DE69318407T2

DE69318407T2 - Hyaluronsaeure und deren derivate in sich gegenseitig durchdringenden polymernetzwerken

Info

Publication number: DE69318407T2
Application number: DE69318407T
Authority: DE
Inventors: Lanfranco I-35020 Ponte Di Brenta Callegaro; Paolo I-56126 Pisa Giusti
Original assignee: Ministero dell Universita e della Ricerca Scientifica e Tecnologica (MURST)
Current assignee: Ministero dell Universita e della Ricerca Scientifica e Tecnologica (MURST)
Priority date: 1992-07-03
Filing date: 1993-07-05
Publication date: 1999-01-07
Anticipated expiration: 2013-07-06
Also published as: JPH08504841A; US5644049A; ATE165839T1; EP0648229A1; JP3698720B2; DE69318407D1; ITPD920121A0; WO1994001468A1; IT1260154B; EP0648229B1; ITPD920121A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft sich gegenseitig durchdringende Polymernetzwerke, wobei eine der Komponenten ein Hyaluronsäureester oder ein Hyaluronsäuresalz ist, ein Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Biomaterialien für biomedizinische und sanitäre Anwendungen.
Hyaluronsäure (HS) ist ein natürliches Heteropolysaccharid aus alternierenden Resten von D-Glucuronsäure und N-Acetyl-D-glucosamin. Es ist ein lineares Polymer mit einem Molekulargewicht zwischen 50000 und 13000000, abhängig von der Quelle, aus der es erhalten wird und wie es hergestellt und analysiert wird. In der Natur kommt es in perizellularen Gelen, in der Grundsubstanz von Bindegeweben in Wirbeltierorganismen, von denen es eine der Hauptkomponenten ist, in den Gelenkflüssigkeiten von Gelenken, im Glaskörper, Nabelschnurgeweben und in Hahnenkämmen vor.
Es sind spezielle Fraktionen von Hyaluronsäure mit definierten Molekulargewichten bekannt, die keine entzündliche Wirkung besitzen, und die deshalb zur Vereinfachung der Wundheilung oder zum Ersatz der endobulbaren Flüssigkeiten oder in der Therapie für Gelenkpathologien durch Injektion ins Gelenk verwendet werden können, wie im Europäischen Patent Nr. 0 138 572, das den vorliegenden Anmeldern bewilligt worden ist, beschrieben ist.
Es sind auch Ester von Hyaluronsäure bekannt, in denen alle oder ein Teil der Carboxygruppen der Säure verestert sind, und ihre Verwendung in Pharmazeutika und Kosmetika und in bioabbaubaren Kunstoffmaterialien, wie in den U. S.-Patenten Nr. 4,851,521 und 4,965,353, die ebenfalls den vorliegenden Anmeldern erteilt wurden, beschrieben ist.
Es ist eine bekannte Tatsache, daß die Anwendung von Hyaluronsäure bei Patienten mit durchgelegenen Stellen, Wunden und Verbrennungen die Heilung beschleunigen kann. Ihre Rolle in den verschiedenen Stadien der Wundheilung ist von Weigel et al. ("A model for the role of hyaluronic acid and fibrin in the early events during inflammatory response and wound healing", J. Theor. Biol. (1986), 219) mit Hilfe eines theoretischen Modells beschrieben worden.
Untersuchungen zur Gewinnung von Produkten (Biomaterialien) für medizinische, sanitäre und pharmazeutische Anwendungen aus Hyaluronsäureestern oder Estern anderer Polysaccharide, verwendet als solche oder in Gemischen mit anderen Polymeren, haben zur Schaffung verschiedener Produkte geführt. Diese schließen Gewebe, wie Gazen verschiedener Dichte (Anzahl der Fäden pro Zentimeter), verschiedener Maße und Denier (Gewicht pro 9000 Meter Faden), Filme, Membranen, Gele, Führungskanäle etc. ein. Einige Beispiele für Filme erscheinen in zwei Patenten der vorliegenden Anmelder, nämlich den U. S.-Patenten Nr. 4,851,521 und 4,965,353. Die Verwendung solcher Materialien ist durch die Unmöglichkeit der Verwendung von Formsystemen zu ihrer Herstellung und Anwendung eingeschränkt.
Ein sich gegenseitig durchdringendes Polymernetzwerk, IPN, ist eine enge Verbindung von zwei Polymeren, beide in Netzwerkform, von denen mindestens eines in unmittelbarer Gegenwart des anderen synthetisiert oder vernetzt wird. Wenn eines der zwei Polymere in Netzwerkform (vernetzt) vorliegt und das andere ein lineares (nicht vernetztes) Polymer ist, entsteht ein Semi-IPN (L. H. Sperling, Interpenetrating Polymer Networks, CHEMTECH, Februar 1988). Der Begriff IPN schließt gegenwärtig neue Materialien ein, in denen die zwei Polymere im Gemisch nicht notwendigerweise aneinander gebunden sind, die Komponenten aber physikalisch verbunden sind. Diese neuen Materialien eröffnen eindeutig die Möglichkeit, leicht abbaubaren Polymeren physikalische, mechanische und Verarbeitungseigenschaften zu geben, um neue Materialien zu schaffen, in denen neue biologische Eigenschaften mit ihren mechanischen Eigenschaften gekoppelt werden können. Beispiele für neu entwickelte IPN und ihre Anwendungen, wobei eine der zwei Komponenten ein wasserlösliches Polymer ist, sind veröffentlicht worden (U. S.-Patente Nr. 4,678,468 und 4,747,953). Die U. K.-Patentanmeldungen Nr. 2 151 246 und 2 151 247 offenbaren polymere Artikel aus Acrylpolymeren, die mit Hyaluronsäure oder ihren Salzen modifiziert sind, wie Abgüsse, Filme, Fasern und Gewebe. Die Dokumente offenbaren kein Gefriertrocknungs- oder Gefrier-Auftau-Zyklusverfahren zur Herstellung der Acrylpolymere.
Ein IPN, das ein natürlich vorkommendes Polymer und ein synthetisches Polymer zur Verwendung auf medizinischen, sanitären und pharmazeutischen Gebieten umfaßt, ist allerdings für die vorliegende Erfindung neu.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist, ein Hydrogel oder einen Schwamm zu liefern, umfassend ein sich gegenseitig durchdringendes Polymernetzwerk, IPN, wobei eine erste Komponente ein Hyaluronsäureester oder ein Hyaluronsäuresalz ist und eine zweite Komponente ein synthetisches chemisches Polymer ist. Der Hyaluronsäureester kann ein 100%iger Hyaluronsäureester oder ein partieller Hyaluronsäureester sein. Dieser Ester oder das Salz kann mit einem pharmakologisch wirksamen Molekül erzeugt werden. Verfahren zur Herstellung des IPN der vorliegenden Erfindung sind ebenfalls offenbart.
Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist, ein IPN zu liefern, wobei der Hyaluronsäureester oder das Hyaluronsäuresalz und das synthetische chemische Polymer, die das IPN umfaßt, vernetzt sind, oder wobei das synthetische chemische Polymer auf das saure Polysaccharid aufgepfropft ist. Die Vernetzung oder das Aufpfropfen kann unter Verwendung von Verbindungen, die Radikale erzeugen können, oder durch funktionelle Gruppen im Hyaluronsäureester oder Hyaluronsäuresalz und dem synthetischen chemischen Polymer erreicht werden. Das IPN kann vor dem Vernetzen oder Aufpropfen erzeugt werden und besitzt Kraft des Aufpfropfens des synthetischen Polymers auf das natürliche oder die intermolekularen Vernetzungen zwischen den beiden starke Wechselwirkungen zwischen den natürlichen und synthetischen Polymeren darin.
Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung des IPN auf den biomedizinischen und sanitären Gebieten, einschließend ihre Verwendung in der Dermatologie, Urologie, Orthopädie, ohrenheilkundlichen Mikrochirurgie, Otoneurologie, der funktionellen, posttraumatischen und rhinosinusalen endoskopischen Mikrochirurgie, der plastischen Chirurgie, im Kreislaufsystem und in jedem anderen Typ von Chirurgie, in dem ihre Eigenschaften nützlich sind.
Das IPN der vorliegenden Erfindung besitzt im Vergleich zu herkömmlichem IPN besondere, verbesserte chemische und physikalische Eigenschaften. Diese Biomaterialien behalten die bioverträglichen Eigenschaften des Hyaluronsäureesters oder des Salzes davon, das als eine der zwei Komponenten des IPN verwendet wird, und auch die mechanischen Eigenschaften des chemischen Polymers, das als zweite der zwei polymeren Komponenten des IPN verwendet wird, bei.
In Bezug auf die in der vorliegenden Erfindung verwendeten Hyaluronsäureester, können diese Ester alleine oder zusammen mit anderen wirksamen Bestandteilen, wie therapeutischen Mitteln, wie Mitteln gegen Infektionen, Antibiotika, antimikrobiellen Mitteln, entzündungshemmenden Mitteln, Zytostatika, zytotoxischen Mitteln, Antivirusmitteln, Anaesthetika, Antiseptika und Desinfektionsmitteln, verwendet werden.
In Bezug auf die in der vorliegenden Erfindung verwendeten chemischen Polymere, können beliebige davon, die bereits als Biomaterialien verwendet wurden, verwendet werden, um das hier offenbarte IPN herzustellen. Solche chemische Polymere sind in G. W. Hastings, Macromolecular Biomaterials, CRC Press, 1984 und S. D. Bruck, Properties of Biomaterials in the Physiological Environment, CRC Press, 1980 beschrieben. Der einzige Faktor, der die Verwendung solcher synthetischer Polymere einschränkt, ist, daß sie nicht toxisch und nicht karzinogen sein müssen.
Zu rein erläuternden Zwecken sind nachstehend einige Beispiele angegeben, die die Herstellung von IPN nach der vorliegenden Erfindung beschreiben.
Ein weiterer Bereich der Anwendbarkeit der vorliegenden Erfindung wird aus der nachstehend gelieferten ausführlichen Beschreibung ersichtlich. Allerdings sollte es selbstverständlich sein, daß die ausführliche Beschreibung und spezielle Beispiele, obwohl sie bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung anzeigen, nur zur Erläuterung gegeben werden, da den Fachleuten aus dieser ausführlichen Beschreibung verschiedene Änderungen und Modifizierungen innerhalb des Geistes und des Umfangs der Erfindung ersichtlich werden.
Die folgende ausführliche Beschreibung der Erfindung wird geliefert, um den Fachleuten beim Anwenden der vorliegenden Erfindung zu helfen. Selbst so sollte die folgende ausführliche Beschreibung nicht benutzt werden, um die vorliegende Erfindung unzulässigerweise einzuschränken, weil Modifizierungen und Veränderungen in den hier diskutierten Ausführungsformen von den normalen Fachleuten gemacht werden können, ohne vom Geist oder Umfang der vorliegenden erfinderischen Entdeckung abzuweichen.
Die Inhalte jeder der hier zitierten Literaturzitate sind durch Bezugnahme vollständig eingeschlossen.

Herstellung von Hyaluronsäurefraktionen, die im IPN der vorliegenden Erfindung verwendbar sind

BEISPIEL 1

Verfahren zur Herstellung eines Gemisches aus Hyalastin und Hyalektin ohne entzündliche Wirkung

Frische oder gefrorene Hahnenkämme (3000 g) werden in einem Fleischwolf zerkleinert und dann sorgfältig in einem mechanischen Homogenisator homogenisiert. Die so erhaltene Paste wird in einen Edelstahlbehälter AISI 316 oder in Glas gegeben und mit dem 10-fachen Volumen an wasserfreiem Aceton umgesetzt. Das Ganze wird 6 Stunden bei einer Geschwindigkeit von 50 Upm gerührt. Es wird 12 Stunden zum Trennen stehengelassen und das Aceton wird durch Aushebern verworfen. Die Acetonextraktion wird wiederholt, bis das verworfene Aceton den richtigen Feuchtegehalt (Karl-Fischer- Verfahren) erreicht hat. Das Ganze wird dann zentrifugiert und bei einer geeigneten Temperatur 5-8 Stunden unter vermindertem Druck getrocknet. Auf diese Weise werden etwa 500-600 g trockene, pulverförmige Hahnenkämme erhalten.
300 g trockenes Pulver werden unter wäßrigen Bedingungen, gepuffert mit Phosphatpuffer in Gegenwart einer geeigneten Menge an Cysteinhydrochlorid, einem enzymatischen Abbau mit Papain (0,2 g) ausgesetzt. Das so Erhaltene wird 24 Stunden bei 60 Upm gerührt, wobei die Temperatur konstant bei 60º-65ºC gehalten wird. Es wird dann auf 25º C abgekühlt und Celite® (60 g) wird zugegeben und das Rühren eine weitere Stunde beibehalten. Das so erhaltene Gemisch wird filtriert, bis eine klare Flüssigkeit erhalten wird. Die klare Flüssigkeit wird dann einer molekularen Ultrafiltration unter Verwendung von Membranen mit einer molekularen Ausschlußgrenze von 30000 unterzogen, um auf der Membran jene Moleküle mit einem Molekulargewicht größer als 30000 zurückzuhalten.
Das Produkt wird von 5 auf 6 ursprüngliche Volumina ultrafiltriert, wobei kontinuierlich destilliertes Wasser zu dem Produkt während der Ultrafiltration zugegeben wird. Die Zugabe von Wasser wird abgebrochen und die Ultrafiltration wird fortgeführt, bis das Volumen auf 1/3 des ursprünglichen Volumens reduziert ist.
Die zurückbehaltene Flüssigkeit wird durch Zugabe von Natriumchlorid 0,1 M gemacht, und die Temperatur wird auf 50ºC gebracht. Unter Rühren bei 60 Upm werden 45 g Cetylpyridiniumchlorid zugegeben. Es wird 60 Minuten gerührt, und dann werden 50 g Celite® zugegeben. Unter Rühren wird die Temperatur des Ganzen auf 25ºC gebracht, und der durch Zentrifugieren erzeugte Niederschlag wird gesammelt. Der erhaltene Niederschlag wird in einer 0,01 M Lösung von Natriumchlorid (5 Liter), die 0,05% Cetylpyridiniumchlorid enthält, suspendiert. Die so erhaltene Suspension wird 60 Minuten bei 50ºC gerührt; die Temperatur wird dann auf 25ºC gebracht, und der Niederschlag wird zentrifugiert. Der Wascharbeitsgang wird dreimal wiederholt, wonach der Niederschlag in einem Behälter, der 3 Liter einer 0,05 M Lösung von Natriumchlorid enthält, die 0,05% Cetylpyridiniumchlorid enthält, gesammelt wird. Er wird 60 Minuten bei 60 Upm gerührt und die Temperatur wird 2 Stunden bei 25ºC konstant gehalten. Der Überstand wird durch Zentrifugieren entfernt. Das Verfahren wird einige Male mit Lösungen von 0,1 M Natriumchlorid, die 0,05% Cetylpyridiniumchlorid enthalten, wiederholt. Das Gemisch wird zentrifugiert, und der Überstand wird verworfen. Der Niederschlag wird in einer Lösung von 0,30 M Natriumchlorid, die 0,05% Cetylpyridiniumchlorid enthält, (3 Liter) dispergiert. Das Gemisch wird gerührt und sowohl der Niederschlag als auch die klare Flüssigkeit werden gesammelt. Die Extraktion wird drei weitere Male am Niederschlag wiederholt, wobei jedes Mal 0,5 Liter der gleichen wäßrigen Lösung verwendet werden.
Schließlich wird der Niederschlagsrückstand entfernt und die klaren Flüssigkeiten werden alle zusammen in einen einzigen Behälter gegeben. Die Temperatur der Flüssigkeit wird unter konstantem Rühren auf 50ºC gebracht. Die Flüssigkeit wird dann mit Natriumchlorid auf 0,23 M gebracht. 1 g Cetylpyridiniumchlorid wird zugegeben und es wird 12 Stunden gerührt.
Das Gemisch wird auf 25ºC gekühlt und dann zuerst durch eine Celite®-Packung und dann durch einen Filter filtriert. Es wird dann erneut auf einer Membran mit einer Molekülausschlußgrenze von 30000 einer molekularen Ultrafiltration unterzogen, wobei drei ursprüngliche Volumina unter Zugabe einer Lösung von 0,33 M Natriumchlorid ultrafiltriert werden. Die Zugabe der Natriumchloridlösung wird unterbrochen und das Volumen wird auf 1/4 des ursprünglichen Volumens reduziert. Die so eingeengte Lösung wird unter Rühren (60 Upm) bei 25ºC mit drei Volumina Ethanol (95%) ausgefällt. Der Niederschlag wird durch Zentrifugieren gesammelt, und der Überstand wird verworfen. Der Niederschlag wird in 1 Liter 0,01 M Natriumchlorid gelöst, und die Fällung wird mit 3 Volumina 95% Ethanol wiederholt.
Der Niederschlag wird gesammelt und zuerst mit 75% Ethanol (3 mal), dann mit absolutem Ethanol (3 mal) und zuletzt mit absolutem Aceton (3 mal) gewaschen.
Das so erhaltene Produkt (HYALASTIN- + HYALEKTIN-Fraktionen) hat ein mittleres Molekulargewicht zwischen 250000 und 350000.
Die Ausbeute an HS beträgt 0,6% des ursprünglichen frischen Gewebes.

BEISPIEL 2

Verfahren zur Herstellung der Hyalastinfraktion aus dem Gemische durch das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren erhalten wurde

Das durch das in Beispiel beschriebene Verfahren erhaltene Gemisch wird in zweimal destilliertem apyrogenem Wasser in einer Menge von 10 mg Produkt pro 1 ml Wasser gelöst. Die erhaltene Lösung wird einer Molekularflitration durch Filtermembranen mit einer Molekülausschlußgrenze von 200000 mit anschließendem Konzentrationsverfahren auf der Membran ohne Zugabe von Wasser ausgesetzt. Während des Ultrafiltrationsverfahrens durch Membranen mit einer Molekülauschlußgrenze von 200000 laufen die Moleküle mit einem Molekulargewicht von mehr als 200000 nicht durch, während die kleineren Moleküle zusammen mit Wasser durch die Membran gehen. Während des Filtrationsverfahrens wird kein Wasser zugegeben, so daß das Volumen abnimmt, und es findet deshalb ein Anwachsen der Konzentration von Molekülen mit einem Molekulargewicht von mehr als 200000 statt. Das Produkt wird ultrafiltriert, bis das Volumen über der Membran auf 10% des ursprünglichen Volumens abgenommen hat. Zwei Volumina apyrogenes zweimal destilliertes Wasser werden zugegeben, und es wird dann wiederum ultrafiltriert, bis das Volumen auf 1/3 reduziert ist. Der Arbeitsgang wird noch zweimal wiederholt. Die durch die Membran gelaufene Lösung wird mit Natriumchlorid auf 0,1 M gebracht und dann mit 4 Voumina 95% Ethanol gefällt. Der Niederschlag wird dreimal mit 75% Ethanol gewaschen und anschließend unter vermindertem Druck getrocknet.
Das so erhaltene Produkt (HYALASTIN-Fraktion) hat ein mittleres Molekulargewicht zwischen 50000 und 100000. Die Ausbeute an HS entspricht 0,4% des ursprünglichen frischen Gewebes.
Hyaluronsäure mit einem mittleren Molekulargewicht von 155000 kann auf die gleiche Weise durch Verwendung geeigneter Ultrafiltationsmembranen und Gelfiltrationschromatographie erhalten werden.

BEISPIEL 3

Verfahren zum Erhalt der Hyalektinfraktion

Die aufkonzentrierte Lösung, die im Behälter oben auf der Ultrafiltrationsmembran mit einer Molekülausschlußgrenze von 200000, wie in Beispiel 2, gesammelt wird, wird mit Wasser verdünnt, bis eine Lösung mit 5 mg Hyaluronsäure pro ml erhalten wird, wie durch quantitative Analyse bezogen auf die Menge an Glucuronsäure bestimmt wurde.
Die Lösung wird auf 0,1 M an Natriumchlorid gebracht und dann mit 4 Volumina 95% Ethanol gefällt. Der Niederschlag wird dreimal mit 75% Ethanol gewaschen und dann unter vermindertem Druck getrocknet.
Das so erhaltene Produkt (HYALEKTIN-Fraktion) hat ein mittleres Molekulargewicht zwischen 500000 und 730000. Dies entspricht einer speziellen Fraktion von Hyaluronsäure mit einer definierten Molekülkettenlänge von etwa 2500 bis 3500 Saccharideinheiten mit einem hohen Reinheitsgrad. Die Ausbeute an HS entspricht 0,2% des ursprünglichen frischen Gewebes.

BEISPIEL 4

Herstellung des Tetrabutylammoniumsalzes von Hyaluronsäure

4,02 g HS-Natriumsalz (10 mÄquiv.) werden in 400 ml destilliertem H&sub2;O gelöst. Die Lösung wird dann in einer bei 4ºC thermostatisierten Säule, die 15 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in Tetrabutylammoniumform enthält, eluiert. Das von Natrium freie Eluat wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 6,18 g.

BEISPIEL 5

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyacrylsäure (PAS)

20 mg HS (MW 155000) werden durch 30-minütiges Schütteln bei einer Temperatur von 50ºC in 2 ml destilliertem Wasser gelöst. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PAS (MW 250000) werden durch 12-stündiges Schütteln bei einer Temperatur von 50ºC in 8 ml destilliertem Wasser gelöst. So wird eine 1%ige Lösung von PAS erhalten, die als Lösung B1 bezeichnet wird, und diese wird zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B1 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Das Schütteln wird eine Stunde fortgeführt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PAS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und bei 75ºC in einen Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 6

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyvinylpyrrolidon (PVP)

20 mg HS (MW 155000) werden durch 30-minütiges Schütteln bei einer Temperatur von 50ºC in 2 ml destilliertem Wasser gelöst. Es wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PVP (MW 40000) werden durch 5-stündiges Schütteln bei einer Temperatur von 50ºC in 8 ml destilliertem Wasser gelöst. Es wird eine 1%ige Lösung von PVP erhalten, die als Lösung B2 bezeichnet wird, die zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung B2 gegeben, während bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PVP in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 750 C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 7

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyacrylamid (PAAm)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. Es wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
84 mg PAAm (MW 5 · 10&sup6;) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während 12 Stunden bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PAAm erhalten, die als Lösung B3 bezeichnet wird, die dann stehengelassen wird, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B3 gegeben, während sie kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PAAm in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 8

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyethylenoxid (PEO)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PEO (MW 100000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während 12 Stunden bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PEO erhalten, die als Lösung B4 bezeichnet wird, die dann stehengelassen wird, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B4 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PEO in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gebläseofen bei einer Temperatur von 750 C gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 9

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Mowiol (Vinylalkohol-Vinylacetat- Copolymer (MOW)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg MOW (MW 127000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während 12 Stunden bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von MOW erhalten, die als Lösung B5 bezeichnet wird, die dann stehengelassen wird, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B5 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/MOW in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 10

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyvinylalkohol (PVA)

24 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PVA (MW 115000) werden in einen Kolben mit einem Rückflußkühler und einem Magnetrührer gegeben, der 8 ml destilliertes Wasser enthält. Der Kolben wird in ein Ölbad bei einer Temperatur von 150ºC gegeben und 5 Stunden geschüttelt. Wenn der PVA vollständig gelöst ist, wird eine 1%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B6 bezeichnet wird; diese wird dann stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam unter konstantem Schütteln bei Raumtemperatur zu Lösung B6 gegeben. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 11

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyphosphazenen, zum Beispiel Poly- (trifluorethoxy)phosphazen (PF 1)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PF 1 (MW 15000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PF1 erhalten, die als Lösung B7 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam unter konstantem Schütteln bei Raumtemperatur zu Lösung B7 gegeben. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PF1 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 12

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polhazen, zum Beispiel Poly- (di(p-Natriumsulfoxyphenoxy)phosphazen (PF2)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
80 mg PF2 (MW 15000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 5 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PF2 erhalten, die als Lösung B8 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B8 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PF2 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.
Die folgenden Beispiele erläutern die Herstellung von Schwämmen durch Gefriertrocknung von Gemischen aus Hyaluronsäure und wasserlöslichen Polymeren.

BEISPIEL 13

Herstellung eines gefriertrockneten Schwammes aus Hyaluonsäure (HS) und Polyacrylsäure (PAS)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird und die zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen wird.
80 mg PAS (MW 250000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PAS erhalten, die als Lösung B1 bezeichnet wird, die stehengelassen wird, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B1 gegeben, während bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PAS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gefriertrockner gestellt. Die Lyophilisierung wird durch Einfrieren auf -30ºC bei Atmosphärendruck und anschließendes 24-stündiges Erwärmen auf -20ºC unter vermindertem Druck (0,015 mbar) erreicht. Wenn der Gefriertrocknungsprozeß beendet ist, wird ein weiches, weißes, schwammartiges Material erhalten.

BEISPIEL 14

Herstellung eines gefriergetrockneten Schwammes aus Hyaluronsäure (HS) und Polyvinylpyrrolidon (PVP)

20 mg HS (MW 155000) werden während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC in 2 ml destilliertem Wasser gelöst. Es wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird; diese wird zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen.
80 mg PVP (MW 40000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PVP erhalten, die als Lösung B2 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B2 gegeben, während konstant bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PVP in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gefriertrockner gestellt. Die Lyophilisierung wird durch Einfrieren auf -30ºC bei Atmosphärendruck und anschließendes 24-stündiges Erwärmen auf -20ºC unter vermindertem Druck (0,015 mbar) erreicht. Wenn der Gefriertrocknungsprozeß beendet ist, wird ein weiches, weißes, schwammartiges Material erhalten.

BEISPIEL 15

Herstellung eines gefriergetrockneten Schwammes aus Hyaluronsäure (HS) und Polyacrylamid (PAAm)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von SOC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird; diese wird zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen.
80 mg PAAm (MW 5 · 10&sup6;) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PAAm erhalten, die als Lösung B3 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B3 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PAAm in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gefriertrockner gestellt. Die Lyophilisierung wird durch Einfrieren auf -30 C bei Atmosphärendruck und anschließendes 24-stündiges Erwärmen auf -20ºC unter vermindertem Druck (0,015 mbar) erreicht. Wenn der Gefriertrocknungsprozeß beendet ist, wird ein weiches, weißes, schwammartiges Material erhalten.

BEISPIEL 16

Herstellung eines gefriergetrockneten Schwammes aus Hyaluronsäure (HS) und Polyethylenoxid (PEO)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird; diese wird zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen.
80 mg PEO (MW 100000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. Es wird eine Lösung erhalten, die als Lösung B4 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B4 gegeben, während kontinuierlich bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PEO in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gefriertrockner gestellt. Die Lyophilisierung wird durch Einfrieren auf -30 C bei Atmosphärendruck und anschließendes 24-stündiges Erwärmen auf -20ºC unter vermindertem Druck (0,015 mbar) erreicht. Wenn der Gefriertrocknungsprozeß beendet ist, wird ein weiches, weißes, schwammartiges Material erhalten.

BEISPIEL 17

Herstellung eines gefriergetrockneten Schwammes aus Hyaluronsäure (HS) und Polyphosnhazenen, zum Beispiel Poly(methoxyethoxy)phosphazen (PF3)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird; diese wird zum Abkühlen auf Raumtemperatur stehengelassen.
80 mg PF3 (MW 15000) werden in 8 ml destilliertem Wasser gelöst, während bei einer Temperatur von 50ºC 12 Stunden geschüttelt wird. So wird eine 1%ige Lösung von PF3 erhalten, die als Lösung B5 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu Lösung B5 gegeben, während bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PF3 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen Gefriertrockner gestellt. Die Lyophilisierung wird durch Einfrieren auf -30ºC bei Atmosphärendruck und anschließendes 24-ständiges Erwärmen auf -20ºC unter vermindertem Druck (0,015 mbar) erreicht. Wenn der Gefriertrocknungsprozeß beendet ist, wird ein weiches, weißes, schwammartiges Material erhalten.

BEISPIEL 18

Herstellung eines Hydrogels aus Hyaluronsäure (HS) und Polyvinylalkohol (PVA)

20 mg HS (MW 155000) werden in 2 ml destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei einer Temperatur von 50ºC geschüttelt wird. Es wird eine 1%ige Lösung von HS erhalten, die als Lösung A bezeichnet wird.
320 mg PVA (MW 115000) werden in einen Kolben mit einem Rückflußkühler und einem Magnetrührer gegeben, der 8 ml destilliertes Wasser enthält. Der Kolben wird 5 Stunden in ein Ölbad mit einer Temperatur von 150ºC gegeben, während geschüttelt wird. Wenn der PVA vollständig gelöst ist, wird eine 4%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B6 bezeichnet wird; diese wird stehengelassen, um auf Raumtemperatur abzukühlen.
Lösung A wird langsam zu 2 ml von Lösung B6 gegeben, während konstant bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Die Lösung, die das Gemisch aus HS/PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die Lösung aus HS/PVA wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und 5 Gefrier-Auftau-Zyklen ausgesetzt. Jeder Zyklus besteht daraus, die Probe von Raumtemperatur auf -20ºC zu bringen, die Probe eine Stunde bei dieser Temperatur zu halten, sie durch Zurückbringen auf Raumtemperatur aufzutauen und den Kreislauf durch einstündiges Halten bei Raumtemperatur zu vervollständigen.
Im zweiten Zyklus hat die Lösung bereits ein gelartiges Aussehen und ihre Dichte nimmt mit nachfolgenden Zyklen zu. Am Ende des fünften Kreislaufs hat die Probe eine einheitliche, weiße gummiartige Beschaffenheit, und ihr Wassergehalt beträgt etwa 60%.
Die folgenden Beispiele erläutern die Herstellung von Filmen durch Verdampfen des Lösungsmittels aus Gemischen aus in Dimethylsulfoxid (DMSO) gelöster Hyaluronsäure (HS) und in DMSO löslichen Polymeren.

BEISPIEL 19

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyvinyla)kohol (PVA)

HS wird wie folgt in DMSO gelöst: 100 mg HS (MW 155000) werden in destilliertem Wasser gelöst, während 30 Minuten bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Das Wasser wird dann durch Zugabe des zweiten Lösungsmittels zu der Lösung und Erhitzen auf 90ºC, um das Wasser zu verdampfen, durch DMSO ersetzt. Weiteres DMSO wird zugegeben, um die Lösung auf ein Endvolumen von 10 ml zu bringen. So wird eine 1%ige Lösung von HS in DMSO erhalten, die in den Beispielen 19-24 als Lösung A bezeichnet wird.
100 mg PVA werden in DMSO gelöst, während bei einer Temperatur von 100ºC 1 Stunde geschüttelt wird, und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B bezeichnet wird. Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Schütteln bei einer Temperatur von 100ºC zu Lösung B gegeben. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HS/PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter, homogener Film erhalten.

BEISPIEL 20

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Claren L6, Solvay (C1 L6), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem geringen Ethylengehalt (29 mol%)

100 mg C1 L6 werden in DMSO gelöst, während 1 Stunde geschüttelt wird, und auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. Es wird eine 1%ige Lösung von C1 L6 erhalten, die als Lösung C bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Schütteln bei einer Temperatur von 70 C zu Lösung C gegeben. Die so erhaltene Lösung wird 1 Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HS/C1 L6 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 750 C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 21

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Claren P10, Solvay (C1 P10), Ethylen-Vinvlalkohol-Copolymer mit einem mittleren Ethylengehalt (36 mol%)

100 mg C1 P10 werden in DMSO gelöst, während eine Stunde bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird, und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 P10 erhalten, die als Lösung D bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC zu Lösung D gegeben. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HS/C1 P10 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 750 C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 22

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Claren R20, Solvay (C1 R20), Ethylen-Vinylalkohol-Copolymer mit einem hohen Ethylengehalt (40 mol%)

100 mg C1 R20 werden in DMSO gelöst, während eine Stunde bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird, und auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 R20 erhalten, die als Lösung E bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Schütteln bei einer Temperatur von 70 C zu Lösung E gegeben. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HS/C1 R20 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 23

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polyurethan (PU), Cardiomat 610, Conton

0,670 ml einer 15%igen Lösung von PU in Tetrahydrofuran : Dioxan, 1 : 1, werden in 8 ml DMSO gelöst, während eine Stunde bei einer Temperatur von 70 C geschüttelt wird. Wenn die Ausgangslösungsmittel verdampft sind, wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PU erhalten, die als Lösung F bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Rühren bei einer Temperatur von 70ºC zu Lösung F gegeben. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die HS/PU in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 24

Herstellung eines Films aus Hyaluronsäure (HS) und Polymilchsäure (PMS)

100 mg PMS werden in DMSO gelöst, während eine Stunde bei einer Temperatur von 85ºC geschüttelt wird, und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PMS erhalten, die als Lösung G bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam unter kontiniuerlichem Schütteln bei einer Temperatur von 85ºC zu Lösung G gegeben. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HS/PMS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

Verwendung von Hyaluronsäuresterderivaten in IPN

Das vorliegende IPN kann nicht nur unter Verwendung von Hyaluronsäure, sondern auch von Esterderivaten von Hyaluronsäure hergestellt werden. Die Herstellung solcher Ester ist im U. S.-Patent Nr. 4,851,521 beschrieben.
In der vorliegenden Erfindung verwendbare Esterderivate von Hyaluronsäure sind Ester von Hyaluronsäure mit aliphatischen, araliphatischen, cycloaliphatischen oder heterocyclischen Alkoholen, in denen alle (sogenannte "vollständige Ester") oder nur ein Teil (sogenannte "partielle Ester") der Carboxygruppen der Hyaluronsäure verestert sind, und Salze der partiellen Ester mit Metallen oder mit organischen Basen, bioverträglich oder verträglich von einem pharmakologischen Gesichtspunkt aus.
Die verwendbaren Ester schließen Ester ein, die sich von Alkoholen ableiten, die selbst eine ansehnliche pharmakologische Wirkung besitzen. Die gesättigten Alkohole der aliphatischen Reihe oder einfache Alkohole der cycloaliphatischen Reihe sind in der vorliegenden Erfindung verwendbar.
Bei den vorstehend genannten Estern, in denen einige der Cabonsäuregruppen frei bleiben (d. h. partielle Ester), können diese mit Metallen oder organischen Basen, wie Alkali- oder Erdalkalimetallen oder mit Ammoniak oder organischen Stickstoffbasen, Salze bilden.
Alkohole der aliphatischen Reihe, die als veresternde Komponenten der Carboxygruppen der Hyaluronsäure zur Verwendung im IPN nach der vorliegenden Erfindung verwendet werden, sind zum Beispiel solche mit einem Maximum von 14 Kohlenstoffatomen, die gesättigt oder ungesättigt sein können, und die gegebenenfalls auch mit anderen freien funktionellen oder funktionell modifizierten Gruppen, wie Amin-, Hydroxy-, Aldehyd-, Keton-, Mercaptan- oder Carbvxygruppen, oder mit von diesen abgeleiteten Gruppen substituiert sein können, wie Kohlenwasserstoff oder Dikohlenwasserstoffaminresten (der Begriff "Kohlenwasserstoff bezieht sich nicht nur auf monovalente Reste von Kohlenwasserstoffen, wie den CnH2n+1-Typ, sondern auch auf bivalente oder trivalente Reste, wie "Alkylene", CnH2n, oder "Alkylidene", CnH2n, Ether- oder Estergruppen, Acetal- oder Ketalgruppen, Thioether- oder Thioestergruppen und veresterte Carboxy- oder Carbamidgruppen und Carbamid, das mit einem oder mehreren Kohlenwasserstoffresten, mit Nitrilgruppen oder mit Halogenen substituiert ist. Von den vorstehend genannten Resten, die Kohlenwasserstoffreste enthalten, sind diese vorzugsweise niedere aliphatische Reste, wie Alkylreste, mit einem Maximum von 6 Kohlenstoffatomen. Solche Alkohole können auch in der Kohlenstoffatomkette durch Heteroatome, wie Sauerstoff-, Stickstoff und Schwefelatome, unterbrochen sein. Bevorzugt sind Alkohole, die mit einer oder zwei der funktionellen Gruppen substituiert sind.
Alkohole der vorstehend genannten Gruppe, die bevorzugt verwendet werden, sind solche mit einem Maximum von 14 und insbesondere 6 Kohlenstoffatomen, und in denen die Kohlenwasserstoffatome in den vorstehend genannten Amin-, Ether-, Ester-, Thioether-, Thioester-, Acetal- oder Ketalgruppen Alkylreste mit einem Maximum von 4 Kohlenstoffatomen darstellen und auch in den veresterten Carboxy- oder substituierten Carbamidgruppen sind die Kohlenwasserstoffreste Alkylreste mit derselben Anzahl von Kohlenstoffatomen, und in denen in den Amin- oder Carbamidgruppen Alkylenamin- oder Alkylencarbamidreste mit einem Maximum von 8 Kohlenstoffatomen sein können. Von diesen Alkoholen sind gesättigte und nicht substituierte Alkohole, wie Methyl-, Ethyl-, Propyl- und Isopropylalkohole, normal-Butylalkohol, Isobutylalkohol, tertiär-Butylalkohol, Amyl-, Pentyl-, Hexyl-, Octyl-, Nonyl- und Dodecylalkohole und solche mit einer linearen Kette, wie normal-Octyl- und Dodecylalkohol besonders bevorzugt. Von den substituierten Alkoholen dieser Gruppe sind die bivalenten Alkohole Ethylenglycol, Propylenglycol und Butylenglycol, die trivalenten Alkohole, wie Glycerin, die Aldehydalkohole, wie Tartronalkohol, die Carboxyalkohvle, wie Milchsäuren, zum Beispiel Glycolsäure, Äpfelsäure, die Weinsäuren, Zitronensäure, die Aminoalkohole, wie normal-Aninoethanol, Aminopropanol, normal-Aminobutanol und ihre in der Aminfunktion dimethylierten und diethylierten Derivate, Cholin, Pyrrolidinylethanol, Piperidinylethanol, Piperazinylethanol und die entsprechenden Derivate von normal-Propyl- oder normal-Butylalkohol, Monothioethylenglycol oder seine Alkylderivate, wie das Ethylderivat in der Mercaptanfunktion verwendbar.
Von den höheren gesättigten aliphatischen Alkoholen sind Cetylalkohol und Miricylalkohol bevorzugt, aber für das Ziel der vorliegenden Erfindung sind die höheren ungesättigten Alkohole mit einer oder zwei Doppelbindungen besonders wichtig, wie insbesondere solche, die in vielen essentiellen Ölen und mit Affinität zu Terpen enthalten sind, wie Citronellol, Geraniol, Nerol, Nerolidol, Linalool, Farnesol und Phytol. Von den ungesättigten niederen Alkoholen ist es nötig, Allylalkohol und Propargylalkohol zu berücksichtigen. Von den araliphatischen Alkoholen sind solche mit nur einem Benzolrest bevorzugt, und in denen die aliphatische Kette ein Maximum von 4 Kohlenstoffatomen hat, wo der Benzolrest mit zwischen 1 und 3 Methyl- oder Hydroxygruppen oder mit Halogenatomen, insbesondere mit Chlor, Brom und Iod substituiert sein kann, und in denen die aliphatische Kette mit einer oder mehreren Funktionsgruppen, ausgewählt aus der Gruppe, die freie oder mono- oder dimethylierte Amingruppen enthält, oder mit Pyrrolidin oder Piperidingruppen substituiert sein kann. Von diesen Alkoholen sind Benzylalkohol und Ethylalkohol am stärksten bevorzugt.
Die Alkohole der cycloaliphatischen oder aliphatisch-cycloaliphatischen Reihe können von mono- oder polycyclischen Kohlenwasserstoffen abstammen, können vorzugsweise ein Maximum von 14 Kohlenstoffatomen haben, können unsubstituiert sein, und können einen oder mehrere Substituenten enthalten, wie jene, die vorstehend für die aliphatischen Alkohole genannt wurden. Von den Alkoholen, die sich von cyclischen monoannularen Kohlenwasserstoffen ableiten, sind solche bevorzugt mit einem Maximum von 12 Kohlenstoffatomen, die Ringe mit vorzugsweise zwischen 5 und 7 Kohlenstoffatomen, die substituiert sein können, zum Beispiel mit zwischen einem und drei niederen Alkylresten, wie Methyl-, Ethyl-, Propyl- oder Isopropylgruppen. Als spezielle Alkohole dieser Gruppe sind die folgenden am stärksten bevorzugt: Cyclohexanol, Cyclohexandiol, 1,2,3- Cyclohexantriol und 1,3,5-Cyclohexantriol (Phloroglucitol), Inositol und die Alkohole, die sich von p-Menthan ableiten, wie Carvomenthol, Menthol und α-γ-Terpineol, 1-Terpineol, 4-Terpineol und Piperitol oder das Gemisch aus diesen Alkoholen, bekannt als "Terpineol", 1,4- und 1, 8-Terpin. Von den Alkoholen, die sich von Kohlenwasserstoffen mit kondensierten Ringen ableiten, wie solche von Thujan, Pinan oder Camphan, sind die folgenden bevorzugt: Thujanol, Sabinol, Pinolhydrat, D- und L-Borneol und D- und L- Isoborneol.
Aliphatisch-cycloaliphatische polycyclische Alkohole, die für die Ester der vorliegenden Erfindung verwendet werden, schließen Stervle, Cholsäuren und Steroide, wie Sexualhormone und ihre synthetischen Analoga, insbesondere Corticosteroide und ihre Derivate, ein. Es ist deshalb möglich, Cholesterol, Dihydrocholesterol, Epidihydrocholestervl, Coprostanol, Epicoprostanvl, Sitvsterol, Stigmasterol, Ergosterol, Cholsäure, Desoxycholsäure, Lithocholsäure, Oestriol, Oestradivl, Equilenin, Equilin und ihre Alkylatderivate, ebenso wie ihre Ethinyl- oder Propinylderivate in 17-Stellung, wie 17α-Ethinyloestradiol oder 7α-Methyl-17α-ethinyloestradiol, Pregnenolon, Pregnandiol, - Testosteron und dessen Derivate, wie 17α-Methyltestosteron, 1,2-Dehydrotestosteron und 17α-Methyl-1,2-dehydrvtestosteron, die Alkinylatderivate in 17-Stellung von Testosteron und 1,2-Dehydrotestosteron, wie 17α-Ethinyltestosteron, 17α-Propinyltestosteron, Norgestrel, Hydroxyprogesteron, Corticosteron, Desoxycorticosteron, 19-Nortestosteron, 19-Nor-17α-methyltestosteron und 19-Nor-17α-Ethinyltestosteron, Antihormone, wie Cyproteron, Cortison, Hydrocortison, Prednison, Prednisolon, Fluorcortison, Dexamethason, Betamethason, Paramethason, Flumethason, Fluocinolon, Fluprednyliden, Clobetasol, Beclomethason, Aldosteron, Desoxycorticosteron, Alfaxolon, Alfadolon und Bolasteron zu verwenden. Als veresternde Komponenten für die Ester der vorliegenden Erfindung sind die folgenden verwendbar: Genine (Aglycone) der cardioaktiven Glucoside, wie Digitoxigenin, Gitoxigenin, Digoxigenin, Strophanthidin, Tigogenin und Saponine.
Andere Alkohole, die nach der vorliegenden Erfindung zu verwenden sind, sind die Vitaminalkohole, wie Axerophthol, Vitamine D2 und D3, Aneurin, Lactoflavin, Ascorbinsäure, Riboflavin, Thiamin und Pantothensäure.
Von den heterocyclischen Säuren können die folgenden als Derivate der vorstehend genannten cycloaliphatischen oder aliphatisch-cycloaliphatischen Alkohole betrachtet werden, wenn ihre linearen oder cyclischen Ketten durch ein oder mehrere, zum Beispiel von zwischen eins und drei Heteroatomen, zum Beispiel aus der Gruppe -O-, -S-, -N und - NH-, unterbrochen sind, und in diesen können eine oder mehrere ungesättigte Bindungen, zum Beispiel Doppelbindungen, insbesondere zwischen 1 und 3, vorhanden sein, und so auch heterocyclische Verbindungen mit aromatischen Strukturen einschließen. Als Beispiel sollten die folgenden genannt werden: Furfurylalkohol, Alkaloide und Derivate wie Atropin, Scopolamin, Cinchonin, 1a Cinchonidin, Chinin, Morphin, Codein, Nalorphin, N- Butylscopolammoniumbromid, Ajmalin; Phenylethylamine wie Ephedrin, Isoproterenol, Epinephrin; Phenothiazinarzneimittel, wie Perphenazin, Pipothiazin, Carphenazin, Homofenazin, Acetophenazin, Fluophenazin und N-Hydroxyethylpromethazinchlorid; Thioxanthenarzneistoffe, wie Fluphenthixol und Clophenthixol; krampflösende Mittel, wie Meprophendiol; Antiphsychotika, wie Opipramol; Antiemetika, wie Oxypendyl; Analgetika, wie Carbetitin und Phenoperidin und Methadol; Hypnotika, wie Etodroxizin; Anorexika, wie Benzidrol und Diphemethoxidin; schwächere Beruhigungsmittel, wie Hydroxyzin; Muskelrelaxantien, wie Cinnamedrin, Diphyllin, Mephenesin, Methocarbamol, Chlorphenesin, 2,2-Diethyl-1,3-propandiol, Guaifenesin, Hydrocilamid; Koronargefäßdilatator, wie Dipyridamol und Oxyfedrin; adrenerge Blocker, wie Propanolol, Timolol, Pindolol, Bupranolol, Atenolol, Metoprolol, Practolol; Antineoplastika, wie 6-Azauridin, Cytarabin, Floxuridin; Antibiotika, wie Chloramphenicol, Thiamphenicol, Erythromycin, Oleandomycin und Lincomycin; Antivirusmittel, wie IdOxuridin; Periphärgefißdilatator, wie Isonicotinylalkohol; Carboanhydraseinhibitoren, wie Sulocarbilat; Antiasthmatika und entzündungshemmende Mittel, wie Tiaramid; und Sulfonamide, wie 2-p-Sulfanilonoethanol.
In einigen Fällen können Hyaluronsäureester von Interesse sein, wo die Esterreste von zwei oder mehr therapeutisch wirksamen Hydroxysubstanzen abgeleitet sind, und natürlich können alle möglichen Varianten verwendet werden. Besonders interessant sind die Substanzen, in denen zwei Arten von verschiedenen Esterresten, die sich von Arzneistoffen mit einem hydroxylischen Charakter ableiten, vorhanden sind, und in denen die verbleibenden Carboxyreste frei sind, mit Metallen oder mit einer Base Salze bilden, wobei gegebenenfalls auch die Basen selbst therapeutisch wirksam sind, zum Beispiel mit der gleichen oder ähnlicher Wirkung wie die der veresternden Komponente. Es ist insbesondere möglich, Hyaluronsäureester zu verwenden, die einerseits von einem entzündungshemmenden Steroid abgeleitet sind, wie einem von den vorstehend erwähnten, und andererseits von einem Vitamin, von einem Alkaloid oder von einem Antibiotikum, wie eines von den aufgelisteten.

BEISPIEL 25

Verfahren zur Herstellung der Hyaluronsäureester der vorliegenden Erfindung

Verfahren A:

Die Ester von Hyaluronsäure können mit per se bekannten Verfahren zur Veresterung von Carbonsäuren, zum Beispiel durch Behandlung von freier Hyaluronsäure mit den gewünschten Alkoholen in Gegenwart von katalysierenden Substanzen, wie starken anorganischen Säuren oder Ionenaustauschern vom sauren Typ oder mit einem verethernden Mittel, das den gewünschten alkoholischen Rest in Gegenwart von anorganischen oder organischen Basen einführen kann, hergestellt werden. Es ist möglich, als Veresterungsmittel die in der Literatur bekannten zu verwenden, wie insbesondere die Ester von verschiedenen anorganischen Säuren oder von organischen Sulfonsäuren, wie Hydracide, das sind Kohlenwasserstoffhalogenide, wie Methyl- oder Ethyliodid, oder neutrale Sulfate oder Kohlenwasserstoffsäuren, Alfite, Carbonate, Silikate, Phosphite oder Kohlenwasserstoffsulfonate, wie Methylbenzol- oder p-Toluolsulfonat oder Methyl- oder Ethylchlorsulfonat. Die Reaktion kann in einem geeigneten Lösungsmittel stattfinden, zum Beispiel einem Alkohol, vorzugsweise dem, der dem Alkylrest entspricht, der in den Carboxyrest eingefuhrt werden soll. Aber die Reaktion kann auch in unpolaren Lösungsmitteln, wie Ketonen, Ethern, wie Dioxan, oder aprotischen Lösungsmitteln, wie Dimethylsulfoxid, stattfinden. Es ist möglich, als Base zum Beispiel ein Hydrat von einem Alkali- oder Erdalkalimetall oder Magnesium oder Silberoxid oder ein basisches Salz eines dieser Metalle, wie ein Carbonat und von den organischen Basen eine tertiäre Stickstoftbase, wie Pyridin oder Collidin, zu verwenden. Anstelle der Base ist es auch möglich, einen Ionenaustauscher vom basischen Typ zu verwenden.
Ein weiteres Veresterungsverfahren verwendet die Metallsalze oder Salze mit organischen Stickstoffbasen, zum Beispiel Ammonium- oder Ammoniumsubstitutionssalze. Es werden vorzugsweise die Salze von Alkali- oder Erdalkalimetallen verwendet, aber auch jedes andere metallische Salz kann verwendet werden. Die Veresterungsmittel sind in diesem Fall ebenfalls die vorstehend genannten und das gleiche trifft auf die Lösungsmittel zu. Es ist bevorzugt, aprotische Lösungsmittel zu verwenden, zum Beispiel Dimethylsulfoxid oder Dimethylformamid.
In den nach diesem Verfahren oder nach dem anderen nachfolgend beschriebenen Verfahren erhaltenen Estern können freie Carboxygruppen der partiellen Ester, falls gewünscht, auf eine per se bekannte Weise in Salze überführt werden.

Verfahren B:

Die Hyaluronsäureester können auch durch ein Verfahren hergestellt werden, das aus der Umsetzung eines quartären Ammoniumsalzes von Hyaluronsäure mit einem Veretherungsmittel, vorzugsweise in einem aprotischen, organischen Lösungsmittel besteht.
Als organische Lösungsmittel ist es bevorzugt, aprotische Lösungsmittel, wie Dialkylsulfoxide, Dialkylcarboxamide, wie insbesondere Niederalkyl-Dialkylsulphoxide, insbesondere Dimethylsulfoxid, und Niederalkyl-Dialkylamide von niederen aliphatischen Säuren, wie Dimethyl- oder Diethylformamid oder Dimethyl- oder Diethylacetamid, zu verwenden.
Andere Lösungsmittel, die nicht immer aprotisch sind, sind zu berücksichtigen, wie Alkohole, Ether, Ketone, Ester, insbesondere aliphatische oder heterocyclische Alkohole und Ketone mit einem geringeren Siedepunkt, wie Hexafluorisopropanol, Trifluorethanol und N-Methylpyrrolidon.
Die Reaktion wird vorzugsweise in einem Temperaturbereich von zwischen etwa 0ºC und 100ºC, insbesondere zwischen etwa 25ºC und 75ºC, zum Beispiel bei etwa 30ºC, durchgeführt.
Die Veresterung wird vorzugsweise durch schrittweise Zugabe des Veresterungsmittels zum vorstehend genannten Ammoniumsalz zu einem der vorstehend genannten Lösungsmittel, zum Beispiel zu Dimethylsulfoxid, durchgeführt.
Als Alkylierungsmittel ist es möglich, die vorstehend genannten, insbesondere die Kohlenwasserstoftbalogenide, zum Beispiel Alkylhalogenide, zu verwenden. Als quartäre Ausgangsammoniumsalze ist es bevorzugt, die niederen Ammoniumtetraalkylate mit Alkylresten vorzugsweise zwischen 1 und 6 Kohlenstoffatomen zu verwenden. Meistens wird das Hyaluronat von Tetrabutylammonium verwendet. Es ist möglich, diese quartären Ammoniumsalze durch Umsetzen eines Metallsalzes von Hyaluronsäure, vorzugsweise eines der vorstehend genannten, insbesondere das Natrium- oder Kaliumsalz, in wäßriger Lösung mit einem mit einer quartären Ammoniumbase salzbildenden Sulfonharz herzustellen.
Eine Variante des vorstehend beschriebenen Verfahrens besteht im Umsetzen eines Kalium- oder Natriumsalzes von Hyaluronsäure, suspendiert in einer geeigneten Lösung, wie Dimethylsulfoxid, mit einem geeigneten Alkylierungsmittel in Gegenwart von katalytischen Mengen eines quartären Ammoniumsalzes, wie dem Iodid von Tetrabutylammonium.
In den partiellen Estern der Erfindung können die nicht veresterten Carboxygruppen frei gehalten werden oder als Salze vorliegen. Zur Erzeugung solcher Salze werden die Basen nach dem Kriterium für diese gewählt, für die das Produkt gedacht ist. Es ist möglich, anorganische Salze, abgeleitet von Alkalimetallen, wie Kalium und insbesondere Natrium und Ammonium, oder abgeleitet von Erdalkalimetallen, wie Calcium oder Magnesium, oder Aluminiumsalze zu erzeugen.
Besonders interessant sind die Salze mit organischen Basen, insbesondere Stickstoftbasen und daher aliphatischen, arylaliphatischen, cycloaliphatischen oder heterocyclischen Aminen.
Diese Ammoniumsalze können sich von therapeutisch verträglichen, aber unwirksamen Aminen oder von Aminen mit therapeutischer Wirkung ableiten. Von den ersteren sollten vor allem die aliphatischen Amine, wie Mono-, Di- und Trialkylamine mit Alkylresten mit einem Maximum von 18 Kohlenstoffatomen oder Arylalkylamine mit der gleichen Zahl von Kohlenstoffatomen im aliphatischen Teil und wo Aryl einen gegebenenfalls mit 1 und 3 Methylgruppen oder Halogenatomen oder Hydroxygruppen substituierten Benzolrest bedeutet, berücksichtigt werden. Die biologisch unwirksamen Basen zur Erzeugung von Salzen können auch cyclisch sein, wie monocyclische Alkylenamine mit Ringen zwischen 4 und 6 Kohlenstoffatomen, gegebenenfalls im Ring durch Heteroatome aus der Gruppe, die aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel gebildet wird, unterbrochen, wie Piperidin oder Morpholin, und können zum Beispiel durch Amin- oder Hydroxyfunktionen substituiert sein, wie Aminoethanol, Ethylendiamin, Ephedrin oder Cholin.
Es ist auch möglich, die quartären Ammoniumsalze der partiellen Ester zu erzeugen, zum Beispiel die Tetraalkylammoniumsalze mit der vorstehend genannten Zahl an Kohlenstoffatomen und vorzugsweise Salze von solch einem Typ, in dem der vierte Alkylrest zwischen 1 und 4 Kohlenstoffatomen besitzt, zum Beispiel eine Methylgruppe.
Zu den biologisch wirksamen Aminen, deren therapeutische Wirkungen zur Anwendung kommen können, gehören alle Stickstoff und basischen Arzneistoffe, wie die in den folgenden Gruppen eingeschlossenen: Alkaloide, Peptide, Phenothiazine, Benzodiazepine, Thioxanthene, Hormone, Vitamine, Antikrampfmittel, Antipsychotika, Antiemetika, Anaestethika, Hypnotika, Anorexika, Tranquilizer, Muskelrelaxantien, Koronargefäßdilatatoren Antineoplastika, Antibiotika, antibakterielle Mittel, Antivirusmittel, Antimalariamittel, Carboanhydraseinhibitoren, nicht-steroide entzündungshemmende Mittel, Vasokonstriktoren, cholinerge Agonisten, cholinerge Antagonisten, adrenerge Agonisten, adrenerge Antagonisten und narkotische Antagonisten.
Alle diese in der Erfindung aufgeführten und die Verwendung der Ester betreffenden Arzneistoffe mit basischen Stickstoffgruppen können als Beispiele angesehen werden.
Nach einem speziellen Aspekt der vorliegenden Erfindung können die Hyaluronsäureester und ihre Salze als ein ausgezeichnetes Transportmittel für therapeutisch wirksame Substanzen verwendet werden. Dazu ist es möglich, die vollständigen Ester oder die partiellen Ester der salzbildenden partiellen Ester in den verbleibenden Carboxygruppen, zum Beispiel mit einer der vorstehend genannten therapeutisch verträglichen, aber nicht biologisch wirksamen Substanzen, vor allem mit Alkalimetallen, zum Beispiel Natrium, zu verwenden. Diese sind die vorstehend genannten Medikamente, die durch Zusammenschluß von zwei Komponenten hergestellt werden:
Komponente (1) - eine pharmakologisch wirksame Substanz oder ein Zusammenschluß von zwei oder mehr aktiven Substanzen; und
Komponente (2) - ein Transportmittel, das einen partiellen oder vollständigen Ester von Hyaluronsäure mit einem Alkohol oder die Salze solcher partieller Ester mit einer organischen oder anorganischen Base, gegebenenfalls unter Zusatz von Hyaluronsäure oder einem Salz davon mit einer anorganischen oder organischen Base umfaßt.
Die in diesen Medikamenten zu verwendenden Hyaluronsäureester sind vor allem solche, in denen der veresternde Alkohol nicht pharmakologisch wirksam ist, zum Beispiel ein einfacher aliphatischer Alkohol, wie vorstehend beschrieben. Medikamente dieses Typs, in denen der Ester ebenfalls pharmakologisch wirksam ist, zum Beispiel ein einfacher aliphatischer Alkohol, wie vorstehend beschrieben. Medikamente dieses Typs, in denen der Ester ebenfalls pharmakologisch wirksam ist, wie zum Beispiel im Fall einer der vorstehend beschriebenen Ester, die sich von Alkoholen mit pharmakologischer Wirkung ableiten, sind nicht von diesem Aspekt der Erfindung ausgeschlossen.
Auf die gleiche Weise schließt die Erfindung auch Medikamente dieses Typs ein, in denen die Ester der Komponente (2) auch mit therapeutisch wirksamen Basen Salze bilden. Diese Basen können dieselben pharmakologisch wirksamen Substanzen sein, die in dem Hyaluronsäureester transportiert werden, und das Gemisch enthält deshalb in diesem Fall, wie nachstehend beschrieben, Salze eines partiellen Esters von Hyaluronsäure mit therapeutisch wirksamen Basen, gegebenenfalls in Gegenwart eines Überschusses der wirksamen Basenkomponente (1). Der Fall kann sich andererseits so darstellen, daß die tranportierte Substanz nicht basisch ist und freie Carboxygruppen im Hyaluronsäureester noch mit therapeutisch wirksamen Basen Salze bilden.
Die Verwendung von Hyaluronsäureestern als ein Transportmittel ermöglicht deshalb die Herstellung der vorstehend beschriebenen Medikamente, einschließlich (1) einer pharmakologisch wirksamen Substanz oder eines Zusammenschlusses von zwei oder mehr von solchen Substanzen und (2) eines wie vorstehend beschriebenen Hyaluronsäureesters oder eines seiner Salze. In solchen Medikamenten wird die mögliche Salzbildung der verbleibenden Carboxygruppen vorzugsweise mit therapeutisch neutralen anorganischen oder organischen Basen, insbesondere mit Alkalimetallen, wie Natrium oder Ammonium durchgeführt, wenn partielle Ester von HS verwendet werden. Sollte die wirksame Substanzkomponente (1) oder ein entsprechender Zusammenschluß von Substanzen basische Gruppen besitzen, wie zum Beispiel Antibiotika, die Amingruppen enthalten, und wenn partielle Ester von Hyaluronsäure mit verbleibenden freien Carboxygruppen verwendet werden sollten, werden die entsprechenden Salze zwischen den Carboxygruppen und diesen basischen Substanzen erzeugt. Die neuen Medikamente schließen deshalb insbesondere partielle Ester von Hyaluronsäure ein, die partiell oder vollständig mit pharmakologisch wirksamen Substanzen Salze bilden und einen basischen Charakter haben. Wie vorstehend beschrieben sind die zusammengefügten Medikamente vom hier beschriebenen Typ, in dem Komponente (1) eine pharmakologisch wirksame Substanz zur topischen Anwendung ist, besonders wichtig.
Die Verwendung von Hyaluronsäureestern als Transportmittel für Arzneimittel, die topisch angewendet werden, ist in der Augenheilkunde besonders nützlich, wo eine besondere Verträglichkeit für die Produkte mit dem cornealen Epithel und daher eine ausgezeichnete Verträglichkeit ohne irgendwelche Sensibilisierungseffekte vorliegen muß. Außerdem ist es möglich, homogene und stabile Filme, die vollkommen transparent sind und auf dem cornealen Epithel haften, zu erreichen, wenn die Medikamente in Form von konzentrierten Lösungen mit elastisch-viskosen Eigenschaften verabreicht werden, um so eine verlängerte Bioverfügbarkeit des Arzneimittels zu garantieren und deshalb ausgezeichnete Präparate mit einem Verzögerungseffekt darzustellen.
Solche augenheilkundlichen Medikamente sind in der Veterinärmedizin besonders wertvoll, wenn man zum Beispiel bedenkt, daß es zur Zeit keine veterinären Spezialitäten für augenärztliche Anwendung gibt, die chemotherapeutische Mittel enthalten. In der Tat werden normalerweise Präparate für die Anwendung beim Menschen verwendet, und diese garantieren nicht immer einen speziellen Wirkungsbereich, oder sie ermöglichen die speziellen Bedingungen nicht, unter denen die Behandlung stattfinden muß.
Dies ist zum Beispiel bei der Therapie für infektiöse Keratokonjunktivitis, Rot-Auge oder IBK der Fall, einer Infektion, die normalerweise Rinder, Schafe und Ziegen befällt. Wahrscheinlich existieren für die drei Arten spezielle etiologische Faktoren und spezieller: bei Rindern scheinen die beteiligten Hauptmikroorganismen Moraxella bovis zu sein (auch wenn andere Mittel mit viralem Ursprung nicht ausgeschlossen werden sollten, wie zum Beispiel Rinotracheitis virus, bei Schafen Micoplasma, Rickettsiae und Chlamydiae, und bei Ziegen Rickettsiae). Diese Krankheit zeigt sich in akuter Form und neigt dazu, sich schnell zu verbreiten: in den Anfangsstadien ist die Symtomatologie gekennzeichnet durch Blepharospasmus und exessive Lachrymation mit anschließendem eitrigem Ausfluß, Konjunktivitis und Keratitis, oft begleitet von Fieber, Appetitlosigkeit und Nachlassen der Milchproduktion. Besonders ernst sind die cornealen Verletzungen, die in den Endstadien sogar eine Perforierung der Cornea selbst verursachen können. Das klinische Fortschreiten der Krankheit varriert von einigen Tagen bis zu mehreren Wochen.
Eine breite Auswahl an chemotherapeutischen Mitteln werden zur Behandlung verwendet, sowohl topisch (oft in Verbindung mit entzündungshemmenden Steroidmitteln) als auch systemisch verabreicht, einschließend: Tetracycline, wie Oxytetracyclin, Penicilline, wie Cloxacillin und Benzylpenicillin, Sulfonamide, Polymyxin B (in Verbindung mit Miconazol und Prednisolon), Chloramphenicol, Tylosin und Chloromycetin. Die topische Behandlung der Krankheit ist trotz ihrer scheinbaren Einfachheit immer noch ein ungelöstes Problem, da es mit den bisher verwendeten augenheilkundlichen Präparaten aus diesem oder jenem Grund nicht möglich gewesen ist, therapeutisch wirksame Konzentrationen von Antibiotika oder Sulfamiden in der lachrymalen Sekretion zu erhalten. Dies ist im Fall von Lösungen recht verständlich, wenn man die hauptsächlich geneigte Position des Kopfes bei diesen Tieren betrachtet, aber das gleiche trifft auch auf halbfeste Medikamente zu, da die üblicherweise verwendeten Excipienten nicht die nötigen Qualitäten der Haftung an der cornealen Oberfläche besitzen, da sie üblicherweise nicht eine genügend hohe Konzentration an Wirksubstanz haben und keine perfekte Verteilung derselben erreichen können (d. h. es liegt ein Verteilungsgradient vor). Diese Mängel von herkömmlichen Colliriums bei der augenheilkundlichen Verwendung sind zum Beispiel von Slatter et al., Austr. Vet. J. 59 (3) (1982), 69-72 beschrieben worden.
Mit den Estern der vorliegenden Erfindung können diese Schwierigkeiten überwunden werden. Die Gegenwart des Hyaluronsäureesters als ein Transportmittel für augenheilkundliche Arzneimittel erlaubt tatsächlich die Formulierung von ausgezeichneten Präparaten ohne Konzentrationsgradient der Wirksubstanz, und sie sind deshalb völlig homogen, mit vollständiger Transparenz und ausgezeichneter Haftfähigkeit am cornealen Epithel, ohne Sensibilisierungseffekte, mit ausgezeichnetem Transport der Wirksubstanz und gegebenenfalls einem Verzögerungseffekt.
Die vorstehend genannten Eigenschaften der Medikamente können natürlich auch auf anderen Gebieten als der Augenheilkunde ausgenützt werden. Sie können in der Dermatologie und bei Krankheiten der Schleimhäute, zum Beispiel im Mund, verwendet werden. Außerdem können sie verwendet werden, um eine systemische Wirkung zu erzielen, wegen des Effekts der transkutanen Absorption, wie in Suppositorien. Alle diese Anwendungen sind sowohl in der Human- als auch in der Veterinärmedizin möglich. In der Humanmedizin sind die neuen Medikamente insbesondere zur Verwendung in der Kinderheilkunde geeignet. Die vorliegende Erfindung schließt deshalb insbesondere jede dieser therapeutischen Anwendungen ein.
Zum Zweck der Kürze ist von jetzt an, wenn die Wirksubstanz von Komponente (1) gemäß der Erfindung erwähnt wird, es so zu verstehen, daß die Assoziation mit einer oder mehr Wirksubstanzen ebenfalls eingeschlossen ist.
Die vorstehend beschriebene Komponente (1) kann zuerst in Bezug auf ihre Verwendung auf den verschiedenen Gebieten der Therapie definiert werden, beginnend mit der Unterscheidung zwischen Human- und Veterinärmedizin und dann die verschiedenen Sektoren der Anwendung im Bezug auf die zu behandelnden Organe oder Gewebe spezifizierend, wie mit Bezug auf topische Anwendung, Augenheilkunde, Dermatologie, Otorhinolaryngologie, Gynäkologie, Angiologie, Neurologie oder jede Art von Pathologie von inneren Organen, die durch topische Anwendungen behandelt werden können, zum Beispiel mit rektalen Anwendungen.
Die Transportwirkung der Hyaluronsäureester gilt auch für zusammengefügte Medikamente vom vorstehend genannten Typ, in denen die Wirksubstanz nicht nur topisch oder durch nasale oder rektale Absorption wirkt, zum Beispiel durch Nasensprays oder Präparate zur Inhalation für die Mundhöhle oder den Rachen, sondern auch auf dem oralen oder parenteralen Weg, zum Beispiel dem intramuskulären, subkutanen oder intravenösen Weg, da sie die Absorption des Arzneimittels in die Anwendungsstelle begünstigt. Die Medikamente können deshalb neben den schon genannten Gebieten auf praktisch allen Sektoren der Medizin, wie der inneren Medizin, zum Beispiel in der Pathologie des Herzgefäßsystems, bei Infektionen des Atmungssystems, des Verdauungssystems, des Nierensystems, bei Krankheiten endokrinologischer Natur, in der Onkologie, in der Psychatrie etc. angewendet werden und können deshalb auch nach ihrer speziellen Wirkung klassifiziert werden, wobei sie villeicht Anaesthetika, Analgetika, Entzündungshemmer, Wundheilungsmittel, antimikrobielle Mittel, adrenerge Agonisten und Antagonisten, Cytostatika, Antirheumatika, Antihypertensiva, Diuretika, Sexualhormone, Immunostimulantien und Immunosuppressiva sind, zum Beispiel eines der Arzneimittel mit der schon beschriebenen Wirkung für die therapeutisch wirksamen Alkohole, die als Veresterungskomponente verwendet werden, oder für die therapeutisch wirksamen Basen, die zur Salzbildung mit den freien Carboxygruppen verwendet werden.
Komponente (1) der vorstehend genannten Medikamente kann erfindungsgemäß auch ein Zusammenschluß von zwei oder mehr Wirksubstanzen sein, wie in vielen bekannten Medikamenten enthalten.
Betrachtet man das Gebiet der Augenheilkunde, können die Indikationen zum Beispiel sein: die miotischen, entzündungshemmenden, wundheilenden und antimikrobiellen Wirkungen.
Beispiele für pharmakologisch wirksame Substanzen, die in erfindungsgemäßen augenheilkundlichen Medikamenten verwendet werden, sind: basische und nichtbasische Antibiotika, wie Aminoglycoside, Makrolide, Tetracycline und Peptide, wie Gentamycin, Neomycin, Streptomycin, Dihydrostreptomycin, Kanamycin, Amikacin, Tobramycin, Spectinomycin, Erythromycin, Oleandomycin, Carbomycin, Spiramycin, Oxytetracyclin, Rolitetracyclin, Bacitracin, Polymyxin B, Gramicidin, Colistin, Chloramphenicol, Lincomycin, Vancomycin, Novobiocin, Ristocetin, Clindamycin, Amphotericin B, Griseofulvin, Nystatin, und gegebenenfalls ihre Salze, wie Sulfate oder Nitrate, oder Zusammenschlüsse derselben untereinander oder mit anderen Wirkstoffen, wie den nachstehend genannten.
Andere augenheilkundliche Arzneimittel, die erfindungsgemäß vorteilhaft zu verwenden sind, sind: andere Antiinfektionsmittel, wie Diethylcarbamazin, Mebendazol, Sulfamedica, wie Sulfacetamid, Sulfadiazin, Sulfisoxazol, Antivirusmittel und Antitumormittel, wie Ioddesoxyuridin, Adeninarabinosid, Trifluorthymidin, Acyclovir, Ethyldesoxyuridin, Bromvinyldesoxyuridin, 5-Iod-5'-amino-2',5'-didesoxyuridin, steroidale Entzündungshemmer, wie Dexamethason, Hydrocortison, Prednisolon, Fluorometholon, Medryson und gegebenenfalls ihre Ester, zum Beispiel Phosphorsäure; nicht-steroidale Entziindungshemmer, wie Indomethacin, Oxyphenbutazon, Flurbiprofen; Wundheilungsmittel, der epidermale Wachstumsfaktor, EGF; Lokalanaesthetika, wie Benoxinat, Proparacain und gegebenenfalls ihre Salze; cholinerge Agonisten, wie Pilocarpin, Methcholin, Carbamylcholin, Aceclidin, Physostigmin, Neostigmin, Demecarium und gegebenenfalls ihre Salze; cholinerge Antagonist-Arzneistoffe, wie Atropin und ihre Salze; adrenerge Agonist-Arzneistoffe, wie Noradrenalin, Adrenalin, Naphazolin, Methoxamin und gegebenenfalls ihre Salze; adrenerge Antagonist-Arzneistoffe, wie Propanolol, Timolol, Pindolol, Bupranolol, Atenolol, Metoprolol, Oxprenolol, Practolol, Butoxamin, Sotalol, Butathrin, Labetolol und gegebenenfalls ihre Salze.
Beispiele für Wirksubstanzen, die allein oder in Zusammenschluß untereinander oder mit anderen wirksamen Bestandteilen in der Dermatologie zu verwenden sind, sind: therapeutische Mittel, wie Antiinfektionsmittel, Antibiotika, antimikrobielle Mittel, entzündungshemmende, cytostatische, cytotoxische, andvirale, anaesthetische Mittel und prophylaktische Mittel, wie Sonnenfilter, Deodorants, antiseptische Mittel und Desinfektionsmittel. Von den Antibiotika sind besonders wichtig: Erythromycin, Bacitracin, Gentamicin, Neomycin, Aureomicin, Gramicidin und ihre Zusammenschlüsse; von den antibakteriellen und Desinfektionsmitteln: Nitroflurzon, Mafernd, Chlorhexidin und Derivate von 8-Hydroxychinolin und gegebenenfalls ihre Salze; von den entzündungshemmenden Mitteln vor allem die Corticosteroide, wie Prednisolon, Dexamethason, Flumethason, Clobetasol, Triamcinolonacetonid, Betamethason und ihre Ester, wie Valerate, Benzoate, Dipropionate; von der cytotoxischen Gruppe: Fluoruracil, Methotrexat, Podophyllin; von den Anaestethika: Dibucain, Lidocain und Benzocain.
Diese Liste enthält natürlich nur einige Beispiele und jedes andere in der Literatur beschriebene Mittel kann verwendet werden.
Als Zusammenschlüsse von Arzneimitteln, die in der Dermatologie zu verwenden sind, sollten die verschiedenen Antibiotika, wie Erythromycin, Gentamycin, Neomycin, Gramicidin, Polymyxin B, untereinander oder Zusammenschlüsse von diesen Antibiotika mit entzündungshemmenden Mitteln, zum Beispiel Corticosteroiden, zum Beispiel Hydrocortison + Neomycin, Hydrocortison + Neomycin + Polymyxin B + Gramicidin, Dexamethason + Neomycin, Fluorometholon + Neomycin, Prednisolon + Neomycin, Triamcinolon + Neomycin + Gramicidin + Nystatin, oder jeder andere Zusammenschluß, der in herkömmlichen Präparaten in der Dermatologie verwendet wird, genannt werden. Die Zusammenschlüsse von verschiedenen Wirksubstanzen sind natürlich nicht auf dieses Gebiet beschränkt, sondern auf jedem der vorstehend genannten Gebiete der Medizin ist es möglich, Zusammenschlüsse zu verwenden, die ähnlich denen sind, die schon bei den auf dem Fachgbiet bekannten pharmazeutischen Präparaten in Verwendung sind.
Im vorstehenden Fall der Verwendung einer Komponente (1) mit basischem Charakter können die Salze, die mit einem partiellen Hyaluronsäureester (da der leztere im Überschuß verwendet wird) erzeugt werden, von verschiedener Art sein, das heißt, alle oder nur ein Teil der verbleibenden Carboxygruppen können Salze bilden und dadurch Ester-saure Salze oder Ester-neutrale Salze herzustellen. Die Anzahl an Säuregruppen, die freigehalten werden müssen, kann für die Herstellung von Medikamenten mit einem speziellen pH-Wert von Wichtigkeit sein. Umgekehrt ist es möglich, einen Überschuß an basischer Komponente (1) zu verwenden, wodurch alle im Hyaluronsäureester verfügbaren Carboxygruppen mit der Base ein Salz bilden.
Nach einem speziellen Aspekt der Erfindung ist es möglich, die Medikamente dieses Typs ausgehend von vorher isolierten und gegebenenfalls gereinigten Salzen in ihrem festen, wasserfreien Zustand, als amorphe Pulver herzustellen, die bei Kontakt mit dem zu behandelnden Gewebe eine wäßrige Lösung erzeugen, gekennzeichnet durch Viskosität und elastische Eigenschaften. Diese Qualitäten werden sogar bei stärkeren Verdünnungen beibehalten, und es ist deshalb möglich, anstelle der vorstehend genannten wasserfreien Salze mehr oder weniger konzentrierte Lösungen in Wasser oder Kochsalzlösung, gegebenenfalls unter Zusatz von anderen Excipienten oder Zusatzstoffen, wie zum Beispiel anderen Mineralsalzen, zu verwenden, um den pH-Wert und den osmotischen Druck zu regulieren. Es ist natürlich möglich, die Salze auch für die Herstellung von Gelen, Inserts, Cremes oder Salben zu verwenden, die auch andere Excipienten oder Inhaltsstoffe enthalten, die in traditionellen Formulierungen von diesen pharmazeutischen Präparaten verwendet werden.
Erfindungsgemäß werden allerdings die Medikamente, die die Hyaluronsäureester oder ihre Salze mit therapeutisch wirksamen oder unwirksamen Substanzen als Transportmittel enthalten, allein verwendet (außer gegebenenfalls mit einem wäßrigen Lösungsmittel). Ebenfalls in die Erfindung eingeschlossen sind die Gemische, die aus allen Arten von hier beschriebenen Medikamenten, Gemischen der gleichen Medikamente und auch gegebenenfalls Gemischen der Hyaluronsäureester mit freier Hyaluronsäure oder Gemischen ihrer Salze, zum Beispiel Natriumsalze, erhältlich sind.
Die erfindungsgemäße Komponente (1) kann auch Zusammenschlüsse oder Gemische von zwei oder mehr solcher Arzneimittel und gegebenenfalls auch mit anderen Bestandteilen sein. Zum Beispiel kann ein Arzneimittel in der Augenheilkunde mit einem Antibiotikum oder einer entzündungshemmenden Substanz und einem Vasokonstriktor oder mit mehreren Antibiotika, einer oder mehreren entzündungshemmenden Substanzen, oder mit einem oder mehreren Antibiotika, einem mydiatrischen oder miotischen oder wundheilenden oder antiallergenen Mittel etc. zusammengeschlossen sein. Zum Beispiel können die nachstehenden Zusammenschlüsse von augenheilkundlichen Arzneimitteln verwendet werden: Kanamycin + Phenylephrin + Dexamethasonphosphat; Kanamycin + Betamethasonphosphat + Phenylephrin oder ähnliche Zusammenschlüsse mit anderen in der Augenheilkunde verwendeten Antibiotika, wie Rolitetracyclin, Neomycin, Gentamicin und Tetracyclin.
Falls anstelle von nur einer Wirksubstanz-Komponente (1) Zusammenschlüsse von Wirksubstanzen verwendet werden, wie die vorstehend genannten, können die Salze der basischen Wirksubstanzen und der partielle Ester von Hyaluronsäure gemischte Salze aus einer oder mehreren solcher basischer Substanzen oder gegebenenfalls gemischte Salze von diesem Typ mit einer gewissen Zahl von anderen Säuregruppen der mit Metallen oder vorstehend genannten Basen Salz bildenden Polysaccharide sein. Es ist zum Beispiel möglich, Salze eines partiellen Esters von Hyaluronsäure oder einer der Molekülfraktionen Hyalastin oder Hyalektin mit einem pharmakologisch unwirksamen Alkohol, zum Beispiel einem niederen Alkanol und mit einem gewissen Prozentsatz von mit dem Antibiotikum Kanamycin salzbildenden Säuregruppen, ein weiterer Prozentsatz von Carboxygruppen mit dem Vasokonstriktor Phenylephrin Salz bildend, herzustellen, und ein verbleibender Prozentsatz an Säuregruppen kann zum Beispiel frei sein oder mit Natrium oder einem der anderen vorstehend genannten Metalle Salze bilden. Es ist auch möglich, diesen Typ von gemischtem Salz mit freier Hyaluronsäure oder ihren Fraktionen oder deren Metallsalzen zu mischen, wie vorstehend für die Medikamente, die Salze einer einzigen Wirksubstanz mit den vorstehend genannten Polysaccharidestern enthalten, angezeigt.
Von den für die Augenheilkunde und Dermatologie diskutierten Beispielen ist es möglich, durch Analogie zu verstehen, welche Medikamente nach der vorliegenden Erfindung auf den vorstehend genannten Gebieten der Medizin, wie zum Beispiel in der Otorhinolaryngologie, Odontologie oder in der inneren Medizin, zum Beispiel in der Endokrinologie, zu verwenden sind. Solche Präparate können deshalb zum Beispiel Entzündungshemmer, Vasokonstriktor oder Vasokompressoren, wie die bereits für die Augenheilkunde genannten, Vitamine, Antibiotika, wie die vorstehend genannten, Hormone, Chemotherapeutika, antibakterielle Mittel etc., ebenfalls wie vorstehend zur Verwendung in der Dermatologie genannt, sein.
Die zusammengefugten Medikamente eines Hyaluronsäureesters mit einer pharmakologisch wirksamen Substanz können andere pharmazeutische Transportmittel enthalten, wie die nachstehend für die pharmazeutischen Präparate, die nur Hyaluronsäureester enthalten, genannten. Allerdings ist es bevorzugt, Medikamente zu verwenden, die einen Zusammenschluß der Komponenten (1) und (2) mit Komponente (2) als dem einzigen Transportmittel (neben einem möglichen Lösungsmittel, wie einem wäßrigen Lösungsmittel) enthalten.
Von den Medikamenten der Erfindung sind die folgenden von besonderer Wichtigkeit, entsprechend dem jeweiligen Fall, die mit einem für die Umgebung, an die sie verabreicht werden sollen, geeigneten Säuregrad, das heißt mit einem physiologisch verträglichen pH- Wert. Die Einstellung des pH-Wertes, zum Beispiel in den vorstehend genannten Salzen des partiellen Esters von Hyaluronsäure mit einer basischen Wirksubstanz kann geeigneterweise durch Regulieren der Mengen an Polysaccharid, seiner Salze und der basischen Substanz selbst durchgeführt werden. So kann zum Beispiel der Überschuß an freien Säuregruppen mit den vorstehend genannten anorganischen Basen, zum Beispiel mit dem Hydrat von Natrium oder Kalium oder Ammonium, neutralisiert werden, wenn die Acidität eines Salzes des partiellen Esters von Hyaluronsäure mit einer basischen Substanz zu hoch ist.

Verfahren B

Die Hyaluronsäureester der vorliegenden Erfindung können allerdings vorteilhafterweise nach einem zweiten Verfahren hergestellt werden, das allgemein auf die Herstellung von Carbonsäureestern aus sauren Polysacchariden mit Carboxygruppen angewendet wird. Dieses Verfahren besteht aus der Umsetzung eines quartären Ammoniumsalzes eines sauren Polysaccharids mit Carboxygruppen mit einem verethernden Mittel, vorzugsweise in einem aprotischen, organischen Lösungsmittel.
Als organische Lösungsmittel ist es bevorzugt, aprotische Lösungsmittel, wie Dialkylsulfoxide, Dialkylcarboxamide, wie insbesondere niedere Alkyl-Dialkylsulfoxide, insbesondere Dimethylsulfoxid, und niedere Alkyl-Dialkylamide von niederen aliphatischen Säuren, wie Dimethyl- oder Diethylformamid oder Dimethyl- oder Diethylacetamid zu verwenden.
Andere Lösungsmittel, die nicht immer aprotisch sind, sind zu berücksichtigen, wie Alkohole, Ether, Ketone, Ester, insbesondere aliphatische oder heterocyclische Alkohole und Ketone mit einem niedrigeren Siedepunkt, wie Hexafluorisopropanol, Trifluorethanol und N-Methylpyrrolidon.
Die Reaktion wird vorzugsweise in einem Temperaturbereich von zwischen etwa 0ºC und 100ºC, insbesondere zwischen etwa 25ºC und 75ºC, zum Beispiel bei etwa 30ºC, durchgeführt.
Die Veresterung wird vorzugsweise durch schrittweise Zugabe des Veresterungsmittels zum vorstehend genannten Ammoniumsalz in einem der vorstehend genannten Lösungsmittel, zum Beispiel in Dimethylsulfoxid, durchgeführt.
Als Alkylierungsmittel ist es möglich, die vorstehend genannten, insbesondere die Kohlenwasserstoftbalogenide, zum Beispiel Alkylhalogenide, zu verwenden. Als quartäre Ausgangsammoniumsalze ist es bevorzugt, die niederen Ammoniumtetraalkylate mit Alkylresten vorzugsweise zwischen 1 und 6 Kohlenstoffatomen zu verwenden. Meistens wird Tetrabutylammoniumhyaluronat verwendet. Es ist möglich, diese quartären Ammoniumsalze durch Umsetzen eines Metallsalzes eines sauren Polysaccharids, vorzugsweise eines von den vorstehend genannten, insbesondere ein Natrium- oder Kaliumsalz, in wäßriger Lösung mit einem mit einer quartären Ammoniumbase salzbildenden Sulfonharz herzustellen.
Das Tetraalkylammoniumsalz des sauren Polysaccharids kann durch Gefriertrocknen des Eluats erhalten werden. Die Tetraalkylammoniumsalze von sauren Polysacchariden, die als Ausgangsverbindungen des vorliegenden Verfahrens verwendet werden, können sich von Niederalkylresten, insbesondere Alkylresten mit zwischen 1 und 6 Kohlenstoffatomen, ableiten. Überraschenderweise waren solche Salze in den vorstehend genannten organischen Lösungsmitteln löslich, und aus diesem Grund ist die Veresterung von sauren Polysacchariden nach dem Verfahren B besonders einfach und fuhrt zu sehr guten Ausbeuten. Es gelingt deshalb nur durch Verwendung dieser Art von Verfahren, daß man die Anzahl von Carboxygruppen des sauren Polysaccharids, die verestert werden sollen, genau dosieren kann.
Eine Variante des vorstehend beschriebenen Verfahrens B besteht im Umsetzen von Kaliumsalz oder saurem Polysaccharidnatriumsalz, suspendiert in einer geeigneten Lösung, wie Dimethylsulfoxid, mit einem geeigneten Alkylierungsmittel in Gegenwart von katalytischen Mengen eines quartären Ammoniumsalzes, wie Tetrabutylammoniumiodid.
Die Salzbildung von HS mit den vorstehenden Metallen zur Herstellung von Ausgangssalzen für das vorstehend beschriebene spezielle Veresterungsverfahren der vorliegenden Erfindung wird auf eine per se bekannte Weise durchgeführt, zum Beispiel durch Umsetzen von HS mit der berechneten Basemenge, zum Beispiel mit alkalischen Hydraten oder mit basischen Salzen von solchen Metallen, wie Carbonaten oder Bicarbonaten.
In den partiellen Estern der vorliegenden Erfindung ist es möglich, mit allen verbleibenden Carboxygruppen oder nur mit einem Teil von ihnen Salze zu bilden, indem die Basemengen so dosiert werden, daß der gewünschte stöchiometrische Grad an Salzbildung möglich ist. Mit dem korrekten Salzgrad ist es möglich, Ester mit einem breiten Bereich an verschiedenen Dissoziatonskonstanten zu erhalten, und die deshalb den gewünschten pH-Wert in Lösung oder in situ zur Zeit der therapeutischen Anwendung ergeben.
Von den Produkten der vorliegenden Erfindung sind die vorstehend beschriebenen Ester und ihre Salze und die, die in den folgenden erläuternden Beispielen beschrieben werden, von besonderer Wichtigkeit.

Herstellung von Benzyl- und Ethylestern von Hyaluronsäure

BEISPIEL 26

Herstellung des vollständigen Benzyle ers (HYAFF11) von Hyaluronsäure

12,4 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 170000 entsprechend 20 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 620 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 4,5 g (25 mÄquiv.) Benzylbromid und 0,2 g Tetrabutylammoniumiodid werden zugegeben, und die Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
Das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 3500 ml Essigsäureethylester gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und viermal mit 500 ml Essigsäureethylester gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 9 g des Benzylesterproduktes im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung der Estergruppen wird nach dem Verfahren, das auf den Seiten 169-172 von Siggia S. und Hanna J. G., "Quantitative Organic Analysis Via Functional Groups", 4. Auflage, John Wiley and Sons beschrieben ist, durchgeführt.
In einer anderen Ausführungsform werden 3 g des Kaliumsalzes von HS mit einem Molekulargewicht von 162000 in 200 ml Dimethylsulfoxid suspendiert; 120 mg Tetrabutylammoniumiodid und 2,4 g Benzylbromid werden zugegeben.
Die Suspension wird 48 Stunden bei 30ºC gerührt. Das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 1000 ml Essigsäureethylester gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und viermal mit 150 ml Essigsäureethylester gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 3,1 g des Benzylesterproduktes im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung der Estergruppen wird nach dem Verfahren, das auf den Seiten 169-172 von Siggia S. und Hanna J. G., "Quantitative Organic Analysis Via Functional Groups", 4. Auflage, John Wiley and Sons beschrieben ist, durchgeführt.

BEISPIEL 27

Herstellung von partiellen Benzylestern (HYAFF 11 p 10, p25 p50 und p75) von Hyaluronsäure

Die partiellen Benzylester von Hyaluronsäure, HYAFF 11 p 10, p25, p50 und p75 können wie im vorstehend beschriebenen Verfahren B hergestellt werden. Die Veresterung kann durch schrittweise Zugabe des Veresterungsmittels zum quartären Ammoniumsalz von Hyaluronsäure, das in einem geeigneten organischen Lösungsmittel mit einem Veretherungsmittel umgesetzt wurde, durchgeführt werden.
Die Salzbildung von Hyalwonsäure für die Herstellung von Ausgangssalzen zur Veresterung und die Salzbildung der verbleibenden Carboxygruppen in den partiellen Benzylestern ist ebenfalls in Verfahren B beschrieben.

BEISPIEL 28

Herstellung des Ethylesters (HYAFF 7) von Hyaluronsäure

12,4 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 85000 entsprechend 20 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 620 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 3,3 g (21,2 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
Das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 3500 ml Essigsäureethylester gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und viermal mit 500 ml Essigsäureethylester gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 8 g des Ethylesterproduktes im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung der Estergruppen wird unter Verwendung des Verfahrens von R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal Chem. 33 (1961), 1028-1030, durchgeführt.

BEISPIEL 29

Herstellung des (partiellen) Cortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 20% veresterte Carboxygruppen - 80% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 105000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,850 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-17α-ol-3,11,20-trion werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid wird zugegeben und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Das Produkt wird dann in 300 ml Wasser, das 1% Natriumchlorid enthält, gelöst und die Lösung wird langsam unter konstantem Rühren in 1500 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und zweimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird. Es werden 4,5 g der partiellen Cortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Cortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980, S. 127 durchgeführt.

BEISPIEL 30

Herstellung des (partiellen) Hydrocortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 20% veresterte Carboxygruppen - 80% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 80 000 entsprechend 20 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 250 C in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,850 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-11β,17α-diol-3,20-dion werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 24 Stunden bei 300C gehalten. Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Das Produkt wird dann in 300 ml Wasser, das 1% Natriumchlorid enthält, gelöst, und die Lösung wird langsam unter konstantem Rühren in 1500 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und zweimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird. Es werden 4,4 g der partiellen Hydrocortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Hydrocortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980, S. 224 durchgeführt.

BEISPIEL 31

Herstellung des (partiellen) Fluorcortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 20% veresterte Carboxygruppen - 80% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 80000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,89 g (2 mÄquiv.) 9-Fluor-21-brom-4-pregnen-11β,17α-diol- 3,20-dion werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 62 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Das Produkt wird dann in 300 ml Wasser, das 1% Natriumchlorid enthält, gelöst, und die Lösung wird langsam unter konstantem Rühren in 1500 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und zweimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird. Es werden 4,6 g der partiellen Fluorcortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Fluorcortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion nut Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980, S. 196 durchgeführt.

BEISPIEL 32

Herstellung des (partiellen) Desoxycorticosteroners (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 20% veresterte Carboxygruppen - 80% Carbonsauresalze (Na)

6,21 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 105 000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,661 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-3,20-dion werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 300 C unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Das Produkt wird dann in 300 ml Wasser, das 1% Natriumchlorid enthält, gelöst, und die Lösung wird langsam unter konstantem Rühren in 1500 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und zweimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird. Es werden 4,5 g der partiellen Desoxycorticosteronesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Desoxycorticosteron nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980, S. 137 durchgeführt.

BEISPIEL 33

Herstellung des (gemischten) Ethanol- und Cortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 80% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Cortison (C&sub2;&sub1;) vestert

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 70000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 1,25 g (8 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,85 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-17α-ol-3,11,20-trion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,6 g der gemischten Ethanol- und Cortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Cortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt.
Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 34

Herstellung des (gemischten) Ethanol- und Hydrocortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 80% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Hydrocortison (C&sub2;&sub1;) verestert

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 125000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 1,25 g (8 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,85 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-11$,17a-diol-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,6 g der gemischten Ethanol- und Hydrocortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Hydrocortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt. Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33(1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 35

Herstellung des (gemischten) Ethanol- und Fluorcortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 80% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Fluorcortison (C&sub2;&sub1;) veresrert

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 70000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 1,25 g (8 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,89 g (2 mÄquiv.) 9β-Fluor-21-brom-4-pregnen- 11β,17α-diol-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,6 g der im Titel genannten gemischten Ethanol- und Fluorcortisonesterverbindung erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Fluorcortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt.
Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 36

Herstellung des (gemischten) Ethanol- und Desoxycorticosteronesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 80% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Desoxycorticosteron (C&sub2;&sub1;) verestert

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 70000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 250 C in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 1,25 g (8 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die so erhaltene Lösung wird 12 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,661 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30 C gehalten. Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30 C unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,6 g der gemischten Ethanol- und Desoxycorticosteronesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Desoxycorticosteron nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt. Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 37

Herstellung des (partiellen und gemischten) Ethanol- und Desoxycorticosteronesters von Hyaluronsäure (HS) - 40% der Carboxygruppen mit Desoxycorticosteron (C&sub2;&sub1;) verestert - 40% Carbonsäuresalze (Na)
6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 125000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,62 g (4 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,85 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten. Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,5 g der partiellen und gemischten Ethanol- und Desoxycorticosteronesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Desoxycorticosteron nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt.
Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 38

Herstellung des (partiellen und gemischten) Ethanol- und Cortisonesters von Hyaluronsäure (HS) - 40% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Cortison (C&sub2;&sub1;) verestert - 40% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 125000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,62 g (4 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,85 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-17α-ol-3,11,20-trion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,5 g der partiellen und gemischten Ethanol- und Cortisonverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Cortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt. Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 39

Herstellung des (partiellen und gemischten) Ethanol- und Hydrocorticonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) - 40% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 20% der Carboxygruppen mit Hydrocortison (C&sub2;&sub1;) verestert - 40% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 70000 entsprechend 10 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,62 g (4 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
0,85 g (2 mÄquiv.) 21-Brom-4-pregnen-11β,17α-diol-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 200 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,5 g der partiellen und gemischten Ethanol- und Hydrocortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Hydrocortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt.
Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 40

Herstellung des (partiellen und gemischten) Ethanol- und Fluorcortisonesters (C&sub2;&sub1;) von Hyaluronsäure (HS) der Carboxyrgruppen mit Ethanol verestert - 20º% der Carboxygruppen mit Fluorcortison (C&sub2;&sub1;) verestert - 40% Carbonsäuresalze (Na)

6,2 g HS-tetrabutylammoniumsalz mit einem Molekulargewicht von 65000 entsprechend 20 mÄquiv. einer monomeren Einheit werden bei 25ºC in 310 ml Dimethylsulfoxid gelöst. 0,62 g (4 mÄquiv.) Ethyliodid werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30~C gehalten.
0,89 g (2 mÄquiv.) 9a-Fluor-21-brom-4-pregnen-11β,17α-diol-3,20-dion werden zugegeben, und die Lösung wird 24 Stunden bei 30ºC gehalten.
Dann wird eine Lösung aus 100 ml Wasser und 5 g Natriumchlorid zugegeben, und das so erhaltene Gemisch wird langsam unter konstantem Rühren in 2000 ml Aceton gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der filtriert und dreimal mit 100 ml Aceton/Wasser 5 : 1 und dreimal mit 100 ml Ethyl-Aceton gewaschen und zum Schluß 8 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet wird.
Es werden 4,6 g der partiellen und gemischten Ethanol- und Fluorcortisonesterverbindung im Titel erhalten. Eine quantitative Bestimmung von Fluorcortison nach milder alkalischer Hydrolyse mit einer wäßrig-alkoholischen Lösung von Na&sub2;CO&sub3; und Extraktion mit Chloroform wird nach dem Amtlichen Britischen Arzneibuch, 1980 durchgeführt.
Eine quantitative Bestimmung der Ethoxyreste wird nach R. H. Cundiff und P. C. Markungs, Anal. Chem. 33 (1961), 1028-1030 durchgeführt.

BEISPIEL 41

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Streptomycinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Streptomycin

243 mg Streptomycinsulfat (1 mÄquiv.) werden in 20 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 50 C thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in der OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das sulfatfreie Eluat wird in einem bei einer Temperatur von 5ºC thermostatisierten Behälter gesammelt.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Streptomycinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,7 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit B ATCC 6633 im Vergleich zu Streptomycinstandard zeigt einen Gehalt von 10,9 Gewichts-% an Streptomycinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Gehalt.

BEISPIEL 42

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Erythromycinsalzes von Hyaluronsäure (EIS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Erythromycin

1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Zum natriumfreien Eluat werden 734 mg der Erythromycinbase (1 mÄquiv.) gegeben. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 2,1 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit S. aureus ATCC 6538 im Vergleich zu Standard-Erythromycin zeigt einen Gehalt von 31,7 Gewichts- % an Erythromycinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Gewicht.

BEISPIEL 43

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Neomycinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Neomycin

152 mg Neomycinsulfat (1 mÄquiv.) werden in 20 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 5ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in der OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das sulfatfreie Eluat wird in einem bei einer Temperatur von 5ºC thermostatisierten Behälter gesammelt.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Neomycinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,65 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit ~ aureus ATCC 6538 im Vergleich zu Standard-Neomycin zeigt einen Gehalt von 6,1 Gewichts-% an Neomycinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Wert.

BEISPIEL 44

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Gentamicinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Gentamicin

145 mg Gentamicinsulfat werden in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 5ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in der OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das sulfatfreie Eluat wird in einem bei einer Temperatur von 5 ~ C thermostatisierten Behälter gesammelt.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Gentamicinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,7 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit S. epidermidus ATCC 12228 im Vergleich zu Standard-Gentamicin zeigt einen Gehalt von 6,50 Gewichts-% an Gentamicinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Wert.

BEISPIEL 45

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Amikacinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxvgruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Amikacin

147 mg Amikacin (1 mÄquiv.) werden in 20 ml Wasser gelöst.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Amikacinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,70 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit S. aureus ATCC 29737 im Vergleich zu Standard-Amikacin zeigt einen Gehalt von 8,50 Gewichts-% an Amikacinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Wert.

BEISPIEL 46

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Kanamycinsalze s von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Kanamycin

146 mg Kanamycinsulfat (1 mÄquiv.) werden in 20 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 5ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in der OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das sulfatfreie Eluat wird in einem bei einer Temperatur von 5ºC thermostatisierten Behälter gesammelt.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Kanamycinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,5 g.
Eine mikrobiologische Bestimmung mit B. subtilis ATCC 6633 im Vergleich zu Standard-Kanamycin zeigt einen Gehalt von 7 Gewichts- % an Kanamycinbase, entsprechend dem theoretisch berechneten Wert.

BEISPIEL 47

Herstellung des partiell mit Ethanol veresterten Pilocarpinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 75% der Carboxygruppen mit Ethanol verestert - 25% Carbonsäuresalze mit Pilocarpin

245 mg Pilocarpinhydrochlorid (1 mÄquiv.) werden in 20 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 5ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das chloridfreie Eluat wird in einem bei 5ºC thermostatisierten Behälter gesammelt.
1,6 g eines 75%igen Ethylesters und 25%igen Natriumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 400 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;-Form enthält, eluiert.
Das natriumfreie Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Pilocarpinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird sofort gefroren und gefriergetrocknet. Ausbeute: 1,89 g.

BEISPIEL 48

Herstellung des partiell mit n-Propanol veresterten Pilocarpinsalzes von Hyaluronsäure (HS) - 85% der Carboxygruppen mit n-Propanol verestert - 15% Carbonsäuresalze mit Pilocarpin

245 mg Pilocarpinhydrochlorid (1 mÄquiv.) werden in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird in einer bei 5ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml quartäres Ammoniumharz (Dowex 1 · 8) in der OH&supmin;-Form enthält, eluiert.
Das chloridfreie Eluat wird in einem bei 5ºC thermostatisierten Behälter gesammelt.
4,1 g des 85%igen Propylesters und 15%igen Tetrabutylammoniumsalzes von HS (entsprechend 1 mÄquiv. einer monomeren Einheit bezogen auf die nicht veresterten Carboxygruppen) werden in 100 ml Dimethylsulfoxid gelöst. Die Lösung wird in einer bei 20ºC thermostatisierten Säule, die 2 ml feuchtes Sulfonharz (Dowex 50 · 8) in der H&spplus;- Form enthält, eluiert.
Das Eluat wird unter Rühren in der Lösung der Pilocarpinbase gesammelt. Die so erhaltene Lösung wird mit Essigsäureethylester (600 ml) gefällt.
Der Niederschlag wird filtriert und viermal mit 200 ml Essigsäureethylester gewaschen und zuletzt 24 Stunden bei 30ºC unter vermindertem Druck getrocknet. Es werden 3,5 g der im Titel genannten Verbindung erhalten.
Die folgenden Beispiele erläutern die Herstellung von Filmen durch Verdampfen von Lösungsmittel aus Gemischen von in DMSO gelösten Hyaluronsäureester mit Benzylalkohol (25% Veresterung, HYAFF11 p25) und in DMSO löslichen Polymeren.
Die Lösung von HYAFF11 p25 in DMSO wird wie folgt hergestellt: 100 mg HYAFF11 p25 werden in destilliertem Wasser : DMSO 1 : 1 gelöst, während 30 Minuten bei Raumtemperatur geschüttelt wird. Das Wasser wird dann durch Zugabe des zweiten Lösungsmittels zur Lösung und Erhitzen auf 90ºC, bis alles Wasser verdampft ist, durch DMSO ersetzt. Zuletzt wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von HYAFF 11 p25 erhalten, und sie wird in den Beispielen 49-55 als Lösung A bezeichnet.

BEISPIEL 49

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p25 und Polyvinylalkohol (PVA)

100 mg PVA werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 100ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung B gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 100ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF 11 p25/ PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 50

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p25 und Claren L6, Solvay (C1 L6), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit niedrigem Ethylengehalt (29 mol%)

100 mg C1 L6 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 L6 erhalten, die als Lösung C bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung C gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p25/C1 L6 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 51

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p25 und Claren P10, Solvay (C1 P10), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem mittleren Ethylengehalt (36 mol %)

100 mg C1 P10 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 P10 erhalten, die als Lösung D bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung D gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 80ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p25/C1 P10 in einem Gewichtsverhältms von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 750 C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 52

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p25 und Claren R20, Solvay (C1 R20), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem hohen Ethylengehalt (40 mol%)

100 mg C1 R20 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70 C in DMSO gelöst und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 R20 erhalten, die als Lösung E bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung E gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF 11 p25/ C1 R20 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 53

Herstellung eines Films aus HYAFF 11 p25 und Polyurethan (PU). Cardiomat 610, Contron

0,670 ml einer 15%igen Lösung von PU in Tetrahydrofuran: Dioxan 1 : 1 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in 8 ml DMSO gelöst. Wenn die Ausgangslösungsmittel verdampft sind, wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PU erhalten, die als Lösung F bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung F gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p25/PU in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 54

Herstellung eines Films aus HYAFF11 P25 und Polymilchsäure (PMS)

100 mg PMS werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 850 C in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PMS erhalten, die als Lösung G bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung G gegeben, während kontinuierlich bei einer Temperatur von 85ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p25/PMS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 55

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p25 und Polyphosphazen, zum Beispiel Poly(methoxyethoxy)phosphazen (PF3)

100 mg PF3 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 100ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PF3 erhalten, die als Lösung H bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung H gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 10ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p25/PF3 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.
Das folgende Beispiel erläutert die Herstellung eines Films durch Verdampfen von Lösungsmittel von Gemischen aus in DMSO gelösten Hyaluronsäureestern mit Benzylalkohol (50% Veresterung, HYAFF11 p50) und in DMSO löslichen Polymeren.
Die Lösung von HYAFF11 p50 in DMSO wird wie folgt hergestellt: 100 mg HYAFF 11 p50 werden durch 30-minütiges Schütteln bei Raumtemperatur in destilliertem Wasser : DMSO 1 : 1 gelöst. Das Wasser wird dann durch Zugabe des letzteren zur Lösung und Erhitzen auf 90ºC, um das Wasser zu verdampfen, durch DMSO ersetzt.
Zum Schluß wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von HYAFF11 p50 in DMSO erhalten, die in Beispiel 56 als Lösung A bezeichnet wird.

BEISPIEL 56

Herstellung eines Films aus HYAFF 11 p50 und Polyphosphazen, zum Beispiel Poly(methoxyethoxy)phosphazen (PF3)

100 mg PF3 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 100ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PF3 erhalten, und diese wird als Lösung B bezeichnet.
Lösung A wird langsam zu Lösung B gegeben, während bei einer Temperatur von 100ºC geschüttelt wird. Die Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p50/PF3 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.
Die folgenden Beispiele erläutern die Herstellung von Filmen durch Verdampfen von Lösungsmittel aus Gemischen von in DMSO gelösten Hyaluronsäureestern mit Benzylalkohol (75% Veresterung, HYAFF11 p75) und in DMSO löslichen Polymeren.
100 mg HYAFF 11 p75 werden durch 30-minütiges Schütteln bei Raumtemperatur in DMSO gelöst. Dann wird DMSO bis zu einem Endvolumen von 10 ml zugegeben. So wird eine 1%ige Lösung von HYAFF 11 p75 erhalten, die in den Beispielen 57-62 als Lösung A bezeichnet wird.

BEISPIEL 57

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Polyvinylalkohol (PVA)

100 mg PVA werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 100ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung B gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 100ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p75/PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 58

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Claren L6, Solvay (C1 L6), Ethylen- Vinylalkohol-Copolynier mit einem niedrigen Ethylengehalt (29 mol%)

100 mg C1 L6 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst werden und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 L6 erhalten, die als Lösung C bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung C gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p75/ C1 L6 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 59

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Claren P10, Solvay (C1 P10), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem mittleren Ethylengehalt (36 mol%)

100 mg C1 P10 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 P10 erhalten, die als Lösung D bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung D gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die HYAFF11 p75/C1 P10 in einem Gewichtsverhältnis von 24/80 enthält, wird langsam in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 60

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Claren R20, Solvay (C1 R20), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem hohen Ethylengehalt (40 mol%)

100 mg C1 R20 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 R20 erhalten, die als Lösung E bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung E gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten. Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p75/C1 R20 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 61

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Polyurethan (PU), Cardiomat 610, Contron

0,670 ml einer 15%igen PU-Lösung in Tetrahydrofuran: Dioxan 1 : 1 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in 8 ml DMSO gelöst. Wenn die Ausgangslösungsmittel verdampft sind, wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PU erhalten, die als Lösung F bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung F gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p75/C1 R20 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 62

Herstellung eines Films aus HYAFF11 p75 und Polymilchsäure (PMS)

100 mg PMS werden durch konstantes einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 85ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PMS erhalten, die als Lösung G bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung G gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 85ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten. Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11 p75/PMS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.
Die folgenden Beispiele beschreiben die Herstellung von Filmen durch Verdampfen von Lösungsmittel aus Gemischen von in DMSO gelösten Hyaluronsäureestern mit Benzylalkohol (100% Veresterung, HYAFF11) und in DMSO löslichen Polymeren. 100 mg HYAFF 11 werden durch 30-minütiges Schütteln bei Raumtemperatur in DMSO gelöst. Dann wird DMSO zugegeben, bis ein Endvolumen von 10 ml erreicht ist. So wird eine 15%ige Lösung von HYAFF 11 in DMSO erhalten, die in den Beispielen 63-69 als Lösung A bezeichnet wird.

BEISPIEL 63

Herstellung eines Films aus HYAFF 11 und Polyvinylalkohol (PVA)

100 mg PVA werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 10ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PVA erhalten, die als Lösung B bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung B gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 100ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/PVA in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist; wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 64

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Claren L6, Solva (C1 L6), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem niedrigen Ethylengehalt (29 mol%)

100 mg C1 L6 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 L6 erhalten, die als Lösung C bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung C gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70 geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten. Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/C1 L6 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 750 C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 65

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Claren P10, Solvay (C1 P10), Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem mittleren Ethylengehalt (36 mol%)

100 mg C1 P10 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 P 10 erhalten, die als Lösung D bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung D gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/C1 P10 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75º C eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 66

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Claren R20, Solvay (Cl R20). Ethylen- Vinylalkohol-Copolymer mit einem hohen Ethylengehalt (440 mol%)

100 mg C1 R20 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70 C in DMSO gelöst und dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von C1 R20 erhalten, die als Lösung E bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung E gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/C1 R20 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 67

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Polyurethan (PU), Cardiomat 610, Contron

0,670 ml einer 15%igen Lösung von PU in Tetrahydrofuran: Dioxan 1 : 1 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 70ºC in DMSO gelöst. Wenn die Ausgangslösungsmittel verdampft sind, wird die Lösung mit DMSO auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PU erhalten, die als Lösung F bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung F gegeben, während bei einer Temperatur von 70ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/PU in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 68

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Polymilchsäure (PMS)

100 mg PMS werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 85ºC in DMSO gelöst und werden dann auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PMS erhalten, die als Lösung G bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung G gegeben, während konstant bei einer Temperatur von 85ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/PMS in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

BEISPIEL 69

Herstellung eines Films aus HYAFF11 und Polyphazen, zum Beispiel Polyphenoxyphosphazen (PF4)

100 mg PF4 werden durch einstündiges Schütteln bei einer Temperatur von 25ºC in DMSO gelöst und auf ein Endvolumen von 10 ml gebracht. So wird eine 1%ige Lösung von PF4 erhalten, die als Lösung H bezeichnet wird.
Lösung A wird langsam zu Lösung H gegeben, während bei einer Temperatur von 25ºC geschüttelt wird. Die so erhaltene Lösung wird eine Stunde geschüttelt, um die vollständige Vermischung der zwei Komponenten zu gewährleisten.
Die so erhaltene Lösung, die das Gemisch aus HYAFF11/PF4 in einem Gewichtsverhältnis von 20/80 enthält, wird in eine Petrischale aus Polystyrol gegossen und in einen auf eine Temperatur von 75ºC eingestellten Gebläseofen gestellt. Wenn das Lösungsmittel vollständig verdampft ist, wird ein transparenter und homogener Film erhalten.

Vernetzung von vorgeformten Polmeren

Um die Aufgaben der vorliegenden Erfindung zu erfüllen, können alle in den voranstehenden Beispielen hergestellten Polymermischungen mit den nachstehenden Verfahren in zusätzliche IPN oder Semi-IPN überführt werden.

BEISPIEL 70

Vernetzung von Polymeren unter Verwendung von Verbindungen, die Radikale erzeugen können

Polymere wie
in denen R ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom, SOCl&sub2;, COCl, SO&sub3;H, COOH oder COOR' sein kann, können mit vielen Peroxiden vernetzt werden (Solovey et al., Bell System Tech. J. 40 (1961), 1400). Die Arbeitstemperaturen sind sehr hoch und führen zu Polymerzersetzung.
Aliphatische Polyether, wie Polyethylenoxid und Polypropylenoxid, können durch Peroxide vernetzt werden (Y. Okada, J. Appl. Polym. Sci. 7, (1963), 695, 703 und 1153). Polyamide, Polysulfone und Polyester können unter Verwendung von Peroxiden vernetzt werden.
Neben Peroxiden kann Ethyltrichloracetat, C&sub6;H&sub1;&sub1;-CCl&sub3;, R-S-S-R etc. verwendet werden, um Radikale zu erzeugen.
Mit vorgeformten Polymeren mit C-C-Doppelbindungen können "zwei Reagenssysteme" verwendet werden: ein Reagens erzeugt Radikale, während das zweite als eine intermolekulare Brücke zwischen den Doppelbindungen fungiert. Ein Beispiel dafür ist Peroxid-Dimaleimid.

Vernetzung von Polymeren mit verschiedenen funktionellen Gruppen

funktionelle Carboxygruppen: Polyacrylsäure, Polymethacrylsäure und ihre Copolymere mit Acrylat, Methacrylat, Styrol und anderen Vinylmonomeren, die Copolymere von hydrolysiertem Maleinanhydrid und Sorbinsäure können mit Diamin, Triamin, Di- und Polyisocyanat, Di-, Tri- und Polyolen, N-Methylolderivaten von Formaldehyd, Oxiranverbindungen und Carbodiimid vernetzt werden. Bei hohen Temperaturen kann die Vernetzung durch die Erzeugung von intermolekularen anidridischen Gruppen erfolgen.
funktionelle OH-Gruppen: Polyvinylalkohol und seine Copolymere mit Ethylen, Acrylat, Methacrylat, beta-Hydroxyethylacrylat, Copolymere mit Styrol-beta- Hydroxyethylacrylat können mit Formaldehyd, N-Methylolderivaten von Formaldehyd, Dihalogeniden von Carbonsäuren, Glyoxal, Glutaraldehyd und anderen Dialdehyden vernetzt werden.
Gemische aus linearen Polymeren mit funktionellen Gruppen, wie Polyvinylalkohol oder seine Copolymere mit Polyacryl- oder Polymethacrylsäure können durch intermolekulare Veresterung (Y. Tatara, J. Polym. Sci. Symp. 54, (1976), 283) vernetzt werden. Diese Gemische können auch mit den vorstehend genannten Reagenzien für COOH- und OH-Gruppen vernetzt werden.
Für Cellulose sind die folgenden Verbindung als Vernetzungsmittel verwendet worden: Harnstoff-Formaldehyd, Dimethylol-Harnstoff, Bis-Dimethylolderivate von cyclischem Ethylen-Harnstoff und ähnliche Verbindungen, wie Methylol-Tetramethylen- Harnstoff, N-Methylolderivate von Idanthoin, von Imizadolidon, von Propylen-Harnstoff und Triazonen. Andere nützliche Verbindungen sind Glyoxal, Glutaraldehyd, alpha- Hydroxyadipaldehyd und andere Dialdehyde, Diepoxide, wie Cyclohexendioxid und andere mit der allgemeinen Struktur:
die mit Ethylenamin, Sulfonen und alpha-Chlorether derivatisiert sein können.
funktionelle Amino-Harnstoff-Urethan-Gruppen: Polyamide, Polyharnstoff und Polyurethane können mit Di- und Polyisocyanaten vernetzt werden.
Neben den vorstehenden Verfahren zum Erhalt von IPN und Semi-IPN durch Vernetzen beider Komponenten der Mischung können Semi-IPN auch durch die Polymerisierung eines Monomers in Gegenwart eines Vernetzungsmittels und in Gegenwart des natürlichen sauren Polysaccharids oder eines halbsynthetischen esterartigen Derivates davon erhalten werden.
Als ein Beispiel ist es möglich gewesen, ein Semi-IPN durch Polymerisieren von Methylmethacrylat, in dem das Polysaccharid gelöst worden war, in Gegenwart von Tetraethylenglycoldimethacrylat (TEGDM) als Vernetzungsinittel und Benzoin als Starter unter Verwendung eines UV-Photopolymerisierungsverfahrens im Volumen zu erhalten.
Bei der so beschriebenen Erfindung ist es offensichtlich, daß sie auf viele Weisen variiert werden kann. Solche Variationen dürfen nicht als ein Abweichen vom Geist und Umfang der Erfindung betrachtet werden, und alle diese Modifizierungen sollen in den Umfang der nachstehenden Ansprüche eingeschlossen sein, wie einem Fachmann offensichtlich ist.

Claims

1. Hydrogel oder Schwamm, umfassend ein sich durchdringendes Polymernetzwerk, IPN, wobei eine erste Komponente ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus einem Hyaluronsäureester und einem Hyaluronsäuresalz besteht, und eine zweite Komponente ein synthetisches chemisches Polymer ist, das durch einen Gefrier-Auftauzyklus bzw. ein Gefriertrocknungsverfahren erhältlich ist.

2. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 1, wobei der Hyaluronsäureester ein 100%iger Hyaluronsäureester oder ein partieller Hyaluronsäureester ist.

3. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 2, wobei der 100%ige Hyaluronsäureester ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus einem 100%igen Benzylester von Hyaluronsäure und einem 100%igen Ethylester von Hyaluronsäure besteht, und der partielle Hyaluronsäureester ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus einem 10%igen partiellen Benzylester von Hyaluronsäure, einem 25%igen partiellen Benzylester von Hyaluronsäure, einem 50%igen partiellen Benzylester von Hyaluronsäure und einem 75%igen partiellen Benzylester von Hyaluronsäure besteht.

4. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei der Hyaluronsäureester ein partieller oder vollständiger Hyaluronsäureester ist, der einen Alkohol mit einer Kettenlänge von 14 Kohlenstoffatomen oder weniger enthält.

5. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei der Hyaluronsäureester ein Ester der Hyaluronsäure mit einem aliphatischen, araliphatischen, cycloaliphatischen oder heterocyclischen Alkohol ist.

6. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei der Hyaluronsäureester oder das -salz ein Ester oder Salz mit einem pharmakologisch wirksamen Molekül ist.

7. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 6, wobei das pharmakologisch wirksame Molekül ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus einem Mittel gegen Infektionen, einem Antibiotikum, einem antimikrobiellen Mittel, einem entzündungshemmenden Mittel, einem Zytostatikum, einem zytotoxischen Mittel, einem Antivirenmittel, einem Anaesthetikum, einem Antiseptikum und einem Desinfektionsmittel besteht.

8. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1-7, wobei die Polymere, die das irr passen, in Dimethylsulfoxid löslich sind.

9. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei der Hyaluronsäureester oder das -salz und das synthetische chemische Polymer, das das IPN umfaßt, vernetzt sind, oder wobei das synthetische chemische Polymer auf den Hyaluronsäureester oder das -salz aufgepfropft ist.

10. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 9, wobei die Vernetzung oder das Aufpfropfen unter Verwendung von Verbindungen, die Radikale erzeugen können, oder durch funktionelle Gruppen im Hyaluronsäureester oder -salz und dem synthetischen chemischen Polymer erreicht wird.

11. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 10, wobei das IPN vor dem Vernetzen oder Aufpropfen erzeugt wird.

12. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 11, wobei das Hydrogel oder der Schwamm durch Polymerisieren eines Monomers in Gegenwart eines Vernetzungsmittels und des Hyaluronsäureesters oder -salzes erzeugt wird.

13. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 12 zur Verwendung auf dem biomedizinischen und sanitären Sektor.

14. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 13 zur Verwendung in der Dermatologie, Urologie, Orthopädie, ohrenheilkundlichen Mikrochirurgie, Otoneurologie, der funktionellen, posttraumatischen und rhinosinusalen endoskopischen Mikrochirurgie, der plastischen Chirurgie und im cardiovaskulären System.

15. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 14, außerdem umfassend ein therapeutisches Mittel aus der Gruppe, die aus einem Mittel gegen Infektionen, einem Antibiotikum, einem antimikrobiellen Mittel, einem entzündungshemmenden Mittel, einem Zytostatikum, einem zytotoxischen Mittel, einem Antivirusmittel, einem Anaesthetikum, einem Antiseptikum und einem Desinfektionsmittel besteht.

16. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 1 bis 15, wobei das synthetische chemische Polymer ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus Polyacrylsäure, Polyvinylpyrrolidon, Polyacrylamid, Polyethylenoxid, Vinylalkohol-Vinylacetat- Copolymer, Polyvinylalkohol, Poly(trifluorethoxy)phosphazen, Poly(di(pnatriumsulfoxyphenoxy)phosphazen), Poly(methoxyethoxy)phosphazen, Poly(phenoxy)phosphazen, Ethylen-Vinylalkohol-Copolymer mit einem niedrigen Ethylengehalt, Ethylen-Vinylalkohol-Copolymer mit einem mittleren Ethylengehalt, Ethylen-Vinylalkohol-Copolymer mit einem hohen Ethylengehalt, Polyurethan und Polymilchsäure besteht.

17. Hydrogel oder Schwamm nach einem der Ansprüche 2 bis 16, wobei die freien Carbonsäuregruppen im partiellen Hyaluronsäureester ein Salz mit einem Metall oder einer organischen Base bilden.

18. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 17, wobei das Metall ein Alkali- oder Erdalkalimetall ist.

19. Hydrogel oder Schwamm nach Anspruch 17, wobei die organische Base Ammoniak oder eine organische Stickstoftbase ist.