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JP2006056806A - Ｆ−９１４９５ａおよびその製造方法 - Google Patents

Ｆ−９１４９５ａおよびその製造方法 Download PDF

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JP2006056806A
JP2006056806A JP2004238490A JP2004238490A JP2006056806A JP 2006056806 A JP2006056806 A JP 2006056806A JP 2004238490 A JP2004238490 A JP 2004238490A JP 2004238490 A JP2004238490 A JP 2004238490A JP 2006056806 A JP2006056806 A JP 2006056806A
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Japan
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measured
compound
dimethyl sulfoxide
ppm
salt
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Application number
JP2004238490A
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English (en)
Inventor
Naoko Nakagawa
直子 中川
Tatsuya Yano
辰也 矢野
Azusa Aoyanagi
あずさ 青柳
Taisuke Ono
泰典 小野
Akira Okuyama
亮 奥山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sankyo Co Ltd
Original Assignee
Sankyo Co Ltd
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Publication date
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Abstract

【課題】血糖値および血漿トリグリセリド濃度を低下させる新規化合物を提供すること。
【解決手段】
下記式（Ｉ）
【化１】
Figure 2006056806

で表わされる化合物又はその塩。
【選択図】なし

Description

本発明は、血糖低下作用および血中トリグリセリド低下作用を有する新規化合物、該化合物を生産する微生物を培養する工程および概培養物から該化合物を回収する工程を含むことからなる該化合物の製造方法、該化合物を生産する新規微生物、該化合物を有効成分として含有する医薬組成物、該化合物を有効成分として含有する抗糖尿病剤、該化合物を有効成分として含有する抗高脂血症剤等に関する。
近年、食生活の変化あるいは運動不足傾向の増加に伴って、成人病、ことに糖尿病 、糖尿病性合併症、高脂血症等の患者が増加している。糖尿病は、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ：以下、「Ｉ型糖尿病」という）およびインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ：以下、「ＩＩ型糖尿病」という）に分類され、糖尿病患者の９０％以上は後者に罹患している。Ｉ型糖尿病の治療にはインスリン注射が、ＩＩ型糖尿病の治療には、運動療法や食事療法と共にスルホニルウレア剤、ビグアナイド、チアゾリジン誘導体などの経口抗糖尿病薬による薬物療法が選択されている。例えば、チアゾリジン誘導体は、インスリン抵抗性を顕著に改善して血糖値及び血中トリグリセリド値を低下させる、有用性の高いＩＩ型糖尿病治療剤であるが、体重増加、浮腫、心不全等の副作用が報告されている（非特許文献１）。それらの経口抗糖尿病薬は、糖尿病の最も重要な指標の一つである血糖値の管理に有用であり、ＩＩ型糖尿病の治療において一定の効果を示すことが多いものの、その効果は必ずしも十分ではなく、糖尿病性合併症の治療および予防は未解決の課題である。
高脂血症は、動脈硬化症、ならびに、その結果生じる虚血性心疾患および虚血性脳血管疾患につながる重要な基礎疾患であり、患者の若年化傾向も指摘されている。虚血性心疾患としては狭心症、心筋梗塞、心不全等が、虚血性脳血管疾患としては脳梗塞、脳内出血等がそれぞれ知られている。高脂血症患者においては、コレステロールやトリグリセリドの異常な高値（総コレステロール２２０ｍｇ／ｄｌ以上、トリグリセリド１５０ｍｇ／ｍｌ以上）が見られ、心筋梗塞を含む動脈硬化性疾患あるいは急性膵臓炎のリスクファクターとして薬物療法の対象になっている。しかしながら、高脂血症を完全に治癒せしめる薬物療法は未だ確立されておらず、持続的な血清脂質異常に起因する動脈硬化症、虚血性心疾患などの合併症は依然先進国における主な死因となっている。
また、ＩＩ型糖尿病患者はしばしば高脂血症を併発する。そのため、抗糖尿作用および抗高脂血症作用を併せ持つ医薬が切望されているが、その社会的要請の大きさにもかかわらず、有望な化合物は未だ見出されていないのが現状である。
レボヴィッツ（Lebovitz, H.E.）著、ダイアビーティーズ／メタボリズム・リサーチ・アンド・レビューズ（Diabetes/Metabolism Research and Reviews）、第18巻、Ｓ２３−Ｓ２９ページ、２００２年刊行
本発明者らは、血糖降下作用および血中トリグリセリド降下作用を併せもつ新規化合物の探索を鋭意行った結果、真菌の培養物中に所望の作用を有し且つ体重増加を来たさない新規化合物を見出し、本発明を完成した。
本発明は；
（１）
下記式（Ｉ）
Figure 2006056806
 で表わされる化合物又はその塩，
（２）
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩：
１）物質の性状：赤茶色粉末状物質、
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶、水に不溶、
３）分子式：Ｃ４０Ｈ４４Ｏ１３、
４）分子量：７３２（ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定）；
５）高分解能ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、［Ｍ＋Ｎａ］＋は次に示す通り
実測値：７５５．２７０９
計算値：７５５．２６８０、
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
２３４ｎｍ（ε４３５００），２６５ｎｍ（ε３１８００），２９７ｎｍ（ｓｈ），３５４ｎｍ（ε１０８００）、
７）赤外部吸収スペクトル：
臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
３２２３，２９５５，２９２８，２８５７，１７１３，１６７４，１６２２，１４６５，１３９９，１３７７，１３３７，１２６８，１０９９，１０７９，１０１０，９６３，９４４，９０７ｃｍ−１、
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（２．５０ｐｐｍ）を用いて測定した、１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り、
０．８６（３Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｍ），１．２−１．３（１６Ｈ，ｍ），１．５７（２Ｈ，ｍ），１．５８（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．７（２Ｈ，ｓ），６．５５（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），６．８３（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）ｐｐｍ、
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（３９．５１ｐｐｍ）を用いて測定した、１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り
１３．９７（ｑ），１４．００（ｑ），２２．０６（ｔ），２２．１２（ｔ），２２．９（ｔ），２３．７（ｔ），２８．５（ｔ），２８．６（ｔ），２８．７（ｔ），２８．９（ｔ），３１．２（ｔ），３１．３（ｔ），３８．１（ｔ），３８．７（ｔ），４３．３８（ｔ），４３．４３（ｔ），１００．９（ｄ），１０３．１（ｓ），１０７．９（ｓ），１１３．７（ｄ），１１８．０（ｄ），１１８．０（ｄ），１１９．７（ｓ），１２１．１（ｄ），１３０．６（ｓ），１３１．７（ｓ），１３５．９（ｓ），１３６．４（ｓ），１３９．０（ｓ），１５４．３（ｓ），１５４．８（ｓ），１５５．４（ｓ），１５７．１（ｓ），１５８．８（ｓ），１７１．３（ｓ），１７２．６（ｓ），１８０．４（ｓ），１８９．９（ｓ），２０５．３（ｓ），２０６．３（ｓ）ｐｐｍ、
１０）高速液体クロマトグラフィー：
カラム：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０，４．６φ×１５０ｍｍ（資生堂（株）製）
溶媒：０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する６５％アセトニトリル水
流速：１．０ｍｌ／分
検出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間：７．７分、
（３）
下記式（ＩＩ）
Figure 2006056806
 で表わされる化合物又はその塩、
（４）
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩：
１）物質の性状：赤茶色粉末状物質、
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶、水に不溶、
３）分子式：Ｃ４２Ｈ４８Ｏ１３、
４）分子量：７６０（ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、［Ｍ＋Ｎａ］＋は次に示す通り
実測値：７８３．２９９９
計算値：７８３．２９９３、
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
２３４ｎｍ（ε４２２００），２６５ｎｍ（ε３２７００），２９７ｎｍ（ｓｈ），３５４ｎｍ（ε１０７００）、
７）赤外部吸収スペクトル：
臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
３３２７，２９５４，２９２８，２８５６，１７４０，１７０１，１６７４，１６１７，１４５８，１４３８，１４０５，１３３８，１２６５，１１７０，１１０５，１０８１，１０４１，１０１２，９６２，９０８ｃｍ−１、
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（２．５０ｐｐｍ）を用いて測定した、１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り
０．８６（３Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｍ），１．２−１．３（１６Ｈ，ｍ），１．５５（２Ｈ，ｍ），１．５７（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．５（３Ｈ，ｓ），３．６２（３Ｈ，ｓ），３．６３（２Ｈ，ｓ），３．８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｓ），７．６２（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ、
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（３９．５１ｐｐｍ）を用いて測定した、１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは以下に示す通り
１３．８８（ｑ），１３．９２（ｑ），２１．９８（ｔ），２２．０３（ｔ），２２．８（ｔ），２３．７（ｔ），２８．４（ｔ），２８．５（ｔ），２８．６（ｔ），２８．８（ｔ），３１．１（ｔ），３１．２（ｔ），３７．７（ｔ），３８．６（ｔ），４３．３（ｔ），４３．５（ｔ），５１．３（ｑ），５１．９（ｑ），１０１．０（ｄ），１０３．５（ｓ），１０８．０（ｓ），１１４．１（ｓ），１１８．２（ｓ），１１８．２（ｄ），１１９．１（ｓ），１２０．９（ｄ），１３０．９０（ｓ），１３０．９３（ｓ），１３６．０（ｓ），１３６．１（ｓ），１３８．１（ｓ），１５４．８（ｓ），１５５．０（ｓ），１５５．４（ｓ），１５７．３（ｓ），１５８．６（ｓ），１７０．３（ｓ），１７１．５（ｓ），１８０．５（ｓ），１８９．５（ｓ），２０５．２（ｓ），２０５．９（ｓ）ｐｐｍ、
１０）高速液体クロマトグラフィー：
カラム：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０，４．６φ×１５０ｍｍ（資生堂（株）製）
溶媒：０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する８０％アセトニトリル水
流速：１．０ｍｌ／分
検出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間：８．６分、
（５）
下記［ｉ］および［ｉｉ］の工程を含むことからなる、（１）又は（２）に記載の化合物の製造方法：
［ｉ］ペニシリウム属に属する、（１）又は（２）に記載の化合物の生産菌を培養する工程；及び
［ｉｉ］該生産菌の培養物より（１）又は（２）に記載の化合物を採取する工程。
（６）
ペニシリウム属に属する、（１）又は（２）に記載の化合物の生産菌がペニシリウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ ２８３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１００７２）である、（５）に記載の製造方法、
（７）
（１）又は（２）に記載の化合物を生産することを特徴とする、ペニシリウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ ２８３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１００７２）、
（８）
（１）又は（２）に記載の化合物をメタノール中で酸触媒と接触させる工程を含むことからなる、（３）又は（４）に記載の化合物の製造方法。
（９）
（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する医薬組成物、
（１０）
（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する抗糖尿剤、および、
（１１）
（１）乃至（４）のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する抗高脂血症剤、
に関する。
本発明においては、前記（１）または（２）に記載の化合物をＦ−９１４９５Ａと、前記（３）または（４）に記載の化合物をＦ−９１４９５Ａジメチルエステルとそれぞれ称する。
本発明の化合物は、カルボキシル基、水酸基等を有するため、塩基を用いて当業者に周知の方法により塩にすることができる。本発明はこれらの塩も包含する。本発明の化合物の塩を医薬として使用する場合、医学的に使用され、薬理学的に許容されるものであれば特に限定はなく、また、医薬以外の用途に用いる場合、例えば中間体として用いる場合には、該用途に用いることのできるものであれば特に限定されない。
そのような塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等の金属塩；アンモニウム塩のような無機塩；ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニア塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、アスパラギン塩のようなアミノ酸塩、好適には、薬理学的に許容される塩であり、より好適には、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩である。
また、本発明の化合物およびその塩は、大気中に放置したり、水又は有機溶媒と混和することによって水又は溶媒と結合し、水和物又は溶媒和物を形成する場合があるが、これらの水和物及び溶媒和物もとして本発明に含まれる。
本発明が提供する新規化合物は優れた血糖値低下作用および血中トリグリセリド値低下作用を示し、しかも体重を増加させないので、糖尿病、高脂血症等の予防及び／又は治療に有用である。
本発明のＦ−９１４９５Ａは、該化合物を生産する微生物の培養物から常法に従って単離することができる。当該微生物としては、Ｆ−９１４９５Ａを生産する微生物であれば特に限定されないが、好適にはＦ−９１４９５Ａを生産する真菌であり、より好適にはＦ−９１４９５Ａを生産する、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属に属する真菌であり、最適にはペニシリウム エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．） ＳＡＮＫ ２８３０３株（以下、単に「ＳＡＮＫ ２８３０３株」という）である。
ＳＡＮＫ ２８３０３株は、沖縄県八重山郡竹富町の樹木の樹皮より、２０００年６月に分離された。
以下、ＳＡＮＫ ２８３０３株の菌学的性状について述べる。
菌学的性状の記載は、「ア ラボラトリー ガイド トゥ コモン ペニシリウム スピーシーズ 第三版（Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｃｏｍｍｏｎ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ （３ｒｄ． ｅｄｉｔｉｏｎ））」 （ピット 著（Ｐｉｔｔ， Ｊ． Ｉ．）フード サイエンス オーストラリア（Ｆｏｏｄ ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｕｓｔｒａｌｉａ），オーストラリア、２０００年）、色調の表示は「メチューン ハンドブック オブ カラー 第三版（Ｍｅｔｈｕｅｎ ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｃｏｌｏｕｒ（３ｒｄ． ｅｄｉｔｉｏｎ））」 （コーネルップ アンド ヴァンシャー 著 （Ｋｏｒｎｅｒｕｐ， Ａ． ａｎｄ Ｗａｎｓｃｈｅｒ， Ｊ． Ｈ．） エリー メチューン （Ｅｒｙｅ Ｍｅｔｈｕｅｎ）， ロンドン、１９７８年）に従った。

菌学的性状記載のために使用した各培地の組成を以下に記載する。
(表１)
ＣＹＡ培地（ツァペック イースト寒天培地 （Ｃｚａｐｅｋ Ｙｅａｓｔ Ｅｘｔｒａｃｔ Ａｇａｒ））
―――――――――――――――――――――――

ツァペック濃縮液＊ １０ｍｌ
イーストエキス ５ｇ
シュークロース ３０ｇ
寒天 １５ｇ
Ｋ２ＨＰＯ４ １．０ｇ
―――――――――――――――――――――――
蒸留水 １０００ｍｌ
（滅菌条件：１２１℃、２０分間）
(表２)
Ｇ２５Ｎ培地（２５％グリセロール ニトレート アガー（２５％ Ｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｎｉｔｒａｔｅ Ａｇａｒ））
―――――――――――――――――――――――
Ｋ２ＨＰＯ４ ０．７５ｇ
ツァペック濃縮液＊ ７．５ｍｌ
イーストエキス ３．７ｇ
グリセロール ２５０ｇ
寒天 １２ｇ
―――――――――――――――――――――――
蒸留水 ７５０ｍｌ
（滅菌条件：１２１℃、２０分間）

＊(表３)
ツァペック 濃縮液
―――――――――――――――――――――――
ＮａＮＯ３ ３０ｇ
ＫＣｌ ５ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ５ｇ
ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ
ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．１ｇ
ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ ０．０５ｇ
―――――――――――――――――――――――
蒸留水 １００ｍｌ
(表４)
ＭＥＡ培地（マルトエキス寒天（Ｍａｌｔ Ｅｘｔｒａｃｔ Ａｇａｒ））
―――――――――――――――――――――――
マルトエキス ２０ｇ
ペプトン １ｇ
グルコース ２０ｇ
寒天 ２０ｇ
―――――――――――――――――――――――
蒸留水 １０００ｍｌ
（滅菌条件：１２１℃、２０分間）

ＳＡＮＫ ２８３０３株の菌学的性状を以下に示す
ＣＹＡ培地上で７日間、２５℃で培養したコロニーは、直径 １５−１８ ｍｍ、菌糸が密に形成され厚く、ビロード状で、放射状のしわを形成し、中心部から縁辺部にかけて旺盛に分生子を形成する。菌糸は白色となる。分生子は灰青緑色（ｇｒｅｙｉｓｈ ｔｕｒｑｕｏｉｓｅ（２４Ｃ３））から、灰緑色（ｇｒｅｙｉｓｈ ｇｒｅｅｎ （２６Ｅ３））となる。浸出液、菌核は形成しない。裏面は赤茶色（ｒｅｄｄｉｓｈ ｂｒｏｗｎ（９Ｄ６））から暗赤色（ｄｕｌｌ ｒｅｄ（８Ｂ３））となる。可溶性色素は形成しない。
ＭＥＡ培地上で７日間、２５℃で培養したコロニーは、直径 １８−２０ ｍｍ、薄く、やや綿毛状で、中心部に分生子を形成する。菌糸は白色となる。分生子は灰緑色（ｇｒｅｙｉｓｈ ｇｒｅｅｎ （２６Ｅ７））から暗緑色（ｄｕｌｌ ｇｒｅｅｎ （２６Ｅ４））となる。浸出液、菌核は形成しない。裏面は暗赤色（ｄｕｌｌ ｒｅｄ （８Ｂ３））から赤灰色（ｒｅｄｄｉｓｈ ｇｒｅｙ （７Ｂ２））となる。可溶性色素は形成しない。
Ｇ２５Ｎ培地上で７日間、２５℃で培養したコロニーは、直径 １０−１２ ｍｍ、菌糸が密に形成され厚く、ビロード状で、分生子はわずかに形成される。菌糸は白色となる。浸出液、菌核は形成しない。裏面は白色、中心部で茶橙色（ｂｒｏｗｎｉｓｈ ｏｒａｎｇｅ（６Ｃ４−３））となる。可溶性色素は形成しない。
ＳＡＮＫ ２８３０３株のＣＹＡ培地及びＭＥＡ培地での２３℃、７日目の微細構造は以下の通り：分生子柄はコロニーの表面あるいは表面下の菌糸から形成される。分生子柄は、４０−１９０×２−３μｍ、無色滑面で、単輪生で、まれにメトレを形成し、頂部がやや膨張し（直径：４．５−８ μｍ）、先端部にほうき状にフィアライドを形成する。フィアライドは７．５−１２．５×２−４ μｍ、アンプル型となる。分生子は直径１．８−３ μｍ、球形から亜球形、滑面からやや粗面で、散開した短い分生子鎖を形成する。

生理学的性質
最適温度：２３乃至２８℃
生育温度：１０乃至３２℃

以上のような菌学的特徴はピットの文献（「 ザ ジーナス ペニシリウム アンド イッツ テレオモルフィック ステーツ ユウペニシリウム アンド タラロマイセス（Ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｔｅｌｅｏｍｏｒｐｈｉｃ ｓｔａｔｅｓ Ｅｕｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ａｎｄ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ）」ピット著（Ｐｉｔｔ， Ｊ． Ｉ．）アカデミック プレス （Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ），ロンドン、１９７９年）のペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属の記載によく一致した。従って、ＳＡＮＫ ２８３０３株をペニシリウム エスピー （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）に属する菌株と同定した。
なお、ＳＡＮＫ ２８３０３株は、「ペニシリウム エスピー （Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．） ＳＡＮＫ ２８３０３株」として、２００４年６月２２日付けで独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センター（住所：日本国茨城県つくば市東１−１−１中央第６）に国内寄託され受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−２００９３が付された後、２００４年７月２０日付けで国際寄託へ移管され受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１００７２が付された。
周知の通り、真菌類は自然界において、あるいは人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線照射、化学薬品処理等）により、変異を起こしやすく、本発明のＳＡＮＫ ２８３０３株も容易にそのような変異を起こし得る。本発明において、ＳＡＮＫ ２８３０３株は、その全ての変異株を包含する。
また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば組み換え、形質導入、形質転換等により得られたものも包含される。即ち、Ｆ−９１４９５Ａを生産するＳＡＮＫ ２８３０３株、それらの変異株およびそれらと明確に区別されない菌株は全てＳＡＮＫ ２８３０３株に包含される。
上述の通り、Ｆ−９１４９５Ａは、該物質を生産する微生物を培養することにより、その培養物より単離することができる。
Ｆ−９１４９５Ａ生産菌の培養は、通常微生物の二次代謝産物の製造に使用され得る培地を用いて行なうことができる。そのような培地は、微生物が資化出来る炭素源、窒素源及び無機塩を含有する。
炭素源としては、例えば、グルコース、フルクトース、マルトース、シュークロース、マンニトール、グリセリン、デキストリン、オート麦、ライ麦、デンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等を挙げることができ、これらは単独で、あるいは併用して使用することができる。炭素源の添加量は、通常、培地量の１乃至１０重量％の範囲である。
窒素源としては、通常、蛋白質およびその加水分解物を含有する物質または無機塩が使用される。このような窒素源としては、例えば、大豆粉、フスマ、落花生粉、綿実粉、カゼイン加水分解物、ファーマミン、魚粉、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキス、ゼラチン、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等を挙げることができ、これらは単独で、あるいは併用して使用することができる。窒素源の添加量は、通常、培地量の０．２乃至１０重量％の範囲である。
栄養無機塩としては、例えば、ナトリウムイオン、アンモニウムイオン、カルシウムイオン、リン酸イオン、硫酸イオン、塩化物イオン、炭酸イオン等のイオンを得ることのできる塩類が使用される。また、カリウム、カルシウム、コバルト、マンガン、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅等の金属を微量含む塩類も使用することができる。
液体培養を行う場合には、必要に応じて、消泡剤を用いてもよい。消泡剤としては、例えば、シリコン油、植物油、界面活性剤等を含有せしめることができる。
Ｆ−９１４９５Ａは、例えば、ＳＡＮＫ ２８３０３株を好気的培養法で好気的に培養することにより得られる。好気的培養法としては、例えば、固体培養法、振盪培養法又は通気撹拌培養法等が用いられる。
Ｆ−９１４９５Ａを生産することを目的としたＳＡＮＫ ２８３０３株の培養の温度は、通常４乃至３０℃であり、好適には１７℃乃至３０℃であり、より好適には２３℃である。培養日数は通常数日間である。液体培養の場合には通気攪拌する。
ＳＡＮＫ ２８３０３株の液体培養は、通常三角フラスコを用いた一段階または複数段階の種培養より開始する。すなわち、滅菌した種培養用培地を含むフラスコにＳＡＮＫ ２８３０３株を接種した後、定温インキュベーター中で数日間（菌が十分に生長するまで）振盪することにより行う。得られた種培養液の一部または全部を、次段階の種培養または生産培養に供する。
より規模の大きな種培養および生産培養を行うに際しては、撹拌機および通気装置を備えたタンクを用いることが好ましい。タンクは、その中で培地の作製および滅菌を行うことができ便利である。菌の接種は、滅菌した培地が十分冷却してから行う。タンクを用いた生産培養は、Ｆ−９１４９５Ａを大量に製造するのに適している。
培養におけるＦ−９１４９５Ａ生産量の経時的変化を追跡するには、培養液の一部を採取し、必要に応じて採取したサンプルを適宜処理した後、高速液体クロマトグラフィー等を用いた理化学的分析、または、血糖低下作用もしくは血中トリグリセリド低下作用を指標とした生物学的分析を行う。ＳＡＮＫ ２８３０３株の液体培養において、Ｆ−９１４９５Ａの生産量は通常３乃至１５日で最高値に達する。
本発明のＦ−９１４９５Ａは、該化合物を生産する微生物の培養物から調製することができる。本発明のＦ−９１４９５Ａは、ＳＡＮＫ ２８３０３株の液体培養物全体、該培養物の不溶性画分（菌体）または該培養物の可溶性画分（培養上清）より、Ｆ−９１４９５Ａの物理化学的性状を利用して精製、単離することができる。
液体培養物全体に含有されるＦ−９１４９５Ａは、例えば、適量（好ましくは終濃度５０％）のアセトンまたはメタノールを該培養物を添加して抽出を行い、次いで抽出液を珪藻土等をろ過助剤としたろ過操作に供し、得られたろ液を出発材料として精製、単離することができる。
また、液体培養物を不溶性画分と可溶性画分に分画した後、それぞれの画分より所望のＦ−９１４９５Ａを精製、単離することも可能である。液体培養物の分画は、遠心分離あるいは珪藻土等をろ過助剤としたろ過により行うことができる。
液体培養物の不溶性画分に含有されるＦ−９１４９５Ａは、５０乃至９０％の含水アセトンまたは含水メタノールにより不溶性画分を抽出し、濃縮操作により有機溶剤を除去した後、得られた粗抽出物を出発材料として精製、単離することができる。
液体培養物の可溶性画分に含有されるＦ−９１４９５Ａは、例えば、酸性条件下で、水と混和しない有機溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレン、ブタノール等の単独または、それらの組み合わせにより抽出することができる。また、活性炭、アンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４（ローム・アンド・ハース（株）製）等や、ダイアイオンＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＣＨＰ２０Ｐ、ＨＰ−５０、セパビーズＳＰ−２０７（三菱化学（株）製）等の吸着剤を使用して、可溶性画分に含有されるＦ−９１４９５Ａを精製することも可能である。Ｆ−９１４９５Ａが吸着剤に吸着しない場合には、吸着剤に吸着した夾雑物を除去することができる。Ｆ−９１４９５Ａが吸着剤に吸着する場合には、吸着しなかった夾雑物を除去してから、メタノール水、アセトン水、ブタノ−ル水等を用いてＦ−９１４９５Ａを溶出、回収することができる。
これらの方法により粗精製されたＦ−９１４９５Ａ含有画分を、シリカゲル、セファデックスＬＨ−２０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、フロリジル、コスモシル（ナカライテスク（株）製）のような担体を用いた分配カラムクロマトグラフィー；ダイヤイオンＣＨＰ２０Ｐ（三菱化学（株）製）のような担体を用いた吸着カラムクロマトグラフィー；セファデックスＧ−１０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、トヨパールＨＷ４０Ｆ（トーソー（株）製）などを用いたゲルろ過クロマトグラフィー；ダウエックス１（ダウケミカル（株）製）、ダイヤイオンＰＡ３１６（三菱化学（株）製）、ＤＥＡＥセファデックスＡ−２５（アマシャムバイオサイエンス（株）製）などを用いたイオン交換クロマトグラフィー；および順相、逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」という）等に供することにより、Ｆ−９１４９５Ａを精製、単離することができる。
なお、これらの分離精製の手段および手法は、単独で、あるいは適宜組み合わせることができ、必要により１つの手法または手段を反復して用いることも可能である。
このようにして単離された本発明のＦ−９１４９５Ａを出発原料として、より優れた血糖値低下作用あるいは血中トリグリセリド値低下作用を有する誘導体を合成することも可能である。そのようなＦ−９１４９５Ａ誘導体のうち、特にＦ−９１４９５Ａアルキルエステルは本発明に包含される。
本発明のＦ−９１４９５Ａアルキルエステルは、Ｆ−９１４９５Ａの有する２つのカルボキシル基のうち少なくとも１つがアルキルエステル化された化合物であれば、モノアルキルエステルおよびジアルキルエステルのいずれでもよく、ジエステルの場合２つのアルキルエステルは同一であっても互いに異なっていてもよい。本発明のアルキルエステルとしては、例えば、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル、ｔ−ブチルエステル、アリルエステル、ベンジルエステル等を挙げることができ、好適にはメチルエステル、エチルエステル、ｔ−ブチルエステルであり、より好適にはメチルエステルである。Ｐ−９１４９５Ａメチルエステルとしてより一層好適なものは、Ｆ−９１４９５Ａジメチルエステルである。
本発明のＦ−９１４９５Ａアルキルエステルは、Ｆ−９１４９５Ａの純品またはその混合物を、当業者に周知の方法でアルキルエステル化することにより得ることができる。
Ｆ−９１４９５Ａは、例えば、Ｆ−９１４９５Ａに対して、アルキルアルコール中で酸触媒を作用させることによりアルキルエステル化することができる。アルキルアルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ｔ−ブタノール、アリルアルコール、ベンジルアルコール等の低級アルキルアルコールを挙げることができ、好適にはメタノール、エタノール、ｔ−ブタノールであり、より好適にはメタノールである。酸触媒としては、フッ化水素酸、塩化水素酸、シュウ化水素酸等のハロゲン化水素類；ｐ−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸等のスルホン酸類を挙げることができ、好適にはハロゲン化水素類であり、より好適には塩化水素酸である。アルキルアルコール中、酸触媒でアルキルエステル化する場合の反応温度は通常０乃至８０℃であり、好適には２０乃至３７℃である。反応時間は、反応温度、アルコールの種類や量、酸触媒の種類や量等に依存するが、通常３０分乃至３日間であり、好適には１２乃至２４時間である。
また、Ｆ−９１４９５Ａは、例えば、縮合剤を含有する不活性溶剤中で、前述のアルキルアルコールを作用させることにより、アルキルエステル化することができる。不活性溶剤としては、ジクロロメタン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類が例示することができ、好適にはジクロロメタンである。縮合剤としては、Ｎ−Ｎ’−ジクロロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）や、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩等を例示することができ、好適にはＤＣＣである。縮合剤を含有する不活性溶剤中アルキルエステル化する場合の反応温度は、通常０乃至６０℃であり、好適には２０乃至３７℃である。反応時間は、反応温度、不活性溶剤の種類や量、縮合剤の種類や量、アルコールの種類や量に依存するが、通常３０分乃至１２時間であり、好適には１乃至３時間である。
前述の方法等により得られたＦ−９１４９５Ａアルキルエステルは、コスモシル（ナカライテスク（株）製）のような担体を用いた分配カラムクロマトグラフィー；ダイヤイオンＣＨＰ２０Ｐ（三菱化学（株）製）のような担体を用いた吸着カラムクロマトグラフィー；セファデックスＧ−１０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、トヨパールＨＷ４０Ｆ（トーソー（株）製）などを用いたゲルろ過クロマトグラフィー；ダウエックス１（ダウケミカル（株）製）、ダイヤイオンＰＡ３１６（三菱化学（株）製）、ＤＥＡＥセファデックスＡ−２５（アマシャムバイオサイエンス（株）製）などを用いたイオン交換クロマトグラフィー；または順相、逆相カラムを用いたＨＰＬＣ等により反応生成物から精製、単離することができる。
以上、Ｆ−９１４９５ＡおよびＦ−９１４９５Ａアルキルエステルの製造方法としていくつかの方法を説明したが、本発明の化合物の製造方法はそれらに限定されるものではなく、当業者に周知の方法を適宜使用することが可能である。
本発明の化合物は、インスリン依存性Ｉ型糖尿病（以下、「Ｉ型糖尿病」という）またはインスリン非依存性ＩＩ型糖尿病（以下、「ＩＩ型糖尿病」という）の予防及び／又は治療に有用である。本発明の化合物は、糖尿病の慢性合併症である糖尿病網膜症、糖尿病腎症、糖尿病神経障害、動脈硬化症の予防及び／又は治療に有効である。本発明の化合物は、従来より糖尿病の治療に使用されているチアゾリジン誘導体のように体重を増加させない。
本発明の化合物は、高脂血症および高脂血症を原因とする動脈硬化症の予防及び／又は治療に有用である。本発明において、高脂血症を原因とする動脈硬化症には、動脈硬化症に起因する虚血性心疾患および虚血性脳血管疾が患含まれる。このうち虚血性心疾患としては狭心症、心筋梗塞、心不全等を、虚血性脳血管疾患としては脳梗塞、脳内出血等をそれぞれ例示することができる。
本発明の化合物およびその薬理学的に許容される塩は、種々の形態で投与することができる。主な投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、乳剤、丸剤、散剤、シロップ剤（液剤）等による経口投与、ならびに、注射剤（静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内投与）、点滴剤、坐剤（直腸投与）等による非経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤等の、医薬の製剤技術分野において通常使用し得る補助剤を用いて製剤化することができる。
錠剤を調製する場合、担体として、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、グルコース、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、グルコース液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩類、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリエチレングリコール等の潤沢剤等を使用することができる。また、必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
丸剤を調製する場合、担体として、例えば、グルコース、乳糖、カカオバター、デンプン、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナラン寒天等の崩壊剤等を使用することができる。
坐剤を調製する場合、当該分野で周知の担体を含有せしめることができる。そのような担体としては、ポリエチレングリコール、カカオバター、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセリド等を例示することができる。
注射剤を調製する場合、液剤、乳剤または懸濁剤とすることができる。これらの液剤、乳剤または懸濁剤は、殺菌されており、且つ血液と等張であることが好ましい。これら液剤、乳剤または懸濁剤の調製に用いる溶液は、医療用の希釈剤として使用できるものであれば特に限定はなく、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げることができる。なお、この場合、等張性の溶液を調製するのに必要な量の食塩、グルコース、グリセリン等を製剤中に含有せしめることができ、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を使用することができる。
また、上記の製剤には、必要に応じて、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等を添加することできる。さらに、本発明の化合物以外の医薬品を含有せしめてもよい。
以上のような製剤（医薬組成物）中に含有される本発明の化合物の量は、特に限定されず、適宜選択され得る、通常、全組成物中１乃至７０重量％、好ましくは１乃至３０重量％含む。
本発明の化合物を医薬組成物として投与する際の投与量は、症状、年齢、性別、体重、投与方法、投与形態等に依存するが、通常成人に対し１日当たり、０．１乃至２０００ｍｇである。投与回数は、１日１回もしくは数回、または、数日当たり１回である。
以下に実施例、試験例および製造例をあげて、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

実施例１．ＳＡＮＫ ２８３０３株の培養
［種培養］
斜面培地上に生育させたＳＡＮＫ ２８３０３株の菌糸を、白金時をもちいて寒天ごと掻き取り、０．８５％生理食塩水を添加した後、ホモジナイザーを用いて均一になるまでホモジナイズした。得られたホモジネートを、下記組成を有する種培養用培地８０ｍｌを入れた５００ｍｌの三角フラスコ（種フラスコ）３本へ無菌的に接種し、次いで該フラスコをロータリー振とう機中で２３℃、２１０ｒｐｍにて、４日間振とう培養することにより種培養を行った。
(表５)
種培養用培地
―――――――――――――――――――――――
可溶性デンプン ２０ ｇ
グリセリン ３０ ｇ
グルコース ３０ ｇ
大豆粉 １０ ｇ
ゼラチン ２．５ ｇ
イーストエキス ２．５ ｇ
ＮＨ４ＮＯ３ ２．５ ｇ
消泡剤（ＣＢ４４２） ５ ｍｇ
―――――――――――――――――――――――
水道水 １０００ ｍｌ
滅菌前のｐＨ６．５
滅菌：１２１℃、２０分間

［２］生産培養
得られた種培養物を、下記組成を有する生産培養用培地８０ｍｌの入った５００ｍｌ容三角フラスコ４１本へ３％（容積／容積）植菌し、次いで該フラスコをロータリー振とう機中で温度２３℃、回転数２１０ｒｐｍにて、６日間培養した。
(表６)
生産培養用培地
―――――――――――――――――――――――
グリセリン ５０ ｇ
生ポテト（男爵） ５０ ｇ
マルトエキス ５ ｇ
イーストエキス ５ ｇ
消泡剤（ＣＢ４４２） ５ ｍｇ
―――――――――――――――――――――――
水道水 １０００ ｍｌ
滅菌前のｐＨ６．３
滅菌：１２１℃、２０分間

実施例２．Ｆ−９１４９５Ａの単離
実施例１で得られた培養終了液（３．３Ｌ）にアセトン（３Ｌ）を添加し、攪拌しながら１時間放置した後、３０００ｒｐｍにて１０分間遠心分離した。得られた上清を６規定塩酸でｐＨ３に調整し、酢酸エチル（３Ｌ）を加えて抽出を行った。有機層（４．５Ｌ）を回収して飽和食塩水（１Ｌ）で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム（３００ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固したところ、油状物質（９．２ｇ）が得られた。この油状物質を、メタノール（３０ｍｌ）に溶解して、０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する５０％アセトニトリル水で平衡化したコスモシル１４０Ｃ１８（ナカライテスク（株）製）カラム（８００ｍｌ）に供与した。カラムを同一溶媒（２．５Ｌ）で洗浄した後、０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する７０％アセトニトリル水（２．５Ｌ）で溶出した。得られた溶出液を濃縮、凍結乾燥し、粗精製物（１．２ｇ）が得られた。この粗精製物の一部（３３０ｍｇ）をメタノール（１ｍｌ）に溶解した後、この溶液を５０μｌづつ２０回に分け、０．０２％トリフルオロ酢酸を含有する６５％アセトニトリル水で平衡化したＨＰＬＣカラム（センシューパック（Ｓｅｎｓｈｕ Ｐａｋ） ＰＥＧＡＳＩＬ ＯＤＳ，２０φ×１５０ｍｍ，センシュー科学（株）製）に供与した。カラムを流速１０．０ｍｌ／分で展開し、２１０ｎｍでの紫外部吸収を検出して、保持時間２０．２分に溶出される画分を分取した。得られた同一保持時間の画分をあわせ、減圧濃縮後、凍結乾燥し、Ｆ−９１４９５Ａ（６２．５ｍｇ）が得られた。
なお、Ｆ−９１４９５Ａの挙動は、下記条件のＨＰＬＣにてモニターした。

カラム ：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０：
４．６φ×１５０ｍｍ （資生堂（株）製）
溶 媒：０．０２％トリフルオロ酢酸を含有する６５％アセトニトリル水
流 速：１．０ｍｌ／分
検 出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間：７．７分

実施例３．Ｆ−９１４９５Ａジメチルエステルの単離
実施例１で得られた培養終了液（３．３Ｌ）にアセトン（３Ｌ）を添加し、攪拌しながら１時間放置した後、３０００ｒｐｍにて１０分間遠心分離した。得られた上清を６規定塩酸でｐＨ３に調整し、酢酸エチル（３Ｌ）を加えて抽出を行った。有機層（４．５Ｌ）を回収して飽和食塩水（１Ｌ）で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム（３００ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固したところ、油状物質（９．２ｇ）が得られた。この油状物質を、メタノール（３０ｍｌ）に溶解して、０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する５０％アセトニトリル水で平衡化したコスモシル１４０Ｃ１８（ナカライテスク（株）社製）カラム（８００ｍｌ）に供与した。カラムを同一溶媒（２．５Ｌ）で洗浄した後、０．０２％ トリフルオロ酢酸を含有する７０％アセトニトリル水（２．５Ｌ）で溶出した。得られた溶出液を濃縮、凍結乾燥し、粗精製物（１．２ｇ）が得られた。この粗精製物の一部（２１８ｍｇ）を塩酸−メタノール試薬１０（東京化成（株）製）１．２ｍｌに溶解した後、室温で１７時間放置した。得られた反応終了液を、５０μｌづつ２４回に分け、０．０２％トリフルオロ酢酸を含有する８０％アセトニトリル水で平衡化したＨＰＬＣカラム（カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ） Ｃ１８ ＵＧ１２０，２０φ×２５０ｍｍ，資生堂（株）製）に供与した。カラムを流速１２．０ｍｌ／分で展開し、２１０ｎｍでの紫外部吸収を検出して、保持時間１８．２分に溶出される画分を分取した。得られた同一保持時間の画分をあわせ、減圧濃縮後、凍結乾燥し、Ｆ−９１４９５Ａジメチルエステル（３２．４ｍｇ）が得られた。
なお、Ｆ−９１４９５Ａジメチルエステルの挙動は、下記条件のＨＰＬＣにてモニターした。

カラム ：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０：
４．６φ×１５０ｍｍ（資生堂（株）製）
溶 媒：０．０２％トリフルオロ酢酸を含有する８０％アセトニトリル水
流 速：１．０ｍｌ／分
検 出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間： ８．６分

試験例１．動物を用いた評価
［動物］
雄性ｄｂ／ｄｂマウス（日本クレアより購入）は、５週齢で購入し、２日間の馴化期間をおいて実験に供した。馴化および試験期間にわたり１ケージあたり５匹で飼育され、飲水および摂餌（Ｆ２、船橋農場）は自由摂取とした。
［実験群］
実験開始にあたり、体重測定後、マウスの尾静脈よりヘパリンコートしたガラス管で採血し、血糖値を測定した。血漿中のグルコース濃度はグルコローダＧＸＴ（Ａ＆Ｔ社）を用いて測定した。３０匹のマウスを全頭採血し、血糖値が４００ｍｇ／ｄｌ以下の個体を１５匹選抜し、血糖値・体重がなるべく等しくなるように各群ｎ＝５で群分けを行った。
［Ｆ−９１４９５Ａの投与］
Ｆ−９１４９５Ａ １０ｍｇ（１３．７μｍｏｌｅ）を２７４μｌの０．１規定塩化ナトリウム （２７．４μｍｏｌｅ）で中和した後、１７２６μｌのホスフェート・バッファード・セイライン（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ：ＰＢＳ）を加えて５ｍｇ／ｍｌ濃度の溶液を作製し、次いで［二回蒸留水 ：ＰＢＳ ＝ １３．７ ： ８６．３］溶液で希釈して１．５ｍｇ／ｍｌ濃度および０．５ｍｇ／ｍｌ濃度の溶液を作製した。投与液は投与直前に調製し、１ｍｌ／１００ｇ体重となる投与量で毎日一回腹腔に投与した。コントロール群は同投与量の［二回蒸留水：ＰＢＳ＝ １３．７：８６．３］溶液を投与した。餌と一般行動は毎日最低１回チェックした。
［実験期間ならびに採血および組織回収］
Ｆ−９１４９５Ａ投与期間は１週間とした。群分けの日を０日（Ｄａｙ０）とし、Ｄａｙ７に体重測定および採血を行った。採血は、群分け時と同様にヘパリンコートしたガラス管を用いて尾静脈からおこない、１１０００ｒｐｍ、５分間の遠心分離操作により血漿を分離した後、血漿中の血糖値および血中トリグリセリド値を測定した。
［結果］
Ｆ−９１４９５Ａの５ｍｇ／ｋｇおよび１５ｍｇ／ｋｇの連投により、Ｄａｙ７においてコントロール群に比して投与群で血糖値の低下が観察された（図１）。また、Ｆ−９１４９５Ａの５ｍｇ／ｋｇ及び１５ｍｇ／ｋｇの連投によって、Ｄａｙ７においてコントロール群に比して投与群で血中トリグリセリド値の低下が観察された（図２）。一方、Ｆ−９１４９５Ａの投与群ではいずれの用量でもコントロール群に比して体重の変化は観察されなかった（図３）。

製造例１．経口用カプセル剤

Ｆ−９１４９５Ａ ３０ｍｇ
乳糖 １７０ｍｇ
トウモロコシ澱粉 １５０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ
―――――――――――――――――――――――
合計 ３５２ｍｇ

上記処方の粉末を混合し、３０メッシュのふるいを通した後、この粉末をゼラチンカプセルに入れ、カプセル剤とする。
Ｆ−９１４９５Ａ投与群およびコントロール群における血糖値の変化を示す図。 Ｆ−９１４９５Ａ投与群およびコントロール群における血中トリグリセリド値の変化を示す図。 Ｆ−９１４９５Ａ投与群およびコントロール群における体重の変化を示す図。

Claims (11)

  1. 下記式（Ｉ）
    Figure 2006056806
     で表わされる化合物又はその塩。
  2. 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩：
    １）物質の性状：赤茶色粉末状物質、
    ２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶、水に不溶、
    ３）分子式：Ｃ４０Ｈ４４Ｏ１３、
    ４）分子量：７３２（ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定）；
    ５）高分解能ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、［Ｍ＋Ｎａ］＋は次に示す通り
    実測値：７５５．２７０９
    計算値：７５５．２６８０、
    ６）紫外部吸収スペクトル：
    メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
    ２３４ｎｍ（ε４３５００），２６５ｎｍ（ε３１８００），２９７ｎｍ（ｓｈ），３５４ｎｍ（ε１０８００）、
    ７）赤外部吸収スペクトル：
    臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
    ３２２３，２９５５，２９２８，２８５７，１７１３，１６７４，１６２２，１４６５，１３９９，１３７７，１３３７，１２６８，１０９９，１０７９，１０１０，９６３，９４４，９０７ｃｍ−１、
    ８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
    重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（２．５０ｐｐｍ）を用いて測定した、１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り、
    ０．８６（３Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｍ），１．２−１．３（１６Ｈ，ｍ），１．５７（２Ｈ，ｍ），１．５８（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．５７（２Ｈ，ｓ），３．７（２Ｈ，ｓ），６．５５（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），６．８３（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝２．６Ｈｚ）ｐｐｍ、
    ９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
    重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（３９．５１ｐｐｍ）を用いて測定した、１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り
    １３．９７（ｑ），１４．００（ｑ），２２．０６（ｔ），２２．１２（ｔ），２２．９（ｔ），２３．７（ｔ），２８．５（ｔ），２８．６（ｔ），２８．７（ｔ），２８．９（ｔ），３１．２（ｔ），３１．３（ｔ），３８．１（ｔ），３８．７（ｔ），４３．３８（ｔ），４３．４３（ｔ），１００．９（ｄ），１０３．１（ｓ），１０７．９（ｓ），１１３．７（ｄ），１１８．０（ｄ），１１８．０（ｄ），１１９．７（ｓ），１２１．１（ｄ），１３０．６（ｓ），１３１．７（ｓ），１３５．９（ｓ），１３６．４（ｓ），１３９．０（ｓ），１５４．３（ｓ），１５４．８（ｓ），１５５．４（ｓ），１５７．１（ｓ），１５８．８（ｓ），１７１．３（ｓ），１７２．６（ｓ），１８０．４（ｓ），１８９．９（ｓ），２０５．３（ｓ），２０６．３（ｓ）ｐｐｍ。
  3. 下記式（ＩＩ）
    Figure 2006056806
     で表わされる化合物又はその塩。
  4. 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩：
    １）物質の性状：赤茶色粉末状物質、
    ２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶、水に不溶、
    ３）分子式：Ｃ４２Ｈ４８Ｏ１３、
    ４）分子量：７６０（ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定）
    ５）高分解能ＬＣ−ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、［Ｍ＋Ｎａ］＋は次に示す通り
    実測値：７８３．２９９９
    計算値：７８３．２９９３、
    ６）紫外部吸収スペクトル：
    メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
    ２３４ｎｍ（ε４２２００），２６５ｎｍ（ε３２７００），２９７ｎｍ（ｓｈ），３５４ｎｍ（ε１０７００）、
    ７）赤外部吸収スペクトル：
    臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外部吸収スペクトルに示された極大吸収は次の通り
    ３３２７，２９５４，２９２８，２８５６，１７４０，１７０１，１６７４，１６１７，１４５８，１４３８，１４０５，１３３８，１２６５，１１７０，１１０５，１０８１，１０４１，１０１２，９６２，９０８ｃｍ−１、
    ８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
    重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（２．５０ｐｐｍ）を用いて測定した、１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示す通り
    ０．８６（３Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｍ），１．２−１．３（１６Ｈ，ｍ），１．５５（２Ｈ，ｍ），１．５７（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｍ），３．５（３Ｈ，ｓ），３．６２（３Ｈ，ｓ），３．６３（２Ｈ，ｓ），３．８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｓ），７．６２（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ、
    ９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
    重ジメチルスルホキシド中、内部標準に重ジメチルスルホキシド（３９．５１ｐｐｍ）を用いて測定した、１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは以下に示す通り
    １３．８８（ｑ），１３．９２（ｑ），２１．９８（ｔ），２２．０３（ｔ），２２．８（ｔ），２３．７（ｔ），２８．４（ｔ），２８．５（ｔ），２８．６（ｔ），２８．８（ｔ），３１．１（ｔ），３１．２（ｔ），３７．７（ｔ），３８．６（ｔ），４３．３（ｔ），４３．５（ｔ），５１．３（ｑ），５１．９（ｑ），１０１．０（ｄ），１０３．５（ｓ），１０８．０（ｓ），１１４．１（ｓ），１１８．２（ｓ），１１８．２（ｄ），１１９．１（ｓ），１２０．９（ｄ），１３０．９０（ｓ），１３０．９３（ｓ），１３６．０（ｓ），１３６．１（ｓ），１３８．１（ｓ），１５４．８（ｓ），１５５．０（ｓ），１５５．４（ｓ），１５７．３（ｓ），１５８．６（ｓ），１７０．３（ｓ），１７１．５（ｓ），１８０．５（ｓ），１８９．５（ｓ），２０５．２（ｓ），２０５．９（ｓ）ｐｐｍ。
  5. 下記［ｉ］および［ｉｉ］の工程を含むことからなる、請求項１又は２に記載の化合物の製造方法：
    ［ｉ］ペニシリウム属に属する、請求項１又は２に記載の化合物の生産菌を培養する工程；及び
    ［ｉｉ］該生産菌の培養物より、請求項１又は２に記載の化合物を採取する工程。
  6. ペニシリウム属に属する、請求項１又は２に記載の化合物の生産菌がペニシリウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ ２８３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１００７２）である、請求項５に記載の製造方法。
  7. 請求項１又は２に記載の化合物を生産することを特徴とする、ペニシリウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ ２８３０３株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１００７２）。
  8. 請求項１又は２に記載の化合物をメタノール中で酸触媒と接触させる工程を含むことからなる、請求項３又は４に記載の化合物の製造方法。
  9. 請求項１乃至４のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する医薬組成物。
  10. 請求項１乃至４のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する抗糖尿剤。
  11. 請求項１乃至４のいずれか一つに記載の化合物又は薬理学的に許容されるその塩を有効成分として含有する抗高脂血症剤。
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