ES2195902T5 - Composicion que comprende esfingomielinasa alcalina de origen bacteriano para uso como preparacion dietetica, complemento alimenticio o producto farmaceutico. - Google Patents
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Abstract
Composición dietética, nutritiva o farmacéutica, caracterizada porque comprende esfingomielinasa alcalina en una cantidad que es suficiente para ejercer un efecto dietético, nutricional o terapéutico en un individuo que lo necesite.
Description
Composición que comprende esfingomielinasa
alcalina de origen bacteriano para uso como preparación dietética,
complemento alimenticio o producto farmacéutico.
La presente invención se refiere a composiciones
dietéticas, nutricionales o farmacéuticas que contienen
esfingomielinasa alcalina.
Por consiguiente, estas composiciones pueden
estar en la forma y actuar como complementos alimenticios, bases
dietéticas o preparaciones medicinales propiamente dichas, según si
están dirigidas a actuar como bases o tratamientos profilácticos o
como preparaciones terapéuticas propiamente dichas, dependiendo de
los individuos concretos a los que se dirige la composición.
Se han identificado tres tipos diferentes de
esfingomielinasa (SMasa) hasta ahora.
Existe una esfingomielinasa ácida, que es una
enzima lisosómica (con un pH óptimo de 4,5-5), cuya
ausencia de la cual causa la enfermedad de
Niemann-Pick, y existe una esfingomielinasa neutra,
con un pH óptimo de 7,5, para la que se han descrito dos isoformas.
Una de estas isoformas se ubica en la membrana citoplasmática y es
dependiente de magnesio, mientras que la otra está contenida en el
citosol y es independiente de cationes. Tanto la esfingomielinasa
ácida como la neutra se encuentran en muchos tejidos y células y son
enzimas ubicuas, que regulan numerosas funciones celulares.
El tercer tipo se denomina esfingomielinasa
alcalina, porque es principalmente activa a pH 9. Es independiente
de magnesio y se ha encontrado tanto en las vellosidades
intestinales fronterizas como en la bilis. La esfingomielinasa
alcalina no se produce en el estómago, duodeno o páncreas pero se
encuentra en el intestino, especialmente en la parte distal del
yeyuno. Se ha observado una notable actividad esfingomielinasa
alcalina también en el colon y en el recto. Se han encontrado
también niveles elevados de esfingomielinasa alcalina en la bilis,
pero esto parece ser propio de los seres humanos. Esta doble fuente
de esfingomielinasa hace que los seres humanos sean muy eficaces en
comparación con otras criaturas con respecto a la hidrólisis de la
esfingomielina (SM) introducida a través de la dieta. Hasta ahora
se ha pensado que la esfingomielinasa alcalina no puede ser
producida por una bacteria intestinal, porque no se han encontrado
diferencias entre los animales convencionales y los libres de
bacterias (véase R.D. Duan, Scand. J. Gastroenterology, 33
(1998) pgs. 673-683).
Además de la esfingomielinasa alcalina que está
presente en el intestino y que está presente en la bilis, no se
conocen otras esfingomielinasas alcalinas que pudieran usarse para
producir composiciones dirigidas a uso nutricional, dietético o
estrictamente terapéutico. Además, la esfingomielinasa ácida y la
neutra no pueden emplearse debido a sus características diferentes
(véase la tabla a continuación).
\vskip1.000000\baselineskip
Ya se conoce el uso de la esfingomielinasa con
fines cosméticos y dermatológicos.
La Patente Japonesa Nº. 63 216.813 describe
composiciones cosméticas que contienen esfingomielinasa y que están
dirigidas a contrarrestar la disminución fisiológica de esta enzima
que se produce en la piel al envejecer, y a promover su
transformación en ceramida la cual, por su parte tiene un efecto
hidratante beneficioso sobre la epidermis.
La Solicitud de Patente Internacional PCT WO
98/22.082 describe el uso de la esfingomielinasa para la preparación
de composiciones dermatológicas adecuadas para tratar alteraciones
de la piel tales como dermatitis, soriasis, ictiosis y dolencias
similares. Además, la Solicitud de PCT describe la preparación de
esfingomielinasa a partir de cepas de bacterias
Gram-negativas, bacterias
Gram-positivas y bacterias ácido lácticas, con
claras ventajas sobre los procedimientos previamente conocidos, que
usan como materiales de partida los órganos de animales superiores,
tales como el cerebro y el hígado.
Ahora se ha encontrado, sorprendentemente, que
algunas bacterias poseen niveles elevados de esfingomielinasa
alcalina, y que su ingestión puede ser beneficiosa para el huésped.
Estas bacterias pueden ingerirse vivas o en forma de extractos,
siempre que estos sean enzimáticamente activas, posiblemente en
combinación con otras bacterias tales como las bacterias ácido
lácticas, con SM y/o con alimentos que contengan SM.
Uno de los objetivos de la presente invención es
por tanto proporcionar una composición dietética, nutritiva, o
farmacéutica que comprenda esfingomielinasa alcalina en una cantidad
que sea suficiente para ejercer un efecto dietético, nutricional o
terapéutico en un individuo que lo necesite.
En particular, esta composición es adecuada para
la prevención y/o tratamiento de alteraciones relacionadas con el
desarrollo intestinal, procesos cancerosos, alteraciones de la
respuesta inmunológica, procesos inflamatorios y apoptósicos del
intestino y sus estructuras asociadas, alteraciones relacionadas con
la síntesis del colesterol, alteraciones debidas a la naturaleza
hidrófoba de las superficies del tracto gastrointestinal,
alteraciones alérgicas del tracto gastrointestinal, alteraciones
relacionadas con procesos digestivos, enfermedades intestinales
inflamatorias, poliposis, en particular poliposis familiar,
hipercolesterolemia, infecciones con Helicobacter pylori,
alteraciones del crecimiento neonatal, alteraciones relacionadas con
homeostasis intestinal y enfermedades de los sistemas nerviosos
central y periférico.
La composición también es útil para uso en
dietas pediátricas y/o alimentación enteral. En dietas pediátricas
la composición puede administrarse, por ejemplo, en combinación con
leche artificial, leche condensada, leche de soja, leche en polvo,
leche parcialmente humanizada, y alimentos para bebés en
general.
La composición contiene esfingomielinasa
alcalina de origen bacteriano, y las bacterias que contienen la
esfingomielinasa alcalina se eligen de entre bacterias
Gram-positivas, bacterias
Gram-negativas y bacterias ácido lácticas, o de
mezclas de las mismas.
Más especialmente, la esfingomielinasa alcalina
de la composición se obtiene de las bacterias ácido lácticas, y
éstas se eligen del grupo que comprende Lactobacillus
acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri,
Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacillus
cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus,
Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus
jensenii, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus minutus,
Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae, Lactobacillus
salivarius, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium
angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve,
Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium,
Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis,
Bifidobacterium longum, Bifidobacterium plantarum, Bifidobacterium
pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Streptococcus
lactis, Streptococcus raffinolactis y Streptococcus
thermophilus.
La cepa particularmente preferida entre estas
bacterias ácido lácticas es Lactobacillus brevis CD2,
presentada el 6 de febrero de 1998 bajo Nº. de acceso DSM 11.988 en
la Colección alemana de Microorganismos y Cultivos Celulares (DSM)
en Braunschweig, Alemania ("Deutsche Sammlung von Mikroorganismen
und Zellkulturen GMBH") a tenor del Tratado de Budapest, o
mutantes o derivados de la misma.
Según una forma de realización preferida de la
invención, las bacterias ácido lácticas se usan en la composición
como bacterias vivas, liofilizadas o sonicadas.
La composición preferiblemente contiene de 1 x
10^{2} a 1 x 10^{13} UFC de bacterias ácido lácticas por gramo
de composición.
Una composición particularmente preferida
contiene 200 x 10^{9} Streptococcus thermophilus, 150 x
10^{9} Bifidobacteria y 4 x 10^{9} Lactobacillus
acidophilus por gramo de composición.
La composición según la invención puede también
contener ácidos biliares, en particular ácido ursodesoxicólico,
pectina, esfingomielina o sus compuestos, medicamentos o alimentos
que contengan esfingomielina, arginina desiminasa, ácidos grasos,
ácidos grasos poliinsaturados, azúcares no fermentadas, en
particular lactulosa, inhibidores del colesterol, inhibidores de
ceramidasas, inhibidores de proteasas, inmunomoduladores, agentes
anticancerígenos, vitaminas, factores de crecimiento, tensioactivos,
cereales, fibra, emulsionantes, estabilizantes, lípidos,
antioxidantes, conservantes, neutralizantes de radicales libres y/o
vasoprotectores.
La composición de la invención se puede
administrar por vía oral como complemento alimenticio o por vía oral
o parenteralmente como medicamento.
La invención también se refiere al uso de
esfingomielinasa alcalina de origen bateriano y las bacterias que
contienen la esfingomielinasa alcalina se eligen de entre bacterias
Gram-positivas, bacterias
Gram-negativas y bacterias ácido lácticas, y de
mezclas de las mismas para la preparación de una composición
dietética, nutritiva o farmacéutica adecuada para la prevención y/o
tratamiento de alteraciones relacionadas con el desarrollo
intestinal, procesos cancerosos, alteraciones de la respuesta
inmunológica, procesos inflamatorios y apoptósicos del intestino y
sus estructuras asociadas, alteraciones relacionadas con la síntesis
de colesterol, alteraciones debidas a la naturaleza hidrófoba de
las superficies del tracto gastrointestinal, alteraciones alérgicas
del tracto gastrointestinal, alteraciones relativas a procesos
digestivos, enfermedades intestinales inflamatorias, poliposis, en
particular poliposis familiar, hipercolesterolemia, infecciones con
Helicobacter pylori, alteraciones del crecimiento neonatal,
alteraciones relacionadas con homeostasis intestinal y enfermedades
de los sistemas nervioso central y periférico.
Esta composición es también útil para uso en
dietas pediátricas y/o en alimentación enteral. En dietas
pediátricas la composición puede administrarse, por ejemplo, en
combinación con leche artificial, leche condensada, leche de soja,
leche en polvo, leche parcialmente humanizada y alimentos para bebés
en general.
La esfingomielinasa alcalina que se usa es
preferiblemente de origen bacteriano, y las bacterias que la
contienen se eligen de entre las bacterias
Gram-positivas, bacterias
Gram-negativas y bacterias ácido lácticas, o de
mezclas de las mismas.
Más especialmente, las bacterias ácido lácticas
que se usan se eligen del grupo que comprende Lactobacillus
acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri,
Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacillus
cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus,
Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus
jensenii, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus minutus,
Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae, Lactobacillus
salivarius, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium
angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve,
Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium,
Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis,
Bifidobacterium longum, Bifidobacterium plantarum, Bifidobacterium
pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Streptococcus
lactis, Streptococcus raffinolactis y Streptococcus
thermophilus
La cepa particularmente preferida entre estas
bacterias ácido lácticas es Lactobacillus brevis CD2,
presentada el 6 de febrero de 1998, bajo Nº. de acceso DSM 11.988
en la Colección alemana de Microorganismos y Cultivos Celulares
(DSM) en Braunschweig, Alemania ("Deutsche Sammlung von
Mikroorganismen und Zellkulturen GMBH") a tenor del Tratado de
Budapest, o mutantes o derivados de la misma.
Según una forma de realización preferida de la
invención, las bacterias ácido lácticas se usan en la composición
como bacterias vivas, liofilizadas o sonicadas.
La composición usada preferiblemente contiene de
1 x 10^{2} a 1 x 10^{13} UFC de bacterias ácido lácticas por
gramo de composición.
Una composición particularmente preferida
contiene 200 x 10^{9} Streptococcus thermophilus, 150 x
10^{9} Bifidobacteria y 4 x 10^{9} Lactobacillus
acidophilus por gramo de composición.
Los experimentos siguientes se llevaron a cabo
para confirmar la presencia y eficacia de la esfingomielinasa
alcalina en las bacterias según la presente invención. Estos
experimentos implicaron la detección de esfingomielinasa alcalina,
la enzima responsable de la formación de ceramida en la piel
humana.
\vskip1.000000\baselineskip
Se suspendieron 10 mg de bacterias
Streptococcus thermophilus liofilizadas en 500 \mul de un
tampón que contenía Tris-HCl 50 mM, a pH 7,4,
MgCl_{2} 10 mM, EDTA 2 mM, DTT 5 mM, Na_{3}VO_{4} 0,1 mM,
Na_{2}MoO4 0,1 mM, p-nitrofenil fosfato 30 mM,
\beta-glicerofosfato 10 mM, ATP 750 mM, PMSF 1
\muM, leupeptina 10 \muM, pepstatina 10 \muM (de Sigma
Chemical Co.) y Triton X-100 al 0,2% (para ensayar
la actividad de la SMasa neutra) o 500 \mul de Triton
X-100 al 0,2% (para ensayar la actividad de la SMasa
ácida). Para ensayar la SMasa alcalina, las bacterias y el material
de biopsia intestinal (homogeneizado) se suspendieron en tampón de
sacarosa 0,25 M que contenía MgCl_{2} 5 mM, KCl 0,15 M,
KH_{2}PO_{4} 50 mM, PMSF 1 mM y benzamidina 1 mM (pH 7,4). Las
muestras preparadas de esta forma se sometieron entonces a lisis por
ultrasonidos (durante 30 min durante los cuales, se alternaron
periodos de 10 segundos de "encendido" con periodos de 10
segundos de "apagado"), usando un homogenizador ultrasónico
Vibracell (Sonic and Materials Inc., Danbury, CT). Las muestras
sonicadas se centrifugaron entonces durante 30 min a 14.000 rpm a
4ºC, se extrajo el sobrenadante, y se determinó la concentración de
proteína con un kit creado por Bio-Rad Laboratorios,
(Richmond, CA).
\newpage
Para determinar la SMasa neutra, se incubaron
100 \mug de la muestra durante 2 horas a 37ºC en un tampón
(volumen final: 50 \mul) que contenía Tris-HCl 50
mM, MgCl_{2} 1 mM, a pH 7,4, y 2,25 \mul de
[N-metil-^{14}C]-esfingomielina
(SM) (0,2 \muCi/ml, actividad específica: 56,6 mCi/mmol,
Amersham).
Para determinar la actividad de la
esfingomielinasa ácida, se incubaron 100 \mug de lisado bacteriano
durante 2 horas a 37ºC en un tampón (volumen final: 50 \mul) que
contenía acetato de sodio 250 mM, EDTA 1 mM, pH 5,0, y 2,25 \mul
de
[N-metil-^{14}C]-SM.
Para ensayar la SMasa alcalina, las muestras se
añadieron a 375 \mul de tampón Tris-EDTA (pH 9)
hasta un volumen final de 0,4 ml, que contenía Tris 50 mM, NaCl
0,15 M, EDTA 2 mM y una mezcla de sales biliares 3 mM con una
proporción molar TC:TDC:GC:GCDC de 3:2:1,8:1. Se ha encontrado que
esta mezcla de sales biliares posee el efecto estimulador más
elevado sobre la SMasa alcalina. La adición del EDTA al tampón
sirvió para inhibir la actividad de la SMasa neutra, la cual es
dependiente de Mg^{++} con un pH óptimo de 7,5. La
^{14}C-SM se disolvió en etanol, se secó con
nitrógeno y se suspendió en el tampón ensayo, que contenía una
mezcla de Triton X-100 3% y sales biliares 3 mM.
La reacción se terminó con la adición de 2 ml de
una mezcla 2:1 de cloroformo y metanol. Se extrajeron los
fosfolípidos y se analizaron en placas de TLC, mientras que la
hidrólisis de la SM se cuantificó por autorradiografía y contaje de
centelleo líquido. La SMasa presente en las bacterias sonicadas y en
el material de biopsia intestinal se expresó en términos de pmol de
SM hidrolizada por hora por miligramo de proteína.
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 1 muestra los niveles de actividad de
la esfingomielinasa en bacterias ácido lácticas sonicadas. No se
encontró actividad debida a la SMasa ácida, pero se observaron
niveles apreciables tanto de la SMasa neutra como de la alcalina en
las muestras bacterianas probadas bajo las condiciones
experimentales usadas (diversos valores de pH y con y sin
MgCl_{2}).
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 2 muestra que el análisis de la
actividad SMasa en las muestras de biopsia intestinal mostró una
actividad elevada de SMasa alcalina del tipo dependiente de sales
biliares, la cual no se pudo detectar en ausencia de sales
biliares. Los niveles de actividad enzimática en los tejidos de un
paciente que sufría enfermedad de Crohn mostraron un nivel inferior
de SMasa alcalina que la muestra control.
\vskip1.000000\baselineskip
Como se muestra en la figura 3, el ensayo de la
actividad de la SMasa en las muestras de Streptococcus
thermophilus, bajo las condiciones experimentales usadas para
la determinación de la SMasa intestinal, mostró que la enzima
bacteriana no se veía afectada por la presencia o ausencia de sales
biliares. Además, cuando la actividad SMasa bacteriana y la
actividad SMasa intestinal se probaron simultáneamente, la
hidrólisis de SM aumentó aditivamente. Se obtuvieron resultados
similares (no mostrados) con la cepa de Lactobacillus brevis
CD2, presentada el 6 de febrero de 1998, bajo Nº. de acceso DSM
11.988 en la Colección alemana de Microorganismos y Cultivos
Celulares en Braunschweig, Alemania ("Deutsche Sammlung von
Mikroorganismen und Zellkulturen GMBH") a tenor del Tratado de
Budapest, o mutantes o derivados de la misma.
Claims (22)
1. Composición dietética, nutritiva o
farmacéutica, caracterizada porque comprende esfingomielinasa
alcalina de origen bacteriano y las bacterias que contienen la
esfingomielinasa alcalina se eligen de entre bacterias
Gram-positivas, bacterias
Gram-negativas y bacterias ácido lácticas, o de
mezclas de las mismas en una cantidad que es suficiente para ejercer
un efecto dietético, nutricional o terapéutico en un individuo que
lo necesite.
2. Composición según la reivindicación 1,
adecuada para la prevención y/o tratamiento de alteraciones
relacionadas con el desarrollo intestinal, procesos cancerosos,
alteraciones de la respuesta inmunológica, procesos inflamatorios y
apoptósicos del intestino y sus estructuras asociadas, alteraciones
relacionadas con la síntesis del colesterol, alteraciones debidas a
la naturaleza hidrófoba de las superficies del tracto
gastrointestinal, alteraciones alérgicas del tracto
gastrointestinal, alteraciones relacionadas con procesos digestivos,
enfermedades intestinales inflamatorias, poliposis, en particular
poliposis familiar, hipercolesterolemia, infecciones con
Helicobacter pylori, alteraciones del crecimiento neonatal,
alteraciones relacionadas con la homeostasis intestinal y
enfermedades de los sistemas nerviosos central y periférico.
3. Composición según la reivindicación 1 ó 2,
adecuada para uso en dietas pediátricas.
4. Composición según la reivindicación 1 ó 2,
adecuada para uso en alimentación enteral.
5. Composición según la reivindicación 3,
caracterizada porque la composición se administra, en
combinación con leche artificial, leche condensada, leche de soja,
leche en polvo, leche parcialmente humanizada y alimentos para bebés
en general.
6. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, caracterizada porque las
bacterias ácido lácticas se eligen del grupo que comprende
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus
buchneri, Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme,
Lactobacillus cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus
curvatus, Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum,
Lactobacillus jensenii, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus
minutus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae,
Lactobacillus salivarius, Bifidobacterium adolescentis,
Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium
breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium,
Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium
longum, Bifidobacterium plantarum, Bifidobacterium
pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Streptococcus
lactis, Streptococcus raffinolactis y Streptococcus
thermophilus.
7. Composición según la reivindicación 6,
caracterizada porque se usa la cepa Lactobacillus brevis
CD2, la cual se presentó el 6 de febrero de 1988, bajo Nº. de
acceso DSM 11.988 en la Colección alemana de Microorganismos y
Cultivos Celulares (DSM) en Braunschweig, Alemania ("Deutsche
Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH"), o mutantes
o derivados de la misma a tenor del Tratado de Budapest.
8. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, caracterizada porque las
bacterias ácido lácticas se usan en la composición como bacterias
vivas, liofilizadas o sonicadas.
9. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, caracterizada porque contiene
de 1 x 10^{2} a 1 x 10^{13} UFC de bacterias ácido lácticas por
gramo de composición.
10. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque contiene 200 x
10^{9} Streptococcus thermophilus, 150 x 10^{9}
Bifidobacteria y 4 x 10^{9} Lactobacillus
acidophilus por gramo de composición.
11. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, caracterizada porque también
contiene ácidos biliares, en particular ácido ursodesoxicólico,
pectina, esfingomielina o sus compuestos, fármacos o alimentos que
contienen esfingomielina, arginina desiminasa, ácidos grasos, ácidos
grasos poliinsaturados, azúcares no fermentadas, en particular
lactulosa, inhibidores del colesterol, inhibidores de ceramidasas,
inhibidores de proteasas, inmunomoduladores, agentes
anticancerígenos, vitaminas, factores de crecimiento, tensioactivos,
cereales, fibra, emulsionantes, estabilizantes, lípidos,
antioxidantes, conservantes, neutralizantes de radicales libres y/o
vasoprotectores.
12. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, que se puede administrar por vía oral
como complemento alimenticio.
13. Composición según una cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, que se puede administrar por vía oral
o parenteralmente como medicamento.
14. Uso de esfingomielinasa alcalina de origen
bacteriano y las bacterias que contienen la esfingomielinasa
alcalina se eligen de entre bacterias
Gram-positivas, bacterias
Gram-negativas y bacterias ácido lácticas, o de
mezclas de las mismas para la preparación de una composición
dietética, nutritiva o farmacéutica adecuada para la prevención y/o
tratamiento de alteraciones relacionadas con el desarrollo
intestinal, procesos cancerosos, alteraciones de la respuesta
inmunológica, procesos inflamatorios y apoptósicos del intestino y
sus estructuras asociadas, alteraciones relacionadas con la síntesis
de colesterol, alteraciones debidas a la naturaleza hidrófoba de las
superficies del tracto intestinal, alteraciones alérgicas del tracto
gastrointestinal, alteraciones relacionadas con procesos digestivos,
enfermedades intestinales inflamatorias, poliposis, en particular
poliposis familiar, hipercolesterolemia, infecciones con
Helicobacter pylori, alteraciones del crecimiento neonatal,
alteraciones relacionadas con la homeostasis intestinal y
enfermedades de los sistemas nerviosos central y periférico.
15. Uso según la reivindicación 14 en dietas
pediátricas.
16. Uso según la reivindicación 14 en
alimentación enteral.
17. Uso según la reivindicación 15,
caracterizado porque la composición se administra, en
combinación con leche artificial, leche condensada, leche de soja,
leche en polvo, leche parcialmente humanizada y alimentos para bebés
en general.
18. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 14 a 17, caracterizado porque las bacterias
ácido lácticas se eligen del grupo que comprende Lactobacillus
acidophilus, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri,
Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaforme, Lactobacillus
cellobiosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus curvatus,
Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus
jensenii, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus minutus,
Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rogosae, Lactobacillus
salivarius, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium
angulatum, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve,
Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium dentium,
Bifidobacterium eriksonii, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium
longum, Bifidobacterium plantarum, Bifidobacterium
pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Streptococcus
lactis, Streptococcus raffinolactis y Streptococcus
thermophilus.
19. Uso según la reivindicación 18,
caracterizado porque se usa la cepa Lactobacillus brevis
CD2, la cual se presentó el 6 de febrero de 1988, bajo Nº. de
acceso DSM 11.988 en la Colección alemana de Microorganismos y
Cultivos Celulares (DSM) en Braunschweig, Alemania ("Deutsche
Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH") a tenor del
Tratado de Budapest, o mutantes o derivados de la misma.
20. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 14 a 19, caracterizado porque las bacterias
ácido lácticas se usan en la composición como bacterias vivas,
liofilizadas o sonicadas.
21. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 14 a 19, caracterizado porque se usan de 1 x
10^{2} a 1 x 10^{13} UFC de bacterias ácido lácticas por gramo
de composición.
22. Uso según una cualquiera de las
reivindicaciones 14 a 19, caracterizado porque se usan 200 x
10^{2} Strepto- coccus thermophilus, 150 x 10^{9}
Bifidobacteria y 4 x 10^{9} Lactobacillus
acidophilus por gramo de composición.
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