JP2015007117A - 眼内徐放型ドラッグ送達システムおよび眼症状を処置する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】高眼圧を治療するための、前房内または前部硝子に設置するための生体適合性、生体内分解性の徐放型インプラントおよびマイクロスフェアを提供する。【解決手段】上昇した眼圧を処置するための方法であって、前記方法は、眼圧が上昇（ＩＯＰ）した患者に、降圧剤と生分解性ポリマーとを含む徐放型インプラントを前房内または前部硝子体に投与するステップを含み、前記インプラントは約１０質量パーセント〜約５０質量パーセントの降圧剤と、約５０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記インプラントは治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。【選択図】図１

Description

Michael R. Robinson、James A. Burke、Hui Liu、Werhner C. Orilla、Lon T. Spada、Scott Whitcup、Alazar N、GhebremeskelPatrick M. Hughes、Kun XuおよびMarianne M. Doによる。

関連出願の相互参照
本出願は、２００９年３月２５日に出願された米国特許非仮出願第１２／４１１，２５０号の利益を主張し、その開示全体は、この特定の参照によって本明細書に組み込まれる。

本発明は、眼内システムおよび眼状態を処置する方法に関する。特に、本発明は、緑内障の症状または緑内障のリスクを示すこともあり得る、眼圧が上昇した（すなわち高血圧状態）前眼房を処置するために、徐放型ドラッグ送達システム（すなわち薬物組込みマイクロスフェアおよび／またはインプラント）の、前眼房への局所投与（すなわち前房内投与）および／または眼の前硝子体腔への局所投与に関する。

我々の発明によるドラッグ送達システムは、薬物を含有するインプラント（単一の一体化徐放ドラッグ送達システム）もしくはインプラント類または複数の薬物を含有するマイクロスフェア類（「微小粒子」と同義語）であり得る。本ドラッグ送達システムを治療的に用いて、眼疾患または状態、たとえば上昇した眼圧および／または緑内障を処置することができる。緑内障は、眼房眼圧（ＩＯＰ）の上昇によって特徴づけられる眼の疾患である。緑内障を処置しないとは、失明をもたらすこともあり得る。緑内障は、原発性または続発性の緑内障であり得る。成人における原発性緑内障（先天性緑内障）は、開放隅角緑内障または急性もしくは慢性の閉塞隅角緑内障のいずれかであり得る。続発性緑内障は、既存する眼疾患、たとえばブドウ膜炎、眼内腫瘍または白内障の拡大に起因する。種々の降圧剤を用いて、ＩＯＰを低下させ、緑内障が処置されている。たとえば、いくつかのプロスタグランジンおよびそれらの類似体ならびに誘導体、たとえば、ＰＧＦ_2α誘導体（プロスタグランジンＦ２α類似体と呼ばれることもある）ラタノプロスト（Ｘａｌａｔａｎ（登録商標）の商標下で販売されている）を用いて、高眼圧症および緑内障が処置されている。眼内プロスタグランジンおよびプロスタミドのインプラント類およびマイクロスフェア類は、たとえば米国特許出願第１１／３６８，８４５号、１１／３０３，４６２号、１０／８３７，２６０号、および１２／２５９，１５３号によって開示されている。とりわけ注目すべきは、第１２／２５９，１５３号の３６頁から４７頁の実施例１から５である。米国特許出願第１１／９５２，９３８号も興味深い。さらに、米国特許第５９７２３２６号および５９６５１５２号も興味深い。

緑内障の従来の処置は、ＩＯＰを低下させるために降圧剤を含有する点眼剤を毎日適用することによる。点眼剤を定期的に毎日使用ことに対する患者の遵守率は、低いことが多い。たとえば、Ｎｏｒｄｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ． ＡＪＯ ２００５； １４０：５９８を参照されたい。さらに、眼感染症が、不適当な点眼剤使用に起因することがある。したがって、たとえば、診療所への来院時に簡便に投与できる高眼圧のための長期（すなわち徐放型）処置方法が求められている。したがって、上昇したＩＯＰおよび／または緑内障を処置するための眼内治療用途の眼内徐放型ドラッグ送達システム（インプラント類および／またはマイクロスフェア類を含む）を提供することは、有利であろう。

本発明はこの必要性を満たし、かつ眼内徐放型ドラッグ送達システムと、該ドラッグ送達システムを作製するための過程と、該ドラッグ送達システムを用いて眼状態を処置するための方法とを提供する。眼内徐放型ドラッグ送達システムは、１つまたは複数の治療的な降圧剤（たとえばプロスタグランジンまたはラタノプロスト等のプロスタミド）の持続放出を提供するのに有利なインプラントまたはマイクロスフェアの形状である。
定義

以下の定義を本明細書で使用する。

「約」とは、数、パラメータもしくはそのように限定された特性のプラスまたはマイナス１０パーセントを意味する。

「マイクロスフェア」および「微小粒子」は、同義語として使用され、前房内へ投与されるよう構築され、大きさに作られる、またはさもなければ形成される、小径のもしくは寸法（以下を参照されたい）のデバイスまたは要素をいう。マイクロスフェアまたは微小粒子としては、治療薬をカプセル封入したまたは組み込んだ生体適合性マトリックスを成す粒子、マクロもしくはナノスフェア、小断片、微小粒子、ナノ粒子、微粉体等が挙げられる。マイクロスフェアは通常、眼の生理的条件で生体適合性であり、有意な有害副作用を引き起こさない。本明細書に開示するように作製されかつ使用されるマイクロスフェアは、眼の視力を混乱させることなく、前房内へ投与され、かつ安全に用いられることができる。マイクロスフェアは、１ｍｍ未満の最大寸法、たとえば直径または長さを有する。たとえば、微小粒子は、約５００μｍ未満の最大寸法を有することが可能である。マイクロスフェアは、約２００μｍを超えない、好ましくは３０μｍ以上から約５０μｍまで、または約７５ミクロンまでの最大寸法を有することも可能である。「インプラント」とは、マイクロスフェアよりもかなり大きいドラッグ送達デバイスである。多数（すなわ、数百または数千）のマイクロスフェアが眼状態（たとえば緑内障）を処置するために投与されるのに対して、通常わずか１から多くても６のインプラントが同じ目的で投与される。

「眼領域」または「眼部位」とは、前眼部および後眼部を含む眼球の領域を意味する。通常、眼球内で見られるいずれかの機能的組織（たとえば視力のための）もしくは構造的組織、または眼球の内部もしくは外部を部分的にもしくは完全に裏打ちする組織類もしくは細胞層が含まれるが、これらに限定されない。眼領域内の眼球領域の具体的な例としては、前（眼）房、後眼房、硝子体腔、脈絡膜、上脈絡膜腔、結膜、結膜下腔、強膜外隙、角膜内腔、角膜外腔、強膜、毛様体扁平部、外科的に誘導された無血管領域、黄斑、および網膜が含まれる。

「眼状態」とは、眼、または眼の部分もしくは領域のうちの１つに影響を及ぼすまたは関わる疾患、病気もしくは状態を意味する。概して、眼は、眼球と、眼球を構成する組織および液体と、眼周囲の筋肉（たとえば斜筋および直筋）と、眼球内もしくは近傍にある視神経の部分とを含む。

前眼部状態は、前方（すなわち眼の前面）眼領域または部位、たとえば眼周囲筋肉、眼瞼または眼球の組織または水晶体嚢もしくは毛様筋の前部から後壁に位置する液体に影響を及ぼす、または関わる疾患、病気または状態である。このように、前眼部状態は、主に結膜、角膜、前眼房、虹彩、後眼房（網膜の後ろだが、水晶体嚢の後壁の前面）、水晶体もしくは水晶体嚢、および前眼部領域もしくは部位を血管新生するまたは神経支配する血管および神経に影響を及ぼすか、または関わる。

したがって、前眼部状態としては、たとえば無水晶体；偽水晶体；乱視；眼瞼けいれん；白内障；結膜疾患；結膜炎；角膜疾患；角膜潰瘍；眼球乾燥症候群；眼瞼疾患；涙器疾患；涙道閉塞；近視；老視；瞳孔障害；屈折障害および斜視等の疾患、病気または状態が挙げられる。緑内障処置の臨床目的は、眼の前眼房内の房水の血圧上昇を低下させる（すなわち眼圧を低下させる）ことができることであるので、緑内障も前眼部状態であるとみなすことができる。

後眼部状態は、主に後眼領域もしくは部位、たとえば脈絡膜または強膜（水晶体嚢の後壁を通る面に対して後方の位置の）、硝子体、硝子体腔、網膜、視神経（すなわち視神経円板）、および後眼領域もしくは部位を血管新生するまたは神経支配する血管および神経に影響を及ぼすか、または関わる疾患、病気または状態である。

したがって、後眼部状態は、たとえば急性黄斑の視神経網膜障害；ベーチェット病；脈絡膜新生血管；糖尿病性ブドウ膜炎；ヒストプラスマ症；感染症、たとえば真菌もしくはウイルスによる感染症；黄斑変性症、たとえば急性黄斑変性症、非滲出性加齢黄斑変性症および滲出性加齢黄斑変性症；浮腫、たとえば黄斑浮腫、嚢胞様黄斑浮腫および糖尿病性黄斑浮腫；多病巣性脈絡膜炎；後方眼部位または位置に影響を及ぼす眼球損傷；眼腫瘍；網膜障害、たとえば網膜中心静脈閉塞症、糖尿病性網膜症（増殖性糖尿病性網膜症を含む）、増殖性硝子体網膜症（ＰＶＲ）、網膜中心動脈閉塞症、網膜剥離、ブドウ膜網膜疾患；交感神経眼炎；Ｖｏｇｔ・小柳・原田（ＶＫＨ）症候群；ブドウ膜拡散；眼のレーザー処置に起因するまたは影響される後眼部状態；光線力学的治療、光凝固、放射線網膜症、網膜上膜疾患、網膜静脈分枝閉塞症、前部虚血性視神経症、非網膜症糖尿病性網膜機能不全、網膜色素変性症、および緑内障によって起因するまたは影響される後眼部状態等の疾患、病気または状態を含むことができる。緑内障は、後眼部状態とみなされることができる。それは、その治療目的が、網膜細胞もしくは視神経細胞への損傷または損失に起因する視力喪失を防止すること、または視力喪失の発生を低減させること（すなわち神経保護）にあるからである。

「生分解性ポリマー」とは、ｉｎ ｖｉｖｏで分解するポリマーまたはポリマー類を意味し、該ポリマーまたはポリマー類の経時侵食が、治療薬の放出と同時にまたは放出に続いて発生する。用語「生分解性の」および「生体内分解性の」は、同等であり、かつ本明細書では互換的に用いられる。生分解性ポリマーは、２つ以上の異なるポリマー単位を含むホモポリマー、コポリマー、またはポリマーであり得る。ポリマーは、ゲル型もしくはヒドロゲル型のポリマー、ＰＬＡポリマーもしくはＰＬＧAポリマーまたはその混合物もしくは誘導体であり得る。

「治療有効量」とは、眼状態を処置するために、または眼に対してもしくは眼の領域に対して著しいマイナスの副作用または有害副作用を起こすことなく眼の損傷もしくは損害を減少させるまたは防止するために必要とされる薬剤の濃度もしくは量を意味する。上記の点を考慮して、治療薬、たとえばラタノプロストの治療有効量は、眼状態の少なくとも１つの症状を減少させるのに有効な量である。

我々の発明の範囲内でのインプラントおよびマイクロスフェアは、降圧剤を含有するインプラントまたはマイクロスフェアの眼内（すなわち前房内）への投与後、比較的長期にわたり、たとえば少なくとも約１週間の間、もしくはたとえば約２ヵ月と約６ヵ月の間、降圧剤を放出することができる。このような持続放出期間のために、良好な治療結果を容易に得られる。好ましくは、眼内徐放型ドラッグ送達システムは、前房内（すなわち眼の眼房（前眼房とも呼ばれる）内に）または眼の後眼房（硝子体腔とも呼ばれる）の前方部分のいずれかに投与される。

我々の発明の一実施形態は、眼状態を処置するための眼内使用用の医薬組成物である。該組成物は、生体侵食性ポリマーから作られている複数のマイクロスフェア、およびマイクロスフェアに含有される降圧剤、たとえばラタノプロスト、ビマトプロスト、およびトラボプロストならびにそれらの塩類、エステル類および誘導体を含むことができる。マイクロスフェアは、該ポリマーの約１質量％〜約９９質量％を成すことができ、および該ポリマーは、ＰＬＧＡおよび／またはＰＬＡであり得る。さらに、マイクロスフェアは、約５ミクロン〜約１ｍｍの範囲の平均最大寸法を有することができ、たとえばマイクロスフェアは、約１５ミクロンと約５５ミクロンの間の平均径を有することができ、および治療薬は、マイクロスフェアの約０．１質量％〜約９０質量％、たとえば、約８質量％〜１５質量％のラタノプロストを成すことができる。

我々の発明の別の実施例では、該組成物は、高粘性ヒアルロン酸を含むことができ、および処置される眼状態は緑内障であり得る。我々の発明の詳細な実施形態は、ＰＬＧＡおよび／またはＰＬＡから作られる複数のマイクロスフェアと、該マイクロスフェアによって含有されるラタノプロストと、高粘性ヒアルロン酸とを含む、緑内障を処置するための眼内使用用の医薬組成物である。我々の発明の別の実施形態は、緑内障を処置するための眼内使用用の医薬組成物であり、該組成物は、ＰＬＧＡポリマー、ＰＬＡポリマー、およびＰＥＧ共溶媒から作られる徐放型インプラントと；該インプラントに含有されるラタノプロストとを含み、該インプラントが約３０質量パーセントのラタノプロストを含み、該インプラントが少なくとも２０、３０、４０、５０、６０、７０、または最高１８０日の間の期間にわたりラタノプロストを放出することができる。

我々の発明の別の実施形態は、緑内障を処置する方法であり、該方法は、上述のインプラントまたはＰＬＧＡおよび／もしくはＰＬＡから作られた複数のマイクロスフェアと；該マイクロスフェアもしくはインプラントに含有されるラタノプロストまたは降圧剤ＥＰ２作動薬と、高粘性ヒアルロン酸（ＨＡ）とを含む医薬組成物を緑内障患者に眼内投与し、それによって緑内障を治療することを含む。好ましくは、ＨＡは複数のマイクロスフェア製剤と共に用いられるが、投与される単一のインプラント共に用いられない。マイクロスフェアは、投与ステップの後、少なくとも約１週間、降圧剤を放出することができる。眼内投与ステップは、テノン嚢下腔、たとえば前方テノン嚢下腔への注射によって行われることが可能であり、医薬組成物は、ベースライン眼圧を２０％まで、３０％まで、４０％までもしくは最高５０％またはそれを超えて低下させることによって緑内障を処置する。

我々の発明は、眼圧が上昇した患者に、３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性マイクロスフェアを前房内に投与することによって眼圧の上昇を処置する方法を包含し、該マクロスフェアは、約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントの降圧剤と、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、該マイクロスフェアが、治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する。生分解性ポリマーは、ポリ乳酸−ポリグリコール酸コポリマー（ＰＬＧＡ）および／またはポリ乳酸ポリマー（ＰＬＡ）から成り得る。降圧剤は、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびトラボプロストならびにそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグであり得る。あるいは、降圧剤は、化合物Ａ〜Ｏ（ＥＰ２受容体作動薬である）（以下に図示する）のうちの１つまたは複数、ならびにそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグであり得る：

化合物Ａ
化合物Ｂ

化合物Ｃ

化合物Ｄ

化合物Ｅ

化合物Ｆ

化合物Ｇ

化合物Ｈ

化合物Ｉ

化合物Ｊ

化合物Ｋ

化合物Ｌ

化合物Ｍ

化合物Ｎ

化合物Ｏ

我々の発明の一実施形態は、ドラッグ送達システムの一部として高粘性ヒアルロン酸を含む。我々の発明の詳細な実施形態は、眼圧が上昇した患者に、３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性マイクロスフェアを前房内に投与することによって上昇した眼圧を処置するための方法であり、該マイクロスフェアは約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントのラタノプラストと、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、該マイクロスフェアが治療有効量のラタノプロストを約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する。

我々の発明のさらに詳細な実施形態は、眼圧が上昇した患者にラタノプロストと生分解性ポリマーとを含む徐放型ロッド状インプラントを線維柱帯網に対して、前房内に投与することによって上昇した眼圧を処置するための方法であり、該インプラントは約１０質量パーセント〜約５０質量パーセントの降圧剤と、約５０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、該インプラントが治療有効量のラタノプロストを約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する。

我々の発明は、眼状態を処置するための眼内使用用医薬組成物も含み、該組成物は３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性マイクロスフェアを含み、該マイクロスフェアは約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントの降圧剤と、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、該マイクロスフェアが治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する。該マイクロスフェアは、約１質量パーセント〜約９９質量パーセントのポリマーを含むことができる。

我々の発明の最も好ましい実施形態は、眼内に配置される、徐放型、ロッド状で単一の一体化（すなわち降圧剤はポリマーマトリックスのインプラント全体にわたり均一に分布される（すなわちリザーバー型インプラントは、我々の発明の最も好ましい実施形態の範囲から除外される））インプラント（治療量の降圧剤を含有する）であり、該インプラントは長さが約２ｍｍ〜約４ｍｍおよび幅が約０．５ｍｍ〜約２ｍｍであり、シリンジ型（すなわち２２ゲージ）アプリケーター（注射器）を用いて、線維柱帯網に対して６時または１２時の位置に移植される。円板インプラントは好ましくない。線維柱帯網にうまく隣接せずおよび／または線維柱帯網に隣接した位置にとどまらないからである。小型のロッド状インプラント（上述の寸法を有する）を線維柱帯網に対して配置して、眼房の流れを活用し、かつ線維柱帯網に流体を引き入れることで、線維柱帯網に対する位置にインプラントを保持し、それによって、インプラントがその設置位置から流れることを防ぐ。この最も好ましい実施形態により、インプラントを安定に配置すると視力がぼやけることもなく、かつ虹彩擦傷もない。

特に添付の図面と併せて考慮すると、本発明のさらなる態様および利点は、以下の発明を実施するための形態および特許請求の範囲に記述されている。

線維柱帯内の大きな孔を通って近傍小管領域（垂直矢印で示す）への房水の流れる方向（水平矢印）を示す、正常なヒト眼の前房隅角の領域を示す断面図である。 前眼房内に設置されたマイクロスフェアを下方に示すと共に前眼房内の房水の対流を矢印で示す模式図である。 図３Ａは初期視のウサギ眼の外部写真である。図３Ｂはフルオレセインインプラント（矢印）の移植から２日後にＨｅｉｄｅｌｂｅｒｇ ＨＲＡ画像装置上に配置したフルオレセインフィルタによる図３Ａのウサギ眼の画像である。図３Ｃは下方に回転させたウサギ眼の外部写真である図３Ｄはフルオレセインインプラントの移植から７日後のＨＲＡによる図３Ｃのウサギ眼の画像である。該インプラントから放出されたフルオレセインの分布（矢印）を示している。 日数の経過（ｘ軸）とともに、製剤Ａマイクロスフェアからｉｎ ｖｉｔｒｏ（０．１％トリトンを含むＰＢＳ）で放出されたラタノプロスト（ｙ軸）の累積％を示すグラフである。 日数の経過（ｘ軸）とともに、製剤Ｂマイクロスフェアからｉｎ ｖｉｔｒｏ（０．１％トリトンを含むＰＢＳ）で放出されたラタノプロスト（ｙ軸）の累積％を示すグラフである。 ベースラインＩＯＰからのパーセント変化をｙ軸に、ドラッグ送達デバイスの眼内投与からの日数をｘ軸にとるグラフである。図６の結果は、製剤Ａ徐放型マイクロスフェアをイヌ（ビーグル）の左眼に前房内注射した後に得られた（図６での実線：「ＡＰＩ」）。フェロー（右）対照眼（図６での点線：「対照」）は、ＩＯＰの減少を何ら示していない。 実施例５のビマトプロストの棒状のインプラント（「ＡＰＩ」）を前房内投与してから８４日間にわたる、被験イヌ眼のベースライン眼圧（ｙ軸）対日数（ｘ軸）のパーセント変化を示すグラフである。約５０％〜６０％のＩＯＰ降下が８４日の観察期間を通して維持されたことを示している。フェロー（左または「対照」）眼にはプラセボ（ビマトロプロストを含まない）インプラントが投与された。

経強膜送達は、眼局所（すなわち点眼薬）ならびに強膜内（すなわち結膜下またはテノン嚢下）配置（たとえば、注射、挿入または移植による）による薬剤投与を含む。我々の発明は、経強膜送達が、上昇した眼圧の処置のために眼房または硝子体腔の標的組織に降圧剤（薬物または生物学的薬剤）を投与する非効率的な方法であるという観察に基づいている。我々がそう確信する理由は、経強膜薬物送達を妨げている３種類のバリア、すなわち静的、動的、および代謝のバリアが明らかに存在することにある。薬物拡散に対して物理的なバリアをもたらす眼組織（強膜、脈絡膜−Ｂｒｕｃｈ膜、網膜色素上皮）は、静的バリアを損なう。動的バリアは、主に結膜に位置する血管およびリンパ管を介する薬物クリアランス機序、前方から後方に網膜を通るバルク流体の流れ、および脈絡毛細管と強膜を介するクリアランス、および網膜色素上皮のトランスポータータンパク質によって生成される。代謝バリアも眼内に存在し、かつ強膜に投与された薬物の急速な分解によって眼内への薬物浸透を減少させる。動的バリアが、高眼圧症および緑内障を処置するための、眼の前面（前眼房）への治療薬の経強膜（すなわちテノン嚢下）送達にとって最も重要なバリアであると思われる。

本明細書に記載の眼内徐放型ドラッグ送達システム（降圧剤を含有するインプラントまたはマイクロスフェアを含む）の直接的前房内投与または前部硝子体腔内投与が、強い経強膜の薬物クリアランス機序を迂回することによって、眼状態、たとえば、眼圧の上昇に特徴づけられる緑内障を処置するのに、効果的に役立ち得るという発見に我々の発明は基づいている。

眼圧（ＩＯＰ）を低下させかつ経強膜バリアの攻撃的クリアランスを回避するための、薬物を眼の前面（眼前房）に送達する適切な代替部位の存在を我々は決定した。毛様体扁平部を介しての前房内注射（すなわち前眼房への直接注射）および前部硝子体注射は、経強膜バリアを効果的に回避し、かつ眼降圧化合物の有効性を改善する。重要なことに、我々が発見したことは、前眼房の独特の生体構造および生理機能の理由から房内ドラッグ送達システムが、新しい徐放型ドラッグ送達システムの物理的特性の開発を必要とし、かつ治療効果のために必要とされることであった。たとえば、前眼房では房水流の速度が速い。このためにＩＯＰ降下薬を含有する徐放型マイクロスフェアを効果的に除去して、他のポリマー送達システムの分解を促進し得る。限外濾過と呼ばれる過程を介して、房水は毛様体によって、特に毛様体の非色素上皮によって後眼房に分泌される。房水は、水晶体の前面と虹彩の後ろの間の狭い間隙を通って流れ、瞳孔を介して前眼房に流れ出る。房水は、ヒトにおいて最初は１０ミクロンから３０ミクロン未満の範囲の孔径を有する線維柱帯網に、全方向３６０度で流れ出る（図１を参照されたい）。図１は、眼の前眼房隅角の領域を示す断面図であり、線維柱内の大きな孔（約１０ミクロン〜３０ミクロン未満）を通って流れる房水の方向（水平矢印）および近傍小管の領域を通って徐々に流れる（垂直矢印で示す）房水を示す。近傍小管領域で孔はシュレム管に入る前には約６ミクロンまで縮小する。房水はシュレム管を通って流れ出て、２５〜３０の集合管を通って眼から房水静脈に出て、最終的に上強膜血管系および眼窩の静脈に流れ出る（図２を参照されたい）。図２は、前眼房での房水対流を矢印で示す模式図である。下方に配置された眼降圧剤を放出するマイクロスフェアを示す。ポリマーマイクロスフェア（またはインプラント）から溶出する遊離薬物は、房水対流（矢印）に入る。次いで、遊離薬物は前眼房全体にうまく分散して、虹彩根部領域を介し、標的組織、たとえば線維柱帯網および毛様体領域に入る。

前房内注射の別の利点は、前眼房が体内の免疫特権部位であり、異物、たとえばポリマードラッグ送達システムに対して反応する可能性が低いことである。これは、異物に対する炎症反応がよく起こるテノン嚢下腔の場合はそうではない。免疫特権を与える免疫調節因子を含んでいる前眼房に加えて、３０ミクロンを超える粒径の粒子は、免疫原性が少なく、眼性炎症を引き起こす傾向が低い。眼内の在住マクロファージは、異物または感染病原体との防御の最前線であるが、しかし３０ミクロンより大きい粒子を貪食するのは難しい。したがって、３０ミクロンより大きい粒子は、マクファージ活性化およびそれに続く炎症カスケードを起こす可能性が低い。

ポリマー放出システムにより薬物を房水に送達する効率が、テノン嚢下への投与よりも前房内部位への投与の方が極めて大きいことを我々は見出した。したがって、テノン嚢下腔に送達される薬物の１％未満が房水に入るが、前房内システムから放出される薬物の１００％が房水に入ることになる。したがって、テノン嚢下と比較して、効果的な前房内ドラッグ送達システムに必要な薬物負荷は低くなり、その結果として、全身の薬物曝露が少なくなると予想される。加えて、たとえばプロスタグランジン類似体等の薬物を送達するとき、結膜が医薬品成分に曝露されることが少なくなり、かつ結膜充血を発現する傾向が少なくなる。最後に、前房内注射の後に、薬物は、房水静脈を経て結膜／上強膜の血管に入ることになる。これにより、結膜の血管外間隙に拡散して存在する高濃度の薬物によって複数の血管が拡張するリスクがあるテノン嚢下の注射と比較して、プロスタグランジン類似体による結膜充血を最小限に抑えることが可能になる。眼への直接注射は、防腐剤の必要性も除去する。防腐剤は局所的な点眼剤に用いられるとき、眼表面を刺激し得る。

本明細書に開示される前房内および硝子体内の徐放型ドラッグ送達システムで活性剤として使用するのに適した降圧剤には、以下が含まれる：
プロスタグランジン、プロスタミドおよび血圧降下脂質（たとえば、ビマトロプロスト（Ｌｕｍｉｇａｎ）（ビマトロプロストは、房水のブドウ膜強膜路を増加させ、ならびに線維柱帯の流出を増加させる）および米国特許第５，３５２，７０８号に記載の化合物）。
プロスタグランジンは、種々の哺乳類の組織で生成される薬理活性ホルモン様物質の種類である。プロスタグラジンは、アラキドン酸に由来し、血圧、平滑筋の収縮および炎症を含む広範囲にわたる生理機能を仲介する。プロスタグランジンの例としては、プロスタグランジンＥ₁（アルプロスタジル）、プロスタグランジンＥ₂（ジノプロストン）、ラタノプロスト、およびトラボプロストがある。ラタノプロストおよびトラボプロストは、実際にはプロスタグランジンプロドラッグ（すなわちプロスタグランジンの１−イソプロピルエステル）であるが、１−カルボン酸に加水分解された後にプロスタグランジンＦ受容体に作用するので、プロスタグランジンと呼ぶ。プロスタミド（プロスタグランジン−エタノールアミドとも呼ばれる）は、プロスタグランジン類似体であり、プロスタグランジンとは薬理学的に異なり、（すなわちプロスタミドは、プロスタグランジンが作用するのと異なる細胞受容体（プロスタミド受容体）に作用するために）、かつ内在性カンナビノイド（たとえばアナンダミド）のシクロオキシゲナーゼ−２（「ＣＯＸ−２」）酵素酸素化の産物として形成される中性脂質である。さらに、プロスタミドは、ｉｎ ｓｉｔｕでカルボン酸に加水分解しない、プロスタミドの例としては、ビマトプロスト（１７−フェニルプロスタグランジンＦ_2αで合成的に作られたエチルアミド）およびプロスタミドＦ_2α、
プロスタグランジン類似体（プロスタグランジン類似体は、房水のブドウ膜強膜流出を増加させる）（すなわちラタノプロスト（Ｘａｌａｔａｎ）、トラボプロスト（Ｔｒａｖａｔａｎ）、ウノプロストン；ＥＰ２／ＥＰ４受容体作動薬；
βアドレナリン受容体拮抗薬（毛様体によって房水産生を減少させる、たとえばチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロール、およびプロプラノロール）；
αアドレナリン受容体作動薬、たとえばブリモニジン（Ａｌｐｈａｇａｎ）およびアプラクロニジン（アイオピジン）（房水の産生を減少させて、ブドウ膜強膜路を増加させる二重機序によって作用する）;
選択性の低い交感神経模倣薬、たとえばエピネフリンおよびジピベフリン（Ｐｒｏｐｉｎｅ）（線維柱帯網を通って、あるいはブドウ膜強膜流出路を通って作用し、おそらくβ２−作動薬の作用によって、房水の流出を増加させる）；
ピロカルピン（毛様筋の収縮、線維柱帯網を締めること、および眼房水の流出増加を可能にすることによって作用する）等の縮瞳薬（副交感神経作動薬）;
炭酸脱水酵素阻害薬、たとえばドルゾラミド（Ｔｒｕｓｏｐｔ）、ブリンゾラミド（Ａｚｏｐｔ）、アセタゾラミド（Ｄｉａｍｏｘ）（毛様体内で炭酸脱水酵素を阻害することによって房水分泌を低下させる）；
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤（線維柱帯網のアクチン細胞骨格を破壊することによってＩＯＰを低下させる）；
カルシウムチャネル遮断薬；
バプタン（バソプレシン受容体拮抗剤）；アネコルタブ酢酸エステルおよび類似体；
エタクリン酸；
カンナビノイド；
カルテオロール、レボブノロール、メチプラノロール、チモロール半水和物、マレイン酸チモロール、ベタキソロール等のβ１選択的拮抗薬を含むβ遮断薬（またはβアドレナリン拮抗薬）；
非選択的アドレナリン作動薬、たとえばホウ酸エピネフリンホウ、塩酸エピネフリン、およびジピベフリン；
α₂選択的アドレナリン作動薬、たとえばアプラクロニジンおよびブリモニジン；
アセタゾラミド、ジクロルフェナミド、メタゾラミド、ブリンゾラミド、およびドルゾラミドを含む炭酸脱水酵素阻害薬；
たとえばカルバコール、塩酸ピロカルピン等の直接作用コリン作動薬を含むコリン作動薬；硝酸ピロカルビンおよびピロカルピン；
コリンエステラーゼ阻害剤、たとえばデメカリウム、エコチオパートおよびフィゾスチグミン；
グルタミン酸塩拮抗剤；
メマンチン、アマンタジン、リマンタジン、ニトログリセリン、デキストロルファン、デキストロメトルファン、ジヒドロピリジン、ベラパミル、エモパミル、ベンゾチアゼピン、ベプリジル、ジフェニルブチルピペリジン、ジフェニルピペラジン、フルスピリレン、エリプロジル、イフェンプロジル、チバロシン、フルナリジン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、バルニジピン、ベラパミル、リドフラジン、プレニラミン乳酸塩、およびアミロリドを含むカルシウムチャネル遮断薬；プロスタミド、たとえばビマトプロスト、またはその薬学的に許容される塩類もしくはプロドラッグ；ならびにトラボプロスト、クロプロステノール、フルプロステノール、１３，１４−ジヒドロ−クロプロステノール、イソプロピルウノプロストン、およびラタノプロストを含むプロスタグランジン；
ＡＲ−１０２（Ａｅｒｉｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から入手可能なプロスタグランジンＦＰ作動薬；
ＡＬ−３７８９（アネコルタブ酢酸エステル、Ａｌｃｏｎから入手可能な血管新生抑制ステロイド）；
ＡＬ−６２２１（トラボプロスト（Ｔｒａｖａｔａｎ）、プロスタグランジンＦＰ作動薬）；
ＰＦ−０３１８７２０７（Ｐｆｉｚｅｒから入手可能な一酸化窒素供与性プロスタグランジン）；
ＰＦ−０４２１７３２９（こちらもＰｆｉｚｅｒから入手可能）；
ＩＮＳ１１５６４４（Ｉｎｓｐｉｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なラトランクリンＢ化合物）；
ＩＮＳ１１７５４８（こちらもＩｎｓｐｉｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なＲｈｏキナーゼ阻害剤）。

眼降圧剤の組み合わせ、たとえばβ遮断薬とプロスタグランジン類似体の組み合わせも、本送達システムで用いることができる。これらには、Ｇａｎｆｏｒｔ（ビマトプロスト／チモロール）、ＥｘｔｒａｖａｎまたはＤｕｏｔｒａｖ（トラボプロスト／チモロール）、Ｘａｌｃｏｍ（ラタノプロスト／チモロール）、Ｃｏｍｂｉｇａｎ（ブリモニジン／チモロール）、およびＣｏｓｏｐｔ（ドルゾラミド ／チモロール）が含まれる。ＩＯＰ降下薬との併用で、神経保護を与える薬剤も、本送達システムに配置されることが可能であり、メマチンおよびセロトニン作動薬（たとえば、５−ＨＴ₂作動薬、たとえば Ｓ−（＋）−１−（２−アミノプロピル）−インダゾール−６−オール）が含まれる。

我々は、種々の期間にわたり薬物負荷量を放出することができるインプラントおよびマイクロスフェアを開発した。これらのインプラントまたはマイクロスフェアは、治療上、前房内にまたは前部硝子体に挿入されると、治療レベルの降圧剤を長期間（たとえば、約１週間から最高約１年の間）供給する。さらに、我々はインプラントおよびマイクロスフェアを作製する新規の方法を開発した。本インプラントおよびマイクロスフェアの降圧剤は、好ましくは、マイクロスフェアの約１質量％〜９０質量％である。より好ましくは、降圧剤はインプラントまたはマイクロスフェアの約５質量％〜約３０質量％である。好ましい実施形態では、降圧剤はマイクロスフェアの約１５質量％（たとえば５質量％〜３０質量％）を含む。別の実施形態では、降圧剤はマイクロスフェアの約４０質量％を含む。

インプラントまたはマイクロスフェアで用いる適切なポリマー材料または組成物としては、眼の機能または生理に実質的な障害を何ら起こさないように、眼と適合する、すなわち生体適合性のある材料を含む。このような材料は、好ましくは少なくとも部分的に、およびより好ましくは実質的に完全に生体適合性であるか、または生体侵食性である。

有用なポリマー材料の例としては、有機エステルおよび有機エーテルに由来する、および／またはこれらを含み、分解されると、モノマーを含む生理学的に許容される分解生成物をもたらす材料が挙げられるがこれらに限定されない。また、無水物、アミド、オルトエステル等に由来する、および／またはこれらを含むポリマー材料は、それ自体で、または、他のモノマーとの組み合わせの使用も見出され得る。ポリマー材料は、付加ポリマーまたは縮合ポリマーであってもよく、縮合ポリマーが有利である。ポリマー材料は、架橋したもの、または非架橋したもの、たとえば、せいぜい軽度な架橋、たとえば、架橋されるポリマー材料の約５％未満、または約１％未満の架橋したものでもよい。大部分は、炭素および水素以外に、ポリマーは酸素および窒素のうちの少なくとも１つを含み、酸素が有利である。酸素は、オキシ（たとえばヒドロキシ）またはエーテル、カルボニル（たとえば非オキソ−カルボニル）として、たとえばカルボン酸エステル等で存在し得る。窒素は、アミド、シアノおよびアミンとして存在し得る。制御型ドラッグ送達のためのカプセル封入を記述する、Ｈｅｌｌｅｒ， Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ ｉｎ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， Ｉｎ： ＣＲＣ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ， Ｖｏｌ． １， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， ＦＬ １９８７， ｐｐ３９−９０に記載されているポリマー類は、本マイクロスフェアでの使用を見出され得る。

さらに関心のポリマーは、ホモポリマーまたはコポリマーのいずれかのヒドロキシ脂肪族カルボン酸、および多糖類である。関心のポリエステル類は、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、ラセミ乳酸、グリコール酸、ポリカプロラクトン、およびそれらの組み合わせのポリマーを含む。通常、Ｌ−乳酸塩またはＤ−乳酸塩を使用することによって、ゆっくりと侵食するポリマーまたはポリマー材料が達成され、一方侵食は乳酸塩ラセミ化合物によって実質的に促進される。有用な多糖類の中には、アルギン酸カルシウムおよび機能化セルロース、特に、非水溶性であり、たとえば約５ｋＤ〜５００ｋＤの分子量であることを特徴とするカルボキシメチルセルロースエステルがあるが、これらに限定されない。

他の関心のポリマーとしては、生体適合性であり、かつ生分解性および／または生体侵食性であり得るポリビニルアルコール、ポリエステル類、およびポリエルテルとそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。本発明で使用されるポリマーまたはポリマー材料の一部の好ましい特性は、生体適合性、選択される治療薬との適合性、本発明のドラッグ送達システムを作製する際のポリマーの使い易さ、少なくとも約６時間、好ましくは約１日を超える生理的環境での半減期、および非水溶性を含み得る。

マトリックスを形成するために含まれる生分解性のポリマー材料は、酵素不安定性または加水分解不安定性を条件とすることが好ましい。有用な非水溶性ポリマーを提供するために、水溶性ポリマーは、加水分解性または生分解性が不安定な架橋で架橋されてもよい。安定性の程度は、ホモポリマーまたはコポリマーを使用するかどうか、ポリマーの混合物を使用するかどうか、およびポリマーが末端酸性基を含むかどうかのモノマーの選択に応じて大きく異なり得る。

ポリマーの生分解、したがってインプラントの持続放出プロファイルを制御することと同様に重要なことは、インプラントまたはマイクロスフェアで使用されるポリマー組成物の相対平均分子量である。異なる分子量を有する同じまたは異なるポリマー組成物をマイクロスフェアに含め、放出プロファイルを調節してもよい。ラタノプロストインプラントの場合、ポリマーの相対平均分子量は、好ましくは約４ｋＤ〜約２５ｋＤ、より好ましくは約５ｋＤ〜約２０ｋＤ，最も好ましくは約５ｋＤ〜約１５ｋＤの範囲ににわたる。

一部のインプラントおよびマイクロスフェアでは、グリコール酸と乳酸のコポリマーが用いられ、生分解の速度はグリコール酸対乳酸の割合によって制御される。最も急速に分解するコポリマーは、ほぼ等しい量のグリコール酸と乳酸を有する。ホモポリマー、または同等以外の割合を有するコポリマーは、分解に対してより耐性がある。グリコール酸対乳酸の割合も、マイクロスフェアの脆性に影響を及ぼすことになる。ポリ乳酸ポリグリコール酸（ＰＬＧＡ）コポリマーにおけるポリ乳酸のパーセンテージは、０〜１００％、好ましくは約１５〜８５％、より好ましくは約３５〜６５％であり得る。一部のインプラントでは、５０／５０ＰＬＧＡコポリマーが用いられる。

インプラントおよびマイクロスフェアは、一体化する、すなわち活性剤もしくは複数の薬剤をポリマーマトリックスに全体にわたり均一に分布させることが可能であり、またはカプセル封入されることが可能であり、ここで活性剤のリザーバーはポリマーマトリックスでカプセル封入される。製造の容易さのため、一体化したインプラントは通常、カプセル封入形態よりも好まれる。しかし、カプセル封入マイクロスフェアによってより良好な制御がもたらされるので、状況によっては、薬物の治療レベル域が狭い範囲内の場合、有利になり得る。さらに、ラタノプロスト成分を含む治療成分は、該マトリックス内で不均一なパターンで分布されることもある。たとえば、マイクロスフェアは、マイクロスフェアの第２の部分と比べて、より高い濃度のラタノプロストを有する部分を含むこともある。

本明細書に開示されるマイクロスフェアは、針による投与のために、約５μｍと約１ｍｍの間、または約１０μｍと約０．８ｍｍの間の大きさであってもよい。針で注射されるマイクロスフェアの場合、最も長い寸法のマイクロスフェアであってもそのマイクロスフェアが針を通って移動できる限り、任意の適切な寸法であってもよい。これは、通常、マイクロスフェアの投与の際に問題にならない。

前房眼の容積および活性剤の活性および溶解度に応じて、単一投与量のインプラントまたはマイクロスフェアの全重量は、最適量である。ほとんどの場合、用量は通常、１用量あたり約０．１ｍｇ〜約２００ｍｇのインプラントまたはマイクロスフェアである。たとえば、単回前房内注射は、組み込まれる治療成分を含む、約１ｍｇ、３ｍｇ、または約５ｍｇ、または約８ｍｇ、または約１０ｍｇ、または約１００ｍｇ、または約１５０ｍｇ、または約１７５ｍｇ、または約２００ｍｇのマイクロスフェアを含み得る。

インプラントまたはマイクロスフェアは、マイクスフェアロとナノスフェア、マイクロ粒子とナノ粒子、球体、散剤、断片等を含む任意の微粒子の形状であってもよい。マイクロスフェアの大きさの上限は、インプラントに対する寛容、挿入時の大きさ限定、所望の放出速度、取扱い易さ等の要素によって決定されることになる。スフェアは、約０．５μｍ〜４ｍｍの範囲の径であり、他の形状の粒子については、同等の容積である。

降圧剤、ポリマー、および他のいずれの修飾因子の割合も、平均割合を変えていくつかのマイクロスフェアバッチを処方することによって経験的に決定され得る。溶解または放出試験のためのＵＳＰ承認方法を用いて、放出速度を測定することができる（ＵＳＰ ２３； ＮＦ １８（１９９５） ｐｐ．１７９０−１７９８）。たとえば、無限シンク方法を用いて、秤量した試料のマイクロスフェアを、水中０．９％ＮａＣｌを含有する測定量の溶液に加える。該溶液量は、放出後の薬物濃度が飽和の５％未満になる量である。この混合物を３７℃で維持し、ゆっくりと攪拌してマイクロスフェアを懸濁状態で維持する。時間の関数としての溶解した薬物の外観を、たとえば、分光測定、ＨＰＬＣ、質量分析法等の当技術分野で既知の種々の方法で、吸光度が一定になるまで、または９０％を超える薬物が放出されるまで、観察することができる。

治療成分に加えて、本明細書で開示されるインプラントおよびマイクロスフェアは、有効量の緩衝剤、防腐剤等を含有する組成物を含んでもよく、それが提供されてもよい。適切な水溶性緩衝剤としては、アルカリおよびアルカリ土属炭酸塩、ホスフェート、炭酸水素塩、クエン酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、コハク酸塩等、たとえばリン酸ナトリウム、クエン酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、炭酸水素塩、炭酸塩等が挙げられるがこれらに限定されない。これらの薬剤は、本システムのｐＨ、約２と約９の間、より好ましくは約４と約８の間のｐＨを維持するのに十分な量で有利に存在する。したがって該緩衝剤は、全インプラントの約５質量％程度であり得る。適切な水溶性防腐剤としては、亜硫酸水素ナトリウム、硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アスコルビン酸塩、ベンザルコニウムクロリド、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、パラベン、メチルパラベン、ポリビニルアルコール、ベンジルアルコール、フェニルエタノール等、およびそれらの混合物が挙げられる。これらの薬剤は、約０．００１質量％〜約５質量％、好ましくは約０．０１質量％〜約２質量％の量で存在してもよい。本マイクロスフェアのうちの少なくとも１つでは、たとえばラタノプロストが基本的にビマトプロストからなるときに、塩化ベンジルアルコニウム防腐剤が、インプラント内に供給される。

種々の技法を用いて、本明細書に記述するインプラントおよび／またはマイクロスフェアを生成することが可能である。有用な技法としては、自己乳化方法、超臨界流体法、溶媒蒸発法、相分離方法、噴霧乾燥法、研磨法、界面法、成形法、射出成形法、それらの組み合わせ等が挙げられるが、かならずしもこれらに限定されない。

本明細書で考察したように、本方法で記述するポリマー成分は、生分解性ポリマーまたは生分解性コポリマーを含み得る。少なくとも一実施形態では、ポリマー成分は、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）ＰＬＧＡコポリマーを含む。さらなる実施形態では、ＰＬＧＡコポリマーは、７５／２５比のラクチド／グリコリドを有する。さらにさらなる実施形態では、ＰＬＧＡコポリマーは、約６３キロダルトンの分子量および約０．６ｄＬ／ｇの固有粘度のうちの少なくとも１つを有する。

さらに、微小粒子の本集団は、約２００μｍ未満の最大粒子径を有し得る。いくつかの実施形態では、微小粒子の集団は、約５０μｍ未満の平均または平均粒子直径を有する。さらなる実施形態では、微小粒子の集団は、約３０μｍ〜約５０μｍから平均粒子径を有する。

本明細書に開示する、降圧剤を含有するインプラントおよびマイクロスフェアを用いて、以下の眼状態を処置することができる。すなわち、黄斑症／網膜変性：加齢黄斑変性症（ＡＲＭＤ）、たとえば非滲出性加齢黄斑変性症および滲出性加齢黄斑変性症を含む黄斑部変性、脈絡膜新生血管、糖尿病性網膜症、急性および慢性黄斑の視神経網膜障害、中心性漿液性網膜脈絡膜症を含む網膜症、ならびに嚢胞状黄斑浮腫および糖尿病性黄斑浮腫を含む黄斑浮腫。ブドウ膜炎／網膜炎／脈絡膜炎：急性多発性後極部色素上皮症、ベーチェット病、バードショット網膜脈絡膜症、感染性（梅毒症、ライム病、結核、トキソプラスマ症）、中間部ブドウ膜炎（毛様体扁平部炎）および前部ブドウ膜炎、多病巣性脈絡膜炎、多発性一過性白点症候群（ＭＥＷＤＳ）、眼性サルコイドーシス、後強膜炎、匍行性脈絡膜炎、網膜下線維症、ブドウ膜炎症候群、およびＶｏｇｔ・小柳・原田症候群を含むブドウ膜炎。血管疾患／滲出性疾患：網膜動脈閉塞性疾患、網膜中心静脈閉塞症、血管内凝固症候群、網膜静脈分枝閉塞症、高血圧性眼底変化、眼性虚血性症候群、網膜細動脈瘤、コート病、中心窩周囲毛細管拡張、半網膜静脈閉塞症、乳頭血管炎、網膜中心動脈閉塞症、網膜動脈分岐閉塞症、頚動脈疾患（ＣＡＤ）、樹氷状血管炎、鎌状赤血球網膜症および他異常ヘモグロビン症、網膜色素線条症、家族性滲出性硝子体網膜症、イールズ病。外傷性／外科的状態：交感性眼炎、ブドウ膜網膜疾患、網膜剥離、外傷、レーザー、ＰＤＴ、光凝固、外科術中の低灌流、放射線網膜症、骨髄移植網膜症。増殖障害：増殖性硝子体網膜症および網膜上膜、増殖性糖尿病性網膜症。感染性障害：眼ヒストプラスマ症、眼性イヌ蛔虫症、推定眼ヒストプラスマ症候群（ＰＯＨＳ）、眼内炎、トキソプラスマ症、ＨＩＶ感染症に関連する網膜疾患、ＨＩＶ感染症に関連する脈絡膜疾患、ＨＩＶ感染症に関連するブドウ膜疾患、ウイルス性網膜炎、急性網膜壊死、進行性網膜外層壊死、真菌の網膜疾患、眼梅毒、眼結核、広汎性片眼性亜急性視神経網膜炎とハエ幼虫症。遺伝障害：網膜色素変性症、網膜ジストロフィーに関連する全身性障害、先天停在性夜盲、錐体ジストロフィー、シュタルガルト病および黄色斑眼底、ベスト病、網膜色素上皮のパターンジストロフィー、Ｘ連鎖性網膜分離症、ソースビー眼底変性症、良性同心性黄斑症、ビエッティ結晶性ジストロフィー、弾力線維性仮性黄色腫。網膜裂孔／円孔：網膜剥離、黄斑円孔、巨大網膜裂孔。腫瘍；腫瘍に関連する網膜疾患、ＲＰＥの先天性肥大、後部ブドウ膜黒色腫、脈絡膜血管腫、脈絡膜骨腫、脈絡膜転移、網膜および網膜色素上皮の混合性過誤腫、網膜芽細胞腫、眼底の血管増殖性腫瘍、網膜星状細胞腫、眼内リンパ系腫瘍。その他：点状脈絡膜内層症、急性後部多発性小板状色素上皮症、近視性網膜変性症、急性網膜色素上皮炎等。

眼内注射後に医薬組成物の分散を減少させるために、我々の発明の範囲内の医薬組成物（たとえインプラントまたはマイクロスフェア）を、高粘性のポリマーゲルを用いて処方されることができる。好ましくは、ポリマーゲルは、高剪断特性を有する。これは、２５〜３０ゲージ針を介して、より好ましくは２７〜３０ゲージ針を介して該ゲルが眼内部位に注射され得ることを意味する。この目的のために、適切なゲルは、水中または他の水性媒体中の分散体として形成されるヒドロゲルまたはコロイド状ゲルであり得る。適切なゲル類の例としては、たとえば、ポリヒドロキシエチルメタアクリレート、ならびに化学的または物理的架橋したポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリエチレンオキシド、および加水分解ポリアクリロニトリル等の合成ポリマーが挙げられる。有機ポリマーである適切なヒドロゲルの例としては、たとえばアルギン酸塩の多価金属塩、ペクチン、カルボキシメチルセルロース、ヘパリン、ヒアルロン酸塩（すなわちポリマーヒアルロン酸）等の共有結合したまたはイオン架橋した多糖類ベースのヒドロゲル類と、キチン、キトサン、プルラン、ゲラン、キサンタンおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースに由来するヒドロゲル類とが挙げられる。市販の皮膚充填剤（たとえばＨｙｌａｆｒｏｍ（登録商標）、Ｒｅｓｔｙｌａｎｅ（登録商標）、Ｓｃｕｌｐｔｕｒａ（商標）およびＲａｄｉｅｓｓｅ）を、我々の医薬組成物の実施形態において高粘性ゲルとして用いることも可能である。

ヒアルロン酸（「ＨＡ」）は、種々の体組織によって作られる多糖である。米国特許第５，１６６，３３１号は、眼内液の代用として、および局所点眼薬の担体として使用するために、ヒアルロン酸の異なる画分の精製を考察している。ヒアルロン酸の眼使用を考察する他の米国特許出願としては、第１１／８５９，６２７号；第１１／９５２，９２７号；第１０／９６６，７６４号；第１１／７４１，３６６号；および第１１／０３９，１９２号が挙げられる。我々の発明の範囲内の医薬組成物は、好ましくは、約１００万と４００万Ｄａｌｔｏｎの間の平均分子量を有する、より好ましくは、約２００万と３００万Ｄａｌｔｏｎの間の平均分子量を有する、最も好ましくは約（±１０％）２００万Ｄａｌｔｏｎの平均分子量を有する高粘性ヒアルロン酸を含む。

乾燥、非架橋ＨＡ材料は、市販ＨＡの線維または粉末、たとえばヒアルロン酸ナトリウム（ＮａＨＡ）の線維または粉末を含む。ＨＡは、微生物由来のヒアルロン酸ナトリウム、動物由来のヒアルロン酸ナトリウムまたはその組み合わせであってもよい。一部の実施形態では、乾燥ＨＡ材料は、ＨＡと、少なくとも１つの他の多糖、たとえばグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）とを含む原料の組み合わせである。我々の発明では、使用されるＨＡは、高分子量ＨＡを含む、または高分子量ＨＡからなる。すなわち本組成物中のＨＡ材料のほぼ１００％は、高分子量ＨＡである。高分子量ＨＡとは、少なくとも約１００万Ｄａｌｔｏｎ（分子量≧１０⁶Ｄａ）〜約４００万Ｄａ（分子量≦４×１０⁶Ｄａ）の分子量を有するＨＡを意味する。たとえば、本組成物における高分子量ＨＡは、約２００万Ｄａ（分子量２×１０⁶Ｄａ）の分子量を有し得る。別の例では、高分子量ＨＡは、約２８０万Ｄａ（分子量２．８×１０⁶Ｄａ）の分子量を有し得る。

我々の発明の一実施形態では、所望の高分子量／低分子量の割合を有する乾燥または生のＨＡ材料（この具体的な例ではＮａＨＡ）は、浄化されて、精製される。これらのステップは通常、所望の高分子量／低分子量の割合で乾燥ＨＡ線維または粉末を、たとえば純水を用いて水和させるステップと、この材料を濾過して大きな異物および／または不純物を除去するステップとを含む。次いで、濾過された水和材料は乾燥されて、精製される。高分子量および低分子量のＮａＨＡは、別々に浄化されて、精製されてもよく、または架橋する直前にたとえば所望の割合で混合させてもよい。プロセスのこの段階で、精製、乾燥させたＮａＨＡ線維をアルカリ溶液中で水和させて、非架橋ＮａＨＡアルカリ性ゲルを生成する。このステップでは、いかなる適切なアルカリ溶液も用いて、これに限定するものではないが、たとえばＮａＯＨを含有する水溶液を用いてＮａＨＡを水和させてもよい。結果としてもたらされるアルカリ性ゲルは、７．５を超えるｐＨ、たとえば８を超えるｐＨ、たとえば９を超えるｐＨ、たとえば１０を超えるｐＨ、たとえば１２を超えるｐＨ、たとえば１３を超えるｐＨを有することになる。この具体的な例では、製造プロセスにおける次のステップは、水和したアルカリ性ＮａＨＡゲルを適切な架橋剤、たとえばＢＤＤＥで架橋ステップを含む。

架橋ステップは、当業者に既知の方法を用いて行われ得る。当業者は、ＨＡの性質によって架橋条件を最適化する方法、および最適化された程度まで架橋を行う方法を理解している。本発明の一部の実施形態では、架橋度は少なくとも約２％〜約２０％であり、たとえば約４％〜約１２％である。ここで架橋度は組成物中のモノマーユニットに対するパーセント重量比として定義される。水和架橋ＨＡゲルを、ＨＣｌを含有する水溶液を加えることによって中和させてもよい。次いで、ＨＡゲルを、低温で充分に時間をかけて、リン酸緩衝生理食塩水中で膨張させる。

いくつかの実施例では、得られた膨張したゲル（ＨＡ）は、実質的に目にみえる別々の粒子がない、たとえば、肉眼で見ると、目にみえてはっきりした粒子が実質的にはない粘着性ゲルである。一部の実施形態では、該ゲルは、３５倍未満の拡大率下で、実質的には目にみえてはっきりした粒子がない。架橋材料のｐＨを安定させて、いずれの未反応架橋剤も除去するために、ここでゲル（ＨＡ）を、従来の方法、たとえば透析法またはアルコール沈殿法によって精製して、架橋材料を回収する。追加の水または弱アルカリ性水溶液を加えて、組成物中のＮａＨＡの濃度を所望の濃度にすることができる。一部の実施形態では、組成物中のＮａＨＡの濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬと約３０ｍｇ／ｍＬの間の範囲にある。

我々の発明の範囲内のインプラントは、米国特許出願第１１／４５５，３９２号；第１１／５５２，８３５号；第１１／５５２，６３０号、および第１２／３５５，７０９号に示されるアプリケーター（注射器）を含む任意の適切な眼内注射装置を用いて、投与され得る。

我々の発明の実施形態は、徐放型生分解性マイクロスフェアまたはインプラントであり得る。我々の発明の好ましい実施形態は、降圧剤を含有するＰＬＡおよび／またはＰＬＧＡインプタントである。これは、この組成物のインプラントが眼房内または前部硝子体への投与後、炎症が有意に少ない（すなわち角膜充血が少ない）という理由からである。我々の発明の一実施形態は、同じインプラントの異なるセグメント内に、または同時に投与される異なるインプラント内に複数の降圧剤を含有するドラッグ送達システムを含むことができる。たとえば、１つのセグメント（すなわち１つのインプラント）は、ムスカリン性降圧剤を含むことができ、第２のセグメント（すなわち第２のインプラント）は降圧剤プロスタグランジンを含むことができ、第３のセグメント（すなわち第３のインプラント）は降圧剤β遮断薬を含むことができる。複数のインプラント（「セグメント」）は、同時に、注射されることができる。たとえば、降圧剤（たとえばムスカリン性薬剤）を有する１つのインプラントは線維柱帯網を介して房水流出を増強させ、第２のインプラントを用いてブドウ膜強膜の流れを増強させる（たとえば降圧脂質）ことができ、第３のインプラントは、房水の産生を減少させる（たとえばβ遮断薬）ことができる。異なる作用機序を有する複数の降圧剤は、ＩＯＰを低下させるのに、単剤療法、すなわち単一種の降圧剤の使用より効果的であり得る。複数のセグメント（複数のインプラント）は、単剤療法で必要な用量よりも、使用される個々の降圧剤のそれぞれの用量を低くすることができ、それによって使用されるそれぞれの降圧剤の副作用を低減させることができる利点がある。たとえば神経保護化合物または神経増強化合物を含有する別々のセグメントおよび付加的なセグメントは、降圧剤を含有する他の部分とともに送達されることも可能である。

複数のセグメント（すなわち投与される複数のインプラント）を使用するとき、各セグメントは、約２ｍｍを超えない長さを有することが好ましい。好ましくは、２２〜２５Ｇの同じ針の口径で投与されるセグメントの総数は、約４である。２７Ｇ径の針で、針の孔またはルーメン内の総セグメント長は、最高約１２ｍｍになり得る。

線維柱帯網（ＴＭ）が眼房液体の上の検出可能な流体取込み作用または吸入作用を有することを我々は決定した。我々の隅角鏡検査イメージングによる測定では、このＴＭ流体取込みによって、３０ミクロン未満の径を有するマイクロスフェア（ＭＳ）がＴＭに引き入れられる。

ＴＭの流体取込み作用を活用して、適切な形状を有するＭＳまたはインプラントを、不明瞭な視覚の原因である後眼房の周りで浮遊しないように保持することができることも突き止めた。重力によってこれらのインプラントは６時の位置まで下がる。インプラントまたはＭＳがこの位置で非常に安定である（比較的固定される）ことを我々は認めた。全長（すべてのセグメントを含めた）が約６〜８ｍｍを超えない２２Ｇ〜３０Ｇ径の針で前房内に投与されることが可能なインプラントは、眼内インプラントが固定され、かつ視覚の不明瞭化もなく、ＴＭ流体の取入れ機序を利用するのに最も好ましい。したがって、ＴＭ流体取入れ効果より、前眼房の６時の位置に安定するにもかかわらず、インプランントはＴＭクリアランス速度を超える放出速度を有することが可能であり、かつこれによりインプラントによって放出される降圧剤が前眼房を急速に満たし、３６０度分布パターンに沿って標的組織に良好に分布されることを可能にする。隅角鏡検査法による前眼房の角度でのインプラントの我々の検査では、該インプラントの近傍で被包も組織の炎症も見られなかった。

実施例
以下の実施例は、本発明の非限定的な実施形態を記載する。

実施例１
前眼房対流の測定
本発明者等は、前眼房において、虹彩と接触している眼房水の方が高温であることにより起こる、６時の位置から１２時の位置まで垂直に上方向への対流があることを突き止めた。本発明者等は、前眼房において、角膜内皮に隣接している眼房水の方が低温であることにより起こる、１２時位置から６時位置まで房水流の下方への対流が起こることも突き止めた。図２を参照されたい。本発明者等は、送達系が眼房水中に直接薬剤を放出する場合、これらの眼房水流は３６０度分布パターンで前眼房全体および前眼房周辺に降圧剤を効果的に運ぶことができると仮定し、そして前眼房中に入れた持続放出性インプラントからの放出の画像診断研究により、前眼房で代理薬剤を分布させる対流の効果を示した。図３を参照されたい。

さらに、本発明者等は、３０ミクロンを越える直径を有し、マイクロスフェアの前房内注射後に前眼房の下角に定着するのに充分な密度を有するマイクロスフェアを作製した。重要なことに、マイクロスフェアの３０ミクロンを超える直径は、マイクロスフェアが小柱網を通して除去されないか、または小柱網中に組み込まれないようなものであり、それによって、遊離薬剤が確実に水流中に直接放出され、３６０度分布パターンに沿った角度で効果的に薬剤を分布させることを確実にする。遊離薬剤は、小柱網および虹彩根部を通過して毛様体領域へ入ることができる。６時位置へのマイクロスフェア処方の定着を加速するために、担体として、未架橋または架橋ヒドロゲル（例えばヒアルロン酸またはメチルセルロース化合物）を０．２％〜４％の濃度でマイクロスフェアに添加することができる。ゲルを添加することにより、３０ミクロンを越える直径を有するマイクロスフェアが小ゲージ（例えば２７〜３０Ｇ）針を通過するのを促進することができ、プレフィルシリンジにおける使用が可能になる。別の送達系、例えば生体内分解性ポリマーを含む固体インプラントは、前眼房への注射後に６時位置で定着するので、これらを使用することもできる（図３Ｂを参照）。

このように、図３は、ハイデルベルクＨＲＡ画像形成装置を使用して視覚化された眼房水薬剤送達（インプラントを６時位置に前房内設置した後）の証拠を示す。図３Ａは、主凝視におけるウサギの眼の外観の写真である。図３Ｂは、ＨＲＡ上の定位置にフルオレセインフィルターを有する３Ａのウサギの眼の画像である。図３Ｂにおいて、このウサギは、前眼房中に持続放出性フルオレセインインプラントを移植した２日後であり、インプラントは６時の位置（矢印）で定着したことがわかる。図３Ｃは、下方向へ回転させた同じウサギの眼の外観の写真である。

図３Ｄは、ＨＲＡを用いた３Ｃのウサギの眼の画像である。図３Ｄにおいて、このウサギは、３Ｂで示すように６時位置で定着した前眼房中の持続放出性フルオレセインインプラントの移植の７日後である。対流によって、インプラントから放出される遊離フルオレセインは前眼房（矢印）全体にわたって均一に分布するようになり、それによって小柱網および毛様体（抗高血圧治療の標的組織）へ３６０度暴露されることに留意されたい。

本発明者らはまた、眼房水より密度の低いマイクロスフェアまたは他の持続放出性送達系が、浮き上がって上方に１２時の位置で定着するので、治療的有用性を有すると断定した。ここでは、薬物送達系は対流中に薬剤を放出することができ、そしてこれは遊離薬剤を３６０度の角に分布させるために６時の位置にある送達系の適切な代替物である。したがって、本発明者らは１２時の位置で注射された薬剤代用物の時間が経過した画像を撮影し、２０分以内に前眼房（３６０度にわたる均一な薬剤暴露）全体を通じて薬剤代用物を分布させる前眼房対流の存在を示した。

下記のように、本発明者らは、製造プロセスで使用されるＰＶＡ安定剤を水で５回洗浄して、マイクロスフェアからＰＶＡ成分を除去する技術を開発した。この化学修飾により、ミクロスフェアは前眼房中１２時の位置まで浮き上がることができる。なぜなら、前眼房マイクロスフェア面は親水性ＰＶＡを失った後に非常に疎水性が高くなり、水が粒子面を効果的に濡らすことができないからである。薬剤送達系が迅速に上方または下方に定着して、視軸からすべての閉塞を除去することは重要である。

意外にも、毛様体での薬剤組織濃度を調査する薬物動態研究により、持続性インプラントを前硝子体領域中に注入した後、高い濃度が示された。硝子体腔中に注射される大部分の薬は様々な機構によって眼の後方へと拡散および／または誘導され、網膜と脈絡膜を通して除去されると以前には考えられていた。本発明者等は、画像診断および薬理学的研究を実施し、前硝子体基底部に送達系を設置し、これにより降圧剤を毛様体へ送達することができ、その結果としてＩＯＰが低下することを突き止めた。これらの画像診断検査から、前硝子体基底部中に入れた薬剤は後眼房中で眼房水に接近することができ、動物およびヒトのどちらの眼でも薬剤を３６０度急速に分散させることができることが証明された。マイクロスフェアやインプラントなどの薬剤送達系は、標準外科的処置を使用して前部硝子体中に慣例どおり設置することができる。ＭＲＩ画像診断検査では、薬剤代用物を前部硝子体へ注射した後のブタの眼を使用した。薬剤は急速に後眼房中に移動し、３６０度パターンで毛様体周辺に分布した。さらに、本発明者等は、前部硝子体中に薬剤代用物を注射した後、ヒトの眼のＭＲＩ画像診断検査を行って、当該薬剤が後眼房および前眼房に急速に移ることを証明し、硝子体注射によって薬剤を眼房水に送達できることを示した。

実施例２
持続放出性マイクロスフェアの開発

序
この実施例で本発明者等は、緑内障および関連する眼症状を治療するために使用される昇圧剤をを含むさまざまなマイクロスフェア作製し、評価した。このようにして、本発明者等は高眼圧を治療するための持続的放出性マイクロスフェアを開発した。本発明者等が作製したマイクロスフェアは、約３ヵ月から約６ヵ月までＩＯＰを減少させ（単独療法として、すなわち追加の降圧剤を含む点眼剤を必要としない）、（同じマイクロスフェアまたはインプラントのテノン嚢下投与と比較して）角膜充血が非常に軽減された。３０μｍを越える直径を有するマイクロスフェアを使用するとマイクロスフェアの前房内投与後の眼充血が軽減されることを突き止めたので、マイクロスフェアは少なくとも約１０質量％の昇圧剤負荷を含み、３０μｍを越える平均直径を有する。

マイクロスフェア製造プロセスは、溶媒およびＳＤＳ界面活性剤としてジクロロメタンを用いる溶媒蒸発プロセスから開始した。しかし、ラタノプロストが組み込まれた場合、当該プロセスには、収率が非常に低い、粒子径がはるかに小さい、そして薬剤封入効率が不十分であるということに関する多くの問題があった。従って、本発明者等は、溶媒および界面活性剤の両方を変えることによって、プロセスを改善した。最終的に、本発明者等は、溶媒としての酢酸エチルおよび安定剤としての１％のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）を用いてプロセスを完成させた。また、本発明者等は１９質量％もの高い昇圧剤負荷を達成することができた。マイクロスフェア直径は３０μｍを越えて維持され、低い剪断速度を使用する場合は６５μｍまでにすることができる。マイクロスフェア直径および直径分布は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ２０００装置を使用して測定した。各試料は、５回の読み取りの平均によって分析した。マイクロスフェア分画は、シーブを通して濾過して、最小サイズのカットオフを維持することによっても実施した。多くの異なるＰＬＡおよびＰＬＧＡポリマーならびにポリマーブレンドをスクリーニングして、放出プロフィール群を得、インビボマイクロスフェア投与の候補を選択した。調査した処方のインビトロ放出率は、１７〜８８μｇ／日の範囲であった。

作製したマイクロスフェアに関して広範囲の形態学的研究を実施した。したがって、マイクロスフェア表面をＳＥＭ（Ｚｅｉｓｓ ＥＶＯ４０装置を使用）により調査し、粒子内部の薬剤分布を凍結割断ＳＥＭにより測定した。ＳＥＭ冷凍乾燥マイクロスフェアを使用し、これを両面粘着グラファイトテープ上に散布し、反対面をアルミニウムスタブに施用して、表面および内部形態を調査した。過剰の試料を除去し、スタブを５〜１０ｎｍの金層でスパッターコーティングした。内部マイクロスフェア形態は、炭素テープ上に単層マイクロスフェアを塗布することによって実施したマイクロスフェア凍結割断にしたがって観察し、スタブ上のもう一つの炭素テープでおおい、次いでこのサンドイッチ構造を液体窒素中に１０秒間浸漬した。サンドイッチ状の単層を分解して、割断マイクロスフェアを得た。

薬剤放出の前後の試料を比較し、薬剤負荷試料もプラセボと比較した。試料は著しく異なる形態を示し、ポリマー特性、形態、および放出挙動の間の密接な関係が明らかになった。本発明者等が作製した２３の異なるマイクロスフェア処方全てにおいて。２つのマイクロスフェア処方Ａおよび処方Ｂをインビボで評価した。本発明者等は、これらの持続放出性マイクロスフェア処方ＡおよびＢが数ヵ月にわたって降圧剤を放出できることを突き止め、マイクロスフェアは外来ベースでの眼内注射によって投与することができると断定した。

処方Ａマイクロスフェア
最初に、本発明者等は、ポリマーマトリックス中にラタノプロストを導入すると、凝集が有意に減少し、微粒子直径が小さくなることを見いだした。さらに、不十分な薬剤封入効率（低い薬物負荷（質量パーセント））は、ＳＤＳと長い緩徐ＤＣＭ蒸発プロセスとのために薬物の水中溶解度が大きく増加したことが原因であった。ＤＣＭは水混和性でなく、その蒸発プロセスは相当長い時間がかかり、その間、ラタノプロストには水相中に拡散するために十分な時間がある。本発明者等は、実験を実施して、ラタノプロスト水溶解度を減少させ、使用される安定剤を（ＳＤＳからポリビニルアルコールに）変えた。もう一つのプロセス改善は、より水混和性の高い溶媒（例えばアセトニトリルまたは酢酸エチル）を徐々に添加することであった。これによって、粒子乾燥プロセスが促進された。使用される最後のプロセスは、溶剤抽出プロセスであった。

これらのプロセス改善で、２３．８％のラタノプロスト含有量を有するポリマー７５：２５ポリ（Ｄ，Ｌ、ラクチドコグリコリド）（Ｒｅｓｏｍｅｒ ＲＧ７５５，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて処方Ａマイクロスフェアを作製した。室温で粘稠性油であるラタノプロスト（２００ｍｇ）、およびポリマー（６００ｍｇ）を、５．６ｍｌの酢酸エチル中に溶解させた。この溶液を剪断しながらマイクロピペットで１６０ｍｌの１％ＰＶＡ水に添加した。Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎホモジナイザを用いて混合物を３０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。剪断後、乳白色エマルジョンを、３〜５時間フード中で穏やかに撹拌して、溶媒を蒸発させた。懸濁液を、１０６μｍおよび３４μｍのシーブに通して、１０６μｍより大きい画分と３４μｍより小さな画分とを除去した。懸濁液を２０００ｒｐｍで１５分間遠心分離することによって上清を除去し、１０ｍｌの脱イオン水を添加して、マイクロスフェアを再構成した。マイクロスフェア懸濁液を凍結乾燥して、自由流動性乾燥粉末を得た。注射前にミクロスフェアを懸濁するために用いたビヒクルは、２％のＣＭＣおよび０．９％の食塩水中０．１質量％のＴｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）であった。平均マイクロスフェア直径サイズは約６０μｍであった。０．１％のトリトンＸ−１００［オクチルフェノールポリエトキシレート］を含むＰＢＳ媒体中の処方Ａからのラタノプロストのインビトロ放出速度（５０ｕｌ用量の２０％マイクロスフェアから）は、図４で示すように、長期間にわたってゼロ次（単位時間当たり一定量の薬剤が放出される）の放出動態であった。処方Ａマイクロスフェアは、最初の２週間で約２１μｇ／日のインビトロ放出速度を示した。

典型的には、持続放出性薬物送達系は、薬剤が放出され、続いて薬剤放出速度が減少（多くの場合、指数関数的減少）する一次放出動態にしたがって組み込まれた薬剤を放出する。標的組織に対する薬剤投与のそのような変動率（過剰量に続いて過少量）は、眼症状の治療的処置については最適に満たない。一方では、一次薬剤放出が最適であり、眼内組織の治療が成功するために非常に有益な投薬レジメである。

ミクロスフェアを、２０％濃度で前記溶媒中に懸濁させた。結果として得られた懸濁液を、前眼房中にまたは硝子体中に２５Ｇ針によって強膜を通して注射した。あるいは、マイクロスフェアは様々な粘稠性ゲル中に懸濁することができ、そして３０Ｇもの小さな針で注射することができる。２〜１０ミリグラムのマイクロスフェアを、イヌの眼に注射し、５週間を超える期間で大幅なＩＯＰ（ベースラインから５０％）の減少が見られた。マイクロスフェアは、前房内、硝子体内、およびテノン嚢下を包含する眼のさまざまな部分に注射することができる。放出速度は、様々な用量のマイクロスフェアを使用することにより調節することができる。マイクロスフェアは、エアゾルの使用を使用して、又は使用せずに、「乾式」注入を可能にするアプリケーターを用いて注射することもできる。ここで、湿潤ビヒクルを用いないマイクロスフェアを、区画の容積を相当増加させることなく前眼房または硝子体腔に注射することができる。処方Ａマイクロスフェア処方は、１回の前房内または硝子体内注射で２〜７ヵ月間ラタノプロストを放出する可能性を有する。

処方Ｂマイクロスフェア
処方Ｂマイクロスフェアは、１２．４％のラタノプロスト含有量を有するＲｅｓｏｍｅｒ Ｒ２０３Ｈ（ポリＤＬ乳酸）（「ＰＬＡ」）を用いて調製した。製造プロセスは、前述の処方Ａマイクロスフェアプロセスと類似していた。マイクロスフェアをスクリーニングして、３４ミクロン以上の直径を有するものを単離し、結果として得られる平均直径は４５ミクロンであった。ゼロ次に近い放出速度を示す０．１％のトリトンＸ−１００（オクチルフェノールポリエトキシレート）を含むＰＢＳ媒体中のインビトロ放出速度を、図５に示す。処方Ｂマイクロスフェア放出のインビトロ放出速度は、２週間にわたって約８８μｇ／日であった。

本発明者らは、作製したマイクロスフェアに更なる処理工程を実行することによってマイクロスフェアのインビボ投与に対する望ましくない副作用を軽減する重要な特徴が得られることを見いだした。このように、眼に注射されるマイクロスフェアの１つの副作用は、角膜充血であり得る。本発明者らは、サイズ分別および洗浄の２つの精製ステップを使用することによって、そのようにさらに処理されたマイクロスフェアの眼内注入によりほとんどすべての充血が防止されることを突き止めた。これらの２つのステップは、３４μｍシーブを通してマイクロスフェア懸濁液を濾過してマイクロスフェアの小さな集団を除去し、続いて結果として得られる微小粒子を水で３〜５回洗浄することによって実施した。これらの精製されたマイクロスフェアをイヌの眼に前房内注射した際、角膜充血の有意な（５０〜８０％軽減）改善が観察された。

まとめ
ミクロスフェアは、溶媒抽出プロセスでうまく製造された。均質化剪断速度とポリマー濃度とが粒径調節の主な因子であることが判明した。マイクロスフェア直径は１μｍから最高１００μｍまで変化し得、シーブを用いた分画によって明確なサイズ範囲が得られた。ラタノプロスト負荷は、約２５質量％まで最適化できる。マイクロスフェアはいかなる保護剤をも使用せずに凍結乾燥することができ、顕著なサイズ安定性を示した。本発明者らは、適度な線量（１８ＫＧｙ）で電子ビームを照射すると、その後のマイクロスフェアからの薬剤放出に対する影響なしに優れた滅菌を達成できることを見いだした。多種多様な放出プロフィールは、主に異なるポリマーマトリックスを使用することによって得られた。マイクロスフェアは、ポリマー特性およびプロセス条件に密接に関連した様々な形態を示した。マイクロスフェアは急速に定着する傾向があり、高粘度ビヒクル、例えば２％のＣＭＣは定着を遅らせることができ、注射をより容易にすることができる。２７〜３０Ｇ針を用いた注射は、適切なゲル担体の使用に際して得ることができる。

下記の実施例３〜７は、水性ビヒクル（２％のカルボキシメチルセルロース［ＣＭＣ］、０．９％の食塩水中０．１％のＴｗｅｅｎ８０）中または高粘度高剪断速度ゲル（すなわち適切な重合性ヒアルロン酸）中に懸濁させたマイクロスフェアまたはインプラントの眼内注射によって実施したインビボ（ビーグル犬）研究を記載する。降圧剤を含むマイクロスフェアまたはインプラントを片眼に注射し、プラセボマイクロスフェアまたはインプラントを対照としてもう一方の眼に注射した。ＩＯＰおよび充血を数週間モニタリングした。超薄壁２５−２７ゲージ針を使用した。マイクロスフェアを使用する場合は、１０％または２０質量％でビヒクル中に懸濁させた。

実施例３
前房内処方Ａマイクロスフェア
１０μｌの処方Ａを、１２時の位置で２５Ｇ皮下針を用いて角膜を通して棚付法（ｓｈｅｌｖｉｎｇ ａｐｐｐｒｏａｃｈ）を使用してビーグル犬の左前眼房に注射した。創傷は自己密封性であり、マイクロスフェアは３０分以内に下角に急速に定着した。図６は、未処置の右眼と比較した左眼におけるＩＯＰの顕著な減少を示す。ＩＯＰのこのような減少は数週間持続した。図６で示すように、左眼（実線）に持続放出性ラタノプロストマイクロスフェアを前房内注射し、３日目までに左眼で約５０％のベースラインからのＩＯＰ減少が記録され、このＩＯＰ減少は、少なくとも１ヶ月の時点まで持続した。注射を受けなかった対照の眼（点線）ではＩＯＰの減少はみられなかった。眼の外観写真は、軽度の結膜充血のみを示す。

実施例４
前房内処方Ｂマイクロスフェア
イヌに、左眼には鼻上の四半部中角膜輪部後方４ｍｍで処方Ｂマイクロスフェア処方５０μｌを前方に硝子体内注射し、右眼にはプラセボマイクロスフェアを注射した。左眼において、ＩＯＰはベースラインより最大約４０％まで減少し、注射部位に限局される中軽度の結膜充血があった。反対側の四半部の充血等級は一貫して０と記録された。プラセボマイクロスフェアを投与した右眼ではＩＯＰ減少は見られなかった。

実施例５
硝子体内および前房内ビマトプロストインプラント
持続放出性ビマトプロスト熱押出インプラントを、４５質量％のレゾマーＲ２０３ｓ（ポリＤＬ乳酸）、２０質量％のＲ２０２Ｈ（ポリ（ＤＬ−ラクチド））、３０質量％の薬剤負荷量および共溶媒として５質量％のＰＥＧ３３５０を使用して調製した。調製された棒状のインプラントの合計重量は、１．６４ｍｇ（４９２．４μｇ薬剤負荷量）または８００μｇであり、後者の半分の大きさの棒状インプラントは、幅１ｍｍ、長さ２ｍｍと測定された。インプラントは、４ヶ月の期間にわたってビマトプロストのインビトロ放出を示した。

硝子体内
１つのビマトプロストインプラントを、イヌの左眼の鼻上の四半部、外科縁の後方４ｍｍに挿入した。プラセボ（ビマトプロストを含まない）インプラントを、もう一方の眼に配置した。左眼対右眼においてＩＯＰの有意な減少（ベースラインより最高約４５％低い）があった。加えて、テノン嚢下設置と比較して、硝子体内インプラント設置では結膜充血がかなり少なかった。

前房内
１つの８００μｇのビマトプロストインプラントを右眼の縁の近くで上方に透明な角膜の棚付切開（ｓｈｅｒｌｖｅｄ ｉｎｃｉｓｉｏｎ）から前房中に挿入し、左眼にはプラセボ（ビマトプロストを含まない）インプラントを挿入した。インプラントは６時間の時点に上方に位置し、挿入後２４時間までに６時の位置で下方に定着した。インプラントの緩徐性生体内分解が見られ、生体内分解および眼内毒性の兆候はなかった。ベースライン記録より６０〜７０％低いＩＯＰの大きな減少が最初の２４時間で見られ、その後維持された。図７を参照。

インプラントは、投与後に最初の３０日間で約６μｇのビマトプロストを毎日放出した。インプラントは投与されると、６時の位置で小柱網に沿って角のウェル中にうまく嵌まった。角膜が虹彩と出会う箇所で、前房角が存在する。この位置で小柱網が見られ、小柱網は（正常な眼で）眼房水が眼から排出される部位である。眼房水が眼から適切に排出され得ない場合、眼内圧は高くなる。図７は、ビマトプロスト棒状インプラントの前房内投与後８４日間にわたる時間（日）（ｘ軸）に対する対象のイヌの眼のベースライン眼内圧の変化（％）（ｙ軸）のグラフであり、約５０％〜６０％のＩＯＰ減少が８４日間の観察期間中維持されたことを示し、高ＩＯＰを治療するためには、別の抗高血圧剤の毎日投与（８４日間毎日少なくとも１回）よりもこの１回の前房内持続放出性インプラントの方が非常に優れていることを示す。

実施例６
前房内および硝子体内ＥＰ２
ＥＰ２アゴニスト化合物Ａ（キラル中心を有する分子）の１回の前房内および硝子体内ニート注射の安全性および寛容性を評価した。処方は、生理食塩水中０．１％の化合物Ａを使用した。化合物Ａの化学名は、５−｛（Ｒ）−１−［４−（（Ｓ）−１−ヒドロキシ−ヘキシル）−フェニル］−５−オキソ−ピロリジン−２−イルメトキシメチル｝−チオフェン−２カルボン酸イソプロピルエステルであり、化学式はＣ₂₆Ｈ₃₅ＮＯ₅Ｓであり、分子量は４７３．６３である。

化合物Ａ
化合物Ａは、水酸基の形態でも存在し得る：

前房内注射
化合物Ａ処方の５０マイクロリットルを、２７Ｇの皮下針を使用して、左眼の前眼房中に注射し、ビヒクルを右眼に注射した。ＩＯＰは、右眼でベースラインから最大約５０％まで減少した。ＩＯＰの減少は、他方の眼の記録と比較して３日目を通して維持された。両眼の注射部位付近で＋０．５の最大結膜充血スコアであり、以降の記録は全て０であった。眼性炎症の徴候は追跡検査ではなかった。

イヌ２：前部硝子体注射
化合物Ａ処方の５０マイクロリットルを、２７Ｇの皮下針を使用して左眼の前部硝子体中、毛様体のすぐ後部に注射した。ビヒクルを右眼に注射した。ＩＯＰは、右眼でベースラインから最高約３０％まで減少した。ＩＯＰ減少は、他方の眼の記録と比較して３日間維持された。両眼で注射をした半球に限局された軽度の結膜充血が３日中存在した。追跡検査では眼性炎症の徴候はなかった。

要約すると、前眼房と前部硝子体中の化合物Ａの無希釈注射は十分寛容性であり、１回の注射後数日間ＩＯＰの低下が存在した。ＩＯＰを減少させることに加えてＥＰ２およびＥＰ４アゴニストは強力な神経保護剤でもあり得る。

前記実施例で記載した方法を用いて、化合物Ａを生物分解性ポリマーマイクロスフェアまたは生物分解性ポリマーインプラントに処方することができ、前房内または前部硝子体中に投与して、持続的抗高血圧（緑内障治療）効果を提供することができる。

実施例７
前房内ラタノプロストインプラント
３０％のラタノプロスト、４０％のＲＧ７５２ｓ、２０％のＲＧ５０２ｓ、５％のプラスドンおよび５％のＰＥＧ３３５０を含む持続放出性ラタノプロスト（熱押出）インプラントを作製し、イヌの左眼に前房内注入した。角膜切開刀を用いて１１時の位置で棚付切開を行い、ラタノプロストインプラントを前眼房中に挿入した。９−０のバイクリル縫合を使用して切開を閉じた。２４時間の時点で、この眼でベースラインから約５０％のＩＯＰの減少が記録された。

実施例８
ヒアルロン酸中の処方Ａマイクロスフェア
２３．８％の薬剤含有量を有する処方Ａマイクロスフェアを、架橋ヒアルロン酸（Ｊｕｖｅｄｅｒｍ）と混合した。ゲルベースのマイクロスフェア懸濁液を使用して、２７Ｇ針を用いて左眼に活性マイクロスフェアを注射し、右眼にはプラセボを注射した。注射はゲルを用いることにより促進され、針が詰まることによる障害はなかった。注射後１日目に、ベースライン値と比較して左眼においてＩＯＰの３５％減少がみられた。マイクロスフェアは下角においてゲル中で凝集しているようであり、眼性炎症は最小であった。

実施例９
降圧剤を含むマイクロスフェアおよびインプラント
降圧剤を含む持続的放出性生物分解性マイクロスフェアは、緑内障のような高圧性疾患を治療するために前房内または前方硝子体内注射用に作製することができる。降圧剤は、それらの塩、エステル、プロドラッグおよび誘導体を含む１以上のＥＰ２アゴニスト、例えば化合物Ａ〜Ｏであり得る。以下に示すように、化合物Ａ〜ＨおよびＪのそれぞれは少なくとも１つのキラル中心を有する。マイクロスフェアは、１５〜２５質量％の化合物（化合物Ａ〜Ｏのいずれか）含有量（質量％）を有するポリマー７５：２５ポリ（Ｄ，Ｌ、ラクチドコグリコリド）（Ｒｅｓｏｍｅｒ ＲＧ７５５，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて作製することができる。したがって、２００ｍｇの化合物（化合物Ａ〜Ｏのいずれか）および６００ｍｇのポリマーを、約６ｍｌの酢酸エチル中に溶解させる。次いで、この溶液を剪断しながらマイクロピペットにより約１６０ｍｌの１％ポリビニールアルコール水に添加する。混合物を、次いでＳｉｌｖｅｒｓｏｎホモジナイザを用いて５分間約３０００ｒｐｍで遠心分離する。剪断後、乳白色エマルジョンを得、これをフード中で約３〜５時間穏やかに撹拌して、溶媒を蒸発させることができる。懸濁液を次いで、１０６μｍおよび３４μｍシーブにかけて、１０６μｍより大きな画分および３４μｍより小さな画分を除去する。上清は、懸濁液を１５分間２０００ｒｐｍで遠心分離することによって除去し、１０ｍｌの脱イオン水を添加して、マイクロスフェアを再構成する。マイクロスフェア懸濁液を次いで凍結乾燥して、自由流動性乾燥粉末を得る。注射前にマイクロスフェアを懸濁させるために用いられるビヒクルは、２％のＣＭＣおよび０．９％の食塩水中０．１質量％のＴｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）であり得る。

さらに、降圧剤を含む持続性放生物分解可能性インプラントは、緑内障などの高圧性疾患を治療するために前房内または前方硝子体内注射用に作製することができる。降圧剤は、１以上のＥＰ２アゴニスト、例えば化合物Ａ〜Ｏであり得る。インプラントは、約３０質量％の化合物（化合物Ａ〜Ｏのいずれか）、４０〜６０質量％の生物分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）ポリマー（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）ＲＧ７５２）（ＰＬＧＡ）、０〜２０％の生物分解性ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）ポリマー（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ２０２）（ＰＬＡ）および１０％のＰＥＧ−３３５０を含むようにホットメルト押出によって作製することができる。

この実施例における化合物を含む生体内分解性ポリマーインプラントは、機械駆動のラムマイクロ押出機を使用して作製することができるが、直接圧縮または溶媒キャスティングによって作製することもできる。インプラントは好ましくは桿状であるが、押出または圧縮ダイを変えることによって任意の幾何学的形状に作製することができる。ポリマー（ｒｅｓｏｍｅｒ）はＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから入手したままの状態で使用する。

化合物（化合物Ａ〜Ｏのいずれか）およびポリマーレゾマー粉末を、まず１５分の間秤量皿（ｗｅｉｇｈ−ｂｏａｔ）中でスパチュラを使用して１５分間混合する（１０質量％のＰＥＧを含む）。混合物を次いで、２つの１／４”ステンレス鋼製球を含むステンレス鋼製容器中に移し、Ｔｕｒｂｕｌａミキサーを用いて２回の独立した１５分サイクルで混合を続ける。粉末ブレンドを、各サイクル間および最終サイクル後にスパチュラを用いて手動で混合する。ブレンドされた材料を押出機バレル中に詰め、押出バレルをピストン押出機の加熱されたウェル（５０〜５５℃）中に入れ、５００ｐｍノズルおよび速度セッティングナンバー０．００２５を用いて押し出す。押出フィラメント（桿状）インプラントを、１ミリグラムのインプラント（長さ約３ｍｍ）に切り出す。これらの持続的放出性生物分解性インプラントを前房内投与して、１から６ヵ月まで（またはそれ以上）減少したＩＯＰ（抗高血圧性効果）を提供することができる。

化合物Ａ

化合物Ｂ

化合物Ｃ

化合物Ｄ

化合物Ｅ

化合物Ｆ

化合物Ｇ

化合物Ｈ
化合物Ｉ

化合物Ｊ

化合物Ｋ

化合物Ｌ

化合物Ｍ
化合物Ｎ

化合物Ｏ

本明細書中で引用されるすべての参考文献、論文、刊行物ならびに特許および特許出願は、その全体が参照することによって組み込まれる。

本発明をさまざまな具体例および実施形態に関して記載したが、本発明がそれらに限定されるものではなく、以下の請求の範囲内でさまざまに実施できると理解すべきである。

Claims (18)

1. 上昇した眼圧を処置するための方法であって、前記方法は、眼圧が上昇（ＩＯＰ）した患者に、降圧剤と生分解性ポリマーとを含む徐放型インプラントを前房内または前部硝子体に投与するステップを含み、前記インプラントは約１０質量パーセント〜約５０質量パーセントの降圧剤と、約５０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記インプラントは治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。
2. 前記インプラントはＩＯＰをベースラインＩＯＰの約２０％〜約７０％減少させることができる請求項１に記載の方法。
3. 上昇した眼圧を処置する方法であって、前記方法は、眼圧が上昇した患者に、ラタノプロストまたはビマトプロストおよび生分解性ポリマーを含むロッド状の徐放型インプラントを線維柱帯網に対して前房内に投与するステップを含み、前記インプラントは約１０質量パーセント〜約５０質量パーセントのラタノプロストまたはビマトプロストと、約５０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記インプラントは治療有効量のラタノプロストまたはビマトプロストを約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。
4. 上昇した眼圧を処置する方法であって、前記方法は、眼圧が上昇した患者に、３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性マイクロスフェアと、約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントの降圧剤と、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含むマイクロスフェアを前房内または前部硝子体に投与するステップを含み、前記マイクロスフェアは治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。
5. 前記生分解性ポリマーがポリ乳酸ポリグリコール酸コポリマー（ＰＬＧＡ）および／またはポリ乳酸ポリマー（ＰＬＡ）を含む請求項４に記載の方法。
6. 前記降圧剤が、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびトラボプロストならびにそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグからなる群から選択される請求項４に記載の方法。
7. 前記降圧剤が、化合物Ａ〜Ｏ、およびそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグからなる群から選択される請求項４に記載の方法。
   化合物Ａ
   化合物Ｂ
   化合物Ｃ
   化合物Ｄ
   化合物Ｅ
   化合物Ｆ
   化合物Ｇ
   化合物Ｈ
   化合物Ｉ
   化合物Ｊ
   化合物Ｋ
   化合物Ｌ
   化合物Ｍ
   化合物Ｎ
   化合物Ｏ
8. 前記ドラッグ送達システムは高粘性ヒアルロン酸を含む請求項４に記載の方法。
9. 上昇した眼圧を処置する方法であって、前記方法は眼圧が上昇した患者に、３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性のマイクロスフェアを前房内に投与するステップを含み、前記マイクロスフェアは約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントのラタノプロストと、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記マイクロスフェアは治療有効量のラタノプロストを約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。
10. 上昇した眼圧を処置する方法であって、前記方法は眼圧が上昇した患者に、ラタノプロストおよびビマトプロストを含むロッド状の徐放型インプラントを線維柱帯網に対して前房内に投与するステップを含み、前記インプラントは約１０質量パーセント〜約５０質量パーセントの降圧剤と、約５０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記インプラントは治療有効量のラタノプロストを約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する方法。
11. 眼状態を処置するための眼内使用用医薬組成物であって、前記組成物は３０ミクロンと６０ミクロンの間の平均径を有する複数の徐放型生分解性マイクロスフェアを含み、前記マイクロスフェア約１０質量パーセント〜約３０質量パーセントの降圧剤と、約７０質量パーセント〜約９０質量パーセントの生分解性ポリマーとを含み、前記マイクロスフェアは治療有効量の降圧剤を約１０日と約１２０日の間の期間にわたり放出する医薬組成物。
12. 前記マイクロスフェアが約１質量％〜約９９質量％のポリマーを含む、請求項１１に記載の組成物。
13. 前記ポリマーがＰＬＧＡである、請求項１１に記載の組成物。
14. 前記降圧剤が、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびトラボプロストならびにそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグからなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
15. 前記降圧剤が化合物Ａ〜Ｏ、およびそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグからなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
    化合物Ａ
    化合物Ｂ
    化合物Ｃ
    化合物Ｄ
    化合物Ｅ
    化合物Ｆ
    化合物Ｇ
    化合物Ｈ
    化合物Ｉ
    化合物Ｊ
    化合物Ｋ
    化合物Ｌ
    化合物Ｍ
    化合物Ｎ
    化合物Ｏ
16. 高粘性ヒアルロン酸をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
17. 眼状態が緑内障である、請求項１１に記載の組成物。
18. 前記降圧剤が化合物Ａ〜Ｏ、ならびにそれらの塩類、エステル類およびプロドラッグからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
    化合物Ａ
    化合物Ｂ
    化合物Ｃ
    化合物Ｄ
    化合物Ｅ
    化合物Ｆ
    化合物Ｇ
    化合物Ｈ
    化合物Ｉ
    化合物Ｊ
    化合物Ｋ
    化合物Ｌ
    化合物Ｍ
    化合物Ｎ
    化合物Ｏ