[go: up one dir, main page]

HU192452B - Process for producing heteropolisaccharides - Google Patents

Process for producing heteropolisaccharides Download PDF

Info

Publication number
HU192452B
HU192452B HU843586A HU358684A HU192452B HU 192452 B HU192452 B HU 192452B HU 843586 A HU843586 A HU 843586A HU 358684 A HU358684 A HU 358684A HU 192452 B HU192452 B HU 192452B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
ncib
polysaccharide
glucose
medium
production
Prior art date
Application number
HU843586A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT36862A (en
Inventor
John D Linton
Andrew R Godley
Michael W Evans
Original Assignee
Shell Int Research
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shell Int Research filed Critical Shell Int Research
Publication of HUT36862A publication Critical patent/HUT36862A/hu
Publication of HU192452B publication Critical patent/HU192452B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K8/00—Compositions for drilling of boreholes or wells; Compositions for treating boreholes or wells, e.g. for completion or for remedial operations
    • C09K8/60—Compositions for stimulating production by acting on the underground formation
    • C09K8/84—Compositions based on water or polar solvents
    • C09K8/86—Compositions based on water or polar solvents containing organic compounds
    • C09K8/88—Compositions based on water or polar solvents containing organic compounds macromolecular compounds
    • C09K8/90—Compositions based on water or polar solvents containing organic compounds macromolecular compounds of natural origin, e.g. polysaccharides, cellulose
    • C09K8/905—Biopolymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K8/00—Compositions for drilling of boreholes or wells; Compositions for treating boreholes or wells, e.g. for completion or for remedial operations
    • C09K8/02—Well-drilling compositions
    • C09K8/04—Aqueous well-drilling compositions
    • C09K8/14—Clay-containing compositions
    • C09K8/18—Clay-containing compositions characterised by the organic compounds
    • C09K8/20—Natural organic compounds or derivatives thereof, e.g. polysaccharides or lignin derivatives
    • C09K8/206—Derivatives of other natural products, e.g. cellulose, starch, sugars
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/824—Achromobacter
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S507/00—Earth boring, well treating, and oil field chemistry
    • Y10S507/925—Completion or workover fluid
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S507/00—Earth boring, well treating, and oil field chemistry
    • Y10S507/935—Enhanced oil recovery
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S507/00—Earth boring, well treating, and oil field chemistry
    • Y10S507/935—Enhanced oil recovery
    • Y10S507/936—Flooding the formation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

A találmány tárgya heteropoliszacharidok előállítása sarjadzó baktériumokkal való fermentációs eljárással.
Ismeretes, hogy heteropoliszacharidok előállíthatok szénhidrátforrásokon megfelelő mikroorganizmusok tenyésztésével. A 81 200 479.4 számú európai szabadalmi bejelentésben például Pseudomonas sp. NCIB 11 592 alkalmazását ismertetik ilyen célra.
Űj, Gram-negatív sarjadzó baktériumot izoláltunk és a National Collection of Industrial Bacteria, Torry Research Station, Aberdeen deponálóhelyen 11 883. számon letétbe helyeztük. A Pseudomonas sp. NCIB 11 592 megjelölésű mikroorganizmushoz képest az NCIB 11 883 poliszacharid termelése sokkal gyorsabbnak tűnik.
Ezen kívül az NCIB 11 883 törzs termelékenysége — a viszkozitást növelő hatásban megadva — lényegesen magasabb, mint a Pseudomónas sp. NCIB 11 592 törzsé. A viszkozitást növelő hatást azzal a hígítási faktorral fejezzük ki, amely hígítás alkalmazásával a fermentlé 30 °C-on, 15%-os sókoncentrációban, 7,5 sec1 nyíróhatás mellett 2-10~2Pas viszkozitású.
A találmány tárgya az előzőekben ismertetettek alapján heteropoliszacharidok előállítására szolgáló eljárás, melyben NCIB 11 883 törzset tenyésztünk asszimilálható szénhidrát- és nitrogénforrást tartalmazó vizes táptalajon levegőztetve, majd a kapott heteropoliszacharidot kinyerjük. Az eljárást végezhetjük szakaszos rendszerben, utántáplálásos rendszerben, melynél tetszés szerint tápanyag utántöltést és/vagy termékelvonást végzünk, vagy folyamatos rendszerben. A termelékenységet figyelembe véve a folyamatos eljárás vagy az utántöltéses — elvonásos eljárás az előnyös. A mikroorganizmust előnyösen élesztőkivonat nélkül, kémiailag definiált táptalajban tenyésztjük. Adott termelékenység vagy adott végső sejtkoncentráció elérése érdekében könnyebben kezelhető az olyan nitrogénforrás, mint például a nátrium-glutamát, az ammónium- vagy a nitrátsók, mint a komplex nitrogénforrások, például az élesztőkivonat vagy a desztillálóberendezések szárított oldható maradékanyagai. Nitrogénforrásként előnyösen nátrium-glutamátot, ammónium-szulfátot vagy nátrium-nitrátot alkalmazunk. A találmány szerinti eljárással előállított heteropoliszacharidok alkalmazhatók vizes oldatok viszkozitásának módosítására.
A vizes rendszer előnyösen a kiegészítő, átdolgozó, hatásfokozó vagy fúrőfolyadékok körébe tartozik. A fúrófolyadék a gáz- vagy olajkutak fúrásánál alkalmazott fúrófej sikosítására szolgál. A kiegészítő, átdolgozó és hatásfokozó folyadékokat az olaj- és gáztartalmú kőzetrétegekbe injektáljuk be az olaj- és gázkeringés fokozására. A hatásfokozó folyadékokat például rétegrepesztéses roncsolásnál és savas roncsolásnál alkalmazzák. A legtöbb kiegészítő, átdolgozó, fúró- és hatásfokozó folyadék legalább még egy adalékanyagot, például sót, a folyadékveszteségre ható adalékanyagot, iszapstabilizáló anyagot, savakat, bázisokat, felületaktív anyagokat stb. tartalmaz. A sűrítendő vizes rendszer lehet azonban nyomdafesték vagy a „francia öntet” elnevezésű salátaöntet is.
A találmány szerint előállított heteropoliszacharid egyik előnyös alkalmazási lehetősége a vizet és 0,06—1,5 t% a találmány szerint előállított heteropoliszacharidot tartalmazó fúrófolyadék. Ugyancsak előnyös alkalmazási terület az olyan kútkezelési eljárás is, melynek során a kútba vizes közeget, azaz vizet és 0,05—1,5 t% találmány szerint előállított heteropoliszacharidot vezetünk. A vizes közeg célszerűen sóoldat vagy más folyadék, kívánt esetben adalékanyagokat is tartalmazhat. A találmány szerint előállított heteropoliszacharid vizes oldata olaj fokozott kinyerésének elősegítésére is alkalmazható. A fokozott olajkinyerés érdekében történő felhasználás történhet a fenti heteropoliszacharid oldatnak a kútban levő folyadék helyettesítésére való .alkalmazásával és/vagy egy a kúttal kapcsolatban levő permeábilis felület alatti képződménybe való bevezetésével, mozgékonyságvizsgálatokban mozgékonysági pufferként, például felületaktív micelláris elárasztásnál, profil kontrolihoz, a víztermelés csökkentésére, a víz : olaj arány csökkentésére stb.
A találmány szerinti eljárásban alkalmazott NCIB 11 883 törzs egy szokatlan Gram-negatív sarjadzó baktérium, amely — úgy tűnik — nem illeszthető könnyen egy ismert taxonómiai csoportba sem. A mikroorganizmus jellemzését és azonosítását a „National Collection of Industrial Bacteria” végezte.
Az NCIB 11 883 törzs jellemzése és azonosítása.
A vizsgálatokat 30 °C hőmérsékleten végeztük, az ettől eltérő hőmérsékletet külön jelöltük.
Sejtmorfológia.
Rövid pálcák, párhuzamos oldalúak vagy enyhén kúposak, egyenesek vagy enyhén hajlottak vagy görbültek. Bipoláris fázis — az öregebb tenyészetekben sötét területek (Oxoid CM55, 30°, 8 nap). Elágazó flagellumok, EM rácson a sejtek csomósodása.
Telepmorfológia
Oxoid CM55 48 óra, piszkosfehér, áttetszőtől félig átlátszatlan, ép szélű, lekerekített, sima és fényes, 1 mm, a telepek enyhén nyálkásak, amíg glukóz tartalmú táptalajon több poliszacharid nem képződik.
Oxoid CM55 telepméret: 24 óra, 0,2 mm; 38 óra, 1,5 mm.
Oxoid CM3 + 1,0% glukóz, 60 óra: jó növekedés, piszkosfehér, kerek, a szélek kissé szabálytalanok, sima, fényes, nyálkás, 2,5—3 mm.
192 452
1. táblázat
Szénforrások hasznosítása. A felsorolt vegyületek a Pseudomonas vizsgálatra Bergey (Manual of Determinative Bacteriology, 1974) és R. Y. Stainer és munkatársai
[J. Gén. Microbiol. 43, 159 (1966)] munkáiban megadottak.
NCIB 11883 NCIB 11 883
CSU™ csu csu Sav CSU CSU CSU Sav
Cluster 1<3> NCIB™ O-F(2) Cluster 1 NCIB™ O-F
9439 9439
9440 9440
Szénhidrátok és cukorszármazékok Alkohol
D-Ritoóz + Metanol* —
D-Xilóz + + + + Etanol — — +
L-Arabinóz ± + + nyomnyi Geraniol — —d
L-Rhamnóz + — +
L-Glukóz + + + gyenge + Nem nitrogéntartalmú aromás és más
D-Fruktóz + + + gyenge + gyűrűs vegyületek
Szacharóz + — + + m-hidroxi-
Trehalóz + — + nyomnyi -benzoát p-hidroxi- — —
Cellobióz + — + + -benzoit + — -—
2-ketoglukonát Szacharát Tesztoszteron
Galaktóz + + + nyomnyi
Mannóz* + nyomnyi
Laktóz* + gyenge -f-
Maltóz* d + gyenge +
Melibióz* nyomnyi
Zsírsavak Alifás aminosavak
Acetát + + /J-Alanin + +(1-) +
Propionát +d — + L-Valin + — —
Butirát + L-Arginin* L-Metionin* + +(DL-) +
Dikarbonsavak Gyűrűs aminosavak
Malonát — Hisztidin ± +(L-) +
L-Triptofán* —
Antranilát* —
Hidroxisavak Aminok
D (—)-Tartarát Benzil-amin _
mezo-Tartarát — Triptamin — —
DL-d-Hidroxi-butirát — a-Amil-amin — d—
DL-Laktát + + +
Glikolát —
Egyéb szerves savak Egyéb nitrogéntartalmú vegyületek
Levulinát dD — Bétáin + +
Citrakonát — Pantotenát
Mezakonát —
192 452
í. táblázat (folytatás)
NCIB 11 883 NCIB 11 883
CSU<« CSU CSU Sav CSU CSU CSU Sav
Cluster 1«> NCIB(4> O-F(2> Cluster 1 NCIB(4! O-F
9439 9439
9440 9440
Cukor polialkoholok és glikolok
Eritrit — —
Szorbit + + mezo-Inozit 4 4~
Adonit — +
Propilén-glikol — —
2,3-Butilén-glikol — +
4- gyenge + + + (1) CSU = Szénforrás hasznosítása (Növekedés egye dűli szénforráson) (2) Sav O-F = Savtermelés O-F táptalajon.
(3) Green, P. N. és Boiusfield, Y. J. (J. Gén. Microbiol 128 623—638) közleményében ismertetett törzs.
Cukor polialkoholok Policukorálkoholok és glikolok
D-Mannit* Glicerin 4- 4- + 4- 4- 4- (nyomnyi?) (nyomnyi?)
* Hozzáadott vegyület
* DL — helyett (4) Az NCIB 9439 Mycoplana dimorpha és az NCIB 9440 M. bullata szénforrás-hasznosítási eredményeit Green P. N. 1981 és Green és Bousfield 1982 eredményeiből vettük (d = kétséges eredmény). Hasonlóképpen cluster 1 esetén a + jelölés különböző törzsek esetén eltérő eredményt jelöl.
Izolátum NCIB 11 883 40 Izolátum NCIB 11 883
°C inkubálás 30° °C inkubálás 30°
Piocianin Lakmusz tej barna (redukált?)
Fluoreszcenc — 45 részben peptonizált
L-Arg CSU 4- (kétséges eredmény) 28
Bétáin CSU
Gáz, glukóz
-}- (összefüggő lepedék)
Glukóz CSU ONPG
Laktát CSU 4~ (nincs lepedék) 50 Arg. Moller —
Acetát CSU — (nincs lepedék) Lys, Moller —
Érzékenység (1 nap) Orn Moller —
Penicillin G 4 pg NO3 — NO-2 —
Sztreptomicin 25 pg gyenge 4- 55 NO3 — N2Gáz 4-
Kloramfenikol Tetraciklin 50 pg 4~ 25 pg +4~+ maradék NO3 — DNA-áz —
Szűrt gél 20° — 28
Novobiocin 5 pg 4- Géllemez — 7
Polimixin B 25 pg gyenge + 60 Kazeinlemez — 7
0/129 Léván Keményítölemez — 7
Lecitin-tojás sárgája lemez — 7
Növekedés faktor igény — Lipáz-tojás sárgája lemez — 7
Ureáz Christiansen 4- 65 nh3 4- 7
182 452
Izolátum NCIB 11 883
°C inkubálás 30°
Indol — 7
H2S (TSI) — 7
Ölom-acetáitos papír gyenge + 7
MR — 7
VP — 7
Arg Thornley — 7
CM3, növekedés °C-on (léginkubátorok,
kivéve 4 °C-on)
5° —
30° +
37° +
CM1 (vízfürdő)
41° gyenge +
45° —*
CM3, pH beállítása, növekedés pH-n
3
5 3 —
7,2 3 —
β 3 --
9 3 --
10 3 --
Szaporodás NaCl-bán
2% 3 +
2% 3 +
4% 3 +
5%
3-ketolaktóz-termelés -
(De Ley-módszer)
Irodalmi hivatkozások:
1. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 8th edn. (1974). (R. E. Buchanan and Ν. E. Gibbons, eds.). Baltimore: Williams and Wilkins.
2. Cowan, S. J. and Steel, K. J. (1974). Manual fór the Identification of Medical Baoteria Cambridge University Press.
A kiválasztott táptalajok és módszerek CM1 Oxoid CM1 táptalaj;
CM3 Oxoid CM3 tápagar;
CM55 Oxoid CM55 véres agar;
mindhárom az Oxoid Ltd., Wade Rd., Basingstoke, Hants, Nagy-Britannia terméke.
Palleroni és Doudoroff 1972 módosított ásványi alaptáp (PD) (A. Rév. Phytopathol 10, 73)
Na2HPO4 · 12H2O 6,0 g
KH2PO4 2,4 g
NH4C1 1,0 g
MgSO4 -7H2O 0,5 g
FeCl3-6H2O 0,01 g
CaCl2-6H2O 0,01 g
Ionmentes víz 1 liter
pH 6,8 Ezt az alaptáptalajt használtuk a szénforrás
hasznosításának vizsgálatánál.
PD ásványi alaptáp + 0,1% sterilre szűrt glil-
köz (P.D.G.) Szűri zselatin Oxoid No2. táptalaj 2,5%
Zselatin (Difco) 12,0%
ZseZafinZemezeZc Oxoid CM3 tápagar 2,8%
Zselatin 1,0%
Tejes lemezek Sovány tej (Difco) külön sterilezve 3 %
Pepton (Difco) 0,1%
Marhahúskivonat Lalb-Lemco 0,1%
NaCl 0,5%
Agar 1,5%
pH 7,4 autoklávban történő sterilezés előtt.
Növekedés só jelenlétében
2, 3, 4 és 5% NaCl tartalmú alaptáptalajt készítünk Hayward és Hodgkiss (1961) eljárása szerint. A tenyészeteket inkubáljuk.
Növekedési faktor vizsgálata
Üvegben desztillált vízzel készített PDG táptalajt egyenes drótszállal beoltva három tenyészetet készítünk. Ha körülbelül 4 nap alatt megfelelő növekedést észleltünk, az azt jelentette, hogy nincs abszolút növekedési faktor igény.
Szénforrás hasznosítása
0,1% sterilre szűrt kizárólagosan használt szénforrást tartalmazó PD táptalajt beoltunk, és a tenyészetet 14 napig inkubáljuk.
Savtermelés szénhidrátból
Hayward és Hodgkiss (1961) oxidációs-fermentációs táptalaját (O-F) 1% sterilre szűrt szénforrással egészítjük ki. A csöveket beoltjuk és 14 napig inkubáljuk.
A National Collection of Industrial Bacteria arra a következtetésre jutott, hogy az NCIB 11 883 a patogenitástól függően A. radiobacter vagy A. tumefaciens törzsnek tekinthető. Az izolátum atipusos, mivel nincs 3-ketolaktóz termelés.
A találmányt a továbbiakban példákkal világítjuk meg.
1. példa
Az NCIB 11 883 sarjadzó baktérium poliszacharid termelése
A poliszacharid termelés kimutatása az aktív
szaporodási szakaszban történik.
Táptalaj-összetétel g/1
(A) (NH4)2-SO4 0,75 g
kh2po4 0,75 g
(B) MgSO4 -7H2O 0,4 g
FeSO4 1 mol/l-es oldat 0,05 ml
CaCl2-2H2O 0,012 ml
IPP nyomelem oldat 2,5 ml 5
192 452
(C) Glukóz 20 g H3BO3 0,06 mg/1
IPP nyomelem törzsoldat g/1 (NaH4)2SO4 0,79 g/1
CuSO4 · 5H2O 0,249 g CaCl2-2H2O 7,05 mg/1
MnSO4-4H2Ö 0,223 g CuSO4-5H2O 0,25 mg/1
ZnSO4 · 7H2O 0,287 g 5 CoCl2-6H2O 0,23 mg/1
CoC12-6H2O 0,118 g KI 0,16 mg/1
H3BO3 0,030 g FeSO4-7H2O 14,0 mg/1
Na2MoO4 · 2H2O 0,124 g Glukóz 25 g/1
KI 0,083 g
Az A, B és C táptalajkomponenseket külön 10 sterilezzük és lehűlés után elegyítjük.
3,2 1 fenti táptalajt tartalmazó Bioteic fermentort 10% NCIB 11 833 inokulummal oltunk be, melyet előzőleg pH 6,8-on, MOD-D2 táptalajon rázott tenyészetben rotációs rázógépen 30 °C-on 15 24 órán át tenyésztettünk.
Az MOD-D2 táptalaj összetétele (pH 6,8)
Vegyületkoncentráció 1_1
(glukóz a megjelölés szerint)
(NH4)2SO4 3,0 g
Na2HPO4 3,0 g
KH2PO4 3,0 g
MgSO4 7H2O 0,2 g
FeSO4 63,2 mg
CaCl2 2H2O 1,33 mg
ZnSO4-7H2O 0,36 mg
CuSO4-5H2O 0,32 mg
MnSO4-4H2O 0,30 mg
CoCl2-6H2O 0,36 mg
h3bo4 0,20 mg
Na2MoO4 2H2O 0,60 mg
Oxoid tisztított agar
L28 15,0 g
A fermentáció során a fermentor hőmérsék- 35 letét 30 °C-on, a pH-t 6,8 értéken tartjuk, 1000 rpm keverést biztosítunk két 6 lapátos Rushtonkeverővel és folyamatos levegőztetést végzünk 1000 ml/perc levegőmennyiséggel. Extracelluláris poliszacharid termelés folyt az NCIB 11 883 40 törzs exponenciális szaporodása közben. Úgy tűnik, ez az organizmus két fázisban termel polimert; a szaporodás alatt és a szaporodás megszűnte után is.
A szaporodás megszűnése előtt 2,5 g/1 (a táp- 45 talajra vonatkozóan) biopolimer keletkezett 2,5 g/1 (táptalajra vonatkozó) sejtsűrűség mellett, 12 óra fermentálás alatt. A szaporodás megszűnése után a végső hozam 6,5 g/1 2,5 g mikroorganizmus/1 sejtsűrűség mellett (táptalajra vonatko- 50 zóan) 45 óra teljes fermentációs idő alatt.
2. példa
NCIB 11 883 és Pseudomonas NCIB 11 592 törzsek heteropoliszacharid termelése kinetikájának összehasonlítása 30 °C-on és 37 °C-on végzett szakaszos fermentáció esetén a szaporodás megszűnése után.
Táptalaj KH2PO4 MgSO4-7H2O MnSO4-4H2O ZnSO4-7H2O Na2MoO4-2H2O
0,68 g/1
0,49 g/1
0,44 mg/1 0,57 mg/1 0,24 mg/1
A fenti táptalajt úgy állítottuk össze, hogy a nitrogénforrás 1,6 g/1 körüli sejtsűrűség elérésekor kimerüljön. Ezért ha ezt a sejtsűrűséget elérjük, további szaporodás már nincs, de a polimertermelés tovább folytatódik.
Biotec fermentorban levő 2,5 1 fenti táptalajt 6% NCIB 11883 vagy Pseudomonas NCIB 11 592 inokulummal oltunk be, amelyeket 16 órán át 30 °C-on vagy 37 °C-on tenyésztettünk. A fermentort 600 fordulat/perc levegővel levegőztetjük és a keverő fordulatszámát 500 fordulat/perc állandó értéken tartjuk. A keverést két, egyenként 6 lapátos Rushton-keverővel végezzük.
Az NCIB 11 883 törzs alkalmazása esetén a fajlagos polimertermelési sebességet 30 °C-on 0,137 g/g, óra, 37 °C-on 0,13 g/g, óra értékűnek találtuk, míg a Pseudomonas NCIB 11 592 törzsnél 0,066 g/g, óra maximális fajlagos polimertermelési sebességet észleltünk. Ami még fontosabb — mint azt az előzőekben már említettük — a termelékenység a higitási faktorral kifejezett viszkozitásnövelő képességben megadva az NCIB 11 883 törzs alkalmazásakor lényegesen magasabb. Az 1. ábrán látható, hogy 1,6 g/1 összehasonlító sejtsűrűség mellett a fermentlé 25-ös higitási faktorú állapotának eléréséhez Pseudomonas 11 592 törzs alkalmazásakor 160 óra, NCIB 11 883 törzs 30 °C-on való tenyésztése esetén 80 óra, NCIB 11 883 törzs 37 °C-on való tenyésztése esetén 35 óra fermentációs idő szükséges.
A poliszacharid hozamot és a polimertermelés termelékenységét Pseudomonas NCIB 11 592 és NCIB 11 883 törzsek alkalmazása esetén az 1. táblázatban ismertetjük:
1. táblázat
Mikro- organizmus glukózon Terme- lékeny- ség (g polimer/1, óra) Terme- lékeny- ség (higitási sebesség h-i) Polimer- hozam g/g
Pseudomonas
NCIB 11 592 0,064 0,156 0,43
NCIB 11 883,
30 °C 0,15 0,31 0,57
NCIB 11 883,
37 °C 0,14 0,71 0,52
A szakaszos tenyésztéssel 30 és 37 °C-on termelt extracelluláris poliszacharid jellemzőit a
2. táblázatban adjuk meg.
192 452
2. táblázat
Sóoldat %* Hőmérséklet °C NCIB NCIB 11 883 11 883 30 °C, 37 °C, szakaszos szakaszos tenyésztés tenyésztés 15 15 15 15 30 60 30 60
1 g/l konc.-jú oldat viszkozitása, (Pa.s) 7,5 s-1-nál 1 g/l konc.-jú oldat viszkozitása, (Pa.s) 23 s-1-nál 6,1-10-2 5,1-.10-2 15,0.10-2 14,5.10-2 3,2.10-2 2,7,10-2 6,0-10-2 5,8.10-2
Hígftási faktor (2.10-2 Pa.s) 26,5 18,5 55 43 * 15% NaCl + 1,5% CaCl2
A pseudomonas NCIB 11 592 törzzsel 30 °Con, szakaszos tenyésztéssel nyert polimer jellemzőit a 3. táblázatban ismertetjük.
3. táblázat
Sóoldat % 15 15
Hőmérséklet °C 30 60 g/l konc.-jú oldat viszkozitása (Pa.s) 7,5s-1-nál 7,9.10-2 5,5.10-2 23 s-1-nál 4,1.10-2 3,2.10-2
Hígítási faktor (2.10-2 Pa.s) 24,5 17,5
3. példa
Poliszacharid termelés exponenciális utántáplálásos tenyésztéssel
A táptalajt úgy állítjuk össze, hogy 1,2 g/l NCIB 11 883 sejttömeg létrehozására legyen elegendő. Ennek az értéknek eléréséig a mikroorganizmus maximális sebességgel szaporodik (0,31 óra-1). A szaporodást ezt követően az exponenciálisan betáplált ammónium-szulfáttal szabályozzuk, úgy, hogy a mikroorganizmus szaporodási sebessége az előre meghatározott értéknek megfelelő legyen. A táp exponenciális betáplálást komputerrel szabályozzuk.
Táptalaj g/l (A) (NH4)2SO4 0,6 g
KH2PO4 0,75 g (B) MgSO4-7H2O 0,4 g
FeSO4-l mol/1 0,05 ml
CaCl2-2H2O 0,012 g
IPP nyomelem oldat 2,5 ml (C) Glukóz 20 g
Az A, B és C táptalajkomponenseket autóklávban külön-külön sterilezzük, majd lehűlés után elegyítjük. Biotec fermentorban 2,5 1 fenti táptalajt 10% NCIB 11 883 inokulummal beoltunk, az inokulumot MOD-D2 táptalajon 30 °C-oa, pH 6,8-on, 24 órás rázott tenyészetben készítjük. A szaporodás exponenciálisan, maximális szaporodási sebességgel folyik körülbelül 1,2 g/l száraz sejttömeg eléréséig. A fermentorban az ammóniaszintet ellenőrizzük, és az ammónium-szulfát exponenciális betáplálását 20 ppm alatti szintnél megkezdjük. A betáplálás sebességét úgy szabályozzuk, hogy az exponenciális szaporodási sebesség 0,064 óra-1 értékű legyen. A fermentlé 10 g/l extracelluláris poliszacharid tartalmának eléréséhez körülbelül 28 óra fermentációs idő szükséges. A fajlagos polimertermelési sebesség 0,12 g/g, óra. Az átlagos termelékenység 0,35 g poliszacharid/1.
4. példa
Folyamatos poliszacharid termelés NCIB 11 883 törzzsel
A táptalaj azonos az 1. példában megadottal.
Szaporodási körülmények:
Az NCIB 1,1 883 törzset nitrogén korlátozással
3,1 1 hasznos térfogatú Biotec fermentorban tenyésztjük. A hőmérsékletet 30 °C-on tartjuk, a pH-t 2 n nátrium-hidroxid és 2 n kálium-hidroxid adagolásával 6,8 értéken tartjuk. A fermentorba 1 1/perc mennyiségű levegőt engedünk és 2 db 6—6 lapátos Rushton-keverővel 1000 fordulat/perc. fordulatszámmal keverjük. A mikrodtganizmust különböző szaporodási sebességekkel tenyésztjük, és megfigyeljük a polimerképsiődés kinetikáját.
A Pseudomonas 11 592 és az NCIB 11 883 törzsek poliszacharid termelésének sebességét a 2. ábrán hasonlítjuk össze. Az NCIB 11 883 törzs fajlagos poliszacharid termelési sebessége 2—3szor nagyobb, mint a Pseudomonas 11 592 törzsé. Ezen túlmenően — mint az a 4. táblázatban látható — az NCIB 11 883 törzs 1 g elfogyasztott glukózra, illetőleg elfogyasztott oxigénre vonatkoztatott poliszacharid termelése is jelentősen magasabb, mint a Pseudomonas 11 592 törzsé.
A 4. táblázatban korlátozott nitrogénforrás mellett, egyensúlyi állandósult állapotban fennálló, a glukózra, illetve oxigénre vonatkoztatott poliszacharid hozam, sejttömeg és szén-anyagcsere adatokat összegezzük.
192 452
4. táblázat
A poliszacharid termelés hozamának és sebességének összegzése a nitrogénben korlátozott NCIB 11 883 tenyészet szaporodási sebességének függvényében.
A tenyésztés hőmérséklete 30 °C, pH 6,8
Higítási sebesség (D) (h_1)
Glukózra vonatkoztatott poliszacharid hozam (g száraz tömeg/g glukóz)
Glukózra vonatkoztatott sejttömeg (g száraz tömeg/g glukóz)
Oxigénre vonatkoztatott polimer hozam (g száraz tömeg/g O2)
Oxigénre vonatkoztatott sejttömeg (g száraz tömeg/g O2)
Glukóz fogyasztás sebessége (g/g száraz tömeg, óra)
Polimer képződés sebessége (g/g nyers fehérje, óra)
Szén visszanyerése
Bevitel
Sejtek széntartalma
Polimer széntartalma
Egyéb oldható szén CO2-ban levő szén
Visszanyerés
Polimer konc. — direkt száraz tömeg IPA*-val kicsapott száraz tömeg ” IPA = izopropil-alkohol.
A Korlátozott nitrogéntartalom mellett folyamatos tenyészetben a Pseudomonas NCIB 11 592 és az NCIB 11 883 törzzsel nyert maximális po-
0,034 0,047 0,080 0,137
0,519 0,ö0 0,55 0,287
0,068 0,096 0,12 0,18
1,6 3,2 2,19 1,6
0,22 0,53 0,68 0.95
0,35 0,49 0,62 0,76
0,205 0,30 0,24t 0,21
0,459 0,62 0,52
100 100 100 100
8,8 10,5 14,02 19,7
48,7 62,4 44,0 33,5
31.6 7,35 22,9 33
18.8 17,0 15,75 10,78
— 97,25 96,6 —
9,17 9,84 (9,41) 4,77 2,58
8,52 9,41 5,37 2,50
liszacharid hozamokat és poliszacharid termelési sebességeket az 5. táblázatban összegezzük.
5. táblázat
A Pseudomonas NCIB 11 592 és az NCIB 11883 törzsek folyamatos tenyészetben, 30 °C-on, pH 6,8 paraméterek mellett kapott poliszacharid hozamának és polisza termelési sebességének összehasonlítása.
Maximumérték
Paraméter Egység NCIB il 5S2 NCIB 11 883
D (óra'J)-nál D 'óra'5)-nál
A termelés fajlagos sebessége Térfogategységre jutó polimer termelés [g/g száraz tömeg, óra] [g/1, óra] 0,09 0,13 G,Ü4 0/33 0,30 0,46 0,047 0,047
Glukózra jutó polimer hozam [g/g glukóz] 0,4 0,02 0,60 0.047
Oxigénre jutó polimer hozam [g/g o2_] 0,92 0 03 3,2 0,047
Polimer : sejt arány [g/g száraz baktériumtömeg] 5,0 0,017 6,3 0,047
[g/g sejtfehérje] 6,2 0,020 12,8 0,047
Az NCIB 11 883 törzs D == 0,031 óra-1, 30 °C, tos t’?nréTtésé’re'! ny<»rt, poliszacharid jellemzőit pH = 6,8 paraméterek mellett végzett folyama- a 6. táblázatban mustjuk be.
192 452
6. táblázat
Sóoldat (%) Hőmérséklet (°C)
15 3 3 0
60 30 60 30 g/l-es oldat viszkozitása (Pa.s) 7,5 s-1-nál 1 g/l-es oldat viszkozitása (Pa.s) 23 s_1-nál Hígítási faktor (2.10'2 Pa.s) 7,5 s-1-nál Hígítási faktor [P]dw (R faktor)
Szűrés 5 μΜ -f- PF*
Szekvencia 1,2 μΝΙ
Idő 200 ml-re 0,8 μΜ * Előszűrés.
A folyamatos tenyésztéssel, NCIB 11883 törzzsel (D — 0,05 h'1, 37 °C, pH 6,8) nyert po7. táblázat
Sóoldat (%) 0 3 15
Hőmérséklet (°C) 30 30 30
1 g/1 oldat viszkozitása
(Pa. s) 7,5 s*1-nál 135 138 130
1 g/1 oldat viszkozitása
(Pa. s) 23 s_1-nál 56 58 54
All 883 törzzsel termelt poliszacharid kémiai elemzésének eredményeit a 8. táblázatban is- 35 mertetjük.
8. táblázat
Glukóz : Galaktóz 5:1—10:1
Piroszőlősav % 1,9— 5,5 40
Borostyánkősav % 2,4—10,1
Egyéb azonos! tatlan savak is vannak jelen, acetátot nyomokban kimutattunk.
11,0.10-2 9,6.10-2 9,0—10-2 7,0—10-2 8,4.10-2
5,0.10-2 4,5.10-2 4,2.10-2 3,5.10-2 3,8.10-2
16,5 4,9 5,5 3,9 5,6
2,83 2,13 2,39 1,70 2,43
16,5 14,2 11,4 11,6 7,5
37,5 39 20,7 17,5 15,5
39,0 42,5 40 58,1 15,2
liszacharid jellemzőit a 7. táblázatban ismertet-

Claims (3)

1. Eljárás heteropoliszacharidok előállítására, azzal jellemezve, hogy NCIB 11 883 tör30 zset tenyésztünk asszimilálható szénhidrátot és nitrogénforrást tartalmazó vizes táptalajon, előnyösen 0,635—0,8 g asszimilálható nitrogén/100 g szénhidráttartalmú táptalajon, levegőztetett tenyészetben, és a kapott heteropoliszacharidot ismert módon kinyerjük.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy folyamatos vagy utántáplálásos tenyésztést végzünk.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy nitrogénforrásként nátrium-glutamátot, ammónium-szulfátot vagy nátrium-nitrátot alkalmazunk.
HU843586A 1983-09-22 1984-09-21 Process for producing heteropolisaccharides HU192452B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB838325445A GB8325445D0 (en) 1983-09-22 1983-09-22 Preparing succinoglucan type of heteropolysaccharide

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT36862A HUT36862A (en) 1985-10-28
HU192452B true HU192452B (en) 1987-06-29

Family

ID=10549175

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU843586A HU192452B (en) 1983-09-22 1984-09-21 Process for producing heteropolisaccharides

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4634667A (hu)
EP (1) EP0138255B1 (hu)
JP (1) JPH0642835B2 (hu)
KR (1) KR850002286A (hu)
AT (1) ATE60805T1 (hu)
AU (2) AU3332984A (hu)
BR (1) BR8404723A (hu)
CA (1) CA1232559A (hu)
DE (1) DE3484086D1 (hu)
DK (1) DK450684A (hu)
EG (1) EG17982A (hu)
FI (1) FI79553C (hu)
GB (1) GB8325445D0 (hu)
HU (1) HU192452B (hu)
IE (1) IE58039B1 (hu)
IL (1) IL73009A (hu)
MX (1) MX7669E (hu)
NO (1) NO160721C (hu)
NZ (1) NZ209614A (hu)
RO (1) RO89835A (hu)
ZA (1) ZA847394B (hu)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8514315D0 (en) * 1985-06-06 1985-07-10 Shell Int Research Preparation of aqueous solution
GB8622032D0 (en) * 1986-09-12 1986-10-22 Shell Int Research Aqueous polysaccharide compositions
GB8811365D0 (en) * 1988-05-13 1988-06-15 Shell Int Research Process for preparing heteropolysaccharide & microorganisms for use in such process
FR2634219B1 (fr) * 1988-07-13 1992-04-24 Rhone Poulenc Chimie Nouvel heteropolysaccharide bm07, procede permettant son obtention et son application dans divers types d'industries
US5236046A (en) * 1988-10-17 1993-08-17 Texaco Inc. Heteropolysaccharide preparation and use thereof as a mobility control agent in enhanced oil recovery
US5153320A (en) * 1989-07-25 1992-10-06 Pfizer Inc. Heteropolysaccharide 105-4
US5252483A (en) * 1990-04-11 1993-10-12 Genencor International, Inc. Degradation of ferric chelates by a pure culture of agrobacterium sp.
US5368099A (en) * 1992-11-04 1994-11-29 Phillips Petroleum Company Injection of dextrins for subterranean microbial processes
JP3453192B2 (ja) * 1994-06-01 2003-10-06 テイカ株式会社 新規多糖類、その製造方法、新規多糖類の用途およびアグロバクテリウム・ラディオバクターｔｎｍ２株
US5881826A (en) 1997-02-13 1999-03-16 Actisystems, Inc. Aphron-containing well drilling and servicing fluids
FR2784395B1 (fr) 1998-10-13 2002-12-27 Rhodia Chimie Sa Heteropolysaccharide produit par un agrobacterium radiobacter
US8287210B2 (en) 2010-11-17 2012-10-16 Amcol International Corporation Sub-aqueous placement of water-based suspensions and method of manufacture and use

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4298725A (en) * 1978-02-01 1981-11-03 Tate & Lyle Limited Process for the preparation of polysaccharide 9
CA1173771A (en) * 1980-05-21 1984-09-04 Roger E. Cripps Fluid displacement with heteropolysaccharide solutions, and the microbial production of heteropolysaccharides
US4269939A (en) * 1980-06-20 1981-05-26 Merck & Co., Inc. Preparation of heteropolysaccharide S-119
FI811807L (fi) * 1980-06-20 1981-12-21 Merck & Co Inc Framstaellning av heteropolysackarid s-119
FR2492405A1 (fr) * 1980-10-17 1982-04-23 Dumas & Inchauspe Procede pour preparer de l'eau visqueuse par action de micro-organismes et eau visqueuse obtenue par ce procede
DE3214953A1 (de) * 1982-04-22 1983-10-27 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Mikrobielle polysaccharide, verfahren zu ihrer herstellung, dafuer geeignete mikroorganismen und verwendung der polysaccharide

Also Published As

Publication number Publication date
JPS60186294A (ja) 1985-09-21
FI79553C (fi) 1990-01-10
MX7669E (es) 1990-06-29
NZ209614A (en) 1988-02-12
EP0138255B1 (en) 1991-02-06
NO160721C (no) 1989-05-24
RO89835A (ro) 1986-07-30
FI843691A0 (fi) 1984-09-20
AU619281B2 (en) 1992-01-23
AU3370389A (en) 1989-08-31
ZA847394B (en) 1985-05-29
NO160721B (no) 1989-02-13
JPH0642835B2 (ja) 1994-06-08
EG17982A (en) 1993-02-28
KR850002286A (ko) 1985-05-10
FI79553B (fi) 1989-09-29
HUT36862A (en) 1985-10-28
IE842400L (en) 1985-03-22
US4634667A (en) 1987-01-06
EP0138255A2 (en) 1985-04-24
DE3484086D1 (de) 1991-03-14
BR8404723A (pt) 1985-08-13
DK450684D0 (da) 1984-09-20
CA1232559A (en) 1988-02-09
GB8325445D0 (en) 1983-10-26
FI843691L (fi) 1985-03-23
DK450684A (da) 1985-03-23
IE58039B1 (en) 1993-06-16
IL73009A (en) 1988-11-30
IL73009A0 (en) 1984-12-31
NO843768L (no) 1985-03-25
AU3332984A (en) 1985-03-28
EP0138255A3 (en) 1986-05-14
ATE60805T1 (de) 1991-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0130647B1 (en) Process for preparing xanthomonas heteropolysaccharide, heteropolysaccharide as prepared by the latter process and its use
EP0127698B1 (en) Acidic heteropolysaccharide am-2, a process for the production thereof, uses thereof and acetobacter mh-1597 (ferm bp-280)
HU192452B (en) Process for producing heteropolisaccharides
EP0045569B1 (en) Method for improving specific xanthan productivity during continuous fermentation
US2978383A (en) Method for the production of 1-glutamic acid
US2978384A (en) Method for the production of 1-glutamic acid
JPH1175885A (ja) ２−ヒドロキシ−４−メチルチオブタン酸カルシウム塩の製造方法
US4377637A (en) Method for producing a low viscosity xanthan gum
EP0046007B1 (en) Xanthomonas campestris atcc 31601 and process for use
US5580763A (en) Method for fermentation production of xanthan gum
EP0044659B1 (en) Method for production of xanthan gum using xanthomonas campestris atcc 31601
US4328308A (en) Semi-continuous method for production of xanthan gum using Xanthomanas campestris ATCC 31600 and Xanthomanas campestris ATCC 31602
US4301247A (en) Method for improving xanthan yield
JP2518218B2 (ja) 微生物菌体の製造方法
US4328310A (en) Semi-continuous method for production of xanthan gum using Xanthomonas campestris ATCC 31601
JP3820418B2 (ja) 新規キチナーゼ及びその製造方法
US4407950A (en) Xanthomonas campestris ATCC 31602 and process for use
US3708399A (en) Fermentation process for the production of citric acid
JP2901458B2 (ja) ゲンチアノースの製造方法
US3616230A (en) Method for production of l-asparaginase
JPH0346115B2 (hu)
KR101235265B1 (ko) 신규한 슈도알테로모나스 속 미생물 및 그가 분비하는 아가레이즈
JPH08149985A (ja) 新規微生物および微生物によるヘテロ多糖類の製造方法
JPS5914786A (ja) 新規微生物
JPH08280395A (ja) トレハロースの製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee