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ITMI20090747A1 - Composizione farmaceutica o dermatologica o nutrizionale o cosmetica per combattere l'azione di immunosoppressione provocata sulla pelle da agenti aggressivi - Google Patents

Composizione farmaceutica o dermatologica o nutrizionale o cosmetica per combattere l'azione di immunosoppressione provocata sulla pelle da agenti aggressivi Download PDF

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ITMI20090747A1
ITMI20090747A1 IT000747A ITMI20090747A ITMI20090747A1 IT MI20090747 A1 ITMI20090747 A1 IT MI20090747A1 IT 000747 A IT000747 A IT 000747A IT MI20090747 A ITMI20090747 A IT MI20090747A IT MI20090747 A1 ITMI20090747 A1 IT MI20090747A1
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IT
Italy
Prior art keywords
catechin
quercetin
skin
mixture
immunosuppression
Prior art date
Application number
IT000747A
Other languages
English (en)
Inventor
Anna Benedusi
Giammaria Giuliani
Original Assignee
Giuliani Spa
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Publication date
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Priority to AU2010243181A priority patent/AU2010243181B2/en
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Priority to ES10724138.2T priority patent/ES2596587T3/es
Priority to NZ596683A priority patent/NZ596683A/xx
Priority to US13/260,245 priority patent/US9138394B2/en
Priority to JP2012507873A priority patent/JP2012525375A/ja
Priority to CA2760195A priority patent/CA2760195A1/en
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Description

Descrizione della domanda di brevetto dal titolo:
COMPOSIZIONE FARMACEUTICA O DERMATOLOGICA O NUTRIZIONALE O COSMETICA PER COMBATTERE L'AZIONE DI IMMUNOSOPPRESSIONE PROVOCATA SULLA PELLE DA AGENTI AGGRESSIVI
Descrizione
La pelle rappresenta una efficace barriera contro gli effetti dannosi deH’ambiente proteggendo gli organi interni. I maggiori strati della pelle includono l’epidermide, il derma e l’ipoderma. L’epidermide umana à ̈ sufficientemente spessa e comprende fino a quindici strati. Essa rappresenta la prima barriera difensiva del corpo contro gli agenti nocivi di natura fisica, chimica ed ambientale, tra cui ad esempio i raggi ultravioletti, gli shock termici ed osmotici e gli inquinanti oggi sempre più diffusi nell’ambiente.
La soppressione del sistema immunitario della pelle à ̈ nota essere uno dei meccanismi attraverso cui detti agenti nocivi inducono ad esempio lo sviluppo dei tumori della pelle, principalmente relativi allo strato epidermico ed alle sue cellule.
Ad esempio la radiazione ultravioletta induce delle alterazioni a livello cutaneo sia immediate sia ritardate rispetto al tempo dell’esposizione. Oltre alle alterazioni visibili, quali la formazione delle cellule da colpo di sole note come “sun burn cells†, la produzione della melanina da parte dei melanociti ed un ispessimento dello strato corneo legato all’azione di citocheratine specifiche, si producono alcune alterazioni a livello molecolare responsabili di possibili danni a lungo termine quali: la deplezione di antiossidanti endogeni, che si verifica nelle ore immediatamente successive all’esposizione ai raggi e che induce una cascata di reazioni degenerative ritardate nel tempo (note come stress ossidativo) che interessano tutta la struttura cutanea, epidermide e derma; la reazione immunitaria che vede protagoniste le cellule di Langherans e che à ̈ mediata da citochine ed altri fattori solubili; il danno molecolare verso il DNA, in particolare attraverso la formazione della 8-oxy D guanosina.
Quali riferimenti di letteratura a tale riguardo circa gli effetti dei raggi ultravioletti in termini di immunosoppressione si possono citare:
Katiyar S, Elmets CA, Katiyar SK. Green tea and skin cancer: photoimmunology, angiogenesis and DNA repair. J Nutr Biochem. 2007 May;18(5):287-96.
Skiba B, Neill B, Piva TJ. Gene expression profiles of TNF-alpha, TACE, furin, IL-1beta and matrilysin in UVA- and UVB-irradiated HaCat cells. Photodermatol Photoimmunol Photomed. 2005 Aug;21(4):173-82.
Yawalkar N, Limai A, Brand CU, Braathen LR. Constitutive expression of both subunits of interleukin-12 in human keratinocytes. J Invest Dermatol. 106(1 ):80-3, 1996.
Curiel-Lewandrowski C, Venna SS, Eller MS, Cruikshank W, Dougherty I, Cruz PD Jr, Gilchrest BA. Inhibition of thà ̈ elicitation phase of contact hypersensitivity by thymidine dinucleotides is in part mediated by increased expression of interleukin-10 in human keratinocytes. Exp Dermatol. 2003 Apr;12(2):145-52.
Schwarz T. Mechanisms of UV-induced immunosuppression. Keio J Med. 2005 Dee; 54(4):165-71.
Scopo della presente invenzione à ̈ di provvedere un mezzo per efficacemente contrastare l'azione di immunosoppressione indotta sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici, ed altri. In EP1328268 di proprietà della stessa Richiedente à ̈ descritta l’attività antiossidante di una miscela dei flavonoidi catechina e quercetina, basata in particolare su uno studio clinico in cui si dimostra un’elevata attività di inibizione dell’aggregazione piastrinica. In tale brevetto à ̈ prospettata anche un’applicazione di tale attività antiossidante nel contrastare l’azione di invecchiamento cutaneo da parte dei raggi ultravioletti.
Tuttavia in generale non à ̈ possibile prevedere se ad una attività antiossidante possa corrispondere per lo stesso composto, o la stessa miscela di composti, anche un’attività nei confronti di effetti di immunosoppressione, e dunque immunoprotettiva, del genere sopra discusso.
Secondo la presente invenzione si à ̈ ora sorprendentemente trovato sulla base di uno studio sperimentale che catechina e quercetina, in miscela tra loro secondo un selezionato rapporto quantitativo, sono un efficace principio attivo per combattere l’azione di immunosoppressione esercitata sulla pelle dagli agenti aggressivi sopra nominati.
Si riportano le formule di struttura e i pesi molecolari di catechina e quercetina: Catechina (PM 290) Quercetina (PM 302)
L’invenzione pertanto ha per oggetto l’uso di tale miscela quale principio attivo nella preparazione di una composizione farmaceutica o dermatologica o nutrizionale o cosmetica per combattere l'azione di immunosoppressione esercitata sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici, e la relativa composizione caratterizzata dal fatto di comprendere quale principio attivo una miscela di catechina e quercetina in rapporto molare compreso tra circa 6:1 e 3:1 , rispettivamente.
La composizione dell’invenzione può essere formulata per uso topico sulla pelle oppure per uso sistemico, ad esempio in forma per somministrazione orale.
Si descrivono di seguito alcuni esempi di composizione secondo la presente invenzione. Essi non devono intendersi limitativi.
Negli esempi 1-5, le quantità dei componenti sono espresse come percentuali in peso all'interno di un intervallo come di seguito specificato. Per quercetina, à ̈ indicato il rapporto quercetina:catechina 1 :5 molare, rispetto alla quantità di catechina scelta entro quell'intervallo.
Esempio 1
LATTE SOLARE
Componente (nome INCI) . Quantità %p/p
PEG- 30 dipolyhydroxystearate . 2,00-5,00
Polyglyceryl-4 diisostearate polyhydroxystearate
Sebacate . 2,00-6,00
Batyl alcohol . 0,03- 0,080
Ethylhexyl methoxycinnamate . 5,00-1 1 ,000 Dìethylamino hidroxybenzoylhexyl benzoate . 5,00-11 ,000
Buthyl methoxydibenzoylmethane . 1 ,00-4,00
Ethylhexyl salicylate . 1,00-5,000 Caprylic/capric triglyceride . 1 ,00-10,00 C12-15 alkyl benzoate . 3,00-10,00 Butylene glycol dicaprylate/dicaprate . 4,00-10,00 Diisopropyl sebacate . 1,00-5,00 Butyrospermum parkii butter . 0,40-3,00 Zea mays oil . 0,50-1 ,00 Persea gratissima oil unsaponifiables . 0,40-2,00 Calendula officinalis . 1,00-5,00 Triethyl citrate . 0,20-0,80 Vp/eicosene copolymer . 0,30-2,00 Glyceryl behenate/ eicosadioate . 1 ,00-3,00 Pentaerythrityl tetra-di-t-butyl
Hydroxyhydrocinnamate . 0,01- 0,050 Ethylhexyl triazone . 1,00-4,00 Magnesium stearate . 0,10- 0,80 Beta-sitosterol . 0,05-0,50 Benzoic acid . 0,20-0,50 Triclosan . 0,02-0,70 Glycyrrhetinic acid . 0,02-0,70 Boron nitride . 0,20-0,50 Titanium dioxide . 0,50-5,00 Aluminum hydroxide . 0,50-5,00 Stearic acid . 0,50-3,00 Glycerin . 1,00-5,00 Sorbityl furfural . 0,10-0,90 Catechin . 0,005-0,05 Magnesium sulfate . 0,70 Cyclopentasiloxane . 1 ,00-5,00 Caprylyl glycol . 0,10-0,80 Quercetin . 1:5 molare rispetto a catechina Tetrasodium dicarboxymethyl glutamate . 0,10-0,05 Parfum . 0,20 Bis-ethylhexyl hydroxydimethoxy benzylmalonate . 0,01-0,50 Hydrogenated lecithin . 0,05-1,00
Acqua . q.b 100 g Esempio 2
LATTE SOLARE
Componente (nome INCI) . Quantità p/p (%) C10-18 triglycerides . 1 ,00 - 10,00 C12-15 alkyl benzoate . 3,00- 10,00 Butylene glycol dicaprylate/dicaprate . 4,00-10,00 Diisopropyi sebacate . 1 ,00-5,00 Behenyl alcohol . 0,40-3,00 Squalane . 0,40-2,00 PEG- 30 dipolyhydroxystearate . 2,00-5,00 Polyglyceryl-4 diisostearate/PoIyhydroxystearate/sebacate2,00-6,00 Batyl alcohol . 0,03- 0,08 Ethylhexyl methoxycinnamate . 5,00- 11,00 Diethylamino hidroxybenzoyl hexyl benzoate . 5,00-11,00 Buthyl methoxydibenzoylmethane . 1 ,00-4,00 Ethylhexyl salicylate . 1 ,00-5,00 Zea mays oil . 0,50-1 ,00 Calendula officinalis . 1 ,00-5,00 Triethyl citrate . 0,20-0,80 Vp/eicosene copolymer . 0,30-2,00 Glyceryl behenate/ eicosadioate . 1 ,00- 3,00 Pentaerythrityl tetra-di-t-butyl Hydroxyhydrocinnamate . 0,01- 0,050 Ethylhexyl triazone . 1 ,00-4,000 Magnesium stearate . 0,10- 0,80 Beta-sitosterol . 0,05-0,50 Benzoic acid . 0,20-0,50 Triclosan . 0,02-0,70 Glycyrrhetinic acid . 0,02-0,70 Boron nitride . 0,20-0,50 Titanium dioxide . 0,50-5,00 Aluminum hydroxide . 0,50-5,00 Stearic acid . 0,50-3,00 Glycerin . 1,00- 5,00 Catechin . 0,005-0,05 Magnesi um sulfate . 0,10-0,80 Cyclopentasiloxane . 1,00-5,00 Caprylyl glycol . 0,50-0,800 Sorbityl furfural . 0,10-0,90 Quercetin . 1:5 molare rispetto a catechina Tetrasodium dicarboxymethyl giutamate . 0,10-0,05 Parfum . 0,200 Coleus forskohlii root extract . 0,01-0,10 Bis-ethylhexyl hydroxydimethoxy Benzylmalonate . 0,01-0,50 Hydrogenated lecithin . 0,05-1,00 Acqua . q.b 100 g Esempio 3
CREMA SOLARE
Componente (nome INCI) . Quantità p/p (%) PEG- 30 dipolyhydroxystearate . 1 ,00-5,00 Polyglyceryl-4 diisostearate Polyhydroxystearate sebacate 1,00-5, 00 Batyl alcohol . 0,03-0,08 Ethylhexyl methoxycinnamate . 5,00-11 ,00 Butyl methoxydibenzoylmethane . 0,50-1 ,00 Diethylamino hidroxybenzoyl hexyl benzoate . 5,00-11 ,00 Ethylhexyl salicylate . 2,00-7,00 Caprylic/capric triglyceride . 3,00-8,00 C12-15 alkyl benzoate . 3,00-8,00 Butylene glycol dicaprylate/dicaprate . 3,00-8,00 Diisopropyl sebacate . 1 ,00-6,00 Butyrospermum parkii butter . 0,40-3,00 Persea gratissima oil unsaponifiables . 0,40-3,00 Olea europea . 0,40-3,00 Calendula officinalis extract . 0,40-3,00 Vp/eicosene copolymer . 0,50-1 ,20 Giyceryl behenate/ eicosadioate . 2-3,500
Triethyl citrate . 0,10-0,60 Pentaerythrityl tetra-di-t-butyl hydroxyhydrocinnamate . 0,025-0,050 Ethylhexyl triazone . 1 ,00-2,500
Beta-sitosterol . 0,05-0,300 Benzoic acid . 0,20-0,30 Triclosan . 0,20-0,500 Glycyrrhetinic acid . 0,020-0,500
Boron nitride . 0,020-0,500 Sorbityl furfural . 0,10-0,90
Glycerin . 1,00-5,00 Magnesium sulfate . 0,02-0,90
Xanthan gum . 0,20-0,40 Cyclopentasiloxane . 1,00-3,50 Catechin . 0,005-0,05 Quercetin . 1:5 molare rispetto a catechina Caprylyl glycol . 0,50-0,800
Silica dimethyl silylate . 1 ,00-3,00 Aluminum starch octenylsuccinate . 1,00-3,00 Tetrasodium dicarboxymethyl glutamate . 0,10-0,50
Coleus forskohlii root extract . 0,005-0,05
Bis-ethylhexyl hydroxydimethoxy benzylmalonate . 0,10-0,50 Hydrogenated lecithin . 0,05-0,150
Parfum . 0,20
Acqua . q.b 100 g
Esempio 4
LATTE DOPOSOLE CORPO
Componente (nome INCI) . Quantità p/p
Glycerin 6,00 Cetyl hydroxyethylcellulose . 0,10-0,40 Xanthan gum . 0,10-0,40 Allantoin . 0,10-0,35 Tapioca starch . 1,00-4,00 Sodium hyaluronate . 0,025-0,35 Disodium edta . 0,025-0,20 Catechin . 0,005-0,05 Quercetin . 1:5 molare rispetto a catechina Sorbitan stearate . 2,00-5,00 Sucrose cocoate . 0,10-1,00 Glycirrehtinic acid . 0,30-0,70 Squalane . 2,00-5,00 Beta-sitosterol . 0,10-0,50 Caprilic/capric triglycerides . 1,00-5,00 Butyrospermum parkii . 1,00-5,00 Calendula officinalis . 1,00-3,00 Dimethicone . 1,00-3,00 Sodium hydroximethylglycinate . 0-25-0,50 Parfum . 0,30
Delta tocopherol . 0,02-0,25 Sorbityl furfural . 0,10-0,90 Acqua . q.b. 100 g Lactic acid (pH corrector) . q.b.
Esempio 5
CREMA DOPOSOLE VISO
Componente (nome INCI) . Quantità p/p (%) Glycerin . 2, 0-5,0 Tapioca starch . 1,00-2,00 Cetyl hydroxyethylcellulose . 0,10-0,50 Sodium hyaluronate . 0,05-0,5 Tetrasodium edta . 0,10-0,50 Catechin . 0,005-0,05
Querceti n 1 :5 molare rispetto a catechina Glycirrehtinic acid, . 0,10-0,70
Cetearyl olivate . 1,00-4,00
Sorbitan olivate . 0,50-3,00
Butyrospermum parkii . 1 ,0-8,00
Cetostearyl alcohol . 0,50-2,00
Beta sitosterol . 0,1050
Delta tocoferol . 0,05-0,20
Dimethicone . 0,50-1,50
Dimethicone crosspolymer . 0,20-1,50
Sorbityl furfural . 0,5-1,00
Calendula officinalis . 0,50-5,00
Sodium hydroximethylglycinate . 0-25-0,50
Parfum . q-b.
Acqua . q.b. 100,00
Esempio 6
PRODOTTO DIETETICO PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL'IMMUNO-SOPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE
Ogni capsula di gelatina molle (perla) contiene:
Catechina . 80 mg
Quercetina . 20 mg
Vitamina E (dl-alpha tocopherol) . 5 mg
Olio di soia . 290 mg
Lecitina di soia . 5 mg
Mono e di-gliceridi di acidi grassi . 30 mg
Costituenti dell’involucro:
Gelatina . 145 mg
Glicerolo . 67 mg
Esempio 7
PRODOTTO DIETETICO IN COMPRESSE PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL’IMMUNOSPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE
Ogni compressa contiene
L-Arginina Cloridrato . 200-250 mg
Cellulosa Microcristallina . 100-250 mg
Calcio Fosfato bibasico biidrato . 100-200 mg Idrossipropilmetilcellulosa . 30-100 mg
Zinco (come aminoacido-chelato) . 7,5 mg
Rame (come aminoacidochelato) . 1,2 mg
Catechina . 4,03 mg
Quercetina . 0,84 mg
Mono- e digliceridi degli acidi grassi (E471) . 5-10 mg
Silicio Biossido (silice colloidale) . 5-10 mg
Ferro ossido rosso (Colorante E172) . 0,44 mg
Biotina . 0,17 mg
Esempio 8
PRODOTTO DIETETICO IN CAPSULE DI GELATINA DURA PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL’IMMUNOSOPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE
Ogni capsula dì gelatina dura contiene
Quercetina . 10,4 mg
Catechina . 40 mg
Lisina monocloridrato . 110 mg
Calcio Fosfato bibasico biidrato . 50-100 mg
Cellulosa microcristallina . 50-100 mg
Magnesio stearato . 5-1 Omg
Silicio biossido . 3-6mg
Gelatina naturale . involucro esterno Esempio 9
PRODOTTO DIETETICO PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL’IMMUNO-SOPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE - capsula di gelatina molle (perla) Ogni capsula di gelatina molle (perla) contiene:
Quercetina . 17 mg
Catechina . 83 mg
Vitamina E (dl-alpha tocopherol) . 5 mg
Olio di Boragine . 50 mg
Olio di soia . 350 mg
Lecitina di soia . 5 mg
Mono e di-gliceridi di acidi grassi . 30 mg
Costituenti dell’involucro:
Gelatina . 145 mg
Glicerolo . 67 mg
Esempio 10
PRODOTTO DIETETICO IN COMPRESSE PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL’IMMUNOSOPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE
Ogni compressa contiene:
d-Biotina . 0,23 mg Ubidecarenone . 10 mg Vitamina C . 60 mg Vitamina E (dl-alpha tocopherol)\ . 15mg Vitis vinifera estratto secco semi e foglie (contenente catechina:quercetina in rapporto molare 5:1) . 60 mg Piridossina cloridrato . 3,6 mg Luteina . 2 mg Zinco come Zinco aminoacido chelato . 7,5 mg Rame come Rame aminoacidochelato . 1,2 mg Manganese come manganese aminoacido chelato . 1,75 mg Idrossipropilmetilcellulosa . 30-50mg Calcio Fosfato bibasico biidrato . 50-100 mg Cellulosa microcristallina . 50-100 mg Magnesio stearato . 5-1 Omg Silicio biossido . 3-6mg Esempio 11
PRODOTTO DIETETICO PER PREVENIRE I DANNI CAUSATI DALL’IMMUNO-SOPPRESSIONE INDOTTA NELLA PELLE - BUSTINE MONODOSE
Ogni bustina contiene:
Vitis vinifera estratto secco semi e foglie (contenente catechina:quercetina in rapporto molare 5:1 ) . 60 mg
Liofilizzato di Lactobacillus plantarum . 1ÎŒ00ÎŒ00 ufc/dose Leucina . 10-20 mg Maltodestrina . 500-1000 mg L’efficacia del principio attivo secondo l’invenzione à ̈ stata verificata mediante sperimentazione in vitro.
Tale studio à ̈ descritto nel seguito con riferimento ai grafici nelle figure dei disegni allegati.
La Fig. 1 mostra un grafico riferito all’espressione della citochina IL-10.
La Fig. 2 mostra un grafico riferito all’espressione della citochina IL-12.
La Fig. 3 mostra un grafico riferito all’espressione del TNF-α secondo quanto di seguito più in dettaglio descritto.
La Fig. 4 mostra r'immuno-istochimica dei dimeri di timina nel campione irradiato (1 MED) e in seguito a trattamento con la miscela catechina e quercetina a 4 ore dopo irraggiamento.
STUDIO IN VITRO INTRODUZIONE E OBIETTIVO
Lo studio à ̈ stato condotto su epidermide umana ricostruita in Vitro per valutare l’azione immuno-protettiva e preventiva del danno al DNA, indotto da irradiazione UVA e UVB con una minima dose eritematosa (1MED), da parte della miscela di catechina e quercetina.
Il danno UV-indotto al DNA Ã ̈ certamente uno dei maggiori mediatori molecolari della foto-immunosoppressione (Schwarz et al., 2005).
Uno studio condotto dal gruppo di Kripke (1992) ha dimostrato con chiara evidenza che il DNA rappresenta il target preferenziale della radiazione UV nella generazione dell’immunosoppressione sistemica e che l’evento molecolare primario che media questo tipo di immunosoppressione indotta dagli UV à ̈ la formazione dei dimeri di pirimidina. In particolare i metodi che agiscono in maniera specifica su questo tipo di lesioni al DNA sono strumenti efficaci per ripristinare la funzione immunologica.
Parallelamente allo studio del danno al DNA UV-indotto sono state anche analiz zate le citochine pro-infiammatorie TNF-alfa e IL-12, e la citochina antiinfiammatoria IL-10.
L'approccio sperimentale secondo lo studio complessivamente permette di identificare in una fase precoce, e quindi di grande rilievo per l'azione dermatologica di prevenzione del foto-danno, il grado di attività delle molecole studiate verso i processi di immuno-soppressione indotti dai raggi UV, in una condizione fisiologica di epidermide vitale in seguito allo stress UV utilizzando parametri rilevanti, dinamici ed altamente sensibili come l’espressione di mediatori ed il danno al DNA a livello molecolare.
E' riconosciuta l’attività immuno-modulatrice di alcune citochine, in particolare l’interleuchina IL-12, verso le cellule immuno-competenti, ossia le cellule di Langherans. E’ stato quindi ipotizzato l’uso di questo meccanismo precoce della risposta immunitaria mediata dai cheratinociti epidermici in seguito ad irradiazione UV per valutare l’attività dei composti in esame.
IL-10 rappresenta un fattore cruciale per mantenere il fine equilibrio tra la resistenza nei confronti dei patogeni e l'infiammazione sistemica dannosa, ed à ̈ un potente inibitore della produzione di IL-12 (Haste-Amezaga et al., 1998, D’Andrea et al., 1993).
L’espressione della IL-12 nei cheratinociti epidermici dopo irradiazione à ̈ stata valutata con la tecnica RT-PCR.
La protezione dal danno al DNA à ̈ stata valutata attraverso la formazione dei dimeri di una base pirimidinica (timina) a livello degli strati epidermici basali e soprabasali che si evidenzia già dopo 4 ore dall’esposizione: essi sono riconosciuti markers del NMSC (non melanoma skin cancer) e la loro formazione viene valutata con tecnica immuno-istochimica. L’esame immuno-istochimico del tessuto trattato con catechina e quercetina evidenzia una diminuzione dell’immunomarcaggio, quindi una diminuzione dei dimeri di timina. La Fig. 4 mostra le immagini dai vetrini di immuno-istochimica dei dimeri di timina, a sinistra nel campione irradiato (1 MED) e a destra in seguito a trattamento con la miscela catechina e quercetina dell’invenzione a 4 ore dopo irraggiamento, in cui si evidenzia la ridotta colorazione delle cellule.
Con la stessa tecnica viene valutata la formazione della 8-oxy D-guanosina, marker specifico del danno al DNA indotto dagli UVA.
Per la sperimentazione à ̈ stata usata soluzione fisiologica 0.9% come sostanza inattiva di controllo, ed una miscela di catechina e quercetina in rapporto in peso 5:1, sciolta in soluzione fisiologica, quale composizione secondo l'invenzione.
Nelle figure 1-3 dei disegni allegati sono riportati i grafici relativi alle corrispondenti espressioni ottenute per un controllo non irradiato, un controllo irradiato e la composizione dell’invenzione (catechina quercetina).
Ciascuna coppia di colonne affiancate nei grafici si riferisce rispettivamente al caso di un trattamento UV di 4 ore (colonna di sinistra più chiara, 4h) e di un trattamento di 24 ore (colonna di destra più scura, 24h), irradiato secondo 1MED.
RISULTATI
I risultati della valutazione istologica in immuno-fluorescenza hanno mostrato : a) Per la 8 oxy D-guanosina bio-marker dello stress ossidativo UVA indotto dopo 4h dall'irradiazione la miscela catechina e quercetina ha mostrato un effetto protettivo, la formazione della 8oxy essendo infatti inibita rispetto al controllo IR .
b) Per i dimeri di timina: per la miscela catechina e quercetina à ̈ stata osservata l’inibizione della formazione dei dimeri di pirimidina a 4 h dopo esposizione. L’aumento di IL-10 rispetto al controllo non irradiato, sia in seguito ad irraggiamento UV sia da parte di catechina quercetina, rappresenta l’evidenza del cambiamento indirizzato verso l’immunosoppressione nell’ambiente cutaneo (Fig.1).
Tuttavia la predominanza di IL-10 rispetto a IL-12 (Fig. 2) risulta essenziale nel favorire la risoluzione della risposta infiammatoria dopo radiazione UV. In particolare la creazione di alti livelli di IL-10 e diminuzione di IL-12 a livello cutaneo à ̈ coerente con la natura immunosoppressiva dell’esposizione UV e l’esigenza cutanea di limitare la risposta infiammatoria (Kang et al., 1997).
Inoltre, la soppressione di IL-12 avviene anche ad opera del TNF-alfa, altra citochina strettamente collegata a IL-12 nella regolazione della risposta infiammatoria e produzione di IFN-gamma (Ma and Trinchieri, 2001). Il TNF-alfa riveste un ruolo chiave come mediatore del danno UV-indotto a livello cutaneo (Barr et al., 1999). L'esposizione UV porta ad un incremento del TNF-alfa, mentre il trattamento con catechina e quercetina porta ad una diminuzione del TNF-alfa.
Questo dato, illustrato in Figura 3, risulta strettamente correlato con l'incremento che catechina quercetina inducono su IL-10, in quanto IL-10 Ã ̈ un potente inibitore del TNF-alfa (Bogdan et al., 1991).
CONCLUSIONI
l risultati dello studio descrìtto hanno messo globalmente in evidenza una sorprendente azione immuno-protettiva della miscela catechina+quercetina secondo l’invenzione, con attività anche anti-infiammatoria sulla base dei dati di protezione sul danno al DNA sia UVA sia UVB indotto, dell’espressione della IL-10 e dell’espressione del TNF-alfa.
Si dimostrano pertanto efficacemente realizzati gli scopi dell'invenzione.

Claims (9)

  1. Rivendicazioni 1 ) Una miscela di catechina e quercetina in rapporto molare compreso tra circa 6:1 e 3:1, rispettivamente, per il trattamento della immunosoppressione indotta sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici.
  2. 2) Uso di una miscela di catechina e quercetina in rapporto molare compreso tra circa 6:1 e 3:1, rispettivamente, quale principio attivo per il trattamento della immunosoppressione indotta sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici.
  3. 3) Uso di una miscela di catechina e quercetina in rapporto molare compreso tra circa 6:1 e 3:1, rispettivamente, per la preparazione di una composizione per il trattamento della immunosoppressione indotta sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici.
  4. 4) Uso secondo le rivendicazioni precedenti caratterizzato dal fatto che detta miscela di catechina:quercetina à ̈ in rapporto molare di circa 5:1.
  5. 5) Composizione farmaceutica o dermatologica o nutrizionale o cosmetica per combattere l'azione di immunosoppressione provocata sulla pelle da agenti aggressivi quali inquinanti, disidratanti, raggi ultravioletti, shock termici ed osmotici, caratterizzata dal fatto di comprendere quale principio attivo una miscela di catechina e quercetina in rapporto molare compreso tra circa 6:1 e 3:1, rispettivamente.
  6. 6) Composizione secondo la rivendicazione 5 caratterizzata dal fatto che detto principio attivo à ̈ costituito da una miscela di catechina:quercetina in rapporto molare di circa 5:1.
  7. 7) Composizione secondo le rivendicazioni precedenti caratterizzata dal fatto di essere formulata per uso topico.
  8. 8) Composizione secondo le rivendicazioni precedenti caratterizzata dal fatto di essere formulata per uso orale.
  9. 9) Composizione secondo le rivendicazioni precedenti caratterizzata dal fatto di essere formulata per uso sistemico.
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