ES2600963T3 - Células/Cepas Lactobacillus secadas por pulverización y su uso contra Helicobacter pylori - Google Patents
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Abstract
Composición que contiene células Lactobacillus secadas por pulverización para el uso en el tratamiento y profilaxix de infecciones por Helicobacter pylori a seres humanos o animales.
Description
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Celulas/ Cepas Lactobacillus secadas por pulverizacion y su uso contra Helicobacter pylori
[0001] La invencion se refiere a cepas de Lactobacillus o celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion (bacterias de acido lactico) asf como sus usos, particularmente para composiciones farmaceuticas y/o dieteticas, incluyendo un producto farmaceutico o suplemento alimenticio, para el tratamiento y profilaxis de infecciones de Helicobacter pylori a animal y a ser humano.
[0002] Microorganismos probioticos comprenden celulas, que muestran efectos ventajosos en cuerpos humanos o animales. Las composiciones probioticas contienen dichos microorganismos. Efectos ventajosos pueden consistir particularmente en el perfeccionamiento de la microflora del tubo digestivo. En la microflora particularmente pueden inhibirse otros microorganismos a traves de interacciones inmediatas entre los microorganismos probioticos y los microorganismos no deseados, por interacciones mediatas a causa de inhibiciones del metabolismo del microorganismo no deseado mediante los productos de expresion del microorganismo probiotico, o mediante el refuerzo del sistema inmunitario natural. Generalmente se supone que un mecanismo principal, la colonizacion competitive del tracto gastrointestinal, es un elemento eficaz esencial, por el que microorganismos no deseados no pueden colonizar la mucosa en medida importante o se pueden expulsar.
[0003] Un grupo de microorganismos probioticos se forma por ejemplo mediante cepas de lactobacilos. A este respecto se trata tfpicamente de bacterias grampositivas microaerofilas o anaerobicas, que fermentan azucar bajo la formacion de acidos, particularmente de acido lactico.
[0004] Del documento US 5,716,615 se conoce una composicion farmaceutica, que contiene entre otros lactobacilos. Esta es aplicable entre otras cosas para el tratamiento de enfermedades del tracto grastrointestinal.
[0005] Del documento WO 2004/087891 se conocen cepas de Lactobacillus que son adecuadas para la fabricacion de composiciones farmaceuticas o dieteticas para el tratamiento de infecciones del tracto gastrointestinal con Helicobacter pylori.
[0006] Interacciones de lactobacilos con Helicobacter pylori se describen en Wang et al., Am. J. Clin. Nutr. 80:737-41 (2004), Felley et al., Best Practice & Research Clinical Gastroenterology 17 (5): 785-791 (2003), Cazzato et al., Scandinavian Journal of Nutrition 48(1): 26-31 (2004) und Sgouras et al., Applied and Environmental Microbiology 70 (1): 518-526 (2004).
[0007] EP 1 112 692 A1 divulga productos secados por pulverizacion, como alimentos, que pueden contener celulas Lactobacillus, pero no celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion.
[0008] El documento WO 2008/060198 A1 divulga la utilizacion de celulas Lactobacillus, como DSM 17581, para la aplicacion farmaceutica, donde las bacterias tambien pueden ser secadas por pulverizacion. Sin embargo, no se divulga el tratamiento de infecciones H. pylori.
[0009] Helicobacter pylori es una bacteria espiraliforme, que coloniza el estomago, donde mediante la produccion de ureasa es alzado el valor del pH en el estomago y de esta manera se protegen las bacterias contra el acido gastrico. Las bacterias penetran en la mucosa y se depositan en las celulas epiteliales. Una infeccion de este tipo activa el sistema inmunologico propio del cuerpo, donde la respuesta inmune no es lo bastante eficaz para la eliminacion de la infeccion, con la consecuencia de una respuesta inmune fortalecida, que lleva a una inflamacion cronica y enfermedad como gastritis o ulceras de estomago y finalmente lleva para al carcinoma.
[0010] Cuando las celulas se ligan entre si y forman aglomerados, este procedimiento se denomina agregacion. Cuando con esta formacion de agregado solo esta implicado un tipo de celulas, se denomina autoagregacion. En caso de que en la formacion de agregado esten implicados al menos dos tipos de de celulas diferentes, el procedimiento se denomina coagregacion. El documento WO 2007/073709 del solicitante describe coagregados de lactobacilos con Helicobacter pylori, que pueden ser utilizados para la profilaxis, tratamiento y/o una terapia de erradicacion de infecciones de Helicobacter pylori, particularmente se alcanza al menos una reduccion de Helicobacter pylori. Ademas se describen en WO 2007/073709 a tal objeto cepas de Lactobacillus adecuadas que fueron depositadas en la Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ) (Coleccion alemana de microorganismos y cultivos de celulas SL), (DSMZ), Mascheroder Weg 1b, D-38124 Braunschweig, Deutschland, es decir: DSM 17646, DSM 17647, DSM 17648, DSM 17649, DSM 17650, DSM 17651, DSM 17652 und DSM 17653.
[0011] Las celulas Lactobacillus idoneas forman coagregados en el contacto con celulas de Helicobacter pylori. Por la formacion de coagregados se impide que Helicobacter pylori penetre en la mucosa del estomago. Las celulas Helicobacter pylori, particularmente su superficie celular, se enmascaran por las celulas Lactobacillus, de modo que las celulas Helicobacter pylori ya no estan en posicion de ligarse a las celulas epiteliales del estomago.
A traves del impedimento de union de Helicobacter pylori a las celulas epiteliales del estomago, no se producen reacciones de inflamacion. Las celulas Helicobacter pylori enmascaradas y desactivadas se hacen pasar y expulsan en
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forma de coagregados a traves del tracto gastrointestinal. Por lo tanto es posible reducir o a erradicar las celulas Helicobacter pylori por la administradon de celulas idoneas de Lactobaallus. La aplicacion de celulas de Lactobacillus puede ocurrir de forma profilactica o curativa.
De todas formas vale mejorar este enfoque terapeutico.
[0012] Por lo tanto la invencion se basa en la tarea de proporcionar una composicion mejorada para la profilaxis y tratamiento de infecciones de Helicobacter pylori. Particularmente u medio o composicion de este tipo, que permita una formacion mejorada de coagregados, donde mediante coagregados formados se inhibe/reduce de forma notable la colonizacion de la mucosa de estomago con Helicobacter pylori.
[0013] La aplicacion y la fabricacion de lactobacilos pulverizados en seco es conocida en el estado de la tecnica, p. ej. Gardiner et al., Comparative Survival Rates of Human-Derived Probiotic Lactobacillus paracasei and L. salivarius Strains during Heat Treatment and Spray Drying, Applied and Enviromental Microbiology 66 (6): 2605-2612 (2000) und Teixeira et al., Survival of Lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus Following Spray-Drying, J. Dairy Sci 78:1025-1031 (1995) und Tos t al., Spray Drying, Freeze Drying, or Freezing of three different lactic acid bacteria species, Journal of Food Sci., Wiley-Blackwell Publ., Inc. (US).
[0014] No se ha descrito sin embargo la utilizacion de lactobacilos secados por pulverizacion para la formacion de coagregados con Helicobacter pylori y su aptitud especial en forma de una composicion farmaceutica o dietetica.
[0015] Las celulas Lactobacllus secadas por pulverizacion pueden formar de forma particularmente ventajosa grandes coagregados con Helicobacter pylori y de esa manera provocar una reduccion eficiente de la carga de germenes por Helicobacter pylori.
De forma espeaalmente ventajosa el secado por pulverizacion de las celulas Lactobacllus lleva a una disminucion de celulas Lactobacillus, donde ademas se realiza un aislamiento / separaaon de las celulas. A diferencia de otros metodos de secado o metodos efectuados sin secado no se consiguen cadenas de dos a diez celulas Lactobacillus (figura 2A), sino - de forma caracterfstica para el secado por pulverizacion - celulas individuales (mono) o dos celulas (dfmero) (figura 2B). Estas "celulas germinativas" son muy adecuadas para la formacion in-situ de coagregados despues de su aplicacion en el medio del estomago y se consiguen coagregados de celulas Lactobacillus y celulas Helicobacter pylori ventajosamente espesos, compactos y eficientes, que presentan ademas un impedimento esterico ventajosamente pequeno en la fase de formacion de los coagregados. Estas celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion presentan un afinidad de enlace mas alta a Helicobacter pylori, como por ejemplo aquellas que se pueden produar segun la teorfa tecnica de WO 2007/073709. Por medio de la afinidad de enlace mas elevada se pueden ligar y unir mas celulas Helicobacter pylori a traves de menos celulas de lactobacilos. La afinidad de enlace mas alta lleva ademas a una estabilidad mas alta de los coagregados formados.
[0016] Ademas es ventajoso, que las celulas Lactobacllus presentan secadas por pulverizacion presentan igualmente una proporcon aumentada de celulas Lactobacillus no vivas y / o fragmentos de celulas, que apoyan igualmente la formacion espontanea de coagregados. La proporcion de celulas Lactobacillus sin vida y/o fragmentos de las mismas puede ser de mas del 80%, mas del 90 % incluso del 100 %.
[0017] Los coagregados segun la invencion recorren el tracto gastrointestinal y abandonan el cuerpo en modo natural. Mismamente en caso de que haya tenido lugar la infeccion, es util este mecanismo de accion de cepas Lactobacillus secadas por pulverizacion segun la invencion, puesto que es impedida otra infeccion con bacterias adiconales de Helicobacter pylori y de esta forma se puede combatir mas facilmente la infeccon preexistente a traves de la Inactivacion / secrecon de las bacterias Helicobacter pylori existentes. A esto se anade, que las cepas Lactobacillus segun la invencion presumiblemente tambien estan en posicion de inhibir la actividad de ureasa de Helicobacter pylori, de modo que las bacterias Helicobacter pylori en los coagregados pierden el ataque de acido gastrico. De este modo se logra tambien un efecto sinergico.
[0018] Las celulas Lactobacillus o cepas Lactobacillus secadas por pulverizacion presentan la ventaja especial de que se aumenta la afinidad de enlace a Helicobacter pylori (supra). Debido a que la superficie de Helicobacter pylori se enmascara por medio de las celulas Lactobacillus, se impide una penetracion de Helicobacter pylori en la mucosa y como consecuencia no puede puede tener lugar una infeccion de Helicobacter pylori junto con procesos inflamatorios cronicos y enfermedades consecuentes como gastritis, ulceras de estomago o ulceras hasta cancer de estomago se impiden de forma segura.
[0019] Ademas los coagregados segun la invencion de celulas Helicobacter pylori y celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion presentan una estabilidad aumentada, de modo que en primer lugar se puede integrar un numero aumentado de Helicobacter pylori en estos coagregados y en segundo lugar no tiene lugar ninguna liberacion de celulas de Helicobacter pylori previamente ligadas a traves de p. ej. movimientos de estomago. Esta ventaja permite una dosificacon ventajosamente mas baja frente a los coagregados conoados del estado de la tecnica. Ademas permiten las celulas Lactobaallus secadas por pulverizacion segun la invencion una solubilidad ventajosamente aumentada en agua, de modo que se puede lograr una distribucion mejorada de celulas secadas por pulverizacion y de los coagregados obtenidos en el espacio del estomago.
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[0020] Ademas los inventores podfan constatar que por medio del secado por pulverizacion de las celulas Lactobacillus se impide una formacion de agregados sin control de los mismos lactobacilos (autoagregacion) o al menos se reduce en gran medida frente a lactobacilos frescos no secados por pulverizacion. Por la autoagregacion de celulas Lactobacillus entre si se ocupan los sitios de enlace para el enmascaramiento de Helicobacter pylori. La reduccion o impedimento de la autoagregacion lleva por lo tanto igualmente a una dosificacion ventajosamente mas reducida de los lactobacilos empleados frente al estado de la tecnica.
[0021] El procedimiento de pulverizacion segun la invencion provoca un cambio morfologico de los lactobacilos, de modo que se aumenta la afinidad de enlace para Helicobacter pylori y asf puede tener lugar una formacion de coagregado mejorada.
[0022] El procedimiento de pulverizacion provoca un cambio morfologico de los lactobacilos, de modo que se aumenta la afinidad de enlace para Helicobacter pylori y asf puede ocurrir una formacion de coagregado mejorada.
[0023] Por lo tanto se refiere la invencion a una composicion farmaceutica o dietetica que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion para el uso en la profilaxis y tratamiento de infecciones Helicobacter pylori a animales y a seres humano, particularmente mamfferos.
[0024] En otra forma de realizacion de la invencion existen las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion en la composicion preferiblemente y esencialmente en una forma de mono y /o dfmeros (supra, Fig. 2B).
[0025] Por lo tanto se puede producir una composicion de este tipo segun la invencion, donde a.) las celulas Lactobacillus son secadas por pulverizacion y b.) las celulas Lactobacillus obtenidas secadas por pulverizacion se introducen un soporte fisiologicamente tolerable (ejemplos de formas de realizacion de portadores farmaceuticamente fisiologicamente tolerables son descritos abajo).
[0026] Ademas se refiere la invencion a una composicion de este tipo, donde despues de la aplicacion a seres humanos o animales se forman in situ coagregados con Helicobacter pylori en el medio del estomago, que preferiblemente son mayores y no menores que 50 pm, particularmente mayores y no menores que 100 pm, 150 pm, particularmente mayores que 500 pm, preferencialmente mayores que 1,000 pm o 1,100 pm.
[0027] El concepto "celulas Lactobacillus" en el sentido de la invencion (en sentido amplio, bacterias de acido lactico, tambien lactobacilos) comprende dichos microorganismos, que necesitan hidratos de carbono, en particular glucosa y lactosa, para la fermentacion de acido lactico y en general usan el camino de biosfntesis Embden-Meyerhof. Las celulas Lactobacillus se resumen taxonomicamente en la familia Lactobacteriaceae. Son grampositivas, no forman esporas y en general inmoviles. Las celulas Lactobacillus viven anaerobicamente, son sin embargo aerotolerantes, aunque no contienen heminas (citocromo, catalasa) (Schleifer et al., System. Appl. Microb.: 18, 461-467 (1995) oder Ludwiq et al., System. Appl. Microb. 15: 487-501 (1992). Las celulas Lactobacillus o las especies pueden sobre la base de acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus casei, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii, Lactobaallus paracasei, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus curvatus und Lactobacillus plantarum (todos homofermentativos), ademas Lactobaallus brevis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus fructivorans, Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus fermentum, Lactobaallus reuteri, Lactobacillus viridescens como tambien BiUdobacterium bifidum (todos heterofermentativos). Celulas Lactobacillus adecuadas de la solicitante se han depositado a tftulo de ejemplo: DSM 17646, DSM 17647, DSM 17648, DSM 17649, DSM 17650, DSM 17651, DSM 17652 und DSM 17653 (supra). Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus buchneri und Lactobacillus pentosus se prefieren segun la invencion.
[0028] Segun la invencion estan comprendidas igualmente dichas "celulas Lactobacillus" incluyendo “derivados” o "analogas" o "mutantes" de estas, que estan inactivadas, con vida o sin vida o representan partes y fragmentos, por ejemplo productos de escision mecanicos o enzimaticos o (p.ej. prensa francesa etc.), de celulas Lactobacillus en cuanto estas presentan la aptitud para la coagregacion.
[0029] Los conceptos y "derivados" "analogos" "mutantes" o "inactivado" comprenden en este caso tambien sobrenadantes de celulas o fermentacion, lisado, fracciones o extractos de "celulas Lactobacillus", donde estos sobrenadantes celulares o de fermentacion, lisados, fracciones o extractos poseen preferiblemente las caracterfsticas de celulas/ cepas/ microorganismos de Lactobacillus segun la invencion. A este respecto significa "lisado" - como tambien el concepto "extracto" - particularmente una solucion o suspension en un medio acuoso de las celulas segun la invencion del microorganismo y comprende por ejemplo macromoleculas, como ADN, ARN, protefnas, peptidos, lfpidos, hidratos de carbono y similares, asf como particularmente tambien escombros celulares. Preferiblemente comprende el lisado tambien pared celular o componentes de pared celular. Procedimientos para la fabricacion de lisados son conocidos de forma suficiente por el experto y comprenden p.ej. el uso de una "prensa francesa" o lisis enzimatica, molino de bolas con esferas de hierro o con perla de vidrio. El rompimiento de celulas puede tener lugar de forma enzimatica, ffsica o qufmica. Ejemplos de lisis celulares enzimaticas pueden ser enzimas individuales como tambien cocteles enzimaticos, como proteasas, proteinasa K, lipasas, glicosidasas; las lisis qufmicas se pueden provocar por ionoforos, detergentes como SDS, acidos o bases; los metodos ffsicos se pueden provocar a traves de presiones altas,
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como prensa francesa, osmolaridad, temperatures o cambio entre calor y trio. Ademas pueden combinarse metodos naturalmente qufmicos, ffsicos y enzimaticos.
[0030] Los "derivados" o "analogos" o "mutantes" o "inactivado de las celulas / cepas / microorganismos " de Lactobacillus segun la invencion presentan preferiblemente las mismas caracterfsticas que las cepas mencionadas. En este caso ya no se da preferiblemente una actividad metabolica en la " (forma) inactivada" o "derivados" o "analogos". "Analogos" de las celulas / cepas / microorganismos de Lactobacillus segun la invencion representan una forma del lisado o fragmentos. Un "fragmento" de las celulas /cepas / microorganismos de Lactobacillus segun la invencion representa una parte de las celulas, como p.ej. membrana celular, macromoleculas, como ADN, ARN, protefnas, peptidos, lfpidos, hidratos de carbono y similares, asf como tambien escombros celulares. El experto puede justificar los conceptos "analogos", “fragmentos, "derivados" o "mutantes" conforme a su sentido e interpretar los conceptos en el sentido de la presente invencion. Para poner a disposicion mutantes, derivados, fragmentos o analogos de celulas / cepas /microorganismos de Lactobacillus, el experto puede recurrir a bibliograffa estandar, que existe y divulga tecnicas, que se pueden usar para la produccion de mutantes, derivados, fragmentos o analogos. Mutantes o variantes modificadas geneticamente o derivados son modificados de forma genetica, por ejemplo a traves de tecnologfas-ADN recombinantes (clonar, secuenciar, transformar acidos nucleicos recombinantes), como tambien mutagenesis ffsica, por ejemplo a traves de radiacion ultravioleta, pero tambien a traves de agentes qufmicos, como con etil metano sulfonato (EMS). Se pueden seleccionar variaciones en las caracterfsticas positivas - bien de manera intencionada o por la evaluacion de un gran numero de mutantes surgidos. Mutantes modificados geneticamente comprenden celulas de los microorganismos segun la invencion y hospedan acidos nucleicos recombinantes en sus plasmidos y/o cromosoma bacteriano. Las modificaciones por mutaciones de punto pueden ademas tener efectos sobre la expresion/ transcripcion/ traslacion, como tambien mutaciones espontaneas sin manipulacion genetica directa (vease p.ej. J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis, Cold Molecular cloning: a laboratory manual / Spring Harbor Laboratory Press, 3. Auflage (2001)).
[0031] Todos estos microorganismos se denominan antes y despues "celulas Lactobacillus".
[0032] Cromosoma y/o plasmidos. Las modificaciones por mutaciones de punto pueden a su vez tener efectos sobre la expresion/ transcripcion /traslacion, como tambien mutaciones espontaneas sin manipulacion genetica directa (vease p.ej. J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis, Cold Molecular cloning: a laboratory manual / Spring Harbor Laboratory Press, 3. Auflage (2001)).
[0033] Todos estos microorganismos se denominan antes y despues "celulas Lactobacillus".
[0034] Las condiciones de cultivo esenciales del tracto estomacal humano comprenden un valor del ph en el area de 1,8 hasta 4,5 y la presencia de pepsina y NaCl. Un medio de referenda, que es caracterfstico de dichas condiciones de cultivo, comprende los componentes siguientes: agua, 5 g/l NaCl asf como 3 g/l de pepsina donde el valor de pH se ajusta a 2,0 o 4,0 con acido clorhfdrico, para simular un estomago vacfo o lleno.
[0035] El concepto del "coagregacion" en es sentido de la Invencion designa la formacion de agregados celulares de un tamano de al menos 50 pm o 100 pm y mas, que contienen celulas Lactobaallus secadas por pulverizacion segun la invencion y celulas Helicobacter pylori, en suspensiones, por ejemplo segun los ejemplos siguientes, particularmente en un medio de referencia, como se ha descrito anteriormente.
[0036] El concepto " celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion " en el sentido de la Invencion significa que las celulas Lactobacillus se secan mediante un metodo de pulverizacion o de vaporizacion (sinonimo), donde p.ej. una suspension de celulas Lactobacillus se divide en gotitas finas de tipo niebla y puede obtenerse un polvo.
[0037] En un secado por pulverizacion una solucion o suspension que contiene celulas Lactobaallus se pulveriza en un medio de secado caliente y de esta manera se seca. La mezcla por pulverizar puede tener forma de solucon, emulsion, suspension o dispersion. Con ayuda una tobera o una rueda espray se pulveriza en millones de gotita individuales, al mismo tiempo que se agranda la superficie en gran medida. El disolvente, como agua, se vaporiza y desaparece rapidamente a traves del aire caliente. Ademas solamente las celulas Lactobacillus son secadas por pulverizacion. de la companfa Buchi Labortechnik AG (Deutschland) o SD-6.3-R de la companfa GEA Niro (Danemark). Ademas es conocido, que se pueden usar cualesquiera medios auxiliares y aditivos.
[0038] La invencion se refiere ademas a una composicion farmaceutica y/o dietetica que contiene una dosis fis iologica eficaz de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion segun la invencion celulas y un soporte fisiologicamente tolerable. Las composiciones farmaceuticas son composiciones, que solamente sirven a objetivos terapeuticos o profilacticos y donde ademas de celulas Lactobacillus unicamente se han anadido componentes auxiliares y/o soportes habituales en la galenica. Las composiciones dieteticas en el sentido de la presente invencion son composiciones, que ademas de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion segun la invencion comprenden un alimento (vease p.ej. de forma no concluyente Directiva de la UE 2002/46/EG del 10 junio 2002) y/o un pienso para animales domesticos y/o animales utiles y / o suplemento alimenticio, que eventualmente contienen componentes auxiliares y aditivos.
[0039] La invencion se refiere a tambien a la utilizacion o uso de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion para la fabricacion de una composicion farmaceutica o dietetica, o un producto farmaceutico o un suplemento alimenticio que
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contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion o una composicion farmaceutica o dietetica, especialmente para la profilaxis e/o tratamiento de enfermedades causadas por la infeccion con Helicobacter pylori, por ejemplo enfermedades gastrointestinales. Entre estas estan particularmente gastritis, ulceras de estomago, ulcera y cancer de estomago. Ademas estan comprendidas aquellas enfermedades y sfntomas, como molestias de vientre, particularmente molestias en el abdomen superior, presion de estomago, calambres de estomago, dolor de estomago, dolores o presion en el abdomen superior, quemazon en el abdomen superior, molestias abdominales cronicas, sensacion de estomago lleno, inapetencia, hambre dolorosa, flatulencias, ardor de estomago, diarrea, irregularidades en deposiciones, mal, nauseas, asco y vomito, intolerancias alimenticias, malabsorcion, estomago irritable (dispepsia funcional), gastritis, dano de mucosa, enfermedad de ulcera gastroduodenal.
[0040] Ademas se refiere la invencion a la utilizacion o uso de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion segun la invencion, o un medicamento o un suplemento alimenticio que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion o una composicion farmaceutica o dietetica, para la erradicacion o terapia de erradicacion de Helicobacter pylori, eventualmente. en combinacion con otros agentes activos idoneos, como antibioticos.
[0041] Una composicion farmaceutica o dietetica segun la invencion o, particularmente un suplemento alimenticio o producto farmaceutico (medicamento), se puede caracterizar por el hecho de que contiene 102 hasta 1015, preferiblemente 104 o 108 hasta 1012, particularmente 108 hasta 1010, celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion. El tamano de referenda es una unidad de administracion, por ejemplo una pastilla. La composicion preferiblemente se prepara para la administracion oral.
[0042] La preparacion galenica de una composicion dietetica o farmaceutica segun la invencion, particularmente un suplemento alimenticio o producto farmaceutico (medicamento), puede tener lugar conforme a la tecnica. Formas de preparacion galenicas adecuadas compactas o lfquidas son por ejemplo granulados, polvo, grageas, pastillas, microcapsulas, capsulas duras, supositorios, jarabes, zumos, suspensiones, o emulsiones, para cuya fabricacion se emplean excipientes habituales en la fabricacion como soportes, explosivos, aglutinante, de revestimiento, Gleit™ o lubricante, sabores aromaticos, edulcorantes y agente de solubilizacion. Como excipientes se citan estearado di magnesio, cloruro sodico, carbonato de magnesio, dioxido de titanio, lactosa, manita y otros azucares, talco, protefna de la leche, gelatina, almidon, celulosa y sus derivados, aceites vegetales y animales como aceite de hfgado de bacalao, aceite de sesamo, cacahuete o girasol, polietilenoglicoles y disolventes, como por ejemplo agua esteril y alcohol mono o polivalente, por ejemplo glicerina. Una composicion farmaceutica segun la invencion se puede producir de manera que celulas de al menos una cepa de Lactobacillus segun la invencion se mezcla en dosis definida con un soporte farmacologicamente adecuado y fisiologicamente tolerable y en su caso con otros excipientes, aditivos o principios activos con dosis definida y se prepara a esta forma de administracion deseada. Como soportes entran en particular en consideracion, los seleccionados del grupo que consiste en maltodextrina, celulosa microcristalina, almidon, particularmente almidon de mafz, levulosa, disolvente, como por ejemplo agua esteril y alcohol mono o polivalente, por ejemplo glicerina. Una composicion farmaceutica segun la invencion se puede producir de forma que celulas de al menos una de capa utilizada de Lactobacillus segun la invencion se mezcla en dosis definida con un soporte farmacologicamente adecuado y fisiologicamente tolerable y en su caso con otros excipientes, aditivos o principios activos con dosis definida y se prepara a esta forma de administracion deseada. Como soportes entran en particular en consideracion los que son seleccionados del grupo que consiste en maltodextrina, celulosa microcristalina, almidon, particularmente almidon de mafz, levulosa, lactosa, dextrosa y mezclas de tales sustancias. La composicion puede contener o consistir en 0,1 hasta 95 % en peso de soporte y 5 hasta 99,9 % en peso de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion, en referencia a la cantidad total de celulas y soporte.
[0043] En el caso de la composicion farmaceutica y / o suplementos alimentiaos se puede prever, que la composicion contenga 102 hasta 1015, preferiblemente 104 hasta 1012, particularmente 108 hasta 1010, de celulas Lactobacillus. El tamano de referenda es una unidad de administracion, por ejemplo una unidad de embalaje de un alimentos para venta a un consumidor final. El soporte fisiologicamente tolerable sera generalmente un alimento, que se selecciona particularmente del grupo que consiste en productos lacteos, productos lacteos fermentados, leche, yogur, queso, cereales, barritas de musli, bebidas y productos de panaderfa y pastelerfa y preparaciones alimentiaas para ninos. Productos alimenticios adecuados segun la invencion. Incluyendo agua, son aquellos como p.ej. definidos de forma no concluyente en el Reglamento (EG) Nr. 178/2002 del 28. enero 2002.
[0044] La invencion se refiere ademas a un metodo para la fabricacion de una composicion farmaceutica y/o dietetica segun la invencion, particularmente un suplemento alimenticio o producto farmaceutico (medicamento), siendo las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion mezcladas con el soporte fisiologicamente tolerable y preferiblemente preparadas para la administracion oral.
[0045] Ademas se divulga un metodo para la fabricacion de una composiaon segun la invencion, donde las celulas Lactobacillus son (i) opcionalmente enriquecidas y (ii) fermentadas y (iii) y secadas por pulverizacion y a continuacion se mezclan con un soporte fisiologicamente tolerable y se preparan preferiblemente para la administracion oral. De forma ilimitada. Particularmente es adecuado esto ultimo para una profilaxis duradera asf como una prevencion de enfermedades de recafda.
[0046] A continuacion la invencion se explica de forma detallada por medio de unicamente ejemplos descriptivos de
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formas de realizacion, sin querer limitar la invencion a estos ejemplos.
Ejemplos y figuras:
Ejemplo 1: Almacenamiento de cepas usadas
[0047] El almacenamiento de las cepas Lactobacillus se realizo en el estado helado. 1 ml de un cultivo cultivado hasta la fase estacionaria (OD600/ml 4-8) en medio MRS (55g/l, pH 6,5; Difco, USA) fue mezclado con 500 pl de una solucion de glicerina esteril de 50 % (v/v) y la mezcla se congelo a - 80 °C.
[0048] El almacenamiento de Helicobacter pylori se realizo en estado helado. 1 ml de un cultivo cultivado hasta la fase estacionaria en caldo de brucella (28g/l, pH 7,0; BD USA), suplementado con 10 % (v/v) de suero fetal bovino (Biochrom), fue mezclado con 500 pl de una solucion de glicerina esteril al 50 % (v/v) y la mezcla se congelo - 80 °C.
Ejemplo 2: Proceso para la produccion de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion
[0049] Un Lactobacillus secado por pulverizacion, que esta en posicion de coagregar Helicobacter pylori, bajo las condiciones de cultivo del tracto digestivo humano, particularmente del estomago, fue producido como se describe a continuacion:
El precultivo 1 tuvo lugar en un vaso de reaccion de 15 ml en un medio MRS de 10 ml. El medio fue inoculado con celulas cultivadas en fresco, congeladas, liofilizadas o secadas por pulverizacion de la cepa Lactobacillus. Este precultivo 1 fue incubado durante 24 h a 37 °C bajo condiciones anaerobicas. El precultivo completo 1 fue usado para inocular el precultivo 2. El precultivo 2 consistfa en 240 ml de medio MRS con 10 ml de precultivo 1. El precultivo 2 fue incubado durante 19 h a 37 °C bajo condiciones anaerobicas. A final de cada precultivo fueron determinados densidad optica, valor de ph y cfu.
[0050] Para la fermentacion de Lactobacillus fueron usados 5 litros de MRS. El fermentador fue autoclavado con todos los componentes necesarios. Los valores nominales para la temperatura y el numero de revoluciones de agitacion eran 37 ° c y 150 U / min. La concentracion de inoculacion era de un 5%. Al final de la fermentacion se determinaron el numero de celulas, unidades formadoras de colonias, pH, densidad optica a 600 nm y la concentracion de glucosa y lactato. A continuacion el caldo de fermentacion se concentro 10 veces hasta 20 veces mas. A continuacion el concentrado fue congelado.
[0051] Antes de del secado fue descongelado el concentrado multiplicado por 20 y se centrifugo a 4300 X g durante 15 minutos. Las celulas en un nuevamente centrffuga una vez con 0,9 % solucion NaCl lavado y a 4300 X g para 15 minutos. Despues las celulas fueron resuspendidas en 500 ml de 10 % de solucion NaCl.
[0052] El secado por pulverizacion fue hecho en un secador Buchi minispray B-191. La temperatura inicial era 140 °C. La temperatura de salida era 86 °C. La corriente de aire caliente era 550 L/si. El rendimiento del aspirador era de 75 %, el fndice de bombeo 5 %. La suspension celular se seco con los parametros anteriores y a continuacion fue tomado el polvo de Lactobacillus secado por pulverizacion.
[0053] A continuacion siguio una determinacion del numero de celulas total y numero de celulas vivientes de la cepa Lactobacillus por gramo de polvo secado por pulverizacion. El examen microscopico del polvo secado por pulverizacion (figura 2B) mostro que las celulas Lactobacillus son mas pequenas que las celulas Lactobacillus (figura 2A) no secadas por pulverizacion y que las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion existen en mono y dfmeros, mientras que las celulas Lactobacillus no secadas por pulverizacion presentan cadenas mas largas. Hasta nueva aplicacion las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion fueron almacenadas a 4 °C.
Ejemplo 3: Comparacion de la coagregacion de Helicobacter pylori a traves de celulas Lactobacillus o cepas Lactobacillus secadas por pulverizacion y no secadas por pulverizacion bajo condiciones del estomago
[0054] El cultivo de celulas Lactobacillus se realizo en tubos cerrados de 15 ml en medio MRS a 37 °C durante 24 h. Para el examen de lactobacilos secados por pulverizacion se resuspendio el polvo secado por pulverizacion en PBS con una concentracion de 10 mg / ml. Helicobacter pylori fue cultivado durante aprox 2 dfas en matraz Erlenmeyer bajo condiciones microaerofilas en caldo Brucella (28 g / L, pH 7,0; BD, USA) con 10% de suero bovino fetal (Biochrom) a 37 °C. Despues del cultivo se examino la morfologfa celular de Helicobacter pylori de manera microscopica. Se hicieron ensayos con celulas de morfologfa sigmoidal o con celulas de morfologfa cocoidal. Tambien se examinaron cultivos con morfologfa mezclada.
[0055] Las celulas respectivas fueron cosechadas por centrifugacion siendo 3200 g durante 10 min y el sobrenadante fue desechado. Las celulas Lactobacillus fueron lavadas una vez en tampon de 5 ml y resuspendidas en tampon PBS de 5 ml (tampon PBS que contiene 1,5 g/l Na2HPO4*2H2O, 0,2 g/l KH2PO4 y 8,8 g/l NaCl). Las celulas Helicobacter pylori fueron lavadas una vez en 5 ml de tampon PBS y resuspendidas en 5 ml de jugo gastrico artificial (que contiene 5 g/l NaCl y 3 g/l pepsina (Sigma)). El valor OD600 fue medido para las celulas respectivas y sobre un valor de 2 para
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Helicobacter pylori o 4 para Lactobacillus mediante la adicion de jugo gastrico artificial o tampon PBS ajustado.
[0056] 2,5 ml de cada suspension celular obtenida asf (Helicobacter pylori /Lactobacillus) fueron mezclados y la mezcla fue agitada durante 10 s hasta 10 min. El resultado era tambien visible de forma optica a traves de clara floculacion de las muestras que contenfan Helicobacter pylori y Lactobacillus, y fue tambien examinado de manera microscopica.
[0057] Figura 1A muestra la imagen microscopico de coagregados de Helicobacter pylori y celulas de Lactobacillus DSM 17648 no secadas por pulverizacion. Figura 1B muestra la imagen microscopica de coagregados de Helicobacter pylori y celulas de Lactobacillus DSM 17648 secadas por pulverizacion. Estos coagregados son bastante mayores que los coagregados de celulas Lactobacillus no secadas por pulverizacion. Se llevaron a cabo experimentos de control sobre autoagregacion a traves del examen separado de cultivos con respectivamente Lactobacillus y Helicobacter pylori de forma aislada.En las figuras 1C 1D, 1D y 1E no se ve coagregacion ni autoagregacion. Figura 1C muestra la imagen microscopica de celulas Lactobacillus DSM 17648 cultivadas en fresco bajo condiciones de estomago artificiales. Figura 1D muestra la imagen microscopica de celulas secadas por pulverizacion Lactobacillus DSM 17648 bajo condiciones de estomago artificiales. Figura 1E muestra la imagen microscopica de celulas Helicobacter pylori cultivadas en fresco bajo condiciones de estomago artificiales.
Ejemplo 4: Probar la estabilidad de los coagregados entre celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion y celulas Helicobacter pylori
[0058] Para probar la estabilidad de los coagregados bajo condiciones in vivo los experimentos se realizaron como en el ejemplo 3. Los coagregados formados despues de 5 minutos de agitacion entre celulas Lactobacillus y celulas Helicobacter pylori fueron expuestos a altas fuerzas de cizallamiento por el pipeteado de la suspension durante 1 minuto o 2 minutos de agitacion a alta velocidad. Despues se examino el tamano del coagregado de manera microscopica y macroscopica. El tamano de los coagregados de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion y Helicobacter pylori no disminufa, mientras que disminufa el tamano de los coagregados de celulas Lactobacillus no secadas por pulverizacion y Helicobacter pylori.
Ejemplo 5: Fabricacion de una composicion farmaceutica con cepas Lactobacillus segun la invencion
[0059] Las celulas de una cepa Lactobacillus o varias cepas de Lactobacillus de la invencion se crfan segun el ejemplo 1 y 2 y se secan por pulverizacion. El polvo secado por pulverizacion es molido entonces sobre un tamano de partfcula de maximo aprox. 1 mm de diametro. El granulado obtenido se mezcla en las proporciones de cantidades siguientes (% en peso) con sustancias del portador o excipientes: 20% granulado, 2% dioxido de silicio (Syloid IFP-Al, GRACE Davidson), 1% estearato de magnesio (MF-2-V; Ackros), 77% celulosa microcristalina (Avicel PH 112, FMC).
[0060] La mezcla se realiza en un micromezclador Quintech en la posicion 70 nivel II. Todos los componentes son anadidos simultaneamente. La mezcla se realiza durante aprox. 120 s. A continuacion se comprime la mezcla obtenida en una prensa de comprimidos habitual en el mercado bajo condiciones normales, pero con fuerza de compresion a ser posible mas baja (< 10 kN) en comprimidos con un peso de aprox 500 mg. Cada pastilla contiene aprox 108 hasta 1010 de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion.
[0061] Ejemplo 6: Comparacion de la coagregacion de Helicobacter pylori a traves de celulas Lactobacillus o cepas Lactobacillus no secadas por pulverizacion y secadas por pulverizacion usando diferentes numeros de celulas de Lactobacillus.
[0062] El cultivo de celulas Lactobacillus se realizo en tubos cerrados de 15 ml en medio MRS a 37 °C durante 24 h. Para el examen de celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion fue resuspendido el polvo secado por pulverizacion en PBS con una concentracion de 10 mg / ml. Helicobacter pylori fue cultivado durante aprox. 2 dfas en matraz de Erlenmeyer bajo condiciones microaerofilas en caldo Brucella (28 g / L, pH 7,0; BD, USA) con 10 % suero bovino fetal (Biochrom) a 37 °C. Despues del cultivo la morfologfa celular de Helicobacter pylori fue examinada de modo microscopico. Se realizaron ensayos con celulas de morfologfa sigmoidal o con celulas de morfologfa cocoidal. Tambien se examinaron cultivos de morfologfa mezclada.
[0063] Las celulas respectivas fueron recogidas por centrifugacion con 3200 g durante 10 min. y el sobrenadante fue desechado. Las celulas Lactobacillus fueron lavadas una vez en 5 ml de tampon y resuspendidas en 5 ml de tampon PBS (tampon de PBS que contiene 1,5 g/l Na2HPO4*2H2O, 0,2 g/l KH2PO4 y 8,8 g/l NaCl). Las celulas Helicobacter pylori fueron lavadas una vez en 5 ml de tampon PBS y resuspendidas en 5 ml de jugo gastrico artificial (conteniendo 5 g/l NaCl y 3 g/l pepsina (Sigma)). El valor OD600 valor fue medido para las celulas respectivas y ajustado a un valor de 2 para Helicobacter pylori o 4 para Lactobacillus mediante la adicion de jugo gastrico artificial y tampon PBS.
[0064] De las suspensiones de Lactobacillus se realizo una determinacion del numero de celulas mediante camara thoma y diluciones, para conseguir suspensiones con numeros de celulas definidos de forma diferente. 2,5 ml de cada suspension celular obtenida asf (Helicobacter pylori / Lactobacillus) fueron mezclados y la mezcla fue agitada durante 5 min. Despues de un tiempo de reposo de 2 minutos el resultado era tambien visible tanto de forma optica a traves de floculacion en las muestras, que contenfan Helicobacter pylori y Lactobacillus, como tambien de manera microscopica
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(fotografias no mostradas). Para la cuantificacion de la coagregacion se tomo de la fase libre de coagregado (sobrenadante; sedimentar coagregado) 1 ml y se determino el OD600.
Sobre la formula
se determino la fuerza de coagregacion (en %). Las figuras 3 y 4 muestran la fuerza de coagregacion de celulas Lactobacillus DSM 17648 cultivadas en fresco frente a Helicobacter pylori. 0 % representa el OD600 del Helicobacter pylori (en el sobrenadante) sin adicion de celulas Lactobacillus (ninguna coagregacion o ninguna sedimentacion condicionada por la coagregacion). El 100 % de la fuerza de agregacion representa una fuerza de coagregacion maxima, por lo tanto un OD600 de 0 o el OD600 del medio utilizado sin celulas (todas las celulas Helicobacter pylori sedimentan a causa de la coagregacion y ninguna celula Helicobacter pylori se registra en el sobrenadante por medicion OD).
[0065] Con el mismo numero de celulas, las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion presentan una fuerza de coagregacion de Helicobacter pylori superior al doble que las celulas cultivadas en fresco (figura 3 y 4).
Descripcion de las figuras:
[0066]
Figura 1A muestra coagregados de celulas Lactobacillus DSM 17648 y Helicobacter pylori (los coagregados muestran un tamano de 40 pm y mas) cultivadas en fresco no secadas por pulverizacion bajo condiciones de estomago s imuladas .
Figura 1B muestra un coagregado muy grande de celulas Lactobacillus DSM 17648 secado espray y Helicobacter pylori (los coagregados muestran un tamano de 40 pm y mas) bajo condiciones de estomago simuladas.
Figuras 1C a 1E sirven de controles en el experimento.
Figura 1C muestra celulas Lactobacillus DSM 17648 cultivadas en fresco bajo condiciones de estomago simuladas. Una autoagregacion no es reconocible.
Figura 1D muestra celulas Lactobacillus DSM 17648 secadas por pulverizacion bajo condiciones de estomago simuladas. Una autoagregacion no es reconocible.
Figura 1E muestra celulas Helicobacter pylori cultivadas en fresco bajo condiciones de estomago simuladas. Una autoagregacion no es reconocible. (Figuras A-E han ampliado el tamano por 1000)
Figuras 2A y 2B muestran la morfologfa de las celulas Lactobacillus.
Figura 2A muestra celulas Lactobacillus no secadas por pulverizacion. Las celulas estan en cadenas de 2 hasta 10 celulas.
Figura 2B muestra celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion. Las celulas se presentan como monomeras y dfmeras (1 hasta 2 celulas) y estan muy reducidas en comparacion con las celulas no secadas por pulverizacion.
Figura 3: Comparacion de la fuerza de coagregacion de celulas Lactobacillus DSM 17648 cultivadas en fresco y secadas por pulverizacion frente a Helicobacter pylori. Se utilizaron respectivamente 1,4 X 108 celulas Lactobacillus en las pruebas. Con el mismo numero de celulas presentan las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion una actividad de coagregacion de Helicobacter pylori superior al doble que las celulas cultivadas en fresco. 0 % representa el OD600 de Helicobacter pylori (en el sobrenadante) sin adicion de celulas Lactobacillus (sin coagregacion ni sedimentacion condicionada por la agregacion). El 100 % de la fuerza de agregacion representa una fuerza de coagregacion maxima, por lo tanto un OD600 de 0 o el OD600 del medio utilizado sin celulas (todas las celulas Helicobacter pylori sedimentan a causa de la coagregacion y no se registran celulas Helicobacter pylori en el sobrenadante por medicion OD).
Figura 4: Comparacion de la fuerza de coagregacion de celulas Lactobacillus DSM 17648 cultivadas en fresco y secadas por pulverizacion frente a Helicobacter pylori. Se utilizaron cantidades respectivamente diferentes de celulas
Lactobacillus en las pruebas. Las celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion presentan el doble de fuerza de coagregacion de Helicobacter pylori que las celulas cultivadas en fresco. 0 % representa el OD600 del Helicobacter pylori (en el sobrenadante) sin adicion de celulas Lactobacillus (sin coagregacion ni sedimentacion condicionada por la coagregacion). El 100 % de la fuerza de agregacion representa una fuerza de coagregacion maxima, por lo tanto un 5 OD600 de 0 o el OD600 del medio utilizado sin celulas (todas las celulas Helicobacter pylori sedimentan a causa de la
coagregacion y no se registran celulas Helicobacter pylori en el sobrenadante mediante medicion OD).
Claims (11)
- 5101520253035404550REIVINDICACIONES1. Composicion que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion para el uso en el tratamiento y profilaxix de infecciones por Helicobacter pylori a seres humanos o animales.
- 2. Composicion para el uso segun la reivindicacion 1 que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion, caracterizada por el hecho de que estas estan esencialmente presentes en una forma monomera y/o dfmera.
- 3. Composicion para el uso segun la reivindicacion 1 o 2, donde a.) las celulas Lactobacillus son secadas por pulverizacion y b.) las celulas Lactobacillus obtenidas secadas por pulverizacion se introducen en un soporte fisiologicamente compatible.
- 4. Composicion para el uso segun una de las reivindicaciones precedentes, donde despues de la aplicacion en el medio estomacal se forman in situ coagregados con Helicobacter pylori.
- 5. Composicion para la aplicacion segun una de las reivindicaciones precedentes, donde los coagregados no son menores que 50 pm, particularmente mayores que 500 pm.
- 6. Composicion para el uso segun una de las reivindicaciones precedentes, donde se seleccionan las celulas Lactobacillus del grupo lactis, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus casei, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus curvatus und Lactobacillus plantarum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus fructivorans, Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus viridescens, DSM 17646, DSM 17647, DSM 17648, DSM 17649, DSM 17650, DSM 17651, DSM 17652, DSM 17653, preferentemente Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus buchneri y Lactobacillus pentosus.
- 7. Composicion para el uso segun una de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por el hecho de que existe una composicion farmaceutica o dietetica, particularmente en forma de un alimento o producto alimenticio y/o un pienso para animales domesticos y/o utiles y / o suplemento alimenticio que eventualmente contiene excipientes y aditivos.
- 8. Composicion para el uso segun una de las reivindicaciones precedentes para la terapia de erradicacion de Helicobacter pylori, eventualmente. en combinacion con otros agentes activos idoneos, como antibioticos.
- 9. Producto farmaceutico que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion o una composicion segun la reivindicacion 1 para el uso y profilaxis de infecciones por Helicobacter pylori a seres humanos o animales.
- 10. Suplemento alimenticio que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion o una composicion segun la reivindicacion 1 para el uso en el caso de infecciones por Helicobacter pylori a seres humanos o animales.
- 11. Producto farmaceutico o suplemento alimenticio o composicion dietetica que contiene celulas Lactobacillus secadas por pulverizacion para el uso en infecciones con enfermedades debidas a Helicobacter pylori, particularmente enfermedades gastrointestinales, como gastritis, ulceras de estomago, cancer de estomago, molestias de vientre, particularmente molestias del abdomen superior, presion de estomago, calambres de estomago, dolor de estomago, dolores o presion en el abdomen superior, quemazon en el abdomen superior, molestias abdominales recurrentes de forma cronica, sensacion continua de estomago lleno, falta de apetito, hambre dolorosa, flatulencias, ardor de estomago, diarrea, irregularidades en el tracto intestinal, indisposicion, nauseas, vomitos, intolerancias alimentarias, malabsorcion, irritacion de estomago (dispepsia funcional), inflamacion de la mucosa del estomago, dano de mucosa, enfermedad de ulcera gastroduodenal, particularmente su profilaxis y tratamiento, y para el uso en la terapia de erradicacion de Helicobacter pylori, eventualmente. en combinacion con otros agentes activos idoneos, como antibioticos.
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