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CN109456105A - 一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法 - Google Patents

一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法 Download PDF

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CN109456105A
CN109456105A CN201811440023.9A CN201811440023A CN109456105A CN 109456105 A CN109456105 A CN 109456105A CN 201811440023 A CN201811440023 A CN 201811440023A CN 109456105 A CN109456105 A CN 109456105A
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fermentation
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potassium
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CN201811440023.9A
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鲁耀雄
张�浩
彭福元
谢坤英
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Hunan Institute Of Agricultural Environment And Ecology
Original Assignee
Hunan Institute Of Agricultural Environment And Ecology
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Abstract

一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法，它涉及微生物菌剂的技术领域。它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、酵母菌、光合细菌、腐植酸、黄腐酸钾、腐殖酸钾、氨基酸肥料、磷酸氢钾、改性生物质炭、海藻酸、甲壳素、蛋白胨、中微量元素。本发明有益效果为：弥补普通的微生物菌剂只能做底肥施用以及定殖困难的缺点，可以在整个茄科作物的生育期都起到预防连作障碍的根腐病发生，并且施用方便，同时菌剂中的辅料有利于功能微生物的定殖和活性的增强，随茄科作物水肥一体化冲施效果更佳，更好地预防连作中根腐病的发生，促进茄科作物的高产稳产。

Description

一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法
技术领域
本发明涉及微生物菌剂的技术领域，一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法。
背景技术
随着农业产业结构的调整，大量农村劳动力转移，种植业向规模化集约型快速发展，大量的蔬菜种植专业村、专业大户、基地、合作社和企业不断涌现，蔬菜种植面积迅速扩大。在蔬菜种植过程中，由于茄科作物的树形大，结果多产量大，收获期长，栽培方法简单和历史悠久，经济效益好，深受种植户的喜爱。因此，茄科作物栽培面积占比较大。
在辣椒、茄子和西红柿等茄科作物的栽培过程中，由于规模化栽培和栽培经验的限制，种植户或者企业习惯长期连作同一作物，导致茄科作物连作障碍日益加剧，土传病害发生严重，增加了农药使用量，造成蔬菜产品的残留超标，并且降低蔬菜品质。
目前市售的缓解作物连作障碍的微生物菌中的功能微生物由于受气候、土壤特性以及土族微生物的影响，定殖都比较困难，造成了功能微生物在连作土壤中发挥的作用就更加微小了，所以起到的缓解作物连作障碍的作用都不明显。即使有缓解辣椒连作障碍复合微生物菌剂(申请号201510228810.7)，其专利的原料是用牛粪、蜂窝煤渣、凹土由于无法水溶，在底肥中施用较为方便，在后期冲施预防根腐病的发生就不方便了，并且茄科作物连作土壤根腐病高发期都在移栽后发生花期前和尾果期，这两个时期之前是预防茄科作物根腐病的重点。本发明针对设施栽培过程中茄科作物连作障碍严重的问题，可以将本发明的微生物菌剂采用拌种、蘸根、随底肥施入、灌根或随水肥一体化的追肥模式一起施入到根部附近，并可以一次或者多次施用，在茄科作物整个生育期都起到预防连作根腐病的发生，保持土壤的湿润更有利于功能微生物的定殖和其活性保持，减少农药施用，预防连作土传病害的发生，提出了一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂制备及使用方法，可以更好的缓解茄科作物连作障碍，可以蘸根、灌根、拌底肥或者水肥一体化进行追肥，可以一次或者多次施用，弥补普通的微生物菌剂只能做底肥施用以及定殖困难的缺点，可以在整个茄科作物的生育期都起到预防连作障碍的根腐病发生，并且施用方便，同时菌剂中的辅料有利于功能微生物的定殖和活性的增强，随茄科作物水肥一体化冲施效果更佳，更好地预防连作中根腐病的发生，促进茄科作物的高产稳产。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案是：一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌5-40份、枯草芽孢杆菌5-40份、地衣芽孢杆菌1-30份、胶质芽孢杆菌1-30份、酵母菌1-25份、光合细菌1-25份、腐植酸2-25份、黄腐酸钾2-25份、腐殖酸钾1-20份、氨基酸肥料1-15份、磷酸氢钾1-10份、改性生物质炭0.5-8份、海藻酸1-10份、甲壳素0.5-3份、蛋白胨2-8份、中微量元素1-5份。
所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质。
所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分。
所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得。
所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10～20份：10～20份：5～10份：5～10份：1～5份：0.2～3份：0.2～3份：0.5～3份：0.5～2份进行混合；
所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。
一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂的制备方法，它包含以下步骤：
步骤一、甲基营养型芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的甲基营养型芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-40℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L，蛋白胨3.0-8.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，牛肉膏3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，K2HPO40.5-1.0g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.8、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉15.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.5-1g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L，K2HPO40.5-1.0g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到甲基营养型芽孢杆菌发酵液，经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤二、枯草芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：蛋白胨8.0-15.0g/L，酵母膏2.0-5.0g/L，牛肉膏3.0-5.0g/L，葡萄糖3.0-5.0g/L，氯化钠2.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，K2HPO40.3-0.5g/L，FeCl30.01-0.05g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉30.0-50.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖5.0-8.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.5-1.0g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L，K2HPO40.3-0.5g/L，FeCl30.01-0.05g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到枯草芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤三、地衣芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-30℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,K2HPO40.1-0.3g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆15.0-30.0g/L，豆饼粉20.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O.1-0.3g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，pH 6.5-7.5，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到地衣芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤四、胶质芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为18-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖8.0-10.0g/L，蛋白胨8.0-15.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，牛肉膏2.0-5.0g/L，NaH2PO40.2-0.5g/L，MgSO4·7H2O 0.2-0.5g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉20.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.2-0.5g/L，CaCl2·2H2O.2-0.5g/L，K2HPO40.3-0.5g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到胶质芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤五、酵母菌的制备：将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏8.0g/L，蛋白胨20.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L，蛋白胨8.0-10.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.8-1.0g/L，FeSO40.03-0.05g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：绿豆芽50.0-80.0g/L(煮成豆芽汁)，土豆淀粉20.0-30.0g/L，蔗糖8.0-12.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.3g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到酵母菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤六、光合细菌的制备：将保存在-4℃环境下的光合细菌菌株接种至有种子培养基的1L玻璃密闭瓶中，种子培养基：CH3COONa 3.0-5.0g/L，NH4Cl 0.7-1.5g/L，酵母膏0.5-1.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，KH2PO40.5-0.1g/L，K2HPO40.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.3g/L，发酵的初始pH值6.5-7.5,控制在1L的玻璃密闭瓶中、温度28-35℃、光照2800-3600Lx、培养60-90小时，此时将玻璃密闭瓶的发酵液加入到装有发酵培养基的10L玻璃密封瓶中继续发酵，发酵培养基和培养条件跟种子培养基的相同，培养90-120小时，结束发酵，得到光合细菌发酵液；将其经过膜浓缩后，菌体浓度≥10亿CFU/g液体菌剂，备用；
步骤七、氨基酸肥料的制备：氨基酸为商品的动物源氨基酸，以各种海鱼加工厂下脚料、蒸煮浆水为原料，经微生物发酵解和生物降解蛋白质，产生一些新的活性物质后，喷雾干燥加工而成，得到氨基酸肥料，备用；
步骤八、改性生物质炭的制备：改性生物质炭为谷壳经过厌氧不充分燃烧形成的木炭化物质后，再经球磨机球磨成纳米级颗粒，再经过500目的筛网，得到改性生物质炭，备用；
步骤九、中微量元素的制备：所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10～20份：10～20份：5～10份：5～10份：1～5份：0.2～3份：0.2～3份：0.5～3份0.5～2份进行混合，备用；
步骤十、微生物预混料制备：将上述的甲基营养型芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、酵母菌固体菌体粉末，按照一定的重量份数与备用的改性生物质炭、腐植酸先进行混合，然后再取一定的重量份数光合细菌喷洒在混合原料中放置24小时左右混合均匀得微生物预混料，备用；
步骤十一、黄腐酸钾预混料制备：将黄腐酸钾、腐殖酸钾、氨基酸肥料、海藻酸、甲壳素、蛋白胨与磷酸氢钾、中微量元素进行混合搅拌，由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨等很容易吸湿粘稠的特征，可以将大部分的磷酸氢钾和中微量原料进行包埋，起到跟微生物的隔离作用，进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期，备用；
步骤十三、将微生物预混料和黄腐酸钾预混料制备进行搅拌混合均匀，即可得到一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂。
一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂的使用方法可以采用拌种、蘸根、随底肥施入、灌根或随水肥一体化的追肥模式一起施入到根部附近，可以一次或者多次施用，在茄科作物整个生育期都起到预防连作根腐病的发生，水肥一体化条件下更有利于保持土壤的湿润便于于功能微生物的定殖和其活性保持，减少农药施用，预防连作土传病害的发生。
采用上述技术方案后，本发明有益效果为：以甲基营养型芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、酵母菌、光合细菌为菌种，通过菌种的单独发酵浓缩后互配，与改性生物质炭混合，其保护菌剂的保质期和活性的作用，在混合一定份数的黄腐酸钾、腐殖酸钾、氨基酸肥料、海藻酸、甲壳素、蛋白胨、磷酸氢钾、中微量元素的原料，与现有的抗连茬微生物菌剂相比，具有以下优点：(1)本发明的使用的物质大部分水溶，不可溶的物质粒径较小，可以满足灌根或者水肥一体化冲施的要求；(2)本发明的是针对茄科作物连作下容易发生导致镰刀菌、丝核真菌、青枯病菌等滋生，优选针对缓解茄科作物连作障碍的多种微生物菌剂配合，不是简单的配比组合，而是协同作用，同时协同调节土壤的理化性质，形成有益的根际微生态环境，增强茄科作物的抗病性，营养协调，保水，保肥，可以预防茄科作物根腐病害的发生，缓解茄科作物连作障碍；(3)通过微生物菌剂与其他原料的混合，让功能微生物更好的吸附和生活在以改性生物质炭和腐植酸等为载体中，同时利用黄腐酸钾、氨基酸肥料、蛋白胨很容易吸湿粘稠的特征，将其与化学原料进行先混合起到了包裹作用，以及腐植酸和改性生物质炭等对功能微生物起吸附作用，使功能微生物与化肥的更好隔离，有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期；(4)黄腐酸钾、腐植酸、腐植酸钾、改性生物质炭、氨基酸肥料等物质，随着功能微生物一起施入到土壤，有利于功能微生物在土壤中更好地定殖；(5)腐植酸、氨基酸肥料、黄腐酸含有一些活性基团以及功能微生物菌剂在产生一些吲哚酸、赤霉酸等生物活性物质，可刺激作物生长发育、提高酶活力、增强抗病抗逆作用，对生根、促长、保花保果都有一定的作用，有利于茄科作物的稳产高产。(6)甲壳素具有预防地下害虫，预防病毒病的发生，同时海藻酸可以激活作物根系细胞，提高根系活力，生根快，根多根长根白根壮，可以钝化重金属，有效缓解连作障碍、肥害、药害、冻害和盐害等逆境条件，促进茄科作物果实提前成熟。
采用上述技术方案后，本发明有益效果可以更好的缓解茄科作物连作障碍，弥补大部分的微生物菌剂由于采用草炭、谷壳和草木灰等非水溶性物质吸附而冲施困难的缺点，本发明可以满足茄科作物连作条件下进行拌种、蘸根、随底肥施入、灌根或随水肥一体化的追肥模式一起施入到根部附近，可以一次或者多次施用，水肥一体化条件下更有利于保持土壤的湿润便于于功能微生物的定殖和其活性保持，减少农药施用，可以减少茄科作物大棚设施栽培过程中的根腐病病害发生，在连作辣椒的栽培过程中，相对未施微生物菌剂，增产了8.93％，相对防治效果为59.45％。在连作茄子的栽培过程中，相对未施微生物菌剂，增产了8.71％，相对防治效果分别为60.67％。因此，本发明缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂有利于茄科作物的稳产高产，改善品质的作用。
具体实施方式
实施例1
本具体实施方式采用的技术方案是，一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌5份、枯草芽孢杆菌5份、地衣芽孢杆菌1份、胶质芽孢杆菌1份、酵母菌1份、光合细菌1份、腐植酸15份、黄腐酸钾25份、腐殖酸钾10份、氨基酸肥料15份、磷酸氢钾10份、改性生物质炭0.5份、海藻酸2份、甲壳素0.5份、蛋白胨7份、中微量元素1份。
所述的甲基营养型芽孢杆菌12、枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275，地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946，侧孢芽孢杆菌登记号ATCC10249，胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16，酵母菌为产朊假丝酵母菌登记号ATCC22023，光合细菌为沼泽红假单胞菌登记号ATCC17001。
所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质。
所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分。
所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得。
所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10份：10份：5份：5份：1份：0.2份：0.2份：0.5份：0.5份进行混合；
所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾。
一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂的制备方法，它包含以下步骤：
步骤一、甲基营养型芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的甲基营养型芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-40℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母膏-5.0g/L，牛肉膏3.0g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，K2HPO41.0g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.8、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆30.0g/L，豆饼粉30.0g/L，酵母粉5.0g/L，蔗糖3.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，NaH2PO40.5g/L，CaCl2·2H2O 0.2g/L，K2HPO40.5g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到甲基营养型芽孢杆菌发酵液，经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤二、枯草芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：蛋白胨15.0g/L，酵母膏5.0g/L，牛肉膏3.0g/L，葡萄糖5.0g/L，氯化钠3.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3g/L，K2HPO40.3g/L，FeCl30.01g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0g/L，豆饼粉50.0g/L，酵母粉5.0g/L，蔗糖5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，NaH2PO40.5g/L，CaCl2·2H2O 0.1g/L，K2HPO40.3g/L，FeCl30.01g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到枯草芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤三、地衣芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-30℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖10.0g/L,蛋白胨10.0g/L,酵母膏3.0g/L,牛肉膏3.0g/L，MgSO4·7H2O0.3g/L,K2HPO40.3g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0g/L，豆饼粉20.0g/L，酵母粉3g/L，蔗糖3g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，NaH2PO40.3g/L，CaCl2·2H2O.1g/L，K2HPO40.3g/L，pH 6.5-7.5，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到地衣芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤四、胶质芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为18-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖10.0g/L，蛋白胨15.0g/L，酵母膏3.0g/L，蔗糖3.0g/L，牛肉膏5.0g/L，NaH2PO40.5g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆30.0g/L，豆饼粉30.0g/L，酵母粉5.0g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L，NaH2PO40.5g/L，CaCl2·2H20.5g/L，K2HPO4 0.5g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到胶质芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤五、酵母菌的制备：将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏8.0g/L，蛋白胨20.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖10.0g/L，蛋白胨10.0g/L，酵母膏5.0g/L，KCl 1.0g/L，MgSO4·7H2O 1.0g/L，FeSO40.03g/L，接菌量为5-10％，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：绿豆芽50.0g/L(煮成豆芽汁)，土豆淀粉30.0g/L，蔗糖8.0g/L，酵母膏3.0g/L，KCl0.5g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，NaH2PO40.3g/L，CaCl2·2H2O 0.1g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到酵母菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤六、光合细菌的制备：将保存在-4℃环境下的光合细菌菌株接种至有种子培养基的1L玻璃密闭瓶中，种子培养基：CH3COONa 5.0g/L，NH4Cl 0.7g/L，酵母膏0.5g/L，KCl0.5g/L，MgSO4·7H2O 0.3g/L，KH2PO40.5g/L，K2HPO40.3g/L，CaCl2·2H2O 0.1g/L，发酵的初始pH值6.5-7.5,控制在1L的玻璃密闭瓶中、温度28-35℃、光照2800-3600Lx、培养60-90小时，此时将玻璃密闭瓶的发酵液加入到装有发酵培养基的10L玻璃密封瓶中继续发酵，发酵培养基和培养条件跟种子培养基的相同，培养90-120小时，结束发酵，得到光合细菌发酵液；将其经过膜浓缩后,菌体浓度≥10亿CFU/g液体菌剂，备用；
步骤七、氨基酸肥料的制备：氨基酸为商品的动物源氨基酸，以各种海鱼加工厂下脚料、蒸煮浆水为原料，经微生物发酵解和生物降解蛋白质，产生一些新的活性物质后，喷雾干燥加工而成，得到氨基酸肥料，备用；
步骤八、改性生物质炭的制备：改性生物质炭为谷壳经过厌氧不充分燃烧形成的木炭化物质后，再经球磨机球磨成纳米级颗粒，再经过500目的筛网，得到改性生物质炭，备用；
步骤九、中微量元素的制备：所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10份：10份：5份：5份：1份：0.2份：0.2份：0.5份：0.5份进行混合，备用；
步骤十、微生物预混料制备：将上述的甲基营养型芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、酵母菌菌体粉末按照一定的重量份数与备用的改性生物质炭、腐植酸先进行混合，然后再取一定的重量份数光合细菌喷洒在混合原料中放置24小时左右混合均匀得微生物预混料，备用；
步骤十一、黄腐酸钾预混料制备：将黄腐酸钾、腐殖酸钾、氨基酸肥料、海藻酸、甲壳素、蛋白胨与磷酸氢钾、中微量元素进行混合搅拌，由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨等很容易吸湿粘稠的特征，可以将大部分的磷酸氢钾和中微量原料进行包埋，起到跟微生物的隔离作用，进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期，备用；
步骤十三、将微生物预混料和黄腐酸钾预混料制备进行搅拌混合均匀，即可得到一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂。
按照上述方法制得的缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，符合以下指标：
(1)有机质≥45％；
(2)N+P2O5+K2O≥12％；
(3)水份≤25％；
(4)细度≥85％；
(5)杂菌数≤15％；
(6)氨基酸≥1.5％
(7)有效菌数≥10亿个/g；
(8)有效期为≥12个月。
注意事项：本实施例的高有机质复合微生物冲施性肥料做茄科作物设施栽培的追肥冲施施用，施用后适当保持土壤湿润，可以提高本实施例的高有机质复合微生物冲施性肥料的功能和肥效。由于专用肥中含有微生物菌群，不能与杀菌剂或抗菌物质进行混合使用。保存时注意避免强光照射，防止与强酸强碱堆放等。
实施例2：
本具体实施方式采用的技术方案是，一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌20份、枯草芽孢杆菌10份、地衣芽孢杆菌5份、胶质芽孢杆菌5份、酵母菌5份、光合细菌5份、腐植酸15份、黄腐酸钾10份、腐殖酸钾5份、氨基酸肥料5份、磷酸氢钾1份、改性生物质炭3份、海藻酸5份、甲壳素2份、蛋白胨2份、中微量元素2份。
所述的甲基营养型芽孢杆菌12、枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275，地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946，侧孢芽孢杆菌登记号ATCC10249，胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16，酵母菌为产朊假丝酵母菌登记号ATCC22023，光合细菌为沼泽红假单胞菌登记号ATCC17001。
所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质。
所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分。
所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得。
所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比20份：20份：10份：10份：5份：3份：3份：3份：2份进行混合；
所述磷酸氢钾为磷酸氢二钾。
按照上述方法制得的缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，符合以下指标：
(1)有机质≥50％；
(2)N+P2O5+K2O≥8％；
(3)水份≤25％；
(4)细度≥85％；
(5)杂菌数≤15％；
(6)氨基酸≥0.5％
(7)有效菌数≥20亿个/g；
(8)有效期为≥12个月。
本实施例未涉及之处，同实施例1。
实施例3
本实施例生产的微生物菌剂随辣椒水肥一体化施入的实验方案和应用效果：
(1)试验设计
试验在浏阳市沙龙的种植基地大棚栽培(头年栽培是辣椒)进行，供试品种为辣椒精品九号，株距45cm，行距50cm。试验设3个处理：对照1：未施微生物菌剂；对照2：将商品抗连茬的微生物菌剂随底肥一次施用，有效活菌数为10亿/g，用量为4kg/亩；处理1：施入本发明中实施例1所述的微生物菌剂随水肥一体化追肥时施用，有效活菌数为10亿/g，用量为4kg/亩，分别在移栽缓苗期后和最大果实采收期后施入两次，水分管理、施肥量和施肥次数都相同。每处理重复3次，共计9个小区，每小区面积为20m2。详细记录每次采收后的辣椒产量，取初果期测量各小区辣椒的株高(茎基部到生长点的长度)、茎粗(茎基部的粗度)及新发叶数起第五片的SPAD值。产果后期收集根际周围土壤测定细菌、真菌、放线菌，每个小区3点取样，每点调查相连7株，以株为单位根据枯萎病发病程度不同分级调查，记录调查总株数、各级病株数。分级方法：
0级：全株无病；
1级：茎基部轻微变褐，辣椒生长基本正常；
3级：茎基部明显变褐，伴有软化和轻微腐烂；
5级：茎基部明显变褐和腐烂，心叶萎垂卷缩；
7级：茎基部变褐腐烂，全株青枯或黄褐色枯死。
病株率(％)＝病株数/调查总株数×100％；
病情指数(％)＝∑(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×7)×100％；
相对防治效果(％)＝(对照发病率-处理发病率)/对照发病率×100％。
其他未特别说明的指标测定均参考相关国标等方法进行。
(2)主要结果
表1微生物菌剂对连作辣椒生长及产量相关指标的影响
注：表中所列数据为3次重复的平均值，同列数值后不同字母表示差异达显著水平，下同。
由表1可以看出，实施例1处理的连作辣椒树高、树茎粗和每公顷鲜产量都显著高于未施菌剂处理，其每公顷鲜产量比未施微生物菌剂处理增产了8.93％，比普通商品微生物菌剂处理增产了5.29％。说明实施例1在施肥量和施肥次数都相同的情况下，增产效果明显。
表2微生物菌剂对连作辣椒根际微生物的影响
由表2可以看出，实施例1处理的连作辣椒土壤细菌、放线菌都显著未施微生物菌剂和普通商品微生物菌剂处理。主要是实施例1处理微生物菌剂在合适配料和相互协作条件更有利于其在连作土壤中的定殖，从而显著增加土壤细菌和放线菌的数量，增强土壤微生物活性和酶活性，改良土壤结构，有利于土壤中物质的转化，提高土壤的肥力。
表3微生物菌剂对连作辣椒枯萎病病情指数的影响
由表3可以看出，用实施例1制备的微生物菌剂随水肥一体化施入到辣椒土壤中，其连作辣椒的发病率和病情指数都显著低于未施微生物菌剂和施普通商品微生物菌剂，其相对未施微生物菌剂和施普通商品微生物菌剂的相对防治效果分别为59.45％和45.97％。因此，施用本发明的微生物菌剂冲施后，可以促进辣椒的生长，减少连作辣椒枯萎病的发生。
实施例4
本实施例生产的微生物菌剂随茄子水肥一体化施入的实验方案和应用效果：
(1)试验设计
试验在浏阳市沙龙村的种植基地大棚栽培进行(头两年栽培都是茄子)，供试品种为茄子春茄十六号，株距50cm，行距60cm。试验设3个处理：对照1：未施微生物菌剂；对照2：将商品抗连茬的微生物菌剂随底肥一次施用，有效活菌数为10亿/g，用量为4kg/亩；处理1：施入本发明中实施例2所述的微生物菌剂随水肥一体化追肥时施用，有效活菌数为20亿/g，用量为4kg/亩，分别在移栽缓苗期后施入和最大果实采收期后施入，水分管理、施肥量和施肥次数都相同。每处理重复3次，共计9个小区，每小区面积为20m2。详细记录每次采收后的茄子产量，取初果期测量各小区茄子的株高(茎基部到生长点的长度)茎粗(茎基部的粗度)及新发叶数起第五片的SPAD值。产果后期收集根际周围土壤测定细菌、真菌、放线菌，每个小区3点取样，每点调查相连7株，以株为单位根据枯萎病发病程度不同分级调查，记录调查总株数、各级病株数。分级方法：
0级：全株无病；
1级：茎基部轻微变褐，茄子生长基本正常；
3级：茎基部明显变褐，伴有软化和轻微腐烂；
5级：茎基部明显变褐和腐烂，心叶萎垂卷缩；
7级：茎基部变褐腐烂，全株青枯或黄褐色枯死。
病株率(％)＝病株数/调查总株数×100％；
病情指数(％)＝∑(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×7)×100％；
相对防治效果(％)＝(对照发病率-处理发病率)/对照发病率×100％。
其他未特别说明的指标测定均参考相关国标等方法进行。
(2)主要结果
表1微生物菌剂对茄子生长及产量相关指标的影响
注：表中所列数据为3次重复的平均值，同列数值后不同字母表示差异达显著水平，下同。
由表1可以看出，实施例2处理的连作茄子树高、树茎粗和每公顷鲜产量都显著高于未施菌剂处理，其每公顷鲜产量比未施微生物菌剂处理增产了8.71％，比普通商品微生物菌剂处理增产了4.45％。说明实施例1在施肥量和施肥次数都相同的情况下，茄子增产效果明显。
表2微生物菌剂对茄子根际微生物的影响
由表2可以看出，实施例2处理的连作茄子土壤细菌、真菌都显著未施微生物菌剂和普通商品微生物菌剂处理。主要是实施例1处理微生物菌剂在合适配料和相互协作条件更有利于其在连作土壤中的定殖，从而显著增加土壤细菌和真菌的数量，增强土壤微生物活性和酶活性，改良土壤结构，有利于土壤中物质的转化，提高土壤的肥力。
表3微生物菌剂对茄子枯萎病病情指数的影响
由表3可以看出，用实施例2制备的微生物菌剂随水肥一体化施入到茄子土壤中，其连作茄子的发病率和病情指数都显著低于未施微生物菌剂和施普通商品微生物菌剂，其相对未施微生物菌剂和施普通商品微生物菌剂的相对防治效果分别为60.67％和43.57％。因此，施用本发明的微生物菌剂冲施后，可以促进茄子的生长，减少连作茄子枯萎病的发生。
以上所述，仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (7)

1.一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌5-40份、枯草芽孢杆菌5-40份、地衣芽孢杆菌1-30份、胶质芽孢杆菌1-30份、酵母菌1-25份、光合细菌1-25份、腐植酸2-25份、黄腐酸钾2-25份、腐殖酸钾1-20份、氨基酸肥料1-15份、磷酸氢钾1-10份、改性生物质炭0.5-8份、海藻酸1-10份、甲壳素0.5-3份、蛋白胨2-8份、中微量元素1-5份；所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质；所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分；所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得；所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10～20份：10～20份：5～10份：5～10份：1～5份：0.2～3份：0.2～3份：0.5～3份：0.5～2份进行混合；所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。
2.根据权利要求1所述的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，它由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌5份、枯草芽孢杆菌5份、地衣芽孢杆菌1份、胶质芽孢杆菌1份、酵母菌1份、光合细菌1份、腐植酸15份、黄腐酸钾25份、腐殖酸钾10份、氨基酸肥料15份、磷酸氢钾10份、改性生物质炭0.5份、海藻酸2份、甲壳素0.5份、蛋白胨7份、中微量元素1份；所述的甲基营养型芽孢杆菌12、枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275，地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946，侧孢芽孢杆菌登记号ATCC10249，胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16，酵母菌为产朊假丝酵母菌登记号ATCC22023，光合细菌为沼泽红假单胞菌登记号ATCC17001；所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质；所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分；所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得；所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10份：10份：5份：5份：1份：0.2份：0.2份：0.5份：0.5份进行混合；所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾。
3.根据权利要求1所述的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，它由以下重量份数的原材料组成：由以下重量份数的原材料组成：甲基营养型芽孢杆菌20份、枯草芽孢杆菌10份、地衣芽孢杆菌5份、胶质芽孢杆菌5份、酵母菌5份、光合细菌5份、腐植酸15份、黄腐酸钾10份、腐殖酸钾5份、氨基酸肥料5份、磷酸氢钾1份、改性生物质炭3份、海藻酸5份、甲壳素2份、蛋白胨2份、中微量元素2份；所述的甲基营养型芽孢杆菌12、枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275，地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946，侧孢芽孢杆菌登记号ATCC10249，胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16，酵母菌为产朊假丝酵母菌登记号ATCC22023，光合细菌为沼泽红假单胞菌登记号ATCC17001；所述的黄腐酸钾、腐植酸和腐殖酸钾为生化处理后的水溶性物质；所述的海藻酸是以褐藻为原料，采用全细胞物理破碎法，内容物释放，经过浓缩形成海藻精浓缩液后中低温干燥，尽可能保持海藻的天然活性成分；所述的甲壳素是虾蟹等甲壳动物的外壳稀盐酸脱除碳酸钙，用热稀碱脱除蛋白质，再经脱色处理制得；所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比20份：20份：10份：10份：5份：3份：3份：3份：2份进行混合；所述磷酸氢钾为磷酸氢二钾。
4.一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，它包含以下步骤：
步骤一、甲基营养型芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的甲基营养型芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏5.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-40℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L，蛋白胨3.0-8.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，牛肉膏3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，K2HPO4 0.5-1.0g/L，接菌量为5-10%，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.8、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉15.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO4 0.5-1g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L，K2HPO4 0.5-1.0g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到甲基营养型芽孢杆菌发酵液，经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤二、枯草芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：蛋白胨8.0-15.0g/L，酵母膏2.0-5.0g/L，牛肉膏3.0-5.0g/L，葡萄糖3.0-5.0g/L，氯化钠2.0-5.0 g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，FeCl3 0.01-0.05g/L，接菌量为5-10%，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉30.0-50.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖5.0-8.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO4 0.5-1.0g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，FeCl3 0.01-0.05g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到枯草芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤三、地衣芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-30℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,K2HPO4 0.1-0.3g/L，接菌量为5-10%，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆15.0-30.0g/L，豆饼粉20.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO4 0.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O.1-0.3g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，pH 6.5-7.5，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到地衣芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤四、胶质芽孢杆菌的制备：将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为18-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖8.0-10.0g/L，蛋白胨8.0-15.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，蔗糖3.0-5.0g/L，牛肉膏2.0-5.0g/L，NaH2PO4 0.2-0.5g/L，MgSO4·7H2O 0.2-0.5g/L，接菌量为5-10%，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：玉米浆20.0-30.0g/L，豆饼粉20.0-30.0g/L，酵母粉3.0-5.0g/L, MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO4 0.2-0.5g/L，CaCl2·2H2O.2-0.5g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到胶质芽孢杆菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤五、酵母菌的制备：将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h，挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏8.0g/L，蛋白胨20.0g/L，氯化钠5.0g/L，pH 7.2-7.6，在温度为20-35℃的环境下培养24h后，得到所需接种液；将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中，种子培养基：葡萄糖5.0-10.0g/L，蛋白胨8.0-10.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O0.8-1.0g/L，FeSO4 0.03-0.05g/L，接菌量为5-10%，接菌后进行发酵，发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min，通气比例为1:0.6-1.6，当种子罐发酵30-50小时，菌体生长处于对数期，此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵，发酵培养基：绿豆芽50.0-80.0g/L（煮成豆芽汁），土豆淀粉20.0-30.0g/L，蔗糖8.0-12.0g/L，酵母膏3.0-5.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，NaH2PO40.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.3g/L，pH 6.5-7.8，控制条件同种子罐，培养64-96小时，当菌体芽孢形成90-95％时，结束发酵，得到酵母菌发酵液；将其经过膜浓缩后，然后中低温干燥，将其粉碎后，菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末，备用；
步骤六、光合细菌的制备：将保存在-4℃环境下的光合细菌菌株接种至有种子培养基的1L玻璃密闭瓶中，种子培养基：CH3COONa 3.0-5.0g/L，NH4Cl 0.7-1.5g/L，酵母膏0.5-1.0g/L，KCl 0.5-1.0g/L，MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L，KH2PO4 0.5-0.1g/L，K2HPO4 0.3-0.5g/L，CaCl2·2H2O 0.1-0.3g/L，发酵的初始pH值6.5-7.5,控制在1L的玻璃密闭瓶中、温度28-35℃、光照2800-3600Lx、培养60-90小时，此时将玻璃密闭瓶的发酵液加入到装有发酵培养基的10L玻璃密封瓶中继续发酵，发酵培养基和培养条件跟种子培养基的相同，培养90-120小时，结束发酵，得到光合细菌发酵液；将其经过膜浓缩后，菌体浓度≥10亿CFU/g液体菌剂，备用；
步骤七、氨基酸肥料的制备：氨基酸为商品的动物源氨基酸，以各种海鱼加工厂下脚料、蒸煮浆水为原料，经微生物发酵解和生物降解蛋白质，产生一些新的活性物质后，喷雾干燥加工而成，得到氨基酸肥料，备用；
步骤八、改性生物质炭的制备：改性生物质炭为谷壳经过厌氧不充分燃烧形成的木炭化物质后，再经球磨机球磨成纳米级颗粒，再经过500目的筛网，得到改性生物质炭，备用；
步骤九、中微量元素的制备：所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、钼酸铵、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、铈硝酸稀土按照质量比10～20份：10～20份：5～10份：5～10份：1～5份：0.2～3份：0.2～3份：0.5～3份0.5～2份进行混合，备用；
步骤十、微生物预混料制备：将上述的甲基营养型芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、酵母菌固体菌体粉末，按照一定的重量份数与备用的改性生物质炭、腐植酸先进行混合，然后再取一定的重量份数光合细菌喷洒在混合原料中放置24小时左右混合均匀得微生物预混料，备用；
步骤十一、黄腐酸钾预混料制备：将黄腐酸钾、腐殖酸钾、氨基酸肥料、海藻酸、甲壳素、蛋白胨与磷酸氢钾、中微量元素进行混合搅拌，由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨等很容易吸湿粘稠的特征，可以将大部分的磷酸氢钾和中微量原料进行包埋，起到跟微生物的隔离作用，进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期，备用；
步骤十三、将微生物预混料和黄腐酸钾预混料制备进行搅拌混合均匀，即可得到一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂。
5.一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂的使用方法，其特征在于：采用拌种、蘸根、随底肥施入、灌根或随水肥一体化的追肥模式一起施入到根部附近，可以一次或者多次施用，在茄科作物整个生育期都起到预防连作根腐病的发生，水肥一体化条件下更有利于保持土壤的湿润便于于功能微生物的定殖和其活性保持，减少农药施用，预防连作土传病害的发生。
6.根据权利要求1-5所述的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，其特征在于：上述生产的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂随辣椒水肥一体化施入的实验方案和应用效果。
7.根据权利要求1-5所述的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂，其特征在于：上述生产的一种缓解茄科作物连作障碍的微生物菌剂随茄子水肥一体化施入的实验方案和应用效果。
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