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JP2001525194A5 - - Google Patents

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【特許請求の範囲】
【請求項1】 図3A(配列番号3)のアミノ酸配列を有するPCVII特異的ポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項2】 図3B(配列番号5)のアミノ酸配列を有するPCVII特異的ポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項3】 図3C(配列番号7)のアミノ酸配列を有するPCVII特異的ポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項4】 図3D(配列番号9)のアミノ酸配列を有するPCVII特異的ポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項5】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列51〜992を含んで成る単離されたPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項6】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列51〜992と少なくとも90%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る単離されたPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項7】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列51〜992と少なくとも95%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る請求項6記載のPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項8】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列51〜992と少なくとも98%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る請求項6記載のPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項9】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列671〜360又は565〜389を含んで成る単離されたPCVIIポリヌクレオチド配列。
【請求項10】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列671〜360又は565〜389と少なくとも85%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る単離されたPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項11】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列671〜360又は565〜389と少なくとも90%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る請求項10記載のPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項12】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列671〜360又は565〜389と少なくとも95%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る請求項10記載のPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項13】 図4A(配列番号1、配列番号11、又は配列番号12及び24)のヌクレオチド配列671〜360又は565〜389と少なくとも98%の同一性を有するヌクレオチド配列を含んで成る請求項10記載のPCVIIポリヌクレオチド。
【請求項14】 請求項1〜13のいずれか1項記載のポリヌクレオチドを含んで成る単離されたヌクレオチド配列。
【請求項15】 図3A(配列番号3)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸をコードするヌクレオチド配列を含んで成る単離されたポリヌクレオチド。
【請求項16】 図3B(配列番号5)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸をコードするヌクレオチド配列を含んで成る単離されたポリヌクレオチド。
【請求項17】 図3C(配列番号6)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸をコードするヌクレオチド配列を含んで成る単離されたポリヌクレオチド。
【請求項18】 図3D(配列番号9)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸をコードするヌクレオチド配列を含んで成る単離されたポリヌクレオチド。
【請求項19】 図3B(配列番号5)に示されるPCVIIアミノ酸配列と少なくとも80%の相同性を有するPCVIIアミノ酸配列の少なくとも25個の連続アミノ酸をコードする単離されたポリヌクレオチド。
【請求項20】 前記相同性が、少なくとも85%である請求項19記載のポリヌクレオチド。
【請求項21】 前記相同性が、少なくとも90%である請求項19記載のポリヌクレオチド。
【請求項22】 前記相同性が、少なくとも95%である請求項19記載のポリヌクレオチド。
【請求項23】 前記相同性が、少なくとも98%である請求項19記載のポリヌクレオチド。
【請求項24】 請求項15〜23のいずれか1項記載のポリヌクレオチドを含んで成る単離されたヌクレオチド配列。
【請求項25】 前記ポリヌクレオチドが、プロモーターの制御下に配置される請求項14又は24記載のヌクレオチド配列。
【請求項26】 請求項25記載のヌクレオチド配列を含んで成る、インビボ又はインビトロ発現ベクター。
【請求項27】 前記インビボ発現ベクターが、ポックスウィルス、アデノウィルス、ヘルペスウィルス及び核酸ベクターから成る群から選択される請求項26記載のインビボ発現ベクター。
【請求項28】 請求項27記載のインビボ発現ベクター及び医薬的ビークルを含んで成る組成物。
【請求項29】 前記インビトロ発現ベクターが、バキュロウィルスである請求項26記載のインビトロ発現ベクター。
【請求項30】 請求項26記載のインビトロ発現ベクターにより形質転換される宿主細胞。
【請求項31】 前記細胞がE.コリである請求項30記載の宿主細胞。
【請求項32】 組換えPCVIIポリペプチドの生成方法であって、請求項30又は31記載の宿主細胞の集団を供給し、そして前記細胞集団を、前記組換えベクターに存在するコード配列によりコードされるPVIIポリペプチドが発現される条件下で培養することを含んで成る方法。
【請求項33】 請求項32記載の方法により生成されるポリペプチド。
【請求項34】 図3A(配列番号3)のPCVII特異的アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項35】 図3B(配列番号5)のPCVII特異的アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項36】 図3C(配列番号7)のPCVII特異的アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項37】 図3D(配列番号9)のPCVII特異的アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項38】 図3A(配列番号3)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項39】 図3B(配列番号5)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項40】 図3C(配列番号7)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項41】 図3D(配列番号3)の少なくとも25個のPCVII特異的連続アミノ酸配列を含んで成る単離されたポリペプチド。
【請求項42】 図3B(配列番号5)のPCVIIアミノ酸配列と80%又はそれ以上の相同性を有するPCVIIアミノ酸配列の少なくとも25個の連続アミノ酸を含んで成る単離されたポリヌクレオチド。
【請求項43】 前記相同性が、約85%であるか、又は85%に等しい請求項42記載のポリペプチド。
【請求項44】 前記相同性が、約90%であるか、又は90%に等しい請求項42記載のポリペプチド。
【請求項45】 前記相同性が、約95%であるか、又は95%に等しい請求項42記載のポリペプチド。
【請求項46】 前記相同性が、約98%であるか、又は98%に等しい請求項42記載のポリペプチド。
【請求項47】 請求項33〜46のいずれか1項記載のポリペプチド、医薬的ビークル、及び任意には、アジュバントを含んで成る組成物。
【請求項48】 ムラミルジペプチド、アビジン、水酸化アルミニウム、ジメチルオクタデシルアルミニウムブロミド、油中水エマルジョン、水中油エマルジョン、サポニン及びサイトカインから選択されたアジュバントを含んで成る請求項47記載の組成物。
【請求項49】 図2A−2C又は4A−4B、又は配列番号1,11,12又は24のPCVII単離されたヌクレオチド配列。
【請求項50】 生物学的サンプルにおけるブタシルコウィルスII型(PCVII)相同配列を決定するための核酸ハイブリダイゼーションアッセイであって、
(a)前記生物学的サンプルを、PCVIIヌクレオチド配列に対して選択的にハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドと共に、前記ポリヌクレオチドと前記生物学的サンプルに存在するPCVIIヌクレオチド配列との間での核酸複合体の形成を促進する条件下でインキュベートし、ここで前記ポリヌクレオチドは、図2A−2C、又は4A−4B、又は配列番号1,11,12又は24に示されるPCVII配列に由来するか又はそれに対して相補的である少なくとも8個の連続ヌクレオチドを含んで成り;そして
(b)前記ポリヌクレオチドを含む複合体を検出することを含んで成るアッセイ。
【請求項51】 ブタにおけるPCVII感染を検出するための診断試験キットであって、PCVIIヌクレオチド配列に対して選択的にハイブリダイズすることができるポリヌクレオチド(ここで、前記ポリヌクレオチドは、図2A−2C、又は4A−4B、又は配列番号1,11,12又は24に示されるPCVII配列に由来するか又はそれに対して相補的である少なくとも8個の連続ヌクレオチドを含んで成る)、及び免疫診断試験を行なうための説明書を含んで成る試験キット。
【請求項52】 生物学的サンプルにおけるPCVII相同配列の検出方法であって、
(a)前記生物学的サンプルを、PCVIIヌクレオチド配列に対して選択的にハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドと共に、前記ポリヌクレオチドと前記生物学的サンプルに存在するPCVIIヌクレオチド配列との間での核酸複合体の形成を促進する条件下でインキュベートし、ここで前記ポリヌクレオチドは、図2A−2C、又は4A−4B、又は配列番号1,11,12又は24に示されるPCVII配列に由来するか又はそれに対して相補的である少なくとも8個の連続ヌクレオチドを含んで成り;そして
(b)前記ポリヌクレオチドを含む複合体を検出することを含んで成る方法。
【請求項53】 前記ポリヌクレオチドがラベルされ、そして前記複合体が、前記ラベルの存在の検出により検出される請求項52記載の方法。
【請求項54】 前記検出が、
(a)2種のPCVII核酸特異的プローブを使用し、ここで前記2種のプローブは、PCVII核酸の内部領域を定義し、そして個々のプローブは前記領域の3’末端を含む1つの鎖を有し、核酸/プローブのハイブリダイゼーション複合体を、プライマーエクステンション反応により、二本鎖プローブ含有フラグメントに変換し、
(b)下記工程を連続的に反復することによって、プローブを含有するフラグメントの数を増幅し、(i)二本鎖のフラグメントを変性して一本鎖のフラグメントを生成し、(ii)一本鎖をプローブとハイブリダイゼーションさせて鎖/プローブ複合体を形成し、(iii)DNAポリメラーゼ及びすべての4種のデオキシリボヌクレオチドの存在下で鎖/プローブ複合体から二本鎖のフラグメントを発生させ、そして(iv)所望の程度の増幅が達成されるまで、工程(i)〜(iii)を反復し、そして
(c)前記増幅生成物を同定することを含んで成る請求項52記載の方法。
【請求項55】 前記ポリヌクレオチドが少なくとも10個、好ましくは12個の長さのヌクレオチドである、請求項50記載のアッセイ、請求項51記載のキット、又は請求項52〜54のいずれか1項記載の方法。
【請求項56】 前記ポリヌクレオチドが少なくとも15個、好ましくは20個の長さのヌクレオチドである、請求項50記載のアッセイ、請求項51記載のキット、又は請求項52〜54のいずれか1項記載の方法。
【請求項57】 前記ポリヌクレオチドが、少なくとも50個の長さのヌクレオチドである、請求項50記載のアッセイ、請求項51記載のキット、又は請求項52〜54のいずれか1項記載の方法。
【請求項58】 前記PCVII配列が、図2A−2C、又は4A−4B、又は配列番号1,11,12又は24に示されるPCVII配列に対して少なくとも85%の同一性を有する、請求項50記載のアッセイ、請求項51記載のキット、又は請求項52〜54のいずれか1項記載の方法。
【請求項59】 前記同一性が少なくとも90%である請求項58記載のアッセイ、キット又は方法。
【請求項60】 前記同一性が少なくとも95%である請求項58記載のアッセイ、キット又は方法。
【請求項61】 前記ハイブリダイゼーションが、緊縮条件下で行なわれる請求項52〜60のいずれか1項のアッセイ、キット又は方法。
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