DE1004398B - Diagnostic preparation in tablet form for the detection of blood - Google Patents
Diagnostic preparation in tablet form for the detection of bloodInfo
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Description
DEUTSCHESGERMAN
Die Erfindung bezieht sich auf ein diagnostisches Mittel zum. Nachweis von okkultem Blut in tierischen Flüssigkeiten. The invention relates to a diagnostic agent for. Detection of occult blood in animal fluids.
Die Bedeutung des Nachweises von okkultem Blut in Flüssigkeiten tierischen Ursprungs, wie z. B. Urin, steht fest. Die gegenwärtig zur Verfügung stehenden Methoden zur Bestimmung derartigen Blutes sind jedoch nicht vollkommen befriedigend insofern, als entweder die Empfindlichkeit der angewandten diagnostischen Mittel nicht groß genug ist oder aber die angewendeten Arbeitsweisen nicht so genau reproduzierbar sind, wie dies wünschenswert wäre, bzw, sind die für den Nachweis benötigten Stoffe für allgemeine Anwendung, z. B. vom Arzt, nicht beständig genug.The importance of detecting occult blood in fluids of animal origin, such as B. urine fixed. However, the methods currently available for determining such blood are not perfectly satisfactory insofar as either the sensitivity of the diagnostic means used is not large enough or the working methods used cannot be reproduced as precisely as this would be desirable, or are the substances required for the detection for general use, e.g. B. from Doctor, not consistent enough.
Die Erfindung betrifft eine Tablette, die zur Verwendung beim Nachweis von okkultem Blut in Stoffen wie Urin u. dgl. oder in urinhaltigen Flüssigkeiten angepaßt ist. Diese Tablette ist den zur Zeit erhältlichen tablettierten Zubereitungen hinsichtlich mehrerer wichtiger Punkte überlegen, und zwar darin, daß die Reaktionszeit der vorliegenden Tablette für j ede gegebene Blutkonzentration sehr viel einheitlicher ist, und ferner darin, daß die Empfindlichkeit der Tablette innerhalb einer gegebenen Zeit überraschenderweise wesentlich größer ist.The invention relates to a tablet which is used in the detection of occult blood in substances such as urine and the like, or in urine-containing liquids. This tablet is the currently available tableted Preparations are superior to several important points, namely that the reaction time of the present tablet for each given blood concentration is much more uniform, and also in that the sensitivity of the tablet is within a given Time is surprisingly much greater.
Im großen und ganzen besteht die erfindungsgemäße Tablette aus einem Gemisch aus erstens einem Blutindikator, wie z. B. o-Tolidin, o-Toluidin, Benzidin, o-Tolidindihydrochlorid und ähnlichen Verbindungen, zweitens einem Oxydationsmittel vom Peroxydtyp, wie Natriumcarbonatperoxyd, Natriumperborsilikat, Strontiumperoxyd, Natriumpyrophosphatperoxyd, Bariumperoxyd, Magnesiumperoxyd und Harnstoffperoxyd, drittens einem Acetat, wie Calciumacetat, Natriumacetat, Kaliumacetat, Lithiumacetat u. dgl., viertens einem wasserunlöslichen Pigment oder Farbstoff und fünftens einer wasserlöslichen festen Säure, die stärker als Essigsäure ist, so daß sie mit dem vorgenannten Acetatsalz reagieren kann, um Essigsäure zu bilden. Beispiele für solche Säuren sind Zitronen-, Fumar-, Itakon-, Malein-, Äpfel-, Malon- und Mandelsäuren. Außerdem muß eine Brausekombination anwesend sein, die z. B. eine Säure in fester trockener Form und ein Carbonat oder Bicarbonat umfaßt, das vorzugsweise ein Erdalkali- oder Alkalicarbonat oder -bicarbonat ist. Die üblicherweise bei der Herstellung von Tabletten benutzten Verdünnungs- und Streckungsmittel werden ebenfalls gemeinsam mit den obengenannten Stoffen verwendet.By and large, the tablet according to the invention consists of a mixture of firstly a blood indicator, such as B. o-tolidine, o-toluidine, benzidine, o-tolidine dihydrochloride and similar compounds, second, an oxidizing agent of the peroxide type, such as sodium carbonate peroxide, sodium perborosilicate, strontium peroxide, Sodium pyrophosphate peroxide, barium peroxide, magnesium peroxide and urea peroxide, third, an acetate such as calcium acetate, sodium acetate, potassium acetate, lithium acetate and the like; fourth, one water-insoluble pigment or dye; and fifth, a water-soluble solid acid that is stronger than acetic acid so that it can react with the aforementioned acetate salt to form acetic acid. examples for such acids are citric, fumaric, itakonic, maleic, malic, malonic and mandelic acids. In addition, one must Shower combination be present, the z. B. an acid in solid dry form and a carbonate or bicarbonate which is preferably an alkaline earth or alkali carbonate or bicarbonate. Which is usually the case with the Diluents and extenders used in the manufacture of tablets are also shared with the materials mentioned above are used.
Das obige Gemisch wird in Tablettenform hergestellt, wobei jede Tablette vorzugsweise 130 mg des Gemisches
enthält und vorteilhaft eine Dicke von 0,3 cm und einen Durchmesser von etwa 0,6 cm hat. Zum Nachweis der
Anwesenheit oder Abwesenheit von okkultem Blut in einer Urinprobe wird ein Tropfen der Urinprobe auf ein
Stück trockenes Filterpapier gegeben und, wenn der Diagnostisches Präparat
in Tablettenform zum Nachweis von BlutThe above mixture is prepared in tablet form, each tablet preferably containing 130 mg of the mixture and advantageously having a thickness of 0.3 cm and a diameter of about 0.6 cm. To detect the presence or absence of occult blood in a urine sample, a drop of the urine sample is placed on a piece of dry filter paper and, if the diagnostic preparation is used
in tablet form for the detection of blood
Anmelder:Applicant:
Miles Laboratories, Inc.,
Elkhart, Ind. (V. St. A.)Miles Laboratories, Inc.,
Elkhart, Ind. (V. St. A.)
Vertreter: Dr.-Ing. F. Wuesthoff und Dipl.-Ing. G. Puls, Patentanwälte, München 9, Schweigerstr. 2Representative: Dr.-Ing. F. Wuesthoff and Dipl.-Ing. G. pulse, Patent Attorneys, Munich 9, Schweigerstr. 2
Beanspruchte Priorität:
V. St. v. Amerika vom 15. April 1954Claimed priority:
V. St. v. America April 15, 1954
Richard Spencer Nicholls und Dale Edwin Fonner,Richard Spencer Nicholls and Dale Edwin Fonner,
Elkhart, Ind. (V. St. A.),
sind als Erfinder genannt wordenElkhart, Ind. (V. St. A.),
have been named as inventors
Tropfen in das Papier eingesickert ist, wird eine der nach obiger Beschreibung hergestellten Tabletten in die Mitte des Tropfens gelegt und dann zwei Tropfen Wasser auf die Tablette gegeben. Ist die Untersuchung positiv, so erscheint auf dem die Tablette umgebenden Filterpapier ein Farbring, dessen Farbe zwischen einem sehr schwachen und einem tief dunklen Blau seh wankt, je nach der Blutkonzentration in der Probe. Je höher die Blutkonzentration, um so tiefer ist die Farbe, und umgekehrt. Die vorgenannte Methode zum Nachweis von okkultem Blut hat sich als besser erwiesen als die bisher nach dem Stand der Technik bekannten Verfahren, nicht nur hinsichtlich der Empfindlichkeit, die erreicht wird, sondern auch im Hinblick darauf, daß sie besser reproduziert werden kann.If drops seep into the paper, one of the tablets produced as described above will be placed in the middle of the drop and then put two drops of water on the tablet. If the examination is positive, so a colored ring appears on the filter paper surrounding the tablet, the color of which is between a very faint and a deep dark blue, depending on the concentration of blood in the sample. The higher the blood concentration, the deeper is the color, and vice versa. The aforementioned method of detecting occult Blood has proven to be better than the methods previously known in the prior art, and not only in terms of the sensitivity that is achieved, but also in terms of being better reproduced can be.
Im Zusammenhang mit dem Präparat und der Arbeitsweise der vorliegenden Erfiodttng ist es unbedingt erforderlich, daß das Gemisch neben dem Blutindikator und einem Oxydationsmittel ein Acetat enthält sowie eine wasserlösliche Säure, wie Weinsäure1, die Essigsäure freimachen kann, wenn sie mit einem Acetat zusammen-In connection with the preparation and the method of operation of the present invention, it is absolutely necessary that the mixture contains an acetate in addition to the blood indicator and an oxidizing agent, as well as a water-soluble acid, such as tartaric acid 1 , which can liberate acetic acid when combined with an acetate.
609 839/343609 839/343
gebracht wird, sowie einen Brausezusatz. Ohne die gleichzeitige Anwesenheit dieser Stoffe wird weder der Empfindlichkeitsgrad noch der Grad der Reproduzierbarkeit angemessen sein.is brought, as well as an effervescent additive. Without that the simultaneous presence of these substances does not affect either the degree of sensitivity or the degree of reproducibility be appropriate.
Da die Zusammensetzung des diagnostischen Präparates gemäß der den Fachleuten bekannten Verfahren verändert werden kann, sind folgende geeignete Zusammensetzungen angegeben:Since the composition of the diagnostic preparation is changed according to the methods known to those skilled in the art the following suitable compositions are given:
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
0-Tolidin 0-tolidine
Strontiumperoxyd .Strontium peroxide.
Weinsäure Tartaric acid
Calciumacetat ....Calcium acetate ....
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination von 0,5 bis 4,0, vorzugsweise 1,0 „ 5,0 „ 15,0, „ 9,0Shower combination from 0.5 to 4.0, preferably 1.0 "5.0" 15.0, "9.0
„ 20,0 „ 60,0, „ 30,0"20.0" 60.0, "30.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
o-Tolidin o-tolidine
Strontiumperoxyd . Bernsteinsäure ....Strontium peroxide. Succinic acid ...
Calciumacetat Calcium acetate
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination von 0,5 bis 4,0, vorzugsweise 1,0 „ 5,0 „ 15,0, „ 7,5Shower combination from 0.5 to 4.0, preferably 1.0 "5.0" 15.0, "7.5
„ 20,0 „ 75,0, „ 40,0"20.0" 75.0, "40.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
o-Tolidin o-tolidine
NatriumperborsilikatSodium perborosilicate
Bernsteinsäure Succinic acid
Calciumacetat Calcium acetate
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination von 1,0 bis 6,0, vorzugsweise 4,0 „ 8,0 „ 20,0, „ 10,0Shower combination from 1.0 to 6.0, preferably 4.0 "8.0" 20.0, "10.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 40,0"20.0" 75.0, "40.0
„ 20,0 „ 75,0, . „ 60,0"20.0" 75.0,. "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
o-Tolidin o-tolidine
Strontiumperoxyd .Strontium peroxide.
Itakonsäure Itaconic acid
Calciumacetat ....Calcium acetate ....
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination von 0,5 bis 4,0, vorzugsweise 1,0 „ 5,0 „ 15,0, „ 7,5Shower combination from 0.5 to 4.0, preferably 1.0 "5.0" 15.0, "7.5
„ 20,0 „ 75,0, „ 40,0"20.0" 75.0, "40.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0,, 20,0, „ 10,0"5.0," 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
Benzidinhydrochlorid StrontiumperoxydBenzidine hydrochloride strontium peroxide
Weinsäure Tartaric acid
Calciumacetat Calcium acetate
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination ..Shower combination ..
von 1,0 bis 5,0, vorzugsweise 1,0 „ 5,0 „ 15,0, „ 7,5from 1.0 to 5.0, preferably 1.0 "5.0" 15.0, "7.5
„ 20,0 „ 60,0, „ 30,0"20.0" 60.0, "30.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteileComposition of the reagent mixture parts by weight
0-Tolidindihydrochlorid0-tolidine dihydrochloride
Strontiumperoxyd Strontium peroxide
Weinsäure Tartaric acid
Calciumacetat Calcium acetate
Maisstärke Cornstarch
Brausekombination Shower combination
von 1,0 bis 5,0, vorzugsweise 1,0
„ 5,0 „ 15,0, „ 7,5from 1.0 to 5.0, preferably 1.0
"5.0" 15.0, "7.5
„ 20,0 „ 60,0, „ 30,0"20.0" 60.0, "30.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Zusammensetzung des Reagenzgemisches GewichtsteüeComposition of the reagent mixture by weight
o-Tolidin o-tolidine
Strontiumperoxyd .Strontium peroxide.
Itakonsäure Itaconic acid
Kaliumacetat Potassium acetate
Maisstärke Cornstarch
BrausekombinationShower combination
von 0,5 bis 4,0, vorzugsweise 1,0
„ 5,0 „ 15,0, „ 7,5from 0.5 to 4.0, preferably 1.0
"5.0" 15.0, "7.5
„ 20,0 „ 75,0, „ 30,0"20.0" 75.0, "30.0
„ 20,0 „ 75,0, „ 60,0"20.0" 75.0, "60.0
„ 1,0 „ 10,0, „ 5,0"1.0" 10.0, "5.0
„ 5,0 „ 20,0, „ 10,0"5.0" 20.0, "10.0
Die vorliegende Erfindung ist besonders brauchbar beim Nachweis von okkultem Blut bei Anwesenheit von Urin und besitzt, ganz im Gegensatz zu den früher bekannten diagnostischen Mitteln, eine so hochgradige Empfindlichkeit, daß noch 1 Teü Blut in 100 000 Teüen unzentrifugiertem Urin nachgewiesen wird.The present invention is particularly useful in the detection of occult blood in the presence of Urine and, in contrast to the previously known diagnostic agents, has such a high grade Sensitivity that 1 part of blood is still detected in 100,000 parts of uncentrifuged urine.
Die gemeinsame Wirkung der Brausekombination und der Acetonkomponente der vorliegenden Zusammensetzung soll die Empfindlichkeit, die Reproduzierbarkeit und die Geschwindigkeit des Untersuchungsverfahrens erhöhen. Dies wird an Hand der Untersuchungen erläutert, die mit den folgenden vier Gemischen durchgeführt wurden, wobei jedes als 130 mg schwere Tablette hergesteüt wurde:The combined effect of the effervescent combination and the acetone component of the present composition is intended to increase the sensitivity, reproducibility and speed of the examination process raise. This is explained on the basis of the investigations carried out with the following four mixtures each made as a 130 mg tablet:
4040
Tablette ATablet A
o-Tolidin 1,0 Gewichtsteüo-tolidine 1.0 parts by weight
Strontiumperoxyd 9,0 GewichtsteüeStrontium peroxide 9.0 parts by weight
Weinsäure 30,0 „Tartaric acid 30.0 "
Stärke 5,0 „Thickness 5.0 "
Talcum 5,0Talc 5.0
Tablette BTablet B
o-Tolidin 1,0 Gewichtsteüo-tolidine 1.0 parts by weight
Strontiumperoxyd 9,0 GewichtsteüeStrontium peroxide 9.0 parts by weight
Weinsäure 30,0 „Tartaric acid 30.0 "
Calciumacetat 60,0 „Calcium acetate 60.0 "
Stärke 5,0Strength 5.0
Talcum 5,0 ,,Talc 5.0 ,,
Tablette CTablet C
o-Tolidin 1,0 Gewichtsteüo-tolidine 1.0 parts by weight
Strontiumperoxyd 9,0 GewichtsteüeStrontium peroxide 9.0 parts by weight
Weinsäure 30,0Tartaric acid 30.0
Calciumacetat 60,0 „ 6s Calcium acetate 60.0 " 6s
Stärke 5,0Strength 5.0
Talcum 5,0 „Talc 5.0 "
Brausekombination 10,0 ,,Shower combination 10.0 ,,
(Weinsäure und Natriumbicarbonat) Tablette D(Tartaric acid and sodium bicarbonate) tablet D
o-Tolidin 1,0 Gewichtsteüo-tolidine 1.0 parts by weight
Strontiumperoxyd 9,0 GewichtsteüeStrontium peroxide 9.0 parts by weight
Weinsäure 30,0Tartaric acid 30.0
Calciumacetat 60,0 „Calcium acetate 60.0 "
Stärke 5,0 „Thickness 5.0 "
Talcum 5,0 „Talc 5.0 "
Brausekombination 10,0 „Shower combination 10.0 "
Wasserunlösliches Pigment oder Farbstoff 0,1 GewichtsteüWater-insoluble pigment or dye 0.1 part by weight
Wie festgesteüt werden kann, gehört die Tablette A zu der allgemeinen Art von früheren Mischungen; Tablette B ist eine Mischung wie Tablette A, der Calciumacetat zugesetzt wurde, und Tablette C hat dieselbe Zusammensetzung wie Tablette B, zu der Calciumacetat und eine Brausekombination hinzugefügt wurden.As can be noted, tablet A is of the general type of prior mixes; Tablet B is a mixture like Tablet A with calcium acetate added and Tablet C has the same Composition like tablet B to which calcium acetate and an effervescent combination have been added.
Tablette D hat dieselbe Zusammensetzung wie Tablette C, ist aber so abgewandelt, daß sie ein wasserunlösliches Pigment oder einen wasserunlöslichen Farbstoff enthält. Um der Tablette das Pigment oder den Farbstoff einzuverleiben, muß dieses lediglich trocken und fein zerteüt sein und wird dann innig mit dem übrigen Präparat vermischt, bevor das Material zu Tabletten verpreßt wird. Die erforderliche Pigmentmenge schwankt natürlich je nach dessen Farbintensität und Lichtundurchlässigkeit. Daher muß die Menge, die als die befriedigendste angesehen wird, für jedes gegebene Pigment durch Versuch bestimmt werden. Die erforderliche Menge ist jedoch im aUgemeinen nicht sehr groß, da schon die Anwesenheit von Spurenmengen ausreicht, um eine leichte Färbung in der Tablette zu bewirken. So wurde z. B. bei dem wasserunlöslichen Farbstoff D & C-Rot Nr. 35 (o-Nitro-p-Arylazo-2-naphtöl) gemäß: Code of Federal Register, Title 21, herausgegeben vom Unitet States Government, Division of Federal Registration, National Archives, Ausgabe 1949, S. 116, 120 und 122, gefunden, daß ungefähr 1 Teil auf 1000 Teüe des übrigen Präparates angemessen ist. Andere geeignete Farben sind D & C-GeIb Nr. 11 (2-(2-Quinolyl)-l, 3-indandion) und D & C-Orange Nr. 17 (l-(2, 4-Dinitrophenylazo)-2-naphtöl). Jedoch ist fast jedes unlösliche Pigment oder Farbstoff brauchbar, das scharf mit Blau kontrastiert,Tablet D has the same composition as Tablet C, but is modified to be water-insoluble Contains pigment or a water-insoluble dye. To the tablet the pigment or the dye to be incorporated, this only has to be dry and finely zerteüt and then becomes intimate with the rest of the preparation mixed before the material is compressed into tablets. The amount of pigment required varies of course, depending on its color intensity and opacity. Hence the amount that must be considered the most satisfactory considered to be determined by experiment for any given pigment. The required amount However, it is generally not very large, since the presence of trace amounts is sufficient to produce a to cause slight coloring in the tablet. So was z. B. in the case of the water-insoluble dye D&C red No. 35 (o-nitro-p-arylazo-2-naphthoil) according to: Code of Federal Register, Title 21, issued by the Unitet States Government, Division of Federal Registration, National Archives, 1949 edition, pp. 116, 120 and 122, found that about 1 part per 1,000 parts of the remainder Preparation is appropriate. Other suitable colors are D&C yellow No. 11 (2- (2-quinolyl) -l, 3-indandione) and D&C Orange No. 17 (1- (2,4-Dinitrophenylazo) -2-naphthoil). However, almost any insoluble pigment or dye that contrasts sharply with blue is useful,
außer wenn es auf andere Weise die Untersuchung stört, wie z. B. durch Reagieren mit einem anderen Bestandteil der Tablette. Diese Anwendung bezieht sich auf die allgemeinen Zusammensetzungen der Beispiele 1 bis 7, wie sie von der Tablette D dargestellt sind. Die besonderen Vorzüge dieser Zusammensetzungen werden besonders augenfällig durch Vergleich mit dem Verhalten der anderen Gemische der Tabletten A, B und C.unless it interferes with the investigation in any other way, such as B. by reacting with another ingredient of the tablet. This application relates to the general compositions of Examples 1 to 7 as they are from the tablet D are shown. The particular advantages of these compositions are particularly evident by comparison with the behavior of the other mixtures of tablets A, B and C.
Diese Tabletten wurden wie folgt geprüft;These tablets were tested as follows;
Blut wurde mit normalem Urin verdünnt, um Proben zu erhalten, die Blut in einer Konzentration von 1:10 000, 1:20 000 und 1:40 000 Teilen Urin enthielten. Um dieBlood was diluted with normal urine to provide samples to obtain the blood in a concentration of 1:10 000, Contained 1: 20,000 and 1: 40,000 parts of urine. To the
Untersuchung durchzuführen, wurde ein Tropfen der Probe auf ein flach auf einem weißen Tonteller ausgebreitetes Filterpapier gegeben. Nachdem der Tropf en in" das Papier eingesickert war, wurde eine Tablette in die-Mitte der benetzten Stelle gelegt und dann zwei Tropfend Wasser zugegeben, so daß diese auf die "Tablette fielen und über diese auf das Papier Hefen. Der Versuch wurde nach Ablauf von 2, 3, 4 und 5 Minuten geprüft, wobei die= Zeiten mit einer Stoppuhr gemessen wurden.To conduct the test, a drop of the sample was placed on a filter paper spread flat on a white clay plate. After the drop in " the paper seeped in, one tablet was placed in the middle of the wetted area and then two drops Water was added so that it fell onto the tablet and yeasts over it onto the paper. The experiment was carried out checked after 2, 3, 4 and 5 minutes, the times being measured with a stop watch.
Jede Tablette wurde viele Male mit jeder der drei Blutkonzentrationen untersucht. Die Ergebnisse sind in Tabelle I angeführt. Each tablet was tested many times for each of the three blood concentrations. The results are given in Table I.
Verthe
Ver
Verthe
Ver
Verthe
Ver
Das befriedigendere Verhalten der Tablette B gegenüber der Tablette A zeigt, daß der Zusatz von Calciumacetat die Empfindlichkeit bei der Untersuchung beträchtlich erhöht. Ferner zeigt sich, daß die Reaktionszeit der Tablette C einheitlicher ist als die der Tablette B und außerdem die Empfindlichkeit der Tablette innerhalb eines gegebenen Zeitraums ganz außerordentlich verbessert ist.The more satisfactory behavior of the tablet B compared to of tablet A shows that the addition of calcium acetate considerably increases the sensitivity of the examination. It also shows that the response time of tablet C is more uniform than that of tablet B and also the sensitivity of the tablet within is vastly improved over a given period of time.
In der Praxis wurde bei der Erfindung gefunden, daß mit dem Untersuchungsverfahren unter Anwendung von Filterpapier ein höherer Grad an Empfindlichkeit erreicht wird als mit anderen Methoden, wie z. B. wenn ein Tropfen der Probe direkt auf die Tablette gegeben wurde oder wenn die Reagenzmischung in Wasser aufgelöst und der Probe zugegeben wurde. Unter diesen letzteren Bedingungen verlief die Untersuchung mit Tablette A negativ bei einem Blutanteil von 1: 10 000 und wurde nur sehr langsam positiv bei einem Teil Blut auf 1000 Teile Urin. Die Empfindlichkeit irgendeines der Präparate ist gegenüber in Wasser gelöstem Blut viel größer als gegenüber solchem Blut, das in Urin enthalten ist. Anscheinend enthält Urin einen Faktor, der bei Anwesenheit von Blut und einem Peroxyd die Bildung von Farbe mit o-Tolidin, Benzidin usw. hemmt. Durch die Verwendung von Filterpapier wird anscheinend diese Schwierigkeit zum großen ' Teil umgangen und eine merklich erhöhte Empfindlich-= keit hervorgerufen.In practice it has been found with the invention that with the test method using Filter paper a higher degree of sensitivity is achieved than with other methods, such as e. B. if a drop the sample was added directly to the tablet or when the reagent mixture was dissolved in water and the Sample was added. Under these latter conditions, the test with tablet A was negative with a blood percentage of 1: 10,000 and was only very slowly positive for one part of blood per 1000 parts of urine. The sensitivity of any of the preparations is to Blood dissolved in water is much larger than that in blood contained in urine. Apparently Urine contains a factor that occurs in the presence of blood and a peroxide the formation of color with o-tolidine, Inhibits benzidine, etc. The use of filter paper appears to make this difficulty a major ' Partly bypassed and caused a noticeably increased sensitivity.
Die Tabletten^ und C wurden verglichen durch Untersuchungen mit dem Niederschlag, der durch Zentrifugieren von Urinproben, die sehr kleine Blutmengen ent- hielten, erhalten wurde. In diesem Fall wurde Blut mit normalem Urin verdünnt, um Blutkonzentrationen von/ !Teil Blut zu 50000, zu 100 000, zu 300 000 und zu 1 000 000 Teilen Urin herzustellen. Für die Untersuchung wurden 15 ecm von einer der Proben in einem konischen Zentrifugenglas bei mäßiger Geschwindigkeit abgeschleudert. Die überstehende Flüssigkeit wurde abgezogen und der verbleibende Niederschlag untersucht, indem ein Tropfen davon auf Filterpapier gegeben und dann weiter, wie bei der vorstehenden Untersuchung beschrieben, verfahren wurde. Die Ergebnisse einer Versuchsreihe sind in der Tabelle II aufgezeichnet.Tablets ^ and C were compared by investigations with the precipitate obtained by centrifuging urine specimens which separated very small amounts of blood. held, was obtained. In this case, blood was diluted with normal urine to reduce blood concentrations of / ! 50,000, 100,000, 300,000 and 1,000,000 parts of blood to produce urine. For the investigation 15 ecm were spun off one of the samples in a conical centrifuge tube at moderate speed. The supernatant liquid was drawn off and the remaining precipitate is examined by placing a drop of it on filter paper and then continuing, as described in the previous investigation, was proceeded. The results of a series of tests are in of Table II.
Tabelle II Untersuchungen mit dem Niederschlag nach dem ZentrifugierenTable II Studies on the precipitate after centrifugation
dernumber
the
4itiv in
4th
dernumber
the
4itiv in
4th
im UrinConcentration of blood
in the urine
37o pos
3
Aus den obigen Ergebnissen ist wiederum ersichtlich, daß mit der Tablette C positive Ergebnisse übereinstimmender und zuverlässiger erzielt wurden als bei Verwendung der Tablette B.Again, from the above results it can be seen that positive results with Tablet C are more consistent and were achieved more reliably than when using tablet B.
Ungeachtet der ausgezeichneten Ergebnisse, die wie oben beschrieben bei Verwendung der Tablette C erzielt werden, besteht hier eine geringe Schwierigkeit bei der Entscheidung, ob die Untersuchung bei Verwendung der Tablette C positiv oder negativ ausgefallen ist, wenn außerordentlich wenig oder kein Blut in der Untersuchungsprobe vorhanden ist. In diesen Situationen wirkt sich die subjektive Ansicht der das Ergebnis ab-ΐ nehmenden Person beträchtlich aus, da diese Person sich::Notwithstanding the excellent results obtained using the tablet C as described above There is little difficulty here in deciding whether to investigate using the Tablet C is positive or negative if there is extremely little or no blood in the test sample. In these situations affects the subjective view of the result from-ΐ the person taking it, as this person is:
nicht an eine deutlich bestimmte Farbänderung halten, -do not adhere to a clearly determined color change,
kann. ■"·.-■'.■can. ■ "· .- ■ '. ■
Wenn eine Tablette, wie sie in der Tablette C vorliegt,. JIf a tablet as it is in tablet C ,. J
in der oben beschriebenen Weise verwendet wird, muß die?::\* is used in the manner described above, the? :: \ *
Untersuchung als positiv angesehen werden, wenn au#:jExamination will be considered positive if au #: j
dem die reagierende Tablette umgebenden Papier eine Blaufärbung erscheint. Wenn jedoch die Tablette mit Brausezusatz reagiert, löst sich die Tablettensubstanz auf das Papier unmittelbar um die Tablette herum ab. An Stellen, wo die Menge auf dem Papier relativ klein ist, ist manchmal schwer zu entscheiden, ob man das Papier als blau geworden ansehen kann oder ob die blaue Farbe, die zu sehen ist, auf der abgelösten Substanz der Tablette beruht, da der Untersuchungsstoff dazu neigt, eine leicht graue oder sehr blasse blaue Farbe anzunehmen. Darüber hinaus kann, selbst wenn es keine Frage ist, was Tablettenstoff und was sauberes Papier ist, Verwirrung durch die Schatten entstehen, die die Tablette auf das Papier wirft, da diese oft eine hellgraue Schattierung und einen unregelmäßigen Umriß haben, da die Tablette beim Aufbrausen ihren ursprünglichen Umriß verloren hat.a blue color appears on the paper surrounding the reacting tablet. However, if the tablet with If the effervescent additive reacts, the tablet substance dissolves on the paper immediately around the tablet. At Places where the amount on the paper is relatively small is sometimes difficult to decide whether to use the paper as a turned blue, or whether the blue color that is seen is on the detached substance of the tablet because the test substance tends to take on a light gray or very pale blue color. About that in addition, even if there is no question of what is tablet pulp and what is clean paper, there can be confusion caused by the shadows that the tablet casts on the paper, as these are often a light gray shade and have an irregular shape because the tablet lost its original shape when it was effervescent.
Es wurde nun festgestellt, daß diese Schwierigkeiten beseitigt werden können und die Brauchbarkeit der Untersuchung dadurch bedeutend verbessert werden kann, daß man das Material der Testtablette mit einem Farbstoff anfärbt, der zu der Blaufärbung der positiven Untersuchung derart kontrastiert, daß die Kontrastfarbe in der Reagenzsubstanz verbleibt und nicht von selbst in das Papier ausläuft und so das Erscheinen der möglichen positiven Reaktion verdeckt. Um dies zu erreichen, sollte der zugesetzte färbende Stoff ein wasserunlösliches Pigment oder Farbstoff sein, so daß es nicht aus dem Reagenzmaterial, mit dem es vereinigt ist, ausgelaugt wird, wenn man alles zusammen benetzt, wie dies bei der Untersuchung beschrieben ist. Damit der färbende Stoff seine Funktion ausüben kann, nämlich klar abzugrenzen, wo sich, wenn die Untersuchung vollendet ist, die Reagenzsubstanz befindet, ist es außerdem wichtig, daß die Farbe dieses Stoffes sich deutlich von der blauen Farbe abhebt, die sich bei positivem Verlauf des Versuches auf dem Papier bildet. Aus diesem Grunde sind gelbe, orange oder rote Pigmente am vorteilhaftesten. Ferner sollten die färbenden Stoffe von guter Lichtundurchlässigkeit und Farbintensität bzw. Deckkraft sein, damit sie sich gut von Blau abheben. Darüber hinaus sollten sie jede Neigung des Untersuchungsstoffes zur Blaufärbung überdecken. It has now been found that these difficulties can be eliminated and the usefulness of the study can be eliminated can be significantly improved by adding a dye to the material of the test tablet colors that contrasts with the blue coloration of the positive examination in such a way that the contrasting color in the Reagent substance remains and does not leak into the paper by itself and so the appearance of the possible positive reaction hidden. To achieve this, the added coloring matter should be a water-insoluble pigment or dye so that it is not leached from the reagent material with which it is associated, if you wet everything together, as described in the investigation. So that the dyeing substance has its own Can exercise function, namely to clearly delimit where the reagent substance is when the investigation is completed it is also important that the color of this fabric stands out clearly from the blue color, which forms on the paper if the test is positive. This is why they are yellow, orange or red pigments most beneficial. Furthermore, the coloring materials should be of good opacity and Color intensity or opacity so that they stand out well against blue. In addition, they should have any inclination of the test substance to turn blue.
Der Vorteil des Färbens des tablettierten Gemisches in der beschriebenen Art und Weise kann durch die folgenden Aufzeichnungen erläutert werden.The advantage of coloring the tabletted mixture in the manner described can be demonstrated by the following Records are explained.
Es wurde eine Anzahl von Urinen erhalten, deren Beurteilung durch mikroskopische Untersuchung des Niederschlags dahingehend lautete, daß sie keine roten Blutzellen enthielten. Es konnte also erwartet werden, daß die Untersuchung negativ ausfiel, d. h. daß keine Blaufärbung des Papiers um das Tablettenmaterial herum erfolgen würde. Es wurde eine Versuchsreihe durchgeführt, bei der eine Anzahl von Laboranten beide Tablettenpräparate mit jedem der Urine untersuchte, jedoch in der Weise, daß sie die Versuche mit den beiden Tabletten nicht gleichlaufend ausführten und also nicht in der Lage waren, ihre Ergebnisse mit dem einen Präparat mit einem anderen an derselben Urinprobe zu vergleichen. Insgesamt wurden mit jedem Präparat 600 Versuche durchgeführt, wobei die Resultate nach Ablauf von 2 Minuten abgenommen wurden. Mit der Tablette C wurde die Untersuchung mit diesen negativen Urinen in 75 Fällen oder 12,5 °/0 der durchgeführten Versuche als wenigstens schwach positiv angesehen, während bei der Versuchsreihe, die mit dem ein rotes Pigment (wie oben bei Tablette D beschrieben) enthaltendem Präparat durchgeführt wurde, nur neun Versuche oder 1,5% der Gesamtversuche anscheinend etwas zeigten, was anders eis ein klar negatives Ergebnis war.A number of urines were obtained which were judged by microscopic examination of the precipitate to be free from red blood cells. It could therefore be expected that the test would turn out negative, ie that the paper would not turn blue around the tablet material. A series of experiments was carried out in which a number of laboratory workers examined both tablet preparations with each of the urines, but in such a way that they did not carry out the experiments with the two tablets at the same time and were therefore unable to compare their results with the one preparation to compare with another on the same urine sample. A total of 600 tests were carried out with each preparation, the results being recorded after 2 minutes had elapsed. With the tablet C the study with these negative urines in 75 cases and / or 0 of the experiments considered to 12.5 ° than at least weakly positive was, while in the series of experiments with a red pigment (as described above for tablet D described) containing Preparation was carried out, only nine experiments or 1.5% of the total experiments apparently showed something that was otherwise a clearly negative result.
Mit der Tablette D der Erfindung ist also ein verbessertes Mittel zum Nachweis von Blut in Flüssigkeiten wie Urin geschaffen, durch das erreicht wird, daß falsche positive Ergebnisse bei schwer nachweisbaren niedrigen Blutkonzentrationen oder bei völliger Abwesenheit von Blut tatsächlich vermieden werden. Hieraus ergibt sich eine deutliche Erhöhung der Zuverlässigkeit der Untersuchung. The tablet D of the invention is thus an improved one Means created for the detection of blood in liquids such as urine, through which it is achieved that false positive results with difficult to detect low blood concentrations or in the complete absence of Blood can actually be avoided. This results in a significant increase in the reliability of the examination.
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