DE583910C

DE583910C - Process for obtaining female sex hormone from urine

Info

Publication number: DE583910C
Application number: DEZ17641D
Authority: DE
Original assignee: CARL VAN EWEYK DR; BERNHARD ZONDEK DR
Current assignee: CARL VAN EWEYK DR; BERNHARD ZONDEK DR
Priority date: 1928-06-13
Filing date: 1928-06-13
Publication date: 1933-09-12

Description

Als Ausgangsmaterial für die Gewinnung des weiblichen Sexualhormons kommt nach den Arbeiten von Zondek und Aschheim der Harn von Schwangeren (bzw. trächtigen S Tieren oder sonst geeigneter HaEo₁ "wie z. B. auch der Harn von Frauen in den Wechseljahren, gegebenenfalls auch Harn von Männern) in Frage, in welchem das Hormon in einer solchen Menge enthalten ist, daß die Verarbeitung lohnt. Notwendig ist, den Harn so zu verarbeiten, daß unter Entfernung von störenden oder giftigen Substanzen das Hormon angereichert wird. Es gelingt nun, derartige Störsubstanzen unter gleichzeitiger Konzentrierung des Hormons dadurch zu entfernen, daß man das Hormon in ähnlicher Weise wie Fermente zusammen mit bestimmten Begleitsubstanzen, die an sich im Harn vorhanden sind, an Niederschläge ao fixiert, die in bestimmter Weise hergesteEt sein müssen. Zu diesem Zweck werden gemäß der Erfindung in dem schwach sauren Harn durch Zusatz von wasserlöslichen Schwermetallsalzen organischer Säuren Niederes schlage erzeugt. Während bei Innehaltung bestimmter Mengenverhältnisse die Filtrate dann vollkommen frei von weiblichem Sexualhormon sind, enthält der Niederschlag die gesamte Menge desselben. Zu den StörsuF-stanzen, die hierbei nicht an den Niederschlag fixiert werden, gehören auch die anderen im Harn enthaltenen Hormone. Es gelingt weiter, den größten Teil dieser Hormonmenge aus solchen Metallniederschlägen wieder in Freiheit zu setzen, wobei Lösungen von sehr hohem Hormongehalt und sehr geringem Gehalt an Verunreinigungen erhalten werden. Die Befreiung des Hormons aus solchen Metallniederschlägen gelingt, weil mit Metallsalzen anorganischer Säuren eine Fixierung des Hormons an den Niederschlag nicht erfolgt. Infolgedessen kann das Hormon aus dein zunächst gebildeten Niederschlag dadurch, in Freiheit gesetzt werden, daß der Metallniederschlag etwa durch Behandeln mit Schwefelwasserstoff in einen, anorganischen übergeführt wird, wobei dann das Hormon in Lösung geht.According to the work of Zondek and Aschheim, the starting material for the extraction of the female sex hormone is the urine of pregnant women (or pregnant S animals or other suitable HaEo ₁ "such as the urine of women during menopause, possibly also urine from Men) in which the hormone is contained in such an amount that it is worth processing. It is necessary to process the urine in such a way that the hormone is enriched by removing interfering or toxic substances. It is now possible to remove such interfering substances Simultaneous concentration of the hormone by fixing the hormone in a manner similar to that of ferments together with certain accompanying substances which are present in the urine on precipitates, which must be produced in a certain way. For this purpose, according to the invention in the weakly acidic urine by the addition of water-soluble heavy metal salts of organic acids Niederes strike e generates. While the filtrates are completely free of female sex hormones when certain proportions are maintained, the precipitate contains the entire amount of the same. The other hormones contained in the urine also belong to the disruptive substances that are not attached to the precipitate. It is also possible to set the greater part of this amount of hormones from such metal precipitates free again, solutions with a very high hormone content and a very low content of impurities being obtained. The release of the hormone from such metal precipitates succeeds because the metal salts of inorganic acids do not fix the hormone to the precipitate. As a result, the hormone from the precipitate initially formed can be set free by converting the metal precipitate into an inorganic one by treatment with hydrogen sulfide, in which case the hormone then goes into solution.

Eine weitere Möglichkeit, das Hormon aus dem Niederschlag in Freiheit zu setzen, besteht darin, daß der Niederschlag mit organischen Lösungsmitteln behandelt wird, wobei wegen der Oberflächenaktivität der verwendeten Substanzen das Hormon aus seiner adsorptiven Bindung gelöst wird. Durch, Verwendung verschiedener Lösungsmittel nacheinander gelingt es auch, eine sehr weitgehende Konzentrierung unter Ausfällung von Ballaststoffen zu erreichen.Another way to set the hormone free from the precipitation is there in that the precipitate is treated with organic solvents, wherein Because of the surface activity of the substances used, the hormone is released from its adsorptive bond. By using different solvents one after the other also succeed in a very extensive concentration with precipitation of Achieve fiber.

Bei Verwendung einer so gereinigten und konzentrierten Hormonlösung läßt sich durch. Wiederholung des Zusatzes organischer Schwermetallsalze das Hormon nicht von neuem in die Fällung bringen, so daß es möglich ist, auf solche Weise eine weitere Reinigung des Hormons zu erzielen.When using a hormone solution that has been purified and concentrated in this way, it can pass through. Repetition of the addition of organic heavy metal salts does not affect the hormone bring a new one into the felling so that it is possible to do another in this way Achieve cleansing of the hormone.

Beispiel.ιExample.ι

ιοί geklärter Harn von Schwangeren wird schwach angesäuert und mit etwa ι 1 Bleiessig verrührt. Der Niederschlag setzt sich im Verlauf einiger Stunden ab·, worauf die überstehende Flüssigkeit abdekantiert und der Niederschlag auf eine große Nutsche gebracht wird, worauf der größte Teil der anhaftenden Flüssigkeit durch Absaugen entfernt wird. DieFäEung wird in wenig Wasser suspendiert und mit Schwefelwasserstoff behandelt. Das Filtrat von dem gebildeten Schwefelblei wird dann noch ein zweites Mal mit Bleiessig behandelt. Nun wird das 'Filtrat des dadurchgebildetenNiederschlags gewonnen, welches von gelöstem Blei mittels Schwefelwasserstoff befreit wird. Die so erhaltenen Lösungen sind hell und enthalten das Hor-ιοί clarified urine of pregnant women becomes weakly acidified and mixed with about ι 1 lead acetic acid. The precipitate settles in the course of a few hours, whereupon the supernatant liquid is decanted and the Precipitation is brought to a large suction filter, whereupon most of the adhering Liquid is removed by suction. The fouling is done in a little water suspended and treated with hydrogen sulfide. The filtrate from the formed Lead sulfur is then treated a second time with lead acetic acid. Now the 'filtrate of the precipitate formed thereby, which of dissolved lead by means of hydrogen sulfide is released. The solutions obtained in this way are light-colored and contain the

mon. :mon. :

Example 2

Die Fällung des geklärten Harns erfolgt durch Zusatz von etwa 40 g Quecksilberacetat. Der Niederschlag wird, wie im Beispiel ι geschildert, gewonnen und mit Äther in großem Überschuß einige Stunden geschüttelt. Der.Äther wird abgetrennt, verjagt und der geringe Rückstand in Wasser aufgenommen, wodurch eine weitgehend gereinigte und sehr konzentrierte Hormonlösung entsteht.The clarified urine is precipitated by adding about 40 g of mercury acetate. The precipitate is, as described in the example ι, obtained and with ether shaken in large excess for a few hours. The ether is cut off, chased away and the small residue taken up in water, whereby a largely purified and a very concentrated hormone solution is created.

Example 3

Der in der gleichen Weise wie im Beispiel ι gewonnene Bleiniederschlag wird über Nacht mit Alkohol bei etwa 50° digeriert, der Alkohol abfiltriert, verdampft, der Rückstand in wenig Alkohol aufgenommen, die entstehende Lösung heiß filtriert und in überschüssiges Aceton eingegossen. Es. erfolgt eine voluminöse Fällung, welche sich glatt in Wasser löst und frei von Hormon ist. Das Filtrat wird eingeengt, mit etwa der doppelten Menge Essigester oder Aoetessigester oder Äther o. dgl. versetzt, .in den Scheidetrichter gebracht und nach Zusatz von etwa einem Drittel des Gesamtvolumens Wasser geschüttelt. Es bilden sich zwei Schichten, von welchen die wasserhaltige fast gar kein Hormon enthält. Die nicht wasserhaltige! Schicht wird abgetrennt, auf dem Wasserbad zur Trockne gebracht und der Rückstand in Wasser aufgenommen. Die auf diese Weise gewonnenen Hormonlösungen sind von besonderer Reinheit und besonders hohem Gehalt an Hormon.The lead precipitate obtained in the same way as in Example ι is over Digested with alcohol at about 50 ° overnight, the alcohol was filtered off and evaporated, the residue taken up in a little alcohol, the resulting solution filtered hot and poured into excess Poured acetone. It. voluminous precipitation takes place, which dissolves smoothly in water and is free of hormones. That The filtrate is concentrated with about twice the amount of ethyl acetate or aoetoacetic ester or ether or the like. Put in the separating funnel and after adding about one third of the total volume of water shaken. Two layers are formed of which the hydrous contains almost no hormone. The non-aqueous one! Layer is separated, brought to dryness on a water bath and the residue in Water absorbed. The hormone solutions obtained in this way are special Purity and particularly high levels of hormones.

Example 4

10 1 des geklärten Harns von Schwangeren werden nach schwachem Ansäuern mit etwa bis 60 g Silberacetat in Substanz oder in Lösung versetzt. Man verfährt im übrigen wie im Beispiel i. Aus dem Niederschlag kann das Hormon durch Einleiten von Schwefelwasserstoff nach Suspension im Wasser und Abfiltrieren der Schwefelsilberfällung in Lösung gewonnen werden. Der Schwefelwasserstoff wird aus der Lösung durch Durchleiten Von Luft oder Kohlensäure entfernt. Man erhält dann eine Hormonlösung, die sehr wenig gefärbt, klar und geruchlos ist und sich sehr weitgehend einengen läßt.10 1 of the clarified urine of pregnant women become after weak acidification with about up to 60 g of silver acetate in substance or in solution are added. Otherwise one proceeds as in the example i. From the precipitation can the hormone by introducing hydrogen sulfide after suspension in the water and Filtering off the sulfur silver precipitate can be obtained in solution. The hydrogen sulfide is removed from the solution by passing air or carbon dioxide through it. A hormone solution is then obtained which is very little colored, clear and odorless and can be narrowed very largely.

Claims

Patent claims:

1. Method of attracting the female Sex hormone from urine, characterized in that it is found in the urine of pregnant women or pregnant animals

or the like in the case of a weakly acidic reaction by adding water-soluble heavy metal salts Organic acid precipitates are generated that contain the hormone.

2. The method according to claim i, characterized in that the hormone from the precipitate formed by treating the precipitation with hydrogen sulfide o. The like. $ Is converted into the aqueous solution.

3. 'A method according to claim 1, characterized in that the recovery of the hormone from the precipitate by using substances with a low upper' flächenspannuhg. As solvents such as alcohols, esters Äthernj, chloroform, urethanes and the like., Takes place.

4. The method according to claim 3, characterized in that the impure solution of the hormone in an organic solvent by treating with others such solvents, if necessary, is repeatedly purified and concentrated. '

5. The method according to claim 1, characterized in that by making a second heavy metal precipitation no longer a precipitation of the hormone, but a further removal, in particular of coloring and smelling accompanying substances is effected. '