CZ2001382A3

CZ2001382A3 - Use of camptothecin derivatives exhibiting reduced gastrointestinal toxicity

Info

Publication number: CZ2001382A3
Application number: CZ2001382A
Authority: CZ
Inventors: Herv Toutain; Magali Guffroy
Original assignee: Aventis Pharma Sa
Priority date: 1998-08-05
Filing date: 1999-08-03
Publication date: 2001-05-16
Also published as: IL141232A0; TR200100331T2; ATE217531T1; BG105216A; BG64641B1; AU771195B2; DE69901506T2; KR20010072228A; NO20010454D0; EA002917B1; WO2000007605A1; GEP20043254B; EE200100066A; ES2176009T3; HUP0103314A2; DE69901506D1; EP1102594B1; EE04264B1; PT1102594E; DK1102594T3

Description

Oblast techniky

Vynález se týká použití derivátů kamptothecinu nemající za následek sekundární účinky nesnášenlivosti gastrointestinálním traktem nebo omezení těchto účinků v gastrointestinální úrovni. Vynález se rovněž týká použití roztoků chloridu sodného pro snížení uvedených sekundárních gastrointestinálních účinků způsobených podáním derivátů kaptothecinu.

Dosavadní stav techniky

Je známo, že podání derivátů kamptothecinu vyvolává četné sekundární účinky. Deriváty kamptothecinu vyvolávají zejména v úrovni gastrointestinálního traktu nejčastěji zvracení a velmi urputné průjmy, které mohou vést až k přerušení léčení.

V evropském patentu EP 137145· jsou popsané deriváty kamptothecinu obecného vzorce

O • · · · • · ve kterém zejména R, znamená atom vodíku, atom halogenu nebo, alkylovou skupinu, X znamená atom chloru nebo skupinu

NR₂R₃, ve které R₂ a R,, mohou znamenat atom skupinu, . skupinu, substituované) ke případně zahrnující O, nebo alkylovou nachází v poloze 9, kamptothecinu jsou j ako alkylovou.· heterocyklickou nebo (případně dusíku., která ' nebo atomem skupinu, množiny vodíku které jsou stejné nebo odlišné, vodíku, případně substituovanou karbocyklickou skupinu které jsou případně substituované, alkylové skupiny tvořící s· kterému jsou vázány, heterocyklickou obsahuje další heteroatom zvolený z S nebo/a skupinu, 10 protirakovinovými inhibitory topoizomerázy, skupina

R₄ znamená atom a ve kuerém se nebo 11 kruhu

NR;, kde

X-CO-O.deriváty působícími jako inhibitory topoizomerázy, jejichž irinotecan, u kterého skupina X-CO-OΓ 4-(1-piperidino)-l-piperidino] karbonyloxy-skupinu, skupina A. Tyto činidly zástupce znamená účinnou látkou, která je obzvláště 'účinná při léčení tuhých nádorů a zejména rakoviny konečníku.

V patentové přihlášce EP 74256 jsou rovněž popsány další deriváty kamptothecinu uváděné rovněž jako protirakovinová činidla, zejména deriváty, které mají strukturu, která je analogická s výše uvedenou strukturou a ve kterých je skupina X-CO-O- nahrazena skupinou -X'R', ve které X'znamená O nebo S a R' znamená atom vodíku, alkylovou skupinu nebo acylovou skupinu.· Další deriváty kamptothecinu byly rovněž popsány například v patentových dokumentech EP 56692, EP 88642, EP 296612, EP 321 122, EP 325247, EP 540099, EP 737686, WO 9003169, WO' 9637496, WO 9638146, WO 9638449, WO 9700876, US 7104894, JP 57 116015, JP' 57 11674, JP 59 005188, JP 60 019790, JP 01 249777, JP 01246287, JP 91/12070 nebo v Canc.Res.,38 (1997) Abst.1526 nebo 95 (San Diego 12. až 16.duben), Canc.Res., 55(3), 603-609 (1995) nebo AFMC Int. Med. Chem. Symp. (1997 Abst.PB-55 (Soul - 27.červenec až 1. srpen).

Deriváty kaptothecinu jsou obvykle podávány injekcemi, ··· · • · zejména intravenózně ve formě sterilního rozteku nebo emulze. Deriváty kamptothecinu mohou být rovněž podávány perorálně ve formě pevných nebo kapalných kompozic.

Uvedené deriváty kamptothecinu mohou být rovněž podávány v kombinaci s dalšími protirakovinovými činidly,, jakými jsou například cisplatin, . oxaliplatin, Tomudex, Taxoter, 5-fluoruracil a inhibitory thymidilát-syntázy.

Bohužel mezi klinické sekundární účinky spojené s léčením za použití derivátů kamptothecinu patří zejména průjmy (úroveň 3 nebo 4), cholinergní syndrom, pocit nevolnosti nebo zvracení. Takto byly' u 38 % léčených pacientů pozorovány silné průjmy, které mohou ohrozit život pacienta v důsledku dehydratace nebo/a přidružené infekce.

V rámci eliminace nebo aáespoň omezení- intestinální toxicity způsobené podáním uvedené účinné použity různé strategie, avšak až

látky byly bezúspěšně.

Důsledkem'toho je, že deriváty kamptothecinu'jsou používány pouze velmi zkušenými onkology a pouze u určité kategorie nemocných, kteříjsou schopni léčení deriváty kaptothecinu snést.

Podstata vynálezu

Nyní bylo nově zjištěno a toto zjištění tvoří podstatu vynálezu, že ochrany proti gastrointestinálním ‘ lézám indukovaným léčením deriváty kaptothecinu lze dosáhnout podáním roztoku chloridu sodného. V důsledku této ochrany dochází ke specifickému omezení, nebo, dokonce k úplné eliminaci uvedených sekundárních gastrointestinálních účinků, aniž by přitom došlo k omezení systemické expozice uvedenou účinnou látkou nebo k omezení 'její protinádorové účinnosti.

• · chloridu sodného pro' nebo potlačeni indukovaných je činidlem, sekundárních

Předmětem vynálezu .je použití přípravu činidla určeného ke sníženi sekundárních gastrointestinálních účinků podáním derivátů kamptothecinu.'Podle^vynálezu určeným k omezení nebo potlačení' gastrointestinálních účinků indukovaných podáním kamptothecinu, vodný roztok chloridu sodného.

derivátů se dosáhne podáním roztoku

Uvedené ochrany sodného současně s podáním derivátu kamptothecinu nebo také podáním roztoku chloridu sodného několik dnů před podáním derivátu kamptothecinu a potom současně s podáním derivátu kamptothecinu.

Tento překvapující účinek má velmi příznivé důsledky a zejména umožňuje vyvarovat se přerušení léčení, ke kterému by jinak došlo v důsledku výše uvedených velmi vážných sekundárních gastrointestinálních účinků.

V rámci vynálezu je použitým roztokem chloridu sodného vodný roztok chloridu sodného, jehož koncentrace se pohybuj,e mezi 4 a 13 g/1. Tento roztok se podává perorálně.

Výhodně se jako vodný roztok chloridu sodného použije vodný roztok chloridu sodného s koncentraci 0,9 g/1.

Roztok chloridu sodného se připraví obvyklými způsoby rozpuštěním chloridu sodného ve vodě (přečištěná voda, například sterilní voda). Tento roztok může rovněž obsahovat také další činidla, jakými jsou zejména sladidla nebo aromatizující přísady.

Roztok chloridu sodného může být podáván v množství '5 až 10 ml/kg/ podání jednou nebo dvakrát denně 5 dnů před zahájením léčení až 1 den po ukončení léčení pro dobu léčení derivátem kamptothecinu trvající .1 den až 5 po sobě • · následujících dnů. V rámci jiného způsobu podání· se roztok chloridu sodného podává v množství 5 až 10 ml/kg/podání jednou nebo dvakrát denně po dobu léčení, výhodně v množství 10 ml/kg/podání dvakrát denně pro dobu léčení derivátem kamptothecinu 1 den až 14 po sobě následujících dnů. Výhodně se roztok chloridu sodného použije podle tohoto druhého způsobu podání.

ivát kamptothecinu nebo

Deri intravenózní injekcí,

V případě, že intravenózně, mohou rovněž obsahovat isotonizuj íci činidla (CPT-11) derivát kamptothecinu . příslušné. farmaceutické pomocné . činidla, a stabilizační se zejména pro intravenózní a 50 0 mg/m².

se látky, ' zejména emulgační .činidla, činidla. Výše uvedený podává ve formě roztoku v injekce v dávkách pohybuj podává kompozice smáčedla, dispergační irinotecan prostředí ících se

Deriváty kamptothecinu mohou být rovněž podávány perorálně ve formě pevných kompozic,· jakými jsou například tvrdé tobolky z želatiny nebo z polopevného hydrofilního materiálu. Tyto deriváty mohou být rovněž podávány ve formě tablet, pilulek, kapslí, prášků nebo granulí. Výhodně, mohou být perorálními kompozicemi tablety.

Ve všech těchto kompozicích je účinná látka několika inertními ředidly inertními přísadami, jakými smíšena zejména s jedním nebo nebo s jednou nebo několika jsou cukry, cukerné deriváty nebo hydrofilní makromolekuly, zejména sacharóza, laktóza, glukóza, maltóza, například pšeničný

D-fruktóza, sorbitol, škroby,. jako škrob, kukuřičný škrob nebo rýžový škrob, celulóza a její deriváty, jako například ethyl- nebo methylcelulóza, hydroxyethylcelulóza, hydroxypropylcelulóza, methylhydroxymethylcelulóza, me.thylhydroxypropylceloza nebo karboxymethylcelulóza, anebo gumy, jako například arabská guma, tragant, guarová guma, algináty, karraghenáty nebo dextrin, nebo proteiny, syntézní produkty, jako například polyvinylpyrrolidon, PEG s vysokou molekulovou hmotnosti nebo také minerální produkty, jako například koloidni siliky nebo silikáty.

Tyto, kompozice mohou obsahovat i jiné látky, jako například maziva, například stearát hořečnatý, nebo zapouzdřovací materiály určené pro regulované uvolňování účinné látky. Mohou být také podávány ve formě farmaceuticky . přijatelných roztoků, suspenzí, emulzí, sirupů a elixírů obsahujících inertní ředidla, jakými jsou voda nebo oleje, jako například parafinový olej. Tyto kompozice mohou rovněž obsahovat jiné látky než ředidla,, jako například smáčedla, sladidla nebo aromatizující látky, zejména cukry· nebo polyolý.

Je samozřejmé, že do rozsahu vynálezu spadají i soupravy obsahující formulaci derivátu . kamptothecinu a činidla na bázi chloridu, sodného a určené pro- omezení nebo úplné potlačeni sekundárních gastrointestnálnich účinků indukovaných podáním derivátů kamptothecinu.

V tomto ohledu vyhovují všechny vhodné formy takových souprav, přičemž lze jako .příklad takových souprav uvést zejména soupravu zahrnující dvě. lahvičky nebo několik lahviček, soupravu zahrnující lahvičku obsahující derivát kamptothecinu a ampuli nebo ampule obsahující činidlo .podle vynálezu, soupravu zahrnující infuzní vak obsahující derivát kamptothecinu a lahvičku nebo lahvičky nebo ampuli nebo ampule obsahujících činidlo podle vynálezu nebo soupravu pro perorální podání obsahující derivát kamptothecinu a jednu nebo několik lahviček nebo jednu nebo několik ampuli obsahujících činidlo podle' vynálezu. Je samozřejmé, že ve výše uvedených ampulích nebo lahvičkách se chlorid sodný může nacházet ve formě prášku určeného k rozpuštěni anebo ve formě roztoku, zejména ve formě roztoku připraveného pro bezprostřední použití. '

9·9· ··99 • 9 * ··

9 · 9·

0 · · ·· • · · 9 99

9 ·9 «9

Experimentální studie . ' 'f

Účinek dosažený vynálezem byl prokázán různými studiemi provedenými za použití myší a psů při dále uvedených podmínkách.

Příprava injikovatelného roztoku

Roztok pro injekce na' bázi trihydrátu irinotecan-hydrochloridu obsahující 20 mg/ml účinné látky se připraví za použití následujících složek použitých v dále uvedených množstvích:

trihydrát irinotecan-hydrochloridu		20 mg
D— s o ΐ τ^- o 1		45 mg
kyselina mléčná		0,9 mg
hydroxid sodný	q. s.	pH =3,5
voda pro injekční přípravky	q.s..	1 ml.

Experimentální studie za použití myší

1.1) Studie I

Vyhodnocení ochranného účinku roztoku chloridu sodného podaného perorálně na intestinálni toxicitu produktu CPT-11 podaného intravenózně

Myším samečkům CD1, kteří jsou staří 5 až 6 měsíců a kteří jsou drženi odděleně ve dvou skupinách po 10 jedincích,.se podá intravenózní injekce (20 mg/kg; rychlost podání 0,5 ml/min) vodného roztoku produktu CPT-11 v roztoku chloridu sodného s koncentrací 9 g/1 v dávce 40 mg/kg (asi 120 mg/nť tělesného povrchu) po dobu 5 po sobě následujících dnů počínaje dnem β a.konče dnem 10. Po této léčivé periodě následuje třídenní perioda bez léčení (až do dne 13) . V první skupině se myším navíc podá vodný roztok chloridu sodného s koncentrací 9 g/1' a v objemu 20 ml/kg/den (t.j. 10 ml/kg/podání, dvakrát denně v asi 10 hodinovém intervalu) a to perorálně po dobu 10 po sobě následujících dnech (den 1 až den 10) (skupina CPT-ll/NaCl). Zvířatům druhé skupiny se roztok chloridu sodného s koncentraci 9 g/1 perorálně nepodá.

Po dobu všech dnů se sleduje úmrtnost pokusných zvířat a klinické příznaky. Ve dnech 1, 6, 11 a 13 se zaznamená tělesná hmotnost. V den 13 se myši usrmtí a pitvají. Všem myším se odebere celý gastrointestinální trakt. Gastrointestnální trakt myší, které přežily až do konce sledovací periody, se podrobí mikroskpickému zkoumaní.

K úmrtnosti spojené s podáním produktu CPT-11 a zaznamenané ve dnech 6 a 7 dochází u ‘7/15 myší skupiny CPT-11 .a pouze u 2/10 myší skupiny CPT-ll/NaCl. Po podání produktu CPT-11 lze příležitostně pozorovat snížení pohybové aktivity, třes, křeče nebo/a dýchací potíže. Po celou dobu léčení produktem CPT-11 se pozorují ztráty tělesné hmotnosti u myší v obou skupinách. CPT-11 a CPT-ll/NaCl. K výraznější ztrátě hmotnosti dochází u myší skupiny CPT-11 ve srovnání s myšmi skupiny CPT-ll/NaCl, přičemž úbytek hmotnosti trvá i po ukončení léčení u myší skupiny CPT-11.

Charakter lézí pozorovaných ve střevu neodpovídá charakteru lézí, které lze očekávat při použití • 4 • 4

4 4 4 4 44 44

4 4 4 4 4 4 44 t«« 4 · 44 4·

44 4 4 4 4 4 44

444 4 44 .44444444 protirakovinových činidel. K těmto lézim dochází hlavně v tenkém střevu u myší obou skupin. Tyto léze globálně indikované jako mírné až výrazné se vyznačují zrátou krypty a zkrácením ochlupení. Tyto intestinálni léze' jsou méně vážné ve skupině myší CPT-ll/NaCl, kde jsou minimální ztráty, krypty pozorovány jen příležitostně.

V závěru lze konstatovat, . že perorálním podáním isotonického roztoku chloridu sodného (9 g/1) v množství 10 ml/kg/podání dvakrát denně (20 ml/kg/den) po dobu 5 dnů před a během intravenózního léčení produktem CPT-11 po dobu 5 dnů · se dosáhne eliminace intestinálních histopatologických lézí indukovaných podáním produktu CPT-11.

1.2.) Studie tt

Vyhodnocení ochranného účinku různých režimů perorálního podání roztoku chloridého sodného na intestinálni toxicitu produktu CPŤ-11

Myším samečkům CD1, kteří jsou staří 5 až 6 týdnů a kteří jsou drženi odděleně v pěti skupinách po 10 jedincích, se podá intravenózní injekce (20 mg/kg; rychlost podání 0,5 ml/min) vodného roztoku produktu CPT-11 v roztoku chloridu sodného s koncentrací 9 g/1. v dávce 40 mg/kg (asi 120 mg/m² tělesného povrchu) po dobu 5 po sobě následujících dnů počínaje dnem 6 a'konče dnem 10. Zvířatům skupiny 1 se dvakrát denně podá roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 v množství 10 ml/kgpodání (v, asi desetihodinovém intervalu) počínaje dnem 1 a konče dnem 10, zvířatům skupiny 2 se dvakrát denně podá uvedený roztok v množství 5 ml/kg/podání počínaje dnem 1 a konče dnem 10,' zvířatům skupiny 3 se dvakrát denně podá uvedený roztok v • · 9 množství 20 ml/kg/podání počínaje dnem 1 a konče dnem 10 a zvířatům skupiny se dvakrát denně podá uvedený roztok v množství 10 ml/kg/podání počínaje dnem 6 a konče dnem 10. Zvířatům skupiny 5 se nepodá uv.edený roztok, chloridu sodného s koncentrací 9 g/1.

Po dobu všech dnů se sleduje úmrtnost pokusných zvířat a klinické příznaky. Ve dnech 3, 6, 10 a 13 se zaznamená tělesná hmotnost. V den 13 se myši usmrtí a pitvají. Všem myším se odebere celý gastrointestinální trakt. Gastrointestnální trakt myší, které přežily až do konce sledovací periody, se podrobí · mikroskpickému zkoumání .

Klinické příznaky pozorované u zvířat všech'skupin jsou podobné klinickým příznakům pozorovaným, u zvířat při předcházející studii (studie I) . Úbytek tělesné hmotnosti je pozorován u zvířat všech skupin.·

'.Mikroskopické léze pozorované ve střevu odpovídají ležím, ke kterým' dochází při podávání protirakovinového činidla. Tyto střevní léze jsou .méně vážně u těch skupin zvířat, kterým byl perorálně podán roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1, než u skupiny zvířat, které byly ošetřeny pouhým podáním CPT-11. Naopak výskyt a závažnost intestinálních lézí jsou totožné u skupin zvířat 1 až 4', kterým, byl perorálně podán roztok . chloridu sodného s koncentrací 9 g/1 v různých aplikačních režimech.

perorálním podáním (9 g/1) jednou nebo objemech. (5 až 20

V závěru ' lze uvést, že se isotonockého roztoku chloridu sodného dvakrát denně v různých aplikačních ml/kg/podání) před intravenózním podáním produktu CPT-11 a nebo výlučně během tohoto podání v průběhu pěti· po sobě jdoucích dnů· dosáhne potlačení výskytu intestinálních histopatologických lézí indukovaných podáním produktu

CPT-11.

9

9 9 .Vyhodnocení účinku isotonického roztoku chloridu sodného podaného produktu hlavního

1.3)

Studie III metabolitu SN-38

Myší samečc přechovávání dvou skupin

0,5 sodného o okoncentraci ve se

CD1 (stáří 5 až 6 třech skupinách po intravenózní

999· ·· ·· • · 9 9 99

9 9 99 • · «··9

9 9 9 99 •999«99 a systemickou toxicitu produktu CPT-11 a jeho odděleně

Zvířatům množství chloridu 12 0 mg/m~ ml/kg v v roztoku týdnů) jsou jedincích, injekcí podá (20 ml/min) vodný roztok produktu CPT-11 mg/kg (asi sobě jdoucích g/1 v dávce tělesného povrchu) po dobu dnem a 'konče pěti

5.

po

Po této léčení následuje třídenní perioda bez Zvířatům jedné z těchto skupin se vodný roztok chloridu sodného množsuví 20 ml(kg/den (t.j. 10: ml/kg/podání, v asi desetihodinovém intervalu) a to v následujících dnech (den 1 až den 5) (skupina Zvířatům do aenne chloridu

Zvířatům druhé skupiny se nepodá perorálně sodného o koncentraci 9 g/1 třetí skupiny, podá g/i dvakrát kterým nebyl vodný roztok v množství sobě jdoucích dnech

Dalších 36 zvířat (den ve ml/kg/podání, to v pěti po skupina).

CPT-11/NaCl se použije CPT-11 a jeho hlavního

Všechny se dny se úmrtnost pěti po sobě CPT-11/NaCl). vodný roztok (skupina CPT-11). podán produkt CPR--11, chloridu - sodného pro stanovení metabolitu SN-38.

ml/kg/den (t.j. hodinovém intervalu) až den 5 (kontrolní skupinách CPT-11 a koncentrace produktu zaznamenávají klinické příznaky a Tělesná hmotnost pokusných zvířat se zjišťuje ve dnech 1, 3, 6 a 8. Vzorky plasmy pro toxikokinetickou analýzu se odebírají ve dnech 1 a 5. Myši se potom usmrtí a pitvají v den 8. Stanoví se relativní a absolutní hmotnosti ···· • 4

4«

·« ··· • · · « · · · • · · • · · · · brzliku, sleziny a varlat a všem pokusnými zvířatů se odebere úplný gastrointestinálni trakt, hrudní kostní dřen, brzlik, slezina varlata a nadvarlata, přičemž tyto orgány se podrobí mikroskopickému zkoumání.

Maximální plasmatické koncentrace (Cmax) a oblasti pod křivkou (AUC) naměřené pro produkt PCT-11 a jeho hlavni metabolit jsou ve dnech 1 a 5 stejné pro zvířata skupin CPT-11 a CPT-ll/NaCl.

v den

Snížení pohybové podáním produktu příležitostně pc CPT-11/NaCl, přič skupiny zvířat CP jsou pozorovány léčení produktem ukončení léčení.

s podáním produktu CPT-11 a sledovaná ul/ΙΌ zvířat ve skupině CPT-ll/NaCl. tivity a dýchací potíže 'spojené s ?-ll jsou po podáni produktu CPR-11 ovány u zvířat' skupin CPT-11 a vážnost těchto příznaků je větší u /NaCl. Stejné ztráty tělesné hmotnosti cupin CPT-11 a CPT-ll/NaCl v průběhu -11 a k těmto ztrátám dochází po

Mikroskopické léze pozorované na brzliku a střevu odpovídají mikroskopickým lézím, ke podávání protirakovinového činidla, pozorované na' brzliku zvířat skupin kterým dochází při

Mikroskopické léze

CPT-11 a CPT-ll/NaCl jsou.stejné a vyznačují se lymfoidní deplecí související se zmenšenou hmotností a velikostí tohoto orgánu. K mikroskopickým intestinálním lézím dochází převážně v tenkém střevu zvířat skupin CPT-11- a CPT-ll/NaCl, přičemž tyto léze se vyznačují ztrátou krypty

Méně závažné intestinální a atrofií ochlupení, pozorovány u zvířat léze jsou skupiny CPT-ll/NaCl ve srovnání se skupinou zvířat· CPT-11.

V závěru lze konstatovat, že perorální podání isotonického roztoku chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 dvakrát denně v množství 10 ml(kg/podání (20 ml/kg/den) v

4 4 44 ·« · ·· • 4 · 4 4 4 4 4 4

444 44 444

4 ··· 4 · · 44 ·44· 4 · to44 j_3 ...........

průběhu ihtravezního podáváni produktu CPR-11 po dobu- 5 dnů nemění systemickou expozici' produktem CPT-11 a jeho hlavním metabolitem SN-38, ' nemění toxicitu produktu CPR-11 vůči brzlíku, avšak selektivně' omezuje závažnost intestinálních lézí indukovaných produktem CPT-11.

1.4) Studie IV

Vyhodnocení účinku perorálního podání roztoku chloridu sodného na protinádorovou aktivitu produktu CPT-11 podaného intravenózn.ě

Myší samičky C3H/HeN mající prsní adenokarcinom MA16/Cimplantovaný subkutánně v den 1 se přechovávaní odděleně ve dvou skupinách, přičemž se jim podá intravenózní. injekce (20 ml/kg) vodného roztoku produktu CPT-11 v 5% glukóze v dávce 14,4 - 23,6 -38,0 nebo 61,3 mg/kg po dobu pěti po sobě jdoucích dní počínaje dnem 1 a konče dnem 10. Zvířatům jedné skupiny se perorálně kromě toho podá -vodný roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 v množství 20 ml/kg/den (t.j. 10 ml/kg/podání, dvakrát denně v asi desetihodinovém intervalu) po dobu deseti po sobě jdoucích dnů (počínaje dnem 1 a konče dnem 10) (skupina CPT-11/NaCl). Zvířatům druhé skupiny sé perorálně nepodá vodný roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 (skupina CPT-11).

Vyhodnotí se protinádorová účinnost produktu CPT-11 vztažená k maximální netoxické dávce. Dávka způsobující více než 20% úbytek hmotnosti nebo více než 20% výskyt úmrtnosti spojené s podáním produktu CPT-11- je považována za příliš toxickou. Vyhodnocené parametry zahrnují inhibici růstu nádoru (T/C) vyjádřenou v procentech,, zpoždění růstu nádoru (T-C) a počet usmrcených nádorových buněk (log ···· ·· 4» • · · ·» • · 4 ·4 • 4 · « ·* • · · · · · • 4 ♦··· ·· ·· · · • ·4 •· · · • ·· ·>· ·· mrtvých nádorových buněk [ Log tumor kill] - T-C/3,32 x doba zdvojeni množství nádorových buněk). Hodnota Log tumor kill 0,7 odpovídá minimální účinnosti, zatímco hodnota Log cell kill 2,8 odpovídá úrovni zvýšené účinnosti..

Pro zvířata skupiny CPT-11 činí maximální netoxická dávka produktu CPT-11 23,6 mg/kg/den, t.j. celková kumulovaná dávka 118 mg/kg, maximální ztráta tělesné hmotnosti, má hodnotu 10 % v den 11 a hodnota Log cell kill je rovna 1,7. Pro· zvířata skupiny CPT-11/NaCl činí maximální netoxická dávka produktu CPT-11 38,0 mg/kg/den, ť, j. celková kumulovaná dávka 190 mg/kg, maximální ztráta tělesné hmotnosti činí 14,1 % a hodnota Log cell kill má hodnotu 2,3.

konstatovat, že perorální podáni chloridu sodného (9 g/1) v množství 10 (2 0 ml/kg/den) po dobu 5 dnů produktu CPT-11 a v průběhu denn ml/kg/podání dvakrát před intravenózním podáni tohoto podání po dobu 5 dnů produktu CPT-11.

nesníží protinádorovou účinnost

2) Experimentální studie na

Vyhodnocení ochranného účinku roztoku chloridu sodného podaného perorálně na intestinální toxicitu produktu CPT-11 podaného intravenózně

Šest psích samiček beagle (stáří 10 až 12 měsíců) se udržuje odděleně ve dvou .skupinách po 3. zvířatech, přičemž se jim podá jediná intravenózní injekce (5 ml/kg v množství 2 ml/min) vodného roztoku produktu CPT-11 v roztoku chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 v dávce 20 mg/kg (asi 400 mg/m² tělesného povrchu) v den 6. Zvířatům jedné skupiny se kromě toho perorálně- podá vodný roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 v množství 20 mk/kg/den (t.j.

···· ·· • ·· • · ·.

· ·· • * · · ··99 ·· · ·· · • · ·· · · ·· • · · · ♦ · • · · · · ♦ · • · · · · · ·· ··♦ ·· ··· '10 ml/kg/podání dvakrát denně v asi 8 hodinovém Intervalu) po dobu sedmi po sobě jdoucích' dnů (den 1 až 7) (skupina CPT-11/NaCl) v době 5 dnů před podáním produktu PCT-11 až 1 den po podání produktu CPT-11.· Zvířatům druhé skupiny se perorálně . nepodá vodný roztok chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 (skupina CPT-llj . Zvířata se potom přechovávají bez jakéhokoliv¹ podání během 2 dnů po posledním podání chloridu sodného o koncentraci 9 g/1 (až do dne 9).

Všechny dny se sledují klinické příznaky a úmrtnost. Zaznamená se rovněž tělesná hmotnost během, předtestové. periody a ve dnech 5 a 9. Zvířata se potom usmrtí v den 9 a pitvají. Všem zvířatům se odeberou reprezentativní vzorky tkáně gastrointestinálního traktu a tyto vzorky se následně podrobí mikroskopickému zkoumání.

(při podávání produktu CPT-11 nebo bezprostředně po tomto podání), průjmy a mírná ztráta hmotnosti. Pozorování tlustého střeva odhalí zčervenání tkáně, které je četnější u- zvířat skupiny CPT-11' než u skupiny CPT-11/NaCl. Pozorované léze rezultují z primární' alterace proliferační sekce a projevují se střední až . výraznou degenerace sliznice u skupiny CPT-11 a minimální až mírnou degenerací sliznice u skupiny CPT-ll/NaCl.

V závěru lze konstatovat, že intravenózní jediná-dávkaproduktu CPT-11 u psích samiček v dávce 20 mg/kg vyvolává gastrointestinální toxicitu kompatibilní s antimitotickou účinností tohoto produktu. Perorálním podáním isotonického roztoku chloridu sodného (9 g/1) v množství 10 ml/kg/podání dvakrát denně (20- ml/kg/den) po dobu 5 dnů před podáním produktu CPR-11 až ' 1 den po podání produktu CPT-11 se ·····« φ» φ · · • φ · · φ · φ Φ Φ • ΦΦ φ · φ ΦΦ

ΦΦ φφφ Φ Φ φ φ φ φ · φ · · · φ · · •Φ φ · · ΦΦ φφφ ·· • · zabráni výskytu histopatologických lézí podáním produktu CPT-11.

indukovaných

Claims

Ρ A Τ Ε Ν Τ Ο V . É NÁROK Υ

1. Použití chloridu sodného pro přípravu činidla určeného pro omezeni nebo potlačení sek Undárních g a s t r o i n t e s t i n á 1 n i c h účinků způsobených podáním derivátu kamptothecinu, v y z n a č e né t i m, že se perorálně podá roztok chloridu sodného.
2. Použiti podle nároku 1, v y z nebo ekundárnicl· kamptothecinu je vodný roztok y z n a koncentraci

t. i m,
4. Použití podle nároku 3 roztok chloridu sodného má g/1.

í o derivátu podání kamptothecinu z nároků 3 chloridu sodného některého z nároků 1 až

4, se v y podá n ač

Cd — v y podá kamptothecinu nebo před a během podáni
5, se bud’ během φ «

Použití podle nároku 1, vyznačené t í m; že derivát kamptothecinu se podá injekčně nebo perorálně.