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CN110294742B - 并环类ask1抑制剂及其应用 - Google Patents

并环类ask1抑制剂及其应用 Download PDF

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CN110294742B CN201810790218.XA CN201810790218A CN110294742B CN 110294742 B CN110294742 B CN 110294742B CN 201810790218 A CN201810790218 A CN 201810790218A CN 110294742 B CN110294742 B CN 110294742B
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Xuanzhu Pharma Co Ltd
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Abstract

本发明涉及并环类ASK1抑制剂及其应用，具体涉及通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体。本发明还涉及该化合物的制备方法、包含该化合物的药物制剂及药物组合物。本发明的化合物能够有效抑制ASK1的氨基酸磷酸化，抑制ASK1的激活；因此能够治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病。

Description

并环类ASK1抑制剂及其应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或立体异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或立体异构体的方法，以及所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或立体异构体在制备治疗和/或预防由ASK1介导的疾病及相关疾病中的应用。
Figure BDA0001734612780000011
背景技术
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)以依次活化的MAPKKK，MAPKK，MAPK的方式存在。环境信号影响MAPKKK，依次使MAPKK磷酸化，特定的MAPK磷酸化，然后MAPK通过使细胞基质磷酸化而介导细胞响应，包括细胞生长，分化，凋亡和发炎等。
细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)是MAPKKK家族中的一员，是C螺旋区相连的类低聚物，N螺旋区连接硫氧还原酶(Trx)，Trx抑制ASK1的激活。在氧化应激，内质网压力，分子内钙浓度和GPCR信号等刺激条件下，ASK1的硫氧还原酶会解离下来，ASK1自身的氨基酸(人：Thr838，小鼠：Thr845)发生自磷酸化，使MAPKK(如MAPKK3/MAPKK6，MAPKK4/MAPKK7)磷酸化；近而使下游的p38和JNK磷酸化并活化。该通路的激活与肿瘤的生长，代谢类疾病和神经系统疾病息息相关。
ASK1抑制剂的作用机制为抑制ASK1的磷酸化，阻断下游通路的激活，从而达到对肿瘤疾病，代谢类疾病和神经退行性疾病的治疗作用。
目前，国际上在研的ASK1抑制剂只有Gilead的GS-4997处于临床阶段，正在开展PhaseIII(III期)，已经完成糖尿病肾病，肺动脉高压和非酒精性脂肪肝炎的PhaseII(II期)研究，通过PhaseII的验证，证明该靶点的有效性和安全性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种并环类ASK1抑制剂及其应用。具体技术方案如下：
本发明首先提供了通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体：
Figure BDA0001734612780000021
其中，
X、X1、X2、X3、X4、X5分别独立地选自C、CR8或N；
R1选自任选地被一个或多个Q1取代的C1-10烷基、C2-10烯基、C1-10烷氧基、3-8元环烷基、C2-10炔基、芳基、杂芳基或杂环基；
每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-8元环烷基、3-8元杂环基、苯基、苯氧基、-O-R8、-C(O)-R8、-OC(O)-R8、-C(O)-O-R8、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)或-C(O)-N(R8)(R9)，其中C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元杂环基、苯基、苯氧基可选地被一个或多个C1-6烷基、3-8元环烷基、C1-6烷氧基、羟基、氨基、羧基或卤素取代；
或者R1和X1连同与之相连的N键合形成杂环基、芳基或杂芳基，所述杂环基、芳基或杂芳基任选被一个或多个烷基、羟基或卤素取代；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基氨基磺酰基、二(C1-6烷基)氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰氨基或C1-6烷基磺酰氧基；
R3选自不存在、氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选地被一个或多个Q2取代C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、的芳基、杂芳基、环烷基或或杂环基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、卤素、氰基、硝基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、氧代、-O-R8、-O-C(O)-R8、-O-C(O)-N(R8)(R9)、-S-R8、-N(R8)(R9)、-S(＝O)-R8、-S(＝O)2R8、-O-S(＝O)2R8、-S(＝O)2-N(R8)(R9)、-S(＝O)2-OR8、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)、-C(O)-R8、-C(O)-O-R8、-C(O)-N(R8)-R9或-N(R8)-S(＝O)2-R9，其中所述C1-6烷基、3-8元环烷基、芳基、杂芳基或杂环基进一步可选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、氧代、C1-6烷基或-O-R8取代；
每个R8和R9分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基，或者当R8和R9与同一N原子相连时，R8和R9与它们所连接的N原子一起形成3-12元杂环；
Figure BDA0001734612780000031
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，
X、X1、X2、X3、X4、X5分别独立地选自C、CR8或N；
R1选自任选被一个或多个Q1取代的C1-6烷基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6炔基、6-14元芳基、5-14元杂芳基或3-12元杂环基；
每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-8元环烷基、杂环基、苯基、苯氧基、-O-R8、-C(O)-R8、-OC(O)-R8、-C(O)-O-R8、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)或-C(O)-N(R8)(R9)，其中C1-6烷基、3-8元环烷基、杂环基、苯基、苯氧基可选地被一个或多个C1-6烷基、3-8元环烷基、C1-6烷氧基、羟基、氨基、羧基或卤素取代；
或者R1和X1键合形成5-12元杂环基、6-12元芳基或5-12元杂芳基，所述5-12元杂环基、6-12元芳基或5-12元杂芳基任选被一个或多个C1-6烷基、羟基或卤素取代；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基；
R3选自不存在、氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被一个或多个Q2取代的C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、6-14元芳基、5-14元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元环烷基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-14元杂芳基、5-14元杂芳基C1-6烷基、3-12元杂环基、3-12元杂环基C1-6烷基、卤素、氰基、硝基、氧代、-O-R8、-O-C(O)-R8、-O-C(O)-N(R8)(R9)、-S-R8、-N(R8)(R9)、-S(＝O)-R8、-S(＝O)2R8、-O-S(＝O)2R8、-S(＝O)2-N(R8)(R9)、-S(＝O)2-OR8、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)、-C(O)-R8、-C(O)-O-R8、-C(O)-N(R8)-R9、或N(R8)-S(＝O)2-R9，其中所述C1-6烷基、3-8元环烷基、6-14元芳基、5-14元杂芳基或3-12元杂环基进一步任选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、氧代、C1-6烷基或-O-R8取代；
R8和R9分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基，或者当R8和R9与同一N原子相连时，R8和R9与它们所连接的N原子一起形成3-12元杂环；
Figure BDA0001734612780000041
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(I)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体：其中，
X2、X3、X4、X5至少有一个选自N；
R1选自任选被一个或多个Q1取代的C1-6烷基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6炔基、6-12元芳基、5-12元杂芳基或3-10元杂环基；
每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-8元环烷基、3-8元杂环基、苯基、苯氧基、-O-R8、-C(O)-R8、-OC(O)-R8、-C(O)-O-R8、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)或-C(O)-N(R8)(R9)；
或者R1和X1连同与之相连的N键合形成5-10元杂环基、6-12元芳基或5-10元杂芳基，所述5-10元杂环基、6-12元芳基或5-10元杂芳基任选被一个或多个C1-6烷基、羟基或卤素取代；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基；
R3选自不存在、氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被一个或多个Q2取代的C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、6-10元芳基、5-12元杂芳基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元环烷基C1-6烷基、6-14元芳基、6-14元芳基C1-6烷基、5-14元杂芳基、5-14元杂芳基C1-6烷基、3-12元杂环基、3-12元杂环基C1-6烷基、卤素、氰基、硝基、卤代C1-6烷氧基、氧代、-O-R8、-O-C(O)-R8、-O-C(O)-N(R8)(R9)、-S-R8、-N(R8)(R9)、-S(＝O)-R8、-S(＝O)2R8、-O-S(＝O)2R8、-S(＝O)2-N(R8)(R9)、-S(＝O)2-OR8、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)、-C(O)-R8、-C(O)-O-R8、-C(O)-N(R8)-R9或-N(R8)-S(＝O)2-R9，其中所述C1-6烷基、3-8元环烷基、6-14元芳基、5-14元杂芳基或3-12元杂环基进一步任选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、氧代、C1-6烷基或-O-R8取代；
每个R8和R9分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基，或者当R8和R9与同一N原子相连时，R8和R9与它们所连接的N原子一起形成3-12元杂环；
Figure BDA0001734612780000051
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式中，前述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，具有通式(II)所示的结构，
Figure BDA0001734612780000052
其中，
X、X1分别独立地选自C、CR8或N；
R1选自任选被一个或多个Q1取代的C1-6烷基、C2-6烯基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基、6-10元芳基、5-10元杂芳基或3-8元杂环基；
每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、3-8元环烷基、3-8元杂环基、苯基、苯氧基、-O-R8、-C(O)-R8、-OC(O)-R8、-C(O)-O-R8、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)或-C(O)-N(R8)(R9)；
或者R1和X1连同与之相连的N键合形成5-8元杂环基、6-10元芳基或5-8元杂芳基，所述5-8元杂环基、6-10元芳基或5-8元杂芳基任选被一个或多个C1-6烷基、羟基或卤素取代；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基；
R3选自不存在、氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被一个或多个Q2取代C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、的6-8元芳基、5-10元杂芳基、3-8元环烷基或3-8元杂环基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元环烷基C1-6烷基、3-8元杂环基、3-8元杂环基C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、卤素、氰基、硝基、-O-R8、-O-C(O)-R8、-O-C(O)-N(R8)(R9)、-S-R8、-N(R8)(R9)、-S(＝O)-R8、-S(＝O)2R8、-O-S(＝O)2R8、-S(＝O)2-N(R8)(R9)、-S(＝O)2-OR8、-N(R8)-C(O)-R9、-N(R8)-C(O)-O-R9、-N(R8)-C(O)-N(R8)(R9)、-C(O)-R8、-C(O)-O-R8、-C(O)-N(R8)-R9或-N(R8)-S(＝O)2-R9，其中所述C1-6烷基、3-8元环烷基、3-8元杂环基进一步任选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、氧代、C1-6烷基或-O-R8取代；
每个R8和R9分别独立地选自氢或C1-6烷基；
Figure BDA0001734612780000061
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，具有通式(III)所示的结构，
Figure BDA0001734612780000062
其中，
R1选自任选被1～3个Q1取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基或3-8元杂环基，每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基酰氨基、氨酰基、C1-6烷基氨酰基、二(C1-6烷基)氨酰基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基或3-8元环烷基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基；
R3选自氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～3个Q2取代的C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、苯基、5-8元杂芳基或3-6元杂环基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-6烷基、3-6元杂环基、3-6元杂环基C1-6烷基、卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基巯基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基氧基羰基、C1-6烷基酰氨基、C1-6烷基氨酰基、C1-6烷基磺酰氨基，其中所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步可选地被任选地被1～3个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基取代；
Figure BDA0001734612780000071
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(III)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，
其中，
R1选自任选被1～3个Q1取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基，每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基、氨酰基、C1-6烷基氨酰基、二(C1-6烷基)氨酰基、C1-6烷基氨基或二(C1-6烷基)氨基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
R3选自氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～3个Q2取代的C1-6烷基、C1-6烷基氨基、C1-6烷氧基、苯基或5-8元杂芳基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-6烷基、3-6元杂环基、-6元杂环基C1-6烷基、卤素、羟基或氨基，其中所述C1-6烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步任选地被1～3个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基取代；
Figure BDA0001734612780000072
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(III)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，
R1选自任选被1～2个Q1取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基、3-6元环烷基，每个Q1独立地选自卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷氧基羰基、氨酰基、C1-4烷基氨酰基、二(C1-4烷基)氨酰基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基；
R3选自氢、卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基或C1-4烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～2个Q2取代的C1-4烷基、C1-4烷基氨基、C1-4烷氧基、苯基或5-6元杂芳基；
每个Q2独立地选自C1-4烷基、C1-4烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、3-6元杂环基、3-6元杂环基C1-4烷基、卤素、羟基或氨基，其中所述C1-4烷基、3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步任选地被1～3个，优选1～2个，卤素、羟基、氨基、C1-4烷基取代；
Figure BDA0001734612780000081
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(III)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，
其中，
R1选自任选被1～2个Q1取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、甲氨基、乙氨基、二甲氨基、二乙氨基、氨酰基、甲基氨酰基、乙基氨酰基、二甲基氨酰基、二乙基氨酰基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、氟、溴、氯、碘、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、三氟甲基、三氟乙基、二氟甲氧基或或三氟甲氧基；
R3选自氢、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、三氟甲基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基或甲酰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～2个Q2取代的苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、四唑基、吡啶基或嘧啶基；
每个Q2独立地选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、甲氧基、环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基，其中所述甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基进一步任选地被1～3个，优选1～2个，卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基取代；
Figure BDA0001734612780000082
选自单键或双键。
本发明的一些实施方式中，前述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，具有通式(IV)所示的结构，
Figure BDA0001734612780000091
其中，
R1选自任选被1～3个Q1取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或3-6元环烷基，每个Q1独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨酰基、C1-6烷基氨酰基、二(C1-6烷基)氨酰基、C1-6烷基氨基或二(C1-6烷基)氨基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
R5选自任选被1～3个Q2取代的苯基或5-8元杂芳基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-6烷基、3-6元杂环基或3-6元杂环基C1-6烷基，其中所述3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步任选地被1～3个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基取代。
本发明的一些实施方式中，涉及前述通式(IV)所示的结构的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，
R1选自任选被1～3个Q1取代的C1-4烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷基，每个Q1独立地选自卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、氨酰基、C1-4烷基氨酰基、二(C1-4烷基)氨酰基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基；
R5选自任选被1～3个Q2取代的苯基或5-6元杂芳基；
每个Q2独立地选自C1-4烷基、C1-4烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-4烷基、3-6元杂环基或3-6元杂环基C1-4烷基，其中所述3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步任选地被1～3个卤素、羟基、氨基、C1-4烷基取代。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(IV)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，
其中，
R1选自任选被1～2个Q1取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基，所述取代基Q1选自卤素、氰基、羟基、氨基、硝基、羧基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、甲氨基、乙氨基、二甲氨基、二乙氨基、氨酰基、甲基氨酰基、乙基氨酰基、二甲基氨酰基、二乙基氨酰基；；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、氟、溴、氯、碘、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、三氟甲基、三氟乙基或三氟甲氧基；
R5选自任选被1～2个Q2取代的苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、四唑基吡啶基或嘧啶基；
每个Q2独立地选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、甲氧基、环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基，其中所述环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基进一步任选地被1～2个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基或异丙基取代。
本发明的一些实施方式中，前述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，具有通式(V)所示的结构，
Figure BDA0001734612780000101
其中，
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
R3选自氢、卤素、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基或C1-6烷基羰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被一个或多个Q2取代的苯基或5-8元杂芳基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-6元环烷基、3-6元环烷基C1-6烷基、3-6元杂环基或3-6元杂环基C1-6烷基，其中所述3-6元环烷基或3-6元杂环基进一步任选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基取代。
本发明的一些实施方式涉及前述通式(V)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，
其中，
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、氟、溴、氯、碘、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、三氟甲基、三氟乙基或三氟甲氧基；
R3选自氢、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、三氟甲基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基或甲酰基；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被一个或多个Q2取代的苯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、四唑基、吡啶基或嘧啶基；
每个Q2选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、甲氧基、环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基，其中所述环丙基、环丙基甲基、环丁基、环丁基甲基、环戊基、环戊基甲基、环己基、环己基甲基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基进一步任选地被一个或多个卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、羧基、甲基、乙基、丙基或异丙基取代。
本发明所述的任一实施方式中的任一取代基的选择可以相互组合，其组合后的技术方案仍包含在发明的保护范围之内。
本发明的一些实施方式中，前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体的结构见表1：
表1
Figure BDA0001734612780000111
Figure BDA0001734612780000121
Figure BDA0001734612780000131
Figure BDA0001734612780000141
本发明所述的“药学上可接受的盐”是指可药用的酸和碱的加成盐，可药用的酸的加成盐可以由无机酸和有机酸制备；可药用的碱的加成盐可以由有机碱或无机碱制备。
本发明所述的“酯”是指药学上可接受的酯，尤其指如下酯，其在活体内水解且包括容易在人体内分解留下母体化合物(通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所述的化合物)或其盐的酯。本发明的一些实施方式中，其中药学上可接受的酯，包括：衍生于自药学上可接受的脂肪族羧酸及磷酸(盐)。
本发明通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物的“立体异构体”是指当式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物存在不对称碳原子时，会产生对映异构体；当化合物存在碳碳双键或环状结构时，会产生顺反异构体；当化合物存在酮或肟时，会产生互变异构体，本发明的一些实施方式中，立体异构体包括但不限于：对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物。
本发明还提供了前述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中所述方法包括：
(1)制备方法一，通式(I-1)所示的化合物与通式(I-2)所示的化合物反应，得到通式(I)所示的化合物；
Figure BDA0001734612780000142
(2)制备方法二，通式(I-3)所示的化合物与通式(I-2)所示的化合物反应，得到通式(I-4)所示的化合物；通式(I-4)所示的化合物中的硝基通过官能团转化反应，得到通式(I)所示的化合物；
Figure BDA0001734612780000151
进一步的，本发明还提供了前述的通式(III)所示的化合物的制备方法，其中所述方法包括：
(1)制备方法一，通式(III-1)所示的化合物与通式(III-2)所示的化合物反应，得到通式(III)所示的化合物；
Figure BDA0001734612780000152
(2)制备方法二，通式(III-3)所示的化合物与通式(III-2)所示的化合物反应，得到通式(III-4)所示的化合物；通式(III-4)所示的化合物中的硝基通过官能团转化反应，得到通式(III)所示的化合物；
Figure BDA0001734612780000161
其中，取代基A选自离去基团，例如卤素。
所述的“官能团转化反应”可以采用已知的化学合成方法来实现，包括但不限于取代反应、加成反应、消除反应、脱水反应、水解反应、氧化反应及酯化反应等，这些反应对于化学领域的技术人员是熟知的，本发明在此不再进行限定；具体实施过程中，可以通过一步反应实现，也可以通过多步反应实现。
另外，一些必需的起始原料，例如用于合成中间体的原料，可以按照有机化学手册中所描述的类似的步骤和方法来合成，本发明在此不再行限定。
以上反应方程式中的R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、n、X、X1、X2、X3、X4、X5如前文所定义，例如通式(I)-(V)任一通式中相应基团的定义。
本发明还提供了用于合成式(III)所示化合物的中间体，其具有以下结构式：
Figure BDA0001734612780000162
其中，取代基A选自离去基团，例如卤素；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、n如前文所定义。
本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及任选的一种或多种第二治疗活性剂。所述的第二治疗活性剂可与ASK1组合用于缓解或治疗由其介导的相关性疾病，如心血管疾病、肺部疾病、代谢性疾病、外周血管疾病、胃肠疾病；
所述的心血管疾病包括不限于心绞痛、心律不齐、间歇性跛行、心肌梗塞、心力衰竭或复发性局部缺血等。适于组合治疗心血管相关疾病的治疗活性剂包括但不限于抗心绞痛剂、抗心力衰竭剂、抗血栓形成剂、抗心律失常剂、抗高血压剂、以及降脂剂。抗心绞痛剂包括但不限于β-阻断剂、钙通道阻断剂以及硝酸盐等；用于治疗心力衰竭的药剂包括利尿剂、ACE抑制剂、血管扩张剂以及强心苷等；抗血栓形成剂包括但不限于血小板抑制剂、抗凝血剂以及血栓溶解剂等；抗心律失常药包括但不限于钠通道阻滞药、β-受体阻滞药、钙通道阻滞药、延长动作电位时程药以及腺苷等。抗高血压剂包括但不限于α-1-肾上腺素拮抗剂、β-肾上腺素拮抗剂、中心α-肾上腺素受体促效剂、组合的α/β-肾上腺素拮抗剂、肾上腺素神经元阻断剂、中枢神经系统作用抗高血压剂、抗血管紧张素II药剂、ACE抑制剂、血管紧张素-II受体拮抗剂、钙通道阻滞剂、血管扩张剂、钾通道活化剂等；降脂剂包括但不限于他汀类、贝特类、烟酸类、胆酸螯合剂、胆固醇吸收抑制等。
所述的肺部疾病是指与肺脏相关的任何疾病，包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎及肺气肿。适于组合治疗肺部疾病的治疗活性剂包括但不限于支气管扩张剂，包括β2促效剂、抗胆碱激导性剂、皮质类固醇以及电解质补充剂。
所述的代谢性疾病包括但不限于糖尿病、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇以及较高甘油三酯等。适于组合治疗代谢性疾病的活性剂包括但不限于抗高血压剂和降脂药。
所述的外周血管疾病包括但限于外周动脉疾病。
所述的胃肠疾病包括但不限于胃食道逆流病、炎性肠病、肠胃炎、胃炎、和消化性溃疡疾病以及胰脏炎等。适于组合治疗胃肠疾病的活性剂包括但不限于质子泵抑制剂、H2阻断剂、前列腺素、硫酸铝及解酸剂等。
利用ASK1抑制剂治疗急性心血管疾病的患者，可同时利用抗生素、止痛药和/或抗焦虑药治疗相关病症。
在本发明一些具体实施方式中，所述药物组合物还包含一种或多种药用载体和/或稀释剂。
本发明还提供了一种药物制剂，其含有前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物制剂为临床上或药学上可接受的任一剂型。
在本发明的一些实施方式中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。
本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，药用载体和/或稀释剂可以包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。
在本发明的一种具体实施方式中，前述的药物制剂可以进一步包含一种或多种第二治疗活性剂，所述的第二治疗活性剂如前文所述。
本发明还提供了前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病的药物中的用途。
在本发明的一些实施方式中，所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自心血管疾病，包括但不限于肺动脉高压、多发性硬化症、动脉粥样硬化、心绞痛、间歇性跛行综合征、心肌梗死、心力衰竭；选自肺部疾病，包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎及肺气肿；选自代谢性疾病，包括但不限于糖尿病及其并发症、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇以及较高甘油三酯；肝胆肾疾病，包括但不限于糖尿病肾病、非酒精性脂肪肝、、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病；过度增殖性疾病包括但不限于胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌；其他疾病，包括神经退行性疾病、纤维化相关疾病、中风、炎性肠道疾病、自身免疫病症。
本发明还提供了前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构、前述的药物制剂或前述的药物组合物在治疗/或预防疾病中的应用。
本发明还提供了前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物在治疗/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病中的应用；所述ASK1介导的疾病及相关疾病如前文所述。
本发明还提供了一种治疗疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给药治疗有效量的前述通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物，其中，所述疾病为ASK1介导的疾病及相关疾病；所述ASK1介导的疾病及相关疾病如前文所述。
定义
本发明所述的“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟和氯。
本发明所述的“氧代”是指取代基结构中的任一C原子可被氧化为“-C(O)-”；若含有杂原子，其杂原子可形成氧化物，如
Figure BDA0001734612780000191
可被氧化成
Figure BDA0001734612780000192
S任选被氧化为S(O)或S(O)2。
本发明所述的“卤代”是指取代基中的任一氢可被一个或多个相同或不同的卤素取代。“卤素”如前文所定义。
本发明所述“C1-10烷基”指含有1-10个碳原子的烃部分去除一个氢衍生的直链或支链的烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基和1-甲基-2-甲基丙基等。所述“C1-6烷基”或“C1-4烷基”指含有1-6个或1-4个碳原子的上述实例。
本发明所述的“C2-10炔基”指含有碳碳叁键的2-10个碳原子的炔烃部分去除一个氢衍生的直链或支链的炔烃基，如乙炔基、丙炔基、2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-甲基-2-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基等。所述“C2-6炔基”指含有1-6个碳原子的上述实例。
本发明所述的“C2-10烯基”指含有碳碳双键的2-10个碳原子的烯烃部分去除一个氢衍生的直链或支链的烯烃基，如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、1,3-丁二烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、1,4-己二烯基、环戊烯基、1,3-环戊二烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基等。所述“C1-6烷基”或“C1-4烷基”指含有1-6个或1-4个碳原子的上述实例。
本发明所述的“C1-10烷氧基”是指前文所定义的“C1-10烷基”通过氧原子与母体连接的基团，即“C1-10烷基-O-”基团，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基和正己氧基等。所述的“C1-6烷氧基”指含有1-6个碳原子的上述实例，即“C1-6烷基-O-”基团。
与“C1-10烷氧基”类似的，本发明所述的“C1-6烷基氨基”是指C1-6烷基-NH-；“苯氧基”是指苯基-O-；“羟基C1-6烷基”是指C1-6烷基上的每个氢可被羟基取代；“羟基C1-6烷氧基”是指羟基C1-6烷基-O-；“二(C1-6烷基)氨基”是指(C1-6烷基)2-N-，其中每个C1-6烷基可以相同也可不同；“C1-6烷基硫基”是指C1-6烷基-S-；“C1-6烷基羰基”是指C1-6烷基-C(O)-；“C1-6烷氧基C1-6烷基”是指C1-6烷基-O-C1-6烷基；“C1-6烷基羰基氧基”是指C1-6烷基-C(O)-O-；“C1-6烷基磺酰基”是指C1-6烷基-S(O)2-；“C1-6烷基氨基磺酰基”是指C1-6烷基-NH-S(O)2-；“二(C1-6烷基)氨基磺酰基”是指(C1-6烷基)2-N-S(O)2-，其中每个C1-6烷基可以相同也可不同；“C1-6烷基磺酰氨基”是指C1-6烷基-S(O)2-NH-；“C1-6烷基磺酰氧基”是指C1-6烷基-S(O)2-O-。
本文中，术语“卤代C1-6烷基”、“卤代C1-6烷氧基”是指该基团的C1-6烷基中的氢被一个或多个卤素取代；所述“卤素”如前文所定义。
本发明所述的“环烷基”、“芳基”、“杂环基”及“杂芳基”，包括单环系统和稠环系统(双环系统或者多环系统)，单环是指仅以一个环的形式存在，稠环是指两个及两个以上环以并、螺、桥的连接方式所形成的多环系结构。所述的并环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的环原子(即共用一个键)所形成的稠环结构。所述的桥环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻的环原子所形成的稠环结构。所述的螺环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用一个环原子所形成的稠环结构。本发明以原子个数所限定的环烷基、芳基、杂环基、杂芳基，在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构。
本发明所述的“环烷基”，是指饱和或部分饱和且不具备芳香性的单环环烷基，双环环烷基系统或者是多环环烷基系统。单环环烷基可以为3-10元环烷基、5-10元环烷基、3-8元环烷基、3-6元环烷基、5-8元环烷基等，优选3-8元饱和环烷基、3-6元饱和环烷基、5-6元饱和环烷基，实例包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基、环庚烯基、1,4-环庚二烯基、环辛烯基、1,5-环辛二烯基等。并环环烷基可以为6-12元并环环烷基、7-10元并环环烷基、8-9元并环环烷基，其代表性实例包括但不限于双环[3.1.1]庚烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.2]壬烷、双环[3.3.1]壬烷和双环[4.2.1]壬烷。螺环环烷基，可以为6-12元螺环基、7-11元螺环基等，其实例包括但不限于：
Figure BDA0001734612780000211
Figure BDA0001734612780000212
所述的桥环环烷基可以为6-12元桥环基、7-11元桥环基，其实例包括但不限于：
Figure BDA0001734612780000213
Figure BDA0001734612780000214
本发明所述的“3-8元环烷基”在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构，优选单环烷基。
本发明所述的“杂环基”是指至少一个环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的非芳香性的环状基团，优选1-3个杂原子，同时包括碳原子、氮原子和硫原子可以被氧代。
“杂环基”，是指饱和或部分饱和且不具备芳香性的单环杂环基或稠杂环基系统。单杂环基可以为3-12元杂环、3-10元杂环基、3-8元饱和杂环基、3-6元杂环基、4-7元杂环基、5-7元杂环基、5-6元杂环基、5-6元含氧杂环基、5-6元含氮杂环基、5-6元饱和杂环基、5-6元饱和含氧杂环基、5-6元饱和含氮杂环基等。单杂环基的实例包括但不限于氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1,2-噁唑烷基、1,3-噁唑烷基、1,2-噻唑烷基、1,3-噻唑烷基、四氢-2H-吡喃基、四氢-2H-噻喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、1,4-二氧杂环己烷基、1,4-氧硫杂环己烷基；部分饱和单杂环基的实例包括但不限于4,5-二氢异噁唑基、4,5-二氢噁唑基、2,5-二氢噁唑基、2,3-二氢噁唑基、3,4-二氢-2H-吡咯基、2,3-二氢-1H-吡咯基、2,5-二氢-1H-咪唑基、4,5-二氢-1H-咪唑基、4,5-二氢-1H-吡唑基、4,5-二氢-3H-吡唑基、4,5-二氢噻唑基、2,5-二氢噻唑基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、2H-噻喃基、4H-噻喃基、2,3,4,5-四氢吡啶基、1,2-异噁嗪基、1,4-异噁嗪基或6H-1,3-噁嗪基等。
稠杂环包括并杂环基、螺杂环基、桥杂环基，可以是饱和的、部分饱和的或不饱和的，但不是芳香性的。所述的并杂环基可以为6-12元并环基、7-11元并环基、6-10元并环基、6-12元饱和并环基、7-11元饱和并环基，其实例包括但不限于：3-氮杂双环[3.10]己烷基、3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚烷、3,8-二氮杂双环[4.2.0]辛烷基、3,7-二氮杂双环[4.2.0]辛烷基、八氢吡咯并[3,4-c]吡咯、八氢吡咯并[3,4-b]吡咯、八氢吡咯并[3,4-b][1,4]噁嗪基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶、2,3-二氢苯并呋喃-2-基、2,3-二氢苯并呋喃基-3-基、二氢吲哚-1-基、二氢吲哚-2-基、二氢吲哚-3-基、2,3-二氢苯并噻吩-2-基、八氢-1H-吲哚基、八氢苯并呋喃基。
所述的螺杂环基可以为6-12元螺杂环基、7-11元螺杂环基、7-11元饱和螺杂环基、6-12元饱和螺环基，其实例包括但不限于：
Figure BDA0001734612780000221
Figure BDA0001734612780000222
所述的桥杂环基可以为6-12元桥杂环基、7-11元桥杂环基、6-12元饱和桥杂环基、7-11元饱和桥杂环基的实例包括但不限于：
Figure BDA0001734612780000223
Figure BDA0001734612780000224
本发明所述的3-10元杂环基、3-8元杂环基，在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构，优选单环杂环基。
本发明所述的芳基，是指芳香性的环状基团，包括指单环系统、双环系统或多环系统，可以为6-14元芳基、6-12元芳基、6-10元芳基、6-8元单环芳基、8-14元稠环芳基，其中6-8元单环芳基的代表性实例包括但不仅限于苯基、环辛烯基；8-14元稠环芳基的代表性实例包括但不仅限于戊搭烯、萘、菲。
本文所用的术语“杂芳基”是指至少一个环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的芳香性的环状基团，优选1-3个杂原子，同时包括碳原子、硫原子、氮原子被氧代的情况，例如碳原子被C(O)、S(O)、S(O)2替代。杂芳基包括单杂芳基和稠杂芳基，可以是5-14元杂芳基、5-12元杂芳基、5-10元杂芳基、5-8元杂芳基、5-6元杂芳基，单杂芳基的代表性实例包括但不仅限于呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基和三嗪基。稠杂芳基是指稠合到苯基、环烷基、环烯基、杂环基或杂芳基的双环或多环系统。稠杂芳基可以为8-12元杂芳基、8-10元杂芳基、9-10元杂芳基，代表性实例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻吩基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、噌啉基、5,6-二氢喹啉-2-基、5,6-二氢异喹啉-1-基、吲唑基、吲哚基、异喹啉基、萘啶基、嘌呤基、喹啉基、5,6,7,8-四氢喹啉-2-基、5,6,7,8-四氢喹啉基、5,6,7,8-四氢喹啉-4-基、5,6,7,8-四氢异喹啉-1-基、4,5,6,7-四氢并[c][1,2,5]噁二唑和6,7-二氢并[c][1,2,5]噁二唑-4(5H)酮基。
本发明所述的5-14元杂芳基、5-12元杂芳基、5-10元杂芳基，在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构。
本发明中，“任选被取代”包括“被取代”和“未被取代”两种情形。
本发明所述的“治疗有效量”是指当给药到患者时至少能够减轻患者病症的症状的前述化合物、药物制剂、药物组合物的量。包含“治疗有效量”的实际量会根据多种情况而变化，多种情况包括但不限于所治疗的特定病症、病症的严重程度、患者的体格和健康状况以及给药途径。熟练的医疗从业者可容易地使用医疗领域中已知的方法确定合适的量。
发明的有益效果
(1)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有优异的ASK1抑制活性，能够治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病；
(2)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有良好的药代动力学性质，作用更持久，生物利用度高；
(3)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行描述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实验中所用缩写代表的含义如下：
PE：石油醚 EA：乙酸乙酯 DCM：二氯甲烷 MeOH：甲醇
DMF-DMA：N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛 DIEA：N,N-二异丙基乙胺
THF：四氢呋喃 Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯
X-antphos：(4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽
X-phos：2-双环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯
EDCI：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐
HOBt：1-羟基苯并三唑
本发明化合物结构中出现的此种双键结构
Figure BDA0001734612780000231
代表该化合物为未经确认顺反式构型的单一化合物或者为顺反式化合物的混合物。
制备实施例
实施例1 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物1)
1.1、7-硝基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000241
将硝酸钾(3.71g,36.7mmol)，加入到浓硫酸(27mL)中，0℃下加入3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(4.50g,30.6mmol)，反应2小时。反应液倾入冰水中，抽滤，所得固体用水冲洗，干燥，得目标化合物(4.00g,产率68.0％)。
1.2、6-溴吡啶甲酰肼的制备
Figure BDA0001734612780000242
将6-溴吡啶甲酸甲酯(5.00g,23.1mmol)，溶解到甲醇(100mL)中，加入水合肼(12.47g,249.1mmol)反应2小时。浓缩，加入乙酸乙酯(10mL)和甲基叔丁基醚(100mL)，抽滤，固体干燥得目标化合物(4.00g,产率80.0％)。
1.3、(E)-N'-(6-溴吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000243
将6-溴吡啶甲酰肼(4.00g,18.5mmol)加入DMF-DMA(15mL)中。80℃搅拌反应16小时，浓缩，加入正庚烷(100mL)和乙酸乙酯(10mL)搅拌1小时，抽滤，固体干燥得目标化合物(5.00g,产率99.6％)。
1.4、2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶的制备
Figure BDA0001734612780000244
将(E)-N'-(6-溴吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺(5.00g,18.45mmol)和醋酸(18.5mL)加入到乙腈(74mL)，滴加异丙胺(7.60mL,92.25mmol)升温至95℃反应16小时，浓缩，硅胶柱层析(PE:EA＝1:1)纯化，得到目标化合物(4.65g,产率:94.3％)。
1.5、7-氨基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000251
将7-硝基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.88g,9.8mmol)和Pd/C(190mg)加入到甲醇(50mL)，氢化反应3小时，抽滤，滤液浓缩，得目标化合物(1.57g,产率98.7％)。
1.6、7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000252
将7-氨基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.20g,7.4mmol)，2-溴-1-环丙基乙-1-酮(1.32g,8.1mmol)，DIEA(1.91g,14.8mmol)，加入到甲苯(20mL)中，95℃搅拌反应6小时，浓缩，经硅胶柱层析(PE:EA＝1:1)纯化，得目标化合物(1.50g,产率83.0％)。
1.7、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000253
将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.50g,6.1mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中待用。
0℃下，将乙酸酐(2.49g,24.4mmol)滴加到甲酸(1mL)中，滴加完毕后继续0℃下搅拌。0.5小时后将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的二氯甲烷溶液缓慢滴加到体系中反应2小时。用饱和氢氧化钠溶液调节pH至8，加入二氯甲烷(100mL)饱和氯化钠溶液(80mL)萃取，有机相浓缩至30mL后直接用于下一步。
1.8、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000254
将上一步所得N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)甲酰胺粗品溶液加入冰醋酸(20mL)中，旋蒸至无DCM，加入醋酸铵(1.88g,24.4mmol)。110℃反应16小时。用饱和氢氧化钠溶液调pH至8-9，加入EA(200mL)萃取，有机相用饱和氯化钠溶液(150mL)洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，得固体。向固体中加入EA(20mL)，搅拌0.5小时，抽滤，固体干燥得目标化合物(1.40g,两步总产率90.6％)。
1.9、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000261
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(500mg,1.97mmol)，2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(579mg,2.17mmol)，碳酸铯(1.28g,3.94mmol)，Pd2(dba)3(92mg,0.10mmol)，X-antphos(116mg,0.20mmol)加入到1,4-二氧六环(300mL)，氮气保护下80℃搅拌反应16小时，浓缩，经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得目标化合物(150mg,产率17.3％)。
分子式：C25H25N7O 分子量：439.2 LC-MS(M/e)：440.1(M+H+)
1H NMR(CD3OD):8.85(s,1H),8.18(d,J＝2.4Hz 1H),8.12-8.00(m,3H),8.00-7.93(m,1H),7.78-7.71(m,1H),7.55-7.45(m,1H),7.34(s,1H),5.60-5.45(m,1H),4.38-4.25(m,2H),3.30-3.22(m,2H),1.95-1.80(m,1H),1.65-1.55(m,6H),0.95-0.85(m,2H),0.75-0.65(m,2H).
实施例2 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物2)
2.1、2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000262
将2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(2.55g,9.6mmol)，7-硝基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.84g,9.6mmol)，碳酸铯(6.26g,19.2mmol)，Pd2(dba)3(440mg,0.48mmol)，X-antphos(556mg,0.96mmol)加入到1,4-二氧六环(100mL)，氮气保护下80℃搅拌反应16小时，浓缩，经硅胶柱层析(PE:EA＝1:1)纯化，得目标化合物(450mg,产率12.5％)。
2.2、7-氨基-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000271
将2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(450mg,1.2mmol)，溶解到THF(10mL)和甲醇(10mL)中，氢化反应2小时，抽滤，滤液浓缩得目标化合物(400mg,产率96.2％)。
2.3、7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000272
将7-氨基-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(345mg,1.0mmol)，2-溴-1-环丙基乙-1-酮(196mg,1.2mmol)，DIEA(284mg,2.2mmol)，加入到甲苯(10mL)中，95℃搅拌反应16小时，浓缩，经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝20:1)纯化，得目标化合物(350mg,产率81.7％)。
2.4、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-氧代1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000273
将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(350mg,0.82mmol)溶解到二氯甲烷(5mL)中待用。
0℃下，将乙酸酐(335mg,3.28mmol)滴加到甲酸(1mL)中，滴加完毕后继续0℃下搅拌。0.5小时后将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的二氯甲烷溶液缓慢滴加到体系中反应2小时。用饱和氢氧化钠溶液调pH至8，加入二氯甲烷(20mL)饱和氯化钠溶液(15mL)萃取，有机相浓缩直接用于下一步。
2.5、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000281
将上一步所得N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-氧代1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺粗品(0.82mmol)溶解到冰醋酸(6mL)中，加入醋酸铵(253mg,3.28mmol)。110℃反应16小时。用饱和氢氧化钠溶液调pH至8，加入二氯甲烷(50mL)水(40mL)萃取，有机相浓缩，硅胶柱层析(DCM:MeOH＝20:1)后，高压制备得目标化合物(50mg,两步总产率14.0％)。
分子式：C25H23N7O；分子量：437.2；LC-MS(M/e)：438.3(M+H+)。
1H NMR(CD3OD):8.90(s,1H),8.45(d,J＝2.4Hz,1H),8.25-8.18(m,2H),8.18-8.10(m,1H),8.10-7.90(m,2H),7.90-7.75(m,2H),7.45-7.43(m,1H),6.86(d,J＝7.6Hz,1H),5.55-5.38(m,1H),2.00-1.89(m,1H),1.65-1.52(m,6H),0.93-0.90(m,2H),0.82-0.71(m,2H).
实施例2-1 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物2)
2-1.1甲基2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-5-硝基苯甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000282
将2-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯(7.0g，35.9mmol)溶于1-叔丁氧基-N,N,N’,N’-四甲基甲烷二胺(9.4g,53.9mmol)中，115℃反应2小时，析出固体，过滤，滤饼再用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂(60mL,石油醚:乙酸乙酯＝6:1)浆洗，过滤，滤饼干燥得目标产物(8.1g，产率：90.2％)。
2-1.2-(2,4-二甲氧基苄基)-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000283
将甲基2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-5-硝基苯甲酸酯(8.19g,32.7mmol)和2,4-二甲氧基苄胺(7.6g,45.4mmol)加入到甲苯(80mL)溶液中，加热至125℃，反应2.5小时，析出固体，冷却至25℃，过滤，滤饼再用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂(100mL,石油醚:乙酸乙酯＝＝2:1)浆洗，过滤，滤饼干燥得目标产物(9.0g，产率：81.6％)。
2-1.3.7-氨基-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000291
将2-(2,4-二甲氧基苄基)-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(8.4g,24.7mmol)、锌粉(8.1g,123.8mmol)、氯化铵(7.9g,147.7mmol)加入到甲醇(100mL)和水(100mL)中，80℃反应4小时，过滤，滤液加入水(100mL)，再用二氯甲烷(300mL×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得目标化合物(7.4g,产率:96.6％)。
2-1.4.7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(2，4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000292
将7-氨基-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.0g,16.1mmol)、2-溴-1-环丙基乙基-1-酮(3.1g,19.0mmol)、N,N-二异丙基乙胺(4.2g,32.6mmol)依次加入到甲苯(15mL)、四氢呋喃(15mL)和二氯甲烷(30mL)混合溶剂中，加热至80℃,反应5小时，旋干，剩余物柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1-1:1)得目标化合物(3.6g,产率:57.0％)。
2-1.5.N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(2,4-二甲氧基苄基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000293
0℃，将乙酸酐(5.2g,12.7mmol)滴入到甲酸(30mL)中，反应0.5小时，再将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.0g,12.7mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液滴入到反应体系中，0℃反应16小时，用1N氢氧化钠溶液调PH＝7,二氯甲烷(400mL×2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得粗品(5.0g)。
2-1.6.7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000294
将N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(2,4-二甲氧基苄基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺(5.0g,粗品)和乙酸铵(7.5g,97.3mmol)，溶于乙酸(30mL)中，加热至105℃,反应16小时，0℃，用氢氧化钠溶液(2M)调PH＝7，二氯甲烷(150mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得粗品(5.1g)。
2-1.7.7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000301
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.1g,粗品)，溶于三氟乙酸(30mL),加热至90℃反应3小时，浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)打浆，过滤，固体干燥得目标化合物(2.2g，三步产率:68.9％)。
2-1.8.7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000302
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮(1.0g,3.98mmol)、2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(900mg，3.37mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(129mg，0.22mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(204mg，0.22mmol)和碳酸铯(2.4g，7.37mmol)溶于1,4-二氧六环(70mL)中，氮气保护下105℃反应16小时。浓缩，反相柱层析(乙腈/水＝0-50％)得粗品，再用甲醇(5mL)和甲基叔丁基醚(20mL)打浆，过滤，滤饼干燥的目标化合物(400mg，产率27.1％)。
分子式:C25H23N7O 分子量:437.51 LC-MS(M/e):438.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.46(s,1H),8.39(s,1H),8.32-8.36(m,1H),8.01-8.07(m,1H),7.86(d,J＝1.2Hz,1H),7.66-7.74(m,3H),7.16(d,J＝0.8Hz,1H),6.68(d,J＝8Hz,1H),5.44-5.51(m,1H),1.91-1.96(m,1H),1.53(d,J＝11.2Hz,6H),0.80-0.93(m,4H).
实施例3 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物3)
3.1、2-甲基-4,5-二硝基苯甲酸的制备
Figure BDA0001734612780000311
将2-甲基-4-硝基苯甲酸(10.0g，55.2mmol)溶于浓硫酸(60mL)中，将硝酸钾(8.4g，83.2mmol)的浓硫酸(40mL)溶液滴加至反应液中，25℃，16小时，倒入冰水中，析出固体，真空干燥得目标化合物9g，产率：72％。
3.2、4-甲氧基-2-甲基-5-硝基苯甲酸的制备
Figure BDA0001734612780000312
将2-甲基-4,5-二硝基苯甲酸(9g,39.8mmol)分批加至氢氧化钾(11g,196.4mmol)的甲醇(200mL)溶液中，加热至70℃，3小时，用2N盐酸调节pH＝3-4，析出固体，过滤，真空干燥得目标化合物(7g，产率：83.3％)。
3.3、4-甲氧基-2-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
Figure BDA0001734612780000313
将4-甲氧基-2-甲基-5-硝基苯甲酸(7.0g,33.2mmol)溶于甲醇(100mL)中，0℃，加入二氯亚砜(8.5g,71.4mmol)，加热至70℃，16小时，旋干，加入200mL乙酸乙酯，饱和碳酸氢钠溶液洗涤，旋干，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)得目标化合物(6.0g,产率:80％)。
3.4、(E)-2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
Figure BDA0001734612780000314
将4-甲氧基-2-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯(5.0g,22.2mmol)，1-叔丁氧基-N,N,N',N'-四甲基甲烷二胺(5.8g,33.3mmol)加热至115℃，3小时，冷却至25℃，加入石油醚:乙酸乙酯＝6:1的混合溶剂(50mL)，过滤，固体真空干燥得目标化合物5.5g，产率:88.7％。
3.5、2-(2,4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000321
将(E)-2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(5.0g,17.8mmol)，2,4-二甲氧基苄胺(4.5g,26.9mmol)溶于甲苯(100mL)中，加热至110℃，反应16小时，旋干溶剂，加入石油醚:乙酸乙酯＝2:1的混合溶剂(80mL)，过滤，固体真空干燥得目标化合物5.5g，产率:91.1％。
3.6、6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000322
将2-(2,4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(5.5g,14.9mmol)溶于三氟乙酸(50mL)中，加热至85℃，3小时，旋干溶剂，加入甲醇(50mL)，旋干，加入乙酸乙酯(60mL)，过滤，固体真空干燥得目标化合物(3.1g，产率:93.9％)。
3.7、6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸甲酯的制备
Figure BDA0001734612780000323
将6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(2.8g,12.7mmol)，6-溴吡啶甲酸甲酯(4.1g,18.9mmol)，碘化亚铜(0.24g,1.26mmol)，磷酸钾(5.4g,25.5mmol)，四甲基乙二胺(0.3g,2.58mmol)，甲苯(100mL)，加热至110℃，16小时，加入甲醇：二氯甲烷＝9:15的混合溶剂(100mL),过滤，固体真空干燥得目标化合物3.0g，产率:66.7％。
3.8、6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰肼的制备
Figure BDA0001734612780000324
将6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸甲酯(600mg,1.7mmol)溶于甲醇(30mL)中，加入一水合肼溶液(3mL)，加热至65℃，16小时，旋干，剩余物直接用于下一步。
3.9、(E)-N'–(6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲脒的制备
Figure BDA0001734612780000331
将6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰肼(粗品,1.7mmol)，N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(20mL)，加热至90℃，反应16小时。旋干，剩余物直接用于下一步。
3.10、2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000332
将(E)-N'–(6-(6-甲氧基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲脒(粗品,1.7mmol)溶于乙酸(1mL)和乙腈(4mL)的混合溶剂中，加入异丙胺(0.5g,8.5mmol)，加热至70℃，16小时，旋干，剩余物柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得目标化合物(0.48g,三步产率:69.6％)。
3.11、7-氨基-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000333
将2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基-7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(0.48g,1.2mmol)加入到甲醇(300mL)中，加入氯化亚锡(1.1g,5.8mmol)，盐酸(1mL)，加热至70℃，16小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，过滤，滤液旋干，剩余物经柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得目标化合物(0.25g,产率:56.8％)。
3.12、7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000341
将7-氨基-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异-1(2H)-酮(0.25g,0.66mmol)，2-溴-1-环丙基乙基-1-酮(0.16g,0.98mmol)溶于甲苯(30mL)，加入N,N-二异丙基乙胺(0.17g,1.3mmol)，加热至95℃,16小时，旋干，剩余物柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得目标化合物(95mg,产率:31.7％)。
3.13、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000342
将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异喹啉-1(2H)-酮(95mg,0.21mmol)溶于乙酸(3mL)中，加入乙酸酐(43mg,0.42mmol)，加热至25℃,16小时，用2N氢氧化钠溶液调pH＝8-9，二氯甲烷(30mL×2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，剩余物直接用于下一步。
3.14、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000343
将N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-甲氧基-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺(粗品,0.21mmol)溶于乙酸(5mL)中，加入乙酸铵(160mg,2.1mmol)，加热至110℃，16小时，旋干，加入碳酸氢钠溶液(10mL)调pH＝8-9，二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相，制备TLC分离(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，得目标化合物46mg，产率：47.4％。
分子式:C26H25N7O2 分子量:467.53 LC-MS(M/e):468.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,d-DMSO)δ:8.92(s,1H),8.15-8.19(m,2H),8.11(s,1H),7.95(dd,J＝7.2Hz,2.0Hz,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(s,1H),7.50(s,1H),7.26(s,1H),6.82(d,J＝7.6Hz,1H),5.27-5.30(m,1H),3.97(s,3H),1.82-1.89(m,1H),1.47(d,J＝6.4Hz,6H),0.76-0.81(m,2H),0.67-0.70(m,2H).
实施例4 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物4)
4.1、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟-3-羟基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的合成
Figure BDA0001734612780000351
将化合物7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮(502mg,2mmol)，1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮化二环2.2.2辛烷双(四氟硼酸)盐(1.42g，4mmol)溶于乙腈(30mL)中，加入水(0.5mL)，回流反应5小时。反应液浓缩，加入水(100mL)，二氯甲烷洗涤三次(100mL×3)，水相浓缩，残留物中加入二氯甲烷和甲醇混合溶剂(二氯甲烷：甲醇＝20:2)，抽滤，滤液浓缩备用。
4.2、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟异喹啉-1(2H)-酮的合成
Figure BDA0001734612780000352
将上步所得粗品溶于二氯甲烷(10mL)中，0℃下加入甲基磺酸(1.25g,13mmol)，10℃反应3小时。浓缩，残留物经反相柱层析(0-35％MeOH)得目标化合物100mg，两步产率18.6％。
分子式：C15H12FN3O 分子量：269.3 LC-MS(M/e):270.1(M+H)
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:9.40(brs,1H),8.55(s,1H),8.12-8.15(m,1H),8.05-8.08(m,1H),7.92(brs,1H),7.37(d,J＝5.6HZ,1H),2.00-2.10(m,1H),1.13-1.16(m,2H),0.92-0.94(m,2H).
4.3、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的合成
Figure BDA0001734612780000361
将化合物7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟异喹啉-1(2H)-酮(100mg,0.37mmol)，2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(99mg,0.37mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(20mg,20％)，三(二亚苄基丙酮)二钯(10mg,10％)和碳酸铯(362mg,1.11mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护下110℃反应15小时。反应液浓缩，加入水(100mL)，二氯甲烷萃取三次(100mL×3)，有机相浓缩，干燥，残留物依次经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)和反相柱层析(0-40％甲醇)得目标化合物15mg，产率8.9％。
分子式：C25H22FN7O 分子量：455.5 LC-MS(M/e):456.2(M+H)
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:9.37(s,1H),8.92(s,1H),8.70(s,1H),8.19-8.24(m,3H),8.10-8.16(m,3H),7.93(s,1H),5.45-5.49(m,1H),2.00-2.10(m,1H),1.58-1.61(m,6H),1.12-1.21(s,2H),0.91-1.00(s,2H).
实施例5 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲基异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物5)
5.1、甲基6-(7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000362
将7-硝基异喹啉-1(2H)-酮(3g,15.8mmol)，甲基6-溴吡啶甲酸酯(4.4g,20.4mmol)，磷酸钾(6.7g,31.6mmol)，四甲基乙二胺(90mg,0.79mmol)和碘化亚铜(0.15g,0.79mmol)加入到甲苯(150mL)中，氮气保护，加热至100℃搅拌反应16小时。冷却至20℃，浓缩至干，加入水(200mL)洗涤，过滤，滤饼用甲醇洗涤，干燥，得目标化合物(1.6g,产率:31.2％)。
5.2、甲基6-(3-甲基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000363
将甲基6-(7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(1.5g,4.61mmol)，甲基三氟硼酸钾(1.7g,13.9mmol)，六氟锑酸银(0.32g,0.93mmol)，氧化银(1.6g,6.91mmol)，二氯(五甲基环戊二烯基)合铑二聚体(0.15g,0.24mmol)溶解到1,2-二氯乙烷(100mL)中，氮气保护，加热至80℃搅拌反应16小时。补加甲基三氟硼酸钾(1.7g,13.9mmol)，六氟锑酸银(0.32g,0.93mmol)，二氯(五甲基环戊二烯基)合铑二聚体(0.15g,0.24mmol)，继续搅拌反应16小时。过滤，滤液浓缩，用硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)得目标化合物(0.25g,产率:16.0％)，回收甲基6-(7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(1.3g)。
5.3、甲基6-(7-氨基-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000371
将甲基6-(3-甲基-7-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(0.63g,1.86mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入三乙胺(1mL)和Pd/C(0.3g)，氢气加压下，20℃搅拌反应3小时。过滤，滤液浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得目标化合物(0.38g,产率66.0％)。
5.4、甲基6-(7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000372
将甲基6-(7-氨基-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(0.37g,1.2mmol)和DIEA(0.31g,2.4mmol)溶于甲苯(10mL)中，加入2-溴-1-环丙基乙-1-酮(0.24g,1.5mmol)，氮气保护，加热至95℃搅拌反应16小时，浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得目标化合物(0.15g,产率32.0％)，回收甲基6-(7-氨基-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(0.22g)。
5.5、甲基6-(7-(N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000373
将乙酸酐(0.37g,3.62mmol)溶于甲酸(5mL)中，20℃搅拌反应30分钟，加入甲基6-(7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(0.28g,0.72mmol)，25℃搅拌反应16小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液中和pH至7。用乙酸乙酯(200mL×5)萃取,合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得目标化合物粗品(0.3g)。
5.6、甲基6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000381
将甲基6-(7-(N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯粗品(0.3g)溶于乙酸中，加入乙酸铵(0.3g,3.89mmol)，氮气保护，加热至110℃搅拌反应16小时，浓缩，所得粗品用中压制备分离纯化得目标化合物(0.2g,两步产率70.0％)。
5.7、6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰肼的制备
Figure BDA0001734612780000382
将甲基6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酸酯(0.2g,0.5mmol)溶于甲醇(5mL)中，加入85％水合肼(2mL)，20℃搅拌反应16小时。浓缩，所得粗品直接用于下一步反应。
5.8、N'-(6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰肼的制备
Figure BDA0001734612780000383
将上一步所得6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰肼粗品溶于DMF-DMA(5mL)中。加热至80℃搅拌反应16小时。浓缩，所得粗品用甲基叔丁基醚洗涤得目标化合物粗品(92mg)。
5.9、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3-甲基异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000391
将N'-(6-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-甲基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰肼粗品(92mg)溶于乙酸(1mL)和乙腈(4mL)的混合溶剂中，加入异丙胺(60mg,1mmol)，加热至95℃反应16小时。浓缩，所得粗品用高压制备纯化得到目标化合物(11mg,三步产率:4.9％)。
分子式：C26H25N7O 分子量：451.5 LC-MS(M/e)：452.3(M+H+)
1H NMR(CD3OD):8.85(s,1H),8.27-8.34(m,3H),8.13(s,1H),7.94-7.97(m,1H),7.79(d,J＝8.4Hz 1H),7.68(dd,J1＝7.6Hz,J2＝1.2Hz,1H),7.42(s,1H),6.75(s,1H),5.37-5.42(m,1H),2.11(s,3H),1.88-1.95(m,1H),1.45-1.55(m,6H),0.88-0.92(m,2H),0.76-0.80(m,2H)。
实施例6 6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备(化合物6)
6.1、5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-2-硝基苯甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000392
将5-溴-2-硝基苯甲酸(3.31g,13.5mmol)，6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(3.0g,14.8mmol)，EDCI(5.15g,26.9mmol)，DMAP(327mg,2.7mmol)加入到吡啶(30mL)中，35℃反应40小时。蒸干加入二氯甲烷(20mL)，抽滤得目标化合物(1.68g,产率:28.9％)。
6.2、2-氨基-5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000401
将5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-2-硝基苯甲酰胺(1.66g,3.8mmol)，铁粉(1.1g,19.6mmol)，氯化铵(610mg,11.4mmol)，水(6mL)，加入异丙醇(24mL)中，80℃搅拌反应16小时，加入甲醇(20mL)，二氯甲烷(20mL)，超声后过滤，滤液蒸干得目标化合物粗品(2.0g)。
6.3、6-溴-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000402
将2-氨基-5-溴-N-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺粗品(1.55g)加入原甲酸三乙酯(20mL)中，143℃反应2小时，冷却析出固体，抽滤得到目标化合物粗品(1.75g)。
6.4、叔丁基(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基)氨基甲酸酯的制备
Figure BDA0001734612780000403
将6-溴-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮粗品(1.75g)，醋酸钯(83mg,0.34mmol)，Xantphos(393mg,0.68mmol)，碳酸铯(2.76g,8.5mmol)，氨基甲酸叔丁酯(597mg,5.1mmol)，加入到1,4-二氧六环(15mL)中，氮气保护，100℃反应16小时，浓缩至干，经硅胶柱层析(洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1：25)得到目标化合物(950mg,三步总产率:55.9％)。
6.5、6-氨基-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000404
将叔丁基(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基)氨基甲酸酯(920mg,2.1mmol)，三氟乙酸(2mL)加入二氯甲烷(6mL)中，12℃反应3小时，浓缩至干，经硅胶柱层析(洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:20)，得到目标化合物(555mg,产率:76％)。
6.6、6-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000411
将6-氨基-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(480mg,1.38mmol)，1-环丙基-2-溴乙酮(225mg,1.38mmol)，DIEA(356mg,2.76mmol)加入到甲苯(18mL)中，90℃反应6小时，浓缩至干，过硅胶柱(洗脱剂为甲醇：二氯甲烷＝1:25)，得到目标化合物(145mg,产率:24.5％)。
6.7、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000412
将乙酸酐(138mg,1.35mmol)用二氯甲烷(1mL)稀释后，0℃下滴入甲酸(2mL)中，0℃搅拌0.5h，将6-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(145mg,0.34mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，然后滴加到上述甲酸溶液中，0℃下反应2h，用氢氧化钠溶液调节pH＝8-9，加入二氯甲烷(15mL)萃取，有机相蒸干得粗品备用。
6.8、6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000413
将N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(3-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基)甲酰胺粗品，乙酸铵(104mg,1.35mmol)，加入冰醋酸(5mL)中，110℃反应20h，用氢氧化钠溶液调节pH＝7-8，加入二氯甲烷(15mL)萃取，有机相蒸干，TLC板(展开剂为甲醇：二氯甲烷＝1:12)得到目标化合物(37mg,两步总产率:24.8％)。
分子式：C24H22N8O 分子量：438.5 LC-MS(M/e)：439.2(M+H+)
1H-NMR(CDCl3)δ:8.58(s,1H),8.47-8.45(d,1H),8.41(s,1H),8.35-8.34(d,1H),8.13-8.09(t,1H),7.97-7.95(d,1H),7.91-7.83(m,3H),7.16(s,1H),5.53-5.46(m,1H),1.98-1.90(m,1H),1.58-1.56(m,6H),0.95-0.89(m,2H),0.87-0.84(m,2H).
实施例7 2-(6-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物7)
7.1、2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
Figure BDA0001734612780000421
将2-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯(7.0g,35.9mmol)溶于1-叔丁氧基-N,N,N',N'-四甲基甲烷二胺(9.4g,53.9mmol)中，加热至115℃下反应2小时。析出固体，过滤，滤饼用石油醚：乙酸乙酯(6:1,60mL)浆洗，过滤，滤饼干燥得目标产物8.1g，产率:90.2％。
7.2、2-(2,4-二甲氧基苄基)-7-硝基-1(2H)-异喹啉酮的制备
Figure BDA0001734612780000422
将2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-5-硝基苯甲酸甲酯(8.1g,32.4mmol)，2,4-二甲氧基苄胺(7.6g,45.4mmol)溶于甲苯(80mL)，加热至125℃反应2.5小时，析出固体，冷却至25℃，过滤，滤饼用石油醚：乙酸乙酯(2:1，100mL)浆洗，过滤，滤饼干燥得目标产物9.0g，产率:81.6％。
7.3、7-氨基-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000423
将2-(2,4-二甲氧基苄基)-7-硝基-1(2H)-异喹啉酮(8.4g,24.7mmol)，锌粉(8.1g,123.8mmol)，氯化铵(7.9g,147.7mmol)依次加入到甲醇(100mL)和水(100mL)中，80℃反应4小时。过滤，滤液加入水(100mL)用二氯甲烷(300mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得目标产物7.4g，产率:96.6％。
7.4、7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000431
7-氨基-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.0g,16.1mmol)，2-溴-1-环丙基乙酮(3.1g,19.0mmol)，DIEA(4.2g,32.6mmol)依次加入到二氯甲烷(30mL)，四氢呋喃(15mL)，甲苯(15mL)中，80℃反应5小时。浓缩，残余物经硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1-1:1)得目标产物3.6g，产率:57.0％。
7.5、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(2,4-二甲氧基苄基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000432
0℃，乙酸酐(5.2g,50.9mmol)滴入甲酸(30mL)中，0.5小时后，再将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.0g,12.7mmol)的二氯甲烷溶液(30mL)滴入到反应体系中，0℃反应16小时。用NaOH(1M)调节pH＝7，二氯甲烷(400mL甲烷)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品5.0g。
7.6、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000433
将N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(2-(2,4-二甲氧基苄基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲酰胺(5.0g,粗品)、乙酸铵(7.5g,97.3mmol)加入乙酸(30mL)中，105℃反应16小时，降至0℃，用NaOH(2M)调节pH＝7，二氯甲烷(150mL甲烷)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品5.1g。
7.7、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000441
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(2,4-二甲氧基苄基)异喹啉-1(2H)-酮(5.1g,粗品)溶于三氟乙酸(30mL)中，90℃反应3小时。浓缩，残余物用乙酸乙酯(50mL)打浆，过滤，滤饼干燥的目标产物2.2g，三步产率:68.9％。
7.8、2-(6-([1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶-2-基)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000442
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮(0.21g,0.84mmol)，3-(6-氯吡啶-2-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶(196mg,0.85mmol)，碳酸铯(0.55g,1.69mmol)，Pd2(dba)3(46mg,0.05mmol)，Xantphos(29mg,0.05mmol)依次加入到二氧六环(50mL)中，120℃反应16小时。浓缩经反相C18柱纯化(水/甲醇＝10％～35％)得目标产物(50mg，产率:13.4％)。
分子式:C26H19N7O 分子量:445.49 LC-MS(M/e):446.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.47(d,J＝5.6Hz,1H),9.39(s,1H),8.55(s,1H),8.45(d,J＝6.8Hz,1H),8.20-9.30(m,1H),7.93-8.13(m,6H),7.52(s,1H),7.16(s,1H),6.95(d,J＝6.0Hz,1H),1.98(s,1H),0.99(m,2H),0.84(s,2H).
实施例8 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物8)
8.1、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-3-羟基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000443
将化合物7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-氟异喹啉-1(2H)-酮(269mg,1mmol)和1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮化二环2.2.2辛烷双(四氟硼酸)盐(709mg,2mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入水(1mL)，60℃反应2小时。待反应结束，反应液浓缩，残留物经中压制备(0-50％甲醇)得目标化合物(122mg,产率40.0％)。
8.2、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000451
7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-3-羟基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(122mg，0.4mmol)、三乙基硅烷(1mL)和三氟乙酸(1mL)加入到微波管中，于70℃下微波反应10小时。待反应结束，残留物经硅胶柱层析纯化(甲醇：二氯甲烷＝1:20)得目标化合物(24mg，产率20.8％)。8.3、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000452
将化合物7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(24mg，0.083mmol)、2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(22mg，0.083mmol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(4mg，20％)、醋酸钯(2mg，10％)和碳酸铯(54mg，0.166mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)中，氮气保护下110℃反应2小时。反应液浓缩，残留物经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)纯化得目标化合物(8mg,产率20.3％)。
分子式：C25H23F2N7O 分子量：475.5 LC-MS(M/e):238.5(M+H/2),475.9(M+H)
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.40(s,1H),8.28(s,1H),8.20(d,J＝7.6Hz),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.98(t,J＝8.0Hz,1H),7.85-7.93(m,2H),7.72-7.78(m,1H),7.15(s,1H),5.40-5.55(m,1H),4.65(t J＝12.0Hz,2H),1.90-1.98(m,1H),1.58-1.63(m,6H),0.85-0.98(m,4H)。
实施例9 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物9)
9.1 7-溴-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000453
将6-溴-4-氟-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(5g,21.8mmol)溶于二氯甲烷(60mL)和甲磺酸(30mL)的混合溶液中，0℃加入叠氮钠(2.1g,32.3mmol)，20℃反应2小时。反应完毕，0℃下缓慢加水淬灭反应，然后加入水(100mL)和二氯甲烷(50mL)，分液，水相用二氯甲烷(50mL×2)萃取，合并有机相，浓缩，残留物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化得产物(2.4g,产率45.3％)。
9.2 2-((苄氧基)甲基)-7-溴-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000461
将7-溴-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(2g,8.2mmol)溶于DMF(20mL)中，加入钠氢(656mg,16.4mmol)，搅拌一小时后加入((氯甲氧基)甲基)苯(1.9g,12.2mmol)，20℃反应4小时。反应完毕，加入100mL水和50mL乙酸乙酯，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，浓缩，残留物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得产物(2.3g,产率76.7％)。
9.3 2-((苄氧基)甲基)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000462
将2-((苄氧基)甲基)-7-溴-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(1.2g,3.3mmol)和环丙基咪唑(356mg,3.3mmol)溶于DMF(6mL)中，加入碘化亚铜(125mg,0.66mmol)、菲啰啉(118mg,0.66mmol)和碳酸钾(910mg,6.6mmol)，氮气保护下，120℃微波反应7小时。过滤，滤液中加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，浓缩，残留物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得产物(680mg,产率52.6％)。
9.4 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000463
将2-((苄氧基)甲基)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(500mg,1.3mmol)溶于TFA(20mL)中，80℃反应36小时。浓缩，残余物中加入二氯(50mL)甲烷和碳酸氢钠溶液(50mL)，搅拌半小时分液，水相用二氯甲烷(20mL×2)萃取，合并有机相，浓缩，残留物经柱层析(乙酸乙酯:甲醇＝20:1)得产物(180mg,产率51.1％)。
9.5 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000471
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-5-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(100mg,0.37mmol)，2-溴-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶(100mg,0.37mmol)、碳酸铯(241mg,0.74mmol)，、Pd(OAc)2(8mg,0.037mmol)和Xphos(35mg,0.073mmol)加入到1,4-二氧六环(10mL)，氮气保护下110℃反应16小时，反应完毕，过滤，滤液浓缩，残余物经TLC分离得到产物(85mg,产率50.3％)。
分子式：C25H24FN7O 分子量：457.5 LC-MS(M/e)：458.2(M+H+)
1HNMR(400MHz,MeOD)δ:8.86(s,1H),8.11(s,1H),8.07-8.08(m,1H),8.03-8.05(m,2H),7.96-7.99(m,1H),7.67-7.70(m,1H),7.40(s,1H),5.48-5.52(m,1H),4.35(t,J＝6.4Hz,2H),3.23(t,J＝6.4Hz,2H),1.80-1.95(m,1H),1.59(d,J＝6.8Hz,1H),0.86-0.90(m,2H),0.74-0.78(m,2H)
实施例10 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物10)
10.1、2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙-1-醇的制备
Figure BDA0001734612780000472
将N'-(6-溴吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺(2.7g,10.0mmol)和醋酸(10mL)加入到乙腈(40mL)，再加入DL-丙氨醇(3.76g,50.0mmol)，升温至95℃反应6小时。体系用氢氧化钠溶液调节pH至8，加入EA(100mL)和饱和氯化钠溶液(80mL)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得产物(1.4g,产率49.5％)。
10.2、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000481
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(200mg,0.79mmol)，2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙-1-醇(223.7mg,0.79mmol)、碳酸铯(514.8mg,1.58mmol)、Pd(OAc)2(17.7mg,0.079mmol)和X-phos(37.7mg,0.079mmol)加入到1,4-二氧六环(20mL)，氮气保护下102℃搅拌反应2小时，体系抽滤，滤液经C18柱层析(水:乙腈＝6:4)纯化得产物(180mg,产率50.1％)。
分子式：C25H25N7O2 分子量：455.5 LC-MS(M/e)：456.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.88(s,1H),8.13-8.05(m,2H),8.05-7.96(m,1H),7.96-7.91(m,2H),7.78-7.71(m,1H),7.55-7.45(m,2H),5.36-5.28(m,1H),5.04-4.98(m,1H),4.23-4.18(m,2H),3.72-3.62(m,2H),1.90-1.78(m,1H),1.47-1.39(m,3H),0.82-0.75(m,2H),0.75-0.68(m,2H)。
实施例11 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-2-(6-(4-(1-羟基丙烷-2基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物14)
11.1、甲基(3-氟苯乙基)氨基甲酸甲酯的制备
Figure BDA0001734612780000482
将2-(3-氟苯基)乙-1-胺(10.0g,71.8mmol)和三乙胺(13.0mL,93.3mmol)溶于二氯甲烷(140mL)中，0℃下加入氯甲酸甲酯(6.1mL,79mmol)，0℃下反应1h，浓缩，硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得产物(10.0g，产率:71％)。
11.2、6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000483
0℃下向甲基(3-氟苯乙基)氨基甲酸酯(9.0g,46mmol)中缓慢加入三氟甲磺酸(45mL,510mmol)，70℃反应25小时，将反应液倒入冰水中(300mL)，二氯甲烷萃取(100mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品直接进行下步反应。
11.3、6-氟-7-硝基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000491
0℃下，向6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(8.26g,粗品)的浓硫酸溶液中(65mL)缓慢加入硝酸钾(6.6g,65mmol)，0℃反应20分钟，将反应液倒入冰水中(200mL)，过滤，水洗(100mL)滤饼，甲醇打浆(20mL)，抽滤干燥得到粗品直接进行下步反应。
11.4、7-氨基-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000492
将6-氟-7-硝基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮粗品(5.0g,23.8mmol)和铁粉(6.7g,119mmol)加入到醋酸(150mL)和四氢呋喃(70mL)中，70℃反应4小时。过滤，滤液浓缩硅胶柱层析得产物(6.5g)。
11.5、7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000493
7-氨基-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(5.8g,32.2mmol)、2-溴-1-环丙基乙酮(3.7g,38mmol)和DIEA(26.4mL,155.5mmol)依次加入到四氢呋喃(55mL)和甲苯(250mL)中，100℃反应16小时。浓缩，硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得产物(5.6g，产率:66％)。
11.6、N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(6-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)甲酰胺的制备
Figure BDA0001734612780000494
0℃，乙酸酐(778mg,7.6mmol)滴入甲酸(10mL)中，0.5小时后，再将7-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(500mg,1.9mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)滴入到反应体系中，0℃反应16小时。用NaOH(1M)调节pH＝7，二氯甲烷(400mL)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩得粗品直接进行下步反应。
11.7、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000501
N-(2-环丙基-2-氧代乙基)-N-(6-氟-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)甲酰胺(500mg,粗品)、乙酸铵(586mg,7.6mmol)加入乙酸(10mL)中，110℃反应16小时，降至0℃，用NaOH(2M)调节pH＝9，乙酸乙酯(500mL×2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品(247mg，两步产率48％)。
11.8、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-2-(6-(4-(1-羟基丙烷-2基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000502
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(100mg,0.37mmol)、2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙烷-1-醇(125mg,0.44mmol)、碳酸铯(240mg,0.74mmol)、Pd(OAc)2(9mg,0.04mmol)和X-phos(38mg,0.08mmol)加入到1,4-二氧六环(20mL)，氮气保护下110℃反应16小时，反应完毕，过滤，滤液浓缩，残余物经TLC分离得到产物粗品，反相制备得产物(32mg,产率18.3％)。
分子式：C25H24FN7O2 分子量：473.5 LC-MS(M/e)：474.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,MeOD)δ:8.82(s,1H),8.19(d,J＝7.6Hz,1H),7.88-8.02(m,4H),7.41(d,J＝10.8Hz,1H),7.21(s,1H),5.45-5.51(m,1H),4.32(t,J＝6.4Hz,2H),3.85(d,J＝5.2Hz,1H),3.23-3.26(m,2H),1.87-1.93(m,1H),1.58(d,J＝6.8Hz,1H),0.86-0.91(m,2H),0.75-0.68(m,2H)。
实施例12(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-2-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物15)
12.1、(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-2-(6-(4-(1-羟基丙烷-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000511
将7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(100mg,0.37mmol)、(R)-2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙烷-1-醇(115mg,0.41mmol)、碳酸铯(240mg,0.74mmol)、Pd(OAc)2(8mg,0.04mmol)和Xphos(35mg,0.07mmol)加入到1,4-二氧六环(10mL)，氮气保护下110℃反应16小时，反应完毕，过滤，滤液浓缩，残余物经TLC分离(二氯甲烷:甲醇＝10:1)纯化得化合物(42mg,产率24％)。
分子式：C25H24FN7O2 分子量：473.5 LC-MS(M/e)：474.2(M+H+)
1HNMR(400MHz,MeOD)δ:8.83(s,1H),8.20(d,J＝7.6Hz,1H),7.96-7.98(m,3H),7.89(s,1H),7.42(d,J＝10.8Hz,1H),7.22(s,1H),5.45-5.51(m,1H),4.33(t,J＝6.4Hz,2H),3.85(d,J＝5.2Hz,1H),3.23-3.26(m,2H),1.87-1.93(m,1H),1.58(d,J＝6.8Hz,1H),0.86-0.91(m,2H),0.75-0.78(m,2H)。
实施例13(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-2-(6-(4-(1-羟丙烷-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物20)
13.1(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-2-(6-(4-(1-羟丙烷-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-34-二氢异喹啉-1(2H)-酮的合成
Figure BDA0001734612780000512
将化合物7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4,4-二氟-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(46mg，0.159mmol)、(R)-2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙烷-1-醇(45mg，0.159mmol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(10mg，20％)、醋酸钯(5mg，10％)和碳酸铯(104mg，0.318mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，氮气保护下110℃反应18小时。反应液浓缩，残留物经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝15:1)纯化得目标化合物(8mg，产率10.2％)。
分子式：C25H23F2N7O2 分子量：491.5 LC-MS(M/e):246.7(M+H/2),492.2(M+H)
1H-NMR(400MHz,MeOD)δ:8.85(s,1H),8.36(s,1H),8.21(d,J＝1.2Hz,1H),8.06-8.15(m,2H),8.00-8.05(m,2H),7.94-7.98(m,1H),7.48(s,1H),5.45-5.55(m,1H),4.78(t,J＝12.0Hz,2H),3.87(d,J＝4.8Hz,2H),1.89-1.96(m,1H),1.60(d,J＝6.8Hz,3H),0.75-0.95(m,4H)。
制备例14 7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物21)
14.1、7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000521
7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮(0.2g,0.79mmol)、2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙-1-醇(225mg,0.79mmol)、碳酸钾(0.21g,1.6mmol)、碘化亚铜(75mg,0.39mmol)和8-羟基喹啉(57mg,0.39mmol)依次加入到DMSO(8mL)中，N2保护100℃反应16小时。将反应液倒入水(50mL)中，过滤，滤饼TLC分离(DCM:MeOH＝10:1)得产品(80mg，产率:22.3％)。
分子式:C25H23N7O2 分子量:453.51 LC-MS(M/e):454.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.82(s,1H),8.35(d,J＝2.0Hz,1H),8.25(s,1H),8.16-8.20(m,2H),8.05-8.08(m,1H),7.97-7.99(dd,J＝2.0Hz,J＝7.2Hz,1H),7.89(d,J＝8.8Hz,1H),7.82(d,J＝7.2Hz,1H),7.64(s,1H),6.86(d,J＝7.6Hz,1H),5.26(q,J＝6.8Hz,1H),5.00(t,J＝5.6Hz,1H),3.67(t,J＝5.6Hz,2H),1.83-1.87(m,1H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H),0.78-0.83(m,2H),0.69-0.73(m,2H)。
实施例15(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备(化合物22)
15.1、(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮的制备
Figure BDA0001734612780000522
7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)异喹啉-1(2H)-酮(0.18g,0.72mmol)、(R)-2-(3-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1,2,4-三唑-4-基)丙-1-醇(202mg,0.72mmol)、碳酸钾(0.3g,2.1mmol)，碘化亚铜(70mg,0.37mmol)和8-羟基喹啉(54mg,0.37mmol)依次加入到DMSO(8mL)中，N2保护100℃反应16小时。将反应液倒入水(50mL)中，过滤，滤饼TLC分离(DCM:MeOH＝8:1)得产品(50mg,产率:15.3％)。
分子式:C25H23N7O2 分子量:453.51 LC-MS(M/e):454.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.71(s,1H),8.35(d,J＝2.0Hz,1H),8.24(s,1H),8.16-8.22(m,2H),8.05-8.08(m,1H),7.96-7.99(dd,J＝1.6Hz,J＝5.1Hz,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,1H),7.82(d,J＝7.2Hz,1H),7.64(s,1H),6.86(d,J＝7.6Hz,1H),5.26(q,J＝6.0Hz,1H),5.00(t,J＝5.2Hz,1H),3.67(t,J＝5.6Hz,2H),1.83-1.87(m,1H),1.43(d,J＝6.4Hz,3H),0.78-0.83(m,2H),0.69-0.73(m,2H).
以下通过体外酶学和细胞抑制活性实验及药代动力学实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。
生物学实验例
实验例1：本发明化合物的体外酶学活性
供试品：本发明实施例合成的化合物，其结构式见表1。
实验材料：
Figure BDA0001734612780000531
试剂配制：
1.kinase detection buffer(激酶检测缓冲液)
a.解冻kinase detection buffer至室温，并观察沉淀是否存在；
b.如果沉淀存在，则在37℃孵育kinase detection buffer，并涡旋15min，溶解沉淀，或从kinase detection buffer中移除沉淀。
2.kinase detection reagent(激酶检测试剂)
a.平衡kinase detection buffer和kinase detection substrate(激酶检测底物)至室温；
b.转移所有体积kinase detection buffer至kinase detection substrate，形成kinase detection reagent；
c.涡旋，混匀，形成均一溶液，kinase detection substrate进入溶液中至少1min。
实验方法：
1、化合物稀释
a.使用DMSO稀释Staurosporine至1mM，本发明化合物至1mM，作为储备液。
b.将Staurosporine及本发明化合物储备液1000倍稀释至1μM。
c.使用TECAN EVO2000系统，3倍梯度稀释Staursporine至11个浓度，最高浓度为1μM，3倍梯度稀释本发明化合物至11个浓度，最高浓度为1μM。
d.使用Echo550分别转移20nLStaurosporine、本发明化合物至384孔板。
2、酶反应实验
1)按表2配制1.3×酶反应体系，该体系中包含激酶，底物以及反应所需因子。
2)向反应孔中加入15μL 1.3×酶反应体系后于室温孵育30分钟。
表2.1.3×酶反应体系
Figure BDA0001734612780000541
3)向每孔中加入5μL 4×ATP溶液(见表3)启动酶反应。
表3.4×ATP溶液
Figure BDA0001734612780000542
4)将反应体系置于25℃反应90分钟后，加入20μL ADP-GloTMReagent孵育40分钟。
5)加入40μL Kinase Detection Regent孵育35分钟，EnSpireTM酶标仪读荧光值。
3、数据分析
使用如下公式计算剩余酶活(％Remaining Activity)：
Remaining Activity(％)＝100％×(Lumcpd-LumLC)/(LumHC-LumLC)
其中，LumHC表示：High control(反应体系含有和化合物检测相同浓度的DMSO)的发光信号强度；
LumLC表示：Low control(Staursporine 1μM)的发光信号强度；
Lumcpd表示：表示供试品化合物的发光信号强度；
采用XLFIT软件进行曲线拟合，得出IC50。
实验结果：
表4本发明化合物对ASK1抑制活性
Figure BDA0001734612780000551
从上述实验结果可以看出，本发明制备的化合物，其能够有效抑制ASK1的氨基酸磷酸化，抑制ASK1的激活，是有效的ASK1抑制剂。
另外，现有技术已经报道，ASK1抑制剂对ASK1介导的疾病及相关疾病有预防和/或治疗作用；也即发明提供的并环类通式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)所示的化合物能够预防和/或治疗上述的ASK1介导的疾病及相关疾病。
实验例2本发明化合物的体外细胞学活性
供试品：本发明实施例合成的化合物，其化学名称、结构式见表1。
实验材料：
Figure BDA0001734612780000552
Figure BDA0001734612780000561
其中：细胞培养基组成：DMEM+10％FBS+1×PS
实验方法：
1、转染
1)取25μL转染试剂Lipofectamine2000与0.7mL Opti-MEM培养基混合，取0.7mLOpti-MEM培养基稀释质粒DNA(pGL4.44(luc2P-AP1-RE-Hygro,AP1 for short)、pcDNA3.1/pcDNA3.1-hASK1)，然后，室温孵育5min。
2)孵育5min后，将质粒DNA混合物加入到转染试剂Lipo2000混合物中，充分混合，并室温孵育20min。
3)将混合后的溶液加入到含HEK-293T细胞的培养皿中进行转染，并放入37℃、5％CO2培养箱中孵育16h。
2、待测化合物稀释及细胞铺板
1)使用DMSO稀释待测化合物至10mM储备液，使用TECAN EVO2000系统，3倍梯度稀释储备液至10个浓度；
2)使用Echo550转移30nL各浓度待测化合物至384孔细胞培养板中；
3)收集转染细胞，进行细胞计数，根据细胞计数的结果，将细胞用培养基稀释至所需密度，然后，取30μL细胞悬液(约10000个细胞)加入到有待测化合物的384孔细胞培养板中，将细胞培养板放入37℃、5％CO2培养箱中孵育24h。
3、检测
1)将步骤2.3的384孔细胞培养板从培养箱中取出，并在室温下平衡15min；
2)实验前，解冻
Figure BDA0001734612780000562
Luciferase reagent，并平衡至室温；
3)加入30μL
Figure BDA0001734612780000563
Luciferase reagent至384孔板，室温孵育10min后进行酶标仪读板。
4、数据分析
1)使用如下公式计算剩余活性(％Remaining Activity)：
Remaining Activity(％)＝100％×(Lumsample-LumNC)/(LumPC-LumNC)
其中，LumPC：ASK1和AP1共转染的多孔发光信号值的平均值；
LumNC：AP1转染的多孔发光信号值的平均值；
Lumsample：表示供试品化合物的发光信号值的平均值；
2)采用XLFIT软件进行曲线拟合，得出IC50值。
实验结果：
表5本发明化合物的体外细胞学活性
Figure BDA0001734612780000571
从上述实验结果可以看出，本发明化合物在体外细胞实验中，本发明化合物能够有效阻断细胞中ASK1的磷酸化，阻断下游通路的激活，因此，本发明化合物能够有效用于治疗由ASK1介导的相关疾病。
实验例3：本发明化合物的C57BL/6小鼠体内药代动力学实验
供试品：本发明部分化合物，自制，其化学名称和制备方法见各化合物的制备实施例。
受试动物：雄性小鼠(C57BL/6)，9只/给药途径/化合物，体重22-26g/只。
供试品溶液制备：
溶解方案：
化合物1 IV给药：2％DMSO+10％PEG400+88％(28％HP-β-CD)
化合物1 PO给药：0.1％SDS+0.5％MC
化合物2 IV给药：2％DMSO+10％PEG400+88％(28％HP-β-CD)
化合物2 PO给药：2％HPC+0.1％Tween80
化合物3 IV给药：3％DMSO+5％PEG400+92％(28％HP-β-CD)
化合物3 PO给药：2％HPC+0.1％Tween80
空白溶媒1的配制：
28％HP-β-CD溶液配制方法：称取HP-β-CD(羟丙基倍他环糊精)(28g)，加入灭菌注射用水(72mL)，得28％HP-β-CD的溶液。
空白溶媒2的配制：
2％HPC+0.1％吐温80的配制：称取HPC(羟丙基纤维素)(30g)，缓慢加入搅拌着的纯化水(1470mL)中，再加入吐温80(1.5mL)，搅拌至澄清。
空白溶媒3的配制：
0.5％MC的配制：称取MC(甲基纤维素)5g，缓慢加入500mL搅拌着的纯化水中，搅拌至澄清透明，再用纯化水定容至1000mL，搅拌均匀。
具体配制方法：
化合物1：
称取化合物1(1.48mg)，加入DMSO(二甲基亚砜)(48.4μL)，超声溶解，再加入PEG400(聚乙二醇400)(242.2μL)，涡旋混匀，最后加入空白溶媒1(2.131mL)，涡旋混匀，配制成浓度为0.6mg/mL的无色透明溶液，此溶液作为化合物1C57BL/6小鼠IV给药药液1；
称取化合物1(1.51mg)和SDS(十二烷基硫酸钠)(4.9mg)，加入空白溶媒3(4.943mL)，研磨，涡旋混匀，配制成浓度为0.3mg/mL的均匀混悬溶液，此溶液作为化合物1C57BL/6小鼠PO给药药液2。
化合物2：
称取化合物2(1.50mg)，加入DMSO(二甲基亚砜)(47.0μL)，涡旋、超声溶解，再加入PEG400(聚乙二醇400)(233μL)，涡旋混匀，最后加入空白溶媒1(2.05mL)，涡旋混匀，置于50℃恒温水浴锅中保温20min，涡旋混匀，配制成浓度为0.6mg/mL的均匀溶液，此溶液作为化合物2C57BL/6小鼠IV给药药液1；
称取化合物2(1.51mg)，加入空白溶媒2(4.691mL)，研磨，混悬均匀，配制成浓度为0.3mg/mL的均匀混悬溶液，此溶液作为化合物2C57BL/6小鼠PO给药药液2。
化合物3：
称取化合物3(1.57mg)，加入DMSO(二甲基亚砜)(72.6μL)，涡旋、超声溶解，再加入PEG400(聚乙二醇400)(121μL)，涡旋混匀，最后加入空白溶媒1(2.230mL)，涡旋混匀，配制成浓度为0.6mg/mL的均匀溶液，此溶液作为化合物3C57BL/6小鼠IV给药药液1；
称取化合物3(1.50mg)，加入空白溶媒2(4.620mL)，研磨，混悬均匀，配制成浓度为0.3mg/mL的均匀混悬溶液，此溶液作为化合物3C57BL/6小鼠PO给药药液2。
实验方法
给药：
将供试品药液按照下表方法给药：
Figure BDA0001734612780000591
采血：
采集时间点：给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h
每个时间点通过眼内眦采集100μL左右的血液，血液采集后放置到含有EDTA-K2抗凝剂的抗凝管中，血液样品在4℃条件下8000转/分钟离心6min得到血浆样品，血浆于-80℃冰箱冻存。
血浆样品分析
对照药与化合物的血浆样品分析均采用蛋白沉淀法：取血浆20μL，加入内标(含甲苯磺丁脲50ng/mL的乙腈溶液)200μL，涡旋10min后，然后4000转/分钟离心20min，取上清液100μL，再加入100μL水，涡旋混匀3min后，LC-MS/MS分析。
实验结果：
表6：C57BL/6小鼠PK评价结果(IV)
Figure BDA0001734612780000592
表7：C57BL/6小鼠PK评价结果(PO)
Figure BDA0001734612780000593
AUCinf代表药时曲线下面积0→∞
CL代表清除率
Vss表示稳态表观分布容积
Tmax代表血药浓度达峰时间
Cmax代表血药浓度达峰浓度
T1/2代表半衰期
F％代表绝对生物利用度
由表6和表7的实验结果可知，本发明化合物具有较高的暴露量和较好的生物利用度，显示出良好的药代动力学性质，具有较好临床应用前景，便于制备成临床上各种剂型。
实验例4本发明化合物的比格犬体内药代动力学实验
供试品：本发明化合物2，自制，其化学名称和制备方法见化合物的制备实施例。
受试动物：雄性比格犬，对照药：3只/给药途径，体重8-11kg/只；化合物：3只/给药途径，体重7-11kg/只。
供试品溶液制备：
溶解方案：
化合物IV给药：5％DMSO+20％PEG400+75％(28％HP-β-CD)
化合物PO给药：2％HPC+0.1％Tween80
空白溶媒1的配制：
28％HP-β-CD溶液配制方法：称取HP-β-CD(羟丙基倍他环糊精)(28g)，加入灭菌注射用水(72mL)，得28％HP-β-CD的溶液。
空白溶媒2的配制：
2％HPC+0.1％吐温80的配制：称取HPC(羟丙基纤维素)(30g)，缓慢加入搅拌着的纯化水(1470mL)中，再加入吐温80(1.5mL)，搅拌至澄清。
具体配制方法：
化合物2：
①称取化合物2(40.49mg)，加入DMSO(二甲基亚砜)(1.99mL)，涡旋溶解，加入PEG400(聚乙二醇400)(7.96mL)，涡旋混匀，再加入空白溶媒1(29.85mL)，涡旋混匀，配制成浓度为1mg/mL的无色透明溶液，此溶液作为化合物比格犬IV给药药液1；
②称取化合物2(80.37mg)，加入空白溶媒2(197.7mL)，研磨，混悬均匀，配制成浓度为0.4mg/mL的均匀混悬液，此溶液作为化合物2比格犬PO给药药液2。
实验方法
给药：
将供试品药液按照下表方法给药：
Figure BDA0001734612780000611
采血：
采集时间点：
化合物IV给药组：给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h；
化合物PO给药组：给药后0.167、0.5、1、2、4、6、8、24h；
每个时间点通过前肢静脉采集400μL左右的血液，血液采集后放置到含有EDTA-K2抗凝剂的抗凝管中，血液样品在4℃条件下8000转/分钟离心6min得到血浆样品，血浆于-80℃冰箱冻存。
血浆样品分析
化合物2的血浆样品分析均采用蛋白沉淀法：取血浆20μL，加入内标(含甲苯磺丁脲50ng/mL的乙腈溶液)200μL，涡旋10min后，然后4000转/分钟离心20min，取上清液100μL，再加入100μL水，涡旋混匀3min后，LC-MS/MS分析。
实验结果：
表8：比格犬PK评价结果(IV)
Figure BDA0001734612780000612
AUCinf代表药时曲线下面积0→∞
CL代表清除率
Vss表示稳态表观分布容积
Tmax代表血药浓度达峰时间
Cmax代表血药浓度达峰浓度
T1/2代表半衰期
F％代表绝对生物利用度
由表8和表9的实验结果可知，在比格犬体内通过IV和PO的方式给予化合物后，结果显示本发明化合物的药代动力学性质良好，具有较高的暴露量、较长的半衰期，口服时具有较高的生物利用度。
以上对明所提供的并环类ASK1抑制剂及其应用进行了详细介绍。本文中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其中心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护。

Claims (14)

1.通式(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，
Figure FDA0003959947240000011
其中，
R1选自任选被1～3个Q1取代的C1-6烷基，每个Q1独立地选自卤素、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、氨酰基、C1-6烷基氨酰基或C1-6烷基氨基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
R3选自氢或卤素；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～3个Q2取代的咪唑基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基、3-6元环烷基，其中所述C1-6烷基、或3-6元环烷基进一步任选地被1～3个卤素取代；
Figure FDA0003959947240000013
选自单键或双键；
并且所述化合物不是如下化合物：
Figure FDA0003959947240000012
Figure FDA0003959947240000021
Figure FDA0003959947240000031
2.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
R1选自任选被1～2个Q1取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基，每个Q1独立地选自卤素、羟基、氨基、甲基、乙基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、甲氨基、乙氨基、氨酰基、甲基氨酰基、乙基氨酰基；
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；
R3选自氢、氟、溴、氯或碘；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～2个Q2取代的咪唑基；
每个Q2独立地选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基，其中所述甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基进一步任选地被1～3个卤素取代。
3.通式(V)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，
Figure FDA0003959947240000041
其中，
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
R3选自氢或卤素；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～3个Q2取代的咪唑基；
每个Q2独立地选自C1-6烷基或3-6元环烷基，其中所述3-6元环烷基进一步任选地被1～3个卤素取代。
4.如权利要求3所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
R2、R4、R6、R7分别独立地选自氢、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基或三氟甲氧基；
R3选自氢、氟、溴、氯或碘；
n选自1或2，当n选自2时，R3可以相同也可以不同；
R5选自任选被1～3个Q2取代的咪唑基；
每个Q2选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基，其中所述环丙基、环丁基、环戊基、环己基进一步任选地被1～3个卤素取代。
5.如权利要求1或权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，所述化合物选自：
Figure FDA0003959947240000042
Figure FDA0003959947240000051
Figure FDA0003959947240000061
6.通式(III)所示化合物的合成方法，其中所述方法包括：
(1)通式(III-1)所示的化合物与通式(III-2)所示的化合物反应，得到通式(III)所示的化合物；
Figure FDA0003959947240000062
或(2)通式(III-3)所示的化合物与通式(III-2)所示的化合物反应，得到通式(III-4)所示的化合物；通式(III-4)所示的化合物中的硝基通过官能团转化反应，得到通式(III)所示的化合物；
Figure FDA0003959947240000063
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、n的定义如权利要求1-2中任一项所述，取代基A选自离去基团，例如卤素。
7.一种药物组合物，其含有权利要求1或权利要求3任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，及任选的一种或多种第二治疗活性剂。
8.如权利要求7所述的药物组合物，其还包含一种或多种药用载体和/或稀释剂。
9.一种药物制剂，其含有权利要求1或权利要求3任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物制剂为临床上或药学上可接受的任一剂型。
10.如权利要求9所述的药物制剂，其为口服制剂或注射剂。
11.如权利要求10所述的药物制剂，其还包含一种或多种第二治疗活性剂。
12.权利要求1或权利要求3任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，或权利要求7所述的药物组合物、或权利要求9所述的药物制剂在制备用于治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病的药物中的用途。
13.如权利要求12所述的用途，所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自心血管疾病、肺部疾病、代谢性疾病、肝胆肾疾病、过度增殖性疾病、神经退行性疾病、中风或炎性肠道疾病。
14.如权利要求13所述的用途，所述心血管疾病选自肺动脉高压、多发性硬化症、动脉粥样硬化、心绞痛、间歇性跛行综合征、心肌梗死、心力衰竭；所述肺部疾病选自哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎或肺气肿；所述代谢性疾病选自糖尿病及其并发症、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇、较高甘油三酯；所述肝胆肾疾病选自糖尿病肾病、非酒精性脂肪肝、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病；所述过度增殖性疾病选自胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌。
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