FI83870B - Foerfarande foer framstaellning av en terapeutiskt anvaendbar optiskt aktiv (-)-1 -etyl-1 -hydroximetyl-1,2,3,4,6,7,12,12b -oktahydroindolo/2,3-a/ -kinolizin. - Google Patents

Description

83870

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen (-)-13-etyyli -la-hydroksimetyyli-1,2,3,4,6,7,12, 12ba-oktahydroindolo-[2,3-a]kinolitsiinin valmistamiseksi

Keksintö liittyy uuteen, optisesti aktiiviseen 1-etyyliokta-hydroindolo[2,3-a]kinolitsiinijohdannaiseen, jonka 1-etyyli-ryhmä ja 12b-vety ovat trans-konfiguraatiossa. Etenkin keksinnön kohteena on menetelmä uuden, optisesti aktiivisen kaavan (I) °7ri mukaisen trans-(-)-Ιβ-etyyli-la-hydroksimetyyli-l,2,3,4,6,7, 12,12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinin ja sen happo-additiosuolojen valmistamiseksi.

Keksinnön mukaan alistetaan kaavan (Ha) h 7^ 1 (113) r1—o—CH2*s^ c2h5 mukaisen la-etyyli-lp-asyylioksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12,12bp-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinijohdannaisen ja kaavan (Hb) 2 83870 CLXjX (Hb) ^ C2H5 mukaisen Ιβ-etyyli-la-asyylioksimetyyli-l,2,3,4,6,7, 12,12ba-oktahydroindo[2,3-a]kinolitsiinijohdannaisen l:l-seos D-viinihapolla suoritettavaan jakamiseen, joissa kaavoissa R1 on vety, 1-6 hiiliatomia alkyyliosassa sisältävä alkyyli-karbonyyli, mahdollisesti substituoitu aryylikarbonyyli tai alkyyliosassaan 1-6 hiiliatomia sisältävä aralkyyli-karbonyyli, ja valinnanvaraisesti hydrolysoidaan aikalisissä olosuhteissa saatu uusi, optisesti aktiivinen kaavan (III)

Ckjh (IM

mukainen (-)-Ιβ-etyyli-la-asyylioksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12, 12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinijohdannainen, jossa R2 on 1 - 6 hiiliatomia alkyyliosassa sisältävä alkyylikar-bonyyli, mahdollisesti substituoitu aryyli tai 1-6 hiiliatomia alkyyliosassa sisältävä aralkyylikarbonyyli, ja haluttaessa käsitellään hapolla saatu uusi kaavan (I) mukainen (-)-Ιβ-etyyli-la-hydroksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12, 12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiini.

I! 3 83870

Yllä olevissa kaavoissa R1 ja R2 voivat merkitä alkyyliryh-mänä suoraketjuista tai haarautunutta, 1-6 hiiliatomia sisältävää alkyyliä, esim. metyyliä, etyyliä, n-propyyliä, isopropyyliä, n-butyyliä, isobutyyliä, tert-butyyliä, n-pentyyliä, isopentyyliä, jne. Aryylinä R1 ja R2 voivat merkitä mono- tai polysyklistä (erillistä tai kondensoimalla liitettyä) aromaattista hiilivetyryhmää, kuten esim. fenyyli-, difenyyli- tai naftyyliryhmää. Käsitettä "aralkyyli" käytetään viittamaan yllä mainittujen aryyli- ja alkyyliryhmien yhdistelmään.

Kaavan (I) mukaisella yhdisteellä on erinomainen farmaseuttinen, etenkin kardiovaskuläärinen, etenkin perifeerinen vasodilatiivinen ja antihypoksiaalinen aktiivisuus.

Unkarilaisessa patenttijulkaisussa 170,495 (GB-patenttijul-kaisu 1,499,546) on esitetty 1,l-disubstituoituja oktahydro-indolo[2,3-aJkinolitsiinejä, jotka voivat sisältää 1-asemassa mm. substituentteja, jotka ovat identtisiä keksinnön mukaisessa yhdisteessä esiintyvien kanssa. Näissä yhdisteissä ei ole kuitenkaan eritelty 1-aseman substituenttien ja 12b-vedyn konfiguraatiota; lisäksi, vaikka julkaisussa ja patenttivaatimuksissa on esitetty myös optisesti aktiiviset yhdisteet ja lohkaisumenetelmä yleisin käsittein, erityisesti esitetyt yhdisteet ovat poikkeuksetta raseemisia. Tunnetuilla raseemisilla yhdisteillä on vasodilatiivisia ominaisuuksia ja tämä aktiivisuus voidaan havaita sekä perifeerisessä että serebraalisessa kierrossa, s.o. mainittujen yhdisteiden vasodilatiivinen aktiivisuus ei ole selektiivinen. Jyrkkänä vastakohtana tämän suhteen keksinnön mukaisella yhdisteellä on selektiivinen perifeerinen vasodilatiivinen aktiivisuus. Eräänä toisena erona aikaisempien, tunnettujen yhdisteiden ja keksinnön mukaisen yhdisteen välillä on se, että ensin mainituilla ei ole antihypoksiaalista aktiivisuutta, kun taas keksinnön mukaisen yhdisteen kohdalla perifeeriseen vasodilatiiviseen aktiivisuuteen liittyy antihypoksiaalinen aktiivisuus.

4 83870

Julkaisun Helv. Chim. Acta, 60, 1801 (1977) raseeminen trans-l-etyyli-l-hydroksimetyyli-1,2,3,4,6,7,12,12b-okta-hydroindolo[2,3-a]kinolitsiini valmistetaan pelkistämällä vastaavat trans-yhdiste, joka sisältää aldehydi-ryhmän 1-asemassa ja joka on saatu välituotteena vinkamiini-syn-teesissä. Yllä esitetyssä artikkelissa ei ole kuitenkaan mitään mainintaa saadun yhdisteen lohkaisusta, vastaavista optisesti aktiivisista yhdisteistä eikä niiden mahdollisesti omaavasta farmaseuttisesta aktiivisuudesta.

Julkaisussa Gaz. Chim. Italiana 111, 257 (1981) esitetyn menetelmän mukaisesti raseeminen trans-l-etyyli-l-hydroksi-metyylil,2,3,4,6,7,12,12b-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiini valmistetaan kuumentamalla l-etyyliheksahydroindolo(2,3-a]-kinolitsinium-perkloraattia ja formaldehydin vesiliuosta asetonitriilissä di-isopropyylietyyliamiinin läsnäollessa. Tämä artikkeli koskee myös raseemista yhdistettä. Siinä ei ole kuitenkaan mainittu vastaavia optisesti aktiivisia· johdannaisia, valmistetun yhdisteen jakamista eikä mainitun yhdisteen tai sen johdannaisten farmaseuttista aktiivisuutta.

Nyt olemme yllättäen todenneet, että optisesti aktiivisella kaavan (I) mukaisella trans-(-)-18-etyyli-la-hydroksimetyyli-1,2,3,4,6,7,12,12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinillä, jota ei ole tekniikan tasolla erityisesti esitetty ja jota ei ole koskaan vielä valmistettu, on erinomainen selektiivinen perifeerinen vasodilatiivinen aktiivisuus päinvastoin kuin vastaavalla raseemisella yhdisteellä, jolla ei ole selektiivistä, yleistä vasodilatiivista aktiivisuutta. Eräs toinen olennainen ero on se, että keksinnön mukainen optisesti aktiivinen yhdiste omaa selektiivisen perifeerisen vasodilatiivisen aktiivisuutensa hyvin alhaisissa annoksissa (esim. 0,03 mg/kg i.v.-annoksessa), kun taas vastaava raseeminen yhdiste on aktiivinen n. kaksi suuruusluokkaa korkeammissa annoksissa (esim. 1 mg/kg i.v.-annos). Vielä eräs keksinnön mukaisen yhdisteen odottamaton etu on sen anti-hypoksiaalinen aktiivisuus, joka yhdessä selektiivisen

II

5 83870 perifeerisen vasodilatiivisen aktiivisuuden kanssa saa aikaan uusia terapiamahdollisuuksia. Vastaavalla raseemisel-la yhdisteellä ei ole ollenkaan antihypoksiaalista aktiivisuutta .

Keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineina käytetyt raseemiset kaavojen (Ha) ja (Hb) mukaiset yhdisteet valmistetaan unkarilaisessa patenttihakemuksessa 170,495 (GB-patenttijulkaisu 1,499,546) esitetyllä menetelmällä.

Kaavojen (Ha) ja (Hb) mukaisten yhdisteiden jakaminen voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla optisesti aktiivisella hapolla. Edullisesti jakaminen suoritetaan D-viinihapolla.

Jakaminen suoritetaan yleensä sopivasti valitussa inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten alifaattisessa ketonissa, esim. asetonissa, alifaattisessa alkoholissa tai tällaisten liuottimien vesipitoisessa seoksessa.

Optisesti aktiivisen hapon kanssa muodostettu happoadditio-suola erotetaan vastaaviksi diastereomeerisiksi suolapareik-si ja haluttaessa vapautetaan vasemmalle kiertävästä suolasta, kaavan (III) mukaisesta trans-yhdisteestä vastaava emäs. Emäksen vapauttaminen suoritetaan mieluummin liuottamalla tai suspendoimalla suola veteen ja veden ja veteen sekoittu-mattoman, orgaanisen liuottimen, kuten mahdollisesti halo-genoidun alifaattisen tai aromaattisen hiilivedyn, lineaarisen tai syklisen eetterin, esim. dikloorimetaanin, kloroformin, eetterin, tolueenin jne. seokseen, tekemällä saatu liuos tai suspensio alkaliseksi epäorgaanisella emäksellä, kuten alkalimetallikarbonaatilla, esim. kalium- tai natrium-karbonaatilla, ammoniakilla jne. ja haluttaessa uuttamalla vasemmalle kiertävä kaavan (III) mukainen trans-emäs jollakin yllä mainituista, veteen sekoittumattomista orgaanisista liuottimista. Vasemmalle kiertävä kaavan (III) mukainen trans-emäs voidaan eristää esimerkiksi sen veteen sekoittu-mattomassa orgaanisessa liuottimessa olevasta liuoksesta 6 83870 haihduttamalla. Haluttaessa saatu raaka uusi kaavan (III) mukainen trans-yhdiste puhdistetaan edelleen kiteyttämällä se uudelleen sopivasta liuottimesta, kuten alifaattisesta, 1-6 hiiliatomia sisältävästä liuottimesta, esim. metano-lista.

Vasemmalle kiertävien kaavan (III) mukaisten trans-yhdistei-den hydrolyysi suoritetaan alkalisessa väliaineessa. Sopivia emäksiä ovat alkalimetallialkoholaatit, esim. natriummety-laatti jne. Hydrolyysi suoritetaan mieluummin inertissä orgaanisessa liuottimessa, etenkin alifaattisessa, 1-6 hiili-atomia sisältävässä alkoholissa, esim. metanolissa. Vaihtoehtoisesti hydrolyysi voidaan suorittaa epäorgaanisella emäksellä vesipitois-alkoholisessa väliaineessa. Hydrolyysi-lämpötila on yleensä 60 - 100*C ja etenkin reaktioseosta keitetään käytetyssä inertissä orgaanisessa liuottimessa. Hydrolyysi etenee loppuun lyhyessä ajassa.

Kaavan (I) mukainen yhdiste, joka on valmistettu yllä esitetyn menetelmän mukaisesti, voidaan haluttaessa muuntaa sen happoadditiosuoloiksi saattamalla se reagoimaan hapon kanssa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti. Tällaisia happoja ovat mm. epäorgaaniset hapot, kuten esimerkiksi halogeeni-vetyhapot (esim. kloorivety- ja bromivetyhappo), rikkihappo, fosforihappo ja perhalogeenihapot, esim. perkloorihappo jne, orgaaniset karboksyylihapot, kuten esimerkiksi muurahaishappo, etikkahappo, propionihappo, glykolihappo, maleiinihappo, hydroksimaleiinihappo, fumaarihappo, meripihkahappo, viini-happo, askorbiinihappo, sitruunahappo, omenahappo, salisyylihappo, maitohappo, kanelihappo, bentsoehappo, fenyylietikka-happo, p-aminobentsoehappo, p-hydroksibentsoehappo, p-amino-salisyylihappo jne., alkyylisulfonihappo, kuten esim. metaani-sulfonihappo, etaanisulfonihappo jne., sykloalifaattiset sulfonihapot, kuten sykloheksyylisulfonihappo, naftyylisul-fonihappo, sulfanyylihappo jne., aminohapot, esim. aspara-giinihappo, glutamiinihappo, N-asetyyliasparagiinihappo, N-asetyyliglutaarihappo jne.

li 7 83870

Suolan muodostus voidaan suorittaa esimerkiksi inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten alifaattisessa, 1-6 hiiliatomia sisältävässä alkoholissa, niin että kaavan (I) mukainen yhdiste liuotetaan liuottimeen ja valittu happo tai sen saman liuottimen kanssa muodostettu liuos lisätään ensimmäiseen liuokseen, kunnes siitä tulee hieman hapan (pH: 5-6). Tämän jälkeen happoadditiosuola eroaa ja se voidaan poistaa reaktioseoksesta esim. suodattamalla.

Keksinnön mukainen yhdiste voidaan haluttaessa alistaa lisä-puhdistukseen, esim. uudelleenkiteytykseen.

Kaavan (I) mukaisen yhdisteen vasodilatiivista, eli sen verisuonia laajentavaa aktiivisuutta testattiin nukutetuilla koirilla. Eläinten femoraalisiin ja sisäisiin yhteisiin päänvaltimoihin sijoitettiin sähkömagneettiset virtausmittarit (Hellige) ja suonissa virtaavan veren määrä määritettiin ml:na/min. valtimon keskipaine mitattiin Statham-painesenso-rilla, joka oli kiinnitetty polyeteenikanyyliin, joka oli viety valtimoon. Minuuttia kohden esiintyvä pulssimäärä määritettiin verenpaineen sykintäkomponentista taajuusmittarilla. Kaikki mitatut parametrit rekisteröitiin keskeytymättä monikanavapolygrafilla.

Vertailua varten testattiin uuden keksinnön mukaisen yhdisteen (kaavan (I) mukainen yhdiste) lisäksi vastaavaa oikealle kiertävää trans-yhdistettä ja tunnettua vastaavaa rasee-mista trans-yhdistettä.

Keksinnön mukaisella uudella vasemmalle kiertävällä trans-yhdisteellä ei ollut mitään vaikutusta pulssimäärään eikä päänvaltimon veren virtaukseen käytetyssä annoksessa. Kaikilla näillä kolmella yhdisteellä oli väliaikainen, verenpainetta hieman alentava vaikutus. Verenpaineen lasku oli n. 20 % tunnetun raseemisen yhdisteen kohdalla, 6 % ( + )-isomeerin kohdalla ja 7 - 10 % keksinnön mukaisen (-)-isomeerin kohdalla. Todettiin, että keksinnön mukainen uusi vasemmalle kiertävä trans-yhdiste on poikkeuksellisen aktii- β 83870 vinen verenpaineen lisäämisessä reisivaltimossa. Vertailua varten testattiin myös rakenteellisesti erilaista pentoksi-fylliiniä, laajalti käytettyä perifeeristä vaikuttavaa verisuonten laajentajaa. Saadut tulokset on esitetty taulukossa 1.

Jokaista yhdistettä kokeiltiin useilla eläimillä. Yksittäisistä tuloksista muodostettiin keskiarvo. Taulukoissa on esitetty eläinten määrä (n), mitattujen parametrien keskiarvo ja prosenttimuutokset.

Intravenöösisessä käytössä (i.v.) arvioitiin lähtöperusarvo ja maksimaalinen muutos.

Taulukko l

Testiyhdisteiden vaikutus verenkiertoon femoraalisessa valtimossa i.v.-käytössä.

Yhdiste Annos n Veren virtaus % Aktii- (mg/kg) (ml/min.)_ visuu- perus maks. kesto _muutos_(min. )

Raseeminen 1,0 5 60 146,6 +144 15,6 0,03 2 60 75 +25 1 (+) 1,0 4 42,5 54,5 +28 3,7 0,03 2 62 62 00 (-) 0,01 6 40,2 63 +57 2,3 0,03 7 42,3 99,6 +135 9,6 pentoksi- fylliini 2,0 5 49,6 60,6 +22 1,5

Taulukossa l esitetyt tulokset osoittavat, että uuden keksinnön mukaisen trans-(-)-stereoisomeerin perifeerinen vaso-dilatiivinen aktiivisuus on parempi kuin pentoksifylliinin. Lisäksi verrattuna vastaavaan raseemisen yhdisteeseen ja li 9 83870 (+)-isomeeriin voidaan nähdä, että keksinnön mukainen (-)-stereoisomeeri on odottamatta n. 100 kertaa tehokkaampi perifeerinen verisuonien laajentaja kuin vastaava (+)-stereo-isomeeri ja n. 30 kertaa aktiivisempi kuin vastaava raseemi-nen yhdiste.

Vaikka ääritapauksissa voi tapahtua niin, että toisella kahdesta mahdollisesta stereoisomeeristä on olennaisesti sama aktiivisuus kuin vastaavalla raseemisella yhdisteellä ja siten toinen isomeeri on täysin tehoton, s.o. vain toinen kahdesta stereoisomeeristä vastaa aktiivisuudesta, näin ei ole kuitenkaan asianlaita tässä keksinnössä. Testimme ovat johtaneet siihen täysin odottamattomaan tulokseen, että keksinnön mukaisen vasemmalle kiertävän trans-stereoisomeerin perifeerinen vasodilatiivinen aktiivisuus on n. 30 kertaa suurempi kuin vastaavan raseemisen yhdisteen.

Lisäksi perustuen taulukossa 1 esitettyihin tuloksiin on huomattava, että vaikka sekä tunnettu raseeminen trans-yhdiste että uusi oikealle kiertävä trans-yhdiste on tehokkain 1,0 mg/kg:n annoksessa, keksinnön mukaisen uuden vasemmalle kiertävän trans-yhdisteen tehokkain annos on ainoastaan 0,03 mg/kg. Taulukossa esitettyjen arvojen mukaisesti vastaava oikealle kiertävä trans-stereoisomeeri oli täysin tehoton ja osoittautui, että tunnetun raseemisen trans-yhdisteen teho oli noin 1/6 keksinnön mukaisen (-)-yhdisteen tehosta annettaessa sitä tässä pienessä annoksessa (0,03 mg/kg). Lisäksi jopa tämä raseemisen yhdisteen alhainen aktiivisuus kestää ainoastaan yhden minuutin ajan, kun taas keksinnön mukaisen (-)-trans-yhdisteen aktiivisuuden kesto on n. 10 kertaa pidempi, s.o. n. 10 min.

Taulukossa IA on esitetty koetulokset pohjukaissuolen kautta annettujen yhdisteiden periferaalisesta vasodilatiivisesta vaikutuksesta. Kokeet suoritettiin nukutetuille sekarotuisille koirille, jotka edustivat molempia sukupuolia ja joiden paino oli 15 - 25 kg. Eläinten femoraalisiin valtimoihin sijoitettiin sähkömagneettiset virtausmittarit (Hellige) ja suonissa virtaavan veren määrä määritettiin ml:na/min.

ίο 83 870

Yhdisteet annettiin sellaisen katetrin kautta, joka aikaisemmin oli viety pohjukaissuoleen. Mahanporttiin johtavat suonet sidottiin yhdisteen takaisinvalumisen estämiseksi. Jokainen yhdiste annettiin 5 eläimelle. Saaduista tuloksista laskettiin keskiarvot. Taulukossa on esitetty mitattujen parametrien keskiarvot ja prosentuaaliset poikkeamat.

Taulukko IA

Pohjukaissuolen kautta annettujen l-hydroksimetyylijohdan-naisten periferaalinen vasodilatiivinen vaikutus

Isomeeri Annos Vertailu Veren virtaus reisisuonissa (mg/kg) (ml/min.) _5_20_80 min.

(±) 5 62 63 (+1,6%) 64 (+3,2%) 62 (+) 5 55 54 (-1,8%) 57 (+3,6%) 56 (+1,8%) (-) 1 33 42 (+27,3%) 39 (+18,0%) 36 (+9,0%)

Taulukon tiedoista voidaan päätellä, että ainoastaan (-)- johdannaisella on periferaalinen vasodilatiivinen aktiivisuus. Kahdella muulla yhdisteellä ei ole vaikutusta reisi-valtimon veren virtaukseen edes viisinkertaisina annoksina.

Keksinnön mukaisen uuden vasemmalle kiertävän trans-yhdisteen antihypoksiaalista aktiivisuutta testattiin valppailla hiirillä normobarisessa hypoksiassa. Viisi koiraspuo-lista hiirtä sijoitettiin 3 litran lasisylinteriin, johon johdettiin jatkuvasti kaasuseosta, joka sisälsi 96 % typpeä ja 4 % happea. Aika, joka kului siitä, kun eläimet sijoitettiin lasisylinteriin, siihen, kun ne kuolivat, mitattiin jokaisen eläimen kohdalla enintään 15 minuutin ajan. Eläimet, jotka säilyivät hengissä kaksinkertaisen ajan verrattuna käsittelemättömien eläinten keskimääräiseen kuolinaikaan (6,2 minuuttia), s.o. jotka olivat hengissä 12,4 minuuttia

II

li 8 3 8 70 kokeen käynnistyksestä, katsottiin suojatuiksi. Vertailu-aineet annettiin 20 eläimelle intraperitoneaalisesti 50 mg/kg:n annoksena 30 minuuttia ennen eläinten sijoittamista lasisylinteriin, kun taas keksinnön kaavan (I) mukaisen (-)-trans-isomeerin annos oli 25 mg/kg. Eläinten kuolemiseen kuluneista ajoista muodostettiin keskiarvo, ja tämän ja käsittelemättömien eläinten kohdalla saatujen kontrolliaiko-jen keskiarvon välinen erotus laskettiin. Tätä erotusta kutsuttiin eloonjääntiajan muutokseksi (ks. taulukko 2). Samoin taulukossa on esitetty suojattujen eläinten määrä, s.o. eläinten määrä, jotka olivat vielä elossa 12,4 minuutin kuluttua niiden sijoituksesta hypoksiaaliseen tilaan, tärkeimpänä aktiivisuudelle luonteenomaisena parametrinä.

Uuden keksinnön mukaisen vasemmalle kiertävän trans-yhdisteen antihypoksiaalista aktiivisuutta verraattiin toisaalta vastaavan raseemisen trans-yhdisteen ja vastaavan oikealle kiertävän trans-stereoisomeerin aktiivisuuteen, toisaalta suoritettiin vertailututkimuksia muiden raseemis-ten transyhdisteiden kanssa, joita on esitetty GB-patentti-julkaisussa 1,499,546. Viimeksi mainittujen vertailutestien tarkoituksena oli määrittää, koskeeko se myös muita, rakenteellisesti läheisiä yhdisteitä, että vasemmalle kiertävällä trans-isomeerillä on huomattavasti parempi ja laadullisesti erilainen aktiivisuus verrattuna vastaavaan oikealle kiertävään ja vastaavasti raseemiseen trans-yhdisteeseen. Tämän testin tulokset on esitetty myös taulukossa 2.

i2 83870

Taulukko 2

Testiyhdisteiden vaikutus hiirien eloonjääntiaikaan ja suojaan hypoksiaalisessa väliaineessa

Yhdiste keskimääräisen suojattujen eläin- eloonjäänti- ten prosenttimää-ajan muutos rä (%) suhteessa kontrolliin tunnettu (±)-l-hydrok- simetyyli-johdannainen +25 10 (GB-pat.julk. 1,499,546, kaavassa (II)1 R1 on vety) uusi (+)-1-hydroksime- tyyli-johdannainen +15 10 uusi (-)-1-hydroksime- tyyli-johdannainen +75 70 [kaava (I)]2 tunnettu (±)-l-asetoksi-metyyli-j ohdannainen (GB-pat.julk. 1,499,546 +4 5 kaavassa II R1 on metyyli) uusi (+)-1-asetokimetyyli- johdannainen +3 0 uusi (-)-l-asetoksimetyy- li-johdannainen +31 10 [kaava (III), R2 on metyyli] tunnettu (±)-l-propionyyli-oksimetyyli-johdannainen (GB-pat.julk. 1,499,546 kaavassa (II)1 R1 on etyyli) -11 0 uusi (+)-l-propionyyli- oksimetyyli-johdannainen +38 20 uusi (-)-1-propionyyli- oksimetyyli-johdannainen -6 0 [kaava (III), R2 on etyyli

II

Käsite "kaava (II)" koskee tässä kaavojen (Ha) ja (Hb) mukaisten yhdisteiden l:l-seosta.

2 25 mg/kg:n annos i3 83870

Taulukossa 2 esitetyt tulokset osoittavat, että keksinnön mukaisella uudella (-)-trans-stereoisomeerillä on merkittävä antihypoksiaalinen aktiivisuus, s.o. se parantaa olennaisesti kudosten ja elinten hypoksiatoleranssia jopa pienissä annoksissa. Vastaavalta (+)-trans-isomeeriltä ja vastaavalta raseemiselta trans-yhdisteeltä puuttuu käytännöllisesti katsoen kokonaan tämä aktiivisuus. Antihypoksiaalinen aktiivisuus on hyvin edullinen terapeuttisen hoidon yhteydessä, koska sairauksisa, joissa esiintyy vasokonstriktiota, veren toimittaminen kudoksiin ja elimiin pienenee olennaisesti, jolloin tapahtuu hypoksia, mikä saa aikaan kudosnekroosin. Tästä syystä vasodilatiivisen vaikutuksen yhdistelmä solu-kestävyyden kasvun kanssa hypoksian suhteen on terapeuttisesti hyvin edullista.

Tunnetuilla raseemisilla ja oikealle kiertävillä trans-yhdisteillä ei ole antihypoksiaalista aktiivisuutta edes korkeammissa annoksissa. Suojan 10 %:n määrä ei näet ole statistisesti merkittävä, koska myös käsittelemättömät eläimet voivat osoittautua suojatuiksi suunnilleen samassa suhteessa .

Edelleen voidaan nähdä, että testatuista, rakenteellisesti läheisistä yhdisteistä ainoastaan keksinnön mukaisella uudella vasemmalle kiertävällä trans-isomeerillä on tämä merkittävä ja uusi aktiivisuus verrattuna vastaaviin ra-seemisiin ja oikealle kiertyviin trans-yhdisteisiin. Sekä raseemisilla trans-l-asetoksimetyyli- tai 1-propionyylioksi-metyyli-johdannaisilla, jotka on esitetty GB-patenttihake-muksessa 1,499,546, että vastaavilla uusilla kaavan (III) mukaisilla optisesti aktiivisilla vasemmalle kiertyvillä yhdisteillä, jotka on saatu jakamalla ensin mainitut yhdisteet, ei ole merkittävää antihypoksiaalista aktiivisuutta.

Kaavan (I) mukaista uutta vasemmalle kiertyvää trans-yhdis-tettä voidaan käyttää edullisesti terapiassa, ennen kaikkea sairauksien hoidossa, joissa esiintyy vasokonstriktiota. Oletettu terapeuttinen annos on 0,01 - 1,0 mg/kg parenteraa-lisessa käytössä ja 0,5 - 5,0 mg/kg oraalisessa käytössä.

i4 83870

Uusi kaavan (I) mukainen yhdiste ja sen fysiologisesti sopivat happoadditiosuolat voidaan valmistaa valmisteiksi terapeuttista käyttöä varten. Keksinnön kohteena ovat siten samoin farmaseuttiset koostumukset, jotka sisältävät aktiivisena aineosana kaavan (I) mukaista yhdistettä tai sen fysiologisesti sopivaa happoadditiosuolaa yhdessä farmaseuttisten kantoaineiden ja/tai täyteaineiden kanssa. Voidaan käyttää tähän tarkoitukseen tavanomaisia ja parenteraaliseen tai enteraaliseeen käyttöön sopivia kantoaineita samoin kuin muita lisäaineita. Kantoaineina voidaan käyttää kiinteitä tai nestemäisiä yhdisteitä, esimerkiksi vettä, gelatiinia, laktoosia, tärkkelystä, pektiiniä, magnesiumstearaattia, steariinihappoa, talkkia, kasviöljyjä, kuten maapähkinäöljy-ä, oliiviöljyä jne. Yhdisteet voidaan valmistaa tavanomaisiksi farmaseuttisiksi valmisteiksi, esimerkiksi kiinteässä (pyöreinä ja kulmikkaina pillereinä, rakeina, kapseleina, esim. kovina liivatekapseleina) tai nestemäisessä muodossa (injisoitavina öljyinä tai vesipitoisina liuoksina tai suspensioina). Kiinteän kantoaineen määrä voi vaihdella laajalti, mutta mieluummin se on 25 mg - 1 g. Koostumukset sisältävät mahdollisesti myös tavanomaisia farmaseuttisia lisäaineita, kuten säilöntäaineita, kostutusaineita, suoloja osmoottisen paineen säätämiseksi, puskureita, maku- ja aromiaineita .

Keksinnön mukaiset koostumukset sisältävät mahdollisesti kaavan (I) mukaista yhdistettä yhdessä muiden tunnettujen aktiivisten aineosien kanssa. Yksikköannosten määrä valitaan antotavan mukaan. Farmaseuttiset koostumukset valmistetaan tavanomaisilla menetelmillä, esim. seulomalla, sekoittamalla, granuloimalla, puristamalla tai liuottamalla aktiiviset aineosat. Saadut valmisteet voidaan sitten alistaa ylimääräisiin tavanomaisiin käsittelyihin, kuten sterilointiin.

Keksintöä havainnollistetaan yksityiskohtaisesti seuraavien ei-rajoittavien esimerkkien avulla.

li « 83870

Esimerkki 1 (+)-Ιβ-asetyylioksimetyyli-la-etyyli-l,2,3,4,6,7,12,I2bp-oktahydroindolo[2,3-a]klnolitsiini ja (-)-la-asetyylioksi-metyyli-ip-etyyli-l,2,3/4,6,7,12,12a-oktahydroindolo[2,3-a]-kinolitsiini

Liuos, jossa on 1,1319 g (7,54 mmoolia) D-viinihappoa 25 ml:ssa absoluuttista asetonia, lisätään kuumaan liuokseen, jossa on 1,3619 g (7,54 mmoolia) (±)-l-asetyylioksimetyyli- l-etyyli-l,2,3,4,6,7,12,12b-oktahydroindolo[2,3-a]kinolit-siiniä (GB-patenttijulkaisu 1,499,546) 25 ml:ssa absoluuttista asetonia. Seoksen annetaan seistä huoneenlämpötilassa 24 - 28 tunnin ajan. Saostuneet kiteet suodatetaan pois ja pestään pienellä määrällä asetonia, minkä jälkeen saadaan 2.00 g vastaavaa tartaraattia. Suola liuotetaan 50 ml:aan tislattua vettä ja liuos saatetaan pH-arvoon 8 natrium-karbonaatin 5 %:sella vesiliuoksella jäähdyttämällä jääve-dellä. Alkalinen liuos uutetaan kolmella 20 ml:n annoksella dikloorimetaania. Yhdistetty orgaaninen liuos kuivataan kiinteän vedettömän magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Jäljelle jäävä öljy kiteytetään metanolista. Saadaan 1,20 g (97,4 %) oikealle kiertyvää otsikkoyhdistettä kiteisenä aineena.

Sulamispiste: 122-123eC

[a]D = +38,7® (c = 1, dikloorimetaani).

Jakamisen emäliuoksen haihdutus tyhjössä tuottaa 1,65 g kiinteää vaahtoa. Noudattamalla olennaisesti edellä esitettyä menetelmää ja kiteyttämällä tuote metanolista saadaan 1.00 g (81,2 %) vasemmalle kiertävää otsikkoyhdistettä.

Sulamispiste: 122 - 123®C

[o]D = -37,5® (c = l, dikloorimetaani).

i6 83870

Esimerkki 2 (+)-la-etyyli-ip-hydroksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12,12bp-okta-hydroindolo[2,3-a]kinolitsiini ja (-)-ip-etyyli-la-hydroksi-metyyli-1,2,3,4,6,7,12,l2ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiini a) 1,95 g (5,97 mmoolia) (+)-Ιβ-asetyylioksimetyyli-la-etyyli-1,2,3,4,6,7,12,12b3-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiiniä, joka on valmistettu esimerkin 1 mukaisesti, liuotetaan 100 ml:aan kuumaa metanolia ja lisätään 0,05 g (0,92 mmoolia) natriummetylaattia, minkä jälkeen seosta kuumennetaan palau-tusjäähdyttäen 30 minuutin ajan. Reaktioseoksen annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan, sitten se kaadetaan 300 ml:aan tislattua vettä ja saostuneet valkoiset kiteet suodatetaan pois ja pestään kylmällä vedellä. Saadaan 1,65 g (97,6 %) oikealle kiertävää otsikkoyhdistettä valkoisena kiteisenä aineena.

Sulamispiste: 220 - 221°C.

[a]D = +110,4° (c = 1, dimetyyliformamidi).

b) Noudattamalla olennaisesti kohdassa a) esitetty menetelmää, mutta lähtemällä (-)-la-asetyylioksimetyyli-18-etyyli-1,2,3,4,6,7,12,12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinistä, joka on valmistettu esimerkin 1 mukaisesti, saadaan 1,60 g (94,2 %) vasemmalle kiertävää otsikkoyhdistettä kiteisenä aineena.

Sulamispiste: 220 - 221°C

[et]D = -108,0° (c = 1, dimetyyliformamidi).

Vasemmalle kiertävän otsikkoyhdisteen vetybromidi valmistetaan kuuman asetonin 10-kertaisesta määrästä vetybromidin 48 %:sen vesiliuoksen kanssa.

Sulamispiste: 280 - 282°C.

Sulamispiste metanolista suoritetun kiteytyksen jälkeen: 285 - 287°C.

Claims (1)

1. 2 C2H5 mukainen (-)-Ιβ-etyyli-la-asyylioksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12, 12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiinijohdannainen, jossa R2 on 1 - 6 hiiliatomia alkyyliosassa sisältävä alkyylikar-bonyyli, mahdollisesti substituoitu aryyli tai 1-6 hiiliatomia alkyyliosassa sisältävä aralkyylikarbonyyli, ja haluttaessa käsitellään hapolla saatu uusi kaavan (I) mukainen (-)-Ιβ-etyyli-la-hydroksimetyyli-l,2,3,4,6,7,12, 12ba-oktahydroindolo[2,3-a]kinolitsiini. n i9 83870 Förfarande för framställning av en terapeutiskt användbar, optiskt aktiv trans-(1)-Ιβ-etyl-la-hydroximetyl-1,2,3,4,6,7,12,12b3-oktahydroindolo[2,3-a]kinolizin med formeln (I) H0-CM2cX och syraadditionssalter därav, kännetecknat av att en 1:l-blandning bestäende av ett la-etyl-ip-acyloxi-metyl-1,2,3,4,6,7,12,12bp-oktahydroindolo[2,3-aJkinolizin-derivat med formeln (Ha) Ί (IIa) R1-0—CH2 l' ^2h5 och ett Ιβ-etyl-la-acyloximetyl-l,2,3,4,6,7,12,12b3-okta-hydroindolo[2,3-a]kinolizinderivat med formeln (Hb) 20 83870 Οφ& R,-° väri R1 är väte, en alkylkarbonyl med 1-6 kolatomer i alkyl-delen, en valbart substituerad arylkarbonyl eller en aralkylkarbonyl som innehäller 1-6 kolatomer i alkyl-delen, uppdelas med D-vinsyra, och valbart hydrolyseras det erhällna nya optiskt aktiva (-)-Ιβ-etyl-la-acyloximetyl-l,2,3,4,6,7,12,12ba-oktahydro-indolo[2,3-a]kinolizinderivatet med formeln (III), ΟπΘ. (m) f?— 0 —CH2' c2h5 väri R2 är en alkylkarbonyl med 1-6 kolatomer i alkyldelen, en valbart substituterad aryl eller en aralkylkarbonyl med 1-6 kolatomer i alkyldelen, under alkaliska förhällanden och, om sä önskas, behandlas den erhällna nya (-)-ip-etyl-la-hydroximetyl-1,2,3,4,6,7,12,12ba-oktahydroindolo[2,3-a]-kinolizinen med en syra. I: