JP2018524313A

JP2018524313A - キネシンスピンドルタンパク質（ｋｓｐ）阻害剤の抗ｂ７ｈ３抗体との抗体薬物複合体

Info

Publication number: JP2018524313A
Application number: JP2017565689A
Authority: JP
Inventors: ラーチェン，ハンス−ゲオルク; レブストック，アンヌ−ソフィ; キャンチョ・グランデ，ヨランダ; ウィットロック，スヴェン; グリッツァン，ウーヴェ; パズ，ペドロ; フィッシャー，メラニー; フランツ，ユルゲン; グリュック，ジュリアン・マリウス; マルシュ，シュテファン; ステルト−ルートヴィヒ，ベアトリクス; マーラート，クリストフ; ウェーバー，エルンスト; グレーフェン，シモーヌ; ベルント，サンドラ
Original assignee: バイエルファーマアクチエンゲゼルシャフト
Priority date: 2015-06-23
Filing date: 2016-06-20
Publication date: 2018-08-30
Also published as: CN108025085A; WO2016207103A1; TW201713364A; CA2990408A1; EP3313525A1; US20180185510A1; AR108021A1

Abstract

本発明は、新規な抗体薬物複合体（ＡＤＣ）、前記ＡＤＣの活性代謝物、前記ＡＤＣの製造方法、疾患の治療および／または予防のための前記ＡＤＣの使用、ならびに疾患、特には過剰増殖性疾患および血管新生性疾患、例えば癌疾患の治療および／または予防のための医薬製造のための前記ＡＤＣの使用に関するものである。そのような治療は、単独療法として、または他の医薬もしくはさらなる治療手段との併用で行うことができる。
【選択図】なし

Description

緒言および最新技術
本発明は、キネシンスピンドルタンパク質阻害剤のバインダー薬剤複合体（ＡＤＣ）、これらＡＤＣの活性代謝物、これらＡＤＣの製造方法、疾患の治療および／または予防のためのこれらＡＤＣの使用、および疾患、特に過剰増殖性および／または血管新生障害、例えば癌疾患の治療および／または予防のための医薬を製造するためのこれらＡＤＣの使用に関する。そのような治療は、単独療法として、または他の医薬もしくはさらなる治療手段と組み合わせて行うことができる。

癌は、最も多様な組織の制御されない細胞増殖の結果である。多くの場合、新たな細胞が既存の組織に侵入し（浸潤性増殖）、またはそれらは離れた臓器に転移する。癌は、非常に多様な異なる臓器で生じ、多くの場合、組織特異的経過を辿る。従って、一般名称として「癌」という用語は、各種臓器、組織および細胞型の所定の疾患の大きい群を説明するものである。

早期の一部腫瘍は、外科手段および放射線療法手段によって摘出することができる。転移腫瘍は基本的に、化学療法によって対症的に治療可能なだけである。この場合の目的は、生活の質の向上および寿命延長の至適な組み合わせを達成することにある。

バインダータンパク質の１以上の活性化合物分子との複合体は、特に腫瘍関連抗原に向かうインターナライジング抗体がリンカーを介して細胞毒性薬に共有結合的に結合している抗体薬物複合体（ＡＤＣ）の形態で知られている。腫瘍細胞へのＡＤＣの導入と次に複合体の解離に続いて、細胞毒性薬自体またはそれから形成される細胞毒性代謝物が腫瘍細胞内で放出され、直接および選択的にそれの作用を発揮することができる。このようにして、従来の化学療法と対照的に、正常組織への損傷は、かなり狭い範囲に抑えられる［例えば、Ｊ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５，５４３−５４９（２００５）；Ａ．Ｍ．ＷｕａｎｄＰ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３，１１３７−１１４６（２００５）；Ｐ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３，２３５−２４４（２００９）；Ｌ．ＤｕｃｒｙａｎｄＢ．Ｓｔｕｍｐ，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２１，５−１３（２０１０）参照］。従って、ＷＯ２０１２／１７１０２０には、複数の担毒体分子が高分子リンカーを介して抗体に結合しているＡＤＣが記載されている。可能な担毒体として、ＷＯ２０１２／１７１０２０には、特に、物質ＳＢ７４３９２１、ＳＢ７１５９９２（イスピネシブ）、ＭＫ−０３７１、ＡＺＤ８４７７、ＡＺ３１４６およびＡＲＲＹ−５２０が挙げられている。

ＷＯ２０１２／１７１０２０

Ｊ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５，５４３−５４９（２００５）Ａ．Ｍ．ＷｕａｎｄＰ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３，１１３７−１１４６（２００５）Ｐ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１３，２３５−２４４（２００９）Ｌ．ＤｕｃｒｙａｎｄＢ．Ｓｔｕｍｐ，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２１，５−１３（２０１０）

最後に挙げた物質は、キネシンスピンドルタンパク質阻害剤である。キネシンスピンドルタンパク質（ＫＳＰ、Ｅｇ５、ＨｓＥｇ５、ＫＮＳＬ１またはＫＩＦ１１とも称される）は、双極性有糸分裂紡錘体が機能するのに必須のキネシン様モータータンパク質である。ＫＳＰの阻害によって有糸分裂停止となり、比較的長期間かけてアポトーシスに至る（Ｔａｏｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＣｅｌｌ２００５Ｊｕｌ８（１），３９−５９）。最初の細胞透過性ＫＳＰ阻害剤であるモナストロール発見後、ＫＳＰ阻害剤は新たな化学療法剤の種類として確立され（Ｍａｙｅｒｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２８６：９７１−９７４，１９９９）、多くの特許出願のテーマとなってきた（例えばＷＯ２００６／０４４８２５；ＷＯ２００６／００２２３６；ＷＯ２００５／０５１９２２；ＷＯ２００６／０６０７３７；ＷＯ０３／０６００６４；ＷＯ０３／０４０９７９；およびＷＯ０３／０４９５２７）。しかしながら、ＫＳＰは、有糸分裂期の比較的短期間中にのみそれの作用を発揮することから、ＫＳＰ阻害剤は、この相中に十分に高い濃度で存在していなければならない。ＷＯ２０１４／１５１０３０には、ある種のＫＳＰ阻害剤を含むＡＤＣが開示されている。

この背景に対して、本発明の目的は、比較的低濃度で投与した後に、アポトーシス作用を発揮することから、癌療法において有益であり得る物質を提供することにある。

この目的を達成するため、本発明は、グリコシル化または脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体と式（Ｉ）の化合物の１以上がリンカーＬを介して抗体に結合している下記の式（Ｉ）の化合物との複合体を提供する。この場合、脱グリコシル化抗体はＦｃ領域のＣＨ２ドメインにおける保存Ｎ−結合部位にグリカンを持たないことから、ＮＫ細胞には結合しない。従って、脱グリコシル化抗体は、ＮＫ細胞介在細胞傷害性を支援しない。その抗体は好ましくは、ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗体である。特に好ましいものは、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォーム、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体に特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体である。

式（Ｉ）：

式中、
Ｒ^１はＨ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば、−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷはＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジル；
Ｒ^２は、Ｈ、−ＭＯＤ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４はＨ、−Ｌ−＃１、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧ_ｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″によって１回もしくは複数回置換されていても良く（ｘは０または１であり、ｖは１から１０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）、開裂後に１級アミノ基が存在し（Ｒ^４＝Ｈに相当）；
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し、または−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１は−Ｈ、−ＮＨ_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
ＡはＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、ｎは０、１または２を表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、Ｃ_１−１０−アルキルを表す。）；
Ｒ^５は、Ｈ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＯＨまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し、
Ｒ^８は、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは−（ＣＨ_２）_０−２−（ＨＺ^２）を表し、ＨＺ^２はＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される２個以下のヘテロ原子を有する４から７員複素環を表し、これらの基のそれぞれは−ＯＨ、ＣＯ_２ＨまたはＮＨ_２によって置換されていても良く；
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
置換基Ｒ^１、Ｒ^３またはＲ^４のうちの一つがを表すか、（Ｒ^８の場合）−Ｌ−＃１を含み、
Ｌはリンカーを表し、＃１はバインダーもしくはそれの誘導体への結合を表し、
−ＭＯＤは−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０はＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−を表し（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）；
ｎは０または１を表し；
ｏは０または１を表し；
Ｇ２は直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（ＲｙはＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３は−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、基−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。

本発明による複合体は、化学的に不安定なリンカー、酵素的に不安定なリンカーまたは安定なリンカーを有することができる。特に好ましいものは、安定なリンカーおよびプロテアーゼによって開裂可能なリンカーである。

本発明はさらに、本発明による複合体、さらにはその製造のための前駆体および中間体の製造方法を提供する。

本発明による複合体の製造は、通常は、次の段階：
保護基を有していても良く、抗体にカップリング可能な反応性基を有するリンカー前駆体を製造する段階；
保護基を有していても良い式（Ｉ）のＫＳＰ阻害剤の誘導体への前記リンカー前駆体の結合（これらの式において、リンカーへの結合はまだ全くない。）によって、保護基を有していても良い反応性ＫＳＰ阻害剤／リンカー複合体を得る段階；
前記ＫＳＰ阻害剤／リンカー複合体に存在する保護基を除去する段階；および
前記ＫＳＰ阻害剤／リンカー複合体への前記抗体の結合によって、本発明による抗体／ＫＳＰ阻害剤複合体を得る段階
を含む。

反応性基の結合は、保護されていても良いＫＳＰ阻害剤／リンカー前駆体複合体の構築後に行うこともできる。

リンカーに応じて、結合後に、コハク酸イミド連結ＡＤＣを、図式２６に従って、有利な安定性プロファイルを有する開鎖コハク酸アミドに変換することができる。

上記で示したように、リンカー前駆体の低分子量ＫＳＰ阻害剤への結合は、式（Ｉ）におけるＲ^１、Ｒ^３またはＲ^４での水素原子のリンカーによる置換によるものであることができる。前記結合前の合成段階において、存在するいずれの官能基も、保護された形で存在していても良い。前記結合段階の前に、これらの保護基を公知のペプチド化学法によって除去する。その結合は、実施例における図式２０から３１で例示的に示されているように、各種経路によって化学的に行うことができる。特に、例えば置換を促進するための保護基もしくは脱離基の導入によって、リンカーへの結合のために低分子量ＫＳＰ阻害剤を修飾することが可能である場合がある。

特に、本発明は、抗Ｂ７Ｈ３抗体に結合した新規な低分子量ＫＳＰ阻害剤を提供する。これらのＫＳＰ阻害剤またはそれらの抗体複合体は、下記一般式（ＩＩ）を有し、ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーである。

式中、
Ｒ^１は、Ｈ、−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、Ｈ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し；
Ｗは、ＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２は、Ｈ、−ＭＯＤ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、
Ｒ^１１は、−Ｈ、−ＮＨ_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４はＨ、−Ｌ−バインダー、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧ_ｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から１０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によって１回もしくは複数回置換されていても良く、開裂後に１級アミノ基が存在し（Ｒ^４＝Ｈに相当）；
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
Ａは−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＨ−または−ＣＮＮＨ_２−を表し；
Ｒ^３は−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−バインダーまたはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、Ｃ_１−１０−アルキルを表す。）；
ｎは０、１または２を表し、
Ｒ^５はＨ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^８は、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは−（ＣＨ_２）_０−２−（ＨＺ^２）を表し、ＨＺ^２はＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される２個以下のヘテロ原子を有する４から７員複素環（好ましくはオキセタン）を表し、これらの基のそれぞれは−ＯＨ、ＣＯ_２ＨまたはＮＨ_２によって置換されていても良く；
Ｒ^９は、Ｈ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
Ｌはリンカーを表し、バインダーは脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、前記バインダーは複数の活性化合物分子に結合していても良く、
Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４のうちの一つの代表的なものは−Ｌ−バインダーを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＯＨまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し、
−ＭＯＤは−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０はＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−を表し（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）；
ｎは０または１を表し；
ｏは０または１を表し；
Ｇ２は直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（ＲｙはＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３は−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、基−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。

ヒト腎臓癌細胞株Ａ４９８における特異的Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ５７０６の内在化挙動を示す図である［２４時間にわたる蛍光標識Ｂ７Ｈ３抗体の内在化の動態的進行が示されている。標的非依存性内在化を検出するため、蛍光標識同位体対照を並行して用いた。詳細な実験条件は、Ｃ−２ｂに記載している（ｘ軸：時間（単位：時間）；ｙ軸：粒数／細胞）。］。配列リストである。

本発明は、ＴＰＰ−５７０６およびＴＰＰ−５７０６の脱グリコシル化および／またはヒト化変異体などの抗Ｂ７Ｈ３抗体と１以上の活性化合物分子との複合体を提供し、活性化合物分子はリンカーＬを介して抗体に結合したキネシンスピンドルタンパク質阻害剤（ＫＳＰ阻害剤）である。

本発明による複合体は、下記一般式によって表すことができる。

式中、バインダーはＴＰＰ−５７０６およびＴＰＰ−５７０６の脱グリコシル化および／またはヒト化変異体などの抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、Ｌはリンカーを表し、ＫＳＰはＫＳＰ阻害剤を表し、ｎは１から５０、好ましくは１．２から２０および特に好ましくは２から８の数字を表す。ここで、ｎはバインダー当たりのＫＳＰ阻害剤／リンカー複合体の数の平均である。好ましくは、ＫＳＰ−Ｌは、上記で示した式（Ｉ）を有する。さらに、リンカーは好ましくは、抗体の異なるアミノ酸に結合している。特に好ましいものは、バインダーの異なるシステイン残基への結合である。当該抗体は好ましくは、脱グリコシル化ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。

本発明に従って使用可能な抗体、本発明に従って使用可能なＫＳＰ阻害剤および制限なく組み合わせて使用可能な本発明に従って使用可能なリンカーについて、下記で説明する。特に、好ましいまたは特に好ましいものとして各場合で表されるバインダーを、好ましいまたは特に好ましいものとして各場合で表されるＫＳＰ阻害剤と組み合わせて、適宜に好ましいまたは特に好ましいものとして各場合で表されるリンカーと組み合わせて用いることができる。

ＫＳＰ阻害剤およびそれらのバインダー複合体
定義
「置換された」という用語は、指定の原子もしくは指定の基上の１以上の水素が、言及されている基からの選択によって置き換わっていることを意味するが、ただし、所定の状況下で、指定の原子の通常の価数を超えるものではない。置換基および／または可変要素の組み合わせが許容される。

「置換されていても良い」という用語は、置換基の数がゼロであるかゼロ以外であることができることを意味する。別段の断りがない限り、置換されていても良い基は、いずれか望ましい炭素もしくは窒素もしくは硫黄原子で水素原子に代えて非水素置換基とすることで収容できるだけの数の適宜の置換基によって置換されていても良い。通常、適宜の置換基（存在する場合）の数は、１、２、３、４または５、特には１、２または３であることができる。

例えば、本明細書で使用される場合、「モノ−または多−」という表現は、例えば本発明の一般式の化合物の置換基の定義において「１、２、３、４または５、好ましくは１、２、３または４、特に好ましくは１、２または３、特別に好ましくは１または２」を意味する。

本発明による化合物における残基が置換されている場合、その残基は、別段の断りがない限り、モノ置換または多置換されていることができる。本発明の保護の範囲において、多置換されている全ての残基の定義は、互いに独立である。好ましいものは、１個、２個もしくは３個の同一もしくは異なる置換基による置換である。１個の置換基による置換が特に好ましい。

アルキル
アルキルは、１から１０個の炭素原子（Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル）、通常は１から６（Ｃ_１−Ｃ_６−アルキル）、好ましくは１から４（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）および特に好ましくは１から３個の炭素原子（Ｃ_１−Ｃ_３−アルキル）を有する直鎖もしくは分岐の飽和１価炭化水素残基である。

好ましい例には、メチル−、エチル−、プロピル−、ブチル−、ペンチル−、ヘキシル−、イソプロピル−、イソブチル−、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル−、イソペンチル−、２−メチルブチル−、１−メチルブチル−、１−エチルプロピル−、１，２−ジメチルプロピル−、ネオペンチル−、１，１−ジメチルプロピル−、４−メチルペンチル−、３−メチルペンチル−、２−メチルペンチル−、１−メチルペンチル−、２−エチルブチル−、１−エチルブチル−、３，３−ジメチルブチル−、２，２−ジメチルブチル−、１，１−ジメチルブチル−、２，３−ジメチルブチル−、１，３−ジメチルブチル−および１，２−ジメチルブチル−などがある。

特に好ましいものは、メチル−、エチル−、プロピル−、イソプロピル−およびｔｅｒｔ−ブチル残基である。

ヘテロアルキル
ヘテロアルキルは、１から１０個の炭素原子を有する直鎖および／または分岐の炭化水素鎖であって、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲｙＮＲｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−のうちの１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖を含む前記炭化水素鎖がある場合、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ_２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い炭化水素鎖である。

ここで、Ｒｙは各場合で、−Ｈ、フェニル−、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル−、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニル−またはＣ２−Ｃ１０−アルキニル−であり、それは、次に、それぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ_２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

ここで、Ｒｘは−Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−またはフェニル−である。

アルケニル
アルケニルは、１個もしくは２個の二重結合および２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０個の炭素原子（Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニル）、特には２もしくは３個の炭素原子（Ｃ_２−Ｃ_３−アルケニル）を有する直鎖もしくは分岐の１価炭化水素鎖であり、アルケニル基が複数の二重結合を含む場合、それらの二重結合は、互いに離れているか、互いに共役していることができることは明らかである。アルケニル基は、例えば、エテニル（またはビニル）、プロパ−２−エン−１−イル（または「アリル」）、プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−３−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−１−エニル、ペンタ−４−エニル、ペンタ−３−エニル、ペンタ−２−エニル、ペンタ−１−エニル、ヘキサ−５−エニル、ヘキサ−４−エニル、ヘキサ−３−エニル、ヘキサ−２−エニル、ヘキサ−１−エニル、プロパ−１−エン−２−イル（または「イソプロペニル」）、２−メチルプロパ−２−エニル、１−メチルプロパ−２−エニル、２−メチルプロパ−１−エニル、１−メチルプロパ−１−エニル、３−メチルブタ−３−エニル、２−メチルブタ−３−エニル、１−メチルブタ−３−エニル、３−メチルブタ−２−エニル、２−メチルブタ−２−エニル、１−メチルブタ−２−エニル、３−メチルブタ−１−エニル、２−メチルブタ−１−エニル、１−メチルブタ−１−エニル、１，１−ジメチルプロパ−２−エニル、１−エチルプロパ−１−エニル、１−プロピルビニル、１−イソプロピルビニル、４−メチルペンタ−４−エニル、３−メチルペンタ−４−エニル、２−メチルペンタ−４−エニル、１−メチルペンタ−４−エニル、４−メチルペンタ−３−エニル、３−メチルペンタ−３−エニル、２−メチルペンタ−３−エニル、１−メチルペンタ−３−エニル、４−メチルペンタ−２−エニル、３−メチルペンタ−２−エニル、２−メチルペンタ−２−エニル、１−メチルペンタ−２−エニル、４−メチルペンタ−１−エニル、３−メチルペンタ−１−エニル、２−メチルペンタ−１−エニル、１−メチルペンタ−１−エニル、３−エチルブタ−３−エニル、２−エチルブタ−３−エニル、１−エチルブタ−３−エニル、３−エチルブタ−２−エニル、２−エチルブタ−２−エニル、１−エチルブタ−２−エニル、３−エチルブタ−１−エニル、２−エチルブタ−１−エニル、１−エチルブタ−１−エニル、２−プロピルプロパ−２−エニル、１−プロピルプロパ−２−エニル、２−イソプロピルプロパ−２−エニル、１−イソプロピルプロパ−２−エニル、２−プロピルプロパ−１−エニル、１−プロピルプロパ−１−エニル、２−イソプロピルプロパ−１−エニル、１−イソプロピルプロパ−１−エニル、３，３−ジメチルプロパ−１−エニル、１−（１，１−ジメチルエチル）エテニル、ブタ−１，３−ジエニル、ペンタ−１，４−ジエニルまたはヘキサ−１−５−ジエニル基である。その基は特にはビニルまたはアリルである。

アルキニル
アルキニルは三重結合を有し、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０個の炭素原子（Ｃ_２−Ｃ_１０−アルキニル）、特には２もしくは３個の炭素原子（Ｃ_２−Ｃ_３−アルキニル）を有する直鎖もしくは分岐の１価炭化水素鎖である。Ｃ_２−Ｃ_６−アルキニル基は、例えば、エチニル、プロパ−１−イニル、プロパ−２−イニル（またはプロパルギル）、ブタ−１−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、ペンタ−１−イニル、ペンタ−２−イニル、ペンタ−３−イニル、ペンタ−４−イニル、ヘキサ−１−イニル、ヘキサ−２−イニル、ヘキサ−３−イニル、ヘキサ−４−イニル、ヘキサ−５−イニル、１−メチルプロパ−２−イニル、２−メチルブタ−３−イニル、１−メチルブタ−３−イニル、１−メチルブタ−２−イニル、３−メチルブタ−１−イニル、１−エチルプロパ−２−イニル、３−メチルペンタ−４−イニル、２−メチルペンタ−４−イニル、１−メチルペンタ−４−イニル、２−メチルペンタ−３−イニル、１−メチルペンタ−３−イニル、４−メチルペンタ−２−イニル、１−メチルペンタ−２−イニル、４−メチルペンタ−１−イニル、３−メチルペンタ−１−イニル、２−エチルブタ−３−イニル、１−エチルブタ−３−イニル、１−エチルブタ−２−イニル、１−プロピルプロパ−２−イニル、１−イソプロピルプロパ−２−イニル、２，２−ジメチルブタ−３−イニル、１，１−ジメチルブタ−３−イニル、１，１−ジメチルブタ−２−イニル−または３，３−ジメチルブタ−１−イニル基である。アルキニル基は特には、エチニル、プロパ−１−イニルまたはプロパ−２−イニルである。

シクロアルキル
シクロアルキルは、３から１２個の炭素原子を有する飽和の１価単環式もしくは二環式炭化水素残基（Ｃ_３−Ｃ_１２−シクロアルキル）である。

ここで、単環式炭化水素残基は、通常は３から１０個（Ｃ_３−Ｃ_１０−シクロアルキル）、好ましくは３から８個（Ｃ_３−Ｃ_８−シクロアルキル）、特に好ましくは３か７個（Ｃ_３−Ｃ_７−シクロアルキル）の炭素原子を有する１価炭化水素残基である。

単環式炭化水素残基の好ましい例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルなどがある。

特に好ましいものは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルである。

ここで、二環式炭化水素残基は、２個の直接隣接する原子を一緒に共有する二つの飽和環系の縮合と理解されるべき、通常は３から１２個の炭素原子を有する炭化水素残基（Ｃ_３−Ｃ_１２−シクロアルキル）である。二環式炭化水素残基の好ましい例には、ビシクロ［２．２．０］ヘキシル、ビシクロ［３．３．０］オクチル、ビシクロ［４．４．０］デシル、ビシクロ［５．４．０］ウンデシル、ビシクロ［３．２．０］ヘプチル、ビシクロ［４．２．０］オクチル、ビシクロ［５．２．０］ノニル、ビシクロ［６．２．０］デシル、ビシクロ［４．３．０］ノニル、ビシクロ［５．３．０］デシル、ビシクロ［６．３．０］ウンデシルおよびビシクロ［５．４．０］ウンデシルなどがある。。

複素環アルキル
複素環アルキルは、同一であるか異なっていることができる１個、２個、３個もしくは４個のヘテロ原子を有する非芳香族単環式もしくは二環式環系である。そのヘテロ原子は、窒素原子、酸素原子または硫黄原子であることができる。

本発明による単環式環系は、３から８個、好ましくは４から７個、特に好ましくは５個もしくは６個の環原子を有することができる。

９
３個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アジリジニルなどがある。

４個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アゼチジニル、オキセタニルなどがある。

５個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ジオキソラニルおよびテトラヒドロフラニルなどがある。

６個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホニル、ジオキサニル、テトラヒドロピラニルおよびチオモルホニルなどがある。

７個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、アゼパニル、オキセパニル、１，３−ジアゼパニル、１，４−ジアゼパニルなどがある。

８個の環原子を有する複素環アルキルの好ましい例には、オキソカニル、アゾカニルなどがある。

単環式複素環アルキルは好ましくは、Ｏ、ＮおよびＳのシリーズからの２個以下のヘテロ原子を有する４から７員の飽和複素環残基である。

特に好ましいものは、モルホニル、ピペリジニル、ピロリジニルおよびテトラヒドロフラニルである。

同一であっても異なっていても良い１個、２個、３個もしくは４個のヘテロ原子を有する二環式環系は、本発明によれば、６から１２個、好ましくは６から１０個の環原子を有することができ、１個、２個、３個もしくは４個の炭素原子がＯ、ＮおよびＳのシリーズからの同一もしくは異なるヘテロ原子によって置き換わっていることができる。

例としては、アザビシクロ［３．３．０］オクチル、アザビシクロ［４．３．０］ノニル、ジアザビシクロ［４．３．０］ノニル、オキサザビシクロ［４．３．０］ノニル、チアザビシクロ［４．３．０］ノニルまたはアザビシクロ［４．４．０］デシル、さらには定義によるさらなる可能な組み合わせから誘導される残基などがある。

特に好ましいものは、パーヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロリル、パーヒドロフロ［３，２−ｃ］ピリジニル、パーヒドロピロロ［１，２−ａ］ピラジニル、パーヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピロリルおよび３，４−メチレンジオキシフェニルである。

アリール
アリールは、炭素原子からなる１価単環式もしくは二環式芳香族環系である。例としては、ナフチルおよびフェニルがあり、好ましいものはフェニルまたはフェニル残基である。

Ｃ _６ −Ｃ _１０ −アラルキル
本発明の範囲におけるＣ_６−１０−アラルキルは、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル基が結合している単環式芳香族アリール、例えばフェニルである。

Ｃ_６−１０−アラルキル基の例にはベンジルがある。

ヘテロアリール
ヘテロアリールは、少なくとも１個の環ヘテロ原子および適宜に１個、２個もしくは３個のＮ、ＯおよびＳの群からのさらなる環ヘテロ原子を含み、環炭素原子を介してまたは適宜に（価数が許す場合）環窒素原子を介して結合している５、６、８、９、１０、１１、１２、１３または１４個の環原子（「５から１４員ヘテロアリール」基）、特には５、６、９または１０個の環原子を意味するものと理解される１価の単環式、二環式もしくは三環式芳香族環系を意味する。

ヘテロアリール基は、５員ヘテロアリール基、例えば、チエニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリルまたはテトラゾリル；または６員ヘテロアリール基、例えば、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニルまたはトリアジニル；または三環式ヘテロアリール基、例えばカルバゾリル、アクリジニルもしくはフェナジニル；または９員ヘテロアリール基、例えばベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、インドリジニルもしくはプリニル；または１０員ヘテロアリール基、例えばキノリニル、キナゾリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キノキサリニルまたはプテリジニルであることができる。

概して、そして別段の断りがなければ、ヘテロアリール残基は、それの全ての可能な異性体型、例えば互変異体および分子の残りの部分への結合箇所に関しての位置異性体を含む。従って、例示的な非限定的例として、ピリジニルという用語は、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イルおよびピリジン−４−イルを包含し、またはチエニルという用語はチエン−２−イルおよびチエン−３−イルを包含する。

Ｃ _５ −Ｃ _１０ −ヘテロアリール
本発明の範囲でのＣ_５−１０−ヘテロアリールは、同一であっても異なっていても良い１個、２個、３個もしくは４個のヘテロ原子を有する単環式もしくは二環式芳香族環系である。ヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（＝Ｏ）および／またはＳ（＝Ｏ）_２であることができる。結合価は、いずれの芳香族炭素原子または窒素原子にあっても良い。

本発明による単環式ヘテロアリール残基は、５または６個の環原子を有する。好ましいものは、１個もしくは２個のヘテロ原子を有するヘテロアリール残基である。特に好ましいのは、この場合、１個もしくは２個の窒素原子である。

５個の環原子を有するヘテロアリール残基には、例えば、次の環：チエニル、チアゾリル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルおよびチアジアゾリルなどがある。

６個の環原子を有するヘテロアリール残基には、例えば、次の環：ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニルおよびトリアジニルなどがある。

本発明による二環式ヘテロアリール残基は、９または１０個の環原子を有する。

９個の環原子を有するヘテロアリール残基には、例えば、次の環：フタリジル、チオフタリジル、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、アゾシニル、インドリジニル、プリニル、インドリニルなどがある。

１０個の環原子を有するヘテロアリール残基には、例えば、次の環：イソキノリニル、キノリニル、キノリジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、シンノリニル、フタラジニル、１，７−および１，８−ナフチリジニル、プテリジニル、クロマニルなどがある。

ヘテロアルコキシ
ヘテロアルコキシは、１から１０個の炭素原子を有する直鎖および／または分岐の炭化水素鎖であって、−Ｏ−を介して分子の残り部分に結合しており、さらに基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−の１以上によってさらに１回もしくは複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合にそれを含む炭化水素鎖が−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ_２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い炭化水素鎖である。

ここで、Ｒ^ｙは各場合で、−Ｈ、フェニル、Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_１０−アルキニルであり、それらは次に、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＮＨ_２）−、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

ここで、Ｒｘは、−Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルである。

本発明の範囲におけるハロゲンまたはハロゲン原子はフッ素（−Ｆ）、塩素（−Ｃｌ）、臭素（−Ｂｒ）またはヨウ素（−Ｉ）である。

フルオロアルキル、フルオロアルケニルおよびフルオロアルキニルは、アルキル、アルケニルおよびアルキニルが、フッ素によってモノ置換もしくは多置換されていても良いことを意味する。

ＫＳＰ阻害剤の抗体への結合は、実施例における図式２０から３１で例示的に示されているように、各種経路によって化学的に行うことができる。特に、例えば置換を促進するための保護基もしくは脱離基の導入によって、リンカーへの結合のために低分子量ＫＳＰ阻害剤を修飾することが可能である場合がある（その反応において、水素原子ではない前記脱離基がリンカーによって置換される。）。次に、このようにして得られたＫＳＰ阻害剤−リンカー分子（そのリンカーはバインダーへの結合に関して反応性基を有する。）をバインダーと反応させることで、本発明によるバインダー複合体を得ることができる。実験の部において、この手順を、非常に多くの実施例によって例示的に説明する。

他の特に好ましい化合物は、下記の式（Ｉ）または（Ｉａ）を有するものである。

式（Ｉ）ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

式中、
Ｒ^１はＨ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷはＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２はＨ、−ＭＯＤ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４はＨ、−Ｌ−＃１、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧ_ｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは、−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から２０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によって１回または複数回多置換されていても良く；
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
ＡはＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３は−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ（（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１−２０Ｈ）基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、ｎは０、１または２を表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は、好ましくはＣ_１−１０−アルキルである。）；
Ｒ^５は、Ｈ、−ＭＯＤ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＯＨまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し、
Ｒ^８は、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは−（ＣＨ_２）_０−２−（ＨＺ^２）を表し、ＨＺ^２はＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される２個以下のヘテロ原子を有する４から７員複素環（好ましくはオキセタン）を表し、これらの基のそれぞれは−ＯＨ、ＣＯ_２ＨまたはＮＨ_２によって置換されていても良く；
置換基Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４のうちの一つは−Ｌ−＃１を表し、
Ｌはリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表し、
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
−ＭＯＤは−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０はＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−または

（式中、Ｇ１が−ＮＨＣＯ−または

を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）を表し；
ｎは０または１を表し；
ｏは０または１を表し；
Ｇ２は直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（Ｒｙは、Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３は−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、基−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。

式（Ｉ）の好ましい実施形態において、置換基Ｒ^１またはＲ^３のうちの一つは−Ｌ−＃１を表す。この実施形態において、Ｒ^４がＨまたは−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′を表し、ＳＧ_ｌｙｓおよびＲ^４′が上記と同じ意味を有する場合が特に好ましい。式（Ｉ）の別の好ましい実施形態において、置換基Ｒ^４は−Ｌ−＃１を表し、前記リンカーは、Ｒ^４に結合している窒素原子で開裂できることで、開裂後に１級アミノ基が存在するようにするリンカーである（Ｒ^４＝Ｈに相当）。そのような開裂可能な基について、下記で詳細に説明する。

Ｒ^１がＨを表さない場合、Ｒ^１が結合している炭素原子は、Ｌおよび／またはＤ配置で、好ましくはＬ配置で存在し得る立体中心である。

Ｒ^２がＨを表さない場合、Ｒ^２が結合している炭素原子は、Ｌおよび／またはＤ配置で存在しても良い立体中心である。

式（Ｉａ）ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

式中、
Ｒ^１はＨ、−Ｌ−＃１または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷはＨまたはＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、
Ｒ^２およびＲ^４は互いに独立に、Ｈ、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それらは、−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から２０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によって１回もしくは複数回置換されていても良く；
またはＲ^２およびＲ^４が一体となって、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し（ピロリジン環の形成）、Ｒ^１１はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；またはＲ^２はＨ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｒ^４は−Ｌ−＃１を表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ_１Ｙ_２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は互いに独立に、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^４は−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
ＡはＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨを表し；
Ｒ^３は置換されていても良いアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、ｎは０、１または２を表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、Ｃ_１−１０−アルキルを表す。）；
Ｒ^５はＨ、Ｆ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し、
Ｒ^８は（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは置換されていても良いオキセタンを表し；
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表す。

Ｒ^１、Ｒ^３またはＲ^４での水素原子の置換により、置換基Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４のいずれも−Ｌ−＃１を表さない式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物を当業者に公知の方法でリンカーに結合させることができる。これによって、置換基Ｒ^１、Ｒ^３またはＲ^４のうちの一つが−Ｌ−＃１を表し、Ｌがリンカーを表し、＃１が抗体への結合を表す式（Ｉ）または（Ｉａ）の複合体が得られる。そこで、式（Ｉ）または（Ｉａ）によるＫＳＰ阻害剤がバインダーと結合している場合、置換基Ｒ^１、Ｒ^３またはＲ^４のうちの一つが−Ｌ−＃１を表し、Ｌはリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表す。すなわち、その複合体の場合、置換基Ｒ^１、Ｒ^３またはＲ^４のうちの一つが−Ｌ−＃１を表し、−Ｌ−＃１は抗体への結合を表す。式（Ｉ）または（Ｉａ）の好ましい実施形態において、置換基Ｒ^１またはＲ^３のうちの一つが−Ｌ−＃１を表す。この実施形態において、Ｒ^４がＨまたは−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′を表し、ＳＧ_ｌｙｓおよびＲ^４′が上記と同じ意味を有する場合が特に好ましい。式（Ｉ）の別の好ましい実施形態において、置換基Ｒ^４は−Ｌ−＃１を表し、リンカーは、Ｒ^４に結合している窒素原子で開裂できることで、開裂後に１級アミノ基が存在するようにできる（Ｒ^４＝Ｈに相当）リンカーである。そのような開裂可能な基について、下記で詳細に説明する。そのバインダーは好ましくは、ヒト、ヒト化またはキメラモノクローナル抗体またはそれの抗原結合性断片である。その抗体は好ましくは、脱グリコシル化ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗Ｂ７Ｈ３抗体である。特に好ましいものは、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。

−Ｌ−＃１に代えて、化合物中に基−Ｌ−＃３が存在することも可能であり、Ｌはリンカーを表し、＃３は抗体への結合のための反応性基を表す。−Ｌ−＃３を含む化合物は、抗体と反応する反応性化合物である。＃３は好ましくは、アミノまたはチオール基と反応して共有結合を形成する、好ましくはタンパク質中のシステイン残基と反応する基である。タンパク質中のシステイン残基は、タンパク質中に天然に存在することができるか、生化学的方法によって導入することができるか、好ましくは、バインダーのジスルフィドの事前の還元によって発生させることができる。

Ａに関しては、好ましいものはＣＯ（カルボニル）である。

Ｒ^１について好ましいものは、−Ｌ−＃１、Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２、−ＣＯＮＺ″（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２および−ＣＯＮＺ″ＣＨ_２ＣＯＯＨであり、Ｚ″はＨまたはＮＨ_２を表す。

Ｒ^２およびＲ^４について好ましいものはＨであるか、Ｒ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨを表す。Ｒ^４については、−Ｌ−＃１も好ましく、−Ｌ−＃１は開裂可能なリンカー、好ましくは細胞内で酵素によって開裂し得るリンカーである。

Ｒ^３について好ましいものは−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル−であり、それは−ＯＨ、Ｏ−アルキル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル、ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）_２またはＮＨ_２（アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルである。）によって置換されていても良い。

Ｒ^５について好ましいものはＨまたはＦである。

Ｒ^６およびＲ^７について好ましいものは、互いに独立に、Ｈ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−３−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−４−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンである。

Ｒ^８について好ましいものは、分岐のＣ_１−５−アルキル基、特には式−Ｃ（ＣＨ_３）_２−（ＣＨ_２）_０−２−Ｒｙの基（Ｒｙは−Ｈ、−ＯＨ、ＣＯ_２ＨまたはＮＨ_２を表す。）、または（フッ素化されていても良い）Ｃ_５−７−シクロアルキルである。特に好ましいものは、式−Ｃ（ＣＨ_３）_３またはシクロヘキシル基の基である。

Ｒ^９について好ましいものは、ＨまたはＦである。

特別に好ましいものは、
ＡがＣＯ（カルボニル）を表し；
Ｒ^１がＨ、−Ｌ−＃１、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２、−ＣＯＮＺ″（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２または−ＣＯＮＺ″ＣＨ_２ＣＯＯＨを表し、Ｚ″がＨまたはＮＨ_２を表し；
Ｒ^２およびＲ^４がＨを表すか、Ｒ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１がＨを表し；またはＲ^４が−Ｌ−＃１を表し、Ｒ^２がＨを表し；
Ｒ^３が、−Ｌ−＃１またはフェニル基（それは、ハロゲン（特にはＦ）またはフッ素化していても良いＣ_１−３−アルキルによってモノ置換もしくは多置換されていても良い。）を表し、または−ＯＹ^４、−ＳＹ^４、−Ｏ−ＣＯ−Ｙ^４、−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−Ｙ^４、ＮＨ−ＣＯ−Ｙ^４、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−Ｙ^４、Ｓ（Ｏ）_ｎ−Ｙ^４（ｎは０、１または２を表す。）、−ＳＯ_２−ＮＨ−Ｙ^４、ＮＨ−Ｙ^４またはＮ（Ｙ^４）_２によって置換されていても良いフッ素化していても良いＣ_１−１０−アルキル基を表し、Ｙ^４がＨ、フェニル（ハロゲン（特にはＦ）またはフッ素化していても良いＣ_１−３−アルキルによってモノ置換もしくは多置換されていても良い。）、またはアルキル（当該アルキル基は、−ＯＨ、−ＣＯＯＨおよび／または−ＮＨＣＯ−Ｃ_１−３−アルキルによって置換されていても良く、アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルを表す。）を表し；
特に好ましくは、Ｒ^３が−ＯＨ、Ｏ−アルキル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル、ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）_２またはＮＨ_２によって置換されていても良く（アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルを意味する。）；ｎが０、１もしくは２を表し；
Ｒ^５がＨまたはＦを表し；
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、Ｈ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−３−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−４−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し；
Ｒ^８が分岐Ｃ_１−５−アルキル基またはシクロヘキシルを表し；
Ｒ^９がＨまたはＦを表す、式（Ｉ）の化合物または（Ｉａ）である。

さらに、（単独でまたは組み合わせて）
Ｒ^１が−Ｌ−＃１、ＣＯＯＨまたはＨを表し、
Ｒ^２およびＲ^４がＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し（Ｒ^１１はＨを表す。）、またはＲ^４が−Ｌ−＃１を表し、Ｒ^２がＨを表し；
ＡがＣＯを表し、
Ｒ^３が、−（ＣＨ_２）ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨ、−ＣＨ_２ＳＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＮＨＣＯＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＣＨ_３、フェニル基（１から３個のハロゲン原子、１から３個のアミノ基または１から３個のアルキル基（ハロゲン化されていても良い）によって置換されていても良い。）を表し、または−Ｌ−＃１を表し、
Ｒ^５がＨを表し、
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、Ｈ、Ｃ_１−３−アルキルまたはハロゲンを表し；特には、Ｒ^６およびＲ^７がＦを表し；
Ｒ^８がＣ_１−４−アルキル（好ましくはｔｅｒｔ−ブチル）またはシクロヘキシルを表し；および／または
Ｒ^９がＨを表す場合が好ましい。

さらに、本発明によれば、
Ｒ^１が−Ｌ−＃１、ＣＯＯＨまたはＨを表し、
Ｒ^２およびＲ^４がＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し（Ｒ^１１はをＨ表す。）、
ＡがＣＯを表し、
Ｒ^３が、−（ＣＨ_２）ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨ、−ＣＨ_２ＳＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＮＨＣＯＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＣＨ_３、フェニル基（１から３個のハロゲン原子、１から３個のアミノ基または１から３個のアルキル基（ハロゲン化されていても良い）によって置換されていても良い。）を表し、または−Ｌ−＃１を表し、
Ｒ^５がＨを表し、
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、Ｈ、Ｃ_１−３−アルキルまたはハロゲンを表し；特には、Ｒ^６およびＲ^７がＦを表し；
Ｒ^８がＣ_１−４−アルキル（好ましくはｔｅｒｔ−ブチル）を表し；
Ｒ^９がＨを表す場合が好ましい。

他の特に好ましい化合物は、下記式式（ＩＩ）または（ＩＩａ）を有する。

式（ＩＩ）：ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

式中、
Ｒ^１はＨ、−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷはＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２はＨ、−ＭＯＤ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し、
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^４はＨ、−Ｌ−バインダー、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは、−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から１０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によって１回もしくは複数回置換されていても良く；
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１０−または−ＣＨＲ^１０−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１０はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨまたはＯＨを表し；
ＡはＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−バインダーまたはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、を表す。Ｃ_１−１０−アルキル）；
Ｒ^５は、Ｈ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＯＨまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し、
Ｒ^８は、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは−（ＣＨ_２）_０−２−（ＨＺ^２）を表し、ＨＺ^２はＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される２個以下のヘテロ原子を有する４から７員複素環を表し、これらの基のそれぞれは−ＯＨ、ＣＯ_２ＨまたはＮＨ_２によって置換されていても良く；
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
−ＭＯＤは−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０はＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−を表し（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）；
ｎは０または１を表し；
ｏは０または１を表し；
Ｇ２は直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（ＲｙはＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、基−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。

式（ＩＩ）のＫＳＰ阻害剤のバインダー複合体の場合、Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４のうちの多くとも一つの代表的なもの（上記の条件のうちの一つに代わって）が−Ｌ−バインダーを表すことができ、Ｌはリンカーを表し、バインダーは抗体を表し、その抗体は複数の活性化合物分子に結合していても良い。

式（ＩＩａ）ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

式中、
Ｒ^１は−Ｌ−バインダー、Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し；ＷはＨまたはＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２およびＲ^４は互いに独立に、Ｈ、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表すか、Ｒ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、またはＲ^２がＨ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｒ^４は−Ｌ−＃１を表し、Ｒ^１１はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
ＳＧ_ｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは、−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から１０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によって１回もしくは複数回置換されていても良く；
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ａは、ＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−バインダーまたは置換されていても良いアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−バインダーまたはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、Ｃ_１−１０−アルキルを表す。）；
Ｒ^５はＨ、Ｆ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｌはリンカーを表し、バインダーはバインダーまたはそれの誘導体を表し、前記バインダーは複数の活性化合物分子に結合していても良く、
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し、
Ｒ^８は（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは置換されていても良いオキセタンを表し；
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表す。

本発明による好ましいものは、さらに、下記のＫＳＰ阻害剤／抗体複合体である。

式（ＩＩｂ）：

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は式（ＩＩ）もしくは（ＩＩａ）でのものと同じ意味を有し、ＡはＣＯを表し、Ｂは単結合、−Ｏ−ＣＨ_２−または−ＣＨ_２−Ｏ−を表し、Ｒ^２０はＮＨ_２、Ｆ、ＣＦ_３またはＣＨ_３を表し、ｎは０、１または２を表す。

式（ＩＩｃ）：

式中、Ａ、Ｒ^１、Ｒ^３、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は式（ＩＩ）もしくは（ＩＩａ）でのものと同じ意味を有し、Ａは好ましくはＣＯを表し、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨまたはＣＨ（ＣＨ_３）ＯＣＨ_３を表す。

式（ＩＩｄ）：

式中、Ａ、Ｒ^３、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は式（ＩＩ）もしくは（ＩＩａ）でのものと同じ意味を有し、Ａは好ましくはＣＯを表し、Ｒ^３は−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨを表し、ｘは０または１を表し、Ｙ^５はＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６はＨまたは−ＣＯＣＨ_３を表す。

式（ＩＩｅ）：

式中、Ａ、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は式（ＩＩ）もしくは（ＩＩａ）でのものと同じ意味を有し、Ｒ^１は−Ｌ−バインダーを表す。

式（ＩＩｉ）：

式中、Ａ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は式（ＩＩ）もしくは（ＩＩａ）でのものと同じ意味を有し、Ｒ^４は−Ｌ−バインダー、好ましくは、開裂後にＲ^４＝Ｈとなるように酵素的に開裂可能なバインダーを表す。

式（ＩＩｊ）：

式中、
Ｒ^３は−Ｌ−＃１を表し；
ＡはＣＯを表し；
Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、式（Ｉ）でのものと同じ意味を有する。

式（ＩＩｋ）：

式中、
Ｒ^１は−Ｌ−＃１を表し；
ＡはＣＯを表し、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＯＨを表し；
Ｒ^３、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、式（Ｉ）でのものと同じ意味を有する。

さらに、式（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）および（ＩＩｋ）の化合物において（単独でまたは組み合わせて）、
ＺがＣｌまたはＢｒを表し；
Ｒ^１が−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−ＣＯＯＨまたは−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２を表し、Ｙ^２が−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^１がＨ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_３−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し、Ｙ^４基の一方がｉ−プロピルを表し、他方が−（ＣＨ_２）_３−ＮＨＣＯＮＨ_２を表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し、Ｙ^４基の一方が−ＣＨ_３を表し、他方が−（ＣＨ_２）_３−ＮＨＣＯＮＨ_２を表し；
Ｙ^４が−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
少なくとも一方のＹ^４の代表的なものがｉ−プロピルおよび−ＣＨ_３からなる群から選択され；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−ＣＯＮＨＣＨＹ^４ＣＯＯＨを表し、Ｙ^４が−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｙ^４がアミノベンジルを表し；
Ｒ^２が−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−ＳＹ^３を表し；
Ｒ^４が−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５を表し、Ｙ^５がＨを表し；
Ｒ^４が−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５を表し、Ｙ^５が−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し；
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表す場合が好ましい。

さらに、式（Ｉ）または（ＩＩ）において、Ｒ^１、Ｒ^２またはＲ^３が−ＭＯＤを表す場合が好ましい。

特に好ましくは、Ｒ^３は−ＭＯＤを表し、Ｒ^１は−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダーを表し、
−ＭＯＤは−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０はＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）を表し；
ｎは０または１を表し；
ｏは０または１を表し；
Ｇ２は直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（ＲｙはＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖は、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３は−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、基−ＭＯＤは好ましくは少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。

特に好ましくは、基−ＭＯＤは、例えばベタイン基において（好ましくは末端）−ＣＯＯＨ基を有する。好ましくは、基−ＭＯＤは、式−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨを有し、ｘは０または１であり、Ｙ^５はＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６はＨまたは−ＣＯＣＨ_３を表す。

他の特に好ましい化合物は、下記の式（ＩＩＩ）を有し、ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーである。

式中、
Ｒ^１は−Ｌ−バインダー、Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２およびＲ^４は互いに独立に、Ｈ、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表し；
ＳＧ_ｌｙｓはリソソーム酵素によって開裂され得る基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、Ｒ^４′はＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは、−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、Ｎ（アルキル）−ＣＯアルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｙ−Ｒ^４″（ｘは０または１であり、ｖは１から１０の数字であり、Ｒ^４″は−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨまたは−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２である。）によってモノ置換もしくは多置換されていても良く；
Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５はＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６は直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
ＡはＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３は−Ｌ−バインダーまたは置換されていても良いアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、または−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨを表し、ｘは０または１を表し、Ｙ^５はＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６はＨまたは−ＣＯＣＨ_３、好ましくは−Ｌ−バインダーまたはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それは１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくは、を表す。Ｃ_１−１０−アルキル）；
Ｒ^５はＨ、Ｆ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚは−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３はＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′はＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｌはリンカーを表し、バインダーは抗体を表し、前記バインダーは複数の活性化合物分子に結合していても良く、
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し、
Ｒ^８は（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは置換されていても良いオキセタンを表し；
Ｒ^９はＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表す。

さらに、（単独でまたは組み合わせて）式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）、（ＩＩｋ）または（ＩＩＩ）において、
ＺがＣｌまたはＢｒを表し；
Ｒ^１が−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２を表し、Ｙ^２が−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^１がＨ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_３−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′がを−ＣＯＯＨ表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し、一方のＹ^４を代表するものがｉ−プロピルを表し、他方が−（ＣＨ_２）_３−ＮＨＣＯＮＨ_２を表し；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−（ＣＯＮＨＣＨＹ^４）_２ＣＯＯＨを表し、一方のＹ^４を代表するものが−ＣＨ_３を表し、他方が−（ＣＨ_２）_３−ＮＨＣＯＮＨ_２を表し；
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
少なくとも一方のＹ^４を代表するものがｉ−プロピルおよび−ＣＨ_３からなる群から選択され；
Ｙ^１がＨを表し、Ｙ^２が−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｚ′を表し、Ｚ′が−ＣＯＮＨＣＨＹ^４ＣＯＯＨを表し、Ｙ^４が−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｙ^４がアミノベンジルを表し；
Ｒ^２が−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−ＳＹ^３を表し；
Ｒ^４が−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５を表し、Ｙ^５がＨを表し；
Ｒ^４が−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５を表し、Ｙ^５が−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し；
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表す場合が好ましい。

好ましいものはさらに、
Ｒ^１がＨ、−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷがＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２がＨ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚが−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４が互いに独立に、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５がＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６が直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４がＨまたは−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダーを表し（−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダーは、Ｒ^４をＨに変換する酵素的に開裂可能なリンカーである。）；
ＡがＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３が−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それが１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ（（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１−２０Ｈ）基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚが−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくはＣ_１−１０−アルキルである。）；
Ｒ^５がＨ、−ＭＯＤ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、Ｈ、シアノ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＣＯＯＨまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し、
Ｒ^８が（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−１０−アルキニルまたは（フッ素化されていても良い）Ｃ_４−_１０−シクロアルキルを表し；
置換基Ｒ^１およびＲ^３のうちの一つが−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダーを表し、
Ｌがリンカーを表し、＃１が抗体への結合を表し、バインダーが抗体を表し、
Ｒ^９がＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
−ＭＯＤが−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０がＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１が−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−を表し（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）；
ｎが０または１を表し；
ｏが０または１を表し；
Ｇ２が、直鎖および／または分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（ＲｙはＨ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲｘ＝Ｎ−Ｏ−（ＲｘはＨ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す、）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、何らかの側鎖を含む前記炭化水素鎖は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３が−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、基−ＭＯＤが好ましくは少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）または（ＩＩＩ）の化合物ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーである。

好ましいものは、
Ｒ^１がＨ、−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＮＨ_２、ＳＯ_３Ｈ、ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し、ＷがＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２がＨ、−ＣＯ−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚが−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４が、−ＮＨＣＯＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、Ｙ^５がＨまたは−ＣＯ−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、Ｙ^６が直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４がＨを表し、
ＡがＣＯ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＳＯ_２ＮＨまたはＣＮＮＨ_２を表し；
Ｒ^３が、−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダー、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それが１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個のＯ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ（（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_１−２０Ｈ）基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、Ｚが−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨＣＯＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し（「アルキル」は好ましくはＣ_１−１０−アルキルである。）；
Ｒ^５がＨ、−ＭＯＤ、ＮＨ_２、ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、Ｚが−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、ＮＨＹ^３、−ＣＯ−ＮＹ^１Ｙ^２または−ＣＯ−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２が互いに独立に、Ｈ、ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｙ^３がＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、Ｚ′がＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＨ_２またはＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、Ｈまたはハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）を表し；
Ｒ^８が（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−１０−アルキルを表し；
置換基Ｒ^１およびＲ^３のうちの一つが−Ｌ−＃１または−Ｌ−バインダーを表し、
Ｌがリンカーを表し、＃１が抗体への結合を表し、バインダーが抗体を表し、
Ｒ^９がＨ、Ｆ、ＣＨ_３、ＣＦ_３、ＣＨ_２ＦまたはＣＨＦ_２を表し；
−ＭＯＤが−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨを表し、ｘが０または１であり、Ｙ^５がＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６がＨまたは−ＣＯＣＨ_３を表す、さらには、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）または（ＩＩＩ）の化合物ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーである。

好ましいものはさらに、例えばトリフルオロ酢酸などの酸とともに存在しても良い次の化合物である。これらの化合物は、リンカーを介して位置Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４に相当する位置を介して抗体に結合していることができる（水素原子はリンカーによって置換されている。）。

Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシアセトアミド；
（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−メチルブタンアミド（１：１）；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アセトアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシアセトアミド；
Ｓ−（１−｛２−［（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）アミノ］エチル｝−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）−Ｌ−システイン；
Ｓ−（１−｛２−［（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）アミノ］エチル｝−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）−Ｌ−システイン；
Ｓ−［１−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−システイン；
Ｎ−［１９−（３（Ｒ／Ｓ）−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｒ／Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝ホモシステイン；
Ｓ−｛（３Ｒ／Ｓ）−１−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル｝−Ｌ−システイン；
Ｓ−［（３Ｒ／Ｓ）−１−（２−｛［６−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）ヘキサノイル］アミノ｝エチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−システイン；
Ｓ−｛１−［２−（｛［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）シクロペンチル］カルボニル｝アミノ）エチル］−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル｝−Ｌ−システイン；
Ｓ−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）−Ｌ−システイン；
Ｎ^６−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）−Ｎ^２−｛Ｎ−［６−（３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝−Ｌ−リジン；
Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｌ−グルタミン；
Ｎ^６−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）−Ｌ−リジン；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−３，３，３−トリフルオロプロパンアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−４−フルオロベンズアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アセトアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−４−（トリフルオロメチル）ベンズアミド；
（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタン酸；
（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（２−アミノエチル）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタンアミド；
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸；
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸；
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニン；
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−Ｌ−セリン；
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−Ｌ−アラニン；
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝グリシン；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−４−メチルベンズアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−４−（メチルスルファニル）ベンズアミド；
（２Ｓ）−Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシプロパンアミド；
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−（メチルスルファニル）アセトアミド；
（２Ｓ）−Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［４−ベンジル−１−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシプロパンアミド；
メチル４−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−４−オキソブタノエート；
４−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−４−オキソブタン酸；
（２Ｒ）−２２−［（３Ｒ／Ｓ）−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル］−２−［（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）メチル］−４，２０−ジオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−３，１９−ジアザドコサン−１−酸；
Ｎ−アセチル−Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン；
Ｎ−アセチル−Ｓ−［２−（［３−（Ｌ−アラニルアミノ）プロピル］｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン；
（２Ｓ）−Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝テトラヒドロフラン−２−カルボキサミド；
３−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）プロパン酸；
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝ホモシステイン；
４−アミノ−Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝ベンズアミド；
４−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−２−カルボキシエチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸；
４−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−２−カルボキシエチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸。

本発明による特に好ましいものは、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５が上記で挙げた意味（例えば式（Ｉ）または（ＩＩ）について挙げたもの）を有する下記の式ＩＶの化合物である。

特に好ましいものは、Ｒ^１およびＲ^５がＨまたは−Ｌ−＃１を表し；Ｒ^２およびＲ^４がＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１０−または−ＣＨＲ^１０−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１０がＨを表し；Ｒ^３がＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨまたは−Ｌ−＃１を表し、置換基Ｒ^１およびＲ^３のうちの一つが−Ｌ−＃１を表す式ＩＶの化合物である。さらに、特に好ましいものは、Ｒ^１がＨまたはＣＯＯＨを表し；Ｒ^２およびＲ^５がＨを表し；Ｒ^４が−Ｌ−＃１を表し；Ｒ^３がＣＨ_２ＯＨまたはＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨを表し、−Ｌ−＃１が、Ｒ^４をＨに変換させる酵素的に開裂可能なリンカーである式ＩＶの化合物である。

リンカー
文献に、例えば抗体などのバインダーに有機分子を共有結合的にカップリング（結合）させるための多様な選択肢が開示されている（例えば、Ｋ．ＬａｎｇａｎｄＪ．Ｗ．Ｃｈｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１４，１１４，４７６４−４８０６，Ｍ．Ｒａｓｈｉｄｉａｎｅｔａｌ．ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２０１３，２４，１２７７−１２９４参照）。本発明に従って好ましいものは、遊離チオールとして既に存在しているか、ジスルフィド架橋の還元によって発生する抗体のシステイン残基の１以上の硫黄原子を介した、および／または抗体のリジン残基の１以上のＮＨ基を介した、ＫＳＰ阻害剤の抗体への結合である。しかしながら、チロシン残基を介して、グルタミン残基を介して、非天然アミノ酸の残基を介して、遊離カルボキシル基を介して、または抗体の糖残基を介して、ＫＳＰ阻害剤を抗体に結合させることも可能である。カップリングのためには、リンカーを用いる。リンカーは、イン・ビボで開裂可能なリンカーの群およびイン・ビボで安定なリンカーの群に分類することができる（Ｌ．ＤｕｃｒｙａｎｄＢ．Ｓｔｕｍｐ，ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２１，５−１３（２０１０）参照）。イン・ビボで開裂可能なリンカーは、イン・ビボで開裂可能な基を有し、そこで、イン・ビボで化学的に開裂可能な基とイン・ビボで酵素的に開裂可能な基の間で区別することが可能である。「イン・ビボで化学的に開裂可能な」および「イン・ビボで酵素的に開裂可能な」は、リンカーまたは基が循環中では安定であり、標的細胞でもしくは標的細胞内でのみ、そこでの化学的もしくは酵素的に異なる環境（比較的低いｐＨ；高いグルタチオン濃度；カテプシンもしくはプラスチンなどのリソソーム酵素、または例えば、β−グルクロニダーゼ類などのグリオシダーゼ類（ｇｌｙｏｓｉｄａｓｅｓ）の存在）によって開裂することで、低分子量ＫＳＰ阻害剤またはそれの誘導体を放出することを意味する。イン・ビボで化学的に開裂可能な基は、特にはジスルフィド、ヒドラゾン、アセタールおよびアミナールであり；酵素的にイン・ビボで開裂可能な基は、特に２−８−オリゴペプチド基、特別にはジペプチド基またはグリコシドである。ペプチド開裂部位は、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２００２，１３，８５５−８６９およびＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒｓ８（１９９８）３３４１−３３４６、さらにはＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．１９９８，９，６１８−６２６に開示されている。これらには、例えば、バリン−アラニン、バリン−リジン、バリン−シトルリン、アラニン−リジンおよびフェニルアラニン−リジン（適宜に、さらなるアミド基を有する）などがある。

イン・ビボで安定なリンカーは、高い安定性（血漿中２４時間後に５％未満の代謝物）によって区別され、上記のようなイン・ビボで化学的または酵素的に開裂可能基を持たない。

リンカー−Ｌ−は好ましくは、
下記の基本構造（ｉ）から（ｉｖ）：
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−ＳＧ１−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｖ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ２
のうちの一つを有し、
ｍは０または１であり；ＳＧは、（化学的にまたは酵素的に）イン・ビボで開裂可能な基（特に、ジスルフィド、ヒドラゾン、アセタールおよびアミナール；またはプロテアーゼによって開裂可能な２から８オリゴペプチド基）であり、ＳＧ１はオリゴペプチド基または好ましくはジペプチド基であり、Ｌ１は互いに独立に、イン・ビボで安定な有機基を表し、Ｌ２は、バインダーに対するカップリング基または単結合を表す。ここで、カップリングは好ましくは、抗体のシステイン残基またはリジン残基に対するものである。あるいは、カップリングは、抗体のチロシン残基、グルタミン残基または非天然アミノ酸に対するものであることができる。非天然アミノ酸は、例えば、アルデヒドまたはケト基（例えば、例えばホルミルグリシン）またはアジドもしくはアルキン基（Ｌａｎ＆Ｃｈｉｎ，ＣｅｌｌｕｌａｒＩｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｏｆＵｎｎａｔｕｒａｌＡｍｉｎｏＡｃｉｄｓａｎｄＢｉｏｏｒｔｈｏｇｏｎａｌＬａｂｅｌｉｎｇｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓ，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１４，１１４，４７６４−４８０６参照）を含むことができる。

本発明に従って特に好ましいものは、基本的リンカー構造（ｉｉｉ）である。代謝により、基本的リンカー構造（ｉｉｉ）を有する本発明による複合体の投与および抗体のシステインまたはリジン残基へのリンカーのカップリングによって、下記式のシステインまたはリジン誘導体が生じる。

式中、Ｌ１は、各場合で、低分子量ＫＳＰ阻害剤、例えば式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃａ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物に結合している。

本発明に従って好ましいものはさらに、基本的リンカー構造（ｉｉ）および（ｉｖ）であり、特に結合が位置Ｒ^１でのものである場合、特には基Ｌ１が下記構造のうちの一つを有する場合である。

（ａ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_０−４−（ＣＨＣＨ_３）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯ−Ｙ^７［Ｙ^５は、ＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６は、Ｈまたは−ＣＯＣＨ_３を表し、Ｙ^７は、単結合または−ＮＨ−（ＣＨ_２）_０−_４−ＣＨＮＨ_２−ＣＯ−を表すことで、開裂後に、相当する構造−ＮＨ−（ＣＨ_２）_０−４−（ＣＨＣＨ_３）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨまたは−ＮＨ−（ＣＨ_２）_０−４−（ＣＨＣＨ_３）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＮＨ_２−ＣＯＯＨが得られる。］。

（ｂ）−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯ−［ｘは０または１であり、Ｙ^５は、ＨまたはＮＨＹ^６を表し、Ｙ^６は、Ｈまたは−ＣＯＣＨ_３を表すことで、開裂後に、相当する構造−ＣＨ_２−Ｓ_ｘ−（ＣＨ_２）_０−４−ＣＨＹ^５−ＣＯＯＨが得られる。］。

本発明に従って好ましいものは、位置Ｒ^４に結合した場合の、特にｍ＝０の場合の基本的リンカー構造（ｉ）でもある。

リンカーがシステイン側鎖またはシステイン残基に結合している場合、Ｌ２は好ましくは、システインのスルフヒドリル基と反応する基から誘導される。これらには、ハロアセチル類、マレイミド類、アジリジン類、アクリロイル類、アリール化化合物、ビニルスルホン類、ピリジルジスルフィド類、ＴＮＢチオール類およびジスルフィド還元剤などがある。これらの基は一般に、スルフヒドリル結合と求電子的に反応して、スルフィド（例えばチオエーテル）またはジスルフィド架橋を形成する。好ましいものは、安定なスルフィド架橋である。Ｌ２は好ましくは

であり、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合点を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合点を示し、
Ｒ^２２は、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲ_２（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、好ましくはＣＯＯＨを表す。

Ｌ２について特に好ましいものは、

であり、
＃^１は抗体の硫黄原子への結合点を示し、＃^２は活性化合物への結合点を示し、ｘは１または２を表し、Ｒ^２２はＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＣＯＮＲ_２、ＣＯＮＨＲ（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、好ましくはＣＯＯＨを表す。ｘ＝１であり、Ｒ^２２がＣＯＯＨを表す場合が好ましい。

本発明による複合体または本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、特に好ましくは９０％強（各場合、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の範囲で、特に好ましくは式Ａ３またはＡ４の二つの構造のうちの一つとして存在する。ここで、式Ａ３またはＡ４の構造は通常は一緒に存在し、好ましくは抗体への結合の数に基づいて６０：４０から４０：６０の比率で存在する。そして、残りの結合は、下記構造として存在する。

本発明によれば、Ｌ１は好ましくは、下記式によって表される。

式中、
Ｒ^１０は、Ｈ、ＮＨ_２またはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−または

を表し；（Ｇ１が、ＮＨＣＯまたは

を表す場合はＲ^１０は好ましくはＮＨ_２ではない。）。

ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状のアルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＣＯ−、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ^ｙ−、ＣＯＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＳＯ_２ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＣＯＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−（Ｒ^ｙは、Ｈ、フェニル、Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒ^ｘは、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。）および／または４個以下のＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択されるヘテロ原子を有する３から１０員の芳香族もしくは非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、側鎖を含む炭化水素は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

Ｇ２は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状アルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳ、または−ＳＯ−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５から１０員の芳香族または非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、前記側鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

Ｇ２は好ましくは、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状アルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒ^ｘは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）およびＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員、例えば５から１０員の芳香族または非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖を含む炭化水素鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

Ｇ２におけるさらなる中断基は、好ましくは

であり、
Ｒ^ｘは、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。

ここで、＃^１はＫＳＰ阻害剤への結合であり、＃^２は抗体へのカップリング基への結合である（例えばＬ２）。

アリーレン基および／または直鎖および／または分岐および／または環状アルキレン基の直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖は通常、言及される個々の数の炭素原子を有するα，ω−二価アルキル基を含む。次のもの：メチレン、エタン−１，２−ジイル（１，２−エチレン）、プロパン−１，３−ジイル（１，３−プロピレン）、ブタン−１，４−ジイル（１，４−ブチレン）、ペンタン−１，５−ジイル（１，５−ペンチレン）、ヘキサン−１，６−ジイル（１，６−ヘキシレン）、ヘプタン−１，７−ジイル（１，７−ヘキシレン）、オクタン−１，８−ジイル（１，８−オクチレン）、ノナン−１，９−ジイル（１，９−ノニレン）、デカン−１，１０−ジイル（１，１０−デシレン）を例として、そして好ましいものとして挙げることができる。しかしながら、炭化水素鎖におけるアルキレン基は分岐であることもでき、すなわち上記で言及の直鎖アルキレン基の１以上の水素原子がＣ_１−１０−アルキル基によって置換されていることで、側鎖を形成していることができる。炭化水素鎖はさらに、環状アルキレン基（シクロアルカンジイル）、例えば１，４−シクロヘキサンジイルまたは１，３−シクロペンタンジイルを含んでいても良い。これらの環状基は不飽和であっても良い。特に、その炭化水素基には、芳香族基（アリーレン基）、例えばフェニレンが存在しても良い。そして、環状アルキレン基およびアリーレン基において、やはり、１以上の水素原子がＣ_１−１０−アルキル基によって置換されていても良い。このようにして、分岐していても良い炭化水素鎖が形成される。この炭化水素鎖は、合計０から１００個の炭素原子、好ましくは１から５０個、特に好ましくは２から２５個の炭素原子を有する。

側鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって同一でまたは異なって１回もしくは複数回置換されていても良い。

当該炭化水素鎖は、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−ならびにＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５から１０員の芳香族または非芳香族複素環の１以上によって同一でまたは異なって１回または複数回中断されていても良い。

Ｇ２におけるさらなる中断基は好ましくは、

である。

好ましくは、リンカーは、下記式：

に相当し、
ｍは、０または１を表し；
§は、活性化合物分子への結合を表し、
§§は、バインダーペプチドもしくはタンパク質への結合を表し、
Ｌ１およびＬ２は上記の意味を有する。

特に好ましくは、Ｌ１は式−ＮＲ１１Ｂ−を有し、
Ｒ^１１は、ＨまたはＮＨ_２を表し；
Ｂは、−［（ＣＨ_２）_ｘ−（Ｘ^４）_ｙ］_ｗ−（ＣＨ_２）_ｚ−を表し、
ｗ＝０から２０であり；
ｘ＝０から５であり；
ｙ＝０または１であり；
ｚ＝０から５であり；
Ｘ^４は、−Ｏ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−または

を表す。

本発明に従って好ましいリンカーＬは、下記式：

を有し、
＃３は、活性化合物分子への結合を表し、
＃４は、バインダーペプチドもしくはタンパク質への結合を表し、
Ｒ１１は、ＨまたはＮＨ_２を表し；
Ｂは、−［（ＣＨ_２）_ｘ−（Ｘ^４）_ｙ］_ｗ−（ＣＨ_２）_ｚ−を表し、
ｗ＝０から２０であり；
ｘ＝０から５であり；
ｙ＝０または１であり；
ｚ＝１から５であり；
Ｘ^４は、−Ｏ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−または

を表す。

上記で言及したリンカーは、リンカーがＲ１での水素原子の置換によってカップリングする式（Ｉ）または（ＩＩ）の複合体で、またはＲ４での開裂可能リンカーＳＧ１と組み合わせたものが特に好ましく、すなわちＲ１が−Ｌ−＃１を表し、またはＲ４が−ＳＧ１−Ｌ−＃１を表し、＃１が抗体への結合を表す。

本発明に従って好ましいものはさらに、下記のリンカーである。すなわち、本発明による複合体において、または本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、特に好ましくは９０％強（各場合で、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の程度まで、特に好ましくは式Ａ５またはＡ６の二つの構造のうちの一つとして存在する。

式中、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合箇所を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合箇所を示し、
Ｒ^２２は、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＣＯＮＲ_２、ＣＯＮＨＲ（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、好ましくはＣＯＯＨを表す。

ここで、式Ａ５またはＡ６の構造は通常は一緒に存在し、好ましくは抗体への結合数に基づいて６０：４０から４０：６０の比率である。残りの結合は、下記構造として存在する。

システイン側鎖またはシステイン残基に結合した他のリンカー−Ｌ−は下記式を有する。

式中、
§は、活性化合物分子への結合を表し、
§§は、バインダーペプチドもしくはタンパク質への結合を表し、
ｍは、０、１、２または３を表し；
ｎは、０、１または２を表し；
ｐは、０から２０を表し；
Ｌ３は、

を表し、
ｏは、０または１を表し；
Ｇ３は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または環状アルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−またはＳＯ_２からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員（好ましくは５から１０員）の芳香族もしくは非芳香族複素環）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

上記式において、好ましくは
ｍは、１を表し；
ｐは、０を表し；
ｎは、０を表し；
Ｌ３は

を表し、
ｏは、０または１を表し；
Ｇ_３は、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｓ（ＣＨ_２）_ｔ（ＣＯＮＨ）_ｕＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｖ（ＣＨ_２）_ｗ−を表し、
ｓ、ｔ、ｖおよびｗはそれぞれ互いに独立に、０から２０であり、ｕは０または１である。

上記の式§−（ＣＯ）ｍ−Ｌ１−Ｌ２−§§における好ましい基Ｌ１は下記のものであり、それらにおいて、ｒは各場合で互いに独立に、０から２０、好ましくは０から１５、特に好ましくは１から２０、特別に好ましくは２から１０の数字を表す。

Ｌ１のさらなる例を表Ｃに示してあり、表中において、この基はボックスで強調してある。

リンカー部分Ｌ１の例を、下記の表ＡおよびＡ′に示してある。その表にはさらに、Ｌ１のこれらの例が好ましく組み合わされる基Ｌ２、さらには好ましいカップリング箇所（Ｒ^１またはＲ^３またはＲ^４）およびｍについての好ましい値を示してあり、これはＬ１の前にカルボニル基があるか否かを問わない（§−（ＣＯ）ｍ−Ｌ１−Ｌ２−§§と比較）。これらのリンカーは好ましくは、システイン残基にカップリングしている。Ｌ２がコハク酸イミドであるかそれから誘導されている場合、このイミドは完全にまたは部分的に、上記のような加水分解された開鎖コハク酸アミドの形態であっても良い。Ｌ１に応じて、開鎖コハク酸アミドへのこの加水分解は、ほぼ明白であるか、全く存在しないことがある。

表Ａ

^＊＊特に好ましくは、これらの列で提供されるリンカーは、下記のものから選択されるリンカーＬ２に結合する。

および／または

式中、＃^１はバインダーの硫黄原子への結合箇所を示し、＃^２は基Ｌ^１への結合箇所を示し、Ｒ^２２は好ましくはＣＯＯＨを表す。本発明による複合体において、または本発明による複合体の混合物において、バインダーのシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、特に好ましくは９０％強（各場合で、バインダーへのリンカーの結合の総数に基づいて）の程度まで、特に好ましくは式Ａ７またはＡ８の二つの構造のうちの一つとして存在する。ここで、式Ａ７またはＡ８の構造は通常は一緒に存在し、好ましくはバインダーへの結合数に基づいて６０：４０から４０：６０の比率である。残りの結合は、下記構造として存在する。

表Ａ′

^＊＊：表Ａにおける注^＊＊を参照する。

^＊＊＊：この構造Ｌ２が存在する場合、同時に下記式の構造Ｌ２があっても良い。

相当するリンカーを有する複合体の例は下記構造を有し、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、Ｌ１は上記の意味を有し、Ｌ２およびＬ３はＬ１と同じ意味を有し、ＡＫ１は、システイン残基を介して結合した抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、ｎは１から１０の数字である。ＡＫ１は好ましくは、ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗体またはそれの抗原結合性断片である。特に好ましくは、ＡＫ１は、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォーム、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０に特異的に結合する脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体である。

リンカーがリジン側鎖またはリジン残基に結合している場合、それは好ましくは、下記式を有する。

式中、
§は活性化合物分子への結合を表し、
§§は、バインダーペプチドもしくはタンパク質への結合を表し、
ｘは０または１を表し、
ＳＧは、開裂可能基、好ましくは２から８オリゴペプチド、特に好ましくはジペプチドを表し、
Ｌ４は、単結合または基−（ＣＯ）_ｙ−Ｇ４−を表し、ｙは０または１を表し、
Ｇ４は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状アルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する５から１０員の芳香族または非芳香族複素環の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

下記の表Ｂは、リジン残基へのリンカーの例を提供するものである。その表はさらに、好ましいカップリング箇所（Ｒ^１−Ｒ^５）を提供する。最初の欄にはさらに、相当するリンカーを使用する実施例番号も記載されている。

表Ｂ：リジンリンカー
−§−（ＳＧ）ｘ−Ｌ４−Ｃ（＝Ｏ）−§§

相当するリンカーを有する複合体の例は、下記構造を有し、その構造において、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、Ｌ４は上記で提供の意味を有し、ＡＫ２は、リジン残基を介して結合した抗体を表し、ｎは１から１０の数字である。好ましいＡＫ２は、ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。

本発明に従って好ましいものはさらに、基本構造（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｖ）であり、それらにおいて、ＳＧ１またはＳＧはプロテアーゼによって開裂可能な基を表し、Ｌ１およびＬ２は上記で提供の意味を有する。特に好ましいものは、下記の基である。

−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＣＯＮＨ−（これにより、アラニンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−ＣＯＮＨ−（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＣＯＮＨ−（シトルリンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＣＯＮＨ（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−ＣＯＮＨ−（リジンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）
−ＮＨ−Ａｌａ−Ｃｉｔ−ＣＯＮＨ−（シトルリンのＣ末端アミドでのアミド結合の開裂）。

ＳＧ１またはＳＧは特に好ましくは

であり、
Ｘは、ＨまたはＣ_１−１０−アルキル基を表し、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ_２またはスルホン酸によって置換されていても良い。

下記の表Ｃは、リンカー部分−ＳＧ１−Ｌ１−または−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ１−の例を提供するものであり、ＳＧ１およびＳＧはプロテアーゼによって開裂可能な基である。表Ｃはさらに、−ＳＧ１−Ｌ１−および−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ１−のこれらの例が好ましく組み合わせる基Ｌ２、さらには好ましいカップリング箇所（Ｒ^１−Ｒ^５）およびｍについての好ましい値を示しており、従ってＬ１の前にカルボニル基にあるか否かは無関係である（§−（ＣＯ）ｍ−Ｌ１−Ｌ２−§§と比較）。これらのリンカーは、好ましくはシステイン残基にカップリングする。Ｌ１基は、ボックスで強調されている。しかしながら、これらの基Ｌ１は、上記の式§−（ＣＯ）ｍ−Ｌ１−Ｌ２−§§について提供の基Ｌ１のうちの一つによって置き換わっていることができる。Ｌ２がコハク酸アミドであるかそれから誘導されている場合、このアミドは完全にまたは部分的に、上記のような加水分解された開鎖コハク酸アミドの形態であっても良い。

表Ｃ

基本構造（ｉ）を有する複合体の例は下記構造を有し、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、Ｌ４はＬ１と同じ意味を有し、ＡＫ１は、システイン残基を介して結合している抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、ｎは１から１０の数字である。その抗体は好ましくは、脱グリコシル化ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。

ＫＳＰ阻害剤−リンカー−中間体および複合体の製造
本発明による複合体は、最初に低分子量ＫＳＰ阻害剤にリンカーを提供することによって製造される。次に、このようにして得られた中間体をバインダー（好ましくは抗体）と反応させる。

好ましくは、システイン残基へのカップリングのために、下記化合物のうちの一つを、システイン含有バインダー、例えばこの目的のために部分還元されていても良い抗体と反応させる。

式中、
Ｒは−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、
Ｋは、Ｃ_１−Ｃ_６−アルコキシまたは−ＯＨによって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−Ｃ_６アルキルを表し、
Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、ＳＧ１、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は上記と同じ意味を有する。

上記各化合物および下記化合物において、ｔｅｒｔ−ブチル基は、シクロヘキシルに置き換わっていても良い。

その化合物は、例えば、それのトリフルオロ酢酸塩の形で用いることができる。例えば抗体などのバインダーとの反応の関しては、当該化合物は好ましくは、バインダーに関して２から１２倍モル過剰で用いる。

好ましくは、リジン残基へのカップリングに関しては、下記化合物のうちの一つを、抗体などのリジン含有バインダーと反応させる。

式中、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、Ｌ４はＬ１と同じ意味を有し、Ｌ１は上記と同じ意味を有する。

システイン残基への中間体カップリングに関しては、その反応は下記のように説明することができる。

他の中間体および他の抗体を同様に反応させることができる。

リジン残基への中間体カップリングに関しては、その反応は下記のように説明することができる。

本発明によれば、下記の複合体が提供される。

リンカーに応じて、コハク酸イミド連結ＡＤＣは、結合後に、有利な安定性プロファイルを有する開鎖コハク酸アミドに変換することができる。

この反応（開環）は、ｐＨ７．５から９で、好ましくはｐＨ８で、２５℃から３７℃の温度で、例えば撹拌することで行うことができる。好ましい撹拌時間は８から３０時間である。

上記式において、Ｘ１はＣＨを表し、Ｘ２はＣを表し、Ｘ３はＮを表し、ＳＧ１およびＬ１は上記と同じ意味を有し、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はＬ１と同じ意味を有し；ＲおよびＫは上記と同じ意味を有する。ＡＫ１は、システイン残基を介して結合した抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片であり、ＡＫ２は、リジン残基を介して結合した抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片である。ＡＫ１およびＡＫ２は好ましくは、脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体である。特に好ましくは、ＡＫ１およびＡＫ２は、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。

抗Ｂ７Ｈ３抗体複合体
当該抗体は好ましくは、脱グリコシル化ヒト、ヒト化もしくはキメラモノクローナル抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片である。特に好ましいものは、ヒトＩｇ４アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片であり、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。この場合、脱グリコシルまたは脱グリコシル化抗体は、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインにおける保存Ｎ−結合部位でグリカンを持たない。

文献に、抗体への有機分子の共有結合カップリング（結合）の多様な選択肢も開示されている。本発明に従って好ましいものは、抗体のシステイン残基の１以上の硫黄原子を介したおよび／または抗体のリジン残基の１以上のＮＨ基を介した抗体への担毒体の結合である。しかしながら、遊離カルボキシル基を介して、または抗体の糖残基を介して抗体に担毒体を結合させることも可能である。

抗体は、結合を介してリンカーに結合することができる。抗体の結合は、バインダーのヘテロ原子を介したものであることができる。結合に用いることができる抗体の本発明によるヘテロ原子は、硫黄（１実施形態において、抗体のスルフヒドリル基を介して）、酸素（本発明によれば、抗体のカルボキシルまたはヒドロキシル基によって）および窒素（１実施形態において、抗体の１級もしくは２級アミン基もしくはアミド基を介して）である。これらのヘテロ原子は天然抗体に存在し得るものであるか、化学的方法または分子生物学の方法によって導入される。本発明によれば、担毒体への抗体の結合は、標的分子に関して抗体の結合活性に対するごくわずかな効果しか持たない。好ましい実施形態において、その結合は、標的分子に関して抗体の結合活性に対して全く効果を持たない。

本発明によれば、「抗体」という用語は、それの最も広い意味で理解すべきであり、免疫グロブリン分子、例えば無傷もしくは修飾モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体または多特異的抗体（例えば二重特異抗体）を含む。免疫グロブリン分子は好ましくは、代表的にはジスルフィド架橋によって連結される四つのポリペプチド鎖、二つの重鎖（Ｈ鎖）および二つの軽鎖（Ｌ鎖）を有する分子を含む。各重鎖は、重鎖の可変ドメイン（略称ＶＨ）および重鎖の定常ドメインを含む。重鎖の定常ドメインは、例えば、三つのドメインＣＨ１、ＣＨ_２およびＣＨ３を含むことができる。各軽鎖は、可変ドメイン（略称ＶＬ）および定常ドメインを含む。軽鎖の定常ドメインは、ドメイン（略称ＣＬ）を含む。ＶＨおよびＶＬドメインは、超可変性を有する領域［相補性決定領域（略称ＣＤＲ）とも称される］および低い配列可変性を有する領域（フレームワーク領域、略称ＦＲ）にさらに細分することができる。代表的には、各ＶＨおよびＶＬ領域は、三つのＣＤＲおよび四つ以下のＦＲからなる。例えば、アミノ末端からカルボキシ末端に次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４である。抗体は、いずれか好適な生物種、例えばウサギ、ラマ、ラクダ、マウスまたはラットから得ることができる。１実施形態において、抗体は、ヒトまたはマウス起源のものである。抗体は、例えばヒト、ヒト化またはキメラであることができる。

「モノクローナル」抗体という用語は、実質的に均一な抗体の群から得られる抗体を指し、すなわち、その群の個々の抗体は、数が少ない可能性がある自然突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高い特異性を有する単一抗原性結合部位を認識する。モノクローナル抗体という用語は、特定の製造プロセスを指さない。

「無傷」抗体という用語は、軽鎖および重鎖の抗原結合ドメインおよび定常ドメインの両方を含む抗体を指す。定常ドメインは、多くの修飾アミノ酸位置を有する天然ドメインまたはそれの変異体であることができる。

「修飾無傷」抗体という用語は、抗体起源ではないさらなるポリペプチドもしくはタンパク質との共有結合（例えば、ペプチド結合）によってアミノ末端またはカルボキシ末端を介して融合した無傷抗体を指す。さらに、抗体を修飾して、定義の位置で、反応性システインを導入して、担毒体へのカップリングを促進するようにすることができる（Ｊｕｎｕｔｕｌａｅｔａｌ．ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００８，Ａｕｇ．，２６（８）：９２５−３２参照）。

「ヒト」抗体という用語は、ヒトから得ることができるか、合成ヒト抗体である抗体を指す。「合成」ヒト抗体は、ヒト抗体配列の分析に基づいて合成配列からイン・シリコで部分的または完全に得ることができる抗体である。ヒト抗体は、例えば、ヒト起源の抗体配列のライブラリから単離された核酸によってコードされ得る。そのような抗体の例が、Ｓｏｄｅｒｌｉｎｄｅｔａｌ．，ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈ．２０００，１８：８５３−８５６にある。

「ヒト化」または「キメラ」抗体という用語は、配列の非ヒトおよびヒト部分からなる抗体を説明するものである。これらの抗体において、ヒト免疫グロブリン（受容体）の配列の一部が、非ヒト免疫グロブリン（供与体）の配列部分によって置き換わっている。多くの場合で、供与体はマウス免疫グロブリンである。ヒト化抗体の場合、受容体のＣＤＲのアミノ酸が、供与体のアミノ酸によって置き換わっている。場合により、フレームワークのアミノ酸も、供与体の相当するアミノ酸によって置き換わっている。場合により、ヒト化抗体は、抗体の至適化時に導入された、受容体にも供与体にも存在しないアミノ酸を含む。キメラ抗体の場合、供与体免疫グロブリンの可変ドメインが、ヒト抗体の定常領域と融合している。

本明細書で使用される相補性決定領域（ＣＤＲ）という用語は、抗原への結合に必要な可変抗体ドメインのアミノ酸を指す。代表的には、各可変領域は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３と称される三つのＣＤＲ領域を有する。各ＣＤＲ領域は、カバットの定義によるアミノ酸および／またはコチアに従って定義される超可変ループのアミノ酸を包含することができる。カバットによる定義は、例えば、可変軽鎖のほぼアミノ酸位置２４から３４（ＣＤＲ１）、５０から５６（ＣＤＲ２）および８９から９７（ＣＤＲ３）、そして可変重鎖の３１から３５（ＣＤＲ１）、５０から６５（ＣＤＲ２）および９５から１０２（ＣＤＲ３）からの領域を含む（Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈＥｄ．ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１））。コチアによる定義は、例えば、可変軽鎖のほぼアミノ酸位置２６から３２（ＣＤＲ１）、５０から５２（ＣＤＲ２）および９１から９６（ＣＤＲ３）そして可変重鎖の２６から３２（ＣＤＲ１）、５３から５５（ＣＤＲ２）および９６から１０１（ＣＤＲ３）の領域を含む（ＣｈｏｔｈｉａａｎｄＬｅｓｋ；ＪＭｏｌＢｉｏｌ１９６：９０１−９１７（１９８７））。場合により、ＣＤＲは、カバットおよびコチアに従って定義されるＣＤＲ領域からのアミノ酸を含むことができる。

重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、抗体は異なる群に分けることができる。無傷抗体の主要な５群：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭがあり、これらのうちのいくつかは、さらなる下位群（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２に分けることができる。異なる群に相当する重鎖の定常ドメインは、［アルファ／α］、［デルタ／δ］、［イプシロン／ε］、［ガンマ／γ］および［ミュー（ｍｙ）／μ］と称される。抗体の三次元構造およびサブユニット構造の両方が公知である。

抗体／免疫グロブリンの「機能性断片」または「抗原結合性抗体断片」という用語は、やはり抗体／免疫グロブリンの抗原結合性ドメインを含む抗体／免疫グロブリンの断片（例えば、ＩｇＧの可変ドメイン）と定義される。抗体の「抗原結合性ドメイン」は代表的には、抗体の１以上の超可変領域、例えばＣＤＲ、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３領域を含む。しかしながら、抗体の「フレームワーク」または「骨格」領域は、抗原に対する抗体の結合時に関与し得る。そのフレームワーク領域は、ＣＤＲの骨格を形成する。好ましくは、抗原結合性ドメインは、少なくとも可変軽鎖のアミノ酸４から１０３および可変重鎖のアミノ酸５から１０９、より好ましくは可変軽鎖のアミノ酸３から１０７および可変重鎖の４から１１１、特に好ましくは完全な可変軽および重鎖、すなわちＶＬのアミノ酸１から１０９およびＶＨの１から１１３（ＷＯ９７／０８３２０による番号付け）を含む。

本発明の「機能性断片」または「抗原結合性抗体断片」は、Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２およびＦｖ断片、二重特異抗体、単一ドメイン抗体（ＤＡｂｓ）、線状抗体、抗体の個々の鎖（単鎖Ｆｖ、略称ｓｃＦｖ）；および多特異的抗体、例えば二重特異抗体および三重特異抗体、例えば抗体断片から形成されるものを包含するが、これらに限定されるものではない（Ｃ．Ａ．ＫＢｏｒｒｅｂａｅｃｋ，ｅｄｉｔｏｒ（１９９５）ＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（ＢｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ），ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ；Ｒ．Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ＆Ｓ．Ｄｕｅｂｅｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ（２００１）ＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（ＳｐｒｉｎｇｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ），ＳｐｒｉｎｇｅｒＶｅｒｌａｇ）。「多特異的」または「多機能性」抗体以外の抗体は、同一の結合部位を有するものである。多特異的抗体は、抗原の異なるエピトープに特異的であることができるか、複数の抗原のエピトープに特異的であることができる（例えば、ＷＯ９３／１７７１５；ＷＯ９２／０８８０２；ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔ，ｅｔａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０６９；米国特許第４，４７４，８９３号；同４，７１４，６８１号；同４，９２５，６４８号；同５，５７３，９２０号；同５，６０１，８１９号；またはＫｏｓｔｅｌｎｙｅｔａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７１５５３参照）。Ｆ（ａｂ′）_２またはＦａｂ分子は、Ｃｈ１ドメインとＣＬドメインの間で起こる分子間ジスルフィド相互作用の作用を低減または完全に防止することができるように構築することができる。

「エピトープ」は、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体に特異的に結合する能力を有するタンパク質決定基を指す。エピトープ決定基は通常、アミノ酸もしくは糖側鎖またはそれらの組み合わせなどの分子の化学的に活性な表面基からなり、通常は特異な三次元構造特性を有し、特異な電荷特性も有する。

「機能性断片」または「抗原結合性抗体断片」は、それのアミノ末端またはカルボキシル末端を介して、共有結合（例えばペプチド連結）によって、抗体を起源としない別のポリペプチドまたはタンパク質と融合していることができる。さらに、抗体および抗原結合性断片を、規定の場所で反応性システインを導入することで修飾して、担毒体へのカップリングを促進することができる（Ｊｕｎｕｔｕｌａｅｔａｌ．ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００８Ａｕｇ；２６（８）：９２５−３２参照）。

ポリクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる。モノクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる（ＫｏｅｈｌｅｒａｎｄＭｉｌｓｔｅｉｎ, Ｎａｔｕｒｅ, ２５６, ４９５−４９７, １９７５）。ヒトおよびヒト化モノクローナル抗体は、当業者に公知の方法によって作ることができる（Ｏｌｓｓｏｎｅｔａｌ．, ＭｅｔｈＥｎｚｙｍｏｌ．９２, ３−１６またはＣａｂｉｌｌｙｅｔａｌＵＳ４，８１６，５６７またはＢｏｓｓｅｔａｌＵＳ４，８１６，３９７）。

当業者は、例えば、トランスジェニックマウス（ＮＬｏｎｂｅｒｇａｎｄＤＨｕｓｚａｒ，ＩｎｔＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ．１９９５；１３（１）：６５−９３）またはファージ提示技術（Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９１Ａｕｇ１５；３５２（６３３６）：６２４−８）によってヒト抗体およびそれの断片を作る多様な方法を知っている。本発明の抗体は、例えば非常に多数の健常志願者から集めた非常に多数の抗体のアミノ酸配列からなる組換え抗体ライブラリーから得ることができる。抗体は、公知の組換えＤＮＡ技術によって作ることも可能である。抗体の核酸配列は、通常の配列決定によって得ることができるか、公開でアクセス可能なデータベースから入手することができる。

「単離」抗体またはバインダーは、精製されて細胞の他の構成要素が除去されたものである。診断的使用または治療的使用を妨害し得る細胞の汚染構成要素は、例えば、酵素類、ホルモン類、または細胞の他のペプチドもしくは非ペプチド構成要素である。好ましい抗体またはバインダーは、抗体またはバインダーに対して９５重量％強の範囲（例えばローリー法、ＵＶ−Ｖｉｓスペクトル分析またはＳＤＳキャピラリーゲル電気泳動によって測定）まで精製されているものである。さらに、アミノ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５個のアミノ酸を決定することができる程度まで精製されている抗体、または均一となるまで精製された（均一性は還元条件もしくは非還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによって決定される（検出は、クマシー・ブルー（ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢｌａｕ）染色または好ましくは銀着色によって決定することができる。）。）抗体である。しかしながら、抗体は通常は、１以上の精製段階によって得られる。

「特異的結合」または「特異的に結合する」という用語は、所定の抗原／標的分子に結合する抗体またはバインダーを指す。抗体またはバインダーの特異的結合は代表的には、少なくとも１０^−７Ｍのアフィニティを有する抗体またはバインダーを説明するものであり（Ｋｄ値として；すなわち好ましくは１０ ^−７Ｍより小さいＫｄ値を有するもの）、その抗体またはバインダーは所定の抗原／標的分子でも非常に関連の深い抗原／標的分子でもない非特異的抗原／標的分子（例えばウシ血清アルブミンまたはカゼイン）に対してより、所定の抗原／標的分子に対して少なくとも２倍高いアフィニティを有する。その抗体は好ましくは、少なくとも１０^−７Ｍ（Ｋｄ値として；すなわち、好ましくは１０^−７Ｍより小さいＫｄ値を有するもの）、好ましくは少なくとも１０^−８Ｍ、より好ましくは１０^−９Ｍから１０^−１１Ｍの範囲のアフィニティを有する。Ｋｄ値は、例えば表面プラズモン共鳴分光法によって測定することができる。

本発明の抗体−薬物複合体は同様に、これらの範囲のアフィニティを示す。そのアフィニティは、好ましくは薬物の結合によってほとんど影響を受けない（概して、そのアフィニティは一桁未満低下し、すなわち、例えば、多くとも１０^−８Ｍから１０^−７Ｍである。）。

本発明に従って使用される抗体は、好ましくは高い選択性についても注目すべきものである。高い選択性が存在するのは、本発明の抗体が、独立の他の抗原、例えばヒト血清アルブミンに対してより少なくとも２倍、好ましくは５倍、またはより好ましくは１０倍良好な標的タンパク質に対するアフィニティを示す場合である（アフィニティは、例えば表面プラズモン共鳴分光法によって測定することができる。）。

さらに、使用される本発明の抗体は、好ましくは交差反応性である。前臨床試験、例えば毒性試験または活性試験（例えば、異種移植マウスでの試験）を容易にし、より良好に解釈できるようにするために、本発明に従って使用される抗体がヒト標的タンパク質に結合するだけでなく、試験に用いられる生物における生物標的タンパク質にも結合する場合が有利である。１実施形態において、本発明に従って使用される抗体は、ヒト標的タンパク質に加えて、少なくとも一つの別の生物種の標的タンパク質に対して交差反応性である。毒性試験および活性試験に関しては、齧歯類、イヌおよび非ヒト霊長類の科の生物を用いることが好ましい。好ましい齧歯類種は、マウスおよびラットである。好ましい非ヒト霊長類は、アカゲザル、チンパンジーおよびカニクイザルである。

１実施形態において、本発明に従って用いられる抗体は、ヒト標的タンパク質に加えて、マウス、ラットおよびカニクイザル（Ｍａｃａｃａｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）からなる生物種の群から選択される少なくとも一つの別の生物種の標的タンパク質に対して交差反応性である。特別に好ましいものは、ヒト標的タンパク質に加えて、少なくともマウス標的タンパク質に対して交差反応性である本発明に従って用いられる抗体である。好ましいものは、前記別の非ヒト生物種の標的タンパク質に対するアフィニティがヒト標的タンパク質に対するアフィニティと５０倍まで、詳細には１０倍まで異なる交差反応性抗体である。

癌標的分子に対する抗体
バインダー、例えば抗体またはそれの抗原結合性断片が向かう標的分子は、好ましくは癌標的分子である。「癌標的分子」という用語は、同じ組織型の非癌細胞上より１以上の癌細胞種上で豊富に存在する標的分子を説明するものである。好ましくは、癌標的分子は、同じ組織型の非癌細胞と比較して１以上の癌細胞種上に選択的に存在し、「選択的に」とは、同じ組織型の非癌細胞と比較して癌細胞上で少なくとも２倍豊富であることを説明するものである（「選択的癌標的分子」）。癌標的分子を用いることで、本発明による複合体を用いる癌細胞の選択的療法が可能となる。

ここで、特に好ましいものは、細胞外癌標的分子Ｂ７Ｈ３（配列番号Ｑ５ＺＰＲ３（タンパク質）；配列番号８０３８１（ＤＮＡ））である。

癌標的分子に結合する抗体は、例えば化学合成または組換え発現などの公知の方法を用いて当業者が作ることができる。癌標的分子についてのバインダーは、商業的に入手できるか、例えば化学合成または組換え発現などの公知の方法を用いて当業者が作ることができる。抗体または抗原結合性抗体断片を作るさらなる方法については、ＷＯ２００７／０７０５３８に記載されている（２２頁「抗体」参照）。当業者であれば、ファージ提示ライブラリー（例えばＭｏｒｐｈｏｓｙｓＨｕＣＡＬＧｏｌｄ）などのプロセスを収集および使用して抗体または抗原結合性抗体断片を発見する方法については知っている（ＷＯ２００７／０７０５３８、２４頁以降および７０頁のＡＫ実施例１、７２頁のＡＫ実施例２参照）。Ｂ細胞からのＤＮＡライブラリーを用いるさらなる抗体取得方法が、例えば２６頁（ＷＯ２００７／０７０５３８）に記載されている。ヒト化抗体についてのプロセスは、ＷＯ２００７０７０５３８の３０−３２頁に記載されており、Ｑｕｅｅｎ、ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｓ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：１００２９−１００３３，１９８９またはＷＯ９０／０７８６に詳細に記載されている。さらに、タンパク質一般および特に抗体の組換え発現方法は当業者には公知である（例えば、ＢｅｒｇｅｒａｎｄＫｉｍｒｎｅｌ（ＧｕｉｄｅｔｏＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏ１．１５２，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔａｌ．，（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，（ＳｅｃｏｎｄＥｄｉｔｉｏｎ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ；ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；１９８９）Ｖｏｌ．１−３）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓａｂｅｌｅｔａｌ．［Ｅｄｓ．］，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓ，ＧｒｅｅｎＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．／ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）；Ｈａｒｌｏｗｅｔａｌ．，（ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ（１９８８１，Ｐａｕｌ［Ｅｄ．］）；ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，（ＬｉｐｐｉｎｃｏｔｔＷｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（１９９８））；ａｎｄＨａｒｌｏｗ，ｅｔａｌ．，（ＵｓｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ（１９９８）参照）。当業者であれば、タンパク質／抗体の発現に必要な相当するベクター、プロモーターおよびシグナルペプチドは知っている。通常プロセスが、ＷＯ２００７／０７０５３８の４１−４５頁にも記載されている。ＩｇＧ１抗体の取得方法が、例えばＷＯ２００７／０７０５３８の７４頁以降の実施例６に記載されている。抗原への結合後の抗体の内在化の決定を可能とするプロセスが当業者には公知であり、例えばＷＯ２００７／０７０５３８の８０頁に記載されている。当業者は、異なる標的分子特異性を有する抗体の作製と同様にして炭酸脱水酵素ＩＸ（Ｍｎ）抗体を作るのに用いられているＷＯ２００７／０７０５３８に記載の方法を用いることができる。

本発明の抗体は、グリコシル化または脱グリコシル化されている。すなわち、後者の場合、それらはＦｃ領域のＣＨ２ドメインにおける保存Ｎ−結合部位にグリカンを持たない。

抗Ｂ７Ｈ３抗体
本発明によれば、抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片、好ましくはＴＰＰ５７０６またはそれ由来の抗体を用いる。さらに、当業者であれば、Ｂ７Ｈ３に結合する抗体については習熟している（例えば、ＵＳ６９６５０１８を参照する。）。ＥＰ２１２１００８には、抗Ｂ７Ｈ３抗体８Ｈ９およびそれのＣＤＲ配列が記載されている。ＴＰＰ３８０３は、ヒトＩｇＧ１の文脈でＣＤＲ配列を含む。

本発明は特には、次の特性：ヒトＢ７Ｈ３への特異的結合、すなわちヒトＢ７Ｈ２またはヒトＢ７Ｈ４への結合がないこと；イン・ビトロおよびイン・ビボでのＢ７Ｈ３発現腫瘍細胞の効果的かつ特異的殺滅を有する抗体またはそれの抗原結合抗体断片もしくはそれの変異体との複合体に関するものである。本発明による抗体は、特には結合後の内在化に好適なエピトープに結合する。同時に、本発明による抗体は、本発明による抗体のアミノ酸配列における相当するヒト生殖系列配列と実質的相同性によって達成される、ヒトで使用される場合の低免疫原性によって区別される。

ＴＰＰ５７０６およびそれの誘導体の形成
抗Ｂ７Ｈ３抗体は関連文献に記載されている。そこで例えば、ＵＳ６９６５０１８には、ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８によって分泌されるマウス抗Ｂ７Ｈ３抗体が開示されている。本発明者らは、標準的な方法を用いて、この抗体のアミノ酸配列を決定している。ＴＰＰ５７０６は、ヒトＩｇＧ１のＣｈ１−Ｃｈ３領域を有するこの抗体由来のマウスＦｖのキメラである。相当するＤＮＡ配列を哺乳動物ＩｇＧ発現ベクターに挿入し、完全ＩｇＧとして発現させた。これらの構築物を、例えば、Ｔｏｍｅｔａｌ．，Ｃｈａｐｔｅｒ１２ｉｎＭｅｔｈｏｄｓＥｘｐｒｅｓｓ：ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＳｙｓｔｅｍｓ，ＭｉｃｈａｅｌＲ．ＤｙｓｏｎａｎｄＹｖｅｓＤｕｒｏｃｈｅｒ編，ＳｃｉｏｎＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＬｔｄ，２００７に記載の方法に従って、一時的に哺乳動物細胞で発現させた。その抗体をタンパク質Ａクロマトグラフィーによって精製し、ヒトＢ７Ｈ３ならびにヒトＢ７Ｈ２およびＢ７Ｈ４に対するそれの結合を、ＡＫ−実施例１に記載のＥｌｉｓａによって特性決定した。さらに、ＴＰＰ５７０６との活性化合物複合体の効力を、実施例Ｃ−１、Ｃ−２およびＣ−６に記載の方法に従ってイン・ビトロおよびイン・ビボで調べた。それに続くバインダーのヒト化の際に、ＴＰＰ５７０６の複数のヒト化誘導体、特にはＡＫ−実施例１に記載のＴＰＰ６６４２およびＴＰＰ６８５０が確認された。これらの抗体において、マウス配列がヒト配列によって実質的に置き換わっており、Ｂ７Ｈ３結合特性にはほとんど変化はなかった。これらの抗体のアミノ酸配列を、非常に多くの場合で生じるヒト生殖系列配列と比較することで、さらに、これらの抗体とヒト生殖系列配列との間の相同性の程度を高めることができる多くのアミノ酸置換が確認された。

抗Ｂ７Ｈ３抗体の特定の実施形態
本願では、下記の表で示した次の好ましい抗体：ＴＰＰ−５７０６、ＴＰＰ−６６４２、ＴＰＰ−６８５０およびＴＰＰ−３８０３について説明する。

ＴＰＰ−５７０６は、配列番号９に相当する重鎖の領域および配列番号１０に相当する軽鎖の領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−６６４２は、配列番号１９に相当する重鎖の領域および配列番号２０に相当する軽鎖の領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−６８５０は、配列番号２９に相当する重鎖の領域および配列番号３０に相当する軽鎖の領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−３８０３は、配列番号３９に相当する重鎖の領域および配列番号４０に相当する軽鎖の領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−５７０６は、配列番号１に相当する重鎖の可変領域および配列番号５に相当する軽鎖の可変領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−６６４２は、配列番号１１に相当する重鎖の可変領域および配列番号１５に相当する軽鎖の可変領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−６８５０は、配列番号２１に相当する重鎖の可変領域および配列番号２５に相当する軽鎖の可変領域を含む抗体である。

ＴＰＰ−３８０３は、配列番号３１に相当する重鎖の可変領域および配列番号３５に相当する軽鎖の可変領域を含む抗体である。

本発明によるリンカーおよび／または担毒体とのカップリングのための抗Ｂ７Ｈ３抗体の好ましい実施形態は、下記の抗体である。

１．ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８によって産生される抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片。

２．ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８によって産生される抗Ｂ７Ｈ３抗体のキメラもしくはヒト化変異体、またはそれの抗原結合性断片。

３．配列番号４１に示したようにポリペプチドに結合している実施形態１または２のいずれかによる抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片。配列番号４１は、ヒトＢ７Ｈ３ポリペプチドの細胞外ドメインのアミノ酸配列を表す。

４．次のもの：
配列番号２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号１２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号１３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号１４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号１６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号１７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号１８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号２２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号２３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号２４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号２６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号２７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号２８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号３２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号３４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号３６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号３８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖
を含むＢ７Ｈ３に結合する抗体または抗原結合性断片。

５．次のもの：
配列番号１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号１１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号１５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号２１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号２５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号３１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号３５に示した軽鎖の可変配列、または
を含む実施形態４による抗体またはそれの抗原結合性断片。

前記抗Ｂ７Ｈ３抗体がＩｇＧ抗体である前出の請求項のいずれかによる複合体。

６．次のもの：
配列番号９に示した重鎖の配列、さらに配列番号１０に示した軽鎖の配列、または
配列番号１９に示した重鎖の配列、さらに配列番号２０に示した軽鎖の配列、または
配列番号２９に示した重鎖の配列、さらに配列番号３０に示した軽鎖の配列、または
配列番号３９に示した重鎖の配列、さらに配列番号４０に示した軽鎖の配列
を含む前出の実施形態のいずれかによる抗体。

７．抗Ｂ７Ｈ３抗体がＴＰＰ６６４２およびＴＰＰ６８５０のうちの一つのヒト化変異体である前出の実施形態のいずれかによる抗体。

８．
置換Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｙ、Ｖ３４Ｍ、Ｔ５０Ｉ、Ｆ５２Ｎ、Ｇ５４Ｓ、Ｎ５５Ｇ、Ｄ５７Ｓ、Ｎ６１Ａ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ｋ６７Ｒ、Ｔ７２Ｒ、Ａ７９Ｖを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号１９に示した重鎖の配列、および
置換Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４３Ａ、Ｑ４５Ｋ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓ、Ｐ９６Ｌを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号２０に示した軽鎖の配列、または
置換Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｇ、Ｖ３４Ｉ、Ｈ３５Ｓ、Ｉ３７Ｖ、Ｔ５０Ｗ、Ｆ５２Ｓ、Ｐ５３Ａ、Ｇ５４Ｙ、Ｄ５７Ｎ、Ｓ５９Ｎ、Ｎ６１Ａ、Ｆ６４Ｌ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ａ６８Ｖ、Ｌ７０Ｍ、Ｋ７４Ｔ、Ｋ７７Ｓ、Ａ１０７Ｑを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号２９に示した重鎖の配列、および
置換Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｖ４８Ｉ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｑ７０Ｄ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号３０に示した軽鎖の配列
を含む前出の実施形態のいずれかによる抗体。

９．ＩｇＧ抗体である、前出の実施形態のいずれかによる抗体。

１０．前出の実施形態のいずれかによる抗原結合性断片またはｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ′断片またはＦ（ａｂ）２断片である前出の実施形態のいずれかによる抗体の抗原結合性断片を含む前出の実施形態のいずれかによる抗体。

１１．モノクローナル抗体またはそれの抗原結合性断片である前出の実施形態のいずれかによる抗体または抗原結合性断片。

１２．ヒト、ヒト化またはキメラ抗体または抗原結合性断片である前出の実施形態のいずれかによる抗体または抗原結合性断片。

特に好ましいものは、抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６、ＴＰＰ−６６４２、ＴＰＰ−６８５０およびＴＰＰ−３８０３である。従って、本発明は、次のアミノ酸置換を有するヒト化誘導体ＴＰＰ６６４２およびＴＰＰ６８５０も提供し、ここで、Ｅ２７Ｑは、対象のヒト化誘導体の個々の鎖のアミノ酸位置２７でのＥのＱによる置換を意味し、Ｎ２８Ｓは、対象のヒト化誘導体の個々の鎖の位置２８におけるＮのＳによる置換を意味する等である。

同位体、塩、溶媒和物、同位体変異体
本発明はまた、本発明の化合物の全ての好適な同位体形態を包含する。本発明の化合物の同位体形態は本明細書において、本発明の化合物内の少なくとも一つの原子が同じ原子番号であるが、自然界において通常もしくは支配的にある原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子に交換されている化合物を意味するものと理解される。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素の同位体があり、例えば^２Ｈ（重水素）、^３Ｈ（三重水素）、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３２Ｐ、^３３Ｐ、^３３Ｓ、^３４Ｓ、^３５Ｓ、^３６Ｓ、^１８Ｆ、^３６Ｃｌ、^８２Ｂｒ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２９Ｉおよび^１３１Ｉである。本発明の化合物の特定の同位体型、特別には１以上の放射性同位体が組み込まれているものは、例えば、作用機序または身体中での有効成分分布の試験に有用となり得る。製造および検出が比較的容易であることから、特には、^３Ｈまたは^１４Ｃ同位体で標識された化合物がその目的には好適である。さらに、同位体、例えば重水素を組み込むことにより、化合物の代謝安定性が高くなることで特に治療上有益となり得るものであり、例えば身体中での半減期が長くなり、または必要な活性成分用量が減る。従って、本発明の化合物のそのような修飾も、場合により、本発明の好ましい実施形態を構成し得る。本発明による化合物の同位体型は、当業者に公知の方法によって、例えばさらに下記に記載の方法および実施例に記載の手順によって、個々の試薬および／または出発化合物の相当する同位体修飾を用いることで製造することができる。

本発明の文脈において好ましい塩は、本発明による化合物の生理的に許容される塩である。自体は医薬用途には適さないが、例えば本発明の化合物の単離または精製には用いることができる塩も包含される。

本発明による化合物の生理的に許容される塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩などがある。

本発明の化合物の生理的に許容される塩にはさらに、通常の塩基の塩、例えば好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアもしくは１から１６個の炭素原子を有する有機アミン、例えば好ましくはエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジンおよび１,２−エチレンジアミンから誘導されるアンモニウム塩などがある。

本発明の文脈で溶媒和物と称されるものは、溶媒分子による配位によって固体または液体での錯体を形成している本発明による化合物の形態と記述される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特定の形態である。本発明の文脈で好ましい溶媒和物は水和物である。

本発明はさらに、本発明の化合物のプロドラッグも包含する。この文脈での「プロドラッグ」という用語は、自体は生理的に活性または不活性であり得るが、身体に存在中に本発明の化合物に変換される（例えば、代謝的または加水分解的に）化合物を指す。

特定の実施形態
次の実施形態が特に好ましい。

実施形態Ａ：
下記式のＡＤＣならびに、ＡＤＣの塩、溶媒和物および溶媒和物の塩。

式中、
ＫＳＰ−Ｌ−は、下記の式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）、（ＩＩｋ）または下記の式（ＩＩｆ）の化合物を表し、バインダーは好ましくは脱グリコシル化した抗Ｂ７Ｈ３抗体である。特に好ましいものは、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０であり、ｎは１から１０の数字を表す。

式（ＩＩｆ）：

式中、
Ａは、Ｃ（＝Ｏ）を表し；
Ｒ^１は、−Ｌ−＃１、Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２、−ＣＯＮＺ″（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２および−ＣＯＮＺ″ＣＨ_２ＣＯＯＨを表し、Ｚ″は、ＨまたはＮＨ_２を表し；
Ｒ^２およびＲ^４はＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒に（ピロリジン環の形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨを表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル−を表し、それは−ＯＨ、Ｏ−アルキル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル、ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）_２またはＮＨ_２（アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルである。）によって置換されていても良く；
Ｒ^５は、ＨまたはＦを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−３−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し；
Ｒ^８は、分岐のＣ_１−_５−アルキル基を表し；
Ｒ^９は、ＨまたはＦを表し、
置換基Ｒ^１およびＲ^３のうちの一つは、−Ｌ−＃１を表し、
−Ｌ−はリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表す。

リンカーは、好ましくは下記のリンカー

であり、
ｍは、０または１を表し；
§は、ＫＳＰへの結合を表し；
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、

を表し、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合点を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合点を示し、
Ｌ１は下記式：

によって表され；
Ｒ^１０は、Ｈ、ＮＨ_２またはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣＯ−または

を表し；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状のアルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳまたは−ＳＯ−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員芳香族または非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合、それは−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

ここで、＃^１はＫＳＰ阻害剤への結合であり、＃^２は抗体に対するカップリング基（例えばＬ２）への結合である。

実施形態Ｂ：
下記式のＡＤＣならびに、ＡＤＣの塩、溶媒和物および溶媒和物の塩。

式中、
ＫＳＰ−Ｌ−は、下記の式（Ｉ）の化合物、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）、（ＩＩｋ）、（ＩＩｆ）の化合物または下記の式（ＩＩｇ）の化合物を表し、バインダーは好ましくは、脱グリコシル化した抗Ｂ７Ｈ３抗体である。この場合、特に好ましいものは、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０であり、ｎは１から１０の数字を表す。

式（ＩＩｇ）：

式中、
Ａは、ＣＯ（カルボニル）を表し；
Ｒ^１は、−Ｌ−＃１、Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２、−ＣＯＮＺ″（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２および−ＣＯＮＺ″ＣＨ_２ＣＯＯＨを表し、Ｚ″は、ＨまたはＮＨ_２を表し；
Ｒ^２およびＲ^４はＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒に（ピロリジン環の形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨを表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル−を表し、それは−ＯＨ、Ｏ−アルキル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル、ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）_２またはＮＨ_２（アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルである。）によって置換されていても良く；
Ｒ^５は、ＨまたはＦを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−３−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し；
Ｒ^８は、分岐のＣ_１−_５−アルキル基を表し；
Ｒ^９は、ＨまたはＦを表し、
置換基Ｒ^１およびＲ^３のうちの一つは、−Ｌ−＃１を表し、
−Ｌ−はリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表し、
−Ｌ−は、

によって表され；
ｍは、０または１を表し；
§は、ＫＳＰへの結合を表し；
§§は、抗体への結合を表し；
Ｌ２は、

を表し、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合点を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合点を示し、
Ｌ１は、下記式：

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖が存在する場合、それは、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く；
＃^１はＫＳＰ阻害剤への結合であり、＃^２は抗体に対するカップリング基（例えばＬ２）への結合である。

実施形態Ｃ：
下記式のＡＤＣならびに、ＡＤＣの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

式中、
ＫＳＰ−Ｌ−は、下記の（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）；（ＩＩｉ）、（ＩＩｊ）、（ＩＩｋ）の化合物または下記の式（ＩＩｈ）の化合物を表し、バインダーは脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、ｎは１から１０の数字を表す。

式（ＩＩｈ）：

式中、
Ａは、Ｃ（＝Ｏ）を表し；
Ｒ^１は、−Ｌ−＃１を表し；
Ｒ^２およびＲ^４はＨを表し、またはＲ^２およびＲ^４が一緒に（ピロリジン環の形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、Ｒ^１１はＨを表し；
Ｒ^３は、Ｃ_１−１０−アルキル−を表し、それは−ＯＨ、Ｏ−アルキル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−アルキル、Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−アルキル、ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−アルキル、Ｓ（Ｏ）_ｎ−アルキル、ＳＯ_２−ＮＨ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ（アルキル）_２またはＮＨ_２（アルキルは好ましくはＣ_１−３−アルキルである。）または−ＭＯＤによって置換されていても良く；
−ＭＯＤは、−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０は、ＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣＯ−または−ＣＯＮＨ−（Ｇ１が−ＮＨＣＯ−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）を表し；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、直鎖もしくは分岐の炭化水素基を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＣＯ−、ＣＯＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＳＯ_２ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＣＯＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−（Ｒ^ｙは、Ｈ、フェニル、Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、または−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒｘは、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。）の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、側鎖を含む炭化水素は−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、Ｇ３は−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、前記基−ＭＯＤは好ましくは少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有し；
Ｒ^５は、ＨまたはＦを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、Ｈ、（フッ素化されていても良い）Ｃ_１−３−アルキル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルケニル、（フッ素化されていても良い）Ｃ_２−_４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表し；
Ｒ^８は、分岐のＣ_１−_５−アルキル基を表し；
Ｒ^９は、ＨまたはＦを表し；
−Ｌ−はリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表し、
−Ｌ−は、

によって表され；
ｍは、０または１を表し；
§は、ＫＳＰへの結合を表し；
§§は、抗体への結合を表し、
Ｌ２は、

によって表され；
式中、
Ｒ^１０は、Ｈ、ＮＨ_２またはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣＯ−または

を表し；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状のアルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＭｅ−、−ＮＨＮＨ−、−ＳＯ_２ＮＨＮＨ−、−ＣＯＮＨＮＨ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒｘは、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。）およびＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員芳香族または非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、存在する場合に側鎖を含む炭化水素鎖は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く；
＃１はＫＳＰ阻害剤への結合であり、＃２は抗体に対するカップリング基（例えばＬ２）への結合である。

実施形態Ｄ：
本発明は、下記一般式のバインダー／活性化合物複合体も提供する。

式中、
バインダーは（好ましい実施形態において、脱グリコシル化）抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、Ｌはリンカーを表し、ＷＳは活性化合物、好ましくはＫＳＰ阻害剤、例えば、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）、（ＩＩｇ）、（ＩＩｈ）または（ＩＩｉ）のうちの一つの本発明によるＫＳＰ阻害剤を表し、ｍは１から２、好ましくは１の数字を表し、ｎは１から５０、好ましくは１．２から２０、特に好ましくは２から８の数字を表し、Ｌは下記構造のうちの一つを有する。ここで、ｍは、リンカー当たりの活性化合物分子の数を表し、ｎはバインダー当たりの活性化合物／リンカー複合体の数の平均を表す。従って、複合体分子に存在する全てのＷＳの合計はｍおよびｎの積である。

ＷＳは、動物、好ましくはヒトにおける局所または全身治療作用を有する活性化合物である。これらの活性化合物は概して、５ｋＤａ以下、好ましくは１．５ｋＤａ以下の分子量を有する。好ましい活性化合物は、ビンカ・アルカロイド類、オーリスタチン類、ツブリシン類、デュオカルマイシン類、キナーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤およびＫＳＰ阻害剤である。

ここで、Ｌは、下記の式Ａ３およびＡ４の一つ：

を表し、
＃^１はバインダーの硫黄原子への結合点を示し、＃^２は活性化合物への結合点を示し、ｘは１または２を表し、Ｒ２２はＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、Ｂｒ、好ましくはＣＯＯＨを表す。

Ｌ１は上記と同じ意味を有する。好ましくは、−Ｌ１−＃２は下記式：

によって表され、
＃３は窒素原子への結合点を示し；
Ｒ^１０は、Ｈ、ＮＨ_２またはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＨ−または

（Ｇ１がＮＨＣＯまたは

を表す場合、Ｒ１０はＮＨ_２を表さない。）を表し；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、アリーレン基からの１から１００個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖および／または直鎖および／または分岐および／または環状のアルキレン基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＣＯ−、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ^ｙ−、ＣＯＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＳＯ_２ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−ＣＯＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−（Ｒ^ｙは、Ｈ、フェニル、Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_１０−アルキニル、それらはそれぞれによって置換されていても良くＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸を表す。）、−ＣＯ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒ^ｘは、Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。）および／またはＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員芳香族または非芳香族複素環（好ましくは

）の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖を含む炭化水素は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

Ｇ２におけるさらなる中断基は好ましくは、

本発明による複合体において、または本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、特に好ましくは９０％強（各場合、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の範囲で、式Ａ３またはＡ４の二つの構造のうちの一つとして存在する。

式Ａ３またはＡ４のリンカーとの複合体は、それぞれ下記の式Ａ３′およびＡ４′の適切な臭素誘導体への抗体のカップリングによって得ることができる。

式Ａ３′またはＡ４′のこれらの臭素誘導体は、下記の図式３０から３２において例示的に示したように、ＨＯＯＣＣＨ_２ＣＨＢｒＣＯＯＲ_２２またはＨＯＯＣＣＨＢｒＣＨ_２ＣＯＯＲ_２２をバインダーのアミン基と反応させることによって得ることができる。

図式３０：

［ａ）：２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート（ＢＥＰ）、ＤＣＭ、ピリジン、ＲＴ；ｂ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ；ｃ）３から４当量のＴＣＥＰ、ＰＢＳ緩衝液；ｄ）ＰＢＳ緩衝液、２０時間室温］
図式３１：

［ａ）：２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート（ＢＥＰ）、ＤＣＭ、ピリジン、ＲＴ；ｂ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ；ｃ）３から４当量のＴＣＥＰ、ＰＢＳ緩衝液；ｄ）ＰＢＳ緩衝液、２０時間室温］
実施形態Ｅ：
本発明は、下記一般式のバインダー／活性化合物複合体も提供する。

式中、
バインダーは、好ましくは脱グリコシル化された抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、Ｌはリンカーを表し、ＷＳは活性化合物、好ましくはＫＳＰ阻害剤、例えば、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）または（ＩＩａ）のうちの一つの本発明によるＫＳＰ阻害剤を表し、ｍは１から２、好ましくは１の数字を表し、ｎは１から５０、好ましくは１．２から２０、特に好ましくは２から８の数字を表し、Ｌは下記構造のうちの一つを有する。ここで、ｍは、リンカー当たりの活性化合物分子の数を表し、ｎはバインダー当たりの活性化合物／リンカー複合体の数の平均を表す。従って、複合体分子に存在する全てのＷＳの合計はｍおよびｎの積である。

ここで、Ｌは、

を表し、
＃^１は抗体の硫黄原子への結合点を示し、＃^２は活性化合物への結合点を示し、Ｒ^２２は、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、Ｂｒ、好ましくはＣＯＯＨを表し；従って、バインダーの硫黄原子への連結は下記の構造の一つを有し得る。

抗体薬物複合体当たり複数の活性化合物分子ＷＳを含む抗体薬物複合体の場合、式Ａ１および／またはＡ２による両方の構造が抗体薬物複合体に存在し得る。本発明による抗体薬物複合体は異なる抗体薬物複合体の混合物であることができることから、この混合物が式Ａ１または式Ａ２の抗体薬物複合体および式Ａ１およびＡ２のものの両方を含むこともできる。

Ｌ_５は、−（ＣＨ_２）_ｍ−（ＣＨＲＳ）_ｎ−（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｏ−（Ｘ）_ｐ−（ＣＨ_２）_ｑ−から選択される基であり、ｍ、ｎ、ｏ、ｐおよびｑは互いに独立に、次の値：ｍ＝０から１０；ｎ＝０または１；ｏ＝０から１０；ｐ＝０または１；およびｑ＝０から１０（ｍ＋ｎ＋ｏ＝１から１５、好ましくは１から６）を有する。Ｘは、５員もしくは６員の芳香族または非芳香族複素環もしくは同素環、好ましくは−Ｃ_６Ｈ_４−または−Ｃ_６Ｈ_１０−を表す。ＲＳは、酸基、好ましくは−ＣＯＯＨまたはＳＯ_３Ｈを表す。

Ｌ_６は、−ＣＯＮＨ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＮＨＣＯＯ−、

および

から選択される基であり、
ｒは１、２または３である。

Ｌ_７は、単結合または直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖（それは、アリーレン基からの１から１００個（好ましくは１から１０個）の炭素原子を有する。）および／または直鎖および／または分岐および／または環状アルキレン基から選択される基であり、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、ＳＯ_２、−ＮＲｙ−、−ＮＲｙＣＯ−、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｙ−、ＣＯＮＲｙ−、−ＮＲｙＮＲｙ−、−ＳＯ_２ＮＲｙＮＲｙ−、−ＣＯＮＲｙＮＲｙ−（Ｒ^ｙは、Ｈ、フェニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ２−Ｃ１０−アルケニルまたはＣ２−Ｃ１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。）、−ＣＯ−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−（Ｒｘは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ３−アルキルまたはフェニルを表す。）および／またはＮ、ＯおよびＳ、−ＳＯ−または−ＳＯ_２−からなる群から選択される４個以下のヘテロ原子を有する３から１０員、好ましくは５から１０員の芳香族または非芳香族複素環の１以上によって１回または複数回中断されていても良く、側鎖を含む炭化水素は、−ＮＨＣＯＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。

Ｌ_５は好ましくは、基−（ＣＨ_２）_ｍ−（ＣＨＲＳ）_ｎ−（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｏ−（Ｘ）_ｐ−（ＣＨ_２）_ｑ−であり、ｍ＝１から３、ｎ＝０、ｏ＝０から７、ｐ＝０およびｑ＝０または１である。特に好ましいものは、基−（ＣＨ_２）_ｍ−（ＣＨＲＳ）_ｎ−（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｏ−（Ｘ）_ｐ−（ＣＨ_２）_ｑ−であり、ｍ＝１または２、ｎ＝０、ｏ＝０または１、ｐ＝０およびｑ＝０または１である。

Ｌ_６は好ましくは、−ＣＯＮＨ−および−ＮＨＣＯ−から選択される基である。

Ｌ_７は好ましくは、単結合または−［（ＣＨ_２）_ｘ−（Ｘ^４）_ｙ］_ｗ−（ＣＨ_２）_ｚ−であり、
ｗ＝０から２０であり；
ｘ＝０から５であり；
ｙ＝０または１であり；
ｚ＝１から５であり；
Ｘ^４は、−Ｏ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−または

を表す。

特に好ましくは、Ｌ_７は単結合または基−［（ＣＨ_２）_ｘ−ＮＨＣＯ−）］であり、ｘ＝１から５である。

特に好ましくは、−Ｌ_５−Ｌ_６−Ｌ_７−は、−（ＣＨ_２）_ｍ−（ＣＨＲＳ）_ｎ−（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｏ−（Ｘ）_ｐ−（ＣＨ_２）_ｑ−−ＮＨＣＯ−−［（ＣＨ_２）_ｘ−ＮＨＣＯ−）］を表し、ｍ＝１または２、ｎ＝０、ｏ＝０または１、ｐ＝０、およびｑ＝０または１、ｘ＝１から５である。

しかしながら、これらの二つの構造が一緒に、本発明による複合体に存在することも可能である。

本発明によれば、これらの抗体薬物複合体は、下記式の化合物から製造することができる。

式中、Ｌは下記式Ａ′：

を有する。

好ましくは、Ａ′のＡへの変換は、７．５から８．５、好ましくは８のｐＨを有するｐＨ緩衝液中、３７℃以下、好ましくは１０から２５℃の温度で、４０時間以内、好ましくは１から１５時間の期間にわたって撹拌することで行う。

実施形態Ｉ：
下記式の抗体複合体

式中、
Ｒ２、Ｒ４およびＲ５はＨを表し；
Ｒ３は、−ＣＨ_２ＯＨを表し；
Ｒ１は、−Ｌ１−Ｌ２−バインダーを表し、
Ｌ１は、

を表し、
＃２はＬ２への結合を表し、＃１は他方の結合への結合を表し；
Ｌ２は、下記式Ａ５およびＡ６の構造の一方または両方：

を表し、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合点を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合点を示し、
Ｒ^２２は、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ（Ｒは各場合で、Ｃ_１−３−アルキルを表す。）、ＣＯＮＨ_２、好ましくはＣＯＯＨを表す。

本発明による複合体において、または本発明による複合体の混合物において、抗体のシステイン残基への結合が、好ましくは８０％強、特に好ましくは９０％強（各場合、抗体へのリンカーの結合の総数に基づいて）の範囲で、特に好ましくは式Ａ５またはＡ６の二つの構造のうちの一つとして存在する。

ここで、式Ａ５またはＡ６の構造は概して、好ましくは抗体の結合数に基づいて６０：４０から４０：６０の比率で一緒に存在する。そして、残りの結合は、下記構造として存在する。

その抗体は好ましくは、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォームに特異的に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体、またはそれの抗原結合性断片、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０である。好ましい実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は脱グリコシル化型で存在する。

具体的実施形態
下記の式のうちの一つによる次の特に好ましい抗体複合体が提供され、ｎは１から２０の数字であり、ＡＫ１（ならびにＡＫ１ａ、ＡＫ１ｂなど）およびＡＫ２（ならびにＡＫ２ａ、ＡＫ２ｂなど）は抗体である。ＡＫ１はシステインを介して結合した抗体であり、ＡＫ２はリジンを介して結合した抗体である。

下記式のいずれかにおける抗体（ＡＫ１またはＡＫ２）は好ましくは、Ｂ７Ｈ３のヒトＩｇ４および／またはヒトおよび／またはマウスＩｇ２アイソフォームに特異的に結合するキメラもしくはヒト化抗Ｂ７Ｈ３抗体、またはそれの抗原結合性断片、特には抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−５７０６およびそれのヒト化変異体、例えばＴＰＰ−６６４２およびＴＰＰ−６８５０および抗Ｂ７Ｈ３抗体ＴＰＰ−３８０３である。好ましい実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は脱グリコシル化されている。

他の複合体は、下記式のうちの一つを有し、それの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーであることができる。

式中、
ＡＫ１は、システインを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、
ＡＫ２は、リジンを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体であり、それは抗体ＴＰＰ−５７０６またはＴＰＰ−３８０３のキメラまたはヒト化変異体であり、
ｎは、１から２０の数字であり、
Ｌ_１は、１から３０個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖であり、それは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＨ−、シクロペンチル、ピペリジニル、フェニルによって同一でまたは異なって１回または複数回中断されていても良く、
その直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖は、−ＣＯＯＨまたは−ＮＨ_２によって置換されていても良い。

ここで、リンカーＬ_１は好ましくは、次の基：
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_６−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_４−§§
§−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_３−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｓ（＝Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＯＯＨ）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２ＣＯＯＨ］−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_３）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；

§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；

§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_５−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_８−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−ＣＨ_３］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｓ（＝Ｏ）_２−（ＣＨ_２）２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；または
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§
を表し、
§は、薬剤分子への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
イソＣ_３Ｈ_７はイソプロピル残基を表し、
ならびに、それらの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーである。

治療用途
治療するのに本発明による化合物を用いることができる過増殖性疾患には、特には癌および腫瘍疾患の群などがある。本発明の文脈において、これらは、特には次の疾患（ただし、これらに限定されるものではない）：乳癌および乳房腫瘍（腺管癌および小葉型などの乳癌、イン・サイツも）、気道の腫瘍（小細胞肺癌および非小細胞肺癌、気管支癌）、脳腫瘍（例えば、脳幹の腫瘍および視床下部の腫瘍、星細胞腫、上衣細胞腫、神経膠芽腫、神経膠腫、髄芽腫、髄膜腫ならびに神経外胚葉性腫瘍および松果体腫瘍）、消化器の腫瘍（食道、胃、胆嚢、小腸、大腸、直腸および肛門の癌）、肝臓腫瘍（特に、肝細胞癌、胆管癌および混合型肝細胞胆管癌）、頭部および頸部領域の腫瘍（喉頭、下咽頭、鼻咽頭、口咽頭癌、口唇および口腔癌、口腔メラノーマ）、皮膚腫瘍（基底細胞腫、棘細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、悪性メラノーマ、非メラノーマ皮膚癌、メルケル細胞皮膚癌、肥満細胞腫瘍）、間質および結合組織の腫瘍（特に、軟組織の肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、線維肉腫、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、リンパ肉腫および横紋筋肉腫）、眼球の腫瘍（特に、眼球内メラノーマおよび網膜芽細胞腫）、内分泌腺および外分泌腺の腫瘍（例えば甲状腺および副甲状腺、膵臓および唾液腺の癌、腺癌）、尿路の腫瘍（膀胱、陰茎、腎臓、腎盂および尿管の腫瘍）および生殖器の腫瘍（女性における子宮内膜、子宮頸部、卵巣、膣、外陰部および子宮の癌、および男性における前立腺および睾丸の癌）を意味するものと理解される。これらには、固形型または循環細胞としての血液、リンパ系および脊髄の増殖性疾患などもあり、例えば白血病、リンパ腫および骨髄増殖性疾患、例えば急性骨髄性、急性リンパ芽球性、慢性リンパ性、慢性骨髄性およびヘアリー細胞性の白血病、およびＡＩＤＳ関連リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫および中枢神経系でのリンパ腫である。

ヒトでのこれらの十分に特徴付けられている疾患は、他の哺乳動物でも同等の病因によって生じ得るものであり、本発明の化合物によって同様に治療可能である。

本発明による化合物による上記で言及の癌疾患の治療は、固体腫瘍の治療およびそれの転移型および循環型の治療の両方を含むものである。

本発明の文脈において、「治療」または「治療する」という用語は、従来の意味で用いられ、疾患または健康上の異常と戦い、軽減し、弱化し、または改善すること、ならびに例えば癌の場合でのように、この疾患によって障害される生活条件を改善することを目的として、患者の世話を行い、ケアを行い、看病することを意味する。

従って、本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療および／または予防のための本発明の化合物の使用を提供する。

本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療および／または予防のための医薬品を製造するための本発明の化合物の使用を提供する。

本発明はさらに、障害の、特別には上記障害の治療および／または予防方法での本発明の化合物の使用を提供する。

本発明はさらに、有効量の少なくとも１種類の本発明による化合物を用いて、障害、特別には上記障害を治療および／または予防する方法を提供する。

本発明の化合物は、単独で、または必要に応じて、１以上の他の薬理活性物質と組み合わせて用いることができ、ただしその組み合わせは望ましくないおよび許容できない副作用を生じるものではない。従って、本発明はさらに、特には上記障害の治療および／または予防のための、少なくとも１種類の本発明の化合物および１以上のさらなる有効成分を含む医薬品を提供する。

例えば、本発明の化合物は、癌疾患治療のための既知の抗過剰増殖性、細胞増殖抑制性または細胞毒性物質と組み合わせることができる。好適な組み合わせ活性化合物の例には、下記のものなどがある。

１３１Ｉ−ｃｈＴＮＴ、アバレリックス、アビラテロン、アクラルビシン、アドゥ−トラスツズマブエムタンシン、アファチニブ、アフリベルセプト、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アレンドロン酸、アリトレチノイン、アルトレタミン、アミホスチン、アミノグルテチミド、ヘキシル−５−アミノレブリネート、アムルビシン、アムサクリン、アナストロゾール、アンセスチム、アネトールジチオレチオン、アンギオテンシンＩＩ、アンチトロンビンＩＩＩ、アプレピタント、アルシツモマブ、アルグラビン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アキシチニブ、アザシチジン、ベロテカン、ベンダムスチン、ベリノスタット、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ビサントレン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブセレリン、ボスチニブ、ブレンツキシマブ・ベドチン、ブスルファン、カバジタキセル、カボザンチニブ、カルシウムホリナート、カルシウムレボホリナート、カペシタビン、カプロマブ、カルボプラチン、カルフィルゾミブ、カルモフール、カルムスチン、カツマキソマブ、セレコキシブ、セルモロイキン、セリチニブ、セツキシマブ、クロラムブシル、クロルマジノン、クロルメチン、シドフォビル、シナカルセト、シスプラチン、クラドリビン、クロドロン酸、クロファラビン、コパンリシブ、クリサンタスパーゼ、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダブラフェニブ、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デガレリクス、デニロイキンジフチトクス、デノスマブ、デプレオチド、デスロレリン、デクスラゾキサン、塩化ジブロスピジウム、ジアンヒドロガラクチトール、ジクロフェナク、ジヌツキシマブ、ドセタキセル、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキソルビシン＋エストロン、ドロナビノール、エドレコロマブ、酢酸エリプチニウム、エンドスタチン、エノシタビン、エンザルタミド、エピルビシン、エピチオスタノール、エポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンゼータ、エプタプラチン、エリブリン、エルロチニブ、エソメプラゾール、エストラムスチン、エトポシド、エベロリムス、エキセメスタン、ファドロゾール、フェンタニル、フルオキシメステロン、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォリン酸、フォルメスタン、ホスアプレピタント、フォテムスチン、フルベストラント、ガドブトロール、ガドテリドール、ガドテル酸メグルミン塩、ガドベルセタミド、ガドキセト酸・２ナトリウム塩（Ｇｄ−ｅＯＢ−ＤＴＰＡ・２ナトリウム塩）、硝酸ガリウム、ガニレリクス、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、グルカルピダーゼ、グルトキシム（ｇｌｕｔｏｘｉｍ）、ゴセレリン、グラニセトロン、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＳＣＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ），ヒスタミン二塩酸塩、ヒストレリン、ヒドロキシカルバミド、Ｉ−１２５シード、イバンドロン酸、イブリツモマブチウキセタン、イブルチニブ、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、イミキモド、インプロスルファン、インジセトロン、インカドロン酸、インゲノールメブテート、インターフェロンアルファ、インターフェロンベータ、インターフェロンガンマ、イオビトリドール、イオベングアン（１２３Ｉ）、イオメプロール、イピリムマブ、イリノテカン、イトラコナゾール、イキサベピロン、ランレオチド、ランソプラゾール、ラパチニブ、ラソコリン、レナリドマイド、レンチナン、レトロゾール、リュープロレリン、レバミソール、レボノルゲストレル、レボチロキシンナトリウム、リペグフィルグラスチム、リスリド、ロバプラチン、ロムスチン、ロニダミン、マソプロコール、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メラルソプロール、メルファラン、メピチオスタン、メルカプトプリン、メスナ、メタドン、メトトレキサート、メトキサレン、アミノレブリン酸メチル、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、メチロシン、ミファムルチド、ミルテホシン、ミリプラチン、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトラクトール、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、モガムリズマブ、モルグラモスチム、モピダモール、モルヒネ塩酸塩、モルヒネ硫酸塩、ナビロン、ナビキシモルス、ナファレリン、ナロキソン＋ペンタゾシン、ナルトレキソン、ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネララビン、ネリドロン酸、ニボルマブペンテトレオチド（ｎｉｖｏｌｕｍａｂｐｅｎｔｅｔｒｅｏｔｉｄｅ）、ニロチニブ、ニルタミド、ニモラゾール、ニモツズマブ、ニムスチン、ニトラクリン、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オクトレオチド、オファツムマブ、オマセタキシン−メペサクシネート、オメプラゾール、オンダンセトロン、オルゴテイン、オリロチモド、オキサリプラチン、オキシコドン、オキシメトロン、オゾガマイシン、ｐ５３遺伝子治療、パクリタキセル、パラジウム−１０３シード、パロノセトロン、パミドロン酸、パニツムマブ、パントプラゾール、パゾパニブ、ペグアスパルガーゼ、ペンブロリズマブ、ペグインターフェロンアルファ−２ｂ、ペメトレキセド、ペントスタチン、ペプロマイシン、ペルフルブタン、ペルホスファミド、ペルツズマブ、ピシバニール、ピロカルピン、ピラルビシン、ピクサントロン、プレリキサホル、プリカマイシン、ポリグルサム、リン酸ポリエストラジオール、ポリビニルピロリドン＋ヒアルロン酸ナトリウム、ポリサッカライド−Ｋ、ポマリドミド、ポナチニブ、ポルフィマーナトリウム、プララトレキセート、プレドニムスチン、プレドニゾン、プロカルバジン、プロコダゾール、プロプラノロール、キナゴリド、ラベプラゾール、ラコツモマブ、塩化ラジウム−２２３、ラドチニブ、ラロキシフェン、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ラムシルマブ、ラニムスチン、ラスブリカーゼ、ラゾキサン、レファメチニブ、レゴラフェニブ、リセドロン酸、エチドロン酸レニウム−１８６、リツキシマブ、ロミデプシン、ロムルチド、ロニシクリブ、サマリウム（１５３Ｓｍ）レキシドロナム、サツモマブ、セクレチン、シプロイセル−Ｔ、シゾフィラン、ソブゾキサン、グリシジダゾールナトリウム、ソラフェニブ、スタノゾロール、ストレプトゾシン、スニチニブ、タラポルフィン、タミバロテン、タモキシフェン、タペンタドール、タソネルミン、テセロイキン、テクネチウム（９９ｍＴｃ）ノフェツモマブ（ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ）メルペンタン、９９ｍＴｃ−ＨＹＮＩＣ−［Ｔｙｒ３］−オクトレオチド、テガフール、テガフール＋ギメラシル＋オテラシル、テモポルフィン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、テストステロン、テトロホスミン、サリドマイド、チオテパ、チマルファシン、チオグアニン、トシリズマブ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラベクテジン、トラマドール、トラスツズマブ、トレオスルファン、トレチノイン、トリフルリジン＋チピラシル、トラメチニブ、トリロスタン、トリプトレリン、トロホスファミド、トロンボポエチン、ウベニメクス、バルルビシン、バンデタニブ、バプレオチド、ヴァラチニブ、ベムラフェニブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、ビスモデギブ、ボリノスタット、イットリウム−９０ガラス微小球、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、ゾレドロン酸、ゾルビシン。

さらに、本発明の化合物は、例えば、例として次の標的：ＯＸ−４０、ＣＤ１３７／４−１ＢＢ、ＤＲ３、ＩＤＯ１／ＩＤＯ２、ＬＡＧ−３、ＣＤ４０に結合し得るバインダーと組み合わせることができる。

さらに、本発明による化合物は、放射線療法および／または外科的介入と組み合わせて用いることもできる。

概して、本発明の化合物と他の細胞増殖抑制的にまたは細胞毒性的に活性な薬剤との組み合わせで、次の目的を追求することができる。

個々の活性化合物による治療と比較して、腫瘍増殖の遅延、それの大きさの低減、またはさらにそれの完全な除去における効力の改善；
単独療法の場合より低い用量で使用される化学療法剤使用の可能性；
個々の投与と比較して副作用少なく、より耐容性のある治療法の可能性；
より広いスペクトラムの腫瘍性疾患の治療の可能性；
療法に対するより高い応答速度の達成；
現代の標準療法と比較して長い患者の生存時間。

本発明はさらに、代表的には１以上の不活性で無毒性の医薬として好適な賦形剤とともに少なくとも一つの本発明の化合物を含む医薬、および上記目的のためのそれの使用を提供する。

本発明の化合物は、全身的および／または局所的に作用し得る。これに関して、それは好適な形で、例えば非経口的に、可能な場合に吸入によって、またはインプラントもしくはステントとして投与することができる。

本発明の化合物は、これらの投与経路に好適な投与形態で投与することができる。

非経口投与は、吸収段階（例えば、静脈、動脈、心臓内、髄腔内または腰椎内で）を回避することができ、または吸収（例えば、筋肉、皮下、皮内、経皮または腹腔内で）を含むことができる。非経口投与の好適な投与形態には、液剤、懸濁液、乳濁液または凍結乾燥物の形態での注射および注入用製剤などがある。好ましいものは、非経口投与、特別には静脈投与である。

概して、非経口投与の場合、約０．００１から１ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１から０．５ｍｇ／ｋｇの量を投与して、効果的な結果を得ることが有利であることが認められている。

そうではあっても、場合により、具体的に体重、投与経路、有効成分に対する個体の応答、製剤の種類、および投与を行う時刻もしくは間隔に応じて、指定量から逸脱する必要であることもあり得る。従って、場合により、上記最小量より少ない量で十分である可能性があるが、他の場合には、言及した上限を超えなければならない。より大きい量の投与の場合、それらを１日かけて、いくつかの個々の用量に分けることが得策である可能性がある。

実施例
下記の実施例は、本発明を説明するものである。本発明は実施例に限定されるものではない。

別段の断りがない限り、下記の試験および実施例におけるパーセントは重量パーセントであり、部は重量部である。液体／液体溶液における溶媒比、希釈比および濃度データは、各場合で体積基準である。

実験の説明において、反応が行われる温度が記載されていない場合、室温を想定することができる。

合成経路：
実施例の例として、下記の図式は、実施例に至る例示的合成経路を示すものである。

図式２０：システイン連結ＡＤＣの合成

図式２１：システイン連結ＡＤＣの合成

図式２２：

［ａ）：例えば水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム、酢酸、ＤＣＭ、ＲＴ；ｂ）例えばアセトキシアセチルクロライド、ＮＥｔ_３、ＤＣＭ、ＲＴ；ｃ）例えばＬｉＯＨ、ＴＨＦ／水、ＲＴ；ｄ）例えばＨ_２、Ｐｄ−Ｃ、ＥｔＯＨ、ＲＴ；ｅ）例えばＴｅｏｃ−ＯＳｕ、ＮＥｔ_３、ジオキサン、ＲＴ；ｆ）例えばＦｍｏｃ−Ｃｌ、ジイソプロピルエチルアミン、ジオキサン／水２：１、ＲＴ］
図式２４：

［ａ）：例えばベンジルブロマイド、Ｃｓ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ、ＲＴ；ｂ）例えばＰｄ（ｄｐｐｆ）_２Ｃｌ_２、ＤＭＦ、Ｎａ_２ＣＯ_３、８５℃；ｃ）例えばＬｉＡｌＨ_４、ＴＨＦ、０℃；ＭｎＯ_２、ＤＣＭ、ＲＴ；ｄ）例えばＴｉ（ｉＯＰｒ）_４、ＴＨＦ、ＲＴ；ｅ）例えばｔＢｕＬｉ、ＴＨＦ、−７８℃；ＭｅＯＨ、ＮＨ_４Ｃｌ；ｆ）例えばＨＣｌ／１，４−ジオキサン］
図式２５：システイン連結ＡＤＣの合成

図式２６：加水分解コハク酸アミドを介したシステイン連結ＡＤＣの合成
Ｌ１＝ＣＨ_２であるＡＤＣについて特に、この方法を用いて、これらのＡＤＣを開鎖連結型に変換した。

図式２７：

［ａ）：水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム、酢酸、ＤＣＭ、ＲＴ；ｂ）アセトキシアセチルクロライド、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＣＭ、ＲＴ；ｃ）ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｄ）トリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｅ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ．］
図式２８：

［ａ）：ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｂ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ．］
図式２９：

［ａ）：水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム、酢酸、ＤＣＭ、ＲＴ；ｂ）アセトキシアセチルクロライド、トリエチルアミン、ＤＣＭ、ＲＴ；ｃ）ＬｉＯＨ、ＭｅＯＨ、ＲＴ；ｄ）トリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｅ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ．］
図式３０：

［ａ）：２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート（ＢＥＰ）、ＤＣＭ、ピリジン、ＲＴ；ｂ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ；ｃ）３から４当量のＴＣＥＰ、ＰＢＳ緩衝液；ｄ）ＰＢＳ緩衝液、２０時間室温］
図式３２：

［ａ）例えば亜鉛ジメチル、シクロヘキシル（ｃｙｈｅｘｙｌ）ＭｇＣｌ、ＴＨＦ、−７８℃；ＮＨ_４Ｃｌ；ｂ）例えばＨＣｌ／１，４−ジオキサン］
図式３３：

［ａ）：水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム、酢酸、ＤＣＭ、ＲＴ；ｂ）アセトキシアセチルクロライド、トリエチルアミン、ＤＣＭ、ＲＴ；ｃ）Ｌ−システイン、ＮａＨＣＯ_３、ＤＢＵ、イソプロパノール／水、ＲＴ；ｄ）３−スルファニルプロパン酸、Ｋ_２ＣＯ_３、ＲＴ；ｅ）リンカー、ＨＡＴＵ、ＤＭＦ、ジイソプロピルエチルアミン、ＲＴ；ｅ）塩化亜鉛、トリフルオロエタノール、５０℃、ＥＤＴＡ．］
Ａ．実施例
略称および頭字語：
Ａ４３１ＮＳ：ヒト腫瘍細胞株
Ａ５４９：ヒト腫瘍細胞株
Ａ４９８：ヒト腫瘍細胞株
ＡＢＣＢ１：ＡＴＰ結合カセットサブファミリーＢメンバー１（Ｐ−ｇｐおよびＭＤＲ１と同義語）
ａｂｓ．：純粋
Ａｃ：アセチル
ＡＣＮ：アセトニトリル
ａｑ．：水系、水溶液
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
ＢＣＲＰ：乳癌耐性タンパク質、排出輸送体
ＢＥＰ：２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｂｒ．：広い（ＮＭＲで）
Ｅｘ．：実施例
ＣＩ：化学イオン化（ＭＳで）
ｄ：二重線（ＮＭＲで）
ｄ：日
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＤＣＩ：直接化学イオン化（ＭＳで）
ｄｄ：二重線の二重線（ＮＭＲで）
ＤＭＡＰ：４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地（細胞培養のための標準培養液）
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＰＢＳ、Ｄ−ＰＢＳ、ＰＢＳ：ダルベッコのリン酸緩衝塩溶液
ＰＢＳ＝ＤＰＢＳ＝Ｄ−ＰＢＳ、ｐＨ７．４、Ｓｉｇｍａから、ＮｏＤ８５３７
組成：
ＫＣｌ０．２ｇ
ＫＨ_２ＰＯ_４（無水物）０．２ｇ
ＮａＣｌ８．０ｇ
Ｎａ_２ＨＰＯ_４（無水物）１．１５ｇ
Ｈ_２Ｏで１リットルとする
ｄｔ：三重線の二重線（ＮＭＲで）
ＤＴＴ：ＤＬ−ジチオスレイトール
ＥＤＣ：Ｎ′−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＧＦＲ：上皮増殖因子受容体
ＥＩ：電子衝撃イオン化（ＭＳで）
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着検定法
ｅｑ．：当量
ＥＳＩ：電気スプレーイオン化（ＭＳで）
ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆｑ：ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆｑ（Ｔｏｆ＝飛行時間およびｑ＝四重極を用いる質量分析装置の名称）
ＦＣＳ：ウシ胎仔血清
Ｆｍｏｃ：（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル
ｓａｔ．：飽和
ＧＴＰ：グアノシン５′三リン酸
ｈ：時間
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＣＴ−１１６：ヒト腫瘍細胞株
ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸
ＨＯＡｃ：酢酸
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物
ＨＯＳｕ：Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド
ＨＰＬＣ：高圧高速液体クロマトグラフィー
ＨＴ２９：ヒト腫瘍細胞株
ＩＣ_５０：半最大阻害濃度
ｉ．ｍ．：筋肉的に、筋肉への投与
ｉ．ｖ．：静脈的に、静脈への投与
ｃｏｎｃ．：濃厚
ＬＣ−ＭＳ：液体クロマトグラフィー結合質量分析
ＬＬＣ−ＰＫ１細胞：ルイス肺癌ブタ（ｐｏｒｋ）腎臓細胞株
Ｌ−ＭＤＲ：ヒトＭＤＲ１トランスフェクトＬＬＣ−ＰＫ１細胞
ｍ：多重線（ＮＭＲで）
Ｍｅ：メチル
ＭＤＲ１：多剤耐性タンパク質１
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ｍｉｎ：分
ＭＳ：質量分析
ＭＴＴ：３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイド３
ＮＣＩ−Ｈ２９２：ヒト腫瘍細胞株
ＮＣＩ−Ｈ５２０：ヒト腫瘍細胞株
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ：Ｎ−メチル−２−ピロリジノン
ＮＭＲ：核磁気共鳴スペクトル測定
ＮＭＲＩ：ＮａｖａｌＭｅｄｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＭＲＩ）由来のマウス系統
ｎｕｄｅマウス：ヌードマウス（実験動物）
ＮＳＣＬＣ：非小細胞肺癌
ＰＢＳ：リン酸緩衝塩溶液
Ｐｄ／Ｃ：パラジウム／活性炭
Ｐ−ｐｇ：Ｐ−糖タンパク質（ｇｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ）、輸送体タンパク質
ＰＮＧａｓｅＦ：糖を開裂させる酵素
ｑｕａｎｔ．：定量的（収率で）
ｑｕａｒｔ：四重線（ＮＭＲで）
ｑｕｉｎｔ：五重線（ＮＭＲで）
Ｒ_ｆ：保持指数（ＴＬＣで）
ＲＴ：室温
Ｒ_ｔ：保持時間（ＨＰＬＣで）
ｓ：一重線（ＮＭＲで）
ｓ．ｃ．：皮下的に、皮下への投与
ＳＣＣ−４：ヒト腫瘍細胞株
ＳＣＣ−９：ヒト腫瘍細胞株
ＳＣＩＤマウス：重度の複合免疫不全を有する試験マウス
ｔ：三重線（ＮＭＲで）
ＴＢＡＦ：フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム
ＴＥＭＰＯ：（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル
ｔｅｒｔ：ターシャリー
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｔ３Ｐ（登録商標）：２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスフィナン２，４，６−トリオキサイド
ＵＶ：紫外線スペクトル測定
ｖ／ｖ：体積比（溶液のもの）
Ｚ：ベンジルオキシカルボニル
７８６−Ｏ：ヒト腫瘍細胞株。

ＨＰＬＣ法およびＬＣ−ＭＳ法：
方法１（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＳＱＤＵＰＬＣシステム；カラム：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＨＳＳＴ３１．８μ ５０×１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９０％Ａ→１．２分５％Ａ→２．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。

方法２（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：ＷａｔｅｒｓＳｙｎａｐｔＧ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＩ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＢＥＨ３００、２．１×１５０ｍｍ、Ｃ１８１．７μｍ；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分２％Ｂ→１．５分２％Ｂ→８．５分９５％Ｂ→１０．０分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．５０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２２０ｎｍ。

方法３（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＱＭ；ＨＰＬＣ装置：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ；カラム：ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＥｘｔｅｎｄ−Ｃ１８３．０×５０ｍｍ３．５ミクロン；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１ｍｏｌの炭酸アンモニウム、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル；勾配：０．０分９８％Ａ→０．２分９８％Ａ→３．０分５％Ａ→４．５分５％Ａ；オーブン：４０℃；流量：１．７５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法４（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：ＷａｔｅｒｓＳｙｎａｐｔＧ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＩ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×５０ｍｍ、Ｃ１８１．８μｍ；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分１０％Ｂ→０．３分１０％Ｂ→１．７分９５％Ｂ→２．５分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法５（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＳＱＤＵＰＬＣシステム；カラム：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＨＳＳＴ３１．８μ ５０×１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９５％Ａ→６．０分５％Ａ→７．５分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．３５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０−４００ｎｍ。

方法６（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：ＷａｔｅｒｓＵＰＬＣＡｃｑｕｉｔｙ搭載ＭｉｃｒｏｍａｓｓＱｕａｔｔｒｏＰｒｅｍｉｅｒ；カラム：ＴｈｅｒｍｏＨｙｐｅｒｓｉｌＧＯＬＤ１．９μ５０×１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋５０％強度ギ酸０．５ｍＬ、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋５０％強度ギ酸０．５ｍＬ；勾配：０．０分９７％Ａ→０．５分９７％Ａ→３．２分５％Ａ→４．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：０．３ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法７（ＬＣ−ＭＳ）：
装置：ＡｇｉｌｅｎｔＭＳＱｕａｄ６１５０；ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ１２９０；カラム：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＨＳＳＴ３１．８μ ５０×２．１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋９９％強度ギ酸０．２５ｍＬ；勾配：０．０分９０％Ａ→０．３分９０％Ａ→１．７分５％Ａ→３．０分５％Ａオーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２０５−３０５ｎｍ。

方法８（ＬＣ−ＭＳ）：
ＭＳ装置型：ＷａｔｅｒｓＳｙｎａｐｔＧ２Ｓ；ＵＰＬＣ装置型：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＩ−ＣＬＡＳＳ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×５０ｍｍ、Ｃ１８１．８μｍ；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分２％Ｂ→２．０分２％Ｂ→１３．０分９０％Ｂ→１５．０分９０％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：１．２０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

方法９：実施例１８１から１９１についてのＬＣ−ＭＳ−Ｐｒｅｐ精製法（方法ＬＩＮＤ−ＬＣ−ＭＳ−Ｐｒｅｐ）
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＰＬＣ装置：Ｗａｔｅｒｓ（カラムＷａｔｅｒｓＸ−ＢｒｉｄｇｅＣ１８、１９ｍｍ×５０ｍｍ、５μｍ、移動相Ａ：水＋０．０５％アンモニア、移動相Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）勾配；流量：４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０−４００ｎｍ）。

または
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＰＬＣ装置：Ｗａｔｅｒｓ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａ５μ Ｃ１８（２）１００Ａ、ＡＸＩＡＴｅｃｈ．５０×２１．２ｍｍ、移動相Ａ：水＋０．０５％ギ酸、移動相Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）勾配；流量：４０ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０−４００ｎｍ）。

方法１０：実施例１８１から１９１についてのＬＣ−ＭＳ分析法（ＬＩＮＤ＿ＳＱＤ＿ＳＢ＿ＡＱ）
ＭＳ装置：ＷａｔｅｒｓＳＱＤ；装置ＨＰＬＣ：ＷａｔｅｒｓＵＰＬＣ；カラム：ＺｏｒｔｅｘＳＢ−Ａｑ（Ａｇｉｌｅｎｔ）、５０ｍｍ×２．１ｍｍ、１．８μｍ；移動相Ａ：水＋０．０２５％ギ酸、移動相Ｂ：アセトニトリル（ＵＬＣ）＋０．０２５％ギ酸；勾配：０．０分９８％Ａ−０．９分２５％Ａ−１．０分５％Ａ−１．４分５％Ａ−１．４１分９８％Ａ−１．５分９８％Ａ；オーブン：４０℃；流量：０．６００ｍＬ／分；ＵＶ検出：ＤＡＤ；２１０ｎｍ。

方法１１（ＨＰＬＣ）：
装置：ＨＰ１１００シリーズ
カラム：ＭｅｒｃｋＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈＳｐｅｅｄＲＯＤＲＰ−１８ｅ、５０−４．６ｍｍ、カタログ番号１．５１４５０．０００１、プレカラムＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈＧｕａｒｄカートリッジキット、ＲＰ−１８ｅ、５−４．６ｍｍ、カタログ番号１．５１４７０．０００１
勾配：流量５ｍＬ／分
注入容量５μＬ
溶媒Ａ：ＨＣｌＯ_４（７０％強度）／水（４ｍＬ／Ｌ）
溶媒Ｂ：アセトニトリル
開始２０％Ｂ
０．５０分２０％Ｂ
３．００分９０％Ｂ
３．５０分９０％Ｂ
３．５１分２０％Ｂ
４．００分２０％Ｂ
カラム温度：４０℃
波長：２１０ｎｍ。

方法１２（ＬＣ−ＭＳＭＣＷ−ＦＴ−ＭＳ−Ｍ１）
ＭＳ装置型：ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＦＴ−ＭＳ；ＵＨＰＬＣ＋装置型：ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＵｌｔｉＭａｔｅ３０００；カラム：Ｗａｔｅｒｓ、ＨＳＳＴ３、２．１×７５ｍｍ、Ｃ１８１．８μｍ；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１％ギ酸；移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル＋０．０１％ギ酸；勾配：０．０分１０％Ｂ→２．５分９５％Ｂ→３．５分９５％Ｂ；オーブン：５０℃；流量：０．９０ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ／最適積分経路２１０−３００ｎｍ。

方法１３：（ＭＣＷ−ＱＭ−ＢＡＳ１）
ＭＳ装置：Ｗａｔｅｒｓ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ）ＱｕａｔｔｒｏＭｉｃｒｏ；装置ＷａｔｅｒｓＵＰＬＣＡｃｑｕｉｔｙ；カラム：ＷａｔｅｒｓＢＥＨＣ１８１．７μ ５０×２．１ｍｍ；移動相Ａ：水１リットル＋０．０１ｍｏｌギ酸アンモニウム、移動相Ｂ：アセトニトリル１リットル；勾配：０．０分９５％Ａ→０．１分９５％Ａ→２．０分１５％Ａ→２．５分１５％Ａ→２．５１分１０％Ａ→３．０分１０％Ａ；オーブン：４０℃；流量：０．５ｍＬ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。

以下において製造が明瞭に記載されていない全ての反応物または試薬は、一般に利用可能な提供元から商業的に購入したものである。製造が同様に以下において記載されておらず、商業的に入手できなかったか、通常は使えない供給元から得た他の全ての反応物または試薬については、それらの製造が記載されている刊行文献を挙げてある。

原料および中間体：
中間体Ｃ２
ｔｅｒｔ−ブチル−（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタノエート

ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ホモセリネート４．２２ｇ（１４．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１８０ｍＬに溶かし、ピリジン３．５ｍＬおよび１，１，１−トリアセトキシ−１λ^５，２−ベンゾヨードキソール−３（１Ｈ）−オン９．２ｇ（２１．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、次にジクロロメタン５００ｍＬで希釈し、１０％強度チオ硫酸ナトリウム溶液で２回抽出し、５％強度クエン酸で２回および１０％強度重炭酸ナトリウム溶液で２回その順で抽出した。有機相を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、減圧下に濃縮した。残留物をＤＣＭに取り、ジエチルエーテルおよびｎ−ペンタンの混合物を加えた。沈殿を濾去し、濾液を濃縮し、アセトニトリル／水から凍結乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−オキソブタノエート３．７ｇ（９３％）を得て、それをそれ以上精製せずに次の段階に用いた（Ｒ_ｆ値：０．５（ＤＣＭ／メタノール９５／５））。

中間体Ｃ１３．５ｇ（９．８５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ１６０ｍＬに溶かし、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム３．１３ｇ（１４．７７ｍｍｏｌ）および酢酸０．７ｍＬを加えた。室温で５分間撹拌後、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−オキソブタノエート３．２３ｇ（１１．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに３０分間撹拌した。減圧下に溶媒留去し、残留物をアセトニトリル／水に取った。沈殿固体を濾過し、乾燥させて、標題化合物５．４６ｇ（８４％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝２．５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６１３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ１１
Ｒ／Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−ホモシステイン／トリフルオロ酢酸塩（１：１）

最初に（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロパン−１−アミン９９０．０ｍｇ（２．７９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン１５．０ｍＬに入れ、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム８２８．８ｍｇ（３．９１ｍｍｏｌ）および酢酸１２９．９ｍｇ（３．２１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５分間撹拌した。ジクロロメタン１５．０ｍＬに溶かした２−（トリメチルシリル）エチル（３−オキソプロピル）カーバメート（中間体Ｌ５８）６９８．１ｍｇ（３．２１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を各場合で、飽和炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、減圧下に溶媒を留去した。残留物をシリカゲル（移動相：ジクロロメタン／メタノール＝１００：２）で精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート１．２５ｇ（理論値の７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５５６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

トリエチルアミン１５１．４ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）およびクロロアセチルクロライド１６１．６ｍｇ（１．４３ｍｍｏｌ）を、２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート４００．０ｍｇ（０．６５ｍｍｏｌ）に加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水で３回および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝３：１）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート２５４．４ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４９分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝６７６（Ｍ＋ＨＣＯＯ⁻）⁻。

２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート１１７．４ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）をイソプロパノール１０．０ｍＬに溶かし、１ＭＮａＯＨ９２８．４μＬおよびＤＬ−ホモシステイン５０．２ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で４．５時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×４０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物７５．３ｍｇ（理論値の４８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．０３（ｓ、９Ｈ）、０．４０（ｍ、１Ｈ）、０．７５−０．９１（ｍ、１１Ｈ）、１．３０（ｍ、１Ｈ）、１．９９−２．２３（ｍ、２Ｈ）、２．６３−２．８８（ｍ、４Ｈ）、３．１８−３．６１（ｍ、５Ｈ）、３．７９−４．１０（ｍ、３Ｈ）、４．８９（ｄ、１Ｈ）、４．８９（ｄ、１Ｈ）、５．１６（ｄ、１Ｈ）、５．５６（ｓ、１Ｈ）、６．８２（ｍ、１Ｈ）、６．９１（ｓ、１Ｈ）、６．９７（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．３８（ｍ、６Ｈ）、７．４９（ｓ、１Ｈ）、７．６３（ｍ、１Ｈ）、８．２６（ｓ、３Ｈ）。

中間体Ｃ１２
Ｒ／Ｓ−［（８Ｓ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−８−カルボキシ−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル］ホモシステイン

原料としてメチル（２Ｓ）−４−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノエート（中間体Ｌ５７）および中間体Ｃ５２を用い、中間体Ｃ１１の合成と同様にして合成を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ５２
（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロパン−１−アミン

最初に、４−ブロモ−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル１０．００ｇ（４９．０１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１００．０ｍＬに入れ、炭酸セシウム２０．７６ｇ（６３．７２ｍｍｏｌ）およびベンジルブロマイド９．２２ｇ（５３．９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、水と酢酸エチルとの間で分配し、水相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。反応を４−ブロモ−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル９０．０ｇで繰り返した。

二つの合わせた反応取得物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｄａｉｓｏ３００×１００；１０μ、流量：２５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物１−ベンジル−４−ブロモ−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル１２５．１５ｇ（理論値の８７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２９５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に、アルゴン下に、１−ベンジル−４−ブロモ−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル４．８０ｇ（１６．３２ｍｍｏｌ）をＤＭＦに入れ、（２，５−ジフルオロフェニル）ボロン酸３．６１ｇ（２２．８５ｍｍｏｌ）、飽和炭酸ナトリウム１９．２０ｍＬ溶液および［１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］−ジクロロパラジウム（ＩＩ）：ジクロロメタン１．３３ｇ（１．６３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８５℃で終夜撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、フィルターケーキを酢酸エチルで洗浄した。有機相を水で抽出し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル１００：３）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル３．６０ｇ（理論値の６７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法７）：Ｒ_ｔ＝１．５９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３２８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸メチル３．６０ｇ（１１．００ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ９０．０ｍＬに入れ、水素化リチウムアルミニウム１．０４ｇ（２７．５０ｍｍｏｌ）（２．４ＭＴＨＦ中溶液）を０℃で加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。０℃で、飽和酒石酸カリウムナトリウム溶液を加え、酢酸エチルを反応混合物に加えた。有機相を飽和酒石酸カリウムナトリウム溶液で３回抽出した。有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をジクロロメタン３０．０ｍＬに溶解させた。酸化マンガン（ＩＶ）３．３８ｇ（３２．９９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で４８時間撹拌した。追加の酸化マンガン（ＩＶ）２．２０ｇ（２１．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、残留物（１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド）２．８０ｇを、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法７）：Ｒ_ｔ＝１．４８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２９８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボアルデヒド２８．２１ｇ（９４．８８ｍｍｏｌ）と（Ｒ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド２３．００ｇ（１８９．７７ｍｍｏｌ）を、純粋ＴＨＦ４０３．０ｍＬに入れ、チタン（ＩＶ）イソプロポキシド６７．４２ｇ（２３７．２１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。飽和ＮａＣｌ溶液５００．０ｍＬおよび酢酸エチル１０００．０ｍＬを加え、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を珪藻土で濾過し、濾液を飽和ＮａＣｌ溶液で２回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム１５００＋３４０ｇＳＮＡＰ、流量２００ｍＬ／分、酢酸エチル／シクロヘキサン１：１０）を用いて精製した。

ＬＣ−ＭＳ（方法７）：Ｒ_ｔ＝１．６３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４０１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に（Ｒ）−Ｎ−｛（Ｅ／Ｚ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］メチレン｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド２５．００ｇ（６２．４２ｍｍｏｌ）を、アルゴン下に純粋ＴＨＦに入れ、冷却して−７８℃とした。ｔｅｒｔ−ブチルリチウム（１．７Ｍペンタン中溶液）１２．００ｇ（１８７．２７ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、混合物をこの温度で３時間撹拌した。−７８℃で、メタノール７１．４ｍＬおよび飽和塩化アンモニウム溶液２１４．３ｍＬをその順で加え、反応混合物を昇温させて室温とし、室温で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物（Ｒ）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝２．９７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４５９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に（Ｒ）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド２８．００ｇ（６１．０５ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン１８６．７ｍＬに入れ、ＨＣｌ／１，４−ジオキサン溶液（４．０Ｍ）４５．８ｍＬを加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｋｉｎｅｔｉｘ１００×３０；流量：６０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって精製した。アセトニトリルを減圧下に留去し、ジクロロメタンを水系残留物に加えた。有機相を重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１６．２ｇ（理論値の７５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝２．１０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３８［Ｍ−ＮＨ_２］^＋、７０９［２Ｍ＋Ｈ］^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．８７（ｓ、９Ｈ）、１．５３（ｓ、２Ｈ）、３．５９（ｓ、１Ｈ）、５．２４（ｄ、２Ｈ）、６．５６（ｓ、１Ｈ）、６．９４（ｍ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、２Ｈ）、７．２０（ｍ、１Ｈ）、７．２６（ｍ、２Ｈ）、７．３４（ｍ、２Ｈ）、７．４６（ｍ、１Ｈ）。

中間体Ｃ５３
（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝ブタン酸

最初に、中間体Ｃ２と同様にして、中間体Ｃ５２を、ベンジル（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソブタノエートで還元的にアルキル化した。中間体Ｃ２７に記載の方法に従って、２級アミノ基を２−クロロ−２−オキソ酢酸エチルでアシル化し、次に二つのエステル基を２Ｍ水酸化リチウム溶液／メタノールで加水分解した。このようにして得られた中間体をエタノールに溶解させ、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を、室温で標準気圧下に水素で１時間水素化した。脱保護化合物をジオキサン／水２：１に取り、最後の段階で、９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルクロロカーボネートの存在下にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを用いてＦｍｏｃ保護基を導入した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３４（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｃ５４
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝ブタノイル］−β−アラニン

最初に、中間体Ｃ２と同様にして、中間体Ｃ５２を、ベンジルＮ−［（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソブタノイル］−β−アラニネートで還元的にアルキル化した。中間体Ｃ２７について記載の方法に従って、２級アミノ基を２−クロロ−２−オキソ酢酸エチルでアシル化した。このようにして得られた中間体をメタノールに溶解させ、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を、標準気圧下に室温で水素によって１時間水素化した。エステル基を２Ｍ水酸化リチウム溶液／メタノールで加水分解した。脱保護化合物をジオキサン／水２：１に取り、最後の段階でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルクロロカーボネートを用いてＦｍｏｃ保護基を導入した。標題化合物４８ｍｇを得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ５８
（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸

最初に、中間体Ｃ２と同様にして、中間体Ｃ５２を、ベンジル（２Ｓ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソブタノエートで還元的にアルキル化した。中間体Ｃ２７について記載の方法に従って２級アミノ基を２−クロロ−２−オキソ酢酸エチルでアシル化し、二つのエステル基を２Ｍ水酸化リチウム溶液／メタノールで加水分解した。このようにして得られた中間体をエタノールに溶解させ、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を室温で水素によって標準気圧下に１時間水素化した。

この完全に脱保護された中間体５００ｍｇ（０．８８６ｍｍｏｌ）をジオキサン６０ｍＬに取り、１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオン２５３ｍｇ（０．９７５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１９８μＬを加えた。室温で２４時間撹拌後、反応液を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に濃縮し、真空乾燥することで、標題化合物３１２ｍｇ（理論値の５０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．６１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６５８（Ｍ＋Ｈ）⁻。

中間体Ｃ５９
（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［（２Ｓ）−２−メトキシプロパノイル］アミノ）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝ブタン酸

最初に、ベンジル（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ブタノエートの２級アミノ基を、中間体Ｃ５３について記載の方法に従って、トリエチルアミンの存在下に（２Ｓ）−２−メトキシプロパノイルクロライド（中間体Ｃ５３の中間体）でアシル化した。得られた中間体をエタノールに取り、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を室温で水素によって標準気圧下に１時間水素化した。脱保護化合物をジオキサン／水２：１に取り、最後の段階でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルクロロカーボネートを用いてＦｍｏｃ保護基を導入した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６４（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｃ６０
（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［（２Ｓ）−２−メトキシプロパノイル］アミノ）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝ブタン酸

中間体Ｃ５３と同様にして合成を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７５０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６１
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−β−アラニン

中間体Ｃ５８６０ｍｇ（０．０９１ｍｍｏｌ）をβ−アラニネートメチルとカップリングさせ、次に２Ｍ水酸化リチウム溶液でエステル開裂することで、標題化合物を製造した。これによって、２段階で標題化合物６７ｍｇ（理論値の６１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６２
Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−Ｄ−アラニン

中間体Ｃ５８およびメチルＤ−アラニネートから中間体Ｃ６１と同様にして標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６４
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル｛（２Ｓ）−１−［（２−アミノエチル）アミノ］−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝カーバメート（１：１）

中間体Ｃ６３と同様にして、標題化合物を中間体Ｃ５８から製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝２．４分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７００（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６５
（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，１１−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラテトラデカン−１４−オン酸

最初に中間体Ｌ６６２１５ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン２５ｍＬに入れ、デス−マーチンペルヨージナン３７７ｍｇ（０．８９ｍｍｏｌ）およびピリジン１４４μＬ（１．７８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。反応液をジクロロメタン３００ｍＬで希釈し、有機相を各場合で、１０％強度Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液２回、１０％強度クエン酸溶液および飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。これによって、アルデヒド３０５ｍｇを得て、それをそれ以上精製せずに反応させた。

中間体Ｃ５２１７５ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５０ｍＬに溶かし、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム１４７ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）および酢酸３２．５μＬを加えた。室温で５分間撹拌後、上記のアルデヒド２１４ｍｇ（０．５９３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。ここで、期待の生成物に代えて、２−（トリメチルシリル）エチル［（２Ｓ）−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）−１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ブタン−２−イル］カーバメートが生成した。このイミドも標題化合物に変換することもできることから、反応液を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切なイミド含有分画を組み合わせた後、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、上記で挙げたイミド１９５ｍｇ（５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝３．３２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６６７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

このイミド６５ｍｇ（９７．５μｍｏｌ）をジクロロメタン１５ｍＬに取り、アセトキシアセチルクロライド３６７μＬ（３．４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５９５μＬを加えた。室温で３０分間撹拌後、反応液を減圧下に加熱せずに濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせて、溶媒留去および高真空乾燥後に、（８Ｓ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−８−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イルアセテート２８ｍｇ（理論値の３７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体２８ｍｇ（３７μｍｏｌ）をメタノール３ｍＬに溶かし、２Ｍ水酸化リチウム溶液５４８μＬを加えた。室温で１０分間撹拌後、反応液をトリフルオロ酢酸でｐＨ４に調節し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、溶媒を留去し、残留物を高真空下に乾燥して、標題化合物２６ｍｇ（理論値の９６％）を白色固体として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７４３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６６
２−（トリメチルシリル）エチル［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−｛［２−（グリシルアミノ）エチル］アミノ｝−１−オキソブタン−２−イル］カーバメート

最初に、ペプチド化学の古典的方法に従って（ＨＡＴＵカップリングおよびＢｏｃ除去）、トリフルオロ酢酸／ベンジル｛２−［（２−アミノエチル）アミノ］−２−オキソエチル｝カーバメート（１：１）をＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシンおよびｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメートから製造した。

この中間体１３ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）および中間体Ｃ５８２５ｍｇ（０．０３３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３ｍＬに取り、ＨＡＴＵ１９ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１７μＬを加えた。室温で１０分間撹拌後、混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、中間体１７．８ｍｇ（理論値の６０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体１７ｍｇ（０．０１９ｍｍｏｌ）をエタノール１０ｍＬに溶かし、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を室温で水素によって標準気圧で２時間水素化した。触媒を濾去し、減圧下に溶媒留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物９ｍｇ（理論値の６２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７５７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６７
９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート

（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロパン−１−アミン（中間体Ｃ５２）６０５．３ｍｇ（１．７１ｍｍｏｌ）を最初に、ジクロロメタン１０．０ｍＬに入れ、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム５０６．７ｍｇ（２．３９ｍｍｏｌ）および酢酸１１７．９ｍｇ（１．９６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５分間撹拌した。ジクロロメタン１０．０ｍＬに溶かした９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（３−オキソプロピル）カーバメート（中間体Ｌ７０）５８０．０ｍｇ（１．９６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を各場合で、飽和炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル３：１）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５１４．７ｍｇ（理論値の４６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６３４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ６９
１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸

最初に（２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート（中間体Ｃ７０）１１７．０ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）および３−スルファニルプロパン酸２１．６ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）を、メタノール３．０ｍＬに入れ、炭酸カリウム８９．５ｍｇ（０．６５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。これによって、標題化合物１０６．１ｍｇ（理論値の７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４２分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝７００（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｃ７０
（２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート

最初に２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート（中間体Ｃ１１の合成参照）９０８．１ｍｇ（１．６３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン５４５．６ｍｇ（５．３９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン１０．０ｍＬに入れ、混合物を冷却して０℃とした。この温度で、クロロアセチルクロライド５９０．５ｍｇ（５．２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を各場合で、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化アンモニウム溶液で３回洗浄した。有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物６７３．８ｍｇ（理論値の６５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５３分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝６７６（Ｍ＋ＨＣＯＯ⁻）⁻。

中間体Ｃ７１
Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

Ｌ−システイン５３６．６ｍｇ（４．４３ｍｍｏｌ）を、水２．５ｍＬと重炭酸ナトリウム５３１．５ｍｇ（６．３３ｍｍｏｌ）に懸濁させた。イソプロパノール２５．０ｍＬに溶かした２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート（中間体Ｃ７０）４００．０ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１．１６ｇ（７．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１．５時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４４９．５ｍｇ（理論値の８６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ７２
（９Ｓ）−９−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］メチル｝−２，２−ジメチル−６，１１−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラテトラデカン−１４−オン酸

最初に中間体Ｌ７２９０ｍｇ（０．２１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン６ｍＬに入れ、ピリジン８６μＬ（１．０６ｍｍｏｌ）およびデス−マーチンペルヨージナン１３５ｍｇ（０．３１８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。反応液をジクロロメタン３０ｍＬで希釈し、有機相を１０％強度Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液で２回、そして５％強度クエン酸溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。このようにして得られたアルデヒドを、それ以上精製せずに反応させた。

中間体Ｃ５２６３ｍｇ（０．１７７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１５ｍＬに溶かし、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム５２．４ｍｇ（０．２４７ｍｍｏｌ）および酢酸２０．２μＬを加えた。室温で５分間撹拌後、上記のアルデヒド８９．６ｍｇ（０．２１２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２０分間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせた後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をアセトニトリル／水から凍結乾燥した。これによって、ベンジル（９Ｒ）−９−［（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）メチル］−２，２−ジメチル−６，１１−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラテトラデカン−１４−オエート７１ｍｇ（２段階で理論値の５３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体７０ｍｇ（９２μｍｏｌ）をジクロロメタン１５ｍＬに取り、混合物を冷却して１０℃とし、トリエチルアミン５４μＬおよびアセトキシアセチルクロライド２５．５μＬ（０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌後、同量の酸塩化物およびトリエチルアミンを加え、室温でさらに１時間撹拌後に再度加えた。反応を室温でさらに３０分間撹拌し、減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせて、溶媒留去および残留物のアセトニトリル／水からの凍結乾燥後に、アシル化中間体４６．５ｍｇ（理論値の５９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体４６ｍｇ（５３μｍｏｌ）をメタノール５ｍＬに溶かし、２Ｍ水酸化リチウム溶液２．７ｍＬを加えた。室温で１０分間撹拌後、反応液を酢酸でｐＨ３から４に調節し、水１５ｍＬで希釈した。水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。残留物をアセトニトリル／水から凍結乾燥して、残留物を高真空乾燥した後、標題化合物３７ｍｇ（理論値の９０％）を白色固体として得た。

中間体Ｃ７３
Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［３−（トリメチルシリル）プロパノイル］−Ｌ−システイン

最初にＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）６１９ｍｇ（０．８６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン８．８ｍＬに入れ、トリエチルアミン８７ｍｇ（０．８６ｍｍｏｌ）およびＮ−［２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニルオキシ］ピロリジン−２，５−ジオン２２４ｍｇ（０．８６ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、Ｎ−［２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニルオキシ］ピロリジン−２，５−ジオン４５ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物をジクロロメタンに取り、有機相を水および飽和重炭酸ナトリウム溶液で２回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、ロータリーエバポレータで濃縮し、真空乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物６０２ｍｇ（７１％、純度８７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ７４
トリフルオロ酢酸２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−Ｄ−アラニネート（１：１）

中間体Ｃ５８７５ｍｇ（０．１１４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１２．５ｍＬに取り、ＨＡＴＵ６５ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン７９μＬの存在下に中間体Ｌ７５７８ｍｇ（０．１７１ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後に、中間体をエタノール２０ｍＬに取り、１０％パラジウム／活性炭で室温で水素標準圧下に１時間水素化した。触媒を濾去し、溶媒を減圧下に除去し、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。アセトニトリル／水１：１からの凍結乾燥によって、標題化合物６３ｍｇ（２段階で理論値の６４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１６分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｃ７５
メチル（２Ｓ）−４−［（アセトキシアセチル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノエート

中間体Ｃ５２４．３ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ５２５ｍＬに溶かし、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム３．６３ｇ（１７．１２ｍｍｏｌ）および酢酸８．４ｍＬを加えた。室温で５分間撹拌後、ＤＣＭ１７５ｍＬに溶かしたメチル（２Ｓ）−４−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノエート（古典的方法によって（３Ｓ）−３−アミノ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸から製造）３．２３ｇ（１１．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに４５分間撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液１００ｍＬで２回抽出し、次に飽和塩化ナトリウム溶液で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、濃縮し、残留物を高真空乾燥して、中間体４．６ｇ（理論値の６１８４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．９７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６１４．３２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体２００ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ１０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン１０５μＬおよびアセトキシアセチルクロライド７７μＬ（０．７１７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を酢酸エチルに取り、飽和重炭酸ナトリウム溶液で２回、次に飽和塩化ナトリウム溶液で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。これによって、標題化合物２１３ｍｇ（７５％）をベージュ泡状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ７６
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛（１Ｓ）−３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−カルボキシプロピル｝−Ｌ−アラニンアミド

ペプチド化学の古典的方法に従って（塩化亜鉛によるＴｅｏｃ保護基の除去、ＨＡＴＵの存在下でのＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニンによるアシル化、およびＴＨＦ／水中での水酸化リチウムによるエステル開裂）、標題化合物を中間体Ｃ７５から製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ７７
Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタノイル）−Ｌ−システイン

最初に４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタン酸（８．３９ｍｇ、４８．１μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物７．３７ｍｇ（４８．１μｍｏｌ）、（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ビスジメチルアミノメチリウムフルオロボレート１５．５ｍｇ（（４８．１μｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８．６０μＬ（４８．１μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１０分間撹拌した。最初にＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイントリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）４０．０ｍｇ（０．０４８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２５．４μＬ（１４１．９μｍｏｌ）を加え、混合物を反応液に加え、反応混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を、によって直接精製し分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物３５．０ｍｇ（理論値の８３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｃ７８
１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−酸

最初に２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］カーバメート（中間体Ｃ１１の合成を参照）１９７ｍｇ（０．３５４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン５．０ｍＬに入れ、混合物を加熱して４０℃とした。この温度で、ピリジン２４０μＬ（３．０ｍｍｏｌ）および４−クロロ−４−オキソブタン酸メチル２２０μＬ（１．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。ピリジン２４０μＬ（３．０ｍｍｏｌ）および４−クロロ−４−オキソブタン酸メチル２２０μＬ（１．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。ピリジン２４０μＬ（３．０ｍｍｏｌ）および４−クロロ−４−オキソブタン酸メチル２２０μＬ（１．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を各場合で５％強度ＫＨＳＯ_４溶液で３回抽出した。有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、メチル１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−オエート７４．１ｍｇ（理論値の３１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

メチル１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−オエート７８．３ｍｇ（１１７μｍｏｌ）を最初に、ＴＨＦ４．０ｍＬに入れ、メタノール８００μＬ、水１６０μＬおよびＬｉＯＨ水溶液（１Ｍ）２３０μＬ（２３０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、酢酸で反応停止し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物６４．８ｍｇ（理論値の８５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．６１分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝６５４［Ｍ−Ｈ］⁻。

中間体Ｃ７９
トリフルオロ酢酸２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｄ−アラニネート（１：１）

最初に１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）５７．４ｍｇ（８１．８μｍｏｌ）を、ＤＭＦ５．７ｍＬに入れ、トリフルオロ酢酸２−（トリメチルシリル）エチル３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート（１：１）（中間体Ｌ７５）７４．０ｍｇ（１６４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４３μＬ（２５０μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ６２．２ｍｇ（１６４μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、酢酸で反応停止し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート５２．４ｍｇ（理論値の６３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．６４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２２［Ｍ］^＋。

アルゴン下に、最初に酢酸パラジウム（ＩＩ）６．２３ｍｇ（２７．７μｍｏｌ）を、ジクロロメタン３．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン１２μＬ（８３μｍｏｌ）およびトリエチルシラン８９μＬ（５５０μｍｏｌ）を加え、混合物を５分間撹拌した。ジクロロメタン３．０ｍＬ中の２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート５６．７ｍｇ（５５．５μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を濃縮してほぼ乾固させ、アセトニトリル／水を加え、混合物を濾過し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物３７．４ｍｇ（理論値の６７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：）：Ｒ_ｔ＝２．１５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｃ８０
Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（グリシルアミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイントリフルオロ酢酸（１：１）

アルゴン下に、最初に１−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オン酸（中間体Ｌ９０）４３．４ｍｇ（９５．１μｍｏｌ）を、ＤＭＦ２．５ｍＬに入れ、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物１４．６ｍｇ（９５．１μｍｏｌ）、（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ビスジメチルアミノメチリウムフルオロボレート３０．５ｍｇ（９５．１μｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１６．５μＬ（９５．１μｍｏｌ）を加え、混合物を１０分間撹拌した。Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイントリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）７９．０ｍｇ（９５．１μｍｏｌ）を、ＤＭＦ２．５ｍＬに溶かし、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４９．５μＬ（２８５．３μｍｏｌ）を加え、混合物を反応液に加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン４４．２ｍｇ（理論値の４０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．５７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１５６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン６０．２ｍｇ（５２．１μｍｏｌ）をエタノール３．０ｍＬに懸濁させ、パラジウム／活性炭（１０％）６．０ｍｇを加え、混合物を水素で室温および標準圧で１時間水素化した。２回、パラジウム／活性炭（１０％）６．０ｍｇを加え、混合物を水素で室温および標準圧で１時間水素化した。触媒を濾去し、反応混合物から減圧下に溶媒を除去し、真空乾燥した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２９．４ｍｇ（理論値の５０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝３．７７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｃ８１
（Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１−シクロヘキシルメタンアミン

アルゴン下に−７８℃で、シクロヘキシルマグネシウムクロライド／ジエチルエーテル（２Ｍ）１８．７ｍＬ（３７．４５ｍｍｏｌ）をジメチル亜鉛３．１２ｍＬ（６．２４ｍｍｏｌ）のトルエン中溶液（２．０Ｍ）に加え、混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。（Ｒ）−Ｎ−｛（Ｅ／Ｚ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］メチレン｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド５．０ｇ（１２．４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中溶液を−７８℃で加え、反応混合物をこの温度で１時間撹拌し、次に室温で４時間撹拌した。−７８℃で、飽和塩化アンモニウム溶液ｍＬを加え、反応混合物を昇温させて室温とした。混合物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、酢酸エチル／シクロヘキサン２５：７５）を用いて精製した。これによって、中間体１．５９ｇ（理論値の２６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７６分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝４８３［Ｍ−Ｈ］⁻。

アルゴン下に、最初にこの中間体２６４．０ｍｇ（０．５４ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン０．５ｍＬに入れ、ＨＣｌ／１，４−ジオキサン溶液（４．０Ｍ）１．３６ｍＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。ジクロロメタンを加え、反応混合物を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、メタノール／ジクロロメタン９８：２）を用いて精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をジクロロメタンに溶解させ、重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１４８ｍｇ（理論値の７２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１３）：Ｒ_ｔ＝２．０７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３６４［Ｍ−ＮＨ_２］^＋。

中間体Ｃ８２
２−（トリメチルシリル）エチル（３−｛［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］アミノ｝プロピル）カーバメート

アルゴン下に、水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム３９２．２ｍｇ（１．８５ｍｍｏｌ）および酢酸９１．２９ｍｇ（１．５２ｍｍｏｌ）を、１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１−シクロヘキシルメタンアミン（中間体Ｃ８１）５０３．０ｍｇ（１．３２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１．４ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。２−（トリメチルシリル）エチル（３−オキソプロピル）カーバメート５７４．６（２．３８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン中溶液を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。２−（トリメチルシリル）エチル（３−オキソプロピル）カーバメート１４３ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）を加えた後、混合物をさらに２時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を各場合で、飽和炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４８８ｇ（理論値の６３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５８２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ８３
２−（トリメチルシリル）エチル（３−｛［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］（クロロアセチル）アミノ｝プロピル）カーバメート

トリエチルアミン２８０．０ｍｇ（２．７７ｍｍｏｌ）およびクロロアセチルクロライド３９７．８ｍｇ（３．５２ｍｍｏｌ）を、４Åモレキュラーシーブスを加えた２−（トリメチルシリル）エチル（３−｛［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］アミノ｝プロピル）カーバメート（中間体Ｃ８２）４８７．９ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８．４０ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を室温で６時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化アンモニウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物４７０ｍｇ（理論値の８５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８０（Ｍ＋Ｎａ）^＋。

中間体Ｃ８４
Ｓ−｛１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル｝−Ｌ−システイン

Ｌ−システイン３２２．１ｍｇ（２．６６ｍｍｏｌ）を水０．１９ｍＬと重炭酸ナトリウム３１９．０ｍｇ（３．８０ｍｍｏｌ）に懸濁させた。イソプロパノール１．９０ｍＬに溶かした２−（トリメチルシリル）エチル（３−｛［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］（クロロアセチル）アミノ｝プロピル）カーバメート（中間体Ｃ８３）２５０．０ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン６９３．８ｇ（４．５６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３．５時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物２７６ｍｇ（理論値の９７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７４４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ８５
Ｓ−｛１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル｝−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３４．８ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）をＳ−｛１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル｝−Ｌ−システイン（１：１）（中間体Ｃ８４）１００ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン４１．５ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．０ｍＬ）中混合物に加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。後処理せずに、混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物８８ｍｇ（理論値の７０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９３６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ８６
１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸

炭酸カリウム１６１．６５ｍｇ（１．１７ｍｍｏｌ）を、２−（トリメチルシリル）エチル（３−｛［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］（クロロアセチル）アミノ｝プロピル）カーバメート（中間体Ｃ８３）２２０．０ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）および３−スルファニルプロパン酸３９．０２ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）のメタノール（７．４５ｍＬ）中混合物および数滴の水に加えた。反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上後処理せずに用いた。これによって、標題化合物２０１ｍｇ（理論値の８３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７２分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝７２６（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｃ８７
２−（トリメチルシリル）エチル｛１３−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカン−１６−イル｝カーバメート

ＤＭＦ中のＮ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（中間体Ｌ１）５４．１８ｍｇ（０．２８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン７１．０１ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ１０４．４６ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール０．２３ｍＬ（０．１４ｍｍｏｌ）０．５Ｍを、１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ８６）１００ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．３７ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で５時間撹拌した。それ以上後処理せずに、混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物４１ｍｇ（理論値の３３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．６１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ８８
ｔｅｒｔ−ブチル３−［（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート・トリフルオロ酢酸（１：１）
立体異性体の混合物

水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム１．７１ｇ（８．０５ｍｍｏｌ）および酢酸０．４０ｇ（６．６１ｍｍｏｌ）を、（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロパン−１−アミン２．０４ｍｇ（５．７５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５１ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を室温で５分間撹拌した。３−ホルミルピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル１．３２ｇ（６．６１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を各場合で、飽和炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１．８６ｇ（理論値の５０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５３８（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｃ８９
ｔｅｒｔ−ブチル３−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート

トリエチルアミン１．３６ｇ（１３．４２ｍｍｏｌ）およびクロルアセチルクロライド２．１３ｇ（１８．８７ｍｍｏｌ）を、４Åモレキュラーシーブスを入れたｔｅｒｔ−ブチル３−［（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ８８）２．８９ｇ（４．１９ｍｍｏｌ、純度８０％）の（４２ｍＬ）ジクロロメタン中溶液に加えた。反応混合物を室温で５時間撹拌した。混合物をロータリーエバポレータで濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物の異性体１４４９ｍｇ（理論値の１７％）および異性体２４４２ｍｇ（理論値の１７％）を得た。

異性体１ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６３６（Ｍ＋ＮＨ_４）^＋。

異性体２ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．７８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６３６（Ｍ＋ＮＨ_４）^＋。

中間体Ｃ９０
Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン（異性体１）

Ｌ−システイン３５７．３ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）を、重炭酸ナトリウム４８８．７ｍｇ（４．０７ｍｍｏｌ）を含む水２．３ｍＬに懸濁させた。イソプロパノール２３．０ｍＬに溶かしたｔｅｒｔ−ブチル３−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（異性体１）（中間体Ｃ８９、異性体１）３５７．０ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１．０６ｇ（６．９８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物２５５．０ｍｇ（理論値の６２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９１
Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン（異性体２）

Ｌ−システイン４５３．５ｍｇ（３．７４ｍｍｏｌ）を、重炭酸ナトリウム４４９．２ｍｇ（５．３５ｍｍｏｌ）を含む水２．１ｍＬに懸濁させた。イソプロパノール２１．１ｍＬに溶かしたｔｅｒｔ−ブチル３−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ８９、異性体２）３２８７．４ｍｇ（０．５４ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン０．９８ｇ（６．４２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物２２１．０ｍｇ（理論値の５９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９２
Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン（異性体１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１８．４９ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９０）５０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン２２．０６ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．３ｍＬ）中混合物に加え、反応混合物を室温で４５分間撹拌した。後処理せずに、混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物６５ｍｇ（理論値の１００％、純度７１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９３
Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン（異性体２）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１８．４９ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９１）５０．０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン２２．０６ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．０ｍＬ）中混合物に加え、反応混合物を室温で９０分間撹拌した。後処理せずに、混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物６３ｍｇ（理論値の９８％、純度７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９４
Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイン（異性体１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１８．５ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９０）５０．０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１８．０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．３ｍＬ）中混合物に加え、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物５７ｍｇ（理論値の８１％、純度８５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９５
３−｛［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］スルファニル｝プロパン酸（異性体１）

炭酸カリウム３０２．５ｍｇ（２．１９ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ８９、異性体１）３８４．０ｍｇ（０．６２ｍｍｏｌ）および３−スルファニルプロパン酸７３．０ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）のメタノール（１４ｍＬ）および水数滴中混合物に加えた。反応混合物を５０℃で２．５時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を、それ以上後処理せずに用いた。これによって、標題化合物３５８．０ｍｇ（理論値の８４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９６
３−｛［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］スルファニル｝プロパン酸（異性体２）

炭酸カリウム２２６．０ｍｇ（１．６４ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−｛［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ８９、異性体２）２８７．０ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）および３−スルファニルプロパン酸５４．６ｍｇ（０．５１ｍｍｏｌ）のメタノール（１４ｍＬ）および水数滴中混合物に加えた。反応混合物を５０℃で２．５時間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水で繰り返し洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を、それ以上後処理せずに用いた。これによって、標題化合物３１８．７ｍｇ（理論値の８８％、純度８８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９７
ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１３−トリオキソ−５−チア−２，９，１２−トリアザテトラデカ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（異性体２）

アルゴン下に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．１７ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ２７．８０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を、３−｛［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］スルファニル｝プロパン酸（中間体Ｃ９６）２５．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．８１ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド−エタン（１：１）トリフルオロ酢酸（中間体Ｌ１）２２．７５ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．４ｍＬ）中溶液およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。

水を加え、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上後処理せずに用いた。これによって、標題化合物３１８．７ｍｇ（理論値の８８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．３９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９８
ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１３−トリオキソ−５−チア−２，９，１２−トリアザオクタデカ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（異性体２）

アルゴン下に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．１７ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ２７．８０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を、３−｛［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］スルファニル｝プロパン酸（中間体Ｃ９６）２５．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．８１ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ−（２−アミノエチル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド−エタン（１：１）トリフルオロ酢酸３７．３０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．４ｍＬ）中溶液およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。水を加え、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物３１８．７ｍｇ（理論値の８８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．５４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ９９
ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１９−トリオキソ−１２，１５−ジオキサ−５−チア−２，９，１８−トリアザテトラコサ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（異性体２）

アルゴン下に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．１７ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ２７．８０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を、３−｛［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］スルファニル｝プロパン酸（中間体Ｃ９６）２５．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．８１ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド−エタン（１：１）トリフルオロ酢酸（中間体Ｌ８２）３５．０５ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．４ｍＬ）中溶液およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。水を加え、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を、それ以上後処理せずに用いた。これによって、標題化合物２５ｍｇ（理論値の３６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝４．５２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１００７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｃ１００
２−（トリメチルシリル）エチル｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝カーバメート

（２Ｒ）−Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド（１：１）トリフルオロ酢酸２２．２ｍｇ（０．０６８ｍｍｏｌ）を、（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸４５ｍｇ（０．０６８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．８ｍＬ）中溶液に加えた。室温で３０分間撹拌後、ＨＡＴＵ３９ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３６ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を前記混合物に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。後処理せずに、混合物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物７ｍｇ（理論値の１２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ８５１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）

市販の（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸およびｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメートからペプチド化学の古典的方法によって、標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．１９分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１９８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２
トリフルオロ酢酸／ｒｅｌ−（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

ＥＤＣ／ＨＯＢＴとのカップリングと次にＴＦＡによる脱保護によって、市販のシス−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−シクロペンタンカルボン酸５０ｍｇ（０．２１４ｍｍｏｌ）および同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）６０ｍｇ（０．２３５ｍｍｏｌ）から標題化合物を製造した。これによって、標題化合物３６ｍｇ（２段階で理論値の３８％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ３
トリフルオロ酢酸／（１Ｓ，２Ｒ）−２−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

ＥＤＣ／ＨＯＢＴとのカップリングおよび次にＴＦＡによる脱保護によって、市販の（１Ｓ，２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸５０ｍｇ（０．２１４ｍｍｏｌ）と同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）７２ｍｇ（０．２８３ｍｍｏｌ）から標題化合物を製造した。これによって、標題化合物１３ｍｇ（２段階で理論値の１６％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ４
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）シクロヘキサンカルボキサミド（１：１）

市販の１−［（４−｛［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］カルボニル｝シクロヘキシル）メチル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよびｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメートから、ペプチド化学の古典的方法によって標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２６分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．２５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２８０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５
トリフルオロ酢酸／Ｎ−［４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル］−β−アラニンアミド（１：１）

市販の１−（４−アミノフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニンから、ペプチド化学の古典的方法によって標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．２２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２６０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｌ−リシネート（１：１）

最初に、ＥＤＣ／ＨＯＢＴの存在下に、市販の６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサン酸をペプチド化学の古典的方法によって製造された部分的に保護されたペプチドｔｅｒｔ−ブチルＬ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ^６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネートとカップリングすることで、標題化合物を製造した。これを次に、温和な条件下に室温で５％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中で撹拌することによりアミノ基で脱保護し、それによって収率３７％で標題化合物を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．２９分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５６６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７
トリフルオロ酢酸／β−アラニル−Ｌ−バリル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って、順次に、ＨＡＴＵの存在下にＮ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンとカップリングし、ＴＦＡで脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリネートとカップリングし、ＴＦＡで脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニネートとカップリングし、ＴＦＡでさらに脱保護することで、市販の１−（４−アミノフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンから標題化合物を製造した。標題化合物３２ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．３１分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８
トリフルオロ酢酸／Ｌ−アラニル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って、順次にＨＡＴＵの存在下にＮ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンとカップリングし、ＴＦＡで脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニネートとカップリングし、ＴＦＡでさらに脱保護することで、市販の１−（４−アミノフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンから標題化合物を製造した。標題化合物１７１ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２３分；
ＬＣ−ＭＳ（方法７）：Ｒ_ｔ＝０．３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４１７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ９
トリフルオロ酢酸／β−アラニル−Ｌ−バリル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

市販の（４−アミノフェニル）酢酸メチルから、中間体Ｌ７と同様にして標題化合物を製造した。標題化合物３２０ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．４５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１０
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−ｒｅｌ−Ｎ^６−｛［（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノシクロペンチル］カルボニル｝−Ｌ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：２）

ＥＤＣ／ＨＯＢＴを用いるシス−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−シクロペンタンカルボン酸とのカップリングおよび次にＴＦＡによる脱保護によって、標題化合物を中間体Ｌ６から製造した。これによって、標題化合物１２ｍｇ（２段階で理論値の５２％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．４５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１１
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ^６−｛［（１Ｓ，２Ｒ）−２−アミノシクロペンチル］カルボニル｝−Ｌ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：２）

ＥＤＣ／ＨＯＢＴを用いる（１Ｓ，２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸とのカップリングおよび次にＴＦＡによる脱保護によって、標題化合物を中間体Ｌ６から製造した。これによって、標題化合物１１ｍｇ（２段階で理論値の３９％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．４５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１２
トリフルオロ酢酸／１−［２−（２−アミノエトキシ）エチル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）

メチル２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート３８１ｍｇ（２．４６ｍｍｏｌ）を、ジオキサン／水１：１７ｍＬに溶かしたｔｅｒｔ−ブチル［２−（２−アミノエトキシ）エチル］カーバメート２２８ｍｇ（１．１２ｍｍｏｌ）に加えた。飽和重炭酸ナトリウム溶液１．２ｍＬを加え、反応液を室温で撹拌した。合計５日間撹拌し、同量の重炭酸ナトリウム溶液をさらに２回加えた後に、トリフルオロ酢酸で酸性とし、ロータリーエバポレータで濃縮し、分取ＨＰＬＣによって残留物を精製することで反応の後処理を行った。適切な分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去し、残留物をアセトニトリル／水１：１から凍結乾燥した。

残留物をジクロロメタン３ｍＬに取り、トリフルオロ酢酸１ｍＬを加えた。室温で１５分間撹拌した後、溶媒を減圧下に除去し、残留物をアセトニトリル／水１：１から凍結乾燥した。これによって、標題化合物７０ｍｇ（２段階で理論値の６７％）を樹脂状残留物として得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１８５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１３
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチルＮ^２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−リシネート（１：１）

ＥＤＣ／ＨＯＢＴの存在下に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸をｔｅｒｔ−ブチルＮ^６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネート塩酸塩（１：１）とカップリングし、次に中間体Ｌ６と同様にしてｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基をやさしく除去することで、標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．４２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１４
トリフルオロ酢酸／１−［２−（４−アミノピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）

中間体Ｌ２と同様にして２段階でｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−イルカーバメートおよび（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸から、標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．２５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２３９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１５
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（２−｛２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパンアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル３−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパノエート２．９３ｇ（１０．５８ｍｍｏｌ）をジオキサン／水１：１１００ｍＬに溶かし、ｐＨ６から７に到達するまで、メチル２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボキシレート３．２８ｇ（２１．１５ｍｍｏｌ）および飽和重炭酸ナトリウム溶液を加えた。溶液を室温で３０分間撹拌し、１，４−ジオキサンを減圧下に留去した。次に、水２００ｍＬを加え、混合物を各場合で酢酸エチル３００ｍＬで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過した。濃縮することで、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−｛２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エトキシ）プロパノエートを褐色油状物として得て、それを高真空乾燥した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７５（Ｍ＋ＮＨ_４）^＋。

この中間体を、標準的な方法（ＴＦＡによる脱保護、ｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメートとのカップリング、ＴＦＡによるさらなる脱保護）によって標題化合物に変換した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．２５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１６
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

市販の１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン５３５ｍｇ（１．７３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン９３０ｍＬを、Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン２６６ｍｇ（１．３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２４ｍＬ）中溶液に加えた。反応を超音波浴で２４時間処理し、減圧下に濃縮して乾固させた。残った残留物を分取ＨＰＣＬによって精製し、適切な分画の濃縮および残留物の高真空乾燥後に、標題化合物３３７ｍｇ（理論値の５０％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．４分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４６８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１７
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチル−Ｌ−リシネート（１：１）

最初にＥＤＣ／ＨＯＢＴおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｌ１６１７２ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルＮ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネート塩酸塩（１：１）１２５ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、次に室温で１０％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中で２時間撹拌することで温和な条件下にアミノ基を脱保護することで、標題化合物を製造した。アセトニトリル／水からの凍結乾燥によって、２段階で標題化合物１９４ｍｇ（理論値の４９％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．１分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１８
トリフルオロ酢酸／β−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

中間体Ｌ７と同様にしてペプチド化学の古典的方法に従って順次に、ＨＡＴＵの存在下にＮ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンを連結し、ＴＦＡによって脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニネートとカップリングし、ＴＦＡで脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニネートとカップリングし、ＴＦＡでさらに脱保護することで、標題化合物を（４−アミノフェニル）酢酸メチルから製造した。標題化合物３３０ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２９分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４６５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ１９
トリフルオロ酢酸／Ｌ−アラニル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝フェニル）−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

順次にペプチド化学の古典的方法に従って、標題化合物を１，４−フェニレンジアミンから製造した。第１段階で、１，４−フェニレンジアミン９４２ｍｇ（８．７２ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン０．８ｇ（２．９ｍｍｏｌ）でモノアシル化した。第２段階で、同様にして、第２のアニリン性アミノ基を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸でアシル化した。ＴＦＡによる脱保護、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニネートとのカップリングおよびＴＦＡによるさらなる脱保護によって、さらに３合成段階で標題化合物を得て、この経路によって１４８ｍｇを得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．２１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＬＣ−ＭＳ（方法４）：Ｒ_ｔ＝０．２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２０
トリフルオロ酢酸／Ｌ−バリル−Ｎ^５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って、中間体Ｌ８と同様にして市販の１−（４−アミノフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンから、順次に、ＨＡＴＵの存在下にＮ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンとカップリングさせ、ＴＦＡで脱保護し、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリネートとカップリングさせ、ＴＦＡでさらに脱保護することで、標題化合物を製造した。標題化合物１７１ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２８分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．３９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４４５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２１
Ｌ−バリル−Ｎ^６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−［４−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル］−Ｌ−リジンアミド

ペプチド化学の古典的方法に従って、順次に、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リジンとカップリングさせ、ピペリジンで脱保護し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリネートとカップリングさせ、次に１０％パラジウム／活性炭でベンジルオキシカルボニル保護基を水素分解的に除去することで、市販の（４−アミノフェニル）酢酸メチル０．４２ｇ（２．５６ｍｍｏｌ）から標題化合物を製造した。これによって、標題化合物３６０ｍｇ（４段階で理論値の３２％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２２
トリフルオロ酢酸／Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル］フェニル｝−Ｎ^５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

順次にペプチド化学の古典的方法に従って、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニンから標題化合物を製造した。第１段階で最初に、この原料２．５ｇ（８．０６ｍｍｏｌ）をセシウム塩に変換し、次にＤＭＦ中ヨードメタンでメチルエステルに変換した。

メタノール中１０％パラジウム／活性炭で水素化分解的に、ニトロ基をアミノ基に変換した。

このようにして生成したアミノ基を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中、Ｎ５−カルバモイル−Ｎ２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−オルニチンでアシル化した。次の段階で、ＤＭＦ中にてピペリジンでＦｍｏｃ基を除去した。

次に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−バリンとのカップリングを行い、最後にｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基をトリフルオロ酢酸で除去した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．６分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２３
トリフルオロ酢酸／Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］−β−アラニンアミド（１：１）

ＥＤＣＩ／ＨＯＢＴおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニンとカップリングさせ、次にトリフルオロ酢酸で脱保護することで、市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．１９分。

中間体Ｌ２４
トリフルオロ酢酸／１−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロプロパンカルボキサミド（１：１）

市販の１−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロプロパン−カルボン酸１１４ｍｇ（０．６７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ２５ｍＬに溶かした。市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）１１０ｍｇ（０．６２３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３９５μＬを加え、混合物を冷却して−１０℃とした。次に、２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート２１７ｍｇ（０．７９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、１０％強度クエン酸、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液の順で抽出し、硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮した。高真空乾燥によって、保護中間体１５２ｍｇを得た。

次に、これらをＤＣＭ１０ｍＬに取り、トリフルオロ酢酸１ｍＬで脱保護した。アセトニトリル／水からの凍結乾燥によって、標題化合物１５８ｍｇ（２段階で理論値の７１％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．１９分。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．９８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ２５
Ｎ−［３１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２９−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５−オクタオキサ−２８−アザヘントリアコンタン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン

バリル−Ｌ−アラニン３１．４ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ３．０ｍＬに溶かし、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコサ−１−イル｝プロパンアミド１１５．０ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン３３．７ｍｇ（０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物７４．１ｍｇ（理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ２６
Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン

Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン６００．０ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）を水／エタノール／ＴＨＦ（１：１：０．５）２５．０ｍＬに懸濁させ、パラジウム／炭素（１０％）を加え、混合物を室温で水素によって標準気圧下に５時間水素化した。触媒を濾去し、減圧下に溶媒留去した。得られた化合物を、それ以上精製せずに次の段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２４７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン１８０ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ５．０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン７４．０ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。次に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリネート２５４．６ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン７４．０ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３．５時間撹拌した。反応溶液を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン２９４．１ｍｇ（理論値の７６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４８０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初にＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン２７２．２ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）２０．０ｍＬに入れ、パラジウム／活性炭２７．２ｍｇを加えた。混合物を水素で室温で標準気圧下に５時間水素化した。混合物を、セライト（登録商標）を用いて濾過し、フィルターケーキを酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）で洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。標題化合物（１８２ｍｇ、理論値の７２％）を、それ以上精製せずに次の反応段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．５３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ２７
Ｎ−［３１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２９−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５−オクタオキサ−２８−アザヘントリアコンタン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン

最初にＬ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン（中間体Ｌ２６）３０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコサ−１−イル｝プロパンアミド４６．１ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．５ｍＬに入れ、４−メチルモルホリン６．８ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５５．６ｍｇ（理論値の９０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ２８
ｔｅｒｔ−ブチル３−ホルミル−４−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ピロリジン−１−カルボキシレート

最初に１−ｔｅｒｔ−ブチル３−エチル−４−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ピロリジン−１，３−ジカルボキシレート（ＷＯ２００６／０６６８９６の文献手順に従って、この化合物を製造した。）４６１．７ｍｇ（１．１５ｍｍｏｌ）を、純粋ジクロロメタン５．０ｍＬに入れ、混合物を冷却して−７８℃とした。水素化ジイソブチルアルミニウム溶液（１ＭＴＨＦ中溶液）３２６．２ｍｇ（２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下し、混合物を−７８℃で２時間撹拌した（薄層クロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３：１）によってモニタリングした。）。水６０ｍＬに溶かした酒石酸カリウムナトリウム１．３ｇ（４．５９ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を昇温させて室温とした。酢酸エチルを反応混合物に加え、水相を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物６２９．０ｍｇを粗生成物として得て、それをそれ以上精製せずに、次の反応段階で直接用いた。

中間体Ｌ２９
ｔｅｒｔ−ブチル３−ホルミル−４−［（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート
ジアステレオマーの混合物

最初にｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（ＷＯ２００６／１０００３６の文献手順に従って製造したもの）８０７．１ｍｇ（２．３４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン８．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン２３６．４ｍｇ（２．３４ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で、メタンスルホニルクロライド２６７．６ｍｇ（２．３４ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。追加のメタンスルホニルクロライド１３３．８ｍｇ（１．１７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン１１８．２ｍｇ（１．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を各場合で飽和重炭酸ナトリウム溶液、５％強度硫酸水素カリウム溶液および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム５０ｇＳＮＡＰ、流量６６ｍＬ／分、シクロヘキサン／酢酸エチル）で精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−｛［（メチルスルホニル）オキシ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート４０２．０ｍｇ（理論値の４１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初にｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−｛［（メチルスルホニル）オキシ］メチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート４００．０ｍｇ（０．９４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ５．０ｍＬに入れ、アジ化ナトリウム９８．２ｍｇ（１．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を４０℃で１０時間撹拌した。追加のアジ化ナトリウム３０．７ｍｇ（０．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４０℃でさらに１０時間撹拌した。酢酸エチルを加え、有機相を水で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル３−（アジドメチル）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート３０９．５ｍｇ（理論値の８９％）を得た。化合物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ｔｅｒｔ−ブチル３−（アジドメチル）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート２５０ｍｇ（０．６８ｍｍｏｌ）を酢酸エチル／エタノール（１：１）１０．０ｍＬに溶かし、パラジウム／活性炭（１０％）２５．０ｍｇを加えた。混合物を水素で室温で標準気圧下に８時間水素化した。反応液をセライト（登録商標）で濾過し、フィルターケーキを酢酸エチルで十分に洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル３−（アミノメチル）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート２２６．２ｍｇ（理論値の８２％）を得た。化合物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ｔｅｒｔ−ブチル３−（アミノメチル）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）ピロリジン−１−カルボキシレート７１５．０ｍｇ（２．０８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ１５．０ｍＬに溶かし、ＴＢＡＦ溶液（１ＭＴＨＦ中溶液）２．２８ｍＬ（２．２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物（１．５４ｇ）をそれ以上精製せずに合成の次の段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２３１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初にｔｅｒｔ−ブチル３−（アミノメチル）−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート１．５４ｇ（４．８８ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサンに入れ、塩化カルシウム（無水）５４１．８ｍｇ（４．８８ｍｍｏｌ）および炭酸カルシウム４８８．６ｍｇ（４．８８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を高撹拌した。トリエチルアミン５９２．８ｍｇ（５．８６ｍｍｏｌ）および１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオン１．５２ｇ（５．８６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＨＯＡｃ６４４．９ｍｇ（１０．７ｍｍｏｌ）および酢酸エチルを加えた。有機相を水で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をシリカゲル（移動相：ジクロロメタン／メタノール＝１００：１）で精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）−４−［（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート３４６．９ｍｇ（理論値の１９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初にｔｅｒｔ−ブチル３−（ヒドロキシメチル）−４−［（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート８０４．０ｍｇ（２．１５ｍｍｏｌ）を、クロロホルム２０．０ｍＬおよび０．０５Ｎ炭酸カリウム／０．０５Ｎ重炭酸ナトリウム溶液（１：１）２０．０ｍＬに入れた。テトラ−ｎ−ブチル塩化アンモニウム５９．７ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）、Ｎ−クロロコハク酸イミド４２９．９ｍｇ（３．２２ｍｍｏｌ）およびＴＥＭＰＯ３３．５ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜高撹拌した。有機相を分離し、減圧下に溶媒を除去した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝３：１）によって精製した。これによって、標題化合物５１７．０ｍｇ（理論値の４６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ３０
ｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−ホルミルピロリジン−１−カルボキシレート
立体異性体の混合物

最初にｔｅｒｔ−ブチル３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（ＷＯ２００６／１０００３６の文献手順に従って製造した化合物）２５０．０ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン／ＤＭＳＯ（４：１）１２．５ｍＬに入れ、トリエチルアミン２１９．６ｍｇ（２．１７ｍｍｏｌ）を加えた。２℃で、三酸化硫黄−ピリジン錯体３４５．５ｍｇ（２．１７ｍｍｏｌ）を１回に少量ずつ加え、混合物を２℃で３時間撹拌した。追加の三酸化硫黄−ピリジン錯体３４５．５ｍｇ（２．１７ｍｍｏｌ）を１回に少量ずつ加え、混合物を室温で１７時間撹拌した。反応混合物を、ジクロロメタンと水との間で分配した。水相をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた有機相を水で１回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに合成の次の段階で用いた（薄層クロマトグラフィー：石油エーテル／酢酸エチル７：３）。

中間体Ｌ３１
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝マロネート

ｔｅｒｔ−ブチルカーバメート５７．２ｇ（４８８．２７ｍｍｏｌ）、３７％強度ホルムアルデヒド水溶液５１．２ｍＬ（６８３．５７ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム２５．９ｇ（２４４．１３ｍｍｏｌ）を水６００ｍＬに加えた。混合物を、溶液がとなるまで昇温させ、室温で１６時間撹拌した。形成された懸濁液をジクロロメタン５００ｍＬで抽出し、有機相を分離し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。混合物をロータリーエバポレータで濃縮し、残留物を高真空下に乾燥して結晶固体を得た。残留物を純粋ＴＨＦ１０００ｍＬに取り、および無水酢酸３２２ｍＬ（３．４１４ｍｏｌ）およびピリジン１３８ｍＬ（１．７０７ｍｏｌ）の混合物を室温で滴下した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、ロータリーエバポレータで水浴にて室温で濃縮した。残留物をジエチルエーテルに取り、飽和重炭酸ナトリウム溶液で３回および飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、ロータリーエバポレータで濃縮し、残留物を高真空下に２日間乾燥した。残留物を純粋ＴＨＦ２０００ｍＬに取り、氷冷しながら１Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド／ＴＨＦ溶液４５６ｍＬ（４５６．５２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で２０分間撹拌し、純粋ＴＨＦ２００ｍＬに溶かしたジ−ｔｅｒｔ−ブチルマロネート１００．８ｇ（４５６．５２ｍｍｏｌ）を滴下した。混合物を室温で４８時間撹拌し、水を加えた。反応混合物をロータリーエバポレータで濃縮し、酢酸エチル５００ｍＬに取った。混合物を水５００ｍＬおよび飽和塩化ナトリウム溶液１００ｍＬで洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで脱水した。有機相をロータリーエバポレータで濃縮し、残留物を高真空下に乾燥した。残留物をシリカゲルでの濾過（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル、勾配＝３０：１→５：１）によって精製した。これによって、標的化合物３７．０７ｇ（理論値の２２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝２．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ３２
ｔｅｒｔ−ブチル［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロピル］カーバメート

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（アセトキシメチル）マロネート３７．０ｇ（１０７．１１ｍｍｏｌ）を純粋ＴＨＦ１０００ｍＬに溶かし、氷冷しながら２Ｍ水素化ホウ素リチウム／ＴＨＦ溶液５３５．５ｍＬ（１０７１．１０ｍｍｏｌ）を滴下した。水１９．３ｍＬ（１０７１．１０ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で４．５時間撹拌した。反応混合物をロータリーエバポレータで濃縮し、真空乾燥した。残留物を酢酸エチル１５００ｍＬに取り、水１００ｍＬを加え、混合物を水冷しながら（軽い発熱）３０分間撹拌した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル５００ｍＬで２回抽出した。有機相をロータリーエバポレータで濃縮し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標的化合物２０．７ｇ（理論値の９４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１．４９分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０６［Ｍ−Ｃ_５Ｈ_８Ｏ_２］^＋。

中間体Ｌ３３
ｔｅｒｔ−ブチル［３−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（ヒドロキシメチル）プロピル］カーバメート

ｔｅｒｔ−ブチル［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロピル］カーバメート２０．００ｇ（９７．４４ｍｍｏｌ）を純粋ジクロロメタン１０００ｍＬに溶かし、イミダゾール６．６３ｇ（９７．４４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジメチルシラン１６．１６ｇ（１０７．１８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、半濃縮塩化ナトリウム溶液で洗浄した。水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、ロータリーエバポレータで濃縮し、真空乾燥した。これによって、標的化合物２８．５０ｇ（理論値の９２％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．０２（ｓ、６Ｈ）、０．８６（ｓ、９Ｈ）、１．３７（ｓ、９Ｈ）、１．５８−１．７３（ｍ、１Ｈ）、２．９１（ｑ、２Ｈ）、３．３３−３．３６［ｍ、（２Ｈ、隠れている）］、３．５３−３．５８（ｍ、２Ｈ）、６．６５−６．７２（ｍ、１Ｈ）。

中間体Ｌ３４
ｔｅｒｔ−ブチル（３−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−ホルミルプロピル）カーバメート

ｔｅｒｔ−ブチル［３−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（ヒドロキシ−メチル）プロピル］カーバメート１２．６５ｇ（３９．５９１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン２００ｍＬに溶かし、ジクロロメタン１５０ｍＬに溶かしたデス−マーチンペルヨージナン１９．３１ｇ（４５．５３ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。混合物を室温で２時間撹拌し、半濃縮重炭酸ナトリウム溶液２５０ｍＬおよび１０％強度チオ硫酸ナトリウム溶液２５０ｍＬを加え、混合物を２０分間撹拌した。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を水３００ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ロータリーエバポレータで濃縮し、真空乾燥した。これによって、標的化合物１１．３５ｇ（理論値の９０％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．０２（ｓ、６Ｈ）、０．８４（ｓ、９Ｈ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）、１．４８−１．５１（ｍ、１Ｈ）、３．０８−３．３２［ｍ、（１Ｈ、隠れている）］、３．５０−３．５８（ｍ、２Ｈ）、３．８１−３．９１（ｍ、１Ｈ）、６．７１（ｔ、１Ｈ）、９．６０（ｄ、１Ｈ）。

中間体Ｌ３５
ｔｅｒｔ−ブチル（３−オキソプロピル）カーバメート

文献から公知の方法に従って（例えば、ＪｅａｎＢａｓｔｉｄｅｅｔａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３，４６（１６），３５３６−３５４５）標題化合物を製造した。

中間体Ｌ３６
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン１００ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４．０ｍＬに取り、トリエチルアミン０．０８ｍＬ（０．５７ｍｍｏｌ）を加えた。２，５−ジオキソピロリジン−１−イル−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリン１９９．０ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン０．０８ｍＬ（０．５７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ含有））によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物７５．７ｍｇ（理論値の３３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４０９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ３７
Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

中間体Ｌ３６７５．７ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）を水／エタノール／ＴＨＦ２５ｍＬに懸濁させ、パラジウム／活性炭（１０％）７．５ｍｇを加え、混合物を室温で水素によって標準気圧下に４．５時間水素化した。触媒を濾去し、反応混合物から溶媒を除去し減圧下に、真空乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに次の段階に用いた。これによって、標題化合物６４．９ｍｇ（理論値の９３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝０．２５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２７５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ３８
Ｎ−［３１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２９−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５−オクタオキサ−２８−アザヘントリアコンタン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

最初に中間体Ｌ３７３８．３ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ３．０ｍＬに入れ、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコサ−１−イル｝プロパンアミド９６．４ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン３９．０μＬ（０．２８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。ＨＯＡｃ１６．０μＬ（０．２８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５８．９ｍｇ（理論値の４５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ３９
２−（トリメチルシリル）エチル（２−スルファニルエチル）カーバメート

最初に２−アミノエタンチオール塩酸塩（１：１）３００ｍｇ（２．６４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン３．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン６６８．０ｍｇ（６．６０ｍｍｏｌ）および１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオン７１９．１ｍｇ（２．７７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２日間撹拌した（薄層クロマトグラフィー：ジクロロメタン／メタノール＝１００：１．５によってモニタリング）。酢酸エチルを加え、反応混合物を水で３回洗浄した。有機相を飽和ＮａＣｌ溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。その化合物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

中間体Ｌ４０
Ｎ−［３１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２９−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５−オクタオキサ−２８−アザヘントリアコンタン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン

Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン６００ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）を水／エタノール／ＴＨＦ（１：１：０．５）２５．０ｍＬ中で、パラジウム／炭素（１０％）を用い、室温で標準気圧下に水素で水素化した。化合物Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジンを、それ以上精製せずに次の合成段階で用いる。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２４７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン１８０．０（０．７３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ５．０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン７４．０ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリネート２５４．６ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン７４．０ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３．５時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン２９４．１ｍｇ（理論値の７６％）を得た。

Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン２７２．２ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）２０ｍＬに溶かし、パラジウム／活性炭２７．２ｍｇを加え、混合物を標準気圧下におよび室温で水素によって水素化した。混合物をセライト（登録商標）で濾過し、フィルターケーキを酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）で十分に洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン１８２．０ｍｇ（理論値の７２％）を得た。

Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン３０．０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコサ−１−イル｝プロパンアミド４６．１ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１．５ｍＬに溶かし、４−メチルモルホリン６．８ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５５．６ｍｇ（理論値の９０％）を得た。

中間体Ｌ４１
Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン

Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン６００ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）を、水／エタノール／ＴＨＦ（１：１：０．５）２５．０ｍＬ中、パラジウム／炭素（１０％）を用いて、室温で標準気圧下に水素によって水素化した。化合物Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジンを、それ以上精製せずに次の合成段階で用いる。

Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン２７２．２ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）２０．０ｍＬに溶かし、パラジウム／活性炭２７．２ｍｇを加え、混合物を標準気圧下におよび室温で、水素によって水素化した。混合物をセライト（登録商標）で濾過し、フィルターケーキを酢酸エチル／エタノール／ＴＨＦ（１：１：１）で十分に洗浄した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン１８２．０ｍｇ（理論値の７２％）を得た。

Ｌ−バリル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン３０．０ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）および３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝プロパンアミド３４．３ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１．５ｍＬに溶かし、４−メチルモルホリン６．８ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４０．６ｍｇ（理論値の８２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７４４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ４２
Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

最初にＬ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン（中間体Ｌ３７）５０．０ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦに入れ、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝プロパンアミド９３．６ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン３６．９ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＨＯＡｃ２１．９ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２０．６ｍｇ（理論値の１４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．５５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ４３
Ｎ−［６７−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−６５−オキソ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１−イコサオキサ−６４−アザヘプタヘキサコンタン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン

最初にＬ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチン（中間体Ｌ３７）１１．３ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦに入れ、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛６３−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６３−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０−イソサオキサトリヘキサコンタ−１−イル｝プロパンアミド５０．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン８．３ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＨＯＡｃ４．９ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１５．８ｍｇ（理論値の２０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法４）：Ｒ_ｔ＝０．９４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１３７７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ４４
Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン

Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン７３．３ｍｇ（０．３９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ７．０ｍＬに溶かし、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝プロパンアミド２００．０ｍｇ（０．３９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン７８．８ｍｇ（０．７８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１０３．３ｍｇ（理論値の４５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５８７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ４５
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−オキソブタノエート

ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−ホモセリネート２．００ｇ（７．２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン９０ｍＬに溶かし、ピリジン１．７６ｍＬおよび１，１，１−トリアセトキシ−１λ^５，２−ベンゾヨードキソール−３（１Ｈ）−オン（デス−マーチンペルヨージナン）４．６２ｇ（１０．９０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２時間撹拌し、ジクロロメタン２００ｍＬで希釈し、１０％強度チオ硫酸ナトリウム溶液で２回、次に５％強度クエン酸で２回および飽和重炭酸ナトリウム溶液で２回の順で抽出した。有機相を分離し、硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下に濃縮した。ジエチルエーテル１００ｍＬおよびシクロヘキサン（体積比＝１：１）を残留物に加え、混合物を若干濃縮して、白色沈殿を生成させた。これを吸引濾過した。濾液をロータリーエバポレータで濃縮し、高真空乾燥して、標的化合物１．７４ｇ（理論値の８８％）を明黄色油状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２７４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝１．３８（ｓ、１８Ｈ）、２．６４−２．８１（ｍ、２Ｈ）、４．３１−４．３６（ｍ、１Ｈ）、７．２３（ｄ、１Ｈ）、９．５９（ｓ、１Ｈ）。

中間体Ｌ４６
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］−Ｌ−グルタミネート（１：１）

最初にＥＤＣ／ＨＯＢＴおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）２００ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）を（４Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−オキソペンタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）２６３ｍｇ（０．８７ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に１０％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中室温で１時間撹拌することによって温和な条件下でアミノ基を脱保護することにより、標題化合物を製造した。アセトニトリル／水からの凍結乾燥によって、２段階で標題化合物８５ｍｇ（理論値の２０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．３７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３２６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ４７
トリフルオロ酢酸／β−アラニル−Ｌ−アラニル−Ｎ５−カルバモイル−Ｎ−［４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１：１）

中間体Ｌ８を２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニネートとカップリングさせ、次にＴＦＡで脱保護することで、標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝１．３６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４８８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ４８
トリフルオロ酢酸／（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

中間体Ｌ２と同様にして、市販の（１Ｒ，２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝１．２２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ４９
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（ブロモアセチル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｌ−リシネート（１：１）

最初にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にジクロロメタン中で、市販のブロモ無水酢酸を、ペプチド化学の古典的方法に従って製造された部分的に保護されたペプチドｔｅｒｔ−ブチルＬ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ^６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネートとカップリングさせることで、標題化合物を製造した。これを次に、温和な条件下に１０％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中で室温で撹拌することにより、アミノ基で脱保護して、標題化合物を２段階で収率４９％で得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５９３および５９５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５０
トリフルオロ酢酸／（１Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＨＡＴＵとカップリングさせ、次にＴＦＡで脱保護することで、市販の（１Ｓ，３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸および同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．２分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５１
トリフルオロ酢酸／（１Ｒ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＨＡＴＵとカップリングさせ、次にＴＦＡで脱保護することで、市販の（１Ｒ，３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸および同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．９８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５０（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｌ５２
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−２−ブロモアセトアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメート４２０ｍｇ（２．６２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５０ｍＬに取り、ブロモ無水酢酸８１７ｍｇ（３．１５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン９１３μＬ（５．２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。

これによって、保護された中間体５７７ｍｇを得て、それを次にジクロロメタン５０ｍＬに取り、トリフルオロ酢酸１０ｍＬを加えた。室温で１時間撹拌後、反応液を減圧下に濃縮し、残留物をアセトニトリル／水から凍結乾燥した。これによって、標題化合物７０５ｍｇ（理論値の６５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１８１および１８３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５３
トリフルオロ酢酸／（１Ｓ，３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＨＡＴＵとカップリングさせ、次にＴＦＡで脱保護することで、市販の（１Ｓ，３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸および同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝０．１９分；
ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５０（Ｍ−Ｈ）⁻。

中間体Ｌ５４
トリフルオロ酢酸／（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル］シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＨＡＴＵとカップリングさせ、次にＴＦＡで脱保護することで、市販の（１Ｒ，３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸および同様に市販のトリフルオロ酢酸／１−（２−アミノエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５５
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ６−Ｄ−アラニル−Ｎ２−｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝−Ｌ−リシネート（１：１）

最初にＨＡＴＵの存在下に中間体Ｌ６をＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニンとカップリングさせ、次に５％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中室温で９０分間撹拌することで温和な条件下にアミノ基で脱保護することで、標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．３５分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５６
トリフルオロ酢酸／ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ６−｛［（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノシクロペンチル］カルボニル｝−Ｌ−リシネート（１：１）

最初にＨＡＴＵの存在下に中間体Ｌ６を（１Ｒ，３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸とカップリングさせ、次に２５％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中室温で１５分間撹拌することで温和な条件下にアミノ基で脱保護することで、標題化合物を製造した。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．４分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ５７
メチル（２Ｓ）−４−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノエート

最初にＬ−アスパラギン酸メチル塩酸塩５００．０ｍｇ（２．７２ｍｍｏｌ）および２−（トリメチルシリル）エチル２，５−ジオキソピロリジン−１−カルボキシレート７０６．３ｍｇ（２．７２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン５．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン８２６．８ｍｇ（８．１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×４０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物（３Ｓ）−４−メトキシ−４−オキソ−３−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸５８３．９ｍｇ（理論値の７４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝２９０（Ｍ−Ｈ）⁻。

最初に（３Ｓ）−４−メトキシ−４−オキソ−３−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸５９２．９ｍｇを、１，２−ジメトキシエタン１０．０ｍＬに入れ、混合物を冷却して−１５℃とし、４−メチルモルホリン２０５．８ｍｇ（２．０４ｍｍｏｌ）およびクロルギ酸イソブチル２７７．９ｍｇ（２．０４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後に沈殿を吸引濾過し、各場合１，２−ジメトキシエタン１０．０ｍＬを用いて２回濾過した。濾液を冷却して−１０℃とし、水１０ｍＬに溶かした水素化ホウ素ナトリウム１１５．５ｍｇ（３．０５ｍｍｏｌ）を高撹拌しながら加えた。相を分離し、有機相を各場合で飽和重炭酸ナトリウム溶液で１回および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物メチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−ホモセリネート５１５．９ｍｇ（理論値の９１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２７８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最初にメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−ホモセリネート５５４．９ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン３０．０ｍＬに入れ、デス−マーチンペルヨージナン１．２７ｇ（３．０ｍｍｏｌ）およびピリジン４７４．７ｍｇ（６．００ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。４時間後、反応液をジクロロメタンで希釈し、有機相を各場合で、１０％強度Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３溶液で３回、１０％強度クエン酸溶液および飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。これによって、標題化合物５６５．７ｍｇ（理論値の９７％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．０３（ｓ、９Ｈ）、０．９１（ｍ、２Ｈ）、２．７０−２．７９（ｍ、１Ｈ）、２．８８（ｄｄ、１Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）、４．０４（ｍ、２Ｈ）、４．５５（ｍ、１Ｈ）、７．５４（ｄ、１Ｈ）、９．６０（ｔ、１Ｈ）。

中間体Ｌ５８
２−（トリメチルシリル）エチル（３−オキソプロピル）カーバメート

３−アミノ−１−プロパノール４３４．４ｍｇ（５．７８ｍｍｏｌ）および２−（トリメチルシリル）エチル２，５−ジオキソピロリジン−１−カルボキシレート１．５０ｇ（５．７８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０．０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン５８５．３ｍｇ（５．７８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を水および飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去した。残留物２−（トリメチルシリル）エチル（３−ヒドロキシプロピル）カーバメート（９９６．４ｍｇ、理論値の７９％）を高真空乾燥し、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

最初に２−（トリメチルシリル）エチル（３−ヒドロキシプロピル）カーバメート８０７．０ｍｇ（３．６８ｍｍｏｌ）を、クロロホルム１５．０ｍＬおよび０．０５Ｎ炭酸カリウム／０．０５Ｎ重炭酸ナトリウム溶液（１：１）１５．０ｍＬに入れた。テトラ−ｎ−ブチル塩化アンモニウム１０２．２ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）、Ｎ−クロロコハク酸イミド７３６．９ｍｇ（５．５２ｍｍｏｌ）およびＴＥＭＰＯ５７．５ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜高撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を高真空乾燥し、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた（８９０．３ｍｇ）。

中間体Ｌ５９
トリフルオロ酢酸／１−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（１：１）

最初にｔｅｒｔ−ブチル（２−｛２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ］エトキシ｝エチル）カーバメート３００．０ｍｇ（０．９１ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタンに入れ、ＴＦＡ４．２ｇ（３６．５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した（ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール１０：１によってモニタリング）。揮発性成分を減圧下に留去し、残留物についてジクロロメタンと４回共蒸留を行った。残留物を高真空乾燥し、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６０
６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイルクロライド

６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサン酸２００．０ｍｇ（０．９５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン４．０ｍＬに溶かし、塩化チオニル３３８．０ｍｇ（２．８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＤＭＦ１滴を加えた。混合物をさらに１時間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をジクロロメタンで３回共蒸留した。粗生成物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

中間体Ｌ６１
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｌ−リシネート（１：１）

最初に、ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリルエタノールによるエステル化、水素化分解、ＨＡＴＵの存在下でのＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニンとのカップリング、およびさらなる水素化分解）、トリペプチド誘導体２−（トリメチルシリル）エチルＬ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネートをＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジンから製造した。ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、この部分保護されたペプチド誘導体を市販の６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサン酸とカップリングさせることで、標題化合物を製造した。これを次に、５％強度トリフルオロ酢酸／ＤＣＭ中室温で２．５時間撹拌することで温和な条件下にアミノ基で脱保護し、エステル保護基は保持されたままとした。後処理および分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物４３８ｍｇを得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．６９分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６１０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６２
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチル−Ｌ−リシネート（１：１）

最初に、ペプチド化学の古典的方法に従って、２−（トリメチルシリル）エチルＮ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リシネートをＮ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジンから製造した。この中間体１４８ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ１９５ｍｇ（０．５１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４９μＬの存在下に、中間体Ｌ１６２００ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。濃縮および分取ＨＰＬＣによる残留物の精製後に、保護中間体をＤＣＭ２０ｍＬに取り、トリフルオロ酢酸２ｍＬを加え、室温で１時間撹拌することでｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を除去した。濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、２５４ｍｇ（２段階で理論値の６３％）を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．５１分；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６３
（４Ｓ）−４−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝−５−オキソ−５−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ペンタン酸

最初に、ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリルエタノールによるエステル化、トリフルオロ酢酸によるＢｏｃ保護基の脱離、ＨＡＴＵの存在下でのＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニンとのカップリングおよびメタノール中１０％パラジウム／活性炭での水素化分解）、トリペプチド誘導体（４Ｓ）−４−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝−５−オキソ−５−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ペンタン酸を（２Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−オキソペンタン酸から製造した。この部分保護されたペプチド誘導体を市販の１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとカップリングさせることで、標題化合物を製造した。後処理および分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物６０１ｍｇを得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６４
（４Ｓ）−４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−５−オキソ−５−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ペンタン酸

ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリルエタノールによるエステル化、トリフルオロ酢酸によるＢｏｃ保護基の脱離、メタノール中１０％パラジウム／活性炭でのベンジルエステルの水素化分解的開裂、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン存在下での１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとのカップリング）、標題化合物を（２Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−オキソペンタン酸から製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６５
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｌ−アラニネート（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリルエタノールによるエステルおよびトリフルオロ酢酸によるＢｏｃ保護基の脱離）、標題化合物を３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニンから製造した。これによって、標題化合物３７３ｍｇ（２段階で理論値の７９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６６
メチル（８Ｓ）−８−（２−ヒドロキシエチル）−２，２−ジメチル−６，１１−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラテトラデカン−１４−オエート

最初に（３Ｓ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ブタン酸１０００ｍｇ（２．８４ｍｍｏｌ）を、１，２−ジメトキシエタン１０．０ｍＬに入れ、４−メチルモルホリン３４４．４ｍｇ（３．４ｍｍｏｌ）およびクロルギ酸イソブチル５０４ｍｇ（３．６９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌後、反応液を冷却して５℃とし、高撹拌しながら、水３ｍＬに溶かした水素化ホウ素ナトリウム１６１ｍｇ（４．２６ｍｍｏｌ）を１回に少量ずつ加えた。１時間後、同量の水素化ホウ素ナトリウムを再度加え、反応液をゆっくり昇温させて室温とした。水１７０ｍＬを加え、反応液を、各場合酢酸エチル２００ｍＬで４回抽出した。相を分離し、有機相をクエン酸で１回、次に飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ベンジルｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ）−４−ヒドロキシブタン−１，２−ジイル］ビスカーバメート７６０ｍｇ（理論値の７８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

塩化水素／ジオキサン１３ｍＬに溶かしたこの中間体７６０ｍｇ（２．１６ｍｍｏｌ）を室温で２０分間撹拌した。反応液を濃縮して５ｍＬとし、ジエチルエーテルを加えた。沈殿を濾過し、アセトニトリル／水１：１から凍結乾燥した。

このようにして得られた生成物をＤＭＦ１３２ｍＬに溶解させ、４−メトキシ−４−オキソブタン酸３４５．５ｍｇ（２．３５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ９７０ｍｇ（２．５５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１０２５μＬを加えた。混合物を室温で５分間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残った残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、アセトニトリルを減圧下に留去した。残った水相を酢酸エチルで２回抽出し、有機相を濃縮し、真空乾燥した。

このようにして得られた中間体をメタノールに取り、室温で水素標準圧下に１時間１０％パラジウム／活性炭で水素化した。触媒を濾去し、溶媒を減圧下に除去した。

この脱保護化合物２４７ｍｇをＤＭＦ２０ｍＬに取り、１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオン３５２ｍｇ（１．３６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５９２μＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、５段階で合計収率２１％で標題化合物２１８ｍｇを得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３６３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６７
トリフルオロ酢酸／２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エチル−β−アラニネート（１：１）

ジクロロメタン１０ｍＬ中１．５当量のＥＤＣＩおよび０．１当量の４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンの存在下にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−β−アラニン１３４ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次にトリフルオロ酢酸で脱保護することで、市販の１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン５０ｍｇ（０．３５４ｍｍｏｌ）から標題化合物を製造した。

収量：５６ｍｇ（２段階で理論値の４８％）。

ＬＣ−ＭＳ（方法３）：Ｒ_ｔ＝１．１５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２１３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６８
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って、中間体Ｌ１と同様にして、市販の（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパン酸およびｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメートから標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２１２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ６９
トリフルオロ酢酸／１−［（ベンジルオキシ）カルボニル］ピペリジン−４−イル−Ｌ−バリル−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチネート（１：１）

ペプチド化学の古典的方法によって、ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いるＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンによるエステル化、順次、ＴＦＡによるＢｏｃ除去、次にＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン存在下でのＮ−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］−Ｌ−バリンとのカップリング、最後にさらなるＴＦＡによるＢｏｃ除去により、標題化合物を市販のベンジル４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレートから製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７０
９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（３−オキソプロピル）カーバメート

最初に９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル（３−ヒドロキシプロピル）カーバメート１０００．０ｍｇ（３．３６ｍｍｏｌ）を、クロロホルム１５．０ｍＬおよび０．０５Ｎ炭酸カリウム／０．０５Ｎ重炭酸ナトリウム溶液（１：１）１５．０ｍＬに入れた。テトラ−ｎ−ブチル塩化アンモニウム９３．５ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、Ｎ−クロロコハク酸イミド６７３．６ｍｇ（５．０４ｍｍｏｌ）およびＴＥＭＰＯ５２．５ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜高撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を高真空乾燥し、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル３：１−１：１）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５８９．４ｍｇ（理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝２．１５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２９６（Ｍ−Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７１
ｔｅｒｔ−ブチル［４−（クロロカルボニル）フェニル］カーバメート

最初に４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］安息香酸１００．０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン２．０ｍＬに入れ、オキサリルジクロライド６４．２ｍｇ（０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した（ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノールによってモニタリング）。追加のオキサリルジクロライド１９２．６ｍｇ（１．５３ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ１滴を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をジクロロメタンと繰り返し共蒸留した。残留物を、それ以上精製せずに次の合成段階で用いた。

中間体Ｌ７２
ベンジル（９Ｓ）−９−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチル−６，１１−ジオキソ−５−オキサ−７，１０−ジアザ−２−シラテトラデカン−１４−オエート

ペプチド化学の古典的方法に従って、Ｚ保護基の水素分解的除去、次にＥＤＣＩ／ＨＯＢＴの存在下に４−（ベンジルオキシ）−４−オキソブタン酸とのカップリング、次にＴＦＡによるＢｏｃ保護基の脱離、最後にトリエチルアミンの存在下での１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオンとの反応によって、市販のベンジルｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ）−３−ヒドロキシプロパン−１，２−ジイル］ビスカーバメートから標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｌ７３
Ｎ−（２−アミノエチル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド

６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサン酸３９５．５ｍｇ（１．８７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１．２１ｇ（９．３６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ８５４．３ｍｇ（２．２５ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）カーバメート３００ｍｇ（１．８７ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で５分間撹拌した。混合物の濃縮後、残留物をＤＣＭに取り、水で洗浄した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。これによって、標題化合物４０８ｍｇ（３３％、純度５３％）を得て、それをそれ以上精製せずに用いた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ１ｍＬを、ｔｅｒｔ−ブチル（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エチル）カーバメート（４０８ｍｇ、０．３６５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物をジクロロメタンと２回共蒸留した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物３８４ｍｇ（９４％、純度５７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．２６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７４
３−［２−［２−［２−［２−［［２−（２，５−ジオキソピロール−１−イル）アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパン酸

ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−［２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノエート１０７ｍｇ（０．３３５ｍｍｏｌ）および（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）２−（２，５−ジオキソピロール−１−イル）アセテート９３ｍｇ（０．３６９ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン０．０７４ｍＬ（０．６７１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸０．０４８ｍＬ（０．８３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−［２−［２−［２−［［２−（２，５−ジオキソピロール−１−イル）アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノエート１３３ｍｇ（８６％、純度１００％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４５９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ０．５ｍＬをｔｅｒｔ−ブチル３−［２−［２−［２−［２−［［２−（２，５−ジオキソピロール−１−イル）アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノエート（１３０ｍｇ、０．２８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物１０２ｍｇ（９０％、純度１００％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．５２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４０２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７５
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート（１：１）

ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリルエタノールによるエステル化およびトリフルオロ酢酸によるＢｏｃ保護基の脱離）、標題化合物を３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニンから製造した。これによって、標題化合物４０５ｍｇ（２段階で理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７６
（２Ｓ）−２−ブロモ−４−オキソ−４−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ブタン酸

最初に、ペプチド化学の古典的方法に従って（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリル）エタノールによるエステル化、Ｚ保護基およびベンジルエステルの水素分解的除去）、好適に保護されたアスパラギン酸誘導体を、（３Ｓ）−４−（ベンジルオキシ）−３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４−オキソブタン酸から製造した。

このようにして得られた（２Ｓ）−２−アミノ−４−オキソ−４−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ブタン酸４７０ｍｇ（１．８ｍｍｏｌ）を、水１０ｍＬに懸濁させ、１Ｍ塩酸１．８ｍＬおよび濃硫酸０．５ｍＬを加え、次に臭化カリウム８６３ｍｇ（７．２５ｍｍｏｌ）を加えた。１０℃で、３０分の期間をかけて亜硝酸ナトリウム１５０ｍｇ（２．１７５ｍｍｏｌ）の水（１ｍＬ）中溶液を滴下し、混合物を１０から１５℃で２時間撹拌した。混合物を酢酸エチル５０ｍＬで抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒の留去および分取ＨＰＬＣによる生成物の精製によって、標題化合物２６０ｍｇ（理論値の４８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝２９５および２９７（Ｍ−Ｈ）⁻。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ［ｐｐｍ］＝０．０３（ｓ、９Ｈ）、０．９５（ｔ、２Ｈ）、２．９４および３．２（２ｄｄ、２Ｈ）、４．１８（ｔ、２Ｈ）、４．５７（ｔ、１Ｈ）。

中間体Ｌ７７
トリフルオロ酢酸／Ｎ−［２−（２−アミノエトキシ）エチル］−２−ブロモアセトアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル［２−（２−アミノエトキシ）エチル］カーバメート４１８ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）を最初に、ブロモ無水酢酸６３８ｍｇ（２．４６ｍｍｏｌ）と反応させ、次にＢｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で除去した。これによって、標題化合物５５１ｍｇ（２段階で理論値の６３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法）：Ｒ_ｔ＝０．３２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２７および２２５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７８
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニン

ＥＤＣＩ／ＨＯＢｔおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニネート塩酸塩（１：１）とカップリングさせ、次にトリフルオロ酢酸で脱保護することで、市販の（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．３２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ７９
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニン

ｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニネート塩酸塩（１：１）６４．８ｍｇ（０．３５７ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１００ｍｇ（０．３２４ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド４ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン６５．６ｍｇ（０．６４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸０．０４８ｍＬ（０．８３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニネート８４．５ｍｇ（７７％、純度１００％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ１．６２ｍＬを、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニネート（８２．８ｍｇ、０．２４４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物６２．７ｍｇ（８７％、純度９５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２８３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８０
２−（トリメチルシリル）エチル３−［（１５−アミノ−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル）アミノ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニネート

ペプチド化学の古典的方法に従って（塩からの放出およびＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−（トリメチルシリル）エタノールによるエステル化、Ｚ保護基の水素分解的除去、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下の市販の３−オキソ−１−フェニル−２，７，１０，１３，１６−ペンタオキサ−４−アザノナデカン−１９−オン酸とのカップリング、およびさらなるＺ保護基の水素分解的除去）、市販の３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン／Ｎ−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（１：１）から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８１
トリフルオロ酢酸／ベンジル｛２−［（２−アミノエチル）スルホニル］エチル｝カーバメート（１：１）

ＤＭＦ中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、２，２′−スルホニルジエタンアミン２５０ｍｇ（１．１１ｍｍｏｌ）を１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン９２．３ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。次に、ＨＰＬＣによる精製を行って、標題化合物７０ｍｇ（理論値の４７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝０．６４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５７．１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８２
トリフルオロ酢酸／Ｎ−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１：１）

Ｎ−Ｂｏｃ−２，２′−（エチレンジオキシ）ジエチルアミン８８．６ｍｇ（０．３５７ｍｍｏｌ）およびＮ−スクシニミジル６−マレイミドヘキサノエート１００ｍｇ（０．３２４ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド４．０ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン０．０７１ｍＬ（０．６５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸０．０４８ｍＬ（０．８３８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：７５ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝カーバメート１２７ｍｇ（理論値の８１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４４２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ２．０ｍＬを、ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝カーバメート１２３ｍｇ（２２５μｍｏｌ）のジクロロメタン（７．５ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物１１１ｍｇ（理論値の１００％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．３１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３４２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝１．１７（ｍ、２Ｈ）、１．４７（ｍ、４Ｈ）、２．０４（ｍ、２Ｈ）、２．９８（ｍ、２Ｈ）、３．１９（ｍ、２Ｈ）、３．３９（ｍ、４Ｈ）、３，５６（ｍ、６Ｈ）、７．０１（ｓ、２Ｈ）、７．７２（ｂｓ、３Ｈ）、７．８０（ｍ、１Ｈ）。

中間体Ｌ８３
トリフルオロ酢酸／Ｎ−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝カーバメート２００ｍｇ（０．８０５ｍｍｏｌ）、（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸１５０ｍｇ（０．９６６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５６０μＬ（３．２ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ４５９ｍｇ（１．２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をジクロロメタンに溶解させた。有機相を５％強度クエン酸溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム２５ｇＳＮＡＰ、ジクロロメタン：メタノール９８：２）を用いて精製した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝カーバメート２７６ｍｇ（理論値の８９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．６７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ４ｍＬを、ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］エチル｝カーバメート（２７５ｍｇ、７１４μｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。これによって、標題化合物２８１ｍｇ（理論値の９９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．１７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２８６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８４
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）カーバメート２００ｍｇ（０．５９４ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン２０２ｍｇ（０．６５４ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド４．０ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン０．１３０ｍＬ（１．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸０．０８５ｍＬ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル［２１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１６−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１５−アザヘンアイコサ−１−イル］カーバメート２７５ｍｇ（理論値の７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５３０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ７８０μＬ（１０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル［２１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１６−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１５−アザヘンアイコサ−１−イル］カーバメート（２６８ｍｇ、５０５μｍｏｌ）のジクロロメタン（５．０ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。残留物を、それ以上精製せずに用いた。これによって、標題化合物２６６ｍｇ（理論値の９７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝１．１７（ｍ、２Ｈ）、１．４７（ｍ、４Ｈ）、２．０３（ｍ、２Ｈ）、２．９９（ｍ、２Ｈ）、３．１８（ｍ、２Ｈ）、３．３８（ｍ、４Ｈ）、３，５２（ｍ、８Ｈ）、３，５８（ｍ、６Ｈ）、７．０１（ｓ、２Ｈ）、７．７３（ｂｓ、３Ｈ）、７．８０（ｍ、１Ｈ）。

中間体Ｌ８５
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）

ｔｅｒｔ−ブチル（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）カーバメート２００ｍｇ（０．５９４ｍｍｏｌ）、（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸１１１ｍｇ（０．７１３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４１０μＬ（２．４ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド６ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ３３９ｍｇ（０．８９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル［１７−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１６−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１５−アザヘプタデカ−１−イル］カーバメート１３０ｍｇ（理論値の４３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ４１０μＬ（５．３ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル［１７−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１６−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１５−アザヘプタデカ−１−イル］カーバメート（１２６ｍｇ、２６７μｍｏｌ）のジクロロメタン（４．０ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１２４ｍｇ（理論値の９５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１３）：Ｒ_ｔ＝０．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝２．９９（ｍ、２Ｈ）、３．２２（ｍ、２Ｈ）、３．４１（ｍ、２Ｈ）、３，５３（ｍ、８Ｈ）、３，５８（ｍ、６Ｈ）、４．０２（ｓ、２Ｈ）、７．０９（ｓ、２Ｈ）、７．７３（ｂｓ、３Ｈ）、８．２１（ｍ、１Ｈ）。

中間体Ｌ８６
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン

Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン１００ｍｇ（０．５３１ｍｍｏｌ）および１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１３４ｍｇ（０．５３１ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド３ｍＬに溶かし、トリエチルアミン０．１５０ｍＬ（１．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で８時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物７１．５ｍｇ（理論値の４１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．４２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３２６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８７
３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパン酸

ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］プロパノエート２５０ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ）、２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸１５１ｍｇ（０．９７４ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物２２４ｍｇ（１．４６ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩２２４ｍｇ（１．１７ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド５．０ｍＬに溶かした。反応混合物を室温で１時間撹拌した。酢酸エチルを加え、混合物を５％強度クエン酸溶液で２回、そして飽和重炭酸ナトリウム溶液で抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×４０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノエート２６７ｍｇ（理論値の６４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３７１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ１．１ｍＬ（１４ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノエート（２６３ｍｇ、７１０μｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２４０ｍｇ（理論値の９４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝０．５７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３１５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８８
２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニネート

Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン１５０ｍｇ（０．７９７ｍｍｏｌ）および１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン２４６ｍｇ（０．７９７ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド４．０ｍＬに溶かし、トリエチルアミン０．２２０ｍＬ（１．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン３０２ｍｇ（理論値の９７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．０２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ［ｐｐｍ］＝０．８２（ｄｄ、６Ｈ）、１．１７（ｍ、２Ｈ）、１．２７（ｄ、３Ｈ）、１．４８（ｍ、４Ｈ）、１．９４（ｍ、１Ｈ）、２．１３（ｍ、２Ｈ）、３．３８（ｔ、２Ｈ）、４．１７（ｍ、２Ｈ）、７．００（ｓ、２Ｈ）、７．７５（ｄ、１Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ）。

Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン１３０ｍｇ（０．５３１ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン６．５ｍＬに溶かし、１−ヒドロキシピロリジン−２，５−ジオン５８．８ｍｇ（０．５１１ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩７８．４ｍｇ（０．４０９ｍｍｏｌ）を加えた。追加の１−ヒドロキシピロリジン−２，５−ジオン５８．８ｍｇ（０．５１１ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩７８．４ｍｇ（０．４０９ｍｍｏｌ）を加えた。ジクロロメタンを加え、混合物を水で３回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１７２ｍｇ（理論値の８７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．２８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ８９
１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｌ−グルタメート塩酸塩（１：１）

（４Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−オキソペンタン酸１．００ｇ（２．９６ｍｍｏｌ）を最初に、ＴＨＦ１３．０ｍＬに入れ、２−（トリメチルシリル）エタノール５１０μＬ（３．６ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン１０９ｍｇ（８８９μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を冷却して０℃とし、Ｎ−エチル−Ｎ′−３−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩６８２ｍｇ（３．５６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を酢酸エチルに溶解させた。有機相を０．１ＮＨＣｌ溶液で２回および飽和塩化ナトリウム溶液洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム２５ｇＳＮＡＰ、シクロヘキサン：酢酸エチル８０：２０）を用いて精製した。これによって、化合物１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−グルタメート６４９ｍｇ（理論値の５０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝４．６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４３８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−グルタメート６４９ｍｇ（１．４８ｍｍｏｌ）を、ジオキサン７．０ｍＬに溶かし、氷浴冷却しながら、４ＮＨＣｌ／ジオキサン１４ｍＬ（５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を高真空乾燥し、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム２５ｇＳＮＡＰ、ジクロロメタン：メタノール９０：１０）によって精製した。これによって、標題化合物３２０ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３３８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ９０
１−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オン酸

最初にＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシン１１８ｍｇ（５６６μｍｏｌ）を、ＤＭＦ５．０ｍＬに入れ、ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート２００ｍｇ（６２２μｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物１３０ｍｇ（８４９μｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩１３０ｍｇ（６７９μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。酢酸エチルを加え、混合物を５％強度クエン酸溶液で２回および飽和重炭酸ナトリウム溶液で抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、ｔｅｒｔ−ブチル１−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート２７４ｍｇ（理論値の９５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝１．６９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＴＦＡ８２０μＬ（１１ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル１−（｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシル｝アミノ）−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート２７４ｍｇ（５３５μｍｏｌ）のジクロロメタン（５．０ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物を水に取り、凍結乾燥した。これによって、標題化合物２６２ｍｇ（理論値の１００％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．１２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４５７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｌ９１
トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル１−｛［３−アミノ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニル］アミノ｝−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オエート（１：１）

ペプチド化学の古典的方法によって（ＥＤＣＩ／ＤＭＡＰを用いる２−トリメチルシリルエタノールによるエステル化、Ｚ保護基の水素分解的除去、市販のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｄ−アラニンとのカップリング、およびＦｍｏｃ保護基の除去）、市販の３−オキソ−１−フェニル−２，７，１０，１３，１６−ペンタオキサ−４−アザノナデカン−１９−オン酸から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１０４
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）ブタンアミド（１：１）

中間体Ｃ５３１０ｍｇ（０．０１４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３．３ｍＬに溶かし、中間体Ｌ１８．５ｍｇ（０．０２７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ７．８ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１２μＬを加えた。反応液を室温で１５分間撹拌し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製して、凍結乾燥後に、保護中間体５．６ｍｇ（理論値の３８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体５．６ｍｇ（０．００６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬに取り、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン６９ｍｇ（０．６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応を超音波浴で２時間処理した。次に、酢酸３５μＬを加え、反応液を高真空下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物２．４ｍｇ（理論値の４８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．９１分。

あるいは、標題化合物を、中間体Ｃ５８からも製造した。最初に、ＨＡＴＵ１３ｍｇ（０．０３４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１０μＬの存在下に、中間体Ｃ５８１５ｍｇ（０．０２３ｍｍｏｌ）を、中間体Ｌ１１１ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）と反応させた。室温で６０分間撹拌後、混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、保護中間体１２．３ｍｇ（理論値の６３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

第２段階で、この中間体を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶解させた。塩化亜鉛１２ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２６ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）および０．１％強度トリフルオロ酢酸水溶液２ｍＬを加えた。反応液を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物８．１ｍｇ（理論値の６８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１１９
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−｛２−［（ブロモアセチル）アミノ］エチル｝ブタンアミド（１：１）

中間体Ｃ５８２９ｍｇ（０．０４４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３．４ｍＬに取り、中間体Ｌ５２３６ｍｇ（０．０８７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ２５ｍｇ（０．０６５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１９μＬを加えた。室温で６０分間撹拌後、混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、中間体２６．４ｍｇ（理論値の７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２０および８２２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体を、２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶解させた。塩化亜鉛６．５ｍｇ（０．０４８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．９ｍｇ（０．０４８ｍｍｏｌ）および０．１％強度トリフルオロ酢酸水溶液２ｍＬを加えた。反応液を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物１４．４ｍｇ（理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７６および６７８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１２７
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［（２Ｓ）−２−メトキシプロパノイル］アミノ）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）ブタンアミド（１：１）

中間体Ｃ５９１２ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２．４ｍＬに溶かし、中間体Ｌ１１４．６ｍｇ（０．０４６ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩６ｍｇ（０．０３１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物５．９ｍｇ（０．０３９ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８μＬを加えた。室温で１時間撹拌後、混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、この中間体１１ｍｇ（理論値の７０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体１１ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬに取り、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン１２３ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応を超音波浴で２時間処理した。次に、酢酸６３μＬを加え、反応液を高真空下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物２ｍｇ（理論値の２２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．９５分。

中間体Ｆ１５３
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［（２Ｓ）−２−ヒドロキシプロパノイル］アミノ）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）ブタンアミド（１：１）

中間体Ｃ６０から中間体Ｆ１０４と同様にして合成を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１５５
Ｎ^６−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）−Ｎ^２−｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝−Ｌ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：１）

ＨＡＴＵ８．７ｍｇ（０．０２３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１７μＬの存在下に中間体Ｃ６１１４ｍｇ（０．０１９ｍｍｏｌ）を中間体Ｌ６１１５ｍｇ（０．０２１ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってトリフルオロエタノール中で塩化亜鉛によって脱保護することで、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１３ｍｇ（２段階で理論値の５９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０７６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１７３
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｌ−グルタミン／トリフルオロ酢酸（１：１）

ＨＡＴＵ７．７ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１６μＬの存在下に中間体Ｌ６３１２ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってトリフルオロエタノール中で塩化亜鉛によって脱保護することで、中間体Ｃ６４１５ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ）から標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１２ｍｇ（２段階で理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０４８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｆ１７８
トリフルオロ酢酸／（１Ｒ，２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−Ｎ−｛２−［（ブロモアセチル）アミノ］エチル｝シクロペンタンカルボキサミド（１：１）

中間体Ｌ１に代えて、中間体Ｌ５２を用い、中間体Ｆ１７７と同様にして標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８７および７８９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｆ１８０
Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｎ２−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−グルタミン／トリフルオロ酢酸（１：１）

ＨＡＴＵ７ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６μＬの存在下に中間体Ｃ６４９．６ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）を中間体Ｌ６４５ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってトリフルオロエタノール中にて塩化亜鉛によって脱保護することによって、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物３．１ｍｇ（２段階で理論値の２８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８５分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｆ１９２
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｌ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｃ５８６０ｍｇ（０．０９１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ８ｍＬに取り、ＨＡＴＵ４２ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６４μＬの存在下に中間体Ｌ６５４５ｍｇ（０．１００ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後、中間体をエタノール１０ｍＬに取り、室温で水素標準圧下に４５分間にわたり１０％パラジウム／活性炭で水素化した。触媒を濾去し、溶媒を減圧下に除去し、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。アセトニトリル／水１：１からの凍結乾燥によって、２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−Ｌ−アラニネート２４．５ｍｇ（２段階で理論値の３１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１７分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

この中間体１０ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）をＨＡＴＵ５．４ｍｇ（０．０１４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８μＬの存在下に市販の（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸中間体２ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってトリフルオロエタノール中にて塩化亜鉛で脱保護することで、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物３．５ｍｇ（２段階で理論値の３３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１９３
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン／Ｎ−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（１：１）から、中間体Ｆ１９２と同様にして標題化合物の合成を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ１９４
Ｎ−｛５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−５−オキソペンタノイル｝−Ｌ−バリル−Ｎ−｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］プロピル｝−Ｌ−アラニンアミド

最初にＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニンとカップリングさせることで、実施例Ｍ９から標題化合物を製造した。次の段階で、室温で水素標準圧下に１０％パラジウム／活性炭で１時間水素化し、次に１，１′−［（１，５−ジオキソペンタン−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオンとの反応によって脱保護中間体を標題化合物に変換することによりＺ保護基を除去した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｆ２０７
Ｎ^６−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）−Ｎ^２−｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝−Ｌ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ１５５と同様にして標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２１３
トリフルオロ酢酸／３−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）プロパンアミド（１：１）

最初に、１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−酸（中間体Ｃ６９）２７．５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ１）１５．９ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）とともに、アセトニトリル１．８ｍＬに入れた。次に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン３２．４ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）を加え、Ｔ３Ｐ（酢酸エチル中５０％品）３２．４ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空乾燥した。これによって、化合物２−（トルメチルシリル）エチル［１３−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカン−１６−イル］カーバメート１１．９ｍｇ（理論値の３５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［１３−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカン−１６−イル］カーバメート１１．９ｍｇ（０．０１ｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛５．５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１１．８ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製を直接行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥させた。これによって、標題化合物７．４ｍｇ（理論値の６０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．７５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２１６
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、アルゴン下に、Ｎ，Ｎ′−ビス［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−システイン３０．２ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）を、水２．０ｍＬおよびイソプロパノール２．０ｍＬに入れ、ＴＣＥＰ５６．７ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。イソプロパノール２．０ｍＬに溶かした２−（トリメチルシリル）エチル｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（クロロアセチル）アミノ］プロピル｝カーバメート（中間体Ｃ７０）５０．０ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１２２．２ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で７時間撹拌した。追加の１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１２２．２ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を水および飽和重炭酸ナトリウム溶液で抽出し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−システイン４３．１ｍｇ（理論値の６４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最初に４−メチルベンゼンスルホン酸／ベンジルβ−アラニネート（１：１）１６．５ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）とともにアセトニトリル１．５ｍＬに入れた。反応混合物を室温で３分間撹拌し、アセトニトリル１．５ｍＬに溶かしたＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−システイン３０．８ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２３．４ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）およびＴ３Ｐ（５０％酢酸エチル中溶液）２９．９ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。得られた化合物は、ベンジルＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−システイニル−β−アラニネートであった。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０１２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ベンジルＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−システイニル−β−アラニネート４３．８ｍｇ（４３．３μｍｏｌ）をエタノール８．０ｍＬに溶かし、パラジウム／活性炭（１０％）４．４ｍｇを加え、混合物を室温および標準圧で終夜水素化した。反応混合物を段ボールフィルターで濾過し、フィルターケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を減圧下に留去した。さらに２回、残留物を、丁度記載した通りに処理した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）１４．５ｍｇ（理論値の３７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最初にＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）１４．５ｍｇ（１６．１μｍｏｌ）を、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝プロパンアミド９．１ｍｇ（１７．７μｍｏｌ）とともにＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、４−メチルモルホリン４．９ｍｇ（４８．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸３．４ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）４．９ｍｇ（理論値の５０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１８６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）１４．１ｍｇ（１１．９μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．５ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛９．７ｍｇ（７１．３μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。追加の二塩化亜鉛９．７ｍｇ（７１．３μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。追加の二塩化亜鉛９．７ｍｇ（７１．３μｍｏｌ）を加え、反応混合物を７０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２０．８ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を凍結乾燥した。これによって、標題化合物６．２ｍｇ（理論値の４４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０４２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２１７
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

アルゴン下に、最初に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸７．５ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．５ｍＬに入れ、ＨＯＢｔ７．５ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ１５．５ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６．２ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。ＤＭＦ１．５ｍＬに溶かしたＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）４０．０ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１８．７ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイン１１．２ｍｇ（理論値の２５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイン１０．９ｍｇ（１２．８μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１０．４ｍｇ（７６．６μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２２．４ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を凍結乾燥した。これによって、標題化合物７．５ｍｇ（理論値の６５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２４１
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛［Ｎ−（ブロモアセチル）グリシル］アミノ｝エチル）ブタンアミド（１：１）

市販の１−（２−ブロモアセトキシ）ピロリジン−２，５−ジオンとのカップリングおよび次に塩化亜鉛による脱ブロックによって、中間体Ｃ６６から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３３および７３５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｆ２４２
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝プロピル）ブタンアミド（１：１）

中間体Ｆ１０４と同様にして標題化合物の合成を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２４３
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エチル］ブタンアミド（１：１）

中間体Ｆ２４２と同様にして標題化合物の合成を行った。

中間体Ｆ２４５
トリフルオロ酢酸／Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブチル｝−Ｎ′−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）コハク酸アミド（１：１）

ＤＭＦ８ｍＬ中ＨＡＴＵ１５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン９μＬ存在下での中間体Ｃ６５１０ｍｇ（０．０１３５ｍｍｏｌ）の中間体Ｌ１８ｍｇ（０．０２７ｍｍｏｌ）とのカップリングおよび次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってのトリフルオロエタノール中の塩化亜鉛による脱保護によって、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物８．８ｍｇ（２段階で理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２４７
トリフルオロ酢酸／メチル４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−ブロモ−４−オキソブタノエート（１：１）

中間体Ｃ６６１４ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ１４ｍＬに溶かし、２−ブロモ−１−エチルピリジニウムテトラフルオロボレート（ＢＥＰ）１０．１ｍｇ（０．０３７ｍｍｏｌ）とともに、１回に少量ずつｐＨを５から６に維持しながら、ピリジン合計２５０μＬを加えた。次に、酢酸でｐＨを４に調節し、反応液を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、凍結乾燥および乾燥によって、保護中間体４ｍｇ（理論値の２１％）を得て、それを次に、塩化亜鉛によってアミノ官能基で脱保護した。ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥によって、標題化合物３ｍｇ（理論値の７２％）を無色泡状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０５および８０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２４８
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−｛２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）エトキシ］エチル｝ブタンアミド（１：１）

ＨＡＴＵ存在下での中間体Ｃ５８１０ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ）の中間体Ｌ１２５ｍｇ（０．０１７ｍｍｏｌ）とのカップリングおよび次に塩化亜鉛による脱保護によって、標題化合物を製造した。これによって、標題化合物６．５ｍｇ（２段階で理論値の５２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５４
トリフルオロ酢酸／メチル（３Ｓ）−４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−ブロモ−４−オキソブタノエート（１：１）

中間体Ｃ６６１５ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）を、（２Ｓ）−２−アミノ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸塩酸塩（１：１）から（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００、６５、５１７−５２２）に記載の方法に従って合成した（２Ｓ）−２−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸２１ｍｇ（０．０９９ｍｍｏｌ）とカップリングさせることで、中間体２４７と同様にして標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０５および８０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５５
Ｒ／Ｓ−（Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−α−グルタミル−Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝）ホモシステイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に（２Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸１３．１ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、ＨＯＢｔ５．４ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ１１．４ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．６ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１２．９ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）に溶かしたＲ／Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）ホモシステイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ１１）３０．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ１ｍＬを加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物４−［２−［［（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル］−［３−（２−トリメチルシリルエトキシカルボニルアミノ）プロピル］アミノ］−２−オキソエチル］スルファニル−２−［［（２Ｓ）−５−ベンジルオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５−オキソ−ペンタノイル］アミノ］ブタン酸３２ｍｇ（７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０８４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

４−［２−［［（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル］−［３−（２−トリメチルシリルエトキシカルボニルアミノ）プロピル］アミノ］−２−オキソエチル］スルファニル−２−［［（２Ｓ）−５−ベンジルオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５−オキソ−ペンタノイル］アミノ］ブタン酸４１．４ｍｇ（０．０３８ｍｍｏｌ）をエタノール１０ｍＬに溶解させ、Ｐｄ／Ｃ４．２ｍｇを加え、混合物を標準気圧下に水素化した。反応混合物を段ボールフィルターで濾過し、フィルターケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を減圧下に加熱せずに留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×４０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｒ／Ｓ−（Ｌ−α−グルタミル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）ホモシステイン／トリフルオロ酢酸（１：１）２１．１ｍｇ（５６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最初にＲ／Ｓ−（Ｌ−α−グルタミル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル））ホモシステイン／トリフルオロ酢酸（１：１）２０．４ｍｇ（２０．９４μｍｏｌ）を、３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝プロパンアミド１１．８ｍｇ（２３．０４μｍｏｌ）とともにＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、４−メチルモルホリン４．２ｍｇ（４１．８８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸３．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｒ／Ｓ−（Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−α−グルタミル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル））ホモシステイン９．５ｍｇ（３６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．６６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２５９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｒ／Ｓ−（Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−α−グルタミル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル））ホモシステイン９．４ｍｇ（７．４７μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．５ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛６．１ｍｇ（４４．８１μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物６．９ｍｇ（７５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１１４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５６
トリフルオロ酢酸／Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブチル｝−Ｎ′−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エチル］コハク酸アミド（１：１）

ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下での中間体Ｃ６５１０ｍｇ（０．０１４ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸／Ｎ−［２−（２−アミノエトキシ）エチル］−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）９．６ｍｇ（０．０２７ｍｍｏｌ）のカップリングおよび次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってのトリフルオロエタノール中での塩化亜鉛による脱保護によって、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物８ｍｇ（２段階で理論値の６４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５７
Ｒ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザオクタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

Ｒ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）５０．０ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）および３−［２−［２−［２−［２−［［２−（２，５−ジオキソピロール−１−イル）アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパン酸（中間体Ｌ７４）２９ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３．０ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ２７．３ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２３．３ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｒ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザオクタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン１７．４ｍｇ（２６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１０１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｒ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザオクタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン１７ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛６．３ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．５ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物７．６ｍｇ（４６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９５７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５８
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−［３−｛２−［（ブロモアセチル）アミノ］エチル｝アミノ）−３−オキソプロピル］ブタンアミド（１：１）

ＨＡＴＵを用いる中間体Ｃ５８のトリフルオロ酢酸／ベンジル［２−（β−アラニルアミノ）エチル］カーバメート（１：１）とのカップリング、次に水素化分解、次に１−（２−ブロモアセトキシ）ピロリジン−２，５−ジオンとのカップリングおよび最後に塩化亜鉛による脱保護によって、標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７４７および７４９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２５９
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［Ｎ−（ブロモアセチル）グリシル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｃ５８７５ｍｇ（０．１１４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１２．５ｍＬに取り、ＨＡＴＵ６５ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン７９μＬの存在下に中間体Ｌ７５７８ｍｇ（０．１７１ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。分取ＨＰＬＣによる精製後、中間体をエタノール２０ｍＬに取り、室温で水素標準圧下に１時間にわたり１０％パラジウム／活性炭で水素化した。触媒を濾去し、溶媒を減圧下に除去し、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。アセトニトリル／水１：１からの凍結乾燥によって、２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−［（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）ブタノイル］−Ｄ−アラニネート６３ｍｇ（２段階で理論値の６４％）を得た。

この中間体４０ｍｇ（０．０４７ｍｍｏｌ）を、上記の方法と同様にして、ＨＡＴＵの存在下にＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシンとカップリングさせ、再度水素化分解的に脱保護した。

この中間体１０ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４μＬの存在下に市販の１−（２−ブロモアセトキシ）ピロリジン−２，５−ジオン７．７ｍｇ（０．０３２ｍｍｏｌ）とカップリングさせ、次に中間体Ｆ１１９について記載の方法に従ってトリフルオロエタノール中にて塩化亜鉛によって脱保護することで、標題化合物を製造した。分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１．３ｍｇを得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７７および７７９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６１
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛２−［（ブロモアセチル）アミノ］エトキシ｝エチル）ブタンアミド（１：１）

ＨＡＴＵの存在下での中間体Ｃ５８２０ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の中間体Ｌ７７２５．８ｍｇ（０．０６１ｍｍｏｌ）とのカップリングおよび次に塩化亜鉛による脱保護によって標題化合物を製造した。これによって、標題化合物１１．９ｍｇ（２段階で理論値の４７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２２および７２０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６２
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初にＳ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）３０ｍｇ（３６μｍｏｌ）と３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−Ｎ−［２−（２−｛３−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−３−オキソプロポキシ｝エトキシ）エチル］プロパンアミド１６．９ｍｇ（４０μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．５ｍＬに入れ、４−メチルモルホリン１０．９ｍｇ（１０８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸７．５８ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン３３．４ｍｇ（理論値の８０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン３２．８ｍｇ（３２μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール３．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛２６．１ｍｇ（１９２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸５６．０ｍｇ（０．１９２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を凍結乾燥した。これによって、標題化合物２２．９ｍｇ（理論値の７１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６３
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

Ｒ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）３０．０ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）およびＮ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニン（中間体Ｌ７８）９．８ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ１６．４ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン４．２ｍｇ（１３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１．３１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９２５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン１１．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛５．０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１０．７ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４．４ｍｇ（４０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６４
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル−Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

Ｒ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）３０．０ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）およびＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニン（中間体Ｌ７９）１２．２ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１．０ｍＬに溶かし、ＨＡＴＵ１６．４ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１４．０ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン８．９ｍｇ（２４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１．３８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９８１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン１５．３ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛６．３ｍｇ（０．０４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．５ｍｇ（０．０４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物９．１ｍｇ（６２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６５
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−６，１７−ジオキソ−１０，１３−ジオキサ−３−チア−７，１６−ジアザドコサン−１−アミド（１：１）

最初に１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）３０．０ｍｇ（４２．７μｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸／Ｎ−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１：１）（中間体Ｌ８２）２５．３ｍｇ（５５．６μｍｏｌ）を、アセトニトリル１．９ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６０μＬ（３４０μｍｏｌ）および２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスフィナン２，４，６−トリオキサイド５０％の酢酸エチル中溶液３３μＬ（５６μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水（２．０ｍＬ）を加え、精製を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［４−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５，１０，２１−トリオキソ−１４，１７−ジオキサ−７−チア−４，１１，２０−トリアザヘキサコサ−１−イル］カーバメート２６．７ｍｇ（理論値の６０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［４−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５，１０，２１−トリオキソ−１４，１７−ジオキサ−７−チア−４，１１，２０−トリアザヘキサコサ−１−イル］カーバメート２５．３ｍｇ（２４．７μｍｏｌ）を、トリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛２０．２ｍｇ（１４８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸４３．３ｍｇ（１４８μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２３．４ｍｇ（理論値の９５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６６
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１３−ジオキソ−６，９−ジオキサ−１６−チア−３，１２−ジアザオクタデカン−１８−アミド（１：１）

１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）３０．０ｍｇ（０．０４３ｍｍｏｌ）を最初に、トリフルオロ酢酸／Ｎ−｛２−［２−（２−アミノエトキシ）エトキシ］エチル｝−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ８３）２２．２ｍｇ（０．０５６ｍｍｏｌ）とともにアセトニトリル１．９ｍＬに入れた。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６０μＬ（０．３４ｍｍｏｌ）を加え、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル中溶液）３３μＬ（０．０５６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水（２．０ｍＬ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［１９−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１３，１８−トリオキソ−６，９−ジオキサ−１６−チア−３，１２，１９−トリアザドコサン−２２−イル］カーバメート２０．５ｍｇ（理論値の４９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９６９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［１９−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１３，１８−トリオキソ−６，９−ジオキサ−１６−チア−３，１２，１９−トリアザドコサン−２２−イル］カーバメート１９．１ｍｇ（１９．７μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１６．１ｍｇ（１１８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸３４．６ｍｇ（１１８μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１３．９ｍｇ（理論値の７５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６７
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、アルゴン下に、１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−オン酸（中間体Ｌ７４）１３．４ｍｇ（３３．３μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン９．３μＬ（５４．４μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１２．６ｍｇ（３３．３μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．７μＬ（２７．７μｍｏｌ）に溶かしたＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイニル−β−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｆ２１６の合成参照）２５．０ｍｇ（２７．７μｍｏｌ）およびＤＭＦ１．０ｍＬを加えた。反応混合物を室温で９０分間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−システイニル−β−アラニン６．９０ｍｇ（理論値の１９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１７２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−システイニル−β−アラニン６．７０ｍｇ（５．７１μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛４．６７ｍｇ（３４．３μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１０ｍｇ（３４．３μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４．４ｍｇ（理論値の６７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６８
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−６，２３−ジオキソ−１０，１３，１６，１９−テトラオキサ−３−チア−７，２２−ジアザオクタコサン−１−アミド（１：１）

最初に１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）３０．０ｍｇ（０．０４３ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１：１）（中間体Ｌ８４）３０．２ｍｇ（０．０５６ｍｍｏｌ）とともにアセトニトリル２．０ｍＬに入れた。次に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン６０μＬ（０．３４ｍｍｏｌ）を加え、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル中溶液）３３μＬ（０．０５６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水（２．０ｍＬ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［４−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−３２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５，１０，２７−トリオキソ−１４，１７，２０，２３−テトラオキサ−７−チア−４，１１，２６−トリアザドトリアコンタ−１−イル］カーバメート２７．９ｍｇ（理論値の５９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１１４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［４−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−３２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−５，１０，２７−トリオキソトリオキソ−１４，１７，２０，２３−テトラオキサ−７−チア−４，１１，２６−トリアザドトリアコンタ−１−イル］カーバメート２５．６ｍｇ（２３．０μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．５ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１８．８ｍｇ（１３８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸４０．３ｍｇ（１３８μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２２．２ｍｇ（理論値の８８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９６９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２６９
４−｛［（８Ｒ，１４Ｒ）−１３−（３−アミノプロピル）−１４−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１５，１５−ジメチル−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカン−８−イル］アミノ｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初にＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタノイル）−Ｌ−システイン（中間体Ｃ７７）１７．０ｍｇ（０．０１９５ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（中間体Ｌ１）４．９９ｍｇ（０．０２５３ｍｍｏｌ）とともにアセトニトリル１．０ｍＬに入れた。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２７μＬ（０．１６ｍｍｏｌ）を加え、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル中溶液）１５μＬ（０．０２５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水（２．０ｍＬ）を加えた。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［（１６Ｒ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，２−ジメチル−６，１２，１７，２２−テトラオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１，１８，２１−テトラアザ−２−シラトリコサン−１６−イル］アミノ｝−４−オキソブタノエート９．５ｍｇ（理論値の４６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［（１６Ｒ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，２−ジメチル−６，１２，１７，２２−テトラオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１，１８，２１−テトラアザ−２−シラトリコサン−１６−イル］アミノ｝−４−オキソブタノエート８．３ｍｇ（７．８９μｍｏｌ）を、トリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛６．４５ｍｇ（４７．３μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で６時間撹拌した。二塩化亜鉛６．４５ｍｇ（４７．３μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２７．７ｍｇ（９４．６μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１．１０ｍｇ（理論値の１４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７０
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−Ｎ′−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）コハク酸アミド（１：１）

最初に、アルゴン下に、１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−オン酸（中間体Ｃ７８）１５．０ｍｇ（２２．９μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８．０μＬ（４５．８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１０．４ｍｇ（２７．４μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．０μＬ（２２．９μｍｏｌ）に溶かしたトリフルオロ酢酸／Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ１）８．５４ｍｇ（２７．４μｍｏｌ）およびＤＭＦ１．０ｍＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛４−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）プロピル］カーバメート１４．７ｍｇ（理論値の７７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝１．３３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛４−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）プロピル］カーバメート１３．２ｍｇ（１５．８μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１２．９ｍｇ（９４．８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２７．７ｍｇ（９４．６μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１０．９ｍｇ（理論値の８３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７１
４−｛［（２０Ｒ，２６Ｒ）−２５−（３−アミノプロピル）−２６−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２７，２７−ジメチル−２，１９，２４−トリオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−２２−チア−３，１８，２５−トリアザオクタコサン−２０−イル］アミノ｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、アルゴン下に、Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタノイル）−Ｌ−システイン（中間体Ｃ７７）１９．４ｍｇ（２２．２μｍｏｌ）を、ＤＭＦ２．０ｍＬに入れ、トリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ７４）２１．７ｍｇ（４４．４μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１２μＬ（６７μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１６．９ｍｇ（４４．４μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［（１６Ｒ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−３５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，２−ジメチル−６，１２，１７，３４−テトラオキソ−５，２１，２４，２７，３０−ペンタオキサ−１４−チア−７，１１，１８，３３−テトラアザ−２−シラペンタトリアコンタン−１６−イル］アミノ｝−４−オキソブタノエート１８．１ｍｇ（理論値の６６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法４）：Ｒ_ｔ＝１．７９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２５０（Ｍ＋Ｎａ）^＋。

ｔｅｒｔ−ブチル４−｛［（１６Ｒ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−３５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，２−ジメチル−６，１２，１７，３４−テトラオキソ−５，２１，２４，２７，３０−ペンタオキサ−１４−チア−７，１１，１８，３３−テトラアザ−２−シラペンタトリアコンタン−１６−イル］アミノ｝−４−オキソブタノエート１８．１ｍｇ（１４．７μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１２．０ｍｇ（８８．４μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２５．８ｍｇ（８８．４μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１２．３ｍｇ（理論値の７３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７２
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−Ｎ′−［１７−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１６−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサ−１５−アザヘプタデカ−１−イル］コハク酸アミド（１：１）

最初に、アルゴン下に、１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラペンタデカン−１５−オン酸（中間体Ｃ７８）１５．０ｍｇ（２２．９μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８．０μＬ（４５．８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１０．４ｍｇ（２７．４μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．０μＬ（２２．９μｍｏｌ）に溶かしたトリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ８５）１３．４ｍｇ（２７．４μｍｏｌ）およびＤＭＦ１．０ｍＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［２３−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１９，２２−トリオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３，１８，２３−トリアザヘキサコサン−２６−イル］カーバメート１５．８ｍｇ（理論値の６８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［２３−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１９，２２−トリオキソトリオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３，１８，２３−トリアザヘキサコサン−２６−イル］カーバメート１５．１ｍｇ（１４．９μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１２．２ｍｇ（８９．６μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２６．２ｍｇ（８９．６μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１０．３ｍｇ（理論値の７０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７３
トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１９−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−２２−チア−３，１８−ジアザテトラコサン−２４−アミド（１：１）

最初に、アルゴン下に、１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）２０．０ｍｇ（２８．５μｍｏｌ）をＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン１０．０μＬ（５７．０μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１３．０ｍｇ（３４．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５．０μＬ（２８．５μｍｏｌ）に溶かしたトリフルオロ酢酸／Ｎ−（１４−アミノ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカ−１−イル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド（１：１）（中間体Ｌ８５）１６．７ｍｇ（３４．２μｍｏｌ）およびＤＭＦ１．０ｍＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチル［２５−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１９，２４−トリオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−２２−チア−３，１８，２５−トリアザオクタコサン−２８−イル］カーバメート１８．６ｍｇ（理論値の６２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０５７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチル［２５−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１９，２４−トリオキソトリオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−２２−チア−３，１８，２５−トリアザオクタコサン−２８−イル］カーバメート１７．１ｍｇ（１６．２μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１３．２ｍｇ（９７．０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２８．４ｍｇ（９７．０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物９．８０ｍｇ（理論値の５９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７４
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初にＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）１３．９ｍｇ（０．０１６７ｍｍｏｌ）を、Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニン（中間体Ｌ８６）７．０７ｍｇ（０．０２１７ｍｍｏｌ）とともアセトニトリル２．０ｍＬに入れた。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２３μＬ（０．１３ｍｍｏｌ）を加え、Ｔ３Ｐ（５０％酢酸エチル中溶液）１３μＬ（０．０２２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン３．７０ｍｇ（理論値の１９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル−Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン１０．６ｍｇ（１０．３μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛８．４６ｍｇ（６２．１μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１８．１ｍｇ（６２．１μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５．６０ｍｇ（理論値の５４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．６９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８８０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７５
Ｎ−［３−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）プロパノイル］−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）−Ｌ−α−グルタミン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−オン酸（中間体Ｃ６９）３９．０ｍｇ（５５．６μｍｏｌ）を、ＤＭＦ４．０ｍＬに入れ、１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｌ−グルタメート塩酸塩（１：１）（中間体Ｌ８９）４１．６ｍｇ（１１１μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン２９μＬ（１７０μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ４２．３ｍｇ（１１１μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、酢酸で反応停止し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｎ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｌ−グルタメート５３．１ｍｇ（理論値の９３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．７１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に、アルゴン下に、酢酸パラジウム（ＩＩ）７．６０ｍｇ（３３．９μｍｏｌ）を、ジクロロメタン３．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン１４μＬ（１００μｍｏｌ）およびトリエチルシラン１１０μＬ（６８０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で５分間撹拌し、ジクロロメタン３．０ｍＬに溶かした１−ベンジル−５−［２−（トリメチルシリル）エチル］−Ｎ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｌ−グルタメート６９．２ｍｇ（６７．７μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を段ボールフィルターで濾過し、フィルターケーキをジクロロメタンで洗浄した。溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物（１９Ｓ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−１９−｛３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝−５−オキサ−１４−チア−７，１１，１８−トリアザ−２−シライコサン−２０−オン酸３８．４ｍｇ（理論値の６１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９３１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最初に（１９Ｓ）−１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−１９−｛３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝−５−オキサ−１４−チア−７，１１，１８−トリアザ−２−シライコサン−２０−オン酸（中間体Ｃ６９）１０．０ｍｇ（１０．７μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ−（２−アミノエチル）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド／２，２，２−トリフルオロエタン−１，１−ジオール（１：１）（中間体Ｌ１）６．７３ｍｇ（２１．５μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン５．６μＬ（３２μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ８．１７ｍｇ（２１．５μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、酢酸で反応停止し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチルＮ２−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）−Ｌ−α−グルタミネート６．９０ｍｇ（理論値の５８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１１０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

２−（トリメチルシリル）エチルＮ^２−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）−Ｌ−α−グルタミネート６．９０ｍｇ（６．２１μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛５．１ｍｇ（３７．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。二塩化亜鉛５．１ｍｇ（３７．２μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。二塩化亜鉛５．１ｍｇ（３７．２μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。二塩化亜鉛１０．１ｍｇ（７４．４μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で終夜および室温で７２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸５４．５ｍｇ（１８６μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２．４ｍｇ（理論値の３９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７６
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、アルゴン下に、３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパン酸（中間体Ｌ８７）９．０８ｍｇ（２８．９μｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．０ｍＬに入れ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン８．３３μＬ（４８．２μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ１１．０ｍｇ（２８．９μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．６７μＬ（２４．１μｍｏｌ）に溶かしたＳ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）２０．０ｍｇ（２７．７μｍｏｌ）およびＤＭＦ１．０ｍＬを加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン４．７０ｍｇ（理論値の１９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝２．４７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０１３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−｛３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパノイル｝−Ｌ−システイン１３．９ｍｇ（１３．７μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛５．６ｍｇ（４１．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。二塩化亜鉛５．６ｍｇ（４１．２μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で３０分間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２４．１ｍｇ（８２．４μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１０．８ｍｇ（理論値の８０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８６９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７７
Ｎ−［３−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）プロパノイル］−３−［（ブロモアセチル）アミノ］−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｄ−アラニネート（１：１）（中間体Ｃ８０）８．９０ｍｇ（８．８８μｍｏｌ）および１−（２−ブロモアセトキシ）ピロリジン−２，５−ジオン２．３１ｍｇ（９．７７μｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン２．９μＬ（２７μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−［（ブロモアセチル）アミノ］−Ｄ−アラニネート５．８０ｍｇ（理論値の６５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１００８（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−［（ブロモアセチル）アミノ］−Ｄ−アラニネート５．８０ｍｇ（５．７５μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛４．７０ｍｇ（３４．５μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。二塩化亜鉛４．７０ｍｇ（３４．５μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で５時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２０．２ｍｇ（６９．０μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１．７０ｍｇ（理論値の３４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７８
Ｎ−［３−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）プロパノイル］−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル３−アミノ−Ｎ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−Ｄ−アラニネート（１：１）（中間体Ｃ８０）１０．０ｍｇ（９．９８μｍｏｌ）および１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン２．７７ｍｇ（１１．０μｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１ｍＬに溶かし、Ｎ−メチルモルホリン３．３μＬ（３０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。酢酸２．０μＬ（３５μｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート５．５０ｍｇ（理論値の５４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．５１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

２−（トリメチルシリル）エチルＮ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２，１７−トリオキソ−５−オキサ−１４−チア−７，１１−ジアザ−２−シラヘプタデカン−１７−イル）−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｄ−アラニネート５．５０ｍｇ（５．３６μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛４．３９ｍｇ（３２．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。二塩化亜鉛４．３９ｍｇ（３２．２μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で１時間撹拌した。二塩化亜鉛４．３９ｍｇ（３２．２μｍｏｌ）を加え、反応混合物を５０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２８．２ｍｇ（９６．５μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物２．７０ｍｇ（理論値の５６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２７９
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［（｛（２Ｒ）−２−カルボキシ−２−［（３−カルボキシプロパノイル）アミノ］エチル｝スルファニル）アセチル］アミノ）プロピル］−Ｌ−アラニンアミド

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタノイル）−Ｌ−システイン（中間体Ｃ７７）１２．２ｍｇ（１４μｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１１．４ｍｇ（８３．８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２４．５ｍｇ（８３．８μｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物４−｛［（１Ｒ）−２−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）−１−カルボキシエチル］アミノ｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）４．６０ｍｇ（理論値の４２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６７３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

４−｛［（１Ｒ）−２−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）−１−カルボキシエチル］アミノ｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）１０．０ｍｇ（１２．７μｍｏｌ）および２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニネート（中間体Ｌ８８）７．４１ｍｇ（１２．７μｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１．５ｍＬに溶かし、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン４．４μＬ（２５μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。酢酸２．０μＬ（３５μｍｏｌ）を加え、反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水／０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物５．２０ｍｇ（理論値の３９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．１１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０３６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８０
トリフルオロ酢酸／Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ベンズアミド（１：１）

市販の１−（３−｛［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］カルボニル｝フェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンとのカップリングおよび次に塩化亜鉛による脱保護によって、中間体Ｃ６４から標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７５５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８１
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［Ｎ−（ブロモアセチル）−β−アラニル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、修飾アミノ酸構成要素Ｎ−（ブロモアセチル）−β−アラニンおよび２−（トリメチルシリル）エチル−３−アミノ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニネートをペプチド化学の古典的方法によって製造した。これらを、ＨＡＴＵおよびモルホリンの存在下にカップリングさせた。次に、１０％強度トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンを用いてｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を除去して、中間体２−（トリメチルシリル）エチル３−｛［Ｎ−（ブロモアセチル）−β−アラニル］アミノ｝−Ｄ−アラニネートを得た。

最後に、この中間体をＨＡＴＵおよび４−メチルモルホリンの存在下に中間体Ｃ５８とカップリングさせ、次に塩化亜鉛によって脱保護することで、標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９１および７９３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８２
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（３−｛［Ｎ−（ブロモアセチル）グリシル］アミノ｝プロピル）ブタンアミド（１：１）

最初に、ペプチド化学の古典的方法によってｔｅｒｔ−ブチルグリシネートおよびブロモ無水酢酸から、中間体トリフルオロ酢酸／Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ２−（ブロモアセチル）グリシンアミド（１：１）を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７４７および７４９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８３
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−２−カルボキシエチル］−Ｎ^２−（ブロモアセチル）−Ｌ−α−アスパラギン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、修飾アミノ酸構成要素（２Ｓ）−２−［（ブロモアセチル）アミノ］−４−オキソ−４−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ブタン酸およびブロモ無水酢酸を（２Ｓ）−２−アミノ−４−オキソ−４−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］ブタン酸およびブロモ無水酢酸から製造し、アミノ酸構成要素２−（トリメチルシリル）エチル−３−アミノ−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニネートを市販の３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−アラニン／Ｎ−シクロヘキシルシクロヘキサンアミン（１：１）から製造した。両方の構成要素をＨＡＴＵおよびモルホリンの存在下にカップリングさせ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を、５％強度トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンを用いて除去して、シリルエチルエステル保護基を得て、従って中間体トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル−Ｎ−｛（２Ｒ）−２−アミノ−３−オキソ−３−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］プロピル｝−Ｎ２−（ブロモアセチル）−Ｌ−α−アスパラギナート（１：１）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３５および８３７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８４
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、中間体Ｌ８０を市販の（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸とカップリングさせ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を、１６％強度トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンを用いて除去して、シリルエチルエステル保護基を得た。

最後に、この中間体をＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ５８とカップリングさせ、次に塩化亜鉛によって脱保護することで、標題化合物を製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．４６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９８４．４５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８５
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−［（１８−ブロモ−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザオクタデカン−１−オイル）アミノ］−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、中間体Ｌ８０を市販のブロモ無水酢酸とカップリングさせ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を、２０％強度トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンを用いて除去して、シリルエチルエステル保護基を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９６７および９６９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８６
１−［（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝−Ｄ−アラニル）アミノ］−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−オン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、中間体Ｌ９１を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸とカップリングさせ、Ｂｏｃ保護基を、１２．５％強度ＴＦＡ／ＤＣＭを用いて除去した。得られた中間体を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ５８とカップリングさせ、塩化亜鉛による脱保護によって標題化合物に変換した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９８４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８７
１−［（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−［（ブロモアセチル）アミノ］−Ｄ−アラニル）アミノ］−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、中間体Ｌ９１をＤＣＭ中にて無水ブロモ酢酸でアシル化し、次にＢｏｃ保護基を１０％強度ＴＦＡ／ＤＣＭを用いて除去した。このようにして得られた中間体を、ＨＡＴＵおよびモルホリンの存在下に中間体Ｃ５８とカップリングさせ、塩化亜鉛による脱保護によって標題化合物に変換した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８７分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９６７および９６９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８８
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−セリル｝アミノ）−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｃ７４３５ｍｇ（３９μｍｏｌ）を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピル（ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙ）エチルアミンの存在下に、ｔｅｒｔ−ブチルＯ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリネートおよび（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸から事前に製造しておいたＮ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−セリンとカップリングさせた。塩化亜鉛による脱保護およびＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１４ｍｇ（理論値の３８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．４３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２４．３４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２８９
Ｎ^２−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−Ｎ^６−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｄ−リジン／トリフルオロアセテート（１：１）

最初に、ペプチド化学の古典的方法によって、Ｎ^６−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−リジンからトリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル−Ｎ^６−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｄ−リシネート（１：１）を製造した。

次に、この中間体１２．５ｍｇ（２５μｍｏｌ）を、ＨＡＴＵおよび４−メチルモルホリンの存在下に中間体Ｃ５８１５ｍｇ（２３μｍｏｌ）とカップリングさせた。塩化亜鉛による脱保護およびＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１４ｍｇ（理論値の５３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９０
Ｎ^２−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−Ｎ^６−（ブロモアセチル）−Ｄ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ペプチド化学の古典的方法によって、Ｎ^６−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ^２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−リジンから、トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル−Ｎ６−（ブロモアセチル）−Ｄ−リシネート（１：１）を製造した。

この中間体１２ｍｇ（２５μｍｏｌ）を、ＨＡＴＵおよび４−メチルモルホリンの存在下に中間体Ｃ５８１５ｍｇ（２３μｍｏｌ）とカップリングさせた。塩化亜鉛による脱保護およびＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物７ｍｇ（理論値の３６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６２および７６４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９１
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］プロピル｝−Ｌ−アラニンアミド

最初に、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニンとカップリングさせることで、実施例Ｍ９から標題化合物を製造した。次の段階で、室温で水素標準圧下に１０％パラジウム／活性炭で１時間水素化することでＺ保護基を除去し、次にＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸とカップリングさせることで、脱保護中間体を標題化合物に変換した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．２１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９２
（２Ｓ）−２−アミノ−４−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛５−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）アミノ］−５−オキソペンタノイル｝アミノ）ブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

５ｍｇ
中間体Ｆ２９３
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−３−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ベンゾイル］アミノ｝−Ｄ−アラニン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｃ７４３５ｍｇ（３９μｍｏｌ）をＤＭＦ４ｍＬに溶かし、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、市販の１−（３−｛［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］カルボニル｝フェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１３．５ｍｇ（４３μｍｏｌ）とカップリングさせた。塩化亜鉛による脱保護およびＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物１２ｍｇ（理論値の３４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝０．９３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９４
Ｎ−｛５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−５−オキソペンタノイル｝−Ｌ−バリル−Ｎ−｛（１Ｓ）−３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−カルボキシプロピル｝−Ｌ−アラニンアミド

メタノール１２ｍＬに溶かした中間体Ｃ７６４１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を、室温で１時間、水素標準圧下に１０％パラジウム／活性炭１０ｍｇで水素化した。触媒を濾去し、溶媒を減圧下に除去した。これによって、脱保護中間体３２ｍｇ（理論値の９２％）を得た。

この中間体１５ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）をＤＭＦに溶かし、１，１′−［（１，５−ジオキソペンタｎ−１，５−ジイル）ビス（オキシ）］ジピロリジン−２，５−ジオン１３ｍｇ（０．０３９ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン７μＬを加えた。室温で１時間撹拌後、反応液を濃縮し、残留物をＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物９ｍｇ（理論値の４５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９５
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛（１Ｓ）−３−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−カルボキシプロピル｝−Ｌ−アラニンアミド

この中間体１５ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４ｍＬに溶かし、１−｛２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン１０ｍｇ（０．０３９ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン７μＬを加えた。室温で２時間撹拌後、反応液を濃縮し、残留物をＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物１０ｍｇ（理論値の５６％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８２１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９６
トリフルオロ酢酸／（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−｛２−［（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）スルホニル］エチル｝ブタンアミド（１：１）

ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ５８とカップリングさせることで、中間体Ｌ８１から標題化合物を製造した。次の段階で、ＤＣＭ／メタノール１：１中室温で水素標準圧下に３０分間、１０％パラジウム／活性炭での水素化によってＺ保護基を除去した。ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）酢酸とカップリングさせ、最後に塩化亜鉛による脱保護によって、脱保護中間体を標題化合物に変換した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７８５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９７
Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（ピロリジン−３−イルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体１）

アルゴン下に、塩化亜鉛１５ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９２）３６ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ、純度６８％）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．７４ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で７時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ３２ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物６．４ｍｇ（理論値の２５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９２（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９８
Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（ピロリジン−３−イルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体２）

アルゴン下に、塩化亜鉛１９ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９６）４５ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ、純度７１％）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．９４ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ４２ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物５．７ｍｇ（理論値の１８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９１（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ２９９
Ｓ−（２−｛（３−アミノプロピル）［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］アミノ｝−２−オキソエチル）−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

塩化亜鉛７６．８ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を、Ｓ−｛１１−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル｝−Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ８５）８８．０ｍｇ（０．０９ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（１．８８ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ１６４．６ｍｇ（０．５７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物３１ｍｇ（理論値の３５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．８２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３００
（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−Ｎ−（２−｛［（２Ｒ）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エチル）ブタンアミド

アルゴン下に、塩化亜鉛１１ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）を、２−（トリメチルシリル）エチル｛（２Ｓ）−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］−１−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エチル）アミノ］−１−オキソブタン−２−イル｝カーバメート（中間体１００）７ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．２ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で８時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ１４ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物１．６ｍｇ（理論値の２７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７０７（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３０１
３−［（２−｛（３−アミノプロピル）［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］アミノ｝−２−オキソエチル）スルファニル］−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）プロパンアミド／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体１）

塩化亜鉛３７．３２ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を、２−（トリメチルシリル）エチル｛１３−［（Ｒ）−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］（シクロヘキシル）メチル］−１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカン−１６−イル｝カーバメート（中間体Ｃ８８）４１．４０ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．９２ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。ＥＤＴＡ８０．０２ｍｇ（０．２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物９．６ｍｇ（理論値の２４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．５８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３０２
Ｓ−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（ピロリジン−３−イルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイントリフルオロアセテート（１：１）（異性体１）

アルゴン下に、塩化亜鉛３１．７ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）を、Ｓ−［２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝｛［（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−３−イル］メチル｝アミノ）−２−オキソエチル］−Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−システイン（中間体Ｃ９９）５６．９ｍｇ（５８．２ｍｍｏｌ、純度８５％）の２，２，２−トリフルオロエタノール（１．４ｍＬ）中混合物に加え、反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ６８．０ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物７ｍｇ（理論値の１３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７３６（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３０３
３−（｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（ピロリジン−３−イルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）−Ｎ−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エチル）プロパンアミド／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体２）

塩化亜鉛１６．７ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１３−トリオキソ−５−チア−２，９，１２−トリアザテトラデカ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ１０３）２６．４ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．８０ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で８時間撹拌した。ＥＤＴＡ３５．７６ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、標題化合物３．８ｍｇ（理論値の１４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝２．９８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７６３（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３０４
Ｎ−（２−｛［３−（｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（ピロリジン−３−イルメチル）アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）プロパノイル］アミノ｝エチル）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体２）

塩化亜鉛１３．２ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−１８−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１３−トリオキソ−５−チア−２，９，１２−トリアザオクタデカ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体１０５）２２．３ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．６４ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で８時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ２８．３６ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ２５０×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって精製した。これによって、標題化合物５ｍｇ（理論値の２３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ３．０５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１９（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

中間体Ｆ３０５
Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−６，１７−ジオキソ−Ｎ−（ピロリジン−３−イルメチル）−１０，１３−ジオキサ−３−チア−７，１６−ジアザドコサン−１−アミド／トリフルオロ酢酸（１：１）（異性体２）

塩化亜鉛１３．４２ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル３−［２−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３，８，１９−トリオキソ−１２，１５−ジオキサ−５−チア−２，９，１８−トリアザテトラコサ−１−イル］ピロリジン−１−カルボキシレート（中間体Ｃ１０７）２４．８０ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）の２，２，２−トリフルオロエタノール（０．６５ｍＬ）中溶液に加え、反応混合物を５０℃で８時間撹拌した。次に、ＥＤＴＡ２８．７８ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５分間撹拌した。酢酸エチルを反応混合物に加え、有機相を水および飽和ＮａＣｌ溶液で繰り返し洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝３．１１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０７（Ｍ＋Ｈ−ＣＦ_３ＣＯ_２Ｈ）^＋。

Ｂ：抗体薬物複合体（ＡＤＣ）の製造
Ｂ−１．抗Ｂ７Ｈ３抗体形成の一般的方法
ＵＳ６，９６５，０１８には、ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８によって分泌されるマウス抗Ｂ７Ｈ３抗体が記載されている。本発明者らは、標準的な方法（ＰｒｅｃｉｓｉｏｎＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）によって決定されたこの抗体のアミノ酸配列およびヒトＩｇＧ１の領域Ｃｈ１、Ｃｈ２およびＣｈ３と融合したＦｖ部分を得た。このために、個々の範囲をコードするＤＮＡ配列を、哺乳動物ＩｇＧ発現ベクターに挿入し、Ｂ−２下に記載の方法に従って発現させた。その結果は、マウスＰＴＡ−４０５８のＦｖ部分およびヒトＩｇＧ１のＣｈ１、Ｃｈ２およびＣｈ３領域のキメラ（ＴＰＰ５７０６と称される）である。

Ｂ−２．哺乳動物細胞で抗Ｂ７Ｈ３抗体を発現する一般的方法
Ｔｏｍｅｔａｌ．，Ｃｈａｐｔｅｒ１２ｉｎＭｅｔｈｏｄｓＥｘｐｒｅｓｓ：ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＳｙｓｔｅｍｓ，ｅｄｉｔｅｄｂｙＭｉｃｈｅａｌＲ．ＤｙｓｏｎａｎｄＹｖｅｓＤｕｒｏｃｈｅｒ，ＳｃｉｏｎＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＬｔｄ, ２００７によって記載の方法に従って、抗体、例えばＴＰＰ−３８０３およびＴＰＰ−５７０６を、哺乳動物細胞の一過性培養で製造した（ＡＫ−実施例１参照）。

Ｂ−３．細胞上清からの抗体の一般的精製方法
抗体、例えばＴＰＰ−３８０３およびＴＰＰ−５７０６を、細胞培養上清から得た。細胞を遠心することで、細胞上清を清澄化した。次に、細胞上清を、ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅ（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）クロマトグラフィーカラムでのアフィニティクロマトグラフィーによって精製した。このために、カラムをＤＰＢＳｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ／Ａｌｄｒｉｃｈ）中で平衡状態とし、細胞上清を加え、カラムを約１０カラム体積のＤＰＢＳｐＨ７．４＋５００ｍＭ塩化ナトリウムで洗浄した。抗体を５０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ３．５＋５００ｍＭ塩化ナトリウムで溶離し、次にＤＰＢＳｐＨ７．４でのＳｕｐｅｒｄｅｘ２００カラム（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）におけるゲル濾過クロマトグラフィーによってさらに精製した。

Ｂ−４．システイン側鎖へのカップリングの一般的方法
次の抗体を、当該カップリング反応に用いた。

抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ（ＴＰＰ−３８０３）
抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ（ＴＰＰ−５７０６）
カップリング反応は通常、アルゴン下で行った。

ＰＢＳ緩衝液に溶かした２から５当量のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）を、１ｍｇ／ｍＬから２０ｍｇ／ｍＬの濃度範囲、好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬから１５ｍｇ／ｍＬの範囲での適切な抗体のＰＢＳ緩衝液中溶液に加え、混合物を室温で１時間撹拌した。これに関しては、使用した個々の抗体の溶液は、実施例で記載の濃度で用いることができるか、指定の出発濃度の約１／２までＰＢＳ緩衝液で希釈して、好ましい濃度範囲とすることもできる。次に、所期の負荷量に応じて、２から１２当量、好ましくは約５から１０当量のカップリング対象のマレインイミド前駆体化合物またはハライド前駆体化合物をＤＭＳＯ中溶液として加えた。この場合、ＤＭＳＯの量は総体積の１０％を超えるものであってはならない。反応液を、マレインイミド前駆体の場合には室温で６０から２４０分間、ハライド前駆体の場合には室温で８から２４時間撹拌し、次にＰＢＳ平衡化ＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液で溶離した。通常、別段の断りがない限り、ＰＢＳ緩衝液中の対象抗体５ｍｇを、還元およびその後のカップリングに用いた。そうして、ＰＤ１０カラムでの精製により、各場合で、個々のＡＤＣのＰＢＳ緩衝液（３．５ｍＬ）中溶液を得た。サンプルを超遠心によって濃縮し、適宜にＰＢＳ緩衝液で再希釈した。必要な場合、低分子量成分をより良好に除去するため、ＰＢＳ緩衝液による再希釈後に、超遠心による濃縮を繰り返した。生物試験のため、必要な場合、最終ＡＤＣサンプルの濃度を、適宜に、再希釈によって０．５から１５ｍｇ／ｍＬの範囲に調節した。実施例で記載のＡＤＣ溶液の個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。

別段の断りがない限り、実施例で示した免疫複合体は、この方法によって製造した。リンカーに応じて、実施例で示されているＡＤＣは、多少、抗体に結合した加水分解された開鎖コハク酸アミドの形態で存在していても良い。

特に、リンカー下位構造：

を介して抗体のチオール基に結合しているＫＳＰ−Ｉ−ＡＤを、開鎖コハク酸アミドを介して結合したＡＤＣを介して、図式２６に従って、カップリング後の再緩衝化およびｐＨ８での約２０から２４時間の撹拌によって、標的指向的に製造することもできる。

＃１は抗体への硫黄架橋を表し、＃２は修飾ＫＳＰ阻害剤への結合点を表す。

リンカーが加水分解された開鎖コハク酸アミドを介して抗体に結合しているそのようなＡＤＣは、下記のような例示的手順により、標的指向的に製造することもできる。

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．３４４ｍｇのＰＢＳ緩衝液（１００μＬ）中溶液を、ＰＢＳ緩衝液５ｍＬ中の対象抗体６０ｍｇ（濃度約１２ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し、ＤＭＳＯ６００μＬに溶かした０．００３ｍｍｏｌのマレインイミド前駆体化合物を加えた。室温でさらに１．５時間から２時間撹拌した後、反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１０７５μＬで希釈した。

この溶液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡化しておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で希釈して総容量１４ｍＬとした。この溶液を室温でアルゴン下に終夜撹拌した。必要な場合、その溶液を再緩衝化してｐＨ７．２とした。そのＡＤＣ溶液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈し、適宜に再度濃縮して濃度約１０ｍｇ／ｍＬとした。

実施例での他の加水分解感受性であり得る抗体へのチアニルコハク酸イミド架橋は、次のリンカー下位構造を含み、＃１は抗体へのチオエーテル連結を表し、＃２は修飾ＫＳＰ阻害剤への結合点を表す。

これらのリンカー下位構造は、抗体への連結ユニットを表し、（リンカー組成物に加えて）腫瘍細胞で生成される代謝物の構造およびプロファイルに対して大きい効果を有する。

示された構造式において、ＡＫ_１Ａは次の意味：
ＡＫ_１Ａ＝抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ（部分還元）−Ｓ§^１
ＡＫ_１Ｂ＝抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ（部分還元）−Ｓ§。

式中、
§^１は、コハク酸イミド基へのまたはいずれかの異性体の加水分解された開鎖コハク酸アミドまたはそれから生じるアルキレン基への連結を表し、
Ｓは、部分還元抗体のシステイン残基の硫黄原子を表す。

Ｂ−５．リジン側鎖へのカップリングの一般的方法
次の抗体を、当該カップリング反応に用いた。

抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ（ＴＰＰ−３８０３）
抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ（ＴＰＰ−５７０６）。

カップリング反応は通常、アルゴン下で行った。

２から８当量のカップリング対象の前駆体化合物を、ＤＭＳＯ中溶液として、所期の負荷量に応じて１ｍｇ／ｍＬから２０ｍｇ／ｍＬ濃度範囲の、好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬの対象抗体のＰＢＳ緩衝液中溶液に加えた。室温で３０分から６時間撹拌後、ＤＭＳＯ中の同量の前駆体化合物を再度加えた。この場合、ＤＭＳＯの量は総体積の１０％を超えてはならない。室温でさらに３０分から６時間撹拌後、反応をＰＢＳで平衡化したＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に負荷し、ＰＢＳ緩衝液で溶離した。通常、別段の断りがない限り、ＰＢＳ緩衝液中の対象抗体５ｍｇを、還元およびその後のカップリングに用いた。従って、ＰＤ１０カラムでの精製によって各場合で、個々のＡＤＣのＰＢＳ緩衝液（３．５ｍＬ）中溶液を得た。サンプルを超遠心によって濃縮し、適宜にＰＢＳ緩衝液で再希釈した。必要であれば、低分子量成分の除去をより良好に行うため、限外濾過による濃縮を、ＰＢＳ緩衝液による再希釈後に繰り返した。生物試験のため、必要な場合、最終ＡＤＣサンプルの濃度を、適宜に、再希釈によって０．５から１５ｍｇ／ｍＬの範囲に調節した。

実施例で記載のＡＤＣ溶液の個々のタンパク質濃度を求めた。さらに、Ｂ−７下に記載の方法を用いて、抗体負荷量（薬物／ｍＡｂ比）を求めた。

示した構造式において、ＡＫ_２Ａは次の意味：
ＡＫ_２Ａ＝抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ−ＮＨ§^２
ＡＫ_２Ｂ＝抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ−ＮＨ§^２
を有し、
式中、
§^２は、カルボニル基への連結を表し、
ＮＨは、抗体のリジン残留物の側鎖アミノ基を表す。

Ｂ−６ａ．閉鎖コハク酸イミド−システイン付加物の一般的製造方法
例示的実施形態において、１０μｍｏｌの上記マレインイミド前駆体化合物をＤＭＦ３から５ｍＬに取り、Ｌ−システイン２．１ｍｇ（２０μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間から２４時間撹拌し、次に減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。

Ｂ−６ａａ．異性体開鎖コハク酸アミド−システイン付加物の一般的製造方法：
例示的実施形態において、上記マレインイミド前駆体化合物６８μｍｏｌを、ＤＭＦ１５ｍＬに取り、Ｎ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン３６ｍｇ（１３６μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で約２０時間撹拌し、次に減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去し、次に、残留物をＴＨＦ／水１：１１５ｍＬに溶かした。２Ｍ水酸化リチウム水溶液１３１μＬを加え、反応液を室温で１時間撹拌した。次に、反応液を１Ｍ塩酸で中和し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、理論値の約５０％の位置異性体保護中間体を無色泡状物として得た。

最後の段階で、０．０２３ｍｍｏｌのこれらの位置異性体加水分解生成物を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶かした。塩化亜鉛１２．５ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で４時間撹拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２７ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、加水分解開鎖スルファニルコハク酸アミドを位置異性体混合物として得た。

本発明による複合体のさらなる精製および特性決定
反応後、場合により、反応混合物を、例えば限外濾過によって濃縮し、脱塩し、例えばＳｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５カラムを用いるクロマトグラフィーによって精製した。例えば、ホスフェート緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で、溶離を行った。次に、溶液を無菌濾過し、冷凍した。あるいは、複合体を凍結乾燥することができる。

Ｂ−７．抗体、担毒体負荷量および開鎖システイン付加物の割合の測定
脱グリコシル化および／または変性後の分子量測定に加えてタンパク質同定のため、トリプシン消化を行い、それは、変性、還元および誘導体化後に、トリプシンペプチドを介してタンパク質のアイデンティティーを確認するものである。

実施例に記載の複合体の得られたＰＢＳ緩衝液溶液の担毒体負荷量を、下記のように求めた。

リジン連結ＡＤＣの担毒体負荷量の測定を、個々の複合体種の分子量の質量分析測定によって行った。ここで、抗体複合体を最初に、ＰＮＧａｓｅＦで脱グリコシル化し、サンプルを酸性とし、ＨＰＬＣ分離／脱塩後に、ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆ_Ｑ（ＢｒｕｋｅｒＤａｌｔｏｎｉｋ）を用いる質量分析によって分析した。ＴＩＣ（全イオンクロマトグラム）におけるシグナルでの全てのスペクトラムを加え、異なる複合体種の分子量をＭａｘＥｎｔデコンボリューションに基づいて計算した。次に、異なる種のシグナル積分後に、ＤＡＲ（＝薬物／抗体比）を計算した。

還元および変性ＡＤＣの逆相クロマトグラフィーによって、システイン連結複合体の担毒体負荷量を求めた。グアニジニウム塩酸塩（ＧｕＨＣｌ）（２８．６ｍｇ）およびＤＬ−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）の溶液（５００ｍＭ、３μＬ）をＡＤＣ溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０μＬ）に加えた。混合物を５５℃で１時間インキュベートし、ＨＰＬＣによって分析した。

ＨＰＬＣ分析を、２２０ｎｍで検出を行うＡｇｉｌｅｎｔ１２６０ＨＰＬＣシステムで行った。ＰｏｌｙｍｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＰＬＲＰ−Ｓポリマー逆相カラム（カタログ番号ＰＬ１９１２−３８０２）（２．１×１５０ｍｍ、粒径８μｍ、１０００Å）を、次の勾配：０分、２５％Ｂ；３分、２５％Ｂ；２８分、５０％Ｂで流量１ｍＬ／分で用いた。移動相Ａは、０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／水からなり、移動相Ｂは０．０５％トリフルオロ酢酸／アセトニトリルからなるものであった。

非複合体化抗体の軽鎖（Ｌ０）および重鎖（Ｈ０）との保持時間比較によって、検出されたピークの割り当てを行った。専ら複合体化サンプルで検出されたピークを、１個の担毒体（Ｌ１）を有する軽鎖および１個、２個および３個の担毒体（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）を有する重鎖に割り当てた。

担毒体を有する抗体の平均負荷量を、全ピークの単一加重積分結果の合計で割った全ピークの担毒体数平均加重積分結果の合計の倍として積分することで求められるピーク面積から計算した。個々の場合で、いくつかのピークの共溶出のために、正確に担毒体負荷を決定することはできない可能性がある。

軽鎖および重鎖をＨＰＬＣによって十分に分離できなかった場合、システイン連結複合体の担毒体負荷量の測定は、軽鎖および重鎖での個々の複合体種の分子量の質量分析測定によって行った。

グアニジニウム塩酸塩（ＧｕＨＣｌ）（２８．６ｍｇ）およびＤＬ−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）の溶液（５００ｍＭ、３μＬ）をＡＤＣ溶液（１ｍｇ／ｍＬ、５０μＬ）に加えた。混合物を５５℃で１時間インキュベートし、ＥＳＩ−ＭｉｃｒｏＴｏｆ_Ｑ（ＢｒｕｋｅｒＤａｌｔｏｎｉｋ）を用いるオンライン脱塩後に質量分析によって分析した。

ＤＡＲ測定のため、全てのスペクトラムを、ＴＩＣ（全イオンクロマトグラム）におけるシグナルに加え、軽鎖および重鎖での異なる複合体種の分子量をＭａｘＥｎｔデコンボリューションに基づいて計算した。担毒体を有する抗体の平均負荷量を、全ピークの単一加重積分結果の合計で割った全ピークの担毒体数平均加重積分結果の合計の倍として積分することで求められる分子量面積から計算した。

開鎖システイン付加物の割合を求めるため、全ての単一複合体化軽鎖および重鎖変異体の閉鎖：開鎖システイン付加物（分子量Δ１８ダルトン）の分子量面積比を求めた。全ての変異体の平均によって、開鎖システイン付加物の割合を得た。

Ｂ−８．ＡＤＣ類の抗原結合のチェック
バインダーの標的分子への結合能力を、カップリングが起こった後に調べた。当業者であれば、この目的に用いられる多種多様の方法については熟知しており、例えば、複合体のアフィニティは、ＥＬＩＳＡ技術または表面プラズモン共鳴分析（ＢＩＡｃｏｒｅ（商標名）測定）を用いて調べることができる。複合体濃度は、例えばタンパク質による抗体複合体についての一般的な方法を用いて当業者が測定することができる（Ｄｏｒｏｎｉｎａｅｔａｌ．；ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００３；２１：７７８−７８４およびＰｏｌｓｏｎｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ２００７；１１０２：６１６−６２３も参照）。

代謝物実施形態
実施例Ｍ１
Ｓ−［１−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ１０４１．８ｍｇ（２μｍｏｌ）をＤＭＦ１ｍＬに取り、Ｌ−システイン２．７ｍｇ（２２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２０時間撹拌し、減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。標題化合物０．６ｍｇ（理論値の２６％）が無色泡状物として残った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８０分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ２
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
および
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、Ｌ−システインを、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、ＤＭＦ中の１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオンでＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システインに変換した。

Ｎ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン４０６ｍｇ（１．５３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１０ｍＬに溶かし、無水マレイン酸１５７．５ｍｇ（１．６０６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１時間撹拌した。中間体Ｃ６６７．５ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ）をこの溶液１３０μＬに加え、反応液を室温で５分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、保護中間体１０ｍｇ（８９％）を得たが、ＨＰＬＣによってもＬＣ−ＭＳによっても位置異性体を分離することはできなかった。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３８分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後の段階で、この中間体１０ｍｇを２，２，２−トリフルオロエタノール２ｍＬに溶かした。塩化亜鉛１２ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で３０分間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２６ｍｇ（０．０８８ｍｍｏｌ）を加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物８．３ｍｇ（理論値の９９％）を８７：１３の比率での位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．３分および２．４３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

^１Ｈ−ＮＭＲ主位置異性体：（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：Ｄ＝８．７（ｍ、１Ｈ）、８．５（ｍ、２Ｈ）、８．１（ｍ、１Ｈ）、７．６（ｍ、１Ｈ）、７．５（ｓ、１Ｈ）７．４−７．１５（ｍ、６Ｈ）、６．９−７．０（ｍ、１Ｈ）、６．８５（ｓ、１Ｈ）、５．６１（ｓ、１Ｈ）、４．９および５．２（２ｄ、２Ｈ）、４．２６および４．０６（２ｄ、２Ｈ）、３．５−３．８（ｍ、５Ｈ）、３．０−３．４（ｍ、５Ｈ）、２．７５−３．０（ｍ、３Ｈ）、２．５８および２．５７（ｄｄ、１Ｈ）、０．７７および１，５（２ｍ、２Ｈ）、０．８１（ｓ、９Ｈ）。

別法として、位置異性体標題化合物を次のように製造した。

このために、最初に、Ｌ−システインを、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中の１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオンでＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システインに変換した。

中間体Ｆ１０４５５ｍｇ（０．０６８ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン３６ｍｇ（０．１３６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１５ｍＬに溶かし、混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去し、残留物をＴＨＦ／水１：１１５ｍＬに溶かした。２Ｍ水酸化リチウム水溶液１３１μＬを加え、反応液を室温で１時間撹拌した。次に、反応液を１Ｍ塩酸で中和し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、位置異性体保護中間体３７ｍｇ（理論値の５０％）を無色泡状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝３．３３分および３．３６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９７６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体２５ｍｇ（０．０２３ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶かした。塩化亜鉛１２．５ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で４時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２７ｍｇ（０．０９２ｍｍｏｌ）を加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物１８．５ｍｇ（理論値の８５％）を２１：７９の比率での位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．３７分および３．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２（Ｍ＋Ｈ）^＋。

標題化合物の個々の位置異性体の標的製造を、次のように行った。

実施例Ｍ３
４−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−２−カルボキシエチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
および
４−［（２−｛［（２Ｒ）−２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）−２−カルボキシエチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ１９３１１ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン８ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ３ｍＬに溶かし、混合物を室温で２０時間撹拌した。その混合物を濃縮し、残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。

適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去し、残留物をＴＨＦ／水１：１２ｍＬに溶かした。２Ｍ水酸化リチウム水溶液１９μＬを加え、反応液を室温で１時間撹拌した。追加の２Ｍ水酸化リチウム水溶液１９μＬを加え、反応液を室温で終夜撹拌した。混合物を１Ｍ塩酸で中和し、溶媒を減圧下に留去し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。これによって、位置異性体保護中間体４．１ｍｇ（理論値の３８％）を無色泡状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０３分（広い）；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体４．１ｍｇ（０．００４ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール３ｍＬに溶かした。塩化亜鉛３ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で１時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸６ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）および０．１％強度トリフルオロ酢酸水溶液２ｍＬを加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物５ｍｇ（定量的）を２０：８０の比率での位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７８分（広い）；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．３６分および２．３９分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ４
Ｓ−（１−｛２−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エトキシ］エチル｝−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ２４８３ｍｇ（４μｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬに取り、Ｌ−システイン０．９ｍｇ（８μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を濃縮して、アセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥後に、標題化合物１．１ｍｇ（理論値の３２％）を白色固体として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７８分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ５
（３Ｒ，７Ｓ）−７−アミノ−１７−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−３−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−４−グリコロイル−２，２−ジメチル−８，１６−ジオキソ−１２−オキサ−４，９，１５−トリアザノナデカン−１９−オン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
および
（３Ｒ，７Ｓ）−７−アミノ−１８−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−３−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−４−グリコロイル−２，２−ジメチル−８，１６−ジオキソ−１２−オキサ−４，９，１５−トリアザノナデカン−１９−オン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ２４８の保護中間体８ｍｇ（０．０１０ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン５．１ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３ｍＬに溶かし、混合物を室温で１８時間撹拌し、超音波浴で２時間処理した。混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去し、残留物をＴＨＦ／水１：１２ｍＬに溶かした。２Ｍ水酸化リチウム水溶液１５μＬを加え、反応液を室温で１５分間撹拌した。反応液を１Ｍ塩酸でｐＨ約３に調節し、塩化ナトリウム溶液２０ｍＬで希釈し、酢酸エチル２０ｍＬで２回抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、残留物をアセトニトリル／水から凍結乾燥した。これによって、位置異性体保護中間体８．４ｍｇ（２段階で理論値の７８％）を無色泡状物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．４４分および３．４３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１０７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体８ｍｇ（０．００７ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール５ｍＬに溶かした。塩化亜鉛９．８ｍｇ（０．０７２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で１．５時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸を加え、溶媒を減圧下に留去した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物４ｍｇ（理論値の５９％）を３１：６７の比率での位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．７９分および０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１９（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ６
２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−（｛（１４Ｒ）−１３−（３−アミノプロピル）−１４−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１５，１５−ジメチル−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカ−１−イル｝アミノ）−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）および
３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−（｛（１４Ｒ）−１３−（３−アミノプロピル）−１４−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１５，１５−ジメチル−２，７，１２−トリオキソ−１０−チア−３，６，１３−トリアザヘキサデカ−１−イル｝アミノ）−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）

中間体Ｆ２１３１８ｍｇ（０．０２１ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン１１．２ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬに溶かし、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮した。残留物（２１．２ｍｇ）をＴＨＦ／水１：１３ｍＬに溶解させた。２Ｍ水酸化リチウム水溶液０．０４ｍＬを加え、反応液を室温で３時間撹拌した。２Ｍ水酸化リチウム水溶液０．０２ｍＬを加え、反応液を室温で１時間撹拌した。酢酸７．２ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を用いて反応液をｐＨ約７に調節した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水；０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、位置異性体保護中間体１３ｍｇ（２段階で５７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０２０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体１３ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール２ｍＬに溶かした。塩化亜鉛６．２ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で７時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．３ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物１０．３ｍｇ（８１．４％）を位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．０３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ７
Ｓ−（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）

中間体Ｆ１１９６ｍｇ（８μｍｏｌ）をＤＭＦ３ｍＬに取り、Ｌ−システイン１．８ｍｇ（１５μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で６時間撹拌し、室温で３日間経過させた。反応を減圧下に濃縮し、生成物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１７（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ８
（３Ｒ）−６−｛（１１Ｓ，１５Ｒ）−１１−アミノ−１５−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−１４−グリコロイル−１６，１６−ジメチル−２，５，１０−トリオキソ−３，６，９，１４−テトラアザヘプタデカ−１−イル｝−５−オキソチオモルホリン−３−カルボン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

実施例１３５からの化合物４ｍｇ（０．００４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／水４ｍＬに溶かし、２Ｍ水酸化リチウム水溶液４８μＬを加えた。反応液を室温で１時間撹拌し、濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、濃縮し、アセトニトリル／水から凍結乾燥することで、標題化合物２．４ｍｇ（理論値の６０％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ９
Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２−ヒドロキシアセトアミド

最初に（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロパン−１−アミン（中間体Ｃ５２）１５０．０ｍｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン２．０ｍＬに入れ、ＨＯＡｃ２９．２ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）および水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム１２５．６ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５分間撹拌した。３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）プロパナール９８．９ｍｇ（０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を飽和炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をシリカゲル（移動相：ジクロロメタン／メタノール１００：１）で精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン１８８．６ｍｇ（７４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．００分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５４１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に２−［３−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ）プロピル］−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン１７１．２ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン５．０ｍＬに入れ、トリエチルアミン７３．６ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で、アセトキシアセチルクロライド９４．９ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機相を飽和重炭酸ナトリウム溶液で２回および飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄した。硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を減圧下に留去し、残留物を、ＢｉｏｔａｇｅＩｓｏｌｅｒａ（シリカゲル、カラム１０ｇＳＮＡＰ、流量１２ｍＬ／分、酢酸エチル／シクロヘキサン１：３）を用いて精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、化合物２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）プロピル］アミノ）−２−オキソ酢酸エチル１５９．０ｍｇ（７７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝１．３５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６４２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

２−（｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝［３−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）プロピル］アミノ）−２−オキソ酢酸エチル１４７．２ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）を最初に、エタノール４．０ｍＬに入れ、メタンアミン（４０％水溶液）３５６．２ｍｇ（４．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をトルエンで３回共蒸留した。残留物をシリカゲル（移動相：ジクロロメタン／メタノール＝１０：１）で精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物６７．４ｍｇ（６３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４７０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ１０
（２Ｒ，２８Ｒ）−２８−アミノ−２−［（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）メチル］−２５−（カルボキシメチル）−４，２０，２４−トリオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−２６−チア−３，１９，２３−トリアザノナコサン−１，２９−ジオン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）および
（１Ｒ，２８Ｒ，３４Ｒ）−１−アミノ−３３−（３−アミノプロピル）−３４−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−３５，３５−ジメチル−６，１０，２６，３２−テトラオキソ−１４，１７，２０，２３−テトラオキサ−３，３０−ジチア−７，１１，２７，３３−テトラアザヘキサトリアコンタン−１，４，２８−トリカルボン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）

Ｒ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｆ２０９）２０ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン９．７８ｍｇ（０．０３６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ２ｍＬに溶かし、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮した。残留物（４７．７ｍｇ）をＴＨＦ／水１：１３ｍＬに溶解させた。２Ｍ水酸化リチウム水溶液０．０８ｍＬを加え、反応液を室温で１時間撹拌した。酢酸９．２６ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を用いて、反応液をｐＨ約７に調節した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水；０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、位置異性体保護中間体１５．３ｍｇ（２段階で２９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１２．２６分および１２．３０分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２５４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体１５．３ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール２ｍＬに溶かした。塩化亜鉛６．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で２時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１３．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物１１．９ｍｇ（７９．５％）を位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１１０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ１１
Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：２）

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ７１）１５．０ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ）をトリフルオロエタノール１．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛７．４ｍｇ（０．０５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１５．８ｍｇ（０．０５４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物１１．１ｍｇ（７７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５７３（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ１２
４−｛［（１Ｒ）−２−（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）−１−カルボキシエチル］アミノ｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−オキソブタノイル）−Ｌ−システイン（中間体Ｃｘ）１２．２ｍｇ（０．０１４ｍｍｏｌ）をトリフルオロエタノール２．０ｍＬに溶かし、二塩化亜鉛１１．４ｍｇ（０．０８４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸２４．５ｍｇ（０．０８４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間撹拌し、水（０．１％ＴＦＡ）を加えた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水、０．１％ＴＦＡ）によって直接、精製を行った。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。これによって、標題化合物４．６ｍｇ（４２％）を得た。

実施例Ｍ１３
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体１、エピマー１（２Ｒ）または（２Ｓ）。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最初に、メチルＬ−システイネート塩酸塩（１：１）を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下にＤＭＦ中の１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオンでメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネートに変換した。

市販の３−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸４０８ｍｇ（１．９３ｍｍｏｌ）およびメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート１８０ｍｇ（０．６４４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ８ｍＬに溶かし、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１４７ｍｇ（０．９７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８時間撹拌後、追加の３−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸１３６ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１４７ｍｇ（０．９７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに１２時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に留去して、４−メトキシ−３−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸１５１ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝４０８（Ｍ−Ｈ）⁻。

この中間体のうち１４５ｍｇを、キラルカラムによる超臨界流体クロマトグラフィーによって個々のジアステレオマー（ＳＦＣ；カラム：ＤＡＩＣＥＬ、ＡＤ−Ｈ５μ ２５０×２０ｍｍ；流量：８０ｍＬ／分；方法：ＡＤ−２５％ＥＴＯＨ−８０ｍＬ；圧力：１００バール；波長：２１０ｎＭ）に分離し、エピマー１６３ｍｇ（４３％）およびエピマー２５８ｍｇ（４０％）を得た。

エピマー１を次のように特性決定した。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．９４分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝４０８（Ｍ−Ｈ）⁻。

^１Ｈ−ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：Ｄ＝７．５７（ｄ、１Ｈ）、４．２４（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、２Ｈ）、３．６７（ｔ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．０５（ｄｄ、１Ｈ）、２．７０−２．８８（ｍ、２Ｈ）、２．５９（ｄｄ、１Ｈ）、０．９３（ｔ、２Ｈ）、０．０２（ｓ、９Ｈ）。

エピマー２を次のように特性決定した。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．９５分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝４０８（Ｍ−Ｈ）⁻。

^１Ｈ−ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：Ｄ＝７．５８（ｄ、１Ｈ）、４．１６−４．２３（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、２Ｈ）、３．６７（ｄｄ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、３Ｈ）、３．６４（ｓ、３Ｈ）、３．０４（ｄｄ、１Ｈ）、２．８８（ｄｄ、１Ｈ）、２．７７（ｄｄ、１Ｈ）、２．６１（ｄｄ、１Ｈ）、０．９２（ｔ、２Ｈ）、０．０２（ｓ、９Ｈ）。

エピマー１３２．５ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ３０ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１３．４ｍｇ（０．１３２ｍｍｏｌ）の存在下に中間体Ｃ６６５０ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体メチル４−｛［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９，１４−トリオキソ−５−オキサ−７，１０，１３−トリアザ−２−シラペンタデカン−１５−イル］アミノ｝−２−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタノエート４３ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

この中間体４０ｍｇ（０．０３５ｍｍｏｌ）を室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液０．９ｍＬ／メタノール１１ｍＬとともに２０分間撹拌して、両方のメチルエステル基を開裂させた。ＨＰＬＣによる精製によって、ジカルボン酸誘導体１２ｍｇ（理論値の３１％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．７４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後に、この中間体１０ｍｇ（０．００９ｍｍｏｌ）を、上記で記載の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物２．６ｍｇ（理論値の３０％）を得た。

実施例Ｍ１４
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体１、エピマー２（２Ｒまたは２Ｓ）。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．４４分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ１３に記載の中間体エピマー２を、実施例Ｍ１３における記載と同様にして反応させた。

エピマー２３２．５ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ３０ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１３．４ｍｇ（０．１３２ｍｍｏｌ）の存在下に、中間体Ｃ６６５０ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体メチル４−｛［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９，１４−トリオキソ−５−オキサ−７，１０，１３−トリアザ−２−シラペンタデカン−１５−イル］アミノ｝−２−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタノエート４３ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

次に、この中間体４０ｍｇ（０．０３５ｍｍｏｌ）を、室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液０．９ｍＬ／メタノール１１ｍＬとともに２０分間撹拌して、両方のメチルエステル基を開裂させた。ＨＰＬＣによる精製によって、ジカルボン酸誘導体１１ｍｇ（理論値の２８％）を得た。

最後に、この中間体１０ｍｇ（０．００９ｍｍｏｌ）を、上記の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物４．４ｍｇ（理論値の５２％）を得た。

実施例Ｍ１５
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体２、エピマー１（３Ｒまたは３Ｓ）。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．４５分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

市販の２−ブロモ−４−エトキシ−４−オキソブタン酸７４２．８ｍｇ（３．３ｍｍｏｌ）およびメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート８０２ｍｇ（２．８７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ３２ｍＬに溶かし、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン６５５．４ｍｇ（４．３１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２０時間撹拌後、反応液を減圧下に濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去して、４−エトキシ−２−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸５２１ｍｇ（理論値の４３％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝３．１３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４２４（Ｍ＋Ｈ）^＋。

この中間体のうち５１０ｍｇを、キラルカラムによる超臨界流体クロマトグラフィーによって個々のジアステレオマーに分離して（ＳＦＣ；カラム：ＤＡＩＣＥＬ、ＡＤ−Ｈ５μ ２５０×２０ｍｍ；流量：８０ｍＬ／分；方法：ＡＤ−１０％ＥｔＯＨ−８０ｍＬ；圧力：１００バール；波長：２１０ｎｍ）、エピマー１１００ｍｇ（２０％）およびエピマー２１４１ｍｇ（２８％）を得た。

エピマー１を次のように特性決定した。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．９９分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝４２２（Ｍ−Ｈ）⁻。

^１Ｈ−ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：Ｄ＝７．６０（ｄ、１Ｈ）、４．１８−４．２６（ｍ、１Ｈ）、４．０１−４．０８（ｍ、４Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）、３．５９（ｄｄ、１Ｈ）、３．０４（ｄｄ、１Ｈ）、２．９２（ｄｄ、１Ｈ）、２．８０（ｄｄ、１Ｈ）、２．６３（ｄｄ、１Ｈ）、１．１７（ｔ、３Ｈ）、０．９２（ｔ、２Ｈ）、０．０２（ｓ、９Ｈ）。

エピマー２を次のように特性決定した。

^１Ｈ−ＮＭＲ：（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）：Ｄ＝７．５６（ｄ、１Ｈ）、４．２１−４．２９（ｍ、１Ｈ）、４．０１−４．１（ｍ、４Ｈ）、３．６４（ｓ、３Ｈ）、３．５８（ｄｄ、１Ｈ）、３．０８（ｄｄ、１Ｈ）、２．８５（ｄｄ、１Ｈ）、２．７８（ｄｄ、１Ｈ）、２．６０（ｄｄ、１Ｈ）、１．１７（ｔ、３Ｈ）、０．９３（ｔ、２Ｈ）、０．０２（ｓ、９Ｈ）。

ＨＡＴＵ３０ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１３．４ｍｇ（０．１３２ｍｍｏｌ）の存在下に、エピマー１３３．６ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）を中間体Ｃ６６５０ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体５１ｍｇ（理論値の６３％）を得た。

エチル４−｛［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９，１４−トリオキソ−５−オキサ−７，１０，１３−トリアザ−２−シラペンタデカン−１５−イル］アミノ｝−３−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタノエート
この中間体４９ｍｇ（０．０４２ｍｍｏｌ）を、室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液０．５ｍＬ／ＴＨＦ／水１：１１２ｍＬとともに３０分間撹拌して、両方のメチルエステル基を開裂させた。酸性とし、ＨＰＬＣによって精製することで、ジカルボン酸誘導体１１ｍｇ（理論値の２４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．６８分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後に、この中間体１１ｍｇ（０．０１ｍｍｏｌ）を、上記の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物３．７ｍｇ（理論値の３９％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．４５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ１６
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体２、エピマー２（３Ｒまたは３Ｓ）。

実施例Ｍ１５に記載の中間体エピマー２を、実施例Ｍ１５における記載と同様にして反応させた。

ＨＡＴＵ３０ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１３．４ｍｇ（０．１３２ｍｍｏｌ）の存在下に、エピマー２３３．６ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ）を、中間体Ｃ６６５０ｍｇ（０．０６６ｍｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体５１ｍｇ（理論値の６３％）を得た。

エチル４−｛［（８Ｓ）−８−｛２−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］エチル｝−２，２−ジメチル−６，９，１４−トリオキソ−５−オキサ−７，１０，１３−トリアザ−２−シラペンタデカン−１５−イル］アミノ｝−３−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタノエート
この中間体４９ｍｇ（０．０４２ｍｍｏｌ）を、室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液０．５ｍＬ／ＴＨＦ／水１：１１２ｍＬとともに３０分間撹拌して、両方のメチルエステル基を開裂させた。酸性とし、ＨＰＬＣによって精製することで、ジカルボン酸誘導体１３．４ｍｇ（理論値の２８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．６６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１１２０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後に、この中間体１３．４ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）を、上記の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物７．５ｍｇ（理論値の６６％）を得た。

実施例Ｍ１７
（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタン酸塩酸塩（１：１）

中間体Ｃ５３１５０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１５ｍＬおよびＤＡＢＣＯ２．２９ｇ（２０．３９ｍｍｏｌ）に溶かした。反応液を超音波浴で３０分間処理した。酢酸１．１７ｍＬを加えることで、反応液をｐＨ３から４に調節し、混合物を減圧下に濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣによって精製し、適切な分画を室温で減圧下に濃縮した。残留物をアセトニトリル／水（１：１）に取り、４Ｎ塩酸５ｍＬを加え、混合物を凍結乾燥した。これによって、標題化合物８１ｍｇ（理論値の６８％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．６９分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ１８
Ｎ−［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］−Ｌ−グルタミン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、トリフルオロ酢酸／ベンジルＮ−（２−アミノエチル）−Ｎ^２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−グルタミネート（１：１）を、ペプチド化学の古典的方法を用いて製造した。次に、ＨＡＴＵの存在下に、この中間体を中間体Ｃ５８とカップリングさせた。次に、最初に、ベンジルオキシカルボニル保護基およびベンジルエステルを水素化開裂によって除去し、次に２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル保護基を、塩化亜鉛を用いて除去した。

ＬＣ−ＭＳ（方法６）：Ｒ_ｔ＝１．９１分；ＭＳ（ＥＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ１９
Ｎ^６−（Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル）−Ｌ−リジン／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ペプチド化学において公知の古典的保護基操作を用いて、トリフルオロ酢酸／２−（トリメチルシリル）エチル−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−リシネート（１：１）を製造した。ＨＡＴＵの存在下に、この中間体を中間体Ｃ６１とカップリングさせた。次に、最初に、２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル保護基および２−（トリメチルシリル）エチルエステルを、塩化亜鉛を用いて開裂させた。最後に、ベンジルオキシカルボニル保護基の水素化分解的開裂および分取ＨＰＬＣによる精製によって、標題化合物を得た。

ＨＰＬＣ（方法１１）：Ｒ_ｔ＝１．６５分。

実施例Ｍ２０
（１Ｒ，４Ｒ，２７Ｒ，３３Ｒ）−１−アミノ−３２−（３−アミノプロピル）−３３−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−３４，３４−ジメチル−６，９，２５，３１−テトラオキソ−１３，１６，１９，２２−テトラオキサ−３，２９−ジチア−７，１０，２６，３２−テトラアザペンタトリアコンタン−１，４，２７−トリカルボン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）

最初に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、メチルＬ−システイネート塩酸塩（１：１）を、ＤＭＦ中の１−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝オキシ）ピロリジン−２，５−ジオンでメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネートに変換した。

市販の３−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸４０８ｍｇ（１．９３ｍｍｏｌ）およびメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート１８０ｍｇ（０．６４４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ８ｍＬに溶かし、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１４７ｍｇ（０．９７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８時間撹拌した後、追加の３−ブロモ−４−メトキシ−４−オキソブタン酸１３６ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン１４７ｍｇ（０．９７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに１２時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去して、４−メトキシ−３−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸１５１ｍｇ（理論値の５７％）を得た。

４−メトキシ−３−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸３．６６ｍｇ（８．９３μｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ３．６６ｍｇ（８．９３μｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１．６μＬ（１５μｍｏｌ）の存在下に、Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（グリシルアミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ８０）１３．０ｍｇ（７．４４μｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（｛Ｎ−［（８Ｒ，１１Ｒ）−８，１１−ビス（メトキシカルボニル）−２，２−ジメチル−６，１３−ジオキソ−５−オキサ−１０−チア−７−アザ−２−シラトリデカン−１３−イル］グリシル｝アミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン３．９ｍｇ（理論値の３７％）を得た。

この中間体３．９０ｍｇ（２．７６μｍｏｌ）を、室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液３５μＬ／ＴＨＦ／水３：１１．０ｍＬとともに１５分間撹拌して、両方のメチルエステル基を開裂させた。ＨＰＬＣによる精製によって、ジカルボン酸誘導体３．６０ｍｇ（理論値の９４％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．８３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１３８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後に、この中間体３．６０ｍｇ（２．６０μｍｏｌ）を、上記の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物１．９２ｍｇ（理論値の５５％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．７２分；ＭＳ（ＥＳＩｎｅｇ）：ｍ／ｚ＝１０９４［Ｍ−Ｈ］⁻。

実施例Ｍ２１
（２Ｒ，２４Ｓ，２７Ｒ）−２７−アミノ−２−［（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）メチル］−２４−（カルボキシメチル）−４，２０，２３−トリオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−２５−チア−３，１９，２２−トリアザオクタコサン−１，２８−ジオン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）

市販の２−ブロモ−４−エトキシ−４−オキソブタン酸７４２．８ｍｇ（３．３ｍｍｏｌ）およびメチルＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイネート８０２ｍｇ（２．８７ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ３２ｍＬに溶かし、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン６５５．４ｍｇ（４．３１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２０時間撹拌後、反応液を減圧下に濃縮し、残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去して、４−エトキシ−２−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸５２１ｍｇ（理論値の４３％）を得た。

４−エトキシ−２−｛［（２Ｒ）−３−メトキシ−３−オキソ−２−（｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝アミノ）プロピル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸４．３６ｍｇ（１０．３μｍｏｌ）を、ＨＡＴＵ３．９２ｍｇ（１０．３μｍｏｌ）および４−メチルモルホリン１．９μＬ（１７μｍｏｌ）の存在下に、Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（グリシルアミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｃ８０）１５．０ｍｇ（８．５９μｍｏｌ）とカップリングさせて、ＨＰＬＣ精製後に、完全に保護された中間体Ｓ−（１１−｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−７，１１−ジアザ−２−シラトリデカン−１３−イル）−Ｎ−［１５−（｛Ｎ−［（８Ｒ，１１Ｓ）−１１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−８−（メトキシカルボニル）−２，２−ジメチル−６，１２−ジオキソ−５−オキサ−１０−チア−７−アザ−２−シラドデカン−１２−イル］グリシル｝アミノ）−４，７，１０，１３−テトラオキサペンタデカン−１−オイル］−Ｌ−システイン３．６ｍｇ（理論値の２６％）を得た。

この中間体６．２０ｍｇ（２．８２μｍｏｌ）を、室温で２Ｍ水酸化リチウム溶液３５μＬ／ＴＨＦ／水１：１１．０ｍＬとともに１５分間撹拌して、両方のエステル基を開裂させた。酸性とし、ＨＰＬＣによって精製して、ジカルボン酸誘導体３．６０ｍｇ（理論値の９２％）を得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝４．７１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１３８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

最後に、この中間体３．６０ｍｇ（１．６９μｍｏｌ）を、上記の方法に従って塩化亜鉛／トリフルオロエタノールで完全に脱保護した。残留物を、分取ＨＰＬＣによって精製した。適切な分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥によって、標題化合物０．８８ｍｇ（理論値の３９％）を得た。

実施例Ｍ２２
（２Ｒ，２７Ｒ）−２７−アミノ−２−［（｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝スルファニル）メチル］−２４−（カルボキシメチル）−４，２０，２３−トリオキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−２５−チア−３，１９，２２−トリアザオクタコサン−１，２８−ジオン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）および（１Ｒ，２７Ｒ，３３Ｒ）−１−アミノ−３２−（３−アミノプロピル）−３３−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−３４，３４−ジメチル−６，９，２５，３１−テトラオキソ−１３，１６，１９，２２−テトラオキサ−３，２９−ジチア−７，１０，２６，３２−テトラアザペンタトリアコンタン−１，４，２７−トリカルボン酸／トリフルオロ酢酸（１：２）

Ｓ−｛２−［（３−アミノプロピル）｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝アミノ］−２−オキソエチル｝−Ｎ−［１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２，１８−ジオキソ−６，９，１２，１５−テトラオキサ−３−アザオクタデカン−１８−イル］−Ｌ−システイン／トリフルオロ酢酸（１：１）（中間体Ｆ２５７）１６．５ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ）およびＮ−｛［２−（トリメチルシリル）エトキシ］カルボニル｝−Ｌ−システイン８．１８ｍｇ（０．０３１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ２ｍＬに溶かし、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下に溶媒留去した。残留物（２８．９ｍｇ）をＴＨＦ／水１：１３ｍＬに溶解させた。２Ｍ水酸化リチウム水溶液０．０４６ｍＬを加え、混合物を室温で３時間撹拌した。次に、酢酸５．２μＬ（０．０９２ｍｍｏｌ）を用い、混合物をｐＨ約７に調節した。反応混合物を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（カラム：Ｒｅｐｒｏｓｉｌ１２５×３０；１０μ、流量：５０ｍＬ／分、ＭｅＣＮ／水；０．１％ＴＦＡ）によって直接精製した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を高真空下に乾燥した。位置異性体保護中間体１２．１ｍｇ（２段階で５８％）が得られた。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．８２分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１２４０（Ｍ＋Ｈ）^＋。

最後の段階で、この中間体１２．１ｍｇ（０．００９ｍｍｏｌ）を２，２，２−トリフルオロエタノール２ｍＬに溶かした。塩化亜鉛７．３ｍｇ（０．０５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５０℃で２時間撹拌した。次に、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラ酢酸１５．７ｍｇ（０．０５４ｍｍｏｌ）を加え、その溶液を、分取ＨＰＬＣによって精製した。関連する分画の濃縮およびアセトニトリル／水からの残留物の凍結乾燥後に、標題化合物６．４ｍｇ（５９％）を位置異性体混合物として得た。

ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒ_ｔ＝０．８６分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝１０９６（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例Ｍ２３
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｌ−グルタミン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＬ−グルタメート塩酸塩（１：１）を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ６１とカップリングさせた。次に、保護された中間体をトリフルオロエタノールに取り、塩化亜鉛存在下に５０℃で終夜撹拌することで、脱保護を完了させた。ＥＤＴＡ添加後に、分取ＨＰＬＣによる精製によって、後処理を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．４５分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ２４
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−β−アラニル−Ｄ−グルタミン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＤ−グルタメート塩酸塩（１：１）を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ６１とカップリングさせた。次に、保護された中間体をトリフルオロエタノールに取り、塩化亜鉛存在下に５０℃で終夜撹拌することで、脱保護を完了させた。ＥＤＴＡ添加後に、分取ＨＰＬＣによる精製によって、後処理を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．４１分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例Ｍ２５
Ｎ−｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝−Ｌ−グルタミン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）

最初に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルＬ−グルタメート塩酸塩（１：１）を、ＨＡＴＵおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下に中間体Ｃ６１とカップリングさせた。次の段階で、標準水素圧下に４５分間にわたり、室温でメタノール中にて１０％パラジウム／活性炭で水素化することで、Ｚ保護基を除去した。次に、部分保護された中間体をトリフルオロエタノールに取り、塩化亜鉛の存在下に５０℃で７時間撹拌することで、脱保護を完了させた。ＥＤＴＡ添加後に、分取ＨＰＬＣによる精製によって、後処理を行った。

ＬＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒ_ｔ＝１．４４分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６４３［Ｍ＋Ｈ］^＋．
実施例Ｍ２６
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−２−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体１、エピマー混合物

本実施例は、実施例１３および実施例１４の化合物のエピマー混合物について説明するものである。その合成は、実施例１３と同様に行い、超臨界流体クロマトグラフィーによる二つのエピマーの分離は行わず、標題化合物をエピマー混合物として製造した。

ＬＣ−ＭＳ（方法５）：Ｒ_ｔ＝２．４３分；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３２［Ｍ＋Ｈ］^＋．
実施例Ｍ２７
４−［（２−｛［２−（｛（２Ｓ）−２−アミノ−４−［｛（１Ｒ）−１−［１−ベンジル−４−（２，５−ジフルオロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２−イル］−２，２−ジメチルプロピル｝（グリコロイル）アミノ］ブタノイル｝アミノ）エチル］アミノ｝−２−オキソエチル）アミノ］−３−｛［（２Ｒ）−２−アミノ−２−カルボキシエチル］スルファニル｝−４−オキソブタン酸／トリフルオロ酢酸（１：１）
位置異性体２、エピマー混合物

本実施例は、実施例１５および実施例１６の化合物のエピマー混合物について説明するものである。その合成は、実施例１５と同様に行い、超臨界流体クロマトグラフィーによる二つのエピマーの分離は行わず、標題化合物をエピマー混合物として製造した。

実施例ＡＤＣ
マレイミド基を介して抗体のシステイン側鎖にカップリングさせた実施例の構造式に示したＡＤＣは、リンカーおよびカップリング手順に応じて、主として各場合で示した開環型または閉環型で存在する。しかしながら、その製造物は、小さい割合で個々の他の形態を含むことができる。

実施例１０４Ｌ１

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．２２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（３９５μＬ）中溶液を、ＰＢＳ（４１２４μＬ）中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ４０ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し、ＤＭＳＯ４００μＬに溶かした中間体Ｆ１０４１．７２ｍｇ（０．０００２７ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ７．２で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ７．２で溶離した。溶出液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈し、再度濃縮した。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１１．６７ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．３。

ＡＤＣは、部分的に、抗体に結合した加水分解開鎖コハク酸イミドの形態であることも可能である。

実施例１７３Ｌ１

ここでは、抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ／ＰＢＳ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ１７３とのカップリングに用い、Ｓｅｐｈａｄｅｘ精製後に、反応液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：１．５７ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．４。

実施例１９４

ここでは、ＰＢＳ５１５μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ１９４とのカップリングに用いた。最初に、ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ１９４５当量を加え、室温で１時間撹拌後、同量を再度加え、反応液を室温でさらに１時間撹拌した。次に、反応液を、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：０．５１ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．４。

実施例１９４Ｌ２

ここでは、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ１９４とのカップリングに用いた。最初に、ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ１９４５当量を加え、室温で１時間撹拌後、同量を再度加え、反応液を室温でさらに１時間撹拌した。次に、反応液を、Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムで精製し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：１．０２ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．９。

実施例２０８Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．２８７ｍｇのＰＢＳ緩衝液（０．５ｍＬ）中溶液を、ＰＢＳ（４．９ｍＬ）中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５０ｍｇ（ｃ＝１０．２ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し、ＤＭＳＯ５００μＬに溶かした中間体Ｆ１０４２．１５ｍｇ（０．００２６７ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液４１００μＬで希釈した。

この溶液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で希釈して総容量１５ｍＬとした。この溶液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、次にＰＤ−１０カラムを用いてｐＨ７．２に再緩衝した。溶出液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈し、再度濃縮した。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１４．９８ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．９。

実施例２４０Ｌ１

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１６μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８３４μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２４００．１９９ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：０．８９ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．７。

実施例２４０Ｌ２
アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８４０μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２４００．１９９ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、次に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．３５ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．５。

実施例２５７Ｌ１

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液をＰＢＳ５１６μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８３４μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２５７０．２５０ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液をＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：０．９１ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．４。

実施例２５７Ｌ２
アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５００μＬ）中溶液を、ＰＢＳ４８１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５０ｍｇ（ｃ＝１０．４ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液４１００μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ５００μＬに溶かした中間体Ｆ２５７２．８５６ｍｇ（０．００７ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１０．８１ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：４．５。

実施例２５９Ｌ１

ここでは、ＰＢＳ５１５μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ２５９とのカップリングに用いた。抗体の還元時間は３０分であり、Ｆ２５９０．２４５ｍｇ（０．２６７μｍｏｌ）を加えた後、反応液を室温で２０時間撹拌し、Ｓｅｐｈａｄｅｘで精製した。溶出液を最後に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：１．４３ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．０。

実施例２６０Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を室温で３０分間撹拌し、ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ２６００．３０２ｍｇ（０．０００２７ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌した後、反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８９０μＬで希釈した。

この溶液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部が閉環型でも存在し得る。得られたＡＤＣバッチを次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．０５ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．６。

実施例２６３Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ４８１μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝１０．４ｍｇ／ｍＬ）に加え、反応液を室温で３０分間撹拌した。ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ２６３０．２０９ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１９１０μＬで希釈し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．５０ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．６。

実施例２７０Ｌ１

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１６μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８３４μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２７００．１８８ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．０２ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．８。

実施例２７４Ｌ１

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１６μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を、予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８３４μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２７４０．２３２ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．１３ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．９。

実施例２７５Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）に加えた。反応液を予めｐＨ８に調節しておいたＰＢＳ緩衝液１８４０μＬで希釈し、室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ１００μＬに溶かした中間体Ｆ２７５０．２２９ｍｇ（０．０００２３ｍｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、反応液を、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としておいたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に乗せ、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離した。溶出液をアルゴン下に室温で終夜撹拌し、超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。これらの条件下では、ＡＤＣの一部は、閉環型で存在する可能性もある。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．１８ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．８。

実施例２８１Ｌ２

ここでは、ｐＨ７．２のＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ２８１とのカップリングに用いた。ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇ存在下での抗体の還元時間は３０分であった。ＤＭＳＯ５０μＬ中のＦ２８１０．２２ｍｇ（０．２３μｍｏｌ）を加えた後、反応液を室温で２０時間撹拌し、次にＳｅｐｈａｄｅｘで精製した。溶出液を最後に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：１．３２ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．４。

実施例２８４Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）に加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ２８４０．２６ｍｇ（０．２３μｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で混合物を２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離し、次に室温で終夜撹拌した。次に、溶出液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．３４ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．０。

実施例２９６Ｌ２

アルゴン下に、ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇのＰＢＳ緩衝液（５０μＬ）中溶液を、ＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）に加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。ＤＭＳＯ５０μＬに溶かした中間体Ｆ２９６０．２１ｍｇ（０．２３μｍｏｌ）を加えた。室温でさらに９０分間撹拌後、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８によって混合物を２．５ｍＬとし、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で平衡としたＰＤ１０カラム（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−２５、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通し、ＰＢＳ緩衝液ｐＨ８で溶離し、アルゴン下に室温で終夜撹拌した。溶出液を超遠心によって濃縮し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で再希釈した。得られたＡＤＣバッチを、次のように特性決定した。

タンパク質濃度：１．３１ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．２。

実施例２９７Ｌ１（異性体１）

ここでは、ｐＨ７．２のＰＢＳ５１０μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ａ５ｍｇ（ｃ＝９．７ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ２９７とのカップリングに用いた。ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇ存在下での抗体の還元時間は３０分であった。ＤＭＳＯ５０μＬ中のＦ２９７０．２３ｍｇ（０．２６μｍｏｌ）を加えた後、反応液を室温で２時間撹拌し、次にＳｅｐｈａｄｅｘで精製した。溶出液を最後に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：０．９７ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：２．４。

実施例２９７Ｌ２（異性体１）

ここでは、ｐＨ７．２のＰＢＳ５１５μＬ中の抗Ｂ７Ｈ３ＡＫ_１Ｂ５ｍｇ（ｃ＝９．８ｍｇ／ｍＬ）を、中間体Ｆ２９７とのカップリングに用いた。ＴＣＥＰ０．０２９ｍｇ存在下での抗体の還元時間は３０分であった。ＤＭＳＯ５０μＬ中のＦ２９７０．２３ｍｇ（０．２６μｍｏｌ）を加えた後、反応液を室温で２時間撹拌し、次にＳｅｐｈａｄｅｘで精製した。溶出液を最後に超遠心によって濃縮し、ＰＢＳで再希釈した。

タンパク質濃度：１．４３ｍｇ／ｍＬ
薬物／ｍＡｂ比：３．１。

Ｃ：生物学的効力の評価
本発明による化合物の生理活性を、下記の評価で示すことができる。

ａ．Ｃ−１ａ：Ｂ７Ｈ３に対するＡＤＣの細胞毒性効果の測定
抗Ｂ７Ｈ３ＡＤＣの細胞毒性効果の分析を、各種細胞株を用いて行った。

Ａ４９８：ヒト腎臓癌細胞、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−ＨＴＢ−４４、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０；（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定なグルタミン含有）＋１０％ＦＣＳ（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｓ０４１５）、Ｂ７Ｈ３−陽性。

ＭＣＦ−７：ヒト乳癌細胞、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０；（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｆ１２７５、フェノールレッド非含有）＋Ｅ２（最終：１Ｅ−１０Ｍ；β−エストラジオール、Ｓｉｇｍａ＃Ｅ２７５８またはＺＫ５０１８／ＣＬＬ）＋１０％ＣＣＳ、＋２ｍ単位／ｍＬインシュリン（ウシ、Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｋ３５１０）＋Ｌ−アラニル−Ｌ−グルタミン；（最終：２ｍＭ、Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｋ０３０２）、Ｂ７Ｈ３−陽性。

Ｃａｋｉ−２：ヒト腎臓癌細胞、ＡＴＣＣ−ＨＴＢ−２７、標準培地：ＤＭＥＭ／ハムのＦ１２（＃ＦＧ４８１５、ＢｉｏｃｈｒｏｍＡＧ）＋１０％ＦＣＳ（＃Ｆ２４４２、Ｓｉｇｍａ）、Ｂ７Ｈ３−陽性。

Ｒａｊｉ：ヒトバーキットリンパ腫細胞、ＤＭＳＺ−ＡＣＣ−３１９、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０；（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定なグルタミン含有）＋１０％ＦＣＳ（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｓ０４１５）、Ｂ７Ｈ３−陰性。

ＮＣＩ−Ｈ２９２：ヒト粘液性類表皮肺癌細胞、ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−１８４８、標準培地：ＲＰＭＩ１６４０（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃ＦＧ１２１５、安定グルタミン）＋１０％ＦＣＳ（Ｂｉｏｃｈｒｏｍ；＃Ｓ０４１５）。

対象の細胞株についてＡｍｅｒｉｃａｎＴｉｓｓｕｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）に記載の標準的方法によって、細胞を培養した。

ＣＴＧアッセイ
Ｃ−１下に挙げた増殖培地を用い、標準的な方法に従って細胞を培養した。試験は、トリプシン（０．０５％）およびＥＤＴＡ（０．０２％）のＰＢＳ中溶液（ＢｉｏｃｈｒｏｍＡＧ＃Ｌ２１４３）による細胞の分離、ペレット化、培地での再懸濁、カウンティングおよび白色底の９６ウェル培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３６１０）への細胞播種（７５μＬ／ウェルで、次の細胞数／ウェル：ＮＣＩ−Ｈ２９２：２５００細胞／ウェル、ＢｘＰＣ３：２５００細胞／ウェル）によって行い、インキュベータにおいて３７℃および５％二酸化炭素でインキュベートした。２４時間後、培地２５μＬ中の抗体薬物複合体（４倍濃縮）を、細胞に加えて、その細胞での抗体薬物複合体の最終濃度が３×１０^−７Ｍから３×１０^−１１Ｍとなるようにした（三連）。次に、細胞をインキュベータにおいて３７℃および５％二酸化炭素でインキュベートした。並行したプレートで、薬物処理開始時（第０日）での細胞生存率を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏｗ（ＣＴＧ）発光細胞生存率アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ＃Ｇ７５７３および＃Ｇ７５７１）を用いて求めた。このために、基質１００μＬを各細胞バッチに加え、次に、プレートをアルミニウムホイルで覆い、プレート振盪器上１８０ｒｐｍで２分間振盪し、実験台上に８分間置き、照度計（ＶｉｃｔｏｒＸ２、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて測定した。その基質により、生存細胞中のＡＴＰ含有量を検出し、その際に、発光シグナルが発生し、その高さは細胞の生存率に正比例する。抗体薬物複合体とともに７２時間インキュベートした後、これらの細胞でも、上記の方法に従って、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏｗ発光細胞生存率アッセイを用いて生存率を求めた。その測定データから、４パラメータ適合によるＤＲＣ（用量応答曲線）解析スプレッドシートを用い、第０日との比較で増殖阻害のＩＣ_５０を計算した。ＤＲＣ解析スプレッドシートは、ＩＤＢＳＥ−ＷｏｒｋＢｏｏｋＳｕｉｔｅプラットフォーム（ＩＤＢＳ：ＩＤＢｕｓｉｎｅｓｓＳｏｌｕｔｉｏｎｓＬｔｄ．，Ｇｕｉｌｄｆｏｒｄ，ＵＫ）に基づいてＢａｙｅｒＰｈａｒｍａＡＧおよびＢａｙｅｒＢｕｓｉｎｅｓｓＳｅｒｖｉｃｅｓが開発したＢｉｏｂｏｏｋＳｐｒｅａｄｓｈｅｅｔである。

下記の表１ａに、本アッセイからの抗Ｂ７Ｈ３抗体についての代表的実施例のＩＣ_５０値を挙げてある。

表１ａ

報告の活性データは、本実験セクションに記載の実施例に関するものであり、薬物／ｍＡＢ比が示されている。それらの値は、異なる薬物／ｍＡＢ比に関して逸脱している可能性がある。ＩＣ_５０値は、いくつかの独立の実験または個々の値の平均である。Ｂ７Ｈ３抗体薬物複合体の作用は、個々のリンカーおよび担毒体を含む個々のアイソタイプ対照に対して選択的であり、非Ｂ７Ｈ３発現腫瘍細胞に対して標的特異的であった。非複合Ｂ７Ｈ３抗体も同様に、上記細胞株で作用を全く示さなかった。

ＭＴＴアッセイ
Ｃ−１下に挙げた増殖培地を用いて、標準的な方法に従って、細胞を培養した。本試験は、ＡｃｃｕｔａｓｅのＰＢＳ中溶液（ＢｉｏｃｈｒｏｍＡＧ＃Ｌ２１４３）による細胞の分離、ペレット化、培地での再懸濁、カウンティングおよび白色底の９６ウェル培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３６１０）への細胞播種（ＮＣＩＨ２９２：総体積１００μＬ中２５００細胞／ウェル）によって行う。次に、細胞を、インキュベータにおいて３７℃および５％二酸化炭素でインキュベートした。４８時間後、培地を交換した。次に、濃度１０^−５Ｍから１０^−１３Ｍでの培地１０μＬ中代謝物をピペットで細胞に加え（三連で）、アッセイ液をインキュベータにおいて３７℃および５％二酸化炭素でインキュベートした。９６時間後、ＭＴＴアッセイ（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ，ＵＳＡ、カタログ番号３０−１０１０Ｋ）を用いて細胞増殖を検出した。このために、ＭＴＴ試薬を細胞とともに４時間インキュベートし、次に界面活性剤を加えることで、細胞を終夜溶解させた。生成した色素を、５７０ｎｍで検出した（ＩｎｆｉｎｉｔｅＭ１０００ｐｒｏ，Ｔｅｃａｎ）。測定データを用いて、ＤＲＣ（用量応答曲線）を使用して増殖阻害のＩＣ_５０を計算した。試験物質で処理しなかったが、それ以外は同様に処理した細胞の増殖を、１００％数値と定義した。

Ｃ−１ｂ：選択された実施例によるキネシンスピンドルタンパク質ＫＳＰ／Ｅｇ５の阻害の測定
ヒトキネシンスピンドルタンパク質ＫＳＰ／Ｅｇ５（ｔｅｂｕ−ｂｉｏ／ＣｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎＩｎｃ, Ｎｏ．０２７ＥＧ０１−ＸＬ）のモータードメインを、１５ｍＭＰＩＰＥＳ、ｐＨ６．８（５ｍＭＭｇＣｌ_２および１０ｍＭＤＴＴ、Ｓｉｇｍａ）中室温で５分間、５０μｇ／ｍＬタキソール（ＳｉｇｍａＮｏ．Ｔ７１９１−５ＭＧ）で安定化した微小管（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｉ）（ウシまたはブタ、ｔｅｂｕ−ｂｉｏ／ＣｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎＩｎｃ）とともに濃度１０ｎＭでインキュベートした。調製したばかりの混合物を３８４ＭＴＰ（Ｇｒｅｉｎｅｒｂｉｏ−ｏｎｅＲＥＦ７８１０９６）に小分けした。濃度１．０×１０^−６Ｍから１．０×１０^−１３Ｍの調べる阻害剤およびＡＴＰ（最終濃度５００μＭ、Ｓｉｇｍａ）を加えた。インキュベーションは室温で２時間であった。マラカイトグリーン（Ｂｉｏｍｏｌ）を用いて形成された無機ホスフェートを検出することで、ＡＴＰａｓｅ活性を検出した。試薬を加えた後、アッセイ液を室温で５０分間インキュベートしてから、波長６２０ｎｍでの吸収を検出した。使用した陽性対照は、モナストロール（Ｓｉｇｍａ、Ｍ８５１５−１ｍｇ）およびイスピネシブ（ＡｄｏｏＱＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅＡ１０４８６）であった。用量−活性曲線の個々のデータは、８倍測定である。ＩＣ_５０値は、二つの独立の実験の平均である。１００％対照は、阻害剤で処理されなかったサンプルであった。

下記の表２に、記載のアッセイおよび相当する細胞毒性データからの代表的実施例のＩＣ_５０値を列記している（ＭＴＴアッセイ）。

表２

報告された活性データは、本実験セクションに記載の実施例に関するものである。

Ｃ−２：内在化アッセイ
内在化は、抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を介した抗原発現性癌細胞における細胞毒性ペイロードの特異的かつ効率的提供を可能とする重要なプロセスである。このプロセスは、特異的Ｂ７Ｈ３抗体およびアイソタイプ対照抗体の蛍光標識を介してモニタリングされる。最初に、蛍光色素を抗体のリジンに結合させる。結合は、ｐＨ８．３の２倍モル過剰のＣｙｐＨｅｒ５ＥモノＮＨＳエステル（バッチ３５７３９２, ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて行う。カップリング後、反応混合物をゲルクロマトグラフィー（ＺｅｂａＳｐｉｎＤｅｓａｌｔｉｎｇＣｏｌｕｍｎｓ、４０Ｋ、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｎｏ．８７７６８；溶離緩衝液：ダルベッコＰＢＳ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｎｏ．Ｄ８５３７）によって精製して、過剰の色素を除去し、ｐＨを調節する。得られたタンパク質溶液を、ＶＩＶＡＳＰＩＮ５００カラム（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓｓｔｅｄｉｍｂｉｏｔｅｃ）を用いて濃縮する。抗体の色素負荷量を、分光光度分析（ＮａｎｏＤｒｏｐ）および次に計算（Ｄ：Ｐ＝Ａ_ｄｙｅε_{ｐｒｏｔｅｉｎ}：（Ａ_２８０−０．１６Ａ_ｄｙｅ）ε_ｄｙｅ）によって求める。

ここで調べたＢ７Ｈ３抗体およびアイソタイプ対照の色素負荷量は、同等の次数のものであった。細胞結合アッセイにおいて、前記結合が抗体のアフィニティにおける変化をもたらさないことが確認された。

その標識抗体を、内在化アッセイで用いる。

この治療開始前に、培地１００μＬ中の細胞（２×１０^４／ウェル）を、９６−ＭＴＰ（肉厚、黒色、透明底Ｎｏ４３０８７７６、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓから）におけるに播いた。３７℃／５％ＣＯ_２で１８時間インキュベートした後、培地を代え、標識Ｂ７Ｈ３抗体を各種濃度で加えた（１０、５、２．５、１、０．１μｇ／ｍＬ）。標識されたアイソタイプ対照（陰性対照）について、同じ処理法を用いた。選択されたインキュベーション時間は、０時間、０．２５時間、０．５時間、１時間、１．５時間、２時間、３時間、６時間および２４時間であった。ＩｎＣｅｌｌＡｎａｌｙｚｅｒ１０００（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅから）を用いて、蛍光測定を行った。パラメータである顆粒カウント／細胞および総顆粒強度／細胞の測定によって、動力学的評価を行った。

Ｂ７Ｈ３への結合後、Ｂ７Ｈ３抗体について、それの内在化能力を調べた。このために、２種類の異なるＢ７Ｈ３発現細胞株（Ａ４９８、７８６−Ｏ）を選択した。Ｂ７Ｈ３抗体の標的介在特異的内在化が観察されたが、アイソタイプ対照は内在化を全く示さなかった（実施例Ａ４９８細胞、図２）。

Ｃ−３：細胞透過性を求めるためのイン・ビトロ試験
Ｃａｃｏ−２細胞を用いるフラックスアッセイでのイン・ビトロ試験によって、基質の細胞透過性を調べることができる［Ｍ．Ｄ．ＴｒｏｕｔｍａｎａｎｄＤ．Ｒ．Ｔｈａｋｋｅｒ, Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２０（８）, １２１０−１２２４（２００３）］。これに関して、２４ウェルフィルタープレート上で、細胞１５から１６日間培養した。透過を求めるため、個々の試験物質を、ＨＥＰＥＳ緩衝液溶液で、頂部で（ａｐｉｃａｌｌｙ）（Ａ）または基底部で（ｂａｓａｌｌｙ）（Ｂ）細胞に付与し、２時間インキュベートした。０時間後および２時間後に、シスおよびトランスコンパートメントからサンプルを取った。それらのサンプルを、逆相カラムを用いるＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ１２００、Ｂｏｅｂｌｉｎｇｅｎ, Ｇｅｒｍａｎｙ）によって分離した。ＨＰＬＣシステムを、ＴｕｒｂｏＩｏｎＳｐｒａｙＩｎｔｅｒｆａｃｅを介して三連四重極質量分析計ＡＰＩ４０００（ＡＢＳＣＩＥＸＤｅｕｔｓｃｈｌａｎｄＧＭＢＨ, Ｄａｒｍｓｔａｄｔ, Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。Ｓｃｈｗａｂらが公開した式を用いて計算されたＰ_ａｐｐ値に基づいて透過性を評価した［Ｄ．Ｓｃｈｗａｂｅｔａｌ．, Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６, １７１６−１７２５（２００３）］。Ｐ_ａｐｐ（Ｂ−Ａ）／Ｐ_ａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比（排出比）が＞２または＜０．５であった場合に、物質は能動的に輸送されると分類された。

細胞内で放出される担毒体について非常に重要なものは、ＢからＡへの透過性［Ｐ_ａｐｐ（Ｂ−Ａ）］およびＰ_ａｐｐ（Ｂ−Ａ）：Ｐ_ａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比（排出比）であり、この浸透率が低いほど、Ｃａｃｏ−２細胞の単層を通る物質の能動輸送および受動輸送が遅くなる。さらに、排出比が能動輸送を示さない場合、その物質は、細胞内放出後に、細胞内でより長く留まることができる。従って、生化学的標的（この場合、キネシンスピンドルタンパク質、ＫＳＰ／Ｅｇ５）との相互作用に使える時間も長くなる。

下記の表３には、このアッセイからの代表的実施例についての浸透率データを示してある。

表３

Ｃ−４：Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）についての基質特性を求めるためのイン・ビトロ試験
多くの腫瘍細胞が、薬物のための輸送タンパク質を発現し、これは非常に多くの場合、細胞増殖抑制剤に対する抵抗性の発達を伴う。従って、そのような輸送タンパク質、例えばＰ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）またはＢＣＲＰの基質ではない物質は、例えば、改善された活性プロファイルを示し得ると考えられる。

Ｐ−ｇｐ（ＡＢＣＢ１）用の物質の基質特性を、Ｐ−ｇｐを過剰発現するＬＬＣ−ＰＫ１細胞（Ｌ−ＭＤＲ１細胞）を用いるフラックスアッセイによって求めた［Ａ．Ｈ．Ｓｃｈｉｎｋｅｌｅｔａｌ．, Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９６, １６９８−１７０５（１９９５）］。このために、ＬＬＣ−ＰＫ１細胞またはＬ−ＭＤＲ１細胞を、３から４日間、９６ウェルフィルタープレートで培養した。透過性を測定するため、個々の試験物質を、単独でまたは阻害剤（例えば、イベルメクチンまたはベラパミル）の存在下に、ＨＥＰＥＳ緩衝液溶液で、頂部で（ａｐｉｃａｌｌｙ）（Ａ）または基底部で（ｂａｓａｌｌｙ）（Ｂ）細胞に付与し、２時間インキュベートした。０時間後および２時間後に、シスおよびトランスコンパートメントからサンプルを取った。それらのサンプルを、逆相カラムを用いるＨＰＬＣによって分離した。ＨＰＬＣシステムを、ＴｕｒｂｏＩｏｎＳｐｒａｙＩｎｔｅｒｆａｃｅを介して三連四重極質量分析計ＡＰＩ３０００（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＡｐｐｌｅｒａ, Ｄａｒｍｓｔａｄｔ, Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。Ｓｃｈｗａｂらが公開した式を用いて計算されたＰ_ａｐｐ値に基づいて透過性を評価した［Ｄ．Ｓｃｈｗａｂｅｔａｌ．, Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６, １７１６−１７２５（２００３）］。Ｐ_ａｐｐ（Ｂ−Ａ）／Ｐ_ａｐｐ（Ａ−Ｂ）の排出比が＞２であった場合に、物質はＰ−ｇｐ基質であると分類された。

Ｐ−ｇｐ基質特性の評価のためのさらなる基準として、Ｌ−ＭＤＲ１細胞およびＬＬＣ−ＰＫ１細胞における排出比または阻害剤存在下もしくは非存在下での排出比を比較することができる。これらの値が２より大きい係数だけ異なる場合、対象の物質はＰ−ｇｐ基質である。

Ｃ−６：イン・ビボ活性試験
本発明による複合体の活性を、例えば異種移植モデルを用いてイン・ビボで調べた。当業者は、本発明による化合物の活性を調べるために用いることができる先行技術の方法について熟知している（例えば、ＷＯ２００５／０８１７１１；Ｐｏｌｓｏｎｅｔａｌ．, ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２００９Ｍａｒ１５；６９（６）：２３５８−６４参照）。このために、例えば、バインダーの標的分子を発現する腫瘍細胞株を、齧歯類（例えばマウス）に移植した。本発明による複合体、アイソタイプ抗体対照複合体または対照抗体または等張性生理食塩水をインプラント動物に投与した。投与は、１回または複数回行った。数日のインキュベーション時間後、複合体処理動物および対照群の比較で、腫瘍の大きさを比べた。複合体処理動物は、相対的に小さい腫瘍サイズを示した。

Ｃ−６ａ．マウスでの増殖阻害／実験腫瘍の退行
抗体薬物複合体に対する抗原を発現するヒト腫瘍細胞を、免疫抑制マウス、例えばＮＭＲｉヌードまたはＳＣＩＤマウスの身体側部に皮下接種する。１００から１０００万個の細胞を細胞培養液から分離し、遠心し、培地または培地／マトリゲルに再懸濁させる。細胞懸濁液をマウスの皮下に注射する。

長い日数かけて、腫瘍が成長する。腫瘍サイズ約４０ｍｍ^２で腫瘍が確立されたら、治療を開始する。それより大きい腫瘍に対する効果を調べるため、腫瘍サイズが５０から１００ｍｍ^２でのみ処置を開始することも可能である。

ＡＤＣによる処置は、マウスの尾静脈への静脈（ｉ．ｖ．）経路を介して行う。ＡＤＣは５ｍＬ／ｋｇの体積で投与する。

処置プロトコールは、抗体の薬物動態によって決まる。標準的処置は、４日ごとに３連続回である。増殖が遅い腫瘍の場合、週１回の処置が推奨される。短期評価のために、１回のみ処置を行うプロトコールを用いることも好適であり得る。しかしながら、治療を続けることも可能であるか、後に、３処置日の第２サイクルを行うことができる。

標準として、処置群当たり動物８匹を用いる。薬物投与を受けた群に加えて、対照群として、一つの群を、同じ方法に従って、緩衝液のみで処理する。

実験の経過中、腫瘍面積を、定期的にカリパスを用いて２次元（長さ／幅）で測定する。その腫瘍面積は、長さ×幅として求める。処置群：対照群の平均腫瘍面積比を、Ｔ／Ｃ面積と記述する。

処置終了後、全ての実験群を同時に屠殺する場合、腫瘍を摘出し、秤量することができる。処置群：対照群の平均腫瘍重量の比較を、Ｔ／Ｃ重量と記述する。

Ｃ−６ｂ．異なる腫瘍モデルでの抗Ｂ７Ｈ３抗体薬物複合体の活性
腫瘍細胞を、雌ＮＭＲＩヌードマウス（Ｊａｎｖｉｅｒ）の体側部に皮下接種する。腫瘍サイズ約４０ｍｍ^２で、抗体薬物複合体を用いて静注で処置を行う。処置後、腫瘍増殖をさらにモニタリングしても良い。

抗Ｂ７Ｈ３抗体薬物複合体による処置によって、対照群および非複合抗Ｂ７Ｈ３抗体と比較して顕著かつ長期の腫瘍増殖阻害が生じる。表８に、処置開始から計算された個々の日数での腫瘍面積によって求めた至適Ｔ／Ｃ値を示している。

表８：

ＡＫ−実施例１：ＴＰＰ５７０６およびそれのヒト化誘導体
ＴＰＰ５７０６を上記の方法に従って合成した。ＴＰＰ５７０６のヒトＢ７Ｈ３およびヒトＢ７Ｈ２およびＢ７Ｈ４への結合を、ＥＬＩＳＡを用いて特性決定した。黒色３８４ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を、３７℃で１時間にわたり、単一コーティング緩衝液（Ｃａｎｄｏｒ）中、抗ヒトＩｇＧＦｃ（Ｓｉｇｍａ、Ｉ２３１６；１：４４０希釈）でコーティングした。ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎで１回洗浄した後、プレートを、３７℃で１時間にわたり、１００％ＳｍａｒｔＢｌｏｃｋ（Ｃａｎｄｏｒ）でブロックした。次に、被験抗体（例えば、ＴＰＰ５７０６またはそれの誘導体のうちの一つ）をプレートに付着させた（２μｇ／ｍＬＩｇＧ／ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ、１０％ＳｍａｒｔＢｌｏｃｋ；１時間、室温）。３回洗浄後、プレートを対象の抗原または緩衝液のみとともにインキュベートした（３７ｎｇ／ｍＬＰＢＳ溶液、０．０５％Ｔｗｅｅｎ、１０％ＳｍａｒｔＢｌｏｃｋ；Ｂ７Ｈ２：ＲｎＤＳｙｓｔｅｍｓ、８２０６−Ｂ７；Ｂ７Ｈ３：ＲｎＤＳｙｓｔｅｍｓ、２３１８−Ｂ３−０５０／ＣＦ；Ｂ７Ｈ４：ＲｎＤＳｙｓｔｅｍｓ、６５７６−Ｂ７；１時間、室温）。３回洗浄後、プレートを抗ＨｉｓＨＲＰ抗体（Ｎｏｖａｇｅｎ、７１８４０−３；１：１００００希釈；１時間、室温）とともにインキュベートした。３回洗浄後、プレートをＡｍｐｌｅｘＲｅｄともに３０分間インキュべートして、読み取りを行った。表ＡＫ−１中のデータは、ＴＰＰ５７０６がＢ７Ｈ３と結合し、Ｂ７Ｈ２やＢ７Ｈ４とは結合しないことを示している。

表ＡＫ−１：ＴＰＰ５７０６およびＴＰＰ３８０３のＢ７Ｈ２、Ｂ７Ｈ３およびＢ７Ｈ４への結合

Ｂ７Ｈ３への特異的結合により、ＴＰＰ５７０６は、Ｂ７Ｈ３発現細胞が関与する疾患および他の有害効果の治療のための治療薬開発に好適な候補である。その抗体はマウス起源のものであることから、標準的な方法を用いてそれをヒト化した（例えば、ＡｌｍａｇｒｏａｎｄＦｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）参照）。特には、Ｂ７Ｈ３への結合がほとんど影響されないことから、ＴＰＰ６６４２およびＴＰＰ６８５０が、さらなる至適化に好適である（表ＡＫ−２）。本発明によれば、下記に挙げたアミノ酸置換により、ＴＰＰ６６４２およびＴＰＰ６８５０のヒト生殖系列配列とのよりさらに近い類似性を達成することができる。

これらは、軽鎖でのＴＰＰ６６４２については、Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４３Ａ、Ｑ４５Ｋ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓ、Ｐ９６Ｌである。重鎖でのＴＰＰ６６４２については、Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｙ、Ｖ３４Ｍ、Ｔ５０Ｉ、Ｆ５２Ｎ、Ｇ５４Ｓ、Ｎ５５Ｇ、Ｄ５７Ｓ、Ｎ６１Ａ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ｋ６７Ｒ、Ｔ７２Ｒ、Ａ７９Ｖである。軽鎖でのＴＰＰ６８５０については、Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｖ４８Ｉ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｑ７０Ｄ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓである。重鎖でのＴＰＰ６８５０については、Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｇ、Ｖ３４Ｉ、Ｈ３５Ｓ、Ｉ３７Ｖ、Ｔ５０Ｗ、Ｆ５２Ｓ、Ｐ５３Ａ、Ｇ５４Ｙ、Ｄ５７Ｎ、Ｓ５９Ｎ、Ｎ６１Ａ、Ｆ６４Ｌ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ａ６８Ｖ、Ｌ７０Ｍ、Ｋ７４Ｔ、Ｋ７７Ｓ、Ａ１０７Ｑである。

これらの置換は、ヒトでの免疫原性をさらに低下させるものであり、それは本発明による抗体に基づく治療薬開発に関して有利な特性である。

Claims

１以上の下記式の薬物分子ならびそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマーと抗体の複合体。

［式中、
バインダーは、グリコシル化もしくは脱グリコシル化抗Ｂ７Ｈ３抗体を表すか、それの抗原結合性断片を表し、
Ｌは、リンカーを表し、
ｎは、１から５０、好ましくは１．２から２０、特に好ましくは２から８の数字を表し、
ＫＳＰは、下記式（Ｉ）の化合物：
式（Ｉ）：

を表し、
式中、
Ｒ^１は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚは、−Ｈ、−ＮＨＹ^３、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ^１Ｙ^２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、−Ｈ、−ＮＨ_２、−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_０−３−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′（例えば−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′）または−ＣＨ（ＣＨ_２Ｗ）Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、−Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＮＨ_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨまたは−（ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＹ^４）_１−３ＣＯＯＨを表し；
Ｗは、ＨまたはＯＨを表し、
Ｙ^４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し；
Ｒ^２は、Ｈ、−ＭＯＤ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ^１Ｙ^２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、−Ｈ、−ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、−Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＮＨ_２または−ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、
Ｙ^５は、−Ｈまたは−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、
Ｙ^６は、直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
Ｒ^４は、−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＳＧ_ｌｙｓ−（ＣＯ）_０−１−Ｒ^４′、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ^４−ＮＨＹ^５または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
ＳＧ_ｌｙｓは、リソソーム酵素によって開裂可能な基、特にはジペプチドもしくはトリペプチドからなる基であり、
Ｒ^４′は、Ｃ_１−１０−アルキル、Ｃ_５−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリール、Ｃ_５−１０−複素環アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルコキシ、Ｃ_１−１０−アルコキシ、Ｃ_６−１０−アリールオキシまたはＣ_６−１０−アラルコキシ、Ｃ_５−１０−ヘテロアラルコキシ、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールオキシ、Ｃ_５−１０−複素環アルコキシ基であり、それは−ＮＨ_２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（アルキル）_２、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、Ｎ（アルキル）−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２−Ｎ（アルキル）_２、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）_２または−ＯＨ、−Ｈまたは基−Ｏ_ｘ−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｖ−Ｒ^４″によって１回または複数回置換されていても良く、
ｘは、０または１であり、
ｖは、１から１０の数字であり、
Ｒ^４″は、−Ｈ、−アルキル（好ましくはＣ_１−１２−アルキル）、−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＯＯＨ、または−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２であり；
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ＮＨＹ^３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ^１Ｙ^２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、−Ｈ、−ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、−Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＮＨ_２または−ＣＯＯＨを表し；
Ｙ^４は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２によって置換されていても良い直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表すか、−ＮＨ_２によって置換されていても良いアリールまたはベンジルを表し、
Ｙ^５は、−Ｈまたは−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＹ^６−ＮＨ_２を表し、
Ｙ^６は、直鎖もしくは分岐のＣ_１−６−アルキルを表し；
または
Ｒ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−または−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−を表し、
Ｒ^１１は、−Ｈ、−ＮＨ_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＣＯＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン（特にはＦまたはＣｌ）、Ｃ_１−４−アルキル、Ｃ_１−４−ハロアルキル、Ｃ_１−４−アルコキシ、ヒドロキシル置換されたＣ_１−４−アルキル、ＣＯＯ（Ｃ_１−４−アルキル）または−ＯＨを表し；
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＨ−または−Ｃ（＝Ｎ−ＮＨ_２）−を表し；
Ｒ^３は、−Ｌ−＃１、−ＭＯＤまたは置換されていても良いアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、複素環アルキル基、好ましくは−Ｌ−＃１またはＣ_１−１０−アルキル、Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_６−１０−アラルキル、Ｃ_５−１０−ヘテロアルキル、Ｃ_１−１０−アルキル−Ｏ−Ｃ_６−１０−アリールまたはＣ_５−１０−複素環アルキル基を表し、それらはそれぞれ、１から３個の−ＯＨ基、１から３個のハロゲン原子、１から３個のハロゲン化アルキル基（それぞれ１から３個のハロゲン原子を有する）、１から３個の−Ｏ−アルキル基、１から３個の−ＳＨ基、１から３個の−Ｓ−アルキル基、１から３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１から３個の−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（＝Ｏ）_ｎ−アルキル基、１から３個の−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−ＮＨ−アルキル基、１から３個の−Ｎ（アルキル）_２基、１から３個の−ＮＨ_２基または１から３個の−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ基によって置換されていても良く、
ｎは、０、１または２を表し、
Ｚは、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、−ＮＨＹ^３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ^１Ｙ^２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、−Ｈ、−ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、−Ｈ、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_３）Ｚ′、−（ＣＨ_２）_０−３−ＣＨ（ＮＨ_２）Ｚ′または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＮＨ_２または−ＣＯＯＨを表し、
Ｒ^５は、−Ｈ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、ハロゲン（特にはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ）、−ＣＮ、ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２Ｆ、ＳＨまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚを表し、
Ｚは、−Ｈ、−ＯＹ^３、−ＳＹ^３、ハロゲン、−ＮＨＹ^３、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＹ^１Ｙ^２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＯＹ^３を表し、
Ｙ^１およびＹ^２は互いに独立に、−Ｈ、−ＮＨ_２または−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｙ^３は、−Ｈまたは−（ＣＨ_２）_０−３Ｚ′を表し、
Ｚ′は、−Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＮＨ_２または−ＣＯＯＨを表し；
Ｒ^６およびＲ^７は互いに独立に、−Ｈ、シアノ、Ｃ_１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ_１−１０−アルキル、Ｃ_２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ_２−１０−アルケニル、Ｃ_２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ_２−１０−アルキニル、ヒドロキシ、−ＮＯ_２、−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨまたはハロゲンを表し、
Ｒ^８は、Ｃ_１−１０−アルキル、フルオロ−Ｃ_１−１０−アルキル、Ｃ_２−１０−アルケニル、フルオロ−Ｃ_２−１０−アルケニル、Ｃ_２−１０−アルキニル、フルオロ−Ｃ_２−１０−アルキニル、Ｃ_４−１０−シクロアルキル、フルオロ−Ｃ_４−１０−シクロアルキルまたは−（ＣＨ_２）_０−２−（ＨＺ^２）を表し、それらは−ＯＨ、−ＣＯＯＨまたは−ＮＨ_２によって同一にまたは異なってモノ置換もしくはジ置換されていても良く、
ＨＺ^２は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される２個以下のヘテロ原子を有する４から７員複素環を表し、
Ｒ^９は、−Ｈ、−Ｆ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆまたは−ＣＨＦ_２を表し；
置換基Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４のうちの一つが−Ｌ−＃１を表し、
Ｌはリンカーを表し、＃１は抗体への結合を表し、
−ＭＯＤは、−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−Ｇ３を表し、
Ｒ^１０は、ＨまたはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−を表し（Ｇ１が−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−を表す場合、Ｒ^１０はＮＨ_２を表さない。）；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖を表し、それは１から１０個の炭素原子を有し、基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^ｙ−、−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^ｙＮＲ^ｙ−の１以上によって１回もしくは複数回中断されていても良く、
Ｒ^ｙは、−Ｈ、フェニル、Ｃ_１−Ｃ_１０−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０−アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_１０−アルキニルを表し、それらはそれぞれ、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって同一にまたは異なって１回もしくは複数回置換されていても良く、および／または−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＲ^ｘ＝Ｎ−Ｏ−によって同一にまたは異なって１回以上中断されていても良く、
Ｒ^ｘは、−Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表し、
側鎖として炭化水素基上で置換されていても良いＣ_１−Ｃ_１０−アルキル基を含む炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮ−ＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、
Ｇ３は、−Ｈまたは−ＣＯＯＨを表し、
基−ＭＯＤは好ましくは、少なくとも１個の基−ＣＯＯＨを有する。］
Ａが−Ｃ（＝Ｏ）−を表す、請求項１に記載の複合体。
Ｒ^１が−Ｈ、−Ｌ−＃１、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″（ＣＨ_２）_１−３ＮＨ_２または−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＺ″ＣＨ_２ＣＯＯＨを表し、Ｚ″が−Ｈまたは−ＮＨ_２を表す、請求項１または２に記載の複合体。
Ｒ^２およびＲ^４が−Ｈを表し、または
Ｒ^２およびＲ^４が一緒になって（ピロリジン環を形成）、−ＣＨＲ^１１−ＣＨ_２−または−ＣＨ_２−ＣＨＲ^１１−を表し；
Ｒ^１１が−Ｈ、−ＣＯＯＨ、Ｆ、メチル、−ＣＨ_２Ｆ、−Ｏメチル、−ＣＨ_２ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ_１−４−アルキル）またはＯＨを表す、請求項１から３のうちの１以上に記載の複合体。
Ｒ^３が−Ｌ−＃１を表し、またはハロゲン、Ｃ_１−３−アルキルまたはフルオロ−Ｃ_１−３−アルキルによってモノ置換もしくは多置換されていても良いフェニル基を表し、または−ＯＹ^４、−ＳＹ^４、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙ^４、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｙ^４、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｙ^４、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｙ^４、−Ｓ（Ｏ）_ｎ−Ｙ^４、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＨ−Ｙ^４、−ＮＨ−Ｙ^４または−Ｎ（Ｙ^４）_２によって置換されていても良いＣ_１−１０−アルキル基もしくはフルオロ−Ｃ_１−１０−アルキル基を表し、
ｎが０、１または２を表し、
Ｙ^４が−Ｈ；ハロゲン、Ｃ_１−３−アルキルもしくはフルオロ−Ｃ_１−３−アルキルによってモノ置換もしくは多置換されていても良いフェニルを表し、または−ＯＨ、−ＣＯＯＨおよび／または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_１−３−アルキルによって置換されていても良いアルキルを表す、請求項１から４のうちの１以上に記載の複合体。
前記複合体が下記式（ＩＩｊ）を有する、請求項５に記載の複合体。

［式中、
Ｒ^３は、−Ｌ−＃１を表し；
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−を表し；
Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、請求項１における式（Ｉ）での場合と同じ意味を有する。］
前記置換基Ｒ^１が−Ｌ−＃１を表す、請求項１から５のうちの１以上に記載の複合体。
前記複合体が下記式（ＩＩｋ）を有する、請求項７に記載の複合体。

［式中、
Ｒ^１は、−Ｌ−＃１を表し；
Ａは、−Ｃ（＝Ｏ）−を表し、
Ｒ^３は、−ＣＨ_２ＯＨを表し；
Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、請求項１における式（Ｉ）での場合と同じ意味を有する。］
Ｒ^５が−Ｈまたは−Ｆを表す、請求項１から８のうちの１以上に記載の複合体。
Ｒ^６およびＲ^７が互いに独立に、−Ｈ、Ｃ_１−３−アルキル、フルオロ−Ｃ_１−３−アルキル、Ｃ_２−４−アルケニル、フルオロ−Ｃ_２−４−アルケニル、Ｃ_２−４−アルキニル、フルオロ−Ｃ_２−４−アルキニル、ヒドロキシまたはハロゲンを表す、請求項１から９のうちの１以上に記載の複合体。
Ｒ^８が分岐Ｃ_１−５−アルキル基またはシクロヘキシルを表す、請求項１から１０のうちの１以上に記載の複合体。
Ｒ^９が−Ｈまたはフッ素を表す、請求項１から１１のうちの１以上に記載の複合体。
前記リンカー−Ｌ−が、下記の基本構造（ｉ）から（ｉｖ）：
（ｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−ＳＧ１−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｉｉ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−Ｌ２−
（ｉｖ）−（Ｃ＝Ｏ）_ｍ−Ｌ１−ＳＧ−Ｌ２
のうちの一つを有し、
ｍが０または１であり、
ＳＧおよびＳＧ１がイン・ビボで開裂可能な基を表し、
Ｌ１が、イン・ビボで開裂できない有機基を表し、
Ｌ２が、バインダーに対するカップリング基を表す、請求項１から１２のうちの１以上に記載の複合体。
前記イン・ビボで開裂可能な基ＳＧが２から８オリゴペプチド基、好ましくはトリペプチド基もしくはジペプチド基またはジスルフィド、ヒドラゾン、アセタールもしくはアミナールであり、ＳＧ１が２から８オリゴペプチド基、好ましくはジペプチド基である、請求項１３に記載の複合体。
前記リンカーＬが、システイン側鎖もしくはシステイン残基に結合しており、下記式を有する、請求項１から１４のうちの１以上に記載の複合体。

［式中、
ｍは、０または１を表し；
§は、活性化合物分子への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
−Ｌ２−は、

を表し、
＃^１は、抗体の硫黄原子への結合箇所を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合箇所を示し、
Ｌ^１は、−（ＮＲ^１０）_ｎ−（Ｇ１）_ｏ−Ｇ２−を表し、
Ｒ^１０は、−Ｈ、−ＮＨ_２またはＣ_１−Ｃ_３−アルキルを表し；
Ｇ１は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−を表し；
ｎは、０または１を表し；
ｏは、０または１を表し；
Ｇ２は、アリール基からの１から１００（好ましくは１から２５）個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖、および／または直鎖および／または分岐アルキル基、および／または環状アルキル基を表し、それは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ−ＣＨ_３−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−もしくは−Ｓ（＝Ｏ）_２−から選択される１から４個の同一もしくは異なるヘテロ原子および／またはヘテロ基を有する５から１０員芳香族もしくは非芳香族複素環によって同一にまたは異なって１回もしくは複数回中断されていても良く、
直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮ−ＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良く、
または下記の基のうちの一つを表し、

Ｒ^ｘは−Ｈ、Ｃ_１−Ｃ_３−アルキルまたはフェニルを表す。］
Ｌ２が、下記式の一方または両方によって表される、請求項１５に記載の複合体。

［式中、
＃^１は、バインダーの硫黄原子への結合箇所を示し、
＃^２は、基Ｌ^１への結合箇所を示し、
Ｒ^２２は、−ＣＯＯＨを表し、
前記バインダーの硫黄原子への結合の８０％より多く（前記バインダーへの前記リンカーの結合総数に基づく）が、これら二つの構造のうちの一つで存在する。］
Ｌ^１が下記式を有する、請求項１５および１６のうちの１以上に記載の複合体。

［式中、ｒは０から８の数字を表す。］
前記リンカー−Ｌ−がシステイン側鎖もしくはシステイン残基に結合しており、下記式を有する、請求項１から１７のうちの１以上に記載の複合体。

［式中、
§は、活性化合物分子への結合を表し、
§§は、抗体への結合を表し、
ｍは、０、１、２または３を表し；
ｎは、０、１または２を表し；
ｐは、０から２０を表し；
Ｌ３は、

を表し、
ｏは、０または１を表し；
Ｇ３は、アリール基からの１から１００（好ましくは１から２５）個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖、および／または直鎖および／または分岐アルキル基、および／または環状アルキル基を表し、それは基−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ−ＣＨ_３−、−ＮＨＮＨ−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＨＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＮＨ−およびＮ、ＯおよびＳ、−Ｓ（＝Ｏ）−もしくは−Ｓ（＝Ｏ）_２−から選択される１から４個の同一もしくは異なるヘテロ原子および／またはヘテロ基を有する５から１０員芳香族もしくは非芳香族複素環の１以上によって同一にまたは異なって１回もしくは複数回中断されていても良く、
前記直鎖または分岐炭化水素鎖は、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨ−ＣＮＮＨ_２、スルホンアミド、スルホン、スルホキシドまたはスルホン酸によって置換されていても良い。］
前記複合体が下記式のうちの一つを有する、請求項１から１８のうちの１以上に記載の複合体ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびエピマー。

［式中、
ＡＫ１は、システインを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、
ＡＫ２は、リジンを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、それは抗体ＴＰＰ−５７０６またはＴＰＰ−３８０３のキメラまたはヒト化変異体であり、
ｎは、１から２０の数字であり；
Ｌ_１は、１から３０個の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖であり、それは、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）_２−、−ＮＨ−、シクロペンチル、ピペリジニル、フェニルによって同一にもしくは異なって、１回または複数回中断されていても良く、
前記直鎖もしくは分岐の炭化水素鎖は、−ＣＯＯＨまたは−ＮＨ_２によって置換されていても良い。］
前記リンカーＬ_１が、下記の基：
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_６−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_４−§§
§−ＮＨ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−（ＣＨ_２）_４−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_３−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｓ（＝Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＯＯＨ）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２ＣＯＯＨ］−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_３）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ_２］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；

§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；

§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_５−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_８−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_４ＣＯＯＨ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−ＣＨ_３］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｓ（＝Ｏ）_２−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−§§；
§−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ［（ＣＨ_２）_２−ＣＯＯＨ］−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（（ＣＨ_２）_２−Ｏ）_４−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２−§§；または
§−ＣＨ_２−Ｓ−（ＣＨ_２）_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ（イソＣ_３Ｈ_７）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_５−§§
を表し、
§が、薬物分子への結合を表し、
§§が、抗体への結合を表し、
イソＣ_３Ｈ_７が、イソプロピル残基を表す、
請求項１９に記載の複合体ならびにそれの塩、溶媒和物、溶媒和物の塩およびＲ／Ｓエナンチオマー。
前記複合体が、下記式のうちの一つを有する、請求項１から１８のうちの１以上に記載の複合体。

［式中、
ＡＫ１は、システインを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、
ＡＫ２は、リジンを介して連結した抗Ｂ７Ｈ３抗体を表し、それは抗体ＴＰＰ−５７０６またはＴＰＰ−３８０３のキメラまたはヒト化変異体であり、
ｎは、１から２０の数字である。］
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体が脱グリコシル化抗体である、請求項１から２１のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体が、ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８またはそれの抗原結合性断片によって産生される抗体である、請求項１から２２のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体が、ハイブリドーマＰＴＡ−４０５８またはそれの抗原結合性断片によって産生される抗体のキメラまたはヒト化変異体である、請求項１から２３のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が配列番号４１に示したようにポリペプチドに結合している、請求項１から２４のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が、
配列番号２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号１２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号１３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号１４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号１６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号１７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号１８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号２２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号２３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号２４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号２６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号２７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号２８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖、または
配列番号３２に示した重鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３３に示した重鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号３４に示した重鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変重鎖、および
配列番号３６に示した軽鎖の可変ＣＤＲ１配列、配列番号３７に示した軽鎖の可変ＣＤＲ２配列、および配列番号３８に示した軽鎖の可変ＣＤＲ３配列を含む可変軽鎖
を含む、請求項１から２５のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が、
配列番号１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号１１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号１５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号２１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号２５に示した軽鎖の可変配列、または
配列番号３１に示した重鎖の可変配列、さらに配列番号３５に示した軽鎖の可変配列
を含む、請求項１から２６のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体がＩｇＧ抗体である、請求項１から２７のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が、
配列番号９に示した重鎖の配列、さらに配列番号１０に示した軽鎖の配列、または
配列番号１９に示した重鎖の配列、さらに配列番号２０に示した軽鎖の配列、または
配列番号２９に示した重鎖の配列、さらに配列番号３０に示した軽鎖の配列、または
配列番号３９に示した重鎖の配列、さらに配列番号４０に示した軽鎖の配列
を含む、請求項１から２８のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が、抗体ＴＰＰ６６４２またはＴＰＰ６８５０のうちの一つのヒト化変異体である、請求項１から２９のうちの１以上に記載の複合体。
前記抗Ｂ７Ｈ３抗体またはそれの抗原結合性断片が、
置換Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｙ、Ｖ３４Ｍ、Ｔ５０Ｉ、Ｆ５２Ｎ、Ｇ５４Ｓ、Ｎ５５Ｇ、Ｄ５７Ｓ、Ｎ６１Ａ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ｋ６７Ｒ、Ｔ７２Ｒ、Ａ７９Ｖを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号１９に示した重鎖の配列、および
置換Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｑ４０Ｐ、Ｓ４３Ａ、Ｑ４５Ｋ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓ、Ｐ９６Ｌを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号２０に示した軽鎖の配列、または
置換Ｉ３１Ｓ、Ｎ３３Ｇ、Ｖ３４Ｉ、Ｈ３５Ｓ、Ｉ３７Ｖ、Ｔ５０Ｗ、Ｆ５２Ｓ、Ｐ５３Ａ、Ｇ５４Ｙ、Ｄ５７Ｎ、Ｓ５９Ｎ、Ｎ６１Ａ、Ｆ６４Ｌ、Ｋ６５Ｑ、Ｄ６６Ｇ、Ａ６８Ｖ、Ｌ７０Ｍ、Ｋ７４Ｔ、Ｋ７７Ｓ、Ａ１０７Ｑを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号２９に示した重鎖の配列、および
置換Ｅ２７Ｑ、Ｎ２８Ｓ、Ｎ３０Ｓ、Ｎ３１Ｓ、Ｔ３４Ｎ、Ｆ３６Ｙ、Ｖ４８Ｉ、Ｈ５０Ａ、Ｋ５２Ｓ、Ｔ５３Ｓ、Ａ５５Ｑ、Ｅ５６Ｓ、Ｑ７０Ｄ、Ｈ９０Ｑ、Ｈ９１Ｓ、Ｇ９３Ｓを含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸置換を含む配列番号３０に示した軽鎖の配列
を含む、請求項１から３０のうちの１以上に記載の複合体。
不活性な無毒性の医薬として好適な補助剤と組み合わせて請求項１から３１のうちの１以上に記載の複合体を含む医薬組成物。
疾患の治療および／または予防方法で使用される請求項１から３２のうちの１以上に記載の複合体。
過剰増殖性障害および／または血管新生性障害の治療方法で使用される請求項１から３３のうちの１以上に記載の複合体。