DE69819012T2

DE69819012T2 - Pharmazeutische zusammensetzung zur reduzierung der mcp-1 proteinsynthese

Info

Publication number: DE69819012T2
Application number: DE69819012T
Authority: DE
Inventors: Angelo Guglielmotti; Alberto Mantovani
Original assignee: Aziende Chimiche Riunite Angelini Francesco ACRAF SpA
Current assignee: Angelini Acraf SpA
Priority date: 1997-07-28
Filing date: 1998-07-22
Publication date: 2004-08-12
Anticipated expiration: 2018-07-23
Also published as: SI1005332T1; HK1028561A1; WO1999004770A3; JP2010047609A; EP1005332A2; JP2001510793A; CA2300289C; AU9160198A; IT1293795B1; JP4651191B2; EP1005332B1; US6534534B1; JP5086322B2; PT1005332E; ES2207858T3; ZA986636B; DE69819012D1; CA2300289A1; DK1005332T3; ITMI971789A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Indazolmethoxyalkansäuren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die für die Behandlung von Störungen aktiv ist, gekennzeichnet durch Produktion des MCP-1-Proteins.
Das Europäische Patent EP-B-0 382 276 beschreibt eine Verbindung mit der Formel:
worin
R und R', die dieselben oder unterschiedlich voneinander sind, H oder ein Alkyl sind mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen,
R''' ist H oder ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und, wenn R''' H ist, Salze davon mit pharmazeutisch annehmbaren, organischen oder anorganischen Basen.
Das oben erwähnte Patent gibt zusätzlich an, dass die Verbindung mit der Formel (I) eine analgetische Aktivität besitzt.
Weiterhin beschreibt das Europäische Patent EP-B-0 510 748 die Verwendung der Verbindung mit der Formel (I) für die Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die bei der Behandlung von Autoimmunerkrankungen aktiv ist.
Es wurde nun festgestellt, dass die Verbindung der Formel (I) ebenfalls aktiv ist zur Reduktion der Produktion von MCP-1-Protein.
Wie bereits bekannt, ist das MCP-1-Protein (Monozyten chemotaktisches Protein-1) ein Chemokin, das zur β-Subfamilie der Chemokine gehört. Es be sitzt eine starke chemotaktische Aktivität für Monozyten und wirkt auch auf T-Lymphozyten, Mastzellen und Basophile.
Andere Chemokine, die zu der β-Subfamilie gehören, sind z. B.: MCP-2 (Monozyten chemotaktisches Protein-2), MCP-3, MCP-4, MIP-1α und MIP-1β, RANTES und Protein 1309.
Die β-Subfamilie unterscheidet sich in ihrer Struktur von der α-Subfamilie; während die beiden ersten Cysteine der Chemokine der α-Subfamilie durch eine dazwischengeschaltete Aminosäure getrennt sind, sind tatsächlich die beiden ersten Cysteine der β-Subfamilie benachbart angeordnet. MCP-1 wird durch verschiedene Zelltypen erzeugt (Leukozyten, Blutplättchen, Fibroblasten, Endothelzellen).
Von allen bekannten Chemokinen zeigt MCP-1 die höchste Spezifität im Hinblick auf Monozyten und Makrophagen, für die es nicht nur ein anziehender Faktor ist, sondern auch ein Stimulus für die Aktivierung, wodurch es ein Verfahren zur Produktion von Superoxiden und Arachidonsäure induziert, wie auch als Stimulus für die Amplifikation der phagozytischen Aktivität wirkt.
Die Sekretion von Chemokinen im allgemeinen und insbesondere von MCP-1 wird im typischen Fall von vielen Faktoren induziert, wie z. B. Interleukin-1 (IL-1), Interleukin-2 (IL-2), TNFIX (Tumor Necrose Faktor α), γ-Interferon und bakterielles Lipopolysaccharid (LPS).
Beim Menschen wurde MCP-1 bei einer großen Anzahl von Erkrankungen mit akutem oder chronischem Verlauf aufgefunden, die durch die traditionelle Medizin nicht in homogene Kategorien klassifiziert sind: z. B. interstitielle Lungenerkrankungen (ILD), Vaskulitis und Atherosklerose.
Bei interstitiellen Lungenerkrankungen zieht MCP-1, freigesetzt von den pulmonalen Endothelzellen, kompetente Zellen heran und aktiviert diese mit einer darauffolgenden Freisetzung von Mediatoren, die die alveolären Strukturen der Lunge beschädigen.
Bei der Vaskulitis wird MCP-1 durch die Endothelzellen der Blutgefäße freigesetzt, folgend auf schädigende Stimuli und zieht Monozyten wie auch andere Zelltypen an und aktiviert diese, die für die Beschädigung der Gefäßwand verantwortlich werden.
Bei der Atherosklerose wird MCP-1 durch das vaskuläre Endothel erzeugt, folgend auf eine Beschädigung der vaskulären glatten Muskelzellen. MCP-1 zieht die Monozyten an, die anfänglich an die Arterienwand anhaften und dann durch die Wände wandern, und trägt dadurch zur Bildung von Atheromen durch Stimulation der Vervielfältigung der glatten Muskelzellen bei.
Die für diese Erkrankungen zur Zeit verwendeten Therapien sind, da sie stromaufwärts der pathologischen Phänomene wirken, unspezifisch und haben häufig vielfältige und zeitweise schwerwiegende Nebenwirkungen.
Die oben erwähnten Therapien ermöglichen außerdem nur eine temporäre Remission der pathologischen Phänomene, die erhalten werden kann und ihre hohe Toxizität verhindert ihre Verwendung über verlängerte Zeitspannen, die jedoch für die Behandlung von Krankheiten des chronischen Typs notwendig wären.
Insbesondere bei der Atherosklerose wirken die zur Zeit verwendeten Arzneimittel nur auf bestimmte Faktoren, die zur Bildung von Atheromen beitragen, wie z. B. Hypercholesterolämie oder Bluthochdruck, während sie keine Wirkung auf das Ziel des pathologischen Prozesses haben, d. h. die Gefäßwand.
Chemotaktische Faktoren im allgemeinen und MCP-1 im besonderen sind außerdem sehr wichtig in den Fällen, wo Komplikationen folgend auf chirurgische Eingriffe auftreten, wie z. B. bei einer Angioplastie, Atherektomie, Gefäßwiederherstellungsverfahren, Transplantationen, Organaustausch, Gewebeaustausch und prothetischen Implantaten. Das Auftreten solcher Komplikationen macht es häufig für den Patienten notwendig, eine weitere intensive Therapie durchzuführen oder selbst einen neuen Eingriff zu erdulden.
Das US-Patent 5 571 713 beansprucht eine Zusammensetzung, umfassend ein MCP-1-Antisinn-Oligonukleotid für die in vitro Inhibition der Produktion von MCP-1 durch mononukleäre menschliche Zellen und glatte Muskeln.
Daher besteht nach wie vor ein starker Bedarf an einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die für die Behandlung der Störungen geeignet ist, die durch die Produktion von MCP-1 gekennzeichnet sind, z. B. Atheroslclerose, interstitielle Lungenerkrankungen aufgrund von postoperativen Komplikationen einer kardiovaskulären Chirurgie bei Transplantaten oder Organ- oder Gewebsersatz und bei Protheseimplantaten.
Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist daher die Verwendung einer Verbindung mit der Formel
worin
R und R', die dieselben oder unterschiedlich voneinander sind, H oder ein Alkyl sind mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, R''' ist H oder ein Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und, wenn R'' H ist, Salze davon mit pharmazeutisch annehmbaren, organischen oder anorganischen Basen zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung einer Störung, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Atherosklerose, interstitielle Lungenerkrankungen, postoperative Komplikationen bei kardiovaskulären Operationen, bei Transplantaten oder Organ- oder Gewebeersatz und bei prothetischen Implantaten.
Vorzugsweise ist R''' H, während R=R'=CH₃; dieses Produkt wird hiernach "Bindarit" genannt.
Vorzugsweise werden die pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der vorliegenden Erfindung in geeigneten Dosierungsformen hergestellt, umfassend eine effektive Dosis von mindestens einer Verbindung mit der Formel (I) oder ein Salz davon mit einer pharmazeutisch annehmbaren Base und mindestens einem pharmazeutisch annehmbaren inerten Bestandteil.
Beispiele für geeignete Dosierungsformen sind Tabletten, Kapseln, beschichtete Tabletten, Körner, Lösungen und Sirups für die orale Verabreichung; mit Arzneimittel versehene Pflasterstücke für die transdermale Verabreichung; Suppositorien für die rektale Verabreichung und sterile Lösungen für die Verabreichung durch injizierbares Aerosol oder auf dem ophthalmischen Weg.
Weitere geeignete Dosierungsfomen sind Formen mit verzögerter Freisetzung und auf Liposomen basierende Formen, entweder für den oralen oder den injizierbaren Weg.
Die Dosierungsformen können auch andere konventionelle Bestandteile enthalten, z. B. stabilisierende Konservierungsmittel, Tenside, Puffer, Salze für die Regulation des osmotischen Drucks, Emulgatoren, Süßstoffe, Färbemittel, Geschmacksstoffe und ähnliche.
Wenn die besondere Therapie dies nötig macht, kann die pharmazeutische Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung andere pharmakologisch aktive Bestandteile enthalten, deren gleichzeitige Verabreichung therapeutisch nützlich ist.
Die Menge der Verbindung mit der Formel (I) oder eines Salzes davon mit einer phaimazeutisch annehmbaren Base in einer pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung kann in einem weiten Bereich variieren, abhängig von bekannten Faktoren, wie z. B. der Art der zu behandelnden Erkrankung, der Schwere der Erkrankung, dem Körpergewicht des Patienten, der Dosierungsform, dem gewählten Verabreichungsweg, der Zahl der täglichen Verabreichungen und der Wirksamkeit der gewählten Verbindung mit der Formel (I). Die optimale Menge kann nichtsdestotrotz einfach und auf dem Routineweg von dem Fachmann bestimmt werden.
Im typischen Fall wird die Menge der Verbindung mit der Formel (2) oder eines Salzes davon mit einer pharmazeutisch annehmbaren Base in der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung so gewählt sein, dass sie ein Verabreichungsniveau von 1 bis 100 mg/kg/Tag sicherstellt. Vorzugsweise liegt das Verabreichungsniveau bei 5 bis 50 mg/kg/Tag oder noch bevorzugter bei 2 bis 20 mg/kg/Tag.
Die Dosierungsformen der pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung können gemäß den Verfahren hergestellt werden, die dem Pharmazeuten bekannt sind, umfassend das Mischen, Granulieren, Komprimieren, Lösen, Sterilisieren und ähnliches.
Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung illustrieren, ohne sie auf irgendeine Weise zu begrenzen.
Beispiel 1
Wirkung von Bindarit auf die Herstellung von MCP-1
Die Fähigkeit von Bindarit, die Produktion von MCP-1 durch Leukozyten (PBMC), stimuliert durch LPS, zu reduzieren, wurde überprüft. Weiße Blutzellen wurden durch Zentriguration auf einem Ficoll-Gradienten isoliert und dann mit LPS (100 ng/ml) für 24 Stunden in Gegenwart oder Abwesenheit von skalaren Konzentrationen an Bindarit stimuliert. Die Überstandsflüssigkeit wurde am Ende gesammelt und das Niveau an MCP-1 wurde durch einen spezifischen immunenzymatischen Test gemessen.
Tabelle 1 zeigt die erhaltenen Ergebnisse.
Tabelle 1
Tabelle 1 zeigt, dass Bindarit die Produktion von MCP-1, induziert durch LPS, ohne wesentliche Beeinflussung des Niveaus von erzeugtem IL-8 signifikant reduziert.
Beispiel 2
Wirkung von Bindarit auf die Heranführung von Zellen bei der "Lufttasche" von Mäusen
Die Wirkung von Bindarit wurde in einem experimentellen Modell bei der Maus untersucht, wobei das Modell durch Produktion von MCP-1, Zellinfiltration und Bildung von Exsudat gekennzeichnet war. Die Mäuse wurden ad libitum mit einer Standarddiät für Nagetiere gefüttert oder mit derselben Diät unter Zugabe von Bindarit (0,5%) für 18 Tage. Am 12. Tag wurde unter Etheranästhesie sterile Luft (5 ml) in die dorsale Haut der Mäuse zur Bildung einer Tasche injiziert. Am 15. Tag wurde wiederum unter Ätheranästhesie weitere sterile Luft (5 ml) in die vorgebildete Tasche injiziert. Am 18. Tag wurde eine sterile physiologische Lösung (1 ml) in die so erhaltene Tasche injiziert oder ein Irritationsmittel (1 ml). Das Irritationsmittel war Karrageen (1%) oder IL-1 (40 ng). Nach 5 Stunden für IL-1 oder 24 Stunden für Karrageen wurden die Mäuse durch Asphyxie mit CO₂ geopfert. Das Exsudat, das sich entwickelt hatte, wurde gesammelt und für die Leukozytenzählung verwendet wie auch für die Messung der erzeugten Mediatoren.
Tabellen 2 und 3 zeigen die erhaltenen Ergebnisse.
Tabelle 2
Tabelle 2 zeigt, dass die mit Bindarit behandelten Mäuse eine signifikante Reduktion der Zahl der infiltrierten Zellen (Leukozytenzellen) zeigen, ohne eine Volumenreduktion des gesammelten Exsudats aufzuweisen.
Tabelle 3
Tabelle 3 zeigt, dass die Wirkung von Bindarit auf die Zellpopulation aufgrund der Wirkung auf MCP-1 zu einer Reduktion des prozentualen Anteils an Monozyten führt, die in die Tasche geführt wurden.

Claims

Verwendung einer Verbindung der Formel:
worin: R und R', die gleich oder unterschiedlich voneinander sind, H oder Alkyl mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen sind, R''' H oder Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist, und, wenn R''' H ist, Salze davon mit pharmazeutisch annehmbaren, organischen oder anorganischen Basen zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung einer Störung, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Atherosklerose, interstitielle Lungenerkrankungen, postoperative Komplikationen bei kardiovaskulären Operationen, bei Transplantaten oder Organ- oder Gewebeersatz und bei prothetischen Implantaten.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) gemäss Anspruch 1, worin R''' H ist.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) gemäss Anspruch 1 oder Anspruch 2, worin R Methyl ist.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) gemäss einem der Ansprüche 1 bis 3, worin R' Methyl ist.