CN117552115B - 用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库及其应用，所述通用型抗原肽库包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5所示的5个抗原肽，所述通用型抗原肽库可在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中应用。该通用型抗原肽库为一种经过溶水性修饰且同时靶向PD‑L和WT1的通用型新抗原肽库，相比个体化新抗原，可以更及时、便捷、标准化地治疗或预防肿瘤防复发或者进展；相比现有单一WT1新抗原，PD‑L1靶标的加入使得免疫协同作用更突出，治疗效果得到提升，同时对现有序列进行溶水性修饰后，增加了肽库制备应用的可行性。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库及其应用。
背景技术
T细胞免疫选择性地识别和消除病原体和异常细胞，包括癌细胞。对于维持我们身体的稳态至关重要。然而，T细胞不受控制的过度激活也可能攻击正常细胞。为了防止这种自身免疫反应，共抑制免疫检查点蛋白，如细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4 (CTLA-4)、程序性死亡-1 (PD-1)和程序性死亡配体(PD-L1)，在正常生理条件下，调节着T细胞的活动。在肾细胞癌(RCC)、乳腺癌、结直肠癌、胃癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、甲状腺乳头状癌和睾丸癌等的癌细胞中，PD-L1的高表达与不良预后相关。事实上，癌细胞上的PD-L1与肿瘤浸润性T细胞上的PD-1的结合激活了Src同源区域2结构域磷酸酶(SPH2)，抑制了T细胞受体(TCR)途径和T细胞活性。基于上述发现，针对PD-L1(如atezolizumab, avelumab和durvalumab)的治疗性抗体被开发出来，并在各种类型癌症的临床试验中显示出令人鼓舞的结果。
WT1基因（Wilm tumor gene1）是从Wilms瘤(Wilms tumor)细胞中分离出来的一种能编码含锌指状多肽的抑癌基因。许多研究发现几乎所有白血病原始细胞（无论系别）持续表达WT1，而且大多数这类原始细胞中，WT1核蛋白可被检出。由于WT1基因在白血病及各种实体瘤包括肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌中高表达，且在这些肿瘤中起癌基因作用，提示WT1蛋白可以作为一个新的超表达的肿瘤抗原。
合成肽疫苗是近年来随着分子生物学及免疫学的进展而发展起来的一种新的疫苗，可以诱导机体产生特异性的免疫应答，而且其副作用轻微、安全性好，是目前疫苗研究的一个新的方向，广泛应用与抗肿瘤及抗病毒免疫治疗。为了提高肿瘤疫苗临床应用的效果，人们一直在筛选以MHC-I类分子限制的方式、由CD8+T 细胞特异性识别的新抗原。T 细胞识别的新抗原为与细胞表面的 MHC-I 类或 II 类分子结合的肽，其长度约为 8-12 个氨基酸。
虽然个体化新抗原鉴定可以通过个体的全基因组测序(WGS)、WES和转录组测序数据进行预测模型计算出来，但是个体化新抗原的预测和制备周期都非常长，且制备成本较高。因此构建通用型抗原肽库更能标准化和规模化解决实际应用的问题。因此基于驱动基因的复发性热点突变构建的通用型抗原多肽库可以克服患者特异性的问题，具有广泛应用于不同类型癌症的免疫治疗的潜力。事实上，已经鉴定出识别BCR-ABL、突变体IDH1-R132H和KRAS-G12D的T细胞，针对这些突变的疫苗和过继T细胞治疗在临床前和临床研究中得到验证。
因此，如果同时联合针对PD-L1和WT1靶标，对机体进行免疫，将会使机体同时产生针对PD-L1和WT1蛋白的特异性免疫应答，并产生协同作用，从而使机体能比单个WT1抗原库更有效地抑制、清除肿瘤细胞，为相关肿瘤的预防及治疗提供更优药物方案。然而现有的通用性抗原肽无法同时靶向PD-L和WT1且在水溶液中溶解性较差，无法很好的应用。
因此，有必要开发一种同时靶向PD-L和WT1且在水溶液中溶解性好的通用型抗原肽库。
发明内容
为了解决所述技术问题，本发明提供了一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库及其应用，该通用型抗原肽库同时针对PD-L1和WT1靶标，不仅可实现现货模式从而更及时、便捷、标准化地用于肿瘤临床治疗，而且在水溶液中具有良好的溶解性，为肽库制剂制备提供的更优解决方案。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
在本发明的第一方面，提供了一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库，所述通用型抗原肽库包括以下5个抗原肽：
抗原肽1：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
抗原肽2：氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
抗原肽3：氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；
抗原肽4：氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；
抗原肽5：氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
在本发明的第二方面，本发明提供了一种编码所述用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的核酸分子。
所述核酸分子能够表达所述抗原肽；
在本发明的第三方面，提供了一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的表达载体。
所述表达载体能够在原核或者真核宿主细胞中表达所述核酸。所述载体可以是常规的载体；具体可以为质粒载体、噬菌体载体或病毒载体；
在本发明的第四方面，提供了一种包含所述的表达载体的工程菌或真核宿主细胞。
在本发明的第五方面，提供了一种负载所述的通用型抗原肽库表位多肽的抗原递呈细胞。
在本发明的第六方面，提供了一种针对所述的通用型抗原肽库表位多肽的特异性免疫效应细胞。
在本发明的第七方面，提供了一种所述的通用型抗原肽库表位多肽或所述的核酸分子或所述的表达载体或所述的表达工程菌或所述的抗原递呈细胞或所述的特异性免疫效应细胞在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中的应用。
进一步地，所述治疗或预防的肿瘤为表达HLA-A02:01、HLA-A02:06、HLA-A02:07、HLA-A24:02、HLA-A30:01、HLA-A33:03、HLA-B13:02、HLA-B15:01、HLA-B46:01、HLA-C03:02、HLA-C03:03、HLA-C03:04、HLA-C04:01、HLA-C06:02、HLA-C07:02、HLA-C08:01的肿瘤即可，即所述肿瘤包括胃癌、结肠癌、肺癌、食管癌、头颈部鳞癌胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、非霍奇金淋巴瘤和胶质母细胞瘤中的至少一种。
在本发明的第八方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括所述的通用型抗原肽库表位多肽、所述的核酸分子、所述的表达载体、所述的表达工程菌、所述的抗原递呈细胞、所述的特异性免疫效应细胞中的至少一种。
在本发明的第九方面，提供了一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库试剂盒，所述试剂盒包括所述的通用型抗原肽库。
进一步地，所述试剂盒还包括溶剂，所述溶剂包括生理盐水、PBS缓冲液、超纯水、脂质体或DSMO。
本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
本发明提供的用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库，建立了一个同时针对PD-L1和WT1靶标通用型抗原肽库。相比个体化新抗原，可以更及时、便捷、标准化地治疗或预防肿瘤防复发或者进展，相比现有单一WT1新抗原，PD-L1靶标的加入使得免疫协同作用更突出，治疗效果得到提升，因此实现了现货模式从而更及时、便捷、标准化地用于肿瘤临床治疗；而且本申请发明人对现有的WT1新抗原肽序列做了溶水性修饰，增加了一段亲水性氨基酸序列，这使得本发明的通用型抗原肽相比现有抗原肽的原始序列可以更快速的合成并且在水溶液中具有良好的溶解性，为肽库制剂制备提供的更优解决方案。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为通用型抗原肽库致敏的树突状细胞(DC)体外诱导HLA-02：01、HLA-A24:02阳性肺癌病人外周血抗原特异性CTL细胞的IFN-γ分泌的ELISPOT检测结果；其中，纵轴表示106 个CD8+T细胞中IFN-g+斑点形成单位数，横轴表示刺激细胞。PW0201表示用通用型抗原肽库负载的HLA-0201靶细胞，PW2402表示用通用型抗原肽库负载的HLA-A24:02靶细胞，+表示阳性对照（使用CD3负载的靶细胞），Control表示没有负载肽的靶细胞。
图2为干扰素γ（a图）和肿瘤坏死因子α释放试验结果（b图）。
图3为抗原肽特异性T细胞回输PDTX小鼠评估疗效的结果。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本发明，本发明的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本发明，而非限制本发明。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
下面将结合实施例及实验数据对本申请的一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库及其应用进行详细说明。
实施例1、基于数据分析并筛选获得高亲和力肽
1、人群高频率HLA分型的筛选：引用这个"我国常见及确认的 HLA 等位基因表(CWD)2.2 版本"数据库，取HLA一类ABC三型中Allele frequency>1%的作为人群高频率HLA分型。不同HLA分型的人群分布频率结果如表1所示。
表1
由表1可知，HLA-A02:01、HLA-A02:06、HLA-A02:07、HLA-A24:02、HLA-A30:01、HLA-A33:03、HLA-B13:02、HLA-B15:01、HLA-B46:01、HLA-C03:02、HLA-C03:03、HLA-C03:04、HLA-C04:01、HLA-C06:02、HLA-C07:02、HLA-C08:01人群中比例非常高，显示出通用型新抗原肽库广泛的应用性。
2、HLA-A02:01、HLA-A02:06、HLA-A02:07、HLA-A24:02、HLA-A30:01、HLA-A33:03、HLA-B13:02、HLA-B15:01、HLA-B46:01、HLA-C03:02、HLA-C03:03、HLA-C03:04、HLA-C04:01、HLA-C06:02、HLA-C07:02、HLA-C08:01高亲和力肽的筛选。
首先对如表2所示的候选肽通过使用NetMHCpan4.1(一类MHC分型8~14位氨基酸序列)进行亲和力分析，之后对亲和力打分BA_Rank结果进行排序，并对每条候选选择打分最小的几条(strong binder(SB BA_Rank<0.5),weak binder(WB BA_Rank<2))。
表2-候选肽
不同HLA分型与通用型抗原肽库多肽的亲和力中，只有抗原肽8、抗原肽9、抗原肽10、抗原肽11、抗原肽12具有强亲和力（如表3所示），SB（rank≦0.5）。
表3
抗原肽8、抗原肽9、抗原肽10、抗原肽11、抗原肽12与HLA-A02:01、HLA-A02:06、HLA-A02:07、HLA-A24:02、HLA-A30:01、HLA-A33:03、HLA-B13:02、HLA-B15:01、HLA-B46:01、HLA-C03:02、HLA-C03:03、HLA-C03:04、HLA-C04:01、HLA-C06:02、HLA-C07:02、HLA-C08:01具有强亲合力。因此将抗原肽8、抗原肽9、抗原肽10、抗原肽11、抗原肽12作为通用型抗原肽库。
实施例2、对实施例1筛选到的高亲和力肽进行溶水性修饰
1、为了提高抗原肽的溶水性，本申请对抗原肽8、抗原肽9、抗原肽10、抗原肽11、抗原肽12的序列均做了溶水性修饰：在5’端增加了一段亲水性氨基酸序列（KKKKKKKKKSLVR），修饰后的抗原肽8-修饰后的抗原肽12即为本申请的抗原肽1-抗原肽5，具体序列见表4。
2、检测本发明的抗原肽1-抗原肽5（即修饰后的抗原肽8-修饰后的抗原肽12）与修饰前的抗原肽8-抗原肽12的溶解度。
为使用BCA检测试剂盒检测通用型抗原肽库和传统序列在生理盐水中的溶解度，溶解浓度是1mg/ml，溶解时间是20min。
（1）配制多肽溶液，使用生理盐水，将多肽溶解于生理盐水中，
溶解浓度是1mg/ml。
（2）标准品的配制
先配制BCA工作液，依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50:1配制15.3 mlBCA工作液，并充分混匀。注：配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀。然后根据下表稀释BSA标准品
（3）20min后，取25μl表格中新鲜配制的BSA标准液，加入到96孔板中，将待测样本A11，A12，A13，B11，B12，B13，C11，C12，C13进行10000rpm，离心1min，取15ul上清和10ul稀释剂加入到96孔板中，吸取测试样本时观察溶液颜色，是否澄清。
（4）每孔中加入200 μl BCA工作液，并充分混匀。
（5） 加盖，37℃孵育30 min后冷却至室温。
（6）用紫外分光光度计于562 nm处检测其吸光度，并计算其溶解比例。
溶解比例结果见表4
表4
由表4可知，相比于修饰前的抗原肽8-抗原肽12的溶解度（3.37%-11.06%），本发明抗原肽1-抗原肽5（即修饰后的抗原肽8-抗原肽12）的溶解度达到了90.12%-99.03%，表明经过本发明修饰后抗原肽的溶解度大大提高。经过溶水性修饰的新抗原多肽序列相比原始序列可以更容易合成并且在水溶液中具有良好的溶解性，为肽库药物制剂制备提供的更优解决方案。因此，将本发明抗原肽1-抗原肽5（即修饰后的抗原肽8-修饰后的抗原肽12）作为用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库。
实施例3、体外肿瘤细胞杀伤实验验证抗原肽效率
本发明实施例采用HLA-02:01、HLA-A24:02阳性肺癌病人外周血淋巴细胞来源抗原特异性CTL的体外诱导，操作步骤如下：
1、采用HLA-02：01、HLA-A24:02阳性肺癌病人抗凝外周全血，通过淋巴细胞分离液(Ficoll-Histopaque 1.077) 密度梯度离心 (室温，400´g，30分钟)，取界面细胞，置入50ml离心管中，用无钙镁PBS (pH7.2)－EDTA (2mM) 洗细胞3次，获得外周血单个核细胞(PBMC)。所获得的单个核细胞用完全培养基 (含10％胎牛血清的RPMI1640) 悬浮PBMC，按1´107细胞/孔铺于6孔板，37°C、5％CO2孵育2小时后，轻晃板子，吸出非贴壁细胞, 冻存备用。
2、贴壁细胞用含人重组rhGM-CSF (500 U/ml，苏州近岸蛋白质科技股份有限公司，GMP-CC79) 和人重组rhIL-4 (10 ng/ml，苏州近岸蛋白质科技股份有限公司，GMP-CD03)的DC无血清培养基液，在37°C、5％CO2培养箱中进行培养。培养到第七天，用肽SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5分别致敏4小时。同时复苏冻存的非贴壁细胞 (富含淋巴细胞)，悬浮于10%胎牛血清的RPMI1640培养基中，调整细胞浓度为4×106细胞/ml，分别取0.5ml加入至上述经肽P109-117致敏的自体DCs中，于37°C、5%二氧化碳条件下共培养 (T：DCs=10:1)，此为第一轮的刺激。之后于共培养的第五天加入20U/ml rhIL-2，培养7天后收集上述淋巴细胞，同样以10：1的比例再与新鲜制备的2×105/ml肽致敏的同体DCs用10%胎牛血清RPMI1640培养液共培养进行第二轮的刺激。同样的刺激每周一次共刺激三次。培养过程中每隔3天加入一次20 U/ml rhIL-2 (苏州近岸蛋白质科技股份有限公司，CX66)，2-3天半量更换新鲜培养基，并依据需要进行细胞的分孔扩增，末次刺激后的7天收集细胞，使用免疫磁珠阳性选择分选CD8+T细胞，方法严格依照厂商提供的说明书进行。 同时选用PBMC加CD3和不加多肽作为对照组。
3、分选出的CD8+T效应细胞：
（1）ELISPOT检测
经免疫磁珠分选出的CD8+ T细胞悬浮于10%胎牛血清的RPMI1640培养基中作为反应细胞，调整细胞浓度为5×106/ml，细胞悬液直接转入包被有抗IFN-g抗体的ELISPOT检测板，100μl/孔。RMA-S细胞用4000 rad钴60照射去增殖后作为刺激细胞，结合PD-L1、WT1抗原肽，调整细胞浓度为5×106/ml，然后将细胞悬液分别加入已含有反应细胞的检测孔中，100μl/孔。参照IFN-g ELISPOT检测试剂盒说明书的方法检测分泌IFN-g 的T细胞集落。
ELISPOT检测结果如图1所示，可知：相比于对照组，实验组分泌更多的IFN-g 的T细胞集落，表明本发明实施例2提供的用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库包含了靶向PD-L和WT1的新抗原多肽序列，且表位多肽与我国民众中常见的高频分型HLA-A11:01、HLA-A24:02、HLA-C07:02、HLA-C01:02、HLA-A02:01具有强亲合力，其可以在HLA-A11:01、HLA-A24:02、HLA-C07:02、HLA-C01:02、HLA-A02:01阳性健康人外周血中诱导出特异性的HLA-A11:01、HLA-A24:02、HLA-C07:02、HLA-C01:02、HLA-A02:01限制性的具有高杀伤活性和高IFN-γ分泌能力细胞毒T淋巴细胞。因此本发明提供的同时靶向PD-L和WT1的通用型抗原肽库比单一的WT1靶向抗原具有更优的免疫治疗潜力。
（2）干扰素γ和肿瘤坏死因子α释放试验
本发明实施例采用HLA-02:01阳性肺癌病人外周血淋巴细胞来源新抗原特异性CTL的体外杀伤HLA-02:01阳性肺癌细胞，检测干扰素γ和肿瘤坏死因子α释放，操作步骤如下：
通过IFN-γ和TNF-α释放法测定新抗原特异性CTL细胞的抗肿瘤反应性。将HLA-02:01阳性肺癌病人外周血淋巴细胞来源新抗原特异性CTL或传统T细胞与HLA-02:01阳性肺癌细胞在96孔板上按不同比例（1、1；5、1；10、1）共培养过夜。将细胞离心，收集上清，根据制造商的说明(BioLegend, San Diego, CA)，通过ELISA测定分泌的IFN-γ和TNF-α的水平。测量分三次进行。
为了确定细胞内IFN-γ水平，根据制造商的说明，用细胞活性化鸡尾酒刺激1×106 新抗原特异性CTL或常规T细胞2小时。加入后进行流式细胞术CD3抗体(APC偶联)，然后固定，渗透和添加IFN-γ抗体。使用FlowJo软件对相同的样本进行分析。测量分三次进行。
常规T细胞或新抗原CTL细胞与肺癌细胞在96孔板中共培养过夜。离心细胞，收集上清，取ELISA法检测各组分泌的IFN-γ、TNF-α水平。数据所示为三个独立实验的代表。
结果如图2所示，可知HLA-02:01阳性肺癌细胞组的特异性T细胞的IFN-γ、TNF-α分子的水平明显上升，说明本发明的通用抗体看可激活免疫应答。
实施例4、抗原肽特异性T细胞回输PDTX小鼠评估疗效
1、PDX小鼠制备：（a）患者肿瘤标本取出后，立即用9‰次氯酸钠消毒，然后转移至装有适量人体组织培养液的50ml离心管中，并在冰上运至动物中心; （b）将标本转移到含有少量组织培养基的100mm培养皿中，将标本切成小块，并盖上盖子放在冰上； （c）用70％酒精灭菌后，将标本移植到裸鼠右侧背部靠近腋窝皮下，每组8只小鼠（4-6周）； （d）让小鼠自然生长，并每周测试两组小鼠的各种指标。
2、小鼠分组实验：PDX小鼠模型分为两组，即对照组和实验组：新生抗原特异性CTL组。每组5只小鼠，对照组不进行任何治疗，实验组：新生抗原特异性CTL组在肿瘤形成后的第9天和第11天用实施例2的用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的新生抗原疫苗免疫。每隔3天观察荷瘤小鼠的全身情况、活动状态和腹部体征，尤其是腹股沟肿瘤的生长情况（大小，体积，质地，活性），并用游标卡尺测量肿瘤的长（L），宽（W），高（H），并用公式V =π/ 6（L * W * H）计算肿瘤的体积，并在4周后处死小鼠。
实验结果如图3所示，新生抗原特异性CTL组的小鼠由于经过T细胞回输治疗法身了了肿瘤消退或肿瘤缩小。
最后，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等
同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库，其特征在于，所述通用型抗原肽库包括以下5个抗原肽：
抗原肽1：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
抗原肽2：氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
抗原肽3：氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；
抗原肽4：氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；
抗原肽5：氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
2.一种编码权利要求1所述的用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的核酸分子。
3.一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的表达载体，其特征在于，所述表达载体能够表达权利要求1所述的抗原肽。
4.一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的表达工程菌，其特征在于，所述工程菌包含权利要求3所述的用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库的表达载体。
5.一种负载权利要求1所述的通用型抗原肽库表位多肽的抗原递呈细胞。
6.权利要求1所述的通用型抗原肽库表位多肽或权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的表达载体或权利要求4所述的表达工程菌或权利要求5所述的抗原递呈细胞在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中的应用，其特征在于，所述肿瘤为表达HLA-A02:01、HLA-A02:06、HLA-A02:07、HLA-A24:02、HLA-A30:01、HLA-A33:03、HLA-B13:02、HLA-B15:01、HLA-B46:01、HLA-C03:02、HLA-C03:03、HLA-C03:04、HLA-C04:01、HLA-C06:02、HLA-C07:02、HLA-C08:01的肿瘤。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自胃癌、结肠癌、肺癌、食管癌、头颈部鳞癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、非霍奇金淋巴瘤和胶质母细胞瘤中的至少一种。
8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的通用型抗原肽库表位多肽、权利要求2所述的核酸分子、权利要求3所述的表达载体、权利要求4所述的表达工程菌、权利要求5所述的抗原递呈细胞中的至少一种。
9.一种用于诱导肿瘤特异性免疫响应的通用型抗原肽库试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的通用型抗原肽库。
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