基含有ポリマーとを共重合させたポリマーでもよい。
なお、プラズマ重合により、アルコキシシリル基含有ポリマーによりコーティングした接液部材を、窒素置換したアリルアミンのＴＨＦ（テトラヒドロフラン）溶液中に浸し、グラフト重合させて、アミノ基を導入することもできる。
【００１９】
共重合させるモノマーは下記の式（５）〜（７）のモノマーや、アクリル酸やメタクリル酸等の（メタ）アクリル酸系モノマーが好ましい。式（５）〜（７）におけるエステル結合（ＣＯＯ）はアミド結合（ＣＯＮＨ）であってもよい。
【化１７】
（５）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【化１８】
（６）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【化１９】
（７）

（Ｒ₁は水素又は炭素原子数１〜６の直鎖若しくは分枝のアルキルであり、ｎは１〜６の数である。−Ｏ−は−ＮＨ−でもよい。）
【００２０】
また、共重合するモノマーには、上記の結合性官能基を有するモノマーの他に、接液部材の材質に応じて、コーティングするアルコキシシリル基含有ポリマーと、接液部材とのの親和性の観点から、その他のモノマーを共重合しても好ましい。例えば、接液部材の材質がポリプロピレンの場合は飽和炭化水素のポリプロピレンとの親和性向上のためブチルメタクリレートを、ポリシロキサン系材の場合はポリジメチルシロキサンメタクリレートを、テフロン（登録商標）の場合はパーフルオロアルキルモノマーを共重合する。
【００２１】
導入したアミノ基に対して、ホスホリルコリン基含有化合物、好ましくはグリセロホスホリルコリンの酸化的解裂反応により得られたアルデヒド体あるいはハイドレート体を、還元的アミノ化反応によって反応させて、ホスホリルコリン基が導入される。好ましいホスホリルコリン基含有化合物は、下記式（２）のジオール体及び／又は下記式（３）のアルデヒド体であり、好ましくは縮合反応及び／又は還元的アミノ化反応によりアミノ基に結合させる。
なお、最終的にホスホリルコリン基含有化合物がアミノ基に結合していれば、アミノ基の導入から結合に至るまでにどのような反応経路をとってもよい。
【化２０】
（２）

【化２１】
（３）

【００２２】
グリセロホスホリルコリンの酸化的解裂反応により得られるアルデヒド体は、公知のグリセロホスホリルコリン基を、公知の方法により酸化的解裂を行わせるもので、極めて簡単なステップである。この反応は、１，２−ジオールを過ヨウ素酸、或いは過ヨウ素酸塩を用いて酸化することにより結合を開裂させ、２つのアルデヒド体を得るものであり、本法の場合、ホスホリルコリンアルデヒド体とホルムアルデヒドを生成する。反応は通常水中または水を含む有機溶媒中で行われる。反応温度は０度から室温である。アルデヒド体は水中で平衡反応を経てハイドレートとなることもあるが、続くアミンとの反応には影響しない。下記にホスホリルコリン基含有する一官能のアルデヒド体を調製するスキームを示す。
【化２２】

グリセロホスホリルコリンの酸化的解裂反応により得られるハイドレート体及び／又はアルデヒド体を、接液部材をコーティングしたポリマーのアミノ基に結合させる還元的アミノ化反応は、両者を溶媒中にて攪拌することにより容易に行うことが出来る。この反応は両者を水或いはアルコール中に共存させ（第三成分の有機溶媒を混合しても良い）、イミンを形成させた後、これを還元剤により還元して２級アミンを得るものである。還元剤としてはシアノホウ素酸ナトリウム等マイルドな還元剤が好ましいが、ホスホリルコリンが安定な限り、他の還元剤を用いることも可能である。反応は通常０度から室温で行われるが、場合により加熱することもある。
具体的には、接液部材をメタノール中に漬し、ホスファチジルグリセロアルデヒドを添加し、室温で６時間放置する。そして、シアノホウ素酸ナトリウムを０℃で添加、一晩加熱攪拌し、アミノ基にホスホリルコリン基を付加させる。反応溶媒はメタノール以外にも、水、エタノール、２−プロパノール等プロトン性溶媒であれば使用可能であるが、メタノールを用いた場合にホスホリルコリン基の付加率が高い傾向にある。
【００２３】
上記の方法により、親水性のホスホリルコリン基を任意の量でその表面に導入された接液部材が簡単に得られる。以下にさらに具体的な方法を記す。
【００２４】
製造方法１
上記式（４）のモノマー１（以下、モノマー１と略す）と、上記式（５）のモノマー（以下、モノマー２と略す）を必須成分として有する共重合体を合成する。反応溶媒はモノマー１及び２と反応せず、２つのモノマーを溶解するものであれば特に限定されない。例えば、トルエン、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、エーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、クロロホルムの１種または２種以上の混合溶媒が挙げられる。重合開始剤はラジカル系開始剤であれば特に限定されない。例えば、過酸化ベンゾイル等の過酸化物、アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス（イソ酢酸）ジメチル等のアゾ系化合物が挙げられる。また重合開始剤を用いる以外にも放射線照射等により重合させることもできる。共重合体の平均分子量は最終的に架橋反応を起こすものであるため特に制限されない。共重合させるモノマーは素材との親和性に応じて上記２種以外にも加えてよい。
＜製造方法１−１＞
モノマー１と２を必須とする共重合体を合成し、これを接液部材に展着させる。さらに残存しているイソシアナートと、上記式（２）のホスホリルコリン基含有化合物（以下、ＰＣ１と略す）を、ウレタン結合により上記式（１）のホスホリルコリン基（以下、ＰＣ基と略す）を導入する。ポリマーの架橋反応を起こすタイミングは簡便性に応じて、ＰＣ基導入前でも後でも良い。水による処理を行えば架橋反応は速やかに進行するが、皮膜を放置しておいても次第に進行してゆく。
＜製造方法１−２＞
モノマー１と２を必須とする共重合体を合成し、これを接液部材に表面に展着させる。さらにこれを水または塩基性水溶液により処理することによりイソシアナートを分解してアミンに変換する。このアミノ基と、上記式（２）のホスホリルコリン基含有化合物（以下、ＰＣ２と略す）を、還元的アミノ化反応により結合させＰＣ基を導入する。
【００２５】
製造方法２
モノマー１と、上記式（６）のモノマー（以下、モノマー３と略す）を必須成分として有する共重合体を合成する。反応溶媒はモノマー１及び３と反応せず、２つのモノマーを溶解するものであれば特に限定されない。例えば、トルエン、アセトン、メタノール、エタノール、２−プロパノール、酢酸エチル、ヘキサン、エーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、クロロホルムの１種または２種以上の混合溶媒が挙げられる。重合開始剤はラジカル系開始剤であれば特に限定されない。例えば、過酸化ベンゾイル等の過酸化物、アゾビスイソブチロニトリル、２，２‘−アゾビス（イソ酢酸）ジメチル等のアゾ系化合物が挙げられる。また、重合開始剤を用いる以外にも放射線照射などにより重合させることもできる。共重合体の平均分子量は最終的に架橋反応を起こすものであるため特に制限されない。
共重合させるモノマーは基板との親和性に応じて上記２種以外にも加えてよい。
モノマー１と３を必須とする共重合体を、接液部材の表面に展着させる。さらに、これをアンモニア水溶液或いはエチレンジアミンを始めとする分子内に２つ以上のアミノ基を有する化合物で処理することによりエポキシ基をアミノ基に変換する。続いて、ＰＣ２を還元的アミノ化反応により結合させ、ＰＣ基を導入する。
【００２６】
製造方法３
モノマー１と、上記式（７）のモノマー（以下、モノマー４と略す）を必須成分として有する共重合体を合成する。反応溶媒はモノマー１及び４と反応せず、２つのモノマーを溶解するものであれば特に限定されない。例えば、トルエン、アセトン、メタノール、エタノール、２−プロパノール、酢酸エチル、ヘキサン、エーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、クロロホルムの１種または２種以上の混合溶媒が挙げられる。重合開始剤はラジカル系開始剤であれば特に限定されない。例えば過酸化ベンゾイル等の過酸化物、アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス（イソ酢酸）ジメチル等のアゾ系化合物が挙げられる。また、重合開始剤を用いる以外にも放射線照射などにより重合させることもできる。共重合体の平均分子量は最終的に架橋反応を起こすものであるため特に制限されるものではない。
共重合させるモノマーは接液部材の材質との親和性に応じて上記２種以外にも加えてよい。
モノマー１と４を必須とする共重合体を接液部材の表面に展着させる。続いて、ＰＣ２を還元的アミノ化反応により結合させＰＣ基を導入する。
【００２７】
製造方法４
モノマー１と（メタ）アクリル酸を必須成分として有する共重合体を合成する。反応溶媒はモノマー１及び（メタ）アクリル酸と反応せず、２つのモノマーを溶解するものであれば特に限定されない。例えば、トルエン、アセトン、メタノール、エタノール、２−プロパノール、酢酸エチル、ヘキサン、エーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、クロロホルムの１種または２種以上の混合溶媒が挙げられる。重合開始剤はラジカル系開始剤であれば特に限定されない。例えば過酸化ベンゾイル等の過酸化物、アゾビスイソブチロニトリル、２，２’−アゾビス（イソ酢酸）ジメチル等のアゾ系化合物が挙げられる。また、重合開始剤を用いる以外にも放射線照射などにより重合させることもできる。本共重合体の平均分子量は最終的に架橋反応を起こすものであるため特に制限されるものではない。共重合させるモノマーは接液部材の材質との親和性に応じて上記２種以外にも加えてよい。モノマー１と４または５を必須とする共重合体を接液部材の表面に展着させる。これに、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドを始めとするカルボジイミド系カップリング剤、カルボジイミダゾールなどを用いてＰＣ１を結合させて、ＰＣ基を導入する。
【００２８】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。本発明は下記の実施例のみに限定されない。接液部材に表面に導入されたホスホリルコリン基はＦＴ−ＩＲ及び元素分析により確認して定量出来る。
【００２９】
合成例１ホスホリルコリン基を含有するアルデヒド体
Ｌ−α−グリセロホスホリルコリン（４５０ｍｇ）を蒸留水１５ｍｌに溶解し、氷水浴中で冷却する。過ヨウ素酸ナトリウム（７５０ｍｇ）を添加し、２時間攪拌する。更にエチレングリコール（１５０ｍｇ）を添加して１晩攪拌する。反応液を減圧濃縮、減圧乾燥し、メタノールにより目的物を抽出する。
構造式及びＮＭＲスペクトルを図１に示す。
【００３０】
実施例１
市販のモノマー１（５ｇ、ｎ＝３）、モノマー２（５ｇ、ｎ＝２）、ブチルメタクリレート（５ｇ）をテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）に溶解し、窒素雰囲気下３０分間脱気する。温度を７０℃に上げ、アゾビスイソブチロニトリル（５ｍｇ）を添加し、４時間重合した。反応液をクロロホルムで希釈した後、内面被覆を行う対象となるチューブ（テフロン（登録商標）管）に封入する。管の片方の終点は封管し、他方の終点より減圧により、数時間かけて溶媒除去をおこなう。ついで、ＰＣ１（１ｇ）、トリエチルアミン（１ｇ）を含有するジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）を調製し、管にその液を毎分１ｃｍの速度で５時間通液させる。その後、管内をメタノール、アセトンを通液させ、目的とするＰＣ基内面修飾配管を得る。内面の架橋反応を充分進行させるため水を通液し再度、減圧により乾燥させても良い。
なお、材質の異なるテフゼル管、ピーク樹脂管、フューズドシリカ管を使用しても全く同様にＰＣ基内面修飾配管が得られる。
【００３１】
実施例２
実施例１のポリマーを同じくクロロホルムで希釈した後、内面被覆を行う対象となるチューブ（テフゼル管）に封入する。管の片方の終点は封管し、他方の終点より減圧により、数時間かけて溶媒除去をおこなう。トリエチルアミン含有水溶液を毎分１ｃｍの速度で５時間通液させて架橋反応を進行させると共にイソシアナートをアミンに変換した。続いてこの配管をＰＣ２（１ｇ）を含有するメタノール（１００ｍｌ）を５時間室温で通液した後、シアノホウ素酸ナトリウム（０．５ｇ）を含有するメタノール（１００ｍｌ）を氷温下で通液し、室温で１２時間封入放置する。その後、管内をメタノール洗浄し目的とするＰＣ基で内面が修飾された配管を得る。
なお、材質の異なるテフロン（登録商標）管、ピーク樹脂管、フューズドシリカ管を使用しても全く同様にＰＣ基内面修飾配管が得られる。
【００３２】
実施例３
市販のモノマー１（５ｇ、ｎ＝３）、モノマー３（１５ｇ、ｎ＝１）、ヒドロキシエチルメタクリレート（５ｇ）、トリメチルアンモニウムエチルアクリレート（１ｇ）をエタノール（２００ｍｌ）に溶解し、窒素雰囲気下３０分間脱気する。温度を７０℃に上げ、アゾビスイソブチロニトリル（５ｍｇ）を添加し、４時間重合した。反応液をクロロホルムで希釈した後、内面被覆を行う対象となるチューブ（ピーク樹脂管）に封入する。管の片方の終点は封管し、他方の終点より減圧により、数時間かけて溶媒除去をおこなう。続いてこの配管内面を架橋させ、エポキシ基をアミノ基に変換するためアンモニア水溶液を５０℃で５時間通液する。これにメタノール通液し、ＰＣ２（１ｇ）を含有するメタノール（１００ｍｌ）を５時間室温で通液した後、シアノホウ素酸ナトリウム（０．５ｇ）を含有するメタノール（１００ｍｌ）を氷温下で通液し、室温で１２時間封入放置した。その後、管内をメタノール洗浄し目的とするＰＣ基内面修飾配管材を得る。
なお、材質の異なるテフロン（登録商標）管、テフゼル管、フューズドシリカ管を使用しても全く同様にＰＣ基内面修飾配管が得られる。
【００３３】
実施例４
市販のモノマー１（５ｇ、ｎ＝３）、モノマー４（２ｇ、ｎ＝２）、メチルメタクリレート（１０ｇ）、ジメチルポリシロキサンメタクリレート（３ｇ）をエタノール（１００ｍｌ）−ヘキサン（５０ｍｌ）に溶解し、窒素雰囲気下３０分間脱気する。温度を７０℃に上げ、アゾビスイソブチロニトリル（５ｍｇ）を添加し、４時間重合する。反応液をクロロホルムで希釈した後、内面被覆を行う対象となるチューブ（フューズドシリカ管）に封入する。管の片方の終点は封管し、他方の終点より減圧により、数時間かけて溶媒除去をおこなう。続いてこの配管内面を架橋させるため水を室温で５時間通液した。これを乾燥し、ＰＣ２（１ｇ）を含有するメタノールを５時間室温で通液した後、シアノホウ素酸ナトリウム（０．５ｇ）を含有するメタノール（１００ｍｌ）を氷温下で通液し、室温で１２時間封入放置する。その後、管内をメタノール洗浄し目的とするＰＣ基内面修飾配管材を得る。
なお、材質の異なるテフロン（登録商標）管、テフゼル管、ピーク樹脂管を使用しても全く同様にＰＣ基内面修飾配管が得られる。
【００３４】
【発明の効果】
本発明によれば、各種材質の接液部材の表面に、簡便な方法にて、親水性のホスホリルコリン基を安定して導入することが可能である。特に、ホスホリルコリン基を、試験液が接触する内面に導入した分析装置若しくは分離装置用配管や分析装置用各種器材は、タンパク質の吸着を防止して、再現性に優れたタンパク分析を可能とする。また、分析装置内でのタンパク変性を抑制し、タンパク回収率を向上させることも可能である。
本発明の接液部材はその材質を選ばない。また、コーティングされたポリマーが架橋するため、コーティングの耐久性に優れている。さらにポリマーコーティング後に高分子反応によってホスホリルコリン基を導入するため、最適な量のホリルコリン基を容易に各種接液部材の表面に導入することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【図１】合成例１の構造式及びＮＭＲスペクトルである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a wetted member coated with a polymer having a hydrophilic group. More specifically, the present invention mainly relates to a liquid contact member in which the surface of the liquid contact member such as a pipe for an analyzer is firmly coated with a polymer having a phosphorylcholine group.
[0002]
[Prior art]
A liquid contact member such as an analyzer piping for the purpose of preventing protein adsorption is coated with a general hydrophilic group. For example, Patent Document 1 describes a capillary column that forms a polymer film on an inner wall surface with a vinyl compound, prevents protein adsorption, enables high-resolution and high-reliability analysis, and has a long life. . Patent Document 2 describes an electrophoresis capillary tube that can easily remove proteins and has a long service life. Agarose is covalently bonded to the inner wall surface of a silica-based capillary tube. Thus, it is described that the protein can be separated with good reproducibility without degrading the separation efficiency, and the service life can be extended. Furthermore, Patent Document 3 proposes a clinical laboratory instrument device in which the adhesion and adsorption of proteins and platelets in blood are controlled, and its surface is coated with a plastic polypropylene spitz whose surface is coated with a hydrophilic polymer such as vinyl alcohol. A tube is specifically disclosed.
[0003]
On the other hand, polymers having a phosphorylcholine group have been studied as biocompatible polymers, and biocompatible materials in which this polymer is coated on various bases have been developed. For example, Patent Document 4 and Patent Document 5 disclose medical materials and separation agents coated with a polymer having a phosphorylcholine group. These are prepared by synthesizing a monomer having a phosphorylcholine structure and coating the surface with a polymer obtained by polymerizing the monomer. Regarding the production method of these polymers, a copolymer of 2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine and methacrylic acid ester is produced in Patent Document 6, and a homopolymer of 2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine is produced in Patent Document 7. ing.
[0004]
[Patent Document 1]
Japanese Patent Laid-Open No. 5-288716 [Patent Document 2]
JP-A-6-288984 [Patent Document 3]
JP-A-62-169052 [Patent Document 4]
JP 2000-279512 A [Patent Document 5]
JP 2002-98676 A [Patent Document 6]
Japanese Patent Laid-Open No. 9-3132 [Patent Document 7]
Japanese Patent Laid-Open No. 10-298240
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a wetted member coated with a polymer having a hydrophilic group, and the surface of a pipe for an analytical device or the like is simply physically coated with a cast of a hydrophilic polymer. The present invention provides a wetted member coated with a hydrophilic polymer much more strongly than a wetted member that is only one. In addition, the hydrophilic group is a phosphorylcholine group having a high protein adsorption preventing effect, and provides a liquid contact member that has good reproducibility and enables high recovery protein analysis.
[0006]
In addition, as seen in the prior art, in the method in which a polymer having a phosphorylcholine group is first obtained and the liquid contact member is coated with this polymer to modify the surface, the entire inner wall surface is effective depending on the shape of the liquid contact member. Or uniform coating is difficult.
[0007]
Moreover, since the coated polymer peels from the surface of the material, there may be a problem in durability. On the other hand, the production of a monomer having a phosphorylcholine group must be carried out under strictly anhydrous conditions, and there is a problem that the method is complicated. Furthermore, there is a problem in the stability of the phosphorylcholine group bonded to the coating polymer due to the polymerization conditions of this monomer.
[0008]
From the above viewpoint, the present invention can be produced by a method that is not complicated and has excellent phosphorylcholine group stability. That is, instead of coating the inner wall surface of the liquid contact member with a polymer obtained by polymerizing a monomer having a phosphorylcholine group in advance, an extremely strong polymer coating is performed on the inner wall surface of the liquid contact member using an alkoxysilyl group-containing polymer. This is a wetted member in which a phosphorylcholine group-containing compound is bonded and a phosphorylcholine group is introduced on the surface thereof. Further, the liquid contact member of the present invention can be applied with wide versatility to liquid contact members made of materials such as metal, plastic, glass, etc., regardless of the material.
[0010]
[Means for Solving the Problems]
According to the present invention, there is provided the liquid contact member, wherein the phosphorylcholine group-containing compound represented by the following formula (2) and / or (3) is bonded to a liquid contact member whose surface is coated with an alkoxysilyl group-containing polymer. It is to provide.
[Chemical 9]
(2)

[Chemical Formula 10]
(3)

[0011]
Furthermore, the present invention is characterized in that the alkoxysilyl group-containing polymer is a polymer obtained by copolymerizing a monomer of the following formula (4) and at least one monomer of the formulas (5) to (7). The liquid contact member is provided.
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(4)

(R ₁ is hydrogen or linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, R ₂ is linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. Is)
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(5)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
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(6)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
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(7)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
[0012]
In addition, the present invention provides the liquid contact member, wherein the liquid contact member is a separation analyzer pipe.
[0013]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The present invention is described in detail below.
[0014]
In the present invention, the liquid contact member means a member in contact with the liquid. For example, a member for contact with a test solution such as a pipe for separation or analysis, a pipe connection part, a needle for sampling, a sample vial, a detector cell, or the like. In these liquid-contact members, the surface of the portion that comes into contact with the test liquid is coated with an alkoxysilyl group-containing polymer. In piping, piping connection parts, needles for sampling, sample vials, detector cells, etc., the inner surface with which the test solution comes into contact may be coated. In particular, HPLC, MS, NMR connection piping, capillary piping of electrophoresis apparatus, and the like are specific preferable embodiments.
[0015]
The material and shape of the liquid contact member of the present invention are not limited. For example, the liquid contact member is made of various materials such as metal, plastic, glass, and ceramic.
A separation analyzer pipe such as a Teflon (registered trademark) pipe, a Tefzel pipe, a peak resin pipe, or a fused silica pipe is a preferred embodiment of the present invention.
[0016]
The alkoxysilyl group-containing polymer is not particularly limited as long as the wetted member can be coated. A strong film is formed on the surface of the coated liquid contact member by a crosslinking reaction of alkoxysilane. For example, a known or later-developed monomer in which an alkoxysilyl group is substituted for a (meth) acrylic acid monomer such as (meth) acrylic acid or (meth) acrylic acid alkyl ester is preferable. Specifically, the surface of the wetted member is treated by dissolving a polymer obtained by polymerizing an alkoxysilyl group-containing (meth) acrylic acid-based or (meth) acrylamide-based monomer of the following general formula (4) in a solvent, Cross-linked by coating.
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(4)

(R ₁ is hydrogen or linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, R ₂ is linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. Is)
[0017]
In order to introduce a phosphorylcholine group represented by the following formula (1), the alkoxysilyl group-containing polymer that coats the liquid contact member must have some reactive group that can be introduced by reacting with the phosphorylcholine group-containing compound. I must. A preferred reactive group is an amino group. The amino group is a primary amine or a secondary amine. An amino group may be introduced by a known method or a method developed in the future. The simplest and preferred method is to use an amine-based monomer having an amino group, or a copolymer copolymerized with a monomer having an isocyanate group or an epoxy group that generates an amino group.
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(1)

[0018]
Even if the copolymer is not a copolymer with an amine-based monomer, a monomer having a functional group that can easily introduce an amino group by reaction with a diamine, such as an epoxy group, and an alkoxysilyl group-containing polymer are copolymerized. It may be a polymerized polymer.
The amino group can also be introduced by immersing a wetted member coated with an alkoxysilyl group-containing polymer by plasma polymerization in a THF (tetrahydrofuran) solution of allylamine substituted with nitrogen and graft polymerization.
[0019]
The monomer to be copolymerized is preferably a monomer of the following formulas (5) to (7) or a (meth) acrylic acid monomer such as acrylic acid or methacrylic acid. The ester bond (COO) in the formulas (5) to (7) may be an amide bond (CONH).
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(5)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
[0020]
In addition to the monomer having the above-mentioned binding functional group, the copolymerizable monomer includes an alkoxysilyl group-containing polymer to be coated and a wettability member in accordance with the material of the liquid contact member. Therefore, it is also preferable to copolymerize other monomers. For example, when the wetted material is polypropylene, butyl methacrylate is used to improve the affinity of the saturated hydrocarbon polypropylene, polydimethylsiloxane methacrylate is used for polysiloxane-based materials, and parthene is used for Teflon (registered trademark). Copolymerize fluoroalkyl monomers.
[0021]
A phosphorylcholine group is introduced by reacting the introduced amino group with an aldehyde or hydrate obtained by oxidative cleavage of a phosphorylcholine group-containing compound, preferably glycerophosphorylcholine, by a reductive amination reaction. The A preferred phosphorylcholine group-containing compound is a diol of the following formula (2) and / or an aldehyde of the following formula (3), and is preferably bonded to an amino group by a condensation reaction and / or a reductive amination reaction.
In addition, as long as the phosphorylcholine group-containing compound is finally bonded to the amino group, any reaction route from the introduction of the amino group to the bonding may be taken.
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(2)

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(3)

[0022]
The aldehyde obtained by the oxidative cleavage reaction of glycerophosphorylcholine is a very simple step because it causes oxidative cleavage of a known glycerophosphorylcholine group by a known method. In this reaction, 1,2-diol is oxidized with periodic acid or periodate to cleave the bond to obtain two aldehydes. In this method, phosphorylcholine aldehyde and Formaldehyde is produced. The reaction is usually carried out in water or an organic solvent containing water. The reaction temperature is from 0 degree to room temperature. Aldehydes may undergo hydration through an equilibrium reaction in water, but do not affect the subsequent reaction with amines. A scheme for preparing a monofunctional aldehyde compound containing a phosphorylcholine group is shown below.
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In the reductive amination reaction in which the hydrate and / or aldehyde obtained by the oxidative cleavage reaction of glycerophosphorylcholine is bonded to the amino group of the polymer coated with the wetted member, both must be stirred in a solvent. Can be easily performed. In this reaction, both are coexisted in water or alcohol (the organic solvent of the third component may be mixed) to form an imine and then reduced with a reducing agent to obtain a secondary amine. . The reducing agent is preferably a mild reducing agent such as sodium cyanoborate, but other reducing agents can be used as long as phosphorylcholine is stable. The reaction is usually performed at 0 ° C. to room temperature, but may be heated in some cases.
Specifically, the liquid contact member is dipped in methanol, phosphatidyl glyceraldehyde is added, and the mixture is allowed to stand at room temperature for 6 hours. Then, sodium cyanoborate is added at 0 ° C., and the mixture is heated and stirred overnight to add a phosphorylcholine group to the amino group. The reaction solvent can be any protic solvent such as water, ethanol, 2-propanol other than methanol, but when methanol is used, the phosphorylcholine group addition rate tends to be high.
[0023]
By the above method, a wetted member in which a hydrophilic phosphorylcholine group is introduced on the surface in an arbitrary amount can be easily obtained. A more specific method will be described below.
[0024]
Manufacturing method 1
A copolymer having the monomer 1 of the above formula (4) (hereinafter abbreviated as “monomer 1”) and the monomer of the above formula (5) (hereinafter abbreviated as “monomer 2”) as essential components is synthesized. The reaction solvent is not particularly limited as long as it does not react with the monomers 1 and 2 and dissolves the two monomers. Examples thereof include one or more mixed solvents of toluene, acetone, ethyl acetate, hexane, ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane, and chloroform. The polymerization initiator is not particularly limited as long as it is a radical initiator. Examples thereof include peroxides such as benzoyl peroxide, azo compounds such as azobisisobutyronitrile and 2,2′-azobis (isoacetic acid) dimethyl. In addition to using a polymerization initiator, polymerization can also be performed by irradiation or the like. The average molecular weight of the copolymer is not particularly limited because it ultimately causes a crosslinking reaction. The monomer to be copolymerized may be added in addition to the above two types depending on the affinity with the material.
<Production method 1-1>
A copolymer essentially comprising monomers 1 and 2 is synthesized and spread on the wetted member. Further, the remaining isocyanate and the phosphorylcholine group-containing compound of the above formula (2) (hereinafter abbreviated as PC1) are introduced into the phosphorylcholine group of the above formula (1) (hereinafter abbreviated as PC group) through a urethane bond. . The timing for causing the crosslinking reaction of the polymer may be before or after the introduction of the PC group, depending on simplicity. If the treatment with water is carried out, the crosslinking reaction proceeds rapidly, but gradually proceeds even if the film is left untreated.
<Production method 1-2>
A copolymer essentially comprising monomers 1 and 2 is synthesized and spread on the surface of the wetted member. Further, this is treated with water or a basic aqueous solution to decompose the isocyanate and convert it into an amine. This amino group and the phosphorylcholine group-containing compound of the above formula (2) (hereinafter abbreviated as PC2) are bonded by a reductive amination reaction to introduce a PC group.
[0025]
Manufacturing method 2
A copolymer having monomer 1 and the monomer of formula (6) (hereinafter abbreviated as monomer 3) as essential components is synthesized. The reaction solvent is not particularly limited as long as it does not react with the monomers 1 and 3 and dissolves the two monomers. Examples thereof include one or a mixed solvent of toluene, acetone, methanol, ethanol, 2-propanol, ethyl acetate, hexane, ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane, and chloroform. The polymerization initiator is not particularly limited as long as it is a radical initiator. Examples thereof include peroxides such as benzoyl peroxide, azo compounds such as azobisisobutyronitrile and 2,2′-azobis (isoacetic acid) dimethyl. In addition to using a polymerization initiator, polymerization can also be performed by radiation irradiation or the like. The average molecular weight of the copolymer is not particularly limited because it ultimately causes a crosslinking reaction.
The monomer to be copolymerized may be added in addition to the above two types depending on the affinity with the substrate.
A copolymer essentially comprising the monomers 1 and 3 is spread on the surface of the liquid contact member. Furthermore, the epoxy group is converted to an amino group by treating this with a compound having two or more amino groups in the molecule such as aqueous ammonia solution or ethylenediamine. Subsequently, PC2 is bound by a reductive amination reaction to introduce a PC group.
[0026]
Manufacturing method 3
A copolymer having monomer 1 and the monomer of formula (7) (hereinafter abbreviated as monomer 4) as essential components is synthesized. The reaction solvent is not particularly limited as long as it does not react with the monomers 1 and 4 and dissolves the two monomers. Examples thereof include one or a mixed solvent of toluene, acetone, methanol, ethanol, 2-propanol, ethyl acetate, hexane, ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane, and chloroform. The polymerization initiator is not particularly limited as long as it is a radical initiator. Examples thereof include peroxides such as benzoyl peroxide, and azo compounds such as azobisisobutyronitrile and 2,2′-azobis (isoacetic acid) dimethyl. In addition to using a polymerization initiator, polymerization can also be performed by radiation irradiation or the like. The average molecular weight of the copolymer is not particularly limited because it ultimately causes a crosslinking reaction.
The monomer to be copolymerized may be added in addition to the above two types depending on the affinity with the material of the liquid contact member.
A copolymer containing the monomers 1 and 4 is spread on the surface of the liquid contact member. Subsequently, PC2 is bound by reductive amination reaction to introduce a PC group.
[0027]
Manufacturing method 4
A copolymer having monomer 1 and (meth) acrylic acid as essential components is synthesized. The reaction solvent is not particularly limited as long as it does not react with monomer 1 and (meth) acrylic acid and dissolves the two monomers. Examples thereof include one or a mixed solvent of toluene, acetone, methanol, ethanol, 2-propanol, ethyl acetate, hexane, ether, tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane, and chloroform. The polymerization initiator is not particularly limited as long as it is a radical initiator. Examples thereof include peroxides such as benzoyl peroxide, and azo compounds such as azobisisobutyronitrile and 2,2′-azobis (isoacetic acid) dimethyl. In addition to using a polymerization initiator, polymerization can also be performed by radiation irradiation or the like. The average molecular weight of the copolymer is not particularly limited because it ultimately causes a crosslinking reaction. The monomer to be copolymerized may be added in addition to the above two types depending on the affinity with the material of the liquid contact member. A copolymer essentially comprising monomers 1 and 4 or 5 is spread on the surface of the liquid contact member. To this, PC1 is bonded using a carbodiimide coupling agent such as dicyclohexylcarbodiimide, 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide, carbodiimidazole, or the like, and a PC group is introduced.
[0028]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. The present invention is not limited to the following examples. The phosphorylcholine group introduced into the surface of the wetted member can be quantified by confirming with FT-IR and elemental analysis.
[0029]
Synthesis Example 1 An aldehyde compound L-α-glycerophosphorylcholine (450 mg) containing a phosphorylcholine group is dissolved in 15 ml of distilled water and cooled in an ice-water bath. Add sodium periodate (750 mg) and stir for 2 hours. Add more ethylene glycol (150 mg) and stir overnight. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, dried under reduced pressure, and the desired product is extracted with methanol.
The structural formula and NMR spectrum are shown in FIG.
[0030]
Example 1
Commercially available monomer 1 (5 g, n = 3), monomer 2 (5 g, n = 2) and butyl methacrylate (5 g) are dissolved in tetrahydrofuran (100 ml) and degassed for 30 minutes under a nitrogen atmosphere. The temperature was raised to 70 ° C., azobisisobutyronitrile (5 mg) was added, and polymerization was performed for 4 hours. After diluting the reaction solution with chloroform, the reaction solution is sealed in a tube (Teflon (registered trademark) tube) to be coated with the inner surface. The end of one end of the tube is sealed, and the solvent is removed over several hours by reducing the pressure from the other end. Next, dimethylformamide (100 ml) containing PC1 (1 g) and triethylamine (1 g) is prepared, and the liquid is passed through the tube at a rate of 1 cm per minute for 5 hours. Thereafter, methanol and acetone are passed through the tube to obtain the target PC base inner surface modified piping. In order to sufficiently advance the cross-linking reaction on the inner surface, water may be passed therethrough and dried again under reduced pressure.
Even if a Tefzel tube, a peak resin tube, or a fused silica tube made of different materials are used, a PC base inner surface modified piping can be obtained in the same manner.
[0031]
Example 2
The polymer of Example 1 is similarly diluted with chloroform and then sealed in a tube (Tefzel tube) to be coated with the inner surface. The end of one end of the tube is sealed, and the solvent is removed over several hours by reducing the pressure from the other end. The aqueous solution containing triethylamine was passed at a rate of 1 cm per minute for 5 hours to advance the crosslinking reaction and convert the isocyanate into an amine. Subsequently, methanol (100 ml) containing PC2 (1 g) was passed through this pipe for 5 hours at room temperature, and then methanol (100 ml) containing sodium cyanoborate (0.5 g) was passed at ice temperature. And enclose for 12 hours at room temperature. Thereafter, the inside of the pipe is washed with methanol to obtain a pipe whose inner surface is modified with a target PC group.
Even if Teflon (registered trademark) pipes, peak resin pipes, and fused silica pipes of different materials are used, PC base inner surface modified pipes can be obtained in exactly the same manner.
[0032]
Example 3
Commercially available monomer 1 (5 g, n = 3), monomer 3 (15 g, n = 1), hydroxyethyl methacrylate (5 g), and trimethylammonium ethyl acrylate (1 g) were dissolved in ethanol (200 ml), and the mixture was stirred in a nitrogen atmosphere for 30 minutes. Deaerate. The temperature was raised to 70 ° C., azobisisobutyronitrile (5 mg) was added, and polymerization was performed for 4 hours. After the reaction solution is diluted with chloroform, it is sealed in a tube (peak resin tube) that is to be subjected to inner surface coating. The end of one end of the tube is sealed, and the solvent is removed over several hours by reducing the pressure from the other end. Subsequently, the inner surface of the pipe is crosslinked, and an aqueous ammonia solution is passed at 50 ° C. for 5 hours in order to convert the epoxy group into an amino group. Methanol was passed therethrough, methanol (100 ml) containing PC2 (1 g) was passed for 5 hours at room temperature, and then methanol (100 ml) containing sodium cyanoborate (0.5 g) was passed under ice temperature. The solution was left to be sealed for 12 hours at room temperature. Thereafter, the inside of the tube is washed with methanol to obtain the intended PC base inner surface modified piping material.
Even if a Teflon (registered trademark) pipe, a Tefzel pipe, or a fused silica pipe made of different materials is used, a PC base inner surface modified pipe can be obtained in the same manner.
[0033]
Example 4
Commercially available monomer 1 (5 g, n = 3), monomer 4 (2 g, n = 2), methyl methacrylate (10 g), dimethylpolysiloxane methacrylate (3 g) were dissolved in ethanol (100 ml) -hexane (50 ml), and nitrogen was added. Degas for 30 minutes under atmosphere. The temperature is raised to 70 ° C., azobisisobutyronitrile (5 mg) is added and polymerized for 4 hours. After diluting the reaction solution with chloroform, the reaction solution is sealed in a tube (fused silica tube) to be coated with the inner surface. The end of one end of the tube is sealed, and the solvent is removed over several hours by reducing the pressure from the other end. Subsequently, water was passed for 5 hours at room temperature in order to crosslink the inner surface of the pipe. This was dried, and methanol containing PC2 (1 g) was passed for 5 hours at room temperature, and then methanol (100 ml) containing sodium cyanoborate (0.5 g) was passed at ice temperature. Leave sealed for 12 hours. Thereafter, the inside of the tube is washed with methanol to obtain the intended PC base inner surface modified piping material.
Even if a Teflon (registered trademark) pipe, a Tefzel pipe, or a peak resin pipe made of different materials is used, a PC base inner surface modified pipe can be obtained in the same manner.
[0034]
【The invention's effect】
According to the present invention, it is possible to stably introduce a hydrophilic phosphorylcholine group onto the surface of a wetted member made of various materials by a simple method. In particular, an analyzer, a separation apparatus pipe, and various instruments for an analysis apparatus in which a phosphorylcholine group is introduced on the inner surface with which a test solution comes into contact prevent protein adsorption and enable protein analysis with excellent reproducibility. It is also possible to suppress protein denaturation in the analyzer and improve the protein recovery rate.
The material of the liquid contact member of the present invention is not limited. Further, since the coated polymer is crosslinked, the durability of the coating is excellent. Furthermore, since phosphorylcholine groups are introduced by polymer reaction after polymer coating, it is possible to easily introduce an optimal amount of folylcholine groups onto the surfaces of various wetted members.
[Brief description of the drawings]
1 is a structural formula and NMR spectrum of Synthesis Example 1. FIG.

Claims

A liquid contact member obtained by binding a phosphorylcholine group-containing compound of the following formula (2) and / or (3) to a liquid contact member whose surface is coated with an alkoxysilyl group-containing polymer .
[Chemical formula 2]
(2)

[Chemical 3]
(3)

2. The polymer according to claim 1, wherein the alkoxysilyl group-containing polymer is a polymer obtained by copolymerizing a monomer of the following formula (4) and at least one monomer of the formulas (5) to (7) . Liquid contact member.
[Formula 4]
(4)

(R ₁ is hydrogen or linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms , R ₂ is linear or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. Is)
[Chemical formula 5]
(5)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
[Chemical 6]
(6)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)
[Chemical 7]
(7)

(R ₁ is hydrogen or straight-chain or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, and n is a number from 1 to 6. —O— may be —NH—.)

The liquid contact member according to claim 1 or 2, wherein the liquid contact member is a separation analyzer pipe .