CS205025B2 - Process for preparing derivatives of glukosamine - Google Patents

Description

Předmětem vynálezu je způsob výroby nových glukosaminových derivátů, zejména glukosamino-3-alkanoyldipeptidů, především sloučenin obecného vzorce I,

\ <^{r X} C0~NH-CH~C0NH~CH (0) (I)

Rz vodík, alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxymethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu,

Re popřípadě esterifikovanou nebo amidovanou karboxylovou skupinu a

Ro popřípadě esterifikovanou nebo amidovanou karboxylovou skupinu, s tím, že alkylcvý zbytek ve významu symbolu R obsahuje více než 1 atom uhlíku, jestliže X znamená karbonylovou skupinu a zbytek R2 znamená methylovou skupinu, nebo jestliže X znamená karbonylovou skupinu, zbytek R2 znamená vodík a Re a R9 představují karboxylovou skupinu, jakož i jejich farmaceuticky použitelných adičních solí s kyselinami.

V další části se výrazem ,,nižší“ u zbytků radikálů nebo sloučenin rozumějí, pokud není uvedeno jinak, výhodně zbytky obsahující až 7, především až 4 atomy uhlíku.

Alkylovou skupinou je například skupina isopropylová, přímá nebo rozvětvená, v libovolné poloze vázaná skupina butylová, pentylová, hexylová nebo heptylová, a především skupina methylová, ethylová nebo n-propylová.

Popřípadě esterifikovanou nebo amidovanou karboxylovou skupinou je především karboxylová skupina samotná nebo karboxylová skupina esterifikovaná nižším alkanolem, jako methanolem nebo ethanolem, v němž znamená

X karbonylovou skupinu nebo sulfonylovou skupinu,

R alkylový zbytek s 1 až 18 atomy uhlíku nebo fenylový zbytek,

Ri vodík nebo alkylový zbytek s 1 až 5 atomy uhlíku nebo benzylový zbytek,

Rž vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,

R4 a Re vodík nebo acylový zbytek s 2 až atomy uhlíku,

205 0 3 nebo také karbamoylová skupina, ktei’á je na atomu dusíku nesubstituována nebo je monosubstituována nebo disubstltuována alkylovou skupinou, zejména nižší alkylovou skupinou, arylovou skupinou, především fenylovou skupinou, nebo aralkylovou skupinou, jako benzylovou skupinou.

Karbamoylová skupina může obsahovat také alkylidenovou skupinu, jako skupinu butylidenovou nebo skupinu pentylidenovoii. Karbamoylová skupina Ra může obsahovat na atomu dusíku také karbamoylmethylovou skupinu.

Acylovou skupinou je zejména acylová skupina organické kyseliny, zejména organické karboxylové kyseliny. Tak je acylovou skupinou zejména alkanoylová skupina, především s 2 až 18 atomy uhlíku, jako skupina acetylová nebo propionylová, nebo také skupina aroylová, jako 1-naftoylová, 2-naftoylová, a zejména benzoylová nebo halogenem, nižším alkylem, nižším alkoxylem, trifluormethylem, hydroxyskupinou nebo nižší alkanoyloxyskupinou substituovaná skupina benzoylová nebo naftoylová, nebo také acylový zbytek organické sulfonové kyseliny, například alkansulfonové kyseliny, zejména nižší alkansulfonové kyseliny, jako methansulfonové kyseliny nebo ethansulfonové kyseliny, nebo arylsulfonové kyseliny, zejména fenylsulfonové kyseliny, která je popřípadě substituována nižším alkylem, jako benzensulfonové kyseliny nebo p-toluensulfonové kyseliny.

Ve shora uvedených sloučeninách, ve kterých Rž znamená alkylovou skupinu, je zbytek amidu octové kyseliny Rz spojený s atomem kyslíku v poloze 3 glukosamidového zbytku opticky aktivní, tj. vyskytuje se v D-formě. Jestliže R7 neznamená vodík, je amino octová kyselina R7 přítomna v L-formě.

Nové sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou vždy podle druhu svých substituentů neutrálními, kyselými nebo zásaditými sloučeninami. Jestliže v těchto sloučeninách jsou přítomny nadbytečné kyselé skupiny, tvoří tyto sloučeniny soli s bázemi, jako amoniové soli nebo soli s alkalickými kovy nebo s kovy alkalických zemin, například se sodíkem, draslíkem, vápníkem nebo hořčíkem. Jsou-li však přítomny nadbytečné zásadité skupiny, pak takové sloučeniny tvoří adiční solí s kyselinami.

Adičními solemi s kyselinami jsou zejména farmaceuticky použitelné, netoxické adiční soli s kyselinami, jako s anorganickými kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou, bromovodíkovou, dusičnou, sírovou, nebo s fosfrečnými kyselinami nebo s organickými kyselinami, jako s organickými karboxylovými kyselinami, například s kyselinou octovou, propionovou, glykolovou, jantarovou, maleinovou, hydroxymaleinovou, methylmaleinovou, fumarovou, jablečnou, vinnou, citrónovou, benzoovou, skořicovou, mandlovou, salicylovou, 4-aminosalicylovou, 2-fenoxybenzoovou, 2-acetoxybenzoovou, em25 bonovou, nikotinovou nebo isonikotinovou, nebo s organickými sulfonovými kyselinami, jako například s kyselinou methansulfonovou, ethansulfonovou, 2-hydroxyethansulfonovou, ethan-l,2-disulfonovou, benzensulfonovou, p-toluensulfonovou nebo naftalen-2-sulfonovou, dále také jiné adiční soli s kyselinami, například takové, které se mohou používat jako meziprodukty, například к čištění volných sloučenin nebo к výrobě jiných solí, jakož i za účelem charakterizování, jako jsou například soli s kyselinou pikrovou, pikrolonovou, flaviánovou, fosfowolframovou, fosfomolybdenovou, chlorplatičitou, Reineckeho soli nebo soli s kyselinou chloristou.

Sloučeniny podle vynálezu mají cenné far- * makologické vlastnosti, zejména mají výrazný účinek při potencování imunity. Tento účinek lze prokázat na základě dále popsaných pokusů: _r

1. Potencování buněčné imunity in vivo:

zvýšení přecitlivělosti opožděného typu vůči ovalbuminu u morčat

Morčata (Pirbright) se v nultý den imunizují 10 mg ovolbumlnu v kompletním Freundově adjuvans injekcí 0,1 ml směsi obsahující adjuvans a antigen do obou zadních tlapek. Za 4 týdny poté se vyvolá kožní reakce intrakutánní injekcí 100 μ% ovalbuminu v 0,1 ml pufrovaného fyziologického roztoku chloridu sodného a kvantitativní vyhodnocení se provede po 24 hodinách na základě reakčního objemu vypočteného pomocí plochy erythemu a přírůstku tlóušfky kůže. Přírůstek reakčního objemu specifický pro antigen a pozorovaný po 24 hodinách (opožděná reakce) platí jako míra buněčné imunity. Ovalbumin je příliš slabým imunogenem, aby mohl indukovat opožděnou reakci buď sám jako takový, nebo v emulzi vody v oleji spolu s nekompletním Freundovým adjuvans (10 dílů roztoku ovalbuminu) v 0,9% roztoku chloridu sodného se smísí s 8,5 díllů Bayolu F (minerální olej] a 1,5 dílu Arlacelu A (monooleát mannitu), a pro účinné imunizování se musí přidávat v kompletním adjuvans, ke kterému byly přidány myko- * bakterie (5 mg usmrcených a lyofilizovaných M. butyricum na 10 ml Bayolu F/Arlacelu А). К důkazu účinnosti při potencování imunity testovaných látek se mohou ty- * to látky přimíchávat místo mykobakterií v dávkách od 10 do 100 μξ ke směsi antigenu v oleji.

Glukosaminpeptiidy podle tohoto vynálezu mají schopnost dokonale napodobit vliv mykobakterií při popsaném uspořádání pokusu a kvantitativně jej převyšují.

Statisticky významného potencování opožděné reakce vůči ovalbuminu lze dosáhnout také tím, že se sloučeniny popsaného typu nepřidávají do směsi antigenu v oleji, ale aplikují se subkutánně v dávkách od 10 do 100 μξ na 1 zvíře během několika dnů po imunizaci (například v nultý, 1., 2., 5., 6. a 7. den) v roztoku chloridu sodného.

Tím je ukázáno, že sloučeniny typu jsou schopny podstatně zvyšovat buněčnou imunitu, a to jak ve směsi s antigene-m samotným (účinek adjuvans v užším slova smyslu), tak i při časově a místně odděleném přívodu od injekce antigenu (systemické potencování imunity).

2. Potencování humorální imunity in vivo: zvyšování produkce protilátek proti albuminu hovězího séra u myší

Myši (kmen NMRI) se imunizují intraperi» toneální (i.p.) injekcí 10 μ% albuminu hovězího séra, prostého sraženin, v nultý den. Za 9, 15 a 29 dnů se odeberou vzorky séra a zjistí se obsah protilátek proti albuminu ho_e vězího séra pasivní hemaglutinací. V používané dávce je rozpustný albumin hovězího séra subimunogenní pro zvířata, kterým se podává, tzn., že není schopen vyvolat žádnou, nebo vyvolá jen zcela nepatrnou produkci protilátek. Dodatečné podání určitých imunopotencujících látek myším před podáním antigenu nebo po podání antigenu vede к vzestupu titru protilátek v séru.

Účinek tohoto podání se vyjadřuje hodnotou dosaženého stupně, tj. součtem log2 rozdílů titrů ve třech zmíněných dnech odběru krve.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou schopny při intraperitoneálním nebo subkutánním podávání dávky 100 až 300 mg/kg hmotnosti zvířete po pět po sobě následujících dnů (tj. ve dnech 0 až 4) po imunizaci albuminem hovězího séra zvýšit statisticky významně produkci protilátek proti albuminu hovězího séra.

Imunostimulační účinek uvedených sloučenin je na rozdíl od jiných bakteriálních imunoleptik (například LPS z Escherichia coli) závislý na antigenu. Injekce nových sloučenin způsobuje zvýšení titru protilátek proti albuminu hovězího séra jen u myší, které byly imunizovány albuminem hovězího séra, nikoli však u myší, které takto imunizovány nebyly. Je velmi pozoruhodné, * že subkutánní dávka uvedených sloučenin je právě tak účiná jako dávka při intraperitoneálním podávání, tzn., že pozorovaný imunopotencující účinek je systemický a • není závislý na tom, zda se stimulans podává stejnou cestou jako antigen, popřípadě zda se musí podávat společně ve směsi s antigenem, jako je tomu v případě klasických adjuvancií.

Popsanými pokusy se dokazuje, že sloučeniny popisovaného typu jsou schopny specificky zvyšovat i humorální imunitu, že zlepšují imunologickou odezvu na dráždění a že jejich imunopotencující účinky spočívají na systemickém aktivování imunologické soustavy.

3. Potencování humorální imunity in vitro:

účinek substitující vliv T-buněk při odezvě na protilátky u slezinných buněk myší na erythrocyty ovcí (SE)

Pro indukci odezvy na protilátky jsou nutné v četných případech lymfocyty z brzlíku (tzv. T-buňky). Tyto buňky spolupracují se vznikajícími lymfocyty, tvořícími protilátky (B-buňky), a pomáhají jim reagovat na stimulování tak zvanými T-závislými antigeny za současné proliferace, diferenciace a syntézy protilátek. Suspenze slezinných buněk kongenitálně athymických nu/nu myší neobsahují žádné funkční T-buňky a nemohou například tvořit in vitro za přítomnosti erythrocytů z ovcí žádné protilátky proti erythrocytům z ovcí. Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou s překvapením schopny nahradit funkčně T-buňky v takovýchto kulturách a umožnit tak tvorbou protilátek odezvu proti erythrocytům z ovcí. Přísada těchto látek к nu/nu kulturám slezinných buněk za přítomnosti erythrocytů z ovcí vede během 4 dnů к podstatnému vzestu-pu počtu buněk tvořících protilátky. Výsledky ukazují, že uvedené sloučeniny jsou schopny zvyšovat tvorbu humorálních protilátek in vitro a kompenzovat nedostatek T-buněk v systému.

4. Selektivní mitogenita pro B-buňky: vliv na· stimulaci proliferace v kulturách B-lymfocy-tů

Suspenze vysoce obohacených B-lymfocytů (buňky z lymfatických uzlin kongenitálně athymických nu/nu myší), jakož i z velké míry čistých nezralých nebo zralých T-lymfocytů (buňky brzlíku, popřípadě brzlíkové buňky z myší Balb/c, resistenční na kortison, tj. buňky persistentní po 48 hodinách po injekci kortisonu) se inkubují po dobu 3 dnů za přítomnosti testovaných sloučenin. Inkorporace H³-thyminu do lymfocytů během posledních 18 hodin pěstování kultury platí jako míra proliferační aktivity.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou mitogenní pro B-lymfocyty (tj. pro předchůdce buněk tvořících protilátky), nikoli však pro T-lymfocyty.

Jsou tedy scopny podpořit proliferaci lymfocytů účastnících se na humorální imunologické odpovědi.

5. Snášenlivost

Ačkoliv se u sloučenin popisovaného typu jeví potencující účinek u morčat například již po jediné dávce 0,05 mg na 1 kg při subkutánním podávání, a u myší po podání pěti dávek 10 mg na 1 kg subkutánně, nebyly pozorovány u myší ani při podání pěti dávek po 300 mg/kg intraperitoneálně žádné toxické jevy. Uvedené látky mají proto vynikající terapeutickou šíři.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou schopny jednak ve směsi s antigenem zvy205025

R~ C~H \ - .

lO-NH-CH-CONH-CH (CCyf šovat jeho imunogenitu, na . druhé straně zvyšují při systemickém podávání imunologickou . reaktivitu léčeného organismu. Přitom jsou uvedené sloučeniny schopny podporovat jak . buněčnou, tak i humorální imunitu a aktivují lymfocyty, které tvoří protilátky.

Nové sloučeniny se mohou tudíž používat jako adjuvancia ve směsi s očkovacími látkami k tomu, aby se zlepšil výsledek očkování a tím i ochrana proti infekci, zprostředkovaná humorální nebo/a buněčnou imunitou, a to proti bakteriím, virům nebo parazitům.

Dále se uvedené sloučeniny hodí ve směsi s nejrůznějšími antigeny jako adjuvancia při pokusné a průmyslové výrobě antisér pro terapii a diagnostiku a pro indukci imunologicky aktivovaných populací lymfocytů při buněčném přenosu.

Kromě toho · se mohou nové sloučeniny používat i bez současného přívodu antigenu k tomu, aby se podpořily již slabě probíhající imunologické reakce u lidí a zvířat. Tyto sloučeniy se hodí podle toho zvláště pro stimulování vlastní obrany těla, například při chronických a akutních infekcích nebo při selektivních (specifických na antigen] imunologických defektech, . jakož i pří vrozených, ale též po,zdeji získaných obecných [tj. nikoli na antigen sp-ec^hEických) imunologických defektních stavech, jak se s nimi lze .·setkat .ve stáří, v průběhu těžších primárních onemocnění a především po terapii ionizujícím zářením nebo hormony, které působí tak, že potlačují imunitu. Uvedené látky je možno tedy s . výhodou podávat také v · kombinaci s antiinfekčními. antibiotiky, chemoterapeutiky nebo při jiných . způsobech léčení, · aby se tak působilo proti · imunologickým poškozením.

Konečně jsou popisované látky vhodné také při obecné profylaxi infekčních onemocnění u lidí a · zvířat.

Vynález se týká zejména způsobu výroby sloučenin obecného vzorce i, v němž

X znamená karbonylovou skupinu,

R znamená nižší alkylovou skupinu nebo fenylovou skupinu a

Ri, Rz, R4, R6, R7, Rb a Ro mají shora uvedený význam, a jejich solí.

Zvláště vcenné jsou také sloučeniny, ve kterých Rz znamená vodík a ostatní zbytky mají shora uvedený význam, a jejich soli.

Zdůraznit nutno zejména sloučeniny obecného vzorce ii.

(II) v němž znamená

R nižší alkylovou skupinu nebo. fenylovou skupinu,

Ri vodík nebo nižší alkylovou skupinu,

Rz ·. vodík nebo methylovou skupinu,

R7 vodík, nižší alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku nebo hydroxymethylovou skupinu,

Re karbamoylovou skupinu a

Ra karboxylovou skupinu, s tím, že nižší alkylový zbytek R . obsahuje . více než 1 atom uhlíku, jestliže Rz znamená methylovou skupinu, a jejich . soli. ;

Především nutno uvést sloučeniny obecného vzorce II, v němž znamená

R nižší alkylovou skupinu nebo fenylovou skupinu,

Ri vodík,

Rz vodík nebo methylovou · skupinu,

R7 vodík, methylovou skupinu nebo . hydroxymethylovou skupinu,

Ra karbamoylovou skupinu a

R9 karboxylovou skupinu, s tím, že nižší alkylový zbytek ve významu R obsahuje více než 1 atom uhlíku, jestliže Rz. znamená methylovou skupinu, a jejich soli.

Nové sloučeniny obecného vzorce i a jejich farmaceuticky použitelné adiční soli s kyselinami . se podle tohoto vynálezu vyrábějí tím, že se sloučenina obecného vzorce III,

CHgORt

~^R1 (II) nh-x-R

COOH v němž

X, R a R2 mají shora uvedený význam a

Ri°, Rr a R6° maj významy zbytků Ri, Rd, popřípadě R6 nebo znamenají snadno odštěpitelné krycí skupiny, nebo derivát této sloučeniny kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce IV,

R7° ·Rs°

II

ÍHN—CH—CONH—CH (CH2 )2—.Rg^o(IV) v němž

R7⁰, Ra° a R9° mají význam symbolů R7, Rs a R9, s tím, že v těchto zbytcích . . přítomné karboxylové skupiny a popřípadě volné hydroxylové skupiny jsou chráněny snadno odštěpitelnými krycími skupinami, načež se popřípadě přítomné krycí skupiny odštěpí, načež - se popřípadě získané soli převedou na volné sloučeniny nebo se získané soli převedou na své fyziologicky použité adiční soli s kyselinami.

Kondezace se provádí například tak, že se sloučenina vzorce III nechá reagovat ve formě aktivované karboxylové kyseliny s aminoderivátem vzorce IV nebo se nechá reagovat kyselina vzorce III se sloučeninou vzorce IV, jejíž - aminoskupina je přítomna v -aktivované formě. - Aktivovanou karboxylovou skupinou může být například anhydrid kyseliny, výhodně smíšený anhydrid kyseliny, jako azid kyseliny, amid ' kyseliny, jako imidazolid, -is-oxazolid nebo aktivovaný ester. Jako aktivované estery lze zejména uvést: (kyanmethylester, karboxymethylester, p-nitrofenylthioes-ter, -p-nitrofenylester, 2,4,5--richlorfenylester, pentachlorfenylester, N-hydroxysukcinimidester, N-hydroxyftalimidester, 8-hydroxychinolmester, 2-hydroxy-l,2-díhydro-l-ethoxykarbonylchinolinester, N-hydroxypiperidinester nebo enolestery, které byly získány s N-ethyl-5-fenylisoxazoliiim-3'-sulfonáte.m.

Aktivované estery se mohou získat také popřípadě působením karbodiimidu za přídavku N-hydro-xysukcinimidu nebo nesubstituovaného nebo například halogenem, methylem nebo methoxy.lem substituovaného 1-hydroxybenzotriazolu-3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydrobenzo.-[d]-l,2,3-triazinu.

Aminoskupina je aktivována například reakcí s fosfitaminem.

Z metod reakce s ' -aktivovanými estery nutno - uvést zejména s N-ethyl-5-fenyli-soxazolium-3‘-sulfonátem (Woodwardovo činidlo K) nebo s 2-ethoxy-l,2-dihydro-l-ethoxy(karbonylchinolinem nebo karbodiimidem.

Snadno -odštěpitelnými krycími skupinami jsou skupiny známé z chemie peptidů, popřípadě z chemie cukrů. Pro karboxylové skupiny lze uvést zejména terc.butylovou skupinu, benzylovou skupinu nebo benzhydrylovou skupinu a pro hydroxylové skupiny zejména acylové skupiny, například nižší alkanoylové skupiny, jako skupinu acetylovou, aroylové skupiny, jako skupinu benzylovou, a především zbytky, které se odvozují od kyseliny - uhličité, jako je benzyloxykarbonyl, nebo alkyl, - zejména terc.butyl, .popřípadě nitroskupinou, nižší alkoxyskupinou nebo halogenem substituovanou benzylovou skupinu nebo tetrahydropyranylovou skupinu nebo popřípadě substituované alkylidenové zbytky, které Jsou vázány na atomy kyslíku v poloze 4 a 6. Takovými alkylidenovými zbytky jsou zejména nižší alkylidenový zbytek, především ethylidenový zbytek, isopropylidenový zbytek nebo propylidenový zbytek nebo také popřípadě substituovaný, výhodně v p-poloze substituovaný benzylidenový zbytek.

Tyto krycí skupiny se mohou odštěpovat o sobě známým způsobem. Tak je lze odstranit hydrogénolyticky, například - vodíkem v přítomnost:! katalyzátoru na bázi vzácného kovu, jako katalyzátoru na bázi paládia nebo platiny, nebo kyselou hydroýzou.

Používané výchozí látky jsou známé nebo se dají vyrábět o sobě známým způsobem. Tak lze sloučeniy vzorce III získat například reakcí příslušného v poloze 3 nesubstituovaného - cukru - s halogenem-R2-octovou kyselinou, přičemž - - R2 - má shora uvedený - význam, a jejími ' -estery - v přítomnosti - silné báze. Halogenem je výhodně - brom - nebo především chlor.

Získané sloučeniny se mohou o sobě známým způsobem převádět na své -soli, například reakcí získaných kyselých sloučenin s - hydroxidy alkalických kovů nebo s hydroxidy kovů alkalických zemin nebo reakcí získaných bazických sloučenin s kyselinami.

Shora popsané postupy se provádějí o sobě známými metodami, v nepřítomnosti nebo výhodně v -přítomnosti ředidla nebo rozpouštědla, popřípadě za chlazení nebo za zahřívání, za zvýšeného tlaku nebo/a v atmosféře inertního plynu, jako v atmosféře dusíku.

Přitom je možno přihlédnout ke všem· substituentům nacházejících se v molekule, popřípadě, zejména v přítomnosti snadno hydrolyzovatelných O-acylových zbytků, používat zvláště - šetrných reakčních podmínek, - jako jsou krátké reakční doby, používat mírně kyselých nebo zásaditých činidel v nižší koncentraci, používat stechiome1:rických poměrů, volit vhoclné katalyzátory, rozpouštědla, teploty -nebo/a tlakové podmínky.

Vynález ss týká také těch provedení postupu, při nichž se Jako výchozí látky - používá sloučeniny, která byla získána jako meziprodukt na libovolném - stupni postupu, - a provedou se chybějící reakční stupně, nebo se výchozí látka tvoří za reakčních podmínek - nebo- se- používá ve formě reaktivního derivátu nebo soli, které vedou - podle vynálezu ke sloučeninám označeným shora jako zvláště cenné.

Vynález se rovněž týká farmaceutických přípravků, které obs-ahují sloučeniny vzorce

0'5‘0'2 ř

I. U farmaceutických přípravků podle vynálezu jde o přípravky к enterálnímu; jako orálnímu nebo'rektálnímu, jakož i к parenterálnímu podávání teplokrevným, a které obsahují farmakologicky účinnou látku samotnou nebo společně s farmaceuticky použitelným nosičem. Dávka účinné látky je závislá na druhu teplokrevnéhe jedince, stáří a individuálním stavu; jakož i na· způsobu podávání:

Nové farmaceutické přípravky obsahují asi od 10 asi do 95 %, s výhodou- asi· od 20 asi· do 90 % účinně látký. Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu mohou být ve formě dávkovačích jednotek·, jako jsou například dražé, tablety, kapsle, čípky nebo ampulký’.·

Farmaceutické přípravky podle tohoto výnálězusě připravují postupy, které jsou¹ jako takové známé, například zá použití obvyklých· míčhacíčh, granulačních; dražírovacích, rozpouštěcích nebo lyofilizačních postupů. Kromě způsobů- použití zmíněných' ná str. 13' se dají připravit· 1 farmaceutické přípravky к orálnímu podávání tak; že se účinná složka smíchá' s pevným nosičem, získaná směs se granuluje, načež se směs, popřípadě granulát, je-li to žádoucí nebo nutné, zpracovává' dále po přidání' vhodných pomdcných látek’na tablety nebo základy dražé;

Vhodiiými· nosiči jsou zvláště plniva, jako jsioii' cukry,· například laktóza, sachárčza, mannitol nebo D-glucitol, celulózové a/nebo uhličitany vápenaté, jako je například trikálčiumfosfát nebo kalciumhydrbgenfosfát¹, dále pojivá, jako je škrobový maz za použitínhpř. kukuřičného, pšeničného, rýžového nebb bramborového škrobu, želatina, tragánť,· methylcelúloša, hydroxypropylmethylcelulbsa, sodná sůl .karboxymethýlcelulos-y а/пйЬО· pibilyvinylpyrrolidon; a/nébo — je-li to žádoúčí¹ — bubřidla, jako jsou výše uvedené škroby, dále karboxyrtiethyiškrob, zesítěný polyviiiylpyrrolidon, agar, alginové kyseliny nebo jejich soli, jako je sodná sůl, a pomocnými' prostředky jsdu v prvé řadě činidla regulující tekutost; dále mohou¹ farmaceutické přípravky obsahovat maziva’ jako je například’ kyseliúa křemičitá; talek, kyselina stearová nebo její soli- jako je sůl hořečna’· tá nébo vápenatá a/iiébo polyethylenglykol. Základy dražé še poVlékají vhodným povlakem, popřípadě vzdorujícím žaludečním šťávám, přičemž še používají kromě jiných koncentrovaně cukerné roztoky, které obsahují' popřípadě arabskou gumu, tálek, polyvinylpyrrolldbh; polýéthylenglykol a/nébo oxid ťitáničitý, dále roztoky laků ve vhodných organických- rozpouštědlech nebo směsích órgahičkých rozpouštědel nebo při přípravě pbvlaků, vzdorujících žaludečním šťávám, se používají roztoky vhodných celulošových přípravků, jako je acetylfťalát celulosy nebo liydroxypropylmethylftalát celulosy. Do tablet a do povlaků dražé je možno přidávat barviva nebo pigmenty, napří klad к identifikačním účelům nebo к vyznačení různých dávek účinné látky.

Dále uvedené příklady jsou určeny к bližšímu popisu· vynálezu, aniž však jeho rozsah' jakkoli omezují; Hodnoty teplot jsou uváděny ve stupních Celsia;

Příklad 1

Roztok 2,6 g benzylesteru benzyl-3-O-{D-l- [ L-l- [ D-l-karbamoy 1-3-kar boxypropyl) k‘aTbamoylethyl]karbamoyléthyl}-2-deoxy-2-proplonylamlno-a-D-glukopyranosidu v 67 mililitrech 60% kyseliny octové se po přidání 0,6 h 5% palladia na uhlí jako katalyzátoru hydrogenuje za normálního tlaku a za teploty místnosti, až ustane spotřeba vodíku· (asi 20 miriútj. Katalyzátor še odfiltruje, promyje· se malým množstvím 60%· kyseliny octové a· filtrát se zahustí ve vakuu· vodní vývěvy do sucha; Zbytek se překrystaluje ze směsi ethanolu a ethéru: Získá-· sé tím benzyl-3O-JD-l-[L-l-(D-l-karbam0yb3-karboxypropyl) karbámoylethyl ] karbamoylethylj-Z-déoxy-Z-propionylamino-a+D-glukopyranosid o t. t. 155 až 160 °C (za rozkladu) a* o optické otáčivosti [л']ь?®= + 1O5°+1° (dimethylfořmamid, c = 0,58).

Benzylester benzyl-3-O-[D-l-[ L-l- (D-l-karbamóyl-3-kar boxypropyl·) karbamoy-letlíyl].· karbamoylethylj-Z-deoxy+Z-propiohylamino-a-Dxglukópyranosidu použitý jako- výchozí sloučenina; se může- připravovat! takto:

V 200 ml methanolu se za přítomnosti 3 •mililitrů· triethyiamlnu rozpustí'4;1 g benzyl ^-amlno-áieO-benzyiidem-S-O+D^l-karboxyethyl)!-2-deoxy-á-D-glukopyranosidu a za mícháiií při teplotě místnosti se do roztoku přikapává 0,95'ml chloridu-kyseliny propionové. Reakční směs· se míchá 2 hodiny, potom'se zahustí do sucha a zbytek se rozpustí v 100 ml vody. Přidáním 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové, vychlazeného v ledu; se pH roztoku nastaví na hodnotu 4, vyloučený produkt se odsaje, promyje se vodou a suší se ve vakuu nad- hydroxidem sodným. Takto připravený benzyb4-6-Q-benzýlideii-3-Q-(D-l-karboxyethyl]-2-děoxy^2-proplonylamino-tfí-glukopyranosiď se dá- překrystalovat z' methanolu; má t. t. 257° a* [lai]_D ²⁰ = = -1-132^+1^ (dimethyiformamid; c=l;086):

К roztoku 3,1 g takto' získané sloučeniny v 150' ml atetonitrilu a 0,9 ml trlethyla-miňu se přidá 1,5 g N-ethyl-5-fenyl-isoxazoliúm-3‘-sulfonátu (Woodwardovo reagens К) a reakční směs se míchá za teploty místnosti až do úplného· rozpuštění' všech· složek·, což trvá asi 60 minut. Potom se přidá 2,2 g hydrochloridm χ-benzylesterú 1-amidu· kyseliny L-alanyl-D-glutamové· a· 0,9 ml trlethylaminu a' reakční směs se míchá 18 hodin za teploty místnosti. Rozpouštědlo se oddestiluje ve vakuu· vodní· vývěvy, ke zbytku se přidá voda, nerozpustný podíl se odsaje, důkladně

015:0>2^!5>

promyje vodou a* vysuší; Získá · se tak · , bem zyleste-r· · be^džyI^-^;(^^j(^-t^e^r^2^z^lideri-3-O-{I^--.-[L’14D-iaaTbamyyl-3-kar.boxypropyl J karbanioy-lethyl ] karbamoylethylI-Z-deoxyriŽíprOpionylaminoiaiDiglukopyranosidu · o' hodnotě Rf 0,45 ná tenkých vrstvách silikagelu < za · použití soustavy mcthylenchlorid/methanol 10/1. Látka se rozpustí v 200 ml 60% · kyselitiy octové a roztok se zahřívá 1,5 hodin na teplotu · 95 až 100 °C. Po ochlazení se · rozpouštědlo · oddestiluje, zbytek · se rozpustí · dvakrát'vždy v · malém · množství- vody, · jež · · se· oddesti-luje · · vždy · do-sucha) načež má · takto - získaný' benzylester benzyl-S^O-jD¹!- ·[ · i-Ί- (D-li Ikaгbamoy^ЗⁱkarbotfУpropyУ-jlaτbamoylI ethyl·] •karbamoylethyilI-2ideoxyi2*propiónyli amino-зD-glukαpyranotidu · po · kTyštalisaci .· z · methanolu t. t. 189° a [«Id²⁰— + '10(0+1° ' [dR methylformamid, c = 0,268).

Příklad 2

Roztok· 4 · g· benzylesteru· benzyli2iacetamii do—QjiL-l- ID<ikarbaihoyl-3ikarboxyprG-1 · pyl] kar^bambylethy 1 · ] kaгra·moylmethy l}i2i iCdeoxyiarD-ilukopyranosicdu v · 80· ml · methanolu se ' po· přidání O-4' g‘5%' · palladia na · uhlí · jako· · katalyzátoru · hydrogenuje za · normálního· tlaku- a za-teploty^; místnost» až · do skončení · spotřeby·’ vodíku. Potom- se · katalyzátor odfiltruje, promyje se malým · množstvím · methaholtn a filtrát se · zahustí ve vakuu· vodní vývěvy do sucha. Zbytek se rozpustí v 50 mililitrech destilované vody, přidá se 1' g· 5% palladia na uhlí jako katalyzátoru a roztok·- se hydrogenuje za · normálního tlaku · a za normální· teploty až · do · · skončení · spotřeby· vodíku. · Katalyzátor se odsaje,· promyje · se malým · množstvím· vody· a filtrát · se· zahustí do sucha. Takto- získaná · 2-acetamidoi3iO-i i{[ l-li [ D:i4<arbamoyI-3karboxypropyy) kari ba^^oylí^ttlh^l]k^álr^^m^c^y^a^^l^1^1ϊy'^;4Id^ěc^?^5I-I^iglUkoša^e·· suší· za vysokého vakua · nad · oxidem · fosforečným. · Látka· mái specifickou rotaci Mn²⁰ = з-00^о+1о (voda, c = 0,930).

Výchozí sloučenina se připravuje takto: K roztoku 9,5 g renzylI2-acetamido-4,6-Oi Irel'lzylideh-3-O-karroxym·ethylI2-deoxy-a-DIglukoyyráhotidu v· 400 ml aci^l^c^i^ii^i^^^ilu a 3 mililitry triethyiaminu · se · přidá 5,3 g Nieti hyR5-fenylieoxazollumi3^řItulfOnátu [..WcCwardovo · reagens· K), a reakční· směs se · míchá' za-’ teploty místnosti · až do vyčeření roztoku· Potom sei přidá 7,15·· g· ' hydrochloridu · У^п^у-!!^™ · 1-amidů· LIalahyRD-glutamové · kyseliny, · 3 ml ťriethylamiilu a 200 ml acetomtrilu a reakční směs se míchá dalších 18 hodin za teploty místnosti. Podíl benzylesteru rehzylI2IacetamidoI4,6-0Ibehzyliden-3-O-í[L·-l[-lD-l-karbamoyR3-larroxy·propyl]karbamoylethyl ] karramoylmethyl|-2idei oxyiaiD-g-lukopyťanosidu, který vykrystaluje;. se odsaje, promyje · se zpola · nasyceným' roztokem· hydrogenu.hličitahu sodného-· ve · vodě a vyšuší se; látka má· specifickou · rotaci · [a]_D2°= + 8Г+Г (dimethyfiormamid, · c =· = 0,816).

Roztok· 8 · g · této· · sloučeniny· v · 409 ml· · 60%· roztoku- kyseliny · . octové · se· zahřívá', hodinu · na · 89 -· °C. Po ochlazení · se··' roztok · zahustí · dosucha, ke zbytku Se· ¹ dvakrát · přidá vždy 50 · mililitrů vody a vždy se reakční směs· zahustí · do'·· sucha: · Zbytek,, který se · takto · získá v krystalickém stavu, se rozmíchá do malého- množství · vody, krystaly se · odsají · a vysušením .· se · získá; benzy-lester · benzyii2iaceti amid0-3iOi{ [ ·L·14D-lkarbamoyRЗⁱkar.boxyi propy-lj karbamo-y^léthyl ·^karramoylmethyllI I2>de·oxy-Dggukopyyranotl·du · -o t. t. 200 až · [ajd'²⁽0=· + 77°+l ? Idimethylformamid, c = -0,599): ”

Pří k had 3·

Roztok- 0,9 · g' benzylesteru · rehzylI2iacetI a-rnido-3-Ο- [+1- · lD+kaгbamoyl-3-larboxypropyl) karbamoyléthyi ] rkarbaaюylmeihg1I -2-deoxy-6-O-зteeroyl-a-Dglukopyranosidu · v· 40 · ml· methanolu·se· po-přidám · 0,2 · g '5’°/o·palladia? na; uhlí · jako · katalyzátoru · hydrogenuje · za normálního·· tlaku · a · za · normální · teploty· až- do· spotřeby · 22,4: mi · vodíku. Po' · odfiltrování · katalyzátoru, který· se · promyje methanol^em; sbi kapalný ' podíl zahustí · do sun · chu a· získ-á · se · tím benzyIhžacciamido-3-Oi i [L-1í l D+ikarbamoyli3-karboxypropy 1 ] i karbamoyléthyi ] larramoУlmethyR2-deoχ·yI · IUChsteaгΰyl-IaD-3lukΌpyranosl·cl- o [:«]d2°~= +33°+1° (chloroform, c ·=1,046).

Výchozí · sloučenina’ se příprav-ulei· taktoK roztoku· ·2,8 g<behzyletteru^,bentУl·R2-acetamido*3iO1 · [^^^lí^'lD-l^'-l^^^l^l^^al€^liI<^^l^^rЮ^x^y^I propyl i) karbamo^lé«thyl ] karbamoylmethy Ь2з deo·xyзa^D-ghUlopyгahOSidu · v 30 ml'·· pyridinu ' se · za- míchání · aiza vyloučení přístupu vlhkosti! přikapává· během · hodiny roztok' 1,4; gramů · chloridu. · kyseliny· stearové v · 7,5> ml · methylenchloridu a· reakční směs se· míchá · 40' hodin · za teploty· místnosti. Potom · se vlije reakční · směs do · ledové vody a vše se · extrahuje · methyJe.nchloridem. Organický podíl še· promýje· 2 · N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným vodou,· potom vodou, vysuší; se- · bezvodým-1 síranem horečnatým^afiltrái se · zahustí · do · sucha·· Zbytek se čistí chromatografováním na sloupci silikagelu za eluování· еШуттегет; kyseliny octové.

Získá · se · tím- benzylester · benzyR2iacetamii · do+Oi [ L-ι- lDIl-larbamoyl-3IkarroxyproI py 1) karbamo^iléthyl ] karbamoylmethy.l-2-dei oxyieiO^teanoyd-a^D.-gJukopyranosidu o. specifické rotaci · [-+²⁰=^;+30^ο+1° Ichloroform, · c =1,203).

Příklad 4

Obdobně podle postupu z příkladu 2 se kondenzuje · rehzyl·I2Ia'cetamldOi4,6з0-benzyI li-den^iO·- (D-lIka·rro.χypropyl · )i2ideoxyi«i iD-glukopyranosid · s hydrochlari-dem· у^ет zylesterm 1-amidu· L.-glyϋm-D-glutamové kyseliny · ai chránící· skupiny se odštěpí; · Získá·.

se tím 2-acetamido-3-O-(D-l-[ (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl J karbamoylmetliyl ] karbamoylpr opylj-2-deoxy-D-glukosa. [ a] d²⁰⁼= = -1-460+1° (H2O, c=0,630).

Výchozí sloučenina se připravuje takto:

K roztoku 60 g benzyl-2-acetamldo-4,6-O-benzyliden-2-deoxy-a-D-glukopyra.nosidu v

600 ml dimethylformamidu se přidá 10 g hydridu sodíku a reakční směs se míchá 1,5 hodiny pod dusíkem za teploty 45 °C. Po ochlazení na 0 °C se přidá 75 ml ethylesteru kyseliny DL-a-brommáselné, a reakční směs se míchá za teploty místnosti po dobu 1 hodiny, dále jednu hodinu za teploty 50 °C, neutralizuje se. potom kyselinou octovou, načež se rozpouštědlo oddestiluje ve vakuu vodní vývěvy. Zbytek se rozdělí mezi methylenchlorid a vodu, organická fáze se promyje ještě jednou vodou, načež se po vysušení síranem horečnatým rozpouštědlo oddesttluje. Zbytek, vysušený za vysokého vakua, se čistí chromatografováním na sloupci silikagelu. Eluováním směsí methylenchloridu a ethylesteru kyseliny octové (85/15) se získá ethylester be.nzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O- [D-l-karboxypropyl) -2-deoxy-a-D-glukopyranosidu o specifické rotaci [a]-+= = 113°+1° (chloroform, c = 0,5). Látka má po krystalizací ze směsi methylenchloridu a etheru t. t. 154 °C, hodnotu Rf 0,21; dále se získá ethylester benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O- (L-l-karboxypropyy) -2-deoxy-a-D-glukopyranosidu o hodnotě specifické rotace [«)d²0 — + 42°°+1 (chloroform, c = = 0,511), t. t. 240 (po krystalizaci z ethylesteru kyseliny octové): hodnota Rf = 0,04.

K roztoku 38,1 g ethylesteru benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O- [ D-l-karboxypropyl--2-deoxy-a-D-glukopyranosidu v

300 ml methanolu se přidá 100 ml 1 N roztoku hydroxidu sodného a reakční směs se udržuje hodinu na teplotě 60 °C. Po ochlazení se roztok zahustí na objem přibližně 150 ml. Koncentrát se zředí přidáním 400 ml ledové vody a přidá se 100 ml 1 ' N roztoku kyseliny chlorovodíkové vychlazeného ledem. Produkt, který vykrystaluje, se odsaje, promyje vodou a vysuší. Získá se tím benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzzHde n-3-0--D-l-karboxy ргору1 ) -2-deoxy-a-D-glukopyrano.sid o t. t. 210 až 213°C' a (a]_n ²⁰ = + 11(0±1° (dimethylformamid, c = 0,55-4').

Obdobným způsobem · se ' získá benzyl-2-acctamido-4,6-O-benzyИden-3-O-( L-l-karboxypгopyl)-2-dnoxy-a-D-glukopyranosid o t. t. 285 °C a [α]ο²⁰= +71° (dimethylformamid, c = 0,589).

Příklad 5

Obdobně jako v příkladu 1 se získá z ethyl-2-benzamido-2-deoxy-3-O-karbo.xymethyl-+D-glukopyranosidu a hydrochloridu α,γ-bis-methyl^amiidu L-alanyl-D-glutaimové kyseliny ethy l-2-eenzamído-2-deoxy-3-O- [ L-l-[D-l,3-bis-N-methylkare.amoylpropyl)karbamoylethyl] karbamoylmethyl-?-D-glukopyranosid o t. t. 233 až 240 °C, [a)D^2O—20° (methanol, c = 0,937). Při chromatografování na tenké vrstvě silikagelu má látka v soustavě chloroform a ethanol (7:3) R_f 0,38.

Příklad 6

Obdobně podle příkladu 1 se získá z 2-benzamido-2-deoxy-3-O-karboxymethyl-Dglukopyranosy 2-bnnzamido-2-dnoxy-°-O- [ L-1- (D-l,°-eis-N-methylkareamoylpropyl )kareamoylnthyl-D-glukopyranosa o t. t. 125· · až 132°C, [л]-^Я).= +24° (H2O, c = 0,93), hodnota R_f = 0,26 při chromatografování na tenké vrstvě silik^agelu v soustavě chloroform-ethanol (7 : 3).

P ř í k 1 a d 7

Obdobně podle příkladu 1 se získá z 2-eenzamido-2-deoxy-3-O-kareoxymethyl-D-glukopyranosy a hydrochloridu dlmethylesteru L-alanyl-D-glutamové kyseliny 2-benzamido-2-deoxy-3-O-[L-l-(D-l,3-bis-methoxykareonylpropyl) kar bamoylmethyl ] karbamoylmethyl-D-glukopyranosa, a to jako hydrát o t. t. 80 až 90°, [«]d²0 = +25° (methanol, c = 1,017). Při chromatografování na tenké vrstvě silikagelu má v soustavě chloroform-ethanol (9:1) látka hodnotu Rf = 0,23.

P ř íklad8

Obdobně podle příkladu 1 se získá z ethyl-2-ennzamido-2-dnoxy-°-O-kaгboxymethyl-/^D-glukopyгanosidu ethyl-2-ben'zamido-2-deoxy-3-O- [ L-l- (D-13-bis-methoxykarbonylpropyl) karbamoylethy 1 ] karbamoylmethyl-+D-glukopyranosid · o t. t. 127 až 135 “C, [ . 0j_D20 = —17° (CH3OH, c = 1,0-24). Látka má při chromatografování na· tenké vrstvě silikagelu v soustavě ethylester kyseliny octové-aceton (2:1) Rf 0,26.

Příklad 9

Obdobně podle příkladu 1 se získá 2-benzamido-2-deooχlЗ-□- [L-l· (D-l-N-karbamoyllnethylkareamoyl-°-kaгeoxypropyl)karbamoy lethyl ] karbamoy lmethyl-D-glukopyranosa. Jako výchozí sloučenina pro peptidovou část se používá 7-benzylester a a-glycinamidu N-terc.butoxykarbonyl-L-alanyl-D-glutamové kyseliny. Teplota tání 163—170 °C.

Příklad 10

Obdobně podle příkladu 1 se získá z ' hydrochloridu x-terc.butylesteru α-amidu L-a-aminovaleroyl-D-glutamové kyseliny 2-benzamido-2-deoxy-3-O- [ L-l- (D-l-kareamoyl-°-karboxypropy 1) karbamoylbutyl ] karbamoylmethyl-D-glukopyranosa. T. t. 114—115· °C;

[«)-2°=+34+4.° (c=0,89, H2O).

Příklad 11

Obdobně podle příkladu 1 se získá 2-benzamido-2-deoxy-3-O-[L-l-(D-l-karbainoyl-3-karboxypropyl) karbamoyl-2-methylpropyl]-l--karbamoy^}.methy]-D[glukopyranosa.

Rf = 0,3'5; (Směs chloroformu a ethanolu 1: :1).

Příklad 12

K roztoku 10,7 g benzylesteru benzyl-2-acetanildo-t^-O-benzyliden^-O-f (D-l-karbam'Oyll3-karboxypr opyl) kar bamoylmethylkarbamoylmethyl j^deoxy-a-D-glukopyranosidu v 200 ml ledové kyseliny octové a 100 mililitrů vody se přidají 2 g 5% paládia na uhlí a reakční směs se hydrogenuje 57 hodin za -atmosférického tlaku a za·- teploty místmístnosti. Katalyzátor ' se odfiltruje, promyje se vodou a filtrát se zahustí. Zbytek se rozpustí ve vodě, roztok se filtruje přes 100 ml iontoměniče Amberlit IR 120 v H+-cyklu a filtrát se lyofilisuje. 2-Acetaml·do-3-O-[(D-l-karbamoyl-3-karboxypr opyl) karbamoylmethylkarbamo ylmethy l]-2-deoxy-D-glukosa se krystaluje ze směsi methanolu a ethylesteru kyseliny octové. Sušením za vysokého ’ vakua se získá produkt -s obsahem 1/4 mol ethylesteru kyseliny octové, který má specifickou rotaci ^]γ]²⁰= + 27°+l° (voda, c = = 0,944).

Výchozí sloučenina, která se při postupu používá, se připravuje takto:

g benzylesteru kyseliny N-terc.butyloxykarbonylglyeyl-D-isoglutamové se rozpustí za teploty místnosti a za vyloučení přístupu vlhkosti ve směsi 18 ml 1,2-cdchlorethanu a 8,4 ml kyseliny trifluoroctové a - reakční směs se nechá stát 16 hodin. Potom se reakční směs zředí přidáním 200 ml -tetrahydrofuranu, za vnějšího chlazení se neutralizuje, -triethylaminem, načež se k ní přidá roztok 8,3 g benzyl-2-acetamido-4,6[O-benzylidesP-O-karboxymethyl^-deoxy-az-D-gliikopyranosidu v 100 ml tetrahydrofuranu a 2,52 mililitrů triethylaminu. Po dalším přidání 5,05 g 2-ethoxy-N-ethoxykaгbonyl-l,2[dihydrochinolinu se reakční směs míchá 24 hodin za teploty místnosti. Produkt, který vykrystaluje, se odsaje, promyje tetrahydrofuranem a etherem, načež se vysuší. Takto získaný benzylester benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O-[ (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl) karbamoylmethylkarbamoylmethyl ] -2-deoxy-_<acD-glukopyranosidu má specifickou rotaci [a]_D2°= +66'°°+l° [NN-dimethylformamid, - c = l,3O8).

Příklad 13

Roztok 4,5 g benzylesteru methyl-2-acetamidO[3-O-|[L-l-(D-l[k·arbamoyl-3-karboxypropyl) karbamoylethyl jkkaTbamoylmethylj^-deoxy-a-D-glukopyranosidu v 125 ml 50% vodného methanolu se po -přidání 1,0 g 5% paládia na uhlí hydrogenuje za normálního tlaku - -a za teploty místnosti až - do spotřeby 178 ml vodíku. Potom se katalyzátor odfiltruje -a filtrát se zahustí ve vakuu vodní vývěvy. Zbytek -sa rozpustí v - 50 ml destilované vody a roztok se lyofilisuje. Získá - se tak methyl-2-acetamido-3-O-{[L-ll(D-l-kaτbamoylc ^-karboxypr opyl) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl|-2-deoxy-crD-glllkopyranosid o s^pecⁱfic^ké rotaci [a]⁰²⁰ = +4⁹°+l° [vO'da^, c = = 0,939).

Výchozí sloučenina se připravuje takto:

8,1 g benzylesteru N-terc.butyloxykarbonУl[L-alanyl[D-isoglutamové kyseliny se za teploty místnosti a za vyloučení přístupu vlhkosti rozpustí ve směsi 8,1 ml ^-ЬгсЫстcthanu a 8,1 ml kyseliny trifluoroctové a roztok se ponechá stát 16 hodin. Reakční směs se zředí přidáním 203 -ml tetrahydrofuranu, neutralizuje se za vnějšího chlazení triethylaminem a k reakční -směsi -se přidá roztok 7,62 g methyl-2-acetamido-4,6-O-benzyli'de!nc3cO-^lkarboxχmethyll2-ιdeoxy-a-D-glUc kopyranosidu a 2,77 ml triethylaminu v 100mililitrech tetrahydrofuranu. Po přidání 5,0 gramů 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu - se - reakční - směs vyhřeje na 40- °C, za této teploty se míchá 30 hodin -a potom se ponechá stát dalších 24 hodin za teploty místnosti. Vyloučený produkt, tj. benzylester methyl-2-·a€etamido-4,6-O-benzyliden-3-O-{[ L-l- [D^l-kaτbamoyl-3-kaτboxypropyl) karbamoylethyl ] kar^bamoylmethyl}-2-deoxy[ -α-D-glukopyranosidu, se odsaje, promyje se tetrahydrofuranem a etherem, načež se vysuší. Látka má [abj²⁰=+58°+l° (N,N-dimethylformamid, c - = 1,125).

Roztok 10,5 g -benzylesteru methyl^-acetamidO[4,6-O-benzyliden[3[O-[{L-ll(D-l-karbamoyl[3[kaτboxypropyl jkarbamoylethyljkarbamoylmethy]-2-dsoxy-a-D[glukopyтanosidu v 320 ml ledové kyseliny octové se zředí za míchání přidáním 200 ml - vody a reakční směs se míchá 2 hodiny - za - teploty 50 až 55 °C. Po ochlazení se roztok zahustí do· -sucha, zbytek se ještě čtyřikrát zředí přidáním vždy 10O ml vody, která se vždy odpaří, a získá se tím benzylester methyl-2-acetamido-3-Ο-{ [ L-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypтopyl) karbamoylethyl jkarbamoylmethy l^-deoxy-wD-ghlkopyranosidu o specifické rotaci [ a ] d²⁰ — + - 64^lO+l° (N,N-diimethylfoirmamid, c = 1,268).

Příklad 14

Roztok 3,0 g benzylesteru - methyl-2-acetamido'-3[O-|[L-ll[D---karbamoyl-3-kaтboxypropyl) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl|-2-deoxy-6-O-sSearoyl-[aD-ghlkopyranosidu v 100 -ml ethanolu a 100 ml tetrahydrofuranu se po- přidání 0,6 g- 5% paládia na uhlí hydrogenuje za atmosférického tlaku a za teploty místnosti, načež se katalyzátor od205025 filtruje a filtrát se zahustí do sucha ve vakuu vodní vývěvy. Krystalickým zbytkem je methyl-2-acetamldo-3-0-([L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl ] karbamoylethyl ] karbamoylmethyl}-2-deoxy-6-O-stearoyl-a-D-glukopyranoisid o specifické rotaci [a]_D ²⁰= + + 50°+l° (Ν,Ν-dimethylformamid, c = 0,921).

Výchozí sloučenina se připravuje takto:

К roztoku 3,98 g benzylesteru methyl-2-acetamido-3-O-{[L-l-(D-l-karbamoyl-3-kařboxypropyl) karbamoylethyl jkarbamoylmethylj-2-deoxy-a-D-gIukopyranosidu v 40 ml absolutního pyridinu se za míchání a za vyloučení přístupu vlhkosti přikapává za chlazení na 0 až 5° během 3 hodin roztok 2,12 g chloridu kyseliny stearové v 20 ml 1,2-dichlorethanu, načež se reakční směs nechá stát 18 hodin za teploty místnosti. Reakční směs se zředí chloroformem, roztok se promyje vodou, ledem vychlazeným 2 N roztokem kyseliny chlorovodíkové a znovu vodou, vysuší ss síranem hořečnatým a zahustí do sucha. Produkt, tj. benzylester methyl-2-acetamido-3-O-([L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl) karbamoylethyl jkarbamoylmethylj-2-deoxy-6-O-stearoyl-a-D-glukopyranosidu, se krystaluje ze směsi ethanolu a etheru, [a]_d ²⁰=+22°+1° (chloroform, c = = 1,030).

Příklad 15

Roztok 6,8 g benzyl-2-acetamldo-3-O-([L-1- (D-l,3-dikarbamoylpropyl) kar bamoy 1ethyl ] -karbamoylmethyl)-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu v 200 ml 50% vodného methanolu se za přítomnosti 5% paládia na uhlí hydrogenuje 60 hodin za teploty místnosti a za atmosférického tlaku. Katalyzátor se odfiltruje a. filtrát se zahustí. Zbytek se rozpustí v 50 ml vody a roztok se lyofilizuje. Získá se tím 2-Qcetaimldo-3-O-[(L-l-(D-l,3-diikaribamoylpropyl ] karbamoylethyl ] karbamoylmethylj-2-deoxy-D-glukosa, obsahující 1,24 mol vody, a to jako bílý prášek o [a]D²⁰= +7°+ ±1° (voda, c —0,514).

Výchozí sloučeninu je možno připravovat takto:

К roztoku 9,1 g benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-0-karboxymethyl-2-deoxy-o-D-glukopyranosidu v 100 ml Ν,Ν-dimethylformamidu a 2,77 ml triethylaminu se přidá 5,0 gramů hydrochloridu diaminu L-alanyl-Dglutamové kyseliny a 5,1 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu, načež se reakční směs ponechá stát 48 hodin za teploty místnosti. Po oddestilování rozpouštědla se zbytek extrahuje důkladně etherem a vodou a po vysušení se překrystaluje ze směsi chloroformu a methanolu, [a]_D ^2Q= + + 83°+l° (Ν,Ν-dimethylformamid, c = 0,531).

Roztok 4 g benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O-[ [ L-l- (D-l,3-dikarbamoylpropyl) karbamoylethyl ] kar bamoylmethyl]-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu v 120 ml ledové kyseliny octové se zředí přidáním 80 ml vody a vše se míchá 3 hodiny při teplotě 60 °C. Reakční směs se ochladí, zahustí, zbytek se třikrát po sobě zředí přidáním 100 ml vody, která se vždy oddestiluje. Takto získaný benzyl-2-acetamido-3-O-([L-l,3-dikarbamoy lpr opyl) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl}-2-deoxy-a-D-glukopyranosid se překrystaluje z methanolu. Čistá látka má t. t. 223 až 225 °C.

Příklad 16

Roztok 5,7 g benzylesteru benzyl-2-acetamido-3-0-{[D-l-(D-l-karbamoyl-2-karboxypropyl)karbamoylmethyl]karbamoylpropylj-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu v 100 ml ledové kyseliny octové se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí za atmosférického tlaku a při teplotě místnosti. Po odfiltrování katalyzátoru se filtrát zahustí, zbylá 2-acetamido-3-0-(D-l-[ (D-l-karbamoyl-3-karboxypropy 1) kar bamoylmethyl ] karbamoylpropylj-2-deoxy-D-glukosa se rozpustí v 50 ml vody a roztok se lyofilisuje. Takto získaná látka má specifickou rotaci [a]_D ^{20 =} = +46°+l° (voda, c = 0,630).

Použitá výchozí sloučenina se připravuje takto:

Ve směsi 5,1 ml 1,2-dichlorethanu a 5,1 ml kyseliny trifluoroctové se rozpustí za teploty místnosti a za vyloučení přístupu vlhkosti 5,1 g benzylesteru N-terc.butyloxykarbonylglycyl-D-isoglutaminu a roztok se ponechá stát 16 hodin. Roztok se zředí přidáním 100 ml tetrahydrofuranu, zředěný roztok se neutralizuje za vnějšího chlazení triethylaminem, načež se přidá roztok 6,3 g benzyl-2-acetamido-4,6-0-benzyliden-3-0- (D-l-karboxypropyl) -2-deoxy-a-D-glukopyranosidu a 1,8 ml triethylaminu v 100 ml tetrahydrofuranu a 3,2 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Za 24 hodin se reakční směs zahustí do sucha a zbytek se rozdělí mezi ethylester kyseliny octové a vodu. Organická fáze se ještě promyje 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného a znovu vodou, načež se odpaří. Zbylý benzylester benzyl-2-acetamido-4,6-O-benzyliden-3-O-[D-l- [ (D-l-karbamoy 1-3-kar boxy propyl) karbamoy 1methyl ] karbamoylpropylJ-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu se překrystaluje ze směsi tetrahydrofuranu a etheru. Látka má specifickou rotaci [α]_ο ²⁰=+76°+l° (N,N-dimethylíormamid, c = 0,457).

Mírnou hydrolysou ve slabě kyselém prostředí se získá z uvedené látky v prostředí

60% kyseliny octové benzylester benzyl-2-acetamid'0-3-0-(D-l- [ (D-l-karbamoyl-3-k'arboxypropyl )kar bamoy lmethy 1 ] karbamoylpropyl)-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu, který se překrystaluje ze směsi methanolu a etheru. Látka má t. t. 180 až 185 °C [a]_D ²⁰ = +87°+l° (methanol, c = 1,035).

Příklad 17

Ve směsi 4 ml kyseliny trifluoroctové a 4. mililitrů 1,2-dichlorethanu se rozpustí 4 g benzylesteru N-terc.butyloxykarbonyl-L-alanyl-D-isoglutaminu při teplotě místnosti a za vyloučení přístupu vzdušné vlhkosti a reakční směs se nechá stát 16 hodin. Potom se reakční směs zředí přidáním 30 ml 1,2-dichlorethanu, neutralizuje se za vnějšího chlazení triethylaminem, načež se přidá roztok 3,7 g benzyl-2-acetamido-3-O-karboxymethyl-2-deOxy-Q-D-glukopyranosidu s 1,38 ml triethylaminu ve 100 ml tetrahydrofuranu. Po přidání 2,6 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolinu se reakční směs nechá stát 24 hodin za teploty místnosti, načež se zahustí do sucha. Zbytek se rozpustí ve směsi chloroformu a methanolu 9 :1, tento roztok se . promyje vodou, 2N .roztokem; kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného s vodou, načež se rozpouštědlo oddestiluje. Takto získaný benzylester benzyl-2-acetam'do-3-O{[L-l-karbamoyl-3-kairboxypr opy 1) karbamoylethyl] karbamoy lmethylJ-2-deoxy-a-Dklukopyranosidu se překrystaluje z ethanolu. Látka má teplotu tání 208 -až 212 °C, [a]_D ²⁰= +77°±7° (N,N-dlmethylformamid, c = 0,546).

Po odštěpení obou benzylových zbytků hydrogenolysou, jak je to popsáno· v příkladu 2, se získá 2-acefainido-3^-Oj [-1-karbamoyl-3-karboxy propyy) karbamo^^iethyl ] -karbamoyl·methy1-2-dleoxy-D-glykosa. [a]D^2<0=4-lO°+1° (voda, c = 0,892).

Příklad 18

Roztok 3,8 g dimethylesteru benzyl-2-acetamido-3-O-[ [ L-l- (D-l,3-dika-boxyp-opyl ] k-arbamoylethyl ] karbamoylmethy--2-deoxy-o-glukopyranosidu v 100 ml methanolu se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí za atmosférického tlaku a za teploty místnosti. Po skončené absorpci vodíku se katalyzátor odfiltruje a filtrát se zahustí do sucha. Zbytek se rozpustí v 70 ml vody .a roztok se lyofilizuje. Takto získaná pěna představuje dimethylester 2-acetamido-3-O-[[ L-l- (D-l,3-dikarboxypropyl Jkarbamoylethyl j karbamoy lmethyl|-2-d.eoxy-D-glukosy o· specifické -rotaci [a]D²⁰=+23°+l° (voda, c = 0,814).

-D-glutamové kyseliny a 6,95 g 2-etho.xy-N-ethoxykarbonyM,2-dlZzdrocZinolizu, načež se reakční směs nechá stát 20 hodin za teploty místnosti. Po oddestilování rozpouštědla se zbytek rozpustí v chloroformu a organický roztok se promyje vodou, 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, znovu vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného a opět vodou. Po vysušení síranem hořečnatým se filtrát zahustí do · sucha. Zbytek - se extrahuje horkým ethanolem, - nerozpustný dimethylester benzyl-2-acetamid o-4,6-O-b ehzzHd en-3-O-{[L-l-

- (D-l,3-dikarboxypr ору1) ) - karbamozlmethyЬ2-deoxy-.a-D-glukopzranosidu se odfiltruje a vysuší; [a]D²⁰=+ 22^p+ +Γ (chloroform, c — 1,160).

Roztok 15,6 g dim-ethylesteru benzyl-2-acetamido-4,6-O-be nzzhde n-3-O-{ [ L-l- (D-1,.3-dikar ·boxypropyl) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl^|-2-deoxy-a-D-^glukopzranosidu v 420 - ml ledové - - kyseliny octové a 280 ml' vody se vytemperuje na - teplotu 10°, reakční směs se míchá 4 hodiny za této teploty, - načež se ochladí a zahustí do sucha. Ke zbytku se třikrát přidá vždy 100 ml vody, jež se vždy oddesttluje do sucha, zbytek se rozpustí v chloroformu, získaný roztok se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem hořečn-atým a zahustí do- sucha. Získá se - tím dimethylester benzyl-2-acetamid·o-3-O-([L-l1

- (D-l,3-dlka(-boxzpropzl (karbamoy lethyl ] karbamoylmethzlj-2-deoxz-a1D-gl'Ukopzrazosidu jako žlutavá pryskyřičná - hmota, [a]_D ²⁰ = - + 31°+1° (chloroform, c = 1,070).

P ř í - k 1 a -d 1 9

Roztok 6,1 g benzylesteru benzyl-3-O-í(L-l-

- (D-l-kar bamoyl-3-karboxzpropzl) karbamozlcthyl ] karbamozlmethyl)-2-deoxz-21propionamido-a-glukopyranosidu ve -200 ml směsi tetraZydrO'furazu a vody (2.:1) se hydro- genuje za přítomnosti 0,6 g 5% paládia na uhlí za atmosférického tlaku a za teploty místnosti. Po ukončení spotřeby vodíku se katalyzátor odsaje - a filtrát - se odpaří. Ke zbytku se přidá 150 ml vody a reakční - směs se hydrogenuj^e tak dlouho za přítomnosti 5% paládia na uhlí, až ustane spotřeba vodíku. Potom se katalyzátor odfiltruje a filtrát se lzofilizuje. Získá se tím 3-O-((L-l-(D11-karbamoz 13 Ί aab o xxpro pyy ) karbamoylethyl ] aarbamozlmnthyl)-2-deoxy-2-propion^ amido-D-glukóza o [a]_D20=+8°+l° (voda, c = 1,146).

Použitá výchozí látka se může připravit takto:

K roztoku 90 g benzyl-2-acetamido-2-deoxZ-a-D-glukopyranotidu v 900 ml N^-dimethylformamidu se za míchání, vyloučení přístupu vlhkosti a za chlazení ledovou vodou přidá 0,3 ml kyseliny methansulfonové, načež se do reakční směsi přikapává během hodiny roztok 60 ml itopropezzlmetZyletZeru - v 240 ml N,N-dimethylformamidu, reakční

Použitá -výchozí sloučenina -se může připravovat takto:

K -roztoku 12,9 g -benzy^2-acetamido-4,6-O-benzzИdez-3-O-aarboxymethyl-2-deoxy-a-D-glu.korzranosidu -a 4,0 ml Methylami^ v 100 ml Ν,Ν1dímetZzlform.amidu se přidá

8,1 g hydr-chloridu dimethylesteru L-alanyl205025 směs se míchá 2 hodiny za teploty místnosti a přidáním triethylaminu se zalkalizuje. Rozpouštědlo se oddestiluje, zbytek se rozpustí v ethylesteru kyseliny octové, tento roztok se promyje vodou, vysuší se síranem horečnatým a filtrát se zahustí k suchu. Produkt, tj. benzyl-2-acetamido-2-deoxy-4,6-0-isopropyliden-a-D-glukopyranosid, se krystaluje z etheru; má potom teplotu tání 136 až 137°, [a]_D2°=+103+1° (chloroform, c = 1,125).

V ' roztoku 225 g hydroxidu draselného v 750 ml ethanolu a 40 ml destilované vody se rozpustí 52,5 g benzyl-2-acetamido-2-deoxy^.BrOHi^ipxoipndeii-a-glukopyranosidu a reakční směs se zahřívá 4,5 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení se reakční směs zahustí na polovinu původního objemu, koncentrát se vlije na led, vše se extrahuje chloroformem, organická fáze se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a filtrát se zahustí do sucha. Zbytek, tj. benzyl-2-amino-2-deoxy-4,6-O-isopropyliden-a-D-glukopyranosid se krystaluje z etheru. Látka má teplotu tání 145 až 146°, [α]₀2β = +117*04-1° (chloroform, c = 1,295).

K roztoku 24,7 g benzyl-2-amino-2-deoxy-4,6-0--sopropyliden-a-D-glukopyranosidu v 192 ml chloroformu se přidá ' roztok 16,0 g kyselého' uhličitanu draselného ve 192 ml destilované vody a reakční směs se ochladí na 0°. Potom se rříkarává za míchání během 20 minut 8,16 g chloridu kyseliny propionové a reakční směs se míchá za uvedené teploty dalších 50 minut. Organická fáze s.e oddělí, promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a filtrát se zahustí do sucha. Produkt, tj. benzyl-2-deoxy-4,6-O--soproryliden-2-rrorionamido-a-D-glukoryranosid, se krystaluje ze směsi ethylesteru kyseliny octové a petroletheru, látka má teplotu tání 121 až 122° a [+]_D20=.+1120+1° (chloroform, 0=0,977),

K ' roztoku' 9,1 g benzyl-2-deoxy-4,6-O-isopropyliden-2-rrorionamido-a-D-glukoryranosidu v 90 ml 'aceeonitrilu se přidá 1,25 g hydridu sodíku (Fluka) a reakční směs se míchá 2 hodiny př 40°. Potom sa reakční směs ochladí na —5 až —10° a přidá se k ní

4,2 ml ethylesteru kyseliny bromoctové. Za dalších 20 minut se přidá 10 ml ethanolu, reakční směs se neutralizuje ledovou kyselinou octovou a zahustí se 'do sucha. Zbytek se rozdělí mezi ether a vodu, roztok v etheru se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a filtrát se zahustí. Produkt, tj. ethylester benzyl-3-O-karboxym.ethyl-2-deO’Xy-4,6-0-isoproryliden-2-propionamido-a-D-glukopyranosidu, se krystaluje ze směsi etheru a petroletheru, t. t. 94 až 95°, [a]D²⁰= + . 145+1°, (chloroform, c = = 1,218).

K roztoku 6,8 g ethylesteru benzyl-3-O-karboxymethyl-2-deoxy-4,6-O--sopropyliden-2-propionamido-a-D-glukopyranosidu v 70 mililitrech methanolu se přidá 22,5 ml IN roztoku hydroxidu sodného. ' Po skončené hydrolýze esteru se přidá 7,5 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a reakční směs se zahustí do sucha. Produkt se rozpustí v 50 mililitrech Ν,Ν-dimethylformamidu a kondenzuje se s 15 mmol soli benzylesteru L-alanin-D-isoglutamínu s kyselinou trifluoroctovou za přítomnosti 3,72 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. . Reakční směs se zahustí k suchu a zbytek se rozpustí v chloroformu. Získaný roztok se promyje vodou, 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného a vodou, načež se organický roztok po vysušení bezvodým síranem hořečnatým zahustí k suchu. Získaný produkt se krystaluje ze zředěného ethanolu ' a má potom teplotu tání 177 až 180°, [a]_D ²⁰= + 710+1° (chloroform, 0 = '1,047).

K roztoku 8,1 g benzylesteru benzyl-3-O-{[ L-1- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl )karbamť^^^l^-ethylj l^<aгb<^π^c^5-m^¢эhly-j-2d^<^O7^l--4,6-O--sopropyltden-2-rropl·onamtdo-a-D-glukopyranosidu v 150 ml methanolu se přidá 15 mililitrů IN roztoku kyseliny chlorovodíkové a reakční směs se nechá stát hodinu ze teploty místnosti. ' Do přidání 15 ml IN roztoku hydroxidu sodného se reakční směs odpaří k suchu a získaný benzylester benzyl-3-O{[ L-1- (D-l-ka t’bamoyl-3-karboxyrropyl )karbamoyiethyl ] karbomoylmethyl|-2-deoxy-2-rropionamido-a-D-g-ukoryranos^du se překrystaluje ze směsi methanolu a vody. Po vysušení má látka t. t. 208 až 210°, [-Jd²^ = +75°+l° (Ν,Ν-dimethylformamid, c = =. 1,120).

Příklad 2 0

Katalytickou hydrogenací benzylesteru benzyl-3-O-;jL-'l-( D-karbamoyl-S-karbgxypropy 1) karbamoylethy 1 ] kar bamoylmethyl[-2-kaprшoylamido-2-deoxy-α-D-glukoryranosidu v Ν,Ν-dimethylformamidu za přítomnosti 5% paládia na uhlí se získá 3-O-([L-1-(D-l-karbamcyl-3-karbcxyproryl)karbamcylethy-]karbamoylmethy]j-2-karrinoy-amido-2-deoxy-D-glukosa ve formě bílé pěny o [a]_Dz0 = + 11-+1° (voda, c = 1,052).

Použitá výchozí sloučenina se připravuje takto:

Obdobně, jako je popsáno v příkladu 1, se přidá k 24,7 g benzyl-2-amino-2-deoxy-O-isorropyliden-α-D-g-ukoryrancsidu 16,7 g chloridu kyseliny kaprinové, a podobně se též reakční směs zpracuje. Získá* se tím benzyl-2-kapгinoylamido-2-deoxy-4,6-0-iscpгopyliden-α-D-glukoryranostd o [-)-)220=+81++ +1° (chloroform, c = 1,019).

K roztoku ' 3,8 g benzyl-2-kaprinoylamtdo-2-deoxy-4,6-O--ssproprllden-α-D-glukopyranosidu v '40 ml aceton^Hu se přidá 0,4 g hydridu sodíku a reakční směs se míchá 2 hodiny za teploty 40°. Potom se reakční směs ochladí na —10°, přidá. se 1,4 ml ethylesteru kyseliny bromoctové, a reakční směs se míchá další hodinu za chlazení na 0°. Zpracováním, jak je popsáno v příkladu 19 se získá ethylester benzyl-3-O-karboxymethyl-2-kaiprinoylami'do-4,'6-0-isopro'pyli'den-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu jako žlutohnědý olej o [a]D,2°=+(chloroform, c = = 1,242).

Obdobně jako v příkladu 19 se ethylester hydrolyzuje, produkt se kondenzuje se solí benzylesteru L-alamn-D-isoglutaminu s kyselinou trifluoroctovou za přítomnosti 2-ethoxy-N-sthoxykaabonyl-l,2-dihydrochinolinu a •iispropylidenketal se štěpí hydrolýzou v mírrtě kyselém prostředí. Získá se tím benzylester benzyl-3-O-( [ L^Zl- (D-karbamoyl-3-karboxyp'ropyl) karbamoyl-ethyl ] karbamoylmethyl|-2-kap['inoylamido-2-deoчy-α-D-glukopyranosidu jako žlutavá pryskyřičná hmota. Teplota tání 192 až 193°.

Příklad 2 1

5% roztok benzyl-2-acetamido-2-deoxy-3-O-[ [ L-l- (D-l-bis-methyikarbamoylpr opyy) karbamoylethy 1 ] karbamoy Imethy lj-a-D-glukopyranosidu ve směsi destilované vody a methanolu (1:1) se hydrogenuje za použití 5% paládia na uhlí jako katalyzátoru a filtrát · se odpaří. Produkt, tj. 2-acetamido-2-deoxy-3-O-([L-l-(l,3-bis-methylkarbamoylpropyl) karbamoylethyl jkarbamoylmethy 1}-D-glukosa, . se získá lyofilizováním, [a]_D ²0 = = + 31°+1° (voda, c = 0,410).

Výchozí sloučenina se může připravovat následujícím způsobem:

K roztoku ' 9,1 g benzyl-2-ace·tamido-4,6-Ol lbenzyliden-3-O-ka..rboxymethyl-2-deoxyla-D-glukopyranosidu v 100 ml N,N-dimethylformamidu a 2,77 ml triethylaminu se přidá 5,6 g hydrochloridu bis-methylamidu L-alanyl-D-glutamové kyseliny a 5,1 g 2-ethoxy-N-ethoKykarbonybl+dihydrochninolinu a reakční směs se nechá stát za teploty· místnosti 48 hodin. Ro;^]^<^u^u^t:ědlo ' se potom oddestiluje, k olejovitému zbytku se přidá voda, nerozpustné podíly se odfiltrují, promyjí se vodou a vysuší. Tento produkt se ještě dvakrát rozmíchá s etherem, odfiltruje se a vysuší. Zjistí se ben·zyl-2lacetamido-4,6l0-benzyliden-2-deoxy-3-(O[L-l-.(D-l,3-bis-methylkarbamoylpropyl -karbamoylethyl ] karbamoylmethyll-a-D-glukopyranosid.

Mírnou hydrolýzou v kyselém prostředí, jak je popsána v příkladu 15, se za použití 60% kyseliny octové odštěpí benzylidenová skupina a produkt, tj. benzyl^-acetamido^-deoxy-3-O-([[L(D-l,3-bis-methyIkarbamoyIpropyl jkarbamoylethyl ] karbamoy lmetylj-a-D-glukopyranosid, s-e izoluje. Teplota tání 280°.

Příklad 2 2

5% vodný roztok benzyl·2-acetamido-3-O-([ L-l- (D-l-karbamoy 1-l-lkabooχpropy-) kar26 bamoyi-2-hiу-Ιγοχуethyi ] karbamoylethylj-2· , -deoKy-a-D-glukopyranosidu se hydrogenuje za přítomností 5% paládia na uhlí; po filtraci se filtrát lyofilizuje. Získá se tím · . 2-acetamido-3--O|lL-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypτopýlJkaτbamoy--2-hydτoxyёthyl jkarbamoylmethy l]-2-deo·xχ-D-gl·ukoιsa o [ a] d²⁰ = = + 10+-1° (voda, c = 1,053).

Výchozí látka se může připravovat takto:

K roztoku 3,7 g benzyl-2-acetamidOl3-O-karboxymethyl-2-deoxyla-D-gIukopyranosidu a · 1,38 ml triethylaminu v 150 ml tetrahydrofuranu · se přidá 3,26 g hydrochloridu tarc.butylesteru L-serinlD-isoglutamínu a 2,6 gramu · 2ethoxy-N-ethoxykarbony--l,2ldihydrochinolinu.· Reakční směs se ponechá ' reagovat 20 hodin za teploty místnosti, potom se rozpouštědlo oddestiluje a zbytek se rozpustí ve směsi chloroformu a methanolu (9 : 1). Rozto-k se promyje vodou, 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem 'kyselého uhličitanu sodného a vodou, a po· filtraci se oddesmuje rozpouštědlo. Získá se tím terc.butytester bsnzyl-2-acetamido-3-O-( [ L-l-( D-l-karaamoy--3-kar boxypropyl)karbamoyl-2-hyd^oxyethyl ] karbamoy lmethyl)-2-deexy-a-D-glukopyranosidu. [ a] -2°=·+77°+ +1° (methanol, c = 0,946).

Mírnou hydrolýzou v kyselém prostředí, jak je popsáno v příkladu 15, se hydrolyzuje· terc.butylester a získá se benzyll2-acetamíl do-3-O-( [ L-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl) ka^ιrbamoyll2lhydr oxyethyl ] karbamoylmeLhyl!-2-deo:xy-a-D-^^lukopyranosid («^o = = +65°+l° (voda, c = 0,947).

Příklad 2 3

5% roztok benzyl^-acetamído-S-O-HL-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl )karbamoylbutyl]karbamoylmethy-|-2-deoxy-olDl glukopyranosidu ve směsi methanolu a vody (1:1) se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí; po filtraci se filtrát zahustí a zbytek se rozpustí v destilované vodě a roztok se lyofilizuje. Získá se tím 2-acetamido-3-O-([L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyy) karbamoylbutyl ] karbamoylmethylj-2-deoxy-Dlg^ukosa. [a]D²⁰= + 12°+1° (voda, c=O,722).

Výchozí sloučeninu je možno připravit takto:

K roztoku 3,7 g benzyl-2lacetaшidOl3lO-kar’boxymethyl-2-fleoxy-a-D-gIukopyranotidu a 1,38 ml triethylaminu v 100 ml tetrahydrofuranu se přidá · 3,28 g hydrochloridu terc.butylesteru L-norvalinlDlisoglutaminu a 2,6 g' 2-ethoxy-N-lehoxχk·kabonyl-l,2-dihydrochinolřnu, a reakční isměs se ponechá 24 hodin za teploty místnosti. Potom se reakční směs ' zpracuje jako v příkladu 24. Získá se tím terc.butylester be!nzyl-2-acetamido-3O205025

-{[ L-l- (D-l-karbamoy 1-3-kar boxypr opyl )karbamoýlbutyl]karbamoylmethyl}-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu. Teplota tání '202 až 204°.

Terc.butylester se štěpí mírnou hydrolýzou v kyselém prostředí.

Příklad 24

Roztok 8,3 g benzylesteru benzy 1-3-0-( [L-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl Jkarbamoylethyl ] karbamoylmethyl}-2-deoxy-2-stearoylamido-of-D-glukopyranosidu v 200 ml ledové kyseliny octové ®e hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí za atmosférického tlaku a za teploty místnosti. Po zpracování reakční směsi se získá ve formě bílého prášku 3-0-((L-l- (D-l-karbamoyl-tf-karboxypropyl)'karbamoylethyl]karbamoylmethyl|-2-deoxy-2’tstearoylamido-D-glukosa. [ a]_D ²⁰ == = +24°+Г (dimethylformamid, c = 0,663).

Použitá výchozí sloučenina se dá připravit takto:

К roztoku 6,2 g benzyl-4,6-O-benzyliden-2-deoxy-2-stearoylamido-a-D-glukopyranosidu v 150 ml Ν,Ν-dimethylfarmamidu se přidá 0,75 g hydridu sodíku a reakční směs se míchá 90 minut za teploty 40°. Potom se reakční směs ochladí na —5°, přidá se 2,2 ml ethylesteru kyseliny bromoctové a reakční směs se míchá 4 hodiny za teploty místnosti. Po přidání 10 ml ledové kyseliny octové a 400 ml destilované vody se směs extrahuje chloroformem, organická fáze se promyje vodou, vysuší se a zahustí do sucha. Takto získaný ethylester benzyl-4,6-O-benzyliden-3-0-karboxyimethyl-2-deoxy-2-iStearoylaimido-α-D-glukopyranosidu se krystaluje z ethanolu. Látka má t.t. 151 až 154° [a]_D ²⁰=H-94± il° (chloroform, c —1,186).

К .roztoku 23,4 g ethylesteru benzyl-4,6-0-benzyliden-3-0-karboxymethyl-2-deoxy-2-stearoylamido-a-D-glukopyranosidu v 334 ml methanolu a 334 ml tetrahydrofuranu se přidá '50,1 ml IN roztoku hydroxidu sodného, reakční směs se míchá 90 minut za teploty 50°, načež ss odpaří. Zbytek se vmíchá do ledové vody, produkt se odsaje, promyje se vodou, vysuší a překrystaluje z ethanolu. Sodná sůl benzyl-4,6-O-benzylíden-3-O-karboxymethyl-2-deoxy-2-stearoylamido-a-D-glukopyranosidu, krystalující s 1 mol vody, taje při 225 až 242° (za rozkladu). Látka má specifickou rotaci [α]ο²⁰= 4-45°+l° (chloroform, c =1,097).

К roztoku 14,4 g (20 mmol) monohydrátu sodné soli benzyl-4,6-O-benzyliden-3-O-karboxymethyl-2-deoxy-2-stearoylamido-a-D-glukopyranosidu ve 120 ml tetrahydrofuranu se přidá 20 mmol soli benzylesteru L-alanin-D-isoglutaminu s ťrifluoroctovou kyselinou a 4,9i5 g (20 mmol) 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dichlorchinolinu, reakční směs se nechá stát 20 hodin při teplotě místnosti, načež se zahustí do sucha. Zbytek se rozpustí v chloroformu, tento roztok se promyje vodou, 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného ve vodě a znovu vodou, načež se organický roztok vysuší bezvodým síranem horečnatým a filtrát se zahustí. Produkt, tj. benzylester benzy 1-4,6-O-benzyliden-3-O-( [ L-l- (D-l-karbamoy 1-3-kar boxypropyl) kar bamoylethyljkarbamoylmethyl(-2-deoxy-2-stearoylamido-a-D-glukopyranosidu, se překrystaluje z ethanolu, [a]_D ^z0—+62°+l° (N,N-dimethylformamid, c = 1,148).

Mírnou hydrolýzou tohoto benzylidenderivátu v prostředí 65% kyseliny octové se získá benzylester benzyl-3-O-([L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl)karbamoylethyljkarbamoylmethyl)-2-deoxy-2-stearoylamido-α-D-glukopyranosidu, teplota tání 188 až 189°, [α]ο²⁰= +59°+l° (N,N-dímethylformamid, c = 1,022).

Příklad 25

5% vodný roztok benzyl-2-acetamido-3-O-([ L-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl )karbamoyl-2-methylpropyl]karbamoylmethylj-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí, katalyzátor se odfiltruje a filtrát se lyofilizuje. Získá se tím 2-acetamido-3-0-([L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl) karbamoyl-2-methylpropyl]karbamoylmethyl)-2-deoxy-D-glukosa. [¢)0^=+11¾ (voda, c=1,096).

Výchozí sloučeninu pro tento postup je možno připravit následujícím způsobem:

К roztoku 3,7 g benzyl-2-acteamido-3-O-karboxymeťhyl-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu a 1,38 ml triethylamlnu ve 100 ml tetrahydrofuranu se přidá 3,38 g hydrochloridu terc.butylesteru L-valin-D-isoglutaminu a 2,6 g

2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu a reakční směs se ponechá stát 24 hodin za teploty místnosti. Potom se zpracovává obdobně, jak to bylo popsáno v příkladu 24. Získá se tím terc.butylester benzyl-2-acetamido-3-O-([ L-l- (D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl pkarbamoy 1-2-methylpropyl ] karbamoylmethyl|-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu, který hydrolýzou v mírně kyselém prostředí skýtá benzyl-2-acetamido-3-O-|[L-l-(D-l-karbamoy 1-3-karboxy propyl) kar bamoy 1-2-methylpropyl ] kar bamoy lmethyl) -2-deoxy-a-D-glukopyranosid. [oj]_d ²⁰ = +76°+l° (metha nol, c = 1,052).

Příklad 26

5% roztok benzyl-2-acetamido-3-O-((L-l- (D-l-karbamoyl-3-kar boxypropyl Jkarbamoyl-3-methylbutyl]karbamoylmethyl(-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu ve směsi methanolu a vody (1:1) se hydrogenuje za přítomnosti paládia na uhlí a po odfiltrování katalyzátoru se filtrát odpaří. Zbytek se rozpustí v destilované vodě, roztok se znovu filtruje, lyofilizuje. Získá se tím 2-acetamido-3-O-{[L· -1- (D-karbamoyl-3-kar boxypr o-pyl) karbamoyl-3-methy lbutyl ] kar bamoylmethyJ-2-deoxy-D-glukosa. [ a] _D ²⁰=+16^o+1° (voda, -c = = 1,060).

Použitá výchozí sloučenina se může připravovat takto:

K roztoku 3,7 g benzyl-2-acetamido-3-O-karboxymethyl-2-deo.xy-a-D-glukopyranosidu a 1,58 ml triethylaminu v 100 ml tetrahydrofuranu se přidá 3,52 - g hydrochloridu terc.butylesteru L-leucin-D-isoglutaminu a 2,6 gramu 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs se nechá stát 24 t hodin při teplotě místnosti a zpracuje se, jak je to popsáno v příkladu 24. Získá se tím terc.butylester . benzyl-2-acetamido-3-O-[[L-l-(D-l-karbanoiyl-3-karboxypropyl-3-methylr butyl ] karbamoylmethyl[-2-deoxy-a-D-ghιkopyranosidu a hydrolýzou v mírně kyselém prostředí se -z této látky připraví . benzyl-2-aceeí^imcd^--^-C^^J)L--l (D-l-karbamoyl-3-karboxy pr opy i ) karbamoyl-3-methylbutyl ] karbamoylmethylj-2-deoxy-a-D-glukopyranosid. [a]_o20=+73a±l° (methanol, c = 0,611).

Příklad 2 7

5% roztok btnzylc2-acetamido-3-0-[[L-l- (.D-l-karbamoyl-3-karroxypropyl) karbamoylpropyl ] karbamoylmethylJ-2cdeoxyca-D-glukopyranosidu v 50% vodném methanolu se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí za atmosférického tlaku a při teplotě místnosti. Po odfiltrování katalyzátoru se filtrát odpaří. Zbytek se rozpustí v desttlované . vodě a roztok se lyofilizuje. Získá se tím - 2-3ϋβί3ΐηΐΰο--!-Ο-|[ L-l· (D-l-karbamoyI-3-karboxypi^oipyl Jkarha moy i propyl ] karbamoy-methy][-2-dtoxy-D-glukota-[.a]D²⁰ = + 11°+Γ· (voda, c = 1,019).

Výchozí sloučenina se může připravit takto:

K roztoku 3,7 g b-:tnzyl[2[acttamlido-3-Oc ckarboxymethyl-2-dtoxy-a-Dcg-ukopyranotidu a 1,38 ml triethylaminu ve 100 ml tetrahyd> rofuranu se přidá 3,24 g hydrochloridu terc.^ι-θ^θγη N-a-L-ammobutyryl-D-isoglutaminu a 2,6 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl[l,2[dihydrochinolinu a po stání 24 hodin za tep loty místnosti se - reakční směs zpracuje postupem, jak byl popsán v - příkladu 22. Vzniklý terc.butylester benzy-c2cacetamido-3cO{[ L-l- (D-l[karbam·oyl-3-kaгroxypгopy 1) karbamoylpropyl ] karramoy-methyl[-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu se potom hydrolyzuje v mírně kyselém prostředí za vzniku benzyl-2-acetamido-3-O-{ [ L-l- (D-l^-^^^j^b^íímoyl^-^S-karboxyyroyyl ) karbamoylpropy 1) karbamoylmec thylj-2cdeoxy-a.-D-glukopyгanosidu. [α]ο²⁰ = = +85·^ο°+1° (dimethylformamid, c = 0,725).

Příklad 28

K roztoku - 3,5 g benzyl-2-acetamidoc3-O-{[ L-l- (D-lcl,3-ritckaгramoy lyroyyl ) karbamoylethyllkarbamoylmethylj-2-deoxy-4,6-O-itoplΌpyliclen-₁3-D-glukopyranot-du v 50 ml ledové kyseliny octové se přikapává za míchání při teplotě 50° během 15 minut 50 ml destilované vody a reakční směs se míchá ještě jednu hodinu za uvedené teploty. Po ochlazení se přidá ještě 100 ml -destilované vody a rozpouštědlo se -oddesítluje ve vakuu vodní vývěvy. Ke zbytku se přidá 20 ml vody a roztok se lyofilizuje. Získá se tím benzyl2-aceta.miidoc3cO-{[ L-l- (D-l,3-bis-karbamoyl· propyl IkarbamoylethyllKarbamoylmethylj^cdeoxy-/--D-glukopyranosíd o - [a)D²⁰ =—44°°+ +1° (Ν,Ν-dimethylformamíd, c = 0,989).

Použitá výchozí sloučenina se může připravovat takto:

K roztoku 30 mg renzylc2cacetamidoc2-deoxy-/3-D-glukopyranosidu v 300 ml N,N-dimethylformamidu se za míchání, vnějšího chlazení a vyloučení přístupu vzdušné vlhkosti přidá -0,1 ml -kyseliny methansulfonové. Potom se přikape během 1 hodiny roztok 20 ml isopropenylmethyletheru v 60 ml Ν,Ν-dimethylformamidu, reakční směs se míchá 2 hodiny za teploty místnosti, zalkalizuje se přidáním triethylaminu a po -odpaření rozpouštědla krystaluje takto získaný benzy-c2cacetc ami'dO'-2-'deoxy-4,6-0-isoproyyll·den-3-D-gl^,Uc kopyranosid z ethylesteru kyseliny -octové. Látka má ' - teplotu tání - 194°, - [a)D²⁰ =—104° + 1° (chloroform, c=0,850).

K roztoku 36,2 g benzyl-2-acetamido-2-dec oxyc4,6-0--sopropylidenc_|3-D-gIukopyгanotidu v -400 ml act^et^i^ii^rilu -a 100- ml Ν,Ν-dimethylformamidu se přidá 4,95 g hydridu sodíku a reakční směs se míchá 2 hodiny při 40°. Potom se tato- reakční směs ochladí -na —10°, do ochlazené, reakční směsi se přidá - 17,2 ml e^-hylesteru kyseliny bromoctové a reakční směs se míchá 30 minut za -chlazení na -0°. Po přidání 40 ml ethanolu se reakční směs neutralizuje ledovou kyselinou octovou, zahustí se do· - sucha, zbytek se rozdělí -mezi ether a destilovanou vodu, roztok v etheru se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a -odpaří se. Produkt, tj. ethyleste.r renzylc2cacetamidoc3-0-ka^ιгboxymethyl-2cdeoxy-4,6-O-isopropy-iden-/3-D-glukoyyгanosidu, se- překrystaluje z etheru. Látka má teplotu tání 93 až 94° -a [a]D²⁰ = -—4^^с°+1° (CHClj, -c = 1,.001).

K roztoku -6,56 g benzy-c2cacetamido-3-Oc -kaгramoylmethyC-2-deoxy-4,6-O-itoyroyy-c iden-βcDcglukopyranotidu v 70 ml methanolu se přidá 22,5 ml lN roztoku hydroxidu sodného. Po skončené hydrolýze esteru se přidá 7,5 ml IN. roztoku kyseliny еШогоуосИкоуе a reakční směs se odpaří k suchu. Získaná sodná sůl se rozpustí v -50 ml Ν,Ν-dimethyl- formamidu -a k roztoku - se přidá 3,7 g hydrochloridu diamidu L-a-any--D-g-utamové ky205025 seliny а 3,72 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-1,2-dihydrochinoliinu. Potom se reakční směs nechá stát 24 hodin za teploty místnosti, zahustí se do sucha, zbytek se rozpustí ve vodě a extrahuje se methylenchloridem a dvakrát n-butanolem. Produkt, který se získá jako zbytek po oddestilování n-butanolu, představuje benzyl-2-acetamido-3-O-j [ L-l- (D-l,3-bis-karbamoylpropyl Jkarbamoylethyl) karbamoylmethyl]-2-deoxy-4,6-0-isopropyliden-/S-D-glukopyranosid.

Příklad 29

К roztoku 5,1 g dimethylesteru benzyl-2-acetamido-3-O-{ [ L-l- (D-l,3-bis-karboxypropy 1) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl|-2-deoxy-4,6-0-i'sop.ropyliden-3-D-glukopyranc6'idu ve 120 ml ledové kyseliny octové se za míchání při 50° přikape 80 ml destilované vody a reakční směs se míchá hodinu za uvedené teploty. Po odpaření kyseliny octové se získá dimethylester benzyl-2-acetamido-3-O-( [ L-l-

- (D-l,3^bi6-karboxypropyl jkarbamoylethyl ] karbamoylmet!hyl]-2-deoxy-3-D-glukopyranosidu. Teplota tání 195 až 197°, [a]_D ²⁰ = — —31°+1° (methanol, c = 0,533).

Použitá výchozí sloučenina se dá připravit takto:

Jako v příkladu 28 se hydrolyzuje působením hydroxidu sodného 6,56 g ethylesteru benzyl-2-acetamido-3-O-karboxmethyl-2-deoxy-4,6-0-isopropyliden-3-D-glukopyranosidu a provede se kondenzace s 4,24 g hydrochloridu dimethylesteru kyseliny L-alanyl-D-glutamové za přítomnosti 3,72 g 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu.

Po oddestilování rozpouštědla se zbytek rozpustiv chloroformu, roztok se promyje vodou, 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové, vychlazeným v ledu, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného a vodou a po vysušení bezvodým síranem hořečnatým se filtrát zahustí do sucha. Jako zbytek se získá dimethylester benzyl-2-acetamido-3-O-|[L-l-

- (D-l,3-bis-karboxypropyl) karbamoylethyl ] - karbamoylmethyl)-2-deoxy-4,6-0-isopropyliden-3-D-glukopyranosidu. [ a ] o²⁰ = —81°+ ±1° (chloroform, c = 0,752).

Příklad 30

5% roztok benzylesteru benzyl-2-acetamido-3-O-|[ L-l- (D-l-karbamoylmethylkarbamoyl-3-karboxypropyl) -karbamoylethyl ] karbamoylmethyl|-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu ve směsi tetrahydrofuranu a vody (2:1) se hydrogenuje za přítomnosti 5% paládia na uhlí ze atmosférického tlaku a za teploty místnosti. Po spotřebě asi 50 % z teoreticky potřebného množství vodíku se katalyzátor odfiltruje a filtrát se odpaří. Zbytek se nyní rozpustí v destilované vodě a provede se další hydrogenace. Po spotřebě teoretického množství vodíku se katalyzátor znovu odfiltruje, filtrát se vysuší lyofilizováním. Získá se tak 2-acetamido-3-O-[[L-l-(D-l-karbamoylmeťhylkarbamoyl-3-karboxypropyl Jkarbamoylethyl ] karbamoylmethyl]-2-deoxy-D-glukosa ve formě bílého prášku. [_a] ,-,20=4. -HlíF+r (voda, c=0,706).

Výchozí sloučeninu je možno připravit takto:

Ve směsi 5 ml kyseliny trlfluoroctové a 5 mililitrů 1,2-dichlorethanu se rozpustí 4,8 g monohydrátu y-benzylesteru glycinamidu n-terc.butoxykarbonyl-L-alanin-D-glutaminu a roztok se ponechá stát 16 hodin za teploty místnosti a za vyloučení přístupu vlhkosti. Potom se zředí reakční roztok přidáním 50 » mililitrů tetrahydrofuranu, ochladí se v ledové lázni a neutralizuje se triethylaminem. Dále se přidá к neutralizovanému roztoku

3,7 g benzyl-2-acetamido-3-karboxymethyl-2- ₍

-deoxy-a-D-glukopyranosidu a 1,38 ml triethylaminu v prostředí 100 ml tetrahydrofuranu а к získanému roztoku se přidá 2,6 g

2- ethoxy-N-etihoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs se nechá stát 24 hodin za teploty místnosti a zpracuje se, jak je to popsáno v příkladu 22. Získá se tím benzylester benzyl-2-acetamido-3-0-{[ L-l- (D-l-karbamoylmethylkarbamoyl-3-karboxypropyl)karbamoylethyl]karbamoylmethyl|-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu. Teplota tání 190 až 195°.

Příklad 31

Roztok 5,2 g benzylesteru benzyl-4,6-O-benzy liden-3-O-| [ L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropyl) karbamoylethyl ] karbamoylmethyl)-2-deoxy-2-p-tolylsulfonylamino-a-D-glukopyranosidu se v prostředí 120 ml 70% vodné kyseliny octové hydrogenuje v přítomnosti paládia na uhlí za atmosférického tlaku a za teploty místnosti; po spotřebě teoretického množství vodíku se katalyzátor odfiltruje a filtrát se zahustí к suchu. Zbytek se rozpustí v 30 ml destilované vody a vysuší se lyofilizováním. Ve formě bílého prášku se získá

3- O-| [ L-l- (D-l-kar bamoy 1-3-karboxypropyl) karbamoylethyl] kar bamoylmethy l|-2-deoxy-'ž-p-tolylsulfonylamido-D-glukoisa.

Použitá výchozí sloučenina se může připravit následujícím způsobem:

Do roztoku 6,0 g benzyl-2-amino-4,6-O-benzyliden-3-O-karboxymethyl-2-deoxy-a-D-glukopyranosidu ve 100 ml methylenchloridu a 6,3 ml triethylaminu se za chlazení na 5° přikapává roztok 3,1 g chloridu kyseliny p-toiuensulfonové v 30 ml methylenchloiridu a reakční směs se nechá stát 1'6 hodin ze teploty místnosti.

Potom se postupně roztok promyje vodou,

2N roztokem hydroxidu sodného, vodou, vychlazeným 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodou, vysuší se síranem hořečnatým a filtrát se zahustí к suchu. Zbytek se vícekrát extrahuje etherem, vysuší se a jako pevný podíl se získá benzyl-4,6-O-benzyliden-3-O-karboxymethyl-2-deoxy-2-p-tolylsulfo)nylaminu-a-D-glukopyranosid o teplotě tání 185 až 187°, [α]η²⁰⁼ +75^o+l° (chloroform, c = = 0,855).

K roztoku 5,7 g benzylt4,6-O-benzylident3t -O-karboxymethyl-2-deoxy-2-p-tolylsulfonylamino-a-D-;glukopyrano^siďu s 1,01 'ml triethylpřidá 10 mmol soli benzylesteru L-alanyl-D-isoglutaminu s kyselinou trifluoroctovou a 2,5 g 2<!tlioxy-.N-etlioxykarbonyl-l,2-dihyclruchinolinu a reakční směs se nechá stát 24 hodin za teploty místnosti. Potom se reakční směs odpaří k suchu, ke zbytku se přidá voda, nerozpustné podíly 'se odfiltrují, promyjí se vodou a etherem a vysuší se ve vakuu. Ve formě bílého prášku se získá benzylester benzyl-4,6-O-benzyliden-3-O-| [ L-l- (D-l-karbamoyl-3-kar boxypropy 1 )kar bamoy lethyl j ka,rhaírnoolln'ethyll-2-deexy-2-p-to.lyl·зulfonylamino-a-D -glukopyir anosidu.

Příklad 32

Směs 3,2 g 2-amino-2-deoxy-3-karboxymethyl-D-glukopyranasy, 2,5 g uhličitanu draselného a 4,5 g /?nitrofenylesteru kyseliny pivalové se míchá v prostředí 100 ml dimethylformamidu 15 hodin za zahřívání na 100°. Po odfiltrování solí se filtrát zahustí ' ve vakuu olejové vývěvy a zbytek se ve formě vodného roztoku filtruje přes iontoměnič IR-120. Eluát se vytřepe chloroformem, zahustí se ve vakuu na sirup. Roztíráním tohoto sirupu s .ethylesterem kyseliny octové vznikne slabě nažloutlý .prášek, tj. . 2-pivaloylamtdo-2-deoxy-3-karboxymethyl-Dtglukot pyranosa, teplota tání '89 až 93°; sodná sůl taje při 80 až 90°.

Výchozí sloučenina, tj. 2-amino-2-deoxy-3-karboxymei^hyl-D-glukopyr^a^r^osa se připravuje takto:

Roztok 10'0 g 2-fenyl-4,5- (3-O-karb)oxyimelhyl-5,'6Ό--sopropyliden-D-glukoiurano-Δ2-oxalinu v 1000 ml 2,6N roztoku kyseliny chlorovodíkové se zahřívá 4 hodiny k varu pod zpětným chladičem, vyloučená kyselina benzoová se odfiltruje a filtrát se extrahuje třikrát etherem. Vodný podíl se upraví za použití pH-metru přidáním 3N roztoku hydroxidu draselného přesně na pH = 7, vyčeří se aktivním uhlím, načež se filtrát zahustí ve vakuu na objem asi 500 ml a přidají se 3 litry acetonu. Po ochlazení ledem se odsaje vyloučená sraženina a jejím sušením ve vakuu za teploty '40° se získá 247 g žlutavého prášku, 'který obsahuje asi 85 % chloridu draselného a 15 % titulní sloučeniny.

Z matečného louhu se získá dalších 22 g směsi titulní sloučeniny a odpovídajícího laktamu.

Reakce 2-pivaloylamido-2-deoxy-3-karboxymethyl-D-ghi-kopyranosy se solí y^benzylesteru α-amídu .kyseliny . L-alanyl-D-glutamové s kyselinou t^J^fuojjo^ct^^ou ' se ' .provádí .obdobně podle příkladu 31 za použití 2-ethoxyt2-etιhoxχlN’ethooχkkabonnlll,2-dihydrochtnolinu v prostředí směsi dimethylformamidu a methylenchloridu (1 : 1). Hydrogenací v přítomnosti '5% paládia na uhlí se získá po ly-ofil^í^z^aci 2-trimethylacetamčdo-2-deoxy-3-O-í[L-l-(D-l-karbamoyl-3-karboxypropylj-l-karba.moylethyl]karbamoylmelhy-l-α,/J-D-glukosa, [a]D20 = —7° (c = 0,6, methanol).

Analogickým způsobem se získají následující sloučeniny:

a) 2-benzoylamtno-3-O-{D-lt [ L-l- (D-l-karbaInoyllЗ-nkrboxyyroppll-l-karbamoylethyl]karbaim.oylethyl--2-deoxy-α,3tglukOsa o ' teplotě rozkladu 140°;

b) 2-benzoylamino-3-O-|D-l- [ L-l-karbamo- yl-3-karboxypropyl) karbamoy lethyl JkarbanioylpiOpyl-^-deoxy-a.L-D-glukcsa, teplota tání 114 až 152°, [п]о²⁰=+17° (v methanolu);

c) 2-benzoylamino-3-O-{ [ L-l- (D-l-karbamoy 1- 3-.kianboxypropy 1) -1-kar bamoy lethyl ] karbamoylmethyl--2-deoxyta,/3'-D-glukcsa, teplota tání 175 až 177° (jako hydrát);

d) 2-benzoy Гапипо-З-О- (1-Ь- (l-D,3-d.ikarboxypr opy^ kпrbпroyylethyl ] kпrbпmyylmethy 1-2-deyχy-DtglukopyпaУO6'a, [ a ] _D20 = + 25° (voda, c = '0,997);

e) 2-benzoylamino-3-O- [ 1-Ь- (1-D-karbamyyl-3-kпrboxypropyl)kпrbamyyl-2-hydrУt xyeťhyl ] karbamoy lme!thyl·-2-deoxy-D-glukypyratnosa, teplota tání 100 až 115°, [a]_D2= +23° (voda, c = 0,886);

f) 2^60207100100-3-0-[ 1-Ь- (1-D-N-n-pryρylkпrbпmoyl-3-:kпrboxyproρyl)karkarbamoy lethyl ] karbamoy lmethyl-2-deoχy-D-glukypyraoyιsп, teplota 'tání 65 až 140 °C, (_a)_D2> =+28° (voda, c = 1,03);

g) 2-b!Slnoylamion-3-O- -llmetllyl---(D-lt ··kaгbπmoyl-3-karboxypropyl) karbamoylethyl ] karbпmyylmethyl-3tdeyχytD-glukУt pyranosa, teplota ' tání 110 až 120 °C, [π]_ό ²⁰=+31° (voda, c=0,88);

h) 2-benzoylпminy-3-0- (L-l- (D-l-karbamoyl-3-karbyχyprypyl) karbamoylethyl ] karbamoylioethy--2-deoxy-3-ethyl-D-glukypyranУstd, teplota tání 215 až 217 °C’ [«jo²⁰ =—22° (methanol, c = 0,97);

i) 2-benzoylпmtno-3-O-[ (D-l-karbamoyl-3-karbo-xypropyl) karbamoylmethyl ]ka..rbaímΏylmethyl-2-deoxy-D-glukosa, teplota tání 115 'až 155 °C, (a]_D ²⁰=^! + 34° (voda, c = =0,81);

38

j)« 2-benzoylamino-3-0-[L-l-(D-l,3-di- lota tání 82 až 143 °C, (a]_D ²⁰=+24° (voda, karbampylpropyl)karbamoylethyl]kar- c = 0,98).

bamoylmiethyl-2-deoixy-D-glukopyranosa, tep-

Claims (2)

1. PŘEDMĚT VYNALEZU

   1. Způsob výroby glukosaminových derivátů obecného vzorce I, (I) v němž znamená

   X karbonylovou skupinu nebo sulfonylovou skupinu,

   R alkylový zbytek s 1 až 18 atomy uhlíku nebo fenylový zbytek,

   Ri vodík nebo alkylový zbytek s 1 až 5 atomy uhlíku nebo benzylový zbytek,

   R2 vodík nebo alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,

   Rí a Re vodík nebo acylový zbytek s 2 až 18 atomy uhlíku,

   R7 vodík, alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxymethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu,

   Re popřípadě esterifikovanou nebo amidovanou karboxylovou skupinu a

   R9 popřípadě esterifikovanou nebo amidovanou karboxylovou skupinu, s tím, že alkylový zbytek ve významu symbolu R obsahuje více než 1 atom uhlíku, jestliže X znamená karbonylovou skupinu a zbytek R2 znamená methylovou skupinu, nebo jestliže X znamená karbonylovou skupinu, zbytek Rz znamená vodík a Ra a Re představují karboxylovou skupinu, jakož i jejich farmaceuticky použitelných adičních solí s kyselinami, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce III,

   COOH (III) v němž

   X, R a R2 mají shora uvedený význam, a

   Ri°, R4⁰ a R6^Q mají významy uvedené pro zbytky Ri, R4, popřípadě R6 nebo znamenají snadno odštěpitelnou krycí skupinu, nebo derivát této sloučeniny kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce IV,

   R7⁰ Re“

   HzN—CH—CONH—CH(CHz)z—Ro (IV) v němž

   R7⁰, Re° a R9⁰ mají významy symbolů R7, Re a R9 s tím, že karboxylové a popřípadě volné hydroxylové skupiny přítomné v těchto zbytcích, jsou chráněny snadno odštěpitelnými krycími skupinami, a popřípadě přítomné krycí skupiny se odštěpí, načež se popřípadě získané soli převedou na vodné sloučeniny nebo se získané soli převedou na své fyziologicky použitelné adiční soli s kyselinami.
2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se kondenzují kyseliny vzorce III ve formě anhydridu kyseliny nebo reaktivního esteru s aminosloučeninou vzorce IV nebo kyselina vzorce III se sloučeninou vzorce IV, jejíž aminoskupina je aktivována fosfitamidem.