DE69915519T2

DE69915519T2 - Pyrazolopyridine

Info

Publication number: DE69915519T2
Application number: DE69915519T
Authority: DE
Inventors: Ian Baxter Stevenage CAMPBELL; Paul Francis Stevenage LAMBETH; Alan Stevenage NAYLOR; Neil Anthony Stevenage PEGG
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1999-02-27
Filing date: 1999-12-22
Publication date: 2005-02-03
Anticipated expiration: 2019-12-23
Also published as: DE69915519D1; AU2661400A; JP2002538157A; ES2216631T3; EP1157025B1; ATE261444T1; US6498166B1; EP1157025A1; WO2000052008A1

Description

Diese Erfindung betrifft Pyrazolo[1,5-a]pyridin-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen und ihre Verwendung in der Medizin.
Es wurde kürzlich gefunden, daß das Enzym Cyclooxygenase (COX) in zwei Isoformen existiert, COX-1 und COX-2. COX-1 entspricht dem ursprünglich identifizierten konstitutiven Enzym, während COX-2 schnell und leicht durch eine Anzahl von Mitteln induzierbar ist, die Mitogene, Endotoxin, Hormone, Cytokine und Wachstumsfaktoren einschließen. Durch die Wirkung von COX erzeugte Prostaglandine besitzen sowohl physiologische als auch pathologische Rollen. Es wird allgemein angenommen, daß COX-1 verantwortlich für die wichtigen physiologischen Funktionen wie Aufrechterhaltung der gastrointestinalen Integrität und Nierenblutfluß ist. Im Gegensatz wird von der induzierbaren Form, COX-2, angenommen, daß sie verantwortlich für die pathologischen Wirkungen von Prostaglandinen ist, wenn eine schnelle Induktion des Enzyms als Antwort auf solche Mittel wie Entzündungserreger, Hormone, Wachstumsfaktoren und Cytokine erfolgt. Ein selektiver Inhibitor von COX-2 würde deshalb entzündungshemmende, antipyretische und analgetische Eigenschaften ohne die mit der Inhibierung von COX-1 verbundenen potentiellen Nebenwirkungen besitzen. Wir haben jetzt eine neue Gruppe von Verbindungen gefunden, die sowohl wirksame als auch selektive Inhibitoren von COX-2 sind.
WO 96/31509 (Glaxo Group Limited) offenbart eine Reihe von Diarylsubstituierten Imidazo[1,2-a]pyridin-Derivaten, die nützlich in der Behandlung von COX-2-vermittelten Krankheiten sind. US 5 552 422 (Merck Frosst Canada, Inc.) offenbart eine Reihe von Diaryl-substituierten 5,5-kondensierten bicyclischen Heterocyclen, die nützlich in der Behandlung von COX-2-vermittelten Krankheiten sind. Jedoch bleibt das Problem der Bereitstellung neuer Verbindungen bestehen, die wirksame und selektive Inhibitoren von COX-2 sind.
Die Erfindung stellt somit die Verbindungen der Formel (I) bereit
und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon, worin:
R⁰ und R¹ unabhängig ausgewählt sind aus H, Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy oder mit einem oder mehreren Fluoratomen substituiertem C_1-6-Alkoxy,
R² Halogen, CN, CONR⁴R⁵, CO₂H, CO₂C_1-6-Alkyl oder NHSO₂R⁴ ist;
R³ C_1-6-Alkyl oder NH₂ ist; und
R⁴ und R⁵ unabhängig ausgewählt sind aus H, C_1-6-Alkyl, Phenyl, mit einem oder mehreren Atomen oder Gruppen (ausgewählt aus Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy oder mit einem oder mehreren Fluoratomen substituiertem C_1-6-Alkoxy) substituiertem Phenyl oder zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen gesättigten 4- bis 8-gliedrigen Ring bilden.
Mit pharmazeutisch akzeptablem Derivat ist jedes (jeder) pharmazeutisch akzeptable(s) Salz, Solvat oder Ester oder Salz oder Solvat eines solchen Esters der Verbindungen der Formel (I) oder jede andere Verbindung gemeint, die bei Verabreichung an den Empfänger eine Verbindung der Formel (I) oder einen aktiven Metaboliten oder Rest davon (direkt oder indirekt) bereitstellen kann.
Die Fachleute werden anerkennen, daß die Verbindungen der Formel (I) an jeder der funktionellen Gruppen in den Verbindungen modifiziert werden können, um pharmazeutisch akzeptable Derivate davon bereitzustellen. Von besonderem Interesse als solche Derivate sind Verbindungen, die an der Benzolsulfonamid-Funktion modifiziert sind, um metabolisch labile Benzolsulfonamide bereitzustellen.
Acylierte Benzolsulfonamid-Derivate sind von besonderem Interesse. Beispiele für solche Benzolsulfonamid-Derivate schließen ein:
N-Alkylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Alkoxyalkylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Alkoxycarbonylbenzolsulfonamide;
N-Arylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Alkoxycarbonylalkylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Carboxyalkylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Alkylcarbonyloxyalkylcarbonylbenzolsulfonamide;
N-Alkylaminoalkylcarbonylbenzolsulfonamide und
N-Dialkylaminoalkylcarbonylbenzolsulfonamide.
In bezug auf solche Benzolsulfonamid-Derivate und allein als Beispiel kann Alkyl C_1-6-Alkyl oder C_1-6-Alkyl, das mit einem oder mehreren Halogenatomen (z. B. Chlor) substituiert ist, sein; Alkoxy kann C_1-6-Alkoxy oder C_1-6-Alkoxy, das mit einem oder mehreren Halogenatomen (z. B. Chlor) substituiert ist, sein; und Aryl kann Phenyl oder substituiertes Phenyl sein.
Die Fachleute werden anerkennen, daß die pharmazeutisch akzeptablen Derivate der Verbindungen der Formel (I) an mehr als einer Position derivatisiert sein können.
Die Fachleute werden ferner anerkennen, daß Benzolsulfonamid-Derivate der Formel (I) als Zwischenstufen in der Herstellung von Verbindungen der Formel (I) oder als pharmazeutisch akzeptable Derivate der Formel (I) oder beides sein können.
Man wird für die pharmazeutische Verwendung anerkennen, daß die oben bezeichneten Salze die physiologisch akzeptablen Salze sein werden, aber andere Salze können z. B. Verwendung in der Herstellung von Verbindungen der Formel (I) und von den physiologisch akzeptablen Salzen davon finden.
Geeignete pharmazeutisch akzeptable Salze der Verbindungen der Formel (I) schließen Säureadditionssalze ein, die mit anorganischen oder organischen Säuren gebildet werden, vorzugsweise mit anorganischen Säuren, z. B. Hydrochloride, Hydrobromide und Sulfate.
Der Begriff Halogen wird verwendet, um Fluor, Chlor, Brom oder Iod darzustellen.
Der Begriff "Alkyl" als Gruppe oder Teil einer Gruppe bezeichnet eine lineare oder verzweigtkettige Alkyl-Gruppe, z. B. eine Methyl-, Ethyl-, n-Propyl-, i-Propyl-, n-Butyl-, s-Butyl- oder t-Butyl-Gruppe.
In einem Aspekt der Erfindung ist R⁰ in der 3- oder 4-Position des Phenyl-Rings, wie in Formel (I) definiert.
In einem anderen Aspekt der Erfindung ist R² in der 6-Position des Pyrazolopyridin-Rings, wie in Formel (I) definiert.
In einem anderen Aspekt der Erfindung sind R⁰ und R¹ unabhängig H, Halogen oder C_1-4-Alkoxy.
In einem anderen Aspekt der Erfindung ist R² CN oder Halogen.
In einem anderen Aspekt der Erfindung ist R³ C_1-3-Alkyl oder NH₂.
Innerhalb der Erfindung wird eine Gruppe von Verbindungen der Formel (I) bereitgestellt (Gruppe A), worin: R⁰ und R¹ unabhängig H, Halogen oder C_1-4-Alkoxy sind; R² CN oder Halogen ist; und R³ C_1-3-Alkyl oder NH₂ ist.
Innerhalb der Gruppe A wird eine weitere Gruppe von Verbindungen bereitgestellt (Gruppe A1), worin: R⁰ F ist; R¹ H ist; R² CN oder Br ist; und R³ Methyl oder NH₂ ist.
Innerhalb der Gruppe A wird eine weitere Gruppe von Verbindungen bereitgestellt (Gruppe A2), worin: R⁰ F ist; R¹ H ist; R² CN, Br oder Cl ist; und R³ Methyl oder NH₂ ist.
Innerhalb der Gruppen A, A1 und A2 werden weitere Gruppen von Verbindungen bereitgestellt, worin R⁰ in der 3- oder 4-Position (vorzugsweise der 4-Position) des Phenyl-Rings ist und R² in der 6-Position des Pyrazolopyridin-Rings ist, wie in Formel (I) definiert.
Es ist selbstverständlich, daß die vorliegende Erfindung alle Isomere der Verbindungen der Formel (I) und ihre pharmazeutisch akzeptablen Derivate umfaßt, einschließlich aller geometrischen, tautomeren und optischen Formen, und Mischungen daraus (z. B. racemische Mischungen).
In einem Aspekt stellt die Erfindung die folgenden Verbindungen bereit:
4-[6-Cyano-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
2-(4-Fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril;
4-[6-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin;
und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon.
In einem anderen Aspekt stellt die Erfindung die folgenden Verbindungen bereit:
4-[6-Chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
4-[6-Chlor-2-(4-ethoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
4-[6-Chlor-2-(3-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
4-[6-Chlor-2-phenyl-pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid;
und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon.
Verbindungen der Erfindung sind wirksame und selektive Inhibitoren von COX-2. Diese Aktivität wird durch ihre Fähigkeit zur selektiven Inhibierung von COX-2 gegenüber COX-1 veranschaulicht.
Angesichts ihrer selektiven COX-2-inhibitorischen Aktivität sind die Verbindungen der vorliegenden Erfindung von Interesse zur Verwendung in der Human- und Veterinärmedizin, insbesondere in der Behandlung des Schmerzes (sowohl chronisch als auch akut), des Fiebers und der Entzündung einer Vielzahl von Zuständen und Krankheiten, die durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt werden. Solche Zustände und Krankheiten sind allgemein fachbekannt und schließen ein: rheumatisches Fieber, Symptome, die mit Influenza oder anderen Virusinfektionen verbunden sind, wie mit dem grippalen Infekt; Kreuz- und Nackenschmerz; Kopfschmerz; Zahnschmerz; Verstauchungen und Verzerrungen; Myositis; neuropathischer Schmerz (z. B. Neuralgie, wie die postherpetische Neuralgie, Trigeminusneuralgie und sympathetisch aufrechterhaltener Schmerz); Synovitis; Arthritis, einschließlich rheumatoider Arthritis; degenerative Gelenkerkrankungen, einschließlich Osteoarthritis; Gicht und Bechterew-Krankheit; Tendinitis; Bursitis; hautbezogene Zustände, wie Psoriasis, Ekzem, Verbrennungen und Dermatitis; Verletzungen, wie Sportverletzungen und diejenigen, die aus chirurgischen und dentalen Prozeduren erwachsen.
Die Verbindungen der Erfindung sind ebenfalls nützlich zur Behandlung von anderen Zuständen, die durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt werden.
Z. B. hemmen die Verbindungen der Erfindung die zelluläre und neoplastische Transformation und das metastatische Tumorwachstum und sind daher nützlich in der Behandlung bestimmter kanzeröser Krankheiten, wie Dickdarmkrebs.
Verbindungen der Erfindung beugen ebenfalls der neuronalen Verletzung vor, indem sie die Erzeugung von neuronalen freien Radikalen (und damit oxidativen Streß) inhibieren, und sind deshalb von Nutzen in der Behandlung von Schlaganfall; Epilepsie; und epileptischen Anfällen (einschließlich Grand Mal, Petit Mal, myoklonische Epilepsie und partielle Anfälle).
Verbindungen der Erfindung hemmen ebenfalls die Prostanoid-induzierte Kontraktion der glatten Muskulatur und sind deshalb von Nutzen in der Behandlung von Dysmenorrhö und Frühgeburt.
Verbindungen der Erfindung hemmen entzündliche Prozesse und sind deshalb von Nutzen in der Behandlung von Asthma, allergischer Rhinitis und Respiratory-Distress-Syndrom; gastrointestinalen Zuständen wie entzündliche Darmerkrankung, Morbus Crohn, Gastritis, Reizdarmsyndrom und ulzeröse Kolitis; und von Entzündung bei solchen Erkrankungen wie Gefäßerkrankung, Migräne, Periarteriitis nodosa, Thyroiditis, aplastische Anämie, Hodgkin-Krankheit, Sclerodermie, Typ I Diabetes, Myasthenia gravis, multiple Sklerose, Sarkoidose, nephrotisches Syndrom, Bechet-Syndrom, Polymyositis, Gingivitis, Konjunktivitis und myokardiale Ischämie.
Verbindungen der Erfindung sind ebenfalls nützlich in der Behandlung von ophthalmischen Krankheiten wie Retinitis, Retinopathien, Uveitis und von akuter Verletzung des Augengewebes.
Verbindungen der Erfindung sind ebenfalls nützlich zur Behandlung von kognitiven Störungen wie Demenz, insbesondere degenerative Demenz (einschließlich Altersdemenz, Alzheimer-Krankheit, Pick-Krankheit, Huntington-Chorea, Parkinson-Krankheit und Creutzfeldt-Jakob-Krankheit) und vaskuläre Demenz (einschließlich Multiinfarktdemenz), sowie Demenz, die mit den Intrakranialraum besetzenden Läsionen, Trauma, Infektionen und verwandten Zuständen (einschließlich HIV-Infektion), Metabolismus, Toxinen, Anoxie und Vitaminmangel verbunden ist; und milde kognitive Beeinträchtigung, die mit Altern verbunden ist, ist insbesondere "Age Associated Memory Impairment".
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung stellen wir eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon zur Verwendung in der Human- oder Veterinärmedizin bereit.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung stellen wir eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon zur Verwendung in der Behandlung eines Zustands bereit, der durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt wird.
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung stellen wir ein Verfahren zur Behandlung eines menschlichen oder tierischen Patienten bereit, der an einem Zustand leidet, der durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt wird, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon an den Patienten umfaßt.
Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung stellen wir ein Verfahren zur Behandlung eines menschlichen oder tierischen Patienten bereit, der an einer Entzündungsstörung leidet, wobei das Verfahren das Verabreichen einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon an den Patienten umfaßt.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung stellen wir die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon zur Herstellung eines Therapeutikums zur Behandlung eines Zustands bereit, der durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt wird.
Gemäß einem anderen Aspekt der Erfindung stellen wir die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon zur Herstellung eines Therapeutikums zur Behandlung einer entzündlichen Störung bereit.
Es ist selbstverständlich, daß ein Verweis auf die Behandlung sowohl die Behandlung etablierter Symptome als auch die prophylaktische Behandlung einschließt, wenn nichts anderes explizit angegeben wird.
Man wird einsehen, daß die Verbindungen der Erfindung vorteilhaft in Verbindung mit einem oder mehreren anderen Therapeutika verwendet werden können. Beispiele für geeignete Mittel zur verbundenen Therapie schließen Schmerzmittel ein, wie ein Glycin-Antagonist, ein Natriumkanalinhibitor (z. B. Lamotrigin), ein Substanz P-Antagonist (z. B. ein NK₁-Antagonist), Acetaminophen oder Phenacetin; ein Matrix-Metalloproteinase-Inhibitor; ein Stickoxidsynthase-(NOS)-Inhibitor (z. B. ein iNOS- oder ein nNOS-Inhibitor); ein Inhibitor der Freisetzung oder Wirkung von Tumornekrosefaktor α; eine Antikörpertherapie (z. B. eine monoklonale Antikörpertherapie); ein Stimulans, einschließlich Coffein; ein H₂-Antagonist wie Ranitidin; ein Protonenpumpeninhibitor wie Omeprazol; ein Antacidum wie Aluminium- oder Magnesiumhydroxid; ein Antiflatulenzmittel wie Simethicon; ein abschwellendes Mittel wie Phenylephrin, Phenylpropanolamin, Pseudoephedrin, Oxymetazolin, Epinephrin, Naphazolin, Xylometazolin, Propylhexedrin oder Levo-Desoxyephedrin; ein Antihustenmittel wie Codein, Hydrocodon, Carmiphen, Carbetapentan oder Dextramethorphan; ein Diuretikum; oder ein sedierendes oder nicht-sedierendes Antihistaminikum. Es ist selbstverständlich, daß die vorliegende Erfindung die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon in Kombination mit einem oder mehreren anderen Therapeutika umfaßt.
Die Verbindungen der Formel (I) und ihre pharmazeutisch akzeptablen Derivate werden zweckmäßig in Form von pharmazeutischen Zusammensetzungen verabreicht. So stellen wir in einem anderen Aspekt der Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung bereit, die eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon umfaßt, angepaßt zur Verwendung in der Human- oder Veterinärmedizin. Solche Zusammensetzungen können zweckmäßig zur Verwendung in herkömmlicher Weise im Gemisch mit einem oder mehreren physiologisch akzeptablen Trägern oder Exzipienten angeboten werden.
Die Verbindungen der Formel (I) und ihre pharmazeutisch akzeptablen Derivate können zur Verabreichung in jeder geeigneten Weise formuliert werden. Sie können z. B. zur topischen Verabreichung oder Verabreichung durch Inhalation oder besonders bevorzugt zur oralen, transdermalen oder parenteralen Verabreichung formuliert werden. Die pharmazeutische Zusammensetzung kann in einer solchen Form sein, daß sie die kontrollierte Freisetzung der Verbindungen der Formel (I) und ihrer pharmazeutisch akzeptablen Derivate bewirken kann.
Zur oralen Verabreichung kann die pharmazeutische Zusammensetzung die Form von z. B. Tabletten (einschließlich sublingualer Tablette), Kapseln, Pulvern, Lösungen, Sirupen oder Suspensionen annehmen, die durch herkömmliche Mittel mit akzeptablen Exzipienten hergestellt werden.
Zur transdermalen Verabreichung kann die pharmazeutische Zusammensetzung in Form eines transdermalen Pflasters gegeben werden, wie als transdermales iontophoretisches Pflaster.
Zur parenteralen Verabreichung kann die pharmazeutische Zusammensetzung als Injektion oder kontinuierliche Infusion (z. B. intravenös, intravaskulär oder subkutan) gegeben werden. Die Zusammensetzungen können solche Formen wie Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen in öligen oder wäßrigen Trägern annehmen und können Formulierungsmittel wie Suspendier-, Stabilisierungs- und/oder Dispergiermittel enthalten. Zur Verabreichung durch Injektion können diese die Form einer Einheitsdosisdarreichung oder Mehrfachdosisdarreichung annehmen, vorzugsweise mit einem hinzugegebenen Konservierungsmittel.
Alternativ zur parenteralen Verabreichung kann der aktive Bestandteil in Pulverform zur Herrichtung mit einem geeigneten Träger sein.
Die Verbindungen der Erfindung können ebenfalls als Depotzubereitung formuliert werden. Solche langwirkenden Formulierungen können durch Implantation (z. B. subkutan oder intramuskulär) oder durch intramuskuläre Injektion verabreicht werden. So können z. B. die Verbindungen der Erfindung mit geeigneten polymeren oder hydrophoben Materialien (z. B. als Emulsion in einem akzeptablen Öl) oder Ionenaustauscherharzen oder als schwachlösliche Derivate, z. B. als schwachlösliches Salz, formuliert werden.
Wie oben angegeben können die Verbindungen der Erfindung auch in Kombination mit anderen Therapeutika verwendet werden. Die Erfindung stellt somit in einem weiteren Aspekt eine Kombination bereit, die eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon zusammen mit einem weiteren Therapeutikum umfaßt.
Die oben bezeichneten Kombinationen können zweckmäßig zur Verwendung in Form einer pharmazeutischen Formulierung angeboten werden, und somit umfassen pharmazeutische Formulierungen, die eine Kombination wie oben definiert zusammen mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger oder Exzipienten umfassen, einen weiteren Aspekt der Erfindung. Die individuellen Komponenten solcher Kombinationen können entweder aufeinanderfolgend oder gleichzeitig in separaten oder kombinierten pharmazeutischen Formulierung verabreicht werden.
Wenn eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon in Kombination mit einem zweiten Therapeutikum verwendet wird, das gegen den gleichen Krankheitszustand wirksam ist, kann sich die Dosis jeder Verbindung von derjenigen unterscheiden, wenn die Verbindung allein verwendet wird. Geeignete Dosen werden den Fachleuten leicht ersichtlich sein.
Eine vorgeschlagene tägliche Dosierung einer Verbindung der Formel (I) zur Behandlung des Menschen beträgt 0,01 bis 500 mg/kg, wie z. B. 0,05 bis 100 mg/kg, z. B. 0,1 bis 50 mg/kg, die zweckmäßig in 1 bis 4 Dosen verabreicht werden kann. Die genaue eingesetzte Dosis wird vom Alter und Zustand des Patienten und vom Verabreichungsweg abhängen. So kann z. B. eine tägliche Dosis von 0,25 bis 10 mg/kg zur systemischen Verabreichung geeignet sein.
Verbindungen der Formel (I) und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon können durch jedes Verfahren hergestellt werden, das auf diesem Gebiet zur Herstellung von Verbindungen analoger Struktur bekannt ist.
Geeignete Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) und von pharmazeutisch akzeptablen Derivaten davon werden nachfolgend beschrieben. In der Erörterung und den Formeln, die folgen, sind R⁰ bis R³ wie in Formel (I) oben definiert, wenn nichts anderes angegeben ist; Hal ist ein Halogen, wie z. B. Br oder I; X^– ist ein Gegenion, wie z. B. I^–; NBS ist N-Bromsuccinimid; NCS ist N-Chlorsuccinimid; DMF ist N,N-Dimethylformamid; Me ist Methyl; unsubstituierte Derivate der Formeln (II), (IV) und (VII) sind diejenigen, worin R² durch H ersetzt ist; und Alkyl und Halogen sind wie zuvor definiert.
Somit können gemäß einem ersten Verfahren (A) Verbindungen der Formel (I) hergestellt werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):
mit einer Boronsäure der Formel (III):
oder einem geeigneten Derivat davon in Gegenwart eines geeigneten Übergangsmetallkatalysators. Zweckmäßig wird die Reaktion in einem Lösungsmittel durchgeführt, wie einem Ether (z. B. 1,2-Dimethoxyethan); in Gegenwart einer Base, wie einer anorganischen Base (z. B. Natriumcarbonat); und unter Einsatz eines Palladium-Katalysators, wie Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0).
Gemäß einem anderen Verfahren (B) können Verbindungen der Formel (I), worin R³ C_1-6-Alkyl ist, hergestellt werden durch Oxidieren einer Verbindung der Formel (IV):
unter herkömmlichen Bedingungen. Zweckmäßig wird die Oxidation unter Verwendung einer Monopersulfat-Verbindung bewirkt, wie z. B. Kaliumperoxymonosulfat (bekannt als Oxone^TM), und die Reaktion wird in einem Lösungsmittel, wie einem wäßrigen Alkohol (z. B. wäßrigem Methanol), bei zwischen –78°C und Umgebungstemperatur durchgeführt.
Gemäß einem anderen Verfahren (C) können Verbindungen der Formel (I), worin R² Halogen ist, hergestellt werden durch Halogenieren einer Verbindung der Formel (V):
unter herkömmlichen Bedingungen. Zweckmäßig wird die Halogenierung unter Verwendung von Halogen (z. B. Brom) oder einer geeigneten Halogenquelle (z. B. NBS oder NCS) bewirkt; in Gegenwart eines Lösungsmittels, wie eines halogenierten Alkans (z. B. Trichlormethan); und bei erhöhter Temperatur (z. B. unter Rückfluß).
Gemäß einem anderen Verfahren (D) können Verbindungen der Formel (I) hergestellt werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (VI):
mit einem Aminopyridiniumkomplex der Formel (VII):
unter herkömmlichen Bedingungen. Zweckmäßig wird die Reaktion in Gegenwart einer Base bewirkt, wie einer anorganischen Base (z. B. Natriumcarbonat); eines Lösungsmittels, wie eines polaren Lösungsmittels (z. B. DMF); und bei Umgebungs- oder erhöhter Temperatur (z. B. Umgebungstemperatur).
Dann können gemäß einem weiteren Verfahren (E) Verbindungen der Formel (I) hergestellt werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):
mit einem Stannan der Formel (XVII):
oder einem geeigneten Derivat davon in Gegenwart eines geeigneten Übergangsmetallkatalysators. Zweckmäßig wird die Reaktion in einem Lösungsmittel durchgeführt, wie einem Ether (z. B. Dioxan); in Gegenwart eines Promotors, wie eines halophilen Metalloxids (z. B. Silberoxid); bei erhöhter Temperatur (z. B. unter Rückfluß); und unter Einsatz eines Palladium-Katalysators, wie Bis(diphenylphosphino)butanpalladium(II)-dichlorid.
Gemäß einem anderen Verfahren (F) können Verbindungen der Formel (I), worin R³ NH₂ ist, hergestellt werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (XVIII):
mit einer Ammoniakquelle unter herkömmlichen Bedingungen. Zweckmäßig wird die Reaktion in einem Lösungsmittel durchgeführt, wie in einem Ester (Ethylacetat); bei Umgebungs- oder erhöhter Temperatur (z. B. Umgebungstemperatur); unter Einsatz von Ammoniumhydroxid als Ammoniakquelle und unter Verwendung einer Verbindung der Formel (XVIII), worin Hal Cl ist.
Gemäß einem anderen Verfahren (G) können Verbindungen der Formel (I) durch gegenseitige Umwandlung hergestellt werden, wobei anderen Verbindungen der Formel (I) als Vorstufen verwendet werden.
Geeignete gegenseitige Umwandlungen schließen z. B. die folgenden Umwandlungen ein: eines Cyano-Derivats zu einem Amid-Derivat; eines Amid-Derivats zu einem Cyano-Derivat; eines Carbonsäure-Derivats zu einem Amid-Derivat; eines Amid-Derivats zu einem Carbonsäure-Derivat; eines Carbonsäure-Derivats zu einem Ester-Derivat; und eines Carbonsäureester-Derivats zu einem Carbonsäure-Derivat.
Die obigen gegenseitigen Umwandlungen können durch herkömmliche Chemie durchgeführt werden, die in vielen Standardtexten zur organischen Chemie beschrieben wird; siehe z. B. "Advanced Organic Chemistry" von Jerry March, 4. Auflage (Wiley, 1992).
Wie es von den Fachleuten anerkannt werden wird, kann es notwendig oder wünschenswert in jeder Stufe der Synthese von Verbindungen der Formel (I) sein, eine oder mehrere empfindliche Gruppen im Molekül zu schützen, um unerwünschte Nebenreaktianen zu verhindern.
Ein anderes Verfahren (H) zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) umfaßt somit das Entschützen geschützter Derivate von Verbindungen der Formel (I).
Die in der Herstellung von Verbindungen der Formel (I) verwendeten Schutzgruppen können in herkömmlicher Weise verwendet werden. Siehe z. B. diejenigen, die beschrieben werden in der Standardliteraturquelle "Protective Groups in Organic Synthesis" von Theodora W. Green und Peter G. M. Wuts, zweite Auflage (John Wiley and Sons, 1991), das hier durch Verweis eingeführt wird und das ebenfalls Verfahren zur Entfernung solcher Gruppen beschreibt.
Die Acylierung von Verbindungen der Formel (I), worin R³ NH₂ ist, um entsprechende acylierte Benzolsulfonamid-Derivate zu liefern, kann durch herkömmliche Mittel durchgeführt werden, z. B. durch Einsatz herkömmlicher Acylierungsmittel, wie diejenigen, die beschrieben werden in "Advanced Organic Chemistry" von J. March, 4. Auflage (John Wiley and Sons, 1992), S. 417–424, das hier durch Verweis eingeführt wird.
Verbindungen der Formeln (II), (IV), (V) und (VI) können durch jedes Verfahren hergestellt werden, das auf dem Gebiet zur Herstellung von Verbindungen analoger Struktur bekannt ist.
Verbindungen der Formel (II) können z. B. gemäß dem nachfolgenden Schema 1 hergestellt werden.
In einer Variation dieses Schemas können Verbindungen der Formel (IX) zum entsprechenden Azirin durch Behandlung mit einer Base (z. B. Triethylamin), gefolgt von Abkühlen auf ca. 0°C und Behandlung mit einem Anhydrid (z. B. Trifluoressigsäureanhydrid) umgewandelt werden. Das Azirin wird dann zur entsprechenden Verbindung der Formel (VIII) umgewandelt, indem das Azirin in einem Lösungsmittel wie einem aromatischen Kohlenwasserstoff (z. B. 1,2,4-Trichlorbenzol) gelöst und die Lösung erwärmt wird (z. B. unter Rückfluß).
Schema 1
Die Fachleute werden anerkennen, daß Schema 1 angepaßt werden kann, um unsubstituierte Derivate der Formel (I) bereitzustellen. Dabei können unsubstituierte Derivate der Formel (II) gemäß Schema 1 durch Verwendung von 2-Methylpyridin hergestellt werden.
Verbindungen der Formel (IV) können z. B. hergestellt werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel (II) mit einer Boronsäure der Formel (XIII)
oder einem geeigneten Derivat davon unter den oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Verfahren (A) beschriebenen Bedingungen.
Verbindungen der Formel (IV), worin R² Halogen ist, können ebenfalls durch Halogenieren unsubstituierter Derivate der Formel (IV) unter den oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Verfahren (C) beschriebenen Bedingungen hergestellt werden. Unsubstituierte Derivate der Formel (IV) können durch Umsetzen der entsprechenden unsubstituierten Derivate der Formel (II) mit einer Boronsäure der Formel (XIII) unter den oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Verfahren (A) beschriebenen Bedingungen hergestellt werden.
Verbindungen der Formel (V) können z. B. hergestellt werden durch Umsetzen eines unsubstituierten Derivats der Formel (II) mit einer Boronsäure der Formel (III) oder einem geeigneten Derivat davon unter den oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Verfahren (A) beschriebenen Bedingungen.
Verbindungen der Formel (V) können auch unter den oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (I) gemäß Verfahren (D) beschriebenen Bedingungen hergestellt werden, durch Verwendung eines unsubstituierten Aminopyridinium-Derivats der Formel (VII).
Verbindungen der Formel (VI) können z. B. gemäß dem nachfolgenden Schema 2 hergestellt werden.
Schema 2
Die in den Schemata 1 und 2 erläuterten Umwandlungen können zweckmäßig unter Bedingungen durchgeführt werden, die herkömmlich für solche Reaktionen sind. Die erläuterten Reaktionsbedingungen und Reagenzien sind exemplarisch.
Die Fachleute werden anerkennen, daß es notwendig oder wünschenswert sein kann, Schema 1 oder 2 zum Erhalt bestimmter Verbindungen der Formel (II), einschließlich unsubstituierte Derivat davon, und (VI) anzupassen.
Verbindungen der Formel (II), worin R² CN ist, werden z. B. zweckmäßig gemäß Schema 1 durch Reaktion der entsprechenden Verbindung der Formel (X) mit O-Mesitylen-sulfonylhydroxylamin erhalten, um die entsprechende Verbindung der Formel (VIII) zu ergeben.
Verbindungen der Formel (XVIII) können hergestellt werden durch Sulfonylieren einer Verbindung der Formel (XIX)
unter herkömmlichen Bedingungen. Zweckmäßig wird die Sulfonylierung unter Verwendung von Sulfonsäure oder eines Derivats davon, wie einer Halogensulfonsäure (z. B. Chlorsulfonsäure), bewirkt; in Gegenwart eines Lösungsmittels, wie eines halogenierten Alkans (z. B. Dichlormethan); und bei zwischen –78°C und Umgebungstemperatur (z. B. –70°C).
Boronsäuren der Formeln (III) und (XIII) sind entweder bekannte Verbindungen oder können durch Literaturverfahren hergestellt werden, wie durch diejenigen, die z. B. in EP-A-533268 beschrieben werden. Geeignete Derivate davon schließen Boronsäureester ein, wie diejenigen, die in R. Miyaura et al. beschrieben werden, J. Org. Chem. 1995, 60, 7508–7510, das hier durch Verweis eingeführt wird.
Aminopyridinium-Komplexe der Formel (VII) und entsprechende unsubstituierte Derivate davon sind entweder bekannte Verbindungen oder können durch Literaturverfahren hergestellt werden, wie durch diejenigen, die z. B. beschrieben werden in Y. Kobayashi et al., Chem. Parm Bull. (1971), 19(10), 2106–15; T. Tsuchiya, J. Kurita und K. Takayama, Chem. Pharm. Bull. 28(9) 2676–2681 (1980) und K. Novitskii et al., Khim Geterotskil Soedin, 1970, 2, 57–62, die alle hier durch Verweis eingeführt werden.
Verbindungen der Formel (XI), (XII), (XIV) und (XVI) sind entweder bekannte Verbindungen oder können aus bekannten Verbindungen durch herkömmliche Chemie hergestellt werden.
Verbindungen der Formel (XVII) können durch Literaturverfahren hergestellt werden, wie durch diejenigen, die z. B. beschrieben werden in Dale E. Mais et al., J. Labelled Compd. Radiopharm., (1991), 29(1); und Hormoz Azizian, Colin Eaborn, Alan Pidcock, J. Organomet. Chem. (1981), 215(1), 49–58.
Verbindungen der Formel (XIX) können unter den oben für die Herstellung der entsprechenden Verbindungen der Formel (I) beschriebenen Bedingungen hergestellt werden.
Bestimmte oben beschriebene Zwischenstufen sind neue Verbindungen, und es ist selbstvesrständlich, daß alle neuen Zwischenstufen hier weitere Aspekte der vorliegenden Erfindung bilden. Verbindungen der Formel (II), (IV), (V), (VI) und (XVIII) sind Schlüsselzwischenstufen und stellen einen besonderen Aspekt der vorliegenden Erfindung dar.
Zweckmäßig werden Verbindungen der Erfindung im Anschluß an die Aufarbeitung in Form der freien Base isoliert. Pharmazeutisch akzeptable Säureadditionssalze der Verbindungen der Erfindung können unter Verwendung herkömmlicher Mittel hergestellt werden.
Solvate (z. B. Hydrate) einer Verbindung der Erfindung können während des Aufarbeitungsverfahrens eines der zuvor genannten Verfahrensschritte gebildet werden.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung, aber beschränken die Erfindung in keiner Weise. Alle Temperaturen sind in °C. Flash-Säulenchromatographie wurde unter Verwendung von Merck 9385 Kieselerde durchgeführt. Biotage-Chromatographie wurde an einer Flash-40i-Säule (Biotage Limited) durchgeführt. Festphasenextraktions-(SPE)-Chromatographie wurde unter Verwendung von Varian Mega Bond Elut (Si)-Kartuschen (Anachem) unter 15 mmHg Vakuum mit Elution mit Stufengradient durchgeführt. Dünnschichtchromatographie (DC) wurde an Kieselerdeplatten durchgeführt. NMR wurde an einem Brucker 400 MHz-Spektrometer durchgeführt. Chemische Verschiebungen sind in bezug auf Tetramethylsilan als interne chemische Verschiebungsreferenz in δ ppm angegeben. Die folgenden Abkürzungen werden verwendet: TFA, Trifluoressigsäure; THF, Tetrahydrofuran; DCM, Dichlormethan; NBS, N-Bromsuccinimid; DMF, N,N-Dimethylformamid; Me, Methyl; s, Singulett; d, Dublett; t, Triplett; und m, Multiplett.
Beispiel 1
4-[6-Cyano-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzol-sulfonamid
i) 6-[2-(4-Fluorphenyl)-2-oxoethyl]nicotinonitril
Zu einer Lösung aus 3-Cyano-6-methylpyridin (High Force Research Limited) (0,59 g, 5 mmol) und Ethyl-4-fluorbenzoat (0,84 g, 5 mmol) (Aldrich) in trockenem THF (15 ml), das bei –70° (Dricold/Ethanol) unter Stickstoff gerührt wurde, wurde Lithiumbis(trimethylsilyl)amid (10 ml M Lösung in Hexan, 10 mmol) getropft. Die Reaktion wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen, unter Stickstoff für 20 h gerührt, in Wasser (200 ml) gegossen und mit Ethylacetat extrahiert (3 × 50 ml). Die vereinigten Extrakte wurden mit Wasser (50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen und getrocknet (MgSO₄). Entfernung des Lösungsmittels ergab einen Feststoff, der aus Ethanol unter Erhalt der Titelverbindung als gelber Feststoff (0,74 g, 62%) kristallisiert wurde, der als Mischung der Keto- und Enol-Formen gemäß NMR vorlag.
MH⁺: 241; Smp.: 170–171°C (unkorrigiert).
ii) 2-(Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril
Festes t-Butoxycarbonyl-O-mesitylensulfonylhydroxylamin (13,0 g, 41,8 mmol) wurde portionsweise unter Rühren zu TFA (40 ml) über 10 min gegeben und dann für weitere 30 Minuten gerührt. Die Lösung wurde auf Eis (–250 ml) gegossen und belassen, bis das Eis geschmolzen war. Der resultierende weiße Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in DCM (300 ml) gelöst. Die Lösung wurde über 4 Å Molekularsieben für 1,5 Stunden getrocknet, filtriert und mit 6-[2-(4-Fluorphenyl)-2-oxoethyl]nicotinonitril (3,32 g, 13,8 mmol) versetzt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 4 Tage gerührt, mit Wasser (100 ml) gewaschen, getrocknet und durch Säulenchromatographie gereinigt. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (3 : 1) ergab die Titelverbindung als gelben Feststoff (0,6 g, 18%).
NMR: (CDCl₃): δ 6,87 (1H, s), 7,15–7,20 (3H, m), 7,57 (1H, dd), 7,95 (2H, m), 8,84 (1H, d).
iii) 3-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril
Eine Lösung aus 2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril (0,6 g, 2,53 mmol) und NBS (0,5 g, 2,8 mmol) in DMF (10 ml) wurde bei Raumtemperatur für 2 h gerührt. Die Reaktion wurde in Wasser (100 ml) gegossen und mit Ethylacetat extrahiert (2 × 30 ml). Die vereinigten Extrakte wurden mit Wasser (30 ml) und Kochsalzlösung (30 ml) gewaschen, getrocknet und durch Biotage-Chromatographie gereinigt. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (20 : 1) ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (0,483 g, 61%).
NMR: (CDCl₃): δ 7,21 (2H, t), 7,30 (1H, dd), 7,62 (1H, dd), 8,06 (2H, m), 8,80 (1H, s).
iv) 4-[6-Cyano-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
Eine Mischung aus 4-Iodbenzolsulfonamid (0,5 g, 1,1 mmol); Dipinacoldiboran (0,456 g, 1,1 mmol); Kaliumacetat (0,775 g, 8 mmol); und [1,1'-Bis(diphenylphosphino)-ferrocen]palladium(II)-chlorid-Komplex : DCM (1 : 1) (0,04 g); in DMF (8 ml) wurde unter Stickstoff für 2 h auf 90° erwärmt. Zur abgekühlten Reaktionsmischung wurden 3-Brom-2-(3-fluorphenyl)-6-trifluormethyl-pyrazolo[1,5-a]pyridin (0,231 g, 0,73 mmol), 2 N Na₂CO₃ (4 ml) und Tetrakis(triphenylphosphin)-palladium(0) (0,04 g) gegeben und die Mischung für 18 Stunden unter Stickstoff auf 90° erwärmt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde in Wasser (100 ml) gegossen und die Suspension mit Ethylacetat extrahiert (3 × 30 ml). Die vereinigten Extrakte wurden mit Wasser (30 ml) und Kochsalzlösung (30 ml) gewaschen und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen braunen Feststoff, der durch Biotage-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (2 : 1) ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (0,151 g, 65%). MH⁺ 393.
NMR: (CDCl₃): δ 4,87 (2H, br), 7,08 (2H, t), 7,28 (1H, dd), 7,48 (2H, d), 7,55 (2H, m), 7,60 (1H, d), 7,98 (2H, d), 8,89 (1H, d).
Beispiel 2
2-(4-Fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril
Zu einer Lösung aus 3-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril (0,24 g, 0,76 mmol) in DMF (20 ml) wurden 4-Methansulfonylphenylboronsäure (0,202 g, 1,1 mmol), gemahlenes Kaliumphosphat (0,45 g, 20 mmol) und Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (0,03 g) gegeben und die Mischung für 6 h unter Stickstoff auf 90° erwärmt. Die abgekühlte Mischung wurde in Wasser (200 ml) gegossen und mit Ethylacetat extrahiert (3 × 40 ml). Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Wasser (50 ml) und Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen Feststoff, der durch Biotage-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan : Ethylacetat (4 : 1) ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (0,019 g, 6%). MH⁺: 392.
NMR: (CDCl₃): δ 3,14 (3H, s), 7,09 (2H, t), 7,30 (1H, dd), 7,50–7,58 (4H, m), 7,62 (1H, dd), 8,00 (2H, d), 8,9 (1H, s).
Beispiel 3
4-[6-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid i) 1-(4-Fluorphenyl)-2-pyridin-1-ylethanon
Unter Verwendung von 2-Methylpyridin (4,65 g, 50 mmol) wurde die Titelverbindung als gelber Feststoff (6,28 g, 58%) in der in Beispiel 1(i) beschriebenen Weise erhalten. Sie existierte als Mischung der Keto- und Enolformen gemäß NMR. MH⁺: 216.
ii) 1-(4-Fluorphenyl)-2-pyridin-2-ylethanonoxim
Zu einer Lösung aus 1-(4-Fluorphenyl)-2-pyridin-1-ylethanon (6,27 g, 29 mmol) in Methanol (100 ml) wurde eine Lösung aus Hydroxylaminhydro chlorid (9,6 g, 130 mmol) und Natriumacetat (15,6 g) in Wasser (80 ml) gegeben, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 24 h gerührt. Der resultierende Niederschlag wurde abfiltriert und getrocknet, um die Titelverbindung als weißen Feststoff zu ergeben (5,83 g, 87%).
(M-H₂O)H⁺: 213
NMR: (CDCl₃): δ 4,42 (2H, s), 7,00 (2H, t), 7,14 (1H, m), 7,28 (1H, d), 7,59 (1H, dt), 7,72 (2H, m), 8,55 (1H, m), 8,96 (1H, br).
iii) 2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin
Festes t-Butoxycarbonyl-O-mesitylensulfonylhydroxylamin (17,26, 54,6 mmol) wurde portionsweise unter Rühren zu TFA (50 ml) über 10 min gegeben und dann für weitere 30 Minuten gerührt. Die Lösung wurde auf Eis (–250 ml) gegossen und belassen, bis das Eis geschmolzen war. Der resultierende weiße Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in Chloroform (200 ml) gelöst. Die Lösung wurde über 4 Å Molekularsieben für 1,5 h getrocknet, filtriert und mit 1-(4-Fluorphenyl)-2-pyridin-2-ylethanonoxim (6,29 g, 27,3 mg) in Chloroform (100 ml) versetzt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt, mit Wasser gewaschen (2 × 50 ml) und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen braunen Feststoff, der durch Biotage-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (20/1) ergab die Titelverbindung als gelben Feststoff (4,09 g, 71%).
MH⁺: 213
NMR: (CDCl₃): δ 6,75 (2H, m), 7,10 (3H, m), 7,50 (1H, d), 7,95 (2H, m), 8,45 (1H, d).
iv) 3-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin
Unter Verwendung von 2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (4,08 g, 19,3 mmol) wurde die Titelverbindung als weißer Feststoff (5,46 g, 97%) in der in Beispiel 1(iii) beschriebenen Weise erhalten.
MH⁺: 291, 293.
NMR: (CDCl₃): δ 6,80 (1H, t), 7,20 (3H, m), 7,55 (1H, d), 8,05 (2H, m), 8,45 (1H, d).
v) 4-[2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-yl]benzolsulfonamid
Durch Verwendung von 3-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (0,87 g, 3,00 mmol) wurde die Titelverbindung als weißer Feststoff (0,067 g, 6%) in der in Beispiel 1(iv) beschriebenen Weise erhalten.
MH⁺: 368.
NMR: (CDCl₃): δ 4,87 (2H, br), 6,87 (1H, dt), 7,06 (2H, t), 7,23 (1H, m), 7,48–7,60 (5H, m), 7,95 (2H, d), 8,53 (1H, d).
vi) 4-[6-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
Eine Mischung aus 4-[2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid (0,062 g, 0,17 mmol) und Brom (0,03 g, 0,17 mmol) in Chloroform (3 ml) wurde unter Rückfluß für 24 Stunden erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde mit Chloroform (20 ml) verdünnt, mit M Natriumthiosulfat (10 ml) und Wasser (10 ml) gewaschen und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen braunen Feststoff, der durch SPE-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (10/1) ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (0,025 g, 32%).
MH⁺: 446, 448:
NMR: (d6-Aceton): δ 6,55 (2H, br), 7,05 (2H, t), 7,30 (1H, d), 7,45 (2H, d), 7,50 (2H, m), 7,55 (1H, d), 7,80 (2H, d), 8,80 (1H, s).
Beispiel 4
6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin
i) 2-(4-Fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfanyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin
Unter Verwendung von 3-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (4,0 g, 13,8 mmol) und 4-Methylsulfanyl-phenylboronsäure (3,07 g, 1,83 mmol) wurde die Titelverbindung als weißer Feststoff (2,29 g, 50%) in der in Beispiel 2 beschriebenen Weise erhalten.
MH⁺: 335.
NMR: (CDCl₃): δ 2,53 (3H, s), 6,80 (1H, t), 7,00 (2H, t), 7,15 (1H, t), 7,25 (2H, d), 7,30 (1H, d), 7,50 (2H, d), 7,60 (2H, m), 8,50 (1H, d).
ii) 6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfanyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin
Durch Verwendung von 2-(4-Fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfanyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin (0,664 g, 2 mmol) wurde die Titelverbindung als weißer Feststoff (0,266 g, 32%) in der in Beispiel 3(vi) beschriebenen Weise erhalten.
MH⁺: 413, 415.
NMR: (CDCl₃): δ 2,54 (3H, s), 7,04 (2H, t), 7,18 (1H, dd), 7,33 (2H, d), 7,41 (1H, d), 7,50 (2H, d), 7,57 (2H, m), 8,63 (1H, d).
iii) 6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin
Zu einer Lösung aus 6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfanyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin (0,26 g, 0,63 mmol) in Aceton (30 ml) wurde eine Lösung aus Oxone (1,16 g, 1,9 mmol) in Wasser (10 ml) gegeben. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 20 Stunden gerührt, weiteres Oxone (1 g, 1,7 mmol) in Wasser (10 ml) wurde hinzugegeben, und das Rühren wurde für 6 Stunden fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wurde in Wasser (200 ml) gegossen und mit Ethylacetat extrahiert (3 × 30 ml). Die vereinigten Extrakte wurden mit Wasser (30 ml) und Kochsalzlösung (30 ml) gewaschen und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen Feststoff, der durch Biotage-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (0,13 g, 58%).
MH⁺: 445, 447.
NMR: (CDCl₃): δ 3,13 (3H, s), 7,07 (2H, t), 7,29 (1H, dd), 7,45–7,55 (5H, m), 7,96 (2H, d), 8,67 (1H, s).
Beispiel 5
4-[6-Chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
i) 4-(Tri-n-butylstannyl)phenylsulfonamid
Eine Mischung aus 4-Iodphenylsulfonamid (20 g, 70,65 mmol), Hexabutyldizinn (50 g, 86,2 mmol) und Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (500 mg) in Toluol/Dioxan (1 : 1, 350 ml) wurde unter Stickstoff für 48 h zum Rückfluß erwärmt. Nach Abkühlen wurde die Reaktionsmischung auf Kieselgel aufkonzentriert und durch Flash-Säulenchromatographie (400 g) mit Cyclohexan : Ethylacetat (8 : 1, dann 3 : 1) gereinigt, um die Titelverbindung als farbloses Öl zu ergeben (18,22 g, 58%).
NMR: (CDCl₃): δ 0,89 (9H, t), 1,1 (6H, t), 1,33 (6H, m), 1,53 (6H, m), 4,80 (2H, s, NH2), 7,63 (2H, d, J 8 Hz, arom.), 7,85 (2H, d, J 8 Hz, arom.).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,44 Detektion UV₂₅₄.
ii) 2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-1-(4-fluorphenyl)ethanon
Natriumhydrid (Aldrich, 60%ig in Öl, 13,03 g) wurde in wasserfreiem THF (250 ml) suspendiert. 4-Fluoracetophenon (15 g, 108,6 mmol) in wasserfreiem THF (100 ml) wurde hinzugetropft und die Mischung für 1 h unter Stickstoff zum Rückfluß erwärmt. Die Lösung wurde auf 0°C abgekühlt und tropfenweise mit 2,5 Dichlorpyridin (16,07 g) in wasserfreien THF (75 ml) versetzt. Die Mischung wurde dann über Nacht zum Rückfluß erwärmt, bevor sie erneut auf 0° abgekühlt und tropfenweise mit Wasser abgeschreckt wurde (Vorsicht! Wasserstoffgas bildete sich, exotherm). Die resultierende Reaktionsmischung wurde mit Kochsalzlösung gewaschen und die organische Phase getrocknet und aufkonzentriert, um ein bewegliches braunes Öl zu ergeben, das auf Kieselgel adsorbiert und durch Biotage-Chromatographie mit Cyclohexan : Ethylacetat (40 : 1) als Elutionsmittel gereinigt wurde. Vereinigen und Aufkonzentrieren der geeigneten Fraktionen ergab die Titelverbindung als gelben Feststoff (2,31 g, 8,5%), der als Mischung der Keto : Enol-Formen (1 : 2) existierte.
NMR (CDCl₃): δ 4,44 (2H, s, Keto-CH₂), 6,0 (offensichtlich 2H, s, Enol-CH=), 7,05–7,15 (10H, m), 7,26 (1H, d, J 9 Hz), 7,6–7,65 (offensichtlich 3H, 2 × dd, J 9 & 2 Hz), 7,8 (4H, dd, J 9 & 5 Hz), 8,35 (offensichtlich 2H, J 3 Hz, N=CH), 8,52 (1H, J 3 Hz, N=CH).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,56 Detektion UV₂₅₄.
iii) 2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-1-(4-fluorphenyl)ethanonoxim
Natriumacetat (6,47 g) und Hydroxylaminhydrochlorid (5,74 g) wurden in Wasser (45 ml) gelöst und zu einer Lösung aus 2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-1-(4-fluorphenyl)ethanon (3,39 g, 13,6 mmol) in Methanol (200 ml) gegeben. Nach Erwärmen für 2 h zum Rückfluß, wurde die abgekühlte Reaktionsmischung zwischen Wasser und Ethylacetat aufgetrennt und die organische Phase getrocknet und aufkonzentriert, um die Titelverbindung als gelben Feststoff zu ergeben (3,56 gm 98%).
NMR: (CDCl₃): δ 4,35 (2H, s, CH₂), 7,02 (2H, t, 8 Hz, arom.), 7,25 (1H, d, J 9 Hz, arom.), 7,53 (1H, dd, J 9 & 2 Hz, arom.), 7,71 (2H, m, arom.), 8,12 (1H, br s, OH), 8,48 (1H, s, 2 Hz, arom.).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,42 Detektion UV₂₅₄.
iv) 6-Chlor-2-(4-Fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin
Festes t-Butoxycarbonyl-O-mesitylensulfonylhydroxylamin (8,45 g, 26,8 mmol) wurde portionsweise unter Rühren zu TFA (100 ml) über 10 min gegeben und dann für weitere 30 Minuten gerührt. Die Lösung wurde auf Eis (~250 ml) gegossen und belassen, bis das Eis geschmolzen war. Der resultierende weiße Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in Chloroform (200 ml) gelöst. Die Lösung wurde über 4 Å Molekularsieben für 1,5 Stunden getrocknet, filtriert und mit 2-(5-Chlorpyridin-2-yl)-1-(4-fluorphenyl)ethanonoxim (3,56 g, 13,4 mmol) in Chloroform (100 ml) versetzt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt, mit Wasser (2 × 50 ml) gewaschen und getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels ergab einen braunen Feststoff, der durch Biotage-Chromatographie gereinigt wurde. Elution mit Cyclohexan/Ethylacetat (35/1) ergab die Titelverbindung als gelben Feststoff (2,476 g, 75%).
NMR: (CDCl₃): δ 6,76 (1H, s, H-3), 7,08 (1H, dd, J 9 & 2 Hz, H-5), 7,13 (2H, t, J 9 Hz, H-3'), 7,45 (1H, d, J 9 Hz, H-4), 7,9 (2H, dd, J 9 & 5 Hz, H-2'), 8,5 (1H, d, J 2 Hz, H-7).
v) 3-Brom-6-chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin
6-Chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (2,48 g, 10,05 mmol) wurde in wasserfreiem DMF (160 ml) gelöst und mit NBS (1,967 g) für 1 h behandelt. Die Reaktionsmischung wurde zwischen Ethylacetat und Wasser aufgetrennt. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, getrocknet und aufkonzentriert, um die Titelverbindung als braunen Feststoff zu ergeben (2,827 g, 86%).
(CDCl₃): δ 7,19 (3H, t, J 9 Hz, H-3' + H-5), 7,48 (1H, d, J 9 Hz, H-4), 8,05 (2H, m, H-2'), 8,49 (1H, br s, H-7).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,74 Detektion UV₂₅₄.
vi) 4-[6-Chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
3-Brom-6-chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (397 mg, 1,22 mmol), 4-(Tri-n-butylstannyl)phenylsulfonamid (1,09 g), Bis(Diphenylphosphino)butanpalladium(II)-dichlorid (100 mg) und Silberoxid (283 mg) wurden in wasserfreiem Dioxan (15 ml) für 24 h im Rückfluß gerührt. Nach Abkühlen wurde die aufkonzentrierte Reaktionsmischung in DCM aufgenommen und auf Kieselgel aufkonzentriert, das auf eine SPE-Säule geladen und mit Cyclohexan : Ethylacetat (8 : 1) eluiert wurde. Dies ergab einen weißen Feststoff, der mit Cyclohexan verrieben und filtriert wurde, um die Titelverbindung als weißen Feststoff (165 mg, 34%) zu ergeben.
MH⁺ 400.
¹H-NMR (DMSO) δ 7,27 (2H, t, J 8 Hz), 7,4 (3H, m), 7,52 (4H, m), 7,7 (1H, d, J 9 Hz), 7,87 (2H, d, J 9 Hz), 9,18 (1H, s).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,12 Detektion UV₂₅₄.
Beispiel 6
4-[6-Chlor-2-(4-ethoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
Das in Beispiel 5(i)–(vi) dargestellte Verfahren wurde wiederholt, aber 4-Fluoracetophenon in Schritt (ii) wurde gegen 4-Ethoxyacetophenon ausgetauscht. Die Titelverbindung wurde aus 3-Brom-6-chlor-2-(4-ethoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (429 mg, 1,22 mmol) in der für Beispiel 5(vi) beschriebenen Weise als weißer Feststoff erhalten (109 mg, 21%).
MH⁺ 426.
NMR (DMSO) δ 1,41 (3H, t, J 7 Hz, CH₃), 4,15 (2H, q, J 7 Hz, CH₂), 7,05 (1H, d, J 8 Hz), 7,46 (1H, d, J 9 Hz), 7,51 (4H, m), 7,61 (2H, d, J 8 Hz), 7,75 (1H, d, 9 Hz), 7,95 (2H, d, 8 Hz), 9,22 (1H, s).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,13 Detektion UV₂₅₄.
Beispiel 7
4-[6-Chlor-2-(3-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
Das in Beispiel 5(i)–(vi) dargestellte Verfahren wurde wiederholt, aber 4-Fluoracetophenon in Schritt (ii) wurde gegen 3-Fluoracetophenon ersetzt. Die Titelverbindung wurde aus 3-Brom-6-chlor-2-(3-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (250 mg, 1,22 mmol) in der für Beispiel 5(vi) beschriebenen Weise als weißer Feststoff erhalten (108 mg, 35%).
¹H-NMR (DMSO) 7,25–7,31 (3H, m), 7,43 (4H, m), 7,54 (2H, d, J 9 Hz), 7,7 (1H, d, J 9 Hz), 7,88 (2H, d, 9 Hz), 9,2 (1H, br s).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,14 Detektion UV₂₅₄.
Beispiel 8
4-[6-Chlor-2-phenyl-pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
i) 5-Chlor-2-phenylethinylpyridin
Eine Mischung aus 2,5-Dichlorpyridin (3,7 g, 25 mmol), Phenylacetylen (3,02 ml, 1,1 Äq.), Bistriphenylphosphinpalladiumdichlorid(II) (Aldrich, 500 mg), Kupfer(I)-iodid (250 mg) und Triethylamin (50 ml) wurde unter N₂ für 18 h zum Rückfluß erwärmt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde mit Wasser verdünnt, mit Diethylether extrahiert, getrocknet und zu einem schwarzen Öl aufkonzentriert, das durch SPE-Si-Chromatographie mit Gradientenelution Cyclohexan : Ethylacetat (100 : 0 zu 10 : 1) partiell gereinigt wurde, um die Titelverbindung als braunen Feststoff zu ergeben (1,94 g, 36%).
MH⁺ 213.
¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃) δ 7,37 (3H, m), 7,48 (1H, d, J 8 Hz), 7,59 (2H, m), 7,67 (1H, dd, J 8 & 2 Hz), 8,57 (1H, d, J 2 Hz).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (15 : 1), Rf 0,36.
ii) 3-Brom-6-chlor-2-phenylpyrazolo[1,5-a]pyridin
Festes t-Butoxycarbonyl-O-mesitylensulfonylhydroxylamin (3,16 g, 10 mmol) wurde portionsweise unter Rühren zu TFA (25 ml) über 10 min gegeben und dann für weitere 30 Minuten gerührt. Die Lösung wurde auf Eis (~250 ml) gegossen und belassen, bis das Eis geschmolzen war. Der resultierende weiße Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in Chloroform (100 ml) gelöst. Die Lösung wurde über 4 Å Molekularsieben für 1,5 Stunden getrocknet, filtriert, mit 5-Chlor-2-phenylethinylpyridin (1,94 g, 9 mmol) in Chloroform (10 ml) behandelt und bei Umgebungstemperatur über Nacht gerührt. Nach Aufkonzentrieren im Vakuum wurde der resultierende halbfeste Stoff in MeCN (30 ml) suspendiert, mit DBU (1,63 ml) versetzt und für 18 h gerührt. Die Mischung wurde aufkonzentriert und zwischen Ethylacetat und Wasser aufgetrennt. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und zu einem braunen Feststoff aufkonzentriert, der teilweise durch SPE-Chromatographie mit Cyclohexan : Ethylacetat (50 : 1) gereinigt wurde, um eine ungefähr 2 : 3-Mischung aus Ausgangsacetylen und gewünschtem Cyclisierungsprodukt zu ergeben (636 mg) (DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,66), die in DMF (10 ml) aufgenommen, auf 0° abgekühlt und mit NBS (540 mg) behandelt und auf Raumtemperatur erwärmen gelassen, für 2 h gerührt und dann in Wasser und in Ethylacetat (2 × 30 ml) extrahiert wurde. Der resultierende hellbraune Feststoff wurde durch SPE-Si-Chromatographie mit Cyclohexan : Ethylacetat (50 : 1) als Elutionsmittel gereinigt, um einen hellbraunen Feststoff zu ergeben (565 mg). Eine Portion dieses Materials (100 mg) wurde durch HPLC mit einer Acetonitril : Wasser-Gradientenelution gereinigt, um reine Titelverbindung zu ergeben (40 mg).
MH⁺ 308/309.
DC SiO₂ (Cyclohexan : Ethylacetat 3 : 1), Rf 0,77.
NMR: (CDCl₃): δ 8,02 (1H, d, J 7 Hz), 7,5 (4H, m), 8,1 (2H, dd, J 7 & 2 Hz), 8,5 (1H, s).
iii) 4-[6-Chlor-2-phenyl-pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid
Durch Verwendung von unreinem 3-Brom-6-chlor-2-(phenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin (300 mg, 1,22 mmol) wurde die Titelverbindung als weißer Feststoff (52 mg, 14%) in der in Beispiel 5(vi) beschriebenen Weise erhalten.
MH⁺ 384.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 4,85 (2H, br s), 7,19 (1H, dd, J 10 & 2 Hz), 7,38 (3H, m), 7,5 (3H, d, J 8 Hz), 7,52 (2H, m), 7,92 (2H, d, J 8 Hz), 8,58 (1H, m).
DC SiO₂ Cyclohexan : Ethylacetat (3 : 1), Rf 0,66 Detektion UV₂₅₄. Beispiel 9 – Tabletten

a) Verbindung der Erfindung 5,0 mg

Lactose 95,0 mg

Mikrokristalline Cellulose 90,0 mg

Vernetztes Polyvinylpyrrolidon 8,0 mg

Magnesiumstearat 2,0 mg

Preßgewicht 200,0 mg
Die Verbindung der Erfindung, mikrokristalline Cellulose, Lactose und vernetztes Polyvinylpyrrolidon werden durch ein 500 μm-Sieb gesiebt und in einem geeigneten Mischer vermischt. Das Magnesiumstearat wird durch ein 250 μm-Sieb gesiebt und mit der Wirkstoffmischung vermischt. Die Mischung wird zu Tabletten unter Verwendung geeigneter Stempel verpreßt.

b) Verbindung der Erfindung 5,0 mg

Lactose 165,0 mg

Vorgequollene Stärke 20,0 mg

Vernetztes Polyvinylpyrrolidon 8,0 mg

Magnesiumstearat 2,0 mg

Preßgewicht 200,0 mg
Die Verbindung der Erfindung, Lactose und vorgequollene Stärke werden zusammen vermischt und mit Wasser granuliert. Die feuchte Masse wird getrocknet und gemahlen. Das Magnesiumstearat und vernetztes Polyvinylpyrrolidon werden durch ein 250 μm-Sieb gesiebt und mit dem Granulat vermischt. Die resultierende Mischung wird unter Verwendung geeigneter Tablettenstempel verpreßt. Beispiel 10 – Kapseln

a) Verbindung der Erfindung 5,0 mg

Lactose 193,0 mg

Magnesiumstearat 2,0 mg

Füllgewicht 200,0 mg
Die Verbindung der Erfindung und vorgequollene Stärke werden durch ein 500 μm-Sieb gesiebt, zusammen vermischt und mit Magnesiumstearat (durch ein 250 μm-Sieb gesiebt) geschmiert. Die Mischung wird in Hartgelatinekapseln geeigneter Größe gefüllt.

b) Verbindung der Erfindung 5,0 mg

Lactose 177,0 mg

Polyvinylpyrrolidon 8,0 mg

Vernetztes Polyvinylpyrrolidon 8,0 mg

Magnesiumstearat 2,0 mg

Füllgewicht 200,0 mg

Die Verbindung der Erfindung und Lactose werden zusammen vermischt und mit einer Lösung von Polyvinylpyrrolidon granuliert. Die feuchte Masse wird getrocknet und gemahlen. Das Magnesiumstearat und vernetztes Polyvinylpyrrolidon werden durch ein 250 μm-Sieb gesiebt und mit den Granalien vermischt. Die resultierende Mischung wird in Hartgelatinekapseln geeigneter Größe gefüllt. Beispiel 11 – Sirup

a) Verbindung der Erfindung	5,0 mg
Hydroxypropylmethylcellulose	45,0 mg
Propylhydroxybenzoat	1,5 mg
Butylhydroxybenzoat	0,75 mg
Natriumsaccharin	5,0 mg
Sorbit-Lösung	1,0 ml
Geeignete Puffer	in genügender Menge
Geeignete Geschmacksstoffe	in genügender Menge
Gereinigtes Wasser auf	10,0 ml

Die Hydroxypropylmethylcellulose wird in einem Teil von heißem gereinigtem Wasser zusammen mit den Hydroxybenzoaten dispergiert, und die Lösung wird auf Umgebungstemperatur abkühlen gelassen. Das Natriumsaccharin, Geschmacksstoffe und Sorbit-Lösung werden zur Masselösung gegeben. Die Verbindung der Erfindung wird in einem Teil des verbleibenden Wassers gelöst und zur Masselösung gegeben. Geeignete Puffer können zur Steuerung des pH in der Region maximaler Stabilität hinzugegeben werden. Die Lösung wird zum Volumen aufgefüllt, filtriert und in geeignete Behälter gefüllt. Beispiel 12 – Injektionsformulierung

% G/V

Verbindung der Erfindung 1,00

Wasser für Injektionen B. P. auf 100,00
Natriumchlorid kann zur Einstellung der Tonizität der Lösung hinzugegeben werden, und der pH kann auf denjenigen der maximalen Stabilität und/oder zur Erleichterung der Auflösung der Verbindung der Erfindung unter Verwendung von verdünnter Säure oder verdünntem Alkali oder durch Zugabe geeigneter Puffersalze eingestellt werden. Solubilisatoren wie Co-Solventien können ebenfalls zur Erleichterung der Auflösung der Verbindung der Erfindung hinzugegeben werden. Antioxidantien und Metallkomplexierungssalze können ebenfalls eingeschlossen werden. Die Lösung wird geklärt, zum Endvolumen mit Wasser aufgefüllt und der pH erneut gemessen und falls notwendig eingestellt, um 10 mg/ml der Verbindung der Formel (I) zu liefern.
Die Lösung kann zur Injektion z. B. durch Einfüllen und Versiegeln in Ampullen, Fläschchen oder Spritzen verpackt werden. Die Ampullen, Fläschchen oder Spritzen können aseptisch gefüllt (z. B. kann die Lösung durch Filtration sterilisiert und in sterile Ampullen unter aseptischen Bedingungen eingefüllt werden) und/oder letztlich sterilisiert werden (z. B. durch Erhitzen in einem Autoklaven unter Verwendung eines der akzeptablen Zyklen). Die Lösung kann unter einer inerten Atmosphäre aus Stickstoff abgepackt werden.
Bevorzugt wird die Lösung in Ampullen gefüllt, durch Verschmelzen des Glases versiegelt und zuletzt sterilisiert.
Weitere sterile Formulierungen werden in einer ähnlichen Weise hergestellt, die 0,5, 2,0 und 5% G/V der Verbindung der Erfindung enthalten, um 5, 20 bzw. 50 mg/ml der Verbindung der Erfindung bereitzustellen.
Biologische Daten
Die inhibitorische Aktivität gegen humanes COX-1 und COX-2 wurde in COS-Zellen bewertet, die stabil mit cDNA für humanes COX-1 und humanes COX-2 transfiziert worden waren. 24 Stunden vor dem Experiment wurden die COS-Zellen aus den 175 cm²-Kolben, in denen sie gezüchtet worden waren, auf Zellkulturplatten mit 24 Vertiefungen unter Verwendung des folgenden Verfahrens übertragen. Das Inkubationsmedium (Dulbeccos modifiziertes Eagle-Medium (DMEM), ergänzt mit hitzeinaktiviertem fötalem Kälberserum (10% V/V), Penicillin (100 IE/ml), Streptomycin (100 μg/ml) und Geneticin (600 μg/ml), wurde aus einem Kolben konfluenter Zellen entfernt (1 Kolben bei Konfluenz enthält ca. 1 × 10⁷ Zellen). 10 ml phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) wurde zum Kolben hinzugegeben, um die Zellen zu spülen. Nach Verwerfen des PBS wurden die Zellen dann in 10 ml Trypsin für 20 Sekunden gespült, worauf das Trypsin entfernt und der Kolben in einen Inkubator (37°) für 1–2 Minuten gestellt wurde, bis die Zellen sich vom Kolben ablösten. Der Kolben wurde dann aus dem Inkubator entfernt und die Zellen in 10 ml frischem Inkubationsmedium resuspendiert. Der Inhalt des Kolbens wurde in einen sterilen 250 ml-Behälter überführt und das Volumen des Inkubationsmediums anschließend auf 100 ml aufgefüllt. 1 ml Zellsuspension wurde in jede Vertiefung von Zellkulturplatten mit 4 × 24 Vertiefungen pipettiert. Die Platten wurden dann in einen Inkubator über Nacht gestellt (37°C, 95% Luft/5% CO₂). Fall mehr als ein Kolben mit Zellen erforderlich war, wurden die Zellen aus den individuellen Kolben vereinigt, bevor sie in die Platten mit 24 Vertiefungen abgegeben wurden.
Im Anschluß an die Inkubation über Nacht wurde das Inkubationsmedium vollständig aus den Zellkulturplatten mit 24 Vertiefungen entfernt und durch 250 μl frisches DMEM (37°C) ausgetauscht. Die Testverbindungen wurden auf das 250-fache der erforderlichen Testkonzentration in DMSO angesetzt und in die Vertiefungen in einem Volumen von 1 μl gegeben. Die Platten wurden dann vorsichtig durch Schwenken vermischt und dann für 1 Stunde in einen Inkubator gestellt (37°C, 95% Luft/5% CO₂). Im Anschluß an den Inkubationszeitraum wurden 10 μl Arachidonsäure (750 μM) in jede Vertiefung auf eine Arachidonsäure-Endkonzentration von 30 μM gegeben. Die Platten wurden dann für weitere 15 Minuten inkubiert, worauf das Inkubationsmedium aus jeder Vertiefung der Platten entfernt und bei –20°C gelagert wurde, bevor die Prostaglandin-E₂-(PGE2)-Spiegel unter Verwendung eines Enzym-Immuntests bestimmt wurden. Die inhibitorische Wirkung der Testverbindung wurde als IC₅₀-Wert ausgedrückt, der als die Konzentration der Verbindung definiert ist, die zur Inhibierung der PGE2-Freisetzung aus den Zellen um 50% erforderlich ist. Das Selektivitätsverhältnis der Inhibierung von COX-1 gegenüber COX-2 wurde durch Vergleich der entsprechenden IC₅₀-Werte berechnet. Die folgenden IC₅₀-Werte für die Inhibierung von COX-2 und COX-1 wurden für Verbindungen der Erfindung erhalten:

Claims

Verbindungen der Formel (I)
und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon, worin: R⁰ und R¹ unabhängig ausgewählt sind aus H, Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy oder mit einem oder mehreren Fluoratomen substituiertem C_1-6-Alkoxy, R² Halogen, CN, CONR⁴R⁵, CO₂H, CO₂C_1-6-Alkyl oder NHSO₂R⁴ ist; R³ C_1-6-Alkyl oder NH₂ ist; und R⁴ und R⁵ unabhängig ausgewählt sind aus H, C_1-6-Alkyl, Phenyl, mit einem oder mehreren Atomen oder Gruppen (ausgewählt aus Halogen, C_1-6-Alkyl, C_1-6-Alkoxy oder mit einem oder mehreren Fluoratomen substituiertem C_1-6-Alkoxy) substituiertem Phenyl oder zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen gesättigten 4- bis 8-gliedrigen Ring bilden.
Verbindungen gemäß Anspruch 1, worin R⁰ und R¹ unabhängig H, Halogen oder C_1-4-Alkoxy sind; R² CN oder Halogen ist; und R³ C_1-3-Alkyl oder NH₂ ist.
Verbindungen gemäß Anspruch 1 oder 2, worin R⁰ F ist; R¹ H ist; R² CN oder Br ist; und R³ Methyl oder NH₂ ist.
Verbindungen gemäß Anspruch 1 oder 2, worin R⁰ F ist; R¹ H ist; R² CN, Br oder Cl ist; und R³ Methyl oder NH₂ ist.
Verbindungen gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, worin R⁰ in der 3- oder 4-Position (bevorzugt in der 4-Position) des Phenyl-Rings ist und R² in der 6-Position des Pyrazolopyridin-Rings ist.
4-[6-Cyano-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; 2-(4-Fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-carbonitril; 4-[6-Brom-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; 6-Brom-2-(4-fluorphenyl)-3-[4-(methylsulfonyl)phenyl]pyrazolo[1,5-a]pyridin; und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon.
4-[6-Chlor-2-(4-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; 4-[6-Chlor-2-(4-ethoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; 4-[6-Chlor-2-(3-fluorphenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; 4-[6-Chlor-2-phenyl-pyrazolo[1,5-a]pyridin-3-yl]benzolsulfonamid; und pharmazeutisch akzeptable Derivate davon.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) und pharmazeutisch akzeptabler Derivate davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 7 definiert, welches umfaßt: (A) Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):
oder eines geschützten Derivats davon mit einer Verbindung der Formel (III):
oder einem geschützten Derivat davon in Gegenwart eines geeigneten Übergangsmetallkatalysators; oder (B) wenn R³ C_1-4-Alkyl darstellt, Oxidieren einer Verbindung der Formel (IV):
oder eines geschützten Derivats davon; oder (C) wenn R² Halogen ist, Halogenieren einer Verbindung der Formel (V):
oder eines geschützten Derivats davon; oder (D) Umsetzen einer Verbindung der Formel (VI):
mit einem Aminopyridiniumkomplex der Formel (VII):
oder einem geschützten Derivat davon; oder (E) Umsetzen einer Verbindung der Formel (II):
mit einem Stannan der Formel (XVII):
oder einem geeigneten Derivat davon in Gegenwart eines geeigneten Übergangsmetallkatalysators; oder (F) wenn R³ NH₂ ist, Umsetzen einer Verbindung der Formel (XVIII):
mit einer Ammoniakquelle unter herkömmlichen Bedingungen; oder (G) gegenseitige Umwandlung einer Verbindung der Formel (I) zu einer anderen Verbindung der Formel (I); oder (H) Entschützen eines geschützten Derivats der Verbindung der Formel (I); und gegebenenfalls Umwandeln von durch eines der Verfahren (A) bis (H) hergestellten Verbindungen der Formel (I) zu pharmazeutisch akzeptablen Derivaten davon.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 6 definiert im Gemisch mit einem oder mehreren pharmazeutisch akzeptablen Trägern oder Exzipienten umfaßt.
Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 6 definiert zur Verwendung in der Human- oder Veterinärmedizin.
Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Derivat davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 6 definiert zur Verwendung in der Behandlung eines Zustands, der durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt wird.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 6 definiert zur Herstellung eines Therapeutikums zur Behandlung eines Zustands, der durch selektive Inhibierung von COX-2 vermittelt wird.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Derivats davon wie in einem der Ansprüche 1 bis 6 definiert zur Herstellung eines Therapeutikums zur Behandlung einer entzündlichen Störung.