FI95255B - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten merkaptoasetyyliamidopyrrolo- ja -pyridobentsatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

95255

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten merkap-toasetyyliamidopyrrolo- ja -pyridobentsatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi 5 Keksintö koskee uusien 6- ja 7- merkaptoasetyyli- amidopyrrolo- ja -pyrido[2,1-a][2]bentsatsepiinikarboksyy-lihappojohdannaisten valmistusta, joiden kaava on

10 H\ H

\ V y H (I ) 15 C&/v*S-R3 Al \ / R2 jossa

Aj ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -COOR4, jossa 20 R4 on vety, -CH20-C(0)C(CH3 )3, C^-alkyyli, bentsyyli tai difenyylimetyyli, edellyttäen, että jos A3 on vety, niin A2 on -C00R4, ja jos A3 on -C00R4, niin A2 on vety; R2 on vety, fenyyli tai bentsyyli; R3 on vety, asetyyli tai bentsoyyli; ja 25 n on kokonaisluku 0 tai 1.

Nämä yhdisteet ovat enkefalinaasin ja angiotensii-niä muuttavan entsyymin inhibiittoreita.

Enkefalinaasi tai tarkemmin sanottuna endopeptidaa-si-24.11 on nisäkkään ektoentsyymi, joka liittyy tiettyjen 30 verenkiertoa säätelevien peptidien metaboliseen hajoami-.· seen. Tämä entsyymi, joka on Zn+2-metallopeptidaasi, vai- kuttaa siten, että se lohkaisee solun ulkopuoliset peptidit hydrofobisten ryhmien aminoryhmästä ja siten inaktivoi peptidit säätelevinä välittäjinä.

2 95255

Enkefalinaasi liittyy erilaisten verenkiertoa säätelevien peptidien metaboliseen hajoamiseen, joita peptidejä ovat mm. endorfiinit kuten B-endorfiini ja enkefalii-nit, eteisnatriureettinen peptidi (ANP) ja muut verenkier-5 toa säätelevät peptidit.

Endorfiinit ovat luonnossa esiintyviä polypeptide-jä, jotka sitoutuvat opiaattireseptoreihin aivojen eri alueilla ja siten aikaansaavat analgeettisen vaikutuksen korottamalla kipukynnystä. Endorfiinit esiintyvät erilai-10 sissa muodoissa, joita ovat mm. α-endorfiini, B-endorfii-ni, Y -endorfiini sekä enkefaliinit. Enkefaliinit, so. Met-enkefaliini ja Leu-enkefaliini, ovat pentapeptidejä, jotka esiintyvät aivokudoksen, selkäytimen ja gastro-intestinaalisen alueen hermopäätteissä. Kuten muut endor-15 fiinit, enkefaliini aikaansaa analgeettisen vaikutuksen sitoutumalla opiaattireseptoreihin aivoissa. Enkefalinaa-sin inhiboinnilla luonnossa esiintyvien endorfiinien ja enkefaliinien metabolinen hajoaminen inhiboituu, jolloin aikaansaadaan tehokas endorfiini- tai enkefaliinivälittei-20 nen analgeettinen vaikutus. Sen vuoksi enkefalinaasin in-hibitio olisi käyttökelpoinen potilaassa, joka kärsii akuutista tai kroonisesta kivusta. Enkefalinaasin inhibi-tio olisi myös käyttökelpoinen antidepressiivisen vaikutuksen aikaansaamisessa ja opiaatin tai morfiinin antami-25 sen loppumiseen liittyvien vieroitusoireiden vakavuuden vähenemisen aikaansaamisessa.

ANP viittaa ryhmään luonnossa esiintyviä peptidejä, jotka liittyvät verenpaineen homeostaattiseen säätelyyn sekä natrium- ja vesiarvoihin. ANP:n pituuden on todettu 30 vaihtelevan noin 21:stä noin 126:een aminohappoon niin, että tavallinen rakenneosa on yksi tai useampia 17 aminohapon disulfidisilmukallista sekvenssiä, joissa aminohapoissa erilaiset amino- ja karboksipäätteiset sekvenssit ovat kiinnittyneet kystiiniryhmään. ANP:n on todettu si-35 toutuvan spesifisiin sitoutumiskohtiin erilaisissa kudok- 3 95255 sissa, joita ovat mm. munuaisen, lisämunuaisen, aortan ja verisuonen sileä lihas, affiniteeteilla, jotka vaihtelevat noin 50 pikomolaarisuudesta (pM) noin 500 nanomolaarisuu-teen (nM) [Needleman, Hypertension, 7 (1985) 469]. Lisäksi 5 uskotaan, että ANP sitoutuu spesifisiin reseptoreihin aivoissa ja mahdollisesti toimii hermosäätelijänä sekä tavanomaisena periferisenä hormonina.

ANP:n biologiset ominaisuudet käsittävät tehokkaat virtsan eritys- / natriumin eritys- ja verisuonia laajen-10 tavat / verenpainetta alentavat vaikutukset sekä inhiboivan vaikutuksen reniinin ja aldosteronin eritykseen [deBold, Science 230 (1985) 767]. Enkefalinaasin inhiboin-nilla luonnossa esiintyvän ANP:n metabolinen hajoaminen inhiboituu, jolloin aikaansaadaan tehokkaat ANP-välittei-15 set virtsan eritys-, natriumin eritys-, verenpainetta alentavat ja hypoaldosteroneemiset vaikutukset. Enkefalinaasin inhibitio olisi sen vuoksi käyttökelpoinen potilaassa, joka kärsii sairaustiloista, joille on luonteenomaista poikkeavuudet nesteen, elektrolyytin, verenpai-20 neen, silmän sisäisen paineen, reniinin tai aldosteronin homeostaasissa, kuten korkeasta verenpaineesta, munuaissairauksista, hyperaldosteronemiasta, sydämen hypertro-fiasta, silmänpainetaudista ja kongestiivisesta sydämen toiminnan vajavuudesta näihin kuitenkaan rajoittumatta.

25 Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat lisäksi angioten- siiniä muuttavan entsyymin (ACE:n) inhibiittoreita. ACE on peptidyylidipeptidaasi, joka katalysoi angiotensiinin I muuttumista angiotensiiniksi II. Angiotensiini II on verisuonien supistaja, joka stimuloi myös aldosteronin eritys-30 tä lisämunuaiskuorella. ACE:n inhibitio olisi sen vuoksi käyttökelpoinen potilaassa, joka kärsii sellaisista sai-raustiloista kuin korkea verenpaine ja kongestiivinen sydämen toiminnan vajavuus [katso William W. Douglas, "Po-lypeptides - Angiotensin, Plasma Kinins, and Others", kap-35 pale 27 julkaisussa GOODMAN AND GILLMAN'S THE PHARMACOLO- 4 95255 GICAL BASIS OF THERAPEUTICS, 7. PAINOS, 1985, S. 652 -653, MacMillan Publishing Co., New York, New York]. Lisäksi on huomattu, että ACE-inhibiittorit ovat käyttökelpoisia hoidettaessa kognitiivisia sairauksia [saksalainen 5 hakemus nro 3901-291-A, julkaistu 3. elokuuta 1989].

Patenttijulkaisuista FI 84 481, EP 249 224, EP 322 914 ja US 4 584 294 tunnetaan fuusioituneita trisyk-lisiä laktaamijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia ACE:n inhibiittoreina ja antihypertensiivisinä aineina.

10 Nämä yhdisteet eroavat nyt kuvatuista kaavan I mukaisista yhdisteistä siinä, että mainitut tunnetut yhdisteet eivät sisällä merkaptoasetyyliamidoryhmää, joka on tyypillinen nyt kuvatuille yhdisteille. Lisäksi nyt kuvatut yhdisteet ovat enkefalinaasin ja ACE:n inhibiittoreita.

15 Patenttijulkaisussa FI 77 244 kuvataan määrättyjä pyridatso[l,2-a][1,2]diatsepiinijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia ACE:n inhibiittoreina ja antihypertensiivisinä aineina. Kyseiset yhdisteet eivät ole fuusioituneita trisyklisiä laktaameja eivätkä ne sisällä nyt kuva-20 tuille kaavan I mukaisille yhdisteille tyypillistä merkaptoasetyyliamidoryhmää. Lisäksi nyt kuvatut yhdisteet ovat sekä enkefalinaasin että ACE:n inhibiittoreita.

Edellä esitetyn kaavan I mukaisen yhdisteryhmän määrittelyssä ja jäljempänä termi "C1.4-alkyyli" viittaa 25 tyydyttyneeseen haarautumattoman tai haarautuneen ketjun omaavaan hydrokarbyyliradikaaliin, jossa on 1-4 hiili-atomia ja joka käsittää metyylin, etyylin, propyylin, iso-propyylin, n-butyylin, isobutyylin, tertiäärisen butyylin ja niiden kaltaiset. Termi "halogeeni", "halogenidi" tai 30 "Hai" viittaa kloori-, bromi- tai jodiatomiin.

Merkintä "viittaa sidokseen kiraaliseen atomiin, jolle ei ole ilmoitettu stereokemiaa.

On tietenkin ymmärrettävä, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä erilaisissa isomeerisissä konfi-35 guraatioissa, joihin kuuluvat rakenteelliset sekä stereo- s 95255 isomeerit. On edelleen ymmärrettävä, että kaavan I mukainen yhdisteryhmä käsittää yhdisteet kussakin niiden erilaisessa rakenteellisessa ja stereoisomeerisessä konfigu-raatiossa yksittäisinä isomeereinä ja isomeerien seoksi-5 na.

Seuraavat kokeet valaisevat kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuutta enkefalinaasi-inhibiittoreina ja ACE-inhibiittoreina.

Enkefalinaasi osittain puhdistetaan rotan munuai-10 sesta. Entsyymi uutetaan mikronukkalisäkefraktiosta käyt täen Triton X-100:a Malfroyn ja Schwartzin kuvaaman menetelmän mukaisesti [J. Biol. Chem. 259 (1984) 14365 - 14370] tai käyttäen proteolyyttistä käsittelyä Almenoffin ja Orlowskin menetelmän mukaisesti [Biochem. 22 (1983) 15 590 - 599]. Entsyymi jatkopuhdistetaan anioninvaihtokro- matografiällä (Mono Q™ -pylväs, Pharmacia) käyttäen Pharmacia FPLC -järjestelyä. Entsyymiaktiivisuus voidaan mitata Florentin et ai:n [Anal. Biochem. 141 (1984) 62 - 69] tai Almenoffin ja Orlowskin [J. Neurochemistry 42 (1984) 20 151 - 157] fluorometrisillä menetelmillä. Entsyymi analy soidaan 50 mM HEPES-puskurissa (pH 7,4) 3,0 ml:n reaktio-tilavuutena, joka sisältää 12 μΜ substraatti-dansyyli-D-AlaGly(p-nitro)PheGly:ä (K. = 40 μΜ) 25 °C:ssa. Substraatti (ja inhibiittori) lisätään väkevästä varastoliuoksesta 25 DMS0:hon (0,1 ml:ksi DMS0:ta lopputilavuus). Entsyymi lisätään pienenä määränä (suunnilleen 0,1 pg FPLC-puhdistet-tua proteiinia) reaktion alkuun saamiseksi ja fluoresens-silisäyksen nopeus tallennetaan jatkuvatoimisesti käyttäen fluorometriä (jännitys 339 nm:ssa, emissio 30 562 nm:ssa).

ACE:n entsymaattista aktiivisuutta tarkkaillaan käyttäen spektrofotometristä substraattia, jonka ovat kuvanneet Holmquist et ai. [Anal. Biochem. 95 (1979) 540 -548] , ja puskurisysteemiä, jonka on kuvannut Ryan [Methods 6 95255 of Entzymatic Analysis, 3. painos, H.U. Bergmeyer, julkaisija; voi. V, Verlag Chemie, Weinham, 1983, s. 20 - 34].

Entsymaattisen aktiivisuuden analyysin tulokset, jotka on kuvattu taulukossa A, osoittavat, että kaavan I 5 mukaiset yhdisteet ovat enkefalinaasin inhibiittoreita sekä ACE:n inhibiittoreita.

Taulukko A

Kt:t kaavan (1) mukaisille yhdisteille enkefalinaa-10 sin ja ACE:n inhibiittoreina

Kaavan (I) mu- Enkefalinaasi, ACE, (nM) kainen yhdiste Kt (nM) 15 100,173 <1 0,74 101,628 8 6,7 27,855 8 5 101,804 1 2,1 100,919 <1 1 20 - 100,173 = [4S-[4a,7a(R*),12b3]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fe-nyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 25 101,628 = [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-tio-3-fe- nyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 27,855 = [4S-[4a,7a(R*),12bS]]-7-[(l-okso-2-tioetyyli)- amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2] -30 bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 101,804 = [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2-tio-2-fenyy-lietyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo ; 100,919 = [6a(R*),llbB]—6—[(S)—(l-okso-2(R)-tio-3-fenyy- 35 lipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyr- rolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappo

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa siten, että

II

7 95255 a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -COOR4, jossa R4 on difenyylimetyyli, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, yhdiste, jonka kaava on 5

\ "rO

\ J H

10 //~'N/ \ (11) o \ (CH2)n CH^OH A1 \ / R2 15 jossa Ax, A2, n ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan tiolietikkahapon tai tiolibentsoehapon kanssa trifenyylifosfiinin ja hapetusaineen läsnä ollessa, b) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, 20 jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on vety, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on difenyylimetyyli, saatetaan reagoimaan hapon kanssa, 25 c) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on vety, ja R3 on vety, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on asetyyli tai bentsoyyli, saatetaan reagoimaan emäksen kanssa, 30 d) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, ‘ jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on -CH20-C(0)C(CH3)3, C1.4-alkyyli tai bentsyyli, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jos- β 95255 sa R4 on vety, saatetaan reagoimaan emäksen läsnä ollessa sopivan C^-alkyylihalogenidin, kloorimetyylipivalaatin tai bentsyylihalogenidin kanssa, tai e) kaavan 1 mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, 5 jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -COOR4, jossa R4 on -CH20-C(0)CH3)3, C1.4-alkyyli tai bentsyyli, ja R3 on vety, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on asetyy-li tai bentsoyyli, saatetaan reagoimaan ammoniakin kanssa.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet, joissa Ax on -COOR4 ja 10 A2 on vety, voidaan valmistaa käyttämällä menetelmiä ja tekniikoita, jotka tavallinen alan ammattimies hyvin tuntee ja ymmärtää. Yleinen synteettinen kaavio näiden yhdisteiden valmistamiseksi on esitetty kaaviossa A, jossa kaikki substituentit, ellei toisin ole ilmoitettu, ovat 15 edellä määritellyt.

t li 9 95255

Kaavio A

• JO - r® f / 1) oksalyylikloridi / vaihe a PhthN ^ A-o» ’ \ ~0H 0 H0 ,CHil" sA„„, 10 1 2 3 vaihe b r®

PhthN \ HaPetuV

15 V- NH vaihe c

O ^ (CH2)n /V OH

C02Me 4 20 f1)

Sykli- / sointi

PhthN ’n. vaihe d

oc Λ1νη Λ H

25 O7 (CH2)n

O

C02Me ς 10 95255

Kaavio A, jatkoa s /¾ vrO. _^ J Sykli- PhthN vaihe f

PhthN *\ sointi v N \ yV“—N (CH2)n vaihe e ° V ^CH2^n o W Γ7 , k 7 C02R4' C02Me OAc fj Vh

H\ *' 9 II J

/X V H h

Jj J XNrX X"

15 " j\“ -- °^/N

hn^\ vaihe g | θ' ", (CH2)n O \ (CH2)n r2--- V—V H CO,Ra’ 10 8 i 20 C02Ra' vaihe h

H\ H

:=T// 0^"Ni ( CH 2 ) n 30 . OH \_ , R2 H 1 H co2r4 11a il 11 95255

Kaavio A, jatkoa

Hvaih%j H\ H

Y N ;rH . Y H 0 N, (CH2)n Λ o \ (CH2)Π λ H \ >« V" ·,< Γ

R' ' H CCW °H

il. llb 15 vaihe ι vaihe k

V

H\ H H\ H /— 20 xn 7 Y H \ 7 Y h u 0 \ (CH2 ) n en . 0 N\ (CH2)n

y Y J>53 Y

«2 1 R2 * H 1 sr3 C02R4‘ h C02Ra' 25 12a 12b R4‘ = CHPh2 30 R3‘ = C0CH3jC0Ph 12 95255

Vaiheessa a sopiva ftaali-imidisuojattu (S)-fenyy-lialaniinijohdannainen, jolla on rakenne 2, voidaan valmistaa saattamalla sopiva (S)-fenyylialaniinijohdannainen, jolla on rakenne 1, reagoimaan ftaalihappoanhydridin kans-5 sa sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyli-formamidissa.

Vaiheessa b sopiva ftaali-imidisuojattu (S)-fenyy-lialaniinijohdannainen, jolla on rakenne 2, voidaan muuttaa vastaavaksi happokloridiksi, sen jälkeen saattaa rea-10 goimaan sopivan aminohappometyyliesterin kanssa, jolla on rakenne 3, kytkentäreaktiossa. Sopiva ftaali-imidisuojattu (S)-fenyylialaniinijohdannainen, jolla on rakenne 2, voidaan esimerkiksi saattaa reagoimaan oksalyylikloridin kanssa sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten metylee-15 nikloridissa. Saadulle happokloridille voidaan sitten suorittaa kytkentäreaktio sopivan aminohappometyyliesterin kanssa, jolla on rakenne 3, käyttäen N-metyylimorfoliinia sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyliform-amidissa, jolloin saadaan sopiva l-okso-3-fenyylipropyyli-20 aminohappometyyliesterijohdannainen, jolla on rakenne 4.

Vaiheessa c rakenteen 4 omaavan sopivan l-okso-3-fenyylipropyyliaminohappometyyliesterijohdannaisenhydrok-simetyleenifunktionaalisuus voidaan hapettaa sopivaksi aldehydiksi, jolla on rakenne 5, alalla hyvin tunnetuilla 25 ja ymmärretyillä hapetusmenetelmillä. Rakenteen 4 omaavan sopivan l-okso-3-fenyylipropyyliaminohappometyyliesteri-johdannaisen hydroksimetyleenifunktionaalisuus voidaan esimerkiksi hapettaa sopivaksi aldehydiksi, jolla on rakenne 5, Swern-hapetuksen avulla käyttäen oksalyyliklori-30 dia ja dimetyylisulfoksidia sopivassa aproottisessa liuot-timessa kuten metyleenikloridissa.

Vaiheessa d sopiva aldehydi, jolla on rakenne 5, voidaan syklisoida sopivaksi enamiiniksi, jolla on rakenne 6, happokatalyysillä. Sopiva aldehydi, jolla on rakenne 5, 35 voidaan esimerkiksi syklisoida sopivaksi enamiiniksi, joi- I! 13 95255 la on rakenne 6, käsittelemällä trifluorietikkahapolla sopivassa aproottlsessa liuottimessa kuten metyleeniklo-rIdissä.

Valheessa e sopiva enamllnl, jolla on rakenne 6, 5 voidaan muuttaa vastaavaksi trlsykliseksl yhdisteeksi, jolla on rakenne 7, happokatalysoidulla Friedel-Crafts-reaktiolla. Sopiva enamllnl, jolla on rakenne 6, voidaan esimerkiksi muuttaa vastaavaksi trlsykliseksl yhdisteeksi, jolla on rakenne 7, käsittelemällä trifluorimetaanisulfo-10 nihapon ja trifluorietikkahappoanhydridin seoksella sopivassa aproottlsessa liuottimessa kuten metyleenikloridis-sa.

Vaiheessa e voi olla tarpeen esteröidä uudelleen karboksifunktionaalisuus käsittelyolosuhteiden vuoksi.

15 Voidaan käyttää esimerkiksi raakatuotteen käsittelyä bro-midifenyylimetaanilla sopivassa aproottlsessa liuottimessa kuten dimetyyliformamidissa yhdessä ei-nukleofiilisen emäksen kuten cesiumkarbonaatin kanssa, jolloin saadaan vastaava difenyylimetyyliesteri.

20 Vaiheessa f rakenteen 7 omaavan sopivan trisyklisen yhdisteen ftaali-imidisuojaryhmä voidaan poistaa käyttämällä alalla hyvin tunnettuja tekniikoita ja menetelmiä. Rakenteen 7 omaavan sopivan trisyklisen yhdisteen ftaali-imidisuojaryhmä voidaan poistaa esimerkiksi käyttäen hyd-25 ratsiinimonohydraattia sopivassa proottisessa liuottimessa kuten metanolissa, jolloin saadaan vastaava aminoyhdiste, jolla on rakenne 8.

Vaiheessa g sopiva (S)-asetaattiyhdiste, jolla on rakenne 10, voidaan valmistaa saattamalla sopiva aminoyh-30 diste, jolla on rakenne 8, reagoimaan sopivan S-asetaatin kanssa, jolla on rakenne 9. Sopiva aminoyhdiste, jolla on

L

rakenne 8, voidaan esimerkiksi saattaa reagoimaan sopivan (S)-asetaattiyhdisteen kanssa, jolla on rakenne 9, kytken-täreagenssin kuten EEDQ:n (l-etoksikarbonyyli-2-etoksi-35 1,2-dihydrokinoliinin), DCC:n (1,3-disykloheksyylikarbodi- 14 95255 imidin) tai dietyylisyaanifosfonaatin läsnä ollessa sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten metyleenikloridissä, jolloin saadaan sopiva (S)-asetoksiyhdiste, jolla on rakenne 10.

5 Vaiheessa h rakenteen 10 omaavan sopivan amidiyh- disteen (S) -asetaattifunktionaalisuus voidaan hydrolysoida vastaavaksi (S)-alkoholiksi, jolla on rakenne 11a, emäksellä kuten litiumhydroksidilla sopivassa liuotinseoksessa kuten tetrahydrofuraanissa ja etanolissa.

10 Vaiheessa i rakenteen 11a omaavan sopivan amidiyh- disteen (S)-alkoholifunktionaalisuus voidaan muuttaa vastaavaksi (R)-tioasetaatiksi tai (R)-tiobentsoaatiksi, jolla on rakenne 12a. Sopivaa (S)-alkoholia, jolla on rakenne 11a, voidaan esimerkiksi käsitellä tiolietikkahapolla Mit-15 sunobu-reaktiossa käyttäen trifenyylifosfiinia ja DlAD:a (di-isopropyyliatsodikarboksylaattia) sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa.

Vaiheessa j rakenteen 11a omaavan sopivan amidiyh-disteen (S)-alkoholifunktionaalisuus voidaan muuttaa vas-20 taavaksi (R)-alkoholiksi, jolla on rakenne 11b. Sopivaa (S)-alkoholia, jolla on rakenne 11a, voidaan esimerkiksi käsitellä etikkahapolla Mitsunobu-reaktiossa käyttäen trifenyylifosf iinia ja DIAD:a sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa. Saatu (R)-asetaatti 25 voidaan sen jälkeen hydrolysoida emäksen kuten litiumhyd-roksidin kanssa.

Vaiheessa k rakenteen 11b omaavan sopivan amidiyh-disteen (R)-alkoholifunktionaalisuus voidaan muuttaa vastaavaksi (S)-tioasetaatiksi tai (S)-tiobentsoaatiksi, jol-30 la on rakenne 12b. Sopivaa (R)-alkoholia, jolla on rakenne «· 11b, voidaan esimerkiksi käsitellä tiolietikkahapolla Mit sunobu-reaktiossa käyttäen trifenyylifosfiinia ja DIAD:a sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofu-raanissa.

is 95255

Kuten taulukossa 1 on esitetty yhteenvetona, R3- ja R4-ryhmiä rakenteet 12a ja 12b omaavissa yhdisteissä voidaan käsitellä käyttäen tavallisen alan ammattimiehen hyvin tuntemia ja ymmärtämiä tekniikoita ja menetelmiä, jol-5 loin saadaan vastaavat yhdisteet, joilla on rakenteet 13a - 16a ja 13b - 16b.

Rakenteen 12a omaavan sopivan yhdisteen difenyyli-metyy1iesterifunktionaalisuus voidaan esimerkiksi poistaa käyttäen trifluorietikkahappoa, jolloin saadaan sopiva 10 karboksyylihappoyhdiste, jolla on rakenne 13a. Samalla tavoin rakenteen 12b omaavan sopivan yhdisteen difenyyli-metyyliesterifunktionaalisuus voidaan poistaa käyttäen trifluorietikkahappoa, jolloin saadaan karboksyylihappoyhdiste, jolla on rakenne 13b.

15 Rakenteen 13a omaavan spivan yhdisteen (R)-tioase- taatti- tai (R)-tiobentsoaattifunktionaalisuus voidaan poistaa litiumhydroksidilla sopivassa liuotinseoksessa kuten tetrahydrofuraanissa ja etanolissa, jolloin saadaan sopiva (R)-tioyhdiste, jolla on rakenne 14a. Samalla ta-20 voin rakenteen 13b omaavan sopivan yhdisteen (S)-tioase-taatti- tai (S)-tiobentsoaattifunktionaalisuus voidaan poistaa litiumhydroksidilla sopivassa liuotinseoksessa kuten tetrahydrofuraanissa ja etanolissa, jolloin saadaan sopiva (S)-tioyhdiste, jolla on rakenne 14b.

25 Vaihtoehtoisesti rakenteen 13a omaavan sopivan yh disteen karboksyylihappofunktionaalisuus voidaan esteröidä uudelleen käyttäen alalla hyvin tunnettuja ja ymmärrettyjä tekniikoita ja menetelmiä. Yhdiste, jolla on rakenne 15a, voidaan esimerkiksi valmistaa käsittelemällä karboksyyli-30 happoyhdistettä, jolla on rakenne 13a, sopivalla alkyyli-’ halogenidilla sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyliformamidissa yhdessä ei-nukleofiilisen emäksen kuten cesiumkarbonaatin kanssa. Samalla tavoin rakenteen 13b omaavan sopivan yhdisteen karboksyylihappofunktionaa- 95255 16 lisuus voidaan esteröidä sopivaksi esteriyhdisteeksi, jolla on rakenne 15b, kuten edellä on kuvattu 15a:lie.

Rakenteen 15a omaavien sopivien yhdisteiden (R)-tioasetaatti- tai (R)-tiobentsoaattifunktionaalisuudet 5 voidaan hydrolysoida vastaaviksi (R)-tioliyhdisteiksi, joilla on rakenne 16a, ammoniakilla sopivassa proottisessa liuottimessa kuten metanolissa. Samalla tavoin rakenteen 15b omaavien sopivien yhdisteiden (S)-tioasetaatti- tai (S)-tiobentsoaattifunktionaalisuudet voidaan hydrolysoida 10 vastaaviksi (S)-tioliyhdisteiksi, joilla on rakenne 16b.

Taulukko 1 R3:n ja R4:n käsittely 15 Yhdiste R0 R.

3 4

13a ja 13b COCHg tai COPh H

14a ja 14b H H

15a ja 15b COCH^ tai COPh C^_^-alkyyli, bentsyyli, -ch2ococ(ch3)3 20 16a ja 16b H C^_^-alkyyli, bentsyyli, difenyylimetyyli, -CH2OCOC(CH3)3

Kaaviossa A esitetyissä yleisissä synteettisissä 25 menetelmissä käytettävät lähtöaineet ovat alan ammattimiehen helposti saatavissa. Esimerkiksi rakenteen 9 omaavat tietyt (R)- ja (S)-karboksiasetaatti- tai -bentsoaatti-lähtöaineet voidaan valmistaa vastaavien pyruvaattiyhdis-teiden stereoselektiivisellä pelkistyksellä alpiiniboraa-30 nien kanssa kuten on kuvattu julkaisuissa J. Org. Chem. 47 : (1982) 1606, J. Org. Chem. 49 (1984) 1316 ja J. Am. Chem.

Soc. 106 (1984) 1531, minkä jälkeen saatua alkoholia käsitellään etikkahappoanhydridillä tai bentsoehappoanhyd-ridillä, jolloin saadaan vastaavat (R)— tai (S)-karboksi-35 asetaatti- tai -bentsoaattiyhdisteet, joilla on rakenne 9.

Il 17 95255

Vaihtoehtoisesti tietyt trisykliset yhdisteet, joilla on rakenne 7, voidaan valmistaa kuten Flynnin ja Beightin EP-patenttihakemuksessa nro 34533A EP (11. kesäkuuta 1987) on kuvattu.

5 Seuraavat esimerkit ovat tyypillisiä kaaviossa A

kuvattuja synteesejä. Näiden esimerkkien ymmärretään olevan ainoastaan valaisevia, eikä niiden katsota rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavalla. Tässä käytettynä seuraavilla termeillä on ilmoitetut merkitykset: "g" viit-10 taa grammoihin; "mmol" viittaa millimooleihin; "ml" viittaa millilitroihin; "kp." viittaa kiehumispisteeseen; ”°C" viittaa Celsius-asteisiin; "mmHg" viittaa elohopeamilli-metreihin; "μΐ" viittaa mikrolitroihin; "pg" viittaa mikrogrammoihin; ja "μΜ" viittaa mikromolaariseen.

15 Esimerkki 1 [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon di-fenyylimetyyliesterin valmistus 20 Vaihe a: N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniini (2)

Sekoita ftaalihappoanhydridiä (1,82 kg, 12,3 mol), (S)-fenyylialaniinia (1,84 kg, 11,1 mol) ja vedetöntä di-metyyliformamidia (2,26 1). Sekoita 115 - 120 eC:ssa 2 tuntia typpiatmosfäärissä. Kaada voimakkaasti sekoittaen 25 veteen (32,6 1) ja jäähdytä yön yli 0 °C:ssa. Suodata, pese kylmällä vedellä (2 x 2 1) ja kuivaa ilmalla. Liuota seokseen, jonka muodostavat 9A etanoli (8,05 1) ja vesi (8,05 1) ja kuumenna palautusjäähdytyslämpötilassa. Suodata painovoiman avulla, jäähdytä ympäristön lämpötilaan 30 ja jäähdytä yön yli noin 0 eC:ssa. Suodata kiteytynyt tuo-: te, pese kylmällä 9A etanolin ja veden seoksella (50:50, 2x21) ja kuivaa ilmalla, jolloin saadaan 2,96 kg (90,3 %) otsikon yhdistettä; sp. 177 - 179 eC.

18 95255

Vaihe b: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso- indol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-6-hydroksi-(S)-norleusiinin metyyliesteri

Sekoita N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinia (2) 5 (50,2 g, 0,17 mol), metyleenikloridia (660 ml) ja dime- tyyliformamidia (0,5 ml) typpiatmos£äärissä. Lisää oksa-lyylikloridia (17,7 ml, 0,2 mol) noin 5 minuutin aikana sekoittaen. Sekoita ympäristön lämpötilassa 3 tuntia ja haihduta liuotin tyhjössä, jolloin jäljelle jää N-ftaloyy-10 li-(S)-fenyylialaniinin happokloridi kiinteänä aineena (54,3 g, 101,9 %).

Sekoita 6-hydroksi-(S)-norleusiinin metyyliesterin vetykloridisuolaa (33,5 g, 0,1 mol) ja dimetyyliformamidia (201 ml), jäähdytä noin 0 °C:seen ja laita typpiatmosfää-15 riin. Lisää tipoittain N-metyylimorfoliinia (51 ml, 0,46 mol) jäähdyttäen niin, että astian lämpötila pysyy 0-5 °C:ssa. Sekoita 0-5 eC:ssa vielä 10 minuuttia, lisää sitten liuos, jonka muodostaa N-ftaloyyli-(S)-fe-nyylialaniinin happokloridi (53,5 g, 0,17 mol) metyleeni-20 kloridissa (270 ml), 30 minuutin aikana jäähdyttäen niin, että lämpötila pysyy 0-5 eC:ssa. Poista jäähdytyshaude ja sekoita huoneenlämpötilassa 18 tuntia.

Haihduta metyleenikloridi tyhjössä ja laimenna jäljelle jäänyt jäännös etyyliasetaatilla (800 ml). Uuta saa-25 tua seosta vedellä (800 ml), erota orgaaninen kerros ja uuta 1 N vetykloridihapolla (270 ml) ja sen jälkeen vedellä (3 x 500 ml). Kuivaa orgaaninen kerros (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan raakatuote (76 g, 98 %). Liuota raakatuote kuumaan tolueeniin (223,5 ml), 30 jäähdytä huoneenlämpötilaan, jäähdytä sitten yön yli noin 0 °C:ssa. Suodata kiteytynyt tuote, pese kylmällä toluee-nilla ja kuivaa ilmassa, jolloin saadaan 56,6 g (76 %) otsikon yhdistettä; sp. 128 - 130 eC.

) 19 95255

Vaihe c: 2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2- yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli-6-okso-(S)-norleusiinin metyyliesteri

Sekoita oksalyylikloridia (80 ml, 0,92 mol) ja me-5 tyleenikloridia (2 1) ja laita typpiatmosfääriin. Jäähdytä alle -50 ®C:seen ja lisää dimetyylisulfoksidin (65,4 ml, 0,92 mol) liuos metyleenikloridissa (425 ml). Sekoita 15 minuuttia ja lisää (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol - 2-yyl i) -1 -okso- 3 - f enyy 1 ipropyy 1 i ] - 6 - hydroksi - (S) -10 norleusiinin metyyliesterin (200 g, 0,456 mol) liuos metyleenikloridissa (800 ml) noin 45 minuutin aikana pitäen astian lämpötila alle -50 °C:ssa 30 minuuttia. Lisää tri-etyyliamiinia (420 ml, 3,01 mol) 30 minuutin aikana. Sekoita samalla lämmittäen 0 °C:seen 1,25 tuntia. Siirrä 15 reaktioseos 12 litran astiaan. Sekoita ja jäähdytä samalla lisäten OXONE:n (kaliumperoksimonosulfaatin) (566 g) liuos vedessä (6,74 1) sellaisella nopeudella, että astian lämpötila pysyy alle 15 °C:ssa. Sekoita 5 minuuttia, erota orgaaninen kerros ja uuta vesipitoista kerrosta metyleeni-20 kloridilla (1 1). Yhdistä orgaaniset faasit, kuivaa (MgS04) ja suodata, jolloin saadaan otsikon yhdiste liuoksena.

Vaihe d: [S-(R*,R*)]-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -1,2,3,4-tet-rahydro-2-pyridiinikarboksyylihapon metyyliesteri 25 Siirrä 2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2- yyli)-1-okso-3-fenyylipropyyli]-6-okso-(S)-norleusiinin metyyliesterin liuos metyleenikloridissa (tilavuus noin 4,5 1) 12 litran astiaan ja laita typpiatmosfääriin. Sekoita ja lisää trifluorietikkahappoa (440 ml, 5,71 mol) 30 yhtenä annoksena. Sekoita saatua seosta huoneenlämpötilassa tunnin ajan, jäähdytä sitten nopeasti noin 0 eC:seen. Lisää natriumhydroksidin (240 g, 6,0 mol) liuos vedessä (3,4 1) hitaana virtana seokseen, jota sekoitetaan voimakkaasti, sellaisella nopeudella, että astian lämpötila py-35 syy noin 0 °C:ssa. Erota orgaaninen faasi ja uuta vesifaa- 95255 20 siä metyleenikloridilla (1 1). Yhdistä orgaaniset faasit ja kuivaa (MgS04). Suodata ja poista liuotin tyhjössä, jolloin jäljelle jää jäännös (262 g, 137 %).

Liuosta edellä mainittu jäännös dietyylieetteriin 5 (11) ja pese vedellä (5 x 500 ml). Haihduta orgaaninen faasi tyhjössä, jolloin jäljelle jää 229 g:n jäännös. Laimenna jäännös metyleenikloridilla (200 ml) ja puhdista silikageelikromatografiällä (metyleenikloridi), jolloin saadaan viskoosi 225 g:n jäännös.

10 Laimenna edellä mainittu jäännös dietyylieetteril- lä (250 ml) ja anna seistä huoneenlämpötilassa 24 tuntia. Suodata kiinteä aine, pese dietyylieetterillä ja kuivaa ilmalla, jolloin saadaan 123,2 g tuotetta, sp. 140 - 142,5 °C. Uudelleenkoteytä (metyleenikloridi (125 ml) / 15 isopropanoli (615 ml)) kiehuttamalla liuotinta pois, kunnes astian lämpötila saavuttaa 75 °C, ja antamalla saadun erän seistä huoneenlämpötilassa 24 tuntia. Suodata, pese kylmällä isopropanolilla ja kuivaa ilmalla, jolloin saadaan 101,5 g otsikon yhdistettä; sp. 144 - 146 °C.

20 Haihduta suodos 101,5 g:sta tyhjössä niin, että saadaan 24 g. Uudelleenkiteytä (isopropanoli), jolloin saadaan vielä 3,5 g otsikon yhdistettä.

Haihduta suodos 123,2 g:sta tyhjössä niin, että jäljelle jää 62 g öljyä. Puhdista silikageelikromatogra-25 fiällä (25 % etyyliasetaattia / 75 % heksaania) ottaen talteen 21 500 ml:n fraktiota. Yhdistä fraktiot 9 - 20 ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan 35 g viskoosia öljyä. Uudelleenkiteytä kolme kertaa (isopropanoli/5 ml/g), jolloin saadaan vielä 11,9 g otsikon yhdistettä; sp. 142,5 - 30 144,5 eC. Käyttökelpoisen aineen kokonaissaanto: 116,9 g ;* (61,3 %).

♦

Vaihe e: [4S-[4a,7a(R*),12bfi]]-7-[(1,3-dihydro- 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahyd-ro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon 35 difenyylimetyyliesteri

Sekoita trifluorimetaanisulfonihappoa (500 g, 3,33 mol) ja trifluorietikkahappoanhydridiä (74,8 ml,

II

„ 95255 21 0,53 mol) ja laita typpiatmosfääriin. Sekoita ja lisää [S-(R*, R*) ] -N- [ 2- (1,3-dihydro-l, 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli) - l-okso-3-fenyylipropyyli]-1,2,3,4-tetrahydro-2-pyridiini-karboksyylihapon metyyliesterin (200 g, 0,48 mol) liuos 5 metyleenikloridissa (1 1) jäähdyttäen sellaisella nopeudella, että astian lämpötila pysyy alle 35 °C:ssa. Sekoita ympäristön lämpötilassa 2 vuorokautta. Kaada jääveteen (5 1), jota sekoitetaan voimakkaasti, ja sekoita 30 minuuttia. Uuta etyyliasetaatilla (3 x 1 1), yhdistä orgaa-10 niset faasit ja pese vedellä (3 x 500 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös etyyliasetaattiin (4 1) ja uuta 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (1 1), sitten 1/3 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (7 x 1 1). Yhdistä vesipitoiset uutteet ja laimenna etyyliasetaatilla 15 (21). Sekoita saatua seosta ja jäähdytä 5-10 °C:seen.

Säädä pH arvoon 2 käyttämällä väkevää vetykloridihappoa (noin 750 ml).

Erota orgaaninen faasi ja uuta vesifaasia etyyliasetaatilla (3 x 11). Yhdistä etyyliasetaattiuutteet, 20 pese vedellä (3 x 1 1), sitten kylläisellä natriumklori-dilla (0,8 1) ja kuivaa (MgS04). Suodata ja pese etyyliasetaatilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä, jolloin jäljelle jää [4S-[4a, 7a( R*),12bfi]]-7-[ (1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-l,2,3,4,6,7,8-oktahydro-6-oksopyrido-25 [2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappoa värittömänä vaahtona (188,3 g, 101,5 %).

Liuota [4S-[4a,7a(R*),12bö]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihappo 30 (113,9 g, 0,28 mol) metyleenikloridiin (1,2 1) ja kuivaa vedettömällä MgS04:lla (60 g). Suodata ja pese metyleenik-loridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (860 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia 35 (98,9 g, 0,3 mol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympä ristön lämpötilassa. Lisää bromidifenyylimetaania 22 95255 (164,8 g, 0,67 mol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (2,464 1) ja vedellä (630 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 625 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykar-5 bonaatilla (625 ml), vedellä (625 ml) ja kylläisellä nat-riumkloridilla (625 ml). Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan 214,4 g öljyä. Uuta yhdistettyjä vesipitoisia pesuliuoksia etyyliasetaatilla (3 x 500 ml), pese vedellä (4 x 300 ml) ja kuivaa (MgS04). Suo-10 data ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan vielä 20,2 g öljyä.

Liuota raakatuote (234,6 g) metyleenikloridiin (200 ml) ja tulppasuodata 213 g:n läpi silikageeliä eluoi-den metyleenikloridilla (2 1). Kiehuta liuotin pois ja 15 korvaa heksaanilla (3 1) niin, että astian lämpötila saavuttaa korkeintaan 65 °C. Jäähdytä ympäristön lämpötilaan, dekantoi saostunut öljy ja kiteytä (9A etanoli), jolloin saadaan 96,6 g (60 %) otsikon yhdistettä; sp. 153 -155 °C.

20 Vaihe f: [4S-[4α,7a(R*),12b8]]-7-(amino)- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepi ini-4-karboksyylihapon di fenyy1imetyyliesteri

Sekoita [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-25 6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentseatsepiini-4-karboksyylihapon difenyylimetyyliesteriä (170,9 g, 0,3 mol), hydratsiini-monohydraattia (34,4 g, 0,68 mol) ja metanolia (3,4 1) typpiatmosfäärissä. Kuumenna palautusjäähdyttäen 5 tuntia. Jäähdytä ympäristön lämpötilaan ja suodata ftaloyylihyd-30 ratsidin poistamiseksi. Haihduta suodos tyhjössä jäännök- seksi ja lietä kloroformiin (600 ml). Poista liukenematon ftaloyylihydratsidi suodattamalla ja pese kloroformilla (4 x 210 ml). Pese suodos vedellä (4 x 429 ml), kuivaa (MgS04) ja suodata. Haihduta suodos kiinteäksi jäännökseksi 35 otsikon yhdistettä, joka painaa 142 g (107,7 %).

23 95255

Vaihe g: [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)- asetyylioksi-3-fenyylipropyyli ) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido [2,l-a][2] bent sat sepi ini - 4 - karbok-syylihapon difenyylimetyyliesteri 5 Sekoita (S)-3-fenyylimaitohappoa (11,17 g, 67.2 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuosta etik-kahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (6,34 ml, 67.2 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuutiksi. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin 10 ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä, jolloin saadaan 13,16 g (94 %) (S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihappoa valkoisena öljynä.

Sekolta (S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihappoa 15 (3,6 g, 17 mmol) ja [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-(amino)- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a) [2]bentsat-sepiini-4-karboksyylihapon difenyylimetyyliesteriä (7,6 g, 17 mmol) metyleenikloridissa (50 ml). Lisää EEDQ:ta (4,3 g, 17 mmol). Sekoita 18 tuntia ympäristön lämpötilas-20 sa argonatmosfäärissä. Uuta 2 N vetykloridihapolla, erota orgaaninen faasi, pese vedellä, sitten kylläisellä nat-riumvetykarbonaatilla. Kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä, jolloin saadaan luonnonvalkoinen vaahto. Puhdista silika-geelikromatografialla (30 %, sitten 40 %, sitten 50 % 25 etyyliasetaattia/heksaania), jolloin saadaan 8,5 g (78 %) otsikon yhdistettä.

Vaihe h: [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)- hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-30 hapon difenyylimetyyliesteri

Liuota [4S-[4α,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-ase-tyylioksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-ok-tahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-lihapon difenyylimetyyliesteriä (11,0 g, 17,4 mmol) eta-35 nollin (75 ml) ja tetrahydrofuraaniin (40 ml) ja lisää litiumhydroksidia (22 ml IM liuosta, 22 mmol). Sekoita 24 95255 reaktioseosta 2 tuntia. Poista liuotin tyhjössä 35 °C:ssa ja jakouuta jäännöstä etyyliasetaatilla ja 1 N vetyklori-dihapolla. Erota orgaaninen faasi, kuivaan (MgS04) ja vä-kevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikromatografiällä (tet-5 rahydrofuraanirheksaani, 1:1), jolloin saadaan 9,6 g (94 %) otsikon yhdistettä.

Analyysi, laskettu yhdisteelle C37H36N205: C 75,49; H 6,16; N 4,76;

Todettu: C 75,30; H 6,44; N 4,54.

10 Vaihe i: [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(R)- asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihapon difenyylimetyyliesteri

Sekoita DIAD:ia (3,4 g, 16,3 mmol), trifenyylifos-15 fiiniä (4,28 g, 16,3 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (200 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia typ-piatmosfäärissä. Lisää liuos, jonka muodostavat [4S-[4a, 7a(R*), 12bB] ] -7- [ (l-okso-2( S)-hydroksi-3-fenyylipro-pyyli )amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-20 [2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon difenyylime tyyliesteri (9,6 g, 16,3 mmol) ja tiolietikkahappo (1,75 ml, 24,5 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (200 ml). Sekoita 0 °C:ssa 30 minuuttia, anna sitten lämmetä ympäristön lämpötilaan. Poista haihtuvat aineet tyh-25 jössä ja puhdista silikageelikromatografiällä (1 1 20-%:ista, 30-%:ista, 40-%:ista, sitten 50-%:ista tetra-hydrofuraania/heksaania), jolloin saadaan 5,127 g (49 %) otsikon yhdistettä.

Esimerkki 2 30 [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihaponval-mistus

Sekoita [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(R)-ase- 35 tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta- 95255 25 hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-hapon difenyylimetyyliesteriä (3,125 g, 4,83 mmol), ani-solia (5 g) ja trifluorietikkahappoa (30 ml). Sekolta 2 tuntia ympäristön lämpötilassa typpiatmosfäärissä. Poista 5 haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista silikageelikromato-grafiällä (1400 ml 30-%:ista tetrahydrofuraania/heksaania, johon on lisätty 5 % etikkahappoa, sitten 1000 ml 40-%:ista tetrahydrofuraania/heksaania, johon on lisätty 5 % etikkahappoa), jolloin saadaan viskoosi vaahto. Liuota 10 vaahto mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja laimenna heksaanilla, kunnes seos muuttuu sameaksi. Anna seistä yön yli 30 °C:ssa, suodata saatu valkoinen kiinteä aine ja kuivaa 56 °C:ssa suurtyhjössä, jolloin saadaan 2,079 g (89,53 %) otsikon yhdistettä.

15 Esimerkki 3 [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-tio-3-fenyy-lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-do[2,l-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Liuota [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-ase-20 tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happoa (2,079 g, 4,33 mmol) tetrahydrofuraaniin (10 ml). Lisää litiumhydroksidin (20 ml 1 N liuosta, 20 mmol) liuokseen metanolissa (60 ml, happi poistettu kuplittamal-25 la typpeä 10 minuuttia). Sekoita sameaa liuosta 40 minuuttia. Tee happamaksi ja laimenna vedellä, kunnes seos muuttuu sameaksi. Poista 10 ml haihtuvasta liuottimesta suur-tyhjössä, laimenna sitten seos 25 ml:ksi vedellä. Sekoita seosta 10 minuuttia, suodata typpikerroksen alla ja kuivaa 30 osittain imukuivauksella typpiatmosfäärissä. Kuivaa kiinteää ainetta yön yli suurtyhjössä, sitten 18 tuntia 35 °C:ssa suurtyhjössä, 24 tuntia 40 °C:ssa, sitten 64 tuntia 50 eC:ssa 10 mmHgrssa.

Toisessa erässä liuota [4S-[4a,7a(R*),12bfi]]-7-35 [(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]- 26 95255 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6 -oksopyr ido [2,l-a][2] bent sat -sepiini-4-karboksyylihappoa (2,819 g, 5,87 mmol) tetrahyd-rofuraanlln (kaasu poistettu). Lisää liuokseen, jonka muodostaa litiumhydroksidi (27 ml 1 N liuosta, 27 mmol) meta-5 nolissa (80 ml) ja josta on poistettu kaasu. Sekoita ympäristön lämpötilassa typpiatmosfäärissä 45 minuuttia. Tee happamaksi vetykloridlhapolla (15 ml 2 N liuosta), laimenna vedellä 250 ml:ksi ja sekoita 15 minuuttia. Ota kiinteä aine talteen suodattamalla typpikerroksen alla ja pese 10 vedellä. Kuivaa 2 tuntia ympäristön lämpötilassa suurtyh-jössä, sitten 18 tuntia 40 °C:ssa suurtyhjössä, sitten 64 tuntia 56 eC:ssa.

Yhdistä molempien erien aineet, jolloin saadaan 3,955 g (88,5 %) otsikon yhdistettä.

15 M+H = 439,1684; Laskettu = 439,1692.

Esimerkki 4 [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyr ido [2,1-a] [2] bent sat sepiini -4-karboksyylihapon 20 bentsyyliesterin valmistus

Liuota [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(R)-ase-tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja 25 kuivaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleenik-loridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 30 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol).

•I Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia.

Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 35 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Il 27 95255

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 5 [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(R)-tio-3-fenyy-5 lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri- do [2,1-a][2]bentsatsepi ini-4-karboksyy1ihaponbentsyy1ies-terin valmistus

Sekoita [4S-[4a,7a(R*),12bBhaihduta]]-7-[(1-okso-2( R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,-10 12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-kar- boksyylihapon bentsyyliesteriä (2,28 g, 4 mmol) ja kylläistä metanolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin 15 saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 6 [4S-[4a,7a(R*),12b6]]—7—[(l-okso-2(S)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon di-20 fenyylimetyyliesterin valmistus

Vaihe j: [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(R)- hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-hapon difenyylimetyyliesteri 25 Liuota [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-hyd- roksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahyd-ro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon difenyylimetyyliesteriä (59 mg, 0,1 mmol), trifenyylifos-fiinia (39 mg, 0,15 mmol) ja etikkahappoa (8,7 μΐ, 30 0,15 mmol) vedettömään tetrahydrofuraaniin (3 ml). Käsit- ’· tele DIAD: 11a (32 mg, 0,15 mmol) 0 °C:ssa. Sekoita 5 mi nuuttia 0 °C:ssa, anna sitten sekoittua ympäristön lämpötilassa 45 minuuttia. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikromatografiällä (heksaani:-35 tetrahydrofuraani, 3:1), jolloin saadaan 67 mg (106 %) 95255 28 [4S-[4α, 7α(R*), 12b6] ]-7- [ (l-okso-2(R)-asetyylioksi-3-fe-nyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopy-rido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapondifenyyli-metyyliesteriS.

5 Liuota [4S-[4a,7a(R*)-12bB]]-7-[(l-okso-2(R)-ase- tyylioksi-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-ok-tahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyy-lihapon difenyylimetyyliesteriä (366 mg, 0,58 mmol) meta-noliin (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja lisää liti-10 umhydroksidia (0,8 ml 1 M liuosta, 0,8 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 tuntia ja poista liuotin tyhjössä. Tee happamaksi ja jakouuta metyleenikloridilla ja vedellä. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä, jolloin saadaan valkoinen vaahto.

15 Toisessa erässä liuota [4S-[4α,7a(R*),12bB]]-7- [(l-okso-2(R)-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-4-karboksyylihapon difenyylimetyyliesteriä (100 mg, 0,16 mmol) metanoliin (5 ml) ja tetrahydrofuraa-20 niin (5 ml) ja lisää litiumhydroksidia (0,2 ml 1 M liuosta, 0,2 mmol). Sekoita reaktioseosta 1 tunti, laimenna vedellä (50 ml), tee happamaksi ja uuta dietyylieetterillä (50 ml). Erota orgaaninen faasi, pese vedellä (2 x 50 ml), kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä.

25 Yhdistä molempien erien aine ja puhdista silika- geelikromatografiällä (30 %, sitten 50 % tetrahydrofuraa-nia/heksaania), jolloin saadaan 355 mg (82 %) otsikon yhdistettä valkoisena vaahtona.

Vaihe k: [4S-[4a,7a(R*),12bS]]-7-[(l-okso-2(S)- 30 asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-·· oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok- syylihapon difenyylimetyyliesteri

Sekoita D1AD:ia (31 mg, 0,15 mmol), trifenyylifos-fiinia (39 mg, 0,16 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania 35 (2 ml). Jäähdytä 0 eC:seen ja sekoita 30 minuuttia argon-

II

29 95255 atmosfäärissä. Lisää [4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-4-karbok-syylihapon difenyylimetyyliesteriä (59 mg, 0,1 mmol) kiin-5 teänä aineena, lisää sitten välittömästi tiolietikkahappoa (11 μΐ, 0,15 mmol). Anna reaktioseoksen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoita yön yli. Poista liuotin tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikromatografiällä (40 % etyy-liasetaatti/heksaani, sitten 50 % etyyliasetaatti/heksaa-10 ni), jolloin saadaan 51 mg otsikon yhdistettä.

Esimerkki 7 [4S-(4a,7a(R*),12bB]]-7-{(l-okso-2(S)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihaponval-15 mistus

Liuota [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-ase-tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboskyyli-hapon difenyylimetyyliesteriä (51 mg, 0,079 mmol) aniso-20 liin (4 tippaa) ja trifluorietikkahappoon (1 ml) argonat-mosfäärissä ympäristön lämpötilassa. Anna seistä 45 minuuttia, poista trifluorietikkahappo tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä (50 ml 340-%:ista etyyliase-taattia/heksaania, sitten 50 ml 40-%:ista etyyliasetaat-25 tia/heksaania, johon on lisätty 5 % etikkahappoa), jolloin saadaan 30 mg (74 %) otsikon yhdistettä.

Esimerkki 8 [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyy-lipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyri-30 do[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon valmistus

Liuota [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-ase-tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happoa (57 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu 35 happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidia (0,25 ml, 30 95255 0,25 mmol). Sekolta 30 minuuttia argonatmosfäärissä ympäristön lämpötilassa. Vähennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetykloridihapon (2 ml) liuokseen, jota sekoitetaan voimakkaasti. Ota saatu sakka tal-5 teen, pese vedellä ja kuivaa tyhjöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 eC:ssa yön yli, jolloin saadaan 30 mg (58 %) otsikon yhdistettä valkoisena sähköstaattisena jauheena. M+H = 439,1717; Laskettu 439,1692.

Esimerkki 9 10 [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-asetyylitio- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon pi-valoyylioksimetyyliesterin valmistus

Liuota (4S-[4a,7a(R*),12b8]]-7-[(l-okso-2(S)-ase-15 tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta- hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-happoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kuivaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleenik-loridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. 20 Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5.0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön lämpötilassa. Lisää kloorimetyylipivalaattia (753 mg, 5.0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 25 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml). Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jol-30 loin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 10 [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyy-lipropyyli) amino-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyylihapon pivaloyyliok-35 simetyyliesterin valmistus

Sekoita [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2(S)-ase-tyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta- li 3i 95255 hydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-4-karboksyyli-hapon pivaloyylioksimetyyliesteriä (2,38 g, 4 mmol) ja kylläistä metanolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta 5 liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Seuraavat yhdisteet voidaan valmistaa edellä esimerkeissä 1 - 10 kuvattujen menetelmien kanssa analogisesti: 10 [4S-[4a,7a(R*),12bB]]-7-[(l-okso-2-tioetyyli)amino]- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2] -bentsatsepiini-4-karboksyylihappo; sp. 255 - 257 °C.

[4S- [4a, 7a( R* ), 12b8] ] -7- [ (l-okso-2-tio-2-fenyylietyyli )-amino] -1,2,3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]-15 bentsatsepiini-4-karboksyylihappo; M+H = 425,1514; Laskettu 425,1535.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet, joissa Ax on vety ja A2 on -C00R4, voidaan valmistaa käyttämällä tavallisen alan ammattimiehen hyvin tuntemia ja ymmärtämiä menetelmiä ja 20 tekniikoita. Yleinen synteettinen kaavio sopivien lähtöai neiden valmistamiseksi näitä yhdisteitä varten on esitetty kaaviossa B, jossa kaikki substituentit, ellei toisin ole ilmoitettu, ovat edellä määritellyt.

32 95255

Kaavio B

Il 1) IDA i ^ 21 \/^Hal 22 23 vaihe a 10 ΛΕΕϋΟ C02Me /Λ^> 15 24 PhthN "N. 2 /r~ oh o vaihe c Λ =*, Λ

PhthN N PhthN N

v~~ NH JL v NH JL

o C02Me o s/N C02Me 25 25 26 1) Hydroboraatio vaihe d„ w 2) Hapetus 30 S®

PhthN 'Λ CHO

NH JL

o COjMe i< 27 33 95255

Kaavio B tarjoaa yleisen synteettisen valmistusmenetelmän kaavan 1 mukaisille yhdisteille, joissa A2 on vety ja A2 on -C00R4.

Vaiheessa a N-(t-butyylioksikarbonyyli)-B-alanii-5 nin metyyliesteriä (21) voidaan käsitellä kahdella ekvivalentilla ei-nukleofiilistä emästä kuten litiumdi-isopro-pyyliamidia sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa, minkä jälkeen lisätään allyylihalo-genidia, jolla on rakenne 22, jolloin saadaan 2-(2-prope-10 nyyli)-N-(t-butyylioksikarbonyyli)-β-alaniinin metyylies teriä (23).

Vaiheessa b 2-(2-propenyyli)-N-(t-butyylioksikarbonyyli )-β-alaniinin metyyliesterin (23) t-butyylioksikar-bonyyliaminofunktionaalisuus voidaan hydrolysoida happa-15 missä olosuhteissa kuten trifluorietikkahapolla sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten metyleenikloridissa, jolloin saadaan 2-(2-propenyyli)-β-alaniinin metyyliesteri (24).

Vaiheessa c sopiva amidiyhdiste, jolla on rakenne 20 25, voidaan valmistaa saattamalla sopiva ftaali-imidisuo- jattu (S)-fenyylialaniiniyhdiste, jolla on rakenne 2 (kuvattu edellä kaaviossa A) reagoimaan 2-(2-propenyyli)-fi-alaniinin metyyliesterin (24) kanssa kytkentäreaktio-olo-suhteissa kuten EEDQ:n kanssa sopivassa aproottisessa liu-25 ottimessa kuten metyleenikloridissa.

Vaiheessa dx rakenteen 25 omaavan sopivan amidiyh-disteen olefiinifunktionaalisuus voidaan muuttaa sopivaksi aldehydiyhdisteeksi, jolla on rakenne 26, hapettavan loh-kaisun olosuhteissa kuten käsittelemällä otsonilla sopi-30 vassa liuotinseoksessa kuten metyleenikloridissa ja meta-\ nolissa.

Vaihtoehtoisesti vaiheessa d2 rakenteen 25 omaavan sopivan amidiyhdisteen olefiinifunktionaalisuus voidaan muuttaa sopivaksi aldehydiyhdisteeksi, jolla on rakenne 35 27, suorittamalla ensin hydroboraatio ja sen jälkeen hape- 34 95255 tus. Rakenteen 25 omaavan sopivan amidiyhdisteen olefiini-funktionaalisuus voidaan esimerkiksi hydroboorata 9-boori-bisyklo[3.3.1]nonaanilla (9-BBN) sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa. Hydroboorattu 5 olefiini voidaan sitten hapettaa alalla hyvin tunnetuilla ja ymmärretyillä tekniikoilla ja menetelmillä kuten käsittelemällä natriumhydroksidilla ja vetyperoksidilla, jolloin saadaan alkoholi, minkä jälkeen suoritetaan Swern-hapetus käyttäen oksalyylikloridia ja metyylisulfoksidia 10 sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten metyleeniklo-ridissa.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet, joissa Ax on vety, A2 on -COOR4, R3 on asetaatti tai bentsoaatti, R4 on metyyli ja n = 0, voidaan valmistaa sopivasta aldehydistä, jolla 15 on rakenne 26, edellä kaavion A vaiheissa d - k esitetyllä menetelmällä.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet, joissa A3 on vety, A2 on -C00R4, R3 on asetaatti tai bentsoaatti, R4 on metyyli ja n = 1, voidaan valmistaa sopivasta aldehydistä, jolla 20 on rakenne 27, edellä kaavion A vaiheissa d - k esitetyllä menetelmällä.

Ryhmiä R3 ja R4 voidaan käsitellä tekniikoilla ja menetelmillä, jotka ovat alalla hyvin tunnetut ja ymmärretyt ja jotka on kuvattu edellä kaaviossa A ja taulukossa 25 1.

Kaaviossa B esitetyissä yleisissä synteettisissä menetelmissä käytettävät lähtöaineet ovat tavallisen alan ammattimiehen helposti saatavissa ja ne on kuvattu edellä kaaviossa A.

30 Seuraavat esimerkit ovat tyypillisiä kaaviossa B

·_ kuvattuja synteesejä. Näiden esimerkkien ymmärretään ole- van ainoastaan valaisevia, eikä niiden tarkoitetan rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavalla.

35 9 5 2 5 5

Esimerkki 11 [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon me-5 tyyliesterin valmistus

Vaihe a: N-(t-butyylioksikarbonyyli)-2-(2-prope- nyyli)-β-alaniinin metyyliesteri

Liuota di-isopropyyliamiinia (5,6 ml, 40 mmol) vedettömään tetrahydrofuraaniin, jäähdytä -78 °C:seen ja 10 laita typpiatmosfääriin. Käsittele n-butyylilitiumilla (25 ml 1,6 M liuosta heksaanissa, 40 mmol). Sekoita 30 minuuttia ja lisää tipoittain N-(t-butyylioksikarbonyyli)-β-alaniinin metyyliesterin (4,06 g, 20 mmol) liuos tetra-hydrofuraanissa (25 ml) 20 minuutin aikana. Sekoita vielä 15 30 minuuttia. Lisää allyylibromidia (1,72 ml, 20 mmol) ja anna seoksen lämmetä huoneenlämpötilaan sekoittaen, kunnes se on homogeenista. Jäähdytä -78 °C:seen ja lämmitä hitaasti -20 °C:seen 30 minuutin aikana. Kaada 5-%:iseen vetykloridihappoon, uuta eetteriin, pese kylläisellä nat-20 riumkloridilla, kuivaa ja väkevöi, jolloin saadaan 5,01 g keltaista öljyä. Puhdista silikageelikromatografiällä (25 % etyyliasetaattia/heksaania), jolloin saadaan 4,2 g (87 %) otsikon yhdisteen raseemista seosta kirkkaana värittömänä öljynä.

25 Vaihe b: 2-(2-propenyyli)-β-alaniinin metyylies teri

Liuota N-(t-butyylioksikarbonyyli)-2-(2-propenyyli )-β-alaniinin metyyliesteriä (5,6 g, 23,0 mmol) metylee-nikloridiin (25 ml) ja käsittele trifluorietikkahapolla 30 (15 ml). Sekoita kolme tuntia ja poista haihtuvat aineet tyhjössä. Käsittele jäännöstä vedellä, tee emäksiseksi natriumhydroksidilla (1,0 g, 25 mmol) ja uuta etyyliasetaatilla. Erota orgaaninen faasi ja kuivaa (Na2S04). Haihduta, jolloin saadaan 4,0 g otsikon yhdistettä öljynä 35 etyyliasetaatissa.

36 95255

Vaihe c: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso- indol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(2-propenyyli)-β-alaniinin metyyliesteri

Sekoita liuosta, jonka muodostavat N-ftaloyyli-5 (S)-fenyylialaniini (7,5 g, 25 mmol) ja EEDQ (7,0 g, 28 mmol) metyleenikloridissa (50 ml). Lisää raakatuote-2-(2-propenyyli)-β-alaniinin metyyliesteri (4,0 g, 23 mmol) ja sekoita typpiatmosfäärissä 2,5 vuorokautta. Kaada etyyliasetaattiin, pese 10-%:isella kloorivetyhapolla (2 x 10 200 ml) ja kylläisellä natriumvetykarbonaatilla. Kuivaa (MgS04) ja väkevöi. Käsittele jäännöstä etyyliasetaatilla, laimenna heksaanilla ja anna kiteytyä. Poista kiinteä aine, jolloin saadaan 5,33 g (55 %) diastereomeerisiä otsikon yhdisteitä valkoisena jauheena; s.p. 133 - 135 °C.

15 Analyysi, laskettu yhdisteelle ^24^24^2^5- C 68,56; H 5,75; N 6,66;

Todettu: C 68,32; H 5,81; N 6,47.

Vaihe dx: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso- indol-2-yyli)]-(S)-fenyylialanyyli]-2-(2-oksoetyyli)-β-20 alaniinin metyyliesterit

Liuota diastereomeeriset (S)-N-[2-(1,3-dihydro- 1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]- 2-(2-propenyyli)-β-alaniinin metyyliesterit (4,2 g, 10 mmol) metyleenikloridiin (150 ml) ja metanoliin 25 (25 ml). Jäähdytä -70 °C:seen ja käsittele otsonilla, kun- * nes sininen väri jää pyvyväksi. Lisää dimetyylisulfidia (7 ml) ja pyridiiniä (2 ml) ja anna liuoksen lämmetä 25 °C:seen, sekoita sitten 18 tuntia. Laimenna liuos me-tyleenikloridilla, pese 10-%:isella kloorivetyhapolla, 30 kuivaa (MgS04) ja väkevöi, jolloin saadaan 4,5 g otsikon yhdistettä vaahtona.

Il 37 95255

Kaavio A, vaihe d: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fenyylipropyyli-1,2,3-trihydro-3-pyrrolikarboksyylihapon metyyliesterit

Sekoita(S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-5 dol-2-yyli)]-(S)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(2-oksoetyy- li)-6-alaniinin metyyliesterit (4,5 g), metyleenikloridi (150 ml) ja trifluorietikkahappo (0,5 ml). Refluksoi 8 tuntia ja puhdista silikageelikromatografiällä (50 % etyy-liasetaattia/heksaania), jolloin saadaan 3,5 g (87 %) ot-10 sikon yhdistettä.

Kaavio A, vaihe e: [6a(R*),llbö]-6-[(S)-(1,3-di- hydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-1,2,3,5,6,7, llb-hep-tahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-karbok-syylihapon metyyliesteri ja [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1,3-di-15 hydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1,2,3,5,6,7, llb-hep-tahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2] bentsatsepiini-2( S )-karbok-syylihapon metyyliesteri

Laita trifluorimetaanisulfonihappoa (10 ml) astiaan typpiatmosfääriin 25 °C:ssa. Lisää (S)-N-[2-(1,3-20 dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fenyyli-propyyli-1,2,3-trihydro-3-pyrrolikarboksyylihaponmetyyli-estereitä (2,5 g, 6 mmol) metyleenikloridissa (10 ml). Sekoita seosta 6 tuntia, kaada veteen ja uuta etyyliasetaatilla. Pese hyvin vedellä, kuivaa (MgS04) ja väkevöi, 25 jolloin saadaan 2,3 g vaahtoa. Käsittelemällä (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fe-nyylipropyyli-1,2,3-trihydro-3-pyrrolikarboksyylihapon metyyliesteriä (1,0 g, edellä esitetyn kokeen toisesta erästä) trifluorimetaanisulfonihapolla (5 ml) metyleeni-30 kloridissa (5 ml), sekoittamalla typpiatmosfäärissä 6 tuntia ja käsittelemällä kuten edellä on kuvattu voidaan aikaansaada vielä 1,0 g vaahtoa.

Yhdistä molemmat tuotteet, väkevöi ja anna seistä 2 vuorokautta. Ota raakatuote talteen etyyliasetaattiin, 35 jolloin muodostuu kiinteä aine. Laimenna heksaanilla ja 38 95255 suodata, jolloin saadaan 1,85 g kiinteää ainetta. Uudel-leenkiteytä (50 ml kuumaa etyyliasetaattia 1:1-suhteiseen etyyliasetaatin ja heksaanin seokseen), jolloin saadaan 1,37 g 2(R)-karboksyylihappoa, otsikon yhdistettä, värit-5 töminä neuloina; sp. 199 - 200 °C.

Analyysi, laskettu yhdisteelle C23H20N205: C 68,31; H 4,98; N 6,93;

Todettu: C 68,01; H 5,06; N 6,80.

Puhdista emäliuokset kromatografialla, jolloin 10 saadaan 2(S)-karboksyylihappoa, otsikon yhdistettä.

Kaavio A, vaihe f: [6a(R*),llbö]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1,3-dihydro-l,3-15 diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5- oksopyrrolo[2,l-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteri (1,37 g, 3,38 mmol), hydratsiinimonohydraat-ti (389 mg, 7,7 mmol) ja metanoli (38 ml) typpiatmosfäärissä. Kuumenna palautusjäähdyttäen 5 tuntia. Jäähdytä 20 ympäristön lämpötilaan ja suodata ftaloyylihydratsidin poistamiseksi. Haihduta suodos tyhjössä jäännökseksi ja lietä kloroformiin (60 ml). Poista liukenematon ftaloyyli-hydratsidi suodattamalla ja pese kloroformilla (4 x 21 ml). Pese suodos vedellä (4 x 50 ml), kuivaa (MgS04) ja 25 suodata. Haihduta suodoa, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe g: [6a( R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2( S )-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli jamino] -1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][ 2 ] -bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteri 30 Sekoita (S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihappo (3,6 g, 17 mmol) ja [6a(R*),llbS]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat- sepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteri (4,64 g, 17 mmol) metyleenikloridissa (50 ml). Lisää EEDQ:ta 35 (4,3 g, 17 mmol). Sekoita 18 tuntia ympäristön lämpötilas- 11 39 95255 sa argonatmosfäärissä. Uuta 2 N vetykloridihapolla, erota orgaaninen faasi, pese vedellä, sitten kylläisellä nat-riumvetykarbonaatilla. Kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-5 sikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe h: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2( S)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-kar-boksyylihapon metyyliesteri 10 Liuota [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli- oksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro- 5-oksopyrrolo[2,l-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyyliha-pon metyyliesteriä (7,87 g, 17,4 mmol) etanoliin (75 ml) ja tetrahydrofuraaniin (40 ml) ja lisää litiumhydroksidia 15 (22 ml 1 M liuosta, 22 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 tun tia. Poista liuotin tyhjössä 35 °C:ssa ja jakouuta jäännöstä etyyliasetaatilla ja IN kloorivetyhapolla. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä ja käsittele diatsometaanilla. Puhdista silikageelikromato-20 grafialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe i: [6a(R*), llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [ 2] bent sat sepiini-2( R) -kar-boksyylihapon metyyliesteri 25 Sekoita DIAD:a (3,4 g, 16,3 mmol), trifenyylifos- fiinia (4,28 g, 16,3 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (200 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia typ-piatmosfäärissä. Lisää liuos, jonka muodostavat 16a(R* ), llbö] -6- [ (S)-(l-okso-2( S ) -hydroksi-3-fenyylipro-30 pyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo- [2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyylies- « teri (6,7 g, 16,3 mmol) ja tiolietikkahappo (1,75 ml, 24,5 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (200 ml). Sekoita 0 °C:ssa 30 minuuttia, anna sitten lämmetä ympä-35 ristön lämpötilaan. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja 40 95255 puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 12 [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-5 propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-oksopyrrolo- [2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon valmistus

Liuota [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro- 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyyliha-10 pon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfäärissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-15 ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti.

Ota saatu sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyhjö-eksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön aikana, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 13 20 [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3- fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon valmistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3- 25 fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso- pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2( R)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuosta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen 30 sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieet-teriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikromatograf iällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Ij 95255 41

Esimerkki 14 [6a(R*),llbfl]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon 5 bentsyyliesterin valmistus

Liuotat 6a( R*), HbS]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihappoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kuivaa 10 vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleenikloridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typ-piatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 15 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 20 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 15 [6a(R* ), llbfl] - 6- [ (S) - (l-okso-2 (R) -tio-3-fenyyli-25 propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo- (2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon bentsyyli-esterin valmistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-30 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyyli hapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä meta-nolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografialla, jolloin saadaan ot-35 sikon yhdiste.

42 95255

Esimerkki 16 [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon me-5 tyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe f: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l,3-dihydro-l,3-10 diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5- oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 21; kaavio A, vaihe e) (1,37 g, 3,38 mmol), hydratsiinimonohydraattia (389 mg, 7,7 mmol) ja metanolia (38 ml) typpiatmosfäärissä. Kuumen-15 na palautusjäähdyttäen 5 tuntia. Jäähdytä ympäristön läm pötilaan ja suodata ftaloyylihydratsidin poistamiseksi. Haihduta suodos tyhjössä jäännökseksi ja lietä kloroformiin (60 ml). Poista liukenematon ftaloyylihydratsidi suodattamalla ja pese kloroformilla (4 x 21 ml). Pese suodos 20 vedellä (4 x 50 ml), kuivaa (MgS0<) ja suodata. Haihduta suodos, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe g: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2( S )-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]-25 bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita(S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihappoa (3,6 g, 17 mmol) ja [6a(R*),llbB]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (4,64 g, 30 17 mmol) metyleenikloridiin (50 ml). Lisää EEDQ:ta (4,3 g, 17 mmol). Sekoita 18 tuntia ympäristön lämpötilassa argon-atmosfäärissä. Uuta 2 N vetykloridihapolla, erota orgaaninen faasi, pese vedellä, sitten kylläisellä natriumvety-karbonaatilla. Kuivaa (MgS0„), väkevöi tyhjössä ja puhdista

V

43 95255 silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe h: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2( S)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,11b-5 heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2( S )-kar-boksyylihapon metyyliesteri

Liuota[6a(R*),llbfi]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-oksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro- 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyyli-10 hapon metyyliesteriä (7,87 g, 17,4 mmol) etanoliin (75 ml) ja tetrahydrofuraaniin (40 ml) ja lisää litiumhydroksidia (22 ml 1 M liuosta, 22 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 tuntia. Poista liuotin tyhjössä 35 °C:ssa ja jakouuta jäännöstä etyyliasetaatilla ja IN vetykloridihapolla. Erota 15 orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä ja käsittele diatsometaanilla. Puhdista silikageelikromato-grafialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe i: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7,11b-20 heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2] bentsatsepiini-2( S )-kar- boksyylihapon metyyliesteri

Sekoita DIAD:a (3,4 g, 16,3 mmol), trifenyylifos-fiinia (4,28 g, 16,3 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (200 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia typ-' 25 piatmosfäärissä. Lisää liuos, jonka muodostavat [6a( R* ), llbB] - 6-[(S)-(l-okso-2(S) - hydroksi-3-fenyylipro-pyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteri (6,7 g, 16,3 mmol) ja tiolietikkahappo (1,75 ml, 30 24,5 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (200 ml).

. Sekoita 0 °C:ssa 30 minuuttia, anna sitten lämmetä ympä ristön lämpötilaan. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

44 95255

Esimerkki 17 [6a(R* ),llb8]-6-[(S)- (l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon valmistus 5 Liuotat 6a(R*),llbS]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli- tio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin 10 (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfää rissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 mltksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti. Ota saatu sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyhjö-15 eksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 18 [6a(R*),llbfi]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-20 pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihaponval- mistus

Sekoita [6a(R*),llbS]-6-((S)-(1-okso-2(R)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihappoa 25 (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kui-30 vaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-matografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Il 45 95255

Esimerkki 19 [6a(R* ), llbB] -6-[(S)-( l-okso-2 (R) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon 5 bentsyyliesterin valmistus

Liuotat 6a(R*),llbö]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2( S )-karboksyylihappoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kuivaa 10 vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleenikloridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typ-piatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 15 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 20 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 20 [6a(R*),llbfi]-6-[(S)-1(l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-25 propyyli)amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[- 2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihaponbentsyylies-terin valmistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3, 5,6,7, llb-heptahydro-30 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyyliha- . pon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä metano- lipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografialla, jolloin saadaan ot-35 sikon yhdiste.

46 95255

Esimerkki 21 [6a(R*),llbfl]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon me-5 tyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe j: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso- 2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-4-oksopyrrolo [2,1-a] [2] bent sat sepi ini - 2 (R) -kar-boksyylihapon metyyliesteri 10 Liuota[6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-hydroksi- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-ok-sopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 21; kaavio A, vaihe h) (41 mg, 0,1 mmol), trifenyylifosfiinia (39 mg, 0,15 mmol) 15 ja etikkahappoa (8,7 μΐ, 0,15 mmol) vedettömään tetrahyd-rofuraaniin (3 ml). Käsittele DIADtlla (32 mg, 0,15 mmol) 0 °C:ssa. Sekoita 5 minuuttia 0 0C:ssa, anna sitten sekoittua ympäristön lämpötilassa 45 minuuttia. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikro-20 matografiällä, jolloin saadaan [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso-2(R)-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][ 2 ] -bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteri.

Liuotat6a(R*),llbfi]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-25 oksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro- 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (262 mg, 0,58 mmol) metanoliin (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja lisää litiumhydroksidia (0,8 ml IM liuosta, 0,8 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 30 tuntia ja poista liuotin tyhjössä. Tee happamaksi ja jako-uuta metyleenikloridilla ja vedellä. Erota orgaaninen faa- « · si, kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikagee-likromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

11 47 95255

Kaavio A, vaihe k: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli ) amino] -1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-kar-boksyylihapon metyyliesteri 5 Sekoita DIAD:a (31 mg, 0,15 mmol), trifenyylifos- fiinia (39 mg, 0,16 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (2 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia argon-atmosfäärissä. Lisää [6a(R*),llbS]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-hepta-10 hydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-karbok- syylihapon metyyliesteriä (41 mg, 0,1 mmol) kiinteänä aineena, lisää sitten välittömästi tiolietikkahappoa (11 μΐ, 0,15 mmol). Anna reaktioseoksen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoita yön yli. Poista liuotin tyhjössä ja puh-15 dista jäännös silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 22 [6a(R* ), llbB] -6- [ (S) - (l-okso-2 (S)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo-20 [2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon valmistus

Liuota[6a(R*),llb3]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6, 7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on 25 poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfäärissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 mlrksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti. 30 Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyh-, jöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jol loin saadaan otsikon yhdiste.

48 95255

Esimerkki 23 [6a(R*), llbB] -6- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihaponval-5 mistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos-10 ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgSO*) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-15 matografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 24 [6a(R* ),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo [ 2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon 20 bentsyyliesterin valmistus

Liuota[6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2( R)-karboksyylihappoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kuivaa 25 vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleenikloridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typ-piatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 30 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 35 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

49 95255

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 25 [6a(R*), llbB] -6-[ (S) - (l-okso-2 (S) -tio-3-fenyyli-5 propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon bentsyyli-esterin valmistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-10 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(R)-karboksyylihapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä metano-lipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-15 sikon yhdiste.

Esimerkki 26 [6a(R* ), llbB] -6- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon me-20 tyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe j: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [ 2] bentsatsepiini-2( S ) -karboksyylihapon metyyliesteri 25 Liuotat 6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-hydroksi- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-ok-sopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 26; kaavio A, vaihe h) (41 mg, 0,1 mmol), trifenyylifosfiinia (39 mg, 0,15 mmol) 30 ja etikkahappoa (8,7 μΐ, 0,15 mmol) vedettömään tetrahyd- rofuraaniin (3 ml). Käsittele DIADrlla (32 mg, 0,15 mmol) 0 °C:ssa. Sekoita 5 minuuttia 0 °C:ssa, anna sitten sekoittua ympäristön lämpötilassa 45 minuuttia. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikro-35 matografiällä, jolloin saadaan [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1- so - 95255 okso-2 ( R)-asetyylioksi-3 - fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,1lb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2] -bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteri.

Liuotat6a(R*),llbö]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-5 oksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,l-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (262 mg, 0,58 mmol) metanoliin (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja lisää litiumhydroksidia (0,8 ml IM liuosta, 0,8 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 10 tuntia ja poista liuotin tyhjössä. Tee happamaksi ja jako-uuta metyleenikloridilla ja vedellä. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikagee-likromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe k: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(1-okso- 15 2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3, 5,6,7,1 lb- heptahydro-5-oksopyrrolo [2, 1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-kar-boksyylihapon metyyliesteri

Sekoita DIAD:a (31 mg, 0,15 mmol), trifenyylifos-fiinia (39 mg, 0,16 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania 20 (2 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia argon- atmosfäärissä. Lisää [6a(R*),llbfi]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli Jamino] -1,2,3,5,6,7, llb-hepta-hydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2] bentsatsepiini-2( S )-karboksyylihapon metyyliesteriä (41 mg, 0,1 mmol) kiinteänä ai-25 neena, lisää sitten välittömästi tiolietikkahappoa (11 μΐ, 0,15 mmol). Anna reaktioseoksen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoita yön yli. Poista liuotin tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

30 Esimerkki 27 v [6a(R*),llbB]-6-[(S)- (1-okso-2(S)-tio-3-fenyyli- propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon valmistus

Liuotat 6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-35 tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-

II

„ 95255 oi oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepi ini-2(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfää-5 rissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti. Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyh-jöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jol-10 loin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 28 [6a(R* ), llb8] -6- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihaponvai-15 mistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2( R)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos-20 ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-25 matografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 29 [6a(R*), llbB] -6- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo [2,1-a] [ 2 ] bent sat sepi ini -2 (S) -karboksyy lihapon 30 bentsyyliesterin valmistus

Liuotat6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsatsepiini-2( S )-karboksyylihappoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kuivaa 35 vedettömällä MgS04:11a. Suodata ja pese metyleenikloridilla 52 95255 (3 χ 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typ-piatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 5 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 10 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml). Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 30 [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-15 propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo-[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon bentsyyli-esterin valmistus

Sekoita [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,5,5,7, llb-heptahydro-20 5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-2(S)-karboksyylihapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä meta-nolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-25 sikon yhdiste.

Esimerkki 31 [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon 30 metyyliesterin valmistus

Vaihe d2: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso-indol-2-yyli )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -2-( 3-oksopropyy-li)-B-alaniinin metyyliesterien valmistus

Sekoita(S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-35 dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(2-propenyyli)-β-

II

53 95255 alaniinin metyyliesteriä (4,2 g, 10 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (5 ml) typpiatmosfäärissä. Lisää ti-poittain 9-BBN:n liuos (20 ml 0,5 M liuosta tetrahydrofuraanissa, 10 mmol). Sekoita, kunnes hydroboraatio on men-5 nyt loppuun. Lisää 30 % vetyperoksidia (0,2 ml) ja 10 N natriumhydroksidia (2,0 ml), eristä sitten alkoholi.

Sekoita oksalyylikloridia (2 ml, 20 mmol) ja mety-leenikloridia (40 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Jäähdytä alle -50 °C:seen ja lisää metyylisulfoksidin (1,6 g, 10 20 mmol) liuos metyleenikloridissa (1,5 ml). Sekoita 15 minuuttia ja lisää edellä mainitun alkoholin (10 mmol) liuos metyleenikloridissa pitäen astian lämpötila alle -50 °C:ssa 30 minuuttia. Lisää trietyyliamiinia (8 ml, 60 mmol) 30 minuutin aikana. Sekoita samalla lämmittäen 15 0 °C:seen, pysäytä reaktio vedellä, uuta etyyliasetaatilla ja kuivaa (MgS04). Puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan diastereomeeriset otsikon yhdisteet.

Kaavio A, vaihe d: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fenyylipropyyli-l,2,3,4-20 tetrahydro-3-pyridiinikarboksyylihapon metyyliesterit

Sekoita(S)-N-[2 —(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin-dol-2-yyli ) ] -( S )-l-okso-3-fenyylipropyyli] -2- ( 3-oksopro-pyyli)-β-alaniinin metyyliesterit (4,5 g), metyleeniklo-ridia (150 ml) ja trifluorietikkahappoa (0,5 ml). Refluk-25 soi 8 tuntia ja puhdista silikageelikromatografiällä (50 % etyyliasetaattia/heksaania), jolloin saadaan 3,5 g (87 %) diastereomeerisiä otsikon yhdisteitä.

Kaavio A, vaihe e: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1,3-di hydro-l , 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1,2,3,4, 6,7, 8,12b-30 oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-kar-boksyylihapon metyyliesteri ja [7a(R*),12bö]-7-[(S)-(1,3-dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli )]-1,2,3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( S ) -kar-boksyylihapon metyyliesteri 54 95255

Laita trifluorimetaanisulfonihappoa (10 ml) astiaan typpiatmosfääriin 25 °C:ssa. Lisää (S)-N-[2—(1,3-dihydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)]-l-okso-3-fenyyli-propyyli-1,2,3,4-tetrahydro-3-pyridiinikarboksyylihapon 5 metyyliesteriä (2,5 g, 6 mmol) metyleenikloridissa (10 ml). Sekoita seosta 6 tuntia, kunnes reaktio on mennyt loppuun. Kaada veteen ja uuta etyyliasetaatilla. Pese hyvin vedellä, kuivaa (MgS04) ja väkevöi, jolloin saadaan diastereomeeriset otsikon yhdisteet. Erota HPLCrllä.

10 Kaavio A, vaihe f: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-amino]- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1,3-dihydro-l,3-di-okso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1,2,3,4, 6, 7,8,12b-oktahydro-6-15 oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (1,37 g, 3,38 mmol), hydratsiinimonohyd-raattia (389 mg, 7,7 mmol) ja metanolia (38 ml) typpiatmosf äärissä. Kuumenna palautusjäähdyttäen 5 tuntia. Jäähdytä ympäristön lämpötilaan ja suodata ftaloyylihydratsi-20 din poistamiseksi. Haihduta suodos tyhjössä jäännökseksi ja lietä kloroformiin (60 ml). Poista liukenematon fta-loyylihydratsidi suodattamalla ja pese kloroformilla (4 x 200 ml). Pese suodos vedellä (4 x 50 ml), kuivaa (MgS04) ja suodata. Haihduta suodos, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

25 Kaavio A, vaihe g: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1-okso- 2( S )-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita(S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihappoa 30 (3,6 g, 17 mmol) ja [7a(R*),12bB]-7-[(S)-amino]- | 1,2,3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat- sepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (4,64 g, 17 mmol) metyleenikloridissa (50 ml). Lisää EEDQ:ta (4,3 g, 17 mmol). Sekoita 18 tuntia ympäristön lämpötilas-35 sa argonatmosfäärissä. Uuta 2 N vetykloridihapolla, erota

II

55 95255 orgaaninen faasi, pese vedellä, sitten kylläisellä nat-riumvetykarbonaatilla. Kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

5 Kaavio A, vaihe h: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1-okso- 2(S)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido [2,1-a] [2] bent sat sepiini -3 (R) -kar-boksyylihapon metyyliesteri

Liuota [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-10 oksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (7,87 g, 17,4 mmol) etanoliin (75 ml) ja tetrahydrofuraaniin (40 ml) ja lisää litiumhydroksidia (22 ml 1 M liuosta, 22 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 tun-15 tia. Poista liuotin tyhjössä 35 °C:ssa ja jakouuta jäännöstä etyyliasetaatilla ja 1 N kloorivetyhapolla. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikromatografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

20 Kaavio A, vaihe i: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1-okso- 2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino]-1,2,3,4, 6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita DIAD:a (3,4 g, 16,3 mmol), trifenyylifos-25 fiiniä (4,28 g, 16,3 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (200 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia typ-piatmosfäärissä. Lisää liuos, jonka muodostavat [7a(R*), 12bö] -7-[ (S)-(l-okso-2( S)-hydroksi-3-fenyylipro-pyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-30 [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyylies- , teri (6,7 g, 16,3 mmol) ja tiolietikkahappo (1,75 ml, 24,5 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (200 ml). Sekoita 0 °C:ssa 30 minuuttia, anna sitten lämmetä ympäristön lämpötilaan. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja 56 95255 puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 32 [7a(R*), 12b8] -7- [ (S) - (l-okso-2 (R) -tio-3-fenyyli-5 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon valmistus

Liuotat7a(R*),12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a] [ 2] bentsatsepiini-3 (R) -karboksyylihapon 10 metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfää-rissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-15 ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti.

Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyh-jöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 33 20 [7a(R* ), 12b8] -7- [ (S) - (l-okso-2 (R) -asetyylitio-3- fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon valmistus

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-25 fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8, 12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[ 2,1-a][2]bentsatsepi ini-3(R)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuosta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoit-30 taen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikromatograf iällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Il 57 95255

Esimerkki 34 [7a(R*), 12b8] - 7- [ (S) - (l-okso-2 (R) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon 5 bentsyyliesterin valmistus

Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihap-poa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kui-10 vaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleeniklo-ridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 15 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 20 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 35 [7o(R* ) ,12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-25 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon bentsyyliesterin valmistus

Sekoita [7a(R*),12bS]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8 12b-oktahyd-30 ro-6-oksopyrido[,21-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyyli hapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä meta-nolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-35 sikon yhdiste.

58 95255

Esimerkki 36 [7a(R*), 12b8] -7 - [ (S) - (l-okso-2 (R) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 5 metyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe f: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-amino]- 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3 ( S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1,3-dihydro-l,3-di-10 okso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1,2,3,4,6,7,8, 12b-oktahydro-6- oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( S )-karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 41; kaavio A, vaihe e) (1,37 g, 3,38 mmol), hydratsiinimonohydraattia (389 mg, 7,7 mmol) ja metanolia (38 ml) typpiatmosfäärissä. Kuumen-15 na palautusjäähdyttäen 5 tuntia. Jäähdytä ympäristön lämpötilaan ja suodata ftaloyylihydratsidin poistamiseksi. Haihduta suodos tyhjössä jäännökseksi ja lietä kloroformiin (60 ml). Poista liukenematon ftaloyylihydratsidi suodattamalla ja pese kloroformilla (4 x 20 ml). Pese suodos 20 vedellä (4 x 50 ml), kuivaa (MgS04) ja suodata. Haihduta suodos, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe g: [7a(R*),12bfi]—7—[(S) — (1-okso- 2(S)-asetyylioksi-3(S ) - fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyridof2,1-a] [2]bentsat-25 sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita (S)-3-fenyyli-2-asetyylioksipropionihap-poa (3,6 g, 17 mmol) ja [7a(R*),12bB]-7-[(S)-amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (4,64 g, 30 17 mmol) metyleenikloridiin (50 ml). Lisää EEDQ:ta (4,3 g, : 17 mmol). Sekoita 18 tuntia ympäristön lämpötilassa argon- atmosfäärissä. Uuta 2 N vetykloridihapolla, erota orgaaninen faasi, pese vedellä, sitten kylläisellä natriumvety-karbonaatilla. Kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista il 59 95255 silikageelikromatografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe h: [7a(R*),12bS]-7-[(S)-(1-okso- 2(S)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-5 oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(S)-kar-boksyylihapon metyyliesteri

Liuota[7a(R*),12b6]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-oksi-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- 6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 10 metyyliesteriä (7,87 g, 17,4 mmol) etanoliin (75 ml) ja tetrahydrofuraaniin (40 ml) ja lisää litiumhydroksidia (22 ml 1 M liuosta, 22 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 tuntia. Poista liuotin tyhjössä 35 °C:ssa ja jakouuta jäännöstä etyyliasetaatilla ja IN vetykloridihapolla. Erota 15 orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikromatografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe i: [7a(R*),12bS]-7-[(S)-(1-okso- 2( R ) - asetyylitio-3-fenyylipropyyli Jamino] -20 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat- sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita DIAD:a (3,4 g, 16,3 mmol), trifenyylifos-fiinia (4,28 g, 16,3 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (200 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia typ-25 piatmosfäärissä. Lisää liuos, jonka muodostavat [ 7a( R* ), 12bB] - 7-[(S)-(l-okso-2(S) -hydroksi-3-fenyylipro-pyyli )amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri (6,7 g, 16,3 mmol) ja tiolietikkahappo (1,75 ml, 30 24,5 mmol) vedettömässä tetrahydrofuraanissa (200 ml).

: Sekoita 0 °C:ssa 30 minuuttia, anna sitten lämmetä ympä ristön lämpötilaan. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

60 95255

Esimerkki 37 [7a(R*),12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon valmistus 5 Liuota[7a(R*),12bS]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli- tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin 10 (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfää rissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti. Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyh-15 jöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 38 [7a(R* ),12b8]-7-[(S)- (l-okso-2(R)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-20 sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon valmistus

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappoa ··; 25 (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kui-30 vaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-matografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

ti β1 95255

Esimerkki 39 [7a(R*), 12b8] -7- [ (S) - (l-okso-2 (R) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 5 bentsyyliesterin valmistus

Liuotat7a(R*),12bö]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihap-poa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kui-10 vaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleeniklori-dilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 15 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 20 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 40 [7a(R*), 12b8] -7 - [ (S) - (l-okso-2 (R) -tio-3-fenyyli-25 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon bentsyyliesterin valmistus

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8 12b-oktahyd-30 ro-6-oksopyrido[,21-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyyli hapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä meta-nolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-35 sikon yhdiste.

62 95255

Esimerkki 41 [7a(R*) ,12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon 5 metyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe j: [7a(R*),12bfi]-7-[(S)-(1-okso- 2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-kar-boksyylihapon metyyliesteri 10 Liuota [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(lokso-2(S)-hydroksi- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( R)-karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 41; kaavio A, vaihe h) (41 mg, 0,1 mmol), trifenyylifosfiinia (39 mg, 0,15 mmol) 15 ja etikkahappoa (8,7 μΐ, 0,15 mmol) vedettömään tetrahyd-rofuraaniin (3 ml). Käsittele DlADclla (32 mg, 0,15 mmol) 0 °C;ssa. Sekoita 5 minuuttia 0 °C:ssa, anna sitten sekoittua ympäristön lämpötilassa 45 minuuttia. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikro-20 matografiällä, jolloin saadaan [7a(R*),12b6]-7-[(S)-(1- okso-2( R)-asetyylioksi-3-fenyylipropyyli)araino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1- a][2]-bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteri.

Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-25 oksi-3-fenyylipropyyli )amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteriä ( 262 mg, 0,58 mmol) metanoliin (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja lisää litiumhydroksidia (0,8 ml IM liuosta, 0,8 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 30 tuntia ja poista liuotin tyhjössä. Tee happamaksi ja jako- . uuta metyleenikloridilla ja vedellä. Erota orgaaninen faa- « si, kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikagee-likromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Il 63 95255

Kaavio A, vaihe k: [7α(R*),12bfi]-7-[(S)-(1-okso- 2( S ) - asetyylitio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bents-atsepiini-3(R)-karboksyylihapon metyyliesteri 5 Sekoita DIADra (31 mg, 0,15 mmol), trifenyylifos- fiinia (39 mg, 0,16 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania (2 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia argon-atmosfäärissä. Lisää [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-10 hydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyy- lihapon metyyliesteriä (41 mg, 0,1 mmol) kiinteänä aineena, lisää sitten välittömästi tiolietikkahappoa (11 μΐ, 0,15 mmol). Anna reaktioseoksen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoita yön yli. Poista liuotin tyhjössä ja puh-15 dista jäännös silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 42 [7a(R* ), 12bB] -7- [ (S) - (l-okso-2 (S) -tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-20 [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon valmistus

Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido [2,1-a] [2] bentsatsepiini-3 ( R) -karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on 25 poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfäärissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vetyklo-ridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti.

30 Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyh-jöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 °C:ssa yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

64 95255

Esimerkki 43 [7a(R*), 12b8] -7- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli) amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon 5 valmistus

Sekoita [7a(R*),12bS]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli )amino) -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos-10 ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-15 matografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 44 [7a(R* ),12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon 20 bentsyyliesterin valmistus

Liuota[7a(R*),12b0]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihap-poa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kui-. 25 vaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleeniklori- dilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 30 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol).

; Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia.

Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 35 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml).

Il 65 95255

Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 45 [7a(R*), 12b8] -7- [ (S) - (l-okso-2 (S) -tio-3-fenyyli-5 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyylihapon bentsyyli-esterin valmistus

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[ ( S)-(l-okso-2(S)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8 12b-oktahyd-10 ro-6-oksopyrido[,21-a][2]bentsatsepiini-3(R)-karboksyyli hapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä meta-nolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan ot-15 sikon yhdiste.

Esimerkki 46 [7a(R* ) , 12bB] - 7- [ (S) - (l-okso-2 (S) -asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 20 metyyliesterin valmistus

Kaavio A, vaihe j: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1-okso- 2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[ 2, 1-a] [ 2 ] bentsatsepiini-3 ( S ) -karboksyylihapon metyyliesteri 25 Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-hydroksi- 3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8, 12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2] bentsatsepiini-3( S ) -karboksyylihapon metyyliesteriä (katso esimerkki 46; kaavio A, vaihe h) (41 mg, 0,1 mmol), trifenyylifosfiinia (39 mg, 0,15 mmol) 30 ja etikkahappoa (8,7 μΐ, 0,15 mmol) vedettömään tetrahyd-: rofuraaniin (3 ml). Käsittele DIAD:11a (32 mg, 0,15 mmol) 0 °C:ssa. Sekoita 5 minuuttia 0 °C:ssa, anna sitten sekoittua ympäristön lämpötilassa 45 minuuttia. Poista haihtuvat aineet tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikro-35 matografiällä, jolloin saadaan [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1- .. 95255 66 okso-2(R)-asetyylioksi-3-fenyy1ipropyy1i)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][ 2 ] -bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri.

Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-asetyyli-5 oksi-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( S ) -karboksyylihapon metyyliesteriä (262 mg, 0,58 mmol) metanoliin (5 ml) ja tetrahydrofuraaniin (5 ml) ja lisää litiumhydroksidia (0,8 ml IM liuosta, 0,8 mmol). Sekoita reaktioseosta 2 10 tuntia ja poista liuotin tyhjössä. Tee happamaksi ja jako-uuta metyleenikloridilla ja vedellä. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04), väkevöi tyhjössä ja puhdista silikagee-likromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Kaavio A, vaihe k: [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(1-okso- 15 2(S )-asetyylitio-3-fenyylipropyyli ) a m i n o ] - 1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Sekoita DIAD:a (31 mg, 0,15 mmol), trifenyylifos-fiinia (39 mg, 0,16 mmol) ja vedetöntä tetrahydrofuraania 20 (2 ml). Jäähdytä 0 °C:seen ja sekoita 30 minuuttia argon- atmosfäärissä. Lisää [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(R)-hydroksi-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-okta-hydro-6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3( S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (41 mg, 0,1 mmol) kiinteänä ainee-25 na, lisää sitten välittömästi tiolietikkahappoa (11 μΐ, 0,15 mmol). Anna reaktioseoksen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoita yön yli. Poista liuotin tyhjössä ja puhdista jäännös silikageelikromatografiällä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

30 Esimerkki 47 [7a(R*),12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido-[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon valmistus Liuota[7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-35 tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro- li 67 95255 6-oksopyrido[2,1-a] [2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteriä (56 mg, 0,12 mmol) metanoliin, josta on poistettu happi (3 ml), sekä 1 N litiumhydroksidiin (0,50 ml, 0,50 mmol). Sekoita 30 minuuttia argonatmosfää-5 rissä ympäristön lämpötilassa. Pienennä tilavuus 1,5 ml:ksi tyhjössä, lisää sitten tipoittain 2 N vety-kloridihapon liuokseen (2 ml), jota sekoitetaan voimakkaasti. Ota muodostunut sakka talteen, pese vedellä ja kuivaa tyhjöeksikkaattorissa 1 tunti. Kuivaa 35 cC:ssa 10 yön yli, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 48 (7o(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 15 valmistus

Sekoita [7a(R*),12bfi]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli )amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappoa (51 mg, 0,12 mmol) ja rikkihappoa (0,3 ml 10-%:ista liuos-20 ta etikkahapossa). Lisää etikkahappoanhydridiä (11 mg, 0,12 mmol) 10 minuutin aikana. Lämmitä 90 °C:seen sekoittaen 45 minuuttia. Anna jäähtyä, kaada dietyylieetteriin ja pese vedellä kolme kertaa. Erota orgaaninen faasi, kuivaa (MgS04) ja väkevöi tyhjössä. Puhdista silikageelikro-25 matografialla, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 49 [7a(R* ) , 12b8]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-ok-sopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon 30 bentsyyliesterin valmistus

Liuota[7a(R*),12b6]-7-[ (S)-(l-okso-2(S)-asetyyli-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihappoa (2,08 g, 4,33 mmol) metyleenikloridiin (25 ml) ja kui-35 vaa vedettömällä MgS04:lla. Suodata ja pese metyleeniklo- 68 95255 ridilla (3 x 200 ml). Haihduta tyhjössä jäännökseksi. Liuota jäännös vedettömään dimetyyliformamidiin (25 ml) ja laita typpiatmosfääriin. Lisää cesiumkarbonaattia (1,65 g, 5,0 mmol) yhtenä eränä. Sekoita 45 minuuttia ympäristön 5 lämpötilassa. Lisää bentsyylibromidia (550 mg, 5,0 mmol). Sekoita saatua seosta ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Pysäytä reaktio etyyliasetaatilla (50 ml) ja vedellä (50 ml). Erota orgaaninen faasi ja pese vedellä (7 x 50 ml), 1/4 kylläisellä kaliumvetykarbonaatilla (50 ml), 10 vedellä (50 ml) ja kylläisellä natriumkloridilla (50 ml). Kuivaa (MgS04), suodata ja haihduta tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Esimerkki 50 [7a(R*), 121bB]-7-[ (S)-(l-okso-2(S)-tio-3-fenyyli-15 propyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-oksopyrido- [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon bentsyyli-esterin valmistus

Sekoita [7a(R*),12bB]-7-[(S)-(l-okso-2(S)-asetyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahyd-20 ro-6-oksopyr-x7*x-x-ido[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-kar- boksyylihapon bentsyyliesteriä (1,87 g, 4 mmol) ja kylläistä metanolipitoista ammoniakkia ympäristön lämpötilassa, kunnes hydrolyysi on mennyt loppuun. Haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatografialla, jolloin 25 saadaan otsikon yhdiste.

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa Ax on -C00R4, A2 on vety ja n = 0, voidaan valmistaa käyttämällä tavallisen alan ammattimiehen hyvin tuntemia ja ymmärtämiä menetelmiä ja tekniikoita. Yleinen synteettinen kaavio näi-30 den yhdisteiden valmistamiseksi on esitetty kaaviossa C, . jossa kaikki substituentit, ellei toisin ole ilmoitettu, ovat edellä määritellyt.

I! 69 95255

Kaavio C

Pb 5 Ph c°2Me A-Me02C>^J^

vaihe a 52 53 J

10 HCI EEDQ

vaihe b Me02Gw ^ X & 15 54 PhthN 2 Λ-οη

O

step c 20

rO JO

/ vaihe d f

PhthN N. PhthN "Λ NH C°2Me NH ^ CO.Me 25 | o ^γ' SS S . 56 k W Iho 30 Kaavio C tarjoaa yleisen synteettisen menetelmän kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa kaavassa Ax on -COOR4, A2 on vety ja n = 0.

Vaiheessa a N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyylies-teriä, jolla on rakenne 51, voidaan käsitellä yhdellä ek-35 vivalentilla ei-nukleofiilistä emästä kuten litiumdi-iso- 70 95255 propyyliamidia sopivassa aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa, minkä jälkeen lisätään 4-halogeeni-buteenia, jolla on rakenne 52, jolloin saadaan 2-(3-bute-nyyli)-N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyyliesteri, jolla on 5 rakenne 53.

Vaiheessa b rakenteen 53 omaavan 2-(3-butenyyli)-N-(fenyylimetyleeniglysiinimetyyliesterin N-(fenyylimetyleeni ) -funktionaalisuus voidaan hydrolysoida happamissa olosuhteissa kuten vetykloridihapon kanssa sopivassa ap-10 roottisess liuottimessa kuten etyylieetterissä, jolloin saadaan 2-(3-butenyyli)glysiinimetyyliesteri, jolla on rakenne 54.

Vaiheessa c sopiva amidiyhdiste, jolla on rakenne 55, voidaan valmistaa saattamalla sopiva ftaali-imidisuo-15 jattu (S)-fenyylialaniiniyhdiste, jolla on rakenne 2 (kuvattu edellä kaaviossa A), reagoimaan 2-(3-butenyyli)gly-siinimetyyliesterin kanssa, jolla on rakenne 54, kytken-täreaktio-olosuhteissa, kuten edellä kaavion B vaiheessa c ja kaavion A vaiheessa b on kuvattu.

20 Vaiheessa d rakenteen 55 omaavan sopivan amidiyh- disteen olefiinifunktionaalisuus voidaan muuttaa sopivaksi aldehydiyhdisteeksi, jolla on rakenne 56, kuten edellä kaavion B vaiheessa d: on kuvattu.

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa A! on -C004, A2 • 25 on vety, n = 0, R3 on asetaatti tai bentsoaatti ja R4 on metyyli, voidaan valmistaa sopivasta aldehydistä, jolla on rakenne 56, edellä kaavion A vaiheissa d - f esitetyllä menetelmällä.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden yksittäiset 3(S)- ja 30 3(R)-esterit, jossa kaavassa Ax on -C00R4/ A2 on vety, n = 0, R3 on asetaatti tai bentsoaatti ja R4 on metyyli, voidaan valmistaa sopivasta aldehydistä, jolla on rakenne 56, edellä kaavion A vaiheessa d esitetyllä menetelmällä erottamalla kaavion A vaiheessa d kuvatulla syklisointireak-35 tiolla muodostuneet enamiiniyhdisteiden 3(S)- ja 3(R)-es- 71 95255 terit ja viemällä prosessi loppuun kuten kaavion A vaiheissa e - f on esitetty.

Ryhmiä R3 ja R4 voidaan käsitellä tekniikoilla ja menetelmillä, jotka alalla hyvin tunnetaan ja ymmärretään 5 ja jotka on kuvattu edellä kaaviossa A ja taulukossa 1.

Kaaviossa C käytettävät lähtöaineet ovat tavallisen alan ammattimiehen helposti saatavissa. Esimerkiksi (R)-ja (S)-3-fenyyli-2-asetyylitiopropionihappo kuvataan julkaisussa J. Org. Chem., 51 (1986) 3664, hT-ibentsyyliok-10 sikarbonyyli)-B-(amino)-L-alaniini kuvataan julkaisussa J.

Am. Chem. Soc., 107(24) (1985) 7105, N-(fenyylimetylee- ni)glysiinimetyyliesteri kuvataan julkaisussa J. Org.

Chem. 41 (1976) 3491 ja allyylitriklooriasetimidaatti kuvataan julkaisussa J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1(11) 15 (1985) 2247.

Seuraavat esimerkit ovat tyypillisiä synteesejä, kuten kaaviossa C on kuvattu. Näiden esimerkkien ymmärretään olevan ainoastaan valaisevia, eikä niiden tarkoiteta rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavalla.

20 Esimerkki 51 [6a(R*),llbfl]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-bentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon me-tyyliesterin valmistus 25 Kaavio C, vaihe a: N-(fenyylimetyleeni)-2-(3-bute- nyyli)glysiinimetyyliesteri

Liuota di-isopropyyliamiinia (15,4 ml, 110 mmol) tetrahydrofuraaniin (250 ml), laita typpiatmosfääriin ja jäähdytä -78 °C:seen. Lisää n-butyylilitiumia (39 ml 2,7 M 30 liuosta heksaanissa, 105 mmol). Sekoita 30 minuuttia ja lisää tipoittain N-(fenyylimetyleeni)glysiinimetyylieste-rin (17,7 g, 100 mmol) liuosta tetrahydrofuraanissa (25 ml). Sekoita 15 minuuttia ja lisää 4-bromibuteenia (13,5 g, 100 mmol) ja anna lämmetä hitaasti huoneenlämpö-35 tilaan. Lisää heksametyylifosforiamidia (20 ml, 100 mmol) 72 95255 ja sekoita typpiatmosfäärissä 3 tuntia. Kaada veteen, uuta etyylieetteriin ja pese suolaliuoksella useita kertoja. Kuivaa (MgS04) ja haihduta liuotin tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste kullanruskeana öljynä (25 g).

5 Kaavio C, vaihe b: 2-(3-butenyyli)glysiinimetyyli- esteri

Liuota N-(fenyylimetyleeni)-2-(3-butenyyli)glysii-nimetyyliesteriä (25 g) etyylieetteriin (400 ml) ja sekoita 1 N vetykloridihapon (150 ml) ja veden (150 ml) kanssa. 10 Laita argonatmosfääriin ja sekoita 2 tuntia. Erota vesi-faasi ja säädä pH arvoon 9, uuta kloroformiin, kuivaa ja haihduta liuotin tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste vaaleana öljynä (4,5 g).

Kaavio C, vaihe c: (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diok-15 so-2H-isoindol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(3-bu- tenyyli)glysiinin metyyliesterit

Liuota N-ftaloyyli-(S)-fenyylialaniinia (2) (6,0 g, 20 mmol) ja EEDQ:ta (6,0 g, 24 mmol) metyleenikloridiin (30 ml). Lisää 2-(3-butenyyli)glysiinimetyyliesteriä 20 (3,0 g, 21 mmol) ja sekoita 18 tuntia. Kaada metyleeni kloridiin, pese 10-%:isella vetykloridihapolla, sitten kylläisellä natriumvetykarbonaatilla. Kuivaa ja haihduta liuotin tyhjössä, jolloin saadaan 8,3 g keltaista öljyä. Puhdista silikageelikromatografiällä (25 % etyyliasetaat-25 tia/heksaania), jolloin saadaan otsikon yhdisteiden dia- stereomeerinen seos vaahtona (5,2 g).

Kaavio C, vaihe d: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)]-fenyylialanyyli]-2-(3-oksopropyy-li)glysiinin metyyliesterit 30 Liuota (S)-N-[2-(l,3-dihydro-l,3-diokso-2H-isoin- • dol-2-yyli)-l-okso-3-fenyylipropyyli]-2-(3-butenyyli)- glysiinin metyyliesterien diastereomeerinen seos (4,2 g, 10 mmol) metyleenikloridiin (100 ml) ja absoluuttiseen metanoliin (10 ml). Jäähdytä -78 °C:seen ja käsittele ot-35 sonilla, kunnes seos muuttuu siniseksi. Poista kaasut ty- 11 73 95255 peliä ja lisää metyylisulfidia (10 ml) ja pyridiiniä (0,5 ml). Anna lämmetä hitaasti huoneenlämpötilaan ja sekoita 18 tuntia. Pese l0-%:isella vetykloridihapolla ja sitten suolaliuoksella. Kuivaa ja haihduta liuotin tyhjös-5 sä, jolloin saadaan otsikon yhdisteiden diastereomeerinen seos öljynä (4,5 g).

Kaavio A, vaihe d: (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-di- okso-2H-isoindol-2-yyli))-l-okso-3-fenyylipropyyli-l,2,3-trihydro-2(S)-pyrrolikarboksyylihapon metyyliesteri ja 10 (S )-N- [2-( 1,3-dihydro-l, 3-diokso-2H-isoindol-2-yyli ) ] -1- okso-3-fenyylipropyyli-1,2,3-trihydro-2(R)-pyrrolikarbok-syylihapon metyyliesteri

Liuota (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso-indol-2-yyli) ] fenyylialanyyli] -2- (3-oksopropyyli )glysiinin 15 metyyliesterien diastereomeerinen seos (4,5 g) 1,1,1-tri- kloorietaaniin (150 ml) ja käsittele trifluorietikkahapol-la (0,5 ml). Kuumenna palautusjäähdyttäen 18 tuntia, haihduta liuotin ja puhdista silikageelikromatografiällä (80 % etyyliasetaattia/heksaania), jolloin saadaan 2(S)- otsikon 20 yhdiste (700 mg) ja 2(R)- otsikon yhdiste (600 mg).

Kaavio A, vaihe e: [6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l,3-di- hydro-1,3-diokso-2H-isoindol-2-yyli)] -1,2,3,5,6,7, llb-hep-tahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a) [2]bentsatsepiini-3(S)-karbok-syylihapon metyyliesteri 25 Liuota (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-diokso-2H-iso- indol-2-yyli ) ]-l-okso-3-fenyylipropyyli-l,2,3-trihydro-2(S)-pyrrolikarboksyylihapon metyyliesteriä (338 mg, 0,836 mmol) vedettömään metyleenikloridiin (10 ml) ja lisää trifluorimetaanisulfonihappoon (5 ml). Sekoita 3,5 30 tuntia, jäähdytä jäähauteessa ja lisää varovasti vettä .· (25 ml). Uuta etyyliasetaatilla (75 ml) ja pese kylläisel lä natriumvetykarbonaatilla (25 ml). Kuivaa 8Na2S04) ja haihduta liuotin tyhjössä. Puhdista silikageelikromatograf iällä (1:1 etyyliasetaatti/heksaani -» 2:1 etyyliase- 74 95255 taatti/heksaani), jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena vaahtona (314 mg, 93 %).

Kaavio A, vaihe f: [6a(R*), llbB]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat- 5 sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesteri

Liuota [6a(R*),llbfi]-6-[(S)-(1,3-dihydro-l,3-diok-so-2H-isoindol-2-yyli)]-l, 2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-okso-pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon me-tyyliesteriä (244 mg, 0,603 mmol) metanoliin (3 ml), kä-10 sittele hydratsiinimonohydraatilla (0,70 ml IM liuosta metanolissa) ja sekoita huoneenlämpötilassa 24 tuntia. Lisää vielä hydratsiinimonohydraattia (0,3 ml 1 M liuosta metanolissa) ja sekoita 48 tuntia. Suodata suodatusapu-aineen läpi, haihduta liuotin tyhjössä ja lisää metyleeni-15 kloridia. Suodata hitaasti suodatusapuaineen (MgS04) läpi ja haihduta liuotin tyhjössä, jolloin saadaan otsikon yhdiste keltaisena öljynä (181 mg).

[6a(R*),llbB]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-bentsoyylitio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-okso-20 pyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon me tyyliesteri

Liuota (R)-3-fenyy1i-2-bentsoyy1itiopropionihappoa (242 mg, 0,845 mmol) metyleenikloridiin (6 ml), jäähdytä jää-metanolihauteessa ja käsittele oksalyylikloridilla 25 (0,94 ml, 11 mmol). Sekoita 1,5 tuntia ja haihduta liuotin tyhjössä 0-5 °C:ssa. Laimenna jäännös metyleenikloridil-la (3 ml) ja lisää [6a(R*),llbB]-6-[(S)-amino]- 1.2.3.5.6.7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a] [2]bentsat-sepiini-3(S)-karboksyylihapon metyyliesterin (155 mg, 30 0,565 mmol) liuos metyleenikloridissa (6 ml). Lisää pyri- diiniä (68 μΐ), 0,85 mmol) ja sekoita 2 tuntia. Laimenna etyyliasetaatilla (60 ml) ja pese 1 N vetykloridihapolla (30 ml) ja kylläisellä natriumvetykarbonaatilla (2 x 30 ml). Kuivaa (MgS04), haihduta liuotin tyhjössä ja puh-35 dista silikageelikromatografiällä (3:2 heksaani/etyyliase-

II

75 95255 taatti), jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (159 g, 53,1 %).

Esimerkki 52 [6a(R*),llbB]-5-[(S)-(l-okso-2(R)-tio-3-fenyyli-5 propyyli)amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oksopyrrolo- [2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyylihapon valmistus

Liuota [6a(R*),llbö]-6-[(S)-(l-okso-2(R)-bentsoyy-litio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oksopyrrolo[2,1-a][2]bentsatsepiini-3(S)-karboksyyliha-10 pon metyyliesteriä (52 mg, 0,098 mmol) metanoliin (1,5 ml) ja poista kaasut 0 °C:ssa. Lisää vesipitoista litiumhyd-roksidia (0,6 ml 1 N liuosta, josta on poistettu kaasut, 0,6 mmol) 0 °C:ssa. Lisää tetrahydrofuraania, jolloin saadaan liuos (4 ml) ja sekoita 17 tuntia huoneenlämpötilas-15 sa. Jäähdytä jäähauteessa ja lisää 1 N vetykloridihappoa (1 ml). Jakouuta metyleenikloridilla (30 ml) ja vedellä (15 ml) ja erota orgaaninen faasi, Kuivaa (Na2S04), haihduta liuotin tyhjössä ja puhdista silikageelikromatogra-fiällä (2:1 heksaani/etyyliasetaatti), jolloin saadaan 20 otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena (32,2 g, 77 %). M+H = 424,1461; Laskettu = 424,1457.

Claims (3)

76 95255

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 6- ja 7-merkaptoasetyyliamidopyrrolo- ja -pyrido[2,1-a][2]bents-5 atsepiinikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joiden kaava on h jD

10. V Y h (I> η /y~~ n \ 0 i (CH2)n CH^J'S-Rt Ai \ 15 / R2 jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -COOR4, jossa R4 on vety, -CH20-C(0)C(CH3)3, C1.4-alkyyli, bentsyyli tai 20 difenyylimetyyli, edellyttäen, että jos A3 on vety, niin A2 on -C00R4, ja jos k1 on -C00R4, niin A2 on vety; R2 on vety, fenyyli tai bentsyyli; R3 on vety, asetyyli tai bentsoyyli; ja n on kokonaisluku 0 tai 1, 25 tunnettu siitä, että a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on difenyylimetyyli, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, yhdiste, jonka kaava on 77 95255 «s "λΌ

5. V R (H> O Ny (CH2) n CH^OH Al \ xo / Az R2 jossa Aj, A2, n ja R2 merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan tiolietikkahapon tai tiolibentsoehapon kanssa trifenyylifosfiinin ja hapetusaineen läsnä ollessa, 15 b) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Aj ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on vety, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on difenyylimetyyli, saatetaan rea-20 goimaan hapon kanssa, c) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on vety, ja R3 on vety, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on asetyyli tai bentsoyyli, saatetaan reagoimaan 25 emäksen kanssa, d) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa Ax ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 on -CH20-C(0)C(CH3)3, C1.4-alkyyli tai bentsyyli, ja R3 on asetyyli tai bentsoyyli, vastaava kaavan I mukainen yhdis- 30 te, jossa A3 ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -COOR4, jos-<. sa R4 on vety, saatetaan reagoimaan emäksen läsnä ollessa sopivan C^-alkyylihalogenidin, kloorimetyylipivalaatin tai bentsyylihalogenidin kanssa, tai e) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, 35 jossa Ai ja A2 merkitsevät vetyä tai ryhmää -C00R4, jossa R4 78 95255 on -CH20-C(0)CH3)3, C^-alkyyli tai bentsyyli, ja R3 on vety, vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa R3 on asetyyli tai bentsoyyli, saatetaan reagoimaan ammoniakin kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että valmistetaan [4S-[4a, 7a(R*),-12bp]]-7-[(l-okso-2(S)-asetyylitio-3-fenyylipropyyli)amino] -1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyrido[2,1-a][2] -bentsatsepiini-4-karboksyylihappo.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan [4S-[4a,7a(R*), -12b8]]-7-[(l-okso-2(S)-tio-3-fenyylipropyyli)amino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahydro-6-okso-pyrido[2,1-a][2]bents-atsepiini-4-karboksyylihappo. 79 95255