JP2628832B2 - 新規タンニン - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、飲食品および医薬品と
して有用な新規タンニンおよびその製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】タンニンは、広く植物界に存在し、収斂
作用があることから、収斂薬として、また皮なめし剤と
して、古くより使用されて来た。しかし、一般にタンニ
ンは複雑な構造を有し、また単離精製の困難さと相俟っ
て研究が遅れていた。一方、タンニンは、上記の様な作
用に加え、各種の酵素の活性を阻害する性質を有し、種
々の生理、代謝調節剤としても有用であることが知られ
ている〔化学の領域、３５、２８（１９８２）〕。

【０００３】タンニン類の酵素阻害については、飼い葉
（Ｆｏｄｄｅｒ ｐｌａｎｔｓ）のタンニン類が、リパ
ーゼや、アミラーゼ、プロテアーゼを阻害すること、ま
た豆（Ｆｉｅｌｄ ｂｅａｎ）のタンニンが、リパーゼ
を阻害することが報告されている（Ｂｒｉｔｉｓｈ
Ｊ． Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，６０，２７５（１９８
８）、Ｊ．Ｓｃｉ．Ｆｏｏｄ Ａｇｒｉｃ．，３０，４
５８（１９７９））。また、４−ジ−Ｏ−ガロイルキナ
酸類（特公昭６０−５０７７８）および３′−Ｏ−Ｇａ
ｌｌｏｙｌｐｒｏｄｅｌｐｈｉｎｉｄｉｎ Ｂ−２（特
公昭６０−１１９１２）、４′，６′−Ｇａｌｌｏｙｌ
ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ（特公昭６３−５３９９３）
が、新規タンニンとして公示され、酵素タンパク質と結
合し、その活性を低下させる作用があり、代謝調節剤と
しての用途が示されている。

【０００４】マメ科の植物であるカワラケツメイ（Ｃａ
ｓｓｉａ ｎｏｍａｍｅ Ｈｏｎｄａ＝Ｃａｓｓｉａ
ｍｉｍｏｓｏｉｄｅｓ Ｌ． ｖａｒ． ｎｏｍａｍｅ
Ｍａｋｉｎｏ＝Ｃａｓｓｉａ ｍｉｍｏｓｏｉｄｅｓ
Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｎｏｍａｍｅ Ｏｈａｓｈｉ）
は、その全草が生薬として、利尿、整腸、健胃などの目
的で利用されており、また茶の代用としても飲用されて
いる。また、本植物の抽出物は、酵素の阻害作用が高い
ことが示されている〔薬用植物図譜、ｐ．１８２、金原
出版（１９６１）、Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ．、５６、１４７８（１９９２）〕。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、植物の
薬効成分を検索する目的で、カワラケツメイ抽出エキス
から各種成分を単離取得して、酵素阻害活性に基づく薬
理効果を調べた。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、カワラケ
ツメイ抽出エキスから酵素阻害活性の高い成分を検索し
た結果、新規タンニンを見出だし本発明を完成した。

【０００７】本発明によれば、式（１）

【０００８】

【化２】

【０００９】で表される新規タンニンが提供される。式
（１）で示される化合物は二つの異性体が存在する。

【００１０】本発明に係る化合物は、体内酵素タンパク
質と結合することによってその活性を低下させる性質を
有し、代謝調節剤として有用である。また、種々の酵素
作用を抑制し、食品などの酵素作用に起因する劣化を防
止するのに利用することができる。

【００１１】本発明に係る化合物は、飲用にも供される
カワラケツメイから採取したもので、安全性が高い。

【００１２】本発明に係る化合物は、例えばカワラケツ
メイからアセトンによる抽出、エーテルと水および酢酸
エチルと水への分配、およびカラムクロマトグラフィな
どの通常の分離方法により単離することができる。

【００１３】

【実施例】以下、実施例により、本発明を更に詳細に説
明する。なお、本発明は以下の実施例にのみ限定される
ものではない。

【００１４】実施例１（カワラケツメイから抽出と分
画） 本物質はカワラケツメイ等から、溶媒抽出、液−液分
配、カラムクロマトグラフィーなど、公知の方法により
分離、採取することが可能である。

【００１５】具体的には、図１に示すように、カワラケ
ツメイの果実乾燥物から７０％アセトンで抽出し、得ら
れた抽出液を濃縮後、エーテルにて抽出し、エーテル層
を除いた後、水層を酢酸エチルで抽出した。この酢酸エ
チルをＴｏｙｏｐｅａｒｌＨＷ−４０カラムに供し、７
０％エタノールで溶出し、分画した。この１分画をさら
にＭＣＩ ＧＥＬ ＣＨＰ−２０Ｐカラムに供し、各濃
度のメタノール水で溶出した。このうち４０％メタノー
ル溶出部を採取し、再度ＭＣＩ ＧＥＬカラムに供し、
メタノール水で溶出した。このうち４０％メタノール溶
出部の中間で当該化合物Ａが得られ、その後に当該化合
物Ｂが得られた。これらの収量は、０．０７％、０．０
３％であった。

【００１６】実施例２（当該化合物Ａの物理・化学的性
状） 実施例１の方法にて採取した化合物Ａの性状を常法によ
り測定した結果、以下のようであった。

【００１７】（１）形状：淡褐色無晶形粉末。

【００１８】（２）旋光度：［α］_Ｄ＋５９゜（ｃ＝
１，ＭｅＯＨ）。

【００１９】（３）ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：５６９（Ｍ
＋Ｎａ）、５４７（Ｍ＋Ｈ）^＋（ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉ
ｏｎ ｍｏｄｅ；ｍａｔｒｉｘ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ）、
５４５（Ｍ−Ｈ）^＋（ｎｅｇａｔｉｖｅ−ｉｏｎ ｍｏ
ｄｅ；ｍａｔｒｉｘ，ｍ−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌ ａ
ｌｃｏｈｏｌ）。

【００２０】（４）ＵＶ λｍａｘ^ＭｅＯＨｎｍ（ｌｏ
ｇ ε）：２８２（３．９７）。

【００２１】（５）^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ａｃ
ｅｔｏｎｅ−ｄ６＋Ｄ_２Ｏ、３０℃） δ：２．１７［１Ｈ，ｍ，Ｈ−３（Ｕ^１））］，２．４
５［１Ｈ，幅広いシグナル，Ｈ−３（Ｕ）］，２．５７
［１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，１６Ｈｚ，Ｈ−４
（Ｌ^２））］，２．９２［１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．５，１
６Ｈｚ，Ｈ−４（Ｌ）］，４．０２［１Ｈ，ｍ，Ｈ−３
（Ｌ）］，４．４２［１Ｈ，幅広いシグナル，Ｈ−２
（Ｌ）］，４．４７［１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｈ−４
（Ｕ）］，５．２４［１Ｈ，ｍ，Ｈ−２（Ｕ）］，６．
０８［１Ｈ，ｓ，Ｈ−６（Ｌ）］，６．２３−６．２６
［２Ｈ，ｍ，Ｈ−８（Ｕ）およびＨ−６（Ｕ）］，６．
６２［２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２，８Ｈｚ，Ｈ−６′（Ｕ）お
よびＨ−６′（Ｌ）］，６．６６［１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝
８Ｈｚ，Ｈ−５（Ｕ）］，６．６９，６．７４［各１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，Ｈ−５′（Ｕ）およびＨ−５′
（Ｌ）］，６．８３［２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，Ｈ−２′
（Ｕ）およびＨ−２′（Ｌ）］． 注 １）上部ユニット、２）下部ユニット 以上のように、当該化合物Ａは、文献未記載の３′，
４′，７−ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎ−（４β
→８）−ｃａｔｅｃｈｉｎである。

【００２２】

【化３】

【００２３】実施例３（当該化合物Ｂの物理・化学的性
状） 実施例１の方法にて採取した化合物Ｂの性状を常法によ
り測定した結果、以下のようであった。

【００２４】（１）形状：淡褐色無晶形粉末。

【００２５】（２）旋光度：［α］_Ｄ−８５゜（ｃ＝
１，ＭｅＯＨ）。

【００２６】（３）ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：５６９（Ｍ
＋Ｎａ）（ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎｍｏｄｅ；ｍａｔ
ｒｉｘ，ｍ−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ
＋ＮａＣｌ）。

【００２７】（４）ＵＶ λｍａｘ^ＭｅＯＨｎｍ（ｌｏ
ｇ ε）：２８１（３．９９）。

【００２８】（５）^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ａｃ
ｅｔｏｎｅ−ｄ６＋Ｄ_２Ｏ） δ：１．８４，１．９７［計１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．
５，５．５，１２．５Ｈｚ，Ｈ＝３（Ｕ）］，２．４
８，２．６１［計１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９，１６Ｈｚ，Ｈ−
４（Ｌ）］，２．６０，２．７７［計１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１
２．５Ｈｚ，Ｈ−３（Ｕ）］，２．８４，２．９１［計
１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．５，１６Ｈｚ，Ｈ−４（Ｌ）］，
３．５６，４．０１［計１Ｈ，ｍ，Ｈ−３（Ｌ）］，
４．４３，４．６８［計１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ
−２（Ｌ）］，４．７５−４．８１［計１Ｈ，ｍ，Ｈ−
４（Ｕ）］，４．８８，４．９０［計１Ｈ，ｂｒ ｄ，
Ｊ＝１２．５Ｈｚ，Ｈ−２（Ｕ）］，６．００［１／２
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２，８Ｈｚ，Ｈ−６′（Ｕ）またはＨ−
６′（Ｌ）］，６．０２，６．１７［計１Ｈ，ｓ，Ｈ−
６（Ｌ）］，６．２０，６．３０［計１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
２．５，８．５Ｈｚ，Ｈ−６（Ｕ）］，６．２１−６．
２２［計１Ｈ，Ｈ−８（Ｕ）］，６．５３［１／２Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，Ｈ−２′（Ｕ）またはＨ−２′
（Ｌ）］，６．５７−６．８２｛計５Ｈ，Ｈ−５
（Ｕ），Ｈ−５′（Ｕ），Ｈ−５′（Ｌ），Ｈ−６′
（Ｕ），Ｈ−６′（Ｌ）およびＨ−２′（Ｕ）［または
Ｈ−２′（Ｌ）］｝，６．９１，６．９６［計１Ｈ，ｂ
ｒ ｓ，Ｈ−２′（Ｕ）またはＨ−２′（Ｌ）］． 以上のように、当該化合物Ｂは、文献未記載の３′，
４′，７−ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎ−（４α
→８）−ｃａｔｅｃｈｉｎである。

【００２９】

【化４】

【００３０】実施例４（当該化合物の酵素阻害作用） 当該化合物の一つである３′，４′，７−ｔｒｉｈｙｄ
ｒｏｘｙｆｌａｖａｎ−（４α→８）−ｃａｔｅｃｈｉ
ｎ（化合物Ｂ）のリパーゼ阻害効果を検討した。

【００３１】リパーゼ活性の測定は、基質に蛍光性の４
−メチルウンベリフェロンのオレイン酸エステル（４−
ＭＵ ｏｌｅａｔｅ）、酵素にブタ膵リパーゼを使用
し、反応によって生成した４−メチルウンベリフェロン
（４−ＭＵ）の蛍光を測定することによって行った。即
ち、小試験管に０．１ｍＭ ４−ＭＵ ｏｌｅａｔｅ懸
濁液１００μｌ、ブタ膵リパーゼ溶液５０μｌ（Ｍｃｌ
ｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ７．４））、緩衝液４５μ
ｌ、５０％テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）または試料の
５０％ＴＨＦ溶液５μｌをとり、３７℃で２０分間反応
後、０．１Ｎ塩酸１ｍｌを添加して反応を停止させ、
０．１Ｍクエン酸ナトリウム溶液を添加して溶液のｐＨ
を４．３付近に調整した後、反応によって生成した４−
メチルウンベリフェロンの蛍光強度を励起波長３２０ｎ
ｍ、蛍光波長４５０ｎｍで蛍光光度計により測定した。
阻害活性は、試料無添加の対照の活性を半分にする試料
添加量（ＩＣ_５０（μｇ））で示した。結果を図２に示
す。

【００３２】当該化合物Ｂは、リパーゼ活性を抑制し、
添加量の増加とともにリパーゼの活性が著しく阻害され
ることが認められた。

【００３３】当該化合物Ｂのリパーゼ阻害効果ＩＣ_５０
は０．６μｇであり、各種酵素阻害作用が知られる緑茶
の主成分であるエピガロカテキンガレート（ＩＣ_５０＝
１．０μｇ）よりも明らかに高い阻害効果が認められ
た。

【００３４】

【発明の効果】本発明に係る化合物は、体内酵素タンパ
ク質と結合することによって、その活性を低下させる性
質を有し、代謝調節剤として有用である。また、種々の
酵素作用を抑制し、食品などの酵素作用に起因する劣
化、例えば悪臭発生および物性低下を防止するのに利用
することができる。

【００３５】本発明に係る化合物は、飲用にも供される
カワラケツメイから採取したもので、安全性が高い。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の実施例１で行ったカワラケツメイから
当該新規化合物を分離する方法を示すフローチャート図
である。

【図２】本発明の実施例４で得られた実験結果につき、
当該化合物Ｂのリパーゼ活性に対する影響を示す特性線
図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊東 禧男 東京都清瀬市野塩３−26−11

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（１） 【化１】 で表される新規タンニン。