CN117503658B - 一种含有重组胶原蛋白的多效组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种含有重组胶原蛋白的多效组合物及其制备方法和应用，所述多效组合物包括重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花和超分子肌肽。本发明提供的多效组合物中采用古朴阿苏果纳米胶囊，有效提高了功能活性成分的生物利用率，超分子肌肽能够保护胶原蛋白和弹性蛋白不受氧化应激损害，从而保持良好的皮肤结构，具备抗糖化作用，将具有抗氧化作用的超分子木棉花和超分子肌肽、胶原蛋白、古朴阿苏果提取物搭配使用，协同作用多效解决肌肤问题，在抗氧化、促进皮肤再生、抗糖化的同时进一步提高补水保湿的效果。

Description

一种含有重组胶原蛋白的多效组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于护肤品技术领域，具体涉及一种含有重组胶原蛋白的多效组合物及其制备方法和应用。

背景技术

随着年龄的增长，身体机能下降，皮肤的表皮组织干燥变薄，胶原蛋白和弹性蛋白逐渐流失，由胶原纤维和弹性纤维交织而成的细筛网状结构受到破坏，就会出现粗细不一的皱纹，除了机体皮肤自身的自然衰老外，环境中也有很多因素会加速皮肤衰老进程，例如摄入过量糖分、紫外线辐射、不良生活方式等。基于以上影响皮肤衰老的因素，具有抗糖化、抗氧化、抗光老、促进皮肤修复等功能的活性物质对于抗皮肤衰老有重要意义。

胶原蛋白具有的伸张能力，能保持皮肤弹性、促进细胞生长，应用于护肤品中可起到保湿、修护、抗皱等功效，并且具有良好的生物降解性和生物美容性，因此胶原蛋白也开始被越来越多的应用在护肤产品中。

古朴阿苏果，学名大花可可，是一种生长在巴西北部亚马孙热带雨林中的水果。它的果实含有丰富的维生素、纤维素和氨基酸，是天然的抗氧化剂。从种子中可以提取到天然的类似于黄油状的油脂，具有丰富的维生素(尤其是维A与维C)、矿物质、氨基酸、脂肪酸和黄酮类，对人体有着极大的益处，长期涂抹皮肤可令皮肤呈现细腻水润、丝滑光亮，具有优秀的保湿及促进皮肤修复的功效，同时对紫外线有着良好的吸收，对皮肤无刺激，安全性好，能有效地吸收阳光中的紫外线，对预防晒伤及对晒后皮肤发红有一定的护理作用，是当地人不可多得的食材与天然护肤品。

木棉花提取物富含三萜类成分、黄酮类化合物，可去除自由基，促进水通道蛋白3和透明质酸合成，为肌肤细胞迅速补充水分，改善肤质弹性，修复细纹。同时木棉花作为中药成分，味甘性凉，具有清热利湿、解毒和止血的功效，外敷具有一定的消炎和修复效果。

CN102836093A公开了一种含有I型胶原蛋白的面霜，面霜的质量百分比组成为：甘油3-8％，海藻糖1-3％，尼泊金甲酯0.1-0.3％，尼泊金丙酯0.05-0.2％，尿囊素0.1-0.5％，VC乙基醚0.5-2％，维生素B3 0.5％-2％，甘草酸二钾盐0.5-1％，M68 1-2％，A165 1-10％、16-18醇1-2％、DC200 1-2％、GTCC2-10％、乳木果油1.5-10％、古朴阿苏果油3-6％、2EHP1-5％，维生素A醋酸酯0.1-1％，维生素E醋酸酯0.4-1％，胡椒碱0.01-0.1％，I型胶原蛋白0.5-2％，香精0.01-0.05％，S-305 0.1-0.5％，LS8740 1-5％；具有增加皮肤紧密度，减少深皱纹、平复细纹，使皮肤紧致而富有弹性的功效，并且能从深层改善肌肤弹性，滋润、保湿、抗衰功效明显。

CN106109277A提供了一种保湿组合物，其包括氨基酸保湿剂、古朴阿苏果油与助剂。限定了古朴阿苏果油的含量，在此比例下其能充分发挥保湿活性作用，与氨基酸保湿剂发生协同作用，使保湿组合物保湿效果较好。

CN113081874A公开了在不同的美容制剂分别添加木棉花提取物和脱羧肌肽来针对不同的肤质进行个性化美容。

但现有技术中，古朴阿苏果提取物、木棉花提取物依然存在由于皮肤生物利用低导致起效速度慢，效果不明显等问题。

因此，开发一种组合物可以将胶原蛋白与古朴阿苏果提取物、木棉花提取物搭配使用，达到促进皮肤修复再生、抗光老、抗氧化、抗糖化等多种功效，是本领域的研究重点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含有重组胶原蛋白的多效组合物及其制备方法和应用，该组合物具有促进皮肤修复再生、抗光老、抗氧化、抗糖化等多种功效。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种含有重组胶原蛋白的多效组合物，其特征在于，所述多效组合物包括重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花和超分子肌肽。

本发明提供的多效组合物中古朴阿苏果具有促进皮肤再生、抗氧化、抗光老等多种作用，采用古朴阿苏果纳米胶囊，有效提高了功能活性成分的生物利用率；超分子肌肽能够保护胶原蛋白和弹性蛋白不受氧化应激损害，从而保持良好的皮肤结构，添加具有抗氧化作用的超分子木棉花及具有抗糖化作用的超分子肌肽，可以与胶原蛋白、古朴阿苏果提取物起到协同作用，在抗氧化的同时进一步提高补水保湿的效果。

优选地，以重量份数计，所述多效组合物包括重组胶原蛋白0.1-0.5份，例如可以为0.2份、0.3份、0.4份等，古朴阿苏果纳米胶囊1-10份，例如可以为2份、4份、6份、8份等，超分子木棉花1-10份，例如可以为2份、4份、6份、8份等，超分子肌肽0.1-1份，例如可以为0.2份、0.4份、0.6份、0.8份等。

优选地，所述古朴阿苏果纳米胶囊采用如下方法进行制备，所述方法包括：

(1)将古朴阿苏果油和普兰尼克溶于丙酮得到混合液；

(2)将所述混合液滴入正在搅拌的蒸馏水中，并持续搅拌，通过自然蒸发除去丙酮，得到纳米粒子；

(3)向持续搅拌的所述纳米粒子中加入壳聚糖，得到所述古朴阿苏果纳米胶囊。

优选地，所述普兰尼克的亲水亲油平衡值为8-29，例如可以为10、12、14、16、18、20、22、24、26、28等。

优选地，所述壳聚糖的分子量为3-20kDa，例如可以为4kDa、6kDa、8kDa、10kDa、12kDa、14kDa、16kDa、18kDa等。

优选地，所述古朴阿苏果油和普兰尼克的质量比为1:(3-5)，例如可以为1:3.5、1:4、1:4.5等。

优选地，所述古朴阿苏果油和丙酮的质量体积比为(4-6)mg:1mL，例如可以为4.5mg:1mL、5mg:1mL、5.5mg:1mL等。

优选地，所述蒸馏水的用量为丙酮的4倍。

优选地，所述古朴阿苏果纳米胶囊的粒径为30-60nm，例如可以为35nm、40nm、45nm、50nm、55nm等。

优选地，所述超分子木棉花采用如下方法进行制备，所述方法包括：将木棉花粉末采用DES-TG水溶液进行提取，即得。

优选地，所述木棉花粉末与DES-TG水溶液的料液比为1:(30-70)，例如可以为1:40、1:50、1:60等。

优选地，所述DES-TG水溶液中包括甜菜碱、甘油和丙二醇。

第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的含有重组胶原蛋白的多效组合物的制备方法，所述制备方法包括：将重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花和超分子肌肽混合均匀，即得。

第三方面，本发明提供一种抗氧化保湿乳液，所述抗氧化保湿乳液的原料包括：第一方面所述的含有重组胶原蛋白的多效组合物、润肤剂、保湿剂、乳化剂和增稠剂。

优选地，所述抗氧化保湿乳液中多效组合物的质量百分含量为1-10％，例如可以为2％、4％、6％、8％、10％等。

本发明所述的数值范围不仅包括上述列举的点值，还包括没有列举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

本发明提供的多效组合物中采用古朴阿苏果纳米胶囊，有效提高了功能活性成分的生物利用率；超分子肌肽能够保护胶原蛋白和弹性蛋白不受氧化应激损害，从而保持良好的皮肤结构，具备抗糖化作用；将具有抗氧化作用的超分子木棉花和超分子肌肽、胶原蛋白、古朴阿苏果提取物搭配使用，协同作用多效解决肌肤问题，在抗氧化、促进皮肤再生、抗糖化的同时进一步提高补水保湿的效果。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

本文所用术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，还可包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。

本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显只指单数形式。

本发明所描述的术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例性地”、“具体示例”或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本文中，对上述术语的示意性表述不是必须针对相同的实施例或示例。

本发明中，除非另有其他明确说明，否则百分比、百分含量均以质量计。如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从商业途径购买。

重组胶原蛋白：启点生物公司，全人源^TM胶原蛋白，分子量20-40KD；

古朴阿苏果油：科莱恩公司，RefinedButter；

木棉花：拜斯特药业公司，木棉花；

肌肽：德之馨公司，Dragosine。

制备例1

本制备例提供一种古朴阿苏果纳米胶囊，制备方法如下：

(1)将5mg古朴阿苏果油和20mg普兰尼克P85溶于1mL丙酮得到混合液；

(2)将所述混合液滴入正在400rpm搅拌的4mL蒸馏水中，并持续搅拌7h，通过自然蒸发除去丙酮，得到纳米粒子；

(3)向持续搅拌的纳米粒子中加入20mg壳聚糖(分子量15kDa)，得到古朴阿苏果纳米胶囊(粒径40nm)。

对比制备例1

本对比制备例提供一种古朴阿苏果纳米胶囊，其与制备例的区别仅在于将丙酮替换为等量的乙醇，其他原料、用量和制备方法均参照制备例1。

制备例2

本制备例提供一种超分子木棉花，制备方法如下：

(1)取木棉花干燥后粉碎，过30目筛，得到粉末。取甜菜碱、甘油和丙二醇按照质量比20:60:3加水配置成40％的超分子提取液；

(2)取10g木棉花粉末，按照木棉花粉末与超分子提取液的比例为1g:40mL加入木棉花，以电压为600V、脉冲数为80次进行高压脉冲提取。提取完成后进行抽滤，得到超分子木棉花。

制备例3

本制备例提供一种超分子肌肽，参照CN114306113A中实施例2制备得到。

实施例1

本实施例提供一种多效组合物，所述组合物包括：

重组胶原蛋白0.3份、制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊8份、制备例2的超分子木棉花8份、制备例3的超分子肌肽0.3份；将前述原料按照配方量混合均匀，得到多效组合物。

实施例2

本实施例提供一种多效组合物，所述组合物包括：

重组胶原蛋白0.5份、制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊6份、制备例2的超分子木棉花10份、制备例3的超分子肌肽0.1份；将前述原料按照配方量混合均匀，得到多效组合物。

实施例3

本实施例提供一种多效组合物，所述组合物包括：

重组胶原蛋白0.1份、制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊10份、制备例2的超分子木棉花6份、制备例3的超分子肌肽0.5份；将前述原料按照配方量混合均匀，得到多效组合物。

实施例4

本实施例提供一种多效组合物，所述组合物包括：

重组胶原蛋白0.3份、制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊3份、制备例2的超分子木棉花2份、制备例3的超分子肌肽0.9份；将前述原料按照配方量混合均匀，得到多效组合物。

实施例5

本实施例提供一种多效组合物，所述组合物包括：

重组胶原蛋白0.3份、制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊12份、制备例2的超分子木棉花12份、制备例3的超分子肌肽2份；将前述原料按照配方量混合均匀，得到多效组合物。

实施例6

本实施例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于调整制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊为等量的对比制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例1

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于将8份制备例1的古朴阿苏果纳米胶囊替换为8份古朴阿苏果油，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例2

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于将8份制备例2的超分子木棉花替换为8份木棉花提取物，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例3

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于将0.3份制备例3的超分子肌肽替换为0.3份肌肽，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例4

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于未加入重组胶原蛋白，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例5

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于未加入古朴阿苏果纳米胶囊，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例6

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于未加入超分子木棉花，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

对比例7

本对比例提供一种多效组合物，其与实施例1的区别仅在于未加入超分子肌肽，其他原料、用量和制备方法参照实施例1。

测试例1

抗氧化测试

DPPH自由基清除能力评价：清除DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基能力在一定程度上反应物质的抗氧化能力。自由基清除率越大，表明抗氧化能力越强，抗衰老能力越强。因此，可以通过抗老化组合物对清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。

将实施例和对比例制备的组合物用DMSO稀释为质量分数2％的待测样品，进行下面试验：

向试管中加入质量浓度为45.8mg/L的DPPH测试液2.0mL和待测样品，总体积用无水乙醇补充至3mL，摇匀，避光反应30min后，用1cm比色皿在517nm波长处测定吸光度，记为A10；向试管中加入无水乙醇2mL和相应体积的待测样品，总体积用无水乙醇补充至3mL，测得的吸光度记为A11；向试管中加入DPPH测试液2mL和无水乙醇1mL，测得的吸光度记为A12，计算待测液对DPPH自由基清除率(Y')；

DPPH自由基清除率的计算公式为：

式中A₁₀为待测样品清除DPPH后体系的吸光度值，A₁₁为样品空白对照清除DPPH后体系的吸光度值，A₁₂为未加药品前反应体系的吸光度值。

测试结果如表1所示。

测试例2

抗糖化测试

采用晚期糖基化终产物清除实验测试进行测试，分别配制以下试剂：0.1mol/LNaOH溶液、0.05mol/L的PBS磷酸盐缓冲液(pH7.4)、10mg/mL牛血清白蛋白溶液、45mg/mL葡萄糖溶液、0.25mmol/L盐酸氨基胍溶液和200mg/mL的实施例、对比例溶于水得到的待测样品溶液。

将PBS磷酸盐缓冲液、牛血清白蛋白溶液和葡萄糖溶液放置于恒温恒湿培养箱中，然后将待测样品溶液与盐酸氨基胍溶液添加进去，在60℃条件下孵育40h。取出各样品溶液，用酶标仪对其进行检测，荧光激发/发射波长为370/440nm，记录荧光吸收值。每个样品做3个平行样，结果取其平均值，其中AEGs的抑制率采用如下公式进行计算：

其中，A_样品表示添加有受试物和葡萄糖溶液的荧光强度；A_样品空白表示添加有受试物，不添加葡萄糖溶液的荧光强度；A_阴性对照表示不含受试物，有葡萄糖溶液的荧光强度；A_{缺糖阴性对照}表示不含受试物，也不含葡萄糖溶液的荧光强度。

测试结果如表1所示。

测试例3

皮肤角质层水分含量测试

测试仪器：皮肤角质层水分含量测定仪milipure；

测试样品：抗氧化保湿水乳，其成分包括：实施例、对比例制备的多效组合物5％、角鲨烷4％、甘油3％、甜菜碱5％、透明质酸2％、硬脂酰乳酸钠2％、瓜尔胶0.5％，余量为纯化水；

测试阶段：2周(D₂)、4周(D₄)；

测试对象：30位，20-45岁健康女性；

测量区域：测试位置为志愿者右面部太阳穴附近；

试验参数解释：

皮肤角质层水分含量：值越高，皮肤角质层水分含量越多。单位：ComeometerUnit，简写C.U.。水分增长率(％)＝(D_n-D₀)×100％/D₀，其中，Dn可以为D₂、D₄时的受试者皮肤的含水量，D₀为受试者皮肤的初始含水量。测试结果如表1所示。

表1

根据表格数据可知，当多效组合物中采用重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花和超分子肌肽按照特定比例搭配时，四种原料协同作用，共同促进抗氧化、抗糖化和保湿功效，效果最优。

由实施例1、实施例4-5可知，当组合物中古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花或超分子肌肽的用量过多或过少时，均会影响抗氧化、抗糖化和保湿功效；由实施例1、实施例6可知，制备古朴阿苏果纳米胶囊时采用丙酮作为溶剂，活性最好，生物利用率高，改用乙醇，护肤功效会受一定影响。

由实施例1、对比例1-3可知，当直接采用未经加工的古朴阿苏果油、未经加工的木棉花提取物、未经加工的肌肽作为原料，多效组合物中功效分子的生物活性降低，抗氧化、抗糖化和保湿功效大幅下降。

由实施例1、对比例4-7可知，当组合物中任意缺少重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花或超分子肌肽时，组合物的抗氧化、抗糖化和保湿功效大幅下降。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的工艺方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (13)

1.一种含有重组胶原蛋白的多效组合物，其特征在于，以重量份数计，所述多效组合物由重组胶原蛋白0.1-0.5份、古朴阿苏果纳米胶囊1-10份、超分子木棉花1-10份、超分子肌肽0.1-1份组成；

所述古朴阿苏果纳米胶囊采用如下方法进行制备，所述方法包括：

（1）将古朴阿苏果油和普兰尼克溶于丙酮得到混合液；

（2）将所述混合液滴入正在搅拌的蒸馏水中，并持续搅拌，通过自然蒸发除去丙酮，得到纳米粒子；

（3）向持续搅拌的所述纳米粒子中加入壳聚糖，得到所述古朴阿苏果纳米胶囊。

2.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，以重量份数计，所述多效组合物由重组胶原蛋白0.1-0.5份、古朴阿苏果纳米胶囊6-10份、超分子木棉花6-10份、超分子肌肽0.1-0.5份。

3.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述普兰尼克的亲水亲油平衡值为8-29。

4.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述壳聚糖的分子量为3-20 kDa。

5.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述古朴阿苏果油和普兰尼克的质量比为1:(3-5)。

6.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述古朴阿苏果油和丙酮的质量体积比为(4-6) mg:1 mL。

7.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述蒸馏水的用量为丙酮的4倍。

8.根据权利要求1所述的多效组合物，其特征在于，所述超分子木棉花采用如下方法进行制备，所述方法包括：将木棉花粉末采用超分子提取液进行提取，即得。

9.根据权利要求8所述的多效组合物，其特征在于，所述木棉花粉末与超分子提取液的料液比为1:(30-70)。

10.根据权利要求8所述的多效组合物，其特征在于，所述超分子提取液中包括甜菜碱、甘油和丙二醇。

11.一种如权利要求1-10任一项所述的含有重组胶原蛋白的多效组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将重组胶原蛋白、古朴阿苏果纳米胶囊、超分子木棉花和超分子肌肽混合均匀，即得。

12.一种抗氧化保湿乳液，其特征在于，所述抗氧化保湿乳液的原料包括：权利要求1-10任一项所述的含有重组胶原蛋白的多效组合物、润肤剂、保湿剂、乳化剂和增稠剂。

13.根据权利要求12所述的抗氧化保湿乳液，其特征在于，所述抗氧化保湿乳液中多效组合物的质量百分含量为1-10%。