CN113604390A - 一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产l-鸟氨酸中的应用 - Google Patents

Abstract

一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L‑鸟氨酸中的应用，所述谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）ACOrn202，该谷氨酸棒杆菌ACOrn202已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC），保藏日期为2021年1月20日，菌种保藏编号为CGMCC No.21680。本发明的谷氨酸棒杆菌ACOrn202，是通过多次诱变得到的一株L‑鸟氨酸高产菌株，在10L发酵罐上，72h内L‑鸟氨酸产量可达86.5g/L，糖酸转化率可达37.72%，具有良好的工业应用前景。

Description

一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用

技术领域

本发明生物技术领域，具体涉及一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用。

背景技术

L-鸟氨酸是生物体内普遍存在的一种氨基酸，在动物体内，主要参与尿素循环，是瓜氨酸和精氨酸生物合成的前体物质，正常情况下在生物体内的氨主要在肝中通过L-鸟氨酸循环(尿素循环，Krebs-Henseleit循环)合成尿素而解毒，对于生物体内氨态氮的排出具有重要意义。

L-鸟氨酸在医药领域及食品行业的应用日益广泛。在医药领域中，L-鸟氨酸除了有助于身体从创伤，烧伤，感染甚至癌症等疾病中恢复，它还对肝脏疾病有治疗作用。在食品行业中，L-鸟氨酸有助于减肥健身，又能提高身体免疫力，可作人体营养物质补充剂，配制消除疲劳的发泡饮料等。近年来市场对于 L-鸟氨酸的需求日益剧增，所以L-鸟氨酸的生产及产品的开发也受到越来越多的关注。

目前L-鸟氨酸已实现工业化生产，其制备方法主要有提取法、化学合成法、酶法、微生物发酵法等。化学制备法消旋现象严重，难以提纯导致收率低；酶法通过水解L-精氨酸得到L-鸟氨酸，成本较高；近年来，微生物发酵法制备L-鸟氨酸受到了国内外的关注，为近年来主要采用的制备工艺之一，该方法不仅可以降低L-鸟氨酸生产成本，而且L-鸟氨酸纯度高，性质稳定，所以通过选育新菌种，优化发酵条件等手段来得以提高发酵产鸟氨酸的产量和质量，为近年来L-鸟氨酸制备方法研究的热点和难点。

发明内容

本发明的目的在于提供一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一株谷氨酸棒杆菌，所述谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum) ACOrn202，该谷氨酸棒杆菌ACOrn202已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏日期为2021年1月20日，菌种保藏编号为CGMCC No.21680。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：所述谷氨酸棒杆菌ACOrn202在发酵生产L-鸟氨酸中的应用。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，包含如下步骤：

步骤1：菌种培养

将谷氨酸棒杆菌ACOrn202菌种接至已灭菌的种子培养基中进行培养，培养至对数生长期；培养条件：温度25-35℃、pH值6.5-7.5、培养时间为12-25h；

步骤2：将步骤1得到的对数生长期菌种接入已灭菌的发酵培养基中进行发酵培养50-80h，得到含L-鸟氨酸的发酵液；发酵培养条件：温度25-35℃、pH 值6.5-7.5、溶氧10-60％、葡萄糖质量浓度控制在0.5-2.0％、谷氨酸质量浓度控制在0.1-1.0％。

优选的技术方案为：每升种子培养基包含葡萄糖10-50g、磷酸氢二钾0.1-5g、磷酸二氢钾0.1-5g、硫酸铵1-10g、硫酸镁0.1-5g、玉米浆10-50g、尿素0.1-5g、 L-组氨酸0.1-5g、L-精氨酸0.1-5g、味精1-10g、甜菜碱0.1-5g和生物素 10-100ug。

优选的技术方案为：每升发酵培养基包含葡萄糖50-120g、磷酸氢二钾 0.1-5g、磷酸二氢钾0.1-5g、硫酸铵10-30g、硫酸镁0.1-5g、玉米浆10-50g、酵母膏0.1-5g、尿素0.1-5g、L-组氨酸0.1-5g、L-精氨酸0.1-5g、味精1-30g和微量元素一份。

优选的技术方案为：每升发酵培养基包含葡萄糖80g、磷酸氢二钾0.5g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸铵20g、硫酸镁0.5g、玉米浆20g、酵母膏2g、尿素0.8g、 L-组氨酸0.3g、L-精氨酸0.3g、味精15g和微量元素一份。

优选的技术方案为：微量元素包括铁、镁、锌、铜、锰、钠和钾；每升发酵培养基含有微量元素0.5-1.5g。

优选的技术方案为：步骤2中，发酵培养条件：温度30℃、pH值7.0、溶氧20-30％、葡萄糖质量浓度控制在0.5-1.5％、谷氨酸质量浓度控制在 0.3-0.5％。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：

1、本发明的谷氨酸棒杆菌ACOrn202，是通过多次诱变得到的一株L-鸟氨酸高产菌株，在10L发酵罐上，72h内L-鸟氨酸产量可达86.5g/L，糖酸转化率可达37.72％，具有良好的工业应用前景。

2、本发明的谷氨酸棒杆菌ACOrn202具有较高的稳定性，该菌株与出发株相比，L-鸟氨酸的产酸和转化率大大提高，节约了生产成本，具有较好的工业应用前景。

具体实施方式

以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。

生物材料的保藏：本发明采用的谷氨酸棒杆菌ACOrn202，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其分类命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，保藏编号为CGMCC No.21680，保藏日期为2021年1月20日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

实施例1：一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用

谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)的诱变筛选方法：

以谷氨酸棒杆菌CICC20213突变株为出发菌株，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其分类命名为谷氨酸棒杆菌 (Corynebacteriumglutamicum)，保藏编号为CGMCC No.21680。

经过多次诱变筛选后，得到一株高产L-鸟氨酸的菌株。其步骤如下：

等离子诱变(ARTP)筛选：将冷藏的甘油管取出，划到鸟氨酸斜面上，30℃培养22h；于鸟氨酸斜面挑取一环菌种于液体种子培养基，180rpm，30℃摇床培养12～25h，取1ml种子液于1.5ml EP管，4000rpm离心，去上清，加入1ml生理盐水，混匀，反复三次，并将菌悬液稀释到合适浓度，OD₆₀₀ 0.6～1.0；取10ul 稀释菌悬液均匀涂到无菌不锈钢载片上，ARTP诱变条件：射频功率120W，处理距离2mm，载气流量10SLM，处理温度为室温(20～40℃)，处理时间40s。将处理过的载片放入装有1ml无菌生理盐水的EP管中，震荡混匀，然后稀释后均匀涂布到平板上，30℃培养40～48h。

抗性突变株筛选：精氨酸对鸟氨酸合成途径中很多关键酶有反馈阻遏作用，可以通过筛选精氨酸的结构类似物抗性突变株来积累鸟氨酸，配置基本鸟氨酸培养基，灭菌后在平板上加入适量的精氨酸结构类似物D-精氨酸、精氨酸氧肟酸盐，浓度范围为1～50mg/L。将诱变后的菌液均匀涂布到平板上，30℃培养48～72h。

筛选精氨酸缺陷型、组氨酸缺陷型：配置基本鸟氨酸培养基，灭菌后在平板上加入组氨酸，精氨酸，组氨酸浓度范围为0.01～5g/L，精氨酸氨酸浓度范围为 0.01～5g/L。将诱变后的菌液均匀涂布到平板上，30℃培养48～72h。本次试验，组氨酸浓度范围为2.5g/L，精氨酸氨酸浓度范围为3.2g/L。将诱变后的菌液均匀涂布到平板上，30℃培养60h。

高通量筛选：将上述诱变完的单菌落挑到装有0.6ml种子培养基的96孔板中，30℃，180rpm培养12～15h，再以10％的接种量接入装有0.6ml发酵培养基的96孔板中，30℃，180rpm培养24h，最终筛选出产酸较高的部分菌株保存。

小试验证：将筛选出的菌株用10L罐考察其L-鸟氨酸的产酸能力，在未经发酵优化的情况下，筛选得到一株产L-鸟氨酸较高的菌株ACOrn202。

筛选得到的谷氨酸棒杆菌ACOrn202的培养温度为30℃，pH7.0。固体培养基为蛋白胨20g/L，酵母粉10g/L，氯化钠5g/L，L-组氨酸0.3g/L，L-精氨酸 0.3g/L，琼脂粉20g/L。

谷氨酸棒杆菌ACOrn202为革兰氏阳性菌，在平板上呈光滑的球状，颜色为淡黄色，在显微镜下呈短粗棒杆状。

16S rRNA基因序列测定结果：

CACTGGCTTCGGGTGTTACCAACTTTCATGACGTGACGGGCGGTGTGT ACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCAGCGTTGCTGATCTGCGATTACTAG CGACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGACCCCAATCCGAACTGAGGC CGGCTTTAAGAGATTAGCTCCACCTCACGGTGTGGCAACTCGCTGTACCGA CCATTGTAGCATGTGTGAAGCCCTGGACATAAGGGGCATGATGATTTGACG TCATCCCCACCTTCCTCCGAGTTAACCCCGGCAGTCTCTCATGAGTACCCAC CATAATGTGCTGGCAACATAAGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAA CCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTGAAC CGACCACAAGGGAAAACGTATCTCTACGCCGATCCGGTCCATGTCAAGCCC AGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCATCGAATTAATCCACATGCTCCGCCGCTTGT GCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCA GGCGGGGCGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACAGAAGTCGTGGAAGACCCC TACACCTAGCGCCCACCGTTTACGGCATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTG TTCGCTACCCATGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACTGCCCAGAGACCTG CCTTCGCCATTGGTGTTCCTCCTGATATCTGCGCATTTCACCGCTACMCCAG GAATTYCAGTCTCCCCTACAGCACTCAAGTTATGCCCGTATCGCCTGCACGC CCGAAGTTAARCCCC

GGGATTTCACAGACGACGCGACAAACCMCCTWCGARCTYTTTWCGCCCA GTAATTCCGGACAACGCTYGCMCCCTACGTATTWCCGCGGSTGSTGGCMC GTAGTTARCCGGTGSTTYTTYTCCAGGTWCCGTCMCCTAAAAGGCTTCGTC CCTAGCGAAAGGAGTTTACAACCCGAAGGCCGTCATCCCCCACGCGGCGT CGCTGCATCAGGCTTGCGCCCATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCG TAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAATGTGGCCGTACACCCTCTCAGG CCGGCTACCCGTCGACGCCTTGGTAGGCCATTACCCCACCAACAAGCTGAT AGGCCGCAGGCTCATCCCACACCGCATAAAGCTTTCCACACCACCCCTACG GTGGTGTGAATATTCGGTATTAGACCCAGTTTCCCAGGCTTATCCCAAAGTG TAGGGCAGATCACCCACGTGTTACTCACCCGTTCGCCACTCATCCACCAAATGCAAGCA。

一株谷氨酸棒杆菌ACOrn202，所述的菌株高产L-鸟氨酸，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其分类命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，保藏编号为CGMCC No.21680，保藏日期为2021年1月20日。

所述谷氨酸棒杆菌ACOrn202的应用，将其应用于发酵生产L-鸟氨酸。

将谷氨酸棒杆菌活化，接入已灭菌的种子培养基中，培养至对数期。种子培养条件为温度25～35℃，pH值6.5～7.5，培养时间为12～25h。种子培养基为葡萄糖10～50g/L，磷酸氢二钾0.1～5g/L，磷酸二氢钾0.1～5g/L，硫酸铵1～10g/L，硫酸镁0.1～5g/L，玉米浆10～50g/L，尿素0.1～5g/L，L-组氨酸0.1～5g/L，L-精氨酸 0.1～5g/L，味精1～10g/L，甜菜碱0.1～5g/L，生物素10～100ug/L。

优化后的种子培养条件为温度30℃，pH值7.0，培养时间为15h。优化后的种子培养基为葡萄糖25g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁1g/L，玉米浆20g/L，尿素1g/L，L-组氨酸0.15g/L，L-精氨酸0.3g/L，味精5g/L，甜菜碱1g/L，生物素50ug/L。

将培养至对数期的种子接入已灭好菌的发酵培养基中，培养50～80h，得到 L-鸟氨酸。发酵条件为温度25～35℃、pH值6.5～7.5、通过调节通风量和搅拌速度将溶解氧水平控制在10％～60％、葡萄糖浓度控制在0.5～2.0％、谷氨酸浓度控制在0.1～1.0％。发酵培养基为葡萄糖50～120g/L，磷酸氢二钾0.1～5g/L，磷酸二氢钾0.1～5g/L，硫酸铵10～30g/L，硫酸镁0.1～5g/L，玉米浆10～50g/L，酵母膏 0.1～5g/L，尿素0.1～5g/L，L-组氨酸0.1～5g/L，L-精氨酸0.1～5g/L，味精1～30g/L，微量元素一份。

优化后的发酵条件为温度30℃、pH值7.0、通过调节通风量和搅拌速度将溶解氧水平控制在20％～30％、葡萄糖浓度前期控制在1.5％，后期控制在 0.5～1.0％、谷氨酸浓度控制在0.3～0.5％。优化后的发酵培养基为葡萄糖80g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸铵20g/L，硫酸镁0.5g/L，玉米浆 20g/L，酵母膏2g/L，尿素0.8g/L，L-组氨酸0.3g/L，L-精氨酸0.3g/L，味精15g/L，微量元素一份。

通过上述方法，将分离得到的L-鸟氨酸高产菌株ACOrn202连续传10代固体斜面，将每一代斜面接入种子摇瓶培养后再接入10L发酵罐，10代产酸结果稳定，发酵培养至72h，平均产L-鸟氨酸86.5g/L，平均糖酸转化率为37.72％。

谷氨酸棒杆菌ACOrn202与原始菌株对比

一株谷氨酸棒杆菌ACOrn202，所述的菌株高产L-鸟氨酸，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其分类命名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，保藏编号为CGMCC No.21680，保藏日期为2021年1月20日。

谷氨酸棒杆菌ACOrn202的应用，将其应用于发酵生产L-鸟氨酸。

将谷氨酸棒杆菌活化，接入已灭菌的种子培养基中，培养至对数期。种子培养条件为温度30℃，pH值7.0，培养时间为15h。种子培养基为葡萄糖25g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁1g/L，玉米浆20g/L，尿素1g/L，L-组氨酸0.15g/L，L-精氨酸0.3g/L，味精5g/L，甜菜碱1g/L，生物素50ug/L。

将培养至对数期的种子接入已灭好菌的发酵培养基中，培养72h左右，得到 L-鸟氨酸。发酵条件为温度30℃、pH值7.0、通过调节搅拌速度将溶解氧水平控制在20％～30％、葡萄糖浓度前期控制在1.5％，后期控制在0.5～1.0％、谷氨酸浓度控制在0.3～0.5％。发酵培养基为葡萄糖80g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，硫酸铵20g/L，硫酸镁0.5g/L，玉米浆20g/L，酵母膏2g/L，尿素0.8g/L，L-组氨酸0.3g/L，L-精氨酸0.3g/L，味精15g/L，微量元素一份。

微量元素由铁、镁、锌、铜、锰、钠和钾等质量比例混合后构成；每升发酵培养基含有微量元素1g。

通过上述方法，将出发菌株CICC20213突变株与ACOrn202分别培养10批， 10批培养结果的均值如表1所示。

表1CICC20213突变株与ACOrn202的发酵结果对比：

从表1中看出，本发明中的谷氨酸棒杆菌ACOrn202与出发菌株CICC20213 突变株对比，在条件相同的情况下，ACOrn202产酸和糖酸转化率有了显著提升，具有良好的产业化应用前景。

实施例2：一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用

菌种同实施例1。

一种谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，包含如下步骤：

步骤1：菌种培养

将谷氨酸棒杆菌ACOrn202菌种接至已灭菌的种子培养基中进行培养，培养至对数生长期；培养条件：温度25℃、pH值6.5、培养时间为12h；

步骤2：将步骤1得到的对数生长期菌种接入已灭菌的发酵培养基中进行发酵培养50h，得到含L-鸟氨酸的发酵液；发酵培养条件：温度25℃、pH值6.5、溶氧10％、葡萄糖质量浓度控制在0.5％、谷氨酸质量浓度控制在0.1％。

优选的实施方式为：每升种子培养基包含葡萄糖10g、磷酸氢二钾0.1g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铵1g、硫酸镁0.1g、玉米浆10g、尿素0.1g、L-组氨酸 0.1g、L-精氨酸0.1g、味精1g、甜菜碱0.1g和生物素10ug。

优选的实施方式为：每升发酵培养基包含葡萄糖50g、磷酸氢二钾0.1g、磷酸二氢钾0.1g、硫酸铵10g、硫酸镁0.1g、玉米浆10g、酵母膏0.1g、尿素 0.1g、L-组氨酸0.1g、L-精氨酸0.1g、味精1g和微量元素一份。

优选的实施方式为：微量元素包括铁、镁、锌、铜、锰、钠和钾；每升发酵培养基含有微量元素0.5g。

实施例3：一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用

菌种同实施例1。

一种谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，包含如下步骤：

步骤1：菌种培养

将谷氨酸棒杆菌ACOrn202菌种接至已灭菌的种子培养基中进行培养，培养至对数生长期；培养条件：温度35℃、pH值7.5、培养时间为25h；

步骤2：将步骤1得到的对数生长期菌种接入已灭菌的发酵培养基中进行发酵培养50-80h，得到含L-鸟氨酸的发酵液；发酵培养条件：温度35℃、pH值 7.5、溶氧60％、葡萄糖质量浓度控制在2.0％、谷氨酸质量浓度控制在1.0％。

优选的技术方案为：每升种子培养基包含葡萄糖50g、磷酸氢二钾5g、磷酸二氢钾5g、硫酸铵10g、硫酸镁5g、玉米浆50g、尿素5g、L-组氨酸5g、L-精氨酸5g、味精10g、甜菜碱5g和生物素100ug。

优选的实施方式为：每升发酵培养基包含葡萄糖120g、磷酸氢二钾5g、磷酸二氢钾5g、硫酸铵30g、硫酸镁5g、玉米浆50g、酵母膏-5g、尿素5g、L-组氨酸5、L-精氨酸5g、味精30和微量元素一份。

优选的实施方式为：微量元素包括铁、镁、锌、铜、锰、钠和钾；每升发酵培养基含有微量元素1.5g。

以上所述者仅为用以解释本发明之较佳实施例，并非企图具以对本发明做任何形式上之限制，是以，凡有在相同之发明精神下所作有关本发明之任何修饰或变更，皆仍应包括在本发明意图保护之范畴。

序列表

<110> 江苏澳创生物科技有限公司

<120> 一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产L-鸟氨酸中的应用

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1346

<212> DNA

<213> 16S rRNA基因序列测定结果

<400> 1

cactggcttc gggtgttacc aactttcatg acgtgacggg cggtgtgtac aaggcccggg 60

aacgtattca ccgcagcgtt gctgatctgc gattactagc gactccgact tcatggggtc 120

gagttgcaga ccccaatccg aactgaggcc ggctttaaga gattagctcc acctcacggt 180

gtggcaactc gctgtaccga ccattgtagc atgtgtgaag ccctggacat aaggggcatg 240

atgatttgac gtcatcccca ccttcctccg agttaacccc ggcagtctct catgagtacc 300

caccataatg tgctggcaac ataagacaag ggttgcgctc gttgcgggac ttaacccaac 360

atctcacgac acgagctgac gacaaccatg caccacctgt gaaccgacca caagggaaaa 420

cgtatctcta cgccgatccg gtccatgtca agcccaggta aggttcttcg cgttgcatcg 480

aattaatcca catgctccgc cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agttttagcc 540

ttgcggccgt actccccagg cggggcgctt aatgcgttag ctgcggcaca gaagtcgtgg 600

aagaccccta cacctagcgc ccaccgttta cggcatggac taccagggta tctaatcctg 660

ttcgctaccc atgctttcgc tcctcagcgt cagttactgc ccagagacct gccttcgcca 720

ttggtgttcc tcctgatatc tgcgcatttc accgctacmc caggaattyc agtctcccct 780

acagcactca agttatgccc gtatcgcctg cacgcccgaa gttaarcccc gggatttcac 840

agacgacgcg acaaaccmcc twcgarctyt ttwcgcccag taattccgga caacgctygc 900

mccctacgta ttwccgcggs tgstggcmcg tagttarccg gtgsttytty tccaggtwcc 960

gtcmcctaaa aggcttcgtc cctagcgaaa ggagtttaca acccgaaggc cgtcatcccc 1020

cacgcggcgt cgctgcatca ggcttgcgcc cattgtgcaa tattccccac tgctgcctcc 1080

cgtaggagtc tgggccgtgt ctcagtccca atgtggccgt acaccctctc aggccggcta 1140

cccgtcgacg ccttggtagg ccattacccc accaacaagc tgataggccg caggctcatc 1200

ccacaccgca taaagctttc cacaccaccc ctacggtggt gtgaatattc ggtattagac 1260

ccagtttccc aggcttatcc caaagtgtag ggcagatcac ccacgtgtta ctcacccgtt 1320

cgccactcat ccaccaaatg caagca 1346

Claims (8)

1.一株谷氨酸棒杆菌，其特征在于：所述谷氨酸棒杆菌为谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）ACOrn202，该谷氨酸棒杆菌ACOrn202已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC），保藏日期为2021年1月20日，菌种保藏编号为CGMCCNo.21680。

2.根据权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202，其特征在于：所述谷氨酸棒杆菌ACOrn202在发酵生产L-鸟氨酸中的应用。

3.一种采用权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：包含如下步骤：

步骤1：菌种培养

将谷氨酸棒杆菌ACOrn202菌种接至已灭菌的种子培养基中进行培养，培养至对数生长期；培养条件：温度25-35℃、pH值6.5-7.5、培养时间为12-25h；

步骤2：将步骤1得到的对数生长期菌种接入已灭菌的发酵培养基中进行发酵培养50-80h，得到含L-鸟氨酸的发酵液；发酵培养条件：温度25-35℃、pH值6.5-7.5、溶氧10-60%、葡萄糖质量浓度控制在0.5-2.0％、谷氨酸质量浓度控制在0.1-1.0％。

4.根据权利要求3所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：每升种子培养基包含葡萄糖10-50g、磷酸氢二钾0.1-5g、磷酸二氢钾0.1-5g、硫酸铵1-10g、硫酸镁0.1-5g、玉米浆10-50g、尿素0.1-5g、L-组氨酸0.1-5g、L-精氨酸0.1-5g、味精1-10g、甜菜碱0.1-5g和生物素10-100ug。

5.根据权利要求3所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：每升发酵培养基包含葡萄糖50-120g、磷酸氢二钾0.1-5g、磷酸二氢钾0.1-5g、硫酸铵10-30g、硫酸镁0.1-5g、玉米浆10-50g、酵母膏0.1-5g、尿素0.1-5g、L-组氨酸0.1-5、L-精氨酸0.1-5g、味精1-30g和微量元素一份。

6.根据权利要求5所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：每升发酵培养基包含葡萄糖80g、磷酸氢二钾0.5g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸铵20g、硫酸镁0.5g、玉米浆20g、酵母膏2g、尿素0.8g、L-组氨酸0.3g、L-精氨酸0.3g、味精15g和微量元素一份。

7.根据权利要求5或6所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：微量元素包括铁、镁、锌、铜、锰、钠和钾；每升发酵培养基含有微量元素0.5-1.5g。

8.根据权利要求3所述的谷氨酸棒杆菌ACOrn202发酵生产L-鸟氨酸的方法，其特征在于：步骤2中，发酵培养条件：温度30℃、pH值7.0、溶氧20-30%、葡萄糖质量浓度控制在0.5-1.5％、谷氨酸质量浓度控制在0.3-0.5％。