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CN112159780A - 一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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CN112159780A CN202011152966.9A CN202011152966A CN112159780A CN 112159780 A CN112159780 A CN 112159780A CN 202011152966 A CN202011152966 A CN 202011152966A CN 112159780 A CN112159780 A CN 112159780A
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Abstract

本发明适用于微生物领域，提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂及其制备方法和应用，该增菌剂包括豆谷汁；所述豆谷汁包括豆汁和花生汁；所述豆汁包括以下组分：黄豆、大米、水；所述花生汁包括以下组分：去皮花生、大米、水。另外，该增菌剂还可包括果蔬汁、蛋黄、蛋清和白砂糖中的至少一种。本发明实施例提供的增菌剂，原料取材方便，较传统牛肉膏蛋白胨培养的成本低廉，操作简单，不用过多进一步复杂处理；而且，该增菌剂能显著地提高乳酸菌发酵液中的活菌数。

Description

一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于微生物领域，尤其涉及一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
乳酸菌是一类能够利用碳水化合物产生乳酸的一类细菌的总称，其中大部分都能对人体起到调节生理功能的作用，因其具有良好的益生性，能有效治疗腹泻、降低血压胆固醇、抗氧化等特性。随着人们对保健意识的提升和发酵制品不卫生、不安全观念的转变，发酵类果蔬制品被消费者广泛接受。为解决传统发酵制品由杂菌污染的不卫生、不安全等问题，直投式果蔬发酵技术应运而生。然而乳酸菌的大量培养和分离纯化都需要良好的增菌培养基，目前实验室扩增乳酸菌的通用MRS培养基，在此培养基中乳酸菌菌体生长情况好可达到106～109cfu/mL，容易分离，基本满足实验室培养的要求。
但是对于发酵食品企业来讲，从增菌效果和实验室条件下培养基的成本问题一直困扰着发酵相关的食品企业。MRS肉汤中的碳源、氮源、矿物质、促生长因子价格比较昂贵，因此选择食源性的植物成分来替换MRS中多种营养成分从而实现在短期内达到高密度增菌的目的。已知大豆根瘤具有天然的固氮作用、而花生中蛋白质含量约占总体的25.7％，可作为纯天然微生物氮素来源；西红柿、胡萝卜、苹果、黄瓜可为微生物生长提供生长因子和多种维生素以及丰富的矿物质成分。积极寻求广泛、廉价易得的培养原料，并且结合简单的操作过程，最终能实现高密度快速培养出活性好、菌种单一的增菌剂势在必行。
发明内容
本发明实施例的目的在于提供一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，旨在解决背景技术中提出的问题。
本发明实施例是这样实现的，一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其包括豆谷汁；所述豆谷汁包括豆汁和花生汁；所述豆汁和花生汁的体积比为(3～7):(3～7)；
其中，所述豆汁包括以下按照重量份计的组分：黄豆40～60份、大米20～40份、水800～1500份；
所述花生汁包括以下按照重量份计的组分：去皮花生40～60份、大米20～40份、水800～1500份。
作为本发明实施例的一个优选方案，所述豆汁包括以下按照重量份计的组分：黄豆45～55份、大米25～35份、水1000～1200份。
作为本发明实施例的另一个优选方案，所述花生汁包括以下按照重量份计的组分：去皮花生45～55份、大米25～35份、水1000～1200份。
作为本发明实施例的另一个优选方案，所述增菌剂还包括果蔬汁；所述果蔬汁和豆谷汁的质量比为(40～60):(45～55)；所述果蔬汁包括以下按照重量份计的组分：胡萝卜130～150份、苹果190～210份、西红柿130～160份、黄瓜150～180份、水700～1000份。
作为本发明实施例的另一个优选方案，所述增菌剂还包括蛋黄、蛋清和白砂糖中的至少一种。
作为本发明实施例的另一个优选方案，所述蛋黄与豆谷汁的质量比为(0～25):(45～55)；所述蛋清与豆谷汁的质量比为(0～25):(45～55)；所述白砂糖与豆谷汁的质量比为(0～6):(45～55)。
本发明实施例的另一目的在于提供一种上述增菌剂的制备方法，其括以下步骤：
按照所述豆汁中各组分的重量份，称取黄豆、大米、水，并将黄豆、大米、水进行混合，磨成豆汁；
按照所述花生汁中各组分的重量份，称取去皮花生、大米、水，并将去皮花生、大米、水进行混合，磨成花生汁；
将豆汁和花生汁按照(3～7):(3～7)的体积比进行混合，得到豆谷汁；
按照所述果蔬汁中各组分的重量份，称取胡萝卜、苹果、西红柿、黄瓜、水，并将胡萝卜、苹果、西红柿、黄瓜、水进行混合，榨成果蔬汁；
将果蔬汁和豆谷汁按照(40～60):(45～55)的质量比进行混合，并不添加或添加蛋黄、蛋清和白砂糖中的至少一种后，再用无菌水进行定容，得到所述增菌剂。
本发明实施例的另一目的在于提供一种上述制备方法制得的增菌剂。
本发明实施例的另一目的在于提供一种上述的增菌剂在高密度培养乳酸菌中的应用。
作为本发明实施例的另一个优选方案，所述乳酸菌为副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜热链球菌中的任一种。
本发明实施例提供的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，原料取材方便，较传统牛肉膏蛋白胨培养的成本低廉，操作简单，不用过多进一步复杂处理。另外，该增菌剂能显著地提高乳酸菌发酵液中的活菌数，使之达到1010～1012cfu/mL。
附图说明
图1为本发明实施例1～4得到的增菌剂及基础MRS培养基应用于6种乳酸菌，在12h时的发酵对比实验结果图。
图2为本发明实施例1～4得到的增菌剂及基础MRS培养基应用于6种乳酸菌，在24h时的发酵对比实验结果图。
具体实施方式
为下面将结合本发明实施例中，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照5:5的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜140g、苹果200g、西红柿145g、黄瓜165g、水900g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、25g的蛋黄、5g的白砂糖进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例2
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照5:5的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将50g的上述豆谷汁，用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例3
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照5:5的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜140g、苹果200g、西红柿145g、黄瓜165g、水900g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、20g蛋清进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例4
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生50g、大米30g、水1000g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照5:5的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜140g、苹果200g、西红柿145g、黄瓜165g、水900g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、4g的白砂糖进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例5
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆40g、大米20g、水1500g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生40g、大米20g、水1500g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照3:7的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜130g、苹果190g、西红柿130g、黄瓜150g、水1000g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将45g的上述豆谷汁、60g的上述果蔬汁、25g的蛋黄、25g蛋清、6g的白砂糖进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例6
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆60g、大米40g、水800g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生60g、大米40g、水800g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照7:3的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜150g、苹果210g、西红柿160g、黄瓜180g、水700g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将55g的上述豆谷汁、40g的上述果蔬汁、5g的蛋黄、5g蛋清进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例7
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆45g、大米25g、水1200g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生55g、大米35g、水1200g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照4:6的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜140g、苹果200g、西红柿140g、黄瓜160g、水800g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、15g蛋清、5g的白砂糖进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例8
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆55g、大米35g、水1000g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生55g、大米35g、水1000g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照6:4的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜135g、苹果205g、西红柿140g、黄瓜170g、水850g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、20g的蛋黄进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实施例9
该实施例提供了一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其制备方法包括以下步骤：
S1、将黄豆50g、大米30g、水1100g用豆浆机磨成豆汁，备用；将去皮花生50g、大米30g、水1100g用豆浆机磨成花生汁，备用；然后，将上述豆汁和花生汁按照5:5的体积比进行混合，并用100目的滤网过滤，得到豆谷汁，备用。
S2、将胡萝卜140g、苹果200g、西红柿150g、黄瓜170g、水900g用榨汁机进行榨汁，并用100目的滤网过滤，得到果蔬汁，备用；其中，苹果可采用旮旯果。
S3、将50g的上述豆谷汁、50g的上述果蔬汁、15g的蛋黄、15g蛋清、3g的白砂糖进行混匀后，再用无菌水定容至200mL，然后通过121℃高温蒸汽进行灭菌20min，即可得到用于高密度培养乳酸菌的增菌剂。
实验例：
先将副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜热链球菌分别置于基础MRS培养基中进行活化2代，得到6种菌液；接着，将6种菌液各取1mL分别接种到上述实施例1～4得到的增菌剂以及现有的MRS培养基(对照组)中，并置于37℃下进行恒温培养12h、24h后数菌，其统计结果如附图1～2所示。
其中，经过实施例1得到的增菌剂高密度发酵培养后，12～24h副干酪乳杆菌9.34～9.81log cfu/mL，植物乳杆菌10.08～10.69log cfu/mL，罗伊氏乳杆菌10.17～10.89logcfu/mL，鼠李糖乳杆菌11.44～12.10log cfu/mL,双歧杆菌11.03～11.54log cfu/mL，嗜热链球菌11.05～11.68log cfu/mL。
经过实施例2得到的增菌剂高密度发酵培养后，12～24h副干酪乳杆菌8.00～9.36log cfu/mL，植物乳杆菌10.15～10.59log cfu/mL，罗伊氏乳杆菌10.26～10.78logcfu/mL，鼠李糖乳杆菌10.36～10.82log cfu/mL，双歧杆菌11.70～11.90log cfu/mL，嗜热链球菌11.60～11.79log cfu/mL。
经过实施例3得到的增菌剂高密度发酵培养后，12～24h副干酪乳杆菌9.41～9.93log cfu/mL，植物乳杆菌9.12～10.7log cfu/mL，罗伊氏乳杆菌9.49～10.69log cfu/mL，鼠李糖乳杆菌10.23～10.28log cfu/mL，双歧杆菌11.16～11.54log cfu/mL，嗜热链球菌11.05～11.97log cfu/mL。
经过实施例4得到的增菌剂高密度发酵培养后，12～24h副干酪乳杆菌9.77～10.51log cfu/mL，植物乳杆菌10.7～11.04log cfu/mL，罗伊氏乳杆菌10.27～10.74logcfu/mL，鼠李糖乳杆菌11.45～12.47log cfu/mL，双歧杆菌11.29～11.87log cfu/mL，嗜热链球菌11.24～12.20log cfu/mL。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，包括豆谷汁；所述豆谷汁包括豆汁和花生汁；所述豆汁和花生汁的体积比为(3～7):(3～7)；
其中，所述豆汁包括以下按照重量份计的组分：黄豆40～60份、大米20～40份、水800～1500份；
所述花生汁包括以下按照重量份计的组分：去皮花生40～60份、大米20～40份、水800～1500份。
2.根据权利要求1所述的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，所述豆汁包括以下按照重量份计的组分：黄豆45～55份、大米25～35份、水1000～1200份。
3.根据权利要求1所述的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，所述花生汁包括以下按照重量份计的组分：去皮花生45～55份、大米25～35份、水1000～1200份。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，所述增菌剂还包括果蔬汁；所述果蔬汁和豆谷汁的质量比为(40～60):(45～55)；所述果蔬汁包括以下按照重量份计的组分：胡萝卜130～150份、苹果190～210份、西红柿130～160份、黄瓜150～180份、水700～1000份。
5.根据权利要求4所述的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，所述增菌剂还包括蛋黄、蛋清和白砂糖中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的一种用于高密度培养乳酸菌的增菌剂，其特征在于，所述蛋黄与豆谷汁的质量比为(0～25):(45～55)；所述蛋清与豆谷汁的质量比为(0～25):(45～55)；所述白砂糖与豆谷汁的质量比为(0～6):(45～55)。
7.一种如权利要求4～6中任一项所述增菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
按照所述豆汁中各组分的重量份，称取黄豆、大米、水，并将黄豆、大米、水进行混合，磨成豆汁；
按照所述花生汁中各组分的重量份，称取去皮花生、大米、水，并将去皮花生、大米、水进行混合，磨成花生汁；
将豆汁和花生汁按照(3～7):(3～7)的体积比进行混合，得到豆谷汁；
按照所述果蔬汁中各组分的重量份，称取胡萝卜、苹果、西红柿、黄瓜、水，并将胡萝卜、苹果、西红柿、黄瓜、水进行混合，榨成果蔬汁；
将果蔬汁和豆谷汁按照(40～60):(45～55)的质量比进行混合，并不添加或添加蛋黄、蛋清和白砂糖中的至少一种后，再用无菌水进行定容，得到所述增菌剂。
8.一种如权利要求7所述制备方法制得的增菌剂。
9.一种如权利要求1～6、8中任一项所述的增菌剂在高密度培养乳酸菌中的应用。
10.根据权利要求9所述的一种增菌剂在高密度培养乳酸菌中的应用，其特征在于，所述乳酸菌为副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜热链球菌中的任一种。
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