CN1498615A

CN1498615A - 一种丹参药材中有效部位的制剂及其制备方法

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Publication number: CN1498615A
Application number: CNA2003101134541A
Authority: CN
Inventors: 军张; 张军; 姚育法; 刘良; 张政朴; 赖小平
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2002-11-12
Filing date: 2003-11-12
Publication date: 2004-05-26
Anticipated expiration: 2023-11-12
Also published as: CN1257710C

Abstract

本发明公开了一种丹参的速释制剂和缓释制剂，本发明还公开了丹参酮类提取物以及丹参酚酸类提取物的制备方法。本发明速释制剂由丹参酮精制物：Poloxamer或PEG：乳糖为1∶0.5－12∶0.5－12经熔融法或微粉化法制成；本发明缓释制剂由丹参酚酸提取物：MC：HPMC100KM或HPMC15KM为0.4－1∶0.1－0.6∶0.4－1制成。本发明采用超临界二氧化碳萃取工艺组合水提—大孔树脂工艺提取富集丹参药材中丹参酮类和丹参酚酸类有效部位，具有提取保留率高，提取物中丹参酮类和丹参酚酸类含量高的优势，丹参酮类成分在速释制剂中溶出度高，丹参酚酸类成分自缓释骨架片中释药平稳。

Description

一种丹参药材中有效部位的制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂及其制备方法，特别是涉及一种丹参药材中有效部位的制剂及其制备方法。

背景技术

丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的根。味苦，性微寒，具有活血化瘀，养血安神，凉血排痈和排毒生肌的功效，是中药活血化瘀的常用药味。现有丹参制剂工艺的局限性表现为：1、醇提工艺虽然对丹参酮类提取较完全，但由于丹参酮类的不稳定性，在浓缩、干燥过程中损失较多，导致丹参酮类在制剂中保留率低和含量重现性差；2、丹参酮类的溶解性差，制剂中溶出度低。现有制剂未筛选适宜的辅料和工艺，以改善丹参酮类溶出度；3、水溶性丹酚酸类的提取以丹参素为指标，醇沉精制工艺中丹参素等有效成分的损失较大，在制剂中保留率低；4、丹参素体内吸收、代谢快，普通制剂难以保持口服给药血药浓度的稳定性。

丹参药材主含脂溶性的二萜类成分和水溶性的酚酸类成分，尚含有黄酮类、三萜类、甾醇等其他成分。二萜类成分中属醌、酮型结构的有丹参酮I、II_A、II_B、V、VI，隐丹参酮，异丹参酮I、II、II_B，二氢丹参酮I等。水溶性的酚酸类成分有丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸及丹参素与咖啡酸的衍生物或二聚物酯化而成的缩酚酸如丹酚酸A、B、C、D、E、G、紫草酸B、迷迭香酸、迷迭香酸甲酯等。

丹参酮II_A是丹参二萜类活血化瘀的代表成分之一。现代药理研究表明丹参酮II_A单体的药理作用主要有：对实验性心肌缺血和再灌注损伤具有改善作用；对心肌电生理的影响实验显示有钙拮抗作用；抗血小板聚集作用抗血栓作用。丹参二萜类另一代表成分隐丹参酮具有抗炎抑菌及雌激素样作用。

丹参中水溶性酚酸类单体化合物的药理作用主要有：抗血栓作用包括抗血小板作用、抗凝作用、抗血栓形成作用；改善血液循环作用；抗氧化损伤作用；

通过多途径，发挥心肌保护作用；丹参药材中活血化瘀活性的两类有效部位具有确切的药理研究基础，并在长期临床实践中得到证实。因此在开发丹参制剂时，不但应根据处方功能主治，提取保留其有效部位；而且应在成型工艺中施以制剂因素，改善有效成分的释放。

发明内容

本发明目的在于提供一种丹参药材中有效部位的精制工艺和丹参制剂及其制备方法。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

丹参酮精制物及丹参酚酸提取物的制备：将丹参药材粉碎投料后，萃取条件为以20-40％用量的70-95％乙醇作为夹带剂，萃取压力30-40Mpa，萃取温度50-75℃，流量为9-12Kg/hKg药材原料；解析条件为，一级解析压力14-18Mpa、解析温度50-75℃；二级解析压力4-8Mpa、解析温度30-50℃；萃取时间2-4h；干燥；得丹参酮类提取物；精制得丹参酮精制物；药渣加水浸泡过夜后，煎煮3-5次，每次0.5-2小时，合并煎液，滤过；滤液过树脂柱，水洗至糖的反应为阴性后，以丹参生药量13-20倍的30-95％乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇后，喷雾干燥，即得丹参酚酸提取物粉末；总固物得率为6.9±0.16％，丹参素含量为1.54±0.04％，丹参酚酸B含量为50％以上。

本发明丹参酮精制物速释制剂的制备：丹参酮精制物∶波洛沙姆为1∶0.5-12，其中波洛沙姆可由聚乙二醇替换，优选比例为1∶5，制备工艺为熔融法或微粉化法，优选工艺为微粉化法。上述组合物中还可加入辅料乳糖，比例为丹参酮精制物∶波洛沙姆∶乳糖1∶0.5-12∶0.5-12，其中乳糖可由甘露醇或葡萄糖替换，优选比例为1∶10∶10。

本发明丹参酚酸提取物缓释制剂的制备：丹参提取物∶羟丙甲基纤维素100KM或羟丙甲基纤维素15KM为1∶0.4-1；优选比例为1∶0.8；上述组合物中还可加入辅料乳糖，比例为丹参提取物∶乳糖∶羟丙甲基纤维素100KM或羟丙甲基纤维素15KM为0.4-1∶0.1-0.6∶0.4-1，其中乳糖可由微晶纤维素、β-CD、乙基纤维素替换，优选比例为0.4∶0.2∶0.8。丹参提取物-羟丙甲基纤维素骨架片中羟丙甲基纤维素的用量为28.5％～44.4％，丹参素在骨架片中的含量为0.35％～0.85％，丹参酚酸B在骨架片中的含量为0.35％～0.85％含量为12--35％。

本发明所用大孔吸附树脂为F_2D型树脂，以聚苯乙烯为骨架的均孔后交联树脂(Post crosslinked isoporous resin)，它的化学结构如图所示：

它的主要理化性能如下：外观：棕色球状颗粒；粒径范围：0.3～0.6mm；含水量：45～50％；湿真密度：1.05～1.07g/ml；湿视密度：0.70～0.75g/ml；比表面积：700～900m²/g；平均孔径：8～10nm；

下面实验例用于进一步说明本发明。

附图说明

图1：254nm荧光斑点

图2：F乙基纤维素l₃显色后斑点

图3：HPMC粘度影响的实验结果

图4：50℃乙醇溶液中丹参酚酸B随受热时间的浓度变化

实验例1：丹参酚酸的检测：

TLC条件：点样量：10μl。固定相：高效GF₂₅₄板(Merck公司)，展开剂：氯仿-乙酸乙酯-苯-甲酸甲醇(1.5∶2∶1∶1∶0.1)检视：在紫外灯下(254nm)检视，见图1；FeCl₃喷雾显色，在可见光下检视，见图2。

图1：254nm荧光斑点，1、2、3树脂水洗液，4、5、6树脂乙醇洗脱液，7、8、9药材水提液以乙酸乙酯萃取液。图2：FeCl₃显色后斑点，1、2、3树脂水洗液，4、5、6树脂乙醇洗脱液，7、8、9药材水提液以乙酸乙酯萃取液。

实验结果显示，丹参药材的TLC图谱与F_2D树脂醇洗液的TLC图谱一致，并且树脂水洗液中未见斑点。提示树脂精制工艺较好的保留了丹参药材中的酚酸类成分。因此F_2D型树脂适宜对丹参水提液精制。

实验例2：丹参酚酸精制物与水提物中丹参素含量比较

称取丹参超临界萃取后药材粉末1000g三份，按照选定工艺条件，进行提取、大孔树脂精制后回收乙醇干燥。取精制物测定，并与水提物比较。结果见表1。

表1 丹参精制物与水提物中丹参素含量比较

批次(％) 固形物得率(％) 丹参素含量(％) 转移率(％)

丹参水提物 20001105 19.5 0.65 90.2

丹参精制物 20001106 6.7 1.60 76.2

丹参精制物 20001107 6.9 1.51 74.1

丹参精制物 20001108 7.1 1.52 77.0

结果：丹参超临界CO₂萃取后药渣中提取丹参酚酸的工艺制得丹参精制粉末，小试三批，总固物得率为6.9±0.16％，丹参素含量为1.54±0.04％，提示该工艺可降低总固物得率，富集丹参药材中水溶性有效成分。

实验例3：不同速释辅料对丹参酮类体外释放影响

1、基质的影响：1)制剂处方(注：DST为丹参超临界萃取物经乙醇结晶所得精制品简写)

处方1：DST粉末；处方2：DST 1g，聚乙二醇 5g；

处方3：DST 1g，聚乙二醇 5g，乳糖 5g；

处方4：DST 1g，波洛沙姆 5g；

2)实验结果：按照制剂处方制备样品，进行溶出度测定，实验结果见表2。

表2、不同基质制剂中丹参酮IIA、丹参酮I溶出度

取样量W 丹参酮IIA 丹参酮I

(g) 含量溶出浓度溶出度含量溶出浓度溶出度

(％) (μg/ml) (％) (％) (μg/ml) (％)

处方1 0.0983 50.8 0.09^# 0.19^# 18.5 0.04^# 0.21^#

处方2 0.5904 9.21 0.49 0.91 3.10 0.23 1.23

处方3 0.9732 4.50 0.90 2.06 1.58 0.29 1.92

处方4 0.2213 8.22 0.77 4.27 2.81 0.21 3.30

上述实验结果表明：

①未加辅料的DST粉末中丹参酮IIA、丹参酮I体外溶出度很差，仅分别溶出0.19％、0.21％；在人工胃液中溶出的浓度仅约为0.09μg/ml和0.04μg/ml。

②聚乙二醇、波洛沙姆、聚乙二醇与乳糖联合载体均可促进丹参酮结晶的体外分散和溶出，其中聚乙二醇与乳糖联合载体优于聚乙二醇。

③波洛沙姆可显著提高体外溶出效果，其制剂使丹参酮IIA和丹参酮I分别溶出3.30％、4.27％，较聚乙二醇处方为高，在人工胃液中溶出浓度提高了80倍。

2、稀释剂对波洛沙姆-丹参酮制剂溶出度的影响

1)制剂处方设计

处方1：DST 1g，波洛沙姆 10g，甘露醇 10g；

处方2：DST 1g，波洛沙姆 10g，葡萄糖 10g；

处方3：DST 1g，波洛沙姆 10g，乳糖 10g；

处方4：DST 1g，波洛沙姆 10g；

2)实验结果

按照处方制备样品，进行溶出度测定，结果见表3、4。

表3、不同稀释剂的DST-波洛沙姆制剂中丹参酮IIA、丹参酮I溶出度

丹参酮IIA 丹参酮I

取样量含量溶出浓度溶出度含量溶出浓度溶出度

(g) (％) (μg/ml) (％) (％) (μg/ml) (％)

处方1 2.0851 2.00 15.06 36.1 0.72 5.13 34.2

处方2 2.3379 1.91 13.89 31.1 0.69 4.58 28.4

处方3 2.0961 2.16 14.26 31.5 0.77 3.43 21.3

处方4 1.0836 3.80 6.01 14.6 1.43 1.85 11.9

表4、不同时间点处方4中丹参酮溶出度

丹参酮IIA 丹参酮I

0.5h溶出度 1h溶出度 0.5h溶出度 1h溶出度

处方4 31.5％ 35.8％ 21.3％ 25.2％

结果显示：

①单纯波洛沙姆∶DST(1∶10)固体分散剂中丹参酮IIA、丹参酮I的0.5h溶出度分别为14.6％和11.9％，加入乳糖、甘露醇、葡萄糖等水溶性糖类形成的联合载体等均可促进丹参酮-波洛沙姆制剂中丹参酮的释放，其中乳糖与波洛沙姆联用0.5小时可溶出21％---31％。因此选择乳糖作为丹参酮-波洛沙姆制剂的辅料。

②不同时间点溶出度的测定结果显示0.5h的溶出度接近于1h的溶出度，作为速释颗粒筛选处方，本实验采用0.5h的溶出度作为考察指标。

实验例4：不同缓释辅料对丹参酚酸缓释骨架片中丹参素溶出的影响

3、羟丙甲基纤维素用量的影响

1)制剂处方：

处方1：羟丙甲基纤维素100KM-丹参提取物(0.2∶1)；处方2：羟丙甲基纤维素100KM-丹参提取物(0.4∶1)；处方3：羟丙甲基纤维素100KM-丹参提取物(0.6∶1)；处方4：羟丙甲基纤维素100KM-丹参提取物(0.8∶1)；

2)溶出度测定结果：

按照以上制剂处方制备样品，进行溶出度测定。实验结果见表5。

表5不同羟丙甲基纤维素用量丹参制剂的溶出度

溶出度(％)

处方片重(g) 1h 2h 4h 5h 7h 9h

1 0.4524 87.9 93.2

2 0.4199 28.9 42.4 65.9 76.6 85.4 92.9

3 0.4263 26.7 41.6 54.6 61.1 72.7 82.1

4 0.3768 29.1 40.0 55.8 61.3 74.2 78.8

实验结果显示：羟丙甲基纤维素的用量影响在一定范围内影响制剂中丹参素的释放。当羟丙甲基纤维素100KM与丹参提取物比例为0.2∶1时，丹参素迅速释放；当羟丙甲基纤维素100KM与丹参提取物比例为0.4∶1-0.8∶1时，形成骨架片，丹参素释放呈缓释过程，羟丙甲基纤维素用量在一定范围内增加，释药速度减慢。

4、羟丙甲基纤维素粘度的影响

处方5：羟丙甲基纤维素4KM-丹参提取物(0.4∶1)；

处方6：羟丙甲基纤维素15KM-丹参提取物(0.4∶1)；

处方2：羟丙甲基纤维素100KM-丹参提取物(0.4∶1)；

实验结果表明：羟丙甲基纤维素4KM∶丹参提取物(0.4∶1)制成的骨架片，药片很快崩解，在2h左右几乎全部溶出。羟丙甲基纤维素15KM与羟丙甲基纤维素100KM制剂中丹参素的溶出呈缓释过程。5、疏水性辅料乙基纤维素的影响

1)制剂处方

处方6：羟丙甲基纤维素15KM-丹参提取物(0.4∶1)；

处方7：羟丙甲基纤维素15KM-乙基纤维素-丹参提取物(0.4∶0.2∶0.8)；

处方8：羟丙甲基纤维素15KM-乙基纤维素-丹参提取物(0.4∶0.4∶0.6)；

处方9：羟丙甲基纤维素15KM-乙基纤维素-丹参提取物(0.4∶0.6∶0.4)；

2)溶出度测定结果

按照以上制剂处方制备样品，进行溶出度测定。实验结果见表6。

表6不同用量乙基纤维素对羟丙甲基纤维素--丹参制剂溶出度的影响

溶出度(％)

处方片重g 1h 2h 3h 4h 5h 7h

7 0.4371 26.4 38.7 47.5 56.4 66.4 78.2

8 0.4519 24.5 35.6 43.5 50.5 57.3 73.3

9 0.4053 24.3 33.4 41.9 47.9 54.7 67.3

6 0.4391 35.7 48.0 58.2 66.3 73.1 86.7

结果表明：在羟丙甲基纤维素-丹参酚酸中添加乙基纤维素，丹参素的释放仍呈缓释过程，随乙基纤维素用量的增加，药物的释放越慢。

6、其它辅料种类的影响

1)制剂处方

处方10：羟丙甲基纤维素15KM-β-CD-丹参提取物(0.4∶0.2∶0.8)；

处方11：羟丙甲基纤维素15KM-微晶纤维素-丹参提取物(0.4∶0.2∶0.8)；

处方12：羟丙甲基纤维素15KM-乳糖-丹参提取物(0.4∶0.2∶0.8)；

处方13：羟丙甲基纤维素15KM-乙基纤维素-丹参提取物(0.4∶0.2∶0.8)；

2)溶出度测定结果

按照以上制剂处方制备样品，进行溶出度测定。实验结果见表7。

表7不同辅料种类对羟丙甲基纤维素--丹参制剂溶出度的影响

溶出度(％)

处方片重g 1h 2h 3h 4h 5h 7h 9h

10 0.4788 24.4 36.9 46.2 55.7 63.7 72.3 79.8

11 0.4557 27.0 40.2 50.3 58.6 68.6 77.9 82.2

12 0.4796 28.2 43.2 53.9 63.1 72.0 82.6

13 0.4371 26.4 38.7 47.5 56.4 66.4

实验结果显示：在制剂中保持羟丙甲基纤维素用量比例固定的情况下，分别加入乳糖、微晶纤维素、β-CD、乙基纤维素，制剂中丹参素的释放仍呈缓释过程。其中含乳糖制剂药物释放最快，其次为微晶纤维素、乙基纤维素，最慢为β-CD。加入微晶纤维素的制剂处方，制粒均匀，压片过程中不粘冲，易成型，经进一步考察，溶出度稳定，易于工业化大生产。

实验例5：丹参酚酸提取工艺研究：

1、提取次数的筛选确定：

称取丹参药材粉末20g，浸泡2小时，加水煎煮三次，每次0.5小时，滤过，测定提取液中丹参酚酸B的含量，计算提取率。(丹参药材中丹参酚酸B的含量为6.2％)

分次提取液中丹参酚酸B的提取率

药液体积峰面积稀释倍数药液浓度提取量(mg) 提取率(％)

(ml) (mg/ml)

第一次 280 2149.3 5 3.0424 851.9 68.7

第二次 295 658.7 5 0.9427 278.1 22.4

第三次 350 132.7 5 0.2018 70.6 5.7

结论：丹参药材提取两次，丹参酚酸B提取率超过90％，提取比较完全，第三次提取意义不大，因此确定提取次数为两次。

2、提取时间的筛选

称取丹参药材粉末5g两份，浸泡2小时，分别加水煎煮1小时、2小时，滤过，测定提取液中丹参酚酸B的含量，计算提取率。(丹参药材中丹参酚酸B的含量为6.2％)

不同煎煮时间提取液中丹参酚酸B的提取率

药液体积(ml) 稀释倍数峰面积药液浓度(mg/ml) 提取量(mg) 提取率(％)

1h 100 10 898.6 0.2561 256.1 82.6

2h 100 10 710.8 0.2032 203.2 65.5

结论：丹参药材煎煮1小时提取液中丹参酚酸B含量较煎煮2小时多，结果提示长时间煎煮可使丹参酚酸B降解损失。

3、提取方式的比较：

称取丹参药材粉末1g，加水80ml，煎煮0.5小时，滤过，定容100ml，测定提取液中丹参酚酸B的含量，计算提取率。(丹参药材中丹参酚酸B的含量为6.2％)

称取丹参药材粉末1g，加水80ml，超声提取1小时，滤过，定容100ml，测定提取液中丹参酚酸B的含量，计算提取率。(丹参药材中丹参酚酸B的含量为6.2％)

不同提取方式对丹参酚酸B提取率的影响

药液体积(ml) 峰面积药液浓度(mg/ml) 提取量(mg) 提取率(％)

超声 100 348.9 0.1013 10.1 16.3

煎煮 100 1255.9 0.3568 35.7 57.5

结论：煎煮提取较超声提取丹参酚酸B提取量多，因此确定提取方式为煎煮提取。

3、正交实验筛选确定提取条件：

称取丹参药材粉末10g，浸泡2小时，按照正交试验项下条件加水煎煮两次，滤过，合并提取液，测定提取液中丹参酚酸B的含量，计算提取率。(丹参药材中丹参酚酸B的含量为6.2％)

丹参药材中丹参酚酸B提取正交实验筛选因素水平表

溶媒用量提取时间

1 10，8 0.5h

2 15，10 1h

丹参药材中丹参酚酸B提取正交实验实验项

溶媒用量提取时间

1 10，8 0.5h

2 10，8 1h

3 15，10 0.5h

4 15，10 1h

丹参药材中丹参酚酸B提取正交实验结果

试验项药液体积峰面积药液浓度提取量(mg) 提取率(％)

(ml) (mg/ml)

1 5000 119.4 0.1018 508.9 82.1

2 5000 598.1 96.5

3 5000 127.5 0.1074 537.1 86.6

4 5000 150.3 0.1231 615.6 99.2

溶媒用量提取时间

1 178.6 168.7

2 185.8 192.7

R 4.4 12

结论：在设定考察条件下，提取时间是主要影响因素，溶媒用量是次要因素。因此确定提取条件为水提两次，加水量分别为10，8倍，提取时间为1小时。(因素水平设计的说明：提取时间的予实验表明提取1小时，丹参酚酸B提取量较2小时多，因此主要提取时间因素设计为0.5H与1H；基于提取时间的限制，考虑采用相对多的溶媒量，在相对短的时间内提取丹参酚酸B，以避免其在煎煮过程中破坏，因此溶媒水平设计为相对较大的10，8与15，10)

正交实验的重复实验：

取丹参药材粉末70g，加水煎煮两次(10倍量，8倍量)，每次1小时，滤过，合并两次提取液，测定药液体积，取10ml药液，加水稀释定容至100ml，HPLC进样测定。

正交实验重复实验

药液体积稀释倍数进样量峰面积药液浓度提取量提取率

(ml) (μl) (mg/ml) (mg) (％)

1 1320 10 5 1085.93 3.0891 4077.5 94.0

2 1020 10 3 832.4 3.9578 4036.9 93.1

4、浓缩过程的考察：

考察丹参水提液在100℃和60℃水浴中丹参酚酸B的浓度变化

100℃和60℃丹参水提液中丹参酚酸B的受热时间-浓度变化曲线

100℃受热时间峰面积药液浓度 60℃受热时间峰面积药液浓度

(mg/ml) (mg/ml)

0h 895.2 0.2552 0h 895.2 0.2552

0.5h 618.9 0.1773

1h 505.3 0.1453 1h 753.3 0.2152

2h 401.7 0.1162 2h 684.8 0.1959

3h 235.1 0.0692 3h 599.2 0.1718

5h 124.2 0.0379 5h 506.7 0.1457

6h 85.3 0.0270 6h 444.9 0.1283

9h 46.2 0.0152 9h 358.5 0.1018

结论：在100℃受热时间为1小时，降低约30％，受热时间为9小时，降低约95％；

在60℃受热时间为1小时，降低约15％，受热时间为9小时，降低约60％。在50℃受热时间为1小时，几乎不降低，受热时间为8小时，降低约40％。

丹参水提液中丹参酚酸B对热敏感，丹参水提液不宜长时间高温浓缩。

5、考察丹参水提液和丹参甲醇溶液在50℃水浴中丹参酚酸B的浓度变化

丹参水提液和乙醇溶液在50℃水浴中丹参酚酸B的受热时间-浓度变化

水溶液峰面积药液浓度(mg/ml) 50℃甲醇液峰面积药液浓度(mg/ml)

0h 739.5 0.2113 0h 457.5 0.1319

1h 742.8 0.2122 1h 503.3 0.1448

2h 704.9 0.2016 2h 451.1 0.1301

3h 623.6 0.1787 3h 487.0 0.1402

5h 541.6 0.1556 5h 510.4 0.1468

8h 429.9 0.1241 8h

结论：在50℃水浴中丹参乙醇溶液中丹参酚酸B受热5小时几乎不变化，比丹参水提液中丹参酚酸B更为稳定，提示乙醇体系更有利于丹参酚酸B的稳定。

6、丹参大孔树脂精制工艺研究

取水提药液1000ml，过洁净大孔树脂柱(10ml柱长相当于25cm³柱体积，树脂干重7.2867g)，按照1ml/min速度上样(2.5BV/H)，收集过柱液。测定过柱液中丹酚酸B的浓度，结果如下：

1-10号管 10ml/管 11-20号管 20ml/管 21-30号管 30ml/管

序号进样量(μl) 峰面积浓度(mg/ml) 百分比(％)

1 20 -- -- --

3 20 -- -- --

5 20 -- -- --

7 20 -- -- --

9 20 -- -- --

11 20 -- -- --

13 20 37.489 0.0034 0.32

15 20 244.749 0.0180 1.68

17 20 345.909 0.0250 2.35

19 20 490.801 0.0353 3.31

21 10 335.981 0.0488 4.57

23 20 932.315 0.0664 6.22

25 20 1010.381 0.0719 6.74

27 20 1399.317 0.0993 9.30

29 20 1549.826 0.1099 10.3

31 20 919.981 0.1311 12.3

33 10 1068.397 0.1520 14.2

35 10 1166.283 0.1658 15.5

37 10 1379.072 0.1957 18.2

上柱液 2 1504.626 1.0672 100

动态吸附曲线显示，从第30管以后，丹酚酸B泄漏量开始显著增大，说明树脂柱开始不能完全吸附药液中的丹酚酸B，确定0-600ml药液为基本吸附区域，为了丹酚酸B保留完全，600ml作为最大上样量，相当于最大上样量以丹酚酸B计为87.9mg/g干树脂。

洗脱过程考察：按实验确定的最大上样量，以丹参药材提取液过已予处理的树脂柱，水洗至糖的反应为阴性后，分别以2.5倍柱体积(60ml)40％、60％、80％、95％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，定容至100ml，稀释10倍后，测定其中丹酚酸B的含量。结果见下表：

洗脱液体积洗脱液浓度累计洗脱量占总洗脱量的百分比

(ml) (mg/ml) (mg) (％)

40％乙醇 100 4.8983 489.8 68.8

60％乙醇 100 1.5371 153.7 21.6

80％乙醇 100 0.5284 52.8 7.4

95％乙醇 100 0.1555 15.6 2.2

40％、60％、80％、95％乙醇洗脱液HPLC峰形基本一致。

洗脱过程确定为40％、60％、80％乙醇分别洗脱3倍柱体积。

7、干燥工艺的筛选

药液分别置于干燥条件下干燥，干燥完毕后，测定其中丹酚酸B含量，结果如下：

不同干燥方式丹酚酸B保留率实验结果

药粉中含量(％) 保留率(％)

烘干(100℃*5h) 55.7 82.4

减压干燥(60℃*5h) 58.1 89.0

喷雾干燥 61.2 94.1

冷冻干燥 63.1 96.7

理论含量 65.2 100

结果显示喷雾干燥与冷冻干燥丹酚酸B保留率高，因此确定干燥方式为喷雾干燥。

丹酚酸B标准曲线：精密称取丹酚酸B4.8mg，以乙腈：0.5％HAC50ml溶解，按色谱条件注入高效液相仪，进样测定。以峰面积响应值为纵坐标，丹酚酸B含量为横坐标，进行线性回归。结果如下：

丹酚酸B进样量与响应值

进样量(μl) 丹酚酸B含量(μg) 峰面积

0 0 0

3 0.288 195.0

5 0.48 328.8

10 0.96 652.3

15 1.44 1015.8

30 2.88 2038.3

Y＝709.91x-10.547 r＝0.9999 线性范围为0-2.88μg

精密称取丹酚酸B4.8mg，以乙腈：0.5％HAC50ml溶解，按色谱条件注入高效液相仪，进样测定。以峰面积响应值为纵坐标，丹酚酸B含量为横坐标，进行线性回归。结果如下：

丹酚酸B进样量与响应值

进样量(μl) 丹酚酸B含量(μg) 峰面积

5 0.48 119.3

10 0.96 234.3

15 1.44 375.5

30 2.88 789.9

40 3.84 1082.2

50 4.8 1384.7

Y＝293.91x-41.066 r＝0.9996 线性范围为0.48-4.8μg

实施例1：丹参酮精制物及丹参酚酸提取物的制备

将丹参药材粉碎至40目投料后，萃取条件为以30％用量的95％乙醇作为夹带剂，萃取压力35Mpa，萃取温度60℃，流量为11Kg/hKg药材原料；解析条件为，一级解析压力16Mpa、解析温度60℃；二级解析压力6Mpa、解析温度45℃；萃取时间3h；干燥；得丹参酮类提取物；精制得丹参酮精制物；

药渣加水浸泡过夜后，煎煮四次，每次半小时，合并煎液，滤过。滤液过F_2D树脂柱，水洗至糖的反应为阴性后，以丹参生药量15倍的70％乙醇洗脱后，以工业乙醇洗脱近无色，合并洗脱液，回收乙醇后，喷雾干燥，即得丹参酚酸提取物粉末；总固物得率为6.9±0.16％，丹参素含量为1.54±0.04％。

实施例2：丹参提取物缓释制剂的制备

羟丙甲基纤维素100KM 0.4g

微晶纤维素0.2g

丹参提取物0.8g，制成片剂，每片0.45g，每日服3-6片。

实施例3：丹参提取物缓释制剂的制备

羟丙甲基纤维素15KM 0.8g

丹参提取物1g，制成片剂，每片0.45g，每日服3-6片。

实施例4：丹参酮精制物速释制剂的制备

波洛沙姆5g

丹参酮精制物1g，以微粉化工艺制备，颗粒制成片剂或胶囊每片0.45g，每日服2-6片(粒)。

实施例5：丹参酮精制物速释制剂的制备

波洛沙姆10g

乳糖10g

丹参酮精制物1g，以熔融法制剂，颗粒制成片剂或胶囊，片剂或胶囊每片0.45g，每日服3-9片(粒)。

实施例6：丹参酮精制物速释制剂的制备

聚乙二醇5g

丹参酮精制物1g，以熔融法制剂，颗粒制成片剂或胶囊，片剂或胶囊每片0.45g，每日服2-6片(粒)。

实施例7：丹参酮精制物速释制剂的制备

波洛沙姆10g

乳糖10g

丹参酮精制物10g，以微粉化法制备颗粒，制成片剂或胶囊，片剂或胶囊每片0.45g，每日服1-3片(粒)。

实施例8：丹参酚酸提取物的制备

称取丹参药材粉末或超临界萃取后药渣20g，浸泡2小时，加水煎煮2次，每次1小时，滤过；取水提药液500ml，过洁净大孔树脂柱，10ml柱长相当于25cm³柱体积，树脂干重7.2867g，收集过柱液；600ml作为最大上样量，相当于最大上样量以丹酚酸B计为87.9mg/g干树脂；洗脱过程确定为40％、60％、80％乙醇3倍柱体积分别洗脱；丹参乙醇溶液50℃左右减压浓缩；喷雾干燥或冷冻干燥，得丹参酚酸提取物。

实施例9：丹参酚酸提取物缓释片剂

原料：丹参酚酸提取物0.8g，乳糖0.2g，羟丙甲基纤维素100KM 0.8g，制成片剂，每片0.45g，每日服4-12片。

实施例10：

原料：丹参酚酸提取物0.6g，β-CD0.4g，羟丙甲基纤维素15KM 0.6g，制成片剂，每片每粒0.45g，每日服5-15片。

Claims

1、一种丹参酮精制物速释制剂，其特征在于该制剂是由如下原料制成的：

丹参酮精制物∶波洛沙姆或聚乙二醇比例为1∶0.5-12。

2、如权利要求1所述的丹参酮精制物速释制剂，其特征在于所述比例为1∶5。

3、如权利要求1所述的丹参酮精制物速释制剂，其特征在于该制剂是由如下原料制成的：

丹参酮精制物∶波洛沙姆∶乳糖1∶0.5-12∶0.5-12。

4、如权利要求3所述的丹参酮精制物速释制剂，其特征在于其中乳糖可由甘露醇或葡萄糖替换。

5、如权利要求3或4所述的丹参酮精制物速释制剂，其特征在于所述比例为1∶10∶10。

6、如权利要求1、2、3或4所述的速释制剂的制备方法采用熔融法或微粉化法。

7、一种丹参酚酸提取物缓释制剂，其特征在于该制剂是由如下原料制成的：

丹参提取物∶羟丙甲基纤维素100KM或羟丙甲基纤维素15KM为1∶0.4-1。

8、如权利要求7所述的丹参酚酸提取物缓释制剂，其特征在于优选比例为1∶0.8。

9、如权利要求7所述的丹参酚酸提取物缓释制剂，其特征在于该制剂是由如下原料制成的：丹参提取物∶乳糖∶羟丙甲基纤维素100KM或羟丙甲基纤维素15KM为0.4-1∶0.1-0.6∶0.4-1。

10、如权利要求7所述的丹参酚酸提取物缓释制剂，其特征在于其中乳糖可由微晶纤维素、β-CD、乙基纤维素替换。

11、如权利要求9或10所述的丹参酚酸提取物缓释制剂，其特征在于所述比例为0.8∶0.2∶0.4。

12、一种丹参酮精制物及丹参酚酸精制物的制备方法：将丹参药材粉碎投料后，萃取条件为以20-40％用量的70-95％乙醇作为夹带剂，萃取压力30-40Mpa，萃取温度50-75℃，流量为9-12Kg/hKg药材原料；解析条件为，一级解析压力14-18Mpa、解析温度50-75℃；二级解析压力4-8Mpa、解析温度30-50℃；萃取时间2-4h；干燥；得丹参酮类提取物；精制得丹参酮精制物；

药渣加水浸泡过夜后，煎煮2-5次，每次0.5-2小时，合并煎液，滤过；滤液过树脂柱，水洗至糖的反应为阴性后，以丹参生药量13-20倍的30-95％乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇后，喷雾干燥，即得丹参酚酸提取物精制粉末。

13、如权利要求12所述的制备方法，其特征在于该方法为：

药渣加水浸泡过夜后，煎煮四次，每次半小时，合并煎液，滤过。滤液过树脂柱，水洗至糖的反应为阴性后，以丹参生药量15倍的70％乙醇洗脱后，工业乙醇洗脱至近无色，合并洗脱液，回收乙醇后，喷雾干燥，即得丹参提取物精制粉末；总固物得率为6.9±0.16％，丹参素含量为1.54±0.04％，丹参酚酸B含量为50％以上。

14.丹参酚酸提取物的制备方法，其特征在于该方法为：

取丹参药材粗粉或丹参超临界萃取后药渣，浸泡2小时，加水煎煮2次，每次1小时，滤过，药液过洁净大孔树脂柱，上样至相当于最大上样量以丹酚酸B计为87.9mg/g干树脂，水洗至糖的反应为阴性后，以40％-80％乙醇3-9倍柱体积洗脱至几乎无色，收集乙醇洗脱液；丹参乙醇溶液50℃左右减压浓缩；浓缩液喷雾干燥或冷冻干燥，得丹参酚酸提取物。

15、如权利要求12.13或14所述的制备方法，其特征在于该方法中大孔吸附树脂为以聚苯乙烯为骨架的均孔后交联树脂，外观呈棕色球状颗粒；粒径范围0.3～0.6mm；含水量45～50％；湿真密度1.05～1.07g/ml；湿视密度0.70～0.75g/ml；比表面积：700～900m²/g；平均孔径8～10nm。