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CN114727991A - 作为Kv1.3钾SHAKER通道阻断剂的芳基亚甲基杂环化合物 - Google Patents

作为Kv1.3钾SHAKER通道阻断剂的芳基亚甲基杂环化合物 Download PDF

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CN114727991A
CN114727991A CN202080084382.4A CN202080084382A CN114727991A CN 114727991 A CN114727991 A CN 114727991A CN 202080084382 A CN202080084382 A CN 202080084382A CN 114727991 A CN114727991 A CN 114727991A
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CN
China
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alkyl
optionally substituted
compound
cycloalkyl
heterocycle
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Pending
Application number
CN202080084382.4A
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English (en)
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F·焦尔达内托
M·O·詹森
V·乔吉尼
R·J·斯诺
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DE Shaw Research LLC
Original Assignee
DE Shaw Research LLC
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Publication date
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Abstract

描述了式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中取代基如本文所定义。还描述了包含所述化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物、以及使用所述化合物或其药学上可接受的盐的方法。

Description

作为Kv1.3钾SHAKER通道阻断剂的芳基亚甲基杂环化合物
本申请要求2019年10月7日提交的美国临时专利申请No. 62/911,655的权益和优先权，其内容通过引用整体并入本文。
本专利公开包含受版权保护的材料。版权所有者并不反对对美国专利商标局专利文件或记录中出现的专利文件或专利公开的传真复制，但对其它方式则保留任何以及所有版权。
通过引用并入
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发明领域
本发明主要涉及药物科学领域。更具体地，本发明涉及可用作如钾通道阻断剂的药物的化合物和组合物。
背景
电压门控Kv1.3钾(K+)通道在淋巴细胞(T和B淋巴细胞)、中枢神经系统和其它组织中表达并调节大量生理过程，如神经递质释放、心率、胰岛素分泌和神经元兴奋性。Kv1.3通道可以调节膜电位，从而间接影响人类效应记忆T细胞中的钙信号传导。效应记忆T细胞是多种病状的介质，所述病状包括多发性硬化、I型糖尿病、银屑病、脊柱炎、牙周炎和类风湿性关节炎。激活时，效应记忆T细胞增加Kv1.3通道的表达。在人类B细胞中，幼稚和早期记忆B细胞在其静止时表达少量的Kv1.3通道。相比之下，类别转换记忆B细胞则表达大量的Kv1.3通道。进一步，Kv1.3通道促进T细胞受体介导的细胞活化、基因转录和增殖所需的钙稳态(Panyi, G.等人，2004, Trends Immunol., 565-569)。效应记忆T细胞中的Kv1.3通道的阻断会抑制钙信号传导、细胞因子产生等活动 (干扰素-γ、白细胞介素2)和细胞增殖。
自身免疫性疾病是由身体自身免疫系统攻击所致的组织损伤引起的一系列病症。此类疾病可能在如多发性硬化和I型糖尿病中影响单个器官，或者可能如在类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮的情况中涉及多个器官。治疗通常是姑息性的，其中使用可能具有严重副作用的抗炎和免疫抑制药物。对更有效疗法的需求使得人们探寻能够选择性抑制已知与自身免疫性疾病的病因有关的效应记忆T细胞功能的药物。这些抑制剂被认为能够在不损害保护性免疫反应的情况下改善自身免疫性疾病症状。效应记忆T细胞(TEMs)表达大量的Kv1.3通道并且依赖于这些通道发挥其功能。在体内，Kv1.3通道阻断剂使炎症部位的TEM瘫痪并防止它们在发炎组织中重新激活。Kv1.3通道阻断剂不影响幼稚和中央记忆T细胞的淋巴结内的运动。通过选择性阻断Kv1.3通道来抑制这些细胞的功能提供了以最小副作用有效治疗自身免疫疾病的潜力。
多发性硬化(MS)是由中枢神经系统(CNS)的自身免疫性损伤引起的。症状包括肌肉无力和瘫痪，其严重影响患者的生活质量。MS进展迅速且无法预测，最终导致死亡。Kv1.3通道也在来自MS患者的自身反应性效应记忆T细胞中高度表达(Wulff H.等人，2003, J. Clin. Invest., 1703-1713； Rus H.等人，2005，PNAS, 11094-11099)。多发性硬化动物模型已通过使用Kv1.3通道的阻断剂而成功治疗。
作为选择性Kv1.3通道阻断剂的化合物因此是作为免疫抑制剂或免疫系统调节剂的潜在治疗剂。Kv1.3通道还被认为是治疗肥胖和增强II型糖尿病患者的外周胰岛素敏感性的治疗靶点。这些化合物还可被用于预防移植排斥，以及治疗免疫(例如自身免疫)和炎性病症。
肾小管间质纤维化是肾实质上的进行性结缔组织沉积，导致肾功能恶化并参与慢性肾病、慢性肾衰竭、肾炎、和肾小球炎症的病理学，是终末期肾衰竭的常见原因。淋巴细胞中Kv1.3通道的过表达可促进其增殖，导致慢性炎症和细胞免疫的过度刺激，其涉及这些肾病的基础病理学（underlying pathology）并且是肾小管间质纤维化进展的促成因素。淋巴细胞Kv1.3通道电流的抑制会抑制肾脏淋巴细胞的增殖并改善肾纤维化的进展(Kazama I.等人，2015, Mediators Inflamm., 1-12)。
Kv1.3通道也在胃肠道病症中发挥作用，该胃肠道病症包括炎性肠病(IBD)如溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩氏病。溃疡性结肠炎是一种慢性IBD，其特征在于过度的T细胞侵润和细胞因子产生。溃疡性结肠炎会损害生活质量并能够导致危及生命的并发症。UC患者的发炎黏膜中CD4和CD8阳性T细胞中高水平的Kv1.3通道与活性UC中促炎化合物的产生有关。Kv1.3通道被认为是疾病活动的标志物，并且药理学阻断可能构成UC中的新的免疫抑制策略。目前包括皮质类固醇、水杨酸酯（salicylates）和抗TNF-α试剂的UC治疗方案对许多患者而言并不充分(Hansen L.K.等人，2014, J. Crohns Colitis, 1378-1391)。克罗恩氏病是可影响胃肠道任何部分的IBD类型。克罗恩氏病被认为是由通常安全的细菌引发的T细胞驱动过程所致的肠道炎症的结果。因此，Kv1.3通道抑制可用于治疗克罗恩氏病。
除了T细胞之外，Kv1.3通道也在小胶质细胞中表达，其中该通道参与炎症细胞因子和一氧化氮的产生并参与小胶质细胞介导的神经元杀伤。在人类中，在阿尔茨海默病患者额叶皮层的小胶质细胞和多发性硬化脑损伤的CD68+细胞中发现了强Kv1.3通道表达。已经表明Kv1.3通道阻断剂可能能够优先靶向有害的促炎性小胶质细胞功能。Kv1.3通道在梗塞啮齿动物和人脑中的活化小胶质细胞上表达。在中风小鼠模型的梗塞半球急性分离的小胶质细胞中观察到比在对侧半球分离的小胶质细胞中更高的Kv1.3通道电流密度(ChenY.J.等人，2017, Ann. Clin. Transl. Neurol., 147-161)。
Kv1.3通道的表达在人阿尔茨海默病脑的小胶质细胞中升高，表明Kv1.3通道是阿尔茨海默病中病理学相关的小胶质细胞靶标(Rangaraju S.等人，2015, J. Alzheimers Dis., 797-808)。可溶性AβO增强小胶质细胞Kv1.3通道活性。Kv1.3通道是AβO诱导的小胶质细胞促炎激活和神经毒性所需的。Kv1.3通道表达/活性在转基因阿尔茨海默病动物和人阿尔茨海默病脑中上调。小胶质细胞Kv1.3通道的药理学靶向可影响海马突触可塑性并减少APP/PS1小鼠中的淀粉样蛋白沉积。因此，Kv1.3通道可能是阿尔茨海默病的治疗靶标。
Kv1.3通道阻断剂也可用于改善心血管病症如缺血性中风的病理，其中，活化的小胶质细胞显著促进梗塞的继发性扩张。
Kv1.3通道表达与多种细胞类型中的增殖、细胞凋亡和细胞存活的控制有关。这些过程对于癌症进展至关重要。在这种情况下，位于线粒体内膜中的Kv1.3通道可以与细胞凋亡调节器Bax相互作用(Serrano-Albarras, A.等人，2018, Expert Opin.Ther.Targets,101-105)。因此，Kv1.3通道的抑制剂可用作抗癌剂。
已知来自蜘蛛、蝎子和海葵的许多具有多个二硫键的肽毒素会阻断 Kv1.3通道。已经开发了一些选择性的、有效的Kv1.3通道肽抑制剂。具有非天然氨基酸(shk-186)的海葵毒素(shk)的合成衍生物是最先进的肽毒素。Shk已在临床前模型中证明了疗效，目前正处于治疗银屑病的I期临床试验中。Shk可以抑制TEM细胞的增殖，从而改善多发性硬化动物模型的病状。不幸的是，Shk也与在CNS和心脏中发现的密切相关的Kvi通道亚型结合。需要Kv1.3通道选择性抑制剂以避免潜在的心脏和神经毒性。此外，像shk-186这样的小肽在给药后会从体内迅速清除，导致短的循环半衰期、频繁的给药事件。因此，需要开发用于治疗慢性炎性疾病的长效、选择性Kv1.3通道抑制剂。
因此，仍然需要开发新的作为药剂的Kv1.3通道阻断剂。
发明内容
在一个方面，描述了具有式I的结构
Figure 533947DEST_PATH_IMAGE001
作为钾通道阻断剂的化合物，其中各种取代基如本文所定义。本文所述的式I的化合物可以阻断Kv1.3钾(K+)通道并用于治疗各种病状。本文还描述了合成这些化合物的方法。本文所述的药物组合物和使用这些组合物的方法可用于治疗体外和体内病状。此类化合物、药物组合物和治疗方法具有许多临床应用，包括作为药物活性剂和方法用于治疗癌症、免疫病症、中枢神经系统(CNS)病症、炎性病症、胃肠病症、代谢病症、心血管病症、肾病或其组合。
在一个方面，描述了式I的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure 451088DEST_PATH_IMAGE002
；
其中
Z是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra；
X1是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基、环烯基或卤代环烷基；
X2是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基或卤代环烷基；
X3是H、卤素、氟代烷基或烷基；
或者X1和X2与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
或者X2和X3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R3是H、卤素或烷基；
或者X1和R3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R1和R2各自独立地为H、烷基、(CR6R7)n4ORa、(CR6R7)n4NRaRb、(CR6R7)n4NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)n4CONRaRb；或者R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环；
R4是H、烷基、卤代烷基、任选被取代的环烷基、(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc、(CR6R7)n4SO2NRcRd、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；
R5的每次出现独立地为H、烷基、环烷基或氧代；
或两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环；
或两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链；
R6和R7的每次出现独立地为H、烷基或环烷基；
Ra和Rb的每次出现独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基；或者Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
Rc和Rd的每次出现独立地为H、烷基、被1-4个各自独立地为卤素、OR8或N(R8)2的取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；或者Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R8的每次出现独立地为H、烷基或任选被取代的杂环；或者两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R9是H、烷基、卤素或(CR6R7)n4ORb；
在化合价允许的情况下，X1、X2、X3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、Ra、Rb、Rc和Rd中的烷基、环烷基、螺烷基、双环烷基、杂环、芳基和杂芳基在适用时任选被1-4个取代基取代，该取代基各自独立地选自烷基、环烷基、卤代环烷基、卤代烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)C1-4烷基、(C=O)N(R8)2和氧代；
在化合价允许的情况下，n1的每次出现独立地为0-3的整数；
n2和n3的每次出现独立地为0-2的整数；和
n4的每次出现独立地为0-3的整数。
在本文所述的任一实施方案中，n2和n3的每次出现独立地为0-1的整数。
在本文所述的任一实施方案中，结构基元(motif)
Figure 230825DEST_PATH_IMAGE003
具有
Figure 626034DEST_PATH_IMAGE004
、
Figure 440406DEST_PATH_IMAGE005
、
Figure 262869DEST_PATH_IMAGE006
、
Figure 722712DEST_PATH_IMAGE007
或
Figure 593716DEST_PATH_IMAGE008
的结构。
在本文所述的任一实施方案中，结构基元
Figure 262595DEST_PATH_IMAGE009
具有
Figure 255959DEST_PATH_IMAGE010
、
Figure 10288DEST_PATH_IMAGE011
或
Figure 747300DEST_PATH_IMAGE012
的结构。
在本文所述的任一实施方案中，结构基元
Figure 395319DEST_PATH_IMAGE013
具有
Figure 825163DEST_PATH_IMAGE014
的结构。
在本文所述的任一实施方案中，R1和R2的至少一次出现为H或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)n4ORa、(CR6R7)n4NRaRb、(CR6R7)n4NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)n4CONRaRb。
在本文所述的任一实施方案中，R1和R2的至少一次出现为ORa或NRaRb。
在本文所述的任一实施方案中，R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环。
在本文所述的任一实施方案中，R1和R2各自独立地为H、Me、OH、CH2OH、NH2、NHMe、NMe2、CH2NH2、CONH2、CONHMe2、CONMe2、NH(C=O)Me、NMe(C=O)Me、
Figure 66789DEST_PATH_IMAGE015
、
Figure 341912DEST_PATH_IMAGE016
、
Figure 985383DEST_PATH_IMAGE017
、
Figure 320550DEST_PATH_IMAGE018
、
Figure 49471DEST_PATH_IMAGE019
或
Figure 128286DEST_PATH_IMAGE020
。
在本文所述的任一实施方案中，R4是H、烷基、卤代烷基或环烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R4是H、Me或氟代乙基。
在本文所述的任一实施方案中，R4是(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4CORc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc或(CR6R7)n4SO2NRcRd。
在本文所述的任一实施方案中，R4是(CR6R7)2ORc、(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、COORc、(CR6R7)1-2NRc(C=O)Rd、(C=O)NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)1-2ORc、SO2Rc或SO2NRcRd。
在本文所述的任一实施方案中，R4是(CH2)2OH、(CH2)2OMe、(C=O)H、(C=O)Me、(C=O)CH2OH、(C=O)CH2OMe、(C=O)Et、(C=O)Ph、(C=O)异丙基、(C=O)NH2、(C=O)NHMe、(C=O)NMe2、(C=O)CH2NH2、(C=O)CH2NHMe、(C=O)CH(OH)CH2OH、(C=O)CH(OMe)CH2OH、(C=O)CH(OH)CH2OMe、(C=O)(C=O)NMe2、(C=O)OMe、SO2Me、SO2Et、SO2CH2OH、SO2CH2OMe、SO2NH2、SO2NHMe或SO2NMe2。
在本文所述的任一实施方案中，R4是(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、(C=O)(CR6R7)1- 2ORc或SO2Rc；并且其中Rc选自H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基、和任选被取代的-环烷基-烷基。
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd是H、Me、Et、
Figure 626263DEST_PATH_IMAGE021
Figure 132331DEST_PATH_IMAGE022
。
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd是选自以下的杂环：
Figure 879707DEST_PATH_IMAGE023
Figure 496633DEST_PATH_IMAGE024
Figure 770488DEST_PATH_IMAGE025
其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc是各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc是各自任选地被1-4个取代基取代的
Figure 447457DEST_PATH_IMAGE026
Figure 682130DEST_PATH_IMAGE027
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，R4是任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的环烷基、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R4是选自以下的杂环：
Figure 837168DEST_PATH_IMAGE028
Figure 309737DEST_PATH_IMAGE029
Figure 95291DEST_PATH_IMAGE030
其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，R4是任选被1-4个取代基取代的环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，R4是各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 551680DEST_PATH_IMAGE031
Figure 775988DEST_PATH_IMAGE032
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，R4是：
Figure 571905DEST_PATH_IMAGE033
Figure 777628DEST_PATH_IMAGE034
Figure 924575DEST_PATH_IMAGE035
Figure 749312DEST_PATH_IMAGE036
或其互变异构体。
在本文所述的任一实施方案中，R5的至少一次出现是H、烷基或环烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R5的至少一次出现是氧代。
在本文所述的任一实施方案中，两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链。
在本文所述的任一实施方案中，两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环。
在本文所述的任一实施方案中，Ra和Rb的至少一个独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基。
在本文所述的任一实施方案中，Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在本文所述的任一实施方案中，R6和R7的每次出现独立地为H或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R9是H、烷基或卤素。
在本文所述的任一实施方案中，R9是(CR6R7)n4ORb。
在本文所述的任一实施方案中，R9是H、F或OH。
在本文所述的任一实施方案中，Z是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra。
在本文所述的任一实施方案中，Z是OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2。
在本文所述的任一实施方案中，Z是OH。
在本文所述的任一实施方案中，X1是H、卤素、氟代烷基或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，X1是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X1是Me或Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X2是H、卤素、氟代烷基或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，X2是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X2是Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X3是H、F、Cl、Br、氟代烷基或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，X3是H、F、Cl或CF3。
在本文所述的任一实施方案中，结构部分
Figure 665315DEST_PATH_IMAGE037
具有各自被R3取代的
Figure 527092DEST_PATH_IMAGE038
Figure 161336DEST_PATH_IMAGE039
的结构。
在本文所述的任一实施方案中，R3是H或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R3是卤素。
在本文所述的任一实施方案中，化合物具有式II的结构，
Figure 727446DEST_PATH_IMAGE040
；
R3’的每次出现独立地为H、卤素或烷基；和
n6是0-2的整数。
在本文所述的任一实施方案中，R3’的至少一次出现是H或烷基。
在本文所述的任一实施方案中，R3’的至少一次出现是卤素。
在本文所述的任一实施方案中，R8的至少一次出现是H、烷基或任选被取代的杂环。
在本文所述的任一实施方案中，R8是H、Me、Et、Pr、Bu或选自以下的杂环：
Figure 12803DEST_PATH_IMAGE041
Figure 373377DEST_PATH_IMAGE042
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在本文所述的任一实施方案中，两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在本文所述的任一实施方案中，n1是0、1、2或3。
在本文所述的任一实施方案中，n4是0、1或2。
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。
在本文所述的任一实施方案中，Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、Me、Et、
Figure 760496DEST_PATH_IMAGE043
Figure 130297DEST_PATH_IMAGE044
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd 的至少一次出现独立地为选自以下的杂环：
Figure 20893DEST_PATH_IMAGE045
Figure 552369DEST_PATH_IMAGE046
Figure 833308DEST_PATH_IMAGE047
其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 741221DEST_PATH_IMAGE048
Figure 548640DEST_PATH_IMAGE049
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在本文所述的任一实施方案中，所述化合物选自表1中的化合物1-338。
在另一方面，描述了药物组合物，其包含至少一种本文所述任一实施方案所述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或稀释剂。
在又另一方面，描述了治疗有需要的哺乳动物物种中的病状的方法，其包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种本文所述任一实施方案所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述病状选自癌症、免疫病症、中枢神经系统(CNS)病症、炎性病症、胃肠病症、代谢病症、心血管病症和肾病。
在本文所述的任一实施方案中，所述免疫病症是移植排斥或自身免疫疾病。
在本文所述的任一实施方案中，所述自身免疫疾病是类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮或I型糖尿病。
在本文所述的任一实施方案中，所述中枢神经系统(CNS)病症是阿尔茨海默病。
在本文所述的任一实施方案中，所述炎性病症是炎性皮肤病状、关节炎、银屑病、脊柱炎、牙周炎或炎性神经病。
在本文所述的任一实施方案中，所述胃肠病症是炎性肠病。
在本文所述的任一实施方案中，所述代谢病症是肥胖或II型糖尿病。
在本文所述的任一实施方案中，所述心血管病症是缺血性中风。
在本文所述的任一实施方案中，所述肾病是慢性肾病、肾炎或慢性肾衰竭。
在本文所述的任一实施方案中，所述病状选自癌症、移植排斥、类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、I型糖尿病、阿尔茨海默病、炎性皮肤病状、炎性神经病、银屑病、脊柱炎、牙周炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肥胖、II型糖尿病、缺血性中风、慢性肾病、肾炎、慢性肾衰竭、及其组合。
在本文所述的任一实施方案中，所述哺乳动物物种是人。
在又另一方面，描述了阻断有需要的哺乳动物物种中的Kv1.3钾通道的方法，其包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种本文所述任一实施方案所述的化合物或其药学上可接受的盐。
在本文所述的任一实施方案中，所述哺乳动物物种是人。
本文公开的任一实施方案可以与本文公开的任何其它实施方案适当地组合。本文公开的任一实施方案与本文公开的任何其它实施方案的组合是明确预期的。具体地，一个取代基的一个或多个实施方案的选择可以与任何其它取代基的一个或多个特定实施方案的选择适当地组合。此类组合可以在本文所述的应用的任何一个或多个实施方案中或本文所述的任何配方中进行。
发明详述
定义
以下是本说明书中使用的术语的定义。除非另有说明，否则本文为基团或术语提供的初始定义在整个本说明书中单独地或作为另一基团的一部分应用于该基团或术语。除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常理解的相同的含义。
术语“烷基”(“alkyl” and “alk”)是指含有1-12个碳原子，优选1-6个碳原子的直链或支链烷烃(烃)基团。示例性的“烷基”基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基 戊基、己基、异己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。术语“(C1-C4)烷基”是指含有1-4个碳原子的直链或支链烷烃(烃)基团，如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、和异丁基。“被取代的烷基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的烷基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。在一些实施方案中，基团如烷基、环烷基、烯基、炔基、环烯基、杂环和芳基本身可以任选地被取代。
术语“烯基”是指含有2-12个碳原子和至少一个碳碳双键的直链或支链烃基团。示例性的此类基团包括乙烯基或烯丙基。术语“C2-C6烯基”是指含有2-6个碳原子和至少一个碳碳双键的直链或支链烃基团，如乙烯基、丙烯基、2-丙烯基、(E)-丁-2-烯基、(Z)-丁-2-烯基、2-甲基(E)-丁-2-烯基、2-甲基(Z)-丁-2-烯基、2,3-甲基-丁-2-烯基、(Z)-戊-2-烯基、(E)-戊-1-烯基、(Z)-己-1-烯基、(E)-戊-2-烯基、(Z)-己-2-烯基、(E)-己-2-烯基、(Z)-己-1-烯基、(E)-己-1-烯基、(Z)-己-3-烯基、(E)-己-3-烯基、和(E)-己-1,3-二烯基。“被取代的烯基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的烯基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素、烷基、卤代烷基 (即，带有单个卤素取代基或多个卤素取代基的烷基基团，如CF3或CCl3)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。
术语“炔基”是指含有2-12个碳原子和至少一个碳碳三键的直链或支链烃基团。示例性的此类基团包括乙炔基。术语“C2-C6炔基”是指含有2-6个碳原子和至少一个碳碳三键的直链或支链烃基团，如乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基。“被取代的炔基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的炔基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。
术语“环烷基”是指含有1-4个环和每个环3-8个碳的完全饱和的环烃基。“C3-C7环烷基”是指环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。“被取代的环烷基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的环烷基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。示例性的取代基还包括：螺连接或稠合的环状取代基，尤其是螺连接的环烷基、螺连接的环烯基、螺连接的杂环(不包括杂芳基)、稠合环烷基、稠合环烯基、稠合杂环或稠合芳基，其中上述环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以任选地被取代。
术语“环烯基”是指含有1-4个环和每个环3-8个碳的部分不饱和的环烃基。示例性的此类基团包括：环丁烯基、环戊烯基、环己烯基等。“被取代的环烯基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的环烯基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。示例性的取代基还包括：螺连接或稠合的环状取代基，尤其是螺连接的环烷基、螺连接的环烯基、螺连接的杂环(不包括杂芳基)、稠合环烷基、稠合环烯基、稠合杂环或稠合芳基，其中上述环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以任选地被取代。
术语“芳基”是指具有1-5个芳环的环状芳烃基团，尤其是单环或双环基团，如苯基、联苯基或萘基。当含有两个或多个芳环(双环等)时，芳基的芳环可以在单个点连接(例如，联苯基)，或稠合(例如，萘基、菲基等)。术语“稠合芳环”是指具有两个或多个芳环的分子结构，其中两个相邻的芳环具有两个共同的碳原子。“被取代的芳基”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的芳基。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。示例性的取代基还包括：稠合的环状基团，尤其是稠合环烷基、稠合环烯基、稠合杂环或稠合芳基，其中上述环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以任选地被取代。
术语“联芳基”是指通过单键连接的两个芳基。术语“联杂芳基”是指通过单键连接的两个杂芳基。类似地，术语“杂芳基-芳基”是指通过单键连接的杂芳基和芳基，术语“芳基-杂芳基”是指通过单键连接的芳基和杂芳基。在某些实施方案中，杂芳基和/或芳基环中的环原子的数目用于指定取代基中芳基或杂芳基环的大小。例如，5,6-杂芳基-芳基是指其中5元杂芳基连接至6元芳基的取代基。可以类似地指定其它组合和环大小。
术语“碳环”(“carbocycle” or “carbon cycle”)是指含有1-4个环和每个环3-8个碳的完全饱和或部分饱和的环状烃基团，或具有1-5个芳环的环状芳烃基团，尤其是单环或双环基团，如苯基、联苯基或萘基。术语“碳环”涵盖如上述定义的环烷基、环烯基、环炔基和芳基。术语“被取代的碳环”是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的碳环或碳环基团。示例性的取代基包括但不限于以上针对被取代的环烷基、被取代的环烯基、被取代的环炔基和被取代的芳基所描述的那些。示例性的取代基还包括：在任何可用的一个或多个连接点处的螺连接或稠合的环状取代基，尤其是螺连接的环烷基、螺连接的环烯基、螺连接的杂环(不包括杂芳基)、稠合环烷基、稠合环烯基、稠合杂环或稠合芳基，其中上述环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以任选地被取代。
术语“杂环”（“heterocycle” and “heterocyclic”）是指完全饱和或者部分或完全不饱和的，包括芳族(即，“杂芳基”)环状基团(例如，3-7元单环、7-11元双环或8-16元三环的环系统)，其在至少一个含碳环中具有至少一个杂原子。杂环基的每个环可以独立地为饱和或者部分或完全不饱和的。含有杂原子的杂环基团的每个环可以具有1、2、3或4个选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子，其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化并且氮杂原子可以任选地被季铵化。(术语“杂芳基鎓”是指带有季氮原子并因此带有正电荷的杂芳基。)杂环基团可以在环或环系统的任何杂原子或碳原子处连接至分子的其余部分。示例性的单环杂环基团包括：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧杂环丁烷基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑烷基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂䓬基、氮杂䓬基、六氢二氮杂䓬基、4-哌啶酮基(piperidonyl)、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、三唑基、四唑基、四氢吡喃基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉基亚砜(thiamorpholinyl sulfoxide)、吗啉基砜(thiamorpholinyl sulfone)、1,3-二氧杂环戊烷和四氢-1,1-二氧代噻吩基等。示例性的双环杂环基团包括：吲哚基、吲哚啉基、异吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻吩基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英基、奎宁环基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲哚嗪基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、二氢苯并[d]噁唑、色原酮基、香豆素基、苯并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(如呋喃并[2,3-c]吡啶基、呋喃并[3,2-b]吡啶基]或呋喃并[2,3-b]吡啶基)、二氢异吲哚基、二氢喹唑啉基(如3,4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)、三嗪基氮杂䓬基、四氢喹啉基等。示例性的三环杂环基团包括：咔唑基、苯并吲哚基、菲咯啉基、吖啶基、菲啶基、呫吨基等。
“被取代的杂环”和“被取代的杂环状”(如“被取代的杂芳基”)是指在任何可用的连接点处被一个或多个取代基、优选1-4个取代基取代的杂环或杂环基团。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。示例性的取代基本身可以任选地被取代。示例性的取代基还包括：在任何可用的一个或多个连接点处的螺连接或稠合的环状取代基，尤其是螺连接的环烷基、螺连接的环烯基、螺连接的杂环(不包括杂芳基)、稠合环烷基、稠合环烯基、稠合杂环或稠合芳基，其中上述环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以任选地被取代。
术语“氧代”是指
Figure 251017DEST_PATH_IMAGE050
取代基，其可以与碳环或杂环上的碳环原子连接。当氧代取代基连接至芳族基团（例如，芳基或杂芳基）上的碳环原子时，芳环上的键可以重排以满足化合价要求。例如，具有2-氧代取代基的吡啶可以具有结构
Figure 534100DEST_PATH_IMAGE051
，其还包括其互变异构体
Figure 245704DEST_PATH_IMAGE052
。
术语“烷基氨基”是指具有结构-NHR’的基团，其中R’氢、烷基或被取代的烷基、环烷基或被取代的环烷基，如本文所定义。烷基氨基的实例包括但不限于：甲基氨基、乙基氨基、正-丙基氨基、异丙基氨基、环丙基氨基、正丁基氨基、叔丁基氨基、新戊基氨基、正戊基氨基、己基氨基、环己基氨基等。
术语“二烷基氨基”是指具有结构-NRR’的基团，其中R和R’各自独立地为烷基或被取代的烷基、环烷基或被取代的环烷基、环烯基或被取代的环烯基、芳基或被取代的芳基、杂环或被取代的杂环，如本文所定义。R和R’在二烷基氨基部分可以相同或不同。二烷基氨基的实例包括但不限于：二甲基氨基、甲基乙基氨基、二乙基氨基、甲基丙基氨基、二(正丙基)氨基、二(异丙基)氨基、二(环丙基)氨基、二(正丁基)氨基、二(叔丁基)氨基、二(新戊基)氨基、二(正戊基)氨基、二(己基)氨基、二(环己基)氨基等。在某些实施方案中，R和R’连接形成环状结构。所得环状结构可以是芳族的或非芳族的。所得环状结构的实例包括但不限于：氮丙啶基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、吡咯基、咪唑基、1,3,4-三嗪基(triazinolyl)和四唑基。
术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟或碘。
术语“被取代”是指其中分子、分子部分或取代基(例如，烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基或本文中公开的任何其它基团)在化合价允许的情况下被一个或多个取代基、优选为1-6个取代基在任何可用的连接点处取代的实施方案。示例性的取代基包括但不限于一个或多个下述基团：氢、卤素(例如，单个卤素取代基或多个卤素取代基，在后一种情况下形成基团，如CF3或带有CCl3的烷基)、氰基、硝基、氧代(即，=O)、CF3、OCF3、烷基、卤代烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环、芳基、ORa、SRa、S(=O)Re、S(=O)2Re、P(=O)2Re、S(=O)2ORe、P(=O)2ORe、NRbRc、NRbS(=O)2Re、NRbP(=O)2Re、S(=O)2NRbRc、P(=O)2NRbRc、C(=O)ORd、C(=O)Ra、C(=O)NRbRc、OC(=O)Ra、OC(=O)NRbRc、NRbC(=O)ORe、NRdC(=O)NRbRc、NRdS(=O)2NRbRc、NRdP(=O)2NRbRc、NRbC(=O)Ra或NRbP(=O)2Re，其中Ra的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基；Rb、Rc和Rd的每次出现独立地为氢、烷基、环烷基、杂环、芳基，或所述Rb和Rc 与它们所键合的N一起任选地形成杂环；并且Re的每次出现独立地为烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基。在上述示例性的取代基中，基团如烷基、环烷基、烯基、炔基、环烯基、杂环和芳基本身可以任选地被取代。术语“任选地被取代”是指其中分子、分子部分或取代基(例如，烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳基或本文中公开的任何其它基团)可被或可不被上述一个或多个取代基取代的实施方案。
除非另有说明，否则假定具有不饱和化合价的任何杂原子具有足以满足化合物的氢原子。
本发明的化合物可以形成盐，其也在本发明的范围内。除非另有说明，对本发明化合物的提及应理解为包括对其盐的提及。如本文所使用，术语“盐”表示与无机和/或有机酸和碱形成的酸性和/或碱性盐。此外，当本发明的化合物包含碱性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)和酸性部分(例如但不限于羧酸)时，可以形成两性离子(“内盐”)，并且包括在如本文所使用的“盐”的范围内。优选药学上可接受(即无毒、生理学上可接受)的盐，尽管其它盐例如在制备过程中可采用的分离或纯化步骤中也是有用的。本发明的化合物的盐例如可以通过如下形成：使本文所述的化合物与一定量的酸或碱(例如当量)在例如盐沉淀的介质中或在水性介质中反应，然后冻干。
含有碱性部分(例如但不限于胺或吡啶或咪唑环)的本发明的化合物可以与各种有机和无机酸形成盐。示例性的酸加成盐包括：乙酸盐(如与乙酸或三卤乙酸例如三氟乙酸形成的那些)、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟基乙磺酸盐(例如，2-羟基乙磺酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐(例如，2-萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯基丙酸盐(例如，3-苯基丙酸盐)、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(如与硫酸形成的那些)、磺酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐如甲苯磺酸盐、十一烷酸盐等。
含有酸性部分(例如但不限于酚或羧酸)的本发明的化合物可以与各种有机和无机碱形成盐。示例性的碱性盐包括：铵盐；碱金属盐(如钠、锂和钾盐)；碱土金属盐(如钙和镁盐)；与有机碱(例如有机胺)的盐，所述有机碱例如苄星青霉素、二环己基胺、哈胺 (与N,N-双(脱氢松香基)乙二胺形成)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-氨基乙酰胺(N-methyl-D-glycamides)、叔丁基胺；以及与氨基酸(如精氨酸、赖氨酸)的盐等。碱性含氮基团可以用试剂季铵化，所述试剂为例如低级烷基卤化物(例如，甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如，硫酸二甲基、二乙基、二丁基和二戊基酯)、长链卤化物(例如，癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如，苄基和苯乙基溴化物)等。
本发明化合物的前药和溶剂化物也在本文考虑之列。如本文所使用，术语“前药”表示在向受试者给药后通过代谢或化学过程经历化学转化而产生本发明化合物或其盐和/或溶剂化物的化合物。本发明化合物的溶剂化物包括例如水合物。
本发明的化合物及其盐或溶剂化物可以以其互变异构体(例如，作为酰胺或亚氨醚)形式存在。所有此类互变异构体都被认为是本发明的一部分。如本文所使用，化合物的任何所示结构包括其互变异构体。
本发明化合物的包括对映异构体和非对映异构体的所有立体异构体(例如，由于各种取代基上的不对称碳而可能存在的那些)都被认为在本发明的范围内。本发明化合物的单个立体异构体例如可以基本上不含其它异构体(例如，作为具有特定活性的纯的或基本上纯的旋光异构体)，或者可以例如作为外消旋体或与所有其它或其它选择的立体异构体混合。本发明的手性中心可以具有如国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)1974推荐书所定义的S或R构型。外消旋体可以通过物理方法例如分级结晶、非对映体衍生物的分离或结晶或利用手性柱色谱法的分离来拆分。可以通过任何合适的方法从外消旋体获得单独的光学异构体，包括但不限于常规方法，例如与光学活性酸形成盐，然后结晶。
本发明的化合物在其制备后，优选分离和纯化以获得含有以重量计等于或大于90%，例如等于或大于95%、等于或大于99%的化合物(“基本上纯的”化合物)的组合物，然后如本文所述使用或对该组合物进行制剂。本发明的此类“基本上纯的”化合物也被认为是本发明的一部分。
本发明化合物的所有构型异构体，无论是混合物形式或纯的或基本上纯的形式，都在考虑范围内。本发明化合物的定义包括顺式(Z)和反式(E)烯烃异构体，以及环状烃或杂环的顺式和反式异构体。
在整个说明书中，可以选择基团及其取代基以提供稳定的部分和化合物。
具体官能团和化学术语的定义在本文中更详细地描述。为了本发明的目的，化学元素根据元素周期表CAS版本，Handbook of Chemistry and Physics, 第75版, 内封面来进行鉴定，具体的官能团通常如其中所述定义。此外，有机化学的一般原理以及特定的官能部分和反应性描述于“Organic Chemistry”, Thomas Sorrell, University ScienceBooks, Sausalito (1999)中，其全部内容通过引用并入本文。
本发明的某些化合物可以以特定的几何或立体异构体存在。本发明认为所有此类化合物包括顺式和反式异构体、R-和S-对映异构体、非对映异构体、(d)-异构体、(l)-异构体、其外消旋混合物和其它混合物都落入本发明的范围内。另外的不对称碳原子可以存在于取代基如烷基中。所有此类异构体及其混合物都包括在本发明中。
根据本发明，可以使用含有任意各种异构体比例的异构体混合物。例如，当仅两种异构体组合时，本发明涵盖了所有含有50:50、60:40、70:30、80:20、90:10、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或100:0异构体比例的混合物。本领域普通技术人员将容易地理解，对于更复杂的异构体混合物，考虑类似的比例。
本发明还包括同位素标记的化合物，其与本文公开的化合物相同，但是一个或多个原子被具有与通常在自然界中发现的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子代替。可掺入本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，例如分别为2H、3H、13C、11C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、和36Cl。含有上述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物或其对映异构体、非对映异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂化物在本发明的范围内。某些同位素标记的本发明化合物例如掺入放射性同位素如3H和14C的那些可用于药物和/或底物组织分布测定。氚代即3H、以及碳-14即14C同位素由于其易于制备和检测而特别优选。进一步，用较重的同位素如氘即2H取代可以提供某些治疗优点，这是由于更大的代谢稳定性，例如体内半衰期增加或剂量需求降低，因此在一些情况下可能是优选的。同位素标记的化合物通常可通过进行以下方案和/或实施例中公开的方法，通过用容易获得的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来制备。
例如，如果需要本发明化合物的特定对映异构体，则可以通过不对称合成或通过用手性助剂衍生化来制备，其中分离所得非对映异构体混合物并裂解助剂基团以提供纯的所需的对映异构体。可选地，当分子含有碱性官能团如氨基或酸性官能团如羧基时，用合适的光学活性酸或碱形成非对映异构体盐，然后通过本领域公知的分级结晶或色谱方法拆分由此形成的非对映异构体，然后回收纯的对映异构体。
应理解，如本文所述的化合物可被任何数目的取代基或官能部分取代。通常，术语“被取代”无论前面是否有术语“任选地”以及本发明的式中包含的取代基，均是指用特定取代基的基团取代给定结构中的氢基团。当任何给定结构中的多于一个位置可被多于一个选自特定组中的取代基取代时，取代基在每个位置可相同或不同。如本文所使用，术语“被取代”意图包括有机化合物的所有允许的取代基。在广泛的方面，允许的取代基包括有机化合物的无环和环状、支链和非支链、碳环和杂环、芳族和非芳族取代基。为了本发明的目的，杂原子如氮可以具有氢取代基和/或满足杂原子化合价的本文所述有机化合物的任何允许的取代基。进一步，本发明并不意欲以任何方式受到有机化合物的允许取代基的限制。本发明设想的取代基和变量的组合优选是导致形成可用于治疗例如增殖性疾病的稳定化合物的那些。如本文所使用，术语“稳定”优选是指化合物具有足以允许制造的稳定性，并且其在足够的检测时间段内并优选在足够用于本文详述的目的的时间段内保持化合物的完整性。
如本文所使用，术语“癌症”和等价地“肿瘤”是指宿主来源的异常复制细胞以可检测的量存在于受试者中的病状。癌症可以是恶性或非恶性癌症。癌症或肿瘤包括但不限于：胆道癌；脑癌；乳腺癌；宫颈癌；绒膜癌；结肠癌；子宫内膜癌；食道癌；胃部(胃)癌；上皮内肿瘤；白血病；淋巴瘤；肝癌；肺癌(例如，小细胞和非小细胞)；黑素瘤；成神经细胞瘤；口腔癌；卵巢癌；胰腺癌；前列腺癌；直肠癌；肾脏(肾)癌；肉瘤；皮肤癌；睾丸癌；甲状腺癌；以及其它癌和肉瘤。癌症可以是原发性或转移性的。癌症之外的疾病可能与Ras信号传导途径组分的突变交替有关，并且本文公开的化合物可以用于治疗这些非癌症疾病。此类非癌症疾病可以包括：神经纤维瘤病；豹斑综合征；努南综合征；Legius综合征(Legius syndrome)；科斯特罗综合征(Costello syndrome)；心-面-皮肤综合征(Cardio-facio-cutaneoussyndrome)；遗传性1型牙龈纤维瘤病；自身免疫性淋巴组织增生综合征；以及毛细血管畸形-动脉流动体畸形。
如本文所使用，“有效量”是指实现或促进期望结果所必需或足够的任何量。在一些情况下，有效量是治疗有效量。治疗有效量是在受试者中促进或实现期望的生物学应答所必需或足够的任何量。任何具体应用的有效量可以根据例如所治疗的疾病或病状、所施用的具体药剂、受试者的大小或疾病或病状的严重程度等因素而变化。本领域普通技术人员可以经验性地确定具体试剂的有效量，而不需要过度的实验。
如本文所用，术语“受试者”是指脊椎动物。在一个实施方案中，受试者是哺乳动物或哺乳动物物种。在一个实施方案中，受试者是人。在其它实施方案中，受试者是非人脊椎动物，包括但不限于非人灵长类、实验室动物、家畜、赛马、驯养动物和非驯养动物。
化合物
描述了作为Kv1.3钾通道阻断剂的新型化合物。申请人出人意料地发现，本文公开的化合物表现出有效的Kv1.3钾通道抑制性质。此外，申请人已经出人意料地发现本文公开的化合物选择性地阻断Kv1.3钾通道且不阻断hERG通道，并因此具有理想的心血管安全特性。
在一个方面，描述了式I的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure 110892DEST_PATH_IMAGE053
；
其中
Z是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra；
X1是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基、环烯基或卤代环烷基；
X2是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基或卤代环烷基；
X3是H、卤素、氟代烷基或烷基；
或者X1和X2与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
或者X2和X3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R3是H、卤素或烷基；
或者X1和R3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R1和R2各自独立地为H、烷基、(CR6R7)n4ORa、(CR6R7)n4NRaRb、(CR6R7)n4NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)n4CONRaRb；或者R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环；
R4是H、烷基、卤代烷基、任选被取代的环烷基、(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc、(CR6R7)n4SO2NRcRd、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；
R5的每次出现独立地为H、烷基、环烷基或氧代；
或两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环；
或两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链；
R6和R7的每次出现独立地为H、烷基或环烷基；
Ra和Rb的每次出现独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基；或者Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
Rc和Rd的每次出现独立地为H、烷基、被1-4个各自独立地为卤素、OR8或N(R8)2的取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；或者Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R8的每次出现独立地为H、烷基或任选被取代的杂环；或者两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R9是H、烷基、卤素或(CR6R7)n4ORa；
在化合价允许的情况下，所述烷基、环烷基、螺烷基、双环烷基、杂环、芳基和杂芳基任选被1-4个取代基取代，该取代基各自独立地选自烷基、环烷基、卤代环烷基、卤代烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)C1-4烷基、(C=O)N(R8)2和氧代；
在化合价允许的情况下，n1的每次出现独立地为0-3的整数；
n2和n3的每次出现独立地为0-2的整数；和
n4的每次出现独立地为0-3的整数。
在一些实施方案中，n2和n3的每次出现独立地为0-2的整数。在一些实施方案中，n2和n3各自为0。在其它实施方案中，n2和n3各自为1。在又一其它实施方案中，n2和n3各自为2。在一些实施方案中，n2和n3分别为0和1。在一些实施方案中， n2和n3分别为0和2。在一些实施方案中， n2和n3分别为1和2。
在一些实施方案中，结构基元
Figure 249749DEST_PATH_IMAGE054
具有
Figure 833177DEST_PATH_IMAGE055
、
Figure 941947DEST_PATH_IMAGE056
、
Figure 927221DEST_PATH_IMAGE057
或
Figure 236980DEST_PATH_IMAGE058
的结构，其中各种取代基如本文所定义。在一些实施方案中，结构基元
Figure 307704DEST_PATH_IMAGE059
具有
Figure 361110DEST_PATH_IMAGE060
、
Figure 138574DEST_PATH_IMAGE061
、
Figure 619233DEST_PATH_IMAGE062
或
Figure 911675DEST_PATH_IMAGE063
的结构，其中各种取代基如本文所定义。在一些实施方案中，结构基元
Figure 768772DEST_PATH_IMAGE064
具有
Figure 463059DEST_PATH_IMAGE065
的结构，其中各种取代基如本文所定义。
在本文所述的任一实施方案中，Ra和Rb的每次出现可以独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基。在一些实施方案中，Ra和Rb的至少一个独立地为H、烷基或环烷基。在其它实施方案中，Ra和Rb的至少一个独立地为饱和杂环、芳基或杂芳基。在其它实施方案中，Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在一些实施方案中，R1和R2各自是H或烷基。在一些实施方案中，R1和R2均为H。在一些实施方案中，R1和R2的至少一个是烷基，如Me、Et、丙基、异丙基、正丁基、异丁基或仲丁基。在一些实施方案中，R1和R2分别为H和烷基。
在一些实施方案中，R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)n4ORa或(CR6R7)n4NRaRb。在一些实施方案中，R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)0-2NRaRb。NRaRb的非限制性实例包括：NH2、NHMe、NMe2、NHEt、NMeEt、NEt2、NHPr、NMePr、NEtPr、NH(iso-Pr)和N(iso-Pr)2。在一些实施方案中，R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)0-2ORa。ORa的非限制性实例包括：OH、OMe、OEt、OPr、O-iso-Pr、OBu、O-tert-Bu和O-sec-Bu。在一些实施方案中，R1和R2的至少一次出现为ORa或NRaRb。
在一些实施方案中，R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)0-2NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)0-2CONRaRb。NRa(C=O)Rb的非限制性实例包括：NH(C=O)Me、NMe(C=O)Me、NH(C=O)Et、NMe(C=O)Et、NEt(C=O)Et、NH(C=O)Pr、NMe(C=O)Pr、NEt(C=O)Pr、NH(C=O)(iso-Pr)、NMe(C=O)(iso-Pr)和NEt(C=O)(iso-Pr)。CONRaRb的非限制性实例包括：(C=O)NH2、(C=O)NHMe、(C=O)NMe2、(C=O)NHEt、(C=O)NMeEt、(C=O)NEt2、(C=O)NHPr、(C=O)NMePr、(C=O)NEtPr、(C=O)NH(iso-Pr)和(C=O)N(iso-Pr)2。
在其它实施方案中，R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环。在一些特定实施方案中，R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成环丙基、环丁基或环戊基。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地为H、Me、OH、CH2OH、NH2、NHMe、NMe2、CH2NH2、CONH2、CONHMe2、CONMe2、NH(C=O)Me、NMe(C=O)Me、
Figure 35991DEST_PATH_IMAGE066
。
在一些实施方案中，R4是H、烷基、卤代烷基或环烷基。在一些特定实施方案中，R4是H、Me、CF3或氟代乙基。
在其它实施方案中，R4是(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4CORc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc或(CR6R7)n4SO2NRcRd。在一些特定实施方案中，n4为0。在其它特定实施方案中，n4是1或2。在一些特定实施方案中，R4是(CR6R7)2ORc、(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、COORc、(CR6R7)1-2NRc(C=O)Rd、(C=O)NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)1-2ORc、SO2Rc或SO2NRcRd。在一些特定实施方案中，CR6R7是CH2、CHMe、CMe2、CHEt或CEt2。在一些特定实施方案中，R4是(CH2)2OH、(CH2)2OMe、(C=O)H、(C=O)Me、(C=O)CH2OH、(C=O)CH2OMe、(C=O)CH(OH)CH2OH、(C=O)CH(OMe)CH2OH、(C=O)CH(OH)CH2OMe、(C=O)Et、(C=O)Ph、(C=O)异丙基、(C=O)NH2、(C=O)NHMe、(C=O)NMe2、(C=O)CH2NH2、(C=O)CH2NHMe、(C=O)(C=O)NMe2、(C=O)OMe、SO2Me、SO2Et、SO2CH2OH、SO2CH2OMe、SO2NH2、SO2NHMe或SO2NMe2。在其它实施方案中，R4是(C=O)CH(OH)CH2OH、(C=O)CH(OMe)CH2OH或(C=O)CH(OH)CH2OMe。
在其它实施方案中，R4是(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、(C=O)(CR6R7)1-2ORc或SO2Rc；并且其中Rc选自H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2中的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基、和任选被取代的-环烷基-烷基。
在一些实施方案中，Rc或Rd是H、Me、Et、
Figure 81308DEST_PATH_IMAGE067
Figure 476517DEST_PATH_IMAGE068
Figure 25310DEST_PATH_IMAGE069
或
Figure 113352DEST_PATH_IMAGE070
。
在一些实施方案中，Rc是选自以下的杂环：
Figure 177123DEST_PATH_IMAGE071
Figure 376023DEST_PATH_IMAGE072
Figure 513743DEST_PATH_IMAGE073
Figure 444790DEST_PATH_IMAGE074
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在一些实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc是各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。在其它实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc是各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 933540DEST_PATH_IMAGE075
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在又一其他实施方案中，R4是任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。在一些特定实施方案中，R4是选自以下的杂环：
Figure 484318DEST_PATH_IMAGE076
Figure 7704DEST_PATH_IMAGE077
Figure 437548DEST_PATH_IMAGE078
Figure 413594DEST_PATH_IMAGE079
Figure 954297DEST_PATH_IMAGE080
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在又一其他实施方案中，在化合价允许的情况下，R4是任选被1-4个取代基取代的环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。在其它实施方案中，在化合价允许的情况下，R4是各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 722402DEST_PATH_IMAGE081
Figure 57568DEST_PATH_IMAGE082
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在一些实施方案中，R8是H或烷基。在其它实施方案中，R8是任选被取代的杂环。在又一其它实施方案中，两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在一些特定实施方案中，R4是：
Figure 786490DEST_PATH_IMAGE083
Figure 865304DEST_PATH_IMAGE084
Figure 363282DEST_PATH_IMAGE085
Figure 869349DEST_PATH_IMAGE086
Figure 85567DEST_PATH_IMAGE087
或其互变异构体。
在一些实施方案中，R5是H、烷基或环烷基。在一些特定实施方案中，R5是H。在其它特定实施方案中，R5是Me、Et、Pr、iso-Pr、Bu、iso-Bu、sec-Bu或tert-Bu。在其它特定实施方案中，R5是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在其它特定实施方案中，R5是氧代。
在其它实施方案中，两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环。在又一其它实施方案中，两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链。
在一些实施方案中，R6和R7的每次出现独立地为H或烷基。在一些特定实施方案中，CR6R7是CH2、CHMe、CMe2、CHEt或CEt2。在一些特定实施方案中，CR6R7是CH2。
在一些实施方案中，R9是H、烷基或卤素。在其它实施方案中，R9是(CR6R7)n4ORb。在一些特定实施方案中，R9是H、F或OH。
在本文所述的任一实施方案中，Z可以是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra。在一些实施方案中，Z是OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2。在一些实施方案中，Z是OH。
在本文所述的任一实施方案中，X1可以是H、卤素、氟代烷基或烷基。在一些实施方案中，X1是环烷基或环烯基。在一些实施方案中，X1是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。在一些实施方案中，X1是H、F或Cl。在一些实施方案中，X1是Me或Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X2可以是H、卤素、氟代烷基或烷基。在一些实施方案中，X2是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。在一些实施方案中，X2是Cl或Br。在一些实施方案中，X2是Cl。
在本文所述的任一实施方案中，X3是H、F、Cl、Br、氟代烷基或烷基。在一些实施方案中，X3是H、F、Cl或CF3。
在一些实施方案中，结构部分
Figure 968072DEST_PATH_IMAGE088
具有各自被R3取代的
Figure 320556DEST_PATH_IMAGE089
Figure 935208DEST_PATH_IMAGE090
或
Figure 373143DEST_PATH_IMAGE091
的结构。
在一些实施方案中，式I的化合物具有式II的结构，
Figure 793760DEST_PATH_IMAGE092
；
其中n6是0-2的整数；R3’的每次出现独立地为H、卤素或烷基；其它取代基如本文所定义。在一些实施方案中，R3’的至少一次出现是H或烷基。烷基的非限制性实例包括：Me、Et、丙基、异丙基、正丁基、异丁基或仲丁基。在其它实施方案中，R3’的至少一次出现是卤素。在一些实施方案中，n6是0。在一些实施方案中，n6是1。在一些实施方案中，n6是2。
在本文所述的任一实施方案中，R3是H、卤素或烷基。在一些实施方案中，R3是H。在其它实施方案中，R3是烷基如Me、Et、丙基、异丙基、正丁基、异丁基或仲丁基。在又一其他实施方案中，R3是F、Cl或Br。
在本文所述的任一实施方案中，R8的至少一次出现是H、烷基或任选被取代的杂环。在一些实施方案中，R8是H、Me、Et、Pr、Bu或选自以下的杂环：
Figure 266330DEST_PATH_IMAGE093
Figure 114200DEST_PATH_IMAGE094
Figure 226381DEST_PATH_IMAGE095
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在其它实施方案中，两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在一些实施方案中，n1是0、1、2或3。在一些特定实施方案中，n1是0或1。在一些实施方案中，n4是0、1或2。在一些实施方案中，n4是0或1。在一些特定实施方案中，n4是0。
在本文所述的任一实施方案中，Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2中的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。
在一些实施方案中，Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
在一些特定实施方案中，Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、Me、Et、
Figure 450689DEST_PATH_IMAGE096
Figure 777765DEST_PATH_IMAGE097
Figure 62116DEST_PATH_IMAGE098
。
在一些特定实施方案中，Rc或Rd的至少一次出现独立地为选自以下的杂环：
Figure 474643DEST_PATH_IMAGE099
Figure 96117DEST_PATH_IMAGE100
Figure 277700DEST_PATH_IMAGE101
Figure 732952DEST_PATH_IMAGE102
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
在一些特定实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在一些特定实施方案中，在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 632775DEST_PATH_IMAGE103
Figure 198885DEST_PATH_IMAGE104
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
在一些实施方案中，式I的化合物选自下述表1中所示的化合物1-338中。
缩写
Figure 172658DEST_PATH_IMAGE105
。
制备方法
以下是用于制造本发明化合物的一般合成方案。这些方案是说明性的，并不意味着限制本领域技术人员可用于制备本文公开的化合物的可能技术。不同的方法对于本领域技术人员是显而易见的。此外，合成中的各个步骤可以以交替的顺序或次序进行，以得到所需的化合物。以下反应是对本文公开的一些起始原料和化合物的制备的说明而非限制。
以下方案1-9描述了可用于合成本发明化合物，例如具有式I结构的化合物或其前体的合成路线。本领域技术人员可以设想对这些方法的各种修改以实现与下面给出的本发明的结果类似的结果。在以下实施方案中，合成路线使用I-4、I-6、I-4a、I-6a、I-7、I-7b、I-10、I-10a和I-13作为实例来描述。其它式I化合物可以通过使用类似于方案1-9中描述的那些方法或使用本领域已知的方法来制备。方案1-9中描述的一般合成路线和以下实施例部分中描述的实施例说明了用于制备本文所述化合物的方法。
如方案1所示，化合物I-4可由化合物I-1a或I-1b制备。
Figure 798811DEST_PATH_IMAGE106
化合物I-1a、I-1b、I-2a、I-2b和I-2c可以通过本领域已知的任何方法制备。如方案1所示，“Br/I”是指Br或I取代基，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案1步骤i所示，中间体酮I-3可以在路易斯酸存在下通过受保护的酚I-1a与适当保护的酰氯I-2a的傅克反应来合成。路易斯酸的非限制性实例包括氯化铝III。可选地，芳基溴化物或碘化物I-1b例如通过用异丙基氯化镁(R是异丙基)处理转化为相应的格氏试剂，或通过用丁基锂处理转化为相应的芳基锂试剂(步骤ii)。所得有机金属试剂与Weinreb酰胺I-2b反应形成酮I-3。酮I-3可以使用合适的还原剂还原而得到醇I-4(步骤v)。合适的还原剂的非限制性实例包括NaBH4。还可选地，芳基溴化物或碘化物I-1b例如通过用异丙基氯化镁(R是异丙基)处理转化为相应的格氏试剂，或通过用丁基锂处理转化为相应的芳基锂试剂，所得有机金属试剂与醛I-2c反应得到苄醇I-4(步骤vi)。苄醇I-4可以使用氧化剂例如戴斯-马丁过碘烷氧化成酮I-3。然后可以选择性地除去化合物I-4中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案2所示，化合物I-6可由化合物I-1b、I-2d或I-3制备。
Figure 185930DEST_PATH_IMAGE107
化合物I-1b和I-2d可以通过本领域已知的任何方法制备。化合物I-3可以通过方案1所示的方法制备。如方案2所示，“Br/I”是指Br或I取代基，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。方案2步骤i所示，具有式I(其中R1包括氨基)的化合物(例如，化合物I-6)可以由酮I-3通过在路易斯酸(例如，四乙醇钛)存在下将酮I-3与烷基亚磺酰亚胺例如叔丁基亚磺酰亚胺(即R是烷基如叔丁基)加热形成亚磺酰亚胺I-5而获得。用还原剂例如硼氢化钠或二异丁基氢化铝(DIBAL)还原亚磺酰亚胺I-5，得到亚磺酰亚胺 I-6 (步骤ii)。化合物I-6的单一对映异构体可以通过本领域已知的方法制备。可选地，如步骤iii所示，化合物I-6可以通过由I-1b形成格式试剂或有机锂试剂，并将形成的格式试剂或有机锂试剂与亚磺酰亚胺I-2d(在方案1中使用本领域已知的方法由I-2c制备)反应直接得到I-6来合成。然后可以选择性地除去化合物I-6中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案3所示，化合物I-3a、I-4a和I-6a可以分别由化合物I-1d和I-2b、I-1d和I-2c、以及I-1d和I-2d制备。
Figure 290152DEST_PATH_IMAGE108
化合物I-1d、I-2b、I-2c和I-2d可以通过本领域已知的任何方法制备。如方案3所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案3步骤i、ii或iii所示，适当保护的酚如氨基甲酸二乙酯I-1d可通过氨基甲酸酯邻位的锂化活化，并与Weinreb酰胺I-2b(步骤i)、醛I-2c(步骤ii)或亚磺酰亚胺I-2d(步骤iii)反应，如方案3所示。然后可以选择性地除去化合物I-4a和I-6a中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。酮I-3a可以使用合适的还原剂(例如，NaBH4)还原而得到相应的醇(未示出)。然后可以选择性地除去所得醇的保护基并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案4所示，化合物I-4、I-3’’和I-7可以由化合物I-3制备。
Figure 446327DEST_PATH_IMAGE109
化合物I-3可以通过方案1所示的方法制备。如方案4所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案4所示，对于其中R1 = R2 = H的式I的化合物(例如化合物I-7)，用还原剂 (例如硼氢化钠)将酮I-3还原成醇I-4(步骤i)。然后在路易斯酸如三氟化硼合乙醚或酸如三氟乙酸存在下，用硅烷如三乙基硅烷将醇I-4还原，得到化合物I-7(步骤ii)。当氮保护基是Boc时，在这些条件下除去该氮保护基而得到苄基环胺I-7。对于R1是烷基的化合物，将酮I-3用合适的烷基-格氏试剂(例如，R1MeBr)处理，得到醇I-3’(步骤iii)。如方案4步骤iv所示，可以使用类似于步骤ii中所用的方法用三乙基硅烷将醇I-3’还原而除去OH基团，得到化合物I-3’’(当氮保护基是Boc时，在这些条件下除去该氮保护基)。然后可以选择性地除去化合物I-3’’和I-7中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离酚OH基团的化合物任选地转化为式I的化合物。
如方案5所示，化合物I-7可以由化合物I-8和I-9制备。
Figure 977803DEST_PATH_IMAGE110
化合物I-8、I-9a和I-9可以由本领域已知的任何方法制备。如方案5所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案5所示，制备其中R1 = R2 = H和n2 = n3 = 1的式I的化合物的其它路线是用钯催化剂例如四(三苯基膦)钯使苄基溴I-8与吡啶硼酸或硼酸酯I-9(R是H或烷基)反应，得到苄基吡啶I-10(步骤i)。通过还原剂(例如在酸(例如HCl)存在下用氧化铂上的氢)还原吡啶I-10，得到苄基哌啶I-7b。可选地， 可以按照类似步骤(步骤iii和iv)使用硼酸乙烯酯I-9a，得到化合物I-7b。在步骤I和iii中可以使用碱如Na2CO3。然后可以选择性地除去化合物I-7b中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案6所示，化合物I-7可以由化合物I-1b和I-11制备。
Figure 586639DEST_PATH_IMAGE111
化合物I-11和I-1b可以通过本领域已知的任何方法制备。如方案6所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案6所示，制备其中R1 = R2 = H的式I的化合物的其它路线是环外烯基环胺I-8的硼氢化，并使用钯催化剂 (例如Pd(dppf)Cl2)将所得硼酸酯与溴或碘酚I-1b偶联。然后可以选择性地除去化合物I-7中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案7所示，化合物I-7也可以由化合物I-1b和I-12制备。
Figure 556869DEST_PATH_IMAGE112
化合物I-12和I-1b可以通过本领域已知的任何方法制备。如方案7所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案7所示，制备其中R1 = R2 = H的式I的化合物的其它路线是在蓝色LED灯照射下，使用三(三甲基甲硅烷基)硅烷、铱和镍催化剂的组合(例如，分别为Ir[dF(CF3)ppy]2(dtbbpy)PF6和NiCl2)的溴苯酚I-1b和溴甲基环胺I-12的光氧化反应。然后可以选择性地除去化合物I-7中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得的具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I化合物。
如方案8所示，化合物I-13可以由化合物I-8和I-2d制备。
Figure 301971DEST_PATH_IMAGE113
化合物I-8和I-2d可以通过本领域已知的方法制备。如方案8所示，PG是指保护基。保护基的非限制性实例包括：Me、烯丙基、Ac、Boc、其它烷氧基羰基、二烷基氨基羰基或本领域已知适于用作OH或NH2的保护基的另外的保护基。其它取代基如本文所定义。如方案8所示，具有取代基R9的式I的化合物可以通过使含有吸电子基团(EWG)如酯或腈的环状胺I-2d与苄基溴I-8在碱如六甲基二硅叠氮化钠(sodium hexamethyldisilazide)存在下反应而得到化合物I-13。任何合适的碱都可以用于该反应。化合物I-13中的酯或腈基(或其它吸电子基团)可以通过本领域已知的方法转化为本文定义的R9基团的范围。然后可以选择性地除去所得具有所需R9基团的化合物中的保护基，并且可以使用本领域已知的方法将所得具有游离NH和/或酚OH基团的化合物任选地转化为式I的化合物。
具有其它的R1和R2取代基的式I的化合物可以由酮I-3通过例如还原胺化、维蒂希反应，然后环丙烷化或硼氢化来合成，或者由醇I-4通过转化为相应的溴化物并用亲核试剂置换该溴化物来合成。
如方案9所示，其中R1是NH2、n2=1和n3=1的式(I)的化合物(例如化合物I-16和I-17)可以由化合物I-1e和I-14制备。
Figure 191298DEST_PATH_IMAGE114
化合物I-14和I-1e可以通过本领域已知的任意方法制备。如方案9所示，苯酚I-1e、吡啶醛I-14和乙酰胺的三组分反应通过任选地将所有三组分与三氯化铝在无溶剂条件下加热来进行，得到乙酰胺I-15。在氧化铂上的氢化将吡啶还原成哌啶I-16，并且酸水解得到胺I-17。
方案1-9中所述的反应可以在合适的溶剂中进行。合适的溶剂包括但不限于乙腈、甲醇、乙醇、二氯甲烷、DMF、THF、MTBE或甲苯。方案1-9中所述的反应可以在惰性气氛下，例如在氮气或氩气下进行，或者反应可以在密封管中进行。反应混合物可以在微波中加热或加热到高温。合适的高温包括但不限于40、50、60、80、90、100、110、120℃或更高，或者所用溶剂的回流/沸腾温度。可选地，反应混合物可以在冷浴中在低于室温的温度例如0、-10、-20、-30、-40、-50、-78或-90℃下冷却。反应可以通过除去溶剂或用一个或多个水相分配有机溶剂相来进行，每个水相任选地含有NaCl、NaHCO3或NH4Cl。有机相中的溶剂可以通过减压蒸发除去，所得残渣可以使用硅胶柱或HPLC纯化。
药物组合物
本发明还提供药物组合物，其包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的载体。
在又另一方面，本发明提供药物组合物，其包含选自如本文所述的式I的化合物中的至少一种化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
在某些实施方案中，组合物时水合物、溶剂化物或药学上可接受的盐的形式。组合物可以通过任何合适的给药路径施用至受试者，包括但不限于口服和肠胃外给药。
如本文所使用，短语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或介质，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料，涉及将受试药剂从身体的一个器官或一部分携带或运输到身体的另一个器官或一部分。各载体必须是“可接受的”即与制剂的其它成分相容并且对患者无害。一些可用作药学上可接受的载体的材料的实例包括：糖类如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；黄芪胶粉；麦芽；明胶；滑石；赋形剂如可可脂和栓剂蜡；油类如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类如丁二醇；多元醇如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯类如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏(Ringer’s)液；乙醇；磷酸盐缓冲液；和其它用于药物制剂的无毒相容物质。术语“载体”表示天然或合成的有机或无机成分，活性成分与其组合以促进应用。药物组合物的组分也能够与本发明的化合物共混，并且彼此共混，以使得不存在会显著损害期望的药物效率的相互作用。
如上所述，本发明药剂的某些实施方案可以以药学上可接受的盐的形式提供。在这方面，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过将游离碱形式的纯化的本发明化合物与合适的有机或无机酸分别反应，并分离由此形成的盐来制备。代表性的盐包括：氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘甲酸盐、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐和十二烷基磺酸盐等。(参见例如Berge等人，(1977)“Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci.66:1-19.)
主题化合物的药学上可接受的盐包括化合物的常规无毒盐或季铵盐，例如来自无毒有机或无机酸。例如，此类常规无毒盐包括衍生自无机酸的那些，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、氨基磺酸盐、磷酸盐、硝酸盐等；和由有机酸制备的盐，所述有机酸如乙酸、丁酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、异硫代酸等。
在其它情况下，本发明的化合物可以含有一个或多个酸性官能团，因此能够与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。在这些情况下，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的、无机和有机碱加成盐。这些盐同样可以在化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过将游离酸形式的纯化的化合物与合适的碱，例如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，与氨，或与药学上可接受的有机伯、仲或叔胺分别反应而制备。代表性的碱金属或碱土金属盐包括锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等。可用于形成碱加成盐的代表性有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(参见例如Berge等人，同上)。
润湿剂、乳化剂和润滑剂如十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁和聚环氧乙烷-聚环氧丁烷共聚物、以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。
本发明的制剂包括适于口服、经鼻、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道和/或肠胃外施用的那些。制剂可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主、具体的给药方式而变化。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量通常是产生治疗效果的化合物的量。通常，在100%中，该量将在约1%至约99%的活性成分，优选约5%至约70%，最优选约10%至约30%的范围内。
制备这些制剂或组合物的方法包括将本发明的化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分结合的步骤。通常，通过将本发明的化合物与液体载体或细碎的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后如果需要，使产物成形，来制备制剂。
适于口服给药的本发明的制剂可以是胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味基质，通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉剂、颗粒剂，或作为在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液，或作为水包油或油包水液体乳剂，或作为酏剂或糖浆剂，或作为软锭剂(使用惰性基质，例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)和/或作为漱口剂等的形式，各自含有预定量的本发明化合物作为活性成分。本发明的化合物也可以以大丸剂、药糖剂或糊剂形式给药。
在本发明的用于口服给药的固体剂型(胶囊剂、片剂、丸剂、糖锭剂、粉末剂、颗粒剂等)中，将活性成分与一种或多种药学上可接受的载体混合，所述载体例如柠檬酸钠或磷酸二钙、和/或以下任意一种：填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；湿润剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐、碳酸钠和淀粉羟乙酸钠；溶液阻滞剂，例如石蜡；吸收促进剂，例如季铵化合物；润湿剂，例如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和聚环氧乙烷-聚环氧丁烷共聚物；吸收剂，例如高岭土和膨润土；润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物；和着色剂。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。类似类型的固体组合物也可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，所述胶囊使用例如乳糖或奶糖(milksugars)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂。
片剂可以通过压制或模塑制备，任选地与一种或多种助剂一起制备。压制片可以使用粘合剂(例如，明胶或羟丁基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉羟乙酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备。模制片可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末化化合物的混合物来制备。
本发明药物组合物的片剂和其它固体剂型，例如糖锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂，可以任选地被刻痕或用包衣和壳，例如肠溶衣和药物配制领域中公知的其它包衣制备。它们也可以配制成提供其中活性成分的缓慢或受控释放，例如使用不同比例的羟丁基甲基纤维素以提供所需的释放曲线、其它聚合物基质、脂质体和/或微球。它们可以通过例如经细菌截留滤器过滤或通过以无菌固体组合物形式掺入灭菌剂而灭菌，所述无菌固体组合物可以在使用前立即溶解于无菌水或一些其它无菌可注射介质中。这些组合物也可任选地含有遮光剂，并且可以是它们仅或优选地在胃肠道的某一部分中任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物和蜡。活性成分也可以是根据情况与一种或多种上述赋形剂一起的微囊形式。
用于口服给药本发明化合物的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、悬浮液、糖浆剂和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丁醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丁二醇、1,3-丁二醇、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯、及其混合物。此外，环糊精例如羟丁基-β-环糊精可以用于增溶化合物。
除了惰性稀释剂，口服组合物还可以包括佐剂，例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。
除了活性化合物之外，悬浮液可以含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。
用于局部或透皮施用本发明化合物的剂型包括粉末剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂和吸入剂。活性化合物可以在无菌条件下与药学上可接受的载体以及与任何防腐剂、缓冲剂或可能需要的推进剂混合。
除了本发明的活性化合物外，软膏剂、糊剂、霜剂和凝胶剂还可以含有赋形剂，例如动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。
除了本发明的化合物外，粉末剂和喷雾剂可以含有赋形剂，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾剂可另外含有常规推进剂，例如氯氟烃和挥发性的未取代烃，例如丙烷和丁烷。
透皮贴剂具有提供本发明化合物向身体的受控递送的额外优点。这种剂型可以通过将药剂溶解或分散在适当的介质中来制备。吸收促进剂也可用于增加本发明的药剂通过皮肤的流量。这种流量的速率可以通过提供速率控制膜或将化合物分散在聚合物基质或凝胶中来控制。
眼用制剂、眼膏、粉末剂、溶液剂等也在本发明的范围内。
本发明的适于肠胃外给药的药物组合物包含一种或多种本发明的化合物与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液或可在临用前重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末的组合，其可包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质或悬浮剂或增稠剂。
在一些情况下，为了延长药物的效果，期望减慢来自皮下或肌内注射的药物的吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液来实现。药物的吸收速率则取决于其溶解速率，而溶解速率又取决于晶体大小和晶形。可选地，通过将药物溶解或悬浮在油介质中来实现胃肠外给药的药物形式的延迟吸收。贮库注射的一种策略包括使用聚环氧乙烷-聚环氧丙烷共聚物，其中介质在室温下为流体，在体温下固化。
通过在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯中形成主题化合物的微胶囊基质而制备可注射贮库形式。根据药物与聚合物的比例以及所用具体聚合物的性质，可以控制药物释放速率。其它可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。贮库型可注射制剂也可以通过将药物包埋在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备。
当本发明的化合物作为药物对人和动物施用时，它们可以本身或作为药物组合物给予，所述药物组合物含有例如0.1%-99.5% (更优选0.5%-90%)的活性成分以及药学上可接受的载体。
本发明的化合物和药物组合物可以用于联合治疗，即，化合物和药物组合物可以与一种或多种其它期望的治疗或医疗程序同时、之前或之后施用。在组合方案中使用的特定疗法组合(治疗剂或方法)将考虑所需治疗剂和/或方法的相容性和要实现的所需治疗效果。还应理解，所用的疗法可对相同病症达到所需效果(例如，本发明化合物可与另一种治疗剂同时施用)。另一种治疗剂的非限制性实例包括生物和小分子抗癌剂、免疫调节剂、免疫抑制剂、抗炎剂、抗关节炎剂、皮质类固醇、止泻剂、抗凝血剂和抗血栓剂。
本发明的化合物可以静脉内、肌内、腹膜内、皮下、局部、口服或通过其它可接受的方式给药。所述化合物可用于治疗哺乳动物(例如人、家畜和家养动物)、赛马、鸟类、蜥蜴和任何其它可耐受所述化合物的生物体的关节炎病状。
本发明还提供了药物包或试剂盒，其包含一个或多个填充有一种或多种本发明药物组合物成分的容器。任选地，与这种容器结合的可以是管理药物或生物制品的制造、使用或销售的政府机构所规定形式的通知，该通知反映了制造、使用或销售机构批准人类施用。
对受试者的施用
在另一方面，本发明提供治疗有需要的哺乳动物物种中的病状的方法，该方法包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种选自式I的化合物或其药学上可接受的盐的化合物，其中所述病状选自癌症、免疫病症、中枢神经系统(CNS)病症、炎性病症、胃肠病症、代谢病症、心血管病症和肾病。
在一些实施方案中，所述癌症选自胆道癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、绒膜癌、结肠癌、子宫内膜癌、食道癌、胃部(胃)癌、上皮内肿瘤、白血病、淋巴瘤、肝癌、肺癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、口腔癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肾脏(肾)癌、肉瘤、皮肤癌、睾丸癌和甲状腺癌。
在一些实施方案中， 所述炎性病症是炎性皮肤病状、关节炎、银屑病、脊柱炎、牙周炎或炎性神经病。在一些实施方案中，所述胃肠病症是炎性肠病如克罗恩氏病或溃疡性结肠炎。
在一些实施方案中， 所述免疫病症是移植排斥或自身免疫疾病(例如，类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮或I型糖尿病)。在一些实施方案中，所述中枢神经系统(CNS)病症是阿尔茨海默病。
在一些实施方案中，所述代谢病症是肥胖或II型糖尿病。在一些实施方案中，所述心血管病症是缺血性中风。在一些实施方案中，所述肾病是慢性肾病、肾炎或慢性肾衰竭。
在一些实施方案中，所述哺乳动物物种是人。
在一些实施方案中，所述病状选自癌症、移植排斥、类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、I型糖尿病、阿尔茨海默病、炎性皮肤病状、炎性神经病、银屑病、脊柱炎、牙周炎、炎性肠病、肥胖、II型糖尿病、缺血性中风、慢性肾病、肾炎、慢性肾衰竭、及其组合。
在又另一方面，描述了阻断有需要的哺乳动物物种中的Kv1.3钾通道的方法，其包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种式I的化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文所述的化合物在阻断Kv 1.3钾通道方面是选择性的，对其它钾通道或对钙或钠通道具有最小的脱靶抑制活性或没有脱靶抑制活性。在一些实施方案中，本文所述的化合物不阻断hERG通道，因此具有期望的心血管安全特性。
本发明的一些方面涉及向受试者施用有效量的组合物以实现特定结果。因此，根据本发明的方法有用的小分子组合物可以以任何适于药物用途的方式配制。
本发明的制剂以药学上可接受的溶液形式给药，所述溶液通常可以含有药学上可接受浓度的盐、缓冲剂、防腐剂、相容的载体、佐剂和任选的其它治疗组分。
对于在治疗中的使用，可以通过任何允许化合物被适当的靶细胞吸收的方式向受试者施用有效量的化合物。本发明的药物组合物的“给药”可以通过本领域技术人员已知的任何方法完成。具体的给药途径包括但不限于：口服、透皮(例如通过贴剂)、肠胃外注射(皮下、皮内、肌内、静脉内、腹膜内、鞘内等)或粘膜(鼻内、气管内、吸入、直肠内、阴道内等)。注射可以是推注或连续输注。
例如，根据本发明的药物组合物通常通过静脉内、肌内或其它肠胃外方式给药。它们也可以通过鼻内应用、吸入、局部、口服或作为植入物施用，甚至直肠或阴道使用也是可能的。合适的液体或固体药物制剂形式是例如用于注射或吸入的水溶液或盐水溶液、微囊化、蜗形化(encochleated)、包被到微型金颗粒上、包含在脂质体中、雾化的、气溶胶、用于植入皮肤的球粒或干燥尖锐物体上以刮划到皮肤中。所述药物组合物还包括颗粒剂、粉末剂、片剂、包衣片剂、(微)胶囊剂、栓剂、糖浆剂、乳剂、悬浮液、霜剂、滴剂或活性化合物延长释放的制剂，在其制剂中，赋形剂和添加剂和/或助剂如崩解剂、粘合剂、包衣剂、溶胀剂、润滑剂、调味剂、甜味剂或增溶剂如上所述常规使用。所述药物组合物适用于各种药物递送系统。为了简要回顾目前的药物递送方法，参见Langer R (1990) Science 249:1527-33，其通过引用并入本文。
本发明方法中所用组合物中所包含的化合物的浓度可在约1 nM至约100μM的范围内。有效剂量被认为在约10皮摩尔/kg至约100微摩尔/kg的范围内。
所述药物组合物优选以剂量单位制备和给药。液体剂量单位是用于注射或其它肠胃外给药的小瓶或安瓿。固体剂量单位是片剂、胶囊剂、粉末剂和栓剂。对于患者的治疗，取决于化合物的活性、给药方式、给药目的(即预防或治疗)、病症的性质和严重程度、患者的年龄和体重，可能需要不同的剂量。给定剂量的施用可以通过以单独剂量单位形式的单次施用或几个更小的剂量单位进行。本发明还考虑了以隔开数天、数周或数月的特定间隔重复和多次给药。
组合物可以以本身(纯的)或以药学上可接受的盐的形式施用。当用于药物时，盐应当是药学上可接受的，但非药学上可接受的盐可以方便地用于制备其药学上可接受的盐。这些盐包括但不限于由下列酸制备的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、马来酸、乙酸、水杨酸、对甲苯磺酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、丙二酸、琥珀酸、萘-2-磺酸和苯磺酸。同样，这些盐可以制备成碱金属盐或碱土金属盐，例如羧酸基团的钠、钾或钙盐。
合适的缓冲剂包括：乙酸和盐(1-2% w/v)；柠檬酸和盐(1-3% w/v)；硼酸和盐(0.5-2.5% w/v)；以及磷酸和盐(0.8-2% w/v)。合适的防腐剂包括苯扎氯铵(0.003-0.03%w/v)；三氯叔丁醇(0.3-0.9% w/v)；对羟基苯甲酸酯类(0.01-0.25% w/v)和硫柳汞(0.004-0.02% w/v)。
适合肠胃外给药的组合物方便地包括无菌水制剂，其可以与接受者的血液等渗。在可接受的载体和溶剂中有水、林格氏液、磷酸缓冲盐水和等渗氯化钠溶液。此外，无菌的不挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定矿物油或非矿物油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可用于制备注射剂。适用于皮下、肌内、腹膜内、静脉内等给药的载体制剂可以在Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA中找到。
可用于本发明的化合物可以以两种以上此类化合物的混合物形式递送。混合物除了化合物的组合之外还可以包括一种或多种佐剂。
有多种给药途径。当然，所选的具体模式将取决于所选的具体化合物、受试者的年龄和一般健康状况、所治疗的具体病状和治疗功效所需的剂量。一般而言，本发明的方法可以使用任何医学上可接受的给药方式来实施，即产生有效水平的应答而不引起临床上不可接受的副作用的任何方式。优选的给药方式如上所述。
组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备。所有方法包括将化合物与构成一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。通常，通过将化合物与液体载体、细碎的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后如果需要，使产物成形，来制备组合物。
其它递送系统可包括时间-释放、延迟释放或持续释放递送系统。这样的系统可以避免化合物的重复施用，增加了对受试者和医师的便利性。许多类型的释放递送系统是可用的并且是本领域普通技术人员已知的。它们包括聚合物基体系，例如聚(丙交酯-乙交酯)、共聚草酸酯、聚己内酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚羟基丁酸和聚酐。例如，美国专利No.5,075,109中描述了含有药物的前述聚合物的微胶囊。递送系统还包括非聚合物系统，其为：脂质，包括甾醇如胆固醇、胆固醇酯和脂肪酸或中性脂肪如甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯；水凝胶释放系统；硅橡胶系统；基于肽的系统；蜡包衣；使用常规粘合剂和赋形剂的压片；部分融合的植入物；等等。具体的实例包括但不限于：(a) 侵蚀系统，其中本发明的试剂以基质内的形式包含，如美国专利No. 4,452,775、No. 4,675,189和No. 5,736,152中所述的那些，以及(b)扩散系统，其中活性组分以受控速率从聚合物渗透，如美国专利No. 3,854,480、No. 5,133,974和No. 5,407,686所述的那些。此外，可以使用基于泵的硬件递送系统，其中一些适于植入。
Kv1.3钾通道阻断剂的有效性测定
在一些实施方案中，测试本文所述化合物对Kv1.3钾通道的活性。在一些实施方案中，测试本文所述化合物的Kv1.3钾通道电生理学。在一些实施方案中，测试本文所述的化合物的hERG电生理学。
等价物
下面的代表性实施例旨在帮助说明本发明，而不是旨在，也不应被解释为限制本发明的范围。实际上，除了本文所示和所述的那些之外，本发明的各种修改及其许多其它实施方案对于本领域技术人员而言将从本文的全部内容变得显而易见，包括以下实施例和本文引用的科学和专利文献的参考。还应当理解，这些引用的参考文献的内容通过引用并入本文以帮助说明本领域的状态。以下实施例包含重要的附加信息、示例和指导，其可以以其各种实施方案及其等效物的形式适应于本发明的实践。
实施例
实施例1-76描述了用于合成本文公开的代表性式I化合物的各种中间体。
实施例1.中间体1 (1-(4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酮)
Figure 818589DEST_PATH_IMAGE115
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的1-乙酰基哌啶-4-甲酸 (2.00 g, 11.68 mmol)在DCE (20 mL)中的溶液中滴加SOCl2 (10 mL)。使反应溶液升温至室温。在室温下再搅拌1.5小时后，将所得溶液减压浓缩，得到粗制1-乙酰基哌啶-4-甲酰氯，其不经进一步纯化用于下一步骤。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下，向1-乙酰基哌啶-4-甲酰氯(0.39 g, 2.03 mmol)在DCE(20 mL)中的溶液中加入1,2-二氯-4-甲氧基苯(0.30 g, 1.69 mmol)。搅拌5分钟后，在氮气氛下，在0℃下，分批加入无水AlCl3(0.49 g, 3.73 mmol)。使反应混合物升温至50℃，在氮气氛下搅拌2小时。冷却至0℃后，用冰水(30 mL)猝灭所得混合物，用DCM(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以深黄色固体形式得到粗产物。将粗产物通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10 μm，19×250 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从56% B到64% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.98 分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到1-(4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酮(85.6 mg, 16%):C14H15Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：316, 318 (3 : 2)，实测值 316, 318 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 11.65 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.22 (s, 1H),4.31 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.69-3.54 (m, 1H),3.21-3.03 (m, 1H), 2.75-2.58 (m, 1H), 1.96 (s, 3H), 1.86-1.71 (m, 2H), 1.53-1.18 (m, 2H)。
实施例2.中间体2 ((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲酮)
Figure 999034DEST_PATH_IMAGE116
步骤a:
将1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.15 g, 0.48mmol)在HCl水溶液(6 N, 15 mL)中的混合物在105℃下搅拌4小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×250 mm, 10 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：9 分钟内从20% B到60% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：8.5 分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以黄色固体形式得到(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲酮(23.5 mg, 18%): C12H13Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：274, 276 (3 : 2)，实测值 274, 276 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 7.85 (br, 1H), 7.57 (s,1H), 6.67 (s, 1H), 3.96-3.76 (m, 1H)。3.12 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.83-2.62 (m,2H), 1.81 (d, J = 13.1 Hz, 2H), 1.57-1.34 (m, 2H)。
实施例3.中间体3 (4-(氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸)
Figure 801905DEST_PATH_IMAGE117
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g, 2.68 mmol)在DMF (10 mL)中的溶液中加入K2CO3 (0.74 g, 5.36 mmol)和CH3I (0.75 g, 5.36 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将所得混合物用水(60 mL)稀释并用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.85 g, 83%): C18H23Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：388, 390 (3 : 2)，实测值388, 390 (3 : 2)；
步骤b:
在0℃下，向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.70 g, 4.38 mmol)在THF (20 mL)中的溶液中分批加入NaBH4 (0.25 g, 6.58 mmol)。在另外搅拌1.5小时后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH (30/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(羟基)甲基)环己烷-1-甲酸叔丁酯(1.40 g, 82%): C18H25Cl2NO4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：390, 392 (3 : 2)，实测值 390, 392 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, DMSO-d 6) δ 7.41 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 5..22 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.61(t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.76(s, 3H), 2.91-2.74 (m, 2H), 1.84-1.71 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.32-1.01 (m,3H)。
步骤c:
在0℃下，向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.50 g, 6.41 mmol)在DCM(18 mL)中的溶液中滴加PBr3(3.50 g, 12.81 mmol)。在另外搅拌1小时后，在0℃下将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液(30 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制4-(溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C13H16BrCl2NO [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：352, 354, 356 (2 : 3 : 1)，实测值352, 354, 356 (2 : 3 : 1)。
步骤d:
在0℃下，向搅拌的4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶(2.00 g, 5.66mmol)和Et3N (0.90 g, 8.50 mmol)在DCM(20 mL)中的溶液中滴加Boc2O(1.90 g, 8.50mmol)在DCM(5 mL)中的溶液。在0℃下另外搅拌1小时后，将所得溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以黄色油的形式得到4-(溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 12% 两步总计): C18H24BrCl2NO3 [M + 1 - 56]+的LCMS (ESI)计算值：396, 398, 400 (2 : 3 : 1)，实测值 396, 398, 400 (2 : 3 : 1)；1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.50 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.15 (d, J = 9.4 Hz,1H), 4.18 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.03 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H),2.81-2.54 (m, 2H), 2.27-2.02 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.32-0.97 (m, 3H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的4-(溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.26 g, 0.58 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入NaN3(0.11 g, 1.74 mmol)。使反应混合物升温至100℃，搅拌16小时。将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩至四分之一体积。将残渣不经进一步纯化直接用于下一步骤：C18H24Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：415, 417 (3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)。
步骤f:
在室温下，向搅拌的4-[叠氮基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.48 mmol)和PPh3(0.25 g, 0.96 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中滴加NH3
Figure 940762DEST_PATH_IMAGE118
H2O(1 mL, 28%在H2O中)。将反应溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用30% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到4-(氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯三氟乙酸 (0.10 g, 45% 两步总计):C18H26Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 : 2)，实测值 389, 391 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.21-4.09 (m, 2H),4.05-3.93 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.82-2.53 (m, 1H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.95-1.83 (m, 1H), 1.40 (s, 9H), 1.32-0.97 (m, 3H)。
实施例4.中间体4 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)
Figure 445562DEST_PATH_IMAGE119
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的1-[4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-基]乙-1-酮 (1.00 g, 3.16 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中加入K2CO3 (0.87 g, 6.33 mmol)和CH3I (0.90 g, 6.33 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将所得混合物用水(60 mL)稀释并用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到 1-[4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基]乙-1-酮(1.00 g, 95%): C15H17Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：330, 332 (3 : 2)，实测值 330, 332 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下，向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.70 g, 2.12 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(0.12 g, 3.18 mmol)。使反应混合物升温至室温，搅拌3小时。在0℃下，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以黄色油的形式得到1-(4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-基)乙酮(0.46 g, 66%): C15H19Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：332, 334 (3 : 2)，实测值 332, 334 (3 : 2)。
步骤c:
在0℃下，向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.46 g, 1.38 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加PBr3 (0.75 g, 2.77 mmol)。在0℃下搅拌1小时后，在0℃下将反应溶液用水(30 mL)猝灭，用EA(4×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以黄色油的形式得到1-(4-(溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮(50 mg, 10%): C15H18BrCl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：394, 396, 398 (2 : 3 : 1)，实测值 394, 396, 398 (2 : 3 : 1)； 1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 5.14 (dd, J = 9.5, 2.4 Hz, 1H),3.99-3.90 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.18-2.91 (m, 1H), 2.69-2.45 (m, 1H), 2.38-2.17 (m, 2H), 2.05 (d, J = 15.0 Hz, 3H), 1.43-1.15 (m,3H)。
步骤d:
在室温下向1-(4-(溴(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮 (50 mg,0.13 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入NaN3(26 mg, 0.40 mmol)。使反应混合物升温至100℃，搅拌8小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩至四分之一体积。将残渣不经进一步纯化直接用于下一步骤：C15H18Cl2N4O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：357, 359 (3 : 2)，实测值 357, 359 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向1-[4-[叠氮基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.10 g, 0.28 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入PPh3(0.15 g, 0.56 mmol)和NH3·H2O(1 mL, 28% in H2O)。在室温下将反应混合物搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用29% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮(30 mg, 71% 两步总计):C15H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：331, 333 (3 : 2)，实测值 331, 333 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.47 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 1.4 Hz,1H), 4.60-4.40 (m, 1H), 3.99-3.82 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.17-2.89 (m, 1H),2.66-2.44 (m, 1H), 2.15-1.78 (m, 5H), 1.43-1.03 (m, 3H)。
实施例5.中间体5 (N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 695278DEST_PATH_IMAGE120
步骤a:
在0℃，向搅拌的(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲酮 (17 g, 62.27 mmol)和Et3N (31.44 g, 0.31 mol)在DCM(150 mL)中的溶液中分批加入Boc2O(14.90 g, 68.21mmol)。使反应溶液升温至室温，在室温下搅拌4小时。在室温下将所得溶液用水(300 mL)猝灭，用EA(3×300 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C17H21Cl2NO4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：374, 376 (3 : 2)，实测值 374, 376 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (粗制)和K2CO3(33.20 g, 0.24 mmol)在DMF(200 mL)中的混合物中滴加烯丙基溴(14.48 g, 0.12 mmol)。使反应混合物升温至40℃，搅拌12小时。将所得混合物用水(500mL)稀释，用EA(2×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到4-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(15.40 g, 64% 两步总计): C20H25Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：414, 416 (3 : 2)，实测值 414,416 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.16-6.00(m, 1H), 5.55-5.36 (m, 2H), 4.62 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.18-4.08 (m, 2H),3.41-3.32 (m, 1H), 2.94-2.74 (m, 2H), 1.93-1.81 (m, 2H), 1.68-1.54 (m, 2H),1.54 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (8.80 g, 21.24 mmol)和Ti(OEt)4 (21.51 g, 94.30 mmol)在THF(50 mL)中的混合物中分批加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (3.86 g, 31.85 mmol)。使反应混合物升温至70℃，在氮气氛下搅拌16小时。在室温下将所得混合物用水(200 mL)猝灭。形成固体并过滤。将滤液用EA(3×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩成粗制4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C24H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：517, 519 (3 : 2)，实测值 517, 519(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.16 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.05-5.95 (m,1H), 5.43-5.26 (m, 2H), 4.56 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.25-4.00 (m, 2H), 2.86-2.52 (m, 3H), 1.91-1.54 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.21 (s, 9H)。
步骤d:
在氮气氛下，在0℃下，向4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (粗制)在MeOH (80 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(1.21 g, 31.86 mmol)。加入后使反应混合物升温至室温，在氮气氛下搅拌2小时。在0℃下将所得混合物用水(150 mL)猝灭，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.58 g, 60% 两步总计): C24H36Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 : 2)； 1H NMR(300 MHz, CD3OD) δ 7.51 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.19-6.03 (m, 1H), 5.52-5.29(m, 2H), 4.67-4.58 (m, 2H), 4.30 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 35.2,13.5 Hz, 2H), 2.84-2.50 (m, 2H), 2.14-1.87 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.30-1.05(m, 3H), 1.23 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下，向搅拌的4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.58 g, 12.68 mmol)在DCM (100 mL)中的溶液中滴加TFA (20 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(200 mL)稀释。在0℃下，用饱和NaHCO3水溶液将反应体系的pH值调节至9。将水层用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用35% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.24 g, 80%):C19H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421 (3 : 2)，实测值 419, 421 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 + D2O) δ 7.50 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.06-5.92(m, 1H), 5.42-5.18 (m, 2H), 4.63-4.48 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.47-4.34 (d, J =8.7 Hz, 1H), 3.38-3.14 (m, 2H), 2.84-2.65 (m, 2H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.96-1.82 (m, 1H), 1.42-1.18 (m, 3H), 0.97 (s, 9H)。
实施例6.中间体6 ((S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺), 方法A
Figure 680551DEST_PATH_IMAGE121
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (5.16 g, 12.45 mmol)和Ti(OEt)4(8.52 g, 37.36 mmol)在THF (50 mL)中的溶液中加入(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (1.67 g, 13.70 mmol)。使反应溶液升温至70℃，搅拌36小时。冷却至室温后，在室温下将所得溶液用水(300 mL)猝灭。形成固体并过滤。将滤液用EA(2×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣在真空烘箱中干燥，以浅黄色固体形式得到(S)-4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.00 g, 93%): C24H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：517, 519 (3 : 2)，实测值517, 519 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.28 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.06-5.94 (m, 1H), 5.46-5.26 (m, 2H), 4.58 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.23-4.01 (m, 2H),3.81-3.62 (m, 1H), 2.84-2.57 (m, 2H), 1.93-1.81 (m, 2H), 1.68-1.54 (m, 2H),1.46 (s, 9H), 1.22 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-65℃下，用30分钟向(S)-4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.50 g, 2.90 mmol)在甲苯 (10 mL)中的溶液中滴加DIBAL-H (4.35 mL, 4.35 mmol, 1 M甲苯溶液)。加入后，在氮气氛下，在-65℃下将反应溶液搅拌3小时。在-65℃下将所得溶液用水(20 mL)猝灭，然后用饱和酒石酸钾钠水溶液(200 mL)稀释。将水层用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.78 g, 52%):C24H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.23 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.10-5.92 (m, 1H),5.46-5.31 (m, 2H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.50-4.37 (m, 1H), 4.28-4.04 (m,2H), 3.84-3.64 (m, 1H), 2.71-2.49 (m, 2H), 2.01-1.81 (m, 2H), 1.47 (s, 9H),1.49-1.22 (m, 3H), 1.17 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下，向搅拌的4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.00 g, 30.80 mmol)在DCM (120 mL)中的溶液中滴加TFA (30 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(200 mL)稀释。在0℃下，用饱和NaHCO3水溶液将反应体系的pH值调节至8。将水层用EA (3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/LNH4HCO3的35% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7.00 g, 46%): C19H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421 (3 : 2)，实测值419, 421 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.97 (m, 1H), 5.46-5.31 (m, 2H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.49-4.37 (m, 1H),4.88-3.95 (m, 1H), 3.42-3.24 (m, 2H), 2.81-2.67 (m, 2H), 2.21-2.09 (m, 1H),2.04-1.97 (m, 1H), 1.65-1.42 (m, 3H), 1.17 (s, 9H)。
中间体6 ((S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺), 方法B
Figure 990310DEST_PATH_IMAGE122
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的3,4-二氯苯酚 (100.00 g, 613.49 mmol) 在DCM(1000 mL)中的溶液中滴加Br2 (98.04 g, 613.49 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌16小时。在0℃下，将反应用饱和Na2S2O3水溶液(500 mL)猝灭。将所得混合物用EA(6×400 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×400 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到2-溴-4,5-二氯苯酚。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57 (s, 1H), 7.15 (s, 1H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的2-溴-4,5-二氯苯酚 (50.00 g, 206.71 mmol)和K2CO3 (57.14 g, 413.41 mmol)在DMF(500 mL)中的溶液中滴加3-溴丙-1-烯 (37.51 g,310.06 mmol)。在氮气氛下，在40℃下，将反应混合物搅拌16小时。将所得混合物用水(1.5L)稀释，用EA(3×0.5 L)提取。将合并的有机层用盐水(4×0.5 L)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以浅黄色油的形式得到1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (40.00 g, 61%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.65 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.12-6.06 (m, 1H), 5.60-5.29 (m, 2H), 4.69-4.57(m, 2H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-15℃下用30分钟向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (30.00 g, 106.39 mmol)在THF (800 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl-LiCl (125mL, 159.59 mmol, 1.3 M THF溶液)。在氮气氛下，在-15℃下，将所得混合物另外搅拌0.5小时。在氮气氛下，在-15℃下，向所得溶液中加入4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(33.67 g, 106.39 mmol)。加入后，在-15℃下将反应混合物搅拌2小时。在-15℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(100 mL)猝灭，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (34.00 g, 58%): C24H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.17 (s, 1H),6.18-6.03 (m, 1H), 5.49-5.31 (m, 2H), 4.62 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.52 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.13 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 35.8 Hz, 2H), 2.12 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.01-1.88 (m, 1H), 1.46 (s, 9H),1.36-1.19 (m, 3H), 1.13 (d, J = 1.4 Hz, 9H)。
步骤d:
在室温下，向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.70 g, 10.97 mmol)在DCM (40mL)中的混合物中滴加TFA (10 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。在0℃下，将混合物用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 9。将所得混合物用EA (2×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的40% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到 (S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (3.50 g, 68%): C19H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421 (3 : 2)，实测值 419, 421 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 6.98 (s, 1H),6.10-5.97 (m, 1H), 5.46-5.31 (m, 2H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.49-4.37 (m,1H), 4.88-3.95 (m, 1H), 3.42-3.24 (m, 2H), 2.81-2.67 (m, 2H), 2.21-2.09 (m,1H), 2.04-1.97 (m, 1H), 1.65-1.42 (m, 3H), 1.17 (s, 9H)。
实施例7.中间体7 (N-((2-羟基萘-1-基)(吡啶-4-基)甲基)乙酰胺)
Figure 61034DEST_PATH_IMAGE123
步骤a:
在氮气氛下，在110℃下向搅拌的萘-2-酚 (3.50 g, 24.28 mmol)、乙酰胺 (1.72g, 29.13 mmol)和吡啶-4-甲醛(2.60 g, 24.28 mmol)的混合物中分数批加入AlCl3(0.49g, 3.64 mmol)。在氮气氛下，在110℃下将反应混合物搅拌8小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(60 mL)猝灭。将水层用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(8/1)洗脱，以浅绿色固体的形式得到N-[(2-羟基萘-1-基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺(1.00g, 14%): C18H16N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：293，实测值 293； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 8.39 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.87 (t, J = 9.0Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.29-7.24 (m,3H), 7.21 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H)。
实施例8.中间体8 (N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺三氟乙酸)
Figure 911178DEST_PATH_IMAGE124
步骤a:
在室温下向搅拌的4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.50 g, 0.96 mmol)在1,4-二噁烷 (5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 0.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7，然后减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的60% ACN水溶液洗脱，以棕色油的形式得到4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 90%): C20H28Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：415,417 (3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下，向搅拌的4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.11 g, 0.27 mmol)和Et3N (54 mg, 0.53 mmol)在DCM (3 mL)中的溶液中滴加TFAA (61 mg, 0.29 mmol)。在0℃下，将反应溶液搅拌0.5小时。将反应溶液用DCM(50 mL)稀释。将溶液用盐水(2×20 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色固体形式得到4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.13 g, 95%): C22H27Cl2F3N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：511, 513 (3 :2)，实测值 511, 513 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 7.02 (s,1H), 6.11-5.99 (m, 1H), 5.47-5.38 (m, 2H), 4.78 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 4.86-4.57 (m, 2H), 4.31-3.93 (m, 2H), 2.75-2.48 (m, 2H), 2.01-1.91 (m, 1H), 1.83-1.72 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.49-1.22 (m, 3H)。
步骤c:
在室温下向4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.13 g, 0.25 mmol)在DCM (3 mL)中的溶液中滴加TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌0.5小时。将反应溶液减压浓缩，以黄色固体形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺三氟乙酸(0.10 g, 90%):C17H19Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：411, 413 (3 : 2)，实测值 411, 413 (3 :2)。
实施例9.中间体9 (1-(烯丙氧基)-2-溴-3,4,5-三氯苯)
Figure 485379DEST_PATH_IMAGE125
步骤a:
在室温下，向搅拌的(3,4,5-三氯苯基)硼酸(5.00 g, 22.20 mol)在THF (15 mL)中的溶液中加入H2O2 (1.51 g, 44.39 mmol, 30%)和NaOH (1.78 g, 44.39 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应在室温下用饱和Na2SO3水溶液(10 mL)猝灭。将混合物用HCl水溶液(1 N)酸化至pH 3。将所得混合物用EA (3×80 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×80 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到3,4,5-三氯苯酚(4.30 g, 95%): 1 H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 6.92 (s, 2H)。
步骤b:
在氩气氛下，在室温下，向搅拌的3,4,5-三氯苯酚 (4.60 g, 23.30 mol)在AcOH(20 mL)中的溶液中滴加Br2 (3.70 g, 23.15 mol)。搅拌6小时后，将反应用饱和Na2SO3水溶液(80 mL)猝灭，用EA(3×80 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×80 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣进行硅胶柱色谱，用PE/EA(20/1)洗脱，以灰白色固体形式得到2-溴-3,4,5-三氯苯酚(2.40 g, 37%): 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ11.43 (s, 1H), 7.15 (s, 1H)。
步骤c:
在室温下，向搅拌的2-溴-3,4,5-三氯苯酚 (2.40 g, 8.69 mmol)和K2CO3 (2.40g, 17.37 mmol)在DMF (15 mL)中的溶液中加入烯丙基溴(1.26 g, 10.42 mmol)。使反应升温至50℃，搅拌1小时。将反应混合物用EA(80 mL)和水(80 mL)稀释，然后用EA(3×80mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×80 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣进行硅胶柱色谱，用PE/EA(20/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到2-溴-3,4,5-三氯-1-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(1.80 g, 66%)。
实施例10.中间体10 ((S)-4-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 638143DEST_PATH_IMAGE126
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的 4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (50.00 g, 0.23mol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (43.00 g, 0.35 mmol)在THF (300 mL)中的溶液中滴加Ti(OEt)4 (187.00 g, 0.82 mol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌4小时。在室温下将所得溶液用饱和NH4Cl水溶液(200 mL)猝灭，用EA(3×300 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以灰白色固体形式得到(S)-4-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(67 g, 81%):C15H28N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317，实测值 317； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ8.01 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.09 (d, J = 13.4 Hz, 2H), 2.97-2.82 (m, 2H), 2.62(m, 1H), 1.90 (dd, J = 13.4, 3.6 Hz, 2H), 1.71-1.43 (m, 2H), 1.47 (s, 9H),1.20 (s, 9H)。
实施例11.中间体11 (4-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 930584DEST_PATH_IMAGE127
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.00 g, 93.90mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (17.00 g, 0.14 mol)在THF (300 mL)中的溶液中滴加Ti(OEt)4 (50.00 g, 0.18 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌4小时。在室温下将所得溶液用饱和NH4Cl水溶液(200 mL)猝灭，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到4-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(24.00 g, 80%):C15H28N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317，实测值 317.
实施例12.中间体12 ((S)-N-((1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 522102DEST_PATH_IMAGE128
步骤a:
在室温下，向搅拌的4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (9.00 g, 42.20 mmol)在DCM(60 mL)中的溶液中加入TFA(30 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压干燥。将粗产物无需进一步纯化而用于后续步骤：C6H11NO [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：114，实测值 114。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸(8.37 g, 57.27 mmol)和HATU (21.77 g, 57.26 mmol)在DMF(150 mL)中的溶液中加入哌啶-4-甲醛 (5.40 g, 47.72 mmol)和Et3N (72.43 g, 0.72 mol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将反应在室温下用水(100 mL)猝灭，用EA(3×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而用于后续步骤：C12H19NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：242，实测值242。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-甲醛 (4.30 g, 17.82 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (3.24 g, 26.73mmol)在THF (40 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (12.20 g, 53.48 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌4小时。将反应在室温下用水(150 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1 : 3)洗脱，以浅黄色油的形式得到 (S)-N-((1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.37 g, 71%): C16H28N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345，实测值 345.1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.92 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.91-4.77 (m, 1H), 4.36-4.12 (m, 2H), 4.11-3.94 (m, 1H), 3.16 (dt, J = 25.1, 12.4 Hz, 1H), 2.91-2.73(m, 2H), 1.90 (d, J = 14.6 Hz, 2H), 1.56-1.40 (m, 1H), 1.39-1.25 (m, 8H),1.11 (d, J = 1.3 Hz, 9H)。
实施例13.中间体13 (2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸)
Figure 13127DEST_PATH_IMAGE129
步骤a:
在室温下，向搅拌的KOH(2.10 g, 37.42 mmol)在H2O (9 mL)和EtOH (18 mL)中的混合物中分批加入2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸甲酯 (3.00 g, 18.73mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2小时。将混合物用10% H3PO4水溶液酸化至pH 4。将所得混合物用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸(1.80 g, 65%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.81 (s, 1H), 4.58-4.50 (m, 1H),4.17 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.05-3.89 (m, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.30 (s, 3H)。
实施例14.中间体14 ((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸)
Figure 851638DEST_PATH_IMAGE130
步骤a:
在室温下，向搅拌的KOH (3.50 g, 62.38 mmol)在H2O (5 mL)和EtOH (10 mL)中的溶液中分批加入(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸甲酯(5.00 g, 31.22mmol)。将反应混合物在室温下另外搅拌2小时。将所得混合物用H2O (10 mL)稀释，用10%H3PO4水溶液酸化至pH 3。将所得混合物用EA(3×60 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到 (4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸(3.00 g, 66%): C6H10O4 [M - H]+的LCMS (ESI)计算值：145，实测值 145； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.80 (br, 1H), 4.59-4.50 (m,1H), 4.27-4.10 (m, 1H), 4.00-3.91 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.38 (s, 3H)。
实施例15.中间体15 (1,2-二氯-3-碘-4-甲氧基苯)
Figure 896955DEST_PATH_IMAGE131
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的3,4-二氯苯酚 (50.00 g, 306.75 mmol), DMAP(74.95 g, 613.50 mmol)和Et3N (62.08 g, 613.50 mmol)在DCM (500 mL)中的溶液中滴加二乙基氨基甲酰氯 (62.39 g, 460.12 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。在室温下将所得混合物用水(300 mL)稀释并用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(40/1)洗脱，以黄色油的形式得到N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯苯酯(72.00 g, 80%): C11H13Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：262, 264 (3 : 2)，实测值262, 264 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.30 (d,J = 2.7 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 8.8, 2.7 Hz, 1H), 3.42 (dq, J = 14.2, 7.2 Hz,4H), 1.24 (dt, J = 14.8, 7.2 Hz, 6H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-78℃下，用0.5小时向二乙基丙胺(DIPA, 42.46 g, 419.64mmol)在THF(400 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (29.32 g, 457.79 mmol, 2.5 M己烷溶液)。在-78℃下搅拌20分钟后，在-78℃下经20分钟向所得溶液中滴加N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯苯酯(100.00 g, 381.49 mmol)在THF (100 mL)中的溶液。添加后，在氮气氛下，在-78℃下将所得混合物另外搅拌0.5小时。在-78℃下，经0.5小时向上述混合物中滴加I2(101.67 g, 400.56 mmol)在THF(50 mL)中的溶液。在-78℃下，将所得混合物另外搅拌2小时。在-78℃下，将所得混合物用饱和Na2SO3水溶液(300 mL)猝灭，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(40/1)洗脱，以灰白色固体形式得到N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯-2-碘苯酯 (117.00 g, 79%): C11H12Cl2INO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：388, 390 (3 : 2)，实测值 388, 390 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
步骤c:
在0℃下，向搅拌的N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯-2-碘苯酯(65.80 g, 169.58mmol)在MeOH (100 mL)中的溶液中加入NaOH (67.82 g, 1695.75 mmol)在H2O(200 mL)中的溶液。使所得混合物升温至50℃，搅拌10小时。将溶液的pH值用HCl水溶液(1 N)调节至6-7。在室温下，将反应用水(400 mL)稀释，用EA(3×400 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(40/1)洗脱，以黄色油的形式得到 3,4-二氯-2-碘苯酚(47.00 g, 96%): 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.09(s, 1H)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的3,4-二氯-2-碘苯酚 (100.00 g, 346.15 mmol)在DMF(300 mL)中的溶液中加入CH3I (73.70 g, 519.23 mmol)和K2CO3 (95.68 g, 692.31mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌5小时。在室温下，将反应用水(500 mL)稀释，用EA(3×600 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×1000 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以灰白色固体形式得到1,2-二氯-3-碘-4-甲氧基苯 (88.00 g, 84%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44(d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H)。
实施例16.中间体16 (1-(烯丙氧基)-3,4-二氯-2-碘苯)
Figure 292164DEST_PATH_IMAGE132
步骤a:
在室温下，向搅拌的3,4-二氯-2-碘苯酚(25.00 g, 86.54 mmol)和K2CO3 (35.88g, 259.61 mmol)在DMF(100 mL)中的溶液中滴加3-溴丙-1-烯 (15.70 g, 129.81 mmol)。使所得混合物升温至40℃，在氮气氛下搅拌4小时。冷却至室温后，在室温下将所得混合物用水(300 mL)稀释，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×500 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到1,2-二氯-3-碘-4-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(16.00 g, 50%): 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.17-6.00 (m, 1H), 5.54 (dt, J = 17.3, 1.7 Hz, 1H), 5.31 (dt, J = 10.7, 1.7 Hz,1H), 4.65 (dd, J = 4.0, 2.3 Hz, 2H)。
实施例17.中间体17 (4-(1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙烯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 840957DEST_PATH_IMAGE133
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的甲基三苯基溴化鏻(1.10 g, 3.09 mmol)在THF(15 mL)中的溶液中分批加入NaH(0.12 g, 3.09 mmol, 60%矿物油溶液)。使反应混合物升温至室温，搅拌15分钟。然后加入4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.80 g, 2.06 mmol)在THF(3 mL)中的溶液。在氮气氛下，将反应混合物在室温下另外搅拌2小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭，用EA(3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙烯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 63%): C19H25Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：386, 388 (3 : 2)，实测值 386, 388 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.18(s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.17-4.07 (m, 2H), 3.82(s, 3H), 2.83-2.70 (s, 2H), 2.64-2.52 (m, 1H), 1.81-1.70 (m, 2H), 1.50-1.37(s, 9H), 1.35-1.21 (m, 2H)。
实施例18.中间体18 ((S)-N-((R)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 928999DEST_PATH_IMAGE134
步骤a:
在氮气氛下，在-65℃下，用30分钟向5-溴-1,2-二氯-3-氟苯 (4.00 g, 16.40mmol)在THF(50 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl·LiCl(25 mL, 32.80 mmol, 1.3 M THF溶液)。另外搅拌30分钟后，在-65℃下滴加B(OMe)3 (2.56 g, 24.60 mmol)在THF(10 mL)中的溶液。添加后，在氮气氛下，在-65℃下将反应混合物搅拌30分钟。在-65℃下将所得混合物用水(100 mL)猝灭，用EA(2×300 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×60 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/LNH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到(3,4-二氯-5-氟苯基)硼酸(0.36 g,94%): C6H4BCl2FO2 [M - H]+的LCMS (ESI)计算值：207, 209 (3 : 2)，实测值 207, 209(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 7.47 (d, J = 9.2 Hz, 1H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下，向搅拌的(3,4-二氯-5-氟苯基)硼酸 (3.60 g, 18.66mmol)和KOH (4.19 g, 74.71 mmol, 4.00 当量)在MeOH (20 mL)中的混合物中滴加H2O2(2.54 g, 74.71 mmol, 30%水溶液)。在空气气氛下，在室温下，将反应混合物搅拌2小时。在室温下，将所得混合物用饱和NaHSO3水溶液(100 mL)猝灭，然后用柠檬酸将溶液酸化至pH 4。将所得混合物用EA (2×400 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×60 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以黄色固体形式得到3,4-二氯-5-氟苯酚(2.65 g, 70%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.83(s, 1H), 6.64 (dd, J = 9.8, 2.8 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的3,4-二氯-5-氟苯酚 (2.60 g, 14.36 mmol),Et3N (4.36 g, 43.09 mmol)和DMAP (3.51 g, 28.73 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中滴加 二乙基氨基甲酰氯 (2.33 g, 17.24 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌2小时后，在室温下将反应溶液用水(130 mL)猝灭，用EA(2×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(6/1)洗脱，以灰白色固体形式得到N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯-5-氟苯酯(3.20 g,70%): C11H12Cl2FNO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：280, 282 (3 : 2)，实测值 280, 282(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.15 (s, 1H), 7.00 (dd, J = 9.3, 2.6 Hz,1H), 3.49-3.32 (m, 4H), 1.31-1.15 (m, 6H)。
步骤d:
在氮气氛下，在-65℃下，用10分钟向N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯-5-氟苯酯(0.50 g, 1.79 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中加入LDA (1.34 mL, 2.68 mmol, 2 M THF溶液)。添加后，将反应溶液在-65℃下搅拌30分钟，然后在氮气氛下，在-65℃下用10分钟滴加(S)-4-(((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.85 g, 2.68 mmol)在THF(5 mL)中的溶液。在氮气氛下，在-65℃下另外搅拌1小时后，在-65℃下将所得混合物用水(30 mL)猝灭，用EA(2×70 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩得到粗制4-((R)-(3,4-二氯-6-((二乙基氨基甲酰基)氧基)-2-氟苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而用于后续步骤：C26H40Cl2FN3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：596, 598(3 : 2)，实测值 596, 598 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向4-((R)-(3,4-二氯-6-((二乙基氨基甲酰基)氧基)-2-氟苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在MeOH (20 mL)中的溶液中分批加入NaOH(0.45 g, 11.32 mmol)。使所得混合物升温至 50℃，搅拌3小时。冷却至室温后，在室温下将反应混合物用水(20 mL)稀释，用柠檬酸酸化至pH 4。将所得溶液用EA(2×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色固体形式得到4-[(S)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)([[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.60 g, 68% 两步总计): C21H31Cl2FN2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：497, 499 (3 : 2)，实测值 497, 499 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 6.89 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.27-3.92 (m, 2H),2.80-2.51 (m, 2H), 2.09-1.98 (m, 2H), 1.54-1.46 (m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.20(s,9H)。
步骤f:
在室温下向4-[(S)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)([[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (粗制)在DCM (10 mL)中的溶液中滴加TFA (2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液调节至pH 8，用EA(2×80mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到粗制(R)-N-[(S)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.40 g, 83%)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C16H23Cl2FN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399 (3 : 2)，实测值 397, 399(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.76 (s, 1H), 4.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H),3.52-3.40 (m, 1H), 3.30-3.20 (m, 1H), 3.03-2.80 (m, 2H), 2.55-2.40 (m, 1H),2.38-2.22 (m, 1H), 1.59-1.37 (m, 3H), 1.10 (s, 9H)。
实施例19.中间体19 ((2R)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸锂)
Figure 868136DEST_PATH_IMAGE135
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的(2R)-5-氧代吡咯烷-2-甲酸乙酯 (0.50 g, 3.18mmol)在THF (4 mL)中的溶液中加入NaH (0.25 g, 6.36 mmol, 60%矿物油溶液)。所得混合物在0℃下搅拌10分钟。然后将MeI (0.90 g, 6.36 mmol)加入该混合物中。在氮气氛下，在0℃下将所得混合物搅拌1小时。在0℃下将反应用水(3 mL)猝灭。将所得混合物用DCM(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用DCM (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(2R)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸乙酯(0.22 g, 40%): C8H13NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：172 实测值：172； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.26 (q, J = 8.6, 7.9 Hz, 2H),4.18-4.08 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.58-2.29 (m, 3H), 2.16-2.05 (m, 1H), 1.44-1.30 (m, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2R)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸乙酯 (0.15 g, 0.95mmol)在MeOH (2 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (48 mg, 1.15 mmol)在H2O (2 mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将所得溶液减压浓缩，以灰白色固体形式得到(2R)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸锂(0.15 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C6H9NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：144，实测值 144。
实施例20.中间体20 (1-溴-5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯)
Figure 801457DEST_PATH_IMAGE136
步骤a:
在室温下，向搅拌的4-氯-3-碘苯酚(3.00 g, 11.79 mmol)和K2CO3 (3.26 g,23.59 mmol)在DMF (30 mL)中的混合物中滴加CH3I (2.51 g, 17.69 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用EA(50 mL)和水(100 mL)稀释。将水溶液用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以无色油的形式得到1-氯-2-碘-4-甲基苯 (2.90 g, 92%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.47-7.41 (m, 1H), 7.41-7.33 (m, 1H), 6.99-6.90 (m, 1H), 3.78 (s, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-氯-2-碘-4-甲氧基苯 (1.00 g, 3.73 mmol)在THF (5 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (2.2 mL, 5.59 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。在氮气氛下，在-78℃下将溶液搅拌30分钟。然后将环丁酮(0.39 g, 5.59 mmol)加入溶液中。将所得溶液在氮气氛下，在-78℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(3 mL)猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 1-(2-氯-5-甲氧基苯基)环丁-1-醇(0.56 g, 71%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.28 (dd, J = 8.7, 1.5 Hz, 1H), 6.96(d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.75-2.63(m, 2H), 2.50-2.37 (m, 2H), 2.23-2.12 (m, 1H), 1.78-1.66 (m, 1H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的1-(2-氯-5-甲氧基苯基)环丁-1-醇 (0.56 g,2.63 mmol)和Et3SiH (0.61 mg, 5.27 mmol)在DCM (3 mL)中的溶液中加入BF3·Et2O(0.75 g, 5.27 mmol)。在氮气氛下，将溶液在室温下搅拌1小时。将反应用水(5 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以无色油的形式得到1-氯-2-环丁基-4-甲氧基苯(0.49 g, 95%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.21 (d, J = 8.7 Hz,1H), 6.90 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.74 (dd, J = 8.7, 3.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H),3.79-3.72 (m, 1H), 2.47-2.33 (m, 2H), 2.19-1.97 (m, 3H), 1.92-1.81 (m, 1H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的1-氯-2-环丁基-4-甲氧基苯 (0.48 g, 2.44 mmol)在HOAc (5mL)中的溶液中滴加Br2 (0.43 g, 2.69 mmol)。将溶液在室温下搅拌1小时。将反应用饱和Na2SO3水溶液(2 mL)猝灭，用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以无色液体的形式得到1-溴-5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯 (0.60 g, 72%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H), 6.98 (s,1H), 3.92 (s, 3H), 3.83-3.71 (m, 1H), 2.51-2.34 (m, 2H), 2.24-2.02 (m, 3H),1.94-1.80 (m, 1H)。
实施例21.中间体21 (1-溴-5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯)
Figure 470336DEST_PATH_IMAGE137
步骤a:
在室温下向搅拌的4-氯-3-氟苯酚 (2.00 g, 13.65 mmol)在DCM (15 mL)中的溶液中加入Br2 (2.62 g, 16.40 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将反应在室温下用饱和Na2SO3水溶液(30 mL)猝灭。将水层用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到2-溴-4-氯-5-氟苯酚(3.40 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.58 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 10.5小时z, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-溴-4-氯-5-氟苯酚(3.40 g, 15.08 mmol)和K2CO3 (4.17 g,30.17 mmol)在DMF(30 mL)中的混合物中滴加3-溴丙-1-烯 (2.74 g, 22.65 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以无色油的形式得到1-溴-5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(2.40 g, 60%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.68 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.14-6.02 (m, 1H), 5.50 (d, J =17.2 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 4.3 Hz, 2H)。
实施例22.中间体22 (8-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯)
Figure 729279DEST_PATH_IMAGE138
步骤a:
在室温下向搅拌的3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸甲酯盐酸盐 (0.50 g, 2.43mmol)和Et3N (0.98 g, 9.72 mmol)在DCM(6 mL)中的溶液中加入Boc2O (0.80 g, 3.65mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发，以黄色油的形式得到3-叔丁基 8-甲基 3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸酯(0.65 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C14H23NO4 [M + H - 15]+的LCMS(ESI)计算值：255，实测值 255； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.90 (d, J = 60.4 Hz,1H), 3.79-3.60 (m, 4H), 3.17 (d, J = 41.4 Hz, 1H), 2.97-2.77 (m, 1H), 2.69-2.41 (m, 3H), 1.85-1.61 (m, 4H), 1.47 (d, J = 3.7 Hz, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-叔丁基 8-甲基 3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸酯(0.65 g, 2.41 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中加入NaOH (0.19 g, 4.83 mmol)在水(2mL)中的溶液。将反应在40℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得溶液用EA(20 mL)和水(30mL)稀释。将水溶液用柠檬酸酸化至pH 3，然后用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发，以黄色油的形式得到 3-(叔丁氧基羰基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸(0.70 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C13H21NO4 [M + H -56]+的LCMS (ESI)计算值：200，实测值 200； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 3.88 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 13.1 Hz, 1H),3.32-3.13 (m, 1H), 3.05-2.75 (m, 3H), 2.73-2.36 (m, 2H), 1.89-1.74 (m, 2H),1.64-1.55 (m, 1H), 1.47 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-(叔丁氧基羰基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸 (0.70g, 2.74 mmol), HOBt (0.56 g, 4.11 mmol)和EDCI (0.79 g, 4.11 mmol)在DMF (6 mL)中的溶液中加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐 (0.40 g, 4.11 mmol)和Et3N (0.55 g, 5.48mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到8-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.43 g, 53%):C15H26N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：243，实测值 243； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 3.91 (d, J = 47.8 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 10.9 Hz, 3H), 3.69-3.39 (m,2H), 3.21 (d, J = 12.8 Hz, 3H), 3.03-2.84 (m, 1H), 2.74 (d, J = 17.2 Hz, 1H),2.55-2.33 (m, 3H), 2.03-1.88 (m, 1H), 1.84-1.57 (m, 2H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz,9H)。
实施例23.中间体23 ((S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 218029DEST_PATH_IMAGE139
步骤a:
在40℃下向搅拌的3-溴-4-氯苯酚 (5.00 g, 24.10 mmol)和K2CO3 (9.99 g,72.31 mmol)在THF(50 mL)中的混合物中滴加MeI (10.26 g, 72.31 mmol)。反应混合物在40℃下搅拌16小时。将所得混合物用水(50 mL)稀释，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以无色油的形式得到2-溴-1-氯-4-甲氧基苯 (4.50 g, 84%): 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.41 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 2.9 Hz, 1H),6.93 (dd, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-溴-1-氯-4-甲氧基苯 (2.00 g, 9.03 mmol) 在DCM(20 mL)中的溶液中加入AgOTf(2.55 g, 9.93 mmol)。添加后，将I2 (2.52 g, 9.93 mmol)加入至反应中，将混合物在室温下搅拌3小时。在室温下将反应用饱和Na2SO3水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×60 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以灰白色固体形式得到1-溴-2-氯-4-碘-5-甲氧基苯(2.50 g, 80%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.84 (s, 1H), 7.04(s, 1H), 3.89 (s, 3H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-90℃下用10分钟向1-溴-2-氯-4-碘-5-甲氧基苯 (10.00 g,28.79 mmol) 在THF(20 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (11.5 mL, 28.75 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。将溶液在相同温度下搅拌30分钟。在-90℃下将4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (9.10 g, 28.79 mmol)在THF(10 mL)中的溶液迅速加入上述溶液中(反应温度从-90上升至-70℃)。添加后，将反应在-75℃下另外搅拌1.5小时。将反应通过饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭，然后用水(100 mL)稀释。将水相用EA(3×100mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO4的60% ACN水溶液洗脱，以灰白色固体形式得到4-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.40 g, 80%): C22H34BrClN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：537, 539 (2 : 3 : 1)，实测值 537, 539 (2 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 4.44 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.16 (d, J =13.4 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.84-2.57 (m, 2H),2.17-2.05 (m, 1H), 2.02-1.84 (m, 1H), 1.545 (s, 9H), 1.30-1.08 (m, 3H), 1.13(s, 9H)。
步骤d:
在室温下，向搅拌的4-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (6.00 g, 11.19 mmol) 在DCM(60 mL)中的溶液中滴加TFA(10 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(50 mL)中和。将水层用DCM(3×200 mL)提取。减压浓缩合并的有机层，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.60 g, 粗制)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C17H26BrClN2O2S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：437, 439 (2 : 3: 1)，实测值 437, 439 (2 : 3: 1)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.50 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.90(s, 3H), 3.47 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.01-2.80 (m, 2H),2.42-2.33 (m, 1H), 2.19-2.06 (m, 1H), 1.57-1.28 (m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (1.70 g,11.63 mmol)和HATU (4.43 g, 11.65 mmol)在DMF (10 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (3.40 g, 7.76mmol)和Et3N (2.36 g, 23.29 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(60 mL)猝灭，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/LNH4HCO3的70% ACN水溶液洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.80 g, 86%): C23H34BrClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：565, 567(2 : 3: 1)，实测值 565, 567 (2 : 3: 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (d, J =2.7 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 5.48-5.32 (dd, J = 33.5, 7.5 Hz, 1H),4.59-4.37 (m, 2H), 4.20-4.10 (m, 1H), 4.32-4.18 (m, 2H), 3.88 (d, J = 2.2 Hz,3H), 3.20-2.90 (m, 1H), 2.73-2.56 (m, 1H), 2.25-2.06 (m, 2H), 1.48-1.33 (m,8H), 1.17-1.09 (m, 10H)。
实施例24.中间体24 ((S)-N-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 345254DEST_PATH_IMAGE140
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的1-溴-2-氯-4-碘-5-甲氧基苯 (47.00 g, 135.30mmol) 在DCM(470 mL)中的溶液中滴加BBr3(101.00 g, 405.90 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌20小时。在0℃下，将反应用水(500 mL)猝灭，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×500 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到5-溴-4-氯-2-碘苯酚(45.50 g, 95%)，其无需进一步纯化而用于后续步骤。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的5-溴-4-氯-2-碘苯酚 (45.20 g, 141.59 mmol)在DMF(100 mL)中的溶液中滴加K2CO3(39.14 g, 283.18 mmol)和烯丙基溴(29.12 g,240.70 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(200 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以无色油的形式得到 1-溴-2-氯-4-碘-5-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(28.50 g, 54%): 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.85 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.12-5.98(m, 1H), 5.53 (dq, J = 17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.37 (dq, J = 10.7, 1.4 Hz, 1H),4.59 (dq, J = 4.6, 1.5 Hz, 2H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-100℃下向搅拌的1-溴-2-氯-4-碘-5-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(10.00 g, 26.78 mmol) 在THF(250 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (10.71 mL, 26.78mmol, 2.5 M 己烷溶液)。在氮气氛下，在-100℃下搅拌30分钟后，将4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (8.47 g, 26.7 mmol)在THF(40 mL)中的溶液在-100℃下滴加至上述混合物中。将所得混合物在-100℃下另外搅拌1小时。在-100℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(200 mL)猝灭。将水层用EA(3×200 mL)提取。将合并的有机层减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.00 g, 60%): C24H36BrClN2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：563, 565 (2 : 3 : 1)，实测值 563, 565 (2 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.22 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.11-5.96 (m, 1H), 5.48-5.30 (m, 2H),4.61-4.55 (m, 2H), 4.46 (s, 1H), 4.24-4.02 (m, 2H), 2.74-2.47 (m, 2H), 2.03-1.77 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.40-1.11 (m, 3H), 1.18 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (5.60 g, 9.96 mol)在DCM(50mL)中的溶液中滴加TFA (10 mL)。将反应溶液在室温下搅拌0.5小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液中和。将水层用EA(3×100 mL)提取。减压浓缩合并的有机层，以浅黄色半固体形式得到 (S)-N-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.30 g, 粗制)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H28BrClN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：463, 465 (2 : 3 : 1)，实测值 463, 465(2 : 3: 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.08-5.98(m, 1H), 5.46-5.34 (m, 2H), 4.62-4.51 (m, 2H), 4.45-4.36 (s, 1H), 4.25-4.18(m, 1H), 3.49-3.34 (dd, J = 32.3, 12.9 Hz, 2H), 2.90-2.73 (m, 2H), 2.26-1.97(m, 2H), 1.80-1.52 (m, 3H), 1.18 – 1.09 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (2.50 g,17.13 mmol)和HATU (6.52 g, 17.13 mmol)在DMF(30 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.30 g, 11.42 mmol)和Et3N (3.47 g, 34.27 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(60 mL)猝灭，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10mmol/L NH4HCO3的70% ACN水溶液洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.80 g, 54%): C25H36BrClN2O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：591, 593 (2 : 3 : 1)，实测值 591, 593 (2 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.24 (d, J = 22.6 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.07-5.97 (m, 1H), 5.46-5.30 (m, 2H), 4.68-4.58 (m, 2H), 4.60-4.50 (m, 3H), 4.49-4.33 (m, 1H), 4.21-4.01 (m, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H) 3.09-2.82 (m, 1H), 2.56 (t, J = 12.7 Hz, 1H),2.19-1.96 (m, 2H), 1.57-1.25 (m, 9H), 1.17 (d, J = 11.7 Hz, 9H)。
实施例25.中间体25 ((S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-5-氯-4-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 868639DEST_PATH_IMAGE141
步骤a:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的2-溴-5-甲基苯酚 (42.00 g, 224.56 mmol)在1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-醇 (500 mL)中的溶液中分批加入NCS (31.00 g, 235.78 mmol)。使反应溶液升温至 50℃，在空气气氛下搅拌16小时。冷却至室温后，将所得溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(50/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到2-溴-4-氯-5-甲基苯酚(47.00 g, 90%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 6.93 (d, J = 0.8Hz, 1H), 2.32 (d, J = 0.7 Hz, 3H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的2-溴-4-氯-5-甲基苯酚 (31.00 g, 0.14 mol)和K2CO3 (39.00 g, 0.28 mol)在DMF (300 mL)中的混合物中滴加烯丙基溴(29.00 g,0.24 mol)。在空气气氛下，在40℃下将反应混合物搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(300 mL)稀释，用EA(3×150 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(100/1)洗脱，以无色油的形式得到1-溴-5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(24.50 g, 66%):1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.12-6.02 (m, 1H), 5.50(d, J = 17.3 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.63-4.56 (m, 2H), 2.34 (s,3H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-90℃下向搅拌的1-溴-5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(29.00 g, 0.12 mol)在THF(900 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (48 mL, 0.12 mol, 2.5 M己烷溶液)。在氮气氛下，在-90℃下搅拌40分钟后，将4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (35.57 g, 0.12 mol)在THF(80 mL)中的溶液在氮气氛下，在-90℃下用20分钟滴加至搅拌的溶液中。在氮气氛下，在-90℃下，将所得混合物另外搅拌1小时。在-90℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(100 mL)猝灭。反应溶液减压浓缩除去THF。将水层用EA(3×600 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(25.40 g, 44%): C25H39ClN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：499, 501 (3 : 1)，实测值 499, 501 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.09 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.10-5.93 (m, 1H), 5.47-5.26 (m, 2H),4.61-4.50 (m, 2H), 4.41-4.28 (m, 1H), 4.21-4.04 (m, 2H), 3.95-3.73 (m, 1H),2.82-2.47 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.10-1.96 (m, 1H), 1.93-1.75 (m, 1H), 1.47(s, 9H), 1.37-1.21 (m, 3H), 1.12 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(48.00 g, 95.77 mmol)在DCM(380 mL)中的溶液中滴加TFA (96 mL)。将所得混合物在室温下另外搅拌1小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8。所得混合物用EA(3×1 L)提取。将合并的有机层用盐水(3×300 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(33.10 g, 88%): C20H31ClN2O2S [M + 1]+的LCMS (ESI)计算值：399, 401 (3:1)，实测值 399, 401 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.10 (s, 1H), 6.75 (s,1H), 6.08-5.93 (m, 1H), 5.44-5.21 (m, 2H), 4.60-4.47 (m, 2H), 4.34-4.22 (m,2H), 3.43 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.34 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.88-2.72 (m, 2H),2.34 (s, 3H), 2.12 (d, J = 10.5小时z, 2H), 1.69-1.51 (m, 3H), 1.10 (s, 9H)。
实施例26.中间体26 (N-[(1-乙酰基哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 32904DEST_PATH_IMAGE142
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.30 g, 0.91 mmol)和Ti(OEt)4 (0.41 g, 1.82 mmol) 在THF(10 mL)中的溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.22 g, 1.82 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将所得混合物搅拌16小时。冷却至室温后，将反应用饱和NH4Cl水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[(1-乙酰基哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.27 g,68%): C19H26Cl2N2O3S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435 (3 : 2)，实测值 433, 435(3 : 2)。
实施例27.中间体27 ((2R,3S)-3-(苯甲酰基氧基)氧杂环戊烷-2-甲酸)
Figure 274530DEST_PATH_IMAGE143
步骤a:
在0℃下，向(4R,5S)-5-(羟基甲基)氧杂环戊烷-2,4-二醇 (15.00 g, 111.83mmol)在MeOH (130 mL)中的溶液中加入H2SO4 (1.49 mL, 27.95 mmol, 97%)的MeOH (20mL)溶液。将反应在0℃至室温下搅拌16小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7。过滤所得混合物，将滤饼用MeOH (3×20 mL)洗涤。将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以浅黄色油的形式得到 (2S,3R)-2-(羟基甲基)-5-甲氧基氧杂环戊烷-3-醇 (15.00 g, 91%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 4.64 (t, J = 3.3 Hz,1H), 4.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.48-4.44 (m, 1H), 3.80-3.73 (m, 1H), 3.57-3.52 (m, 2H), 3.52-3.46 (m, 1H), 3.24-3.22 (m, 3H), 1.87-1.80 (m, 1H), 1.53(dt, J = 12.8, 4.0 Hz, 1H)。
步骤b:
将(2S,3R)-2-(羟基甲基)-5-甲氧基氧杂环戊烷-3-醇 (5.00 g, 33.75 mmol)和双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺 (17.37 g, 67.48 mmol)在ACN (5 mL)中的溶液在80℃下搅拌5小时。冷却至室温后，在室温下用15分钟将Et3SiH(19.62 g, 168.74 mmol)和TMSOTf (37.50 g, 168.72 mmol)分批加入上述混合物中。将所得混合物在室温下另外搅拌16小时。在0℃下将反应用水(30 mL)猝灭，用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用EA洗脱，以浅黄色半固体形式得到(2S,3R)-2-(羟基甲基)氧杂环戊烷-3-醇(1.40 g, 35%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 4.93-4.77(m, 1H), 4.71-4.54 (m, 1H), 3.82-3.67 (m, 2H), 3.57 (td, J = 5.3, 2.9 Hz,1H), 3.40-3.33 (m, 1H), 1.98-1.85 (m, 1H), 1.74-1.63 (m, 1H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2S,3R)-2-(羟基甲基)氧杂环戊烷-3-醇 (1.30 g, 11.01mmol)和咪唑(0.76 g, 11.12 mmol)在DMF (8 mL)中的溶液中滴加TBDMSCl (1.66 g,11.01 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌0.5小时。将反应用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以无色油的形式得到(2S,3R)-2-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]氧杂环戊烷-3-醇 (1.54 g, 60%): 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 4.88 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.08-3.99 (m, 1H), 3.82-3.68 (m,2H), 3.62-3.55 (m, 1H), 3.55-3.44 (m, 2H), 2.01-1.85 (m, 1H), 1.78-1.63 (m,1H), 0.87 (s, 9H), 0.04 (d, J = 2.5 Hz, 6H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(2S,3R)-2-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]氧杂环戊烷-3-醇 (0.82 g, 3.53 mmol)和苯甲酸(0.56 g, 4.59 mmol) 在THF(8 mL)中的溶液中加入Ph3P (1.85 g, 7.05 mmol)和DEAD (1.23 g, 7.06 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将反应用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(6/1)洗脱，以无色油的形式得到(2S,3S)-2-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(1.00 g, 84%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (dt, J =8.2, 1.1 Hz, 2H), 7.66-7.55 (m, 1H), 7.47 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 5.72-5.59 (m,1H), 4.20-4.01 (m, 1H), 4.01-3.81 (m, 1H), 3.96 (td, J = 8.7, 4.8 Hz, 1H),3.91 (dd, J = 6.3, 2.0 Hz, 2H), 2.48-2.32 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 0.85(s, 9H), 0.05--0.05 (m, 6H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(2S,3S)-2-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.50 g, 1.49 mmol)在THF(3 mL)和HOAc (0.1 mL)中的溶液中加入TBAF (2.97 mL, 2.970 mmol, 1 M THF溶液)。将反应在室温下搅拌3小时。将反应用EA(30mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以无色油的形式得到 (2S,3S)-2-(羟基甲基)氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.30 g, 91%): 1H NMR(400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.96-7.91 (m, 2H), 7.68-7.62 (m, 1H), 7.53 (t, J = 7.6Hz, 2H), 5.51-5.46 (m, 1H), 3.97-3.86 (m, 2H), 3.81-3.72 (m, 1H), 3.65-3.57(m, 2H), 2.40-2.29 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(2S,3S)-2-(羟基甲基)氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.34 g,1.53 mmol)和(乙酰氧基)(苯基)-λ3-碘烷基乙酸酯(0.74 g, 2.30 mmol)在ACN (3 mL)和水(3 mL)中的溶液中加入TEMPO (48 mg, 0.31 mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将所得混合物用饱和Na2SO3水溶液(10 mL)猝灭，将混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以无色油的形式得到 (2R,3S)-3-(苯甲酰基氧基)氧杂环戊烷-2-甲酸(0.20 g, 55%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.77 (s, 1H), 8.07-7.81 (m,2H), 7.68 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 5.93-5.64 (m, 1H),4.69-4.51 (m, 1H), 4.17-3.84 (m, 2H), 2.38-2.23 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 1H)。
实施例28.中间体28 (4-甲基-5-氧代吗啉-2-甲酸锂)
Figure 815232DEST_PATH_IMAGE144
步骤a:
在0℃下向搅拌的异丝氨酸(50.00 g, 475.77 mmol)在MeOH (300 mL)中的混合物中滴加SOCl2(41. mL, 570.97 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到3-氨基-2-羟基丙酸甲酯 (50.00 g, 71%): C4H9NO3 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：120，实测值 120； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 4.50 (dd, J =8.2, 4.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.36-3.30 (m, 1H), (dd, J = 13.0, 8.3 Hz,1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-氨基-2-羟基丙酸甲酯 (22.50 g, 188.89 mmol)和Et3N(57.34 g, 566.66 mmol)在DCM(300 mL)中的溶液中滴加氯乙酰氯(21.33 g, 188.89mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以黄色固体形式得到3-(2-氯乙酰胺基)-2-羟基丙酸甲酯(13.00 g,35%): C6H10ClNO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：196, 198 (3 : 1)，实测值 196, 198(3: 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.97 (s, 1H), 4.35 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.08(s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.79-3.62 (m, 2H), 3.26 (s, 1H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的3-(2-氯乙酰胺基)-2-羟基丙酸甲酯 (5.00 g,25.56 mmol) 在THF(300 mL)中的溶液中加入t-BuOK (5.74 g, 51.15 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。在起始材料被完全消耗之后，将MeI (4.35 g, 30.65 mmol)加入反应中。将混合物在室温下另外搅拌2小时。将溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用EA洗脱，以浅黄色半固体形式得到4-甲基-5-氧代吗啉-2-甲酸甲酯 (0.90 g, 20%): C7H11NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：174，实测值 174； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 4.61 (dd,J = 7.5, 4.8 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 16.6 Hz, 1H),3.78 (s, 3H), 3.63 (dd, J = 6.2, 4.1 Hz, 2H), 2.98 (s, 3H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-甲基-5-氧代吗啉-2-甲酸甲酯 (0.15 g, 0.87 mmol)在MeOH (3 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (73 mg, 1.73 mmol)在水(1 mL)中的溶液。将反应溶液在40℃下搅拌1小时。将反应减压浓缩，以灰白色固体形式得到4-甲基-5-氧代吗啉-2-甲酸锂(0.14 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C6H9NO4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：160，实测值 160。
实施例29.中间体29 (3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯)
Figure 193124DEST_PATH_IMAGE145
步骤a:
在室温下向搅拌的8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸甲酯 (1.00 g, 5.91 mmol)和Et3N (1.20 g, 11.86 mol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入Boc2O (1.60 g, 7.33 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将分离的水溶液用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到8-叔丁基 3-甲基 8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸酯(1.30 g, 99%): C14H23NO4 [M + H -15]+的LCMS (ESI)计算值：255，实测值 255。
步骤b:
在室温下向搅拌的8-叔丁基 3-甲基 8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3,8-二甲酸酯(1.30 g, 4.83 mol)在MeOH (5 mL)中的溶液中加入NaOH (0.39 g, 9.65 mol)在H2O(0.5 mL)中的溶液。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×20 mL)提取。将合并的水层用柠檬酸酸化至pH 3，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到 (8-[(叔丁氧基)羰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸) (1.20 g,97%): C13H21NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：278，实测值 278； 1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 4.40-4.21 (m, 2H), 2.94-2.79 (m, 1H), 2.06-1.98 (m, 2H), 1.98-1.84(m, 2H), 1.84-1.73 (m, 2H), 1.73-1.59 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的8-[(叔丁氧基)羰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸 (1.20g, 4.70 mmol)和Et3N (0.95 g, 9.40 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入CDI (0.91g,5.64 mmol)和N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (0.69 g, 7.05 mmol)。将反应在室温下搅拌3小时。将反应减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(1.10 g,69% 三步总计): C15H26N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：243，实测值 243； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 4.40-4.23 (m, 1H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.76-3.71 (m, 3H),3.35-3.21 (m, 1H), 3.19 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 2.18-1.93 (m, 4H), 1.81-1.56 (m,4H), 1.56-1.44 (m, 9H)。
实施例30.中间体30 (3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯)
Figure 793870DEST_PATH_IMAGE146
步骤a:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]氮杂环丁烷-3-甲酸 (2.00 g, 9.94mmol)和CDI(1.80 g, 10.9 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入Et3N (1.20 g, 11.93mmol)和N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (0.90 g, 14.91 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。在室温下将所得溶液用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (2.10 g, 78%): C11H20N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：189，实测值 189； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 4.14-3.99 (m, 4H), 3.89-3.76 (m, 1H),3.72 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 1.46 (s, 9H)。
实施例31.中间体31 (4-氟-4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 257212DEST_PATH_IMAGE147
步骤a:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-4-氟哌啶-4-甲酸 (2.00 g, 8.09mmol)和CDI(2.60 g, 16.18 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入Et3N (2.50 g, 24.27mmol)和N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (1.00 g, 16.18 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液在室温下用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以无色油的形式得到 4-氟-4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.50 g, 57%): C13H23FN2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：235，实测值235； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.01 (d, J = 13.5 Hz, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.26(s, 3H), 3.21-3.01 (m, 1H), 2.06 (dd, J = 19.6, 10.9 Hz, 5H), 1.49 (s, 9H)。
实施例32.中间体32 (5-((叔丁氧基羰基)氨基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酸锂)
Figure 601606DEST_PATH_IMAGE148
步骤a:
在室温下向搅拌的5-氨基-1,3,4-噁二唑-2-甲酸乙酯 (0.10 g, 0.64 mmol)和Et3N (0.19 g, 1.91 mmol)在DMF (1 mL)中的溶液中加入Boc2O (0.17 g, 0.76 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将反应减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10mmoL/L NH4HCO3的55% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到 5-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-1,3,4-噁二唑-2-甲酸乙酯(0.10 g, 55%): C10H15N3O5 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：202，实测值 202； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 4.38 (q, J = 7.1 Hz, 2H),1.46 (d, J = 3.1 Hz, 9H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
步骤b:
向搅拌的5-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-1,3,4-噁二唑-2-甲酸乙酯 (0.16 g,0.62 mmol)在MeOH (2 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (78 mg, 1.87 mmol)的MeOH(3 mL)水溶液，在室温下加入LiOH·H2O (48 mg, 1.15 mmol)的H2O(2 mL)溶液。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到5-((叔丁氧基羰基)氨基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酸锂(0.16 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C8H11N3O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：230，实测值 230； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ8.53 (s, 1H), 2.50 (s, 9H)。
实施例33.中间体33 (3-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑)
Figure 964497DEST_PATH_IMAGE149
步骤a:
在室温下向搅拌的3-碘-1H-吡唑 (0.50 g, 2.59 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入TrtCl (0.86 g, 3.09 mmol)和Et3N (0.52 g, 5.16 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(12/1)洗脱，以灰白色固体形式得到3-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑(0.60 g, 48%): 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.19-7.10 (m, 15H), 6.42 (d, J = 2.5 Hz, 2H)。
实施例34.中间体34 (4-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑)
Figure 470565DEST_PATH_IMAGE150
步骤a:
在室温下向搅拌的4-碘-1H-吡唑 (0.50 g, 2.59 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入TrtCl (0.86 g, 3.09 mmol)和Et3N (0.52 g, 5.16 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑(0.80 g, 64%): 1H NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.75 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.40-7.35 (m, 9H), 7.07-7.00 (m,6H)。
实施例35.中间体35 ((S)-3-甲氧基-2-(三苯甲氧基)丙酸酯锂)
Figure 686782DEST_PATH_IMAGE151
步骤a:
在室温下向搅拌的(2S)-环氧乙烷-2-甲酸甲酯 (2.00 g, 19.59 mmol)在MeOH(15 mL)中的溶液中加入Mg(OSO2CF3)2 (3.15 g, 9.80 mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(2S)-2-羟基-3-甲氧基丙酸甲酯(1.50 g, 46%): C5H10O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：135，实测值 135； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.34 (t, J = 3.4Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 2.65 (brs, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2S)-2-羟基-3-甲氧基丙酸甲酯 (0.70 g, 5.22 mmol)和DMAP (64 mg, 0.52 mmol)在吡啶(8 mL)中的溶液中加入TrtCl (1.60 g, 5.74 mmol)。将所得溶液升温至80℃，搅拌24 h。将所得混合物用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(2S)-3-甲氧基-2-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(0.80 g, 33%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ7.45-7.19 (m, 15H), 4.16 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 10.6, 5.5 Hz,1H), 3.32-3.27 (m, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.21 (s, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2S)-3-甲氧基-2-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (0.80 g, 2.13mmol) 在MeOH (8 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (0.45 g, 10.63 mmol)在水(3 mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌2小时。所得混合物减压浓缩，得到(S)-3-甲氧基-2-(三苯甲氧基)丙酸锂(0.80 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H22O4 [M +Na]+的LCMS (ESI)计算值：385，实测值 385。
实施例36.中间体36 (1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-甲酸锂)
Figure 569288DEST_PATH_IMAGE152
步骤a:
在室温下向搅拌的1-氧代-2H-异喹啉-4-甲酸甲酯 (0.20 g, 1.00 mmol)在MeOH(2 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (84 mg, 2.00 mmol)的水(3 mL)溶液。将所得混合物在室温下搅拌16小时。所得混合物减压浓缩，得到1-氧代-1,2-二氢异喹啉-4-甲酸锂 (0.20g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C10H7NO3 [M - H]+的LCMS (ESI)计算值：188，实测值 188。
实施例37.中间体37 (5-氰基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂)
Figure 921772DEST_PATH_IMAGE153
步骤a:
在室温下向搅拌的5-乙炔基-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯 (0.18 g, 1.00mmol)在MeOH (2 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (84 mg, 2.00 mmol)的水(3 mL)溶液。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，得到5-氰基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C7H4N2O3 [M - H]+的LCMS (ESI)计算值：163，实测值 163。
实施例38.中间体38 (N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺)
Figure 785691DEST_PATH_IMAGE154
步骤a:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.50 g, 0.96 mmol)在1,4-二噁烷 (8 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌20分钟。在室温下将反应溶液用饱和Na2CO3水溶液调节pH至8。将所得混合物用EA (3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到4-[(R)-氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H28Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：415, 417 (3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的4-[(R)-氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 0.96 mmol)和Et3N (0.29 g, 2.89 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFAA (0.24 g, 1.16 mmol)。将反应溶液在0℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用DCM (50 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用DCM (2×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C22H27Cl2F3N2O4 [M + Na]+的LCMS(ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.25 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.12-5.98 (m, 1H), 5.48-5.39 (m, 2H), 4.77 (t,J = 9.7 Hz, 1H), 4.69-4.56 (m, 2H), 4.10 (d, J = 16.0 Hz, 2H), 2.75-2.48 (m,2H), 2.08-1.97 (m, 1H), 1.78 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.31-1.20(m, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.40 g, 0.78 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA (2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以浅黄色固体形式得到N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.30 g,76% 三步总计): C17H19Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：411, 413 (3 : 2)，实测值 411, 413 (3 : 2)。
实施例39.中间体39 (2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酸锂)
Figure 223626DEST_PATH_IMAGE155
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的NaH (12.65 g, 316.16 mmol, 60%)在THF(300mL)中的混合物中滴加氧杂环丁烷-3-醇 (19.52 g, 263.47 mmol)。在氮气氛下，将反应溶液在室温下搅拌0.5小时。在氮气氛下，在0℃下，向上述混合物中滴加2-溴乙酸乙酯(44.00g, 263.47 mmol)。将反应混合物在室温下另外搅拌2小时。将所得混合物用水(200 mL)猝灭，用EA(3×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(30×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以无色油的形式得到2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酸乙酯(25.00 g, 59%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.79-4.72 (m, 2H), 4.72-4.67 (m, 2H), 4.67-4.59 (m, 1H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz,2H), 4.05 (s, 2H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酸乙酯(1.00 g, 6.24 mmol)在THF (2 mL)和MeOH (2 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (0.29 g, 6.89 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，以灰白色固体形式得到2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酸锂 (0.70 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：1H NMR (400 MHz,D2O) δ 4.77-4.74 (m, 1H), 4.71-4.68 (m, 2H), 4.59-4.53 (m, 2H), 3.79 (s, 2H)。
实施例40.中间体40 ((R)-3-甲氧基-2-(三苯甲氧基)丙酸锂)
Figure 909822DEST_PATH_IMAGE156
步骤a:
在室温下向搅拌的(2R)-环氧乙烷-2-甲酸甲酯 (1.00 g, 9.80 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中加入Mg(OSO2CF3)2 (1.58 g, 4.90 mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(2R)-2-羟基-3-甲氧基丙酸甲酯(0.90 g, 55%): C5H10O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：135，实测值 135； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.33 (t, J = 3.7Hz, 1H), 3.83 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 3.76-3.65 (m, 2H), 3.41 (d, J = 1.5 Hz,3H), 2.91-2.39 (brs, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2R)-2-羟基-3-甲氧基丙酸甲酯(0.50 g, 3.73 mmol)和DMAP(46 mg, 0.37 mmol)在吡啶(4 mL)中的溶液中加入TrtCl (1.14 g, 4.10 mmol)。将所得溶液在80℃下搅拌24小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(2R)-3-甲氧基-2-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (0.60 g, 34%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.49-7.09 (m, 15H),4.16 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 10.6, 5.5 Hz, 1H), 3.32-3.27 (m, 1H),3.23 (s, 3H), 3.21 (s, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2R)-3-甲氧基-2-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (0.60 g, 1.59mmol)在MeOH (6 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (0.33 g, 7.97 mmol)的水(2 mL)溶液。将所得混合物在室温下搅拌2小时。所得混合物减压浓缩，得到(R)-3-甲氧基-2-(三苯甲氧基)丙酸锂(0.80 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：LCMS (ESI)计算值 forC23H22O4 [M + Na]-: 385，实测值 385。
实施例41.中间体41 ((1R,5S,6R)-6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯)
Figure 116813DEST_PATH_IMAGE157
步骤a:
在室温下向搅拌的(1R,5S,6R)-3-[(叔丁氧基)羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(0.50 g, 2.20 mmol), HOBt (0.45 g, 3.30 mmol)和EDCI (0.63 g, 3.30 mmol)在DMF(6 mL)中的溶液中加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐 (0.40 g, 4.11 mmol)和Et3N(0.45 g, 4.40 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将反应用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油形式得到(1R,5S,6R)-6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.30 g, 45%): C13H22N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：215，实测值 215； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.76 (s, 3H), 3.72-3.64 (m,1H), 3.59 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.52-3.41 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.15-2.04(m, 1H), 2.02-1.93 (m, 1H), 1.47 (s, 9H)。
实施例42.中间体42 (4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 230262DEST_PATH_IMAGE158
步骤a:
在室温下向搅拌的2-甲基吡啶-4-甲酸 (2.00 g, 14.58 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液中加入PtO2 (0.40 g, 1.75 mmol)和HCl (6 N, 1 mL)。将反应在氢气下脱气三次，并在H2 (50 atm)下在30℃下搅拌16小时。将反应过滤，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到2-甲基哌啶-4-甲酸甲酯(2.00 g, 96%)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C8H15NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：158，实测值 158； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ3.51-3.43 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.31-3.24 (m, 1H), 3.12-3.02 (m, 1H), 2.77(tt, J = 12.4, 3.8 Hz, 1H), 2.30-2.16 (m, 2H), 1.77 (qd, J = 13.8, 4.3 Hz,1H), 1.63-1.49 (m, 1H), 1.37 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-甲基哌啶-4-甲酸甲酯(2.00 g, 12.72 mmol)和Et3N (2.57g, 25.40 mmol)在DCM(10 mL)中的混合物中加入Boc2O (4.16 g, 19.06 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到1-叔丁基 4-甲基 2-甲基哌啶-1,4-二甲酸酯(3.3 g, 粗制)，其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。C13H23NO4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：202 实测值：202； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 4.28-4.09 (m, 1H), 3.91-3.76 (m, 1H), 3.72(s, 3H), 3.11 (td, J = 13.1, 4.1 Hz, 1H), 2.76-2.51 (m, 1H), 2.10-1.86 (m,3H), 1.85-1.69 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.09 (d, J = 6.5 Hz, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的1-叔丁基 4-甲基 2-甲基哌啶-1,4-二甲酸酯 (3.30 g,12.82 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液中加入NaOH (1.03 g, 25.75 mmol)在水(2 mL)中的溶液。将反应溶液在40℃下搅拌1小时。将反应用水(50 mL)稀释。将水溶液用柠檬酸酸化至pH 3，然后用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用23% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以浅黄色半固体形式得到1-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基哌啶-4-甲酸(2.20 g,71%): C12H21NO4 [M + H -56]+的LCMS (ESI)计算值：188，实测值 188。
步骤d:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-2-甲基哌啶-4-甲酸 (1.80 g, 7.40mmol), HOBt (1.50 g, 11.10 mmol)和EDCI (1.80 g, 11.10 mmol) 在DCM(10 mL)中的溶液中加入N,O-二甲基羟基胺盐酸盐 (1.08 g, 11.10 mmol)和Et3N (1.50 g, 14.80mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应用水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.50 g, 71%): C14H26N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：287 实测值：287； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.04-3.92 (m, 1H),3.89-3.81 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.20-3.10 (m, 1H), 2.88 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.01-1.90 (m, 1H), 1.90-1.76 (m, 2H), 1.73-1.60 (m, 1H), 1.49(s, 9H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
实施例43.中间体43a (含有顺式异构体、外消旋体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)； 中间体43b (含有反式异构体、外消旋体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 827597DEST_PATH_IMAGE159
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (2.76g, 9.78 mmol) 在THF(10 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (4.86 mL, 9.72 mmol, 2 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后将4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.40 g, 4.89 mmol)加入到反应中。在氮气氛下，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭，用水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色半固体形式得到 4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 24%):C21H27Cl2NO4 [M + H -56]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374 (3:2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.70 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.17-5.98 (m, 1H), 5.56-5.28 (m, 2H), 4.69-4.59 (m, 2H), 4.23-4.02 (m, 1H), 3.93-3.78 (m, 1H), 3.56-3.39 (m, 1H), 3.17-3.02 (m, 1H), 2.06-1.81 (m, 1H), 1.81-1.57 (m, 2H), 1.57-1.43 (m, 10H), 1.09 (d, J = 6.6 Hz, 3H)。和以浅黄色油的形式得到4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 53%):C18H23Cl2NO4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：332, 334 (3 : 2)，实测值 332, 334(3: 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12.30 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.17 (s, 1H),4.21-4.02 (m, 1H), 3.96 (dd, J = 14.0, 6.9 Hz, 1H), 3.50-3.37 (m, 1H), 3.25-3.06 (m, 1H), 2.08-1.96 (m, 2H), 1.96-1.81 (m, 1H), 1.81-1.67 (m, 1H), 1.53(s, 9H), 1.20 (d, J = 6.4 Hz, 3H)。
在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 2.56 mmol)和K2CO3 (0.71 g, 5.15 mmol)在DMF (5 mL)中的混合物中加入3-溴丙-1-烯 (0.47 g, 3.86 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用EA(30mL)和水(30 mL)稀释，将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 90%)。4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的总量是1.50 g (72%)。
步骤b:
4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.50 g, 3.51 mmol)在SFC下用下述条件分离：柱：CHIRALPAK IF, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：CO2: 75%，流动相B：MeOH: 25%；流速：40 mL/min；检测器：UV: 220/254 nm； 保留时间：RT1: 3.29 分钟； RT2: 3.85 分钟。
在3.29分钟处获得第1峰，从其中以浅黄色半固体形式分离出含有两种顺式对映异构体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 45%): C21H27Cl2NO4 [M + H -56]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374 (3 : 2)； 在3.85分钟处获得第2峰，从其中以浅黄色半固体形式分离出含有两种反式对映异构体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 36%): C21H27Cl2NO4 [M + H -56]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 :2)，实测值 372, 374 (3 : 2)。
实施例44.中间体44 ((2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲醇三氟乙酸)
Figure 51905DEST_PATH_IMAGE160
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的3,4-二氯苯酚 (100.00 g, 613.49 mmol)在DCM(1000 mL)中的溶液中滴加Br2(98.04 g, 613.49 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌16小时。在0℃下，将反应用饱和Na2S2O3水溶液(500 mL)猝灭。将所得混合物用EA (6×400 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×400 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到2-溴-4,5-二氯苯酚和2-溴-3,4-二氯苯酚的混合物(100g, 粗制)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤。
步骤b:
在0℃下向2-溴-4,5-二氯苯酚和2-溴-3,4-二氯苯酚(32 g, 125.04 mmol, 1 当量)与K2CO3 (54.9 g, 396.87 mmol, 3 当量)在MeCN(210 mL)中的粗制混合物中滴加MeI(16.5 mL, 116.05 mmol, 2 当量)。将反应混合物在50℃下搅拌4小时。将反应混合物过滤并浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以白色固体形式得到 2-溴-3,4-二氯-1-甲氧基苯 (8.7 g, 25.7%) : 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.40 (dd, J = 9.0, 1.1 Hz,1H), 6.79 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 和以白色固体形式得到1-溴-4,5-二氯-2-甲氧基苯 (24.3 g, 71.77%): 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.64 (s, 1H), 6.99(s, 1H), 3.91 (s, 3H)。
步骤c:
在氮气氛下，在0℃下向2-溴-3,4-二氯-1-甲氧基苯 (0.80 g, 3.13 mmol) 在THF(8 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (2.0 mL, 19.76 mmol, 2 M THF溶液)。将反应溶液在0℃下搅拌0.5小时。然后在氮气氛下，在0℃下滴加4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.67g, 3.13 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液。在0℃下另外搅拌0.5小时后，使反应混合物升温至室温， 在氮气氛下另外搅拌0.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭，用EA(2×40mL)提取。将有机层合并，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/2)洗脱，以灰白色泡沫形式得到 4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(羟基)甲基] 哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g, 82%): C18H25Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：412, 414 (3 : 2)，实测值 412, 414 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38(d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.21(d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.70 (td, J =12.9, 2.8 Hz, 1H), 2.59 (td, J = 12.8, 3.0 Hz, 1H), 2.17-1.97 (m, 2H), 1.48(s, 9H), 1.42-1.24 (m, 3H)。
步骤d:
在室温下向4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(羟基) 甲基] 哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 1.28 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA (2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时并浓缩，以无色油的形式得到 (2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(哌啶-4-基) 甲醇三氟乙酸 (0.60 g, 粗制): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)。
实施例45.中间体45 ((S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4-氯-5-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 378981DEST_PATH_IMAGE161
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-氯-4-甲基苯酚 (0.50 g, 3.51 mmol)在HOAc(5 mL)的溶液中滴加Br2 (0.56 g, 3.51 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌3小时。将反应溶液用饱和Na2SO3水溶液(50 mL)猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化， 用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到2-溴-5-氯-4-甲基苯酚(0.70 g,90%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.46 (s, 1H), 2.30(s, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-溴-5-氯-4-甲基苯酚(0.70 g, 3.16 mmol)和K2CO3 (0.87g, 6.32 mmol)在DMF(5 mL)中的混合物中加入3-溴丙-1-烯 (0.50 g, 4.11 mmol)。使反应混合物升温至40℃并搅拌3小时。将反应混合物用水(50 mL)稀释，用EA(2×15 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以灰白色固体形式得到 1-溴-4-氯-5-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.45 g, 54%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 (s, 1H), 6.90 (s,1H), 6.12-6.02 (m, 1H), 5.58-5.40 (m, 1H), 5.40-5.30 (m, 1H), 4.59 (dt, J =5.0, 1.6 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-65℃下向搅拌的1-溴-4-氯-5-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.43 g, 1.64 mmol)在THF (4 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (0.76 mL, 1.90 mmol, 2.5M 己烷溶液)。搅拌30分钟后，在氮气氛下，在-65℃下滴加4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.40 g, 1.26 mmol)在THF(2 mL)中的溶液。使所得混合物升温至室温，另外搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/5)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4-氯-5-甲基苯基)(((S)-叔丁基亚磺酰基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.18 g, 30%): C25H39ClN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：499, 501(3 : 1)，实测值 499, 501 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.96 (s, 1H), 6.87(s, 1H), 6.09-5.99 (m, 1H), 5.50-5.27 (m, 2H), 4.61-4.45 (m, 2H), 4.42-3.82(m, 4H), 2.66-2.57 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.92-1.91 (m, 1H), 1.66 (s, 3H),1.45 (s, 9H), 1.13 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4-氯-5-甲基苯基)(((S)-叔丁基亚磺酰基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.18 g, 0.38 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。在室温下将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)猝灭，用DCM (3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4-氯-5-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 70%):C20H31ClN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：399, 401 (3 : 1)，实测值 399, 401 (3 :1)。
实施例46.中间体46 (1-溴-4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯)
Figure 663332DEST_PATH_IMAGE162
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向3-氯-2-氟苯酚(1.50 g, 10.23 mmol)在MeCN (60 mL)和TFA (1.00 mL)中的溶液中加入NCS(1.37 g, 10.24 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。减压浓缩反应混合物。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到3,4-二氯-2-氟苯酚(1.60 g, 86%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.64(s, 1H), 7.27 (dd, J = 9.0, 2.1 Hz, 1H), 6.97 (t, J = 8.9 Hz, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3,4-二氯-2-氟苯酚 (1.60 g, 8.84 mmol)在AcOH (20 mL)中的溶液中滴加Br2 (1.55 g, 9.72 mmol)。反应溶液在室温下搅拌3小时。将反应混合物倒入水(100 mL)中。然后将反应混合物用EA(2×50 mL)提取。将有机相用饱和Na2SO3水溶液(2×50 mL)、饱和NaHCO3水溶液(2×50 mL)和盐水(2×50 mL)洗涤。然后将溶液经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化， 用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到6-溴-3,4-二氯-2-氟苯酚(1.80 g, 78%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.45 (d, J = 2.3 Hz, 1H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的6-溴-3,4-二氯-2-氟苯酚 (1.80 g, 6.97 mmol)和K2CO3(2.00 g, 14.47 mmol)在DMF(20 mL)中的混合物中加入3-溴丙-1-烯 (1.26 g, 10.39mmol)。然后将反应在40℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(80 mL)稀释，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压蒸发。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以无色液体的形式得到1-溴-4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(1.70 g, 82%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (d, J =2.3 Hz, 1H), 6.18-6.03 (m, 1H), 5.47-5.37 (m, 1H), 5.32 (dd, J = 10.2, 1.5Hz, 1H), 4.70-4.60 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -121.32.
实施例47.中间体47 ((R)-2-甲氧基-3-(三苯甲氧基)丙酸锂)
Figure 810279DEST_PATH_IMAGE163
步骤a:
在室温下向搅拌的(2R)-2,3-二羟基丙酸甲酯 (0.50 g, 4.16 mmol)和(氯代二苯基甲基)苯(3.50 g, 12.5 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中分批加入DMAP(30 mg, 0.25mmol)和Et3N (1.26 g, 12.5 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌72小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×5 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(8/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(2R)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(0.10 g, 6%)。1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.29 (m, 15H), 4.31 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 3.91(dd, J = 14.0, 3.6 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2R)-2-羟基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (0.50 g, 1.38mmol)和CH3I (1 mL)在Et2O (5 mL)中的溶液中分批加入Ag2O(0.96 g, 4.14 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌16小时。所得混合物用水(20 mL)稀释，用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×5 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(6/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(2R)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (0.40 g, 77%): C24H24O4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：399，实测值 399； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39-7.21 (m, 15H), 4.00-3.90 (m,2H), 3.82 (s, 3H), 3.87-3.76 (m, 1H), 3.53 (s, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2R)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯 (50 mg, 0.13mmol)在MeOH (2 mL)中的混合物中加入LiOH·H2O (9 mg, 0.4 mmol)在H2O (1 mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌16小时， 减压浓缩，得到(2R)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸锂(50 mg, 粗制)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C23H22O4 [M +Na]+的LCMS (ESI)计算值：385，实测值 385。
实施例48.中间体48 ((2S)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸锂)
Figure 25229DEST_PATH_IMAGE164
步骤a:
在室温下向搅拌的(2S)-2,3-二羟基丙酸甲酯(1.00 g, 8.32 mmol)和(氯代二苯基甲基)苯(2.50 g, 9.16 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入Et3N(1.26 g, 12.5 mmol)和DMAP (61 mg, 0.50 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。所得混合物用水(15mL)稀释，用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，以灰白色固体形式用PE/EA(5/1)洗脱，得到(2S)-2-羟基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(1.00 g, 33%): 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.49-7.39 (m, 5H), 7.33 (dt, J = 6.9, 1.5 Hz, 5H), 7.33-7.22(m, 5H), 4.32-4.27 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.54-3.45 (m, 1H), 3.38 (dd, J =9.4, 3.4 Hz, 1H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的(2S)-2-羟基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(0.50 g, 1.38 mmol)和CH3I (1 mL)在Et2O (5 mL)中的溶液中分批加入Ag2O (0.96 g,4.14 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌16小时。将所得混合物用水(30 mL)稀释。将所得混合物用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×25 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(6/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(2S)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(0.40 g, 77%): C24H24O4[M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：399，实测值 399； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.49-7.42(m, 6H), 7.36-7.25 (m, 6H), 7.29-7.21 (m, 3H), 3.97 (dd, J = 5.4, 4.0 Hz,1H), 3.78 (s, 3H), 3.47 (s, 3H), 3.45-3.36 (m, 2H)。
步骤c:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的(2S)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸甲酯(0.20 g, 0.53 mmol)在MeOH (3 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (38 mg, 1.59 mmol)在H2O(1 mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到(2S)-2-甲氧基-3-(三苯基甲氧基)丙酸(0.10 g, 粗制)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C23H22O4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：385，实测值 385。
实施例49.中间体49 (4-(1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 206811DEST_PATH_IMAGE165
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的(甲氧基甲基)三苯基磷鎓氯化物 (12.36 g,36.06 mmol)在THF(60 mL)中的混合物中滴加n-BuLi (10.30 mL, 25.75 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。在氮气氛下，在-78℃下将所得混合物搅拌30分钟。在-78℃下用5分钟向上述混合物中滴加4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.00 g, 5.15 mmol)在THF(5 mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下另外搅拌2小时。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(80 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-甲氧基乙烯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.60 g, 59%): C20H27Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：416,418 (3 : 2)，实测值 416, 418 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.09 (d, J =1.3 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.87 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.66 (s,3H), 2.74-2.58 (m, 4H), 1.71-1.53 (m, 5H), 1.46 (d, J = 1.3 Hz, 9H)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的4-[(E)-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-甲氧基乙烯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.80 g, 4.32 mmol)在1,4-二噁烷(10 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(6N, 10 mL)。然后将所得混合物升温至室温，搅拌3小时。将所得混合物减压浓缩。将粗制的所得混合物无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C14H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：302, 304 (3 : 2)，实测值 302, 304 (3 : 2)
步骤c:
在0℃下向搅拌的2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-(哌啶-4-基)乙醛(1.50 g,4.96 mmol)在THF(15 mL)和饱和NaHCO3 水溶液(20 mL)中的混合物中滴加Boc2O (1.62 g,7.445 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.30g, 65%): C19H25Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值 402,404 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.68 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H),7.00 (s, 1H), 4.04 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.67 (dd, J = 8.9, 1.7Hz, 1H), 2.82-2.71 (m, 1H), 2.66 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.36-2.21 (m, 1H),1.89 (dt, J = 13.3, 2.9 Hz, 1H), 1.67 (s, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.41 (s, 1H),1.26-1.16 (m, 1H), 1.10-0.95 (m, 1H)。
实施例50.中间体50 (4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 662063DEST_PATH_IMAGE166
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向(甲氧基甲基)三苯基磷鎓氯化物 (1508 mg, 4.40mmol) 在THF(7 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (2.5 mL, 38.46 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。将溶液在0℃下搅拌1小时。然后在氮气氛下，在-20℃下滴加2, 2-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1 g, 4.40 mmol)在THF(5 mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌15小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭，用EA(2×20 mL)提取。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以无色油的形式得到 4(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g, 71%): C14H25NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：256，实测值 256； 1H NMR (300 MHz, M乙醇) δ 5.97 (d, J = 24.0Hz, 1H), 3.62-3.45 (m, 5H), 2.37-2.27 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 1H), 2.18 (s,1H), 1.46 (d, J = 1.7 Hz, 9H), 1.38 (d, J = 2.7 Hz, 6H)。
步骤b:
在室温下向 4-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g, 3.13mmol) 在THF(10 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 5 mL)。将反应混合物在50℃下搅拌4小时。然后将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 9，然后加入Boc2O (821 mg, 3.76mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用EA(2×15 mL)提取。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以无色油的形式得到4-甲酰基-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (360 mg, 48%): C13H23NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：242，实测值 242。
步骤c’:
在室温下向搅拌的2-溴-4,5-二氯苯酚 (31.00 g, 128.15 mmol)和[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基硅烷 (32.00 g, 192.23 mmol)在DCM (100 mL)中的溶液中加入DIEA(49.70 g, 384.46 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌5小时。将反应用水(200 mL)猝灭。将所得混合物用DCM(3×400 mL)提取。将合并的有机层用用盐水(3×200 mL)洗涤，经Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(50/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 [2-(2-溴-4,5-二氯苯氧基甲氧基)乙基]三甲基硅烷 (44.00 g,83%): 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.86 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 5.39 (s, 2H),3.74 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 0.79 (t, J = 6.0 Hz, 2H), -0.05 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-10℃下向[2-(2-溴-4,5-二氯苯氧基甲氧基) 乙基] 三甲基硅烷(步骤c’的产物) (0.69 g, 1.86 mol)在THF(7 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (0.2 mL,1.61 mmol, 2 M THF溶液)。在氮气氛下，将反应混合物在-10℃下搅拌0.5小时。在氮气氛下，在-10℃下将4-甲酰基-2, 2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (300 mg, 1.24 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液滴加至所得溶液中。使反应混合物升温至室温，在氮气氛下搅拌2小时。将所得混合物饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×10 mL)提取。将有机相合并，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(9/1)洗脱，以无色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)(羟基)甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.20 g, 30%): C25H41Cl2NO5Si [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：534, 536 (3 : 2)，实测值 534, 536 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 7.67 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.30 (s, 2H), 3.83-3.72 (m, 2H),3.71-3.50 (m, 2H), 3.46-3.28 (m, 1H), 1.97-1.89 (m, 1H), 1.84-1.73 (m, 2H),1.71-1.65 (m, 1H), 1.52 (d, J = 4.0 Hz, 6H), 1.49 (s, 9H), 1.40 (s, 2H), 0.04(s, 9H)。
步骤d:
在室温下向 4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)(羟基)甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.18 g, 0.34 mmol) 在DCM(8 mL)中的溶液中分三次加入戴斯-马丁试剂(0.14 g, 0.34 mmol)。然后将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应用饱和Na2SO3水溶液猝灭，然后用DCM (2×10 mL)提取。将有机相经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)羰基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.16 g, 粗制):C25H39Cl2NO5Si [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：532, 534 (3 : 2)，实测值 532, 534 (3 :2)。
步骤e:
在室温下向4-(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯甲酰基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.16 g, 粗制) 在THF(10 mL)中的溶液中一次加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (44 mg, 360 mmol)和Ti(OEt)4 (0.90 g, 3.95 mmol)。在氮气氛下，将反应混合物在70℃下搅拌15小时。将反应混合物用水(50 mL)猝灭。形成固体并过滤。将滤液用EA(2×40 mL)提取。将有机层合并，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到4-(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.20 g, 粗制):C29H48Cl2N2O5SSi [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：657, 659 (3 : 2)，实测值 657, 659(3: 2)。
步骤f:
在氮气氛下，在室温下，向4-[(1E)-(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.31 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中分5次加入NaBH4 (58 mg, 1.54 mmol)。在氮气氛下，将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物饱和NH4Cl水溶液(10 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣用制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以无色油的形式得到 4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基] 苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(75 mg, 37%): C29H50Cl2N2O5SSi [M +Na]+的LCMS (ESI)计算值：659, 661 (3 : 2)，实测值 659, 661 (3 : 2)。
实施例51.中间体51 ((S)-N-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 561886DEST_PATH_IMAGE167
步骤a:
在氮气氛下，在-65℃下向搅拌的1,2-二氯-3-碘-4-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(1.25 g, 3.80 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中加入n-BuLi(1.2 mL, 3.80 mmol, 2.5 M己烷溶液)。在氮气氛下，在-65℃下搅拌30分钟后，在氮气氛下，在-65℃下滴加4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.80 g, 2.53 mmol)在THF(5mL)中的溶液。添加后，在氮气氛下，将反应混合物在-65℃下另外搅拌1小时。在-65℃下将反应用水(40 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(7/1)洗涤，以浅黄色油的形式得到4-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3-二氯苯基)(((S)-叔丁基亚磺酰基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.80 g, 57%): C24H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCL3) δ7.34 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.79 (dd, J = 9.0, 4.9 Hz, 1H), 6.11-5.94 (m, 1H),5.49-5.28 (m, 2H), 4.79 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.68-4.50 (m, 3H), 4.36-3.91 (m,3H), 2.77-2.47 (m, 2H), 2.40-2.29 (m, 1H), 2.18-2.02 (m, 1H), 1.46 (s, 9H),1.34-1.22 (m, 1H), 1.04 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的 4-[(R)-[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g, 1.54 mmol)在DCM (6mL)中的溶液中加入TFA(1.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(6 mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 8。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.60 g, 74%): C19H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421(3 : 2)，实测值 419, 421 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.31 (m, 1H),6.81-6.76 (m, 1H), 6.11-5.95 (m, 1H), 5.49-5.34 (m, 2H), 4.81 (t, J = 10.0Hz, 1H), 4.67-4.50 (m, 3H), 3.26 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 12.4 Hz,1H), 2.68-2.36 (m, 5H), 2.13 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H)。
实施例52.中间体52 (4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-甲酸锂)
Figure 127997DEST_PATH_IMAGE168
步骤a:
在室温下向搅拌的5-氧代-4H-吡嗪-2-甲酸 (3.00 g, 21.41 mmol)和K2CO3 (14.8 g, 1.07 mol)在DMF(30 mL)中的混合物中加入CH3I(15.2 g, 1.08 mol)。在氮气氛下，将所得混合物在40℃下搅拌16小时。将所得混合物用水(50 mL)稀释，用EA(5×60 mL)提取。将合并的有机层用盐水 (5×80 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黑褐色固体形式得到4-甲基-5-氧代吡嗪-2-甲酸甲酯 (2.50 g, 69%): C7H8N2O3 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：169，实测值 169； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.48 (s,1H), 8.02 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.61 (s, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-甲基-5-氧代吡嗪-2-甲酸甲酯 (0.60 g, 3.57 mmol)在MeOH (7 mL)中的混合物中加入LiOH (0.26 g, 10.71 mmol)在H2O(1 mL)中的溶液。在室温下搅拌20小时后，将所得混合物减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤。C6H6N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：155，实测值 155。
实施例53.中间体53 (1-溴-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯)
Figure 898507DEST_PATH_IMAGE169
步骤a:
在室温下向搅拌的2-溴-5-甲基苯酚 (2.00 g, 10.69 mmol)在DMF (20 mL)中的溶液中加入K2CO3 (2.96 g, 21.41 mmol)和3-溴丙-1-烯 (1.94 g, 16.04 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-溴-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(1.29 g, 53%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.38 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.69 (dd, J = 7.9, 2.0 Hz, 1H),6.16-6.02 (m, 1H), 5.40-5.30 (m, 1H), 5.28-5.20 (m, 1H), 4.60 (d, J = 5.0 Hz,2H), 2.32 (s, 3H)。
实施例54.中间体54 (4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 524660DEST_PATH_IMAGE170
步骤a:
在室温下向搅拌的3-甲基吡啶-4-甲酸 (2.00 g, 14.58 mmol)和HCl (6 N, 3mL)在MeOH (15 mL)中的混合物中加入PtO2(0.33 g, 1.46 mmol)。在H2 (50 atm)气氛下，将所得混合物在50℃下搅拌12小时。过滤反应混合物，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到3-甲基哌啶-4-甲酸甲酯HCl (2.30 g, 90%): C8H15NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：158，实测值 158； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 3.86-3.69 (m, 2H), 3.64 (s, 3H),3.15-2.90 (m, 2H), 2.83 (q, J = 5.7 Hz, 1H), 2.35-2.23 (m, 1H), 1.91-1.81 (m,2H), 0.93 (d, J = 7.2 Hz, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-甲基哌啶-4-甲酸甲酯 (2.30 g, 14.63 mmol)和Et3N(2.96 g, 29.26 mmol)在THF (15 mL)和MeOH (30 mL)中的溶液中加入Boc2O (4.79 g,21.95 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物用EA(50 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用20% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以黄色油的形式得到1-叔丁基 4-甲基 3-甲基哌啶-1,4-二甲酸酯(2.90 g,77% 两步总计): C13H23NO4 [M + H - 15]+的LCMS (ESI)计算值：243，实测值 243； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 4.02 (s, 1H), 3.80 (dd, J = 13.3, 1.5 Hz, 1H), 3.70 (s,3H), 3.31-2.81 (m, 2H), 2.62 (dt, J = 10.5, 4.3 Hz, 1H), 2.27-2.15 (m, 1H),1.92-1.77 (m, 1H), 1.75-1.58 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 0.90 (dd, J = 6.8, 2.5Hz, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的1-叔丁基 4-甲基 3-甲基哌啶-1,4-二甲酸酯 (2.70 g,10.49 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中加入NaOH (0.83 g, 20.98 mmol)在H2O (4 mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌12小时，用柠檬酸酸化至pH 3。将混合物用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到1-[(叔丁氧基)羰基]-3-甲基哌啶-4-甲酸(1.30 g, 63%):C12H21NO4 [M +Na]+的LCMS (ESI)计算值：266，实测值 266； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ12.24 (s, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.70 (dd, J = 13.1, 3.6 Hz, 1H), 3.09-2.65 (m,2H), 2.56 (dt, J = 10.0, 4.5 Hz, 1H), 2.19-2.08 (m, 1H), 1.65-1.49 (m, 2H),1.39 (s, 9H), 0.80 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-3-甲基哌啶-4-甲酸 (1.10 g, 4.52mmol)和HOBt (0.91 g, 6.78 mmol)在DMF (10 mL)中的混合物中加入EDCI (1.30 g,6.78 mmol), Et3N (0.55 g, 5.43 mmol)和N,O-甲氧基(甲基)胺 (0.30 g, 4.97 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌12小时。在室温下将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以无色油的形式得到4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 77%): C14H26N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：231 实测值：231； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.17-3.89 (m, 2H),3.86-3.76 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.29-3.13 (m, 4H), 3.13-2.94 (m, 2H), 2.24-2.09 (m, 1H), 2.06-1.87 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 0.93 (d, J = 7.0 Hz, 3H)。
实施例55.中间体55 ((3S,4S)-rel-4-(2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯甲酰基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯； (3R,4S)-rel-4-(2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯甲酰基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)
Figure 646200DEST_PATH_IMAGE171
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下，向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (2.12g, 7.68 mmol) 在THF(10 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (3.84 mL, 7.68 mmol, 2 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后将4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.10 g, 3.84 mmol)在THF(8 mL)中的溶液滴加至该溶液中。添加后，将所得溶液在0℃下另外搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭。将反应混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到4-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯甲酰基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯和4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的混合物。将残渣溶解于DMF(10 mL)中，在室温下加入K2CO3(0.88 g, 6.37mmol)和烯丙基溴(0.77 g, 6.37 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到含有两种顺式对映异构体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.90 g, 55%):C21H27Cl2NO4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374(3: 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.15-5.97 (m,1H), 5.52-5.38 (m, 2H), 4.69-4.54 (m, 2H), 4.25-4.03 (m, 1H), 4.01-3.86 (m,1H), 3.68-3.52 (m, 1H), 3.12-2.94 (m, 1H), 2.91-2.76 (m, 1H), 2.24-2.10 (m,1H), 2.01-1.84 (m, 1H), 1.76-1.55 (m, 1H), 1.55-1.39 (m, 9H), 0.85 (d, J =6.5 Hz, 3H)。
以浅黄色油的形式分离出含有两种反式对映异构体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯)(0.12 g, 7%): C21H27Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：450, 452 (3 : 2)，实测值 450, 452 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.68 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.11-5.93 (m, 1H), 5.44 (q, J = 11.2 Hz,2H), 4.62 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.19-4.10 (m, 1H), 3.92 (d, J = 13.0 Hz, 1H),3.57 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.87-2.78 (m, 1H),2.23-2.08 (m, 1H), 1.97-1.82 (m, 1H), 1.76-1.58 (m, 1H), 1.56-1.32 (m, 9H),0.82-0.75 (m, 3H)。
实施例56.中间体56 ((2S)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸)
Figure 16001DEST_PATH_IMAGE172
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的(2S)-5-氧代吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(0.50 g, 2.70mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaH (0.22 g, 5.40 mmol, 60%矿物油溶液)。在氮气氛下，将所得混合物在0℃下搅拌30分钟。在0℃下向上述混合物中滴加MeI (1.15 g, 8.10mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物用水(40 mL)猝灭，用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(2S)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸叔丁酯(0.34 g, 63%): C10H17NO3 [2M + H]+的LCMS (ESI)计算值：399，实测值 399； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.09-3.92 (m, 1H),2.87 (s, 3H), 2.57-2.43 (m, 1H), 2.43-2.24 (m, 2H), 2.13-1.98 (m, 1H), 1.50(s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2S)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸叔丁酯 (50 mg, 0.25mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩，以黄色油的形式得到(2S)-1-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酸(64 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C6H9NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：144，实测值144； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.35-4.12 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.75-2.36 (m,3H), 2.31-2.10 (m, 1H)。
实施例57.中间体57 (溴-5-氯-4-乙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯)
Figure 172176DEST_PATH_IMAGE173
步骤a:
在室温下向搅拌的4-氯-3-乙基苯酚 (3.00 g, 19.15 mmol)在DCM(20 mL)中的溶液中滴加Br2(3.67 g, 22.96 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和Na2SO3水溶液(20 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到2-溴-4-氯-5-乙基苯酚(4.50 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.42 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 2.65 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.20 (t, J =7.5 Hz, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-溴-4-氯-5-乙基苯酚 (4.50 g, 19.10 mmol)和K2CO3 (5.28g, 38.20 mmol)在DMF(40 mL)中的溶液中加入3-溴丙-1-烯 (3.47 g, 28.68 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用EA(50 mL)和水(50 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以无色油的形式得到1-溴-5-氯-4-乙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(2.40 g, 45% 两步总计)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD)δ 7.52 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.16-5.91 (m, 1H), 5.53-5.38 (m, 1H),5.35-5.21 (m, 1H), 4.73-4.48 (m, 2H), 2.72 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.23 (t, J =7.5 Hz, 3H)。
实施例58.中间体58 (5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯)
Figure 156182DEST_PATH_IMAGE174
步骤a:
在室温下向搅拌的2-[(叔丁氧基)羰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-甲酸 (0.50g, 2.07 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入EDCI(0.60 g, 3.11 mmol)和HOBt (0.42 g,3.11 mmol)。在室温下搅拌10分钟后，在室温下向上述混合物中加入N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (0.30 g, 3.11 mmol)和Et3N (0.63 g, 6.22 mmol)。在室温下搅拌5小时后，将所得溶液用水(30 mL)稀释，用DCM(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用40% ACN水溶液(加0.05% TFA)提取，以黄色油的形式得到5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.31g, 52%): C14H24N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：229，实测值 229； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.25 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.29(dd, J = 9.9, 3.4 Hz, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.17-2.98 (m, 1H), 2.98-2.81 (m,1H), 2.75-2.67 (m, 1H), 2.03-1.84 (m, 2H), 1.81 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 1.62(d, J = 10.1 Hz, 1H), 1.49 (s, 9H)。
实施例59.中间体59 (2-甲基-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸锂)
Figure 765018DEST_PATH_IMAGE175
步骤a:
在室温下向搅拌的2-甲基-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸乙酯 (0.10 g, 0.55 mmol)在MeOH(1 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (46 mg, 1.10 mmol)在水(0.5 mL)中的溶液。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到 2-甲基-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸锂 (0.15 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C7H7NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：154，实测值 154。
实施例60.中间体60 (1-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙基]-6-氧代吡啶-3-甲酸锂)
Figure 672931DEST_PATH_IMAGE176
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯(0.50 g, 3.26mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入NaH(0.26 g, 6.53 mmol, 60%矿物油溶液)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟。然后将2-(2-氯乙氧基)氧杂环己烷(1.61 g, 9.79 mmol)和NaI(97 mg, 0.65 mmol)加入到混合物中。添加后，使反应混合物升温至70℃，搅拌5小时。冷却至室温后，将所得混合物在0℃下用水(30 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以黄色油的形式得到1-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙基]-6-氧代吡啶-3-甲酸甲酯(0.50 g, 54%): C14H19NO5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：282 实测值：282； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 8.18 (dt, J = 8.8, 2.1 Hz,1H), 6.84 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.81-4.49 (m, 3H), 4.17-3.93 (m, 1H), 3.93-3.77 (m, 4H), 3.68-3.45 (m, 2H), 1.95-1.46 (m, 6H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的1-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙基]-6-氧代吡啶-3-甲酸甲酯(0.20 g, 0.711 mmol)在MeOH(5 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (59 mg, 1.42 mmol)在水(0.5 mL)中的溶液。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，得到 1-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙基]-6-氧代吡啶-3-甲酸锂 (0.16 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C13H17NO5 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：290，实测值 290。
实施例61.中间体61 (3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]丙酸锂)
Figure 683612DEST_PATH_IMAGE177
步骤a:
在室温下向搅拌的3-氨基-2-(氨基甲基)丙酸甲酯二盐酸盐(0.50 g, 2.44mmol)和Et3N(0.74 g, 7.31 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入Boc2O (1.17 g, 5.36mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(20 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]丙酸甲酯(1.00 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C15H28N2O6 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：333，实测值 333； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.73 (s, 3H), 3.62-3.51 (m,2H), 3.23 (dt, J = 13.6, 5.7 Hz, 2H), 2.80-2.64 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.46(s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]丙酸甲酯 (1.00 g, 3.00 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O (0.25 g, 6.01mmol)在水(1 mL)中的溶液。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到 3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]丙酸锂(1.00 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C14H26N2O6 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：319，实测值 319。
实施例62.中间体62 (1-乙酰基吡咯烷-3-甲酸)
Figure 651568DEST_PATH_IMAGE178
步骤a:
在室温下向1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (4.20 g, 19.51 mmol)和K2CO3 (5.40 g, 39.07 mmol)在DMF(10 mL)中的混合物中加入(溴甲基)苯 (5.00 g, 29.23mmol)。使所得混合物升温至50℃，搅拌1小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(50 mL)稀释，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-苄基 1-叔丁基 吡咯烷-1,3-二甲酸酯(2.77 g, 47%): C17H23NO4 [M + Na]+的LCMS(ESI)计算值：328，实测值 328； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.42-7.28 (m, 5H), 5.15(s, 2H), 3.58-3.50 (m, 2H), 3.45-3.34 (m, 2H), 3.25-3.08 (m, 1H), 2.24-2.04(m, 2H), 1.45 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-苄基 1-叔丁基 吡咯烷-1,3-二甲酸酯(2.77 g, 8.84mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到吡咯烷-3-甲酸苄基酯(1.81 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C12H15NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：206，实测值 206。
步骤c:
在室温下向搅拌的吡咯烷-3-甲酸苄基酯(1.81 g, 8.82 mmol)和Et3N (2.70 g,26.46 mmol)在DMF(20 mL)中的溶液中滴加乙酸酐(1.40 g, 13.23 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下，将反应用水(40 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-乙酰基吡咯烷-3-甲酸苄基酯(1.60 g, 71% 两步总计): C14H17NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：248，实测值248； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.46-7.28 (m, 5H), 5.18 (d, J = 4.0 Hz, 2H),3.75 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.67 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.63-3.54 (m, 1H), 3.54-3.40 (m, 1H), 3.32-3.18 (m, 1H), 2.34-2.10 (m, 2H), 2.05 (d, J = 3.5 Hz, 3H)。
步骤d:
在氢(1.5 atm)下，在室温下将1-乙酰基吡咯烷-3-甲酸苄基酯(1.60 g, 6.47mmol)和Pd/C (0.16 g, 1.50 mmol)在MeOH (15 mL)中的混合物搅拌1小时。过滤所得混合物，将滤饼用MeOH (3×10 mL)洗涤。将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到1-乙酰基吡咯烷-3-甲酸(0.79 g, 62%): C7H11NO3 [2M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：337，实测值 337；1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 3.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 6.9 Hz, 1H),3.61-3.35 (m, 2H), 3.27-3.06 (m, 1H), 2.31-2.10 (m, 2H), 2.06 (d, J = 5.2 Hz,3H)。
实施例63.中间体63 ((S)-N-[(S)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][5-氟-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 419804DEST_PATH_IMAGE179
步骤a:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的4-氟-3-甲基苯酚 (2.00 g, 15.86 mmol)在DCM(20 mL)中的溶液中加入Br2 (3.04 g, 19.02 mmol)。在空气气氛下，在室温下将所得混合物搅拌1小时。将反应在室温下用饱和Na2SO3水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×50 mL)提取。将合并的有机层合并，减压浓缩，得到2-溴-4-氟-5-甲基苯酚，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.15 (d, J = 8.9 Hz, 1H),6.76 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 2.17 (d, J = 2.1 Hz, 3H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的2-溴-4-氟-5-甲基苯酚 (3.50 g, 17.07mmol)和K2CO3 (4.72 g, 34.14 mmol)在DMF(30 mL)中的溶液中滴加3-溴丙-1-烯 (3.10g, 25.61 mmol)。在空气气氛下，在室温下将所得混合物搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以无色油的形式得到1-溴-5-氟-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(2.30 g, 55%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.26 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.95-6.85 (m, 1H), 6.15-6.01 (m, 1H), 5.48 (dq, J = 17.3, 1.9Hz, 1H), 5.28 (dq, J = 10.6, 1.6 Hz, 1H), 4.62-4.54 (m, 2H), 2.24 (d, J = 2.1Hz, 3H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-5-氟-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.11 g, 0.435 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加n-BuLi (0.17 mL, 0.425 mmol)。将反应在-78℃下搅拌30分钟。然后将(S)-N-[[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.29 mmol)加入混合物中。将所得溶液在-78℃下搅拌2小时。将反应用NH4Cl(1 mL)猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(S)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][5-氟-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(40 mg, 27%): C26H39FN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：511，实测值 511。
实施例64.中间体64 (N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺、N-[(2,3-二氯-6-羟基苯基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺)
Figure 131408DEST_PATH_IMAGE180
步骤a:
将3,4-二氯苯酚(2.00 g, 12.27 mmol), 吡啶-4-甲醛(1.31 g, 12.27 mmol)和乙酰胺(0.87 g, 14.72 mmol), FeCl3 (0.30 g, 1.84 mmol)的混合物在110℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物用EA(200 mL)稀释。混合物搅拌20分钟并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH (10/1)洗脱，得到粗产物。将粗产物用制备TLC纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅褐色固体形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺和N-[(2,3-二氯-6-羟基苯基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺的混合物(0.12 g, 3%): C14H12Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：311, 313 (3 : 2)，实测值311, 313 (3 : 2)。
实施例65.中间体65 (6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯)
Figure 262175DEST_PATH_IMAGE181
步骤a:
在室温下向搅拌的3-叔丁基 6-甲基 3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3,6-二甲酸酯(0.40 g, 1.57 mmol)在MeOH (4 mL)中的溶液中加入KOH(0.18 g, 3.13 mmol)在H2O(1mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用柠檬酸 (30 mL)酸化至pH 3。将所得混合物用EA (3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到3-[(叔丁氧基)羰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸(0.40 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C12H19NO4 [M+ Na]+的LCMS (ESI)计算值：264，实测值 264； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 3.92-3.79(m, 1H), 3.64-3.56 (m, 1H), 3.43-3.32 (m, 1H), 3.11-3.02 (m, 1H), 2.72-2.57(m, 2H), 2.56-2.43 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H), 1.47 (d, J = 11.9 Hz, 9H),1.38-1.29 (m, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-[(叔丁氧基)羰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸 (0.40g, 1.66 mmol), HOBt (0.34 g, 2.49 mmol)和EDCI (0.48 g, 2.49 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (0.24 g, 2.49 mmol)和Et3N (0.50 g,4.97 mmol)。室温下搅拌1小时后，将反应在室温下用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(0.36 g, 81% 两步总计): C14H24N2O4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：229，实测值 229； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.04 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.88-3.76 (m, 1H), 3.70 (s, 3H),3.52-3.36 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.13-3.05 (m, 1H), 2.86-2.79 (m, 1H), 2.78-2.66 (m, 1H), 2.09 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.34 (d, J = 9.4 Hz,1H)。
实施例66.中间体66 ((3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯)
Figure 401032DEST_PATH_IMAGE182
步骤a:
在室温下向搅拌的(3R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸 (2.50 g, 11.61mmol), HOBt (2.35 g, 17.39 mmol)和EDCI (3.34 g, 17.42 mmol)在DCM(20 mL)中的溶液中加入N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (1.70 g, 17.42 mmol)和Et3N (2.35 g, 23.23mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(50 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用40% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.50 g, 67%):C12H22N2O4 [M +H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：203，实测值 203； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.73 (s,3H), 3.71-3.50 (m, 2H), 3.50-3.30 (m, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.23-2.00 (m, 2H),1.48 (s, 9H)。
实施例67.中间体67 ((3S)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯)
Figure 718881DEST_PATH_IMAGE183
步骤a:
在室温下向搅拌的(3S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸 (2.50 g, 11.61mmol), HOBt (2.35 g, 17.39 mmol)和EDCI (3.34 g, 17.42 mmol) 在DCM(20 mL)中的溶液中加入N,O-甲氧基(甲基)胺盐酸盐 (1.70 g, 17.42 mmol)和Et3N (2.35 g, 23.23mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(50 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(3S)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.50 g, 67%): C12H22N2O4 [M+ H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：203，实测值 203； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.74(s, 3H), 3.66 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 3.61-3.53 (m, 1H), 3.51-3.30 (m, 3H), 3.22(s, 3H), 2.20-2.03 (m, 2H), 1.48 (s, 9H)。
实施例68.中间体68 (5-氯-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂)
Figure 421127DEST_PATH_IMAGE184
步骤a:
在室温下向搅拌的5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯 (0.20 g, 1.07 mmol)在MeOH (2 mL)和H2O (1 mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(90 mg, 2.13 mmol)。将所得混合物升温至40℃，搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，以浅黄色固体形式得到5-氯-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C6H4ClNO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：174, 176 (3 : 1)，实测值 174, 176 (3 :1)。
实施例69.中间体69 (6-(羟基甲基)吡啶-3-甲酸锂)
Figure 406400DEST_PATH_IMAGE185
步骤a:
在室温下向搅拌的6-(羟基甲基)吡啶-3-甲酸甲酯 (0.20 g, 1.20 mmol)在MeOH(2 mL)和H2O (1 mL)中的混合物中加入LiOH·H2O (0.10 g, 2.39 mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，以浅黄色固体形式得到6-(羟基甲基)吡啶-3-甲酸锂(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C7H7NO3 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：154，实测值 154。
实施例70.中间体70 (3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁嗪烷-5-甲酸)
Figure 716159DEST_PATH_IMAGE186
步骤a:
在室温下向搅拌的2-(羟基甲基)丙-2-烯酸乙酯(1.00 g, 7.68 mmol)在MeOH(20 mL)中的混合物中滴加(4-甲氧基苯基)甲胺 (1.16 g, 8.46 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-羟基-2-([[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]甲基)丙酸乙酯(1.60 g, 78%): C14H21NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：268，实测值 268； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.24 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.93-6.85 (m, 2H), 4.24-4.15 (m, 1H),4.06-3.94 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.38-3.08 (m, 2H), 2.98-2.89(m, 1H), 2.77-2.66 (m, 1H), 1.29 (td, J = 7.2, 1.4 Hz, 3H)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的3-羟基-2-([[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]甲基)丙酸乙酯(0.70 g, 2.62 mmol) 在DCM(80 mL)中的溶液中分批加入CDI(0.42 g, 2.62 mmol)。使所得混合物升温至室温，搅拌3小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁嗪烷-5-甲酸乙酯(0.60 g, 55%): C15H19NO5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：294，实测值 294；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.27 (d, J = 9.4 Hz, 2H), 6.92-6.87 (m, 2H), 4.64-4.36 (m, 3H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.73 (s, 2H), 3.54-3.45 (m,1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.10-2.99 (m, 1H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁嗪烷-5-甲酸乙酯(0.40 g, 1.36 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 3.00 mL)。将所得混合物在50℃下搅拌3小时。将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁嗪烷-5-甲酸(0.40 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C13H15NO5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：266，实测值 266； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.31-7.22 (m, 2H), 6.94-6.89 (m, 2H), 4.58-4.40 (m, 4H), 3.80(s, 3H), 3.57-3.41 (m, 2H), 3.16-3.08 (m, 1H)。
实施例71.中间体71 (3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸)
Figure 521304DEST_PATH_IMAGE187
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-3-甲基氮杂环丁烷-3-甲酸 (0.45 g, 2.09 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中滴加BH3·THF (6 mL, 6.27 mmol, 1 MTHF溶液)。在氮气氛下使反应溶液升温至0℃并搅拌12小时。在0℃下将反应用H2O(20 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，以灰白色半固体形式得到3-(羟基甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.45 g, 粗制): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.35-4.22 (m, 2H),4.17-3.97 (m, 4H), 1.47 (s, 9H)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的3-羟基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.45 g,2.24 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，以无色油的形式得到3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸(0.35g, 粗制): C4H9NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：104，实测值：104。
实施例72.中间体72 (1-溴-5-氯-4-环丙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯)
Figure 574711DEST_PATH_IMAGE188
步骤a:
在氮气氛下，在室温下，向搅拌的4-氯-3-碘苯酚(1.00 g, 3.90 mmol)和环丙基硼酸 (0.67 g, 7.86 mmol)在1,4-二噁烷 (15 mL)中的溶液中加入Na2CO3 (1.20 g,11.71 mmol)在水(5 mL)和Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(0.30 g, 0.39 mmol)中的溶液。将反应混合物用氮脱气，并在氮气氛下在90℃下搅拌24小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(30mL)稀释，将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以无色油的形式得到 4-氯-3-环丙基苯酚(0.48 g, 72%): 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 2.9Hz, 1H), 2.19-2.09 (m, 1H), 1.02-0.95 (m, 2H), 0.67-0.59 (m, 2H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-氯-3-环丙基苯酚 (1.00 g, 5.93 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中滴加Br2(1.14 g, 7.13 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。在室温下将所得溶液用饱和Na2SO3水溶液(10 mL)猝灭。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到粗制2-溴-4-氯-5-环丙基苯酚(0.94 g): 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 8.04 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 2.21-2.03 (m, 1H), 1.10-0.98 (m, 2H), 0.70-0.61(m, 2H)。
步骤c:
在空气气氛下，在室温下向2-溴-4-氯-5-环丙基苯酚(0.94 g, 3.79 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中滴加K2CO3 (1.00 g, 7.59 mmol)和3-溴丙-1-烯 (0.69 g, 5.69mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用水(80 mL)稀释，用EA(3×30mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以黄色油的形式得到1-溴-5-氯-4-环丙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.27 g, 25 %): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.53(s, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.12-6.01 (m, 1H), 5.55-5.42 (m, 1H), 5.33-5.26 (m,1H), 4.61 (dt, J = 5.0, 1.7 Hz, 2H), 2.20-2.12 (m, 1H), 1.09-0.96 (m, 2H),0.77-0.68 (m, 2H)。
实施例73.中间体73 ((N,N-二乙基氨基甲酸4-氯-3-氟-5-甲基苯酯)
Figure 273545DEST_PATH_IMAGE189
步骤a:
在0℃下向2-氟-6-甲基苯胺(50.00 g, 399.53 mmol)在DMF(300 mL)中的溶液中分5次加入NBS(71.11 g, 399.53 mmol)。然后使反应升温至室温，搅拌1小时。将反应混合物倒入水(3 L)中，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到4-溴-2-氟-6-甲基苯胺(90.00 g, 粗制): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.05 (dd, J = 10.1, 2.2 Hz, 1H),7.00 (dt, J = 2.1, 1.1 Hz, 1H), 3.63 (s, 2H), 2.18 (s, 3H)。
步骤b:
在0℃下向4-溴-2-氟-6-甲基苯胺(80.00 g, 392.08 mmol)在HCl水溶液(12 N,600 mL)中的悬浮液中滴加NaNO2 (31.92 g, 462.65 mmol)在H2O(200 mL)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。在0℃下向所得混合物中分20次滴加氯化铜(116.83 g,1180.15 mmol)。添加后，将所得混合物搅在室温下拌0.5小时，然后在50℃下搅拌12小时。将混合物用饱和Na2CO3水溶液中和至pH 8。将所得混合物用水(1 L)稀释，用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×500 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(20/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到5-溴-2-氯-1-氟-3-甲基苯(41.00 g, 47%): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.24-7.21 (m, 1H), 7.19(dd, J = 8.0, 2.3 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -111.76.
步骤c:
在氮气氛下，向5-溴-2-氯-1-氟-3-甲基苯(41.00 g, 183.47 mmol)在DMSO(320mL)和H2O (80 mL)中的溶液中加入N,N-双(4-羟基-2,6-二甲基苯基)乙二酰胺(3.01 g,9.17 mmol), LiOH·H2O (16.17 g, 385.29 mmol)和N1,N 2-双(4-羟基-2,6-二甲基苯基)草酰胺 (2.40 g, 9.17 mmol)。将悬浮液在氮气氛下脱气。然后将反应80℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用HCl水溶液(2 N, 200 mL)酸化，用水(2 L)稀释，然后用EA(3×500 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×300 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以无色油的形式得到4-氯-3-氟-5-甲基苯酚(30.00 g, 92%): C7H6ClFO [M - H]-的LCMS (ESI)计算值：159, 161(3: 1)，实测值 159, 161 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.60-6.50 (m, 2H),5.00 (s, 1H), 2.36 (s, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -112.60.
步骤d:
在氮气氛下，在0℃下用15分钟向4-氯-3-氟-5-甲基苯酚 (37.00 g, 230.43mmol), Et3N (95.90 g, 949.57 mmol)和DMAP (56.30 g, 460.86 mmol)在DCM(500 mL)中的溶液中滴加二乙基氨基甲酰氯(37.49 g, 276.51 mmol)。在氮气氛下，将反应溶液在室温下搅拌12小时。所得溶液用水(500 mL)稀释，用DCM (2×250 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×200 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以无色油的形式得到N,N-二乙基氨基甲酸4-氯-3-氟-5-甲基苯基酯(40.00 g, 82%): C12H15ClFNO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：260, 262 (3 :1)，实测值 260, 262 (3 : 1)；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.89-6.85 (m, 2H), 73.46-3.37 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.28-1.20 (m, 6H)。
实施例74.中间体74 (5-氯-1-甲基-6-氧代吡啶-3-甲酸)
Figure 754205DEST_PATH_IMAGE190
步骤a:
在室温下向搅拌的5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯 (1.00 g, 5.33 mmol)和K2CO3 (2.21 g, 15.99 mmol)在DMF(6 mL)中的混合物中滴加MeI(3.78 g, 26.65 mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌5小时。将反应混合物用水(50 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色固体形式得到5-氯-1-甲基-6-氧代吡啶-3-甲酸甲酯(0.98 g, 90%):C8H8ClNO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：202, 204 (3 : 1)，实测值 202, 204 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.46 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 2.3 Hz,1H), 3.88 (s, 3H), 3.68 (s, 3H)。
步骤b:
在空气气氛下，在0℃下向搅拌的5-氯-1-甲基-6-氧代吡啶-3-甲酸甲酯(0.50 g,2.48 mmol)在MeOH(3 mL, 74.09 mmol)中的混合物中加入NaOH水溶液(1 N, 3 mL)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。将混合物用HCl水溶液(1 N, 0.5 mL)酸化至pH 6。过滤收集沉淀的固体并用MeOH (2×2 mL)洗涤，以灰白色固体形式得到5-氯-1-甲基-6-氧代吡啶-3-甲酸(0.45 g, 87%): C7H6ClNO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：188, 190 (3 : 1)，实测值 188, 190 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 13.06 (s, 1H), 8.51 (d, J =2.3 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H)。
实施例75.中间体75 ((S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-5-氯-4-(三氟甲基)苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
Figure 312225DEST_PATH_IMAGE191
步骤a:
在室温下向搅拌的4-氯-3-(三氟甲基)苯酚(3.00 g, 15.26 mmol) 在DCM(30mL)中的溶液中滴加Br2(2.44 g, 15.26 mmol)。所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌4小时。在0℃下，将反应用饱和Na2S2O3水溶液(100 mL)猝灭。将所得混合物用EA (4×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到2-溴-4-氯-5-(三氟甲基)苯酚。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C7H3BrClF3O [M - H]+的LCMS (ESI)计算值：273, 275 (2 : 3),实测值：273, 275 (2 : 3)。
步骤b:
在室温下向搅拌的2-溴-4-氯-5-(三氟甲基)苯酚 (粗制)和K2CO3 (4.01 g,29.04 mmol)在DMF (20 mL)中的混合物中滴加烯丙基溴(2.64 g, 21.78 mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×60 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×60 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯(1.00 g, 22%): 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.15-6.00 (m, 1H), 5.59-5.34 (m,2H), 4.67 (dt, J = 5.1, 1.7 Hz, 2H)。
步骤c:
在氮气氛下，在-90℃下向搅拌的1-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯 (0.94 g, 2.97 mmol)在THF(100 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(1.19 mL, 2.97mmol, 2.5M 己烷溶液)。在氮气氛下，在-90℃下将所得混合物搅拌40分钟。在氮气氛下，在-90℃下向搅拌的溶液中滴加4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.94 g, 2.97 mmol)。在氮气氛下，在-90℃下将所得混合物搅拌1小时。在-90℃下将反应用水(150 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的75% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[(R)-[5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 47%)。C25H36ClF3N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：553, 555 (3 : 1)，实测值 553, 555 (3 : 1)。
步骤d:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的4-[(R)-[5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g, 1.81mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中滴加TFA (2.5 mL)。将最终反应混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液酸化至pH 8。将所得混合物用EA (3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-5-氯-4-(三氟甲基)苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.94 g, 87%): C20H28ClF3N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：453, 455 (3 : 1)，实测值 453, 455 (3 : 1)。
实施例76.中间体76 (2,3-二羟基丁酸)
Figure 903744DEST_PATH_IMAGE192
步骤a:
在室温下向搅拌的丁烯酸 (5.00 g, 58.08 mmol)和3-氯苯-1-过氧甲酸 (9.00g, 52.27 mmol)在氯仿(60.00 mL)中的溶液中分批加入H2O(120 mL)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。分离出两层，将氯仿层用H2O (3×60 mL)提取。将水层减压浓缩。将残渣溶解于水(50 mL)中，在50℃下搅拌16小时。将所得溶液减压浓缩，以灰白色固体形式得到2,3-二羟基丁酸 (1.00 g, 15%): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.82 (s, 1H), 3.19(d, J = 1.9 Hz, 1H), 3.16-3.08 (m, 1H), 1.30 (d, J = 5.1 Hz, 3H)。
实施例77-254描述了本文中公开的式I的代表性化合物的合成。
实施例77.化合物1 (2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 863609DEST_PATH_IMAGE193
步骤a:
在氩气气氛下，在0℃下向搅拌的4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (70 mg, 0.18 mmol) 在DCM(3 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.64 g, 2.58mmol)。使反应混合物升温至室温，在氩气气氛下搅拌2小时。在0℃下将所得混合物用水(2mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18OBD柱 19×250 mm, 10 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：15 分钟内从1% B到30% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：12.10分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物1 (2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(22.5 mg, 34%): C12H16Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：275, 277 (3 : 2)，实测值 275, 277 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s,1H), 7.06 (s, 1H), 4.22 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.33(d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.06-2.83 (m, 2H), 2.49-2.30 (m, 1H), 2.20-2.07 (m,1H), 1.67-1.36 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.96.
实施例78.化合物2 (4,5-二氯-2-[羟基(哌啶-4-基)甲基]苯酚)
Figure 639804DEST_PATH_IMAGE194
步骤a:
在氮气氛下，在-40℃下向搅拌的4,5-二氯-2-[(哌啶-4-基)羰基]苯酚 (中间体2, 实施例2) (0.20 g, 0.73 mmol) 在THF(10 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(30 mg,0.80 mmol)。将反应混合物在氮气氛下在-40℃下搅拌2小时。将反应混合物通过添加饱和NH4Cl水溶液(4 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeC18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从15% B到50% B；检测器：UV 254/210nm；保留时间：7.30分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物2 (4,5-二氯-2-[羟基(哌啶-4-基)甲基]苯酚)(22.9 mg, 12%): C12H15Cl2NO2 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：276, 278 (3 : 2)，实测值 276, 278 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, DMSO-d 6) δ 7.28 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.35 (br, 1H), 4.53 (d, J = 5.4Hz, 1H), 2.96-2.77 (m, 2H), 2.40-2.16 (m, 2H), 1.63-1.40 (m, 2H), 1.37-0.98(m, 3H)。
实施例79.化合物3 (4,5-二氯-2-[1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基]苯酚)
Figure 419542DEST_PATH_IMAGE195
步骤a:
在氮气氛下，在-20℃下向搅拌的4,5-二氯-2-[(哌啶-4-基)羰基]苯酚 (中间体2, 实施例2) (70 mg, 0.26 mmol) 在THF(5 mL)中的溶液中滴加MeMgBr (1.3 mL, 1.30mmol, 1 M THF溶液)。在-20℃下另外搅拌2小时后，将所得溶液用饱和NH4Cl水溶液(20mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：X Bridge C18, OBD, 100Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：9 分钟内从15% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：8.69分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物3 (4,5-二氯-2-[1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基]苯酚)(20 mg, 26%): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.16(s, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.82-2.70 (m, 2H), 2.06 (t, J =12.2 Hz, 1H), 1.82-1,68 (m, 2H), 1.54-1.47 (m, 5H)。
实施例80.化合物4 (1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(羟基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)
Figure 814751DEST_PATH_IMAGE196
步骤a:
在氮气氛下，在-40℃下向搅拌的1-(4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-基)乙酮 (中间体1, 实施例1) (0.20 g, 0.63 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中加入NaBH4(26 mg, 0.69 mmol)。在氮气氛下，在-40℃下另外搅拌2小时后，将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从10% B到60% B；检测器：UV254/210 nm；保留时间：6.33分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物4 (1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基) (羟基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)(39.4mg, 26%): C14H17Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：318, 320 (3 : 2)，实测值 318,320 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 7.45 (br, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.90 (s,1H), 4.60 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 13.4Hz, 1H), 2.94-2.73 (m, 1H), 2.42-2.20 (m, 1H), 1.91 (s, 3H), 1.79-1.61 (m,1H), 1.51 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.40-0.98 (m, 3H)。
实施例81.化合物5 (4,5-二氯-2-[2-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基]苯酚)
Figure 629123DEST_PATH_IMAGE197
步骤a:
在室温下向4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙烯基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体17, 实施例17) (2.00 g, 5.18 mmol) 在THF(16 mL)中的溶液中滴加BH3 (0.9 mL, 1 MTHF溶液)。在室温下搅拌5小时后，在室温下加入NaOH (0.52 g, 12.94 mmol)和H2O2 (1.5mL, 30%水溶液)。将反应溶液在室温下搅拌16小时。在室温下将所得溶液用饱和Na2SO3水溶液(100 mL)猝灭，用EA(3×300 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用CH2Cl2/MeOH (25/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-羟基乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.80 g, 86%): C19H27Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：404, 406 (3 : 2)，实测值 404, 406 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 7.10 (s, 1H),4.08 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.95 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.85-3.70 (m, 4H),3.30-3.20 (m, 1H), 3.12-2.96 (m, 1H), 2.89-2.55 (m, 2H), 2.01-1.76 (m, 2H),1.42 (s, 9H), 1.41-1.20 (m, 2H), 1.07 -0.92 (m, 1H)。
步骤b:
在室温下向4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-羟基乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.51 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3 (0.64 g, 2.56 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌4小时。将所得混合物用水(10 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从30% B到70% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：8.15分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以褐色固体形式得到化合物5 (4,5-二氯-2-[2-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基]苯酚)(50 mg, 29%): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.20 (s, 1H), 6.80 (s, 1H),3.90-3.70 (m, 2H), 3.30-3.00 (m, 2H), 2.90-2.58 (m, 3H), 2.10-2.00 (m, 2H),1.55-1.12 (m, 3H)。
实施例82.化合物6 ((S)-4,5-二氯-2-(羟基(哌啶-4-基)甲基)苯酚)和化合物7((R)-4,5-二氯-2-(羟基(哌啶-4-基)甲基)苯酚)
Figure 451586DEST_PATH_IMAGE198
步骤a:
通过制备SFC在以下条件下分离出4,5-二氯-2-[羟基(哌啶-4-基)甲基]苯酚(化合物2, 实施例78) (70 mg): 柱：Phenomenex Lux 5 μm，Cellulose-4, AXIA Packed, 12×25 cm, 5 μm；流动相A：CO2 (70%)，流动相B：MeOH (30%)；流速：40 mL/min；检测器：UV220 nm； 保留时间：RT1: 5.25 分钟； RT2: 5.93 分钟。
在5.25分钟以灰白色固体形式分离出较快洗脱的对映异构体即化合物6 ((S)-4,5-二氯-2-(羟基(哌啶-4-基)甲基)苯酚) (15.3 mg, 22%): C12H15Cl2NO2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：276, 278 (3 : 2)，实测值 276, 278 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.24 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.66 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.24-3.08 (m, 2H),2.67 (td, J = 12.5, 2.9 Hz, 2H), 1.92-1.73 (m, 2H), 1.56-1.34 (m, 3H)。
在5.93分钟以灰白色固体形式分离出较慢洗脱的对映异构体即化合物7 ((R)-4,5-二氯-2-(羟基(哌啶-4-基)甲基)苯酚) (8.1 mg, 12%): C12H15Cl2NO2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：276, 278 (3 : 2)，实测值 276, 278 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.24 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.66 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.24-3.08 (m, 2H),2.67 (td, J = 12.5, 2.9 Hz, 2H), 1.92-1.73 (m, 2H), 1.56-1.34 (m, 3H)。
实施例83.化合物8 (2-[2-氨基-1-(哌啶-4-基)乙基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 718619DEST_PATH_IMAGE199
步骤a:
在室温下向4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-羟基乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(步骤a, 实施例81) (0.10 g, 0.25 mmol)和Et3N (50 mg, 0.50 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(34 mg, 0.30 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩得到粗制4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-(甲磺酰基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸丙烷-2-基酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H29Cl2NO6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：482, 484 (3 : 2)，实测值 482, 484(3: 2)。
步骤b:
向4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-(甲磺酰基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在DMF(5 mL)中的溶液中加入叠氮化钠(32 mg, 0.50 mmol)。使反应混合物升温至80℃并搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液浓缩至四分之一体积。将粗制4-[2-叠氮基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯不经进一步纯化直接用于下一步骤: C19H26Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：429, 431(3: 2)，实测值 429, 431 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向4-[2-叠氮基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制) 在THF(3 mL)中的溶液中加入PPh3 (0.23 g, 0.87 mmol)和NH3·H2O (1 mL, 28%水溶液)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用水(30 mL)稀释，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用DCM/MeOH (15/1)洗脱，以黄色油的形式得到4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(80 mg, 34.06% 三步总计):C19H28Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：403, 405 (3 : 2)，实测值 403, 405 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.37 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.13-3.99 (m,1H), 3.96-3.81 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.17-3.12 (s, 2H), 2.96-2.78 (d, J =3.8 Hz, 2H), 2.73-2.56 (m, 2H), 1.81-1.70 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H),1.26-1.20 (m, 1H), 1.08-0.79 (m, 2H)。
步骤d:
在室温下向4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.20 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3 (0.40 g, 1.59 mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物在室温下用水(20 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 m；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从30%B到75% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：8.40分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物8 (2-[2-氨基-1-(哌啶-4-基)乙基]-4,5-二氯苯酚)(25 mg, 43%): C13H18Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：289, 291 (3 : 2)，实测值289, 291 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 7.33 (s, 1H), 7.03 (s, 1H),3.61-3.35 (m, 3H), 3.20-2.81 (m, 4H), 2.23-2.00 (m, 2H), 1.62-1.20 (m, 3H)。
实施例84.化合物9 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)
Figure 917519DEST_PATH_IMAGE200
步骤a:
在0℃下向搅拌的1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(30 mg, 0.09 mmol) 在DCM(3 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.14 g, 0.54 mmol)。在另外搅拌1小时后，将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)在0℃下猝灭并用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从28% B到43% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.88分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物9 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)(4.5 mg, 18%): C14H18Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.22 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.60-4.40 (m, 1H),4.07-3.82 (m, 2H), 3.15-2.92 (m, 1H), 2.61-2.39 (m, 1H), 2.09 (d, J = 7.0 Hz,3H), 2.09-1.88 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 1H), 1.25-1.04 (m, 2H)。
实施例85.化合物10 (N-[(S)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺和化合物17 (N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺)
Figure 586398DEST_PATH_IMAGE201
步骤a:
通过制备SFC在以下条件下分离出N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺 (47 mg, 0.15 mmol): 柱：Phenomenex Lux, Cellulose-4Å, AXIA Packed, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：CO2: 70%，流动相B：MeOH: 30%；流速：40 mL/min；检测器：UV: 220nm； 保留时间：RT1: 5.25 分钟； RT2: 5.93 分钟。
在5.25分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物17 (N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺) (4.7 mg, 10%): C14H18Cl2N2O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.26 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.96-4.93 (m, 1H), 3.19 (dd, J = 36.1, 12.3 Hz, 2H), 2.69 (dt, J = 23.9, 12.4 Hz,2H), 2.06 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.46(d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.42-1.24 (m, 2H)。
在5.93分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物10 (N-[(S)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺)(4.8 mg, 10%): C14H18Cl2N2O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.98-4.92 (m, 1H), 3.19 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.71-2.55 (m, 2H), 2.09-2.00 (m,1H), 1.99 (s, 3H), 1.90 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.43 (d, J = 13.5 Hz, 1H),1.38-1.23 (m, 2H)。
实施例86.化合物11 (N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺)
Figure 579762DEST_PATH_IMAGE202
步骤a:
在室温下向4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g,2.21 mmol)在DMF (8 mL)中的溶液中加入NaN3 (0.43 g, 6.62 mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将混合物冷却至室温。在室温下将反应用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA (4×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩至四分之一体积，得到粗制4-(叠氮基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C18H24Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：415, 417 (3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[叠氮基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在THF(8 mL)和NH3·H2O (3 mL, 38%水溶液)中的溶液中加入PPh3 (1.14 g,4.33 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时，然后在搅拌下在50℃下用3小时加入LiOH(0.10 g, 4.33 mmol)在水(4 mL)中的溶液。将反应用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用28% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 70% 两步总计): C18H26Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 : 2)，实测值 389,391 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.77 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入乙酰乙酸盐(87 mg, 0.85 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)稀释。将所得混合物用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(乙酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.16 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H28Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：431, 433 (3 : 2)，实测值 431, 433 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.38 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.04 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.06 (dd, J = 36.3,13.8 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.80-2.58 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 1.85 (dd, J =51.0, 11.9 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.36-1.09 (m, 3H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(乙酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.16 g, 0.37 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入BBr3(0.74 g, 2.97 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应用水水(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å,10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从40% B到90% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：8.71分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物11 (N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺)(47.7 mg, 20% 两步总计): C14H18Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.38 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.06 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.45 (d, J = 12.9 Hz,1H), 3.39-3.35 (m, 1H), 3.02-2.85 (m, 2H), 2.22-2.06 (m, 2H), 2.00 (s, 3H),1.66-1.29 (m, 3H)。
实施例87.化合物12 (N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)甲磺酰胺)
Figure 193146DEST_PATH_IMAGE203
化合物12
步骤a:
在室温下向搅拌的4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.77 mmol)和Et3N (0.16 g, 1.54 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中滴加甲磺酰氯(0.11 g, 0.92 mmol)。在室温下再搅拌1.5小时后，在室温下将所得混合物用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H28Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：467, 469 (3 : 2)，实测值 467, 469 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(甲磺酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加BBr3 (0.51 g, 2.05 mmol)。使反应混合物升温至室温，在氮气氛下搅拌2小时。在0℃下将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液(5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeC18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从30% B到85% B；检测器：UV 254/210nm；保留时间：7.84分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物12 (N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)甲磺酰胺)(32.9 mg, 12% 两步总计): C13H18Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：353, 357 (3 : 2)，实测值 353, 357(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.25 (d, J =8.9 Hz, 1H), 3.24-3.06 (m, 2H), 2.78-2.60 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.18-2.07(m, 1H), 1.99-1.86 (m, 1H), 1.47-1.25 (m, 3H)。
实施例88.化合物13 (4,5-二氯-2-[哌啶-4-基(1H-吡唑-1-基)甲基]苯酚)
Figure 195737DEST_PATH_IMAGE204
步骤a:
在室温下向搅拌的4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.44 mmol)和K2CO3(0.12 g, 0.88 mmol)在DMF(3 mL)中的混合物中加入1H-吡唑 (60 mg, 0.88 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(1H-吡唑-1-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(40mg, 21%): C21H27Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：440, 442 (3 : 2)，实测值 440,442 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(1H-吡唑-1-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(40 mg, 0.09 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入BBr3(0.18 g, 0.73 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应用水水(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å,10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从20% B到80% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：8.15分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物13 (4,5-二氯-2-[哌啶-4-基(1H-吡唑-1-基)甲基]苯酚)(5.5 mg, 23%): C15H17Cl2N3O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：326, 328 (3 : 2)，实测值 326, 328 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.75(dd, J = 2.4, 0.7 Hz, 1H), 7.63-7.51 (m, 2H), 6.90 (s, 1H), 6.27 (t, J = 2.2Hz, 1H), 5.45 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.16-3.04 (m, 2H), 2.74-2.57 (m, 2H),1.54-1.42 (m, 1H), 1.40-1.17 (m, 4H)。
实施例89.化合物14 (N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-甲基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺)
Figure 719122DEST_PATH_IMAGE205
步骤a:
在0℃下向搅拌的4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.77 mmol)和Et3N (0.16 g, 1.54 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFAA(0.19 g, 0.92 mmol)。在室温下另外搅拌4小时后，将反应溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H25Cl2F3N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：485, 487 (3 : 2)，实测值 485, 487 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(三氟乙酰胺基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(2 mL)。使反应溶液升温至室温并搅拌3小时。将所得溶液减压浓缩。将粗产物(0.35 g 作为TFA盐)不经进一步纯化而直接用于后续步骤: C15H17Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：385, 387 (3 : 2)，实测值 385,387 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.04 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.11 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 12.7Hz, 1H), 2.66-2.42 (m, 2H), 2.06-1.86 (m, 2H), 1.38-1.11 (m, 3H)。
步骤c:
在氩气下，在0℃下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.35 g, 0.91 mmol)和甲醛(33 mg, 1.09 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中分批加入NaBH(OAc)3(0.58 g, 2.73 mmol)。使反应混合物升温至室温，另外搅拌4小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(6/1)洗脱，以黄色油的形式得到N-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(1-甲基哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.22 g, 70% 三步总计): C16H19Cl2F3N2O2 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：399, 401 (3 : 2)，实测值 399, 401 (3 : 2)。
步骤d:
在0℃下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(1-甲基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.22 g, 0.55 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加BBr3 (0.83 g, 3.31mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌4小时。在0℃下将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用22% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到化合物14 (N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-甲基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺)(0.14 g, 65%): C15H17Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：385, 387 (3 : 2)，实测值 385, 387 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.34 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.98 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 11.8 Hz,1H), 2.89 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.18-1.84 (m, 4H), 1.51-1.23(m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -77.04.
实施例90.化合物15 ((S)-2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)和化合物16 ((R)-2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 883387DEST_PATH_IMAGE206
步骤a:
将2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 (0.30 g)通过制备手性HPLC在下述条件下纯化: 柱：CHIRALPAK IG, 20×250 mm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.2%IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：13 分钟内20% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 8.568 分钟, RT2: 10.754 分钟。
在8.568分钟以灰白色固体形式获得较快洗脱的对映异构体作为化合物16 ((R)-2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(51 mg, 17%): C12H16Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：275, 275 (3 : 2)，实测值 275, 275 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 3.93 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.34 (d, J =12.8 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.91-2.69 (m, 2H), 2.20-1.89 (m,2H), 1.63-1.45 (m, 1H), 1.51-1.25 (m, 2H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.92.
在10.754分钟以浅黄色固体形式获得较慢洗脱的对映异构体作为化合物15((S)-2-(氨基(哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸) (37.2 mg, 12%): C12H16Cl2N2O[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：275, 275 (3 : 2)，实测值 275, 275 (3 : 2)； 1H NMR(300 MHz, CD3OD) δ 7.19 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.88 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.21(d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 2.80-2.56 (m, 2H), 2.04-1.86(m, 2H), 1.57-1.41 (m, 1H), 1.40-1.19 (m, 2H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.92.
实施例91.化合物18 (2-(4,5-二氯-2-羟基苯基)-2-(哌啶-4-基)乙酰胺)
Figure 62696DEST_PATH_IMAGE207
步骤a:
在室温下向搅拌的4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.44 mmol)在DMSO(3 mL)中的溶液中加入KCN(0.14 g, 2.21 mmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。在室温下将反应用饱和FeSO4水溶液(5 mL)猝灭。将所得混合物用EA(4×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(4×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(9/1)洗脱，以黄色油的形式得到 4-[氰基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(60 mg, 34%): C19H24Cl2N2O3 [M +H - 15]+的LCMS (ESI)计算值：399, 401 (3 : 2)，实测值 399, 401 (3 : 2)； 1H NMR(300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.20-3.99 (m, 3H), 3.86 (s,3H), 2.80-2.56 (m, 2H), 1.77 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.53-1.44 (m, 1H), 1.42(s, 9H), 1.32-1.16 (m, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[氰基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(60 mg, 0.15 mmol)和KOH (84 mg, 1.50 mmol)在MeOH (1 mL)和水(1 mL)中的混合物中滴加H2O2(51.1 mg, 1.50 mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[氨基甲酰基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(40 mg, 64%): C19H26Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：417, 419 (3 : 2)，实测值 417, 419 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.62 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.08-3.99 (m, 2H), 3.92 (d, J = 13.4 Hz,1H), 3.83 (s, 3H), 2.87-2.54 (m, 2H), 2.13-2.00 (m, 1H), 1.81 (d, J = 13.1Hz, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.3-1.15 (m, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[氨基甲酰基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (40 mg, 0.10 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入BBr3(0.14 g, 0.58 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用水(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从15% B到35% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.68分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物18 (2-(4,5-二氯-2-羟基苯基)-2-(哌啶-4-基)乙酰胺)(14.7 mg, 48%): C13H16Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：303, 305 (3 : 2)，实测值 303, 305 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.32 (s,1H), 6.86 (s, 1H), 3.59 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.24-2.99 (m, 2H), 2.82-2.55(m, 2H), 2.18 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 1.91 (t, J = 13.4 Hz, 1H), 1.46-1.04 (m,3H)。
实施例92.化合物19 ((S)-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)和化合物20 ((R)-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)
Figure 603398DEST_PATH_IMAGE208
步骤a:
将1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮 (化合物9, 实施例84) (0.23 g)通过制备手性HPLC在下述条件下纯化: 柱：CHIRALPAK IG UL001, 20×250mm, 5 μm；流动相A：Hex，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：19 分钟内20% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 12.36 分钟, RT2: 15.05 分钟。
在12.36分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物20 ((R)-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)(60.2 mg, 27%):C14H18Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.8 Hz,1H), 4.55 (dd, J = 28.9, 13.2 Hz, 1H), 4.04-03.79 (m, 2H), 3.18-2.93 (m, 1H),2.66-2.44 (m, 1H), 2.08 (J = 7.0 Hz, 3H) 5H), 2.04-1.93 (m, 2H), 1.51-1.34(m, 1H), 1.30-1.10 (m, 2H)。
在15.05分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物19 ((S)-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)乙酮)(70.8 mg, 30%):C14H18Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：317, 319 (3 : 2)，实测值 317, 319 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.8 Hz,1H), 4.55 (dd, J = 28.6, 13.0 Hz, 1H), 4.07-3.82 (m, 2H), 3.15-2.92 (m, 1H),2.63-2.44 (m, 1H), 2.06 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 2.06-1.92 (m, 2H), 1.51-1.34 (m,1H), 1.30-1.10 (m, 2H)。
实施例93.化合物21 (2-(氨基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)
Figure 981290DEST_PATH_IMAGE209
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-甲基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(化合物14, 实施例89)(0.12 g, 0.31 mmol)在MeOH(5 mL)中的溶液中滴加NaOH(62 mg, 1.56 mmol)在水(1 mL)中的溶液。将反应溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD PrepColumn 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从17% B到52% B；检测器：UV 210 nm； 保留时间：8.58分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物21 (2-(氨基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)(19 mg, 21%): C13H18Cl2N2O [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：289, 291 (3 : 2)，实测值 289, 291 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.18 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.87 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.01-2.77 (m, 2H),2.26 (s, 3H), 2.09-1.86 (m, 3H), 1.84-1.67 (m, 1H), 1.47-1.25 (m, 3H)。
实施例94.化合物22 (N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺)
Figure 582036DEST_PATH_IMAGE210
步骤a:
在0℃下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(实施例89, 步骤b) (80 mg, 0.21 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中滴加三溴硼烷(0.42 g, 1.66 mmol)。在室温下另外搅拌3小时后，在0℃下将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(3 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从18% B到55% B；检测器：UV210 nm； 保留时间：8.08分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物22 (N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺)(20 mg,26%): C14H15Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：371, 373 (3 : 2)，实测值 371,373 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.24 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H),4.86 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.29-3.13 (m, 2H), 2.92-2.58 (m, 2H), 2.35-2.02 (m,1H), 1.96-1.80 (m, 1H), 1.56-1.25 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -77.08.
实施例95.化合物23 (1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(吡咯烷-1-基)甲基)哌啶-1-基)乙酮三氟乙酸)
Figure 45378DEST_PATH_IMAGE211
步骤a:
在室温下向搅拌的1-[4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.40 g, 1.01 mmol)和吡咯烷(0.72 g, 10.10 mmol)在DMSO (5 mL)中的溶液中加入Na2CO3(0.32 g, 3.04 mmol)。将所得混合物升温至50℃并搅拌3小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(50 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用CH2Cl2/MeOH (20/1)洗脱，以灰白色固体形式得到1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(吡咯烷-1-基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.29 g, 74%): C19H26Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：385, 387 (3 : 2)，实测值 385, 387 (3 : 2)。
步骤b:
将1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(吡咯烷-1-基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.27 g, 0.70 mmol)在碘化氢(4 mL)中的溶液在100℃下搅拌20小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å,10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从20% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.12分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物23 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(吡咯烷-1-基)甲基]哌啶-1-基]乙酮三氟乙酸)(19 mg, 7%): C18H24Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：371, 373 (3 : 2)，实测值 371, 373 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.31 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.65-4.49 (m, 1H), 4.34-4.29 (m, 1H),4.26-3.71 (m, 2H), 3.52-3.34 (m, 2H), 3.25-2.95 (m, 2H), 2.73-2.51 (m, 2H),2.29-1.86 (m, 9H), 1.29-0.92 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.99.
实施例96.化合物24 ((R)-4,5-二氯-2-(羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯酚)和化合物319 ((S)-4,5-二氯-2-(羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯酚)
Figure 389772DEST_PATH_IMAGE212
步骤a:
在室温下向搅拌的4,5-二氯-2-[(哌啶-4-基)羰基]苯酚 (中间体2, 实施例2)(0.31 g, 1.12 mol), AcOH (74 mg, 1.24 mol)和HCHO (41 mg, 1.35 mmol)在MeOH (5mL)中的混合物中分批加入NaBH(OAc)3(0.71 g, 3.37 mol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应在室温下用水(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从16% B到54% B；检测器：UV 254/210 nm； 保留时间：7.95分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到4,5-二氯-2-[羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基]苯酚(70 mg, 21%): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2) 实测值：290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.72(d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.00-2.83 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.11-1.93 (m, 2H),1.93-1.81 (m, 1H), 1.71-1.55 (m, 1H), 1.55-1.37 (m, 3H)。
步骤b:
将4,5-二氯-2-(羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯酚 (25 mg)通过制备手性HPLC在下述条件下纯化: 柱：柱：CHIRALPAK AD-H, 2×25 cm；流动相A：己烷 (0.1%DEA)；流动相B：IPA；流速：20 mL/min；梯度：20 分钟内从5% B到5% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 13.55 分钟, RT2: 16.98 分钟； 注射体积: 0.3 mL。
在16.98分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物24 ((R)-4,5-二氯-2-(羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯酚)(7.7 mg, 31%): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.72 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.93 (t, J =12.0 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.09-1.96 (m, 2H), 1.94-1.78 (m, 1H), 1.75-1.33(m, 4H)。
在16.98分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物319((S)-4,5-二氯-2-(羟基(1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯酚)(8.3 mg, 33%) : C13H17Cl2NO2 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.72 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.93 (t,J = 12.0 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.09-1.96 (m, 2H), 1.94-1.78 (m, 1H), 1.75-1.33 (m, 4H)。
实施例97.化合物25 4,5-二氯-2-(1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基)苯酚 异构体1和化合物26 4,5-二氯-2-(1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基)苯酚 异构体2
Figure 622170DEST_PATH_IMAGE213
步骤a:
通过制备SFC在以下条件下分离出4,5-二氯-2-(1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基)苯酚 (20 mg, 0.07 mmol): 柱：Phenomenex Lux Cellulose-4，AXIA Packed, 2.12×25cm, 5 μm；流动相A：CO2 (70%)，流动相B：MeOH (2 mmol NH3的MeOH溶液) 30%；流速：40 mL/min；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 4.9 分钟； RT2: 5.8 分钟。
在4.9分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物25 (4,5-二氯-2-(1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基)苯酚 异构体1) (3.7 mg, 18%): C13H17Cl2NO2 [M +1]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.16 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.82-2.70 (m,2H), 2.06 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.82-1,68 (m, 2H), 1.54-1.47 (m, 5H)。
在5.8分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物26 (4,5-二氯-2-(1-羟基-1-(哌啶-4-基)乙基)苯酚 异构体2)(3.9 mg, 19%): C13H17Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：290, 292 (3 : 2)，实测值 290, 292 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.16 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.82-2.70 (m, 2H),2.06 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.82-1,68 (m, 2H), 1.54-1.47 (m, 5H)。
实施例98.化合物27 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(吡啶-2-基)氨基]甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮三氟乙酸)
Figure 393817DEST_PATH_IMAGE214
步骤a:
在氩气氛下，在室温下向搅拌的1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.20 g, 0.60 mmol)和2-溴吡啶(0.14 g, 0.91 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的混合物中加入XantPhos (35 mg, 0.06 mmol), t-BuONa (0.17 g, 1.81mmol)和Pd2(dba)3·CHCl3 (63 mg, 0.06 mmol)。在氩气气氛下将混合物在80℃下搅拌2小时。使混合物冷却至室温。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(7/1)洗脱，以黄色油的形式得到N-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)[1-(丙-1-烯-2-基)哌啶-4-基]甲基]吡啶-2-胺 (56 mg, 18%): C20H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：408,410 (3 : 2)，实测值 408, 410 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]吡啶-2-胺(56.00 mg, 0.15 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入BBr3 (0.23 g, 0.92 mmol)。将反应在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用水(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从20%B到38% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.38分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物27 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(吡啶-2-基)氨基]甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮三氟乙酸)(10 mg, 16%): C19H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：394, 396 (3 : 2)，实测值 394, 396 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.99-7.92 (m, 1H), 7.90 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.10(d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.93 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.78 (t, J = 9.1Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 31.7, 13.3 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 30.2, 13.7 Hz, 1H),3.12 (dt, J = 25.8, 13.4 Hz, 1H), 2.63 (dt, J = 24.5, 12.4 Hz, 1H), 2.42-2.30(m, 1H), 2.11 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 2.08-1.97 (m, 1H), 1.55-1.18 (m, 3H)； 19FNMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.02.
实施例99.化合物28 (1-[4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮)
Figure 344455DEST_PATH_IMAGE215
步骤a:
在室温下向1-[4-[溴(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.50g, 1.27 mmol)在DMSO(5 mL)中的溶液中加入KCN(0.25 g, 3.81 mmol)。使反应混合物升温至50℃并搅拌19小时。冷却至室温后，将所得混合物用饱和FeSO4水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙腈(0.37 g, 86%): C16H18Cl2N2O2 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：341, 343 (3 : 2)，实测值 341, 343 (3 : 2)； 1H-NMR (400MHz, DMSO-d 6) δ 7.54 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.38 (dd, J = 35.2,13.3 Hz, 1H), 4.22 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.87-3.69 (m, 1H),3.09-2.86 (m, 1H), 2.49-2.38 (m, 1H), 2.25-2.08 (m, 1H), 1.97 (s, 3H), 1.91-1.74 (m, 1H), 1.43-1.31 (m, 1H), 1.35-1.26 (m, 1H), 1.08-0.94 (m, 1H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙腈 (0.37 g, 1.09 mmol)和NH3·H2O (0.5 mL, 12.84 mmol, 28%水溶液)在MeOH(5 mL)中的溶液中加入雷尼镍(37 mg, 0.43 mmol)。添加后，将反应混合物在氢下脱气三次，在室温下在1.5 atm氢下搅拌20小时。过滤所得混合物，将滤饼用MeOH (3×10 mL)洗涤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用CH2Cl2/MeOH (15/1)洗脱，以绿色油的形式得到1-[4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.33 g,87%): C16H22Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345, 347 (3 : 2)，实测值 345, 347(3 : 2)； 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.30 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H),4.47 (dd, J = 35.2 13.3 Hz, 1H), 3.98-3.75 (m,1H), 3.85 (s, 3H), 3.13-2.88(m, 3H), 2.68-2.41 (m, 1H), 2.06 (d, J = 10.1 Hz, 3H), 1.99-1.83 (m, 2H),1.43-0.85 (m, 4H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的1-[4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.16 g, 0.46 mmol)和Et3N (70 mg, 0.70 mmol)在CH2Cl2 (2 mL)中的溶液中加入TFAA (0.11 g, 0.51 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.17 g, 粗制)，其不经进一步纯化而用于后续步骤: C18H21Cl2F3N2O3[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：441, 443 (3 : 2)，实测值 441, 443 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向N-[2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.17 g, 粗制)在DCM(5 mL)中的溶液中加入BBr3 (1.00 g, 3.97mmol)。在室温下搅拌1小时后，在室温下将所得溶液用饱和Na2CO3水溶液(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/3)洗脱，以灰白色固体形式得到N-[2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.14 g, 83%):C17H19Cl2F3N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：427, 429，实测值 427, 429； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.21 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.49 (dd, J = 52.9,13.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 51.4, 13.9 Hz, 1H), 3.77-3.67 (m, 1H), 3.64-3.50(m, 1H), 3.23-2.96 (m, 2H), 2.71-2.52 (m, 1H), 2.17-2.05 (m, 2H), 2.10 (d, J = 15.8 Hz, 3H), 1.56-1.42 (m, 1H), 1.38-1.20 (m, 1H), 1.14-0.92 (m, 1H)； 19F-NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.41.
步骤e:
在室温下向搅拌的N-[2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-2-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.14 g, 0.33 mmol)在MeOH/水(5 mL/1 mL)中的溶液中加入KOH(37 mg, 0.66 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD, 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从25% B到55% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.22分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物28 (1-[4-[2-氨基-1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮) (43 mg, 40%): C15H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：331, 333 (3 : 2)，实测值 331, 333 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.10 (s, 1H), 6.85 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.52 (dd, J = 51.7,12.8 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 48.6, 13.8 Hz, 1H), 3.28-2.99 (m, 3H), 2.71-2.49(m, 2H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.08 (d, J = 13.9 Hz, 3H), 2.05-1.97 (m, 1H),1.45-0.90 (m, 3H)。
实施例100.化合物29 (1-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-酮三氟乙酸)
Figure 226961DEST_PATH_IMAGE216
步骤a:
在室温下向搅拌的4-[氨基(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.64 mmol)和Et3N (97 mg, 0.96 mmol)在CH2Cl2 (5 mL)中的溶液中滴加4-氯丁酰氯 (0.10 g, 0.71 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物(0.35 g) 无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C22H31Cl3N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：493, 495 (3 : 2)，实测值 493, 495(3 : 2)。
步骤b:
在氩气气氛下，在0℃下向搅拌的4-((4-氯丁酰胺基)(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 粗制)在DMF(5 mL)中的溶液中分批加入NaH (0.14 g,3.54 mmol, 60%矿物油溶液)。将反应混合物在氩气气氛下在50℃下搅拌16。将所得混合物用水(40 mL)在0℃下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 83%): C22H30Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：457, 459 (3 :2)，实测值 457, 459 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 7.21 (s,1H), 5.16 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.16-4.05 (m, 1H), 4.05-3.96 (m, 1H), 3.84(S, 3H), 3.55-3.44 (m, 1H), 3.16-3.08 (m, 1H), 2.97-2.71 (m, 2H), 2.58-2.48(m, 1H), 2.42-2.28 (m, 2H), 2.07-1.84 (m, 3H), 1.70-160 (m, 1H), 1.50 (s,9H), 1.621.29 (m, 2H)。
步骤c:
在0℃下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(2-氧代吡咯烷-1-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.55 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加BBr3(1.10 g, 4.37mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌3小时。在0℃下将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：6.5 分钟内从25% B到53% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：4.57分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物29 (1-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基)吡咯烷-2-酮三氟乙酸)(75.2mg, 40%): C16H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：343, 345 (3 : 2)，实测值 343,345 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.51 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.17 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.59-3.43 (m, 2H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.25-3.13 (m, 1H),3.13-2.93 (m, 2H), 2.78-2.60 (m, 1H), 2.47-2.33 (m, 2H), 2.10-1.90 (m, 3H),1.70 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 1.62-1.47 (m, 1H), 1.44-1.29 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.08.
实施例101.化合物30 (1-(羟基(哌啶-4-基)甲基)萘-2-酚)
Figure 376182DEST_PATH_IMAGE217
步骤a:
在室温下向搅拌的2-甲氧基萘 (0.38 g, 2.45 mmol)和1-乙酰基哌啶-4-甲酰氯(0.55 g, 2.94 mmol)在DCE(5 mL)中的溶液中加入AlCl3 (0.96 g, 7.21 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在50℃下搅拌6小时。在0℃下将反应用水(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化(PE/EA 1/1)，以浅黄色油的形式得到1-[4-[(2-甲氧基萘-1-基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.40 g, 53%): LCMS (ESI)计算值 forC19H21NO3 [M + H]+ 312 实测值：312； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.58 (d, J = 1.8Hz, 1H), 8.05-7.93 (m, 2H), 7.93-7.82 (m, 1H), 7.36-7.29 (m, 1H), 7.25 (dd, J= 9.0, 2.5 Hz, 1H), 4.61-4.52 (m, 1H), 4.07-3.99 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.93-3.82 (m, 1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 2.95 (td, J = 12.7, 2.9 Hz, 1H), 2.15 (s,3H), 2.03-1.93 (m, 2H), 1.82-1.55 (m, 2H)。
步骤b:
将1-(4-(2-甲氧基-1-萘甲酰基)哌啶-1-基)乙酮 (0.15 g, 0.07 mmol)在HCl水溶液(6 N, 5 mL)中的溶液在100℃下搅拌4小时。冷却至室温后，减压浓缩反应溶液。将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液调节pH值至8，然后用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩. 将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水；流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从11% B到50%B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.52分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(2-羟基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲酮(35 mg, 30%): C16H17NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：256，实测值 256； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.83-7.73 (m,2H), 7.64 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 7.5 Hz,1H), 7.12 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.22-3.10 (m, 3H), 2.75 (t, J = 12.3 Hz, 2H),1.97 (d, J = 13.7 Hz, 2H), 1.76 (t, J = 12.9 Hz, 2H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(2-羟基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲酮 (30 mg,0.12 mmol)在MeOH中的溶液中加入NaBH4 (9 mg, 0.24 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。将所得混合物在室温下用水(10 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：water with 20 mmol/L NH4HCO3；流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：9 分钟内从10% B到40% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.10分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物30 (1-(羟基(哌啶-4-基)甲基)萘-2-酚)(7.5 mg,25%): C16H19NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：258，实测值 258； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.94 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H),7.42 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H),5.46 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.18 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.07 (d, J = 12.5 Hz,1H), 2.65-2.52 (m, 2H), 2.21-1.98 (m, 2H), 1.69-1.51 (m, 2H), 1.49-1.37 (m,1H)。
实施例102.化合物31 (4,5-二氯-2-[(甲基氨基)(哌啶-4-基)甲基]苯酚三氟乙酸)
Figure 53151DEST_PATH_IMAGE218
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (实施例4, 步骤a) (0.25 g, 0.76 mmol)在MeOH (5 mL)中的混合物中加入甲胺盐酸盐(0.26 g, 3.79 mmol)和NaBH3CN (0.14 g, 2.27 mmol)。在氮气氛下在60℃下搅拌8小时后，使反应混合物冷却至室温。将所得混合物在室温下用水(5 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的60% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮(0.20 g, 76%): C16H22Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345, 347 (3 : 2)，实测值345, 347 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.20 g, 0.58 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3 (0.72g, 2.90 mmol)。使反应混合物升温至室温，在氮气氛下搅拌1小时。将所得混合物用水(2mL)在室温下猝灭，减压浓缩，得到粗制1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基)哌啶-1-基)乙酮。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C15H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：331, 333 (3 : 2)，实测值 331, 333 (3 : 2)。
步骤c:
将1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.18g, 0.54 mmol)在HCl水溶液(6 N, 10 mL)中的溶液在120℃下搅拌5小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：SunFire Prep C18 OBD柱 19×150mm, 5 μm，10 nm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从11% B到25% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.87分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物31 (4,5-二氯-2-[(甲基氨基)(哌啶-4-基)甲基]苯酚三氟乙酸)(25 mg, 15%): C13H18Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：289,291 (3 : 2)，实测值 289, 291 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H),7.13 (s, 1H), 4.27 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.52 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.39 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.13-2.86 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.59-2.44 (m, 1H), 2.24 (d,J = 13.7 Hz, 1H), 1.76-1.33 (m, 3H)； 19F NMR (282, CD3OD) δ -76.96.
实施例103.化合物32 (2-(氨基(吡咯烷-3-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体1)和化合物33 (2-(氨基(吡咯烷-3-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体2)
Figure 406598DEST_PATH_IMAGE219
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-乙酰基吡咯烷-3-甲酸 (中间体62, 实施例62)(0.49 g, 3.09 mmol) 在DCM(5 mL)中的混合物中滴加硫酰氯 (1.10 g, 9.28 mmol)。将反应减压浓缩。将残渣溶解于DCE (6 mL)，然后在氮气氛下，在-5℃下将溶液滴加至1,2-二氯-4-甲氧基苯(0.34 g, 1.90 mmol)和AlCl3 (1.23 g, 9.26 mmol)在DCE (10 mL)中的混合物中。将反应混合物在0℃下搅拌16小时。将反应用水(25 mL)在-5℃下猝灭。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用HCl水溶液(1 N, 3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-[3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)羰基]吡咯烷-1-基]乙-1-酮(0.49 g, 45%): C13H13Cl2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：302, 304 (3 : 2)，实测值302, 304 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.12 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.22 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.42-4.17 (m, 1H), 3.93-3.70 (m, 2H), 3.70-3.48 (m, 2H),2.49-2.21 (m, 2H), 2.10 (d, J = 8.9 Hz, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，将1-[3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)羰基]吡咯烷-1-基]乙-1-酮(0.48 g, 1.59 mmol), K2CO3 (0.44 g, 3.18 mmol)和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯 (0.27 g,1.75 mmol)在DMF(5 mL)中的混合物在80℃下搅拌1小时。冷却至室温后，在室温下将所得混合物用水(20 mL)稀释。将所得混合物用EA (3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(12/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-[3-([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基]羰基)吡咯烷-1-基]乙-1-酮(0.49 g, 73%): C21H21Cl2NO4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：422, 424 (3 : 2)，实测值 422, 424 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.78 (s, 1H), 7.51 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.48-7.39 (m, 2H), 6.97 (dd, J =8.6, 2.0 Hz, 2H), 5.15 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 23.3, 6.8 Hz, 1H), 3.82 (s,3H), 3.63-3.51 (m, 1H), 3.51-3.36 (m, 3H), 3.26-3.17 (m, 1H), 2.14-1.93 (m,4H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-[3-([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基]羰基)吡咯烷-1-基]乙-1-酮 (0.42 g, 0.99 mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.60g, 4.97 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (1.81 g, 7.96 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将所得混合物搅拌16小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(1-乙酰基吡咯烷-3-基)([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.81 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C25H30Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：525,527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的N-(1-乙酰基吡咯烷-3-基)([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.81 g, 1.54 mmol)在MeOH (4 mL)中的混合物中加入NaBH4 (0.12 g, 3.08 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(15 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(1-乙酰基吡咯烷-3-基)([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.61 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C25H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：527, 529 (3 : 2)，实测值 527, 529 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的N-[(1-乙酰基吡咯烷-3-基)([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.61 g, 1.16 mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用DCM/MeOH (20/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到1-[3-[氨基([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])甲基]吡咯烷-1-基]乙-1-酮(0.35 g, 58%三步总计): C21H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：423, 425 (3 : 2)，实测值 423,425 (3 : 2)。
步骤f:
将1-[3-[氨基([4,5-二氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]苯基])甲基]吡咯烷-1-基]乙-1-酮 (90 mg, 0.21 mmol)和HCl(6 N, 2 mL)的溶液在80℃下搅拌3小时。将将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，19×250 mm, 5 μm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：5.5 分钟内从20% B到35% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 4.70 分钟, RT2:5.00分钟。在4.70分钟收集到含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物33 (2-(氨基(吡咯烷-3-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体2)(9 mg,11%): C11H14Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：261, 263 (3 : 2)，实测值 261, 263(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.53 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.44 (d, J =10.2 Hz, 1H), 3.64-3.47 (m, 1H), 3.44-3.34 (m, 1H), 3.29-3.06 (m, 2H), 2.98-2.84 (m, 1H), 2.48-2.34 (m, 1H), 2.06-1.88 (m, 1H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ-77.00. 在5.00分钟收集到含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物32 (2-(氨基(吡咯烷-3-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体1)(12 mg,15%): C11H14Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：261, 263 (3 : 2)，实测值 261, 263(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.49 (d, J =9.3 Hz, 1H), 3.76-3.57 (m, 1H), 3.48-3.37 (m, 1H), 3.31-3.16 (m, 3H), 1.97-1.81 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -77.01.
实施例104.化合物35 (2-(氨基(1-甲苯磺酰基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)
Figure 827215DEST_PATH_IMAGE220
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.29 mmol)和Et3N (58 mg, 0.58mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中分批加入4-甲基苯-1-磺酰氯 (60 mg, 0.31 mmol)。在氮气氛下，在室温下另外搅拌1小时后，将反应溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4-甲基苯)磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 26%): C26H34Cl2N2O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：573, 575 (3 : 2)，实测值 573, 575 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.66 (d, J = 8.0 Hz, 2H),7.44 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7,41 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.19-6.02 (m, 1H),5.48-5.29 (m, 2H), 4.60 (s, 2H), 4.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 7.7Hz, 1H), 3.87-3.77 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.37-2.12 (m,2H), 1.77-1.67 (m, 1H), 1.43-1.28 (m, 3H), 1.112 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4-甲基苯)磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (50 mg, 0.09 mmol)和Pd(PPh3)4 (11 mg, 0.01 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中加入NaBH4 (5 mg, 0.14mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(10 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-甲苯磺酰基哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C23H30Cl2N2O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-甲苯磺酰基哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷 (3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从50% B到88%B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.20分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以黄色固体形式得到化合物35 (2-(氨基(1-甲苯磺酰基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)(12mg, 35% 两步总计): C19H22Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：429, 431 (3 : 2)，实测值 429, 431 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 2H),7.41 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.95-3.69 (m, 3H), 2.45(s, 3H), 2.33-2.11 (m, 2H), 2.03-1.92 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.81-1.54 (m,1H), 1.56-1.16 (m, 3H)。
实施例105.化合物36 (N-[(2-羟基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺三氟乙酸)
Figure 830943DEST_PATH_IMAGE221
步骤a:
在室温下向N-[(2-羟基萘-1-基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺 (中间体7, 实施例7)(0.10 g, 0.34 mmol)在MeOH(3 mL)中的溶液中加入PtO2 (7 mg, 0.03 mmol)。将反应混合物用氢脱气三次，在室温下在氢气氛(50 atm)下搅拌18小时。将混合物经硅藻土(Celite)过滤，然后将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeC18 OBD, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：8 分钟内从15% B到35% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.67分钟。将收集的含有所需产物的馏分减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物36 (N-[(2-羟基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲基]乙酰胺三氟乙酸)(90 mg, 90%): C18H22N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：299，实测值 299； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.20 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.85 (d, J =10.2 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.27 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.07 (t,J = 12.8 Hz, 1H), 2.90-2.75 (m, 1H), 2.73-2.60 (m, 1H), 2.35-2.22 (d, J =14.4 Hz, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.70-1.59 (m, 1H), 1.49-1.32 (m, 2H)； 19F-NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.11.
实施例106.化合物34 (1-(氨基(哌啶-4-基)甲基)萘-2-酚三氟乙酸)
Figure 882076DEST_PATH_IMAGE222
步骤a:
将N-((2-羟基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲基)乙酰胺 (化合物36的游离碱，实施例105) (0.20 g, 0.67 mmol)在HCl水溶液(6 N, 5 mL)中的溶液在100℃下搅拌8小时。冷却至室温后，将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18OBD, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：6.5 分钟内从5% B到25% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.35分钟。收集含有所需产物的馏分并浓缩，以灰色固体形式得到化合物34 (1-(氨基(哌啶-4-基)甲基)萘-2-酚三氟乙酸)(2 mg, 1%): C16H20N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：257，实测值257； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.93 (t, J = 7.8 Hz,2H), 7.63 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.44 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 9.0 Hz,1H), 5.05 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 12.6Hz, 1H), 3.14 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 2.94-2.75 (m, 2H), 2.41 (d, J = 14.2 Hz,1H), 1.87-1.68 (m, 1H), 1.56-1.39 (m, 2H)； 19F-NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.97.
实施例107.化合物37 (2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸)
Figure 807306DEST_PATH_IMAGE223
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3,4,5-三氯苯酚 (实施例9, 步骤a) (0.59 g,2.99 mmol), 乙酰胺(0.21 g, 3.59 mmol)和吡啶-4-甲醛(0.32 g, 2.99 mmol)的混合物中加入AlCl3(0.06 g, 0.45 mmol)。将反应在110℃下搅拌16小时。将反应用水(25 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[吡啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.14 g, 12%): C14H11Cl3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345, 347, 349 (3 : 3 :1)，实测值 345, 347, 349 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.79-8.70 (m,2H), 7.94-7.85 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.17 (s, 3H)。
步骤b:
在室温下向N-[吡啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺 (0.10 g,0.29 mmol)在20 mL MeOH/AcOH (v/v = 1/1)中的溶液中加入PtO2 (20 mg, 0.09 mmol)。在氢气氛下(50 atm)将混合物在30℃下搅拌6小时。将反应过滤，将滤液减压浓缩。将残渣溶解于EA(20 mL)和水(20 mL)。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到N-[哌啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C14H17Cl3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：351, 353, 355 (3 : 3 : 1)，实测值351, 353, 355 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.04-6.87 (m, 1H), 5.51(d, J = 10.5小时z, 1H), 3.52-3.38 (m, 2H), 3.06-2.78 (m, 2H), 2.54-2.03 (m,2H), 1.98 (s, 3H), 1.61-1.42 (m, 3H)。
步骤c:
将N-[哌啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺 (0.10 g, 0.29 mmol)在浓HCl(3 mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从5% B到40% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.18分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物37 (2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸)(70mg, 57% 两步总计): C12H15Cl3N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：309, 311, 313 (3 :3: 1)，实测值 309, 311, 313 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.15 (s,1H), 4.69 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H),3.05 (td, J = 13.1, 3.1 Hz, 1H), 3.00-2.88 (m, 1H), 2.76-2.63 (m, 1H), 2.26(d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.77-1.62 (m, 1H), 1.62-1.50 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz,CD3OD) δ -77.06.
实施例108.化合物38 (5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-2-酮三氟乙酸 非对映异构体1)和化合物39 (5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-2-酮 非对映异构体2)
Figure 31614DEST_PATH_IMAGE224
步骤a:
在氮气氛下，将3,4-二氯苯酚 (2.00 g, 12.27 mmol), 6-溴吡啶-3-甲醛 (2.30g, 12.27 mmol), 乙酰胺 (0.87 g, 14.72 mmol)和AlCl3 (0.245 g, 1.84 mmol)的混合物在110℃下搅拌1.5小时。冷却至室温后，将混合物用水(80 mL)稀释，用EA(5×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/3)洗脱，以浅黄色固体形式得到N-[(6-溴吡啶-3-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]乙酰胺(1.21 g, 20%): C14H11BrCl2N2O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：389, 391, 393 (2 : 3 : 1)，实测值 389, 391, 393 (2 : 3 : 1)； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.59 (s, 1H), 8.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 7.3, 2.6 Hz, 1H), 7.69-7.57 (m, 1H), 7.56-7.42 (m, 2H), 6.90-6.80 (m, 2H),1.99 (s, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，将N-[(6-溴吡啶-3-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.51g, 1.32 mmol), (E)-N-(苯基亚甲基)羟基胺 (0.21 g, 1.71 mmol)、Pd2(dba)3 (0.12 g,0.13 mmol)、RockPhos (0.12 g, 0.26 mmol)和Cs2CO3 (0.94 g, 2.9 mmol)在DMF(5 mL))中的混合物在80℃下搅拌2小时。使反应混合物冷却至环境温度，用水(30 mL)猝灭，用DCM/MeOH (10/1, 3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩, 将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH (10:1)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(6-羟基吡啶-3-基)甲基]乙酰胺(0.26 g,60%): C14H12Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：327, 329 (3 : 2)，实测值 327, 329(3 : 2)。
步骤c:
在氮气氛下，将N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(6-羟基吡啶-3-基)甲基]乙酰胺 (65mg)在HCl水溶液(6 N, 2 mL)中的溶液在80℃下搅拌3小时。减压浓缩反应溶液，将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化: 柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19mm×250 mm；流动相A：具有20 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从15% B到68% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.07分钟。将合并的含有产物的馏分减压浓缩，以灰白色固体形式得到5-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-1,2-二氢吡啶-2-酮(20 mg, 35%): C12H10Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：285, 287 (3:2)，实测值 285, 287 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.64 (dd, J = 9.5, 2.7Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.54 (d, J =9.6 Hz, 1H), 5.15 (s, 1H)。
步骤d:
将5-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-1,2-二氢吡啶-2-酮 (70 mg, 0.25mmol)和PtO2(7 mg, 0.03 mmol)在HCl水溶液(1 N, 0.1 mL)和MeOH(1 mL)中的混合物在氢气氛下(50 atm)在室温下搅拌6.5小时。过滤后，减压浓缩滤液，将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化: 柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从8% B到40%B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：RT1: 5.33 分钟, RT2: 5.72 分钟。
在5.33分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物38 (5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-2-酮三氟乙酸 非对映异构体1) (4.5 mg, 6%):C12H14Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：289, 291 (3 : 2)，实测值 289, 291 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.28 (d, J = 10.2Hz, 1H), 3.03-2.85 (m, 2H), 2.74-2.58 (m, 1H), 2.55-2.35 (m, 2H), 2.19 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.85-1.65 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.98.
在5.72分钟的含有杂质的较慢洗脱的对映异构体通过通过制备HPLC在下述条件下再纯化: 柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从8% B到60% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.92分钟。将合并的含有产物的馏分减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物39 (5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-2-酮 非对映异构体2)(2.8 mg, 3%): C12H14Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：289, 291 (3 :2)，实测值 289, 291 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 (s, 1H), 6.91 (s,1H), 4.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.57-3.49 (m, 1H), 3.17 (dd, J = 12.4, 10.2Hz, 1H), 2.41-2.18 (m, 3H), 1.67-1.63 (m, 1H), 1.57-1.43 (m, 1H)。
实施例109.化合物40 (2-[1-氨基-1-(哌啶-4-基)乙基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 358690DEST_PATH_IMAGE225
步骤a:
在氩气下，在-78℃下向搅拌的CH3Li (1.4 mL, 2.31 mmol, 1.6 M 乙醚溶液)在甲苯(2 mL)中的溶液中滴加N-[(1Z)-(1-乙酰基哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.50 g, 1.15 mmol)和AlMe3(0.17 g, 2.31 mmol)在THF(10 mL)中的溶液。将反应在-78℃下搅拌8小时。将反应混合物用水(20 mL)在-78℃下猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH (20/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到N-[1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 19%): C20H30Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：449,451 (3 : 2)，实测值 449, 451 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-[1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)乙基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.22 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3(0.33 g, 1.34 mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应溶液用水(1 mL)猝灭并减压浓缩，以浅黄色油的形式得到1-[4-[1-氨基-1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C15H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：331, 333 (3 : 2)，实测值 331, 333 (3 : 2)。
步骤c:
将1-[4-[1-氨基-1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)乙基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (0.10 g,0.30 mmol)在HCl水溶液(6 N, 4 mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å,10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：8 分钟内从15% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.65分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物40 (2-[1-氨基-1-(哌啶-4-基)乙基]-4,5-二氯苯酚)(35 mg, 55% 两步总计): C13H18Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：289, 291 (3 : 2)，实测值 289, 291 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ7.15 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 3.29-3.14 (m, 2H), 2.84-2.61 (m, 2H), 2.21-2.03(m, 1H), 1.98-1.82 (m, 1H), 1.74-1.64 (m, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.46-1.28 (m,2H)。
实施例110.化合物41 (2-(氨基(1-苄基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 377462DEST_PATH_IMAGE226
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和DIPEA(46 mg, 0.36 mmol)在ACN(5mL)中的混合物中分批加入(溴甲基)苯(49 mg, 0.29 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液在室温下用水(30 mL)稀释，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用DCM/MeOH (25/1)洗脱，以黄色油的形式得到N-[(1-苄基哌啶-4-基)[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(31 mg, 26%): C26H34Cl2N2O2S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：509, 511 (3 : 2)，实测值 509, 511 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, DMSO-d 6) δ 7.56 (s, 1H), 7.36-7.18 (m, 6H), 6.10-5.94 (m, 1H), 5.53-5.23(m, 3H), 4.63 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.53-4.42 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 2.93-2.67(m, 2H), 1.98-1.57 (m, 4H), 1.31-1.14 (m, 3H), 1.12 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(1-苄基哌啶-4-基)[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (31 mg, 0.06 mmol)和Pd(PPh3)4 (7 mg,0.006 mmol)在THF(2 mL)中的混合物中加入NaBH4 (4 mg, 0.09 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将反应混合物用水(10 mL)猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制N-((1-苄基哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C23H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：469, 471 (3 : 2)，实测值 469, 471 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向N-((1-苄基哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，19×250 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从10% B到60% B；检测器：UV 254 nm； 保留时间：5.9分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物41 (2-(氨基(1-苄基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(12.4 mg, 43% 两步总计):C19H22Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：365, 367 (3 : 2)，实测值 365, 367 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.62-7.40 (m, 6H), 7.11 (s, 1H), 4.37-4.28 (m,3H), 3.67-3.58 (m, 1H), 3.54-3.44 (m, 1H), 3.17-2.91 (m, 2H), 2.55-2.38 (m,1H), 2.32-2.15 (m, 1H), 1.83-1.44 (m, 3H)； 19F NMR (282, CD3OD) δ -76.98.
实施例111.化合物42 (2-[氨基(8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 711360DEST_PATH_IMAGE227
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (0.71 g, 2.51 mmol) 在THF(8 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (1.68 mL,3.36 mmol, 2 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后将3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯 (0.50 g, 1.68 mmol)加入反应中。将反应在0℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭，用EA(50 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-[[2-(丁-3-烯-1-基)-4,5-二氯苯基]羰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(0.32 g, 40%): C22H27Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464 (3 : 2)，实测值 462, 464 (3 : 2)；
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]羰基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯 (0.25 g, 0.57 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺(83 g, 0.68 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (0.26 g, 1.14 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应溶液用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(0.26 g, 76%): C26H36Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：565, 567 (3 : 2)，实测值 565, 567 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.41(s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.12-5.99 (m, 1H), 5.43 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.31(dd, J = 10.6, 1.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 4.28-4.16 (m, 2H),3.31-3.22 (m, 1H), 2.05-1.91 (m, 3H), 1.87-1.66 (m, 5H), 1.48 (s, 9H), 1.22(s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯 (0.20 g, 0.37 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中加入NaBH4(28 mg, 0.74 mmol)。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2mL)猝灭，用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C26H38Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：545, 547 (3 : 2)，实测值 545, 547(3: 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯 (0.20 g, 0.37 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.004 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (28 mg, 0.73 mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭，减压浓缩。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，得到 3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(0.13 g, 54% 两步总计): C23H34Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：527, 529 (3 :2)，实测值 527, 529 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.40 (s, 1H), 6.91 (s,1H), 4.30-4.00 (m, 3H), 2.42 (s, 1H), 1.97-1.80 (m, 4H), 1.80-1.54 (m, 2H),1.52-1.43 (m, 10H), 1.27-1.19 (m, 10H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯 (0.13 g, 0.26 mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。然后将上述混合物溶解在DCM(2 mL)中，在室温下加入TFA (0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.50 分钟内从5% B到60% B；检测器：UV254/210 nm；保留时间：5.40分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅粉色固体形式得到化合物42 (2-[氨基(8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(37.7 mg, 47%): C14H18Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：301, 303 (3 : 2)，实测值301, 303 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.45 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.28-4.09 (m, 2H), 4.06-3.88 (m, 1H), 2.77-2.55 (m, 1H), 2.23-1.99 (m, 4H), 1.99-1.70 (m, 2H), 1.70-1.27 (m, 2H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.95.
实施例112.化合物43 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-甲基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 739359DEST_PATH_IMAGE228
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU (0.27 g, 0.72 mmol)和2-甲基丙酸(63mg, 0.72 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和Et3N (72 mg, 0.72mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌2小时候，将所得溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的70%ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲基丙酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 60%): C23H34Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：489, 491 (3 : 2)，实测值 489, 491 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲基丙酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4 (2 mg,0.002 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (12 mg, 0.31 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-异丁酰基哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H30Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：449, 451 (3 : 2)，实测值 449, 451 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-异丁酰基哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从23% B到45% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.58分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以粉色固体形式得到化合物43 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-甲基丙-1-酮三氟乙酸)(12.0 mg, 22% 两步总计): C16H22Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345, 347 (3 : 2)，实测值 345, 347 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.43 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.73-4.50 (m, 1H), 4.21-3.98 (m, 2H), 3.14-2.89(m, 2H), 2.69-2.29 (m, 2H), 2.09-1.93 (m, 1H), 1.43-1.15 (m, 3H), 1.15-0.95(q, J = 6.6 Hz, 6H)； 19F-NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.98.
实施例113.化合物44 (2-(氨基(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)
Figure 920942DEST_PATH_IMAGE229
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol), HOAc (29 mg, 0.48 mmol)和二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(96 mg, 0.95 mmol)在DCM(5 mL)中的混合物中分批加入NaBH(OAc)3(0.30 g, 1.43 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50%ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(氧杂环己烷-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 75%):C24H36Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：503, 505 (3 : 2)，实测值 503, 505 (3 :2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(氧杂环己烷-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 mg, 0.46 mmol)和Pd(PPh3)4 (0.11 g, 0.09 mmol) 在THF(3 mL)中溶液中分批加入NaBH4 (35 mg, 0.92mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H32Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：463, 465 (3 : 2)，实测值 463, 465 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：9 分钟内从30%B到40% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.28分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物44 (2-(氨基(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)(28 mg, 17% 两步总计): C17H24Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：359, 361 (3 : 2)，实测值 359, 361 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.19(s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.99 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 3.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H),3.46-3.35 (m, 2H), 3.12 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 11.4 Hz, 1H),2.61-2.43 (m, 1H), 2.27-2.06 (m, 2H), 2.00 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.86-1.73(m, 3H), 1.62-1.23 (m, 5H)。
实施例114.化合物45 (2-(氨基(1-(吡咯烷-1-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 376194DEST_PATH_IMAGE230
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.28 g, 0.67 mmol)和Et3N(0.20 g, 2.00mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中分批加入吡咯烷-1-磺酰氯 (0.34 g, 2.00 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。在室温下将所得溶液用水(30 mL)猝灭，用DCM(3×20 mL)提取，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的40%-80%ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(吡咯烷-1-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 73%): C23H35Cl2N3O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：552, 554 (3 : 2)，实测值 552, 554 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(吡咯烷-1-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.54 mmol)和Pd(PPh3)4 (13 mg, 0.01 mmol)在THF(3 mL)中溶液中分批加入NaBH4 (41 mg, 1.09mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(吡咯烷-1-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H31Cl2N3O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：512, 514 (3 : 2)，实测值 512, 514 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(吡咯烷-1-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从21% B到58% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.80分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物45 (2-(氨基(1-(吡咯烷-1-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(30 mg, 18% 两步总计): C16H23Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：408, 410 (3 : 2)，实测值 408, 410 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.44 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.17 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 12.7 Hz,1H), 3.67 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.35-3.24 (m, 4H), 2.85 (td, J = 12.5, 2.6Hz, 1H), 2.73 (td, J = 12.3, 3.1 Hz, 1H), 2.27-2.12 (m, 1H), 2.09-1.87 (m,5H), 1.54-1.24 (m, 3H)； 19F-NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.95.
实施例115.化合物46 (4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺)
Figure 10438DEST_PATH_IMAGE231
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.17 g, 0.41 mmol)和Et3N (0.12 g, 1.22mmol)在DCM (3 mL, 47.19 mmol)的溶液中分批加入N,N-二甲基氨基甲酰氯(0.13 g,1.22 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。将反应溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以黄色固体形式得到 4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺(80 mg, 36%): C22H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：490, 492 (3 : 2)，实测值 490, 492 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺 (80 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4 (38 mg, 0.03 mmol)在THF(2 mL)中溶液中分批加入NaBH4 (25 mg, 0.65 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：450, 452 (3 : 2)，实测值 450, 452 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺 (粗制) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从23% B到70% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.12分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物46 (4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-N,N-二甲基哌啶-1-甲酰胺)(18 mg, 37% 两步总计): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值 346, 348 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.21 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.89 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.81-3.71 (m, 1H),3.68-3.59 (m, 1H), 2.84 (s, 6H), 2.83-2.63 (m, 2H), 2.06-1.85 (m, 2H), 1.49-1.18 (m, 3H)。
实施例116.化合物47 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-羟基乙-1-酮)
Figure 514231DEST_PATH_IMAGE232
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU(0.27 g, 0.72 mmol)和2-羟基乙酸(54 mg,0.72 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中滴加N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]- 2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.24 mmol)在DMF(1 mL)和Et3N (72mg, 0.72 mmol)中的溶液。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。在室温下将反应溶液用水(30 mL)猝灭。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相闪蒸纯化，用具有10mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg,53%): C21H30Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：477, 479 (3 : 2)，实测值 477, 479(3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基] 甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (60 mg, 0.13 mmol)和Pd(PPh3)4 (3 mg, 0.003 mmol) 在THF(3 mL)中的混合物中加入NaBH4(5 mg, 0.13 mmol)。将混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(10 mL)猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C18H26Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：437, 439 (3 : 2)，实测值 437, 439 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-羟基乙酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.23 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从23% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.67分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以黄色固体形式得到化合物47 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-羟基乙-1-酮)(20 mg, 13%): C14H18Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：333, 335 (3 : 2)，实测值 333, 335 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s,1H), 6.89 (s, 1H), 4.57 (dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 4.27-4.19 (m, 2H),3.92 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.72 (dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 3.05-2.91 (m,1H), 2.71-2.57 (m, 1H), 2.15-1.90 (m, 2H), 1.50-1.15 (m, 3H)。
实施例117.化合物48 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-羰基)环丙腈三氟乙酸)
Figure 815900DEST_PATH_IMAGE233
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU (0.42 g, 1.09 mmol)和1-氰基环丙烷-1-甲酸 (48 mg, 0.43 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入Et3N (43 mg, 0.43 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90mg, 0.21 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。在室温下另外搅拌2小时后，在室温下将反应溶液用水(20 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的30%-70% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-([1-[(1-氰基环丙基)羰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 82%): C24H31Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：512, 514 (3 : 2)，实测值 512, 514 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-([1-[(1-氰基环丙基)羰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.20 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.02 mmol) 在THF(3 mL)中溶液中分批加入NaBH4 (15 mg, 0.39mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-((1-(1-氰基环丙烷羰基)哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H27Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：472, 474 (3 : 2)，实测值 472, 474 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((1-(1-氰基环丙烷羰基)哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从18% B到68% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.20分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物48 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-羰基)环丙腈三氟乙酸)(28.4 mg, 53% 两步总计): C17H19Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：368, 370 (3 : 2)，实测值 368, 370 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.45 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.54 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 13.8 Hz,1H), 4.19 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.30-3.02 (m, 1H), 2.95-2.58 (m, 1H), 2.51-2.38 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 1H), 1.58 (s, 4H), 1.50-1.28 (m, 3H)； 19F-NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.03.
实施例118.化合物49 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-3-羟基-3-甲基丁-1-酮三氟乙酸)
Figure 442053DEST_PATH_IMAGE234
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU (0.49 g, 1.29 mmol)和3-羟基-3-甲基丁酸 (0.10 g, 0.86 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入Et3N (0.86 g, 0.86 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.18 g, 0.43 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液。在室温下另外搅拌2小时后，在室温下将反应溶液用水(20 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50%-80% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以红色固体形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 54%):C24H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 :2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.14, 0.27 mmol)和Pd(PPh3)4 (34 mg, 0.03 mmol) 在THF(5 mL)中的混合物中加入NaBH4 (16 mg, 0.41mmol)。将混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(30 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：479, 481 (3 : 2)，实测值 479, 481 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到50%B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.28分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物49 (1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-3-羟基l-3-甲基丁-1-酮三氟乙酸)(37 mg, 49% 两步总计): C17H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：375, 377 (3 : 2)，实测值 375, 377 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.44 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.66 (dd, J = 54.9, 13.4 Hz, 1H),4.25-4.03 (m, 2H), 3.20-2.96 (m, 1H), 2.75-2.53 (m, 3H), 2.47-2.33 (m, 1H),2.01 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.47-1.12 (m, 9H)； 19F-NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.00.
实施例119.化合物50 ((2S)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 563593DEST_PATH_IMAGE235
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸 (0.20 g,1.06 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.44 g, 1.06 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入Et3N (0.32 g, 3.18mmol)和EDCI (0.61 g, 3.18 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将反应溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(9/1)洗脱，以黄色固体形式得到((2S)-1-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.15 g,42%): C27H41Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：590, 592 (3 : 2)，实测值 590, 592(3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的((2S)-1-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100 mg,0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.002 mmol) 在THF(3 mL)中的混合物中加入NaBH4 (16mg, 0.34 mmol)。将混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(10 mL)猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制((2S)-1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C24H37Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：550, 552 (3 :2)，实测值 550, 552 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向((2S)-1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下另外搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBDPrep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm s 250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从5% B到42% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.80分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以黄色固体形式得到化合物50((2S)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮三氟乙酸)(47.2 mg, 53% 两步总计): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 :2)，实测值 346, 348 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (d, J = 7.2 Hz,1H), 7.09 (s, 1H), 4.56 (dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 4.45-4.36 (m, 1H),4.26-4.13 (m, 1H), 3.92 (dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 3.25-3.01 (m, 1H),2.85-2.57 (m, 1H), 2.52-2.32 (m, 1H), 2.15-2.01 (m, 1H), 1.46 (d, J = 12.8Hz, 3H), 1.44-1.05 (m, 3H)； 19F-NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.93.
实施例120.化合物51 (2-[氨基[1-(环丙基甲基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 933394DEST_PATH_IMAGE236
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和环丙烷甲醛 (50 mg,0.71 mmol)在MeOH (4 mL)中的溶液中加入AcOH (29 mg, 0.48 mmol)和NaBH(OAc)3(0.30 g, 1.43 mmo)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/LNH4HCO3的70% MeOH水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-[[1-(环丙基甲基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.17 g, 75%):C23H34Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：473, 475 (3 : 2)，实测值 473, 475 (3 :2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[1-(环丙基甲基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.17g, 0.36 mmol)和Pd(PPh3)4 (8 mg, 0.01 mmol)在THF(4 mL)中的混合物中加入NaBH4(20 mg, 0.54 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将所得混合物用水(30 mL)猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩得到粗制N-((1-(环丙基甲基)哌啶-4-基)(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435 (3 : 2)，实测值 433, 435 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-[[1-(环丙基甲基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.28 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从33% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.86分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物51 (2-[氨基[1-(环丙基甲基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(18 mg, 19% 两步总计): C16H22Cl2N2O [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：329, 331 (3 : 2)，实测值 329, 331 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.48 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.26 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 12.6 Hz,1H), 3.66 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.10-2.87 (m, 4H), 2.53-2.36 (m, 1H), 2.25(d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.80-1.49 (m, 3H), 1.20-1.03 (m, 1H), 0.86-0.71 (m,2H), 0.50-0.30 (m, 2H)。
实施例121.化合物52 (2-[氨基(氮杂环丁烷-3-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 948624DEST_PATH_IMAGE237
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (2.40 g, 8.60 mmol)在THF(20 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (5.73 mL,11.46 mmol, 2 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后将3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (1.40 g, 5.73 mmol)加入该反应中。将反应在0℃下另外搅拌1.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭，用EA(50 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]羰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.30g, 53%): C18H21Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：408, 410 (3 : 2)，实测值 408,410 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.90 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.28-6.06(m, 1H), 5.56-5.36 (m, 2H), 4.74 (d, J = 5.8, Hz, 2H), 4.19-4.00 (m, 5H),1.46 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]羰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 1.29 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺(0.47 g, 3.88mmol)在THF(8 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (2.36 g, 10.36 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色油的形式得到 3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.49 g, 70%):C22H30Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：489, 491 (3 : 2)，实测值 489, 491 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.49 g, 1.00 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (76 mg, 2.00 mmol)。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到 3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C22H32Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：513, 515 (3 : 2)，实测值 513, 515 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.50 g, 1.02 mmol)和Pd(PPh3)4 (59mg, 0.05 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (77 mg, 2.03 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA (3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，得到 3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 65% 两步总计):C19H28Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：473, 475 (3 : 2)，实测值 473, 475 (3 :2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的3-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.44 mmol)在1,4-二噁烷(4 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。然后将上述混合物溶解在DCM(2 mL)中，在室温下加入TFA (0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：9 分钟内从6% B到18% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.80分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色油的形式得到化合物52 (2-[氨基(氮杂环丁烷-3-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(44.7 mg, 28%): C10H12Cl2N2O [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：247, 249 (3 : 2)，实测值 247, 249 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 7.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.83 (d, J = 9.7 Hz,1H), 4.31-4.13 (m, 2H), 4.03-3.91 (m, 1H), 3.90-3.69 (m, 2H)； 19F NMR (282MHz, CD3OD) δ -77.11.
实施例122.化合物53 (4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺)
Figure 745678DEST_PATH_IMAGE238
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和Et3N (72 mg, 0.72mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中滴加异氰酸根合三甲基硅烷(66 mg, 0.57 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌2小时候，将所得溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺(0.15 g, 68%): C20H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464 (3 : 2)，实测值 462, 464 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺(0.15 g, 0.33 mmol)和Pd(PPh3)4 (8mg, 0.01 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (18 mg, 0.50 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。所得混合物用水(2 mL)在室温下猝灭，减压浓缩，得到4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酰胺。将残渣不经进一步纯化直接用于下一步骤：C17H25Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：422, 424 (3: 2)，实测值 422, 424 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(6 N, 1 mL)。在室温下搅拌2小时后，将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：8分钟内从5% B到90% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.75分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物53 (4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺)(69.6 mg, 71% 两步总计): C13H17Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：318, 320 (3 : 2)，实测值 318, 320 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.20(s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.11 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 13.7 Hz, 1H),3.88 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.85-2.62 (m, 2H), 2.04-1.86 (m, 2H), 1.50-1.09 (m,3H)。
实施例123.化合物54 ((2R)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 354514DEST_PATH_IMAGE239
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸 (0.20 g,1.06 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.44 g, 1.06 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入Et3N (0.32 g, 3.18mmol)和EDCI (0.61 g, 3.18 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将反应溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(9/1)洗脱，以黄色固体形式得到((2R)-1-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.10 g,36%): C27H41Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：590, 592 (3 : 2)，实测值 590, 592(3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的((2R)-1-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.10 g,0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.002 mmol)在THF(3 mL)中的混合物中加入NaBH4(16mg, 0.34 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(10mL)猝灭。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制(((2R)-1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C24H37Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：550, 552(3 : 2)，实测值 550, 552 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向((2R)-1-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下另外搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBDPrep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：水(加0.05%TFA )，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从5% B到42% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.80分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以黄色固体形式得到化合物54 ((2R)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮三氟乙酸)(34.5 mg,48% 两步总计): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值346, 348 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.56(dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 4.45-4.36 (m, 1H), 4.26-4.13 (m, 1H), 3.91(dd, J = 38.8 Hz, 12.8 Hz, 1H), 3.25-3.01 (m, 1H), 2.83-2.57 (m, 1H), 2.50-2.29 (m, 1H), 2.17-1.99 (m, 1H), 1.41 (d, J = 12.8 Hz, 3H), 1.52-1.10 (m,3H)； 19F-NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.92.
实施例124.化合物55 (2-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-N,N-二甲基乙酰胺)
Figure 262427DEST_PATH_IMAGE240
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和DIEA(62 mg, 0.48mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入2-溴-N,N-二甲基乙酰胺 (48 mg, 0.29 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过利用具有10mmol/L NH4HCO3的80% ACN水溶液的反相色谱纯化，以黄色油的形式得到2-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺 (50 mg, 42%): C23H35Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：504, 506 (3 :2)，实测值 504, 506 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺 (50 mg, 0.10mmol)和Pd(PPh3)4 (3 mg, 0.002 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入NaBH4 (5 mg, 0.12mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩得到粗制2-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H31Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：464, 466 (3 : 2)，实测值 464, 466 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的2-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺 (50 mg, 0.11 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(6 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从5% B到60% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.38分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以无色油的形式得到化合物55 (2-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-N,N-二甲基乙酰胺)(18 mg, 46% 两步总计): C16H23Cl2N3O2 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：360, 362 (3 : 2)，实测值 360, 362 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.88 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.20 (s,2H), 3.09 (s, 2H), 3.03 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.94-2.85 (m,2H), 2.16-1.96 (m, 2H), 1.94-1.71 (m, 2H), 1.48-1.32 (m, 3H)。
实施例125.化合物56 (2-[氨基[1-(2-羟基-2-甲基丙基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 273109DEST_PATH_IMAGE241
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)和2-溴乙酸甲酯(0.11 g,0.72 mmol)在ACN (5 mL)的混合物中加入DIEA(0.12 g, 0.95 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌16小时后，将所得溶液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/LNH4HCO3的80% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到2-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)乙酸甲酯(0.18 g, 77%):C22H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：491, 493 (3 : 2)，实测值 491, 493 (3 :2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)乙酸甲酯(0.18 g, 0.37 mmol)和Pd(PPh3)4 (9 mg, 0.01 mmol)在THF(3 mL)中的混合物中加入NaBH4(17 mg, 0.44 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)乙酸甲酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H28Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：451, 452 (3 : 2)，实测值 451, 452 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的2-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)乙酸甲酯(粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到2-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙酸甲酯 (0.10 g, 80% 两步总计): C15H20Cl2N2O3 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：347, 349 (3 : 2)，实测值 347, 349 (3 : 2)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙酸甲酯(80 mg, 0.23 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入MeMgBr (0.27 g, 2.30mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将所得混合物在室温下用水(30mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10 μm，19×250 mm；流动相A：水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从5% B到45% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物56 (2-[氨基[1-(2-羟基-2-甲基丙基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(15 mg, 19%): C16H24Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：347, 349 (3 : 2)，实测值 347, 349 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.47(s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.24 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 12.9 Hz, 1H),3.73 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.29-2.96 (m, 4H), 2.55-2.30 (m, 1H), 2.26-2.09(m, 1H), 1.95-1.48 (m, 3H), 1.35 (s, 6H)。
实施例126.化合物57 (4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-N-环丙基哌啶-1-甲酰胺)
Figure 162436DEST_PATH_IMAGE242
步骤a:
在0℃下向搅拌的CDI (0.21 g, 1.29 mmol)和Et3N (0.26 g, 2.58 mmol) 在THF(5 mL)中的溶液中分批加入N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.18 g, 0.43 mmol)。在0℃下搅拌1小时后，在0℃下将环丙胺(73.5 mg, 1.29 mmol)加入到所得溶液中。使反应溶液升温至室温，另外搅拌1小时。将所得溶液用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的70% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-环丙基-4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基] [(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺 (0.17 g, 70%): C23H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：502, 504 (3 : 2)，实测值 502, 504 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-环丙基-4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺 (0.17 g, 0.34 mmol)和Pd(PPh3)4 (38 mg, 0.03 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(19 mg, 0.65mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤, 经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-环丙基-4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H29Cl2N3O3S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464 (3 : 2)，实测值 462, 464 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-环丙基-4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(4 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从34% B到46% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.0分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物57 (4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-N-环丙基哌啶-1-甲酰胺)(25 mg, 31% 两步总计): C16H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：358, 360 (3 : 2)，实测值 358, 360 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.21 (s,1H), 6.86 (s, 1H), 4.09 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.88(d, J = 7.7 Hz, 1H), 2.78-2.59 (m, 2H), 2.57-2.46 (m, 1H), 2.00-1.86 (m, 2H),1.40 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.29-1.08 (m, 2H), 0.70-0.62 (m, 2H), 0.52-0.40(m, 2H)。
实施例127.化合物58 (2-[氨基([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 258568DEST_PATH_IMAGE243
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和DIEA(0.12 g, 0.95mmol)在ACN (8 mL)中的溶液中加入3-(溴甲基)-5-甲基-1,2-噁唑(0.13 g, 0.72 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌4小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用65% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 37%): C24H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：514, 516(3: 2)，实测值 514, 516 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg,0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.003 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(7.9 mg,0.21 mmol, 1.2 当量)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到粗制N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：474, 476 (3 :2)，实测值 474, 476 (3 : 2)。
步骤c:
向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从10% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.88分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以褐色固体形式得到化合物58 (2-[氨基([1-[(5-甲基-1,2-噁唑-3-基)甲基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(9.8 mg, 20% 两步总计): C17H21Cl2N3O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：370, 372 (3 : 2)，实测值 370, 372 (3 : 2)； 1H NMR(300 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.32 (s, 1H), 4.36 (s, 2H),4.26 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 12.5 Hz,1H), 3.23-2.98 (m, 2H), 2.54-2.38 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.33-2.19 (m, 1H),1.86-1.51 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.98.
实施例128.化合物59 (2-[氨基(4-氟哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 970172DEST_PATH_IMAGE244
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (1.50 g, 5.17 mmol)在THF(15 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (3.44 mL,6.88 mmol, 2 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后将4-氟-4-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g, 3.44 mmol)加入反应中。将反应在0℃下搅拌1.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭，用EA(50 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到 4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]羰基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 27%):C20H24Cl2FNO4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：376, 378 (3 : 2)，实测值 376, 378(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.07-5.94 (m,1H), 5.46-5.32 (m, 2H), 4.59 (dt, J = 5.6, 1.4 Hz, 2H), 4.10 (d, J = 13.8 Hz,2H), 3.12-3.01 (m, 2H), 2.15-1.97 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 1.16 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺 (0.21 g, 1.73 mmol)在THF(8 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4(0.79 g, 3.47 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(50 mg, 7%):C24H33Cl2FN2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：557, 559 (3 : 2)，实测值 557, 559 (3:2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯 (50 mg, 0.09 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(7 mg, 0.19 mmol)。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭，用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(50 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C22H32Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS(ESI)计算值：559, 561 (3 : 2)，实测值 559, 561 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯 (50 mg, 0.09 mmol)和Pd(PPh3)4(5 mg,0.05 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4 (7 mg, 0.19 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以褐黄色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(40 mg, 86% 两步总计): C21H31Cl2FN2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519,521 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.51 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 4.85-4.76(m, 1H), 4.08-3.79 (m, 2H), 3.19-2.95 (m, 2H), 2.35-2.16 (m, 2H), 1.81-1.53(m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.15 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯 (40 mg, 0.10 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。然后将上述混合物溶解在DCM(2 mL)中，在室温下加入TFA (0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到70% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.90分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物59 (2-[氨基(4-氟哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(8.4 mg, 34%): C12H15Cl2FN2O [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：293, 295 (3 : 2)，实测值 293, 295 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.34 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 3.05-2.74 (m, 4H), 2.17-2.02 (m, 1H), 1.83-1.47 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ-76.94, -172.46.
实施例129.化合物60 ((S)-2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸))和化合物61 ((R)-2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸)
Figure 835360DEST_PATH_IMAGE245
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3,4,5-三氯苯基)硼酸 (6.00 g, 26.64 mol)和H2O2 (1.81 g, 53.27 mmol, 30%)在THF(10 mL)中的溶液中加入NaOH(2.13 g, 53.27mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌12小时。将反应用饱和Na2SO3水溶液(100mL)猝灭，用HCl水溶液(1 N)酸化至pH 3-4。将所得混合物用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×100 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(9/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到3,4,5-三氯苯酚(3.10 g,88%)。C6H2Cl3O[M - H]-的LCMS (ESI)计算值：195, 197, 199 (3 : 3 : 1)，实测值 195,197, 199 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 10.55 (s, 1H), 6.99 (s, 1H)。
步骤b:
在氮气氛下，在110℃下向搅拌的3,4,5-三氯苯酚(0.59 g, 2.99 mmol), 乙酰胺(0.21 g, 3.59 mmol)和吡啶-4-甲醛(0.32 g, 2.99 mmol)的混合物中滴加AlCl3 (59.8mg, 0.45 mmol)。反应混合物在110℃下搅拌10小时。冷却至室温后，将反应混合物在室温下用水(200 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×80 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50%ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[吡啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.14 g, 12%)。C14H11Cl3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345, 347(1 : 1)，实测值 345, 347 (1 : 1)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.81-8.67 (m, 2H),7.97-7.86 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.17 (s, 3H)。
步骤c:
向N-[吡啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.10 g, 0.29 mmol)在共溶剂MeOH/AcOH(20 mL, v/v=1:1)中的溶液中加入在压力罐中的PtO2(20 mg)。在氢气氛(50 atm)下，在30℃下将混合物氢化6小时。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液减压浓缩，以无色油的形式得到N-[哌啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺(0.10 g, 粗制)。C14H17Cl3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：351, 353, 355 (3 : 3 :1)，实测值 351, 353, 355 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 6.97 (s, 1H),5.51 (d, J = 10.5小时z, 1H), 3.45 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.40-3.34 (m, 1H),3.07-2.82 (m, 2H), 2.30-2.13 (m, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.58-1.46 (m, 1H), 1.35-1.25 (m, 3H)。
步骤d:
在100℃下向搅拌的N-[吡啶-4-基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基]乙酰胺 (0.14g, 0.4 mmol)在浓HCl(3 mL)中的溶液中3小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm,19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从5% B到40% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：7.18分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸(70 mg, 41%)。C12H15Cl3N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：309, 311, 313 (3 : 3 :1)，实测值 309, 311, 313 (3 : 3 : 1)。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.15 (s, 1H),4.69 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.38 (d, J = 12.9 Hz,1H), 3.05 (td, J = 13.1, 3.1 Hz, 1H), 2.94 (td, J = 12.4, 5.3 Hz, 1H), 2.73-2.66 (m, 1H), 2.26 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 1.80-1.49 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz,CD3OD) δ -77.06.
步骤e:
通过制备SFC在以下条件下分离出2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸 (68 mg, 0.16 mmol): 柱：CHIRALPAK IG UL001, 20×250 mm, 5 µm；流动相A：CO2，流动相B：MeOH (0.5% IPA)；流速：40 mL/min；梯度：35% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 2.56 分钟； RT2: 5.4 分钟；温度: 25 ℃。
在2.56分钟以浅黄色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物61 ((R)-2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸) (5.1 mg, 8%): C12H15Cl3N2O [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：309, 311, 313 (3 : 3 : 1)，实测值 309, 311, 313 (3 : 3 :1)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.17 (s, 1H), 4.40 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.38(d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.21 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.95-2.70 (m, 2H), 2.48-2.39(m, 1H), 2.10 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 1.57-1.45 (m, 1H), 1.39-1.25 (m, 2H)； 19FNMR (376 MHz, CD3OD) δ -73.50.
在5.4分钟以浅黄色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物60 ((S)-2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4,5-三氯苯酚三氟乙酸) (6.5 mg, 9%): C12H15Cl3N2O [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：309, 311, 313 (3 : 3 : 1)，实测值 309, 311, 313 (3 : 3 :1)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.19 (s, 1H), 4.40 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.39(d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.21 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.93-2.73 (m, 2H), 2.48-2.39(m, 1H), 2.16-2.02 (m, 1H), 1.57-1.42 (m, 1H), 1.42-1.28 (m, 2H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -73.51.
实施例130.化合物62 (2-(氨基(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 974217DEST_PATH_IMAGE246
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)和1,1-二氟-2-碘乙烷(0.27 g, 1.43 mmol)在MeCN(3 mL)中的溶液中加入K2CO3(0.13 g, 0.95 mmol)。使反应混合物升温至50℃，在氮气氛下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的70% ACN水溶液洗脱，以浅黄色固体形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 52%): C21H30Cl2F2N2O2S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：483, 485 (3 : 2)，实测值 483, 485 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.25 mmol)和Pd(PPh3)4 (6mg, 0.01 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中分批加入NaBH4 (14 mg, 0.38 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。在室温下将反应混合物用水(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩. 将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以黄色固体形式得到 N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 73%): C18H26Cl2F2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：443, 445 (3 : 2)，实测值 443, 445 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.11 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将反应溶液在室温下搅拌3小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.5% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到35% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物62 (2-(氨基(1-(2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(10 mg,23%): C14H18Cl2F2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：339, 341 (3 : 2)，实测值 339, 341(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.30 (t, J =54.0 Hz； 1 H), 4.25 (d, J = 9.6 Hz； 1 H), 3.70-3.33 (m, 4H), 3.12-2.80 (m,2H), 2.51-2.30 (m, 1H), 2.22-2.10 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H), 1.59-1.46 (m,2H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -77.04, -121.72。
实施例131.化合物63 ((4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮三氟乙酸)
Figure 354383DEST_PATH_IMAGE247
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和(S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(0.15 g, 0.72 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入Et3N(0.15 g, 1.44 mmol)和EDCI(0.18 g, 0.96 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。将所得溶液用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到(3S)-3-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.18 g, 60%): C29H43Cl2N3O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：616, 618 (3 : 2)，实测值 616, 618 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3S)-3-(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.18 g, 0.29mmol)和Pd(PPh3)4(32 mg, 0.029 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(16 mg, 0.44mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(3S)-3-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C26H39Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：576, 578 (3 : 2)，实测值576, 578 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3S)-3-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(5 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：柱：XBridge C18 OBD PrepColumn, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到45% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.52.收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物63 ((4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮三氟乙酸)(56.2 mg, 40% 两步总计): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372,374 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J =2.2 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 41.8, 13.3 Hz, 1H), 4.26-3.96 (m, 2H), 3.74-3.54(m, 2H), 3.41-3.30 (m, 3H), 3.26-3.00 (m, 1H), 2.80-2.54 (m,1H), 2.49-2.31(m, 2H), 2.21-2.02 (m, 2H), 1.59-1.08 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.92。
实施例132.化合物64 (2-(氨基(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)
Figure 604099DEST_PATH_IMAGE248
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.18 g, 0.43 mmol)和DIEA(0.11 g, 0.86 mmol)在ACN(3mL)中的溶液中分批加入1-溴-2-甲氧基乙烷(0.18 g, 1.29 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.17 g, 75%): C22H34Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：477, 479 (3 : 2)，实测值477, 479 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.17 g, 0.36 mmol)和Pd(PPh3)4 (45 mg, 0.04 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中分批加入NaBH4 (27 mg, 0.71mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H30Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：437, 439 (3 : 2)，实测值 437, 439 (3 :2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时，然后减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从34% B到50%B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.80分钟。收集含有所需产物的馏分并浓缩，以灰白色固体形式得到化合物64 (2-(氨基(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚)(25 mg, 31% 两步总计): C15H22Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：333, 335 (3 :2)，实测值 333, 335 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.16 (s, 1H), 6.83 (s,1H), 3.86 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.51 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.06(d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.55 (t, J = 5.7 Hz, 2H),2.16-1.87 (m, 3H), 1.82-1.69 (m, 1H), 1.46-1.21 (m, 3H)。
实施例133.化合物65 (3-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)吡咯烷-2-酮三氟乙酸)
Figure 995897DEST_PATH_IMAGE249
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.18 g, 0.43 mmol)和DIEA(0.11 g, 0.86 mmol)在ACN(3mL)中的溶液中分批加入3-溴吡咯烷-2-酮 (0.21 g, 1.29 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌10小时。将所得溶液用水(30 mL)稀释，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的40%-70% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 63%): C23H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：502, 504 (3 : 2)，实测值502, 504 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g, 0.30 mmol)和Pd(PPh3)4(34 mg, 0.03 mmol)在THF(5 mL)中的混合物中分批加入NaBH4 (17 mg, 0.45 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将反应混合物用水(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C20H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464 (3 : 2)，实测值 462, 464(3 : 2)
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(4 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时，然后减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：8 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.37分钟。收集含有所需产物的馏分并浓缩，以灰白色固体形式得到化合物65 (3-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)吡咯烷-2-酮三氟乙酸)(60 mg, 56% 两步总计): C16H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：358,360 (3 : 2)，实测值 358, 360 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H),7.11 (s, 1H), 4.33-4.18 (m, 2H), 4.15-3.74 (m, 1H), 3.67-3.38 (m, 4H), 3.23-3.00 (m, 1H), 2.58-2.24 (m, 4H), 1.88-1.50 (m, 3H)。
实施例134.化合物66 ((4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮三氟乙酸)
Figure 40076DEST_PATH_IMAGE250
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体5, 实施例5) (0.20 g, 0.48 mmol)和(R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸 (0.15 g, 0.72 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入Et3N (0.15 g, 1.44 mmol)和EDCI (0.18 g, 0.96 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。将所得溶液用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到 (3R)-3-(4-((2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.19 g, 62%): C29H43Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：616, 618 (3 : 2)，实测值 616, 618 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3R)-3-(4-((2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.19 g,0.31 mmol)和Pd(PPh3)4 (35 mg, 0.031 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (18mg, 0.47 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(3R)-3-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C26H39Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：576, 578 (3 :2)，实测值 576, 578 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3R)-3-(4-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(5 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：柱：XBridge C18 OBD PrepColumn, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到45% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.52.收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物66 ((4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮三氟乙酸)(60.1 mg, 42% 两步总计): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372,374 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J =2.2 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 41.8, 13.3 Hz, 1H), 4.26-3.96 (m, 2H), 3.74-3.54(m, 2H), 3.41-3.30 (m, 3H), 3.26-3.00 (m, 1H), 2.80-2.54 (m,1H), 2.49-2.31(m, 2H), 2.21-2.02 (m, 2H), 1.59-1.08 (m, 3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.92。
实施例135.化合物67 (2-[氨基[1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 907538DEST_PATH_IMAGE251
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU (0.42 g, 1.09 mmol)和氧杂环丁烷-3-甲酸 (75 mg, 0.73 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入Et3N (0.12 g, 1.09 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.15 g,0.36 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液。在室温下另外搅拌2小时后，在室温下将反应溶液用水(20 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.13 g, 72%): C21H23Cl2F3N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：495, 497 (3 : 2)，实测值 495, 497 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.20 g, 0.40 mmol)在MeOH/水(10 mL/5mL)中的溶液中加入KOH(0.11 g, 2.00 mmol)。反应混合物在室温下搅拌6小时，在室温下用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到1-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]-1-[1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲胺(0.10 g, 粗制)。粗产物无需进一步纯化而用于后续步骤，为黄色固体：C19H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：399,401 (3 : 2)，实测值 399, 401 (3 : 2)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]-1-[1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲胺(0.10 g, 0.25 mmol)和Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.01mmol)在THF中的溶液中分批加入NaBH4 (14 mg, 0.38 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，在室温下将反应混合物用水(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA(2×20 mL)提取。收集水层并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到35% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物67 (2-[氨基[1-(氧杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(18 mg, 20%): C16H20Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：359, 361 (3 : 2)，实测值 359, 361 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.90-4.75 (m, 4 H), 4.60 (dd, J = 36.8,1.3 Hz； 1 H), 4.20-4.08 (m, 2H), 3.50 (dd, J = 36.8, 1.3 Hz； 1H), 3.12-2.88(m, 1H), 2.78-2.58 (m, 1H), 2.45-2.26 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 1H), 1.49-1.01(m, 3H)。
实施例136.化合物68 (2-[氨基(1-苯甲酰基哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 960945DEST_PATH_IMAGE252
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的HATU (0.42 g, 1.09 mmol)和苯甲酸(89 mg,0.72 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中滴加N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (0.15 g, 0.36 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液和Et3N(0.11 g, 1.09 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将所得溶液用水(30mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩. 将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-苯甲酰基哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.12 g, 78%): C24H23Cl2F3N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：515, 517(3 : 2)，实测值 515, 517 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-苯甲酰基哌啶-4-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.12 g, 0.23 mmol)在MeOH/水(10 mL/5 mL)中的溶液中加入KOH(64 mg, 1.15 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌6小时。在室温下将所得混合物用水(30mL)稀释并用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩. 将作为黄色固体的粗产物无需进一步纯化而用于后续步骤：C22H24Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421 (3 : 2)，实测值 419, 421 (3 :2)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(氨基)甲基)哌啶-1-基)(苯基)甲酮 (0.15 g, 粗制)和Pd(PPh3)4 (7 mg, 0.01 mmol)在THF中的溶液中加入NaBH4 (18 mg, 0.47 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。收集水层并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.5% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到35% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物68 (2-[氨基(1-苯甲酰基哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(63 mg, 52%): C19H20Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：379, 381 (3 : 2)，实测值 379, 381 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.48-7.42 (m, 6H), 7.08 (s,1H), 4.80-4.65 (m, 1 H), 4.20 (d, J = 9.6 Hz； 1 H), 3.98-3.65 (m, 1 H), 3.20-2.65 (m, 2H), 2.50-2.31 (m, 1H), 2.12-1.88 (m, 1H), 1.59-1.11 (m, 3H)； 19F NMR(282 MHz, CD3OD) δ -77.00。
实施例137.化合物69 ((R)-2-氨基-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)和化合物87 ((R)-2-氨基-1-(4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)
Figure 535146DEST_PATH_IMAGE253
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离(2R)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮 (50 mg): 柱：柱：CHIRALPAK IG UL001, 20×250 mm,5 μm；流动相A：己烷 (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：18 mL/min；梯度：16 分钟内从40% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 11.55 分钟； RT2: 15.73 分钟；注射体积: 0.3 mL。
在11.55分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物87 ((R)-2-氨基-1-(4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)(6.3 mg,13%): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值 346, 348(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 5.1Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 36.6, 13.5 Hz, 1H), 4.08-3.73 (m, 3H), 3.18-2.94 (m,1H), 2.71-2.55 (m, 1H), 2.14-1.92 (m, 2H), 1.59-1.42 (m, 1H), 1.38-1.11 (m,5H)。
在15.73分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物69 ((R)-2-氨基-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)(2.1 mg,4%): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值 346, 348(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H),4.56 (dd, J = 13.3, 38.9 Hz, 1H), 4.06-3.85 (m, 3H), 3.18-2.97 (m, 1H), 2.70-2.52 (m, 1H), 2.14-1.92 (m, 2H), 1.59-1.42 (m, 1H), 1.38-1.11 (m,5H)。
实施例138.化合物70 (2-[氨基[1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 937177DEST_PATH_IMAGE254
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.72 mmol)和2-氟吡啶(0.14 g,1.43 mmol)在DMF(8 mL)中的溶液中加入t-BuOK (0.24 g, 2.15 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的65%ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 22%): C24H31Cl2N3O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：496, 498(3: 2)，实测值 496, 498 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4(37 mg, 0.03 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4 (12 mg, 0.32 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H27Cl2N3O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：456, 458 (3 : 2)，实测值 456, 458 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6N, 1.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：8 分钟内从16% B到30% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：6.23分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物70 (2-[氨基[1-(吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(5 mg, 11% 两步总计): C17H19Cl2N3O [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：352, 354 (3 : 2)，实测值 352, 354 (3 : 2)； 1H NMR (300MHz, DMSO-d 6 + D2O) δ 8.04 (dd, J = 4.9, 2.0 Hz, 1H), 7.50-7.39 (m, 1H), 7.27(s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.76 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.53 (dd, J = 7.1, 4.9 Hz,1H), 4.29 (t, J = 16.4 Hz, 2H), 3.87 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 2.75-2.55 (m, 2H),1.90-1.65 (m, 2H), 1.45-1.06 (m, 3H)。
实施例139.化合物71 (2-[氨基(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 229618DEST_PATH_IMAGE255
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.15 g, 0.36 mmol)和Et3N (0.11 g)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加甲磺酰氯 (84 mg, 0.73 mmol)。在氮气氛下，在室温下另外搅拌2小时后，在室温下将反应溶液用水(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩. 将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EtOAc (5/1)洗脱，以黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.11 g, 61%):C18H21Cl2F3N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：489, 491 (3 : 2)，实测值 489, 491 (3:2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (80 mg, 0.16 mmol)在MeOH/水(5 mL/2mL)中的溶液中加入KOH (0.11 g, 1.96 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌3小时。在室温下将所得混合物用水(10 mL)稀释并用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×3 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的45% ACN水溶液洗脱，以浅黄色固体形式得到1-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]-1-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲胺(44 mg, 68%):C16H22Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：393, 395 (3 : 2)，实测值 393, 395 (3 :2)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]-1-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲胺 (0.10 g, 0.25 mmol)和Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.01 mmol)在THF中的溶液中加入NaBH4(14 mg, 0.38 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物在室温下用水(10 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到35% B；检测器：UV 254/220nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物71 (2-[氨基(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(15 mg, 16%):C13H18Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：353, 355 (3 : 2)，实测值 353, 355 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.21 (d, J = 9.6 Hz；1 H), 3.85 (d, J = 11.7 Hz； 1 H), 3.70 (d, J = 11.7 Hz； 1H), 2.83 (s, 3H),2.80-2.58 (m, 2H), 2.32-2.18 (m, 1H), 2.10-2.02 (m, 1H), 1.59-1.20 (m, 3H)；19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -76.96.
实施例140.化合物72 (2-(氨基(2,2-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体1)和化合物73 (2-(氨基(2,2-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体2)
Figure 555557DEST_PATH_IMAGE256
步骤a:
在室温下向4-[(4,5-二氯-2-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲氧基]苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体50, 实施例50) (65 mg, 0.10 mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(12 N, 2 mL)。反应溶液在室温下搅拌0.5小时。然后将反应混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 19 mm×250 mm, 10 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：8 分钟内从10% B到40% B；检测器：UV254/210 nm；保留时间RT1: 6.55 分钟； RT2: 7.05 分钟。
以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物73 (2-(氨基(2,2-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体2) (14 mg, 34%):C14H20Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：303, 304 (3 : 2)，实测值 303, 304 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.21 (d, J = 9.4 Hz,1H), 3.27-3.11 (m, 2H), 2.67-2.53 (m, 1H), 2.10-2.01 (m, 1H), 1.65-1.21 (m,9H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.01。
以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物72 (2-(氨基(2,2-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸 非对映异构体1)(8 mg, 20%):C14H20Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：303, 304 (3 : 2)，实测值 303, 304 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.20 (d, J = 9.3 Hz,1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.30-3.19 (m, 1H), 2.73-2.58 (m, 1H), 2.21 (d, J =14.0 Hz, 1H), 1.61-1.27 (m, 9H)。； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.01。
实施例141.化合物74 (2-[氨基[1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 249844DEST_PATH_IMAGE257
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)在NMP (5 mL)中的溶液中加入t-BuOK(0.16 g, 1.43 mmol)和2-溴-1,3-噁唑(0.14 g, 0.95 mmol)。使反应混合物升温至150℃，搅拌2小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的60% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80mg, 34%): C22H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：486, 488 (3 : 2)，实测值 486,488 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.03 mmol) 在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(12 mg, 0.32 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩得到粗制N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基] 甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H25Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：446, 448 (3 : 2)，实测值 446, 448 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (50 mg, 0.11 mmol)在1,4-二噁烷 (4 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBDPrep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从48% B到52% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.63分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物74(2-[氨基[1-(1,3-噁唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(10 mg, 9% 两步总计):C15H17Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：342, 344 (3 : 2)，实测值 342, 344 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, DMOSd 6 + D2OD) δ 7.49 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H),6.84 (s, 1H), 6.78 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 3.97-3.82 (m, 3H), 2.87-2.68 (m, 2H),1.87-1.61 (m, 2H), 1.42-1.13 (m, 3H)。
实施例142.化合物75 ((S)-2-氨基-1-(4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)和化合物76 ((S)-2-氨基-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)
Figure 166984DEST_PATH_IMAGE258
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离(2S)-2-氨基-1-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮 (50 mg): 柱：CHIRALPAK IC, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.2%IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：18 分钟内从30% B到30% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 12.47 分钟； RT2: 15.87 分钟； 注射体积: 0.3mL。
在12.47分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物75 ((S)-2-氨基-1-(4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮)(8.8 mg,18%): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值 346, 348(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.25 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 3.2Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 37.8, 13.4 Hz, 1H), 4.15-3.79 (m, 3H), 3.16-2.94 (m,1H), 2.74-2.52 (m, 1H), 2.16-1.95 (m, 2H), 1.59-1.43 (m, 1H), 1.42-1.09 (m,5H)。
在15.87分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物76 ((S)-2-氨基-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮) (2.7 mg,5%): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2)，实测值 346, 348(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.25 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 3.2Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 37.8, 13.4 Hz, 1H), 4.15-3.79 (m, 3H), 3.16-2.94 (m,1H), 2.74-2.52 (m, 1H), 2.16-1.95 (m, 2H), 1.59-1.43 (m, 1H), 1.42-1.09 (m,5H)。
实施例143.化合物77 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,2,2-三氟乙-1-酮三氟乙酸)
Figure 946721DEST_PATH_IMAGE259
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.72 mmol)在1,4-二噁烷 (5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物用饱和NaHCO3水溶液调节pH值至7并减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的85%ACN水溶液洗脱，以棕色油的形式得到4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 89%): C20H28Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：415, 417(3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 0.96 mmol)和Et3N (0.19 g, 1.93 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入(9H-芴-9-基)甲基碳酰氯(0.37 g, 1.44 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色泡沫形式得到 4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基]氨基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 65%): C35H38Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：637, 639 (3 : 2)，实测值 637, 639 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(9H-芴-9-基)甲氧基]羰基]氨基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.35 g, 0.55 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用DCM/MeOH (15/1)洗脱，以灰白色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲基酯(0.16 g, 54%):C30H30Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：537, 539 (3 : 2)，实测值 537, 539 (3 :2)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲基酯(160 mg, 0.30 mmol)和Et3N (60 mg, 0.60mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸酐(0.13 g, 0.60 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌1小时。所得溶液减压浓缩，得到 ((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C32H29Cl2F3N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：633, 635(3 : 2)，实测值 633, 635 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸(9H-芴-9-基)甲酯(粗制)在DCM(2 mL)中的溶液中加入二乙胺(55mg, 0.76 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液洗脱，以棕色油的形式得到1-(4-[氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙-1-酮(70 mg, 58% 两步总计):C17H19Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：411, 413 (3 : 2)，实测值 411, 413 (3 :2)。
步骤f:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的1-(4-[氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙-1-酮 (70 mg, 0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg,0.003 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (8 mg, 0.20 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将所得混合物在室温下用水(5 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从36% B到46% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：4.90分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物77 (1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,2,2-三氟乙-1-酮三氟乙酸)(10 mg, 16%): C14H15Cl2F3N2O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：371, 372 (3 : 2)，实测值 371, 372 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.08 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.54-3.43 (m, 2H),3.13-2.86 (m, 2H), 2.31-2.05 (m, 2H), 1.63-1.45 (m, 3H)。
实施例144.化合物79 ((4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮)和化合物85 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮)
Figure 341931DEST_PATH_IMAGE260
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮 (化合物63的游离碱， 实施例131) (50 mg): 柱：CHIRALPAK IG UL001, 20×250 mm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.3% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：22 分钟内从40% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1:14.492 分钟； RT2: 19.856 分钟； 注射体积: 0.6 ml。
在14.492分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物79 ((4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮)(26.1 mg,52%): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.21 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.4Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 28.0, 13.2 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 28.9, 13.7 Hz, 1H),3.96-3.83 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.19-2.83 (m, 5H), 2.70-2.49 (m, 1H),2.15-1.82 (m, 4H), 1.61-1.06 (m, 3H)。
在19.856分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物85 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-吡咯烷-3-基)甲酮) (8.2 mg,16%): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.21 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.4Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 28.0, 13.2 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 28.9, 13.7 Hz, 1H),3.96-3.83 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.19-2.83 (m, 5H), 2.70-2.49 (m, 1H),2.15-1.82 (m, 4H), 1.61-1.06 (m, 3H)。
实施例145.化合物83 (2-[(R)-氨基[1-(氮杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 280937DEST_PATH_IMAGE261
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体6, 实施例6) (0.50 g, 1.19mmol)和1-[(叔丁氧基)羰基]氮杂环丁烷-3-甲酸 (0.72 g, 3.58 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中分批加入Et3N (0.37 g, 3.66 mmol)和EDCI (0.68 g, 3.54 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将反应在室温下用水(50 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到3-(4-((R)-(2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.39 g, 54%): C28H41Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：602, 604 (3 : 2)，实测值 602, 604 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.17-6.03 (m, 1H), 5.50-5.40 (m,1H), 5.39-5.30 (m, 1H), 4.68-4.55 (m, 2H), 4.46 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.13-4.03 (m, 5H), 3.80-3.54 (m, 2H), 3.10-2.90 (m, 1H), 2.72-2.53 (m, 1H), 2.24-2.13 (m, 1H), 2.08-2.01 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.40-1.17 (m, 3H), 1.14 (d, J = 2.0 Hz, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-(4-((R)-(2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.39 g, 0.65 mmol)和Pd(PPh3)4 (15 mg, 0.01 mmol) 在THF(8 mL)中的溶液中加入NaBH4 (37 mg, 0.97 mmol)。将所得混合物在氮气下，在室温下搅拌40分钟。将反应用水(20 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，以深黄色固体形式得到 3-(4-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.34 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C25H37Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：562, 564 (3 : 2)，实测值 562, 564 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的 3-(4-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-羰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.34 g, 0.65 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，以深黄色固体形式得到粗制 3-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤:C21H29Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：458, 460 (3 : 2)，实测值 458, 460 (3 :2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(粗制) 在DCM(3 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从2% B到30% B；检测器：UV 254/210nm；保留时间：4.94分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物83 (2-[(R)-氨基[1-(氮杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸) (0.11 g, 36% 三步总计): C16H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：358, 360(3: 2)，实测值 358, 360 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 6.0 Hz,1H), 6.86 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 38.1, 13.4 Hz, 1H), 4.39-3.95(m, 6H), 3.62 (dd, J = 37.6, 13.8 Hz, 1H), 3.10-2.86 (m, 1H), 2.42-2.28 (m,1H), 2.16-1.91 (m, 1H), 1.56-1.41 (m, 2H), 1.31-1.06 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.02.
以类似于化合物83所述的方式，由(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1a中的化合物。
表1a
Figure 103399DEST_PATH_IMAGE262
Figure 370432DEST_PATH_IMAGE263
Figure 569333DEST_PATH_IMAGE264
Figure 238211DEST_PATH_IMAGE265
Figure 231575DEST_PATH_IMAGE266
Figure 985905DEST_PATH_IMAGE267
实施例146.化合物80 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮)； 化合物84 ((4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基) 哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮)
Figure 722916DEST_PATH_IMAGE268
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮 (化合物66的游离碱， 实施例134) (120 mg) : 柱：CHIRALPAK IG UL001, 20×250 mm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.1%IPA)，流动相B：EtOH；流速：16 mL/min；梯度：20 分钟内从50% B到50% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1:11.704 分钟； RT2: 17.496 分钟； 注射体积: 1 mL。
在14.492分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物80 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮)(35.8 mg,30%): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.8Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 27.3, 12.2 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 13.6, 28.5 Hz, 1H),3.94-3.86 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.19-2.88 (m, 5H), 2.68-2.48 (m, 1H),2.23-1.85 (m, 4H), 1.54-1.06 (m, 3H)。
在19.856分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物84 ((4-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((R)-吡咯烷-3-基)甲酮)(37.4 mg,31%): C17H23Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：372, 374 (3 : 2)，实测值 372, 374(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.8Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 27.3, 12.2 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 13.6, 28.5 Hz, 1H),3.94-3.86 (m, 1H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.19-2.88 (m, 5H), 2.68-2.48 (m, 1H),2.23-1.85 (m, 4H), 1.54-1.06 (m, 3H)。
实施例147.化合物86 (2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4-二氯苯酚 双(三氟乙酸)
Figure 246302DEST_PATH_IMAGE269
步骤a:
将N-[(2,3-二氯-6-羟基苯基)(吡啶-4-基)甲基]乙酰胺 (中间体64, 实施例64)(0.20 g, 0.65 mmol)在HCl水溶液(6 N, 6 mL)中的混合物在100℃下搅拌30分钟。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，以浅黄色固体形式得到 2-[氨基(吡啶-4-基)甲基]-3,4-二氯苯酚(0.16 g, 粗制)，其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。C12H10Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：269, 271 (3 : 2)，实测值 269, 271 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向2-[氨基(吡啶-4-基)甲基]-3,4-二氯苯酚 (0.16 g, 0.60 mmol)在MeOH(7 mL)中的溶液中加入PtO2(30 mg, 0.13 mmol)。在氢气氛下(50 atm)将混合物在30℃下搅拌5小时。将反应过滤，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 mm, 10 μm，19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从8% B到38% B；检测器：UV254/210 nm；保留时间：5.18分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物86 (2-[氨基(哌啶-4-基)甲基]-3,4-二氯苯酚 双(三氟乙酸))(25 mg, 8% 两步总计): C12H16Cl2N2O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：275, 277 (3 : 2)，实测值 275, 277(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (dd, J = 8.9, 1.3 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.39 (d,J = 13.0 Hz, 1H), 3.06 (td, J = 13.1, 3.1 Hz, 1H), 2.94 (td, J = 12.4, 4.5Hz, 1H), 2.80-2.63 (m, 1H), 2.33-2.22 (m, 1H), 1.76-1.63 (m, 1H), 1.63-1.46(m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.00 (d, J = 3.0 Hz)。
实施例148.化合物92 (2-氨基-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮三氟乙酸)
Figure 535200DEST_PATH_IMAGE270
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙酸(0.30 g, 1.74mmol)和HATU (0.66 g, 1.74 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.25 g, 0.58 mmol)和Et3N (0.18 g, 1.74 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌3小时。将所得溶液用水(40 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的70%ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到(2-(4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.19 g,54%): C26H39Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：576, 578 (3 : 2)，实测值 576, 578(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.22 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H),6.13-6.01 (m, 1H), 5.54-5.29 (m, 4H), 4.65-4.52 (m, 3H), 4.49 (s, 2H), 3.94-3.80 (m, 2H), 3.08-2.82 (m, 1H), 2.64-2.39 (m, 1H), 2.14-1.95 (m, 2H), 1.57-1.19 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.16 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(2-(4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.19g, 0.33 mmol)和Pd(PPh3)4 (33 mg, 0.03 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(19mg, 0.50 mmol)。在氮气下将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(50 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩得到粗制(2-(4-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C23H35Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：536,538 (3 : 2)，实测值 536, 538 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2-(4-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)((S)-1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下另外搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：SunFire C18OBD Prep Column, 100 Å, 5 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从10% B到13% B；检测器：UV 210 nm； 保留时间：5.57分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物92 (2-氨基-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]乙-1-酮三氟乙酸)(20 mg,14% 两步总计): C14H19Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：332, 334 (3 : 2)，实测值332, 334 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.20 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.55(dd, J = 35.7, 13.5 Hz, 1H), 3.93-3.74 (m, 2H), 3.45 (dd, J = 10.9, 3.7 Hz,2H), 3.08-2.85 (m, 1H), 2.70-2.56 (m, 1H), 2.10-1.94 (m, 2H), 1.58-1.46 (m,1H), 1.34-1.10 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.04。
以类似于化合物92所述的方式，由(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1b中的化合物。
表1b
Figure 776826DEST_PATH_IMAGE271
Figure 51950DEST_PATH_IMAGE272
Figure 695420DEST_PATH_IMAGE273
Figure 30587DEST_PATH_IMAGE274
Figure 759508DEST_PATH_IMAGE275
Figure 838323DEST_PATH_IMAGE276
Figure 336300DEST_PATH_IMAGE277
Figure 107947DEST_PATH_IMAGE278
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Figure 596883DEST_PATH_IMAGE280
Figure 949367DEST_PATH_IMAGE281
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Figure 102043DEST_PATH_IMAGE294
Figure 1866DEST_PATH_IMAGE295
Figure 567976DEST_PATH_IMAGE296
实施例149.化合物101 (4,5-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)； 化合物116 (4,5-二氯-2-[(R)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)；和 化合物115 (4,5-二氯-2-[(S)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)
Figure 869645DEST_PATH_IMAGE297
步骤a:
在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g,2.14 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(2 mL, 26.93 mmol)。在室温下搅拌1小时后，将所得混合物减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤。C12H13Cl2NO2 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：274, 276 (3 : 2)，实测值 274, 276 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向CDI (0.25 g, 1.57 mmol)和(3R)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (0.39 g, 1.80 mmol)在DMF 2 (mL)中的溶液中加入4,5-二氯-2-(哌啶-4-羰基)苯酚三氟乙酸(0.10 g, 0.26 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液和Et3N (1.10 g,10.87 mmol)。将反应溶液在室温下另外搅拌2小时。在室温下将所得混合物用水(50 mL)稀释并用EA(3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1:1)洗脱，以灰白色固体形式得到(3R)-3-[4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.11g, 88%): C22H28Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：471, 473 (3 : 2)，实测值 471,473 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.15 g, 0.24 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA (2 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C17H20Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：371, 373 (3 : 2)，实测值 371,373 (3 : 2)。
步骤d:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的4,5-二氯-2-[1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-羰基]苯酚(80 mg, 0.22 mmol)在MeOH(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(27.2 mg, 0.72mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1.5小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6分钟内从5% B到80% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.43分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物101 (4,5-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)(55 mg, 64%): C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373, 375 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ7.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.74 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.54 (s,1H), 4.09 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 3.31-3.25 (m, 1H), 3.18-2.83 (m, 5H), 2.58(t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.20-1.81 (m, 4H), 1.53 (t, J = 14.1 Hz, 1H), 1.44-1.19(m, 2H)。
步骤e:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离4,5-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚(55 mg, 0.14 mmol): 柱：Chiralpak IC, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：26 分钟内从20% B到20%B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 14.035 分钟； RT2: 20.088 分钟；温度: 25 ℃。
在14.035分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物116 (4,5-二氯-2-[(R)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)(10 mg, 18%):C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373, 375 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.74 (t,J = 5.4 Hz, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.09 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 3.31-3.25 (m, 1H),3.18-2.83 (m, 5H), 2.58 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.20-1.81 (m, 4H), 1.53 (t, J =14.1 Hz, 1H), 1.44-1.19 (m, 2H)。
在20.088分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物115 (4,5-二氯-2-[(S)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚)(21 mg, 21%):C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373, 375 (3 :2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.35 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.74 (t,J = 5.4 Hz, 1H), 4.54 (s, 1H), 4.09 (t, J = 13.1 Hz, 1H), 3.31-3.25 (m, 1H),3.18-2.83 (m, 5H), 2.58 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.20-1.81 (m, 4H), 1.53 (t, J =14.1 Hz, 1H), 1.44-1.19 (m, 2H)。
实施例150.化合物102 ((S)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮)
Figure 964640DEST_PATH_IMAGE298
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-2-羟基丙酸(0.19 g, 2.16 mmol)和Et3N(0.22 g, 2.16 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中分批加入CDI(0.29 g, 2.09 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，将(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.72 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液滴加至所得溶液中。添加后，在氮气氛下，在室温下将反应溶液另外搅拌12小时。将所得溶液在室温下用水(50 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/3)洗脱，以黄色固体形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-((S)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 29%): C22H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：491, 493 (3 : 2)，实测值 491, 493 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-((S)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.20 mmol)和Pd(PPh3)4 (22 mg, 0.02 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入NaBH4(11 mg, 0.30 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H28Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：451, 453 (3 : 2)，实测值 451, 453(3: 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6分钟内从20% B到50% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.58分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物102 ((S)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮)(10.0 mg, 14% 两步总计): C15H20Cl2N2O3[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：347, 349 (3 : 2)，实测值 347, 349 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.63-4.46 (m, 2H), δ 4.04 (dd,J = 13.8, 35.1 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.12-2.93 (m, 1H), 2.74-2.51 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 2H), 1.50 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.31 (d, J = 6.6Hz, 3H), 1.32-1.08 (m, 2H)。
实施例151.化合物104 (2-[(R)-氨基([1-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 351759DEST_PATH_IMAGE299
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.25 g, 0.48 mmol)和Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.005 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (36 mg, 0.96 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，在室温下将所得混合物用水(2 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20% NH4HCO3的70% MeOH水溶液洗脱，以黄色油的形式得到4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.15 g, 65%): C21H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：479, 481 (3 : 2)，实测值 479, 481 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.15 g, 0.31 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 8并减压浓缩。将残渣通过利用具有10% NH4HCO3的50% ACN水溶液的反相色谱纯化，以黄色油的形式得到 N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 67%): C16H24Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：379, 381 (3 : 2)，实测值379, 381 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.26(d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.20 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.04 (d, J = 12.7 Hz, 1H),2.76-2.51 (m, 2H), 2.21 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.08-1.90 (m, 1H), 1.48-1.23(m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的EDCI(61 mg, 0.32 mmol)和(3R)-1-甲基吡咯烷-3-甲酸 (25 mg, 0.19 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入Et3N (32 mg, 0.32 mmol)和N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (60 mg, 0.16mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌16小时后，将所得溶液用水(30 mL)猝灭，用EA(3×30mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-1-甲基吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C22H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：490, 492 (3 : 2)，实测值 490, 492 (3 :2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-1-甲基吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6分钟内从30% B到80% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：4.42分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物104 (2-[(R)-氨基([1-[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚)(13 mg, 33% 两步总计): C18H25Cl2N3O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：386, 388 (3 : 2)，实测值 386, 388 (3 : 2)； 1H NMR(300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.57 (dd, J = 29.1, 13.3 Hz,1H), 4.03 (dd, J = 27.8, 13.8 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.35-3.30(m, 1H), 3.16-2.86 (m, 2H), 2.84-2.51 (m, 4H), 2.45-2.39 (m, 3H), 2.21-1.90(m, 4H), 1.57-1.07 (m, 3H)。
实施例152.化合物105 ((R)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮)
Figure 721560DEST_PATH_IMAGE300
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(2R)-2-羟基丙酸 (86 mg, 0.96 mmol)和Et3N(97 mg, 0.95 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中分批加入CDI (0.15 g, 0.95 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，将(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液滴加至所得溶液中。添加后，在氮气氛下，在室温下将反应溶液另外搅拌12小时。将所得溶液用水(50mL)稀释，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20% NH4HCO3的60% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-((R)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 46%): C22H32Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：491, 493 (3 : 2)，实测值 491, 493 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD): δ 7.45 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.18-5.96 (m, 1H), 5.52-5.30 (dd, J =44.4, 14.0 Hz, 2H), 4.70-4.62 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.59-4.51 (m, 3H), 4.10(dd, J = 55.6, 13.7 Hz, 1H), 3.15-2.87 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 1H), 2.30-2.00(m, 2H), 1.52-1.20 (m, 6H), 1.10 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1-((R)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 0.19 mmol)和Pd(PPh3)4(22 mg, 0.02 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入NaBH4(11 mg, 0.30 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-2-羟基丙酰基) 哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C19H28Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：451, 453 (3 : 2)，实测值 451, 453 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Atlantis HILIC OBD柱，19×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水+0.1%NH3·H2O，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：6 分钟内从30% B到65% B；检测器：UV 210 nm； 保留时间：5.00分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物105 ((R)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮)(3.7 mg, 5% 两步总计): C15H20Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：347, 349 (3 : 2)，实测值 347, 349 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.63-4.46 (m, 2H), δ 4.04 (dd, J = 13.8,35.1 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.12-2.93 (m, 1H), 2.74-2.51 (m, 1H),2.10-1.90 (m, 2H), 1.50 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.35-1.08 (m, 5H)。
实施例153.化合物106 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲酮)
Figure 612156DEST_PATH_IMAGE301
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.50 g, 1.19 mmol)和(3S)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (0.51 g, 2.38 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入Et3N(0.24 g, 2.38 mmol)和EDCI (0.46 g, 2.38 mmol)。在氮气氛下，在室温下，将反应溶液搅拌2小时。将所得溶液用水(50 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的10%-50% ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到(3S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 43%): C29H43Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：616, 618 (3 : 2)，实测值 616, 618 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.49 mmol)和Pd(PPh3)4(11 mg, 0.01 mmol)在THF(5 mL)中溶液中分批加入NaBH4(74 mg, 1.95 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到(3S)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基) 氨基]甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 71%): C26H39Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：576, 578 (3 : 2)，实测值576, 578 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.35 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中滴加TFA(1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。所得溶液用饱和NH4HCO3水溶液在0℃下中和。将pH值调节至7。将水层用EA(5×50 mL)提取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的40%ACN水溶液洗脱，以黄色固体形式得到得到 (S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 39%):C21H31Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：476, 478 (3 : 2)，实测值 476, 478 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.14 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 13.3 Hz,1H), 4.62 (dd, J = 50.6, 13.2 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 39.0, 7.8 Hz, 1H), 4.09-3.87 (m, 1H), 3.30-2.87 (m, 6H), 2.59 – 2.44 (m, 1H), 2.12 – 1.91 (m, 4H),1.63-1.43 (m, 1H), 1.31-1.13 (m, 11H)。
步骤d:
向搅拌的(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.21 mmol)和甲醛 (9.5 mg, 0.32 mmol)在MeOH(2 mL)中的溶液中加入HOAc(13 mg, 0.21 mmol)。在室温下搅拌1小时后，在室温下分批加入NaBH(AcO)3 (89 mg, 0.42 mmol)。将反应混合物在室温下另外搅拌1小时。所得混合物用饱和NH4HCO3水溶液中和，用EA(5×50 mL)提取。将合并的有机层减压浓缩，得到粗制(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-1-甲基吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C22H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：490, 492 (3 : 2)，实测值 490, 492 (3 :2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((S)-1-甲基吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 5 µm,19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从20% B到80% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：4.72分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物106 ((4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)((S)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲酮)(21.5 mg, 25% 两步总计):C18H25Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：386, 388 (3 : 2)，实测值 386, 388 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.1 Hz,1H), 4.56 (dd, J = 28.9, 13.2 Hz, 1H), 4.03 (dd, J = 28.1, 13.7 Hz, 1H), 3.89(t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 3.14-2.88 (m, 2H), 2.81-2.46 (m, 4H),2.44-2.32 (s, 3H), 2.20-1.94 (m, 4H), 1.62-1.03 (m, 3H)。
实施例154.化合物107 (2-[(R)-氨基[1-(氮杂环丁烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 409211DEST_PATH_IMAGE302
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)和Et3N (97 mg, 0.96mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中分批加入3-(氯磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.15 g,0.59 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌3小时。将所得混合物用水(50 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到3-([4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.12 g, 39%): C27H41Cl2N3O6S2 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：638, 640 (3 : 2)，实测值 638, 640 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.21 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.09-5.96 (m, 1H), 5.49-5.34 (m,2H), 4.64-4.52 (m, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.28-4.09 (m, 4H), 3.86 (d, J = 35.3Hz, 3H), 2.73 (dd, J = 22.9, 11.6 Hz, 2H), 1.89 (s, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.38-1.25 (m, 4H), 1.17 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-([4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯 (0.12 g, 0.19 mmol)和Pd(PPh3)4 (21 mg, 0.02 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中分批加入NaBH4 (25 mg, 0.66 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌6小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到3-([4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(80 mg, 71%):C24H37Cl2N3O6S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：598, 600 (3 : 2)，实测值 598, 600 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-([4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(80 mg, 0.15 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：12 分钟内从20% B到35% B；检测器：210 nm；保留时间：9.5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物107 (2-[(R)-氨基[1-(氮杂环丁烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(40 mg,67%): C15H21Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：394, 396 (3 : 2)，实测值 394, 396(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.37-4.26 (m,1H), 4.01-3.87 (m, 3H), 3.87-3.65 (m, 4H), 2.86-2.63 (m, 2H), 2.10-1.76 (m,2H), 1.56-1.15 (m, 3H)。
实施例155.化合物108(N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)乙酰胺三氟乙酸)
Figure 204997DEST_PATH_IMAGE303
步骤a:
在室温下向搅拌的(3R)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (0.46 g, 2.15mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中加入EDCI (0.41 g, 2.15 mmol)。搅拌10分钟后，在室温下将Et3N (0.43 g, 4.31 mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.60 g, 1.44 mmol)加入所得溶液中。将反应溶液在室温下另外搅拌16小时。将所得溶液用水(40 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用75% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到(3R)-3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 45%): C29H43Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：616, 618 (3 : 2)，实测值 616, 618 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(3R)-3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.40 g, 0.39mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 0.67 mL)。将反应溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液调节pH值至7。将所得水溶液用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(3R)-3-(4-[氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.22 g, 粗制)。C25H35Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：512, 514 (3 : 2)，实测值 512, 514 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3R)-3-(4-[氨基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.39 mmol)和Et3N (0.13 g, 1.29mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入Ac2O(88 mg, 0.86 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。在室温下将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用EA洗脱，以灰白色固体形式得到(3R)-3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](乙酰胺基)甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80 mg, 37% 两步总计):C27H37Cl2N3O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：554, 556 (3 : 2)，实测值 554, 556 (3 :2)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向(3R)-3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](乙酰胺基)甲基]哌啶-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (80 mg, 0.14 mmol)和Pd(PPh3)4 (3.3 mg, 0.002 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (8.3 mg, 0.22 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(40 mL)在室温下猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(3R)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙酰胺基)甲基]哌啶 -1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(74 mg, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤。C24H33Cl2N3O5 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：514, 516 (3 : 2)，实测值 514, 516 (3:2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙酰胺基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(72 mg, 0.14 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将反应溶液在室温下搅拌0.5小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从20% B到30% B；检测器：UV 210 nm；保留时间：4.60分钟。收集含有产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物108(N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(1-((R)-吡咯烷-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)乙酰胺三氟乙酸)(66 mg, 85% 两步总计): C19H25Cl2N3O3 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：414, 416 (3 : 2)，实测值 414, 416 (3 : 2)。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.33 (d, J = 1.7 Hz, 1H),6.95 (s, 1H), 5.07-4.93 (m, 1H), 4.49 (dd, J = 28.4, 13.4 Hz, 1H), 4.02 (dd,J = 25.5, 13.8 Hz, 1H), 3.73-3.54 (m, 2H), 3.42-3.34 (m, 3H), 3.20-2.98 (m,1H), 2.75-2.55 (m, 1H), 2.46-2.25 (m, 1H), 2.22-1.84 (m, 6H), 1.55-1.09 (m,3H)； 19F NMR (282 MHz, CD3OD) δ -77.05。
实施例156.化合物111 (4,5-二氯-2-([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基]甲基)苯酚三氟乙酸)
Figure 378489DEST_PATH_IMAGE304
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3R)-3-[4-(4,5-二氯-2-羟基苯甲酰基)哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 0.74 mmol)在MeOH(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(56 mg, 1.48 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将反应在室温下用水(50 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 57%): C22H30Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：473, 475 (3: 2)，实测值 473, 475 (3: 2)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03 (d, J =11.3 Hz, 2H), 4.73-4.49 (m, 2H), 4.04-3.82 (m, 1H), 3.73-3.61 (m, 1H), 3.59-3.47 (m, 3H), 3.47-3.29 (m, 2H), 3.27-2.94 (m, 2H), 2.68-2.16 (m, 2H), 1.53-1.42 (m, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3R)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.17 g, 0.36 mmol)和Et3SiH (0.25 g, 2.15mmol)在DCM(1 mL, 15.73 mmol)中的溶液中加入BF3.Et2O(0.41 g, 2.86 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在50℃下搅拌8小时。冷却至室温后，将反应在室温下用水(10 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBDPrep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从20% B到35% B；检测器：UV 210 nm； 保留时间：4.7分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物111 (4,5-二氯-2-([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基]甲基)苯酚三氟乙酸)(10 mg, 8%): C17H22Cl2N2O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：357, 359 (3 : 2)，实测值 357, 359 (3 : 2)。1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.61-4.44 (m, 1H),4.00 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.74-3.57 (m, 2H), 3.43-3.35 (m, 3H), 3.18-3.06(m, 1H), 2.73-2.58 (m, 1H), 2.59-2.47 (m, 2H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.15-2.00(m, 1H), 1.99-1.85 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 2H), 1.36-1.07 (m, 2H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -76.96。
实施例157.化合物114 (2-[(R)-氨基[1-(3-氟氮杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 389171DEST_PATH_IMAGE305
步骤a:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-3-氟氮杂环丁烷-3-甲酸 (0.21 g,0.95 mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中加入CDI (0.15 g, 0.95 mmol)。搅拌30分钟后，在室温下向所得溶液加入N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)。然后将反应在室温下另外搅拌2小时。将所得溶液用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基]-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.11 g,25%): C28H40Cl2FN3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：620, 622 (3 : 2)，实测值 620,622 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基]-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸酯(0.11 g, 0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (4.0 mg, 0.003 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4(13 mg, 0.35 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，将所得混合物用水(30mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到3-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基]-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.12g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C25H36Cl2FN3O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：580, 582 (3 : 2)，实测值 580, 582 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-羰基]-3-氟氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(98 mg, 0.17 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有20 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：9 分钟内从30% B到80% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：7.74分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物114 (2-[(R)-氨基[1-(3-氟氮杂环丁烷-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(35 mg, 54% 两步总计): C16H20Cl2FN3O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：376, 378(3: 2)，实测值 376, 378 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.80(s, 1H), 4.51 (d, J = 35.4, 9.8 Hz, 1H), 4.30-4.00 (m, 2H), 3.98-3.60 (m,4H), 3.13-2.90 (m, 1H), 2.80-256 (m, 1H), 2.14-1.95 (m, 2H), 1.55-1.22 (m,3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -148.94。
实施例158.化合物119 ((R)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)； 化合物120 ((S)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 357127DEST_PATH_IMAGE306
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮(化合物117, 实施例145) (35 mg): 柱：CHIRALPAKIG, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH3/MeOH的MTBE，流动相B：MeOH；流速：20mL/min；梯度：14 分钟内从10% B到10% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 7.47分钟； RT2: 10.05 分钟。
在7.47分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物120 ((S)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)(10.2mg, 29%): C15H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：363, 365 (3 : 2)，实测值 363,365 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.68-4.47(m, 2H), 4.11 ((dd, J = 40.3, 13.8 Hz, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.76-3.53 (m,2H), 3.20-2.94 (m, 1H), 2.74-2.55 (m, 1H), 2.16-1.92 (m, 2H), 1.57-1.43 (m,1H), 1.41-1.13 (m, 2H)。
在10.05分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物119((R)-1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)(10.1 mg, 29%): C15H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：363, 365 (3 : 2)，实测值363, 365 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.68-4.47 (m, 2H), 4.11 ((dd, J = 40.3, 13.8 Hz, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.76-3.53(m, 2H), 3.20-2.94 (m, 1H), 2.74-2.55 (m, 1H), 2.16-1.92 (m, 2H), 1.57-1.43(m, 1H), 1.41-1.13 (m, 2H)。
实施例159.化合物122 (3,4-二氯-2-([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基]甲基)苯酚三氟乙酸)
Figure 453259DEST_PATH_IMAGE307
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲醇(中间体44的游离碱，实施例44) (0.30 g, 1.03 mmol)和Et3SiH (2.49 g, 21.54 mmol)在DCM(3mL)中的溶液中滴加BF3.Et2O(1.47 g, 10.34 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物用水(10 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过反相快速色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色泡沫形式得到4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)甲基]哌啶三氟乙酸(0.22 g, 57%): C13H17Cl2NO [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：274, 276 (3 : 2)，实测值 274, 276 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40 (d, J = 8.9 Hz, 1H),6.97 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.42-3.35 (m, 2H), 3.01-2.84 (m, 4H),2.13-1.91 (m, 1H), 1.90-1.77 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 2H)。
步骤b:
在室温下向(3R)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (0.35 g, 1.60 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入CDI (0.26 g, 1.60 mmol)。将混合物在室温下搅拌0.5小时。然后在室温下加入Et3N(0.73 g, 7.19 mmol)和4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)甲基]哌啶三氟乙酸 (0.220 g, 0.80 mmol)。将反应混合物在室温下另外搅拌1小时。将反应用水(50mL)猝灭，用EA(3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/2)洗脱，以灰白色泡沫形式得到(3R)-3-[4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.20 g, 72%): C23H32Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：471, 473 (3 : 2)，实测值 471, 473 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31 (d, J = 8.9 Hz, 1H),6.75 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.72-3.42(m, 3H), 3.35 (q, J = 8.7 Hz, 1H), 3.26-3.13 (m, 1H), 3.11-2.91 (m, 1H), 2.81(d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.56 (s, 1H), 2.22 (s, 1H), 2.10-1.82 (m, 2H), 1.67 (s,1H), 1.48 (s, 9H), 1.37-1.22 (m, 3H)。
步骤c:
在室温下向(3R)-3-[4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.41 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入BBr3(1.57 g,6.35 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将与用水(5 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column, 19 mm×250 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从30% B到40% B；检测器：UV 210 nm； 保留时间：5.11分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物122(3,4-二氯-2-([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基]甲基)苯酚三氟乙酸)(109.8 mg, 57%): C17H22Cl2N2O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：357,359 (3 : 2)，实测值 357, 359 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.20 (d, J =8.7 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.55-4.41 (m, 1H), 4.00 (d, J = 13.6Hz, 1H), 3.71-3.58 (m, 2H), 3.45-3.34 (m, 3H), 3.16-3.04 (m, 1H), 2.82 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 12.6 Hz, 1H), 2.46-2.27 (m, 1H), 2.16-1.96 (m,2H), 1.83-1.64 (m, 2H), 1.45-1.21 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.04.
实施例160.化合物123 (3,4-二氯-2-[(R)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸)； 化合物321 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸)
Figure 289497DEST_PATH_IMAGE308
步骤a:
通过制备手性HPLC在下述条件下分离3,4-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸(147.5 mg, 0.40 mmol): 柱：Chiralpak IA, 2×25cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.1% TFA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：20 分钟内从20% B到20% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 6.39 分钟； RT2: 13.31 分钟。
在6.39分钟以浅粉色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物123 (3,4-二氯-2-[(R)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸) (52 mg,33%): C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373, 375(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.8Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 6.8, 3.3 Hz, 1H), 4.58 (t, J = 15.6 Hz, 1H), 4.07 (dd,J = 24.8, 13.9 Hz, 1H), 3.75-3.58 (m, 2H), 3.46-3.34 (m, 3H), 3.15-3.04 (m,1H), 2.70-2.54 (m, 1H), 2.44-2.27 (m, 1H), 2.27-2.16 (m, 1H), 2.16-1.93 (m,2H), 1.59-1.26 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.35。
在13.31分钟以浅粉色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物321 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸)(59mg, 38%): C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373,375 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.77 (dd, J =8.8, 2.9 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 6.6, 2.0 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 22.9, 13.3Hz, 1H), 4.14-3.96 (m, 1H), 3.73-3.57 (m, 2H), 3.45-3.34 (m, 3H), 3.20-3.03(m, 1H), 2.71-2.53 (m, 1H), 2.45-2.27 (m, 1H), 2.27-2.15 (m, 1H), 2.15-1.91(m, 2H), 1.59-1.24 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.21。
实施例161.化合物124 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体1)； 化合物125 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体2)； 化合物121 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体3)； 化合物127 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体4)
Figure 154684DEST_PATH_IMAGE309
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的Et3N(0.35 g, 3.47 mmol)和4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶(0.50 g, 1.74 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入3-(氯磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.70 g, 2.60 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌30分钟后，将所得混合物用水(50 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-[[4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基]磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.65 g, 72%): C22H30Cl2N2O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：521, 523 (3 : 2)，实测值 521, 523 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.68 (s, 1H), 7.36 (s, 1H),3.97 (s, 3H), 3.97-3.89 (m, 1H), 3.82 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.66 (d, J = 6.8Hz, 2H), 3.60-3.54 (m, 1H), 3.50-3.39 (m, 2H), 3.05 (m, J = 12.0 Hz, 2H),2.37-2.24 (m, 2H), 1.97 (d, J = 13.3 Hz, 2H), 1.72-1.60 (m, 2H), 1.484 (s,9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-[[4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶-1-基]磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.65 g, 1.25 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入BBr3(2.50 g, 9.97 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，在室温下将所得混合物用水(5mL)猝灭。形成沉淀的固体，通过过滤收集。将滤饼用水(3×5 mL)洗涤并在真空烘箱中干燥，以灰白色固体形式得到4,5-二氯-2-[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-羰基]苯酚(0.45g, 88%): C16H20Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：407, 409 (3 : 2)，实测值 407,409 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.10 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.21-4.10(m, 1H), 3.90 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 3.74-3.66 (m, 3H), 3.58-3.40 (m, 2H),3.19 (t, J = 13.0 Hz, 2H), 2.52-2.42 (m, 2H), 2.00 (d, J = 13.5 Hz, 2H),1.86-1.71 (m, 2H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4,5-二氯-2-[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-羰基]苯酚(0.45 g, 1.10 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中加入NaBH4(63 mg, 1.66 mmol)。在室温下另外搅拌1小时后，将所得混合物在室温下用水(2 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从27% B到38% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.92分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚(0.40 g, 88%): C16H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：409, 411 (3 : 2)，实测值 409, 411 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H),4.77 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 3.89-3.68 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.09-3.02 (m,1H), 2.96-2.77 (m, 3H), 2.20-2.00 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.59-1.39 (m,3H)。
步骤d:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 (0.40 g, 0.98 mmol): 柱：CHIRALPAK AD-H, 2.0 cm×25 cm；流动相A：己烷 (0.1%DEA)，流动相B：EtOH；流速：18 mL/min；梯度：19 分钟内从50% B到50%B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 7.42 分钟； RT2: 10.38 分钟； RT3: 13.56 分钟； RT4: 15.99 分钟。
在7.42分钟以灰白色固体形式得到第1对映异构体作为化合物124 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体1) (30.4 mg, 8%):C16H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：409, 411 (3 : 2)，实测值 409, 411 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.2 Hz,1H), 3.89-3.68 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.96-2.77 (m,3H), 2.20-2.00 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.59-1.39 (m, 3H)。
在10.38分钟以灰白色固体形式得到第2对映异构体作为化合物125 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体2)(29.8 mg, 7%):C16H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：409, 411 (3 : 2)，实测值 409, 411 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.2 Hz,1H), 3.89-3.68 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.96-2.77 (m,3H), 2.20-2.00 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.59-1.39 (m, 3H)。
以灰白色固体形式在13.56分钟得到第3对映异构体作为化合物121 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体3)(29.3 mg, 7%):C16H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：409, 411 (3 : 2)，实测值 409, 411 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.2 Hz,1H), 3.89-3.68 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.96-2.77 (m,3H), 2.20-2.00 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.59-1.39 (m, 3H)。
在15.99分钟以灰白色固体形式得到第4对映异构体作为化合物127 (4,5-二氯-2-(羟基(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)哌啶-4-基)甲基)苯酚 异构体4)(27.5 mg, 7%):C16H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：409, 411 (3 : 2)，实测值 409, 411 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.39 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.2 Hz,1H), 3.89-3.68 (m, 3H), 3.21-3.12 (m, 2H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.96-2.77 (m,3H), 2.20-2.00 (m, 2H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.59-1.39 (m, 3H)。
实施例162.化合物126 (3,4-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基]哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸)
Figure 293542DEST_PATH_IMAGE310
步骤a:
在室温下向(3R)-1-[(叔丁氧基)羰基] 吡咯烷-3-甲酸 (0.40 g, 1.86 mmol)在DMF(8 mL)中的溶液中加入CDI (0.34 mg, 2.07 mmol)。在室温下搅拌0.5小时后，在室温下将Et3N (0.11 g, 10.79 mmol)和(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲醇(0.30 g,1.03 mmol)加入所得溶液中。在室温下另外搅拌1小时后，将所得混合物用水(80 mL)猝灭，用EA(3×25 mL)提取。将有机相合并，用盐水(4×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用EA洗脱，以灰白色泡沫形式得到(3R)-3-[4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.20 g,50%): C23H32Cl2N2O5 [M + H-56]+的LCMS (ESI)计算值：431, 433 (3 : 2)，实测值 431,433 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.83 (d, J =9.0 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 57.9, 13.0 Hz, 1H), 3.92(s, 4H), 3.73-2.87 (m, 7H), 2.52 (dt, J = 38.5, 12.3 Hz, 1H), 2.3-1.8 (m,4H), 1.47 (s, 9H), 1.41-1.29 (m, 3H)。
步骤b:
在室温下向(3R)-3-[4-[(2,3-二氯-6-甲氧基苯基)(羟基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.41 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入BBr3(1.56 g,6.35 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。然后将反应在0℃下用水(5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD PrepColumn 19 mm×250 mm, 10 µm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从25% B到33% B；检测器：UV 210 nm；保留时间: 4.15分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物126 (3,4-二氯-2-[羟基([1-[(3R)-吡咯烷-3-羰基] 哌啶-4-基])甲基]苯酚三氟乙酸) (147.5 mg, 76%):C17H22Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：373, 375 (3 : 2)，实测值 373, 375 (3 :2)。1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.19 (s, 1H), 8.93 (d, J = 29.9 Hz, 2H), 7.37(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.50 (br, 1H), 4.94 (d, J =7.2 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 27.3, 13.0 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 27.8, 13.6 Hz,1H), 3.61-3.45 (m, 1H), 3.33-3.07 (m, 3H), 3.06-2.86 (m, 1H), 2.50-2.40 (m,2H), 2.29-2.09 (m, 2H), 2.02-1.78 (m, 2H), 1.49-0.97 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, DMSO-d 6) δ -74.32。
实施例163.化合物128 (4,5-二氯-2-[羟基([1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]苯酚)
Figure 876970DEST_PATH_IMAGE311
步骤a:
在氩气气氛下，在0℃下向搅拌的1,2-二氯-3-碘-4-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.60 g, 1.82 mmol)在THF(10 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl(1.37 mL, 2.74 mmol, 2 MTHF溶液)。在氩气气氛下，在0℃下将所得溶液搅拌0.5小时。然后在氩气气氛下，在0℃下将4-甲酰基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 2.19 mmol)在THF(1 mL)中的溶液滴加至所得溶液中。将所得溶液在室温下另外搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(20mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.65 g, 75%): C21H29Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：430, 432(3 : 2)，实测值 430, 432 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34 (d, J = 8.9Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.10-5.92 (m, 1H), 5.47-5.33 (m, 2H), 4.95(t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.69-4.57 (m, 2H), 3.69-3.36 (m, 2H), 3.36-3.11 (m, 2H),2.39 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.85-1.71 (m, 1H), 1.66-1.49 (m,1H), 1.49-1.42 (m, 10H), 1.43-1.22 (m, 2H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.65 g, 1.51 mmol)在DCM(8 mL)中的溶液中加入TFA (4 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。所得溶液减压浓缩，以黄色油的形式得到(氮杂环庚烷-4-基)[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲醇(0.60 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C16H21Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：330, 332 (3 : 2)，实测值330, 332 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的(3S)-1-[(叔丁氧基)羰基]吡咯烷-3-甲酸 (0.52 g, 2.42mmol)和HATU (0.92 g, 2.42 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入(氮杂环庚烷-4-基)[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲醇 (0.40 g, 1.21 mmol)和Et3N (0.24 g, 2.42mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。在室温下将反应用水(20 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色半固体形式得到(3S)-3-(4-[[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.48 g, 60% 两步总计): C26H36Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：527, 529 (3 : 2)，实测值 527, 529 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39-7.32 (m, 1H), 6.89-6.71 (m, 1H), 6.09-5.96 (m, 1H), 5.48-5.33 (m, 2H), 4.99-4.90 (m, 1H), 4.68-4.59 (m, 2H), 3.88-3.52 (m, 4H), 3.52-3.27 (m, 4H), 3.27-3.04 (m, 1H), 2.58-2.35 (m, 1H), 2.30-1.96 (m, 3H), 1.88 (dd, J = 31.0, 12.6Hz, 1H), 1.68-1.53 (m, 1H), 1.53-1.43 (m, 10H), 1.43-1.22 (m, 2H)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3S)-3-(4-[[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.48 g, 0.91 mmol)和Pd(PPh3)4 (21 mg, 0.02 mmol)在THF(5 mL)中的混合物中加入NaBH4 (69 mg, 1.82 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(10 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用40% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到(3S)-3-[4-[(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 90%): C23H32Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：487, 489 (3 : 2)，实测值 487, 489 (3 : 2)；
步骤e:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(10 mg, 0.06 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入TFA(1.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm n；流动相A：具有10 mmoL/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到40% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：6.62分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物128 (4,5-二氯-2-[羟基([1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]苯酚)(2.7 mg, 36% 两步总计): C18H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389(3 : 2)，实测值 387, 389 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.31-7.19 (m, 1H),6.75-6.64 (m, 1H), 5.16-5.01 (m, 1H), 3.86-3.63 (m, 2H), 3.63-3.49 (m, 1H),3.49-3.34 (m, 2H), 3.29-3.10 (m, 3H), 3.12-2.98 (m, 1H), 2.30-1.81 (m, 5H),1.81-1.35 (m, 4H)。
实施例164.化合物322 (3,4-二氯-2-[(R)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体1)； 化合物129 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体2)； 化合物323 (3,4-二氯-2-[(R)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体3)；和化合物130 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体4)
Figure 923423DEST_PATH_IMAGE312
步骤a:
通过制备SFC在以下条件下分离(3S)-3-[4-[(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1- 羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (350 mg, 0.72 mmol): 柱：Chiral pakAD-H, 2×25 cm (5 μm)；流动相A：CO2 (70%)，流动相B：IPA (2 mM NH3-MeOH)；流速：50mL/min；梯度：18% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 6.75分钟, RT2: 7.90 分钟,RT3: 8.67 分钟, RT3: 8.67 分钟, RT4: 11.57分钟。注射体积: 0.4 mL。
在6.75分钟收集第1峰并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(3S)-3-[(4R)-4-[(S)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(55mg, 16%)。
在7.90分钟收集第2峰并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(3S)-3-[(4S)-4-[(S)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸酯(35 mg,10%)。
在11.57分钟收集第4峰并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(3S)-3-[(4S)-4-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg, 14%)。
在8.67分钟收集第3峰并减压浓缩。将残渣通过制备手性HPLC在下述条件下纯化:柱：CHIRAL ART Cellulose-SB, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.1% FA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：14 分钟内从10% B到10% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：10.26分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(3S)-3-[(4R)-4-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40 mg, 11%)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[(4R)-4-[(S)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(55 mg, 0.113 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA (0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm，流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到40% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：6.62分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物322 (3,4-二氯-2-[(R)-羟基[-1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体1)(20 mg, 34%): C18H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389 (3 : 2)，实测值 387, 389 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.30 (dd,J = 8.8, 4.6 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 8.8, 6.3 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 6.2, 3.2Hz, 1H), 3.78-3.64 (m, 2H), 3.64-3.47 (m, 3H), 3.47-3.35 (m, 4H), 2.48-2.24(m, 1H), 2.24-1.90 (m, 4H), 1.78-1.51 (m, 3H), 1.51-1.32 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.11。
在室温下向搅拌的(3S)-3-[(4S)-4-[(S)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(35 mg, 0.07 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱 19×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到42% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.47分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物129 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体2)(19 mg, 50%): C18H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389 (3 : 2)，实测值 387, 389 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.30(dd, J = 8.8, 4.2 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H), 5.13 (dd, J =11.7, 6.0 Hz, 1H), 3.93-3.72 (m, 1H), 3.72-3.58 (m, 3H), 3.58-3.48 (m, 1H),3.48-3.34 (m, 4H), 2.44-2.30 (m, 1H), 2.24-1.87 (m, 4H), 1.82-1.43 (m, 4H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.01。
在室温下向搅拌的(3S)-3-[(4R)-4-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40 mg, 0.08 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm, 5μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：10 分钟内从2% B到19% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.63分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物323 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体3)(29 mg, 67%): C18H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389 (3 : 2)，实测值 387, 389 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.30(dd, J = 8.8, 4.9 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 8.8, 7.2 Hz, 1H), 5.09 (dd, J =10.0, 6.3 Hz, 1H), 3.85-3.73 (m, 2H), 3.73-3.49 (m, 3H), 3.47-3.34 (m, 4H),2.42-2.29 (m, 1H), 2.21-1.99 (m, 3H), 1.99-1.87 (m, 1H), 1.80-1.36 (m, 4H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.03。
在室温下向搅拌的(3S)-3-[(4S)-4-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)(羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-羰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.10 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入TFA (0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到40% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：6.62分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物130 (3,4-二氯-2-[(S)-羟基[1-[(3S)-吡咯烷-3-羰基]氮杂环庚烷-4-基]甲基]苯酚三氟乙酸 异构体4)(43 mg, 79 %): C18H24Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389 (3 : 2)，实测值 387, 389 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.30 (dd,J = 8.8, 4.3 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H), 5.16-5.06 (m, 1H),3.83-3.55 (m, 4H), 3.55-3.34 (m, 5H), 2.46-2.23 (m, 1H), 2.23-1.88 (m, 4H),1.80-1.45 (m, 4H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.11。
实施例165.化合物132 (2-[(R)-氨基[1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 908697DEST_PATH_IMAGE313
步骤a:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和Et3N (48 mg, 0.48 mmol)在DCM(1 mL)中的混合物中加入2-甲氧基乙烷-1-磺酰氯(45 mg, 0.29 mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时。在0℃下将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 56%): C22H34Cl2N2O5S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543 (3 : 2)，实测值541, 543 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.23 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.92 (m, 1H), 5.46-5.31 (m, 2H), 4.61-4.41 (m, 3H), 3.86-3.77 (m, 2H), 3.74(t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.78-2.61 (m,2H), 1.90-1.79 (m, 1H), 1.79-1.59 (m, 1H), 1.54-1.40 (m, 1H), 1.40-1.23 (m,2H), 1.17 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg,0.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (2 mg, 0.002 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4 (13 mg,0.34 mmol)。在室温下搅拌1小时后，将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 粗制), 其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H30Cl2N2O5S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 2)，实测值501, 503 (3 : 2)。
步骤c:
将(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg, 0.18 mmol)和HCl(4N, 1 mL)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到33% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.63分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物132 (2-[(R)-氨基[1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(47.4 mg, 56%两步总计): C15H22Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399 (3 : 2)，实测值397, 399 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.18(d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.77-3.65 (m, 3H), 3.36 (s,3H), 3.28 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.87 (td, J = 12.3, 2.6 Hz, 1H), 2.76 (td, J =12.2, 2.9 Hz, 1H), 2.28-2.16 (m, 1H), 2.02 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.55-1.22(m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.98.
实施例166.化合物110 (2-[(R)-氨基[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)
Figure 218455DEST_PATH_IMAGE314
步骤a:
在氩气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (50 mg, 0.12 mmol)和Et3N(25 mg, 0.25mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入3-(氯磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(45 mg, 0.17mmol) 。在氩气氛下，将所得混合物在室温下搅拌4小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以浅黄色油的形式得到3-([4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(25 mg, 32%): C28H43Cl2N3O6S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：652,654 (3 : 2)，实测值 652, 654 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.21 (s, 1H),6.98 (s, 1H), 6.10-5.94 (m, 1H), 5.46-5.29 (m, 2H), 4.59-4.54 (m, 2H), 4.41(s, 1H), 3.94-3.76 (m, 3H), 3.75-3.53 (m, 4H), 3.37 (dt, J = 10.8, 7.7 Hz,1H), 2.86-2.67 (m, 2H), 2.17-2.02 (m, 1H), 1.96-1.78 (m, 1H), 1.47 (s, 9H),1.39-1.20 (m, 4H), 1.15 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-([4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.14 g, 0.22 mmol)和Pd(PPh3)4(24 mg, 0.02 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(26 mg, 0.69 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用EA(3×5 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/ 4)洗脱，以浅黄色固体形式得到3-([4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.10 g, 73%)； C25H39Cl2N3O6S2 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：612, 614 (3 : 2)，实测值 612, 614 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-([4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.10 g, 0.16 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(6 mL)，然后在室温下加入TFA(3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 5 µm, 19 mm×250 mm；流动相A：具有10 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从10% B到80% B；检测器：UV254 nm； 保留时间：5.7分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物110 (2-[(R)-氨基[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(20mg, 30%)。C16H23Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：408, 410 (3 : 2)，实测值 408,410 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 3.98-3.82(m, 2H), 3.82-3.65 (m, 2H), 3.20-3.11 (m, 2H), 3.02 (dt, J = 13.1, 6.7 Hz,1H), 2.95-2.71 (m, 3H), 2.20-1.81 (m, 4H), 1.55-1.44 (m, 1H), 1.44-1.20 (m,2H)。
实施例167.化合物112 (2-[(R)-氨基([1-[吡咯烷-3-磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚 异构体1)； 化合物118 (2-[(R)-氨基([1-[吡咯烷-3-磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚 异构体2)
Figure 289180DEST_PATH_IMAGE315
步骤a:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离2-[(R)-氨基[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚 (20 mg, 0.049 mmol) (化合物110, 实施例166): 柱：Chiralpak ID-2, 2×25 cm, 5 µm；流动相A：MeOH (0.1% IPA)，流动相B：无；流速：16 mL/min；梯度：13 分钟内从100% A到100% A；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 6.191分钟； RT2: 10.888 分钟。
在6.191分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物118 (2-[(R)-氨基([1-[吡咯烷-3-磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚 异构体2)(8.1 mg,40%): C16H23Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：408, 410 (3 : 2)，实测值 408, 410(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 3.91 (d, J =7.7 Hz, 1H), 3.86-3.66 (m, 3H), 3.20-3.11 (m, 2H), 3.09-2.95 (m, 1H), 2.93-2.73 (m, 3H), 2.17-2.02 (m, 2H), 2.05-1.80 (m, 2H), 1.49 (d, J = 13.0 Hz,1H), 1.41-1.24 (m, 2H)。
在10.888分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物112 (2-[(R)-氨基([1-[吡咯烷-3-磺酰基]哌啶-4-基])甲基]-4,5-二氯苯酚 异构体1)(7.7 mg,38%): C16H23Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：408, 410 (3 : 2)，实测值 408, 410(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 3.99-3.85 (m,2H), 3.81-3.67 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 2H), 3.09-2.95 (m, 1H), 2.94-2.71 (m,3H), 2.18-2.06 (m, 2H), 2.05-1.79 (m,2H), 1.49 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.44-1.22 (m, 2H)。
实施例168.化合物141 (2-[(R)-氨基[1-(哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 342586DEST_PATH_IMAGE316
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.238 mmol)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(67 mg, 0.358 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入碳酸二(三氯甲基)酯(0.10 g,0.36 mmol)和Et3N (48 mg, 0.48 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(30 mL)猝灭，用EA(3×15 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用75% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到4-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.10 g, 66%): C29H44Cl2N4O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：631, 633 (3 : 2)，实测值 631, 633 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.22 (s, 1H), 6.97 (s, 1H),6.06-6.01 (m, 1H), 5.49-5.31 (m, 2H), 4.63-4.54 (m, 2H), 4.45-4.31 (m, 1H),3.73 (dd, J = 25.4, 13.1 Hz, 2H), 3.45-3.40 (m, 4H), 3.22-3.17 (m, 4H), 2.68(dd, J = 29.0, 16.0 Hz, 2H), 2.08-2.04 (m, 1H), 1.92-1.88 (m, 1H), 1.79-1.68(m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.38-1.34 (m, 1H), 1.30-1.25 (m, 1H), 1.15 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.15g, 0.24 mmol)和Pd(PPh3)4 (27 mg, 0.02 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(18 mg, 0.47 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌1小时后，在室温下将所得混合物用水(2mL)猝灭并减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C26H40Cl2N4O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：591, 593 (3 : 2)，实测值 591, 593 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向4-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90 mg, 0.15 mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣溶解于DCM(5 mL)，然后在室温下加入TFA(2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeShield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到20% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.88分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物141 (2-[(R)-氨基[1-(哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(89 mg, 79% 两步总计):C17H24Cl2N4O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：387, 389 (3 : 2)，实测值 387, 389 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.16 (d, J = 9.7 Hz,1H), 3.89 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.72 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 3.46 (t, J = 5.1Hz, 4H), 3.24 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 2.87 (dt, J = 30.4, 12.7 Hz, 2H), 2.30 (d,J = 11.1 Hz, 1H), 1.97 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.45-1.19 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.10。
实施例169.化合物145 ((R)-2-(氨基(1-((2-羟基乙基)磺酰基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 120049DEST_PATH_IMAGE317
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的2-[(R)-氨基[1-(2-甲氧基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚(化合物132的游离碱，实施例165) (18 mg, 0.05 mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入BBr3 (57 mg, 0.23 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌6小时。在0℃下将反应用水(3 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：X select CSHOBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.65分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅褐色固体形式得到化合物145 (2-[(R)-氨基[1-(2-羟基乙烷磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸) (11 mg, 63%):C14H20Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：383, 385 (3 : 2)，实测值 383, 385 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.94 (s, 1H), 8.26 (s, 3H), 7.60 (s, 1H),7.10 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 3.73 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.65 (d,J = 12.1 Hz, 1H), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.16 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.81-2.66 (m,2H), 1.96 (t, J = 13.7 Hz, 2H), 1.4-1.23 (m, 1H), 1.22-1.12 (m, 1H)； 19F NMR(376 MHz, DMSO-d 6) δ -73.61。
实施例170.化合物184 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 600709DEST_PATH_IMAGE318
步骤a:
在0℃下向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (中间体1, 实施例1) (2.60 g, 8.22 mmol)和K2CO3 (2.30 g, 16.45 mmol)在DMF(15 mL)中的混合物中滴加碘甲烷(2.3 g, 16.45 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。在0℃下通过加入水(30 mL)将反应猝灭。将所得混合物用EtOAc(8×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(6×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C15H17F2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：330, 332 (3 : 2)，实测值 330, 332(3: 2)； 1H NMR (300 MHz, M乙醇-d 4) δ 7.64 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 4.48-4.34 (m,1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (q, J = 3.4 Hz, 1H), 3.51 (tt, J = 10.8, 3.8 Hz, 1H),3.23 (ddd, J = 14.0, 11.8, 2.9 Hz, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.10 (s, 3H),1.91 (dt, J = 13.6, 8.3 Hz, 2H), 1.69-1.38 (m, 2H)。
步骤b:
将1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶-1-基]乙-1-酮 (1.69 g, 1 当量)在HCl水溶液(17 mL, 6 N)中的溶液回流4小时。将所得混合物真空浓缩，以黄色油的形式得到4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)羰基]哌啶: C13H15Cl2NO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：288, 290 (3 : 2)，实测值 288, 290 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.48 g, 3.33mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中加入EDCI (0.80 mg, 4.16 mmol)和HOBt(0.56 g, 4.16mmol)。在室温下向上述混合物中加入4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶(0.8 g, 2.77mmol)和Et3N (0.84 g, 8.34 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌12小时。将混合物用水(15 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶(0.53 g, 39%): C19H23Cl2NO5[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：416, 418 (3 : 2)，实测值 416, 418 (3 : 2)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶 (0.10 g, 0.24 mmol)和甲胺盐酸盐 (81 mg, 1.20mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中一次加入Ti(OEt)4 (0.28 g, 1.20 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将反应混合物搅拌12小时。冷却至室温后，在室温下将NaBH4(18 mg, 0.48 mmol)加入上述混合物中。添加后，将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用H2O(40mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮(83 mg, 84%): C17H24Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：391,393 (3 : 2)，实测值 391, 393 (3 : 2)。
步骤e:
在0℃下向搅拌的1-[4-[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 (60 mg, 0.15 mmol) 在DCM(1 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应用MeOH (2 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm,5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.92分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物184 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(16 mg, 21%): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.43 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.72-4.46 (m, 2H), 4.31-4.05 (m, 2H), 3.80-3.55(m, 2H), 3.18-3.03 (m, 1H), 2.86-2.67 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.46 (s, 1H),2.03 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.45-1.13 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.95。
实施例171.化合物182 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 893150DEST_PATH_IMAGE319
步骤a:
在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶 (步骤c, 实施例170) (0.10 g, 0.24 mmol)和乙胺盐酸盐 (97mg, 1.20 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中加入Ti(OEt)4 (0.27 g, 1.20 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将反应混合物搅拌12小时。冷却至室温后，在室温下将NaBH4(18 mg, 0.48mmol)加入上述混合物中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用H2O(40mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×3 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用30% ACN水溶液(加0.5% TFA)洗脱。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以黄色油的形式得到1-(4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(乙基氨基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮(0.10 g, 74%):C21H26Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：405, 407 (3 : 2)，实测值 405, 407 (3 :2)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的1-(4-((4,5-二氯-2-甲氧基苯基)(乙基氨基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮 (60 mg, 0.15 mmol) 在DCM(1 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应用MeOH (2 mL)猝灭。将混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 μm；流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到28%B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.42分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物182 (1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(20 mg, 38 %): C17H24Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：391, 393 (3 : 2)，实测值 391, 393 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.43 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.71-4.43 (m, 2H), 4.30-4.05 (m, 2H), 3.74-3.56(m, 2H), 3.07-2.82 (m, 3H), 2.75-2.53 (m, 1H), 2.50-2.36 (m, 1H), 2.05 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.49-1.34 (m, 2H), 1.30 (t, J = 7.3 Hz, 3H), 1.24-1.09 (m,1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.05.
实施例172.化合物187 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2,3-二氯-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 750248DEST_PATH_IMAGE320
步骤a:
在室温下向搅拌的HOBt(48 mg, 0.36 mmol), EDCI (68 mg, 0.36 mmol) (5mL)和(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (52 mg, 0.36 mmol)在DMF中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[23-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和Et3N (48 mg, 0.48 mmol)。在氮气氛下，在室温下将反应溶液搅拌12小时。将反应在室温下用水(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×20mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.23 g, 88%): C25H36Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：547, 549 (3 : 2)，实测值 547, 549 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[2,3-二氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.13 g, 0.24 mmol)和Pd(PPh3)4 (27 mg, 0.02 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (18 mg, 0.48 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将反应用NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，以浅褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 66%): C22H32Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：507, 509 (3 : 2)，实测值 507, 509 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(2,3-二氯-6-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.20mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1.5 mL)。在氮气氛下，在室温下将所得溶液搅拌30分钟。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到17% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物187 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2,3-二氯-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(37 mg, 38%): C15H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：363, 365 (3 : 2)，实测值363, 365 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.47 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.92 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 4.80-4.41 (m, 3H), 4.19 (dd, J = 66.7, 13.9 Hz, 1H), 3.79-3.54 (m, 2H), 3.20-2.95 (m, 1H), 2.87-2.44 (m, 2H), 2.07 (s, 1H), 1.55-1.16(m, 3H)。
实施例173.化合物146 ((R)-2-(氨基(1-(6-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 444534DEST_PATH_IMAGE321
步骤a:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)和2-氯-6-硝基吡啶(0.13 g,0.72 mmol)在DMSO (2 mL)中的溶液中加入K2CO3(0.13 g, 0.96 mmol)。使反应升温至80℃并搅拌2小时。将所得混合物用EA(20 mL)和水(20 mL)稀释。然后将分配的水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 46%): C24H30Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543(3 : 2)，实测值 541, 543 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 0.22mmol)和Pd(PPh3)4 (2.56 mg, 0.002 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(16.77 mg,0.44 mmol)。在氮气氛下，在室温下搅拌30分钟后，将所得混合物用水(2 mL)猝灭并减压浓缩，以浅黄色固体形式得到N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.11g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C21H26Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 2)，实测值 501, 503(3 : 2)。
步骤c:
将N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.11 g, 0.22 mmol)在HCl(1 mL, 4M)和1,4-二噁烷 (1 mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液通过反相色谱纯化，用42% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到2-[(R)-氨基[1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚(75 mg, 80%): C17H18Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399 (3 : 2)，实测值 397, 399 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.98 (s, 1H), 7.93-7.81(m, 1H), 7.68-7.55 (m, 1H), 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.6 Hz,1H), 7.11 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 4.37-4.17 (m, 2H),2.97-2.82 (m, 2H), 2.20 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.03-1.88 (m, 1H), 1.38-1.22(m, 3H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的2-[(R)-氨基[1-(6-硝基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚(75 mg, 0.19 mmol)和SnCl2(0.36 g, 1.89 mmol)在MeOH(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(12 N, 3 mL)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将残渣通过反相色谱在下述条件下纯化: 柱, C18； 流动相, ACN水溶液(加0.05% TFA)， 50分钟内5%-80%梯度；检测器：UV 210 nm，以灰白色固体形式得到化合物146 (2-[(R)-氨基[1-(6-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(35 mg, 50%): C17H20Cl2N4O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：367, 369 (3 : 2)，实测值 367, 369 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,DMSO-d 6) δ 11.00 (s, 1H), 8.33 (s, 3H), 7.63 (s, 1H), 7.57 (br, 2H), 7.13 (s,1H), 6.19-6.14 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.13 (d, J = 13.2 Hz,1H), 3.95 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.97-2.92 (m, 2H), 2.18 (d, J = 10.5小时z,1H), 1.97 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.31-1.21 (m, 3H)。
实施例174.化合物147 ((R)-2-(氨基(1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 17467DEST_PATH_IMAGE322
步骤a:
在室温下向(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 0.36 mmol)和5-溴-2-氟吡啶(94 mg, 0.54 mmol)在ACN(2 mL)中的溶液中加入K2CO3 (99 mg, 0.72 mmol)。使反应升温至70℃，在氮气氛下在相同温度下搅拌3小时。将所得混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用EA/PE (1/1)洗脱，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15g, 68%): C24H30BrCl2N3O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：574, 576, 578, (2 : 3 : 1)，实测值 574, 576, 578, (2 : 3 : 1)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (60 mg, 0.10 mmol)、甲基[2-(甲基氨基)乙基]胺 (2 mg, 0.02 mmol)和三氟乙酰胺(24 mg, 0.21 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入CuI (4 mg, 0.02 mmol)和Cs2CO3 (68 mg, 0.21 mmol)。将所得混合物用氮脱气三次，在氮气氛下在100℃下搅拌12小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(5 mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg, 89%): C24H32Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：511, 513 (3 : 2)，实测值511, 513 (3 : 2)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (60 mg, 0.12mmol)和Pd(PPh3)4 (27 mg, 0.02 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (9 mg, 0.24mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(3 mL)猝灭并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C21H28Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：471, 473(3 : 2)，实测值 471, 473 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.11 mmol) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：X select CSHOBD柱 30×150 mm 5μm；流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到25%B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.25分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物147 ((R)-2-(氨基(1-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(15 mg, 38% 两步总计): C17H20Cl2N4O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：367, 369 (3 : 2)，实测值 367, 369 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 11.96(s, 1H), 11.1-10.9 (m, 1H), 8.30 (s, 3H), 7.68-7.56 (m, 2H), 7.41 (s, 2H),7.12 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.26 (dd, J = 7.0, 1.9 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.24(s, 1H), 3.92 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.09-2.89 (m,2H), 2.25-2.12 (m, 1H), 1.97 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.36-1.28 (m, 2H), 1.28-1.11 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, DMSO-d 6) δ -73.48.
实施例175.化合物148 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸)
Figure 62784DEST_PATH_IMAGE323
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和Et3N (96 mg,0.95 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入4-硝基苯基甲酰氯 (0.11 g, 0.57 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用80% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸4-硝基苯基酯(0.12 g, 43%): C26H31Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：584, 586 (3 :2)，实测值 584, 586 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-硝基苯基 4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸酯 (0.30 g, 0.51 mmol)和氮杂环丁烷-3-醇 (0.11 g, 1.54 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中加入K2CO3 (0.14 g, 1.03mmol)。在150℃下用微波辐射照射反应混合物30分钟。过滤所得混合物。将滤液通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.19 g, 71%): C23H33Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：518,520 (3 : 2)，实测值 518, 520 (3 : 2)。
步骤c:
在氮气下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g,0.19 mmol)和Pd(PPh3)4 (22 mg, 0.02 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(14 mg,0.38 mmol)。在氮气下将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(50 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 粗制)，其不经进一步纯化而用于后续步骤: C20H29Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：478, 480 (3 : 2)，实测值 478, 480 (3 : 2)。
步骤d:
将N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.11 mmol)和HCl水溶液(6 N, 0.5 mL)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV220 nm； 保留时间：5.6分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物148 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸)(5 mg, 10% 两步总计): C16H21Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：374,376 (3 : 2)，实测值 374, 376 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (s, 1H),7.10 (s, 1H), 5.27-5.20 (m, 1H), 4.35-4.07 (m, 2H), 4.06-3.55 (m, 5H), 3.32-3.06 (m, 2H), 2.50-2.40 (m, 1H), 2.15-2.03 (m, 1H), 1.53-1.45 (m, 2H), 1.41-1.36 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.00.
实施例176.化合物149 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-4-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 457993DEST_PATH_IMAGE324
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 0.36 mmol)和4-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑(0.19 g, 0.43 mmol)在DMSO(3 mL)中的溶液中加入Cs2CO3 (0.35 g,1.07 mmol), L-脯氨酸(16 mg, 0.14 mmol)和CuI(14 mg, 0.07 mmol)。将所得混合物用氮脱气三次，在氮气氛下在120℃下搅拌24小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用65% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30 mg, 9%):C41H44Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：727, 729 (3 : 2)，实测值 727, 729 (3 :2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30 mg, 0.04 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.004 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(3 mg, 0.08 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)在室温下猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到 (S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C38H40Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：687, 689 (3 : 2)，实测值 687, 689 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-4-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30 mg, 0.04 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到20% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.28分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物149 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-4-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(4.4 mg, 23% 两步总计): C15H18Cl2N4O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：341, 343 (3 : 2)，实测值 341, 343 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.74 (s, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.27 (d, J = 9.7 Hz, 1H),3.77 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.62-3.52 (m, 1H), 3.20-3.02 (m, 2H), 2.47-2.30(m, 1H), 2.21 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 1.83-1.69 (m, 1H), 1.69-1.47 (m, 2H)； 19FNMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.11。
实施例177.化合物150 ((R)-2-(氨基(1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 6786DEST_PATH_IMAGE325
步骤a:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80 mg, 0.20 mmol)和5-溴-2-氟吡啶(0.17 g,0.96 mmol)在ACN(3 mL)中的溶液中加入K2CO3 (53 mg, 0.38 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在70℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(40 mL)稀释，用EA(3×30mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg, 49%): C24H30BrCl2N3O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：574, 576,578 (2 : 3 : 1)，实测值 574, 576, 578 (2 : 3 : 1)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(4-溴吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg, 0.10 mmol)、甲基[2-(甲基氨基)乙基]胺(1.9 mg, 0.02 mmol)和三氟乙酰胺 (24 mg, 0.21 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入CuI (4 mg, 0.02 mmol)和Cs2CO3 (68 mg, 0.21 mmol)。将所得混合物用氮气氛脱气三次，并在氮气氛下在100℃下搅拌12小时。将所得混合物用水(20mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×5 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg,89%): C24H32Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：511, 513, (3 : 2)，实测值 511,513, (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (60 mg, 0.12 mmol)和Pd(PPh3)4 (27 mg, 0.02 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4 (8.9 mg, 0.24 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(3 mL)在室温下猝灭并减压浓缩。将残渣用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)通过反相色谱纯化，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 54%): C21H28Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：471, 473, (3 : 2)，实测值 471, 473, (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.11 mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱: X select CSHOBD柱 30×150 mm 5 μmn； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到23% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.13分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物150 ((R)-2-(氨基(1-(4-氨基吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(20 mg, 37%): C17H20Cl2N4O [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：367,369 (3 : 2)，实测值 367, 369 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.53 (d, J =7.2 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.32 (dd, J = 7.1, 2.1 Hz, 1H), 6.08(d, J = 2.1 Hz, 1H), 4.20 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 13.4 Hz, 1H),3.86 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.11 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.07-2.95 (m, 1H),2.51-2.41 (m, 1H), 2.12 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.60-1.30 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -76.94.
实施例178.化合物151 (2-[(R)-氨基[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 94828DEST_PATH_IMAGE326
步骤a:
在氮气氛下，在80℃下将(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol), 5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺 (52 mg, 0.29 mmol)和K2CO3 (66 mg, 0.48 mmol)在ACN(3 mL)中的混合物搅拌6小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/2)洗脱，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2- (丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.11 g, 71%): C21H29Cl2N5O2S2 [M +H+]+的LCMS (ESI)计算值：518, 520 (3 : 2)，实测值 518, 520 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.40 (dd, J =21.4, 13.8 Hz, 2H), 4.61-4.65 (m, 2H), 4.47-4.39 (m, 1H), 3.98-3.90 (m, 1H),3.77 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 3.05-2.84 (m, 2H), 2.12 (d, J = 13.4 Hz, 2H),1.47-1.43 (m, 1H), 1.39-1.20 (m, 2H), 1.16 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气下在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g,0.21 mmol)和Pd(PPh3)4 (48 mg, 0.04 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(16 mg,0.42 mmol)。在氮气下将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(50 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以褐色固体形式得到粗制(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C18H25Cl2N5O2S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：478, 480(3 : 2)，实测值 478, 480 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 粗制)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：X select CSH OBD柱 30×150 mm 5 µm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到23% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.48分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物151 (2-[(R)-氨基[1-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(37 mg, 47% 两步总计): C14H17Cl2N5OS [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：374, 376 (3 : 2)，实测值 374, 376 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.45 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.20 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 13.1 Hz,1H), 3.71 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.22-3.01 (m, 2H), 2.40-2.36 (m, 1H), 2.02-2.10 (m, 1H), 1.51-1.57 (m, 1H), 1.46-1.30 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-77.09。
实施例179.化合物154 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-3-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 299544DEST_PATH_IMAGE327
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 0.60 mmol)和3-碘-1-(三苯基甲基)-1H-吡唑(0.31 g, 0.72 mmol)在DMSO(3 mL)中的溶液中加入Cs2CO3 (0.58 g,1.79 mmol), L-脯氨酸(27 mg, 0.24 mmol)和CuI(23 mg, 0.12 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在120℃下搅拌24小时。冷却至室温后，将反应溶液用水(30 mL)稀释，用EA(3×30mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用65% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-3-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 8%): C41H44Cl2N4O2S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：727, 729 (3 : 2)，实测值 727, 729 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-3-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.07 mmol)和Pd(PPh3)4 (8 mg, 0.01 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(5 mg, 0.14 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-3-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C38H40Cl2N4O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：687, 689 (3 : 2)，实测值 687, 689 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[1-(三苯基甲基)-1H-吡唑-3-基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg, 0.07 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到28% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.65分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物154 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-3-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(2.4 mg, 8% 两步总计): C15H18Cl2N4O [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：341, 343 (3 : 2)，实测值 341, 343 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.64 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.18 (d, J = 9.8Hz, 1H), 3.84 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.89 (td, J =12.6, 2.9 Hz, 1H), 2.83-2.70 (m, 1H), 2.33-2.21 (m, 1H), 2.08-1.99 (m, 1H),1.60-1.48 (m, 1H), 1.44-1.30 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.09。
实施例180.化合物158 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)
Figure 498444DEST_PATH_IMAGE328
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (50 mg, 0.12 mmol)和Et3N(24 mg,0.24 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中加入1H-吡唑-4-磺酰氯(20 mg, 0.12 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在0℃下搅拌1小时。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05 TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到 (S)- N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 85%): C22H30Cl2N4O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：549, 551 (3 : 2)，实测值 549, 551 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88(s, 2H), 7.20 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.11-5.86 (m, 1H), 5.46-5.22 (m, 2H),4.67-4.07 (m, 3H), 3.85-3.71 (m, 2H), 2.18 (t, J = 11.5 Hz, 2H), 2.09 (d, J =13.2 Hz, 1H), 1.79-1.68 (m, 1H), 1.61-1.27 (m, 3H), 1.16 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (70 mg, 0.13mmol)和Pd(PPh3)4 (1.5 mg, 0.001 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4 (10 mg,0.26 mmol)。在氮气下，在室温下搅拌30分钟后，将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到 (S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H26Cl2N4O4S2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：509, 511 (3 : 2)，实测值 509, 511 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 0.14 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从11% B到31% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.68分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物158 (2-[(R)-氨基[1-(1H-吡唑-4-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚三氟乙酸)(49.9 mg, 75% 两步总计): C15H18Cl2N4O3S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：405, 407 (3 : 2)，实测值 405, 407 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)1H NMR δ 8.00 (s, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.16 (d, J = 9.7 Hz, 1H),3.91-3.78 (m, 1H), 3.75-3.67 (m, 1H), 2.23-2.10 (m, 2H), 2.12-1.97 (m, 2H),1.57-1.45 (m, 1H), 1.45-1.28 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.06。
实施例181.化合物180 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-1,2-二氢吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 901744DEST_PATH_IMAGE329
步骤a:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 0.19 mmol)和4-氟-1,2-二氢吡啶-2-酮(32 mg, 0.29 mmol)在ACN(1 mL)中的溶液中加入K2CO3 (53 mg, 0.38 mmol)。将反应在80℃下搅拌4小时。冷却至室温后，过滤所得混合物。将滤液通过反相色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 92%): C24H31Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：512, 514 (3 : 2)，实测值 512, 514 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 7.20 (s, 1H),7.01 (s, 1H), 6.46-6.31 (m, 1H), 6.13-5.93 (m, 2H), 5.48-5.28 (m, 2H), 4.59(s, 2H), 4.38-4.30 (m, 2H), 4.08-3.88 (m, 2H), 3.08-2.80 (m, 2H), 2.31-2.02(m, 2H), 1.60-1.42 (m, 1H), 1.42-1.24 (m, 2H), 1.17 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg, 0.18mmol)和Pd(PPh3)4 (2 mg, 0.002 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4(13 mg, 0.35mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H27Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：472, 474 (3 : 2)，实测值472, 474 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 0.19 mmol)在1,4-二噁烷(1mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：X select CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm；流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到28%B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.42分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅绿色糖浆形式得到化合物180 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-1,2-二氢吡啶-2-酮三氟乙酸)(46 mg, 55% 两步总计): C17H19Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：368, 370 (3 : 2)，实测值 368, 370 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.51-7.41 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.94 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.21-4.08 (m, 2H), 4.02 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.17-2.89 (m,2H), 2.50-2.38 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 1H), 1.53-1.38 (m, 2H), 1.37-1.20 (m,1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.12。
实施例182.化合物183 ((2-[(R)-氨基[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚))
Figure 160687DEST_PATH_IMAGE330
步骤a:
在室温下向(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.72 mmol)在ACN(2 mL)中的溶液中加入氰基(二苯氧基亚甲基)胺(0.34 g, 1.43 mmol)。将反应溶液在70℃下搅拌3小时。冷却至室温后，将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用EA/PE (2/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(N-氰基-4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲亚氨酸苯基酯)(70 mg, 17%): C27H32Cl2N4O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：563, 565 (3 : 2)，实测值 563, 565 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向(N-氰基-4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲亚氨酸苯基酯)(65 mg, 0.12 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液中加入NH2OH·HCl(48 mg, 0.69 mmol)和DIEA(0.15 g, 1.15 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌16小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(19 mg, 36%): C21H29Cl2N5O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：502,504 (3 : 2)，实测值 502, 504 (3 : 2)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10g, 0.20 mmol)和Pd(PPh3)4 (23 mg, 0.02 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (15mg, 0.40 mmol)。在氮气氛下，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用水(50mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H29Cl2N5O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464(3: 2)，实测值 462, 464 (3 : 2)。
步骤d:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基](4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 0.17 mmol) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 0.8 mL)。将反应溶液在0℃下搅拌30分钟。将溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 µm；流动相A：具有10 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从30% B到50% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物183 (2-[(R)-氨基[1-(5-氨基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚)(9.8 mg, 16% 两步总计): C14H17Cl2N5O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：358, 360(3 : 2)，实测值 358, 360 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.87(s, 1H), 3.90 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 3.82 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.90-2.78 (m,1H), 2.75 (td, J = 12.6, 3.0 Hz, 1H), 1.94 (d, J = 12.5 Hz, 2H), 1.45-1.20(m, 3H)。
实施例183.化合物188 ((R)-1-(4-((R)-氨基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 915016DEST_PATH_IMAGE331
步骤a:
在氮气氛下，在-65℃下向搅拌的2-溴-3,4,5-三氯-1-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(中间体9, 实施例9) (0.35 g, 1.11 mmol)在THF(10 mL)中的混合物中滴加n-BuLi(0.26mL 1.65 mmol, 2.50 M 己烷溶液)。在-65℃下搅拌0.5小时后，在-65℃下用10分钟滴加4-([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.53 g, 1.66 mmol)在THF(5 mL)中的溶液。将反应混合物在-65℃下另外搅拌0.5小时。在-65℃下将所得混合物用水(50 mL)猝灭，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5:1)洗脱，以黄色油的形式得到4-[(R)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基][2,3,4-三氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 37%): C24H35Cl3N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：553, 555, 557 (3 : 3 : 1)，实测值 553, 555, 557 (3 : 3 : 1)； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.98 (s, 1H), 6.12-5.95 (m, 1H), 5.47-5.40 (m, 2H),4.76 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 2H), 4.48-4.41 (d, J = 10.1 Hz, 1H),4.26-4.01 (m, 2H), 2.76-2.46 (m, 3H), 2.35 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 1.40-1.12(m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.05 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基][2,3,4-三氯-6-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.45 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中滴加TFA(1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7，然后用EA(5×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过反相色谱纯化，用具有10mmol/L NH4HCO3的40% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3,4-三氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 62%):C19H27Cl3N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：453, 455, 457 (3 : 3 : 1)，实测值 453,455, 457 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03 (s, 1H), 6.14-6.04 (m,1H), 5.48-5.39 (m, 2H), 5.18-4.99 (m, 1H), 4.82 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.74-4.55 (m, 2H), 3.59 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.03-2.79(m, 2H), 2.55-2.44 (m, 1H), 2.36-2.19 (m, 1H), 1.72-1.41 (m, 3H), 1.09 (s,9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的HATU (0.20 g, 0.53 mmol)和(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (77 mg, 0.53 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3,4-三氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.26mmol)和Et3N (54 mg, 0.53 mmol)。在室温下搅拌2小时后，将所得溶液在室温下用水(30mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的70%ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3,4-三氯苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(44 mg, 28%): C25H35Cl3N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：581, 583, 585 (3 : 3 :1)，实测值 581, 583, 585 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03 (s, 1H),6.14-5.93 (m, 1H), 5.54-5.32 (m, 2H), 4.83-4.34 (m, 4H), 3.97-3.48 (m, 4H),3.18-2.90 (m, 2H), 2.70-2.49 (m, 2H), 2.30-2.16 (m, 1H), 1.50-1.20 (m, 9H),1.03 (s, 9H)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(6-(烯丙氧基)-2,3,4-三氯苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(40 mg, 0.07 mmol)和Pd(PPh3)4 (9 mg, 0.007 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(6 mg, 0.15 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。在室温下将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭并减压浓缩，得到粗制(S)-N-((R)-(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C22H31Cl3N2O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543 (1 : 1)，实测值 541, 543 (1 : 1)。
步骤e:
在室温下将(S)-N-((R)-(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在1,4-二噁烷(5mL)中的溶液加入HCl水溶液(6 N, 3 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到23% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物188 ((R)-1-(4-((R)-氨基(2,3,4-三氯-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(11.9 mg, 30% 两步总计):C15H19Cl3N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399, 401 (3 : 3 : 1)，实测值 397,399, 401 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.13 (s, 1H), 4.73-4.49 (m,3H), 4.18 (dd, J = 65.2, 13.9 Hz, 1H), 3.79-3.50 (m, 2H), 3.20-2.91 (m, 1H),2.75-2.48 (m, 2H), 2.17-2.00 (m, 1H), 1.54-1.27 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz,CD3OD) δ -76.95。
实施例184.化合物189 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(3-羟基萘-2-基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 511082DEST_PATH_IMAGE332
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的2-溴-3-甲氧基萘(0.30 g, 1.3 mmol)在THF(5mL)中的溶液中滴加n-BuLi (0.61 mL, 1.5 mmol, 2.5 M己烷溶液)。在氮气氛下，在-78℃下将反应混合物搅拌30分钟。在-78℃下用5分钟向上述混合物中滴加4-([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 1 mmol)在THF(2 mL)中的溶液。将所得混合物从-78℃至室温再搅拌2小时。在室温下将所得溶液用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[(R)-(3-甲氧基萘-2-基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 83%): C26H38N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：475，实测值 475； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.75 (d, J = 8.3 Hz,2H), 7.55 (s, 1H), 7.49-7.43 (m, 1H), 7.40-7.34 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.25-4.12 (m, 2H), 4.08-3.95 (m, 4H), 3.18-3.07 (m, 1H), 2.77-2.49 (m, 2H), 2.20-1.98 (m, 1H), 1.83-1.59 (m, 1H), 1.51-1.28 (m, 11H), 1.26 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(R)-(3-甲氧基萘-2-基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.60 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌30分钟。将混合物在0℃下用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(3-甲氧基萘-2-基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：375，实测值 375。
步骤c:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.15 g, 1.00mmol)和HATU (0.51 g, 1.30 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-(3-甲氧基萘-2-基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.25 g, 0.70 mmol)和Et3N(0.20 g, 2.00 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用水(30 mL)猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](3-甲氧基萘-2-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.13 g, 38%): C27H38N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：503，实测值 503； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.76 (d, J = 8.0Hz, 2H), 7.60-7.44 (m, 2H), 7.40 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.76-4.61(m, 1H), 4.53-4.28 (m, 2H), 4.26-4.04 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.95-3.48 (m,1H), 3.19-2.82 (m, 1H), 2.69-2.44 (m, 1H), 2.40-2.12 (m, 2H), 1.45-1.23 (m,9H), 1.12 (d, J = 13.4 Hz, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](3-甲氧基萘-2-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.16 g, 0.30 mmol)在DCM(3 mL)中的混合物中加入BBr3(0.39 g, 1.6 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌3小时。在0℃下将反应用水(3 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从8% B到25% B；检测器：UV 254/220nm；保留时间：5.38分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物189 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(3-羟基萘-2-基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(29 mg, 21%): C19H24N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345，实测值 345； 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.82-7.75 (m, 2H), 7.69 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.49-7.42(m, 1H), 7.35 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.72-4.43 (m, 2H), 4.35-3.96(m, 2H), 3.77-3.56 (m, 2H), 3.09 (dt, J = 60.5, 13.3 Hz, 1H), 2.82-2.49 (m,2H), 2.10 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 1.54-1.06 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-77.02。
实施例185.化合物190 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 34468DEST_PATH_IMAGE333
步骤a:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (38 mg, 0.26mmol)和HATU (0.10 g, 0.26 mmol)在DMF(1 mL)中的混合物中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (70 mg,0.18 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液和Et3N (35 mg, 0.35 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将反应在室温下用水(40 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-5-氯-4-甲基苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制):C26H39ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：527, 529 (3 : 1)，实测值 527, 529 (3 :1)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-5-氯-4-甲基苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.23 mmol)和Pd(PPh3)4 (52 mg, 0.05 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中加入NaBH4(17 mg, 0.46 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(3 mL)猝灭并减压浓缩，以棕色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化而用于后续步骤: C23H35ClN2O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：487, 489 (3 : 1)，实测值 487, 489 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制)在THF(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下另外搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱: X BridgeShield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到20% B；检测器 UV 220 nm； 保留时间：5.62分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物190 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸) (27mg, 22% 三步总计): C16H23ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：343, 345 (3 : 1)，实测值 343, 345 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H), 6.85 (s, 1H),4.73-4.38 (m, 2H), 4.37-3.90 (m, 2H), 3.87-3.47 (m, 2H), 3.22-2.93 (m, 1H),2.66 (dt, J = 45.2, 12.9 Hz, 1H), 2.38 (s, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.02 (s, 1H),1.51-1.08 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.08.
以类似于化合物190所述的方式，由(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1c中的化合物。
表1c
Figure 464312DEST_PATH_IMAGE334
Figure 440358DEST_PATH_IMAGE335
Figure 981061DEST_PATH_IMAGE336
Figure 811483DEST_PATH_IMAGE337
Figure 146649DEST_PATH_IMAGE338
实施例186.化合物191 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基萘-1-基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 875571DEST_PATH_IMAGE339
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-2-甲氧基萘 (0.35 g, 1.50 mmol)在THF(5 mL)中的混合物中滴加n-BuLi(0.71 mL, 1.80 mmol, 2.5 M己烷溶液)。在氮气氛下，在-78℃下将所得溶液搅拌30分钟。在-78℃下用5分钟向上述溶液中滴加4-([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.35 g, 1.10 mmol)在THF(2 mL)中的溶液。将所得溶液升温至室温，另外搅拌2小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(20mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[(R)-(2-甲氧基萘-1-基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 34%): C26H38N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：475，实测值 475； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.97 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.84-7.79(m, 2H), 7.56-7.48 (m, 1H), 7.42-7.35 (m, 1H), 7.32 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.01(d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.30-4.16 (m, 1H), 4.05-3.89 (m, 4H), 2.78-2.63 (m,1H), 2.52-2.36 (m, 2H), 2.27-2.15 (m, 1H), 1.45 (d, J = 3.9 Hz, 12H), 0.97(s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(R)-(2-甲氧基萘-1-基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.42 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将混合物在0℃下用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(2-甲氧基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.2 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：375，实测值 375； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 8.12-8.04 (m, 1H), 7.93 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.89-7.82 (m, 1H),7.60-7.53 (m, 1H), 7.53-7.46 (m, 1H), 7.44-7.36 (m, 1H), 5.01 (d, J = 9.7 Hz,1H), 4.07 (s, 3H), 3.55 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 12.7 Hz, 1H),3.09-2.98 (m, 1H), 2.88-2.73 (m, 1H), 2.69-2.58 (m, 1H), 2.56-2.29 (m, 1H),1.70-1.56 (m, 1H), 1.50-1.26 (m, 2H), 0.98 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (78 mg, 0.50mmol)和HATU (0.30 g, 0.80 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-(2-甲氧基萘-1-基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.50 mmol)和Et3N(0.16g, 1.6 mmol)。在室温下将反应在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用水(30 mL)猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用57% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-甲氧基萘-1-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.16 g, 47 %): C27H38N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：503，实测值 503； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.97-7.90 (m, 1H),7.90-7.80 (m, 3H), 7.59-7.49 (m, 1H), 7.44-7.30 (m, 1H), 4.98-4.83 (m, 1H),4.82-4.46 (m, 2H), 4.45-4.29 (m, 1H), 4.29-4.19 (m, 1H), 4.10-4.02 (m, 3H),4.02-3.90 (m, 1H), 3.89-3.49 (m, 1H), 3.20-2.98 (m, 1H), 2.68-2.29 (m, 2H),1.60-1.22 (m, 9H), 1.01 (d, J = 3.6 Hz, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-甲氧基萘-1-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.16 g, 0.31 mmol)在DCM(3 mL)中的混合物中加入BBr3(0.18 g, 1.90 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。在0℃下将反应用水(5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从8% B到25% B；检测器：UV 254/220nm；保留时间：4.70分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物191 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基萘-1-基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(38 mg, 25%): C19H24N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：345，实测值 345； 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.86 (t, J = 7.7 Hz, 2H),7.56 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.9 Hz, 1H),4.89-4.84 (m, 1H), 4.71 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.57-4.39 (m, 1H), 4.13 (dd, J = 115.7, 13.8 Hz, 1H), 3.81-3.52 (m, 2H), 3.05 (dt, J = 82.6, 13.2 Hz, 1H),2.86-2.43 (m, 2H), 2.25-2.07 (m, 1H), 1.67-1.40 (m, 1H), 1.40-1.14 (m, 2H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.97.
实施例187.化合物192 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙-1-酮)
Figure 954385DEST_PATH_IMAGE340
步骤a:
在室温下向搅拌的2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酸锂 (0.26 g, 1.85 mmol)和HATU (0.70 g, 1.85 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中加入N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺 (中间体38, 实施例38) (0.38 g,0.92 mmol)和Et3N (0.28 g, 2.77 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应溶液通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.20 g, 37% 两步总计): C22H25Cl2F3N2O5 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：525, 527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.20 g, 0.38 mmol)和Pd(PPh3)4(4.4 mg, 0.004 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4 (29 mg, 0.76mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。所得混合物减压浓缩，以褐色固体形式得到N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H21Cl2F3N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：485,487 (3 : 2)，实测值 485, 487 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2,2-三氟乙酰胺(0.20 g, 0.41 mmol)在MeOH(2 mL)中的溶液中加入KOH(35 mg, 0.62 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用HCl水溶液(1 N)酸化至pH 7。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有10 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从24% B到30% B；检测器：UV 254/220nm；保留时间：6.35分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物192 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2-(氧杂环丁烷-3-基氧基)乙-1-酮)(45 mg, 30% 两步总计): C17H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 : 2)，实测值 389, 391 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.81-4.70 (m, 2H), 4.70-4.41 (m,4H), 4.30-4.12 (m, 2H), 3.92-3.72 (m, 2H), 3.10-2.91 (m, 1H), 2.71-2.43 (m,1H), 2.12-1.92 (m, 2H), 1.48 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.42-1.05 (m, 2H)。
实施例188.化合物196 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 452362DEST_PATH_IMAGE341
步骤a:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.61 g, 4.17mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中加入EDCI (1.00 g, 5.22 mmol)和HOBt (0.70 g, 5.18mmol)。在室温下向上述混合物中加入 4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌啶 (实施例3,步骤a) (1.00 g, 3.47 mmol)和Et3N (1.05 g, 10.37 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12小时。将反应混合物用H2O (80 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的30% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶(0.68 g, 34%): C19H23Cl2NO5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：416, 418 (3 : 2)，实测值416, 418 (3 : 2)；
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶(0.46 g, 1.10 mmol)和甲胺盐酸盐(0.37 g,5.52 mmol)在THF(20 mL)中的混合物中加入Ti(OEt)4 (1.00 g, 5.52 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在70℃下搅拌12小时。冷却至室温后，在氮气氛下在室温下将NaBH4(8mg, 0.22 mmol)加入上述混合物中。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用H2O(50 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色固体形式得到[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基](甲基)胺(0.39 g, 粗制): C20H28Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：431, 433(3 : 2)，实测值 431, 433 (3 : 2)。
步骤c:
在0℃下向搅拌的[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基](甲基)胺 (0.39 g, 0.90 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中滴加BBr3(1 mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应用MeOH (2 mL)猝灭。将混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.92分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物196 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(0.14 g, 30%):C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.71-4.31 (m, 2H),4.31-4.03 (m, 2H), 3.85-3.51 (m, 2H), 3.25-2.98 (m, 1H), 2.84-2.36 (m, 5H),2.05 (s, 1H), 1.54-1.01 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.19.
实施例189.化合物193 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(二甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 630534DEST_PATH_IMAGE342
步骤a:
在室温下向搅拌的(2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮(化合物196的游离碱， 实施例188) (50 mg, 0.13 mmol),HOAc (35 mg, 0.42 mmol)和HCHO (6 mg, 0.22 mmol)在MeOH(1 mL)中的混合物中分批加入NaBH3CN(27 mg, 0.42 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌3小时。将所得混合物在室温下用水(5 mL)猝灭，减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5 % B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.85分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物193 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(二甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(29 mg, 43%): C17H24Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：391, 393 (3 : 2)，实测值 391, 393 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 7.15 (s, 1H),4.82-4.36 (m, 3H), 4.33-4.06 (m, 1H), 3.78-3.53 (m, 2H), 3.28-3.03 (m, 1H),2.98-2.60 (m, 8H), 2.11-1.80 (m, 1H), 1.54 (s, 1H), 1.40-1.01 (m, 2H)； 19F NMR(376 MHz, CD3OD) δ -76.67.
实施例190.化合物198 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-氯-2-羟基-5-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 846752DEST_PATH_IMAGE343
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸(50 mg, 0.34 mmol)和HATU (151 mg, 0.40 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入Et3N (53mg, 0.53 mmol)和N-[(R)-[4-氯-5-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基] (哌啶-4-基)甲基]-2,2-二甲基丙酰胺 (0.10 g, 0.26 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌12小时。将反应用水(20 mL)猝灭，用EA(3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(R)-[4-氯-5-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2-二甲基丙酰胺(180 mg, 粗制): C26H39ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：527, 529 (3 : 1)，实测值 527, 529 (3 : 1)。
步骤b:
在氮气氛下，向搅拌的N-[(R)-[4-氯-5-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2,2-二甲基丙酰胺(180 mg, 粗制)和Pd(PPh3)4(15 mg, 0.01 mmol)在THF (5 mL)中的溶液中分三次加入NaBH4(27 mg, 0.71 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。所得混合物用水(3 mL)猝灭并减压浓缩，以棕色油的形式得到(S)-N-((R)-(4-氯-2-羟基-5-甲基苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化而用于后续步骤: C26H39ClN2O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：527, 529 (3 : 1)，实测值 527, 529 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(4-氯-2-羟基-5-甲基苯基)(1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制)在THF(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下另外搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeShield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：9 分钟内从11% B到26% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.1分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物198 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-氯-2-羟基-5-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮) (26.1mg, 31% 三步总计): C16H23ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：343, 345 (3 : 1)，实测值 343, 345 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.98 (s, 1H), 6.76 (s, 1H),4.67-4.40 (m, 2H), 4.10 (dd, J = 48.1, 13.7 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 7.9, 3.6Hz, 1H), 3.76-3.53 (m, 2H), 3.10-2.96 (m, 1H), 2.73-2.50 (m, 1H), 2.25 (s,3H), 2.02 (s, 2H), 1.53-1.40 (m, 1H), 1.33-1.14 (m, 2H)。
实施例191.化合物201 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 729257DEST_PATH_IMAGE344
步骤a:
在室温下向搅拌的2-甲基丙-2-烯酸 (92 mg, 1.07 mmol)和HATU (0.41 g,1.07 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.72 mmol)和Et3N (0.14g, 1.43 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(40 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色半固体形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲基丙-2-烯酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 86%): C23H32Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：487, 489 (3 : 2)，实测值 487, 489 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.11-5.97 (m, 1H), 5.48-5.32 (m, 2H),5.21 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.72-4.24 (m, 3H), 4.18-3.92 (m, 1H), 3.10-2.87(m, 1H), 2.72-2.49 (m, 1H), 2.26-2.01 (m, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.52-1.39 (m,3H), 1.25-1.12 (m, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-甲基丙-2-烯酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g,0.62 mmol)和Pd(PPh3)4 (7 mg, 0.01 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (47 mg,1.23 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物在室温下用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲基丙-2-烯酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.24 g, 87%): C20H28Cl2N2O3S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：447, 449 (3 : 2)，实测值 447, 449 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.36 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.64-4.28 (m, 2H),4.16-3.88 (m, 2H), 3.18-2.95 (m, 1H), 2.78-2.58 (m, 1H), 2.21 (d, J = 13.7Hz, 1H), 2.15-2.06 (m, 1H), 1.94 (s, 3H), 1.41 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.33-1.19 (m, 1H), 1.14 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲基丙-2-烯酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.45 mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应溶液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基] -2-甲基丙-2-烯-1-酮(0.15 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C16H20Cl2N2O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：343, 345 (3 : 2)，实测值 343, 345 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 5.07 (s, 1H),4.72-4.40 (m, 1H), 4.23-3.94 (m, 2H), 3.25-2.98 (m, 1H), 2.88-2.52 (m, 1H),2.47-2.34 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.47-1.28 (m, 3H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-甲基丙-2-烯酰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 0.34 mmol)和柠檬酸 (48 mg,0.25 mmol)在t-BuOH(1 mL)和水(1 mL)中的混合物中加入K2OsO2(OH)4 (31 mg, 0.08mmol)和NMO(47 mg, 0.40 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得溶液通过反相色谱纯化，用20% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱。将含有所需产物的馏分减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从12% B到23% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间 6.38分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物201 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮三氟乙酸)(55 mg, 25% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.75-4.50 (m, 2H), 4.15 (d, J = 9.6Hz, 1H), 3.72 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.56 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.07-2.54 (m,2H), 2.49-2.31 (m, 1H), 2.11-1.91 (m, 1H), 1.51-1.09 (m, 6H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.02.
实施例192.化合物202 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 81741DEST_PATH_IMAGE345
步骤a:
在室温下向搅拌的4-(4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酰基)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶 (实施例188, 步骤a) (0.22 g, 0.53 mmol)和乙胺盐酸盐(0.22 g, 2.64 mmol)在THF(10 mL)中的混合物中加入Ti(OEt)4 (0.60 g, 2.64 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将反应混合物搅拌12小时。冷却至室温后，在室温下将NaBH4(34 mg,0.11 mmol)加入上述混合物中。在室温下将反应混合物搅拌1小时。在室温下将反应用H2O(40 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色固体形式得到[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基](乙基)胺(0.23 g, 粗制): C21H30Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：445, 447 (3 : 2)，实测值445, 447 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的[(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基](乙基)胺 (0.23 g, 0.52 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.5 mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用MeOH (2mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeShield RP18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.57分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物202 ((2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(乙基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(56 mg,21%): C17H24Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：391, 393 (3 : 2)，实测值 391, 393(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.73-4.42 (m,2H), 4.31-4.02 (m, 2H), 3.66 (d, J = 19.9 Hz, 2H), 3.08 (dt, J = 45.1, 12.8Hz, 1H), 2.98-2.80 (m, 2H), 2.66 (dt, J = 44.7, 12.8 Hz, 1H), 2.56-2.23 (m,1H), 2.18-1.95 (m, 1H), 1.54-1.07 (m, 6H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.24.
实施例193.化合物212 ((2R)-1-[(1R,5S,6R)-6-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 24289DEST_PATH_IMAGE346
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (1.12 g, 4.14 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl·LiCl(3.98 mL, 5.18 mmol, 1.3 M THF溶液)。将反应在0℃下搅拌30分钟。然后在-10℃下用0.5小时滴加(1R,5S,6R)-6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.28 g, 1.04 mmol)在THF(2 mL)中的溶液。将反应在-10℃下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(30 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(1R,5S,6R)-6-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.19 g, 40%): C20H23Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：412, 414 (3 : 2)，实测值 412, 414 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.68 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.14-5.96 (m, 1H), 5.56-5.35 (m, 2H),4.66-4.57 (m, 2H), 3.75-3.54 (m, 3H), 3.54-3.39 (m, 2H), 2.32-2.27 (m, 2H),1.47 (d, J = 2.6 Hz, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(1R,5S,6R)-6-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.19 g, 0.46 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺(84 mg, 0.69 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4(0.42 g, 1.84 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到(1R,5S,6R)-6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.20g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H32Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：515, 517 (3 : 2)，实测值 515, 517 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(1R,5S,6R)-6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯 (0.20 g,0.39 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(29 mg, 0.78 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，用EA(20 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(1R,5S,6R)-6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.18g, 90%)，其不经进一步纯化而直接用于后续步骤: C24H34Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：517, 519 (3 : 2)，实测值 517, 519 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(1R,5S,6R)-6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(0.18 g,0.35 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(20 mL)猝灭，用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)中和至pH 7。将所得溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到N-[[(1R,5S,6R)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.18 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H26Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：417,419, (3 : 2)，实测值 417, 419, (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.13 g, 0.86mmol)和HATU(0.33 g, 0.86 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入N-[[(1R,5S,6R)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.18 g, 0.43 mmol)和Et3N (0.13 g, 1.29 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用56% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(1R,5S,6R)-3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 56% 四步总计): C25H34Cl2N2O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：545, 547, (3 : 2)，实测值 545, 547 (3 : 2)。
步骤f:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(1R,5S,6R)-3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.14 g, 0.26 mmol)和Pd(PPh3)4 (3 mg,0.003 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (19 mg, 0.51 mmol)。在氮气氛下，将反应在室温下搅拌30分钟。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以棕色油的形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(1R,5S,6R)-3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C22H30Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：505, 507 (3 : 2)，实测值 505, 507 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(1R,5S,6R)-3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (30 mg, 0.06 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和HCl(1 N, 20 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×20 mL)洗涤。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm；流动相A：具有10 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：8 分钟内从7% B到20% B；检测器：UV 254/220nm；保留时间：6.55分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物212 ((2R)-1-[(1R,5S,6R)-6-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(3 mg, 16%): C15H18Cl2N2O4 [M + H – 17]+的LCMS(ESI)计算值：344, 346 (3 : 2)，实测值 344, 346 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ7.53-7.40 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.40-4.12 (m, 1H), 4.04-3.85 (m, 2H), 3.85-3.58 (m, 3H), 3.56-3.38 (m, 2H), 2.01-1.68 (m, 2H), 1.42-1.27 (m, 1H)。
实施例194.化合物214 ((2R)-1-[4-[1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)-2,2-二氟乙基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 258961DEST_PATH_IMAGE347
步骤a:
在-70℃下向搅拌的4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体49, 实施例49) (0.30 g, 0.75 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中滴加DAST(0.72 g, 4.47 mmol)。将使所得混合物升温至室温，在氮气氛下搅拌16小时。将反应在0℃下用水(30 mL)猝灭，用EA(3×35 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.22 g, 57%): C19H25Cl2F2NO3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：424, 426 (3 : 2)，实测值424, 426 (3 : 2)。
步骤b:
在0℃下向搅拌的4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.22 g, 0.52 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C14H17Cl2F2NO [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：324, 326 (3 : 2)，实测值 324, 326 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙基]哌啶 (0.17g, 0.52 mmol)和(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.92 g, 0.63 mmol)和HOBt (0.11 g, 0.78 mmol)和Et3N (0.16 g, 1.57 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中分批加入EDCI(0.16 g, 0.79 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(40mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙基]-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶(90 mg, 38%): C20H25Cl2F2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：452, 454 (3 : 2)，实测值 452, 454 (3 : 2)。
步骤d:
在0℃下向搅拌的4-[1-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙基]-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶(90 mg, 0.20 mmol)在DCM(1 mL)中的溶液中滴加BBr3(0.15 g, 0.60 mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌30分钟。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液猝灭。将所得混合物用EA(3×15 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×5 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过制备HPLC在下述条件下纯化: 柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 µm；流动相A：具有10 mmol/LNH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从30% B到55% B；检测器：254/220 nm； 保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物214 ((2R)-1-[4-[1-(4,5-二氯-2-羟基苯基)-2,2-二氟乙基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(21.2 mg, 25%): C16H19Cl2F2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：398, 400(3 : 2)，实测值 398, 400 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.33 (s, 1H), 6.96(s, 1H), 6.26 (td, J = 56.3, 4.3 Hz, 1H), 4.62-4.34 (m, 2H), 4.07 (dd, J =45.8, 13.8 Hz, 1H), 3.78-3.59 (m, 2H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.08 (dt, J = 40.5,12.8 Hz, 1H), 2.68 (dt, J = 41.1, 13.0 Hz, 1H), 2.23 (d, J = 11.2 Hz, 1H),2.08 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 1.67-1.25 (m, 2H), 1.26-0.98 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -119.02, -119.20.
实施例195.化合物209 (4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺三氟乙酸)
Figure 413999DEST_PATH_IMAGE348
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.47 mmol)和Et3N(96 mg,0.95 mmol)在DCM(2 mL)中的混合物中滴加4-硝基苯基甲酰氯 (0.10 g, 0.57 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12小时。将所得混合物用水(40 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/3)洗脱，以灰白色固体形式得到4-([[叔丁基(羟基)-λ3-硫烷基]氨基](4,5-二氯-2-丙氧基环己基)甲基)哌啶-1-甲酸4-(二羟基氨基)苯基酯(0.25 g, 75%): C26H31Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：584, 586 (3 : 2)，实测值584, 586 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.30 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.48 (s,1H), 7.38 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 6.20-6.05 (m, 1H), 5.47 (dd, J =17.4, 1.7 Hz, 1H), 5.36 (dd, J = 10.5, 1.5 Hz, 1H), 4.70-4.53 (m, 3H), 4.45-4.07 (m, 2H), 3.18-2.78 (m, 2H), 2.30-2.20 (m, 1H), 2.13-1.99 (m, 1H), 1.50-1.25 (m, 3H), 1.15 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸4-硝基苯基酯(0.20 g, 0.34 mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中加入2-氨基乙-1-醇(0.40 g, 6.84 mmol)。将反应溶液在90℃下搅拌12小时。将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×35 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用25% ACN水溶液(加0.5% TFA)洗脱，以黄色固体形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺(0.12 g, 62%): C22H33Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：506, 508 (3 : 2)，实测值 506, 508 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (s, 1H), 7.17 (s, 1H),6.16-6.04 (m, 1H), 5.50-5.29 (m, 2H), 4.67-4.48 (m, 3H), 4.14-3.92 (m, 2H),3.58 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.86-2.62 (m, 2H), 2.14(d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.03-1.88 (m, 1H), 1.36-1.17 (m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺 (0.11 g,0.21 mmol)和Pd(PPh3)4 (13 mg, 0.01 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中分批加入NaBH4(16 mg, 0.43 mmol)。将反应混合物在氮气氛下，在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用水(30 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以褐色半固体形式得到4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺(66 mg,粗制): C19H29Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：466, 468 (3 : 2)，实测值 466,468 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.45-4.31(m, 1H), 4.12-3.90 (m, 2H), 3.58 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.28 (t, J = 5.9 Hz,2H), 2.85-2.63 (m, 2H), 2.15 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.04-1.90 (m, 1H), 1.36-1.17 (m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺(66 mg, 0.14 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 0.5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm,5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到33% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：4.7分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物209 (4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-N-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酰胺三氟乙酸)(25 mg, 37% 两步总计): C15H21Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：362, 364 (3 : 2)，实测值, 362, 364 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.43 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.30-4.08 (m, 2H), 3.97 (d, J = 13.6 Hz, 1H),3.69-3.42 (m, 2H), 3.28 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.91-2.67 (m, 2H), 2.40-2.15 (m,1H), 2.02-1.87 (m, 1H), 1.41-1.22 (m, 2H), 1.21-1.06 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.09。
实施例196.化合物215 ((2R)-1-[6-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 807940DEST_PATH_IMAGE349
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(实施例6, 步骤b) (1.07 g, 3.80 mmol)在THF(15 mL)中的混合物中滴加i-PrMgCl·LiCl(3.90 mL, 5.07 mmol, 1.3 M THF溶液)。将所得混合物在氮气氛下在-10℃下搅拌30分钟。在-10℃下用5分钟向上述溶液中滴加6-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(0.36 g, 1.27 mmol)的THF(2 mL)溶液。在氮气氛下，在-10℃下将所得溶液另外搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到6-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(30 mg, 6%)。C21H25Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：448, 450 (3 : 2)，实测值 448, 450 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 (d, J = 27.1 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 27.9 Hz,1H), 6.14-5.96 (m, 1H), 5.49-5.28 (m, 2H), 4.64-4.53 (m, 2H), 4.37-4.16 (m,1H), 3.70-3.39 (m, 2H), 3.22 (dd, J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 2.80 (d, J = 27.5Hz, 1H), 2.10 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.63-1.55 (m, 1H), 1.50-1.43 (m, 10H),1.37-1.19 (m, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的6-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(30 mg, 0.07 mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (26 mg,0.21 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (96 mg, 0.42 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在70℃下搅拌16小时。冷却至室温后，在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(30 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H34Cl2N2O4S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：529, 531 (3 : 2)，实测值 529, 531 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的6-[(1E)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯 (30 mg, 0.06mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(10 mg, 0.26 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应在室温下用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(40 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：531, 533 (3 : 2)，实测值 531, 533 (3 :2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的6-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-甲酸叔丁酯(40 mg, 0.08 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液(30 mL)碱化至pH 8，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-([3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(40 mg, 粗制)，其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。C20H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：431, 433 (3 : 2)，实测值 431, 433 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (20 mg, 0.14mmol)和HATU (71 mg, 0.19 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液中加入N-([3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (40mg, 0.09 mmol)和Et3N (28 mg, 0.28 mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将反应通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10 mg, 26% 四步总计):C26H36Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：559, 561 (3 : 2)，实测值 559, 561 (3 :2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (10 mg, 0.02 mmol)和Pd(PPh3)4 (1 mg, 0.001 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(1.3 mg, 0.03 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(3-((4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H32Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 :2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)(3-((4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (10mg, 0.02 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10 μm，19×250 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.50分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物215((2R)-1-[6-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(3.3 mg, 38% 两步总计): C16H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：375, 377 (3 : 2)，实测值 375, 377 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD): 1H NMRδ 7.65-7.46 (m, 1H), 7.09 (dd, J = 6.9, 4.3 Hz, 1H), 4.85-4.45 (m, 2H), 4.25-3.87 (m, 1H), 3.87-3.62 (m, 4H), 3.62-3.40 (m, 1H), 3.10-2.97 (m, 1H), 2.78-2.55 (m, 1H), 2.46-2.27 (m, 1H), 2.27-2.06 (m, 1H), 1.59-1.41 (m, 1H)； 19F NMR(376 MHz, CD3OD) δ -77.23.
实施例197.化合物217 (1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮 异构体1) 化合物218 (1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮 异构体2)
Figure 390231DEST_PATH_IMAGE350
步骤a:
通过制备手性HPLC在下述条件下分离1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮三氟乙酸 (化合物201, 实施例191) (55mg): 柱：CHIRALPAK IG, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：20 分钟内从30% B到30% B；检测器：UV: 220/254 nm； 保留时间：RT1: 12.76 分钟； RT2: 17.37 分钟； 注射体积: 0.3 mL。
在12.76分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物217 (1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮 异构体1)(10 mg, 24%): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.21 (s, 1H), 6.86 (s, 1H),4.74-4.45 (m, 2H), 3.89 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.71 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.56(d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.04-2.37 (m, 2H), 2.15-1.93 (m, 2H), 1.48-1.40 (m,1H), 1.38 (s, 3H), 1.33-1.09 (m, 2H)。
在17.37分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物218 (1-(4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基-2-甲基丙-1-酮 异构体2)(15 mg, 36%): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.86 (s, 1H),4.74-4.45 (m, 1H), 3.90 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.71 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.63-3.41 (m, 2H), 3.08-2.44 (m, 2H), 2.01 (dd, J = 34.1, 10.7 Hz, 2H), 1.50-1.42(m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.34-1.06 (m, 2H)。
实施例198.化合物219 (3-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸)
Figure 112200DEST_PATH_IMAGE351
步骤a:
在室温下向搅拌的1-[(叔丁氧基)羰基]-3-羟基氮杂环丁烷-3-甲酸 (87 mg,0.40 mmol)， EDCI (96 mg, 0.50 mmol)和HOBt (67 mg, 0.50 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.14 g, 0.34 mmol)和Et3N (0.10 g, 1.00 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以灰白色固体形式得到3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]-3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.18 g, 粗制):C28H41Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：618, 620 (3 : 2)，实测值, 618, 620 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.15-6.04 (m, 1H),5.45 (d, J = 17.3 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.66-4.60 (m, 2H),4.58-4.26 (m, 4H), 3.98-3.76 (m, 3H), 3.11-2.90 (m, 1H), 2.75-2.56 (m, 1H),2.23-2.13 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.39-1.17 (m, 3H), 1.14(s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]-3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.18 g, 0.29 mmol)和Pd (PPh3)4 (17 mg, 0.02 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中分批加入NaBH4 (22 mg, 0.58 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将所得混合物用H2O(2 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以褐色固体形式得到3-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]-3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(90 mg, 粗制): C25H37Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：578, 580 (3 : 2)，实测值, 578, 580 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]-3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(90 mg, 0.15mmol)在THF(1 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 0.50 mL)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge ShieldRP18 OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到15% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.42分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以褐色固体形式得到化合物219 (3-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氮杂环丁烷-3-醇三氟乙酸)(38 mg, 50%): C16H21Cl2N3O3[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：374, 376 (3 : 2)，实测值, 374, 376 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.71-4.40 (m, 3H), 4.25-3.88(m, 3H), 3.18-2.93 (m, 1H), 2.83-2.59 (m, 1H), 2.48-2.30 (m, 1H), 2.03 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 1.49-1.12 (m, 4H)。
以类似于化合物219所述的方式，由(S)-N-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1d中的化合物。
表1d
Figure 274191DEST_PATH_IMAGE352
Figure 601267DEST_PATH_IMAGE353
Figure 885618DEST_PATH_IMAGE354
Figure 298145DEST_PATH_IMAGE355
实施例199.化合物220 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-醇)
Figure 60564DEST_PATH_IMAGE356
步骤a:
在室温下向搅拌的4-((R)-(2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(((S)-叔丁基亚磺酰基)氨基)甲基)哌啶-1-甲酸4-硝基苯基酯(0.35 g, 粗制)和3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-醇(0.13 g, 1.24 mmol)在1,4-二噁烷(4 mL)中的溶液中滴加DIEA(1.60 g, 12.40mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.5% TFA)洗脱，得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[3-羟基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 38%): C24H35Cl2N3O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：548, 550 (3 : 2)，实测值, 548, 550 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.22 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.09-5.96 (m, 1H), 5.48-5.31(m, 2H), 4.63-4.49 (m, 2H), 4.45-4.32 (m, 1H), 4.08-3.82 (m, 8H), 2.80-2.59(m, 2H), 2.04-1.84 (m, 2H), 1.32-1.22 (m, 3H), 1.15 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[3-羟基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.14 g, 0.25 mmol)和Pd (PPh3)4 (15 mg, 0.01 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中分批加入NaBH4 (19 mg, 0.51 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物在室温下用水(3 mL)猝灭并减压浓缩，以黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[3-羟基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 粗制): C21H31Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：508, 510(3 : 2)，实测值, 508, 50 (3 : 2)
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[3-羟基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g, 粗制)在THF(1 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 0.5 mL,)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：20 mL/min；梯度：7 分钟内从13% B到35% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：7.4分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物220 (1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-醇)(16 mg, 14% 两步总计): C17H23Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：404, 406 (3 : 2)，实测值, 404, 406(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.21 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.27-3.95 (m,3H), 3.92-3.70 (m, 4H), 3.58 (s, 2H), 2.75 (dt, J = 25.9, 12.7 Hz, 2H), 2.09-1.87 (m, 2H), 1.49-1.09 (m, 3H)。
实施例200.化合物221 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮 异构体1)； 化合物222 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮 异构体2)
Figure 976568DEST_PATH_IMAGE357
步骤a:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮 (35 mg, 0.09 mmol): 柱：Chiralpak IC, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：26 分钟内从40% B到40% B；检测器：220/254 nm； 保留时间：RT1:18.17 分钟； RT2:22.14分钟。在18.17分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物222 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮 异构体2)(6.7 mg, 19%): C18H23Cl2N2O3 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：400, 402 (3 : 2)，实测值 400, 402 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 4.57 (dd, J = 39.7, 13.3 Hz, 1H),4.10 (dd, J = 37.1, 13.8 Hz, 1H), 3.92 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.51-3.36 (m,1H), 3.23-2.97 (m, 2H), 2.68-2.50 (m, 1H), 2.47-2.35 (m, 2H), 2.15-1.84 (m,4H), 1.50 (t, J = 15.3 Hz, 1H), 1.40-1.04 (m, 3H)。
在22.142分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物221 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮 异构体1)(6.4 mg,18%): C18H23Cl2N2O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：400, 402 (3 : 2)，实测值 400, 402(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.2Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 38.7, 13.3 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 38.9, 13.8 Hz, 1H),3.96-3.84 (m, 1H), 3.53-3.35 (m, 1H), 3.24 -2.99 (m, 2H), 2.71-2.49 (m, 1H),2.46-2.32 (m, 2H), 2.13-1.83 (m, 4H), 1.60-1.42 (m, 1H), 1.38-1.08 (m, 3H)。
实施例201.化合物296 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-2-酮 异构体1)； 化合物246 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-2-酮 异构体2)
Figure 370769DEST_PATH_IMAGE358
步骤a:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-2-酮三氟乙酸 (80 mg, 0.21 mmol): 柱：CHIRALPAK IC, 2×25cm, 5 μm；流动相A：MTBE (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：16 mL/min；梯度：26 分钟内从30% B到30% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 14.14 分钟； RT2: 22.44 分钟。
在14.14分钟以灰白色固体形式得到14.14分钟处的较快洗脱的对映异构体作为化合物296 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-2-酮 异构体1) (游离胺) (20.6 mg, 32%): C17H21Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：386,388 (3 : 2)，实测值 386, 388 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J =6.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 38.6, 13.4 Hz, 1H),4.13-3.84 (m, 2H), 3.84-3.67 (m, 1H), 3.67-3.57 (m, 1H), 3.57-3.43 (m, 1H),3.16-2.93 (m, 1H), 2.72-2.45 (m, 3H), 2.13-1.95 (m, 2H), 1.49 (t, J = 16.3Hz, 1H), 1.41-1.06 (m, 2H)。
在22.44分钟以灰白色固体形式得到22.44分钟处的较慢洗脱的对映异构体 作为化合物246 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吡咯烷-2-酮 异构体2) (18.9 mg, 30%): C17H21Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：386, 388 (3 :2)，实测值 386, 388 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H), 6.87 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 38.4, 13.4 Hz, 1H), 4.13-3.84 (m, 2H), 3.81-3.67(m, 1H), 3.67-3.43 (m, 2H), 3.18-2.94 (m, 1H), 2.74-2.44 (m, 3H), 2.11-1.91(m, 2H), 1.49 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.35-1.04 (m, 2H)。
实施例202.化合物225 ((2R)-1-((3aR,5R,6aS)-5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 5013DEST_PATH_IMAGE359
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3aR,5R,6aS)-2-(叔丁氧基羰基)-六氢-1H-环戊并[c]吡咯-5-甲酸 (0.10 g, 0.39 mmol), EDCI (0.11 g, 0.59 mmol)和HOBt (79 mg,0.59 mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中分批加入Et3N (59 mg, 0.59 mmol)和N,O-二甲基羟基胺HCl(36 mg, 0.59 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(30 mL)在室温下猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(3aR,5R,6aS)-5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-六氢-1H-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(0.10 g, 81%): C15H26N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：299，实测值 299； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.84-4.55 (m, 2H), 3.70(s, 3H), 3.60-3.48 (m, 2H), 3.35-3.25 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.76-2.62 (m,2H), 2.21-2.09 (m, 2H), 1.84-1.68 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-5℃下用15分钟将1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.47 g, 1.68 mmol)在THF(10 mL)中的溶液加入i-PrMgCl·LiCl(1.30 mL, 1.68 mmol,1.3 M THF溶液)。另外搅拌30分钟后，滴加(3aR,5R,6aS)-5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-六氢-1H-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯 (0.10 g, 0.34 mmol)在THF(5 mL)中的溶液。在氮气氛下，在-5℃下将反应混合物搅拌0.5小时。在-5℃下将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭，用EA(2×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到(3aR,5R,6aS)-5-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-六氢-1H-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(32 mg, 22%): C22H27Cl2NO4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：440, 442 (3 : 2)，实测值 440, 442 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.66 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.11-6.00 (m, 1H), 5.51-5.37 (m,2H), 4.70 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.75 (dd, J = 20.7, 11.3 Hz, 1H), 3.64-3.39(m, 2H), 3.31-3.22 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.75-2.56 (m, 2H), 2.23-2.11 (m,2H), 1.84-1.67 (m, 2H), 1.47 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3aR,5R,6aS)-5-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-六氢-1H-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(50 mg, 0.11 mmol)和Ti(OEt)4(0.10 g, 0.45 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中分批加入叔丁烷亚磺酰胺(21 mg, 0.17mmol)。使反应溶液升温至70℃，在氮气氛下搅拌24小时。冷却至室温后，将所得溶液用水(60 mL)猝灭，用EA(2×80 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(3aR,5R,6aS)-5-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C26H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：543,545 (3 : 2)，实测值 543, 545 (3 : 2)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(3aR,5R,6aS)-5-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯(粗制)在THF(2 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(5 mg, 0.13 mmol)。搅拌1小时后，在室温下将所得混合物用水(20 mL)猝灭，用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到粗制(3aR,5R,6aS)-5-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C26H38Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：545, 547 (3 : 2)，实测值 545, 547 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(3aR,5R,6aS)-5-((2-(烯丙氧基)-4,5-二氯苯基)(1,1-二甲基乙基亚磺酰胺基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(粗制)在DCM(2 mL)中的溶液中滴加TFA(0.5 mL)。在室温下搅拌1小时后，将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将粗产物通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-[(3aR,5R,6aS)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(18 mg, 61% 三步总计): C21H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：445, 447 (3 : 2)，实测值 445, 447 (3 : 2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (9 mg, 0.06mmol)和HATU(23 mg, 0.06 mmol)在DMF(1 mL)中的溶液中加入N-[(3aR,5R,6aS)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(18 mg, 0.04 mmol)和Et3N (16 mg, 0.16 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用水(20 mL)在室温下猝灭，用EA(2×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×15mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)((3aR,5R,6aS)-2-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)八氢环戊并[c]吡咯-5-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将所得混合物无需进一步纯化而直接用于后续步骤:C27H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：573, 575 (3 : 2)，实测值 573, 575 (3 :2)。
步骤g:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)((3aR,5R,6aS)-2-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)八氢环戊并[c]吡咯-5-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)和Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.005 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4(4 mg, 0.11 mmol)。在室温下搅拌1小时后，在室温下将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，得到N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)((3aR,5R,6aS)-2-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)八氢环戊并[c]吡咯-5-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C24H34Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)。
步骤h:
在室温下向搅拌的N-((4,5-二氯-2-羟基苯基)((3aR,5R,6aS)-2-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)八氢环戊并[c]吡咯-5-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(粗制)在THF(2 mL)中的混合物中滴加HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用EA(10 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 3×10 mL)提取。将合并的水层用EA(3×10 mL)洗涤并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Sunfire Prep C18 OBD柱，10 μm，19×250 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到35% B；检测器：UV254 nm； 保留时间：5.8分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物225((2R)-1-((3aR,5R,6aS)-5-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基)-2,3-二羟基丙-1-酮) (0.6 mg, 4% 三步总计): C17H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 : 2)，实测值 389, 391 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.41-4.32 (m, 1H), 4.30-4.15 (m, 1H),3.8-3.45 (m, 5H), 2.95-2.60 (m, 3H), 2.38-2.25 (m, 1H), 1.83-1.70 (m, 1H),1.42-1.10 (m, 3H)。
实施例203.化合物226 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(氟甲基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 367861DEST_PATH_IMAGE360
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4-溴-5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体24, 实施例24) (3.80 g, 6.42 mmol)和(三丁基甲锡烷基)甲醇(3.09 g, 9.629 mmol)在二噁烷(30 mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(0.74 g, 0.64 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将所得混合物用EtOAc(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的50% CH3CN水溶液洗脱，以浅黄色半固体形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.80 g, 57%):C23H35ClN2O6S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：503, 505 (3 : 1) 实测值：503, 505 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.11-6.96 (m, 2H), 4.74-4.65 (m, 3H), 4.65-4.54(m, 1H), 4.51-4.40 (m, 0H), 4.41-4.26 (m, 3H), 4.24-4.16 (m, 1H), 4.11-4.02(m, 1H), 3.09-2.83 (m, 2H), 2.59-2.35 (m, 2H), 2.14-1.93 (m, 2H), 1.44-1.33(m, 6H), 1.20 (d, J = 7.1 Hz, 9H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(120 mg, 0.239 mmol, 1.00 当量)在二噁烷(0.50 mL)中的溶液中加入HCl(4 M)(2.00 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将pH值用饱和NaHCO3水溶液调节至8。然后向其中加入Boc2O(62 mg, 0.286 mmol, 1.20 当量)和Na2CO3(75.85 mg, 0.716 mmol, 3.00 当量)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用EtOAc(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EtOAc(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(100 mg, 91.34%):C21H31ClN2O7 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：459, 461 (3 : 1) 实测值：459, 461 (3 :1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(0.80 g, 1.74 mmol)和2,2-二甲氧基丙烷(0.36 g, 3.49 mmol)在丙酮(10 mL)中的溶液中加入TsOH(30 mg, 0.17 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EtOAc(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EtOAc(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的38%CH3CN水溶液洗脱，以浅黄色固体形式得到N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(0.50 g, 57%): C24H35ClN2O7 [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：499, 501 (3 : 1) 实测值：499, 501 (3 : 1)； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.07-6.86 (m, 2H), 5.66-5.32 (m, 1H), 4.74-4.52 (m, 4H), 4.52-4.34 (m, 2H), 4.27-4.03 (m, 2H), 3.96-3.53 (m, 1H), 3.12-2.80 (m, 1H), 2.69-2.42 (m, 1H), 2.13-1.84 (m, 2H), 1.81-1.61 (m, 1H), 1.52-1.36 (m, 15H)和2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-(羟基甲基)苯基叔丁基碳酸酯，为浅黄色固体形式(0.21 g, 20%):C29H43ClN2O9 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：599, 601 (3 : 1) 实测值：599, 601 (3 :1)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 (s, 1H), 7.08-6.92 (m, 1H), 5.11-4.95 (m,1H), 4.79-4.72 (m, 1H), 4.74-4.56 (m, 3H), 4.56-4.35 (m, 3H), 4.25-4.05 (m,1H), 3.93-3.56 (m, 2H), 3.14-2.76 (m, 1H), 2.80-2.41 (m, 1H), 2.15-1.69 (m,2H), 1.59 (s, 6H), 1.49-1.36 (m, 18H)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(羟基甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(65mg, 0.13 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入DAST (42 mg, 0.26 mmol)。在氮气氛下，将反应在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)猝灭。将水层用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(R)-[5-氯-4-(氟甲基)-2-羟基苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(65 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H34ClFN2O6 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 1)，实测值501, 503 (3 : 1)。
步骤e:
在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-4-(氟甲基)-2-羟基苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]氨基甲酸叔丁酯(65 mg, 0.13 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA (0.5 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm，n； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到15% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.32分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物226 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(氟甲基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(12.9 mg, 21% 两步总计): C16H22ClFN2O4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：361, 363 (3 : 1)，实测值 361, 363 (3 : 1)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.46 (d, J = 47.1 Hz, 2H), 4.75-4.44 (m, 2H), 4.33-3.98 (m, 2H), 3.85-3.54 (m, 2H), 3.19-2.92 (m, 1H), 2.77-2.48 (m, 1H), 2.48-2.29 (m, 1H), 2.10-1.81 (m, 1H), 1.52-0.99 (m, 3H)； 19F NMR(376 MHz, CD3OD) δ -77.10, -219.80。
实施例204.化合物227 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(二氟甲基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 138371DEST_PATH_IMAGE361
步骤a:
在室温下向搅拌的2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-(羟基甲基)苯基叔丁基碳酸酯(实施例203, 步骤c) (0.21 g, 0.35 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.16 g,0.37 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和Na2SO3水溶液(1mL)猝灭。将所得混合物用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-甲酰基苯基叔丁基碳酸酯(0.12 g, 57%): C29H41ClN2O9 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：597, 599 (3 : 1)，实测值597, 599 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.25 (s, 1H), 7.84-7.65 (m,2H), 7.62-7.52 (m, 1H), 4.88-4.59 (m, 2H), 4.43-4.17 (m, 2H), 4.17-3.83 (m,2H), 3.02-2.76 (m, 2H), 2.50-2.38 (m, 2H), 1.87-1.59 (m, 3H), 1.51 (d, J =5.2 Hz, 9H), 1.36 (s, 9H), 1.29 (s, 6H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-甲酰基苯基叔丁基碳酸酯(0.12 g, 0.20 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入DAST(65 mg, 0.40 mmol)。在氮气氛下，将反应在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)猝灭。将水层用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-(二氟甲基)苯基叔丁基碳酸酯(0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C29H41ClF2N2O8 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：619,621 (3 : 1)，实测值 619, 621 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的2-[(R)-[(叔丁氧基羰基)氨基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-4-氯-5-(二氟甲基)苯基叔丁基碳酸酯 (0.12g, 0.19 mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到20% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.56分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物227 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(二氟甲基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(36.5 mg, 37% 两步总计):C16H21ClF2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：379, 381 (3 : 1)，实测值 379, 381 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.00 (t, J = 54.7Hz, 1H), 4.71-4.39 (m, 2H), 4.31-4.02 (m, 2H), 3.75-3.57 (m, 2H), 3.08 (dt, J = 44.4, 12.6 Hz, 1H), 2.67 (dt, J = 44.8, 12.9 Hz, 1H), 2.49-2.34 (m, 1H),2.09-1.95 (m, 1H), 1.49-1.11 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.27, -117.12。
实施例205.化合物228 (5-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮)
Figure 889158DEST_PATH_IMAGE362
步骤a:
在室温下向搅拌的6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (0.10 g, 0.75 mmol), HOBt (0.14g, 1.00 mmol), EDCI (0.19 g, 1.00 mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.50 mmol)和Et3N (0.15 g, 1.50 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应用水(40 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基] [1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 31%): C26H34ClN3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：520, 522 (3 : 1)，实测值520, 522 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) δ 7.59 (s, 1H), 7.52 (d, J = 10.0Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.57 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.13-5.99 (m,1H), 5.38 (dd, J = 28.6, 13.9 Hz, 2H), 4.66-4.48 (m, 2H), 4.46-4.09 (m, 3H),2.95-2.66 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.23-1.95 (m, 2H), 1.53-1.19 (m, 3H), 1.15(s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.19mmol)和Pd(PPh3)4 (2 mg, 0.002 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (15 mg,0.39 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H30ClN3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：480, 482 (3 :1)，实测值 480, 482 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg, 0.18 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18OBD柱，30×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.50分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物228 (5-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮)(38 mg, 53% 两步总计):C19H22ClN3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：376, 378 (3 : 1)，实测值 376, 378 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.68-7.56 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.69 (s, 1H),6.55 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.55-3.97 (m, 2H), 3.88 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.11-2.79 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.07-1.93 (m, 2H), 1.52-1.40 (m, 1H), 1.39-1.16(m, 2H)。
实施例206.化合物229 ((6S)-6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮三氟乙酸)
Figure 276277DEST_PATH_IMAGE363
步骤a:
在室温下向搅拌的(2S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基丙酸 (0.44 g, 2.14mmol)和HATU (0.81 g, 2.14 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.60 g, 1.43mmol)和Et3N (0.43 g, 4.29 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到N-[(2S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.54 g, 62%): C27H41Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：606, 608 (3 : 2)，实测值 606, 608 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.22 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.40(dd, J = 19.7, 14.3 Hz, 2H), 4.67-4.50 (m, 3H), 4.50-4.37 (m, 2H), 4.03-3.88(m, 1H), 3.48-3.34 (m, 1H), 3.17-2.88 (m, 2H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.20-2.12(m, 1H), 2.04-1.93 (m, 1H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.48-1.39 (m, 11H), 1.17 (d, J = 4.8 Hz, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-[(2S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.54 g, 0.89 mmol) 在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将所得溶液在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)中和至pH 7。将水层用EA(3×50mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(2S)-3-氨基-2-羟基丙酰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.43 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C22H33Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：506,508 (3 : 2)，实测值 506, 508 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26 (s, 1H),7.00-6.90 (m, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.47-5.33 (m, 2H), 4.97-4.72 (m, 1H),4.65-4.45 (m, 3H), 4.45-4.23 (m, 1H), 4.20-3.91 (m, 2H), 3.20 (d, J = 45.5Hz, 2H), 3.07-2.85 (m, 1H), 2.62-2.44 (m, 1H), 2.03-1.88 (m, 1H), 1.80-1.59(m, 2H), 1.51-1.33 (m, 1H), 1.11 (d, J = 11.1 Hz, 9H)。
步骤c:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(2S)-3-氨基-2-羟基丙酰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.39mmol)和Et3N(0.12 g, 1.18 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中滴加氯乙酰氯(45 mg, 0.39mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将所得混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄绿色油的形式得到2-氯-N-[(2S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基]乙酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H34Cl3N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：582, 584, 586 (3 : 3 : 1)，实测值 582, 584, 586 (3 : 3 : 1)。
步骤d:
在室温下向搅拌的2-氯-N-[(2S)-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基]乙酰胺(0.20 g, 0.34 mmol)和t-BuOK (77 mg, 0.68 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(2S)-5-氧代吗啉-2-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 32% 两步总计): C24H33Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：546, 548 (3 : 2)，实测值 546, 548 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 7.22 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.97 (m, 2H), 5.46-5.34(m, 2H), 4.68-4.46 (m, 3H), 4.39 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35-4.28 (m, 1H),4.27-4.18 (m, 1H), 4.09-3.99 (m, 1H), 3.99-3.83 (m, 1H), 3.82-3.62 (m, 1H),3.52-3.40 (m, 1H), 3.05 (dt, J = 43.8, 12.5 Hz, 1H), 2.55 (dt, J = 40.6, 12.6Hz, 1H), 2.28-2.17 (m, 1H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.74-1.51 (m, 2H), 1.46-1.34(m, 1H), 1.21-1.10 (m, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(2S)-5-氧代吗啉-2-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 0.13mmol)和Pd(PPh3)4(1 mg, 0.001 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4 (9 mg, 0.25mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(2S)-5-氧代吗啉-2-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H29Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：506, 508 (3 : 2)，实测值 506, 508 (3 : 2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(2S)-5-氧代吗啉-2-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (70 mg, 0.14 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm，n；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到25% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：6.55分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物229 ((6S)-6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮三氟乙酸)(10 mg, 15% 两步总计): C17H21Cl2N3O4[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值 402, 404 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.72-4.36 (m, 2H), 4.33-4.24(m, 1H), 4.24-3.99 (m, 3H), 3.76-3.58 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.18-3.04(m, 1H), 2.68 (dt, J = 57.8, 12.8 Hz, 1H), 2.48-2.28 (m, 1H), 2.09-1.97 (m,1H), 1.52-1.00 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.08。
实施例207.化合物231 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮)
Figure 380500DEST_PATH_IMAGE364
步骤a:
在室温下向搅拌的3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基丙酸 (0.59 g, 2.88 mmol)和HATU (1.09 g, 2.87 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (1.00 g, 2.38mmol)和Et3N (0.72 g, 7.15 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到N-(3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.80 g, 44%): C27H41Cl2N3O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：606, 608 (3 : 2)，实测值 606, 608 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.26-7.18 (m, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.11-5.96 (m, 1H), 5.47-5.32 (m,2H), 4.71-4.50 (m, 2H), 4.50-4.37 (m, 2H), 4.06-3.77 (m, 3H), 3.48-3.34 (m,1H), 3.19-2.90 (m, 2H), 2.66-2.50 (m, 1H), 2.21-1.96 (m, 1H), 1.63-1.48 (m,2H), 1.48-1.41 (m, 10H), 1.19-1.15 (m, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-(3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.80 g, 1.32 mmol) 在DCM(8 mL)中的溶液中加入TFA(2 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。在0℃下将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)中和至pH 7。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-(3-氨基-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.7 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H33Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：506, 508 (3 : 2)，实测值 506, 508 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.22 (s,1H), 6.98 (s, 1H), 6.09-5.96 (m, 1H), 5.45-5.32 (m, 2H), 4.68-4.23 (m, 5H),4.12-3.84 (m, 1H), 3.38-3.07 (m, 2H), 3.07-2.90 (m, 1H), 2.64-2.41 (m, 1H),2.09-1.96 (m, 2H), 1.59-1.20 (m, 3H), 1.13 (d, J = 8.3 Hz, 9H)。
步骤c:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-(3-氨基-2-羟基丙酰基)哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.70 g, 1.38 mmol)和Et3N (0.42 g, 4.15 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中滴加氯乙酰氯(0.16 g, 1.38mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到2-氯-N-(3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基)乙酰胺(0.7 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H34Cl3N3O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：582, 584, 586 (3 : 3 : 1)，实测值 582, 584, 586 (3 : 3 : 1)。
步骤d:
将2-氯-N-(3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-2-羟基-3-氧代丙基)乙酰胺 (0.70 g, 1.20mmol)和t-BuOK (0.27 g, 2.40 mmol)在THF(70 mL)中的混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用水(100 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(5-氧代吗啉-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.14 g,19% 三步总计): C24H33Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：546, 548 (3 : 2)，实测值546, 548 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26-7.17 (m, 1H), 6.99 (s, 1H),6.48-6.33 (m, 1H), 6.10-5.94 (m, 1H), 5.48-5.34 (m, 2H), 4.68-4.49 (m, 3H),4.47-4.19 (m, 3H), 4.10-3.97 (m, 1H), 3.97-3.82 (m, 2H), 3.52-3.41 (m, 1H),3.17-2.87 (m, 1H), 2.64-2.44 (m, 1H), 2.28-1.91 (m, 2H), 1.62-1.24 (m, 3H),1.19-1.14 (m, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(5-氧代吗啉-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.18 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.004 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入NaBH4 (28 mg, 0.73 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(5-氧代吗啉-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H29Cl2N3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：506, 508 (3 : 2)，实测值 506, 508 (3 :2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(5-氧代吗啉-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.20 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.50分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物231 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮)(7.5 mg, 10% 两步总计): C17H21Cl2N3O4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值 402, 404 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.70-4.43 (m, 2H),4.34-3.98 (m, 2H), 3.98-3.76 (m, 1H), 3.69-3.57 (m, 1H), 3.45-3.34 (m, 1H),3.21-2.89 (m, 1H), 2.78-2.50 (m, 1H), 2.28-1.65 (m, 3H), 1.60-1.40 (m, 1H),1.40-1.02 (m, 2H)。
实施例208.化合物236 (2-[(R)-氨基[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4-氯-5-甲基苯酚三氟乙酸)
Figure 536674DEST_PATH_IMAGE365
步骤a:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.50 mmol)和Et3N (0.15 g, 1.50mmol)在DCM(3 mL)中的溶液中加入3-(氯磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.16 g, 0.60mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应在室温下用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到3-[4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C29H46ClN3O6S2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：632, 634 (3 : 1)，实测值 632, 634 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl)δ 7.07 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.15-5.89 (m, 1H), 5.46-5.29 (m, 2H), 4.65-4.47(m, 2H), 4.42-4.23 (m, 1H), 4.04-3.75 (m, 2H), 3.75-3.52 (m, 4H), 3.48-3.32(m, 1H), 2.90-2.59 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.30-2.14 (m, 2H), 2.02-1.67 (m,2H), 1.53-1.40 (m, 10H), 1.40-1.20 (m, 2H), 1.14 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.40 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.004 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(30 mg, 0.79 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到3-[4-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C26H42ClN3O6S2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：592, 594 (3 : 1)，实测值 592, 594 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[4-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.42 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XselectCSH OBD柱 30×150 mm 5 μm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到18% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：6.92分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物236 (2-[(R)-氨基[1-(吡咯烷-3-磺酰基)哌啶-4-基]甲基]-4-氯-5-甲基苯酚三氟乙酸)(81 mg, 32% 三步总计):C17H26ClN3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：388, 390 (3 : 1)，实测值 388, 390 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.21-4.02 (m, 2H),3.94 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.72-3.58 (m, 2H),3.55-3.46 (m, 1H), 3.44-3.35 (m, 1H), 3.05-2.94 (m, 1H), 2.94-2.82 (m, 1H),2.48-2.35 (m, 2H), 2.35-2.21 (m, 4H), 2.08-1.99 (m, 1H), 1.52-1.37 (m, 2H),1.37-1.23 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.17。
实施例209.化合物240 (2-[(R)-氨基(1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-4-氯-5-甲基苯酚三氟乙酸)
Figure 333729DEST_PATH_IMAGE366
步骤a:
在室温下向搅拌的咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-甲酸 (0.12 g, 0.75 mmol)和HATU(0.29 g, 0.75 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.50 mmol)和Et3N (0.15 g, 1.50 mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将所得混合物用EA(20 mL)和水(20 mL)稀释。将水溶液用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色泡沫形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C27H34ClN5O3S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：544, 546 (3 : 1)，实测值 544, 546 (3 : 1)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.12-5.99 (m, 1H), 5.48-5.28 (m, 2H),4.68-4.49 (m, 2H), 4.42-4.27 (m, 1H), 4.10-3.97 (m, 2H), 3.14-2.97 (m, 1H),2.45-2.25 (m, 4H), 2.21 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.14-2.08 (m, 1H), 1.59-1.42(m, 1H), 1.42-1.31 (m, 2H), 1.14 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g, 0.28mmol)在HOAc(3 mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(0.16 g, 0.14 mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应减压浓缩，以黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)(1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(150 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H30ClN5O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：504, 506 (3 : 1)，实测值 504, 506 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)(1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g, 0.30 mmol)在1,4-二噁烷(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和水(10 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×20 mL)洗涤。将合并的水溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从3% B到29% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.32分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以浅黄色固体形式得到化合物240 (2-[(R)-氨基(1-[咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羰基]哌啶-4-基)甲基]-4-氯-5-甲基苯酚三氟乙酸)(75 mg, 58% 三步总计): C20H22ClN5O2[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：400, 402 (3 : 1)，实测值 400, 402； 1H NMR (400 MHz,DMSO-d 6) δ 9.30 (s, 1H), 8.81 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 11.9, 2.0Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.62-4.31(m, 1 H), 4.28-4.12 (m, 1H),4.09-3.55 (m, 1H), 3.27-2.65 (m, 2H), 2.31-2.10 (m, 4H), 2.12-1.76 (m, 1H),1.48-1.00 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.22.
以类似于化合物240所述的方式，由(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1e中的化合物。
表1e
Figure 942565DEST_PATH_IMAGE367
Figure 116057DEST_PATH_IMAGE368
Figure 126739DEST_PATH_IMAGE369
Figure 94695DEST_PATH_IMAGE370
Figure 49881DEST_PATH_IMAGE371
Figure 495906DEST_PATH_IMAGE372
Figure 626673DEST_PATH_IMAGE373
Figure 765530DEST_PATH_IMAGE374
实施例210.化合物244 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 348959DEST_PATH_IMAGE375
步骤a:
在氮气氛下，在-65℃下用15分钟向i-Pr2NH(8.98 g, 88.73 mmol)在THF(70 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(25.4 mL, 63.53 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。搅拌45分钟后，将反应溶液冷却至-85℃。然后在氮气氛下在-85℃下用0.5小时滴加4-氯-3-氟-5-甲基苯基 N,N-二乙基氨基甲酸酯(中间体73, 实施例73) (15.00 g, 57.76 mmol)在THF(90 mL)中的溶液。在氮气氛下，在-85℃下搅拌40分钟后，在-80℃下用0.5小时滴加4-[[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(22.00 g, 69.52 mmol)在THF(90 mL)中的溶液。将所得混合物在-65℃下搅拌1小时。在-65℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(50 mL)猝灭，用盐水(100 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/3)洗脱，以灰白色泡沫形式得到4-[(R)-[3-氯-6-[(二乙基氨基甲酰基)氧基]-2-氟-4-甲基苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (25g, 75%): C27H43ClFN3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：576, 578 (3 : 1)，实测值 576,578 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.87 (s, 1H), 4.53-3.72 (m, 4H), 3.56-3.25 (m, 4H), 2.75 (s, 3H), 2.63 (d, J = 41.6 Hz, 2H), 2.26 (dd, J = 27.8,17.3 Hz, 1H), 1.96 (s, 1H), 1.47 (d, J = 2.5 Hz, 9H), 1.34-1.17 (m, 9H), 1.10(s, 9H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -115.04.
步骤b:
在室温下向4-[(R)-[3-氯-6-[(二乙基氨基甲酰基)氧基]-2-氟-4-甲基苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (25.00 g, 43.39mmol)在MeOH(350 mL)中的溶液中加入NaOH(8.68 g, 216.95 mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌3小时。冷却至室温后，将所得混合物用HCl水溶液(1 N)酸化至pH 7，用DCM(3×100mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色泡沫得到4-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(20 g, 粗制): C22H34ClFN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：477, 479 (3 : 1)，实测值 477, 479 (3 : 1)。
步骤c:
在0℃下向4-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.00 g, 41.93 mmol)在DCM(160 mL)中的溶液中加入TFA(40 mL)。使反应混合物升温至室温并搅拌1.5小时。将所得溶液用饱和Na2CO3水溶液在0℃下中和至pH 8，用DCM(8×60 mL)提取。将合并的有机层合并，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20.00 g, 88%): C17H26ClFN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 1)，实测值 377, 379 (3 : 1)。
步骤d:
在室温下向搅拌的HATU (1.66 g, 4.38 mmol)和(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.51 g, 3.50 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中加入Et3N (0.89 g, 8.76mmol)和(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (1.10 g, 2.92 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用水(80 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.5 g, 粗制): C23H34ClFN2O5S [M + H]+: 505, 507 (3 : 1)，实测值505, 507 (3 : 1)。
步骤e:
在0℃下向(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.50 g,2.97 mmol)在THF(15 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 5 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣在下述条件下纯化：柱：XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6 分钟内从15% B到20% B；210 nm；检测器：UV 254 nm； 保留时间：5.02分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物244 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(296 mg,28% 两步总计): C16H22ClFN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：361, 363 (3 : 1)，实测值361, 363 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.52 (s, 1H), 4.67-4.44 (m, 2H),4.13 (dd, J = 48.6, 10.5小时z, 2H), 3.73-3.62 (m, 2H), 3.12-3.01 (m, 1H),2.74-2.54 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.13-2.04 (m, 2H), 1.55-1.51 (m, 1H), 1.40-1.15 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -119.35。
实施例211.化合物251 (5-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-甲氧基-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 536357DEST_PATH_IMAGE376
步骤a:
在室温下向搅拌的5-甲氧基-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (0.19 g, 0.94 mmol),EDCI (0.18 g, 0.94 mmol)和HOBt (0.13 g, 0.94 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基] (哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.25 g, 0.63 mmol)和Et3N (0.19 g, 1.88 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12小时。将所得混合物用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色半固体形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(5-甲氧基-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 粗制): C27H36ClN3O5S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：550, 552 (3 : 1)，实测值 550, 552 (3 : 1)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(5-甲氧基-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.25 g, 粗制)在HOAc(2 mL)中的混合物中加入Pd(PPh3)4(0.21 g, 0.18 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将所得混合物减压浓缩，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)[1-(5-甲氧基-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制): C24H32ClN3O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：510, 512 (3 : 1)，实测值 510, 512 (3 : 1)。
步骤c:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)[1-(5-甲氧基-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20g, 粗制)在THF(2 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 0.5 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C 18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到27% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：7.07分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物251 (5-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-甲氧基-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)(118 mg, 73% 三步总计): C20H24ClN3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：406, 408(3 : 1)，实测值 406, 408 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.28-7.19 (m, 2H),6.95 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.57-4.00 (m, 3H), 3.86 (s, 3H),3.21-2.86 (m, 2H), 2.52-2.36 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.51-1.32 (m, 2H), 1.31-1.13 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.18.
以类似于化合物251所述的方式，由(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸或酸盐(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1f的化合物。
用于制备化合物207的酸盐即5-(羟基甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂如下所述制备。
Figure 521631DEST_PATH_IMAGE377
步骤a’:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的5-溴-2-羟基-1,2-二氢吡啶-3-甲酸甲酯(2.00 g,8.55 mmol)在THF(20 mL)和MeOH(1.00 mL)中的溶液中加入LiBH4(8.55 mL, 17.09 mmol,2 M THF溶液)，将所得混合物在室温下搅拌3小时。然后将反应用水(10mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/MeOH(10/1)洗脱，以灰白色固体形式得到5-溴-3-(羟基甲基)-1H-吡啶-2-酮(1.00g, 57%): C6H6BrNO2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：204, 206 (1 : 1) 实测值：204, 206 (1 : 1)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ6.90-6.82 (m, 1H), 6.72-6.68 (m, 1H), 3.68 (s, 3H)。
步骤b’:
在室温下向搅拌的5-溴-3-(羟基甲基)-1H-吡啶-2-酮(0.50 g, 2.45 mmol)和Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2加合物(0.20 g, 0.25 mmol)在MeOH(5 mL)中的溶液中加入TEA(0.50 g,4.90 mmol)。在CO(5 atm)气氛下，将所得混合物在100℃下搅拌过夜，然后减压浓缩。将残渣通过制备TLC(DCM/MeOH 20/1)纯化，以浅粉色固体形式得到5-(羟基甲基)-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯(60 mg, 13%): C8H9NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：184 实测值：184.
步骤c’:
将5-(羟基甲基)-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸甲酯(60 mg, 0.33 mmol)和LiOH.H2O(27 mg, 0.66 mmol)在MeOH(1 mL)和H2O(0.25 mL)中的溶液在40℃下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩，以灰白色固体形式得到5-(羟基甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸锂(70 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C7H7NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：170，实测值 170。
表1f
Figure 831390DEST_PATH_IMAGE378
Figure 902114DEST_PATH_IMAGE379
实施例212.化合物257 (5-[4-[(R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 955520DEST_PATH_IMAGE380
步骤a:
在室温下向搅拌的6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (84 mg, 0.60 mmol), EDCI (0.12g, 0.60 mmol)和HOBt (82 mg, 0.60 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中分批加入(R)-N-[(S)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体18, 实施例18) (0.20 g, 0.50 mmol)和Et3N (0.15 g, 1.51 mmol)。室温下搅拌2小时后，将反应溶液在室温下用水(20 mL)猝灭，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到 (S)-N-((R)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(1-(6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C22H26Cl2FN3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：518, 520 (3 : 2)，实测值 518, 520 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(1-(6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在THF(4 mL)中的混合物中滴加HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用EA(10 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 3×10 mL)提取。将合并的水层用EA(3×10 mL)洗涤并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到28% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.43分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物257 (5-[4-[(R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸) (64 mg, 59% 两步总计): C18H18Cl2FN3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：414, 416 (3 : 2)，实测值 414,416 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.72-7.56 (m, 2H), 6.98 (d, J = 1.8 Hz,1H), 6.56 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.38-4.06 (m, 2H),3.15-2.88 (m, 2H), 2.62-2.39 (m, 1H), 2.12-1.93 (m, 1H), 1.55-1.15 (m, 3H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.29, -113.13.
实施例213.化合物260 ((2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-醇三氟乙酸)
Figure 716672DEST_PATH_IMAGE381
步骤a:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-3-(苯甲酰基氧基)氧杂环戊烷-2-甲酸 (0.13 g,0.54 mmol)和HATU (0.20 g, 0.54 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g,0.34 mmol)和Et3N(0.11 g, 1.07 mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应通过反相色谱纯化，用具有10 mmoL/L NH4HCO3的55% ACN水溶液洗脱，以浅黄色固体形式得到(2R, 3S)-2-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g, 57%): C31H38Cl2N2O6S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：637, 639 (3 : 2)，实测值 637, 639 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.98 (t, J = 9.6 Hz, 2H), 7.67-7.56 (m, 1H), 7.51-7.37 (m,2H), 7.25-7.17 (m, 1H), 6.97-6.86 (m, 1H), 6.07-5.92 (m, 1H), 5.88 (t, J =6.1 Hz, 1H), 5.41-5.28 (m, 2H), 4.92 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.74-4.39 (m, 4H),4.39-4.25 (m, 2H), 4.07-3.94 (m, 2H), 3.82-3.61 (m, 1H), 2.86 (dt, J = 94.8,12.5 Hz, 1H), 2.47-2.30 (m, 2H), 2.30-2.14 (m, 1H), 1.97-1.80 (m, 1H), 1.67-1.52 (m, 2H), 1.13 (d, J = 24.7 Hz, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-2-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g, 0.24 mmol)和Pd(PPh3)4(5 mg, 0.01 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(18 mg, 0.47 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭并减压浓缩，以棕色油的形式得到(2R,3S)-2-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g,粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C28H34Cl2N2O6S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：597, 599 (3 : 2)，实测值 597, 599 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-2-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g, 0.25mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应减压浓缩，以褐色固体形式得到(2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H26Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：493, 495 (3 : 2)，实测值 493,495 (3 : 2)。
步骤d:
将(2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.15 g, 0.30 mmol)在甲胺的甲醇(5 mL)溶液中的溶液在室温下搅拌16小时。将反应减压浓缩。将残渣溶解于HCl水溶液(1 N, 30 mL)和EA(30 mL)。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×30 mL)洗涤。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到25% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.65分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物260((2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-醇三氟乙酸)(42 mg, 36% 三步总计): C17H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389,391 (3 : 2)，实测值 389, 391 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (d, J =4.0 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.75-4.42 (m, 3H), 4.29-3.95 (m, 3H), 3.95-3.87(m, 1H), 3.18-2.91 (m, 1H), 2.64 (dt, J = 39.0, 12.8 Hz, 1H), 2.50-2.28 (m,1H), 2.28-2.07 (m, 1H), 2.07-1.87 (m, 2H), 1.57-1.07 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.02.
实施例214.化合物264 (5-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-氯-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 197332DEST_PATH_IMAGE382
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2,2-二甲基丙酰胺 (0.10 g, 0.28 mmol)和Et3N (60 mg, 0.56 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入EDC·HCl (80 m, 0.42 mmol)和HOBt (60 mg, 0.42 mmol)和5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (60 mg, 0.36 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将残渣通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色泡沫形式得到N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)[1-(5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2,2-二甲基丙酰胺(0.10 g, 73%): C23H28Cl2FN3O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：532, 534 (3 : 2)，实测值 532, 534 (3 : 2): 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.85 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.47-4.17(m, 2H), 3.11-2.86 (m, 2H), 2.40-2.21 (m, 4H), 1.50-1.24 (m, 5H), 1.14 (d, J = 28.3 Hz, 9H)。
步骤b:
将(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)[1-(5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.19 mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和HCl水溶液(6 N, 1 mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将粗产物通过制备HPLC在下述条件下纯化: 柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到29% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.88分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物264 (5-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-氯-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸) (56 mg, 55%): LCMS (ESI)计算值 forC19H20Cl2FN3O3 [M + H]+: 428, 430 (3 : 2)，实测值 428, 430 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.85 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.47-4.07 (m, 3H), 3.05-2.97 (m, 2H), 2.49 (q, J = 11.1 Hz,1H), 2.40-2.31 (m, 3H), 2.05 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.52-1.21 (m, 3H)。19F NMR(400 MHz, CD3OD) δ -77.19, -117.77.
实施例215.化合物266 (5-[4-[(R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-氯-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 489773DEST_PATH_IMAGE383
步骤a:
在室温下向搅拌的5-氯-6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (61 mg, 0.35 mmol)和EDCI(0.12 g, 0.60 mmol)和HOBt (82 mg, 0.60 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中分批加入(R)-N-[(S)-(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体18, 实施例18) (0.14 g, 0.35 mmol)和Et3N (0.15 g, 1.51 mmol)。室温下搅拌2小时后，将反应溶液在室温下用水(20 mL)猝灭，用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到 (S)-N-((R)-(1-(5-氯-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基)(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C22H25Cl3FN3O4S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：552, 554, 556 (3 : 3 : 1)，实测值 552, 554, 556 (3 : 3 :1)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-((R)-(1-(5-氯-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基)(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (粗制)在THF(4 mL)中的混合物中滴加HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌2小时。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用EA(10 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 3×10 mL)提取。将合并的水层用EA(3×10 mL)洗涤并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到30% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：7.80分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物266 (5-[4-[(R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-3-氯-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)(46 mg, 42% 两步总计): C18H17Cl3FN3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：448, 450,452 (3 : 3 : 1)，实测值 448, 450, 452 (3 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.84 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 1.8 Hz, 1H),4.43 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.39-4.03 (m, 2H), 3.14-2.81 (m, 2H), 2.54-2.37 (m,1H), 2.13-1.93 (m, 1H), 1.53-1.17 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.99,-113.23。
实施例216.化合物272 (5-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 346870DEST_PATH_IMAGE384
步骤a:
在室温下向搅拌的6-氧代-1H-吡啶-3-甲酸 (44 mg, 0.32 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入EDCI (0.10 g, 0.60 mmol)和HOBt (81 mg, 0.60 mmol)。在室温下向上述混合物中加入(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.40 mmol)和Et3N(0.12 g,1.20 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌12小时。将反应混合物通过反相色谱纯化，用45%ACN水溶液(加0.5% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12g, 48%): C23H29ClFN3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：498, 500 (3 : 1)，实测值 498,500 (3 : 1)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.1 g, 0.20 mmol)在THF(1mL)中的混合物中滴加HCl水溶液(4 N, 0.25 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱19×150 mm, 5 μm；流动相A：水(具有10 mmol/L NH4HCO)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.97分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物272 (5-[4-[(R)-氨基(3-氯-2-氟-6-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮三氟乙酸)(48 mg, 46%):C19H21ClFN3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：394, 396 (3 : 1)，实测值 394, 396 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.76-7.56 (m, 2H), 6.73 (s, 1H), 6.56 (d, J =9.4 Hz, 1H), 4.54-3.96 (m, 3H), 3.18-2.82 (m, 2H), 2.56-2.43 (m, 1H), 2.35(s, 3H), 2.12-2.00 (m, 1H), 1.53-1.35 (m, 2H), 1.34-1.18 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.19, -117.75。
实施例217.化合物275 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-二嗪烷-2-酮三氟乙酸)
Figure 41157DEST_PATH_IMAGE385
步骤a:
在室温下向搅拌的3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]丙酸锂 (0.70 g, 2.15 mmol)和HATU (0.81 g, 2.15 mmol)在DMF(6 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.60 g, 1.43 mmol)和Et3N (0.43 g, 4.29 mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将残渣通过反相色谱纯化，用60% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色半固体形式得到N-(2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.74 g, 72% 三步总计): C33H52Cl2N4O7S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：719,721 (3 : 2)，实测值 719, 721 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.22 (d, J =3.9 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.11-5.95 (m, 1H), 5.69-5.49 (m, 2H),5.49-5.30 (m, 2H), 4.71-4.50 (m, 3H), 4.48-4.21 (m, 1H), 4.05-3.79 (m, 1H),3.55-3.40 (m, 3H), 3.19-2.89 (m, 4H), 2.59-2.37 (m, 1H), 2.22-1.92 (m, 2H),1.63-1.36 (m, 19H), 1.33-1.20 (m, 2H), 1.17 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的N-(2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]-3-[4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-基]-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.74 g, 1.03 mmol)在DCM(8 mL)中的溶液中滴加TFA (2mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(6 mL)中和至pH 8。将所得混合物用DCM/MeOH (10/1) (3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的47% ACN水溶液洗脱，以浅黄色半固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-[3-氨基-2-(氨基甲基)丙酰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 33%): C23H36Cl2N4O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519,521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.23 (d, J =11.5 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.47-5.33 (m, 2H), 4.73 (dd, J = 42.4, 13.5 Hz, 1H), 4.62-4.27 (m, 3H), 4.10 (dd, J = 35.9, 13.7 Hz, 1H),3.94-3.70 (m, 1H), 3.11-2.94 (m, 3H), 2.94-2.78 (m, 2H), 2.59-2.41 (m, 1H),2.25-1.95 (m, 2H), 1.58-1.19 (m, 3H), 1.16 (d, J = 9.1 Hz, 9H)。
步骤c:
在0℃下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[3-氨基-2-(氨基甲基)丙酰基]哌啶-4-基][4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.39mmol)在DCM(15 mL)中的溶液中加入CDI(56 mg, 0.35 mmol)的DCM(5 mL)溶液。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-氧代-1,3-二嗪烷-5-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 48%): C24H34Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：545, 547 (3 : 2)，实测值 545, 547 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.20 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.00(s, 1H), 6.12-5.97 (m, 1H), 5.48-5.25 (m, 2H), 4.76-4.22 (m, 3H), 4.22-3.75(m, 2H), 3.65-3.49 (m, 2H), 3.49-3.31 (m, 2H), 3.18-2.94 (m, 2H), 2.62-2.35(m, 1H), 2.35-1.95 (m, 2H), 1.68-1.24 (m, 3H), 1.17 (d, J = 8.5 Hz, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(2-氧代-1,3-二嗪烷-5-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.18mmol)和Pd(PPh3)4(2 mg, 0.002 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入NaBH4(14 mg, 0.37mmol)。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。所得混合物减压浓缩，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-氧代-1,3-二嗪烷-5-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：505, 507 (3 : 2)，实测值 505, 507(3: 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(2-氧代-1,3-二嗪烷-5-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.20 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 µm, 19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.68分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物275 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-二嗪烷-2-酮三氟乙酸)(50 mg, 53% 两步总计):C17H22Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：401, 403 (3 : 2)，实测值 401, 403 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 7.56 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 4.36 (dd, J =58.0, 13.1 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 3.99 (dd, J = 54.6, 13.8 Hz,1H), 3.13 (d, J = 8.5 Hz, 4H), 3.07-2.88 (m, 2H), 2.47-2.37 (m, 1H), 2.22-2.07 (m, 1H), 1.90 (t, J = 16.2 Hz, 1H), 1.30-0.85 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz,CD3OD) δ -77.38.
实施例218.化合物284 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-2-羟基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 630401DEST_PATH_IMAGE386
步骤a:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.37 g, 2.49mmol)和HATU (1.18 g, 3.11 mmol)在DMF(10 mL)中的混合物中滴加N-[(R)-[5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯基](哌啶-4-基) 甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.94 g, 2.08 mmol)和Et3N (0.42 g, 4.15 mmol)。将最终反应混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(5×50 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有20 mmol/L NH4HCO3的50% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[(R)-[5-氯-2- (丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.68 g, 56%): C26H36ClF3N2O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：581, 583 (3 : 1)，实测值 581, 583 (3 : 1)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)-4-(三氟甲基)苯基](1-[[(4R)-2,2-二甲基-1,3-di氧杂环戊烷-4-基](羟基)甲基]哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.68 g, 1.17 mmol)和Pd(PPh3)4 (0.13 g, 0.12 mmol)在THF(8 mL)中的混合物中分批加入NaBH4(0.88 g, 2.33 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(10 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmol/L NH4HCO3的45% ACN水溶液洗脱，以浅黄色油的形式得到N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(三氟甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.33 g, 47%): C23H32ClF3N2O5S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543 (3 : 1)，实测值 541, 543 (3 : 1)。1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.46 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.94-4.83 (m, 1H),4.65-4.37 (m, 2H), 4.37-4.17 (m, 3H), 3.17-2.95 (m, 2H), 2.73-2.60 (m, 1H),2.24-2.10 (m, 2H), 1.44-1.32 (m, 8H), 1.16 (d, J = 5.6 Hz, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的N-[(R)-[5-氯-2-羟基-4-(三氟甲基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.33 g,0.61 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 2 mL)。在室温下将反应混合物搅拌2小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30×150 mm, 5 µm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.5分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物284 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-2-羟基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(106.2 mg, 43%)。C16H20ClF3N2O4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399 (3 : 1)，实测值 397, 399 (3 : 1): 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.31 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.15-7.03 (m, 1H), 4.68-4.46 (m, 2H),4.12 (dd, J = 40.8, 14.0 Hz, 1H), 3.98 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.76-3.56 (m,2H), 3.05 (dt, J = 25.9, 12.8 Hz, 1H), 2.64 (dt, J = 26.8, 12.7 Hz, 1H),2.14-1.95 (m, 2H), 1.48 (s, 1H), 1.43-1.16 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-63.69.
实施例219.化合物274 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-4-甲基吗啉-3-酮 异构体1)； 化合物278 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-4-甲基吗啉-3-酮 异构体2)
Figure 675718DEST_PATH_IMAGE387
步骤a:
通过制备手性HPLC在下述条件下分离6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-4-甲基吗啉-3-酮三氟乙酸(66.5 mg 0.13 mmol): 柱：CHIRALPAK IF,2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：19 mL/min；梯度：22分钟内从40% B到40% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1:12.67 分钟； RT2: 17.32分钟； 注射体积: 0.6 mL。
在12.67分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物278 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-4-甲基吗啉-3-酮 异构体2)(18.1 mg, 11 %): C18H23Cl2N3O4 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：416, 418 (3 : 2)，实测值416, 418 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.81-4.66 (m, 1H), 4.53 (dd, J = 41.3, 13.4 Hz, 1H), 4.30-4.16 (m, 2H), 4.14-3.97(m, 1H), 3.91 (dd, J = 18.3, 7.7 Hz, 1H), 3.74 (dd, J = 12.1, 8.6 Hz, 1H),3.45-3.35 (m, 1H), 3.19-2.94 (m, 4H), 2.72-2.53 (m, 1H), 2.16-1.92 (m, 2H),1.59-1.43 (m, 1H), 1.38-1.04 (m, 2H)。
在17.32分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物274 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-4-甲基吗啉-3-酮 异构体1)(17.3 mg, 11%): C18H23Cl2N3O4 [M + H]+LCMS (ESI)计算值：416, 418 (3 : 2)，实测值416, 418 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.88 (d,J = 3.0 Hz, 1H), 4.75 (td, J = 8.2, 3.8 Hz, 1H), 4.52 (dd, J = 35.4, 13.3 Hz,1H), 4.31-4.06 (m, 2H), 4.12-3.98 (m, 1H), 3.91 (dd, J = 7.6, 2.4 Hz, 1H),3.80-3.68 (m, 1H), 3.46-3.35 (m, 1H), 3.12-2.98 (m, 4H), 2.75-2.51 (m, 1H),2.16-1.95 (m, 2H), 1.51 (t, J = 15.2 Hz, 1H), 1.40-1.04 (m, 2H)。
实施例220.化合物276 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮 异构体2)
Figure 70927DEST_PATH_IMAGE388
步骤a:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮(0.12 g, 0.23 mmol): 柱：CHIRALPAK IG, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：MTBE (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：21 分钟内从10% B到10% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 12.96 分钟； RT2: 18.67 分钟； 注射体积:0.3 mL； 试验次数: 17。
在12.96分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为(6S)-6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮 (37 mg, 41%):C17H21Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值 402, 404 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.70-4.43 (m, 2H), 4.34-3.98 (m, 2H), 3.98-3.76 (m, 1H), 3.69-3.57 (m, 1H), 3.45-3.34 (m, 1H), 3.21-2.89 (m, 1H), 2.78-2.50 (m, 1H), 2.28-1.65 (m, 3H), 1.60-1.40 (m, 1H), 1.40-1.02 (m, 2H)。
以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物276 (6-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]吗啉-3-酮 异构体2)(41 mg, 44%):C17H21Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值 402, 404 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.72-4.43 (m, 2H),4.24 (qd, J = 16.6, 3.7 Hz, 2H), 4.07 (dd, J = 40.0, 13.5 Hz, 1H), 3.91 (dd,J = 16.3, 7.7 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 12.8, 9.0 Hz, 1H), 3.45-3.35 (m, 1H),3.19-2.92 (m, 1H), 2.72-2.56 (m, 1H), 2.12-1.94 (m, 2H), 1.56-1.40 (m, 1H),1.40-1.11 (m, 2H)。
实施例221.化合物318 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(环戊-1-烯-1-基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 619720DEST_PATH_IMAGE389
步骤a:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体23,实施例23) (0.10 g, 0.18 mmol)在DCM(2 mL)中的混合物中加入BBr3 (0.27 g, 1.06mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。在0℃下将反应用水(3 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用30% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-溴-5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮(60 mg, 67%): C15H20BrClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：407, 409, 411(2: 3 : 1)，实测值 407, 409, 411 (2 : 3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43(s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.71-4.43 (m, 1H), 4.30-4.05 (m, 2H), 3.76-3.58 (m,2H), 3.19-2.95 (m, 1H), 2.67 (dt, J = 42.6, 12.9 Hz, 1H), 2.48-2.31 (m, 1H),2.08-1.97 (m, 2H), 1.48-1.07 (m, 3H)。
步骤b:
向(2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-溴-5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮(30 mg, 0.07 mmol)和2-(环戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(29 mg, 0.15 mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)和水(0.5 mL)中的溶液中加入Na2CO3(23mg, 0.22 mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(12 mg, 0.02 mmol)。将反应混合物用氮脱气三次。在氮气氛下，在80℃下搅拌2小时后，将所得混合物冷却至室温，用EA(15 mL)稀释。将所得溶液用HCl水溶液(1 N, 3×10 mL)提取。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5μm； 流动相A:水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从8% B到35% B；检测器：UV 220/254nm；保留时间：6.50分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物318 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基[5-氯-4-(环戊-1-烯-1-基)-2-羟基苯基]甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(12 mg, 33%): C20H27ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：395, 397 (3 : 1)，实测值 395, 397 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.28(s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.14 (q, J = 2.3 Hz, 1H), 4.71-4.46 (m, 2H), 4.28-4.03(m, 2H), 3.83-3.56 (m, 2H), 3.17-2.95 (m, 1H), 2.78-2.61 (m, 3H), 2.59-2.51(m, 2H), 2.48-2.30 (m, 1H), 2.08-1.88 (m, 3H), 1.50-1.11 (m, 3H)。
实施例222.化合物282 ((2R)-1-(4-((R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-异丙基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 707762DEST_PATH_IMAGE390
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体23, 实施例23)(0.50 g, 0.88 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷 (0.22 g, 1.32 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)和H2O (1.25 mL)中的溶液中加入Na2CO3 (0.28 g, 2.65 mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (72 mg, 0.08 mmol)。将所得混合物用氮脱气三次，在氮气氛下在80 °C下搅拌2小时。将所得混合物用EA(20 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-2-甲氧基-4-(丙-1-烯-2-基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.37 g, 79%): C26H39ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：527, 529 (3 :1)，实测值 527, 529 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.11 (d, J = 20.5小时z,1H), 6.73 (s, 1H), 5.30-5.22 (m, 1H), 5.02 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.74-4.61 (m,2H), 4.61-4.43 (m, 1H), 4.43-4.28 (m, 1H), 4.28-4.05 (m, 2H), 3.84 (s, 3H),3.12-2.85 (m, 1H), 2.55 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.05-1.91 (m,2H), 1.68-1.48 (m, 3H), 1.45-1.38 (m, 6H), 1.18 (d, J = 12.9 Hz, 9H)。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-2-甲氧基-4-(丙-1-烯-2-基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.19 mmol)在MeOH(2 mL)中的溶液中加入PtO2(30 mg, 0.13mmol)。将所得混合物用氢脱气三次，并在氢气氛(1.5 atm)下在室温下搅拌1小时。过滤所得混合物。将滤饼用MeOH(3×30 mL)洗涤。将滤液减压浓缩，以棕色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-异丙基-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 99%): C26H41ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：529, 531 (3 : 1)，实测值 529, 531 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD)δ 7.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.58-4.35 (m, 2H), 4.30-3.98(m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.18-2.88 (m, 1H), 2.63 (dt, J =23.0, 12.6 Hz, 1H), 2.26-1.97 (m, 3H), 1.48-1.30 (m, 7H), 1.30-1.21 (m, 8H),1.14 (d, J = 7.7 Hz, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-异丙基-2-甲氧基苯基)[1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g,0.19 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3(0.47 g, 1.89 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用MeOH(2 mL)在0oC下猝灭。将混合物用饱和NaHCO3水溶液(5 mL)中和至pH 7。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeShield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 µm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从25% B到45% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.50分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物282 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-异丙基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(16mg, 22% 两步总计): C18H27ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：371, 373 (3 : 1)，实测值 371, 373 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.10 (s, 1H), 6.76 (s, 1H),4.65-4.44 (m, 2H), 4.11 (dd, J = 46.7, 13.7 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 7.2 Hz,1H), 3.78-3.55 (m, 2H), 3.30-3.26 (m, 1H), 3.11-2.93 (m, 1H), 2.75-2.49 (m,1H), 2.07-1.93 (m, 2H), 1.58-1.38 (m, 1H), 1.38-1.07 (m, 8H)。
实施例223.化合物283 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氟-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 958483DEST_PATH_IMAGE391
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][5-氟-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (30 mg, 0.06 mmol)和Pd(PPh3)4 (7 mg, 0.006 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (5 mg, 0.12 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭。减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](5-氟-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20 mg, 粗制): C23H35FN2O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：471，实测值 471。
步骤b:
在空气气氛下，在室温下将(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](5-氟-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20mg, 0.042 mmol)和HCl水溶液(6 N, 0.50 mL)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18OBD柱，5 μm,19×150 mm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到32% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：7.38分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物283 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氟-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(4 mg, 29%):C16H23FN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：327，实测值 327； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ6.82 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 13.6 Hz,1H), 4.53-4.46 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 48.1, 13.8 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 8.3Hz, 1H), 3.70-3.57 (m, 2H), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.70-2.60 (m, 1H), 2.19 (s,3H), 2.07-1.94 (m, 2H), 1.51-1.42 (m, 1H), 1.40-1.15 (m, 2H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -131.97.
实施例224.化合物285 (2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-氟-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸
Figure 891804DEST_PATH_IMAGE392
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (中间体21, 实施例21) (0.60 g, 2.25 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl(2.25 mL,2.25 mmol, 2 M THF溶液)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。然后在0℃下将4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 1.88 mmol)在THF(4 mL)中的溶液滴加至上述溶液中。将所得溶液在0℃下另外搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物用水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 80%): C20H27ClFNO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：400, 402(3 :1)，实测值 400, 402 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J = 8.4 Hz,1H), 6.70 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.39 (dd, J = 24.6, 13.8Hz, 2H), 4.71 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 4.24-4.06 (m,3H), 2.77-2.50 (m, 2H), 1.95-1.68 (m, 2H), 1.47 (d, J = 2.6 Hz, 9H), 1.45-1.20 (m, 3H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 1.50 mmol)在DCM(4 mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.95g, 2.25 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将反应用饱和Na2SO3水溶液(5 mL)猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(8/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 98%): C20H25ClFNO4 [M + Na]+的LCMS(ESI)计算值：420, 422 (3 : 1)，实测值 420, 422 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 6.15-5.98 (m, 1H),5.58-5.33 (m, 2H), 4.62 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.29-4.06 (m, 3H), 3.47-3.33 (m,1H), 2.93-2.62 (m, 3H), 1.96-1.68 (m, 2H), 1.48 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 1.51 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.55 g, 4.52 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (3.44 g, 15.08 mmol)。使反应升温至70℃并在氮气氛下搅拌16小时。将反应溶液用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经硅藻土(celite)过滤。将滤液用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.53 g, 70%):C24H34ClFN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 1)，实测值 501, 503 (3 :1)；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.12 (s, 1H), 6.72 (d, 2.9 Hz, 1H), 6.09-5.91 (m,1H), 5.37 (dd, J = 33.6, 14.0 Hz, 2H), 4.58 (s, 2H), 4.23-4.07 (m, 1H), 2.90-2.55 (m, 4H), 1.95-1.83 (m, 1H), 1.83-1.64 (m, 1H), 1.65-1.54 (m, 2H), 1.48(s, 9H), 1.23 (s, 9H)
步骤d:
在氮气氛下，在-70℃下向搅拌的4-[(1E)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.53 g, 1.06mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(2.08 mL, 2.08 mmol, 1M 甲苯溶液)。在氮气氛下，将所得溶液在-70℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(2/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.43 g,81%): C24H36ClFN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：503, 505 (3 : 1)，实测值 503,505 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.71 (d, J =10.7 Hz, 1H), 6.11-5.93 (m, 1H), 5.48-5.28 (m, 2H), 4.64-4.39 (m, 2H), 4.31-4.04 (m, 1H), 4.23-4.04 (m, 1H), 3.83-3.61 (m, 1H), 2.74-2.52 (m, 2H), 2.03-1.78 (m, 2H), 1.62-1.60 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.17 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.40 mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液中和至pH 8。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×40 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.16 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H28ClFN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：403, 405 (3 : 1)，实测值 403, 405 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.20 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 6.09-5.89 (m,1H), 5.48-5.31 (m, 2H), 4.68-4.49 (m, 2H), 4.49-4.32 (m, 1H), 4.32-4.23 (m,1H), 3.42 (dd, J = 33.0, 12.6 Hz, 1H), 2.91-2.71 (m, 2H), 2.38-2.12 (m, 1H),2.12-1.94 (m, 1H), 1.78-1.51 (m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (87 mg, 0.60mmol)和HATU (0.23 g, 0.60 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.16 g,0.40 mmol)和Et3N (80 mg, 0.79 mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用58% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.18 g, 85%): C25H36ClFN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：531, 533 (3 :1)，实测值 531, 533 (3 : 1)。
步骤g:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.18 g, 0.34 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.003 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(26 mg, 0.69 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应溶液用水(0.5 mL)猝灭并减压浓缩，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-氟-2-羟基苯基)([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 粗制)，其无需进一步纯化而直接用于后续步骤: C19H28ClFN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：451, 453(3: 1)，实测值 451, 453 (3 : 1)；
步骤h:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-氟-2-羟基苯基)([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.13 g, 0.29 mmol) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。将反应减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到18% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.95分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物285 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-氟-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(30 mg, 25% 两步总计): C15H20ClFN2O4 [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：347, 349 (3 : 1)，实测值 347, 349 (3 : 1)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.39 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 10.5小时z, 1H), 4.72-4.45 (m, 2H), 4.36-3.97 (m, 2H), 3.77-3.57 (m, 2H), 3.20-2.95 (m, 1H), 2.81-2.56 (m, 1H), 2.46-2.29 (m, 1H), 2.14-1.94 (m, 1H), 1.51-1.09 (m, 3H)； 19F NMR(376 MHz, CD3OD) δ -77.20, -114.76.
实施例225.化合物286 (4-[(R)-氨基([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-氯-5-羟基苄腈三氟乙酸)
Figure 560683DEST_PATH_IMAGE393
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(中间体23, 实施例23)(90 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4 (18 mg, 0.02 mmol)在NMP(2mL)中的混合物中加入Zn(CN)2(37 mg, 0.32 mmol)。在150℃下用微波辐射照射反应混合物2小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液猝灭。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-氰基-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20 mg, 17%):C24H34ClN3O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：512, 514 (3 : 1)，实测值 512, 514 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.27-7.20 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.71-4.60 (m,2H), 4.59-4.36 (m, 1H), 4.29-4.07 (m, 2H), 3.92-3.77 (m, 4H), 2.97 (dt, J =63.9, 13.0 Hz, 1H), 2.53 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.20-2.09 (m, 1H), 2.03-1.91(m, 1H), 1.53-1.24 (m, 9H), 1.18 (d, J = 10.6 Hz, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-氰基-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (20 mg,0.04 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3(59 mg, 0.23 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。在0℃下将反应用水(1 mL)猝灭。将混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm，n；流动相A：水(加0.05%TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到23% B；检测器：UV 220/254nm；保留时间：6.03分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以橙色固体形式得到化合物286 (4-[(R)-氨基([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-氯-5-羟基苄腈三氟乙酸)(4 mg, 22%): C16H20ClN3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：354, 356 (3 : 1)，实测值 354, 356 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.55 (s, 1H), 7.27 (s, 1H),4.71-4.44 (m, 2H), 4.30-4.05 (m, 2H), 3.76-3.56 (m, 2H), 3.20-2.95 (m, 1H),2.66 (dt, J = 44.9, 12.9 Hz, 1H), 2.48-2.31 (m, 1H), 2.09-1.95 (m, 1H), 1.50-1.13 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.93.
实施例226.化合物287 ((R)-1-(4-((S)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)； 化合物291 ((R)-1-(4-((R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 819626DEST_PATH_IMAGE394
步骤a:
通过手性制备HPLC在下述条件下分离(2R)-1-[4-[氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 (106.00 mg): 柱：CHIRALPAK IG, 20×250mm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20 mL/min；梯度：23 分钟内从30% B到30% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 13.338 分钟； RT2: 18.463 分钟； 注射体积: 0.4 ml。
在7.47分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物291 ((R)-1-(4-((R)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)(31mg, 29%): C15H19Cl2FN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：381, 383 (3 : 2)，实测值 381,383 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.66 (s, 1H), 4.68-4.44 (m, 2H), 4.27-4.04 (m, 2H), 3.81-3.50 (m, 2H), 3.21-2.96 (m, 1H), 2.77-2.59 (m, 1H), 2.31-2.16 (m, 1H), 2.05 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.46-1.15(m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -116.15.
在10.05分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物287((R)-1-(4-((S)-氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮)(28 mg, 26%): C15H19Cl2FN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：381, 383 (3 : 2)，实测值 381, 383 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.66 (s, 1H), 4.68-4.44 (m,2H), 4.27-4.04 (m, 2H), 3.81-3.50 (m, 2H), 3.21-2.96 (m, 1H), 2.77-2.59 (m,1H), 2.31-2.16 (m, 1H), 2.05 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 13.3 Hz, 1H),1.46-1.15 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -116.15.
实施例227.化合物288 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-环丁基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 308376DEST_PATH_IMAGE395
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯(0.24 g,0.87 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(0.35 mL, 0.88 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。将反应溶液在-78℃下搅拌30分钟。然后将(S)-N-([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g, 0.44 mmol)在THF(3 mL)中的溶液加入该溶液中。将所得溶液在-78℃下另外搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭，用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用43% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺三氟乙酸(0.12 g,64%): C21H33ClN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：413, 415 (3 :1)，实测值 413, 415(3 : 1)；1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.48 (d, J = 9.0Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.85-3.72 (m, 1H), 3.47 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.04-2.81 (m, 3H), 2.47-2.31 (m, 3H), 2.23-1.98 (m, 4H), 1.92-1.83 (m, 1H), 1.67-1.34 (m, 2H), 1.34-1.21 (m, 1H), 1.13 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (64 mg, 0.44mmol)和HATU (0.17 g, 0.45 mmol)在DMF(2 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.29 mmol)和Et3N (88 mg, 0.87 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用65% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(50 mg,38%)；C27H41ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543 (3 : 1)，实测值 541, 543(3 : 1)和(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺，为浅黄色油的形式(30 mg, 25%):C24H37ClN2O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 1)，实测值 501, 503 (3 :1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (50 mg,0.09 mmol)和(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丁基-2-甲氧基苯基)([1-[(2R)-2,3-二羟基丙酰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (30 mg, 0.06 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入BBr3(0.14 g, 0.55 mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。在0℃下将反应用MeOH(1mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7分钟内从5% B到45% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.62分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物288 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-环丁基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(28.3 mg, 25% 两步总计): C19H27ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：383, 385 (3 : 1)，实测值 383, 385(3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.22 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 4.70-4.38 (m,2H), 4.32-4.03 (m, 2H), 3.87-3.56 (m, 3H), 3.19-2.92 (m, 1H), 2.67 (dt, J =45.2, 12.8 Hz, 1H), 2.48-2.29 (m, 3H), 2.19-1.93 (m, 4H), 1.93-1.80 (m, 1H),1.48-1.06 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.99.
实施例228.化合物289 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-环丙基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 248650DEST_PATH_IMAGE396
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-5-氯-4-环丙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(中间体72, 实施例72) (0.1 g, 0.43 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(0.17mL, 0.43 mmol, 2.5 M己烷溶液)。将反应在-78℃下搅拌30分钟。然后在10分钟内加入(S)-N-[[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.29 mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将混合物用水(30 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用62% ACN水溶液(加0.01% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(S)-[5-氯-4-环丙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30 mg, 19%): C28H41ClN2O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：553, 555 (3 : 1)，实测值, 553, 555 (3 : 1)； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.28 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.16-6.00 (m, 1H),5.49-5.23 (m, 2H), 4.83-4.77 (m, 1H), 4.62-4.35 (m, 4H), 4.32-4.01 (m, 3H),3.16-2.87 (m, 1H), 2.69-2.53 (m, 2H), 2.27-1.99 (m, 3H), 1.45-1.22 (m, 8H),1.14 (d, J = 6.7 Hz, 9H), 1.05-0.98 (m, 2H), 0.76-0.66 (m, 2H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-环丙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (35 mg, 0.06 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg)在THF(1 mL)中的混合物中加入NaBH4(5 mg, 0.13 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将反应用H2O(2 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丙基-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(35 mg, 粗制): C25H37ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：513, 515 (3 : 1)，实测值, 513, 515 (3 : 1)；
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-环丙基-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (35 mg,0.07 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 0.5 mL)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgeShield RP18 OBD柱 19×15 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.03分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物289 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-环丙基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(11mg, 44%): C18H25ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：369, 371 (3 : 1)，实测值 369,371 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 7.10 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.67-4.47 (m,2H), 4.11 (dd, J = 47.7, 13.8 Hz, 1H), 3.89-3.81 (m, 1H), 3.74-3.54 (m, 2H),3.13-2.93 (m, 1H), 2.69-2.56 (m, 1H), 2.20-1.95 (m, 3H), 1.53-1.39 (m, 1H),1.40-1.11 (m, 2H), 1.06-0.84 (m, 2H), 0.70-0.53 (m, 2H)。
实施例229.化合物290 (2R)-1-[4-[氨基(4,5-二氯-3-氟-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸
Figure 772036DEST_PATH_IMAGE397
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(中间体46, 实施例46) (0.80 g, 2.67 mmol)在THF(6 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl(1.60 mL, 3.20 mmol, 2 M THF溶液)。在氮气氛下，在0℃下搅拌30分钟后，在氮气氛下，在0℃下滴加4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.62 g, 2.93 mmol)在THF(4 mL)中的溶液。使所得混合物升温至室温，在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(20mL)猝灭，用EA(2×10 mL)提取。将有机相经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以无色油的形式得到4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.55 g, 48%):C20H26Cl2FNO4 [M + H - 100]+的LCMS (ESI)计算值：334, 336 (3 : 2)，实测值 334, 336(3 : 2)。
步骤b:
在0℃下向4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.55 g, 1.27 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.81g, 1.90 mmol)。然后将反应在室温下搅拌2小时。将所得混合物用共溶剂NaHCO3水溶液/Na2SO3水溶液(20 mL, v/v = 1/1)洗涤。将有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 91%):C20H24Cl2FNO4 [M + H - 56]+的LCMS (ESI)计算值：376, 378 (3 : 2)，实测值 376, 378(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.08-5.95 (m,1H), 5.46-5.30 (m, 2H), 4.75-4.67 (m, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.28-3.20 (m, 1H),2.84 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 1.85 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 1.67-1.53 (m, 2H), 1.48(d, J = 1.8 Hz, 9 H)。
步骤c:
在氮气氛下向搅拌的4-[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.50g, 1.16 mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.28 g, 2.31 mmol)在THF(20 mL)中的溶液中一次加入Ti(OEt)4 (2.64 g, 11.57 mmol)。在氮气氛下，在80℃下将反应溶液搅拌30小时。冷却至室温后，将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液(60 mL)猝灭。过滤所得混合物。将滤液用EA(2×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.80 g, 粗制): C24H33Cl2FN2O4S [M + H - 100]+的LCMS (ESI)计算值：435, 437 (3 :2)，实测值 435, 437 (3 : 2)。
步骤d:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.80 g, 2.24 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(0.17 g, 4.48 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭并浓缩除去MeOH。然后将水层用EA(2×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g, 粗制):C24H35Cl2FN2O4S [M + H - 100]+的LCMS (ESI)计算值：437, 439 (3 : 2)，实测值 437,439 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.80 g, 粗制)在DCM(8 mL)中的溶液中加入TFA(2 mL)。在氮气氛下，在室温下将反应溶液搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 8。将所得混合物用DCM(3×25 mL)提取。将合并的有机层用盐水(10 mL)洗涤，经Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.60 g, 粗制): C19H27Cl2FN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：437, 439 (3 : 2)，实测值 437, 439(3 : 2)。
步骤f:
在氮气氛下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.13 g,0.89 mmol)和HATU(0.39 g, 1.03 mmol)在DMF(8 mL)中的溶液中加入N-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.60 g,粗制)和Et3N (0.48 mL, 4.71 mmol)。在氮气氛下，在室温下将反应溶液搅拌2小时。将所得溶液倒入水(50 mL)中。将所得混合物用EA(2×20 mL)提取。将有机层用盐水(5×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.50 g, 粗制): C25H35Cl2FN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：565, 567 (3 : 2)，实测值 565, 567 (3 : 2)。
步骤g:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-3-氟-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.50 g, 粗制)和Pd(PPh3)4 (20 mg, 0.02 mmol)在THF(6 mL)中的混合物中分批加入NaBH4(0.13 g, 3.54 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。在0℃下将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(3 mL)猝灭并减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(4,5-二氯-3-氟-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.50 g, 粗制): C22H31Cl2FN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：525, 527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 : 2)。
步骤h:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-3-氟-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.50 g, 粗制)在THF(3 mL)中的混合物中滴加HCl水溶液(6 N, 3 mL))。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱，30×150 mm, 5 μm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到22% B；检测器：220 nm； 保留时间：6.48分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物290 ((2R)-1-[4-[氨基(4,5-二氯-3-氟-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(55.9 mg, 10% 6步总计):C15H19Cl2FN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：381, 383 (3 : 2)，实测值 381, 383 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.34 (s, 1H), 4.72-4.41 (m, 2H), 4.32-4.03 (m,2H), 3.77-3.56 (m, 2H), 3.08 (dt, J = 44.1, 12.7 Hz, 1H), 2.67 (dt, J = 44.2,12.9 Hz, 1H), 2.38-2.35 (m, 1H), 2.02 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.50-1.16 (m,3H)； 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ -77.014, -132.61.
实施例230.化合物292 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-乙基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 936301DEST_PATH_IMAGE398
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-5-氯-4-乙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(中间体57, 实施例57) (0.24 g, 0.87 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入n-BuLi(0.34mL, 0.85 mmol, 2.5 M 己烷溶液)。将溶液在-78℃下搅拌30分钟。然后将(S)-N-([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.58 mmol)在THF(2 mL)中的溶液加入该溶液中。将反应在-78℃下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭，用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用65% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-[5-氯-4-乙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 48%):C27H41ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：541, 543 (3 : 1)，实测值 541, 543 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.31-7.20 (m, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.19-5.97 (m,1H), 5.37-5.23 (m, 2H), 4.76-4.47 (m, 4H), 4.36-3.97 (m, 2H), 3.79-3.57 (m,2H), 3.20-2.83 (m, 1H), 2.82-2.39 (m, 3H), 2.30-2.03 (m, 2H), 1.44-1.35 (m,6H), 1.35-1.29 (m, 2H), 1.29-1.19 (m, 3H), 1.16-1.11 (m, 10H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[5-氯-4-乙基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 0.28 mmol)和Pd(PPh3)4 (3 mg, 0.003 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(21 mg, 0.55 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(5-氯-4-乙基-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H37ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：501, 503 (3 : 1)，实测值 501, 503 (3 :1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(5-氯-4-乙基-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.15 g,0.30 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5µm n；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到25% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.34分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物292 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-4-乙基-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)三氟乙酸(23 mg, 18% 两步总计): C17H25ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：357, 359 (3 :1)，实测值 357, 359 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.25 (s, 1H), 6.86 (s,1H), 4.66-4.47 (m, 2H), 4.29-4.04 (m, 2H), 3.69-3.55 (m, 2H), 3.16-3.01 (m,1H), 2.79-2.54 (m, 3H), 2.48-2.26 (m, 1H), 2.08-1.91 (m, 1H), 1.41-1.18 (m,6H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.96.
实施例231.化合物293 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基-4,5-二甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 177926DEST_PATH_IMAGE399
步骤a:
在室温下向搅拌的2-溴-4,5-二甲基苯酚 (2.00 g, 9.94 mmol)在DMF(10 mL)中的溶液中加入3-溴丙-1-烯(1.81 g, 14.92 mmol)和K2CO3(2.75 g, 19.89 mmol)。将反应在40℃下搅拌16小时。将反应用水(50 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE洗脱，以灰白色油的形式得到1-溴-4,5-二甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(1.29 g, 54 %): 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.28 (s, 1H), 6.82 (s, 1H),6.15-6.00 (m, 1H), 5.53-5.42 (m, 1H), 5.31-5.20 (m, 1H), 4.70-4.45 (m, 2H),2.21 (d, J = 16.0 Hz, 6H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-4,5-二甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.10 g, 0.43 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(0.18 mL, 0.450 mmol, 2.5 M己烷溶液)。将反应在-78℃下搅拌30分钟。然后加入(S)-N-[[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.29 mmol)。将所得溶液在-78℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物用EA(20 mL)和水(20 mL)稀释，将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(S)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][4,5-二甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(42 mg, 29 %): C27H42N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：507，实测值 507； 1H NMR(400 MHz, CD3OD) δ 7.00 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.21-6.06 (m, 1H),5.44 (d, J = 16.8 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 10.5小时z, 1H), 4.85-4.78 (m, 1H),4.56 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 4.47-4.33 (m, 1H), 4.29-4.00 (m, 4H), 3.17-2.87 (m,1H), 2.73-2.53 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.15-2.01 (m, 2H), 1.42-1.33 (m, 7H), 1.30-1.24 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][4,5-二甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(43 mg, 0.08 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.01 mmol)在THF(1 mL)中的混合物中加入NaBH4(6 mg, 0.16 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用H2O(30 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-羟基-4,5-二甲基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(43 mg, 粗制): C24H38N2O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：467，实测值 467。
步骤d:
在室温下向搅拌的N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-羟基-4,5-二甲基苯基)甲基]-2,2-二甲基丙酰胺 (43 mg, 0.09 mmol)在THF(1 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 0.50 mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.03分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物293 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基-4,5-二甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(11 mg, 25% 两步总计): C17H26N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：323，实测值 323； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 6.94 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.72-4.41 (m, 2H), 4.31-3.98 (m, 2H),3.78-3.57 (m, 2H), 3.15-2.97 (m, 1H), 2.66 (dt, J = 50.5, 13.3 Hz, 1H), 2.48-2.30 (m, 1H), 2.21 (d, J = 7.7 Hz, 6H), 2.10-1.88 (m, 1H), 1.45-1.09 (m, 3H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.02.
实施例232.化合物294 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 718629DEST_PATH_IMAGE400
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的1-溴-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(中间体53, 实施例53) (99 mg, 0.44 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加n-BuLi(0.17 mL,0.425 mmol, 2.5 M 正己烷溶液)。将反应在-78℃下搅拌30分钟。然后将(S)-N-[[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.29 mmol)加入反应中。将所得溶液在-78℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)在-78℃下猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化， 用PE/EA(1/4)洗脱，以无色油的形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(35 mg, 24%): C26H40N2O5S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：493，实测值 493。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基][4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (30mg, 0.06 mmol)和Pd(PPh3)4 (0.70 mg, 0.001 mmol)在THF(0.5 mL)的溶液中加入NaBH4 (5 mg, 0.12 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-羟基-4-甲基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(20 mg, 粗制)，其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。C23H36N2O5S [M +H]+的LCMS (ESI)计算值：453，实测值 453。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基](2-羟基-4-甲基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(30 mg, 0.07 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridgePrep C18 OBD柱，5 µm, 19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：7 分钟内从2% B到18% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.00分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以棕色油的形式得到化合物294 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(4 mg, 15% 两步总计): C16H24N2O4 for [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：309，实测值 309； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.07 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 4.68-4.40(m, 2H), 4.30-4.01 (m, 2H), 3.78-3.52 (m, 2H), 3.07 (dt, J = 50.3, 10.9 Hz,1H), 2.66 (dt, J = 50.7, 12.8 Hz, 1H), 2.49-2.33 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.03(t, J = 10.4 Hz, 1H), 1.53-0.99 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.96.
实施例233.化合物295 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 17892DEST_PATH_IMAGE401
步骤a:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的2-溴-4-氯-1-甲氧基苯(96 mg, 0.44 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入n-BuLi (0.17 mL, 0.43 mmol, 2.5 M己烷溶液)。将反应在-78℃下搅拌30分钟。然后将(S)-N-[[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基]亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.29 mmol)加入反应中。将所得溶液在-78℃下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭。将所得混合物用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/4)洗脱，以浅黄色油的形式得到 (S)-N-[(R)-(5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(55 mg, 52%):C23H35ClN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：487, 489 (3 : 1)，实测值 487, 489 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.27-7.20 (m, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.89-6.80 (m,1H), 4.74-4.59 (m, 1H), 4.60-4.40 (m, 2H), 4.38-4.05 (m, 1H), 3.97-3.69 (m,4H), 3.68-3.50 (m, 1H), 3.15-2.46 (m, 2H), 2.31-2.21 (m, 1H), 2.04-1.94 (m,1H), 1.55-1.21 (m, 9H), 1.21-1.11 (m, 9H)。
步骤b:
在0℃下在(S)-N-[(R)-(5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(60 mg, 0.12 mmol)的DCM(2 mL)溶液中加入BBr3(93 mg, 0.37 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应用水(2 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 30×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从20% B到40% B；检测器：UV254/220 nm；保留时间：6.43分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物295 (2R)-1-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮(11 mg, 28%): C15H21ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：329, 331 (3 : 1)，实测值 329, 331 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.33-7.18 (m, 2H), 6.91 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 4.69-4.45 (m, 2H), 4.29-4.05 (m, 2H), 3.77-3.56 (m, 2H),3.08 (dt, J = 45.2, 12.6 Hz, 1H), 2.67 (dt, J = 45.8, 13.0 Hz, 1H), 2.46-2.31(m, 1H), 2.09-1.96 (m, 1H), 1.50-1.08 (m, 3H)。
实施例234.化合物297 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-1-甲基吡啶-2-酮)
Figure 618638DEST_PATH_IMAGE402
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)和4-溴-1-甲基吡啶-2-酮 (0.27 g, 1.43 mmol)在甲苯(2 mL)中的溶液中加入Pd(OAc)2(11 mg, 0.05mmol), BINAP (30 mg, 0.05 mmol)和t-BuONa(0.14 g, 1.43 mmol)。将反应用氮脱气三次，在氮气氛下在100℃下搅拌24小时。冷却至室温后，将反应用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水溶液用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用40% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基) 哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(70 mg, 50%): C22H29Cl2N3O3S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：486, 488 (3 : 2)，实测值 486, 488 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.39-7.30 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.24 (dd, J = 7.8, 2.8 Hz,1H), 5.72 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 13.4Hz, 1H), 3.87 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.44 (s, 3H), 2.97-2.76 (m, 2H), 2.22 (d,J = 13.5 Hz, 1H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.50-1.31 (m, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(1-甲基-2-氧代吡啶-4-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (70 mg, 0.14 mmol) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有10 mmoL/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7分钟内从15% B到50% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.17分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物297 (4-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-1-甲基吡啶-2-酮)(30 mg, 55%): C18H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：382, 384 (3 : 2)，实测值 382, 384 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.37 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.23 (dd, J = 7.8,2.8 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.03-3.95 (m, 1H), 3.95-3.83 (m, 2H),3.44 (s, 3H), 2.97-2.76 (m, 2H), 2.11-1.96 (m, 2H), 1.53-1.42 (m, 1H), 1.42-1.23 (m, 2H)。
实施例235.化合物298 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1-甲基吡嗪-2-酮三氟乙酸)
Figure 81980DEST_PATH_IMAGE403
步骤a:
在室温下向搅拌的4-甲基-5-氧代吡嗪-2-甲酸 (44 mg, 0.28 mmol)和HATU(0.14 g, 0.36 mmol)在DMF(2 mL)中的混合物中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 0.24 mmol)和Et3N (85 mg, 0.84 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌2小时。将所得混合物用水(20 mL)稀释。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅灰色固体的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(4-甲基-5-氧代吡嗪-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.11 g, 80%): C25H32Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：555, 557 (3 : 2)，实测值 555, 557 (3 : 2)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(4-甲基-5-氧代吡嗪-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80 mg,0.07 mmol)在HOAc(2 mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4 (66 mg, 0.03 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.1% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到 (S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(4-甲基-5-氧代吡嗪-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80mg, 80%): C22H28Cl2N4O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：515, 517, (3 : 2)，实测值515, 517, (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(4-甲基-5-氧代吡嗪-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (80 mg, 0.16 mmol)在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱: X BridgePrep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到30% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：5.83分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以粉色固体形式得到化合物298 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1-甲基吡嗪-2-酮三氟乙酸)(22 mg):C18H20Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：411, 413, (3 : 2)，实测值 411, 413, (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.06 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.08(s, 1H), 4.68-4.25 (m, 2H), 4.19 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.19-2.65(m, 2H), 2.48-2.39 (m, 1H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.59-1.21 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.03.
以类似于化合物298所述的方式，由(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺和相应的酸(其如本文所述制备，或可从商业来源获得)开始，制备下述表1g中的化合物。
表1g
Figure 426374DEST_PATH_IMAGE404
Figure 924351DEST_PATH_IMAGE405
实施例236.化合物299 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮三氟乙酸)
Figure 368102DEST_PATH_IMAGE406
步骤a:
在室温下向搅拌的6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酸 (109 mg, 0.79 mmol)在DMF(3mL)中的溶液中加入EDCI (0.20 g, 1.07 mmol)和HOBt (0.15 g 1.07 mmol)。在室温下向上述混合物中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g, 0.76 mmol)和Et3N (0.14 g, 1.43 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌12小时。将所得混合物用水(12 mL)稀释。将混合物用EA(3×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 粗制):C25H31Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：540, 542 (3 : 2)，实测值 540, 542 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.61 (s, 1H), 7.57-7.48 (m, 1H), 7.24 (s, 1H),6.99 (s, 1H), 6.59 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.11-5.96 (m, 1H), 5.48-5.34 (m, 2H),4.58 (s, 2H), 4.48-4.07 (m, 2H), 2.98-2.68 (m, 2H), 2.21-1.97 (m, 2H), 1.53-1.39 (m, 2H), 1.37-1.25 (m, 2H), 1.16 (s, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(6-氧代-1, 6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 粗制)和Pd(PPh3)4(27 mg, 0.02 mmol)在THF(3 mL)中的混合物中加入NaBH4(35mg, 0.93 mmol)。将反应混合物在氮气氛下、在室温下搅拌1小时。将所得混合物用H2O(3mL)在室温下猝灭并减压浓缩，以褐黄色固体形式得到 (S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25g, 粗制): C22H27Cl2N3O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：500, 502 (3 : 2)，实测值 500,502 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-氧代-1H-吡啶-3-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 0.50 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 1.5 mL)。在室温下将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用45% ACN水溶液(加0.5% TFA)洗脱。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以黄色固体形式得到5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮(0.18 g, 90%): C18H19Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：396, 398 (3 : 2)，实测值 396, 398 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.08(d, J = 14.0 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.6 Hz, 1H),4.69-3.72 (m, 3H), 3.05 (s, 2H), 2.55-2.36 (m, 1H), 2.14-1.95 (m, 1H), 1.64-1.21 (m, 3H)。
步骤d:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1H-吡啶-2-酮(0.18 g, 0.45 mmol)在MeOH(20 mL)和HCl(12 N, 2 mL)中的混合物中分批加入PtO2(90 mg, 0.40 mmol)。在氢气氛(1.5 atm)下，将所得混合物在室温下搅拌2小时。过滤所得混合物，将滤饼用MeOH (2×5 mL)洗涤。将滤液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱 19×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从8% B到27% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.02分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物299 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]哌啶-2-酮三氟乙酸)(40 mg, 17%): C18H23Cl2N3O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：400, 402(3 : 2)，实测值 400, 402 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (d, J = 3.9Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.59 (dd, J = 54.2, 13.5 Hz, 1H), 4.24-4.01 (m, 2H),3.72-3.37 (m, 2H), 3.26-3.00 (m, 2H), 2.63 (dt, J = 44.4, 13.2 Hz, 1H), 2.50-2.29 (m, 3H), 2.14-1.82 (m, 3H), 1.51-1.04 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-77.12.
实施例237.化合物300 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1-甲基哌嗪-2-酮三氟乙酸)
Figure 584320DEST_PATH_IMAGE407
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-(4-甲基-5-氧代吡嗪-2-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (实施例235, 步骤a) (0.11 g, 0.20 mmol)和Pd(PPh3)4 (23 mg, 0.02 mmol) 在THF(2 mL)中的混合物中加入NaBH4 (15 mg, 0.40 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液猝灭。5分钟后，在室温下向混合物加入HCl水溶液(6 N, 1.5 mL)。在室温下另外搅拌30分钟后，将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱: X Bridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到35% B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：5.89分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物300(5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1-甲基哌嗪-2-酮三氟乙酸)(21 mg, 21%): C18H24Cl2N4O3 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：415,417 (3 : 2)，实测值 415, 417 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.45 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.73-4.37 (m, 1H), 4.35-4.00 (m, 2H),3.96-3.81 (d, J = 18.8 Hz, 2H), 3.81-3.46 (m, 2H), 3.16 (s, 2H), 3.06-2.99(m, 3H), 2.93-2.60 (m, 1H), 2.52-2.35 (m, 1H), 2.18-2.02 (m, 1H), 1.54-1.41(m, 1H), 1.40-1.07 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.08。
实施例238.化合物302 ((R)-5-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)吡啶-2-醇)
Figure 466825DEST_PATH_IMAGE408
步骤a:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 0.72 mmol), BINAP (45 mg, 0.072mmol)和t-BuONa(0.14 g, 1.43 mmol)在甲苯(5 mL)中的溶液中加入Pd2(dba)3加合物CHCl3(74 mg, 0.072 mmol)和5-溴-2-甲氧基吡啶(0.20 g, 1.5 当量)。将反应混合物用氮气氛脱气三次，在氮气氛下，在120℃下搅拌12小时。冷却至室温后，将所得混合物用水(30 mL)稀释，用EA(2×60 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(加0.05%TFA)洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(80 mg, 32%): C22H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：486, 488 (3 : 2)，实测值 486, 488 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (20 mg, 0.04 mmol)在THF(2 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩，得到粗制(R)-2-(氨基(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-4-基)甲基)-4,5-二氯苯酚。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C18H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：382, 384 (3:2)，实测值 382, 384 (3 : 2)。
步骤c:
将2-[(R)-氨基[1-(6-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯酚(粗制)在HBr(60% HOAc溶液, 1 mL)中的溶液在120℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液调节至pH 9。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm；流动相A：具有20 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到25% B；检测器：UV 220 nm；保留时间：7.85分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以黄色油的形式得到化合物302((R)-5-(4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-基)吡啶-2-醇)(1.3 mg, 25% 两步总计): C17H19Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：368, 370 (3 : 2)，实测值 368,370 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.68 (dd, J = 9.7, 3.1 Hz, 1H), 7.48(s, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.00 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 9.8 Hz, 1H),4.24 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.52 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 12.0 Hz,1H), 2.70-2.60 (m, 1H), 2.58-2.46 (m, 1H), 2.28-2.17 (m, 1H), 2.13-1.99 (m,1H), 1.69-1.54 (m, 1H), 1.49-1.38 (m, 2H)。
实施例239.化合物308 ((2R)-1-[(3S)-3-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 异构体1)； 化合物312 ((2R)-1-[(3S)-3-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 异构体2)
Figure 819309DEST_PATH_IMAGE409
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (2.73 g, 9.68 mmol)在THF(20 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl·LiCl (9mL, 11.61 mmol, 1.3 M THF溶液)。将所得混合物在氮气氛下在-10℃下搅拌30分钟。在-10℃下用5分钟向上述混合物中滴加(3S)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.50 g, 1.94 mmol)的THF(1 mL)溶液。在-10℃下将所得混合物另外搅拌2小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3S)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 32%): C19H23Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：422, 424 (3 : 2)，实测值 422, 424 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.13-6.00 (m, 1H), 5.55-5.24 (m, 2H),4.69-4.56 (m, 2H), 4.03-3.90 (m, 1H), 3.71-3.54 (m, 2H), 3.54-3.32 (m, 2H),2.26-2.01 (m, 2H), 1.48 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.25 g, 0.63 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺 (0.23 g, 1.87 mmol) 在THF(5mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4(0.85 g, 3.75 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在70℃下搅拌16小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)猝灭。过滤所得混合物，将滤饼用EA(3×10 mL)洗涤。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3S)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 76 %):C23H32Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：525, 527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.06-5.91 (m, 1H),5.45-5.28 (m, 2H), 4.63-4.52 (m, 2H), 3.77-3.64 (m, 3H), 3.59-3.46 (m, 1H),3.40-3.29 (m, 1H), 2.29-1.92 (m, 2H), 1.50-1.45 (m, 9H), 1.24 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.30 g, 0.60 mmol) 在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(68 mg, 1.79 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(3S)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：505, 507 (3 : 2)，实测值 505, 507 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31(s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.10-5.96 (m, 1H), 5.40 (dd, J = 26.3, 13.9 Hz, 2H),4.65-4.51 (m, 2H), 3.77-3.65 (m, 3H), 3.55-3.42 (m, 1H), 3.37-3.15 (m, 2H),3.04-2.58 (m, 1H), 1.88-1.71 (m, 1H), 1.51-1.44 (m, 9H), 1.17 (d, J = 8.2 Hz,9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(3S)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯 (0.30 g, 0.60 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.4 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)中和至pH 7，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]((3S)-吡咯烷-3-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C18H26Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：405, 407 (3 : 2)，实测值 405, 407 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.32 g, 2.22mmol)和HATU (1.13 g, 2.96 mmol)在DMF(5 mL)中的混合物中加入N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]((3S)-吡咯烷-3-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g,0.74 mmol)和Et3N (0.22 g, 2.22 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将残渣通过反相色谱纯化，用57% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3S)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 60% 三步总计): C24H34Cl2N2O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.28-7.23 (m, 1H), 7.02-6.96 (m, 1H), 6.13-5.98 (m, 1H),5.51-5.33 (m, 2H), 4.83-4.43 (m, 4H), 4.40-4.26 (m, 1H), 4.26-4.09 (m, 1H),3.92-3.57 (m, 2H), 3.48-3.24 (m, 1H), 3.10-2.56 (m, 2H), 2.48-2.13 (m, 1H),1.95-1.67 (m, 1H), 1.47-1.39 (m, 6H), 1.17-1.14 (m, 9H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3S)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.38 mmol)和Pd(PPh3)4(4 mg, 0.004 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(28 mg, 0.75 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3S)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：493, 495 (3 : 2)，实测值 493, 495 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3S)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.41mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm，n； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：9 分钟内从5% B到20% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1:6.05 分钟、RT2: 8.92 分钟。
收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物308 ((2R)-1-[(3S)-3-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 异构体1) (17.5 mg, 13% 两步总计): C14H18Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：349, 351(3 : 2)，实测值 349, 351 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 (d, J = 5.5Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.28 (dt, J = 48.6, 5.8 Hz, 1H), 4.08-3.78 (m, 2H),3.78-3.53 (m, 3H), 3.50-3.35 (m, 1H), 3.28-3.00 (m, 1H), 2.82-2.58 (m, 1H),2.38-2.17 (m, 1H), 1.97-1.67 (m, 1H)。
在8.92分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物312 ((2R)-1-[(3S)-3-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 异构体2) (34.1 mg, 26% 两步总计): C14H18Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：349, 351 (3 : 2)，实测值 349, 351 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 29.3, 5.8 Hz, 1H),4.06-3.90 (m, 2H), 3.91-3.60 (m, 3H), 3.61-3.41 (m, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H),2.81-2.58 (m, 1H), 1.81-1.50 (m, 2H)。
实施例240.化合物309 ((2R)-1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-4-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 417649DEST_PATH_IMAGE410
步骤a:
在氮气氛下，在-60℃下向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.50 g, 1.21 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入LiHMDS(2.41 mL,2.41 mmol, 1 M THF溶液)。将反应在-60℃下搅拌0.5小时。然后将MeI (0.51 g, 3.62mmol)加入反应中。将反应在-60℃至室温下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，用EA(20 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(10/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.28 g, 54%): C21H27Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：450, 452 (3 : 2)，实测值 428, 430 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.14(s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.07-5.91 (m, 1H), 5.43-5.30 (m, 2H), 4.54 (d, J = 5.7Hz, 2H), 3.62-3.42 (m, 2H), 3.42-3.31 (m, 2H), 2.05-1.95 (m, 2H), 1.62-1.54(m, 2H), 1.54 (s, 9H), 1.30 (s, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.28 g, 0.65 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺 (0.24 g, 1.96mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (1.49 g, 6.54 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.44 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H36Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：531, 533 (3 : 2)，实测值 531, 533 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.27-7.20 (m, 2H), 6.11-5.97 (m, 1H), 5.49-5.39 (m, 1H), 5.35-5.28(m, 1H), 4.65-4.57 (m, 2H), 3.88-3.56 (m, 2H), 3.38-3.33 (m, 1H), 3.31-3.21(m, 1H), 2.02-1.84 (m, 2H), 1.78-1.58 (m, 2H), 1.46 (d, J = 1.8 Hz, 9H), 1.29(s, 3H), 1.23 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.44 g, 0.83 mmol)在THF(5 mL)和MeOH(2 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(0.13 g, 3.31 mmol)。将反应在室温下搅拌8小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.33 g, 75%): C25H38Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS(ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.52 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.16-6.05 (m, 1H), 5.46 (d, J = 17.1 Hz, 1H),5.34 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.70-4.56 (m, 2H), 3.92-3.75 (m, 3H), 3.13-2.93(m, 4H), 1.66-1.60 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.23 (s, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.33 g, 0.62 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA (1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时。在0℃下将反应用饱和Na2CO3水溶液(20 mL)中和至pH 7。将所得溶液用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](4-甲基哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(400 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H30Cl2N2O2S[M +H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435 (3 : 2)，实测值 433, 435 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.18-6.04 (m, 1H), 5.51-5.30 (m,2H), 4.68-4.57 (m, 3H), 3.31-3.23 (m, 2H), 3.22-3.02 (m, 2H), 1.94-1.69 (m,4H), 1.23 (s, 3H), 1.14 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.20 g, 1.38mmol)和HATU (0.53 g, 1.38 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](4-甲基哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.40 g, 0.92mmol)和Et3N (0.28g, 2.77 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用50% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以无色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-4-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.13 g, 37% 两步总计): C26H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：561, 563 (3 : 2)，实测值 561, 563 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.20-6.02 (m, 1H), 5.52-5.38 (m, 1H),5.38-5.28 (m, 1H), 4.71-4.58 (m, 2H), 4.35-4.16 (m, 4H), 4.04-3.82 (m, 1H),3.77-3.54 (m, 1H), 3.24-2.85 (m, 2H), 1.88-1.51 (m, 4H), 1.42-1.34 (m, 6H),1.27 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 14.9 Hz, 9H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-4-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.13 g, 0.23 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.01 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (18 mg, 0.46 mmol)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应减压浓缩，以褐色固体形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-4-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：521, 523 (3 : 2)，实测值521, 523 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-4-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12 g, 0.23mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和HCl(1 N, 20 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×20 mL)洗涤。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5μm n；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7分钟内从10% B到25% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：5.58分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物309 ((2R)-1-[4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-4-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(63 mg, 56% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.42 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.63-4.26 (m,3H), 4.09-3.93 (m, 1H), 3.78-3.60 (m, 2H), 3.30-3.20 (m, 1H), 3.12-2.85 (m,1H), 1.78-1.54 (m, 3H), 1.41-1.28 (m, 1H), 1.21 (s, 3H)； 19F NMR (376 MHz,CD3OD) δ -77.15.
实施例241.化合物310 ((2R)-1-[(3R)-3-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)； 化合物311 ((2R)-1-[(3R)-3-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 980218DEST_PATH_IMAGE411
步骤a:
在氮气氛下，在-10℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (5.46 g, 19.36 mmol)在THF(30 mL)中的混合物中滴加i-PrMgCl·LiCl(18 mL, 23.23 mmol, 1.3 M THF溶液)。将所得混合物在氮气氛下在-10℃下搅拌30分钟。在-10℃下用5分钟向上述混合物中滴加(3R)-3-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.00 g, 3.87 mmol)在THF(1 mL)中的溶液。在-10℃下将所得混合物另外搅拌2小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.45 g, 23%): C19H23Cl2NO4[M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：422, 424 (3 : 2)，实测值 422, 424 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.14-5.95 (m, 1H), 5.53-5.33(m, 2H), 4.64 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.03-3.91 (m, 1H), 3.68-3.54 (m, 2H),3.51-3.35 (m, 2H), 2.21-2.04 (m, 2H), 1.48 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25 g, 0.63 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺 (0.23 g, 1.87 mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (0.85 g, 3.75 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在70℃下搅拌16小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)猝灭。过滤所得混合物，将滤饼用EA(3×10 mL)洗涤。将所得混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 67%):C23H32Cl2N2O4S [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：525, 527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.18 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.08-5.94 (m, 1H),5.48-5.28 (m, 2H), 4.62-4.52 (m, 2H), 3.76-3.61 (m, 3H), 3.60-3.46 (m, 1H),3.41-3.29 (m, 1H), 2.34-1.94 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.24 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.60 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(68 mg, 1.79 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用水(20 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g,粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：505, 507 (3 : 2)，实测值 505, 507 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33(s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.10-5.95 (m, 1H), 5.48-5.30 (m, 2H), 4.66-4.48 (m,2H), 3.77-3.41 (m, 4H), 3.38-3.13 (m, 2H), 2.73-2.58 (m, 1H), 1.90-1.65 (m,1H), 1.50-1.43 (m, 9H), 1.25 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.60 mmol) 在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.4 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)中和至pH 7，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]((3R)-吡咯烷-3-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C18H26Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：405, 407 (3 : 2)，实测值 405, 407 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.32 g, 2.22mmol)和HATU(1.13 g, 2.96 mmol)在DMF(5 mL)中的混合物中加入N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]((3R)-吡咯烷-3-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30 g,0.74 mmol)和Et3N (0.22 g, 2.22 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将残渣通过反相色谱纯化，用57% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以灰白色固体形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 60% 四步总计): C24H34Cl2N2O5S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)； 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.27-7.21 (m, 1H), 7.03-6.95 (m, 1H), 6.14-5.97 (m, 1H),5.50-5.31 (m, 2H), 4.81-4.67 (m, 1H), 4.67-4.50 (m, 3H), 4.45-4.20 (m, 1H),4.20-4.09 (m, 1H), 4.05-3.74 (m, 1H), 3.71-3.55 (m, 1H), 3.52-3.28 (m, 1H),2.86-2.58 (m, 1H), 2.27-1.96 (m, 2H), 1.92-1.59 (m, 1H), 1.53-1.28 (m, 6H),1.20-1.12 (m, 9H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.38 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.004 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(43 mg, 1.13 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：493, 495 (3 : 2)，实测值 493, 495 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]吡咯烷-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.41mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30×150 mm, 5 μm；流动相A：具有10 mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从15% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 6.50 分钟； RT2: 6.70 分钟。
在6.50分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物310 ((2R)-1-[(3R)-3-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(15.6 mg, 11% 两步总计): C14H18Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：349,351 (3 : 2)，实测值 349, 351 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 (d, J =4.9 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.30 (dt, J = 51.2, 5.4 Hz, 1H), 4.07-3.84 (m,2H), 3.78-3.41 (m, 4H), 3.31-3.01 (m, 1H), 2.82-2.63 (m, 1H), 2.38-2.15 (m,1H), 1.97-1.66 (m, 1H)。
在6.70分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物311 ((2R)-1-[(3R)-3-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(31.3 mg, 22% 两步总计): C14H18Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：349,351 (3 : 2)，实测值 349, 351 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 (d, J =9.7 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.40 (dt, J = 24.9, 5.5 Hz, 1H), 4.08-3.89 (m, 2H), 3.85-3.36 (m, 4H), 3.30-3.22 (m, 1H), 2.81-2.58 (m, 1H), 1.80-1.52 (m, 2H)。
实施例242.化合物313 ((2R)-1-[8-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)； 化合物314 ((2R)-1-[8-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 666414DEST_PATH_IMAGE412
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(0.61g, 2.16 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (1.44 mL, 2.88 mmol, 2 M THF溶液)。在氮气氛下，在0℃下搅拌30分钟后，将8-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(中间体22, 实施例22) (0.43 g, 1.44 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液滴加至所得溶液中。将反应在0℃下另外搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2mL)在0℃下猝灭，用EA(20 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(6/1)洗脱，以无色油的形式得到8-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.30 g, 45%): C22H27Cl2NO4 [M +Na]+的LCMS (ESI)计算值：462, 464 (3 : 2)，实测值 462, 464 (3 : 2)； 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 6.14-5.96(m, 1H), 5.44 (dt, J = 25.1, 8.5 Hz, 2H), 4.63 (dd, J = 18.1, 5.5 Hz, 2H),4.07-3.79 (m, 1H), 3.79-3.48 (m, 1H), 3.27-2.84 (m, 2H), 2.58-2.37 (m, 2H),1.86-1.72 (m, 1H), 1.72-1.50 (m, 4H), 1.47 (d, J = 9.5 Hz, 9H)。
步骤b:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的8-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.30 g, 0.65 mmol)和叔丁烷亚磺酰胺 (0.24g, 1.95 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (1.48 g, 6.50 mmol)。使反应升温至70℃并在氮气氛下搅拌16小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到8-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.43 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C26H36Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：543, 545 (3 :2)，实测值 543, 545 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 6.98 (s,1H), 6.09-5.90 (m, 1H), 5.36 (dd, J = 35.9, 13.9 Hz, 2H), 4.73-4.49 (m, 2H),4.04-3.54 (m, 5H), 2.99-2.65 (m, 2H), 2.60-2.13 (m, 1H), 2.00-1.57 (m, 3H),1.47 (d, J = 3.8 Hz, 9H), 1.24 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的8-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯 (0.43 g, 0.79 mmol)在THF(5 mL)和MeOH (3 mL)中的溶液中加入NaBH4(0.24 g, 6.33 mmol)。将反应在室温下搅拌8小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，然后用水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到8-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.34 g, 96% 两步总计): C26H38Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：545, 547 (3 : 2)，实测值 545, 547(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.58-7.44 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.15-5.98(m, 1H), 5.57-5.26 (m, 2H), 4.70-4.49 (m, 2H), 3.99-3.88 (m, 1H), 3.80-3.66(m, 1H), 3.54-3.35 (m, 1H), 3.03-2.82 (m, 1H), 2.82-2.42 (m, 2H), 2.02-1.68(m, 3H), 1.66-1.51 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.23 (s, 9H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的8-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯(0.34 g, 0.62 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时.将反应用饱和Na2CO3水溶液(20 mL)猝灭，用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)中和至pH 7。将所得溶液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以灰白色固体形式得到N-[3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.30g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C21H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：445, 447, (3 : 2)，实测值 445, 447, (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.15 g, 1.01mmol)和HATU (0.38 g, 1.01 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入N-[3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.30g, 0.67 mmol)和Et3N (0.20 g, 2.02 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用56% ACN水溶液(加0.05% TFA)稀释，以无色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 56% 两步总计):C27H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：573, 575 (3 : 2)，实测值 573, 575 (3 :2)。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.65-7.47 (m, 1H), 7.22-7.16 (m, 1H), 6.25-6.00(m, 1H), 5.40 (dd, J = 43.9, 14.0 Hz, 2H), 4.76-4.41 (m, 2H), 4.44-4.17 (m,2H), 4.17-4.07 (m, 1H), 4.02-3.88 (m, 1H), 3.86-3.50 (m, 2H), 3.21-2.77 (m,1H), 2.75-2.64 (m, 1H), 2.64-2.53 (m, 1H), 2.32-2.09 (m, 1H), 2.01-1.82 (m,2H), 1.73-1.59 (m, 3H) 1.45-1.30 (m, 6H), 1.12 (s, 9H)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.35 mmol)和Pd(PPh3)4(40 mg, 0.04 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (26 mg, 0.70 mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以黄色油的形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C24H34Cl2N2O5S [M+ H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([3-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.38 mmol)在1,4-二噁烷(5 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 2 mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和HCl(1 N, 20 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×20 mL)洗涤。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：8 分钟内从5% B到25% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1:8.65 分钟, RT2: 9.32 分钟。
在8.65分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物313 ((2R)-1-[8-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(57.7 mg, 33% 两步总计): C17H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 :2)，实测值 389, 391 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.48 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.58-4.24 (m, 1H), 4.24-4.01(m, 2H), 3.93-3.55 (m, 3H), 3.30-3.05 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.63-2.39(m, 2H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.93-1.82 (m, 1H), 1.80-1.43 (m, 3H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.19.
在9.32分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物314 ((2R)-1-[8-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(13.3 mg, 10% 两步总计): C17H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：389, 391 (3 :2)，实测值 389, 391 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.59 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.64-4.44 (m,1H), 4.27-3.95 (m, 1H), 3.95-3.59 (m, 3H), 3.54-3.48 (m, 1H), 3.26-3.01 (m,1H), 2.62-2.49 (m, 1H), 2.49-2.36 (m, 1H), 1.99-1.83 (m, 1H), 1.83-1.75 (m,2H), 1.75-1.47 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.98.
实施例243.化合物315 ((2R)-1-(5-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)； 化合物316 ((2R)-1-(5-((S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 873404DEST_PATH_IMAGE413
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯 (实施例6, 步骤b) (0.97 g, 3.43 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (1.71 mL,3.42 mmol, 2 M THF溶液)。在氮气氛下，在0℃下将所得溶液搅拌30分钟。在氮气氛下，在0℃下向上述混合物中加入5-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.65 g, 2.29 mmol)在THF(2 mL)中的溶液。将所得溶液在氮气氛下，在室温下搅拌1小时。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)猝灭。将反应混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(4/1)洗脱，以黄色油的形式得到5-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.15 g, 20%):C21H25Cl2NO4 [M + H - 15]+的LCMS (ESI)计算值：411, 413 (3 : 2)，实测值 411, 413(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.77 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.12-6.00 (m,1H), 5.48-5.39 (m, 2H), 4.65 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.28-4.23 (m, 1H), 3.51(dd, J = 8.8, 5.5 Hz, 1H), 3.30 (dd, J = 9.8, 3.5 Hz, 1H), 3.12 (d, J = 9.8Hz, 1H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.09-2.02 (m, 1H), 1.95-1.87 (m, 1H), 1.66-1.55(m, 2H), 1.49 (s, 9H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的5-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.15 g, 0.35 mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(85 mg,0.70 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (0.80 g, 3.52 mmol)。在氮气氛下，将所得混合物在70℃下搅拌16小时。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10 mL)在室温下猝灭。过滤所得混合物。将滤饼用EA(5×20 mL)洗涤。将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到5-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.22 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：529, 531 (3 : 2)，实测值 529, 531 (3 :2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的5-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.22 g, 0.42 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4(31 mg, 0.83 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(20 mL)在室温下猝灭。将反应混合物用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到5-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.18 g, 90% 两步总计):C25H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：531, 533 (3 : 2)，实测值 531, 533 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 12.9,2.8 Hz, 1H), 6.22-6.01 (m, 1H), 5.55-5.39 (m, 1H), 5.39-5.26 (m, 1H), 4.71-4.56 (m, 3H), 4.56-4.44 (m, 1H), 4.38-4.18 (m, 1H), 4.17-4.04 (m, 1H), 3.18-2.98 (m, 1H), 2.92-2.74 (m, 1H), 2.36-2.05 (m, 2H), 1.81-1.55 (m, 2H), 1.52-1.41 (m, 9H), 1.25-1.18 (m, 9H)。
步骤d:
将5-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(0.18 g, 0.34 mmol)在TFA(1 mL)和DCM(5 mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10 mL)猝灭，并在0℃下用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 7。将所得混合物用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到N-[2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.28 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H28Cl2N2O2S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：431, 433 (3 : 2)，实测值 431, 433 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.14 g, 0.97mmol)和HATU (0.37 g, 0.97 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入N-[2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.28g, 0.65 mmol)和Et3N (0.13 g, 1.30 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用55% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 63% 两步总计): C26H36Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：559, 561(3 : 2)，实测值 559, 561(3 : 2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 0.21 mmol)和Pd(PPh3)4 (3 mg, 0.002 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4(16 mg, 0.43 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)在室温下猝灭。将所得混合物减压浓缩，以褐色固体形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H32Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519, 521 (3 : 2)。
步骤g:
将N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)([2-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g)在HCl水溶液(4 N, 1 mL)和二噁烷 (1 mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5µm n；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从20% B到40% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 7.03 分钟； RT2: 10.12 分钟。
在7.03分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以浅粉色固体形式得到化合物315 ((2R)-1-[5-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(7.2 mg, 7% 两步总计): C16H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：375, 377 (3 : 2)，实测值 375, 377 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 7.07 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.65-4.47 (m, 1H), 4.36-4.11(m, 2H), 3.75-3.57 (m, 2H), 3.55-3.45 (m, 1H), 3.27-3.11 (m, 1H), 2.85-2.72(m, 1H), 2.66-2.51 (m, 1H), 1.86-1.56 (m, 3H), 1.40-1.16 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -76.96.
在10.12分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以紫色固体形式得到化合物316 ((2R)-1-[5-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(8.3 mg, 7% 两步总计): C16H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：375, 377 (3 : 2)，实测值 375, 377 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.51 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.79-4.60 (m,1H), 4.40-4.13 (m, 2H), 3.81-3.59 (m, 2H), 3.56-3.45 (m, 1H), 3.04 (dd, J =27.2, 11.2 Hz, 1H), 2.52-2.39 (m, 1H), 2.24-2.05 (m, 2H), 1.85-1.55 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.11.
实施例244.化合物317 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-溴-5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 986854DEST_PATH_IMAGE414
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的N-[(R)-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体23, 实施例23)(40 mg, 0.07 mmol)在DCM(0.6 mL)中的混合物中滴加BBr3(0.3 mL)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将所得混合物用水(5 mL)猝灭并减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 µm, 19×150 mm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到35% B；检测器：220 nm； 保留时间：6.10分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，得到化合物317((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4-溴-5-氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸，为浅黄色固体形式) (3.9 mg, 10%): C15H20BrClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：407, 409 (2 : 3)，实测值 407, 409 (2 : 3)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.43(s, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.58 (dd, J = 53.9, 13.6 Hz, 2H), 4.33-4.02 (m, 2H),3.67 (d, J = 22.6 Hz, 2H), 3.09 (dt, J = 42.2, 12.2 Hz, 1H), 2.67 (dt, J =42.3, 12.9 Hz, 1H), 2.38 (s, 1H), 2.01 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.46-1.12 (m,3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.87.
实施例245.化合物326 ((2R)-1-[(2S,4R)-4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)； 化合物327 ((2R)-1-[(2R,4S)-4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 912085DEST_PATH_IMAGE415
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的含两种反式异构体的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体43b, 实施例43)(0.30 g, 0.70mmol)和叔丁烷亚磺酰胺(0.13 g, 1.05 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4(1.60 g, 7.00 mmol)。将反应在70℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。将所得混合物经由硅藻土(celite)过滤，然后将滤液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色固体形式得到含两种反式异构体的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g,73%): C25H36Cl2N2O4S[M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：551, 552 (3 : 2)，实测值 551, 553(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.18 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.10-5.89 (m,1H), 5.45-5.36 (m, 1H), 5.32 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.63-4.40 (m, 3H), 4.16-3.94 (m, 1H), 2.93-2.76 (m, 2H), 1.93-1.80 (m, 1H), 1.79-1.65 (m, 1H), 1.65-1.48 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.23 (s, 9H), 1.13 (dd, J = 15.2, 6.9 Hz, 3H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-70℃向搅拌的含两种反式异构体的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.20 g, 0.38 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入DIBAL-H (0.56 mL, 0.564 mmol,1 M甲苯溶液)。将反应在-70℃下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(2 mL)猝灭，然后用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到含两种反式异构体的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H38Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533,535 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的含两种反式异构体的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30g, 0.56 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应在室温下搅拌0.5小时。将反应用饱和Na2CO3水溶液(20 mL)猝灭，用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)中和至pH 7。将所得溶液用EA(30 mL)和水(30 mL)稀释，然后将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到含两种反式异构体的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435, (3 : 2)，实测值 433, 435 (3 :2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.13 g, 0.87mmol)和HATU (0.33 g, 0.87 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入含有两个反式异构体的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.25 g, 0.58 mmol)和Et3N (0.12 g, 1.15 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应通过反相色谱纯化，用52% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到含两种反式异构体的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 71% 三步总计): C26H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：561,563 (3 : 2)，实测值 561, 563 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的含两种反式异构体的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.15 g, 0.27 mmol)和Pd(PPh3)4 (31 mg, 0.03 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入NaBH4 (20 mg, 0.53 mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以浅褐色油的形式得到含两种反式异构体的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：521, 523 (3 : 2)，实测值 521, 523 (3 : 2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的含两种反式异构体的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)[1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-2-甲基哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.10 g, 0.19 mmol) 在1,4-二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1mL)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应用EA(20 mL)和HCl(1 N, 20 mL)稀释。将有机层用HCl水溶液(1 N, 2×20 mL)洗涤。将合并的水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 μm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：9 分钟内从8% B到17% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 8.47 分钟, RT2: 9.32 分钟。
在8.47分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物326 ((2R)-1-[(2S,4R)-4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(24 mg, 18% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 :2)，实测值 377, 379 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ7.43 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.09-4.96 (m, 1H), 4.67-4.26 (m, 2H),4.16-4.02 (m, 1H), 3.92 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.73-3.52 (m, 2H), 3.25-2.74(m, 1H), 2.64-2.49 (m, 1H), 1.93 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 1.64-1.40 (m, 1H),1.31 (dd, J = 46.9, 7.0 Hz, 3H), 1.23-1.03 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-77.02.
在9.32分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物327((2R)-1-[(2R,4S)-4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]-2-甲基哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(32 mg, 24% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 :2)，实测值 377, 379 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ7.41 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.59-4.42 (m, 2H),4.09 (dd, J = 14.9, 9.8 Hz, 2H), 3.78-3.55 (m, 2H), 3.30-2.83 (m, 1H), 2.78-2.53 (m, 1H), 2.07-1.85 (m, 1H), 1.50-1.29 (m, 1H), 1.29-1.04 (m, 4H)； 19F NMR(376 MHz, CD3OD) δ -76.96.
实施例246.化合物328 ((2R)-1-[4-[氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 136393DEST_PATH_IMAGE416
步骤a:
在氮气氛下，在-65℃下用10分钟向二异丙基胺(2.71 g, 2.67 mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入n-BuLi(1.28 mL, 3.213 mmol, 2.5 mol/L己烷溶液)。添加后，将反应溶液搅拌30分钟，然后在氮气氛下，在-65℃下滴加N,N-二乙基氨基甲酸3,4-二氯-5-氟苯基酯 (实施例18, 步骤c) (0.50 g, 1.78 mmol)在THF(3)中的溶液。另外搅拌35分钟后，在-65℃下用10分钟向所得混合物中滴加4-[[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (中间体11, 实施例11) (0.85 g, 2.67 mmol) 在THF(3 mL)中的溶液。在氮气氛下，在-65℃下将反应混合物另外搅拌1小时。在-65℃下将所得混合物用水(30mL)猝灭，用EA(2×70 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以黄色油的形式得到4-([3,4-二氯-6-[(二乙基氨基甲酰基)氧基]-2-氟苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.57 g, 48%): C26H40Cl2FN3O5S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：596, 598 (3 : 2)，实测值 596, 598 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向4-([3,4-二氯-6-[(二乙基氨基甲酰基)氧基]-2-氟苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.57 g, 0.96 mmol)在MeOH(5 mL)中的溶液中分批加入NaOH(0.38 g, 9.58 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。在室温下将反应混合物用水(20 mL)稀释，用柠檬酸酸化至pH 4。将所得溶液用EA(2×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到4-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.56 g, 1.13 mmol)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C21H31Cl2FN2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：497, 499 (3 : 2)，实测值 497, 499 (3 :2)。
步骤c:
在室温下向4-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(粗制)在DCM(10 mL)中的溶液中滴加TFA (2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液调节至pH 9，用EA(2×200 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，得到N-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.56 g,1.41 mmol)。将粗产物无需进一步纯化而直接用于后续步骤：C16H23Cl2FN2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：397, 399 (3 : 2)，实测值 397, 399 (3 : 2)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.30, 2.11mmol)和HATU (1.07 g, 2.82 mmol)在DMF(5 mL)中的溶液中加入Et3N (0.43 g, 4.23mmol)和N-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)(哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.56 g, 1.41 mmol)。室温下搅拌2小时后，将反应溶液在室温下用水(30 mL)猝灭，用EA(3×100 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液洗脱，以黄色油的形式得到N-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)[1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.28 g, 42% 三步总计): C22H31Cl2FN2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：525, 527 (3 : 2)，实测值 525, 527 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 6.85 (s, 1H), 4.63-4.41 (m, 2H), 4.20-4.00 (m,2H), 3.75-3.55 (m,2H), 3.20-2.94 (m, 1H), 2.79-2.50 (m, 1H), 2.43-2.25 (m, 1H), 2.08-1.96 (m,1H), 1.64-1.28 (m, 3H), 1.31-1.19 (m, 6H), 1.12 (s, 9H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的N-[(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)[1-(2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)哌啶-4-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.28 g, 0.53 mmol)在THF(4 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(6 N, 2 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150mm, 5 µm；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7%B到22% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：6.25分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物328 ((2R)-1-[4-[氨基(3,4-二氯-2-氟-6-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(106 mg, 52%): C15H19Cl2FN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：381, 383 (3 : 2)，实测值 381, 383 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 6.98 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.72-4.34 (m, 3H), 4.21 (dd, J = 58.5,13.9 Hz, 1H), 3.80-3.56 (m, 2H), 3.23-2.95 (m, 1H), 2.79-2.58 (m, 1H), 2.54-2.36 (m, 1H), 2.04-1.95 (m, 1H) 1.57-1.06 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ-76.85, 113.17.
实施例247.化合物329 ((2R)-1-[(3R)-3-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)； 化合物330 ((2R)-1-[(3R)-3-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)
Figure 463469DEST_PATH_IMAGE417
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的1-溴-4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯(实施例6, 步骤b) (0.52 g, 1.83 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (1 mL, 2.00mmol, 2 M THF溶液)。在0℃下搅拌30分钟后，在氮气氛下，在0℃下将(3R)-3-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 1.41 mmol)在THF(3 mL)中的溶液滴加 至所得混合物中。使反应混合物升温至室温并搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(40 mL)猝灭。将所得混合物用EA(2×10 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用EA洗脱，以无色油的形式得到(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 68%):C20H27Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：416, 418 (3 : 2)，实测值 416, 418 (3 :2)。
步骤b:
在0℃下向(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 0.96 mmol)在DCM(10 mL)中的溶液中加入戴斯-马丁试剂(0.49g, 1.15 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物用共溶剂NaHCO3水溶液/Na2SO3水溶液(20 mL, v/v = 1/1)洗涤。将合并的有机层用盐水(20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣用硅胶柱色谱纯化，用EA/PE (1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.36 g, 90%): C20H25Cl2NO4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：414, 416 (3 : 2)，实测值 414, 416 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 7.07 (s, 1H),6.11-6.01 (m, 1H), 5.51-5.33 (m, 2H), 4.73-4.57 (m, 2H), 4.34-3.85 (m, 2H),3.47-3.32 (m, 1H), 2.88-2.71 (m, 2H), 2.04-1.92 (m, 2H), 1.76-1.71 (m, 2H),1.48 (s, 9H)。
步骤c:
在氮气氛下，向搅拌的(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.36 g, 0.87 mmol)和2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.16 g, 1.30 mmol)在THF(20 mL)中的溶液中一次加入Ti(OEt)4 (1.98 g, 8.69 mmol)。在氮气氛下，将反应溶液在80℃下搅拌48小时。冷却至室温后，将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(100 mL)中，分离出固体，然后过滤混合物，将滤液用EA(2×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 粗制): C24H34Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：517, 519 (3 :2)，实测值 517, 519 (3 : 2)。
步骤d:
在0℃下向搅拌的(3R)-3-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 0.77 mmol)在MeOH(10 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(59 mg, 1.55 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层合并，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40g, 粗制): C24H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：519, 521 (3 : 2)，实测值 519,521 (3 : 2)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(3R)-3-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.40 g, 0.77 mmol) 在DCM(4 mL)中的溶液中加入TFA(1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时。将所得溶液用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8。将所得混合物用DCM(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(260 mg, 粗制): C19H28Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：419, 421 (3 : 2)，实测值 419, 421(3 : 2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的HATU (0.35 g, 0.93 mmol)和(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.14 g, 0.93 mmol)在DMF(4 mL)中的溶液中加入Et3N (0.13 g, 1.24mmol)和N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.26 g, 0.62 mmol)。在室温下搅拌2小时后，将所得溶液用水(30 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×15 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.35 g, 粗制): C25H36Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：547, 549 (3 :2)，实测值 547, 549 (3 : 2)。
步骤g:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.35 g, 0.64 mmol)和Pd(PPh3)4(15 mg, 0.01 mmol) 在THF(5 mL)中的溶液中分批加入NaBH4(48 mg, 1.28 mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2小时。在0℃下将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(5 mL)猝灭，用EA(3×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×10 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色油的形式得到N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.40 g, 粗制): C22H32Cl2N2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：507, 509 (3 : 2)，实测值 507, 509 (3 : 2)。
步骤h:
在室温下向搅拌的N-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(3R)-1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]哌啶-3-基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.40 g, 粗制)在THF(10 mL)中的溶液中滴加HCl水溶液(4 N, 5 mL)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩。将残渣用制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm, 5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从5% B到20% B；检测器：UV 220 nm； 保留时间：RT1: 6.10 分钟； RT2: 6.72 分钟。
以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物330 ((2R)-1-[(3R)-3-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(23mg, 7% 6步总计): C15H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：363, 365 (3 : 2)，实测值 363, 365 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.46 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 7.11(d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.57-4.41 (m, 1H), 4.23 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.17-3.73(m, 2H), 3.64 (qt, J = 18.4, 8.7 Hz, 2H), 2.96 (dt, J = 117.9, 12.3 Hz, 1H),2.57 (dt, J = 56.1, 12.1 Hz, 1H), 2.42-2.07 (m, 2H), 1.99-1.83 (m, 1H), 1.70-140 (m, 2H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.99.
以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物329 ((2R)-1-[(3R)-3-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(48.9 mg, 16% 6步总计): C15H20Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：363, 365 (3 :2)，实测值 363, 365 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (d, J = 8.7 Hz,1H), 7.09 (s, 1H), 4.62-4.58 (m, 1H), 4.43-4.19 (m, 1H), 4.11 (d, J = 13.7Hz, 1H), 3.83-3.65 (m, 3H), 3.63-3.44 (m, 1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 2.48-2.30(m, 1H), 1.88-1.69 (m, 1H), 1.67-1.45 (m, 2H), 1.39-1.19 (m, 1H)； 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -77.03.
实施例248.化合物331 ((2R)-1-((3R,4R)-rel-4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-3-甲基哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体1)； 化合物332((2R)-1-((3R,4R)-rel-4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-3-甲基哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体2)
Figure 747820DEST_PATH_IMAGE418
步骤a:
在氮气氛下，在室温下向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(顺式异构体)(0.38 g, 0.88 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.21 g, 1.77 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中加入Ti(OEt)4 (2.00 g, 8.87 mmol)。在氮气氛下，在70℃下将所得混合物搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用饱和Na2CO3水溶液(30 mL)猝灭。形成固体并过滤，将滤饼用EA(3×100 mL)洗涤。将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.24 g, 50%): C25H36Cl2N2O4S[M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：553, 555(3 : 2)，实测值 553, 555 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03-6.91 (m, 2H),6.11-5.88 (m, 1H), 5.35-5.26 (m, 2H), 4.67-4.53 (m, 2H), 4.40-4.18 (m, 1H),4.07-3.88 (m, 1H), 3.01-2.64 (m, 2H), 2.54-2.25 (m, 1H), 2.03-1.85 (m, 1H),1.68-1.54 (m, 2H), 1.51-1.45 (m, 9H), 1.26-1.18 (m, 9H), 1.02 (d, J = 7.0 Hz,3H)。
步骤b:
在氮气氛下，在-65℃下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.24 g,0.45 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加DIBAL-H (0.11 mL, 0.80 mmol, 1 M 甲苯溶液)。在氮气氛下，在-65℃下将所得混合物搅拌3小时。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭，用水(50 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.25 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H38Cl2N2O4S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.01-6.81 (m, 2H), 6.19-5.90 (m, 1H), 5.40-5.31(m, 2H), 4.82-4.48 (m, 3H), 4.39-4.21 (m, 1H), 4.06-3.77 (m, 1H), 2.90-2.56(m, 2H), 2.56-2.40 (m, 1H), 1.83-1.64 (m, 1H), 1.63-1.53 (m, 2H), 1.51-1.43(m, 9H), 1.09 (s, 9H), 0.83 (d, J = 6.9 Hz, 3H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯 (0.25 g, 0.47 mmol)在DCM(5 mL)中的混合物中加入TFA(1 mL)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在0℃下将反应溶液用饱和NaHCO3水溶液中和至pH 8并用水(50 mL)稀释。将水层用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](3-甲基哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.2 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435 (3 : 2)，实测值 433, 435 (3 :2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.09-6.90 (m, 2H), 6.08-5.95 (m, 1H), 5.52-5.28(m, 2H), 4.65-4.49 (m, 3H), 3.99-3.81 (m, 1H), 3.43-3.21 (m, 2H), 3.21-2.95(m, 1H), 2.95-2.61 (m, 1H), 2.55-2.15 (m, 1H), 2.00-1.71 (m, 2H), 1.14-1.01(m, 12H)。
步骤d:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (0.10 g, 0.69mmol)和HATU(0.26 g, 0.69 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](3-甲基哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20g, 0.46 mmol)和Et3N (93 mg, 0.92 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌0.5小时。将反应通过反相色谱纯化，用40% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.17 g, 67% 三步总计): C26H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：561, 563(3 : 2)，实测值 561, 563(3: 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.28-7.14 (m, 1H), 7.06-6.91 (m, 1H), 6.15-5.92 (m, 1H), 5.52-5.30 (m, 2H), 4.81-4.48 (m, 3H), 4.45-4.25 (m, 2H), 4.22-4.02 (m, 2H), 4.02-3.65 (m, 1H), 3.31-2.88 (m, 2H), 2.85-2.60 (m, 2H), 1.69-1.48 (m, 2H), 1.47-1.34 (m, 6H), 1.10 (s, 9H), 0.93-0.75 (m, 3H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.17 g, 0.30 mmol)和Pd(PPh3)4 (4 mg, 0.003 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (22 mg, 0.60 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。在室温下将反应用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10 g, 63%)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：521, 523 (3 : 2)，实测值 521, 523 (3 :2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]-3-甲基哌啶-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.10g, 0.19 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm 5 µm n；流动相A：水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：8.5 分钟内从5% B到20% B；220 nm；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 7.90 分钟, RT2: 8.60 分钟。
在7.90分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物331 ((2R)-1-((3S,4S)-4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-3-甲基哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸三氟乙酸)(37 mg, 25% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.46 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 4.65-4.38 (m, 2H), 4.38-3.98 (m, 2H),3.80-3.51 (m, 2H), 2.96 (t, J = 13.0 Hz, 1H), 2.83 (d, J = 13.0 Hz, 1H),2.61-2.39 (m, 1H), 2.29-2.08 (m, 1H), 1.62-1.20 (m, 1H), 1.20-0.85 (m, 4H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.09.
在8.60分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物332 ((2R)-1-((3R,4R)-4-((R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)-3-甲基哌啶-1-基)-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸)(31 mg, 21% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [[M + H]+的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 7.54 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.78-4.51 (m, 2H), 4.48-4.14 (m,2H), 3.92-3.50 (m, 3H), 3.25-3.05 (m, 1H), 2.81-2.51 (m, 2H), 1.87-1.68 (m,1H), 1.68-1.46 (m, 1H), 0.99-0.76 (m, 3H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.04.
实施例249.化合物333 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]氮杂环庚烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体1)； 化合物334 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]氮杂环庚烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体2
Figure 629188DEST_PATH_IMAGE419
步骤a:
在氮气氛下，在0℃下向搅拌的4-溴-1,2-二氯-5-(丙-2-烯-1-基氧基)环己-1,3-二烯(2.50 g, 8.80 mmol)在THF(25 mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl (5.5 mL, 11.00mmol, 2 M THF溶液)。在氮气氛下，在0℃下将所得溶液搅拌30分钟。在0℃下用5分钟向上述混合物中滴加4-甲酰基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯 (1.00 g, 4.40 mmol)的THF(2 mL)溶液。将所得溶液在0℃下另外搅拌1小时。在0℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(50 mL)猝灭，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过制备TLC纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.60g, 27%): C21H29Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS (ESI)计算值：452, 454 (3 : 2)，实测值 452,454 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H),6.08-5.93 (m, 1H), 5.47-5.30 (m, 2H), 4.77 (dd, J = 24.0, 6.2 Hz, 1H), 4.65-4.49 (m, 2H), 3.62-3.44 (m, 2H), 3.33-3.12 (m, 2H), 2.11-1.53 (m, 3H), 1.54-1.40 (m, 12H), 1.37-1.17 (m, 1H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](羟基)甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 1.40 mmol)在DCM(5 mL)中的溶液中分批加入戴斯-马丁试剂(0.12 g, 2.80 mmol)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。在室温下将反应用饱和Na2SO3水溶液(10 mL)猝灭。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(5/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯 (0.60 g, 80%): C21H27Cl2NO4 [M + Na]+的LCMS(ESI)计算值：450, 452 (3 : 2)，实测值 450, 452 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.67 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.13-5.97 (m, 1H), 5.51-5.33 (m, 2H), 4.64 (dt,J = 5.5, 1.5 Hz, 2H), 3.70-3.48 (m, 2H), 3.45-3.34 (m, 2H), 3.29-3.20 (m,1H), 2.16-1.95 (m, 2H), 1.95-1.83 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 1H), 1.65-1.53 (m,2H), 1.49 (s, 9H)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯甲酰基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.60 g, 1.40 mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.34 g, 2.80mmol)在THF(3 mL)中的溶液中滴加Ti(OEt)4(1.60 g, 7.00 mmol)。将所得溶液在氮气氛下，在70℃下搅拌16小时。在室温下将反应用饱和NaHCO3水溶液(50 mL)猝灭。将所得混合物用EA(3×50 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(1/1)洗脱，以浅黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g, 32%): C25H36Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：531, 533 (3 : 2)，实测值 531, 533 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.18 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.14-5.89 (m, 1H), 5.47-5.26 (m, 2H), 4.62-4.51(m, 2H), 3.69-3.42 (m, 2H), 3.42-3.15 (m, 2H), 2.73-2.31 (m, 2H), 2.23-2.08(m, 1H), 2.05-1.68 (m, 2H), 1.67-1.51 (m, 2H), 1.50-1.46 (m, 9H), 1.23 (s,9H)。
步骤d:
在氮气氛下，在-78℃下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基])甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(0.30 g,0.56 mmol)在THF(5 mL)中的溶液中滴加DIBALH (1.13 mL, 1.13 mmol, 1 M甲苯溶液)。在氮气氛下，将所得混合物在-78℃下搅拌2小时。在-78℃下将反应用饱和NH4Cl水溶液(2mL)猝灭。将所得混合物用水(30 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(3/1)洗脱，以灰白色固体形式得到4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯 (0.20 g,53%): C25H38Cl2N2O4S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：533, 535 (3 : 2)，实测值 533, 535(3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.09-5.95 (m,1H), 5.46-5.32 (m, 2H), 4.67 (d, J = 31.6 Hz, 1H), 4.59-4.44 (m, 2H), 3.76-3.37 (m, 2H), 3.34-3.08 (m, 2H), 2.03-1.80 (m, 3H), 1.80-1.59 (m, 1H), 1.57-1.30 (m, 11H), 1.24-1.15 (m, 10H)。
步骤e:
在室温下向搅拌的4-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯 (0.12 g, 0.23 mmol)在DCM(2 mL)中的溶液中加入TFA(0.5 mL)。将所得溶液在室温下搅拌30分钟。将残渣用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 8。将所得混合物用水(20 mL)稀释，用EA(3×30 mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以浅黄色固体形式得到(S)-N-[(R)-氮杂环庚烷-4-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C20H30Cl2N2O2S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：433, 435 (3 : 2)，实测值 433, 435 (3 :2)。
步骤f:
在室温下向搅拌的(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-甲酸 (81 mg, 0.55mmol)和HATU (0.26 g, 0.69 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-氮杂环庚烷-4-基[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.12g, 0.28 mmol)和Et3N (83 mg, 0.82 mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用63% ACN水溶液(加0.05% TFA)洗脱，以浅黄色油的形式得到(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 46%): C26H38Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：561,563 (3 : 2)，实测值 561, 563 (3 : 2)。
步骤g:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg, 0.16 mmol)和Pd(PPh3)4 (2 mg, 0.002 mmol) 在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4 (18 mg, 0.48 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(90 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C23H34Cl2N2O5S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：521, 523 (3 : 2)，实测值 521, 523 (3 :2)。
步骤h:
在室温下向搅拌的(S)-N-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)([1-[(4R)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基]氮杂环庚烷-4-基])甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (90 mg,0.17 mmol)在1,4-二噁烷(1 mL)中的混合物中加入HCl水溶液(4 N, 1.00 mL)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD柱，5 μm，19×150 mm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：7 分钟内从10% B到29% B；检测器：UV 220/254 nm； 保留时间：RT1: 6.30 分钟； RT2: 6.60 分钟。
在6.30分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物333 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]氮杂环庚烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体1)(10.3 mg, 12% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+ 的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.43 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 4.47 (dt, J = 26.7, 5.6Hz, 1H), 4.22 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 3.84-3.46 (m, 5H), 3.46-3.33 (m, 1H),2.36-2.18 (m, 1H), 2.18-1.94 (m, 2H), 1.88-1.58 (m, 2H), 1.51-1.27 (m, 2H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.95.
在6.60分钟收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物334 ((2R)-1-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]氮杂环庚烷-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮三氟乙酸 异构体2)(10.6 mg, 12% 两步总计): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+ 的LCMS(ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.43 (s, 1H), 7.08 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.50 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.34-4.19(m, 1H), 3.98-3.52 (m, 6H), 2.31-2.02 (m, 2H), 2.02-1.83 (m, 1H), 1.72-1.44(m, 3H), 1.41-1.21 (m, 1H)； 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -76.94.
实施例250.化合物335 ((2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-醇三氟乙酸)
Figure 453924DEST_PATH_IMAGE420
步骤a:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-3-(苯甲酰基氧基)氧杂环戊烷-2-甲酸 (0.12 g,0.49 mmol)和HATU (0.19 g, 0.49 mmol)在DMF(3 mL)中的溶液中加入(S)-N-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (中间体25, 实施例25) (0.13 g, 0.33 mmol)和Et3N (99 mg, 0.98 mmol)。将反应溶液在室温下搅拌0.5小时。将所得溶液用水(50 mL)猝灭，用EA(3×40 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×30 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用具有10 mmoL/L NH4HCO3的55% ACN水溶液洗脱，以浅黄色泡沫形式得到(2R,3S)-2-[4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.13 g, 65%): C32H41ClN2O6S[M + H]+的LCMS (ESI)计算值：617, 619 (3 : 1)，实测值 617, 619 (3 : 1)； 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 8.04 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.70-7.53 (m,1H), 7.53-7.37 (m, 2H), 7.11-7.01 (m, 1H), 6.70 (d, J = 22.3 Hz, 1H), 6.10 -5.92 (m, 1H), 5.88 (td, J = 6.1, 2.5 Hz, 1H), 5.45-5.23 (m, 2H), 4.92 (d, J =5.6 Hz, 1H), 4.72-4.37 (m, 4H), 4.37-4.28 (m, 1H), 4.10-3.96 (m, 1H), 3.81-3.71 (m, 1H), 3.05-2.67 (m, 1H), 2.46-2.29 (m, 4H), 2.29-2.12 (m, 1H), 1.99-1.81 (m, 1H), 1.76-1.54 (m, 1H), 1.52-1.38 (m, 1H), 1.25-1.17 (m, 3H), 1.11(d, J = 29.8 Hz, 9H)
步骤b:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-2-[4-[(R)-[5-氯-4-甲基-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基]([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.13 g, 0.21 mmol)和Pd(PPh3)4 (5 mg, 0.004 mmol)在THF(3 mL)中的溶液中加入NaBH4 (16 mg, 0.42 mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物用饱和NH4Cl水溶液(0.5 mL)猝灭并减压浓缩，以棕色油的形式得到(2R,3S)-2-[4-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.12 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C29H37ClN2O6S[M +H]+的LCMS (ESI)计算值：577, 579 (3 : 1)，实测值 577, 579 (3 : 1)。
步骤c:
在室温下向搅拌的(2R,3S)-2-[4-[(R)-(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)([[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基])甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(0.12 g, 0.21mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入HCl水溶液(4 N, 1 mL)。将反应溶液在室温下搅拌1小时并减压浓缩，以褐色固体形式得到(2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(95 mg, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C25H29ClN2O5 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：473, 475 (3 : 1)，实测值 473,475 (3 : 1)。
步骤d:
在室温下将(2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-基苯甲酸酯(95 mg, 0.20 mmol)在甲胺的甲醇(4 mL)溶液中搅拌16小时。将反应减压浓缩。将残渣溶解于HCl(1 N, 30 mL)。将水层用EA(2×30 mL)提取。将水层减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：Xselect CSH OBD柱 30×150 mm5 μm； 流动相A:水(加0.05% TFA)，流动相B：ACN；流速：60 mL/min；梯度：7 分钟内从7% B到20% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：6.93分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物335 ((2R,3S)-2-[4-[(R)-氨基(5-氯-2-羟基-4-甲基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]氧杂环戊烷-3-醇三氟乙酸) (52.1 mg, 51% 三步总计):C18H25ClN2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：369, 371 (3 : 1)，实测值 369, 371 (3 :1)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.73-4.46 (m, 3H),4.29-4.00 (m, 3H), 3.95-3.82 (m, 1H), 3.17-2.90 (m, 1H), 2.78-2.48 (m, 1H),2.44-2.27 (m, 4H), 2.27-2.10 (m, 1H), 2.08-1.90 (m, 2H), 1.55-1.07 (m, 3H)；19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -77.07.
实施例251.化合物336 ((2R)-1-[4-[(S)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)； 化合物337 ((2R)-1-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)
Figure 369928DEST_PATH_IMAGE421
步骤a:
通过手性制备HPLC在以下条件下分离(2R)-1-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮 (化合物196的游离碱，实施例188) (40 mg):柱：Chiralpak IF, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (0.1% IPA)，流动相B：EtOH；流速：20mL/min；梯度：18 分钟内从30% B到30% B；检测器：UV 254/220 nm；保留时间：RT1: 10.21分钟； RT2: 14.65 分钟。
在10.21分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物337((2R)-1-[4-[(R)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(4 mg, 10%): C16H22Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 7.11 (s, 1H),4.71-4.31 (m, 2H), 4.31-4.03 (m, 2H), 3.85-3.51 (m, 2H), 3.25-2.98 (m, 1H),2.84-2.36 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.15-1.9 (m, 1H), 1.54-1.01 (m, 3H)。
在14.65分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物336((2R)-1-[4-[(S)-(4,5-二氯-2-羟基苯基)(甲基氨基)甲基]哌啶-1-基]-2,3-二羟基丙-1-酮)(11 mg, 28%): C16H22 Cl2N2O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：377, 379 (3 : 2)，实测值 377, 379 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.17 (s, 1H), 6.87 (s, 1H),4.65-4.44 (m, 2H), 4.13 (dd, J = 31.3, 13.6 Hz, 1H), 3.73-3.57 (m, 3H), 3.21-2.89 (m, 1H), 2.80-2.51 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.21-2.02 (m, 1H), 1.97 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.37-1.16 (m, 2H)。
实施例252.化合物338 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-噁嗪烷-2-酮 异构体1)； 化合物210 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-噁嗪烷-2-酮 异构体2)
Figure 497284DEST_PATH_IMAGE422
步骤a:
通过制备手性HPLC在下述条件下纯化5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-噁嗪烷-2-酮三氟乙酸 (化合物279, 表1b) (0.14 g, 0.27mmol): 柱：CHIRALPAK IE, 2×25 cm, 5 μm；流动相A：己烷 (加0.2% IPA)，流动相B：EtOH；流速：15 mL/min；梯度：23 分钟内从50% B到505 B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 15.37 分钟； RT2: 19.03 分钟； 注射体积: 0.3 mL；试验次数: 8。
在15.37分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物210 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-噁嗪烷-2-酮 异构体2)(32.6 mg, 30%): C17H21Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值402, 404 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7.23 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.87 (s,1H), 4.55 (dd, J = 41.0, 13.3 Hz, 1H), 4.42-4.24 (m, 2H), 4.10 (dd, J = 40.0,13.8 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 13.5, 7.6 Hz, 1H), 3.54-3.36 (m, 3H), 3.18-2.97(m, 1H), 2.60 (dt, J = 33.9, 12.8 Hz, 1H), 2.16-1.93 (m, 2H), 1.51 (dd, J =28.7, 13.3 Hz, 1H), 1.42-1.06 (m, 2H)。
在19.03分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物338 (5-[4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-羰基]-1,3-噁嗪烷-2-酮 异构体1)(28.5 mg, 26%): C17H21Cl2N3O4 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：402, 404 (3 : 2)，实测值402, 404 (3 : 2)； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.24 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.55(dd, J = 36.5, 13.4 Hz, 1H), 4.44-4.26 (m, 2H), 4.10 (dd, J = 36.6, 13.7 Hz,1H), 3.91 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 3.52-3.38 (m, 3H), 3.11 (dt, J = 41.2, 13.2Hz, 1H), 2.70-2.49 (m, 1H), 2.11-1.94 (m, 2H), 1.51 (t, J = 16.2 Hz, 1H),1.35-1.09 (m, 2H)。
实施例253.化合物78 (2-[氨基[1-(2-氨基甲酰基乙基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯基甲酸酯)；
Figure 131527DEST_PATH_IMAGE423
步骤a:
在氮气氛下，在120℃将N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺 (0.20 g, 0.48 mmol)在丙-2-烯酰胺(3 mL)中的混合物搅拌12小时。将所得混合物用EA(20 mL)和水(20 mL)稀释。将水溶液用EA(2×20 mL)提取。将合并的有机层用盐水(2×20 mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液减压浓缩，以黄色油的形式得到3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)丙酰胺(0.13 g, 56%)；C22H33Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：490, 492 (3 : 2) 实测值：490, 492 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ7.54 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.11-5.91 (m, 1H), 5.47-5.13 (m, 2H), 4.74-4.47(m, 2H), 4.47-4.31 (m, 1H), 3.54-3.43 (m, 1H), 3.40-3.29 (m, 1H), 3.29-3.10(m, 2H), 2.90-2.61 (m, 2H), 2.23-1.79 (m, 3H), 1.54-1.21 (m, 3H), 1.02-0.93(m, 10H)。
步骤b:
在室温下向搅拌的3-(4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基)丙酰胺(0.10 g, 0.20 mmol)在THF(4 mL)中的溶液中加入L-脯氨酸(47 mg, 0.41 mmol)和Pd(PPh3)4 (47 mg, 0.04 mmol)。将所得混合物在氮气氛下，在室温下搅拌16小时。将反应在室温下用水(1 mL)猝灭。将所得混合物减压浓缩，得到3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]丙酰胺(0.10 g, 粗制)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤：C19H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：450, 452 (3 : 2) 实测值：450, 452 (3 : 2)；
步骤c:
在室温下向搅拌的3-[4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-基]丙酰胺(0.10 g, 0.22 mmol)在二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl(4N, 1 mL)。将反应在室温下搅拌5小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液中和至pH=7。将混合物减压浓缩。
将所得混合物真空浓缩。将粗产物通过制备HPLC在下述条件下纯化(柱: XBridgeC18 OBD Prep Column, 19 mm×250 mm；流动相A：水(0.05%TFA )，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：8 分钟内从4% B到24% B；254/210 nm；Rt：6.67分钟。收集含有所需产物的馏分并减压浓缩，以灰白色固体形式得到化合物78 (2-[氨基[1-(2-氨基甲酰基乙基)哌啶-4-基]甲基]-4,5-二氯苯基甲酸酯)(10 mg, 14% 两步总计): C15H21Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：346, 348 (3 : 2) 实测值：346, 348 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.19 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.89 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.10-3.00 (m,1H), 3.00-2.91 (m, 1H), 2.72-2.60 (m, 2H), 2.41 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.14-1.86 (m, 3H), 1.86-1.73 (m, 1H), 1.51-1.18 (m, 3H)。
实施例254.化合物81 (4-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺)； 化合物82 (4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺)
Figure 494376DEST_PATH_IMAGE424
步骤a:
在室温下向搅拌的N-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基](哌啶-4-基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.20 g, 0.48 mmol)和Et3N (73 mg, 0.72 mmol)在DCM(2mL)中的混合物中加入异氰酸根合三甲基硅烷(66 mg, 0.57 mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将所得混合物减压浓缩。将残渣通过反相色谱纯化，用70% ACN水溶液(0.05%TFA)洗脱，以黄色油的形式得到4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺(0.15 g, 68%)；C20H29Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS(ESI)计算值：462, 464 (3 : 2) 实测值：462, 464 (3 : 2)。
步骤b:
在室温下向搅拌的4-[[4,5-二氯-2-(丙-2-烯-1-基氧基)苯基][(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺 (0.15 g, 0.33 mmol)和Pd(PPh3)4 (7 mg, 0.01mmol)在THF(2 mL)中的溶液中加入NaBH4(25 mg, 0.65 mmol)。将反应在室温下搅拌1小时。将反应溶液用饱和NH4Cl水溶液(1 mL)猝灭并减压浓缩，以褐色固体形式得到4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺(0.13 g, 粗制)，其不经进一步纯化而直接用于后续步骤: C17H25Cl2N3O3S [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：422, 424 (3 : 2) 实测值：422, 424 (3 : 2)。
步骤c:
在室温下向搅拌的4-[(4,5-二氯-2-羟基苯基)[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基]哌啶-1-甲酰胺(0.13 g, 0.31 mmol)在二噁烷(2 mL)中的溶液中加入HCl(4 N, 1mL)。将反应在室温下搅拌5小时。将反应溶液减压浓缩。将残渣通过制备HPLC在下述条件下纯化：柱：XBridge C18 OBD Prep Column 100 Å, 10 μm，19 mm×250 mm；流动相A：具有20mmol/L NH4HCO3的水，流动相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：6.5 分钟内从20% B到80% B；检测器：UV 254/210 nm；保留时间：5.95分钟。收集含有所需产物的馏分，减压浓缩，以灰白色固体形式得到4-[氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺(69.6 mg, 67% 两步总计): C13H17Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：318, 320 (3 : 2) 实测值：318, 320(3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.21 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.18-4.03 (m,1H), 4.03-3.93 (m, 1H), 3.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.86-2.62 (m, 2H), 2.10-1.85 (m, 2H), 1.50-1.34 (m, 1H), 1.34-1.12 (m, 2H)。
步骤d:
通过制备手性HPLC在下述条件下分离4-(氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基)哌啶-1-甲酰胺 (65mg, 0.20 mmol): 柱：CHIRALPAK IG, 20×250 mm, 5 μm；流动相A：己烷(加0.2% IPA)-HPLC，流动相B：EtOH-HPLC；流速：20 mL/min；梯度：15 分钟内从30% B到30%B；检测器：UV 220/254 nm；保留时间：RT1: 9.17 分钟； RT2: 12.55分钟。在9.17分钟以灰白色固体形式得到较快洗脱的对映异构体作为化合物81 (4-[(S)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺) (10 mg, 15%): C13H17Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：318, 320 (3 : 2) 实测值：318, 320 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.19 (s,1H), 6.85 (s, 1H), 4.15-4.03 (m, 1H), 4.02-3.91 (m, 1H), 3.87 (d, J = 7.6 Hz,1H), 2.85-2.66 (m, 2H), 2.04-1.84 (m, 2H), 1.50-1.32 (m, 1H), 1.32-1.07 (m,2H)。在12.55分钟以灰白色固体形式得到较慢洗脱的对映异构体作为化合物82 (4-[(R)-氨基(4,5-二氯-2-羟基苯基)甲基]哌啶-1-甲酰胺)(8 mg, 12%): C13H17Cl2N3O2 [M + H]+的LCMS (ESI)计算值：318, 320 (3 : 2) 实测值：318, 320 (3 : 2)； 1H NMR (300 MHz,CD3OD) δ 7.21 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.16-4.06 (m, 1H), 4.02-3.93 (m, 1H),3.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.86-2.62 (m, 2H), 2.06-1.85 (m, 2H), 1.48-1.37 (m,1H), 1.37-1.09 (m, 2H)。
实施例255.Kv1.3钾通道阻断剂活性的评价
以下描述的测试用于评价所公开的化合物作为Kv1.3钾通道阻断剂的活性。
细胞培养
使稳定表达Kv1.3的CHO-K1细胞在含有10%热灭活的FBS、1 mM丙酮酸钠、2 mM L-谷氨酰胺和G418 (500µg/ml)的DMEM中生长。在37℃下在5% CO2加湿培养箱中使细胞在培养瓶中生长。
溶液
将细胞浸浴在细胞外液中，该细胞外液含有140 mM NaCl、4 mM KCl、2 mM CaCl2、1 mM MgCl2、5 mM 葡萄糖、10 mM HEPES；pH用NaOH调节至7.4；295-305 mOsm。内部溶液含有50 mM KCl、10 mM NaCl、60 mM KF、20 mM EGTA、10 mM HEPES；pH用KOH调节至7.2；285mOsm。所有化合物以30 mM溶解于DMSO中。化合物储液用外部溶液新鲜稀释至浓度为30 nM、100 nM、300 nM、1 µM、3 µM、10 µM、30 µM和100 µM。最高含量的DMSO (0.3%)以100 µM存在。
电压方案
以0.1 Hz频率施加电流，该电流是通过施用从-90 mV(保持电位)至+40 mV的100ms去极化脉冲而诱发的。对照(无化合物)和所施加的每个化合物浓度的化合物脉冲序列含有20个脉冲。在脉冲序列之间使用10秒的间断(见下表A)。
表A. 电压方案
Figure 264886DEST_PATH_IMAGE425
膜片钳记录和复合应用
借助自动膜片钳平台Patchliner(Nanion Technologies GmbH)使得能够进行全细胞电流记录和化合物应用。EPC 10膜片钳放大器(HEKA Elektronik Dr. Schulze GmbH)与Patchmaster软件(HEKA Elektronik Dr. Schulze GmbH)一起用于数据采集。在10kHz下取样数据而不进行过滤。使用P/4程序(HEKA Elektronik Dr. Schulze GmbH)在线减去被动泄漏电流(Passive leak currents)。对相同的细胞连续地施加增加的化合物浓度，其间没有冲洗。在后续脉冲序列之前的总化合物孵育时间不长于10秒。在化合物平衡期间观察到峰值电流抑制。
数据分析
AUC和峰值用PatchMaster(HEKA Elektronik Dr. Schulze GmbH)获得。为了测定IC50，使用对应于给定化合物浓度的脉冲序列中的最后单脉冲。将在化合物存在下获得的AUC和峰值相对于在化合物不存在下的对照值进行标准化。使用Origin (OridiLab)，IC50由符合Hill方程的数据得到：I化合物/I对照=(100-A)/(1 + ([化合物]/IC50)nH)+A，其中IC50值是电流抑制为半最大值时的浓度，[化合物]是应用的化合物浓度，A是未阻断的电流的分数，nH是Hill系数。
实施例256.hERG活性的评价
hERG电生理学
该测定用于评价所公开的化合物对hERG通道的抑制活性。
细胞培养
使稳定表达hERG的CHO-K1细胞在具有谷氨酰胺、含有10%热灭活的FBS、1%青霉素/链霉素、潮霉素(100μG/ml)和G418(100μG/ml)的Ham’s F-12培养基中生长。在37℃下在5%CO2加湿培养箱中使细胞在培养瓶中生长。
溶液
将细胞浸浴在细胞外液中，该细胞外液含有140 mM NaCl、4 mM KCl、2 mM CaCl2、1 mM MgCl2、5 mM 葡萄糖、10 mM HEPES；pH用NaOH调节至7.4；295-305 mOsm。内部溶液含有50 mM KCl、10 mM NaCl、60 mM KF、20 mM EGTA、10 mM HEPES；pH用KOH调节至7.2；285mOsm。所有化合物以30 mM溶解于DMSO中。化合物储液用外部溶液新鲜稀释至浓度为30 nM、100 nM、300 nM、1 µM、3 µM、10 µM、30 µM和100 µM。最高含量的DMSO (0.3%)以100 µM存在。
电压方案
电压方案(参见表B)被设计为模拟心脏动作电位期间的电压变化，其中300 ms去极化至+20 mV(类似于心脏动作电位的平台期)、300 ms复极化至-50 mV(诱导尾电流)和最终步骤至-80 mV的保持电位。脉冲频率为0.3 Hz。对照(无化合物)和所施加的每个化合物浓度的化合物脉冲序列包含70个脉冲。
表B. hERG电压方案
Figure 818270DEST_PATH_IMAGE426
膜片钳记录和复合应用
借助自动膜片钳平台Patchliner(Nanion)使得能够进行全细胞电流记录和化合物应用。EPC 10膜片钳放大器(HEKA)与Patchmaster软件(HEKA Elektronik Dr. SchulzeGmbH)一起用于数据采集。在10 kHz下取样数据而不进行过滤。对相同的细胞连续地施加增加的化合物浓度，其间没有冲洗。
数据分析
AUC和峰值用PatchMaster(HEKA Elektronik Dr. Schulze GmbH)获得。为了测定IC50，使用对应于给定化合物浓度的脉冲序列中的最后单脉冲。将在化合物存在下获得的AUC和峰值相对于在化合物不存在下的对照值进行标准化。使用Origin (OridiLab)，IC50由符合Hill方程的数据得到：I化合物/I对照=(100-A)/(1 + ([化合物]/IC50)nH)+A，其中IC50是电流抑制为半最大值时的浓度，[化合物]是应用的化合物浓度，A是未阻断的电流的分数，nH是Hill系数。
表1提供了某些所选化合物对Kv1.3钾通道和hERG通道的抑制活性的总结。
表1.某些示例性化合物对Kv1.3钾通道和hERG通道的IC50(μM)值。
Figure 674230DEST_PATH_IMAGE427
Figure 981715DEST_PATH_IMAGE428
Figure 137890DEST_PATH_IMAGE429
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Figure 248431DEST_PATH_IMAGE432
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Figure 214354DEST_PATH_IMAGE467
Figure 480119DEST_PATH_IMAGE468
Figure 384621DEST_PATH_IMAGE469
Figure 156268DEST_PATH_IMAGE470
Figure 106906DEST_PATH_IMAGE471
*未测试。

Claims (78)

1.式I的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure 626415DEST_PATH_IMAGE002
；
其中
Z是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra；
X1是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基、环烯基或卤代环烷基；
X2是H、卤素、CN、烷基、卤代烷基、环烷基或卤代环烷基；
X3是H、卤素、氟代烷基或烷基；
或者X1和X2与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
或者X2和X3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R3是H、卤素或烷基；
或者X1和R3与它们所连接的碳原子一起形成任选被取代的6-元芳基；
R1和R2各自独立地为H、烷基、(CR6R7)n4ORa、(CR6R7)n4NRaRb、(CR6R7)n4NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)n4CONRaRb；或者R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环；
R4是H、烷基、卤代烷基、任选被取代的环烷基、(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc、(CR6R7)n4SO2NRcRd、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；
R5的每次出现独立地为H、烷基、环烷基或氧代；
或两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环；
或两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链；
R6和R7的每次出现独立地为H、烷基或环烷基；
Ra和Rb的每次出现独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基；或者Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，所述杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
Rc和Rd的每次出现独立地为H、烷基、被1-4个各自独立地为卤素、OR8或N(R8)2的取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基；或者Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R8的每次出现独立地为H、烷基或任选被取代的杂环；或者两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子；
R9是H、烷基、卤素或(CR6R7)n4ORb；
在化合价允许的情况下，X1、X2、X3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、Ra、Rb、Rc和Rd中的烷基、环烷基、螺烷基、双环烷基、杂环、芳基和杂芳基在适用时任选被1-4个取代基取代，该取代基各自独立地选自烷基、环烷基、卤代环烷基、卤代烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)C1-4烷基、(C=O)N(R8)2和氧代；
在化合物允许的情况下，n1的每次出现独立地为0-3的整数；
n2和n3的每次出现独立地为0-2的整数；和
n4的每次出现独立地为0-3的整数。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中n2和n3的每次出现独立地为0-1的整数。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中结构基序
Figure 543556DEST_PATH_IMAGE004
具有
Figure 323293DEST_PATH_IMAGE006
或
Figure 125027DEST_PATH_IMAGE008
的结构。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中结构基序
Figure 939399DEST_PATH_IMAGE010
具有
Figure 761862DEST_PATH_IMAGE012
或
Figure 560053DEST_PATH_IMAGE014
的结构。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中结构基序
Figure 758954DEST_PATH_IMAGE016
具有
Figure 427832DEST_PATH_IMAGE018
的结构。
6.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R1和R2的至少一次出现为H或烷基。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R1和R2的至少一次出现为(CR6R7)n4ORa、(CR6R7)n4NRaRb、(CR6R7)n4NRa(C=O)Rb、(CR6R7)n4NRaSO2Rb或(CR6R7)n4CONRaRb。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中R1和R2的至少一次出现为ORa或NRaRb。
9.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R1、R2与它们所连接的碳原子一起形成3-5元碳环。
10.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中R1和R2各自独立地为H、Me、OH、CH2OH、NH2、NHMe、NMe2、CH2NH2、CONH2、CONHMe2、CONMe2、NH(C=O)Me、NMe(C=O)Me、
Figure 326256DEST_PATH_IMAGE020
Figure 80585DEST_PATH_IMAGE022
。
11.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R4是H、烷基、卤代烷基或环烷基。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中R4是H、Me或氟代乙基。
13.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中R4是(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4CORc、(C=O)(CR6R7)n4Rc、(CR6R7)n4COORc、(CR6R7)n4NRc(C=O)Rd、(CR6R7)n4(C=O)NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)n4ORc、(CR6R7)n4SO2Rc或(CR6R7)n4SO2NRcRd。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中R4是(CR6R7)2ORc、(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、COORc、(CR6R7)1-2NRc(C=O)Rd、(C=O)NRcRd、(CR6R7)n4(C=O)(C=O)NRcRd、(C=O)(CR6R7)1-2ORc、SO2Rc或SO2NRcRd。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中R4是(CH2)2OH、(CH2)2OMe、(C=O)H、(C=O)Me、(C=O)CH2OH、(C=O)CH2OMe、(C=O)Et、(C=O)Ph、(C=O)异丙基、(C=O)NH2、(C=O)NHMe、(C=O)NMe2、(C=O)CH2NH2、(C=O)CH2NHMe、(C=O)CH(OH)CH2OH、(C=O)CH(OMe)CH2OH、(C=O)CH(OH)CH2OMe、(C=O)(C=O)NMe2、(C=O)OMe、SO2Me、SO2Et、SO2CH2OH、SO2CH2OMe、SO2NH2、SO2NHMe或SO2NMe2。
16.根据权利要求14所述的化合物，其中R4是(C=O)Rc、(C=O)(CR6R7)1-2Rc、(C=O)(CR6R7)1-2ORc或SO2Rc；并且其中Rc选自H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2中的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基、和任选被取代的-环烷基-烷基。
17.根据权利要求14所述的化合物，其中Rc或Rd是H、Me、Et、
Figure 817597DEST_PATH_IMAGE024
、
Figure 340982DEST_PATH_IMAGE026
、
Figure 301985DEST_PATH_IMAGE028
Figure 543611DEST_PATH_IMAGE030
。
18.根据权利要求14所述的化合物，其中Rc或Rd是选自以下的杂环：
Figure 818734DEST_PATH_IMAGE032
Figure 868730DEST_PATH_IMAGE034
Figure 203896DEST_PATH_IMAGE036
Figure 932818DEST_PATH_IMAGE038
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
19.根据权利要求14所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，Rc是各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
20.根据权利要求19所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，Rc是各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 542791DEST_PATH_IMAGE040
Figure 40768DEST_PATH_IMAGE042
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
21.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中R4是任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的环烷基、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中R4是选自以下的杂环：
Figure 812415DEST_PATH_IMAGE044
Figure 169578DEST_PATH_IMAGE046
Figure 52083DEST_PATH_IMAGE048
Figure 404567DEST_PATH_IMAGE050
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
23.根据权利要求21所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，R4是任选被1-4个取代基取代的环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
24.根据权利要求23所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，R4是各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 878274DEST_PATH_IMAGE052
Figure 316209DEST_PATH_IMAGE054
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
25.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中R4是
Figure 736826DEST_PATH_IMAGE056
Figure 615920DEST_PATH_IMAGE058
Figure 729370DEST_PATH_IMAGE060
Figure 654600DEST_PATH_IMAGE062
或其互变异构体。
26.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物，其中R5的至少一次出现为H、烷基或环烷基。
27.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物，其中R5的至少一次出现为氧代。
28.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物，其中两个R5基团连接至碳环上的不同碳原子并且一起形成键或含有1-3个碳的烷基链。
29.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物，其中两个R5基团与它们所连接的碳原子一起形成3-7元任选被取代的饱和碳环。
30.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Ra和Rb的至少一个独立地为H、烷基、环烷基、饱和杂环、芳基或杂芳基。
31.根据权利要求1-29中任一项所述的化合物，其中Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
32.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R6和R7的每次出现独立地为H或烷基。
33.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R9是H、烷基或卤素。
34.根据权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中R9是(CR6R7)n4ORb。
35.根据权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中R9是H、F或OH。
36.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z是ORa、NRaRb或NRb(C=O)Ra。
37.根据权利要求36所述的化合物，其中Z是OH、OMe、NH2、NHMe或NMe2。
38.根据权利要求36所述的化合物，其中Z是OH。
39.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X1是H、卤素、氟代烷基或烷基。
40.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X1是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。
41.根据权利要求39所述的化合物，其中X1是Me或Cl。
42.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X2是H、卤素、氟代烷基或烷基。
43.根据权利要求42所述的化合物，其中X2是H、F、Cl、Br、Me、CF3或CF2Cl。
44.根据权利要求42所述的化合物，其中X2是Cl。
45.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X3是H、F、Cl、Br、氟代烷基或烷基。
46.根据权利要求45所述的化合物，其中X3是H、F、Cl或CF3。
47.根据权利要求1-35中任一项所述的化合物，其中所述结构部分
Figure 878908DEST_PATH_IMAGE064
具有各自被R3取代的
Figure 471564DEST_PATH_IMAGE066
Figure 755914DEST_PATH_IMAGE068
Figure 168441DEST_PATH_IMAGE070
的结构。
48.根据权利要求1-47中任一项所述的化合物，其中R3是H或烷基。
49.根据权利要求1-47中任一项所述的化合物，其中R3是卤素。
50.根据权利要求1-38中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有式II的结构，
Figure 101500DEST_PATH_IMAGE072
；
R3'的每次出现独立地为H、卤素或烷基；和
n6是0-2的整数。
51.根据权利要求50所述的化合物，其中R3’的至少一次出现为H或烷基。
52.根据权利要求50所述的化合物，其中R3’的至少一次出现为卤素。
53.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R8的至少一次出现为H、烷基或任选被取代的杂环。
54.根据权利要求53所述的化合物，其中R8是H、Me、Et、Pr、Bu或选自以下的杂环：
Figure 283082DEST_PATH_IMAGE074
Figure 472755DEST_PATH_IMAGE076
Figure 372578DEST_PATH_IMAGE078
Figure 469847DEST_PATH_IMAGE080
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
55.根据权利要求1-52中任一项所述的化合物，其中两个R8基团与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
56.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中n1是0、1、2或3。
57.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中n4是0、1或2。
58.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、烷基、被各自独立地选自卤素、OR8和N(R8)2中的1-4个取代基取代的烷基、烯基、任选被取代的环烷基、任选被取代的双环烷基、任选被取代的螺烷基、任选被取代的饱和杂环、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的-烷基-芳基、任选被取代的-烷基-杂芳基、任选被取代的-烷基-杂环、任选被取代的-烷基-环烷基或任选被取代的-环烷基-烷基。
59.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中Rc和Rd与它们所连接的氮原子一起形成任选被取代的杂环，该杂环包含氮原子和0-3个各自选自N、O和S的另外的杂原子。
60.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中Rc或Rd的至少一次出现独立地为H、Me、Et、
Figure 771516DEST_PATH_IMAGE082
Figure 132090DEST_PATH_IMAGE084
Figure 925733DEST_PATH_IMAGE086
。
61.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中Rc或Rd的至少一次出现独立地为选自以下的杂环：
Figure 295535DEST_PATH_IMAGE088
Figure 186130DEST_PATH_IMAGE090
Figure 514344DEST_PATH_IMAGE092
Figure 123179DEST_PATH_IMAGE094
Figure 296672DEST_PATH_IMAGE096
；其中在化合价允许的情况下，所述杂环任选被一个或多个氰基、环烷基、氟代烷基、氟代环烷基、卤素、OH、NH2、氧代或(C=O)C1-4烷基取代。
62.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的环烷基、螺烷基或双环烷基，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
63.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中在化合价允许的情况下，Rc或Rd的至少一次出现独立地为各自任选被1-4个取代基取代的
Figure 307353DEST_PATH_IMAGE098
Figure 681834DEST_PATH_IMAGE100
，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CN、-(CH2)0-2OR8、N(R8)2、(C=O)N(R8)2和氧代。
64.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自表1中的化合物1-338。
65.药物组合物，其包含至少一种权利要求1-64中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或稀释剂。
66.治疗有需要的哺乳动物物种中的病状的方法，其包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种权利要求1-64中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述病状选自癌症、免疫病症、中枢神经系统(CNS)病症、炎性病症、胃肠病症、代谢病症、心血管病症和肾病。
67.根据权利要求66所述的方法，其中所述免疫病症是移植排斥或自身免疫疾病。
68.根据权利要求67所述的方法，其中所述自身免疫疾病是类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮或I型糖尿病。
69.根据权利要求66所述的方法，其中所述中枢神经系统(CNS)病症是阿尔茨海默病。
70.根据权利要求66所述的方法，其中所述炎性病症是炎性皮肤病状、关节炎、银屑病、脊柱炎、牙周炎或炎性神经病。
71.根据权利要求66所述的方法，其中所述胃肠病症是炎性肠病。
72.根据权利要求66所述的方法，其中所述代谢病症是肥胖或II型糖尿病。
73.根据权利要求66所述的方法，其中所述心血管病症是缺血性中风。
74.根据权利要求66所述的方法，其中所述肾病是慢性肾病、肾炎或慢性肾衰竭。
75.根据权利要求66所述的方法，其中所述病状选自癌症、移植排斥、类风湿性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、I型糖尿病、阿尔茨海默病、炎性皮肤病状、炎性神经病、银屑病、脊柱炎、牙周炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肥胖、II型糖尿病、缺血性中风、慢性肾病、肾炎、慢性肾衰竭、及其组合。
76.根据权利要求66所述的方法，其中所述哺乳动物物种是人。
77.阻断有需要的哺乳动物物种中的Kv1.3钾通道的方法，其包括向所述哺乳动物物种施用治疗有效量的至少一种权利要求1-64中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
78.根据权利要求76所述的方法，其中所述哺乳动物物种是人。
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