JP3347495B2

JP3347495B2 - 粒子分析装置

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Publication number: JP3347495B2
Application number: JP27949094A
Authority: JP
Inventors: 正和福田; 博幸中本; 政昭岡
Original assignee: Sysmex Corp
Current assignee: Sysmex Corp
Priority date: 1994-11-14
Filing date: 1994-11-14
Publication date: 2002-11-20
Anticipated expiration: 2017-11-20
Also published as: JPH08136438A; EP0711991A1; US5719666A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は粒子分析装置に関し、
特に、尿中に含有される円柱や粘液糸などを検出する装
置に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来のこの種の分析装置においては、染
色した粒子に光を照射して前方または側方の蛍光および
散乱光を測光するようにした光学式装置や、電気抵抗式
の粒子計数器においてオリフィスに針状の部材を挿入し
て各種サイズの粒子を計数するようにした装置などが知
られている（例えば、特開平４−３３７４５９号公報お
よび欧州出願公開公報第２４２９７１Ａ２号参照）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
装置で尿中に含まれる粒子を分析すると、円柱、粘液糸
およびその他の粒子の弁別や分析が難かしいという問題
があった。

【０００４】この発明はこのような事情を考慮してなさ
れたもので、粒子の体積情報を電気的に検出すると同時
に粒子の長さ情報を光学的に検出し、それらの情報の相
関関係に基づいて粒子の種類を判別する粒子分析装置を
提供するものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段および作用】この発明は、
細孔によって連通する第１および第２セルに電解液を収
容し、その電解液に浮遊する粒子が第１セルから第２セ
ルへ細孔を介して流れるように構成したフローセルと、
第１および第２セルの電解液中にそれぞれ設けられた第
１および第２電極と、粒子の細孔の通過に伴って変化す
る第１および第２の電極間の電気抵抗の変化に基づく電
気抵抗信号を検出する第１検出手段と、流れる粒子に光
ビームを照射する光源手段と、光ビームを受けた粒子か
らの散乱光を検出する第２検出手段と、第２検出手段に
より検出された各粒子の散乱光信号から散乱光信号発生
期間を計時する計時手段と、各粒子に関する電気抵抗信
号と散乱光信号発生期間との相関関係から粒子の種類を
判別する判別手段を備えた粒子分析装置を提供するもの
である。この発明の粒子分析装置における被検粒子は、
主にヒトの尿に含まれる円柱(cast)、粘液糸(mucous)お
よび上皮細胞のような粒子であり、これらは予め蛍光染
料や蛍光標識試薬によって処理された粒子であってもよ
い。

【０００６】なお、円柱とはTomm-Horsfallムコ蛋白
が、少量の血しょう蛋白（アルブミン）の存在のもとで
腎尿細管腔内において凝固沈殿したものが基質となり、
その基質内に血液細胞や腎尿細管上皮細胞などが包埋さ
れたものである。円柱は、その形状からcylinderあるい
は尿細管腔を鋳型として形成されることからcastと呼ば
れている（円柱の存在は尿細管腔に一時的な閉塞があっ
たことを意味し、腎実質障害を示唆する所見として重要
であり、とくに血液細胞、上皮円柱などを封入する物は
臨床的意義が高い）。

【０００７】また、粘液糸とは、細長い紐状で硝子円柱
に似るが両端が線状に長くのびたものであり、正常なヒ
トの尿中でも少量見られるが、慢性尿管炎、慢性膀胱炎
尿に多く認められる。

【０００８】この発明のフローセルは、細孔によって連
通された、電解液を収容する２つのセルからなり、好適
には粒子を含む試料液をシース液に包んで流すことによ
り流体力学的効果によって試料液の流れを形成して細孔
に粒子を一列に通過させることのできるセルである。

【０００９】この発明に用いるフローセルは、細孔に試
料液を０．５〜１０m／sec程度の速度で流すものであ
る。

【００１０】試料液およびシース液は、同一の導電率を
有することが好ましい。

【００１１】第１および第２電極は、導電材料で形成さ
れるが、耐腐触性を考慮するとプラチナやステンレス鋼
などで形成されることが好ましい。第１検出手段は、粒
子が細孔を通過するときに、第１および第２電極間の電
気抵抗変化を検出するが、これは第１および第２電極間
に電流を供給する電流電源と、第１および第２電極間に
流れる電流を検出する検出装置から構成されることが好
ましい。

【００１２】第１検出手段が検出する電気抵抗信号は、
粒子が細孔を通過する時、山状のパルス波形となるが、
そのパルス高さは、周知のように粒子の体積にほぼ比例
する。

【００１３】光源手段は細孔を通過中、通過直前、又は
通過直後の粒子に、フローセルの外部から光ビームを照
射するものであり、これには、連続的に発光する（パル
ス発光でないタイプのもの）レーザ光源に集光用レンズ
を付加したものを用いることが好ましい。照射するビー
ム巾（流れ方向）は５〜３０μｍが好ましい。

【００１４】第２検出手段は、光ビームを受けた粒子か
ら発せられる散乱光を検出するものであるが、これに
は、ホトダイオード、ホトトランジスタ又はホトマルチ
プライヤーチューブなどを用いることができる。

【００１５】計時手段は、１つの粒子の散乱光信号の発
生期間、すなわちパルス幅を計時する。つまり、第２検
出手段が１つの粒子からの散乱光の検出を開始してから
終了するまでの期間を計時するが、これには例えば適当
なスレッシュホールド（例えば、図３のレベルＩ）を含
有するコンパレータとカウンター（タイマー）が用いら
れる。

【００１６】そして、１つの粒子の散乱光信号の発生期
間はその粒子の流れ方向の長さ情報を反映する。

【００１７】ところで、尿中に含まれる上皮細胞、粘液
糸、および円柱は、それぞれ、図１に示すような、形態
を有するので、各体積の長さに対する比、つまり、（体
積）／（長さ）が上皮細胞＞円柱＞粘液糸という関係を有する。

【００１８】従って、細孔を順次通過する各粒子につい
て、第１検出手段から得られる電気抵抗変化信号の最大
値と計時手段から得られる散乱光発生期間との相関関係
を求めると、図２のようになり、判別手段はこの相関関
係に基づいて粒子の種類を弁別することができる。

【００１９】なお、判別手段は、ＣＰＵ，ＲＯＭおよび
ＲＡＭからなるマイクロコンピュータによって形成され
ることが好ましい。

【００２０】この発明の粒子分析装置は、第２検出手段
により検出された各粒子の散乱光信号を、第１参照値と
比較すると共に、第１参照値よりも大きい第２参照値と
比較する比較手段と、各粒子の散乱光信号が、第１参照
値よりも大きい第１期間と第２参照値よりも大きい第２
期間を計時する第２計時手段と、第１および第２期間の
相関関係に基づいて粒子の種類を判別する第２判別手段
を、さらに備えてもよい。

【００２１】１つの粒子について、第２検出手段から得
られる散乱光信号の時間的変化つまり波形について考察
すると、粒子が上皮細胞の場合には、図３の（ａ）に示
すように波形は初めから終わりまで高い値となるが、粒
子が粘液糸の場合には、粒子が透明に近いため波形は、
図３の（ｂ）に示すように上皮細胞の場合に比べてかな
り低くなり、粒子が円柱の場合には、その波形は、図３
の（ｃ）に示すように、内容物を有する部分が高くな
る。

【００２２】つまり、図３に示す各波形を第１参照値
（レベルＩ）および第２参照値（レベルII）と比較する
と（但し、レベルII＞レベルＩ）、散乱光波形がレベル
Ｉよりも大きい第１期間（パルス幅Ｉ）のレベルIIより
も大きい第２期間（パルス幅II）に対する比は、上皮細胞＞円柱＞粘液糸となる。

【００２３】従って、細孔を順次通過する各粒子につい
て、散乱光波形がレベルＩよりも大きい第１期間（パル
ス幅I）とレベルIIよりも大きい第２期間（パルス幅I
I）との相関関係を求めると、図４のようになり、第２
判別手段はこの相関関係に基づいて上皮細胞を容易に弁
別することができる。従って、判別手段は、図２から上
皮細胞を除去したデータ（図５）から円柱と粘液糸のみ
を弁別すればよいことになる。なお相関関係とは、具体
的にはスキャッタグラムを意味する。

【００２４】このように、請求項２記載の発明によれ
ば、請求項１記載の判別手段の作用と相俟って、粒子の
種類がさらに精度よく弁別される。

【００２５】なお、前記比較手段にはコンパレータを、
計時手段には、カウンター（タイマー）をそれぞれ使用
し、第２判別手段は、前記判別手段と同様に、マイクロ
コンピュータによって形成することができる。

【００２６】この発明の粒子分析装置は、光ビームを受
けた粒子からの蛍光を検出する第３検出手段と、第３検
出手段により検出された各粒子の蛍光信号を第３参照値
と比較する第２比較手段と、各粒子の蛍光信号強度が第
３参照値よりも大きい第３期間を計時する第３計時手段
と、第３期間と前記散乱光発生期間との相関関係に基づ
いて粒子の種類を判別する第３判別手段を、さらに備え
てもよい。

【００２７】第３検出手段は、光ビームを受けた粒子か
らの蛍光を検出するものであるが、蛍光は散乱光より波
長が長く、強度が微弱であるため、第３検出手段には、
散乱光を除去して蛍光のみを通過させるフィルターとホ
トマルチプライヤーチューブとを組合わせて用いること
が好ましい。

【００２８】１つの粒子について第３検出手段から得ら
れる蛍光信号の時間的変化、つまり波形について考察す
ると、粒子が上皮細胞である場合には、上皮細胞はＤＮ
Ａを多く含有するため蛍光染料によく染まり、図６の
（ａ）に示すように、高く長い波形となるが、粒子が粘
液糸である場合には、ＤＮＡを含まないので、図６の
（ｂ）に示すように、ほとんど波形が現れず、また、粒
子が円柱である場合には、その内容物を有する部分が図
６の（ｃ）に示すように波形が高くなる。

【００２９】つまり、図６に示す各波形と第３参照値
（レベルIII）とを比較すると、レベルIIIよりも高い第
３期間（蛍光パルス幅）は、上皮細胞〉円柱〉粘液糸となる。従って、細孔を順次通過する各粒子について、
蛍光波形がレベルIIIよりも大きい期間（蛍光パルス
幅）と図２で求めた散乱光パルス幅との相関関係は、図
７のようになるので、図７によって、まず上皮細胞を弁
別して、図２に示す特性から上皮細胞のデータを取り除
けば、残りのデータから円柱と粘液糸を容易に分別する
ことができる。

【００３０】なお、第２比較手段にはコンパレータを、
第３計時手段にはカウンター（タイマー）を使用し、第
３判別手段にはＣＰＵ、ＲＯＭおよびＲＡＭからなるマ
イクロコンピュータを用いることができる。この発明の
粒子分析装置は、第２検出手段から得られる散乱光信号
の最大波高値を検出するピーク検出手段と、この波高値
から粒子の種類を判別する第４判別手段をさらに備えて
もよい。

【００３１】円柱の散乱波形について考察すると、内容
物をほとんど含まない円柱は硝子円柱と呼ばれ透明に近
く散乱光波高値は低い、しかし、顆粒円柱、赤血球円
柱、上皮円柱と呼ばれる封入体が有る円柱は高い波高値
を発生する。つまり、図８の（ａ）に示す様に硝子円柱
の散乱光信号の最大値Ｖｐと図８の（ｂ）に示す封入体
にある円柱の散乱光信号の最大値Ｖｐの比較結果は、封入体のある円柱＞硝子円柱となり、円柱の分類が可能となる。

【００３２】従って、硝子の散乱光信号波形の最大値Ｖ
ｐの頻度分布を求めると、硝子円柱の分布領域（イ）と
封入体のある円柱の分布領域（ロ）が、図９の様にな
り、硝子円柱と封入体がある円柱を容易に判別ができ
る。この様に、第４判別手段は、第２判別手段と相俟っ
て、粒子の種類をさらにくわしく分類できる。なお、ピ
ーク検出手段には、ピークホールド回路とＡ／Ｄ変換回
路を使用し、第４判別手段にはマイクロコンピュータを
使用することができる。

【００３３】この発明の粒子分析装置は、第３検出手段
から得られる蛍光信号の最大値を検出するピーク検出手
段と、この最大値から粒子の種類を判別する第４判別手
段をさらに備えてもよい。円柱の蛍光波形について考察
すると、内容物をほとんど含まない硝子円柱は蛍光染料
に染まり難く最大波高値は低い、しかし、顆粒円柱、上
皮円柱、白血球と呼ばれる封入体のある円柱はその封入
体が蛍光染料に良く染まり高い波高値を発生する。

【００３４】つまり、図１０の（ａ）に示す様に硝子円
柱の蛍光信号の最大値Ｖｐと封入体のある円柱の蛍光信
号の最大値Ｖｐの比較結果は、封入体のある円柱＞硝子円柱となり、円柱の分類が可能となる。

【００３５】従って、粒子の蛍光信号波形の最大値Ｖｐ
の頻度分布を求めると、硝子円柱の分布領域（イ）と封
入体のある円柱の分布領域（ロ）が図１１の様になり、
硝子円柱と封入体がある円柱を容易に判別ができる。こ
の様に、第４判別手段は、第３判別手段と相俟って、粒
子の種類をさらにくわしく分類できる。なお、ピーク検
出手段には、ピークホールド回路とＡ／Ｄ変換回路を使
用し、第４判別手段にはマイクロコンピュータを使用す
ることができる。

【００３６】

【実施例】以下、図面に示す実施例に基づいてこの発明
を詳述する。なお、これによってこの発明が限定される
ものではない。図１２は実施例の構成を示す説明図であ
り、１および２は弁、３は試料液容器（図示しない）か
ら希釈、蛍光染色などの前処理がなされた試料液を吸引
する吸引ノズル、４はシリンジ、５はフローセル、６は
試料ノズル、７ａは第１セル、７ｂは第２セル、８は
弁、９はシース液容器、１０はシース液を第１セル７ａ
の供給する供給口、１１は図１３に示す断面を有し第１
セル７ａと第２セル７ｂを接続する細孔であり、オリフ
ィス状のものを含む（以後、オリフィスと称して説明す
る）。１２は第１セル７ａ内に設けられたステンレス製
の電極、１３は第２セル７ｂ内に設けられた白金製の電
極、１４は第２セル７ｂに設けられた排液口、１５は電
極１２を陰極とし電極１３を陽極として電極１２と電極
１３との間に接続された直流定電流電源、１６は電源１
５の出力電圧を増幅し信号２９として出力する増幅器で
ある。

【００３７】また、１７はレーザ光源、１８はコンデン
サーレンズ、１９はビームストッパ、２０はコレクター
レンズ、２１はピンホール、２２はダイクロイックミラ
ー、２３はフィルター、２４はホトマルチプライヤーチ
ューブ、２５はホトダイオード、２６は試料ノズル６か
ら出力される試料液流、３０はピンホール２１を有する
遮光板である。

【００３８】このような構成において、まず、弁１、２
を所定時間開けると、陰圧により吸引ノズル３から試料
液が弁１、２の間に満たされる。次に、シリンジ４が一
定流量で弁１、２間の試料液を試料ノズル６へ押し出す
ことにより、試料ノズル６から試料液が第１セル７ａに
吐出される。

【００３９】それと同時に弁８を開けることにより第１
セル７ａにシース液が供給される。これによって試料液
はシース液に包まれ、さらにオリフィス１１によって細
く絞られてシースフローを形成する。オリフィス１１の
断面形状は図１３に示すように一辺ｄが１００〜３００
μｍの角穴を有し、光学硝子（石英硝子も含む）で形成
されている。

【００４０】このようにシースフローを形成することに
よって試料液に予め含まれた粒子を一個づつオリフィス
１１を介して一列に整列して流すことができる。オリフ
ィス１１を通過した試料液とシース液は第２セル７ｂに
設けた排液口１４から排出される。

【００４１】電極１２、１３間の電気抵抗は、シース液
の導電率（電気伝導度）、オリフィス１１の穴寸法（断
面積）と穴長さ、試料液の導電率、試料液の流れの径に
よって決まる。

【００４２】直流定電流源１５から電極１２、１３間に
定電流を流すことにより、電極１２、１３間の電気抵抗
と電流値により決まる直流電圧が発生する。また、オリ
フィス１１を粒子が通過すると、オリフィス１１の両端
の電気抵抗が変化するので、電気抵抗が粒子の通過中だ
け電極１２、１３間に発生する電圧がパルス状に変化
し、その変化分の最大値（パルスの波高値）はオリフィ
ス１１を通過する粒子の大きさに比例する。この変化分
が増幅器１６で増幅され抵抗信号２９（パルス状のアナ
ログ信号）として出力される。

【００４３】一方、オリフィス１１を流れる試料液流２
６ヘレーザ１７から発振したレーザ光がコンデンサーレ
ンズ１８で楕円形に絞られて照射される。その楕円形の
サイズは、試料の流れの方向には被験粒子径と同程度、
例えば１０μｍ前後であり、試料の流れ方向と直交する
方向には被験粒子径より十分大きく、例えば１００〜４
００μｍ程度である。

【００４４】試料液中の粒子に当たらずそのままフロー
セル５を透過したレーザ光はビームストッパ１９で遮光
される。レーザ光をうけた粒子から発せられる前方散乱
光及び前方蛍光はコレクターレンズ２０により集光さ
れ、遮光板３０のピンホール２１を通過する。そして、
ダイクロイックミラー２２に到達する。

【００４５】散乱光より長波長の蛍光はそのままダイク
ロイックミラー２２を透過し、フィルター２３で更に散
乱光が除かれた後にホトマルチプライヤーチューブ２４
で検出され蛍光信号２７（パルス状のアナログ信号）と
して出力される。また、散乱光はダイクロイックミラー
２２で反射されホトダイオード２５で受光されて散乱光
電気信号２８（パルス状のアナログ信号）として出力さ
れる。

【００４６】図１４は、前述のようにして得られた蛍光
信号２７、散乱光信号２８および抵抗信号２９を処理す
る処理回路のブロック図であり、３１〜３３は増幅器、
３４および３５は直流再生回路、３６、３７、３９はコ
ンパレータ、３８、５０はピークホールド回路、５２は
クロックゼネレータ、４１、４２、４４はカウンタ、４
３、４５、５１はＡ／Ｄ変換器、４６は制御回路、４７
はデータ処理部、４８はメモリ、４９はディスプレイで
ある。

【００４７】次に、このような構成における信号処理動
作を説明する。パルス状の散乱光信号２８は増幅器３１
で増幅され、直流再生回路３４で直流レベルが固定され
る。直流再生回路３４から出力されるパルス信号Ｓ１は
コンパレータ３６、３７、３８において、それぞれの閾
値と比較され閾値を越える期間（パルス幅）がカウンタ
４１、４２より計時される。コンパレータ３６の閾値を
粘液糸が検出できる程度（図３のレベルＩ）に、そし
て、コンパレータ３７の閾値を円柱が捕らえられる程度
（図３のレベルII）にしておくことにより、２種類のパ
ルス幅値（図３のパルス幅Ｉ、II）が得られる。散乱光
発光の最大値がピークホールド回路３８にとらえられ
て、Ａ／Ｄ変換器４３によってＡ／Ｄ変換されて散乱光
強度が得られる。

【００４８】パルス状の蛍光信号２７は増幅器３２で増
幅され、直流再生回路３５で直流レベルが固定され信号
Ｓ２として出力される。信号Ｓ２はコンパレータ３９で
閾値（図６のレベルIII）と比較され閾値を超える期間
がカウンタ４３で計時されパルス幅値（図６の蛍光パル
ス幅）となる。あわせて、蛍光信号２７の最大値がピー
クホールド回路５０でとらえられてＡ／Ｄ変換器５０に
よってＡ／Ｄ変換され蛍光強度が得られる。パルス状の
抵抗信号２９は増幅器３３で増幅され、サンプルホール
ド回路４０でピーク値（パルス波高値）がホールドされ
Ａ／Ｄ変換器４５でデジタル値に変換される。

【００４９】デジタル化された各カウンタ４１、４２、
４４およびＡ／Ｄ変換器４３、４５、５１の出力信号は
データ処理部４７に送られ粒子の弁別処理が行われる。
つまり、図２、図４、図５および図７に示すようなスキ
ャッタグラム（相関関係）や図９および図１１に示す度
数分布に基づいて上皮細胞、円柱、粘液子、硝子円柱、
封入体のある円柱などの弁別が行われる。そして弁別さ
れた粒子はカウント（計数）され試料１マイクロリット
ル当たりの数に換算される。また、その結果は粘度分
布、スキャッタグラムと共にディスプレイ４８に表示さ
れると共にメモリ４７に記憶される。

【００５０】なお、前記実施例では、前方散乱光及び前
方蛍光を用いる例を示したが、側方散乱光または側方蛍
光を使用してもよい。又、長さ情報を得るために抵抗波
形のパルス幅を使用しても同様の結果が得られる。

【００５１】

【発明の効果】この発明によれば、粒子の長さ情報と体
積情報の相関関係を求めることにより、尿中に含まれる
粒子、つまり円柱、粘液糸および上皮細胞などを容易に
弁別することができる。併せて、粒子からの散乱光強度
や蛍光強度の相関関係を求めることにより、さらに粒子
の弁別精度が向上する。

【図面の簡単な説明】

【図１】尿に含まれる上皮細胞、粘液系および円柱の側
面図である。

【図２】この発明における散乱光パルス幅と抵抗波高値
との関係を示すグラフである。

【図３】この発明における各種散乱光波形と散乱光パル
ス幅を示す波形図である。

【図４】この発明における散乱光パルス幅の特性を示す
グラフである。

【図５】この発明における散乱光パルス幅と抵抗波高値
との関係を示すグラフである。

【図６】この発明における蛍光パルス波形を示す波形図
である。

【図７】この発明における散乱光パルス幅と蛍光パルス
幅との関係を示すグラフである。

【図８】散乱光信号波形を示す波形図である。

【図９】散乱光信号最大値の頻度分布図である。

【図１０】蛍光信号波形を示す波形図である。

【図１１】蛍光信号最大値の頻度分布図である。

【図１２】この発明の一実施例の構成図である。

【図１３】図１２の要部の断面図である。

【図１４】実施例の信号処理回路を示すブロック図であ
る。

【符号の説明】

１弁２弁３吸引ノズル４シリンジ５フローセル６試料ノズル７ａ第１セル７ｂ第２セル８弁９シース液容器１０供給口１１オリフィス（細孔）１２電極１３電極１４排液口１５直流定電流電源１６アンプ１７レーザ光源１８コンデンサーレンズ１９ビームストッパ２０コレクターレンズ２１ピンホール２２ダイクロイックミラー２３フィルター

フロントページの続き (56)参考文献特開平５−306989（ＪＰ，Ａ) 特開平５−322885（ＪＰ，Ａ) 特開平５−119035（ＪＰ，Ａ) 実開平４−59450（ＪＰ，Ｕ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 15/12 G01N 15/14 G01N 21/49 G01N 33/493

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】細孔によって連通する第１および第２セ
ルに電解液を収容し、その電解液に浮遊する粒子が第１
セルから第２セルへ細孔を介して流れるように構成した
フローセルと、第１および第２セルの電解液中にそれぞ
れ設けられた第１および第２電極と、粒子の細孔の通過
に伴って変化する第１および第２の電極間の電気抵抗の
変化に基づく電気抵抗信号を検出する第１検出手段と、
流れる粒子に光ビームを照射する光源手段と、光ビーム
を受けた粒子からの散乱光を検出する第２検出手段と、
第２検出手段により検出された各粒子の散乱光信号から
散乱光信号発生期間を計時する計時手段と、各粒子に関
する電気抵抗信号と散乱光信号発生期間との相関関係か
ら粒子の種類を判別する判別手段を備えた粒子分析装
置。
【請求項２】第２検出手段により検出された各粒子の
散乱光信号を、第１参照値と比較すると共に、第１参照
値よりも大きい第２参照値と比較する比較手段と、各粒
子の散乱光信号が、第１参照値よりも大きい第１期間と
第２参照値よりも大きい第２期間を計時する第２計時手
段と、第１および第２期間の相関関係に基づいて粒子の
種類を判別する第２判別手段を、さらに備えた請求項１
記載の粒子分析装置。
【請求項３】光ビームを受けた粒子からの蛍光を検出
する第３検出手段と、第３検出手段により検出された各
粒子の蛍光信号を第３参照値と比較する第２比較手段
と、各粒子の蛍光信号強度が第３参照値よりも大きい第
３期間を計時する第３計時手段と、第３期間と前記散乱
光発生期間との相関関係に基づいて粒子の種類を判別す
る第３判別手段を、さらに備えた請求項１記載の粒子分
析装置。
【請求項４】第２検出手段により得られる散乱光信号
の最大値を検出するピーク検出手段と、検出された最大
値に基づき粒子の種類を判別する第４判別手段を、さら
に備えた請求項２記載の粒子分析装置。
【請求項５】第３検出手段により得られる蛍光信号の
最大値を検出するピーク検出手段と、粒子の蛍光強度に
基づき粒子の種類を判別する第５判別手段を、さらに備
えた請求項３記載の粒子分析装置。