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CN1288467A - 具有生长激素释放性质的化合物 - Google Patents

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CN1288467A
CN1288467A CN99802165A CN99802165A CN1288467A CN 1288467 A CN1288467 A CN 1288467A CN 99802165 A CN99802165 A CN 99802165A CN 99802165 A CN99802165 A CN 99802165A CN 1288467 A CN1288467 A CN 1288467A
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ethyl
amino
acid
naphthyl
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迈克尔·安科森
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Novo Nordisk AS
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Novo Nordisk AS
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Abstract

本发明公开了通式(Ⅰ)所示的化合物及其在治疗因生长激素缺乏所致医学疾病中的应用。

Description

具有生长激素释放性质的化合物
发明领域
本发明涉及新的化合物、含有它们的组合物及其在治疗生长激素缺乏所致的医学疾病中的应用。
发明背景
生长激素是一种促进所有能够生长的组织生长的激素。此外，已知生长激素对代谢过程产生多种不同的影响，例如促进蛋白质合成和游离脂肪酸活动化，并且在碳水化合物代谢为脂肪酸的能量代谢中起开关作用。生长激素缺乏可以诱发多种严重的医学疾病，例如侏儒症。
生长激素释放自脑垂体。该释放作用受许多激素和神经递质直接或间接的严格调控。生长激素的释放可以被生长激素释放激素(GHRH)促进且可以被促生长素抑制素(somatostatin)抑制。在这两种情况中，这两种激素均释放自下丘脑，但它们的作用主要由位于脑垂体中的特异性受体来介导。还描述了其他刺激脑垂体释放生长激素的化合物。例如精氨酸、L-3,4-二羟基苯基丙氨酸(L-多巴)、胰高血糖素、后叶加压素、PACAP(垂体腺苷环化酶激活肽)、毒覃碱性受体拮抗剂和合成六肽，GHRP(生长激素释放肽)通过直接作用于脑垂体或通过影响下丘脑的GHRH和/或促生长素抑制素释放作用来释放出内源生长激素。
在需要增加生长激素水平的疾病或情况中，生长激素的蛋白质特性致使除了非肠道给药以外的任何给药方式都无效。此外，其他直接起作用的天然促分泌素，例如GHRH和PACAP，都是较长的多肽，所以优选通过非肠道途径给药。
迄今业已公开了应用某些化合物来提高哺乳动物中生长激素水平，例如在EP18072、EP83864、WO89/07110、WO89/01711、WO89/10933、WO88/9780、WO83/02272、WO91/18016、WO92/01711、WO93/04081、WO9517422、WO9517423、WO9514666、WO9419367、WO9534311、WO9602530、WO9615148、WO9613265、WO9622997、WO9635713、WO9638471、WO9632943、WO9700894、WO9706803、WO9709060、WO9707117、WO9711697、WO9722620、WO9723508、WO9724369和WO9734604。
生长激素释放化合物的组合物的重要之处在于其生长激素释放效能及其生物利用度。所以本发明的目的是提供新的具有生长激素释放性质的酰肼类化合物。此外，本发明的目的是提供新的具有特异性和/或选择性的且没有或基本上没有副作用的生长激素释放化合物(生长激素促分泌素)，例如释放LH、FSH、TSH、ACTH、后叶加压素、后叶催产素、皮质醇和/或催乳激素。本发明的目的是提供具有良好口服生物利用度的化合物。
发明概述
本发明提供了在正常试验条件下可直接在体外作用于脑垂体细胞以从中释放生长激素的新化合物。
可以在体外使用这些生长激素释放化合物作为用于研究如何在脑垂体水平下调控生长激素分泌的独特科研工具。
此外，本发明的生长激素释放化合物也可以经体内给药以提高内源生长激素的释放。
发明详述
所以，本发明涉及通式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中：
R1和R2独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
R3a是氢、由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或由一个或多个C1-6-烷基任选取代的芳基或杂芳基；
R4a是由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或C1-7-酰基；
R5a是氢、由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或由一个或多个C1-6-烷基任选取代的芳基或杂芳基；或
R3a和R4a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
R3a和R5a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
R4a和R5a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
a和b独立地为0、1或2；
G是氢、-O-(CH2)k-R27，
J是氢、-O-(CH2)L-R32
Figure 9980216500172
其中R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35和R36独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；
k和L独立地为0、1或2；
D是
Figure 9980216500181
其中R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n、m和q独立地是0、1、2或3；
p是0或1；
M是-CR11=CR11a、亚芳基、亚杂芳基、-O-、-S-或价键；
R11和R11a独立地是氢或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；或
D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R11独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；或
R7和R8或R7和R9或R8和R9任选地形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j独立地是1或2并且U是-O-、-S-或价键；
n和m独立地是0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是-CR11=CR11a-、亚芳基、亚杂芳基、-O-、-S-或价键；
R11和R11a独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基。
此外，式Ⅰ的化合物包括其光学异构体，它们的形式可以是分离的、纯化或部分纯化的光学异构体或其外消旋混合物。
在通式Ⅰ的化合物的R-和/或S-构型中可以存在两个手性碳原子。在一个实施方案中，这两个手性碳原子同时存在于R-构型中。
而且，式Ⅰ的化合物可以具有一个或多个可能为几何异构的碳-碳双键，并且预期可能存在的立体异构体(E或Z异构体)均属于本发明的范围，除非指出具体几何并构体。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，R1是氢。在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R1是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特别是甲基。
在式Ⅰ化合物的又一个实施方案中，R2是氢。在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R2是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特别是甲基。
仍然是在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，R3a是氢。在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R3a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特别是甲基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，R4a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特别是甲基。在式Ⅰ化合物的另一个实施方案中，R4a是C1-7-酰基，例如C2-4-酰基，特别是乙酰基。
仍然是在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，R5a是氢。在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R5a是C1-6-烷基，例如C1-4-烷基，特别是甲基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，R3a和R4a可以与它们所连接的氮原子一起形成杂环体系，该杂环体系被一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代。所述杂环体系可以是芳香族杂环或非芳族杂环，并且可以选自例如吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、噌啉、吡唑烷、氧代吡唑烷或吡唑啉。在一个具体实施方案中，所述杂环体系是氧代吡唑烷。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R3a和R5a可以与它们所连接的氮原子一起形成杂环体系，该杂环体系可被一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代。所述杂环体系可以是芳香族杂环或非芳族杂环，并且选自例如吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、噌啉、吡唑烷或吡唑啉。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，R4a和R5a可以与它们所连接的氮原子一起形成杂环体系，该杂环体系可被一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代。所述杂环体系可以是芳香族杂环或非芳族杂环，并且选自例如氮杂环丙烷、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚或吗啉，特别是吡咯烷或哌啶。
当R3a和R4a构成杂环体系时，R4a和R5a也可以同时形成杂环体系，或R5a是氢、由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或由一个或多个C1-6-烷基任选取代的芳基或杂芳基。
当R3a和R5a构成杂环体系时，R4a和R5a也可以同时形成杂环体系，或R4a是由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或C1-7-酰基。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，a是1。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，b等于1。在另一实施方案中，b是2。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，G是
Figure 9980216500201
其中R27和R28独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一实施方案中，R27和R28同时为氢。在一个实施方案中，G是1-萘基或2-萘基。在上式Ⅰ的化合物中，优选G是2-萘基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中G是
Figure 9980216500202
其中R27、R28、R29、R30和R31独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一实施方案中，R27、R28、R30和R31是氢且R29是芳基。在另一实施方案中，R29是苯基。在上式Ⅰ的化合物中，G优选是联苯-4-基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，G是-O-(CH2)k-R27，其中R27是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k是0、1或2。在另一实施方案中，R27是芳基。在又一实施方案中k等于1。在上式Ⅰ的化合物中，优选G是苄氧基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，G是
Figure 9980216500203
其中R27和R28独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一实施方案中，R27和R28同时为氢。在一个实施方案中G是1H-吲哚-3-基。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，J是其中R32、R33、R34、R35和R36独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一实施方案中，R32、R33、R34、R35和R36均为氢。优选J是苯基。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，J是其中R32和R33独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。在另一实施方案中，R32和R33同时为氢。优选J是2-噻吩基。
在式Ⅰ化合物的另一实施方案中，D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-
其中R7、R8、R9和R10独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n和m独立地为0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是-CR11=CR11a、亚芳基、-O-或-S-；
R11和R11a独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；在一个实施方案中，R7是氢。在第二实施方案中，R7是C1-6-烷基，特别是甲基。在第三实施方案中，R8是氢。在另一实施方案中，R8是C1-6-烷基，特别是甲基。在一个实施方案中，R9是氢。在另一实施方案中，R9是C1-6-烷基，特别是甲基。
在一个实施方案中R8和R9形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j独立地是1或2并且U是-O-、-S-或价键。在另一实施方案中，U是价键。在一个实施方案中i+j的和等于3。
在一实施方案中，n等于0。在另一实施方案中，m等于0。在一实施方案中，m等于1。在另一实施方案中，o等于0。在一实施方案中，p等于0。在另一实施方案中p等于1。在一实施方案中M是-CR11=CR11a-、亚芳基、-O-或-S-。在另一实施方案中M是-CH=CH-。在又一个实施方案中，M是亚苯基。
在式Ⅰ化合物的一个实施方案中，D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-
其中R7、R8、R9和R10独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n和m独立地为0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是价键；
R11和R11a独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基。在一个实施方案中，R7是氢。在第二实施方案中，R7是甲基。在第三实施方案中，R8是氢。在另一实施方案中，R8是C1-6-烷基，特别是甲基。在另一实施方案中，R9是氢。在另一实施方案中，R9是C1-6-烷基，特别是甲基。在一实施方案中，n是0。在另一实施方案中，m是0。在一实施方案中，m等于1。在另一实施方案中，o是0。在又一实施方案中，p是0。在一实施方案中，p是1。
在上式Ⅰ的化合物中，优选的D是3-氨基甲苯基、4-氨基-4-甲基戊-(1E)-烯基、N-甲基-3-氨基甲苯基、3-(1-氨基环丁基)-1-丙烯基或1-氨基-1-甲基乙基。
本发明优选的式Ⅰ化合物是：
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500221
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500232
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500233
3-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺
Figure 9980216500241
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500242
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500243
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲氨基甲基)苯甲酰胺
Figure 9980216500251
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500252
(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500253
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500262
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺
2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-2-甲基丙酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500273
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500281
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500282
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500283
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-N-甲基酰胺
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-{2-苄氧基-1-[N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯基丙基)氨基甲酰基]乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
和
2-氨基-N-[(1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
在上述优选化合物中，最优选(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
通用方法
Figure 9980216500311
通式结构Ⅰ的化合物可以由一-、二-或三取代肼或腙和适当保护的氨基酸和适当的偶联剂(如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并三唑)或肽偶联领域中已知的其他偶联剂、在适宜的溶剂(如二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中制备而成。适当的氨基酸可以采用所属技术领域已知的方法保护和脱保护并且例如T.W.Green所述(《有机合成中的保护基》，第2版，JohnWiley & Sons，纽约，1991)。
相信，式Ⅰ化合物可以提高对酶促蛋白水解降解的抗性，这是因为它们是非天然化合物，特别是因为非天然的模拟酰胺键替代了天然酰胺键。与已知的激素释放肽相比的本发明化合物对蛋白水解降解抗性的增加和尺寸的减小，预期将改进其相对于现有文献中公开的肽的生物利用度。
在上述结构式和本发明说明书全文中，下列术语具有下列确定的含义：
如上具体所述的C1-6-烷基、C1-6-亚烷基、C1-4-烷基或C1-4-亚烷基将包括那些呈直链或支链或环状构型的指定链长的烷基或亚烷基。所述直链烷基的例子是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基及其相应的二价基团，如亚乙基。支链烷基的例子是异丙基、仲丁基、叔丁基、异戊基和异己基及其相应的二价基团，例如亚异丙基。环烷基的例子是C3-6-环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基及其相应的二价基团，如亚环丙基。
上述C1-6-烷氧基将包括那些呈直链或支链或环状构型的指定链长的烷氧基。直链烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。支链烷氧基的例子是异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基和异己氧基。环烷氧基的例子是环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基和环己氧基。
上述C1-7-酰基将包括那些呈直链或支链或环状构型的指定链长的酰基。直链酰基的例子是甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基等。支链酰基的例子是异丁酰基、异戊酰基、新戊酰基等。环酰基的例子是环戊基羰基、环己基羰基等。
在本文中，术语“芳基”将包括一价碳环芳香环基团，该基团可以是单环、双环或多环，例如选自苯基和萘基；该基团被一个或多个C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤素、氨基或芳基任选取代。
在本文中，术语“亚芳基”将包括二价碳环芳香环基团，该基团可以是单环、双环或多环，例如选自亚苯基和亚萘基；该基团被一个或多个C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤素、氨基或芳基任选取代。
在本文中，术语“杂芳基”将包括一价杂环芳香环基团，该基团可以是单环、双环或多环，例如选自吡啶基、1-H-四唑-5-基、噻唑基、咪唑基、吲哚基、嘧啶基、噻二唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基、喹啉基、吡嗪基或异噻唑基，该基团被一个或多个C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤素、氨基或芳基任选取代。
在本文中，术语“亚杂芳基”将包括二价杂环芳香环基团，该基团可以是单环、双环或多环，例如选自吡啶二基、1-H-四唑二基、噻唑二基、咪唑二基、吲哚二基、嘧啶二基、噻二唑二基、吡唑二基、噁唑二基、异噁唑二基、噁二唑二基、噻吩二基、喹啉二基、吡嗪二基或异噻唑二基，该基团被一个或多个C1-6-烷基、C1-6-烷氧基、卤素、氨基或芳基任选取代。
在本文中，术语“杂环体系”将包括芳香环和非芳香环基团，该体系可以是单环、双环或多环并且在环结构内含有至少一个，例如一个、两个或三个氮原子，并且任选含有一个或多个，如一个或两个其他杂原子如硫或氧原子。该杂环体系优选选自吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、噌啉、吡唑烷、吡唑啉、氮杂环丙烷、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、氧代吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚或吗啉。
术语“卤素”是指氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心(手性碳原子)并且其立体异构体，不论是分离的、纯化或部分纯化的立体异构体或是其外消旋混合物均包括在本发明的范围内。
本发明的化合物可以任选地为药学上可接受盐的形式，例如式Ⅰ化合物的药学上可接受的酸加成盐，其包括那些通过将式Ⅰ化合物与无机或有机酸反应制备的酸加成盐，所述无机酸或有机物可例如盐酸、氢溴酸、硫酸、乙酸、磷酸、乳酸、马来酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、柠檬酸、戊二酸、葡糖酸、甲磺酸、水杨酸、琥珀酸、酒石酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、氨基磺酸或富马酸和/或水。
式Ⅰ的化合物可以以药学上可接受酸加成盐的形式给药，或在适当时作为碱金属或碱土金属或低级烷基铵盐给药。相信上述盐形式具有接近于和游离碱形式相同等级的活性。
另一方面，本发明涉及含有通式Ⅰ所示化合物或其药学上可接受盐作为活性组份以及药学上可接受载体或稀释剂的药物组合物。
通过常规技术可以制备含有本发明化合物的药物组合物，例如公开在《Remington氏药物科学》1985或Remington的《药物科学和实践》，第19版(1995)中的方法。所述组合物可以以常规形式，如胶囊、片剂、气溶胶、溶液、混悬液或局部涂敷剂的形式存在。
所用的药学上可接受的载体或稀释剂可以是常规的固体或液体载体。所述固体载体的实例是乳糖、石膏粉、蔗糖、环糊精、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁、硬脂酸或纤维素的低级烷基醚。液体载体的实例是糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧化乙烯或水。
同样地，所述载体或稀释剂可以包括任何所属领域已知的缓释材料，例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，它们可以单独使用或与蜡混合。
如果将固体载体用于口服给药，可以将制剂压片，以粉末或颗粒形式装入在硬明胶胶囊内或采取糖锭剂或锭剂的形式。固体载体的量的变化范围很宽，但通常为约25mg-约1g。如果采用液体载体，制剂可以采取糖浆剂、乳剂软明胶胶囊或灭菌注射液如含水或无水混悬液或溶液的形式。
可以通过常规压片技术制备的典型片剂可以含有：
片芯
活性化合物(游离化合物或其盐)    100mg
胶体二氧化碳(Aerosil)           1.5mg
微晶纤维素(Avicel)              70mg
改性纤维素胶(Ac-Di-Sol)         7.5mg
硬脂酸镁
包衣
HPMC约                          9mg
*Mywacett 9-40约               0.9mg
*薄膜包衣中用作增塑剂的酰化甘油一酯
对于经鼻给药，所述制剂可以含有溶解或悬浮在液体载体中，特别是含水载体中的式Ⅰ化合物，用于气溶胶给药。所述载体可以含有添加剂，例如增溶剂如丙二醇、表面活性剂、吸收促进剂如卵磷脂(磷脂酰胆碱)或环糊精、防腐剂如对羟基苯甲酸酯。
通常，本发明的化合物是以单位剂型分配，每单位剂型中含有50-200mg的活性组份以及药学上可接受载体。
当对病人例如人体给药时，本发明化合物作为药物时的剂量适宜为0.1-500mg/天，例如约5-约50mg，如约10mg/剂。
业已证实，通式Ⅰ的化合物具有在体内释放内源生长激素的能力。所以，所述化合物可应用于治疗需提高血浆生长激素水平的疾病中，例如用于生长激素缺乏症人体或老年患者或家畜的治疗中。
所以，在一个具体方面中，本发明涉及一种用于促进脑垂体释放生长激素的药物组合物，该组合物含有通式Ⅰ的化合物或其药学上可接受盐作为活性组份以及药学上可接受的载体或稀释剂。
另一方面，本发明涉及一种促进脑垂体释放生长激素的方法，该方法包括给需此治疗的患者施用有效量的通式Ⅰ的化合物或其药学上可接受的盐。
另一方面，本发明涉及通式Ⅰ的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于促进脑垂体释放生长激素的药物中的应用。
所属领域的普通技术人员业已熟知，在人体中经常且有效地使用生长激素是多种多样的和变化的。所以，式Ⅰ的化合物可以以促进脑垂体释放生长激素为目的给药，而且因此具有类似的作用或用作生长激素本身。生长激素的用途概括如下：促进老年人体内生长激素的释放，预防糖皮质激素的分解代谢副作用，预防和治疗骨质疏松症，治疗慢性疲劳综合征(CFS)、治疗急性疲劳综合征和选择性手术继发性肌肉损失，刺激免疫系统，加速创伤愈合，促进骨折修复，促进复杂性骨折如disctraction骨生成，治疗骨折继发性消瘦，治疗生长迟缓，治疗肾衰或肾机能不全所致的生长迟缓，治疗心肌病，治疗慢性肝病，治疗血小板减少症、治疗节段性回肠炎，治疗短肠综合征，治疗慢性阻塞性肺部疾病(COPD)，治疗和移植有关的并发症，治疗生理性身材矮小包括生长激素缺乏的儿童和与慢性疾病有关的身材矮小，治疗肥胖和与肥胖有关的生长迟缓，治疗食欲缺乏，治疗与Prader-Willi综合征和特纳氏综合征相关的生长迟缓；提高患有部分性生长激素不敏感综合征患者的生长速度；加快烧伤患者复原且减少住院时间；治疗子宫内生长迟缓、骨骼发育不良、肾上腺皮质机能亢进和库兴氏病；诱发生长激素脉冲式释放；在应激患者中替代生长激素，治疗骨软骨发育不良、Noonan氏综合征、精神分裂症、抑郁症、阿耳茨海默氏病、创伤愈合迟缓和身心障碍，治疗肺机能障碍和通气依赖症(ventilatordependency)，治疗心力衰竭或有关的血管机能障碍，治疗心功能损伤，治疗或预防心肌梗塞，降低血压，预防心室机能障碍或预防再灌注；在慢性透析中治疗成年人；减弱大型手术后蛋白质的分解代谢反应，减小慢性疾病如癌症或AIDS所致恶病质和蛋白质损失；治疗包括胰岛细胞增殖症的血胰岛素增多，用于诱发排卵的佐剂治疗；用于促进胸腺发育和预防与年龄有关的胸腺功能衰退，治疗免疫抑制的患者，治疗sarcopenia，治疗与AIDS有关的消瘦；提高肌肉的强度、可动性，保持皮肤厚度，维持代谢内稳态，维持衰弱老年人的肾脏内稳态，促进成骨细胞、骨骼改型和软骨生长，调节对食物的摄取；刺激同组动物中的免疫系统并且治疗同组动物中衰老性疾病，作为家畜的生长启动子和促进绵羊羊毛的生长，和治疗代谢综合征(综合征X)。此外，式Ⅰ的化合物可用于治疗哺乳动物如人体中的胰岛素(包括NIDDM)耐药性。而且，由于REM(眼速动期)睡眠的增加并且REM潜伏期的减少，本发明的式Ⅰ化合物能够改善睡眠质量且校正相对的衰老生长激素过少症。
对于上述适应症，给药剂量取决于所用的式Ⅰ化合物、给药方式和预期疗法。然而，以每天0.0001-100毫克/干克体重，优选约0.001-约50毫克/千克体重的剂量水平对患者和动物给药通常能够获得内源生长激素的有效释放。此外，当以上述剂量水平给药时，式Ⅰ的化合物没有或基本上没有副作用，这类副作用例如释放LH、FSH、TSH、ACTH、后叶加压素、后叶催产素、皮质醇和/或催乳激素。一般地，适合口服、经鼻、经肺或透皮给药的剂型含有约0.0001mg-约100mg，优选约0.001mg-约50mg的、与药学上可接受的载体或稀释剂混合在一起的式Ⅰ化合物。
本发明的药物组合物选择性地含有与一种或多种具有不同活性的化合物，如抗生素或其他药学活性物质，组合在一起的式Ⅰ化合物。
给药途径可以是任何将活性化合物有效输送至适当或指定作用部位的途径，例如口服、经鼻、经肺、透皮或非肠道给药，优选口服给药。
除了式Ⅰ化合物的药物用途以外，式Ⅰ化合物可以用于研究生长激素释放的调控的体外工具。
式Ⅰ的化合物还用于在体内作为评估脑垂体的生长激素释放性能的工具。例如，分析将这些化合物给药于人体前后所取的血清样本中的生长激素。对各血清中的生长激素的比较可以直接测定出患者脑垂体释放生长激素的能力。
可以给商业上重要的动物施用式Ⅰ化合物以提高其生长速度和生长程度，并且增加产奶量和产毛量，或用于治疗疾病。
生长激素促分泌素式Ⅰ化合物的另一个用途是与其他促分泌素如GHRP(2或6)、GHRH及其类似物、生长激素及其类似物或生长调节素(包括IGF-1和IGF-2)混合。
药学方法
可以体外评估式Ⅰ化合物在大鼠脑垂体原代培养物中释放生长激素的效能和效价，并且所述评估试验按照下列方法进行。
大鼠脑垂体细胞的分离方法是对O.Sartor等人在内分泌学116,1985,952-957页所述方法的改进。从Mollegaard,Lille Skensved,Denmark购得雄性白化Sprague-Dawley大鼠(250±25克)。将大鼠分组笼养(4只/笼)并置于12小时光照循环的室内。室温在19-24℃间变化且湿度为30-60％。
将大鼠斩首并切下脑垂体。除去神经中叶且将残留组织立即置于冰冷的隔离缓冲液(Gey氏培养基(Gibco 041-04030)内，该缓冲液中补加有0.25％D-葡萄糖，2％非必需氨基酸(Gibco 043-01140)和1％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma A-4503))内。将组织切成小片且转移至补加有3.8mg/ml胰蛋白酶(Worthington#3707 TRL-3)和330mg/ml DNA酶(Sigma D-4527)的隔离缓冲液中。将该混合物在37℃和O2/CO2为95/5％的气氛中以70转/分钟温育35分钟。随后在上述缓冲液中洗涤该组织3次。随后用标准巴斯德氏吸移管将该组织抽吸成为单细胞。分散后，细胞经尼龙滤膜(160mm)过滤以除去未消化的组织。将该细胞悬浮液用补加有胰蛋白酶抑制剂(0.75mg/ml,Worthington#2829)的隔离缓冲液洗涤3次，最后再悬浮在培养基中，所用培养基是补加有25mMHEPES(Sigma H-3375)的DMEM(Gibco 041-01965),4mM谷氨酰胺(Gibco 043-05030H),0.075％碳酸氢钠(Sigma S-8875),0.1％非必需氨基酸，2.5％胎牛血清(FCS,Gibco 011-06290),3％马血清(Gibco 034-06050),10％新鲜大鼠血清，1nMT3(Sigma T-2752)和40mg/l地塞米松(Sigma D-4902)pH7.3；培养的密度为2×105细胞/ml。将细胞接种在微量滴定板(Nunc,Denmark)中，浓度为200ml/孔，并且在37℃和8％CO2的条件下培养3天。
化合物试验
培养后，将上述细胞用补加有1％BSA(Sigma A-4503)的刺激缓冲液(Hanks平衡盐溶液(Gibco 041-04020),0.25％D-葡萄糖(Sigma G-5250)和25mMHEPES(Sigma H-3375)pH7.3)洗涤两次并在37℃下预温育1小时。用90ml的刺激缓冲液(37℃)更换上述缓冲液。加入10ml待测化合物的溶液且将平板在37℃和5％CO2的条件下温育15分钟。倾析掉培养基且在rGH SPA试验系统中测定GH的含量。
对剂量为10pM-100mM内的所有混合物进行分析。利用希尔公式(图P,Biosoft)作出剂量-反应的关系图。效能(释放的最大GH值，Emax)表示为GHRP-6的百分Emax。效价(EC50)测定为诱发刺激GH释放最大值一半时的化合物的浓度。
利用下列方法可以评估式Ⅰ化合物的代谢稳定性：
将化合物以浓度为1mg/ml溶解在水中。取25ml此溶液分别加入到175ml的相应的酶-溶液内(得到酶∶底物比例(w/w)=约1∶5)。将溶液在37℃下放置过夜。使用具有选定的离子监控分子离子的流动注射电喷质谱法(ESMS)，相对于相应的零样本对10ml各种降解溶液进行分析。如果和零样本相比，信号的降低超过了20％，则再采用HPLC和质谱来分析剩余的溶液，从而精确鉴定出降解的程度和位点。
稳定性试验中包括采用若干种标准肽(ACTH4-10，血管紧张肽1-14和胰高血糖素)，目的在于检验不同溶液对肽的降解能力。
标准肽(血管紧张肽1-14,ACTH4-10和胰高血糖素)购自Sigma Mo,USA。
酶(胰蛋白酶，糜蛋白酶、弹性蛋白酶氨肽酶M和羧肽酶Y和B)均购自Boehringer Mannheim GmbH(Mannheim,Germany)。
胰酶混合物：存在于100mM碳酸氢铵pH8.0中的胰蛋白酶，糜蛋白酶和弹性蛋白酶(总浓度为0.025mg/ml)。
羧肽酶混合物：存在于50mM碳酸氢铵pH4.5中的羧肽酶Y和B(总浓度为0.025mg/ml)。
氨肽酶M溶液：存在于100mM碳酸氢铵pH8.0中的氨肽酶(0.025mg/ml)。
用两种不同的质谱仪进行质谱分析。Sciex API Ⅲ三联四极LC-MS仪(Sciex Instruments,Thornhill,Ontario)上安装有电喷离子源和Bio-Ion 20 time-of-flight血浆解吸附仪(Bio-Ion Nordic AB,Uppsala,Sweden)。
在APIⅢ仪上，使用单一的离子监控所研究的流动注射分析物中的分子离子来定量分析(降解前后的)化合物。用ABI 140B HPLC元件(Perkin-ElmerApplied Biosystems Divisions,Foster City,CA)将液体流量(甲醇∶水=1∶1)控制在100ml/分钟。将该仪器的参数设定在标准操作条件，并且使用最强分子离子(多数情况下，这相当于双重带电的分子离子)来进行SIM监控。
而且，降解产物的鉴定包括使用血浆解吸附质谱(PDMS)，其中将样本涂敷在硝基纤维素涂层的靶上且在标准的仪器设定下进行。所测定的质谱的准确度一般优于0.1％。
用HY-TACH C-18反相4.6×105mm HPLC(Hewlett-Packard公司，Palo Alto,CA)和标准的乙腈∶TFA(三氟乙酸)分离梯度分离并纯化降解产物。HPLC系统采用HP 1090M(Hewlett-Packard Company,Palo Alto,PA)。
    肽衍生物        MW/SIM离子(amu)  羧肽酶混合物  胰酶混合物
      标准
    ACTH4-10      1124.5/562.8       +      -
   胰高血糖素      3483/871.8       -      -
 胰岛素(B23-29)      859.1/430.6       -      -
 血管紧张肽1-14      1760.1/881.0       -      -
     GHRP-2      817.4/409.6       -      -
     GHRP-6      872.6/437.4       -      -
+：稳定(在降解溶液中24小时后SIM信号的降低小于20％)
-：不稳定(在降解溶液中24小时后SIM信号的降低超过了20％)
任何在此所述的新特征和特征的组合对于本发明来说是重要的。
试验
在下列实施例中将进一步举例说明制备式Ⅰ化合物的方法和含有它们的制剂，但是不能把这些实施例构成对本发明的限定。
化合物的结构是通过高效液相色谱(HPLC)、核磁共振(NMR,Bruker400MHz)或液相色谱-质谱(LC-MS)来鉴定。NMR位移(δ)以百万分之一(ppm)表示并且仅给出选定峰的位移。mp为熔点且以℃表示。柱色谱采用W.C.Still等人在《有机化学杂志》1978,43,2923-2926所述的技术并在Merck硅胶60(Art9385)上进行。用作起始原料的化合物或是已知化合物，或是易于通过已知方法制备的化合物。所用甲醇/氨溶液是含有10％氨的甲醇溶液。
HPLC(方法A1):RP-HPLC分析是使用214nm下的UV检测和HibarLiChrosorb RP-18(5uM)250-4(Merck)柱进行的，洗脱速率为1ml/分钟。所用的两种溶剂体系为：溶剂体系Ⅰ:0.1％三氟乙酸的乙腈溶液。溶剂体系Ⅱ:0.1％三氟乙酸的水溶液。用由20％溶剂体系Ⅰ和95％溶剂体系Ⅱ组成的混合液平衡该色谱柱。在注射样品后，在30分钟内进行在溶剂体系Ⅱ中含有20％-80％溶剂体系Ⅰ的梯度洗脱。然后，将梯度扩展到100％溶剂体系Ⅰ5分钟，接着用100％的该溶剂体系等度洗脱5分钟。RP分析采用在214、254、276和301nm下的UV检测并在218TP54 4.6mm×250mm 5m C-18硅胶柱(TheSeperations Group,Hesperia)上进行分析，所述硅胶柱在42℃下以1ml/分钟洗脱。上述柱用5％乙腈的缓冲溶液平衡，所述缓冲液是由0.1M硫酸铵组成且用4M硫酸调至pH为2.5。注射样品后，在50分钟内用在同一缓冲液中含有5％-60％乙腈的梯度进行洗脱。
HPLC(方法B1):RP-HPLC分析是采用214nm下的UV检测和HibarLiChrosorb RP-18(5uM)250-4(Merck)柱，洗脱速率为1ml/分钟。所用的两种溶剂体系为：溶剂体系Ⅰ:0.1％三氟乙酸的乙腈溶液。溶剂体系Ⅱ:0.1％三氟乙酸的水溶液。用由20％溶剂体系Ⅰ和95％溶剂体系Ⅱ组成的混合液平衡该色谱柱。在注射样品后，在30分钟内进行在溶剂体系Ⅱ中含有20％-80％溶剂体系Ⅰ的梯度洗脱。然后，将梯度扩展到100％溶剂体系Ⅰ5分钟，接着用100％的该溶剂体系等度洗脱5分钟。RP分析采用在214、254、276和301nm下的UV检测并在218TP54 4.6mm×250mm 5m C-18硅胶柱(TheSeperations Group,Hesperia)上进行分析，所述硅胶柱在42℃下以1ml/分钟洗脱。上述柱用含有5％(乙腈+0.1％TFA)的TFA水溶液(0.1％)平衡。注射样品后，在50分钟内用在相同含水缓冲液中的5％-60％(乙腈+0.1％TFA)的梯度进行洗脱。
HPLC(方法H8):HPLC分析是采用Watersmillenium系统且使用Water3mm×150mm 3.5m C-18对称柱进行。将该柱加热至42℃并且在15分钟内以1ml/分钟的流速用5-90％乙腈、85-0％水和10％三氟乙酸(0.5％)水溶液的线性梯度进行洗脱。
实施例1
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
N’-乙酰基肼基羧酸叔丁酯
Figure 9980216500411
向肼基甲酸叔丁酯(1.0g,7.6mmol)和吡啶(3.1ml)在二氯甲烷(5ml)中的溶液内缓慢加入乙酸酐(1.5ml)且将该混合物搅拌过夜。将混合物加入二氯甲烷(50ml)中并用水(2×10ml)和盐水(10ml)洗涤并干燥(MgSO4)，过滤且真空浓缩得到0.95g作为黄色油状物的N’-乙酰基肼羧酸叔丁酯。
LC-MS:Rt=5.39分钟，m/z=349.6(m+1)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.5(s,9H,(CH3)3C-O)；2.05(s,3H,CH3CO)
N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将N’-乙酰基肼羧酸叔丁酯(0.95g,5.45mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中并加入三氟乙酸(10ml)且在室温下将该混合物搅拌1小时。真空浓缩该混合物并用二氯甲烷抽提得到1.0g乙酰肼。随后将(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲氨基)-3-苯基丙酸(0.76g,2.73mmol)溶解在由二甲基甲酰胺(3ml)和二氯甲烷(6ml)组成的混合液中，向其中加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.45g,3.28mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.62g,3.28mmol)的混合物并搅拌20分钟。随后加入乙酰肼(1.0g,5.45mmol)和二异丙基乙基胺(1.87ml)的混合物且将该混合物搅拌过夜。加入乙酸乙酯(50ml)并用水(50ml)洗涤该混合物。水层用乙酸乙酯(3×50ml)提取且将合并的有机层用水(2×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩成油状物，并在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.81g N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，该产物为黄色油状物。
LC-MS:Rt=9.34分钟，m/z=336.4(m+1)
HPLC:Rt=10.17分钟(H8)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.32+1.40(2s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)；2.05(s,3H,COCH3)；2.78(s,3H,N-CH3)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.81g,2.42mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中且加入三氟乙酸(5ml)并在室温下将该混合物搅拌30分钟。真空浓缩该混合物且用二氯甲烷抽提3次，将残留的油状物在硅胶(40克)上层析，用二氯甲烷：(甲醇/氨)(9∶1)洗脱得到0.41g乙酸N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼，该产物为无定形粉末。
随后将(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.63g,1.92mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中且加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.26g,1.92mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.37g,1.92mmol)的混合物并搅拌30分钟。向其中加入乙酸N’((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼(0.41g,1.74mmol)和DIEA(0.39ml)的混合物并搅拌过夜。
向混合物中加入二氯甲烷(50ml)且用水(50ml)洗涤该混合物。有机层用碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩得到油状物，并在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶4)洗脱，得到0.59g N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，该产物为油状物。
LC-MS:Rt=13.68分钟，m/z=574.2(m+1)
HPLC:Rt=13.53分钟(H8)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500431
0℃下，向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.59g,1.08mmol)溶液内加入三氟乙酸(5ml)且搅拌90分钟。真空浓缩该混合物且用二氯甲烷汽提3次。将所得油状物溶解在甲醇/氨(2ml)中并加入二氯甲烷(20ml)和硅胶(5g)且真空浓缩。通过过滤用二氯甲烷(100ml)和二氯甲烷：(甲醇/氨)(9∶1)提取所得粉末，将合并的提取液真空浓缩，得到0.41g粗产物，该产物为泡沫状。
然后，将(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.21g,0.89mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.13g,0.98mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(0.13g,0.98mmol)的混合物并搅拌30分钟。随后，加入上述粗产物(0.40g,0.89mmol)和二异丙基乙基胺(0.20ml)的混合物且将该混合物搅拌过夜。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)洗涤该混合物。有机层用碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩得到0.42g褐色泡沫。将该泡沫溶于二氯甲烷(5ml)中，冷却至0℃，加入三氟乙酸(5ml)，将该混合物搅拌45分钟。用二氯甲烷(50ml)和水(10ml)停止该反应混合物，用固体碳酸氢钠滴定至pH～7。分离有机层且用水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。
将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18Sep-Pak Classic柱体(2.0g，购自WatersTM)上，该柱体预先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗涤。随后采用由水/乙腈/三氟乙酸(10、15、20和25％乙腈在水/0.1％三氟乙酸中的溶液)组成的梯度洗脱剂通过Sep-Pak柱(2g)。合并相关馏分且冷冻干燥，得到0.19g(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸盐，该盐为白色无定形粉末。
LC-MS:Rt=9.21分钟，m/z=572.4(m+1)
HPLC:Rt=26.45分钟(A1),Rt=28.40(B1)
实施例2
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500441
N’-乙酰基-N-甲基肼羧酸叔丁酯
Figure 9980216500442
向溶于二氯甲烷(10ml)中的N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.62g,4.20mmol)的溶液内加入乙酸酐(0.79毫升，8.40mmol)和吡啶(1.36ml,16.80mmol)并且将该混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)且用水(3×10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到0.32g(41％)的N’-乙酰基-N-甲基肼羧酸叔丁酯，该产物为油状物。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.45+1.48(2s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)；1.98(s,3H,COCH3)；3.14+3.17(2s,3H,N-CH3，旋转异构体)乙酸N’-甲基肼
Figure 9980216500443
向溶于二氯甲烷(2ml)中的N’-乙酰基-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.3g,1.59mmol)的溶液内加入三氟乙酸(2ml)并且将混合物搅拌60分钟。将该混合物真空浓缩并用二氯甲烷汽提3次，得到0.32g(100％)乙酸N’-甲基肼三氟乙酸，该产物为薄油状物。
1H NMR(CDCl3):δ2.13(s,3H,COCH3)；2.98(s,3H,N-CH3)
N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500451
向(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-苯基丙酸(0.27g,0.96mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中的溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.13g,0.96mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(0.18g,0.96mmol)并将该混合物冷却至0℃。加入乙酸N’-甲基肼(0.19g,0.96mmol)和二异丙基乙基胺(0.41g,2.40mmol)，将该混合物在室温下搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到0.35g(125％)N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯粗品，该产物为无色油状物。
LC-MS:Rt=10.29分钟，m/z=350.4(m+1)
HPLC:Rt=10.77分钟(H8)
乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼
向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.35g,1.00mmol)的溶液内加入三氟乙酸(2ml)且将混合物搅拌30分钟。将该混合物真空浓缩，用二氯甲烷汽提3次且在硅胶(40g)上层析，用二氯甲烷：(甲醇/氨)(9∶1)洗脱，得到110mg(44％)乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼，该产物为油状物。
1H NMR(CDCl3):δ1.85(s,3H,COH3)；2.25(2s,3H,N-CH3)；3.05(s,3H,N-CH3)
(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺
Figure 9980216500461
向溶于二氯甲烷(5ml)中的2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.18g,0.53mmol)的溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.072g,0.53mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.10g,0.53mmol)且将混合物冷却至0℃。随后加入乙酸N’-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼(0.11g,0.44mmol)和二异丙基乙基胺(0.098g,0.57mmol)且在室温下将混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩且在硅胶(40g)上层析，用乙酸乙酯洗脱，得到0.14g(57％)N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，该产物为无色油状物。
在0℃下向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.14g,0.25mmol)的溶液内加入三氟乙酸(2ml)并将该混合物搅拌90分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)和饱和碳酸氢钠(5ml)，用固体碳酸氢钠滴定该混合物直至pH=7。分离水层且用二氯甲烷(20ml)提取，将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到0.10g(87％)的(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺，该产物油状物。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.68(s,3H,N-CH3)；1.98(s,3H,COCH3)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.066g,0.27mmol)的溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.037g,0.27mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.052g,0.27mmol)且将混合物冷却至0℃。随后加入(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺(0.10g,0.22mmol)和二异丙基乙基胺(0.049毫升，0.29mmol)且在室温下将混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得产物在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.10g(66％)((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，该产物为无色油状物。
将溶于二氯甲烷(2ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-2-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.146mmol)溶液冷却至0℃并加入三氟乙酸(2ml)，将该混合物搅拌30分钟。然后，加入二氯甲烷(50ml)和饱和碳酸氢钠(5ml)，用固体碳酸氢钠滴定该混合物直至pH=7。分离水层且用二氯甲烷(20ml)提取，合并的有机层用盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18 Sep-PakClassic柱体(2.0g，购自WatersTM)上，该柱体已经预先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗涤。随后将由水/乙腈/三氟乙酸(10、50和70％乙腈在水/0.1％三氟乙酸中的溶液)组成的梯度洗脱剂通过该Sep-Pak柱(2g)。合并相关馏分且冷冻干燥，得到0.054g(53％)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸盐，该产物为白色无定形粉末。
LC-MS:Rt=8.74分钟，m/z=586.4(m+1)
HPLC:Rt=29.53(A1)；Rt=31.35(B1)
1H NMR(DMSO)选定峰：δ1.05(s,6H,C-(CH3)2)；1.77(s,3H,COCH3)；6.2(d,1H,C=CH-CO)；6.3(m,1H,CH2-CH=C)
实施例3
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
N’-亚苄基肼羧酸叔丁酯
Figure 9980216500482
向溶于99％乙醇(100ml)中的肼基甲酸叔丁酯(10.0g,75.64mmol)的溶液中加入苯甲醛(7.64毫升，75.64mmol)并将该混合物搅拌60分钟。将该混合物冷却至0℃，过滤且用冷乙醇洗涤沉淀物，干燥，得到13.47g(81％)的N’-亚苄基肼羧酸叔丁酯，该产物为白色结晶。
Mp 184-186℃
1H NMR(CDCl3):δ1.52(s,9H,(CH3)C)；7.34-7.92(m,7H，芳香氢)
N’-亚苄基-N-甲基肼羧酸叔丁酯
向溶于无水四氢呋喃(20ml)中的N’-亚苄基肼羧酸叔丁酯(2.0g,9.07mmol)的溶液内加入碘甲烷(4.54毫升，72.6mmol)并将该溶液冷却至0℃。缓慢加入氢化钠(60％的矿物油分散体，1.09g,27.2mmol)且在室温下将该混合物搅拌3天。加入四氢呋喃(50ml)并过滤该混合物。将滤液真空浓缩，在硅胶(100g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到1.97g(93％)N’-亚苄基-N-甲基肼羧酸叔丁酯，该产物为黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.58(s,9H,(CH3)3C)；3.34(s,3H,N-CH3)
N-甲基-肼羧酸叔丁酯
Figure 9980216500492
向溶于无水四氢呋喃(50ml)中的N’-亚苄基-N-甲基肼羧酸叔丁酯(1.97g,8.41mmol)的溶液内加入钯/碳(10％,0.2g)且将该混合物与氢接触。在消耗了260ml氢气后，用硅藻土过滤该混合物并浓缩，得到1.25g(100％)N-甲基肼甲羧酸叔丁酯。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.5(s,9H,(CH3)3C-O)；3.05(s,3H,N-CH3)
N-甲基-N’-((2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基丙酰基)肼羧酸叔丁酯
Figure 9980216500493
向溶于二氯甲烷(10ml)中的(2R)-(N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基)-3-苯丙酸(0.6g,1.5mmol)溶液中加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.22g,1.65mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.29g,1.50mmol)且将混合物冷却至0℃。随后加入N-甲基-肼羧酸叔丁酯(0.22g,1.50mmol)和二异丙基乙基胺(0.33毫升，1.95mmol)且在室温下将混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(20ml)且用水(20ml)、饱和碳酸氢钠(20ml)、盐水(20ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤并且真空浓缩。所得产物在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.65g(82％)N’-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-苯基丙酰基)-N-甲基肼羧酸叔丁酯，该产物为白色泡沫。
向溶于二氯甲烷(4ml)中的N’-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-苯基丙酰基)-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.65g,1.23mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且将该混合物在室温下搅拌60分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)并用盐水(2×20ml)、磷酸盐缓冲液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到0.34g(90％)的N-甲基-N’-((2R)-2-(甲氨基)-3-苯基丙酰基)肼羧酸叔丁酯，该产物为黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.3+1.45(s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)；2.2(s,3H,N-CH3)2.5(s,3H,N-CH3)
N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基)-3-苯基丙酰基]-N-甲基肼羧酸叔丁酯
向溶于二氯甲烷(10ml)中的(2R)-[N-(9H-芴-9-基甲氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-萘-2-基丙酸(0.6g,1.33mmol)溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.18g,1.33mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.25g,1.33mmol)且将混合物冷却至0℃。加入N-甲基-N’-((2R)-2-(甲氨基)-3-苯基丙酰基)肼羧酸叔丁酯(0.34g,1.11mmol)和二异丙基乙基胺(0,25毫升，1.44mmol)并且在室温下将该混合物搅拌过夜。加入二氯甲烷(50ml)并用盐水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得产物在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(2∶1)洗脱，得到0.53g(64％)的N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基)-3-苯基丙酰基]-N-甲基肼羧酸叔丁酯，该产物为无色油状物。
1H NMR(DMSO)选定峰：δ1.25+1.55(2s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)；2.3+2.35(2s,3H,N-CH3,，旋转异构体)；2.65+2.68(2s,3H,N-CH3，旋转异构体)；2.95+3.0(2s,3H,N-CH3，旋转异构体)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯
Figure 9980216500511
0℃下，向溶于二氯甲烷(2ml)中的N’-[(2R)-2-(N-((2R)-2-[N-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基)-N-甲基氨基)-3-苯基丙酰基]-N-甲基肼羧酸叔丁酯(0.27g,0.36mmol)的溶液内加入三氟乙酸(2ml)并将该混合物搅拌90分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)和饱和碳酸氢钠(5ml)且用固体碳酸氢钠滴定该混合物直至pH=7。分离水层并用二氯甲烷(20ml)提取，将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到0.18g(78％)N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，该产物为白色无定形粉末。
LC-MS:Rt=14.03分钟，m/z=641.4(m+1)
HPLC:Rt=13.80分钟(H8)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯
Figure 9980216500521
向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N’-甲基肼基羰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.18g,0.28mmol)的溶液中加入乙酸酐(0.053ml)和吡啶(0.027ml)且将该混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物并用二氯甲烷汽提3次，得到0.21g(110％)的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，该产物为无色油状物。
LC-MS:Rt=16.48分钟，m/z=683.0(m+1)
HPLC:Rt=15.81分钟(H8)
(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺
Figure 9980216500522
向溶于二氯甲烷(4ml)中的N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酸氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.21g,0.31mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且将该混合物搅拌60分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)并用盐水(2×20ml)、磷酸盐缓冲液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到0.13g(92％)的(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺，该产物为无色油状物。
LC-MS:Rt=8.57分钟，m/z=461.2(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500531
向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.1g,0.42mmol)的溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.06g,0.42mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.08g,0.42mmol)且将混合物冷却至0℃。随后加入(2R)-N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺(0.13g,0.28mmol)和二异丙基乙基胺(0.062毫升，0.36mmol)且在室温下将混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得产物在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.12g(63％)((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，该产物为无色油状物。
将溶于二氯甲烷(2ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.146mmol)溶液冷却至0℃并加入三氟乙酸(2ml)，将该混合物搅拌30分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)和饱和碳酸氢钠(5ml)，用固体碳酸氢钠滴定该混合物直至pH=7。分离水层且用二氯甲烷(20ml)提取，将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18 Sep-PakClassic柱体(2.0g，购自WatersTM)上，该柱体已经预先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗涤。随后将由水/乙腈/三氟乙酸(10、50和70％乙腈在水/三氟乙酸(0.1％)中的溶液)组成的梯度洗脱剂通过该Sep-Pak柱。合并相关馏分且冷冻干燥得到0.086g(84％)(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N’-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺的三氟乙酸盐，该产物为白色无定形粉末。
LC-MS:Rt=9.255分钟，m/z=586.4(m+1)
HPLC:Rt=31.47分钟(A1)；Rt=33.30(B1)
1H NMR(DMSO)选定峰：δ5.3(dd,1H,C=CH-CO)5.7(t,1H,CH-CH2C6H5)6.15(d,1H,CH2-CH=C)6.4(m,1H,CH-CH2C10H7)
实施例4
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500541
N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯
0℃下，向溶于无水四氢呋喃(40ml)中的肼基羧酸叔丁酯(1.0g,7.56mmol)的溶液中加入氢化钠(60％的油分散体，2.73g,68mmol)和碘甲烷(11.3毫升，181mmol)且将该混合物搅拌3天。随后加入四氢呋喃(100ml)并过滤该悬浮液，将滤液真空浓缩。将所得产物溶解在乙酸乙酯中并在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱并且浓缩，得到0.53g(40％)的N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯，该产物为薄油。
1H NMR(CDCl3):δ1.48(s,9H,(CH3)3C-O)；2.6(s,6H,2N-CH3)2.9(s,3H,N-CH3)
N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
向溶于二氯甲烷(4ml)中的N,N’,N’-三甲基肼羧酸叔丁酯(0.52g,2.99mmol)的溶液内加入三氟乙酸(4ml)并将该混合物搅拌60分钟。将该混合物真空浓缩且用二氯甲烷汽提3次，得到0.61g的N,N,N’-三甲基肼三氟乙酸盐，该产物为薄油。
随后将(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸(1.0g,3.58mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.34g,1.79mmol)并搅拌30分钟。随后加入N,N,N’-三甲基肼三氟乙酸盐(0.37g,1.96mmol)和二异丙基乙基胺(0.92g,5.34mmol)的混合物且将该混合物搅拌2天。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(50ml)洗涤该混合物。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(2×10ml)和水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且在硅胶(100g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.30g的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，该产物是无定形粉末。
HPLC:Rt=13.03分钟(H8)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.23+1.35(2s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)2.25+2.42+2.45(3s,6H,N-N(CH3)2，旋转异构体)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将溶于二氯甲烷(1ml)中的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.3g,0.89mmol)的溶液内加入三氟乙酸(1ml)并将该混合物搅拌30分钟。将该混合物真空浓缩，用二氯甲烷汽提3次并且悬浮在二氯甲烷：(甲醇/氨)(1∶1)(2ml)中，沉淀出三氟乙酸铵。随后加入乙醚(10ml)并过滤该混合物，真空浓缩滤液，得到0.31g(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸三甲基肼，该产物为油状物。
随后将(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.35g,1.07mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中并加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.15g,1.07mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.21g,1.07mmol)的混合物且搅拌30分钟。随后加入(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸三甲基肼(0.21g,0.89mmol)和二异丙基乙基胺(0.20ml)并将该混合物搅拌过夜。加入二氯甲烷(30ml)并用水(10ml)洗涤该混合物。有机层用碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩为油状物，并且在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(3∶7)洗脱，得到0.43g的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯，该产物为油状物。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ0.92+1.22(2s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)5.0+5.3(2t,1H,CH-CH2C6H5，旋转异构体)6.3+6.45(2t,1H,CH-CH2C10H7,旋转异构体)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500571
0℃下，向溶于二氯甲烷(2ml)中的N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.43g,0.79mmol)溶液内加入三氟乙酸(2ml)并搅拌30分钟。将该混合物真空浓缩且用二氯甲烷汽提3次。将所得油状物溶解在甲醇/氨(2ml)中并加入二氯甲烷(20ml)和硅胶(5g)，真空浓缩。通过过滤用二氯甲烷(50ml)和二氯甲烷：(甲醇/氨)(9∶1)提取所得粉末，将合并的提取液真空浓缩，得到0.36g粗产物，该产物为泡沫。
将(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.12g,0.48mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)中并加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.065g,0.48mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.092g,0.48mmol)的混合物且搅拌30分钟。然后，加入所得粗产物(0.18g,0.40mmol)和二异丙基乙基胺(0.09g,0.53mmol)的混合物且将该混合物搅拌过夜。
加入二氯甲烷(50ml)并用水(10ml)洗涤该混合物。有机层用碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩得到0.14g的无色油状物。将油状物溶解在二氯甲烷(2ml)中，冷却至0℃，加入三氟乙酸(2ml)并将混合物搅拌30分钟。用二氯甲烷(50ml)和水(10ml)停止该反应混合物，用固体碳酸氢钠滴定直至pH-7。分离有机层并用水(10ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。
将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18 Sep-Pak Classic柱体(2.0g，购自WatersTM)上，该柱体预先用乙腈(100ml)和水(100ml)洗涤。随后将由水/乙腈/三氟乙酸(10、15、20和25％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)组成的梯度洗脱剂通过Sep-Pak。合并相关馏分和冷冻干燥，得到0.072g(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺的三氟乙酸盐，该产物为白色无定形粉末。
LC-MS:Rt=9.96分钟，m/z=572.4(m+1)
HPLC:Rt=35.28分钟(A1)；Rt=37.45(B1)
1H NMR(DMSO)选定峰：δ5.1(t,1H,CH-CH2C6H5)6.1(t,1H,CH2-CH=C)6.2(d,1H,C=CH-CO)6.4(t,1H,CH-CH2C10H7)
实施例5
3-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺
向溶于二氯甲烷(10ml)中的3-[(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)甲基]苯甲酸(0.18g,0.48mmol)溶液中加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.065g,0.48mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.092g,0.48mmol)且将混合物冷却至0℃。随后加入(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺(0.18g,0.40mmol)和二异丙基乙基胺(0.089毫升，0.52mmol)且在室温下将混合物搅拌过夜。随后加入二氯甲烷(50ml)且用水(10ml)、饱和碳酸氢钠(10ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。所得产物在硅胶(40g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗脱，得到0.12g(37％)(3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]苄基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯，该产物为无色油状物。
向溶于二氯甲烷(4ml)中的(3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]苄基)氨基甲酸((9H-芴-9-基)甲基)酯(0.12g,0.15mmol)的溶液中加入三(2-氨乙基)胺(4ml)且将该混合物搅拌90分钟。随后加入二氯甲烷(50ml)并用盐水(2×20ml)、磷酸盐缓冲液(pH=6,2×20ml)、水(20ml)、盐水(10ml)洗涤该混合物，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。
将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18 Sep-Pak Classic柱体(0.25g，购自WatersTM)上，该柱体预先用乙腈(10ml)和水(10ml)洗涤。随后将由水/乙腈/三氟乙酸(10、30和70％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)组成的梯度洗脱剂洗脱Sep-Pak(2g)。合并相关馏分且冷冻干燥得到0.08g(77％)3-氨基甲基-N-甲基N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺的三氟乙酸盐，该产物为无定形粉末。
LC-MS:Rt=9.87分钟，m/z=580.2(m+1)
HPLC:Rt=35.28分钟(A1)；Rt=37.43(B1)
1H NMR(DMSO)选定峰：δ5.7(t,1H,CH-CH2C6H5)6.2(t,1H,CH-CH2C10H7)6.8-7.9(m,16H，芳香氢)
实施例6
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500591
N-(1-(N’N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨酸甲酸叔丁酯
Figure 9980216500592
将溶于二氯甲烷中的(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸(3.0g,10.74mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(2.06g,10.74mmol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(1.46g,10.74mmol)的溶液搅拌30分钟。随后加入N’,N’-二甲基肼(1.23g,16.11mmol)和二异丙基乙基胺(2.39毫升，13.96mmol)的混合物且将该混合物搅拌过夜。
向该混合物中加入乙酸乙酯(100ml)且用水(20ml)洗涤。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(2×10ml)和水(50ml)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且在硅胶(100g)上层析，用庚烷∶乙酸乙酯(2∶3)洗脱，得到2.19g N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)乙基)]氨酸甲酸叔丁酯，该产物为无定形粉末。
HPLC:Rt=10.81分钟(H8)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.25+1.30+1.45+1.50(4s,9H,(CH3)3C-O，旋转异构体)2.45+2.50+2.60(3s,6H,N-N(CH3)2，旋转异构体)2.80(s,3H,N-CH3)
(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’二甲基肼
Figure 9980216500601
向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.19g,6.81mmol)的溶液内加入三氟乙酸(2ml)并在室温下搅拌90分钟。将该混合物真空浓缩且用二氯甲烷(3×2ml)汽提3次，定量生成(2R)-2-甲基氨基-3-苯丙酸N’,N’二甲基肼的三氟乙酸盐。
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ2.30(s,3H,HN-CH3)；2.45+2.50(2s,6H,N-N(CH3)2，旋转异构体)
N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将溶于二氯甲烷(20ml)中的2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸(1.77g,5.37mmol)的溶液内加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.73g,5.37mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(1.03g,5.37mmol)并将该混合物搅拌30分钟。随后加入(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’-二甲基肼(2.41g,5.37mmol)和二异丙基乙基胺(3.7ml,21.5mmol)并在室温下搅拌过夜。将混合物真空浓缩，并且在硅胶(100g)上用二氯甲烷(90)：甲醇/氨(10/1)层析，得到2.52g N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯，该产物为黄色油状物。
LC-MS:Rt=13.18分钟，m/z=53.2(m+1)
HPLC:Rt=14.12分钟(H8)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.15+1.25+1.30+1.45(4s,9H,(CH3)3-C，旋转异构体)
(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺
在0℃下，向溶于二氯甲烷(5ml)中的N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(2.52g,4.73mmol)溶液中加入三氟乙酸(5ml)并搅拌60分钟。真空浓缩该混合物且用二氯甲烷汽提3次，定量得到(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺的三氟乙酸盐，该产物为黄色油状物。
HPLC:Rt=7.61分钟(H8)
LC-MS:Rt=7.72分钟，m/z=433.2(m+1)
((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500621
向溶于二氯甲烷(5ml)中的(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸(0.35g,1.42mmol)的溶液中加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.193g,1.42mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.272g,1.42mmol)的混合物且搅拌30分钟。随后加入所得(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺粗产物和二异丙基乙基胺(0.61毫升，3.55mmol)的混合物且将该混合物搅拌过夜。将混合物真空浓缩且在硅胶(40g)上用乙酸乙酯(95)：甲醇/10％氨(5)层析，得到0.37g((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯，该产物是油状物。
HPLC:Rt=14.51分钟(H8)
LC-MS:Rt=13.39分钟，m/z=658.4(m+1)
0℃下向溶于二氯甲烷(3ml)中的((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(0.36g,0.55mmol)的溶液中加入三氟乙酸(3ml)且将该混合物搅拌30分钟。加入二氯甲烷(50ml)和水(10ml)并且用固体碳酸氢钠滴定该溶液直至pH＞7。用二氯甲烷(25ml)提取水层并将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤且真空浓缩。
将所得产物溶解在乙腈/水1∶20(10ml)中并且上样至C-18 Sep-Pak Classic柱体(0.25g，购自WatersTM)上，该柱体预先用乙腈(10ml)和水(10ml)洗涤。随后将由水/乙腈/三氟乙酸(10、30和70％乙腈在水/三氟乙酸中的溶液)组成的梯度洗脱剂通过该Sep-Pak(2g)。合并相关馏分且冷冻干燥，得到196mg(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酰胺的三氟乙酸盐，该产物为白色无定形粉末。
HPLC:Rt=30.42分钟(A1)；Rt=30.38(B1),Rt=8.40分钟(H8)
LC-MS:Rt=8.99分钟，m/z=588.4
实施例7
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例6)的制备方法、用2(R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯基丙酸来制备。
N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500632
LC-MS:Rt=8.92分钟，m/z=328.4(m+1)
1H NMR(CDCl3)选定峰：δ1.35+1.40+1.42+1.45(4s,9H,C-(CH3)3，旋转异构体)2.45+2.55+2.60(3s,6H,(CH3)2N-N，旋转异构体)2.80+2.85(2s,3H,N-CH3)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=13.96分钟(H8)；
LC-MS:Rt=13.11分钟，m/z=539.4(m+1)
(2R)-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺
HPLC:Rt=7.41分钟(H8)；
LC-MS:Rt=7.74分钟，m/z=439.2(m+1)
((3E)-4-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500651
HPLC:Rt=14.43分钟(H8)；
LC-MS:Rt=13.31分钟，m/z=664.4(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
HPLC:Rt=30.03分钟(H8),Rt=29.88分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.97分钟，m/z=564.4(m+1)
实施例8
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲基氨基甲基)苯甲酰胺
Figure 9980216500653
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例6)的方法、用3-[叔-丁氧基羰基甲基氨基)甲基]苯甲酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-5-甲基己-2-烯酸进行制备。
N-(3-[N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]苄基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=14.63分钟(H8)；
LC-MS:Rt=13.68分钟，m/z=680.2(m+1)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲基氨基甲基)苯甲酰胺
Figure 9980216500662
HPLC:Rt=31.17分钟(A1),Rt=30.58分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.92分钟，m/z=580.2(m+1)
实施例9
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500671
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例4)的制备方法、用2(R)-N-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基-D-4,4’-联苯基丙氨酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸制备。
N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=16.70分钟(H8)；
LC-MS:Rt=17.29分钟，m/z=573.4(m+1)
(2R)-3-(联苯-4-基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺
Figure 9980216500681
HPLC:Rt=8.56分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.51分钟，m/z=473.2(m+1)
((3E)-4-[N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500682
HPLC:Rt=16.22分钟(H8)；
LC-MS:Rt=17.16分钟，m/z=698.6(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500683
HPLC:Rt=37.23分钟(A1),Rt=38.88分钟(B1),Rt=10.88分钟(H8)；
LC-MS:Rt=11.14分钟，m/z=598.4(m+1)
实施例10
(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例4)的制备方法、用(2E)-4-(1-(叔-丁氧基羰基氨基)环丁基)丁-2-烯酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸制备上述化合物。
(1-((2E)-3-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]烯丙基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500692
HPLC:Rt=15.75分钟(H8)；
LC-MS:Rt=16.63分钟，m/z=684.2(m+1)
(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500701
HPLC:Rt=35.28分钟(A1),Rt=36.92分钟(B1),Rt=10.48分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.57分钟，m/z=584.4(m+1)
实施例11
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500702
按照(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例9)的制备方法但用N-氨基哌啶代替N,N’,N’-三甲基肼进行制备。
N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500711
LC-MS:Rt=13.68分钟，m/z=362.0(m+1)
(2R)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(哌啶-1-基)丙酰胺
HPLC:Rt=5.55分钟(H8)；
LC-MS:Rt=6.87分钟，m/z=262.4(m+1)
N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500713
HPLC:Rt=16.22分钟(H8)；
LC-MS:Rt=15.41分钟，m/z=599.2(m+1)
(2R)-3-(联苯-4-基)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]丙酰胺
HPLC:Rt=9.11分钟(H8)；
LC-MS:Rt=9.71分钟，m/z=499.2(m+1)
((3E)-4-[N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=16.25分钟(H8)；
LC-MS:Rt=15.13分钟，m/z=724.6(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
HPLC:Rt=37.03分钟(A1),Rt=35.93分钟(B1),Rt=10.45分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.24分钟，m/z=624.4(m+1)
实施例12
(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-萘基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，但用(2R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯丙酸进行制备。
N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500732
HPLC:Rt=12.88分钟(H8)；
LC-MS:Rt=13.29分钟，m/z=342.2(m+1)
(2R)-2-(甲基氨基)-3-(2-噻吩基)丙酰三甲基肼
HPLC:Rt=5.26分钟(H8)；
LC-MS:Rt=6.67分钟，m/z=242.6(m+1)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=15.85分钟(H8)；
(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺
Figure 9980216500743
HPLC:Rt=8.79分钟(H8)；
LC-MS:Rt=9.72分钟，m/z=453.2(m+1)
((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=15.83分钟(H8)；
LC-MS:Rt=16.19分钟，m/z=678.2(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500752
HPLC:Rt=33.85分钟(A1),Rt=35.38分钟(B1)；
LC-MS:Rt=10.02分钟，m/z=578.2(m+1)
实施例13
(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，但用2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸代替(2R)-2-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸进行制备。
((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500762
HPLC:Rt=13.85分钟(H8)；
LC-MS:Rt=14.24分钟，m/z=522.2(m+1)
(2R)-2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]丙酰胺
Figure 9980216500763
HPLC:Rt=9.02分钟(H8)；
LC-MS:Rt=9.06分钟，m/z=422.2(m+1)
((3E)-4-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基氨基甲酰基)-1,1-二甲基丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500771
HPLC:Rt=13.98分钟(H8)；
LC-MS:Rt=15.24分钟，m/z=647.4(m+1)
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺
HPLC:Rt=30.56分钟(A1),Rt=32.10分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.24分钟，m/z=547.4(m+1)
实施例14
2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500781
按照类似于(2E)-4-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺(实施例13)的方法，但用2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基丙酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸进行制备。
[(1R)-1-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=13.51分钟(H8)；
LC-MS:Rt=13.68分钟，m/z=607.4(m+1)
2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-2-甲基丙酰胺
HPLC:Rt=29.8分钟(A1),Rt=31.29分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.21分钟，m/z=507.6(m+1)
实施例15
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500792
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，用N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺代替N,N’,N’-三甲基肼进行制备。
N-(哌啶-1-基)甲酰胺
Figure 9980216500793
在40℃下，将在密封管内的N-氨基哌啶(2.0ml,18.5mmol)和甲酸甲酯(2.3ml,37mmol)的溶液搅拌4天。真空浓缩该混合物，将其悬浮在醚(100ml)中且过滤，得到1.84g的N-(哌啶-1-基)甲酰胺，该产物为白色粉末。
1H NMR(CDCl3):δ1.40(m,6H,-CH2CH2CH2CH2CH2-)2.75(m,4H,-CH2CH2-N-CH2CH2-)6.80(d,1H,NH)7.90+8.30+8.35(3s,1H,CHO-N，旋转异构体)
N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺
Figure 9980216500801
在0℃，向氢化铝锂(0.66g,17.4mmol)在干四氢呋喃(20ml)中的悬浮液中加入溶于四氢呋喃(20ml)中的N-(哌啶-1-基)甲酰胺(1.86g,14.5mmol)溶液并将混合物搅拌3小时。随后加入乙酸乙酯(20ml)和6N盐酸(30ml)且在减压下除去四氢呋喃。该混合物用30％氢氧化钠滴定至pH11，用二氯甲烷(3×100ml)提取水层，将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤且真空浓缩。所得油状物在硅胶(40g)上层析，用二氯甲烷(9)：甲醇(1)洗脱，得到1.76g的N-甲基-N-(哌啶-1-基)胺，该产物为黄色薄油。
1H NMR(CDCl3):δ1.65+1.90(2m,6H,-CH2CH2CH2CH2CH2-，旋转异构体)2.75(s,3H,N-CH3)3.25(m,4H,-CH2CH2-N-CH2CH2-)
N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500802
HPLC:Rt=15.12分钟(H8)；
LC-MS:Rt=15.74分钟，m/z=376.4(m+1)
(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(哌啶-1-基)丙酰胺
HPLC:Rt=7.15分钟(H8)；
LC-MS:Rt=8.56分钟，m/z=276.4(m+1)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500812
HPLC:Rt=17.53分钟(H8)；
LC-MS:Rt=18.20分钟，m/z=587.4(m+1)
(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯基乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺
HPLC:Rt=9.61分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.76分钟，m/z=487.4(m+1)
((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500821
HPLC:Rt=17.42分钟(H8)；
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
HPLC:Rt=38.85分钟(A1),Rt=40.19分钟(B1),Rt=11.42分钟(H8)；
LC-MS:Rt=12.11分钟，m/z=612.4(m+1)
实施例16
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例15)的制备方法，但用(2R)-2-(N-(叔-丁氧基羰基)-N-甲基氨基)-3-(噻吩-2-基)丙酸代替(2R)-2-(叔-丁氧基羰基甲基氨基)-3-苯丙酸进行制备。
N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500832
HPLC:Rt=14.85分钟(H8)；
LC-MS:Rt=15.39分钟，m/z=382.2(m+1)
(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-(哌啶-1-基)-3-(2-噻吩基)丙酰胺
HPLC:Rt=6.83分钟(H8)；
LC-MS:Rt=8.34分钟，m/z=282.2(m+1)
N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
HPLC:Rt=17.53分钟(H8)；
LC-MS:Rt=17.83分钟，m/z=593.4(m+1)
(2R)-N-甲基-2-(甲基氨基)-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2(2-噻吩基)乙基]-3-(2-萘基)丙酰胺
HPLC:Rt=9.48分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.62分钟，m/z=493.4(m+1)
((3E)-1,1-二甲基-4-[N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酰基]丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500851
HPLC:Rt=17.19分钟(H8)；
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
HPLC:Rt=39.47分钟(A1),Rt=41.43分钟(B1),Rt=11.30分钟(H8)；
LC-MS:Rt=12.17分钟，m/z=618.4(m+1)
实施例17
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500853
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺(实施例1)的制备方法，但用3-吡咯烷酮代替乙酸肼。
N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡咯烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500861
HPLC:Rt=10.70分钟(H8)；
LC-MS:Rt=10.34分钟，m/z=348.4(m+1)
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
Figure 9980216500862
HPLC:Rt=14.22分钟(H8)；
LC-MS:Rt=14.84分钟，m/z=559.4(m+1)
(2R)-N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基-2-(甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酰胺
HPLC:Rt=8.26分钟(H8)；
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
HPLC:Rt=29.21分钟(A1),Rt=8.43分钟(H8)；
LC-MS:Rt=9.24分钟，m/z=584.4(m+1)
实施例18
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500873
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，但用N-氨基哌啶代替三甲基肼进行制备。
HPLC:Rt=34.78分钟(A1),Rt=33.74分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.81分钟，m/z=598.4(m+1)
实施例19
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500881
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，但用N-氨基吡咯烷代替三甲基肼进行制备。
HPLC:Rt=31.78分钟(A1),Rt=30.78分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.92分钟，m/z=584.4(m+1)
实施例20
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-N-甲基酰胺
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例19)的制备方法，但用(2R)-叔-丁氧基羰基氨基-N-甲基-D-4,4’-联苯基丙氨酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸。
HPLC:Rt=34.80分钟(A1),Rt=34.04分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.46分钟，m/z=610.4(m+1)
实施例21
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500891
按照类似于(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺(实施例4)的制备方法，但用3-苄氧基-2-叔-丁氧基羰基氨基丙酸代替2(R)-(N-叔-丁氧基羰基-N-甲基氨基)-3-(萘-2-基)丙酸同时用N-叔-丁氧基羰基-a-氨基异丁酸代替(2E)-5-(叔-丁氧基羰基氨基)-5-甲基己-2-烯酸。
分离出两种非对映异构体：
化合物1:
HPLC:Rt=32.20分钟(A1),Rt=33.78分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.64分钟，m/z=498.2(m+1)
化合物2:
HPLC:Rt=31.05分钟(A1),Rt=32.56分钟(B1)；
LC-MS:Rt=9.42分钟，m/z=498.2(m+1)
实施例22
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-[(1R)-2-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500901
按照类似于2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺(实施例21)的制备方法，但用(2R)-2-甲基氨基-4-苯基丁酸N,N二甲基肼代替(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丙酸N’,N’-二甲基肼进行制备。
分离出两种非对映异构体：
化合物1:
HPLC:Rt=28.44分钟(A1),Rt=28.73分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.21分钟，m/z=498.4(m+1)
化合物2:
HPLC:Rt=30.50分钟(A1),Rt=30.50分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.61分钟，m/z=498.4(m+1)
实施例23
2-氨基-N-{2-苄氧基-1-[N-((1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]氨基甲酰基]乙基}-2-甲基丙酰胺
按照类似于2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯基丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺(实施例22)的制备方法，但用(2R)-2-氨基-4-苯基丁酸N,N二甲基肼代替(2R)-2-甲基氨基-3-苯基丁酸N’,N’-二甲基肼进行制备。
分离出两种非对映异构体：
化合物1:
HPLC:Rt=27.82分钟(A1),Rt=27.78分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.41分钟，m/z=484.4(m+1)
化合物2:
HPLC:Rt=29.48分钟(A1),Rt=29.58分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.67分钟，m/z=498.4(m+1)
实施例24
2-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
按照类似于2-氨基-N-{2-苄氧基-1-[N-((1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]氨基甲酰基]乙基}-2-甲基丙酰胺(实施例23)的制备方法，但用(2R)-2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸代替3-苄氧基-2-叔-丁氧基羰基氨基丙酸。
HPLC:Rt=25.65分钟(A1),Rt=27.71分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.11分钟，m/z=493.4(m+1)
实施例25
2-氨基-N-[(1R)-1-{N-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
按照类似2-氨基-N-[(1R)-1-[(1R)-1-(N,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺(实施例24)的制备方法，但用(2R)-2-甲基氨基-4-苯基丁酸N,N’-二甲基肼代替(2R)-2-氨基-3-苯基丁酸N’,N’-二甲基肼。
HPLC:Rt=27.02分钟(A1),Rt=27.31分钟(B1)；
LC-MS:Rt=8.07分钟，m/z=507.4(m+1)。

Claims (18)

1．通式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中：
R1和R2独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
R3a是氢、由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或由一个或多个C1-6-烷基任选取代的芳基或杂芳基；
R4a是由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或C1-7-酰基；
R5a是氢、由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基，或由一个或多个C1-6-烷基任选取代的芳基或杂芳基；或
R3a和R4a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
R3a和R5a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
R4a和R5a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系，该杂环体系由一个或多个C1-6-烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代；或
a和b独立地为0、1或2；
G是氢、-O-(CH2)k-R27，
Figure 9980216500022
J是氢、-O-(CH2)L-R32
Figure 9980216500031
其中R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35和R36独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；
k和L独立地为0、1或2；
D是其中R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n、m和q独立地是0、1、2或3；
p是0或1；
M是-CR11=CR11a、亚芳基、亚杂芳基、-O-、-S-或价键；
R11和R11a独立地是氢或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；或
D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-(CHR10)o-(CH2)n-其中R7、R8、R9和R10独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；或
R7和R8或R7和R9或R8和R9任选地形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j独立地是1或2并且U是-O-、-S-或价键；
n和m独立地是0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是-CR11=CR11a、亚芳基、亚杂芳基、-O-、-S-或价键；
R11和R11a独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基。
2．根据权利要求1所述的化合物，其中R1是C1-6-烷基。
3．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中R2是氢或C1-6-烷基。
4．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中R3a是氢或C1-6-烷基。
5．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中R4a是C1-6-烷基或C1-7-酰基。
6．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中R5a是氢或C1-6-烷基。
7．根据权利要求1-3或6任一项所述的化合物，其中R3a和R4a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系。
8．根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其中R4a和R5a与它们所连接的氮原子一起构成杂环体系。
9．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中a和b独立地是1或2。
10．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中G是-O-(CH2)k-R27，
Figure 9980216500041
其中R27、R28、R29、R30和R31独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基；k是0、1或2。
11．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中J是
Figure 9980216500042
或
Figure 9980216500043
其中R32、R33、R34、R35和R36独立地是氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6-烷基或C1-6-烷氧基。
12．根据上述权利要求任一项所述的化合物，其中D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-
其中R7、R8、R9和R10独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n和m独立地是0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是-CR11=CR11a-、亚芳基、-O-或-S-；
R11和R11a独立地是氢，或由一个或多个芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基。
13．根据权利要求1-11任一项所述的化合物，其中D是
R7-NH-(CR8R9)p-(CH2)m-M-(CHR10)o-(CH2)n-
其中R7、R8、R9和R10独立地是氢或由一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基任选取代的C1-6-烷基；
n和m独立地是0、1、2或3；
o和p独立地是0或1；
M是价键。
14．根据权利要求12或13所述的化合物，其中R8和R9形成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j独立地是1或2并且U是-O-、-S-或价键。
15．根据上述权利要求任一项所述的化合物选自：
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-{N-[(1R)-2-(N’-乙酰基-N-甲基肼基)-1-苄基-2-氧代乙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
3-氨基甲基-N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)苯甲酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500072
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-(2-噻吩基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500073
N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-2-苯乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基-3-(N-甲氨基甲基)苯甲酰胺
Figure 9980216500081
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500082
(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500083
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500091
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-(2-噻吩基)-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500092
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)酰胺
Figure 9980216500093
2-氨基-N-((1R)-2-(1H-吲哚-3-基)-1-(N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基)乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500101
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-苯乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500102
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-[(1R)-1-(N-甲基-N-(哌啶-1-基)氨基甲酰基)-2-(2-噻吩基)乙基]氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500103
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-1-(N-[(1R)-1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡唑烷-1-基)乙基]-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500111
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((哌啶-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
Figure 9980216500112
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-甲基-N-((1R)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}-2-(2-萘基)乙基)酰胺
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-((1R)-2-(联苯-4-基)-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-((吡咯烷-1-基)氨基甲酰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-N-甲基酰胺
Figure 9980216500121
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-甲基-N-[(1R)-2-苯基-1-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)乙基]氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500122
2-氨基-N-(2-苄氧基-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}乙基)-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500123
2-氨基-N-{2-苄氧基-1-[N-((1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基)氨基甲酰基]乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基氨基甲酰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
Figure 9980216500132
和
2-氨基-N-[(1R)-1-{N-[(1R)-1-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-3-苯丙基]-N-甲基氨基甲酰基}-2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺
16．一种药物组合物，该组合物含有上述权利要求任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性组份以及药学上可接受的载体或稀释剂。
17．一种用于促进哺乳动物脑垂体释放生长激素的方法，该方法包括给所述哺乳动物给药有效量的上述权利要求任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或上述任一项组合物权利要求中所述的组合物。
18．上述化合物权利要求任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于促进哺乳动物脑垂体释放生长激素的药物中的应用。
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