HU215113B - Eljárás szubsztituált 3-(piridinil-amino)-indol- és benzo[b]tiofén-származékok, és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására - Google Patents
Eljárás szubsztituált 3-(piridinil-amino)-indol- és benzo[b]tiofén-származékok, és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására Download PDFInfo
- Publication number
- HU215113B HU215113B HU9201297A HU9201297A HU215113B HU 215113 B HU215113 B HU 215113B HU 9201297 A HU9201297 A HU 9201297A HU 9201297 A HU9201297 A HU 9201297A HU 215113 B HU215113 B HU 215113B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- formula
- compound
- compounds
- preparation
- benzo
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/26—Psychostimulants, e.g. nicotine, cocaine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Description
A találmány új szubsztituált 3-(piridinil-amino)-indolés -benzo[b]tiofén-származékok, és ezen vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítási eljárására vonatkozik.
A találmány szerinti vegyületeket az (I) általános képlettel írjuk le, amely képletben R, jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil- vagy (1-6 szénatomos alkil)-karbonilcsoport,
-X-Y= jelentése -NH-CH= vagy -S-CH= csoport, és W és Z jelentése hidrogénatom vagy halogénatom.
A fenti (I) általános képletű vegyületek alkalmasak különböző memóriazavarok, így például Alzheimerkór kezelésére, továbbá a neurotranszmitter funkciók modulátorai, így például szerotonergiás és adrenergiás hatásúak, és ily módon alkalmasak depresszióellenes, szorongásellenes szerként való felhasználásra, továbbá atipikus pszichózis elleni szerként, hányás elleni szerként, valamint különböző személyiségzavarok kezelésére, így például a rögeszmés betegségek kezelésére.
A fenti (I) általános képletű vegyületek esetén az alkilcsoport egyes vagy elágazóláncú 1-6 szénatomos alkilcsoportot, így például metil-, etil-, η-propil-, izopropil-, η-butil-, izo-butil-, szek-butil-, terc-butil-, valamint egyenes vagy elágazóláncú pentil- vagy hexilcsoportot jelent.
A halogénatom lehet fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom.
A találmány szerinti vegyületek magukba foglalják az összes sztereoizomereket, így az optikai izomereket, valamint tautomerizomereket, amennyiben azok vannak.
A találmány szerinti (I) általános képleteket a találmány szerinti eljárással a következőkben leírtak szerint állíthatjuk elő.
A következő eljárások ismertetésénél a képletekben szereplő R1( valamint a W, X, Y és Z szubsztituensek jelentése azonos az előzőekben megadott jelentésekkel, hacsak másképpen nem jelöljük.
A találmány szerinti eljárásnál kiindulási anyagként felhasználásra kerülő (II) általános képletű 3-aminoindol-származékokat ismert módon állítjuk elő, így például oly módon, hogy 3-nitrozo-indol-származékot Na2S2O4-gyel redukálunk [„Indoles”, II. rész, kiadó W.
I. Houliha, Wiley-Interscience, New York, valamint a 0 224 830 (1987) számú európai szabadalmi bejelentés].
A találmány szerinti eljárásnál kiindulási vegyületként még alkalmazásra kerülő (III) általános képletű 3-amino-benzo[b]tiofén-származékokat szintén ismert módon állítjuk elő [D. E. Boswell és munkatársai, Heterocyclic Chem., 5: 69 (1968) és Heilbron, „Dictionary of Organic Compounds”, 151].
a) eljárás
A B) reakcióvázlat szerint egy (Π) általános képletű vegyületet egy (V) általános képletű klór-piridinhidrokloriddal reagáltatunk, amikor egy (VI) általános képletű vegyületet nyerünk.
Ezt a reakciót általában éteres oldószerben, így például bisz(2-metoxi-etil)-éterben, dietil-éterben, dimetoxi-etánban, dioxánban vagy tetrahidrofuránban, vagy pedig valamely aprotikus oldószerben, így például dimetil-formamidban, dimetil-acetamidban, N-metil-2pirrolidonban, hexametil-foszforamidban vagy dimetilszulfoxidban, vagy pedig valamely protikus oldószerben, például etanolban vagy propanolban végezzük 20 °C és 150 °C közötti hőmérsékleten.
A C) reakcióvázlat szerint egy (III) általános képletű vegyületet egy (V) általános képletű vegyülettel lényegében a fentiek szerint reagáltatunk, amikor is (VII) általános képletű vegyületet nyerünk.
b) eljárás (1. változat)
A G) reakcióvázlat szerint egy (VI) általános képletű vegyületet egy R8-Hal általános képletű halogenid vegyülettel - a képletben R8 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport - reagáltatunk -10 és 80 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen 0 és 25 °C közötti hőmérsékleten, amikor is (XI) általános képletű vegyületet nyerünk. A reakciót általában alkalmas oldószerben, így például dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, éteres oldószerben vagy aromás szénhidrogénben végezzük, alkalmas bázis, így például nátrium- vagy kálium-hidrid vagy kálium-terc-butoxid jelenlétében.
c) eljárás (1. változat)
A J) reakcióvázlat szerint egy (VI) általános képletű O vegyületet reagáltatunk egy R9-C-Hal általános képletű savhalogeniddel - a képletben R9 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport - ismert módon, amikor is a (XVI) általános képletű vegyületet nyerjük.
Hasonlóképpen járunk el egy R9-CO-0-CO-R9 általános képletű savanhidrid alkalmazásával.
b) eljárás (2. változat)
Az O) reakcióvázlat szerint a (VII) általános képletű vegyületet egy Rg-Hal általános képletű halogenidvegyülettel reagáltatjuk a b) eljárás (1. változatj-nál leírtak szerint, amikor is a (XXII) általános képletű vegyületet nyerjük.
c) eljárás (2. változat)
Az R) reakcióvázlat szerint egy (VII) általános képO
II letű vegyületet egy Rx,-C-Hal általános képletű savhalogeniddel reagáltatunk lényegében a c) eljárás (1. változatánál leírtak szerint, amikor is a (XXVII) általános képletű vegyületet nyeljük.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek alkalmasak különböző memóriazavarok, így például Alzheimer-kór kezelésére, továbbá felhasználhatók neurotranszmitter funkció modulátoraként, így például szerotonergiás és adrenergiás anyagként, továbbá alkalmasak depresszió elleni, valamint szorongás elleni szerként, valamint atipikus antipszichotikus, valamint hányás elleni szerként, felhasználhatók továbbá személyiségzavarok, így például rögeszmés betegségek esetében is.
HU215 113 Β
PH]-8-hidroxi-2-(di-n-propil-amino)-tetralin (PHJDPAT) kötése szerotonin (5HT}fi receptorokhoz
A vizsgálat célja, hogy meghatározzuk a találmány szerinti vegyületek affinitását az agyban lévő 5HT1A receptorhoz. E vizsgálatok alapján előre megmondható egy szerotonergiás tulajdonságú vegyülettel kapcsolatban annak szorongás elleni szerként, atipikus antipszichotikus szerként való felhasználhatósága, valamint alkalmazhatósága személyiségzavarok, így például rögeszmés betegségek kezelésére.
Bevezetés
Az 5HT receptorok két típusát patkányagyban a spiroperidollal szembeni különböző érzékenységük alapján mutatták ki [Pedigo, N. W., Yammamura, Η. I. és Nelson, D. L.: Discrimination of multiple [3H]-5hydroxytryptamine binding sites by the neuroleptic spiperone in rat brain. J. Neirochem. 36: 220-226 (1981)]. A spiroperidol-érzékeny receptorokat 5HT1A altípusként jelölik, míg a nem érzékeny receptorok jele 5HT]B [Middlemiss, D. N. és Fozard, J. R.: 8-Hydroxy-2-(di-n-propylamino)tetralin discriminates between subtypes of the 5HT] recognition site. Eur. J. Pharmacol., 90: 151-152 (1983)]. Különböző 5HT kötési helyeket is kimutattak különböző esetekben (5HT1C, 5HT1C>, 5HT1D és 5HT3) az 5HT antagonistákkal szembeni különböző érzékenységük alapján [Peroutka, S. J.: Pharmacological Differentiation and characterization of 5-HTJA, 5-HT!B and 5-HT]C binding sites in rat frontal cortex. J. Neurochem. 47: 529-530 (1986)]. Jelentős előnyt jelentett az 5HT receptorok osztályozásában az 5HTIA receptor [3H]DPAT szelektív ligandumjának azonosítása [Peroutka, S. J.: Hydroxytryptamine receptor subtypes: molecular, biochemical and physiological characterization TINS 11: 496-500 (1988)]. Zavarvizsgálatok azt mutatják, hogy a [3H]DPAT jelzett receptorok nem terminális autoreceptorok, hanem szomatodentrikus autoreceptorok [Gozlan, H., El Mestikawy, S., Pichat, L., Glowinsky, J., and Hamon, M.: Identification of presynaptic serotonin autoreceptors using a new ligand: [3H]DPAT. Natúré 305: 140-142]. Bár a DPAT csökkenti a gyulladás mértékét a Raphemagban, és gátolja az 5HT felszabadulását, a tényleges elhelyezkedése és szerepe még nem tisztázott [Verge, D., Daval, G., Marcinkiewicz, M., Patey, A., El Mestikawy, H., Gozlan és Hamon, M.: Quantitative autoradiography of multiple 5HTj receptor subtypes in the brain of control or 5,7,dihydroxytryptamine-treated rats. J. Neurosci. 6: 3474—3482 (1986)]. Ezen vizsgálatok alapján, valamint a [3H]DPAT guanin nukleotidokhoz való kötődésének érzékenysége alapján, valamint az adenilezési ciklusra kifejtett hatása alapján feltehető, hogy a DPAT az 5HT1A receptor agonistájaként hat [Schlegel, R. és Peroutka, S. J.: Nucleotide interactions with 5-HT1A binding sites directly labeled by [3H]-8-hydroxy-2-(di-n-propylamino)tetralin ([3H]8-OH-DPAT). Biochem. Pharmacol. 35: 1943-1949 (1986)].
I. eljárás:
A) Reagensek
1. Trisz pufferek, pH=7,7
a) 57,2 g trisz HCl
16,2 g trisz bázis desztillált vízzel 1 1-re kiegészítve (0,5 mmol trisz puffer, pH=7,7, puffer la).
b) 1:10 arányú hígítást készítünk ionmentesített vízzel (0,05 mól trisz puffer, pH=7,7, puffer lb).
c) 0,05 mól trisz puffer, pH=7,7, amely 10 pmol pargilint, 4 mmol CaCl2-t és 0,1% aszkorbinsavat tartalmaz (puffer le).
0,49 mg pargilin.HCl 111 mg CaCl2 250 mg aszkorbinsav,
250 ml térfogatra kiegészítve 0,05 mólos trisz pufferral, pH=7,7 (reagens lb).
2. 160-206 Ci/mmol mennyiségű 8-hidroxi[3H]DPAT (2-(N,N-di[2,3(n)-3H]-propil-amino)-8hidroxi-1,2,3,4-tetrahidro-naftalin (Amersham). IC5o meghatározásához: 10 nmol koncentrációjú törzsoldatot készítünk, és 50 μΐ mennyiségben a vizsgáló csövekbe mérjük (végső koncentráció 0,5 nmol).
3. Szerotonin-kreatinin-szulfát: 0,5 mmol koncentrációjú törzsoldatot készítünk 0,01 n sósavval, és három csőbe 20 μΐ mennyiséget adagolunk a nem specifikus kötés meghatározására (végső koncentráció lOpmol).
4. Vizsgálandó vegyületek: Minden vizsgálathoz 1 mmol koncentrációjú törzsoldatot készítünk alkalmas oldószerrel, szériahígítást készítünk úgy, hogy a végső koncentrációja a vizsgálatnál 2xl0“5-2xl0“8 mól között legyen. Minden vizsgálatnál hét különböző koncentrációt alkalmazunk. A magasabb vagy alacsony koncentrációértékeket a vizsgálandó vegyület hatásossága alapján választjuk meg.
B) Szövetpreparátum készítése
Hím Wistar patkányokat lefejezünk, a hippocampusokat eltávolítjuk, megmérjük, és a hússzoros térfogatú, 0,05 mólos trisz pufferban (pH=7,7) homogenizáljuk. A homogenizátumokat 48 000 G mellett 10 percen át centrifúgáljuk, majd a felülúszót eldobjuk. A pelletet azonos térfogatú, 0,05 mólos trisz pufferban szuszpendáljuk, majd 37 °C hőmérsékleten 10 percen át inkubáljuk, majd ismételten 48000 G mellett 10 percen át centrifúgáljuk. A végső membrán pelletet 0,05 mólos trisz pufferban szuszpendáljuk, amely még 4 mmol CaCl2-t, 0,1% aszkorbinsavat és 10 pmol pargilint tartalmaz.
C) Vizsgálat
800 μΐ szövetpreparátum
130 μΐ 0,05 mól trisz +CaCl2+pargilin+aszkorbinsav μΐ hordozóanyag(5HT)hatóanyag 50 μΐ [3H]DPAT
HU 215 113 Β
A csöveket 15 percen át 25 °C hőmérsékleten inkubáljuk. A vizsgálatot Whatman GF/B szűrőn át végzett vákuumszűréssel megállítjuk, majd a szűrőket kétszer 5 ml mennyiségű jéghideg, 0,05 mólos trisz pufferral átmossuk, a szűrletet szcintillációs mérőcsőbe helyezzük 10 ml Liquiscint szcintillációs folyadékkal együtt, és számláljuk.
Számítás
A specifikus kötést a teljes kötés, valamint a 10 pmol 5HT jelenlétében végzett kötés közötti különbség alapján számoljuk. Az IC50 értékeket a százalékos specifikus kötésből számoljuk minden hatóanyag-koncentrációnál.
II. eljárás:
A) Reagensek
1. Trisz pufferek, pH=7,7
a) 57,2 g trisz HCI
16,2 g trisz bázis desztillált vízzel 1 1-re kiegészítve (0,5 mmol trisz puffer, pH=7,7, puffer la).
b) 1:10 arányú hígítást készítünk desztillált vízzel (0,05 mól trisz puffer, pH=7,7, 25 °C hőmérsékleten, puffer lb).
c) 0,05 mól trisz puffer, pH=7,7, amely 10 μπιοί pargilint, 4 mmol CaCl2-t és 0,1% aszkorbinsavat tartalmaz (puffer le).
0,49 mg pargilin.HCl 110,9 mg CaCl2 250 mg aszkorbinsav,
250 ml térfogatra kiegészítve 0,05 mól trisz pufferral, pH=7,7 (puffer lb).
2. 160-206 Ci/mmol mennyiségű 8-hidroxi[3H]DPAT (2 -N ,N-di [2,3 (n)-3H]-propil-amino)-8hidroxi-1,2,3,4-tetrahidro-naftalin (Amersham). IC5o meghatározásához: 3,3 nmol koncentrációjú [3H]DPAT-oldatot készítünk trisz pufferral (le) úgy, hogy ha 150 μΐ mennyiséget mérünk be a csövekbe, 1 ml vizsgálati folyadék esetén 0,5 nmol végső koncentrációt nyerünk.
3. Szerotonin-kreatinin-szulfátból (Sigma Chemical
Company) 100 pmol koncentrációjú oldatot készítünk trisz pufferral (le). Három csőbe 0,01 μΐ-t mérünk be a nem specifikus kötések meghatározására (ez végső koncentrációban 1 ml vizsgálati folyadék esetében 10 pmolt jelent).
4. Vizsgálandó vegyületek: Minden vizsgálathoz
100 mmol koncentrációjú törzsoldatot készítünk alkalmas oldószerrel, majd szériahígítást végzünk trisz pufferral (le) úgy, hogy ha 100 μΐ hatóanyagot elkeverünk 1 ml vizsgálati folyadékkal, végső koncentrációként 10 5—1CH8 mól értékeket nyerjünk. Minden vizsgálatnál hét különböző koncentrációt alkalmazunk, a magasabb vagy alacsonyabb koncentrációértékeket a hatóanyag hatásossága alapján választjuk.
B) Preparátum készítése
Hím Wistar patkányokat lefejezünk, a hippocampusokat eltávolítjuk, és hússzoros térfogatú, jéghideg
0,05 mólos trisz pufferban (pH=7,7, lb) homogenizáljuk. A kapott homogenizátumot 48000 G mellett 10 percen át 4 °C hőmérsékleten centrifugáljuk, a kapott pelletet ismételten friss (lb) trisz pufferban homogenizáljuk, 37 °C-on 10 percen át inkubáljuk, majd ismételten 48000 G mellett 10 percen át centrifugáljuk. A végső membrán pelletet 0,05 mólos trisz pufferban (le) szuszpendáljuk, amely még 4 mmol CaCl2-t, 0,1% aszkorbinsavat és 10 pmol pargilint tartalmaz. A specifikus kötés értéke körülbelül 90%-a a teljes megkötött ligandumnak.
C) Vizsgálat 750 μΐ szövet 150 μΐ [3H]DPAT
100 μΐ hordozó (az összkötéshez), vagy 100 pmol szerotonin-kreatinin-szulfát (a nem specifikus kötéshez), vagy a megfelelő hatóanyag-koncentráció.
A csöveket 15 percen át 25 °C hőmérsékleten inkubáljuk. A vizsgálatot Whatman GF/B szűrőn keresztül végzett vákuumszűréssel állítjuk meg, majd a szűrőket kétszer 5 ml jéghideg, 0,05 mólos trisz pufferral (lb) átmossuk. A szűrőket ezután szcintillációs csövekbe helyezzük 10 ml Liquiscint szcintillációs folyadékkal együtt, majd számláljuk. A specifikus kötést az összkötés és a 10 μπιοί szerotonin-kreatininszulfát jelenlétében mért kötés különbsége alapján határozzuk meg. Az IC50 értékeket a százalékos specifikus kötésértékből számítjuk minden hatóanyag-koncentráció esetén.
A [3H]DPAT kötés esetén a KD érték 1,3 nmol a receptortelítési-kísérlet Scatchard-analízise alapján meghatározva. Ebből a Kj értékét a következő, ChengPrusoff-egyenlet alapján számítjuk:
Kí=IC50/1+L/Kd
A 3H-GR65630 kötődése patkány entorinális kéreg membránokhoz: 5HT3 receptor kötési vizsgálata A vizsgálat célja a találmány szerinti vegyületek affinitásának meghatározása az agyban lévő 5HT3 kötési helyekhez. A vizsgálat alapján előre megmondható a vegyületek hatásossága hányás elleni szerként, szorongás elleni szerként vagy atipikus antipszichotikus szerként való alkalmazás esetén.
Bevezetés
Ismert, hogy jelenleg három különböző receptor altípus ismeretes az 5HT neurotranszmitter szerotonin esetében: 5HTb 5HT2 és 5HT3. Az 5HTt és 5HT2 kötési helyeket igen jól jellemezték, és a kötési, valamint a funkcionális aktivitási vizsgálatok alapján további alcsoportokba osztották [Peroutka, S. J.: 5-Hydroxytryptamine receptor subtypes; Molecular biochemical and physiological characterization. Tends in Neuroscience 11: 496-500 (1988), Watling, K. J.: 5HT3 receptor agonists and antagonists. Neurotransmission 3: 1-4 (1989)]. Ugyanakkor az 5HT3 kötési helyeket csupán az utóbbi időben kezdték jellemezni. Eredetileg úgy gondolták, hogy az 5HT3 kötési helyek csak a periférián
HU 215 113B fordulnak elő [Costell, B., Naylor, R. J. és Tyres, Μ. B.: Recent advances in the neuropharmacology of 5HT3 agonists and antagonists. Rév. Neuroscience 2: 41-65 (1988)]. Ugyanakkor az utóbbi időben alkalmazott igen hatásos és szelektív 5HT3 antagonista szerek (GR65630, zacopride, ICS 205 930 és MDL 72 222), valamint az ezek alkalmazásával végzett kötési vizsgálatok kimutatták, hogy az 5HT3 kötési helyek is az agy különböző részein helyezkednek el [Kilpatrick, G. J., Jones, Β. P. és Tyres, Μ. B.: Identification and distribution of 5HT3 receptors in rat brain using radioligand binding. Natúré 330: 746-748 (1987), Barnes, N. M., Costell, B. és Naylor, R. J.: [3H] Zacopride: Ligand fór the Identification of 5HT3 recognition sites. J. Pharm. Pharmacol. 40: 548-551 (1988), Watling, K. J., Aspley, S., Swain, C. J. and Saunders, J.: [3H] Quatemised ICS 205-930 labels 5HT3 receptor binding sites in rat brain. Eur. Pharmacol. 149: 397-398 (1988)]. Legtöbb 5HT3 kötési helyet az agy limbic- és dopamintartalmú részein határoztak meg (entorinális kéreg, mandula, nucleus accumbens és tuberculum olfactorium) [Kilpatrick, G. J., Jones, Β. P. és Tyres, Μ. B.: Identification and distribution of 5HT3 receptors in rat brain using radioligand binding. Natúré 330: 746-748 (1987)]. Amellett, hogy az 5HT3 antagonisták szelektíve kötődnek a dopamingazdag területeken, megállapították azt is, hogy blokkolni képesek bizonyos függőséget okozó drogokkal (nikotin és morfin) kapcsolatos viselkedési hatásokat, és aktívak a szorongás elleni szerekre vonatkozó viselkedési vizsgálatokban. Ezen szelektív regionális kötési eredmények, valamint viselkedési kísérletek alapján kikövetkeztethető, hogy az 5HT3 antagonisták gyógyhatásúak lehetnek különböző túlzott dopaminergiás aktivitásokkal kapcsolatos állapotokban, így például skizofrénia vagy drogfüggőség esetén.
Eljárás:
A) Reagensek
1. 0,05 mól Krebs-Hepes puffer, pH=7,4
11,92 g Hepes
10,52 g NaCl 0,373 g KC1 0,277 g CaCl2 0,244 g MgCl2.6H2O
Desztillált vízzel 11-re kiegészítve, és a pH értékét 7,4-re beállítva 5 n nátrium-hidroxiddal 4 °C-on.
2. 87 Ci/mmol [3H]-GR65630 (New England
Nuclear)
IC50 meghatározásához: 1 nmol koncentrációjú [3H]-GR65630-oldatot készítünk Krebs-Hepes pufferral úgy, hogy ha ebből 100 μΐ mennyiséget adagolunk a csövekbe, 250 μΐ vizsgálati folyadék esetében 0,4 nmol végső koncentrációt nyerjünk.
3. Zacopride-maleátból (Research Biochemicals
Inc.) 500 μιηοΐ koncentrációjú oldatot készítünk Krebs-Hepes pufferral, ebből 50 μΐ-t adagolunk három csőbe a nem specifikus kötés meghatározásához (ez 100 pmol végső koncentrációt jelent 250 μΐ vizsgálati folyadék esetén).
4. Vizsgálandó vegyületek: A vizsgálatokhoz 50 pmol koncentrációjú törzsoldatot készítünk alkalmas oldószerrel, és ebből szériahígítást végzünk Krebs-Hepes pufferral úgy, hogy ha 50 pl mennyiségű hatóanyagot alkalmazunk 250 pl vizsgálandó folyadékban, végső koncentrációként 105—108 közötti koncentrációt nyerjünk. A vizsgálatoknál hét különböző koncentrációt alkalmazunk, a magasabb vagy alacsonyabb koncentrációértékeket a hatóanyag hatásossága alapján választottuk meg.
B) Szövetpreparátum készítése
150-200 g tömegű hím Wistar patkányokat lefejeztünk, eltávolítottuk az entorinális kérget, megmértük, majd tízszeres térfogatú jéghideg 0,05 mólos KrebsHepes pufferban (pH=7,4) homogenizáltuk. A homogenizátumokat 48 000 G mellett 15 percen át 4 °C-on centrifúgáltuk, a kapott pelletet ismételten friss KrebsHepes pufferban homogenizáltuk, majd ismét 48 000 G mellett 15 percen át 4 °C hőmérsékleten centrifúgáltuk. A végső pelletet az eredeti térfogatnak megfelelő mennyiségű jéghideg Krebs-Hepes pufferban szuszpendáltuk, ily módon a végső szövetkoncentráció 1,2-1,6 mg/ml 100 pl vizsgálati folyadékban. A specifikus kötés értéke körülbelül 55-65% az összmegkötött ligandumra vonatkoztatva.
C) Vizsgálat
100 pl szövetszuszpenzió 100 pl [3H]-GR65630 pl hordozó (az összkötéshez), vagy 500 pmol zacopride-maleát (a nem specifikus kötéshez) vagy a megfelelő hatóanyag-koncentráció.
A vizsgáló csöveket jégen lehűtöttük, majd forgattuk és folyamatos rázással 30 percen át 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk. Az inkubációs periódus befejezése után az inkubátumokat 5 ml jéghideg Krebs-Hepes pufferral hígítottuk, majd azonnal Whatman GF/B szűrőn keresztül vákuumban szűrtük, majd ezt követően kétszer, 5-5 ml mennyiségű Krebs-Hepes puffénál átmostuk. A szűrőket szárítottuk és 10 ml folyékony szcintillációs folyadék adagolása után számláltuk. A specifikus GR65 630 kötést az összkötés és a 100 pmol zacopride jelenlétében mutatott kötés különbsége alapján határoztuk meg. Az IC5o értékeket computer segítségével végzett log-probit analízis segítségével határoztuk meg.
^H-Serotonin-felvétel patkány teljes agy synaptosomes-ben
A vizsgálat célja, hogy biokémiai úton kiválasszuk azokat a vegyületeket, amelyek gátolják a szerotonin (5HT)-felvételt, és amely vegyületek alkalmasak antidepressziós szerként személyiségzavarok, így például rögeszmés betegségek kezelésére.
Bevezetés
Asberg és munkatársai szerint a szerotonergiás hipofünkcióban szenvedő betegek egy biokémiai alcsoportját alkotják a depressziós betegek [Asberg,
HU 215 113 Β
Thoren, P., Traskman, L. és Ringberger, V.: „Serotonin depression: - A biochemical subgroup within the affective disorders, Science 191: 478-480 (1975)], míg mások szerint [DeMontigy, C.: Enhancement of 5HT neurotransmission by antidepressant treatments, J. Ohysiol. (Paris) 77: 455—461 (1980)] a megváltozott szerotonergiás funkciók okozzák az affective elváltozásokkal kapcsolatos kedélyállapot-változásokat. Bár az 5HT szerepe a depresszió etiológiájában még nem tisztázott, az igaz, hogy számos antidepressziós hatóanyag blokkolja az 5HT újrafelvételi mechanizmust. In vitro receptorkötési vizsgálatokkal kimutatták, hogy a [3H]imipramin jelzi az 5HT felvevőhelyeket [Langer, S. Z., Morét, C., Raisman, R., Dubocovich, M. L. és Briley M.: High affinity [3H]imipramine binding in rat hypothalamus: Association with uptake of serotonin bút nőt norepinephrine. Science 210: 1133-1135 (1980)]. Ismert, hogy a trazodone és zimelidin klinikailag hatásos antidepressziós szerek [Feigher, J. P.: Clinical efficacy of the newer antidepressants, J. Clin. Psychopharmacol. 1: 235-265 (1981)], és meglehetős szelektív hatással rendelkeznek az 5HT felvételre [Orgen, S. O., Ross, S. B., Hall, H., Hóim, A. C. és Renyi, A. L.: The pharmacology of zimelidine: 5HT selective reuptake inhibitor. Acta Psychiat. Scand. 290: 127-151 (1981), Clements-Jewry, S., Robson, P. A. és Chindley, L. J.: Biochemical investigations intő the mode of action of trazodone. Neuropharmacol. 19: 1165-1173 (1980)]. A legutóbbi időben kimutatták, hogy a fluoxetin egyidejűleg szelektív és hatásos 5HTfelvétel inhibitor.
A [3H]-5HT transzportot CNS szövetben jellemezték [Ross, S. B.: Neuronal transport of 5-hydroxytryptamine, Pharmacol. 21: 123-131 (1980), Shaskan, E. G. és Synder, S. H.: Kinetics of serotonin accumulation intő slices írom rat brain: Relationship to catecholamine uptake. J. Pharmacol. Exp. Ther. 175:404—418 (1970)], és azt találták, hogy az telíthető, nátrium- és hőmérsékletfüggő, ouabainnal, metabolikus inhibitorokkal, triptamin analógokkal [Hóm, S. A. Structure activity relations fór the inhibition of 5HT uptake intő rat hypothalamic homogenates by serotonin and tryptamine analogues, J. Neurochem. 21: 883-888 (1973)], és triciklusos antidepressziós szerekkel (tercier aminok, szekunder aminok) [Hóm, A. S. és Trace, R. C. A. M.: Structureactivity relations fór the inhibition of 5-hydroxytryptamine uptake by tricyclic antidepressant intő synaptosomes from serotonergic neurosis in rat brain homogenates. Brit. J. Pharmacol. 57; 399-403 (1974)] gátolható. Ez utóbbi megállapítások megkülönböztetik az 5HT-felvételt a katekolamin-felvételtől. A [3H]-5HT-felvétel alkalmas a szerotonin idegterminálok jelzésére is.
Eljárás:
A) Kísérleti állatok: hím CR Wistar patkányok (100-125 g)
B) Reagensek
1. Kreps-Henseleit hidrogén-karbonát puffer, pH=7,4 (KHBB): 1 1 térfogatban az alábbi sókat tartalmazza:
| g/i | mmol | |
| NaCl | 6,92 | 118,4 |
| KC1 | 0,35 | 4,7 |
| MgSO4.7H2O | 0,29 | 1,2 |
| KH2PO4 | 0,16 | 2,2 |
| NaHCO3 | 2,10 | 24,9 |
| CaCl2 | 0,14 | 1,3 |
Felhasználás előtt hozzáadandó:
| Dextróz | 2 mg/ml | 11,1 mmol |
| Iproniazid-foszfát | 0,3 mg/ml | 0,1 mmol |
A kapott oldatot 60 percen át öblítjük 95% O2/5% CO2 tartalmú gázzal, majd a pH értékét ellenőrizzük (7,4±0,l)
2. 0,32 mól szaccharóz: 21,9 g szaccharóz 200 ml térfogatban.
3. Szerotonin-kreatinin-szulfátból (Sigma Chemical Co.) 0,1 mólos törzsoldatot készítünk 0,01 n sósavban. Ezt alkalmazzuk a radiojelzett 5HT specifikus aktivitásának hígításához.
4. 20-30 Ci/mmol aktivitású 5-[l,2-3H(N)]hidroxi-triptamin-kreatinin-szulfát (Serotonin) (beszerzés: New England Nuclear).
A 3H-5HT kívánt végső koncentrációja a vizsgálatnál 50 nmol. A hígítási faktor 0,8. így
62,5 nmol 3H-5HT-t 100 ml KHBB-ben tartalmazó oldatot készítünk.
A) 56,1 μί 0,1 mmol 5HT = 56,1 nmol *B) 0,64 nmol 3H-5HT = 6,4 nmol
62,5 nmol
Számított térfogat a specifikus aktivitás 3H5HT-ből.
5. A vizsgálatokhoz a vizsgálandó vegyületekből 1 mmol-os törzsoldatot készítünk alkalmas oldószerrel, majd ezekből szériahígítást készítünk úgy, hogy a végső koncentráció értéke 2χ10_8-2χ10-5 mól közötti értékek legyenek. Minden vizsgálathoz hét különböző koncentrációt alkalmazunk, a magasabb vagy alacsonyabb koncentrációértékeket a vizsgálandó vegyület hatásossága alapján alkalmazzuk.
C) Szövetpreparátum készítése
Hím Wistar patkányokat lefejeztünk és az agyukat gyorsan eltávolítottuk. Meghatároztuk az agy teljes tömegét a cerebella nélkül, majd kilencszeres térfogatú, jéghideg 0,32 mólos szaccharózoldatban homogenizáltuk Potter-Elvejhem homogenizátor alkalmazásával. A homogenizálást 4-5-ször végzett le-fel emeléssel végeztük, hogy minimalizáljuk a szinaptozom lízisét. A homogenizátumot ez után 1000 G mellett 10 percen át 0-4 °C hőmérsékleten centrifugáltuk, a felülúszót (Sj dekantálással elválasztottuk, és ezt alkalmaztuk a felvétellel kapcsolatos kísérletekhez.
D) Vizsgálat
800 μΐ KHBB+[3H]-5HT 20 μΐ hordozó vagy megfelelő hatóanyagkoncentráció
200 μΐ szövetszuszpenzió.
A csöveket 37 °C hőmérsékleten 95% O2/5% CO2 atmoszférában 5 percen át inkubáltuk. Minden vizsgá6
HU215 113 Β lathoz három csövet inkubáltunk 20 μΐ hordozóval 0 °C-os jégfíirdőn. Inkubálás után a csöveket azonnal centrifugáltuk 4000 G mellett 10 percen át. A felülúszó folyadékot leszívattuk, a pelleteket 1 ml szolubliziáló oldatban (Triton X-100+50% EtOH, 1:4 tf hígítás) oldottuk. A csöveket ez után erőteljesen forgattuk, szcintillációs mérőcsőben dekantáltuk, és 10 ml Liquiscint szcintillációs folyadék jelenlétében számláltuk. Az aktív felvétel a 37 °C hőmérsékleten és 0 °C hőmérsékleten mért percenkénti beütésszámok különbsége. Az egyes hatóanyag-koncentrációknál a százalékos gátlás értékét három párhuzamos alapján határoztuk meg. Az IC50 értékeket log-probit analízis alapján határoztuk meg.
A fentiek szerinti három vizsgálat eredményeit a következő 1. táblázatban foglaljuk össze egy kiválasztott találmány szerinti vegyület esetében.
1. táblázat
| Hatóanyag | 5HT1A receptorkötés IC50 (pmol) | 5HT3 receptorkötés IC50 (pmol) | 3H-seroto- nin-felvétel gátlása IC50 (pmol) |
| 3-(4-piridinilamino)-l H-indol | 6,4 | 5,5 | 14,6 |
| Buspirone | 0,062 | >20 | |
| MDL 72222 | 0,53 | ||
| Clozapine | 0,58 | 1,02 | >20 |
| Chloripramine | 0,15 | ||
| Amitriptyline | 0,83 |
A találmány szerinti vegyületek hatásos mennyiségét különböző módon adagolhatjuk a betegeknek, így például orálisan kapszulák vagy tabletták formájában, parenterálisan, steril oldatok vagy szuszpenziók formájában, vagy bizonyos esetekben intravénásán, steril oldatok formájában. A hatásos szabad bázis formájában lévő vegyületeket gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sójuk formájában is adagolhatjuk a stabilitás, alkalmas kristályosodás és megnövekedett oldhatóság érdekében.
A gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sók előállításához például a következő savakat alkalmazhatjuk: szervetlen savak, így például sósav, hidrogén-bromid, kénsav, salétromsav, foszforsav vagy perklórsav, továbbá szerves savak, így például borkősav, citromsav, ecetsav, borostyánkősav, maleinsav, fumársav vagy oxálsav.
A találmány szerinti hatóanyagokat orális adagolás esetén például inért hígítóanyagokkal vagy ehető hordozóanyagokkal elkeverve, vagy zselatinkapszulák formájában, vagy tablettákká sajtolt formában adagolhatjuk. Ennek megfelelően a találmány szerinti orális gyógyszerkészítmények lehetnek tabletták, pirulák, kapszulák, elixírek, szuszpenziók, ostyák és rágógumik, amely készítmények a hatóanyagot ismert adalékanyagokkal együtt tartalmazzák. Ezek a készítmények legalább 0,5 t% hatóanyagot tartalmaznak, de bizonyos esetekben a hatóanyag-tartalom 4—701% közötti érték is lehet. A hatóanyag mennyiségét a készítményekben általában úgy választjuk meg, hogy alkalmas dózisegységet kapjunk. Az előnyös találmány szerinti gyógyszerkészítmények orális egységdózisok esetén általában
1-200 mg hatóanyagot tartalmaznak.
A tabletta, pirula, kapszula, pasztilla és más hasonló gyógyszerkészítmények a következő adalékanyagokat tartalmazhatják: kötőanyagok, így például mikrokristályos cellulóz, tragantgumi vagy zselatin, keményítő vagy laktóz, dezintegrálószer, így például alginsav, primogél, kukoricakeményítő, csúsztatóanyagok, így például magnézium-sztearát vagy sterotex, kolloidális szilícium-dioxid, édesítőszerek, így például szaccharóz vagy szaccharin, továbbá ízanyagok, így például borsmenta, metil-szalicilát vagy narancs ízanyag. Ha a dózisegység kapszula, az tartalmazhat még a fentieken kívül folyékony hordozót is, így például zsíros olajokat. A dózisegységek tartalmazhatnak még egyéb más anyagokat is, amelyek a készítmények fizikai formáját módosítják, így például bevonattal is el lehetnek látva. így a tablettákat vagy pirulákat cukor, sellak vagy más enterális bevonóanyaggal vonhatjuk be. A szirupok tartalmazhatnak még a hatóanyag mellett szaccharózt édesítőszerként vagy bizonyos konzerválóanyagokat, színező, festék- és izanyagokat. A gyógyszerkészítmények előállításánál felhasznált anyagok gyógyszerészetileg tiszták és nem toxikusak kell hogy legyenek a felhasznált mennyiségben.
A parenterális adagolású gyógyszerkészítmények lehetnek olajok vagy szuszpenzíók. Ezek a készítmények általában legalább 0,1% hatóanyagot tartalmaznak, de a hatóanyag mennyisége 0,5 és 30 t% között változik általában. A hatóanyag-mennyiséget általában úgy választjuk meg, hogy megfelelő dózisegységet kapjunk. Az előnyös parenterális találmány szerinti készítmények általában 0,5-100 mg hatóanyagot tartalmaznak parenterális dózisegységenként.
A találmány szerinti oldat vagy szuszpenziókészítmények például a következő komponenseket tartalmazhatják: steril hígítóanyag, így például injekciós célra alkalmas víz, sóoldat, fixált olajok, polietilénglikolok, glicerin, propilénglikol vagy más szintetikus oldószerek, antibakteriális szerek, így például benzil-alkohol vagy metil-paraben, antioxidánsok, így például aszkorbinsav vagy nátrium-biszulfid, kelátképző szerek, így például etilén-diamin-tetraecetsav, pufferek, így például acetátok, citrátok vagy foszfátok, továbbá a tonicitás beállítására alkalmas szerek, így például nátrium-klorid vagy dextróz. A parenterális készítményeket például eldobható fecskendőkben, vagy több dózist tartalmazó üvegből vagy műanyagból készült fiolákban hozzuk forgalomba.
A találmány szerinti gyógyszerkészítményekben például a következő hatóanyagokat alkalmazhatjuk:
-(4-piridinil-amino)-1 H-indol
N-(lH-indol-3-il)-N-(4-piridinil)-propánamid
3-(4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofén
N-(benzo[b]tiofén-3-il)-N-(4-piridinil)-propánamid
-(3 -fluor-4-piridinil-amino)-1 H-indol
3-(propil-4-piridinil-amino)-1 H-indol
HU215 113 Β
-metil-(4-piridinil-amino)-1 H-indol
6-fluor-3-(4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofén
6-fluor-3-(N-propil-4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofén
3-(4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofén
3-[N-propil-N-(3-fluor-4-piridinil)-amino]-lH-indol
A találmány szerinti eljárást közelebbről a következő példákkal illusztráljuk.
1. példa
3-(4-piridinil-amino)-lH-indol-maleát g 3-amino-índoIt és 12 g 4-klór-piridinhidrokloridot feloldunk 150 ml 1-metil-2-pirrolidinonban, és 70-75 °C hőmérsékleten 1 órán át keveijük, majd további 4 g 4-klór-piridin-hidrokloridot adagolunk. A kapott keveréket összesen 2 órán át keveijük, majd lehűtjük, vizet adunk hozzá, nátrium-karbonáttal meglúgosítjuk, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumot egymást követően vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd vízmentes magnéziumszulfáton szárítjuk, szüljük, és betöményítjük. A kapott 20 g sötét színű olajat szilikagélen kromatografáljuk (20% metanol/diklór-metánban, HPLC), amikor is 7 g sötét színű olajat nyerünk. Ezt acetonitrilből átkristályosítva 3 g világosbarna kristályos anyagot kapunk, op. 192-193 °C. A kapott termék 2,8 g-ját maleátsóvá alakítjuk 50% metanol/dietil-éterben, így 3,5 g világosbarna kristályos anyagot nyerünk, op. 149-151 °C, ezt 50% metanol/dietil-éter elegyből átkristályosítjuk, így 3,4 g világosbarna kristályos anyagot kapunk, op. 149-151 °C.
Elemanalízis a C17H15N3O4 képletű vegyületre: számított: 62,76% C 4,65% H 12,92% N mért: 62,85% C 4,70% H 12,92% N
2. példa
N-(l H-indol-3-il)-N-(4-piridinil)-propánamid g 3-(4-piridinil-amino)-lH-indolt elkeverünk 10 ml toluolban oldott 3 g propionsavanhidriddel és 10 ml diklór-metánnal. A kapott oldatot környezeti hőmérsékleten 1 órán át keveijük, majd vizet adunk hozzá, és nátrium-karbonáttal meglúgosítjuk. A terméket diklórmetánnal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, majd szüljük, és betöményítjük. A visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk (50% etil-acetát/diklór-metánban), ily módon 3,5 g világosbarna szilárd anyagot nyerünk, op. 166-168 °C. Ebből 1,5 g-ot acetonitrilből átkristályosítunk, így 1,3 g világosbarna kristályt nyerünk, op. 168-170 °C.
Elemanalízis a CI6H15N3O képletű vegyületre: számított: 72,43% C 5,70% H 15,84% N mért: 72,06% C 5,69% H 15,94% N
3. példa
3-(3-fluor-4-piridinil-amino)-lH-indolhidroklorid g 3-amino-indolt és 13 g 4-klór-3-fluor-piridinhidrokloridot feloldunk 200 ml l-metil-2-pirrolidinonban, és 75-80 °C hőmérsékleten 2 órán át keveijük, majd további 5 g 4-klór-3-fluor-piridin-hidrokloridot adagolunk. A keveréket összesen 3 órán át keveijük, majd lehűtjük, vizet adunk hozzá, nátrium-karbonáttal meglúgosítjuk, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és betöményítjük, amikor is 20 g sötét színű olajat nyerünk. Szilikagélen először diklór-metánnal, majd 50% etil-acetátot tartalmazó diklór-metánnal kromatografáljuk, amikor is 17 g sötét színű olajat nyerünk. Ezt szilikagélen flash kromatográfiával tisztítjuk, amikor is 10,6 g sötét színű olajat nyerünk. Ezt ez után szilikagélen 20% etil-acetátot tartalmazó diklór-metánnal, HPLC-vel tisztítjuk, így 8 g sötét színű olajat nyerünk. Ebből 6 g-ot hidroklorid-sóvá alakítunk metanol/dietil-éter elegyben, a kapott só mennyisége
3,5 g, op. 250 °C. 30% metanolt tartalmazó dietil-éterből átkristályosítjuk, amikor is 2,7 g kristályos anyagot nyerünk, op. 265—268 °C (bomlik).
Elemanalízis a C13HhC1FN3 képletű vegyületre: számított: 59,21% C 4,20% H 15,93% N mért: 59,06% C 4,40% H 15,49% N
4. példa
6-fluor-3-(4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofénmaleát g 3-amino-6-fluor-benzo[b]tiofént és 7 g 4-klórpiridin-hidrokloridot feloldunk 200 ml l-metil-2-pirrolidinonban, és 1 órán át 80-85 °C hőmérsékleten keverjük, majd lehűtjük, vizet adunk hozzá, nátrium-karbonáttal meglúgosítjuk, etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumot egymást követően vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szüljük, és betöményítjük. A kapott 10 g sötét színű olajat szilikagélen tisztítjuk (10% metanol/diklór-metánban, HPLC), amikor is 4,7 g barna színű szilárd anyagot nyerünk, op. 102-106 °C. Ezt az anyagot maleátsóvá alakítjuk 20% metanolt tartalmazó dietil-éteres oldatban, majd ugyanezen oldószerből átkristályosítjuk, amikor is 2,9 g fehér, kristályos anyagot nyerünk, op. 172-174 °C (bomlik).
Elemanalízis a CI7H13FN2O4S képletű vegyületre: számított: 56,66% C 3,64% H 7,78% N mért: 56,41% C 3,44% H 7,68% N
5. példa
6-fluor-3-(N-propil-4-piridinil-amino)-benzo[b] tiofén-hidroklorid
4,2 g 6-fluor-3-(4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofént 20 ml dimetil-formamidban oldva lassan az 5 ml dimetil-formamidban szuszpendált 0,42 g nátriumhidridhez adagoljuk. Az anion kialakulását követően
2,3 g 1-bróm-propánt adagolunk hozzá, 10 ml dimetilformamidban oldva. 1 óra elteltével a reakciókeveréket elkeverjük vízzel, etil-acetáttal extraháljuk, a szerves extraktumot egymást követően vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, szüljük és betöményítjük. A kapott 5 g sötét színű olajat szilikagélen kromatografáljuk etil-acetáttal, amikor is 3,3 g sárga olajat nyerünk. Ezt hidrokloridsóvá alakítjuk 20% metanolt tartalmazó dietil-éterben, a kapott só mennyisége 3,3 g, sárga kristályos anyag, op. 290-292 °C (bomlik).
Claims (4)
1. Eljárás (I) általános képletű vegyületek, valamint gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására - a képletben
Rj jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil- vagy (1-6 szénatomos alkil)-karbonilcsoport,
-X-Y= jelentése -NH-CH= vagy -S-CH= csoport, és W és Z jelentése hidrogénatom vagy halogénatom azzal jellemezve, hogy
a) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol R| jelentése hidrogénatom, egy (V) általános képletű vegyületet - a képletben Z jelentése a fenti egy (II) vagy (III) általános képletű vegyülettel - a képletekben W jelentése a fenti - reagáltatunk, vagy
b) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelynek képletében -X-Y=, W és Z jelentése a fenti és R] jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, egy olyan (I) általános képletű vegyületet, amelynek képletében -X-Y=, W és Z jelentése a fenti, és R| jelentése hidrogénatom, egy Rg-Hal általános képletű vegyülettel - a képletben R8 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport - reagáltatunk, vagy
c) olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelynek képletében -X—Y=, W és Z jelentése a fenti és Rj jelentése (1-6 szénatomos alkil)karbonilcsoport, egy olyan (I) általános képletű vegyületet, amelynek képletében -X-Y=, W és Z jelentése a fenti és Rj jelentése hidrogénatom egy o o o
II II II
R9CO-Hal vagy R^CO-O-C-Rg általános képletű vegyülettel - a képletben Rg jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport és Hal jelentése klór- vagy brómatom - reagáltatunk, és kívánt esetben bármely fentiek szerint nyert (I) általános képletű vegyületet savaddíciós sóvá alakítjuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelyek képletében W és Z jelentése hidrogénatom vagy fluoratom és Rj és -X-Y= jelentése az 1. igénypont szerinti, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás valamely következő vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sója előállítására:
3-(4-piridinil-amino)-1 H-indol
N-( 1 H-indol-3 -il)-N-(4-piridinil)-propánamid
3-(3-fluor-4-piridmil-amino)-1 H-indol
6-fluor-3-(4-piridinil-ammo)-benzo[b]tiofén vagy
6-fluor-3-(N-propil-4-piridinil-amino)-benzo[b]tiofén, azzal jellemezve, hogy a megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazzuk.
4. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, 1. igénypont szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületet vagy savaddíciós sóját - a képletben Rb -X-Y=, W és Z jelentése az 1. igénypont szerinti - gyógyszerészetileg elfogadható hordozó- és/vagy adalékanyaggal elkeveijük, és adagolásra alkalmas gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/688,964 US5177088A (en) | 1991-04-17 | 1991-04-17 | Substituted 3-(pyridinylamino)-indoles |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9201297D0 HU9201297D0 (en) | 1992-07-28 |
| HUT62572A HUT62572A (en) | 1993-05-28 |
| HU215113B true HU215113B (hu) | 1998-12-28 |
Family
ID=24766519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9201297A HU215113B (hu) | 1991-04-17 | 1992-04-16 | Eljárás szubsztituált 3-(piridinil-amino)-indol- és benzo[b]tiofén-származékok, és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5177088A (hu) |
| EP (1) | EP0509402B1 (hu) |
| JP (1) | JP2617650B2 (hu) |
| KR (1) | KR100254027B1 (hu) |
| AT (1) | ATE161840T1 (hu) |
| AU (1) | AU655253B2 (hu) |
| BG (1) | BG61034B1 (hu) |
| CA (1) | CA2066332C (hu) |
| CS (1) | CS117192A3 (hu) |
| DE (1) | DE69223837T2 (hu) |
| DK (1) | DK0509402T3 (hu) |
| ES (1) | ES2111580T3 (hu) |
| FI (1) | FI105096B (hu) |
| GR (1) | GR3026317T3 (hu) |
| HU (1) | HU215113B (hu) |
| IE (1) | IE921235A1 (hu) |
| IL (1) | IL101599A (hu) |
| MX (1) | MX9201759A (hu) |
| NO (1) | NO180486C (hu) |
| NZ (1) | NZ242359A (hu) |
| PL (1) | PL168905B1 (hu) |
| RO (1) | RO109847B1 (hu) |
| RU (1) | RU2060254C1 (hu) |
| TW (1) | TW200477B (hu) |
| ZA (1) | ZA922807B (hu) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5264442A (en) * | 1990-08-13 | 1993-11-23 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Incorporated | Carbamoyl-1-(pyridinylalkyl)-1H-indoles, indolines and related analogs |
| US5328920A (en) * | 1991-04-17 | 1994-07-12 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Incorporated | Substituted (pyridinylamino)-indoles |
| US5185350A (en) * | 1991-09-23 | 1993-02-09 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Incorporated | Substituted pyridinylamino-1h-indoles,1h-indazoles,2h-indazoles, benzo (b)thiophenes and 1,2-benzisothiazoles |
| US5356910A (en) * | 1993-07-19 | 1994-10-18 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. | Use of N-(pyridinyl)-1H-indol-1-amines for the treatment of obsessive-compulsive disorder |
| WO1996039397A1 (en) * | 1995-06-06 | 1996-12-12 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | Benzisoxazole and indazole derivatives as antipsychotic agents |
| US5668154A (en) * | 1995-06-06 | 1997-09-16 | Hoechst Marion Roussel Inc. | Pyridiniminyl-1,2-benzisoxazoles and -benzisothiazoles |
| CA2276203C (en) * | 1996-12-27 | 2003-07-22 | Hoechst Marion Roussel, Inc. | N-(pyridinylamino)isoindolines and related compounds |
| US7091199B1 (en) | 1999-09-14 | 2006-08-15 | Aventis Pharmaceuticals Inc. | Thienoisoxazole phenoxy unsubstituted ethyl and propyl derivatives useful as d4 antagonists |
| EE200200134A (et) * | 1999-09-14 | 2003-04-15 | Aventis Pharmaceuticals Inc. | D4 retseptori antagonistidena toimivad bensisoksasolüül-, püridoisoksasolüül- ja benstienüülfenoksüderivaadid |
| US7125903B1 (en) | 1999-09-14 | 2006-10-24 | Aventis Pharmaceuticals Inc. | Thienoisoxazolyl-and thienylpyrrazolyl-phenoxy substituted propyl derivatives useful as D4 antagonists |
| US7253165B2 (en) * | 1999-09-14 | 2007-08-07 | Aventis Pharmaceuticals Inc. | Benzisoxazolyl-, pyridoisoxazolyl-and benzthienyl-phenoxy derivatives useful as D4 antagonists |
| DE10029371A1 (de) | 2000-06-20 | 2002-01-03 | Merck Patent Gmbh | Heterocyclische Aminoalkylpyridinderivate als Psychopharmaka |
| GB0217920D0 (en) * | 2002-04-23 | 2002-09-11 | Aventis Pharm Prod Inc | Interleukin-4 Gene Expression inhibitors |
| BRPI0511722A (pt) | 2004-06-01 | 2008-01-08 | Hoffmann La Roche | 3-amino-1-arilpropilindóis como inibidores da recaptação de monoamina |
| BRPI0619263A2 (pt) | 2005-11-30 | 2011-09-27 | Hoffmann La Roche | indóis de 3-amino-1-arilpropila e indóis aza-substituìdos, métodos para prepará-los, composição farmacêutica e uso dos referidos indóis |
| RU2008120141A (ru) | 2005-11-30 | 2010-01-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) | 3-амино-2-арилпропилазаиндолы и их применения |
| EP2351737A1 (en) * | 2005-11-30 | 2011-08-03 | F. Hoffmann-La Roche AG | 3-Amino-1-arylpropyl indoles and aza-substituted indoles |
| KR101098583B1 (ko) * | 2008-01-04 | 2011-12-26 | 주식회사 엘지생명과학 | 세포, 조직 및 장기 보존 효과를 갖는 인돌 및 인다졸 유도체 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3166987D1 (en) * | 1980-09-18 | 1984-12-06 | Asahi Chemical Ind | 3-aminoindazole derivatives and process for preparation thereof |
| IE58370B1 (en) * | 1985-04-10 | 1993-09-08 | Lundbeck & Co As H | Indole derivatives |
| US4717658A (en) * | 1985-12-03 | 1988-01-05 | Miles Inc. | Gram negative bacteria screening method with horseshoe crab amebocyte lysate (LAL) |
| US4970218A (en) * | 1987-04-24 | 1990-11-13 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. | N-(pyridinyl)-1H-indol-1-amines |
| US4806554A (en) * | 1988-01-11 | 1989-02-21 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals, Inc. | Pyrazol and indazolpyridinamines |
| US4954502A (en) * | 1988-06-10 | 1990-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | 1-indolyalkyl-4-(substituted-pyridinyl)piperazines |
| DE69021645T2 (de) * | 1989-05-19 | 1996-02-22 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc., Somerville, N.J. | N-(aryloxyalkyl)heteroarylpiperidine und -heteroarylpiperazine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Medikamente. |
| US4983615A (en) * | 1989-06-28 | 1991-01-08 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Inc. | Heteroarylamino- and heteroaryloxypyridinamine compounds which are useful in treating skin disorders |
| US4954503A (en) * | 1989-09-11 | 1990-09-04 | Hoechst-Roussel Pharmaceuticals, Inc. | 3-(1-substituted-4-piperazinyl)-1H-indazoles |
| CA2030051C (en) * | 1989-11-17 | 2001-08-07 | Haruhiko Kikuchi | Indole derivatives |
-
1991
- 1991-04-17 US US07/688,964 patent/US5177088A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-04-09 DE DE69223837T patent/DE69223837T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-04-09 ES ES92106162T patent/ES2111580T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-04-09 BG BG96202A patent/BG61034B1/bg unknown
- 1992-04-09 AT AT92106162T patent/ATE161840T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-04-09 DK DK92106162T patent/DK0509402T3/da active
- 1992-04-09 EP EP92106162A patent/EP0509402B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-04-14 NZ NZ242359A patent/NZ242359A/en unknown
- 1992-04-14 MX MX9201759A patent/MX9201759A/es unknown
- 1992-04-14 RO RO92-200519A patent/RO109847B1/ro unknown
- 1992-04-15 PL PL92294239A patent/PL168905B1/pl unknown
- 1992-04-15 FI FI921693A patent/FI105096B/fi active
- 1992-04-15 NO NO921505A patent/NO180486C/no unknown
- 1992-04-15 IL IL10159992A patent/IL101599A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-04-16 RU SU925011369A patent/RU2060254C1/ru active
- 1992-04-16 CS CS921171A patent/CS117192A3/cs unknown
- 1992-04-16 CA CA002066332A patent/CA2066332C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-04-16 HU HU9201297A patent/HU215113B/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-04-16 KR KR1019920006338A patent/KR100254027B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-04-16 IE IE123592A patent/IE921235A1/en not_active IP Right Cessation
- 1992-04-16 JP JP4096304A patent/JP2617650B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-04-16 ZA ZA922807A patent/ZA922807B/xx unknown
- 1992-04-21 AU AU15121/92A patent/AU655253B2/en not_active Ceased
- 1992-04-24 TW TW081103218A patent/TW200477B/zh active
-
1998
- 1998-03-11 GR GR980400508T patent/GR3026317T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU215113B (hu) | Eljárás szubsztituált 3-(piridinil-amino)-indol- és benzo[b]tiofén-származékok, és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására | |
| TW418205B (en) | Sulphonamide derivatives having 5-HT6 receptor antagonist activity, their preparation and pharmaceutical composition containing the same | |
| JP3057109B2 (ja) | 新規インドール誘導体 | |
| KR0182791B1 (ko) | 위산분비억제방법 | |
| CZ284371B6 (cs) | Nové (R)-5-karbamoyl-8-fluor-3-N,N-disubstituované amino-3,4-dihydro-2H-1-benzopyrany | |
| EP1131321B1 (en) | Indole derivatives and their use as serotonin receptor ligands | |
| US6391891B1 (en) | Bicyclic compounds as ligands for 5-HT1 receptors | |
| CA2100812C (en) | Substituted aminothienopyridines, a process for their preparation and their use as medicaments | |
| US5328920A (en) | Substituted (pyridinylamino)-indoles | |
| JP4452501B2 (ja) | ４−（チオ−またはセレノキサンテン−９−イリデン）−ピペリジンまたはアクリジンの誘導体および選択的５−ｈｔ２ｂ受容体アンタゴニストとしてのその使用 | |
| WO1993021179A1 (en) | Novel amidoalkyl- and imidoalkyl-piperazines | |
| SK285893B6 (sk) | Derivát indolu, jeho použitie a farmaceutický prostriedok s jeho obsahom | |
| JP3495708B2 (ja) | ５−ｈｔ１ｄ受容体選択的アンタゴニストとしての光学活性３−［（２−ピペラジニルフェニル）メチル］−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−２−ピロリジノン化合物 | |
| NZ526018A (en) | 8'4-'3-(5-fluoro-1H-indol-3-YL)propyl!-1-piperazinyl!-2-methyl-2H-1,4-benzoxazin -3(4H)-one methanesulfonate with high affinity for the dopamine D2 receptor and the seotonin reuptake site | |
| JP2009545555A (ja) | 置換インダニルスルホンアミド化合物、それらの調製、および薬剤としての使用 | |
| US6022880A (en) | Substituted pyridylamino indoles | |
| JP2002088084A (ja) | ジアザビシクロオクタン誘導体およびそれらの治療的使用 | |
| HUP0301748A2 (hu) | A központi idegrendszer megbetegedésének kezelésére alkalmas indolszármazékok, ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és alkalmazásuk | |
| CA2327513A1 (en) | N-aryloxyethyl-indoly-alkylamines for the treatment of depression | |
| MXPA00009808A (en) | N-aryloxyethyl-indoly-alkylamines for the treatment of depression |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DGB9 | Succession in title of applicant |
Owner name: HOECHST MARION ROUSSEL INCORPORATED, US |
|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |