CN110420209B - 一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物及其应用，可以在缓解糖尿病周围神经痛的同时，明显减少药物副作用。本发明实施例提供一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物，包括以下组分：维生素B1；普瑞巴林或加巴喷丁。

Description

一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物及其应用

技术领域

本发明属于医药领域，具体来说，涉及一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物。

背景技术

糖尿病周围神经痛属于感觉性周围神经病变，是糖尿病的一个重要并发症，通常表现为远端对称性间断性或持续性疼痛，尤其是下肢烧灼样疼痛、针刺样疼痛，常在静息时发生，而夜间、劳累或压力大时症状会加重，严重者多伴有焦虑和抑郁等等，严重影响生活质量。糖尿病性疼痛的发病机制目前尚不明确，治疗效果有限，是临床上一大难题。普瑞巴林是临床治疗糖尿病周围神经痛的常用药物，加巴喷丁和普瑞巴林作用机制类似，均能够有效缓解糖尿病周围神经痛，但由于它们同时对中枢神经系统具有强效作用，副作用较为明显，临床上常因不良反应导致停药。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物及其应用，可以在缓解糖尿病周围神经痛的同时，明显减少药物副作用。

为解决上述问题，本发明实施例采用的技术方案如下：

第一方面，本发明实施例提供一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物，包括以下组分：

维生素B1；

普瑞巴林或加巴喷丁。

优选的，所述药物包括维生素B1和普瑞巴林；按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰1～5。

优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰1。

优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰5。

优选的，所述药物包括维生素B1和加巴喷丁；按照重量份数比，所述维生素B1和加巴喷丁为1︰1～5。

优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和加巴喷丁为1︰1。

优选的，所述药物的剂型为如下任一剂型：注射剂或口服固体制剂。

第二方面，本发明实施例提供一种药物组合物应用于治疗糖尿病周围神经痛。

与现有技术相比，本发明提供的治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物及其应用，可以在缓解糖尿病周围神经痛的同时，明显减少药物副作用。通过临床前数据证实，本实施例的药物组合物具有治疗糖尿病周围神经痛疗效，且副作用明显减少。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的技术方案进行进一步的说明。需要说明的是，实施例中的制剂组方仅用于说明本发明的技术方案，而不应理解为对本发明技术方案的限制。

本发明实施例的一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物，包括以下组分：

维生素B1；

普瑞巴林或加巴喷丁。

上述技术方案中,所述维生素B1，又称硫胺素，英文名:Thiamine。维生素B1能增进食欲，维持神经组织、肌肉、心脏的正常活动等，缺少它会得脚气病、神经性皮炎等。

上述技术方案中，所述普瑞巴林，英文名:Pregabalin，为γ-氨基丁酸(GABA)类似物，具有抗癫痫、镇痛和抗焦虑活性，具有脂溶性。上述技术方案中，所述加巴喷丁，英文名:Gabapentin；结构与普瑞巴林相似，具有抗癫痫作用，具有脂溶性。

在糖尿病周围神经痛动物模型中，上述实施例的组合物可使得动物热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值显著增加，效果优于普瑞巴林、加巴喷丁单独使用的效果，取得了良好的协同作用，并且有效降低了单独使用普瑞巴林、加巴喷丁的不良反应。相对而言，本实施例的组合物降低普瑞巴林、加巴喷丁的剂量，减少了单独使用普瑞巴林、加巴喷丁的副作用。

作为一种组合方式，所述药物包括维生素B1和普瑞巴林。优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰1～5。

优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰1。优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰5。

作为另一种组合方式，所述药物包括维生素B1和加巴喷丁。优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和加巴喷丁为1︰1～5。优选的，按照重量份数比，所述维生素B1和加巴喷丁为1︰1。

上述实施例中，所述药物的剂型为如下任一剂型：注射剂或口服固体制剂。优选的，口服固体制剂为片剂、胶囊。

上述实施例的药物组合物应用于治疗糖尿病周围神经痛。

上述实施例的药物组合物的制备方法，以所述维生素B1与普瑞巴林或加巴喷丁中的一种为活性成分，按照药学领域的常规方法制备，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分，包括药学领域可接受的载体如稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等，制成复方制剂使用。

上述实施例的药物组合物可以缓解糖尿病周围神经痛的作用，同时可以减少副作用的作用机制：普瑞巴林为GABA类似物，具有镇痛、抗癫痫和抗焦虑抑郁作用，能够有效缓解糖尿病周围神经痛，加巴喷丁结构和作用机理与普瑞巴林类似。但由于普瑞巴林和加巴喷丁具有脂溶性易经过血脑屏障进入中枢神经系统，产生许多与镇痛无关的其他生物效应，带来不可忽视的副作用，如嗜睡、眩晕等，如何保证患者糖尿病周围神经痛治疗效果的同时降低药物副作用是目前临床中亟待解决的问题。SOCS3属于SOCS家族，是一类可以对多种细胞因子产生的信号转导通路进行负性调节的蛋白，维生素B1能够营养神经并显著上调SOCS3的表达，从而与普瑞巴林产生协同作用，有效缓解糖尿病周围神经痛，并减少副作用。

下面列举实施例，以验证采用本实施例的药物组合物可以起到缓解糖尿病周围神经痛的作用，同时可以明显减少药物组合物对人体带来的副作用。

实施例1维生素B1/普瑞巴林复方片剂

取450g维生素B1、2250g普瑞巴林、360g磷酸氢钙、180g羧甲基纤维素钠混合均匀；取150g糊精加3600g水制成溶液，作为黏合剂，湿法制粒，干燥、整粒后加入50g硬脂酸镁压成10000片。

上述实施例中，磷酸氢钙、羧甲基纤维素钠和糊精为辅料。

实施例2维生素B1/普瑞巴林复方片剂

取450g维生素B1、450g普瑞巴林、360g磷酸氢钙、180g羧甲基纤维素钠混合均匀；100g糊精加2400g水制成溶液，作为黏合剂，湿法制粒，干燥、整粒后压成10000片。

上述实施例中，磷酸氢钙、羧甲基纤维素钠和糊精为辅料。

实施例3维生素B1/普瑞巴林注射剂

取450g维生素B1、1350g普瑞巴林、9g氯化钠加入注射用水500ml中，完全溶解后，注射用水定容至1000ml，药液过滤、罐装、灭菌即得。

实施例4维生素B1/加巴喷丁复方片剂

取450g维生素B1、450g加巴喷丁、360g磷酸氢钙、180g羧甲基纤维素钠混合均匀；取150g糊精加3600g水制成溶液，作为黏合剂，湿法制粒，干燥、整粒后加入50g硬脂酸镁压成10000片。

上述实施例中，磷酸氢钙、羧甲基纤维素钠、糊精为辅料。

实施例5维生素B1/加巴喷丁复方片剂

取450g维生素B1、2250g加巴喷丁、360g磷酸氢钙、180g羧甲基纤维素钠混合均匀；取150g糊精加3600g水制成溶液，作为黏合剂，湿法制粒，干燥、整粒后加入50g硬脂酸镁压成10000片。

上述实施例中，磷酸氢钙、羧甲基纤维素钠、糊精为辅料。

实施例6维生素B1/加巴喷丁注射剂

取450g维生素B1、1350g加巴喷丁、9g氯化钠加入注射用水500ml中，完全溶解后，注射用水定容至1000ml，药液过滤、罐装、灭菌即得。

试验对象：SPF级别健康雄性SD大鼠，180～200g，用于建立糖尿病周围神经痛大鼠模型。将链脲佐菌素溶于pH 4.0的柠檬酸盐缓冲溶液，现用现配，低温保存和运输避免链脲佐菌素分解。

检测过程：大鼠禁食16小时后一次性腹腔注射1mL链脲佐菌素(70mg/kg)柠檬酸盐缓冲溶液。链脲佐菌素注射完毕2周后，大鼠尾静脉采血测定血糖水平，血糖≥16.7mmol/L的大鼠视为糖尿病大鼠。测定糖尿病大鼠的热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值，取热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值均较给予链脲佐菌素前下降40％的大鼠作为糖尿病周围神经痛大鼠模型。

将模型大鼠随机分为11组，每组6只，具体如下：

根据人体给药剂量和大鼠给药剂量之间的换算标准，以人体60kg体重计算，人每次给药40mg，大鼠每次给药相应剂量为0.8mg。以下给药剂量均为大鼠单次给药的剂量：

A组为模型组，灌胃，每只1mL，不含药物。

B组为对照组，灌胃，每只1mL，含0.8mg普瑞巴林。

C组为对照组，灌胃，每只1mL，含4mg普瑞巴林。

D组为对照组，灌胃，每只1mL，含0.8mg加巴喷丁。

E组为对照组，灌胃，每只1mL，含4mg加巴喷丁。

F组为实验组，灌胃，以实施例2制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、0.8mg普瑞巴林。

G组为实验组，灌胃，以实施例1制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、4mg普瑞巴林。

H组为实验组，灌胃，以实施例3制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、2.4mg普瑞巴林。

I组为实验组，灌胃，以实施例4制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、0.8mg加巴喷丁。

J组为实验组，灌胃，以实施例5制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、4mg加巴喷丁。

K组为实验组，灌胃，以实施例6制成的药物给药，每只1mL，含0.8mg维生素B1、2.4mg加巴喷丁。

试验1：

检测对试验对象周围神经痛模型的镇痛效果。

各组大鼠给药完成后4h，测定糖尿病大鼠的热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值。具体过程为：在安静环境中，维持环境温度20-25℃。将大鼠放入热痛刺激仪的有机玻璃箱内。全身可以自由活动。待大鼠静置20min后，用红外光从玻璃桥架下面向上照射大鼠足掌，测定大鼠的抬脚潜伏期，并以此作为热刺激缩足反射阈值。将大鼠置于透明的金属网格笼中，测定前使之适应20min，探觅行为停止后开始测量。以钝性针尖刺激大鼠足底，逐渐加压至动物缩足，每次测量间隔3min，引起大鼠或小鼠足爪抬起的最大压力为其机械性缩足反射阈值。所有的行为学实验都是在双盲的条件下进行。分别统计各组大鼠给药前及给药后的热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值，以考察药物对模型大鼠的镇痛效果。各组热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值均以平均值和标准差表示，组间差异的比较采用t检验。P<0.05为显著差异，具有统计学意义。

表1各组大鼠给药前后的热刺激缩足反射阈值(s)

组别	给药前	给药后
			A	5.48±0.78	5.57±0.98
B	5.35±0.91	6.16±1.01
			C	5.17±0.73	8.93±1.43
D	5.39±0.89	5.81±0.88
			E	5.52±0.87	8.02±1.53
F	5.67±0.50	7.74±1.11
			G	5.84±0.74	14.81±1.79
H	5.66±0.78	10.42±1.30
			I	5.95±0.78	7.15±1.07
J	5.57±0.96	13.09±2.04
			K	5.71±0.84	9.37±1.55

从表1可以看出：给药前各组热刺激缩足反射阈值无显著差异(p>0.05)；给药后C、E、F、G、H、I、J、K组的热刺激缩足反射阈值均显著高于A组(p<0.01)，提示在该剂量下普瑞巴林、加巴喷丁及与维生素B1的组合物对糖尿病周围神经痛模型具有镇痛作用。进一步比较B组和F组，C组和G组，D组和I组，以及E组和J组，F组热刺激缩足反射阈值显著高于B组(p<0.01)，G组热刺激缩足反射阈值显著高于C组(p<0.01)，D组热刺激缩足反射阈值显著高于I组(p<0.01)，J组热刺激缩足反射阈值显著高于E组(p<0.01)，表明维生素B1能有效提高普瑞巴林、加巴喷丁的镇痛效果。

表2各组大鼠给药前后的机械刺激缩足反射阈值(g)

组别	给药前	给药后
			A	5.39±0.52	5.73±0.77
B	5.07±0.76	5.49±0.97
			C	5.16±0.88	10.60±1.29
D	5.18±0.87	5.36±0.85
			E	5.59±0.91	9.01±1.83
F	5.29±0.80	8.59±1.13
			G	5.90±0.65	14.85±2.13
H	5.54±0.66	10.34±1.48
			I	5.61±0.86	7.25±1.26
J	5.60±0.86	12.65±1.78
			K	5.44±0.64	9.92±1.50

从表2可以看出：给药前各组机械刺激缩足反射阈值无显著差异(p>0.05)；给药后C、E、F、G、H、I、J、K组的机械刺激缩足反射阈值均显著高于A组(p<0.01)，提示在该剂量下普瑞巴林、加巴喷丁及与维生素B1的组合物对糖尿病周围神经痛模型具有镇痛作用。进一步比较B组和F组，C组和G组，D组和I组，以及E组和J组，F组机械刺激缩足反射阈值显著高于B组(p<0.01)，G组机械刺激缩足反射阈值显著高于C组(p<0.01)，D组机械刺激缩足反射阈值显著高于I组(p<0.01)，J组机械刺激缩足反射阈值显著高于E组(p<0.01)，表明维生素B1能有效提高普瑞巴林、加巴喷丁的镇痛效果。

以上热刺激缩足反射阈值和机械刺激缩足反射阈值结果提示这种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合灌胃给药对大鼠糖尿病周围神经痛模型的镇痛效果优于普瑞巴林、加巴喷丁单独给药的效果，并具有一定的协同作用。

试验2：

本实施例的药物组合物能够降低对糖尿病周围神经痛模型大鼠单独使用普瑞巴林、加巴喷丁所引起的嗜睡和/或眩晕的发生率。

每日给药1次，比较各组大鼠每日给药前后活动状态，观察动物是否嗜睡，是否眩晕，具体表现为不能把握方向，无法控制肢体运动,如步态不稳、转圈、翻滚等。给药前，各组动物之间没有明显差异，给药后，C组有10％动物出现嗜睡和/或眩晕，E组有14.2％动物出现嗜睡和/或眩晕，A、B、D、F、G、H、I、J、K组没有动物出现嗜睡和/或眩晕，提示联合使用维生素B1减少了单独使用普瑞巴林、加巴喷丁所引起的副作用。

试验3：

本实施例的药物组合物能够显著上调保护因子SOCS3的基因表达水平。

试验过程：过量麻醉处死动物，取脊髓L4-L6节段，将脊髓组织置于加有1mlTRIZOL的无RNA酶污染的EP管中，用研磨棒将其研磨至无大块颗粒。神经元先用预冷的PBS洗3次，吸干PBS，加入1ml TRIZOL即可。室温裂解5分钟。加入200μl氯仿，将EP管上下振荡15s混匀，室温静置10min。4℃，12000g离心15min。离心后EP管中的液体分为三层：RNA保留在上层无机相中；蛋白质溶解于下层有机相中；上下两层界面处的中间层为DNA相。小心吸取上层水相约500μl。加入等体积预冷的异丙醇，上下颠倒混匀，室温静置10min以上。4℃，12000g离心10min，弃上清。加入1ml 75％乙醇漂洗RNA沉淀1次，4℃，7500g，离心5min，弃上清，室温干燥。用适量DEPC水溶解RNA，-80℃短时间保存备用。逆转录cDNA逆转录反应采用20μl反应体系：总mRNA 4μg、dNTP 0.5mM、oligo(dT)15primer 1μg、RNasin inhibitor20IU、M-MLV 200IU，余体积以灭菌DEPC水补齐。30℃反应10min，42℃反应30min，95℃反应10min灭活逆转录酶，冷却至4℃终止反应，反转录产物置于-20℃保存。扩增PCR反应采用20μl扩增体系：上下游引物各2μl，MgCl₂(25mM)1.2μl，dNTP(10mM)0.4μl，10×Buffer 2μl，Taq DNA Polymerase 0.5μl，cDNA模板1.5μl，余体积以灭菌DEPC水补齐；RT-PCR实时定量PCR采用SYBR Green PCR Master Mix试剂盒，使用7300Real-Time PCR系统反应，得到Ct值(Ct值是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数)，并按照2^-ΔΔCt法进行统计分析。具体步骤如下：首先用内参基因的Ct值对实验组(test)和对照组(ctrl)的靶基因Ct值进行归一化:ΔCt test＝实验组目的基因Ct值–实验组内参基因Ct值，ΔCtctrl＝实验组目的基因Ct值–实验组内参基因Ct值；随后用对照组的Ct值归一实验组的ΔCt：ΔΔCt＝ΔCt test–ΔCt ctrl；最后计算表达水平的差异倍数：Fold change＝2^-ΔΔCt。本实施例中B、C、D、E、F、G、H、I、J、K组为实验组，A组为对照组。

测试结果如图1所示，显示了各组大鼠脊髓中SOCS3的基因表达水平。从图1中看出：与A组相比，B、C、D、E组大鼠脊髓SOCS3基因表达水平没有明显变化，F、G、H、I、J、K组大鼠脊髓SOCS3基因表达水平显著升高(p<0.01)，提示含有维生素B1的药物组合物能够有效增加神经保护因子SOCS3的基因表达，促进神经修复。

本实施例的治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物灌胃给药对大鼠糖尿病周围神经痛模型的镇痛效果优于普瑞巴林、加巴喷丁单独给药的效果，取得了良好的协同作用，并且有效减少了单独使用普瑞巴林、加巴喷丁引起的嗜睡、眩晕等不良反应发生率，这种作用具体可能与上调SOCS3表达水平有关。本实施例的药物组合物，在糖尿病周围神经痛治疗中具有一定的应用前景和市场前景。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本领域的技术人员应该了解，本发明不受上述具体实施例的限制，上述具体实施例和说明书中的描述只是为了进一步说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护的范围由权利要求书及其等效物界定。

Claims (3)

1.一种治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物，其特征在于，由以下组分组成：

维生素B1；

普瑞巴林或加巴喷丁；

按照重量份数比，所述维生素B1和普瑞巴林为1︰5；或者按照重量份数比，所述维生素B1和加巴喷丁为1︰5。

2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病周围神经痛的药物组合物，其特征在于，所述药物的剂型为如下任一剂型：注射剂或口服固体制剂。

3.一种权利要求1或2所述药物组合物应用于制备治疗糖尿病周围神经痛的药物。

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