DE824207C - Verfahren zur Herstellung einer Schwefeldioxydverbindung des p-Amino-diaethylanilins - Google Patents

Description

iWiGBI. S.175)

AUSGEGEBEN AM 10. DEZEMBER 1951

JHr. 824

p 32288 IVc/i2 ρ D

Die Gewinnung von Nucleosiden durch hydrolytische Spaltung von Nucleinsäure kann nach bekannten Verfahren durch 3- bis 4stündige Behandlung mit Ammoniak bei 175 bis i8o° erfolgen. Man erhält hierbei ein Gemisch der Purin-und Pyrimidinnucleoside.

Nachteilig bei diesem Verfahren ist, daß man eine schlechte Ausbeute erhält und mit Druckgefäßen arbeiten muß. Arbeitet man unter milderen Bedingungen, z. B. bei 115⁰, so wird die Nucleinsäure nur bis zu den Mononucleosiden abgebaut.

Man hat daher (Patentschrift 693 416) die Verwendung flüchtiger organischer Basen, wie Pyridin, Chinolin usw., vorgeschlagen, wobei die Spaltung der Nucleinsäure in etwa 96 Stunden beendet ist. Die Ausbeute an Guanosin und Adenosin ist wesentlich besser als bei Verwendung von Ammoniak.

Es wurde nun gefunden, daß die Hydrolyse der Nucleinsäuren immer dann in glatter Weise zu den Mononucleosiden führt, also unter Erhaltung der Glykosidbindung und Lösung der Phosphorsäurebindung, wenn man unter Bedingungen arbeitet, die die Aufrechterhaltung eines p_H-Bereichs von 6 bis 8, besser von 6,5 bis 7,5, gewährleisten. Es handelt sich also bei der gewünschten hydrolytischen Spaltung der Nucleinsäure nicht um einen spezifischen Effekt des spaltenden Agens, sondern um Mittel, die einen bestimmten p_H-Bereich aufrechterhalten.

Der für die Spaltung günstige p_H-Bereich kann in einfacher Weise durch Zusatz anorganischer oder organischer Pufferlösungen aufrechterhalten werden. Die frei werdende Phosphorsäure wird abgepuffert und kann deshalb die entstehenden Nucleoside nicht weiterspalten.

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Das neue Verfahren bedeutet eine wesentliche Verbilligung der bisherigen Verfahren. Die Hydrolyse kann unter Vermeidung von Druckgefäßen oft in erheblich kürzerer Zeit, als es bisher möglich war, durchgeführt werden. Auch sind die Löslichkeitsverhältnisse oft so günstig, daß bestimmte Nucleoside, wie z. B. Guanosin, beim Erkalten direkt aus der Reaktionslösung ausfallen und in verhältnismäßig reiner Form gewonnen werden können. Die neue Methode bedeutet also, bei etwa gleichen Ausbeuten an Nucleosiden, eine erhebliche technische Vereinfachung und wesentliche Verbilligung der bisherigen Methoden.

Beispiel

ioo g Rohnucleinsäure werden in 200 ecm Wasser aufgeschlemmt, mit Natronlauge auf pn 7 eingestellt und mit der zehn- bis zwanzigfachen Menge Pufferlösung (citronensaures Natrium und Natronlauge) vom pH-Wert 7 verdünnt und 9 bis 10 Tage am Rückflußkühler gekocht. Das ausgefallene Guanosin wird abfiltriert. Ausbeute: 10g. Anschließend wird das Adenosin direkt oder als schwerlösliche Verbindung abgetrennt. Ausbeute: 8g.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH:

   Verfahren zur Gewinnung von Xucleosiden durch hydrolytische Spaltung von Nucleinsäure, dadurch gekennzeichnet, daß man die Spaltung der Nucleinsäure mit Wasser bei Gegenwart anorganischer oder organischer Puffersubstanzen ausführt, durch welche ein p_H-Bereich von 6 bis 8, vorteilhaft von 6,5 bis 7,5. aufrechterhalten wird.

   2512 11.