JP2008074780A - リポソームの皮膚吸収部位をコントロールする方法及びリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤 - Google Patents

Abstract

【課題】リポソームの皮膚吸収部位をコントロールする方法及びその方法に用いられるリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤、さらに該リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤を含有する皮膚外用剤を提供すること。
【解決手段】
ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を膜構成成分として含むリポソームを皮膚に吸収させるに当たって前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法及び前記リポソームからなるリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤並びに前記リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤を含有する皮膚外用剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、リポソームの膜構成成分として用いるリン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を変化させることによってリポソームの皮膚吸収部位をコントロールする方法及び前記種々含有量のホスファチジルコリンのリン脂質を膜構成成分としたリポソームからなるリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤に関する。

リポソームは、内部に水相を有する脂質二重層から成る閉鎖小胞体であり、医薬品、化粧品等幅広い分野で、主に生理活性物質のキャリアーとして用いられている。
リポソームに生理活性物質等を内包して経皮吸収させる場合、内包物質の生理活性物質等の種類によって皮膚内のターゲット部位をコントロールすることが薬効を効果的に発揮させる上で有効である。

高橋らによれば、リポソーム膜として一般的に用いられるリン脂質において、ホスフォチジルイノシトールとホスフォチジルエタノールアミンの含有量を合わせて約６０％までに高めた水素添加大豆レシチンを調製し、酢酸トコフェロールの角質層での貯留効果を検討したところ、一般的な水素添加大豆レシチンに比べて、効果が増大したことを報告している。この効果は、ホスフォチジルイノシトールやホスフォチジルエタノールアミンがホスフォチジルコリンに比較してより角質上層部に滞留しやすいことに由来すると説明されている（非特許文献１参照）。

しかしながら、リポソームの経皮吸収の際の皮膚内のターゲット部位をコントロールする技術の開示はなく、示唆する記載もない。経皮吸収の際の皮膚内のターゲット部位を精度よくコントロールすることができれば皮膚科学的価値の高いものとなる。

フレグランス ジャーナル、２００１−１２、ｐ．５１

本発明は上記事情に鑑みてなされたもので、その目的は、リポソームの皮膚吸収部位をコントロールする方法及びその方法に用いられるリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤、さらに該リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤を含有する皮膚外用剤を提供することにある。

本発明者らは上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、リポソームの膜構成成分としてホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を用い、前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を変化させるとリポソームの皮膚吸収部位をコントロールすることができ、前記リポソームは、前記種々含有量のホスファチジルコリンのリン脂質を膜構成成分としたリポソームによりリポソームの皮膚吸収をコントロールできるリリース剤となることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を膜構成成分として含むリポソームを皮膚に吸収させるに当たって、前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法である。

さらに、本発明は、ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質並びに界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を膜構成成分として含むリポソームを皮膚に吸収させるに当たって、前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法である。

前記方法において、リポソームの膜構成成分として、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上をリン脂質と併用すると、リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールがより精度のよいものとなる。

前記方法における界面活性剤としては、アシルメチルタウリン塩及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油であることが好ましい。

前記方法におけるアシルメチルタウリン塩は、メチルステアロイルタウリン塩が好ましい。

また、前記方法におけるリン脂質は、水素添加リン脂質であることが好ましい。

さらに、本発明は、ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を膜構成成分として含むリポソームからなる、前記リン脂質中のホスファチジルコリン含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることによりリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤である。

さらに、本発明は、ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質並びに界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を膜構成成分として含むリポソームからなる、前記リン脂質中のホスファチジルコリン含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることによりリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤である。

前記リリース剤において、リポソームの膜構成成分として、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上をリン脂質と併用すると、リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールがより精度のよいものとなる。

前記リリース剤における界面活性剤としては、アシルメチルタウリン塩及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油であることが好ましい。

前記リリース剤におけるアシルメチルタウリン塩は、メチルステアロイルタウリン塩が好ましい。

また、前記リリース剤におけるリン脂質は、水素添加リン脂質であることが好ましい。

さらに、本発明は前記リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤を含有する皮膚外用剤である。

本発明によれば、リン脂質を膜構成成分として含むリポソームの前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより、リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールすることができる。特に、皮膚中のレセプター及び真皮からなる皮膚深部への吸収割合をコントロールすることができる。さらに、前記方法に用いるリポソームは、リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするための、特に、皮膚のレセプター及び真皮からなる皮膚深部への吸収割合をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤として有用である。前記リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤は皮膚外用剤に含有され効果を発揮する。

以下、本発明を実施するための最良の形態について詳述する。

本発明においては、リポソーム膜の構成成分として、リン脂質が用いられる。前記リン脂質は、ホスファチジルコリン（レシチン）を０〜１００質量％含み、その他の成分としてホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ジホスファチジルグリセロール、スフィンゴミエリン等が含まれる。したがって、例えば、ホスファチジルコリンを０質量％含むリン脂質とは、ホスファチジルコリン以外のホスファチジルエタノールアミン等からなるリン脂質であり、またホスファチジルコリンを１００質量％含むリン脂質とは、ホスファチジルコリンからなるリン脂質である。本発明におけるリン脂質は、化粧料、医薬部外品、医薬品等に使用されるものであれば特に限定されない。なお、本発明においてリン脂質とは、天然リン脂質、水素添加リン脂質等のリン脂質誘導体、合成リン脂質等を含めた概念のものである。前記ホスファチジルコリンについては、天然の大豆レシチン、卵黄レシチン等が使用できる。

前記ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質は、市販品を用いることが可能であり、市販品の例としては、例えば、ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）、ルシノールＳ−１０Ｅ（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）、ルシノールＳ−ＰＩＥ（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）（以上、日光ケミカルズ社製）等が挙げられる。

本発明に係るリン脂質の含有量は、リポソーム中０．５〜１０．０質量％であることが好ましい。この範囲において本発明の充分な効果を得ることができる。

本発明においてはリポソームの膜構成成分として用いるリン脂質中の、ホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で調整する。前記ホスファチジルコリンの含有量によって後で証明するようにリン脂質を膜構成成分として含むリポソームが皮膚に経皮吸収された場合、皮膚の皮膚表面からレセプターの範囲での吸収部位を異なったものにすることができる。リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を増加させる程、より皮膚深部方向に多く吸収され、リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量が高いリポソームは、レセプター及び真皮からなる皮膚深部（以下、単に皮膚深部という。）に選択的に吸収される。逆に、リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を減少させる程、皮膚深部方向への吸収が抑えられ、皮膚深部への吸収が少なく、より皮膚表面方向への吸収が多くなり、選択的に表皮及びそれより表面側の表面部に吸収される。したがって、リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより、リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールすることができるコントロール方法が提供される。また、このようなリン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させたリポソームはリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤として有用である。

本発明においては、リポソーム膜の構成成分として前記リン脂質とともに界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を併用することができる。これらとの併用により、前記リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールをより精度のよいものとすることができる。

前記リン脂質と併用される界面活性剤としては、特に限定されないが、非イオン界面活性剤及びアニオン界面活性剤が好ましい。

非イオン界面活性剤の例としては、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン（以下、ＰＯＥという。）ソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、ＰＯＥソルビタンモノステアレート等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥグリセリンモノイソステアレート等）、ポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧという。）脂肪酸エステル類（ＰＥＧモノオレエート、ＰＥＧジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ポリオキシプロピレン（以下、ＰＯＰという。）アルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等を挙げることができる。非イオン界面活性剤は１種または２種以上が任意に選択されて用いられる。

本発明においては、これらのうち、ＰＯＥ硬化ヒマシ油誘導体が好ましく用いられる。なかでも、ＰＯＥの平均付加モル数が４０〜８０のＰＯＥ硬化ヒマシ油誘導体が好ましい。特に、ＰＯＥの平均付加モル数が４０〜８０のＰＯＥ硬化ヒマシ油（以下、ＨＣＯといい、例えばＰＯＥの平均付加モル数が６０の場合、ＨＣＯ−６０と示す。）が好ましい。

また、アニオン性界面活性剤の例としては、例えば、脂肪酸セッケン（例えば、ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、アルキル硫酸塩（例えば、ラウリル硫酸カリウム等）、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル、アシルメチルタウリン塩（例えば、メチルステアロイルタウリン塩、メチルオレオイルタウリン塩、メチルステアロイルタウリンナトリウム（以下、ＳＭＴという。）、メチルオレオイルタウリンナトリウム等）が好適に使用される。これらのうちでは、ＳＭＴを代表とするアシルメチルタウリン塩が特に好ましい。

本発明において前記リン脂質と併用されるコレステロールエステルとしては、コレステロールと高級脂肪酸のエステルである。前記高級脂肪酸としては、好ましくは炭素数１２〜２４の直鎖又は分岐鎖の飽和又は不飽和脂肪酸であり、例えば、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、マカデミアナッツ油脂肪酸が挙げられる。これらのうちでは、特にステアリン酸、オレイン酸、パルミチン酸が好ましい。コレステロールエステルの具体例としては、ラウリン酸コレステリル、ミリスチン酸コレステリル、パルミトレイン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、リノール酸コレステリル、マカデミアナッツ油脂肪酸コレステリル、ラウロイルグルタミン酸ジ（コレステリル／オクチルドデシル）等が挙げられる。

界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上の含有量としては、特に限定されないが、リポソーム中のリン脂質に対して５〜８０質量％であることが好ましい。この範囲において本発明の充分な効果を得ることができる。

リポソーム膜の構成成分として、公知の他の成分をさらに本発明の効果を損なわない範囲で添加しても構わない。また、リポソームには、リン脂質膜中及び内水相中にそれぞれ親油性もしくは親水性の種々の成分を内包させることができる。例えば、リン脂質膜中に内包させ得る親油性成分としては、アボカド油，アルモンド油，オリーブ油，ゴマ油，サザンカ油，サフラワー油，大豆油，ツバキ油，トウモロコシ油，ナタネ油，パーシック油，ヒマシ油，綿実油，落花生油，ホホバ油等の植物性油類又は植物性ロウ類、ミリスチン酸イソプロピル，パルミチン酸イソプロピル，ラウリン酸ヘキシル，ミリスチン酸オクチルドデシル，ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル，２−エチルヘキサン酸セチル，トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル，トリオクタン酸トリメチロールプロパン等のエステル油類、フェニルアラニン，トリプトファン，イソロイシン，ロイシン，プロリン，メチオニン，バリン，アラニン等の疎水性アミノ酸類及びこれらの親油性誘導体、レチノール，レチナール，レチノイン酸等のビタミンＡ類及びこれらの親油性誘導体、α−カロテン，β−カロテン，γ−カロテン等のプロビタミンＡ類、コレカルシフェロール，エルゴカルシフェロール等のビタミンＤ類及びこれらの親油性誘導体、７−デヒドロコレステロール，エルゴステロール等のプロビタミンＤ類及びこれらの親油性誘導体、α−トコフェロール，βトコフェロール，γ−トコフェロール，δ−トコフェロール等のビタミンＥ類及びこれらの親油性誘導体、フィロキノン，メナキノン，メナジオン等のビタミンＫ類及びこれらの親油性誘導体等の親油性ビタミン類、ユビキノン及びその親油性誘導体，リポ酸及びその親油性誘導体，リノール酸及びその親油性誘導体，リノレン酸及びその親油性誘導体，アラキドン酸及びその親油性誘導体等といった親油性ビタミン様作用因子類、リボフラビン酪酸エステル，ジカプリル酸ピリドキシン，ジパルミチン酸ピリドキシン，パルミチン酸アスコルビル，ジパルミチン酸アスコルビル等の水溶性ビタミン類の親油性誘導体、グアイアズレン，グアイアズレンスルホン酸エチル，グリチルレチン酸ステアリル等の親油性抗炎症剤等が挙げられる。これらの成分は１種又は２種以上を選択して用いることができる。

また、内水相中に内包させる親水性成分としては、１，３−ブチレングリコール，プロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール類、グルコース，ガラクトース，フルクトース，サッカロース，マルトース等の単糖類及びオリゴ糖類、イノシトール，ソルビトール，マルチトール等の糖アルコール類、リシン，グルタミン，アスパラギン，グルタミン酸，アスパラギン酸，トレオニン，アルギニン，セリン，ピロリドンカルボン酸等の親水性アミノ酸類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、チアミン等ビタミンＢ_１類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、リボフラビン等ビタミンＢ_２類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、ニコチン酸，ニコチン酸アミド等ナイアシン類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、ピリドキシン，ピリドキサール，ピリドキサミン等ビタミンＢ_６類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、パントテン酸及びその塩並びに親水性誘導体、ビオチン及びその塩並びに親水性誘導体、葉酸及びその塩並びに親水性誘導体、コバラミン等ビタミンＢ_１２類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、アスコルビン酸及びその塩並びに親水性誘導体等の親水性ビタミン類、オロト酸及びその塩並びに親水性誘導体、カルニチン及びその塩並びに親水性誘導体、ヘスペリジン，エリオジクチン，ルチン等のビタミンＰ類等の親水性ビタミン様作用因子、グリコール酸，乳酸，クエン酸等の２−ヒドロキシカルボン酸及びこれらの塩並びに親水性誘導体、ヒアルロン酸，コンドロイチン硫酸，デルマタン硫酸，ヘパリン等ムコ多糖類及びこれらの塩並びに親水性誘導体、可溶性コラーゲン，コラーゲン加水分解物，エラスチン加水分解物，ケラチン加水分解物等のペプチド類及びこれらの塩並びに親水性修飾物、アラントイン及びその塩並びに親水性誘導体，グアイアズレンスルホン酸塩，グリチルリチン酸及びその塩並びに親水性誘導体等の親水性抗炎症剤、植物の極性溶媒による抽出物等が挙げられる。これらの成分は１種又は２種以上を選択して用いられる。

本発明に係るリポソームの調製にあたっては、特に限定されることなく既知の方法を用いて調製することができる。例えば、前記膜構成成分を、もし必要であれば多価アルコール等の他の活性成分、リポソームへの内包成分と共に水に溶解乃至分散させる。分散に当たっては例えば加温（例えば、８０〜９０℃）、高速撹拌（例えば、ホモミキサーで３０００ｒｐｍ以上の撹拌速度）等により分散を高めることが好ましい。次いで、この水分散液を高圧ミキサー（例えばマイクロフルイダイザーやＡＰＶホモジナイザー等）を用いて微細に分散させてリポソームを形成させ、リポソーム水分散液を得る。

また、油溶性の生理活性物質を含有する油性コアを内包するリポソームは、例えば、油溶性の生理活性物質を油性成分に溶解し、これに、リン脂質等のリポソーム膜構成成分を加えて撹拌した後、水を加えてよく撹拌することにより、水分散液として調製することができる。撹拌には、必要に応じて超音波を使用してもよい。

さらに、膜構成成分と水性溶液とを、膜構成成分の相転移温度以上にて撹拌するか、又は膜構成成分を、グリセリン，ジグリセリン，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，ポリエチレングリコール，１，３−ブチレングリコール，ジエチレングリコールモノエチルエーテル，ソルビトール，マルチトール等の多価アルコール類、グリセリルモノ酢酸エステル，グリセリルジ酢酸エステル，グリセロリン酸等のグリセリンエステル類等の水溶性の非揮発性有機溶媒に混合し、次いで水性溶液に分散して調製することもできる。さらに、得られたリポソーム懸濁液に超音波処理を加えてもよい。

リポソームのその他の製造法としては、薄膜法、逆層蒸発法、エタノール注入法、脱水−再水和法等を挙げることができる。

本発明に係る前記リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤は応用範囲が広く、種々の分野に応用することができる。例えば、医薬部外品を含む化粧品、医薬品等が挙げられる。

本発明に係る前記リポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤は皮膚外用剤に配合され、優れた効果を発揮する。リポソームは、一般的には、水分散液として存在し、水に任意に希釈される。皮膚外用剤中においても皮膚外用剤中の水に任意に希釈されるが、本発明におけるリポソームとは、皮膚外用剤中に存在する任意に希釈されたリポソーム水分散液を含む概念である。

本発明に係る皮膚外用剤には通常医薬部外品を含む化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等必要に応じて適宜配合される。

本発明に係る皮膚外用剤としては、医薬品（軟膏剤等）、医薬部外品（軟膏剤等）及び化粧品［乳液、クリーム、ジェル、エッセンス（美容液）、頭髪用化粧品、ボディ化粧品等］の形態に広く適用可能である。

以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。実施例の説明に先立ち本発明で用いた効果試験方法について説明する。

１．経皮吸収性
（１）試験方法及び評価
蛍光物質４ＭＵＳ（4-Methylumbelliferyl sulfate potassium salt）を添加した試料を塗布した豚皮をフランツ型の拡散セルにセットし、３２℃で２４時間放置後、皮膚内に含まれる４ＭＵＳをＳｕｌｆａｔａｓｅ（Type IV from Limpets）で分解後、蛍光検出にて定量し、蛍光物の吸収量を測定した。なお、測定皮膚部位はレセプター、真皮、表皮であり、さらに皮膚に貼ったテープに存在する蛍光物を測定し、表皮中最外部における吸収とした。

次に、リポソームの製造例を挙げる。表１及び表２に掲げた成分を用いて以下の方法でリポソームを製造した。表１及び表２には使用した各成分の割合を質量％（配合量合計１００質量％）で示している。

（製造法）
（１）配合全成分をそれぞれ量り込み、室温にて精製水以外の成分を精製水中に撹拌しながら添加し、分散させた。
（２）その後、８０〜９０℃に加温して、ホモミキサーで高速撹拌し、分散を高めた。
（３）次いで、前項（２）の分散液を高圧ミキサー（マイクロフルイダイザー）を用いて微細に分散させてリポソームを形成させた。
（４）次いで、この分散液を室温まで冷却してリポソーム分散液を得た。

表１中、
（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）
（注２）ルシノールＳ−１０Ｅ（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）（日光ケミカルズ製）
（注３）ルシノールＳ−ＰＩＥ（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）（日光ケミカルズ製）

表２中、
（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）
（注２）ルシノールＳ−１０Ｅ（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）（日光ケミカルズ製）
（注３）ルシノールＳ−ＰＩＥ（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）（日光ケミカルズ製）

上記実施例１〜１３のリポソームにつき効果試験を行い、各皮膚部位での蛍光物の吸収量を測定した。なお、試験試料としては表１及び２に掲げた実施例１〜１３のリポソーム成分にさらに蛍光物質４ＭＵＳを添加して製造したリポソームを用いた。評価結果を表３及び表４に示した。表には、塗布量に対する全皮膚吸収量の割合（％）及び各部位の吸収量（全皮膚吸収量中の％）を示した。

表３及び表４から分かるように、ホスファチジルコリンを９０質量％含有するリン脂質（ルシノールＳ−１０ＥＸ）を膜構成成分とするリポソーム（実施例１）は、皮膚中のレセプターへの吸収量が多く、レセプター及び真皮からなる皮膚深部に全吸収量の９０％を超える量が吸収されている。このことから、ホスファチジルコリンの含有量の多いリン脂質を膜構成成分とするリポソームは選択的に皮膚深部に吸収されることが分かる。

また、ホスファチジルコリンの含有量がルシノールＳ−１０ＥＸに比べて少ない（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）のリン脂質（ルシノールＳ−１０Ｅ）を膜構成成分とするリポソーム（実施例２）は、皮膚中のレセプター及び真皮への吸収量は実施例１のリポソームに比べて少なく、皮膚中のレセプター並びにレセプター及び真皮からなる皮膚深部への到達吸収が抑えられ、これより浅い部位への吸収が選択的に行われていることが分かる。

さらに、ホスファチジルコリンの含有量がルシノールＳ−１０Ｅに比べて少ない（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）のリン脂質（ルシノールＳ−ＰＩＥ）を膜構成成分とするリポソーム（実施例３）は、皮膚中のレセプター及び真皮からなる皮膚深部への吸収量は実施例２のリポソームに比べてさらに少なく、これに対して、表皮及びテープ部への吸収量が前記実施例１〜２のリポソームに比べて多くなっており、皮膚中の浅い部位、特に、表皮及びテープ部への吸収が選択的に行われていることが分かる。

なお、前記実施例２のリポソームの表皮及びテープ部への吸収量は、本実施例３のリポソームの場合より少ないことから、前記実施例２のリポソームは皮膚中の中間深部への吸収が選択的に行われていることが分かる。

実施例４〜１３には、リポソーム膜の構成成分としてリン脂質と、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を併用したときの塗布量に対する全皮膚吸収量の割合（％）及び各部位の吸収量（全皮膚吸収量中の％）を示してある。

これらによれば、実施例１〜３と同様の傾向が見られる。すなわち、ホスファチジルコリンを９０質量％含有するリン脂質（ルシノールＳ−１０ＥＸ）と、ステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、ＨＣＯ−６０及びＳＭＴのいずれかを膜構成成分とするリポソーム（実施例４〜６及び１１）は、皮膚中のレセプターへの吸収量が多く、レセプター及び真皮からなる皮膚深部に全吸収量の９０％を超える量が吸収されている。

なお、実施例４〜６及び１１のリポソームは、実施例１との比較からステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、ＨＣＯ−６０及びＳＭＴのいずれかを膜構成成分として添加しないリポソームに比べて、皮膚中のレセプターへの吸収量の多さ、レセプター及び真皮からなる皮膚深部への選択的到達吸収（全吸収量の９０％を超える量が吸収）がより明確になっていることが分かる。したがって、リポソームの膜構成成分として、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上をリン脂質と併用すると、リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールがより精度のよいものとなることが分かる。

また、ホスファチジルコリンの含有量がルシノールＳ−１０ＥＸに比べて少ない（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）のリン脂質（ルシノールＳ−１０Ｅ）とＨＣＯ−６０、ステアリン酸コレステリル及びメチルオレオイルタウリンナトリウムのいずれかを膜構成成分とするリポソーム（実施例７、８及び１２）は、皮膚中のレセプターへの吸収量並びにレセプター及び真皮からなる皮膚深部への吸収量が実施例４〜６及び１１のリポソームに比べて少なく、皮膚中のレセプター並びにレセプター及び真皮からなる皮膚深部への到達吸収が抑えられ、これより浅い部位への吸収が選択的に行われていることが分かる。なお、実施例７、８及び１２のリポソームが皮膚中の中間深部への吸収が選択的に行われていることは、実施例２の場合と同様である。

さらに、実施例２との比較から実施例７、８及び１２のリポソームは、ＨＣＯ−６０、ステアリン酸コレステリル及びメチルオレオイルタウリンナトリウムのいずれかを膜構成成分として添加しないリポソームに比べて、レセプター及び真皮からなる皮膚深部より浅い部位（皮膚中の中間深部）への選択的吸収がより明確になっていることが分かる。これからも、リポソームの膜構成成分として、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上をリン脂質と併用すると、リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールがより精度のよいものとなることが分かる。

さらに、ホスファチジルコリンの含有量がルシノールＳ−１０Ｅに比べて少ない（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）のリン脂質（ルシノールＳ−ＰＩＥ）とステアリン酸コレステリル、ＳＭＴ及びＨＣＯ−８０のいずれかを膜構成成分とするリポソーム（実施例９、１０及び１３）は、皮膚中のレセプターへの吸収量並びにレセプター及び真皮からなる皮膚深部への吸収量が実施例７、８及び１２のリポソームに比べてさらに少なく、皮膚中のレセプター並びにレセプター及び真皮からなる皮膚深部への到達吸収がより抑えられ、より浅い部位への吸収が行われていることが分かる。特に、この実施例９、１０及び１３のリポソームは表皮及びテープ部位への吸収量が前記実施例４〜８及び１１〜１２のリポソームに比べて明らかに多くなっており、皮膚中の表皮及びテープ部位という浅い部位への吸収が選択的に行われていることが分かる。

なお、実施例３との比較からステアリン酸コレステリル、ＳＭＴ及びＨＣＯ−８０のいずれかを膜構成成分として添加しないリポソームに比べて、表皮及びテープ部位からなる皮膚の浅い部位への選択的吸収がより明確になっていることが分かる。これからも、リポソームの膜構成成分として、界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上をリン脂質と併用すると、リポソームの皮膚吸収到達部位のコントロールがより精度のよいものとなることが分かる。

以上から、レセプター及び真皮への到達吸収をみると、リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量が多いほど吸収割合が高いことが明らかであり、ホスファチジルコリンの含有量を減少させることによりリポソームの皮膚吸収到達部位が皮膚の浅い部位に移行しており、リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量によってリポソームの皮膚吸収到達部位ををコントロールすることができることが分かる。したがって、前記ホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることによって前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法として、またその方法に用いられるリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤として有用であることが明らかである。

以下に本発明に係る皮膚外用剤の製剤例を示す。いずれの皮膚外用剤もリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤としての優れた効果を有していた。なお、製造は前記実施例１〜１３のリポソームの製法に準じて製造した。

［製剤例１］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
ＨＣＯ−６０ １．０
リン脂質（注１） ４．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）

［製剤例２］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
ＳＭＴ １．０
リン脂質（注２） ４．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注２）ルシノールＳ−１０Ｅ（ホスファチジルコリン含有量５０質量％）（日光ケミカルズ製）

［製剤例３］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
ＨＣＯ−６０ １．０
リン脂質（注３） ４．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注３）ルシノールＳ−ＰＩＥ（ホスファチジルコリン含有量２０質量％）（日光ケミカルズ製）

［製剤例４］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
ＨＣＯ−８０ １．５
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウリン酸エステル ０．５
リン脂質（注１） ７．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）

［製剤例５］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
メチルオレオイルタウリンナトリウム ０．５
リン脂質（注１） ５．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）

［製剤例６］化粧水
成分 配合量（質量％）
グリセリン ８．０
１，３−ブチレングリコール ３．０
オレイルアルコール ０．１
パルミチン酸コレステリル １．５
リン脂質（注１） ３．０
エタノール １０．０
精製水 残余

（注１）ルシノールＳ−１０ＥＸ（ホスファチジルコリン含有量９０質量％）（日光ケミカルズ製）

Claims (11)

1. ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を膜構成成分として含むリポソームを皮膚に吸収させるに当たって、前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法。
2. ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質並びに界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を膜構成成分として含むリポソームを皮膚に吸収させるに当たって、前記リン脂質中のホスファチジルコリンの含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることにより前記リポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールする方法。
3. 界面活性剤が、アシルメチルタウリン塩及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油である請求項２記載の方法。
4. アシルメチルタウリン塩が、メチルステアロイルタウリン塩である請求項３記載の方法。
5. リン脂質が、水素添加リン脂質である請求項１乃至４のいずれか一項に記載の方法。
6. ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質を膜構成成分として含むリポソームからなる、前記リン脂質中のホスファチジルコリン含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることによりリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤。
7. ホスファチジルコリンを０〜１００質量％含有するリン脂質並びに界面活性剤及びコレステロールエステルからなる群から選ばれる１種以上を膜構成成分として含むリポソームからなる、前記リン脂質中のホスファチジルコリン含有量を０〜１００質量％の範囲で変化させることによりリポソームの皮膚吸収到達部位をコントロールするためのリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤。
8. 界面活性剤が、アシルメチルタウリン塩及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油である請求項７記載のリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤。
9. アシルメチルタウリン塩が、メチルステアロイルタウリン塩である請求項８記載のリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤。
10. リン脂質が、水素添加リン脂質である請求項６乃至９のいずれか一項に記載のリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤。
11. 請求項６乃至１０のいずれか一項に記載のリポソームの皮膚吸収コントロールリリース剤を含有する皮膚外用剤。