CN109485498A - 一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备及使用方法 - Google Patents
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Abstract
一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备及使用方法,它涉及肥料技术领域。它由以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾、硝酸钾、尿素、硫酸钾、全水溶磷酸铵、磷酸氢钾、氨基酸肥料、腐植酸、蛋白胨、浓缩生物发酵液、改性生物质炭、微生物菌剂、中微量元素。本发明有益效果为:在补充无机养分的同时,还补充有机质和功能微生物菌,起到调节土壤微生物群落结构,实现了冲施肥料有机、无机和微生物的有效结合,可以有效缓解土壤连作障碍的发生,减少大棚设施栽培过程中的根腐病病害发生,增加产量,提高农产品的品质。
Description
技术领域
本发明涉及肥料技术领域,具体涉及一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备及使用方法。
背景技术
随着农业产业结构的调整,大量农村劳动力到城市务工,种植业向规模化集约型快速发展,大量的蔬菜种植专业村、专业大户、基地、合作社和企业不断涌现,蔬菜种植面积迅速扩大。在蔬菜种植过程中,由于茄科作物的树形大,结果多产量大,收获期长,栽培方法简单和历史悠久,经济效益好,深受种植户的喜爱。因此,茄科作物栽培面积占比较大。
在辣椒、茄子和西红柿等茄科作物的栽培过程中,由于劳动力成本的限制,种植户为了追求短期效益,采用高肥高水的水肥一体化栽培模式,一茬茄科作物需要冲施水溶性的复合肥多达十来次,这种重用轻养甚至进行掠夺性经营的栽培模式下,致使土壤有机质含量降低,透气性降低,需氧性的微生物活性下降,土壤熟化慢,造成土壤酸化板结,盐渍化加重,土壤中部分微量元素缺失,蔬菜缺素症状较为常见,肥料的利用率极低,并且由于规模化栽培和栽培经验的限制,种植户或者企业习惯长期连作同一作物,导致茄科作物连作障碍日益加剧,土传病害发生严重,增加了农药使用量,造成蔬菜产品的残留超标,降低蔬菜品质。
目前市售的冲施性水溶性肥料大多是尿素、硝酸钾、硫酸钾、水溶性磷酸一铵、磷酸氢二钾等化学原料的混配,容易受潮结块,而且杂质过多,严重影响了水溶肥的销售;并且长期大量的使用化肥,会导致土壤中有机肥力不足,养分比例严重失调,连续重茬导致土壤病虫害发生严重。因此,本发明针对茄科作物水肥一体化的栽培模式,减少化肥农药施用,提高土壤有机质含量,预防连作土传病害的发生,提出了一种茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足,提供一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备及使用方法,在补充无机养分的同时,还补充有机质和功能微生物菌,起到调节土壤微生物群落结构,实现了冲施肥料有机、无机和微生物的有效结合,可以有效缓解土壤连作障碍的发生,减少大棚设施栽培过程中的根腐病病害发生,增加产量,提高农产品的品质。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案是:一种高有机质复合微生物冲施肥料,它由以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾30-85份、硝酸钾5-25份、尿素1-10份、硫酸钾1-10份、全水溶磷酸铵1-10份、磷酸氢钾1-5份、氨基酸肥料4-10份、腐植酸1-5份、蛋白胨0.2-2份、浓缩生物发酵液0.2-2份、改性生物质炭0.2-4份、微生物菌剂0.2-5份、中微量元素0.2-2份;
所述的黄腐酸钾和腐植酸为生化处理后的水溶性物质;所述的氨基酸为商品的动物源氨基酸,是以各种海鱼加工厂下脚料、蒸煮浆水为原料,经微生物发酵解和生物降解蛋白质,产生一些新的活性物质后,喷雾干燥加工而成;所述的浓缩生物发酵液为商品的液体生物发酵液,是通过甘蔗糖蜜、蔗渣等有机资材经过深层液体生物发酵技术而产生;所述的改性生物质炭为谷壳经过厌氧不充分燃烧形成的木炭化物质后,再经球磨机球磨成纳米级颗粒,再经过500目的筛网的材料;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比1~10份:1~10份:1~5份:1~5份:0~1份:0~0.1份进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌按照菌数比1~10份:1~10份:1~10份:0~5份:0~5份进行混合,微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g;所述全水溶磷酸铵为磷酸一铵或磷酸二铵;所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。
一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备方法它包含以下步骤:
步骤一、枯草芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏2.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L,葡萄糖3.0-5.0g/L,氯化钠2.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,K2HPO40.3-0.5g/L,FeCl30.01-0.05g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆20.0-30.0g/L,豆饼粉30.0-50.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L,蔗糖5.0-8.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO40.5-1.0g/L,CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L,K2HPO40.3-0.5g/L,FeCl30.01-0.05g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到枯草芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤二、地衣芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O0.3-0.5g/L,K2HPO40.1-0.3g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆15.0-30.0g/L,豆饼粉20.0-30.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L,蔗糖3-5g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO40.3-0.5g/L,CaCl2·2H2O.1-0.3g/L,K2HPO40.3-0.5g/L,pH 6.5-7.5,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到地衣芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤三、侧孢芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨10.0-15.0g/L、葡萄糖10.0-15.0g/L、氯化钠5.0-10.0g/L、牛肉膏5.0-8.0g/L、氯化钾1.0-5.0g/L、磷酸二氢钾1.0-2.0g/L、硫酸镁0.5-1.0g/L、硫酸亚铁0.01-0.05g/L的液体无菌培养基中,在20-40℃条件下,150-250r/min摇床48-72天后,菌种培养液的OD600值在2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;二级种子培养:按液体无菌培养基的体积比为5-10%的接种量,将一级种子接种到发酵罐中,在20-45℃条件下,搅拌速度为150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,摇床72-120天后,制得二级种子,根据二级种子培养的同样步骤和方法制得三级菌液,经过浓缩后,中低温烘干粉碎后菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤四、酵母菌的制备:将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏8.0g/L,蛋白胨20.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-10.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,KCl 0.5-1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.8-1.0g/L,FeSO40.03-0.05g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:绿豆芽50.0-80.0g/L(煮成豆芽汁),土豆淀粉20.0-30.0g/L,蔗糖8.0-12.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,KCl 0.5-1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO40.3-0.5g/L,CaCl2·2H2O0.1-0.3g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到酵母菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤五、胶质芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为18-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖8.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,蔗糖3.0-5.0g/L,牛肉膏2.0-5.0g/L,NaH2PO40.2-0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.2-0.5g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆20.0-30.0g/L,豆饼粉20.0-30.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O0.3-0.5g/L,NaH2PO40.2-0.5g/L,CaCl2·2H2O.2-0.5g/L,K2HPO40.3-0.5g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到胶质芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤六、微生物菌剂配制:将上述制备的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌固体菌体粉末按照设计的重量比进行混合,备用;
步骤七、微生物吸附料的制备:0.2-5份黄腐酸钾、1-2.5份腐植酸、0.2-2份氨基酸肥料、0.01-0.1份中微量元素、0.2-2份改性生物质炭、0.05-0.1份蛋白胨按照设计的重量份额比混合均匀,备用;
步骤八、微生物的吸附和包埋:将浓缩生物发酵液先与配制好的微生物菌混合均匀,然后再与备用的微生物吸附料混合均匀,备用。由于腐植酸和改性生物质炭对微生物起到吸附和包埋的作用,减少微生物与化学原料的接触,保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤九、化肥原料的包埋方法:将剩余的黄腐酸钾、腐植酸、氨基酸肥料、改性生物质炭、蛋白胨与化肥原料:硝酸钾、尿素、硫酸钾、全水溶磷酸铵、磷酸氢钾、中微量元素按照设计的重量份额比混合均匀,备用。由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨很容易吸湿粘稠的特征,可以将大部分的化学原料进行包埋,起到跟微生物的隔离作用,进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤十、高有机质复合微生物冲施性肥料的配制:将步骤八吸附和包埋好的微生物菌剂混合物,与经过步骤九包埋好的化肥原料等混合均匀,即可制得高有机质复合微生物冲施性肥料。
采用上述技术方案后,本发明有益效果为:是以优选针对抗茄科作物根腐病和调节土壤理化性质的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌和胶质芽孢杆菌为菌种,通过菌种的单独发酵浓缩后互配,以黄腐酸钾、氨基酸肥料等包埋化肥原料硝酸钾、尿素、硫酸钾、全水溶磷酸铵、磷酸氢钾、中微量元素后,与吸附和包埋好的微生物菌剂混合均匀而成,与现有的冲施肥或复合微生物肥相比,具有以下优点:(1)本发明的冲施肥含有机质、无机肥和有益微生物功能菌,弥补有机无机复混肥没有功能微生物的缺点、复合微生物肥有机质含量低的缺点;(2)本发明的是根据茄科作物的生长特性进行研制的茄科作物冲施追肥,使用的大部分原料具有水溶性,而不溶性物质的颗粒细小也成悬浮状,不堵塞冲施喷头,可以满足茄科作物设施栽培过程中冲施肥的要求;(3)优选针对茄科作物根腐病和调节土壤理化性质的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌和胶质芽孢杆菌,不是简单的配比组合,而是协同作用,同时协同调节土壤的理化性质,形成有益的根际微生态环境,增强茄科作物的抗病性,营养协调,保水,保肥,可以预防茄科作物根腐病害的发生;(4)通过微生物菌剂与其他原料的混合进行的吸附和包埋在以改性生物质炭和腐植酸为载体中,起到保护微生物的作用,同时利用黄腐酸钾和氨基酸肥料很容易吸湿粘稠的特征,将其与化学原料进行先混合起到了包埋效果,以及腐植酸和改性生物质炭对功能微生物起吸附作用,使功能微生物与化肥的隔离,进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;(5)黄腐酸钾、腐植酸、改性生物质炭、氨基酸肥料等物质,随着功能微生物一起施入到土壤,有利于功能微生物在土壤中更好地定殖;(6)腐植酸、氨基酸肥料、黄腐酸含有一些活性基团以及功能微生物菌剂在产生一些吲哚酸、赤霉酸等生物活性物质,可刺激作物生长发育、提高酶活力、增强抗病抗逆作用,对生根、促长、保花保果都有一定的作用,有利于茄科作物的稳产高产;
本发明的茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料增产、提质效果十分显著。2017-2018年在浏阳市沙龙村的大棚设施栽培辣椒和茄子大田试验中,使用本发明的茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料与当地习惯施肥方案(全施化肥)和普通复合微生物冲施肥相比,本发明的茄科作物茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料具有茎粗、树旺、增产、肥土、根腐病病害少。在辣椒大棚设施栽培中,相比化肥冲施处理,产量可以提高17.8%,相比普通的复合微生物冲施处理,产量可以提高8.5%。在茄子大棚设施栽培中,相比化肥冲施处理,产量可以提高23.4%,相比普通的复合微生物冲施处理,产量可以提高13.3%。说明施用本发明的茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料,可以减少茄科作物大棚设施栽培过程中的根腐病病害发生,增加产量,提高农产品品质的作用。
具体实施方式
实施例1
本具体实施方式采用的技术方案是:一种茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料,它有以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾65份、硝酸钾5份、尿素3份、硫酸钾3份、磷酸一铵1份、磷酸氢二钾1份、腐植酸5份、氨基酸肥料10份、蛋白胨0.5份、浓缩生物发酵液0.5份、改性生物质炭2份、微生物菌剂4份、中微量元素1份;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比5份:5份:5份:5份:1份:0.1份进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌和胶质芽孢杆菌按照菌数比5份:5份:5份:1份:1份进行混合均匀,枯草芽孢杆菌的登记号为CICC 10275,地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946,侧孢芽孢杆菌ATCC10249,产朊假丝酵母菌ATCC22023,胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16,该微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g;所述全水溶磷酸铵为磷酸一铵;所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾。
一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备方法它包含以下步骤:
步骤一、枯草芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨10.0g/L,酵母膏3.0g/L,牛肉膏5.0g/L,葡萄糖5.0g/L,氯化钠3.0g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,K2HPO40.5g/L,FeCl30.05g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆30.0g/L,豆饼粉50.0g/L,酵母粉5.0g/L,蔗糖8.0g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,NaH2PO41.0g/L,CaCl2·2H2O 0.5g/L,K2HPO40.5g/L,FeCl30.05g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到枯草芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤二、地衣芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖10.0g/L,蛋白胨15.0g/L,酵母膏5.0g/L,牛肉膏5.0g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,K2HPO40.3g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆30.0g/L,豆饼粉30.0g/L,酵母粉5.0g/L,蔗糖5.0g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,NaH2PO40.5g/L,CaCl2·2H20.3g/L,K2HPO40.5g/L,pH 6.5-7.5,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到地衣芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤三、侧孢芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨10.0g/L、葡萄糖10.0g/L、氯化钠5.0g/L、牛肉膏5.0g/L、氯化钾1.0g/L、磷酸二氢钾1.0g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸亚铁0.01g/L的液体无菌培养基中,在20-40℃条件下,150-250r/min摇床48-72天后,菌种培养液的OD600值在2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;二级种子培养:按液体无菌培养基的体积比为5-10%的接种量,将一级种子接种到发酵罐中,在20-45℃条件下,搅拌速度为150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,摇床72-120天后,制得二级种子,根据二级种子培养的同样步骤和方法制得三级菌液,经过浓缩后,中低温烘干粉碎后菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤四、酵母菌的制备:将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏8.0g/L,蛋白胨20.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖5.0g/L,蛋白胨8.0g/L,酵母膏3.0g/L,KCl 0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.8g/L,FeSO40.03g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:绿豆芽50.0g/L(煮成豆芽汁),土豆淀粉20.0g/L,蔗糖8.0g/L,酵母膏3.0g/L,KCl0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.3g/L,NaH2PO40.3g/L,CaCl2·2H2O 0.1g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到酵母菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤五、胶质芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为18-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖8.0g/L,蛋白胨8.0g/L,酵母膏3.0g/L,蔗糖5.0g/L,牛肉膏2.0g/L,NaH2PO40.2g/L,MgSO4·7H2O 0.2g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆30.0g/L,豆饼粉30.0g/L,酵母粉5.0g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,NaH2PO40.2g/L,CaCl2·2H2O.2g/L,K2HPO40.3g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到胶质芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤六、微生物菌剂配制:将上述制备的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌固体菌体粉末按照设计的重量比进行混合,备用;
步骤七、微生物菌剂吸附料的制备:1份黄腐酸钾、5份腐植酸、1份氨基酸肥料、0.01份中微量元素、2份改性生物质炭、0.05份蛋白胨按照设计的重量份额比混合均匀,备用;
步骤八、微生物菌剂的吸附和包埋:将浓缩生物发酵液先与制备好微生物菌剂混合均匀,然后在与备用的微生物菌剂吸附料混合均匀,备用。由于腐植酸和改性生物质炭对微生物起到吸附和包埋的作用,减少微生物与化学原料的接触,保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤九、化肥原料的包埋方法:将剩余的黄腐酸钾、氨基酸肥料、蛋白胨与化肥原料:硝酸钾、尿素、硫酸钾、全水溶磷酸铵、磷酸氢钾、中微量元素按照设计的重量份额比混合均匀,备用。由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨很容易吸湿粘稠的特征,可以将大部分的化学原料进行包埋,起到跟微生物的隔离作用,进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤十、高有机质复合微生物冲施性肥料的配制:将步骤八吸附和包埋好的微生物菌剂混合物,与经过步骤九包埋好的化肥原料等混合均匀,即可制得高有机质复合微生物冲施性肥料。
按照上述方法制得的复合微生物冲施肥,符合以下指标:
(1)有机质≥45%;
(2)N+P2O5+K2O≥15%;
(3)水份≤30%;
(4)杂菌数≤15%;
(5)氨基酸≥8%
(6)有效菌数≥4亿CFU/g;
(7)有效期为≥12个月。
注意事项:本实施例的高有机质复合微生物冲施性肥料做茄科作物设施栽培的追肥冲施施用,施用后适当保持土壤湿润,可以提高本实施例的高有机质复合微生物冲施性肥料的功能和肥效。由于专用肥中含有微生物菌群,不能与杀菌剂或抗菌物质进行混合使用。保存时注意避免强光照射,防止与强酸强碱堆放等。
本实施例的生产的茄科作物高有机质含量复合微生物冲施肥料作为辣椒追肥的实验方案和应用效果:
1、试验设计
试验在浏阳市沙龙的种植基地大棚栽培(头年栽培是辣椒)进行,供试品种为辣椒精品九号,株距45cm,行距50cm。试验设3个处理:处理1:全施化肥(15-15-15的硫酸钾型复合肥)120kg/亩;处理2:施入商品复合微生物冲施肥做追肥施用,22%的养分配比为11-5-6,用量为95.45kg/亩;处理3:施入本发明中实施例1所述的茄科作物高有机质含量水溶性复合微生物冲施肥做追肥施用,22%的养分配比为12-4-6,用量为87.5kg/亩。施肥方案底肥、追肥,三个处理的底肥都采用15-15-15的硫酸钾型复合肥穴施,施入量为50公斤/亩,追肥都是水肥一体化的冲施,分10次进行,从辣椒移栽后返苗后开始追肥,约为15-25d左右,采收一批辣椒果实后就冲施一次,遇下雨或者土壤非常湿润推迟施肥。每个处理的每次施肥量(包括底肥和10次追肥)都相同,商品复合微生物冲施肥和实施例1所述的高有机质含量水溶性复合微生物冲施肥每次追肥时,养分不足的用磷酸氢钾和硫酸钾等水溶性好的化肥补足,即保证每次追肥冲施肥时N=1.05kg/亩、P2O5=1.05kg/亩、K2O=1.05kg/亩,这样就保证每个处理整个生育期施肥量都按照全N=18kg/亩、P2O5=18kg/亩、K2O=18kg/亩等养分计算。每处理重复3次,共计9个小区,每小区面积为15m2。详细记录每次采收后的辣椒产量,取初果期测量各小区辣椒的株高(茎基部到生长点的长度)、树幅、茎粗(茎基部的粗度)及新发叶数起第五片的SPAD值。产果后期收集根际周围土壤测定细菌、真菌、放线菌,同时测定根际周围为体积1m×1m×0.5m的蚯蚓数量,每个小区3点取样,每点调查相连7株,以株为单位根据枯萎病发病程度不同分级调查,记录调查总株数、各级病株数。分级方法:
0级:全株无病;
1级:茎基部轻微变褐,辣椒生长基本正常;
3级:茎基部明显变褐,伴有软化和轻微腐烂;
5级:茎基部明显变褐和腐烂,心叶萎垂卷缩;
7级:茎基部变褐腐烂,全株青枯或黄褐色枯死。
病株率(%)=病株数/调查总株数×100%;
病情指数(%)=∑(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×7)×100%;
相对防治效果(%)=(对照发病率-处理发病率)/对照发病率×100%。
其他未特别说明的指标测定均参考相关国标等方法进行。
2、主要结果
表1不同类型肥料对连作辣椒生长及产量相关指标的影响
注:表中所列数据为3次重复的平均值,同列数值后不同字母表示差异达显著水平,下同。
由表1可以看出,实施例1处理的连作辣椒树高、树茎粗、树幅和每公顷鲜产量都显著高于化肥处理,其每公顷鲜产量比化肥处理增产了17.84%,比复合微生物冲施肥处理增产了8.49%。说明实施例1在施肥养分和施肥方案都相同的情况下,增产效果明显。
表2不同类型肥料对连作辣椒根际微生物和蚯蚓数量的影响
由表3可以看出,实施例1处理的连作辣椒土壤细菌、放线菌、真菌和蚯蚓的数量都显著高于化肥和复合微生物肥冲施肥处理。虽然实施例1真菌的数量显著明显高于其他处理,但是其土壤类型还是以细菌型的微生物数量为主,主要是由于土壤有机质的增多,其土壤微生物数量都显著增加了。因此,实施例1处理微生物数量的显著增加可以提高土壤的肥力,特别是蚯蚓数量的显著增多,可以改良土壤结构,减少了土壤板结,提高土壤孔隙度,优化了土壤质量,增强土壤通透性。
表3不同类型肥料对连作辣椒枯萎病病情指数的影响
由表3可以看出,用实施例1制备的高有机质含量复合微生物冲施肥作为连作辣椒追肥冲施,其连作辣椒的发病率和病情指数都显著低于化肥和商品复合微生物肥,其相对化肥和商品复合微生物肥的相对防治效果分别为74.29%和48.87%。因此,施用本发明的高有机质含量复合微生物冲施肥,可以促进辣椒的生长,减少连作辣椒枯萎病的发生,更适合高肥高水的水肥一体化设施栽培,培土增效。
实施例2
一种茄科作物高有机质复合微生物冲施肥料,它有以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾60份、硝酸钾15份、尿素2份、硫酸钾4份、磷酸二铵5份、磷酸二氢钾2份、腐植酸2份、氨基酸肥料5份、蛋白胨0.5份、浓缩生物发酵液0.5份、改性生物质炭2份、微生物菌剂1份、中微量元素1份;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比2:2:2:2:1:0.05进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌按照菌数比2:2:2:1:1进行混合均匀,枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275,地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946,侧孢芽孢杆菌ATCC10249,产朊假丝酵母菌ATCC22023,胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16,该微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g。所述全水溶磷酸铵为磷酸二铵;所述磷酸氢钾为磷酸氢二钾。
其余的的制备方法和步骤同实施例1相同。
按照上述方法制得的复合微生物冲施肥,符合以下指标:
(1)有机质≥40%;
(2)N+P2O5+K2O≥22%;
(3)水份≤30%;
(4)杂菌数≤15%;
(5)氨基酸≥5%
(6)有效菌数≥1亿CFU/g;
(7)有效期为≥12个月。
注意事项同实施例1。
本实施例生产的茄科作物高有机质含量复合微生物冲施肥料作为茄子追肥的实验方案和应用效果:
1、试验设计
试验在浏阳市沙龙村的种植基地大棚栽培进行(头两年栽培都是茄子),供试品种为茄子春茄十六号,株距50cm,行距60cm。试验设3个处理:处理1:全施化肥(20-10-20的硫酸钾型复合肥)120kg/亩;处理2:施入商品复合微生物冲施肥做追肥施用,22%的养分配比为11-5-6,用量为127.27kg/亩;处理3:施入本发明中实施例1所述的茄科作物高有机质含量水溶性复合微生物冲施肥料做追肥施用,22%的养分配比为12-4-6,用量为116.67kg/亩。施肥方案底肥、追肥,三个处理的底肥都采用20-10-20的硫酸钾型复合肥穴施,施入量为50公斤/亩,追肥都是水肥一体化的冲施,分10次进行,从茄子移栽后返苗后开始追肥,约为15-25d左右,采收一批茄子果实后就冲施一次,遇下雨或者土壤非常湿润推迟施肥。每个处理的每次施肥量(包括底肥和10次追肥)都相同,商品复合微生物冲施肥和实施例2所述的高有机质含量水溶性复合微生物冲施肥每次追肥时,养分不足的用磷酸氢钾和硫酸钾等水溶性好的化肥补足,即保证每次追肥冲施肥时N=1.2kg/亩、P2O5=0.6kg/亩、K2O=1.2kg/亩,这样就保证每个处理整个生育期施肥量都按照全N=24kg/亩、P2O5=12kg/亩、K2O=24kg/亩等养分计算。每处理重复3次,共计9个小区,每小区面积为20m2。详细记录每次采收后的茄子产量,取初果期测量各小区茄子的株高(茎基部到生长点的长度)、树幅、茎粗(茎基部的粗度)及新发叶数起第五片的SPAD值。产果后期收集根际周围土壤测定细菌、真菌、放线菌,同时测定根际周围为体积1m×1m×0.5m的蚯蚓数量,每个小区3点取样,每点调查相连7株,以株为单位根据枯萎病发病程度不同分级调查,记录调查总株数、各级病株数。分级方法:
0级:全株无病;
1级:茎基部轻微变褐,茄子生长基本正常;
3级:茎基部明显变褐,伴有软化和轻微腐烂;
5级:茎基部明显变褐和腐烂,心叶萎垂卷缩;
7级:茎基部变褐腐烂,全株青枯或黄褐色枯死。
病株率(%)=病株数/调查总株数×100%;
病情指数(%)=∑(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×7)×100%;
相对防治效果(%)=(对照发病率-处理发病率)/对照发病率×100%。
其他未特别说明的指标测定均参考相关国标等方法进行。
2、主要结果
表1不同类型肥料对茄子生长及产量相关指标的影响
注:表中所列数据为3次重复的平均值,同列数值后不同字母表示差异达显著水平,下同。
由表1可以看出,实施例2处理的茄子树高、树茎粗、树幅和每公顷鲜产量都显著高于化肥处理,其每公顷鲜产量比化肥处理增产了23.41%,比复合微生物冲施肥处理增产了13.33%。说明实施例2在施肥养分和施肥方案都相同的情况下,茄子的增产效果明显。
表2不同类型肥料对茄子根际微生物和蚯蚓数量的影响
由表2可以看出,实施例2处理的茄子土壤细菌、放线菌、真菌和蚯蚓的数量都显著高于化肥和复合微生物肥冲施肥处理。虽然实施例2真菌的数量显著明显高于其他处理,但是其土壤类型还是以细菌型的微生物数量为主,主要是由于土壤有机质的增多,其土壤微生物数量都显著增加了。因此,实施例2处理微生物数量的显著增加可以提高土壤的肥力,特别是蚯蚓数量的显著增多,可以改良土壤结构,减少了土壤板结,提高土壤孔隙度,优化了土壤质量,增强土壤通透性。
表3不同类型肥料对茄子枯萎病病情指数的影响
由表3可以看出,用实施例2制备的高有机质含量复合微生物冲施肥作为茄子追肥冲施,其茄子的发病率和病情指数都显著低于化肥和商品复合微生物肥,其相对化肥和商品复合微生物肥的相对防治效果分别为78.57%和61.29%。因此,施用本发明的高有机质含量复合微生物冲施肥,可以促进茄子的生长,减少茄子枯萎病的发生,更适合高肥高水的水肥一体化设施栽培,培土增效。以上所述,仅用以说明本发明的技术方案而非限制,本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换,只要不脱离本发明技术方案的精神和范围,均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (6)
1.一种高有机质复合微生物冲施肥料,其特征在于,它由以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾30-85份、硝酸钾5-25份、尿素1-10份、硫酸钾1-10份、全水溶磷酸铵1-10份、磷酸氢钾1-5份、氨基酸肥料4-10份、腐植酸1-5份、蛋白胨0.2-2份、浓缩生物发酵液0.2-2份、改性生物质炭0.2-4份、微生物菌剂0.2-5份、中微量元素0.2-2份;
所述的黄腐酸钾和腐植酸为生化处理后的水溶性物质;所述的氨基酸为商品的动物源氨基酸,是以各种海鱼加工厂下脚料、蒸煮浆水为原料,经微生物发酵解和生物降解蛋白质,产生一些新的活性物质后,喷雾干燥加工而成;所述的浓缩生物发酵液为商品的液体生物发酵液,是通过甘蔗糖蜜、蔗渣等有机资材经过深层液体生物发酵技术而产生;所述的改性生物质炭为谷壳经过厌氧不充分燃烧形成的木炭化物质后,再经球磨机球磨成纳米级颗粒,再经过500目的筛网的材料;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比1~10份:1~10份:1~5份:1~5份:0~1份:0~0.1份进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌按照菌数比1~10份:1~10份:1~10份:0~5份:0~5份进行混合,微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g;所述全水溶磷酸铵为磷酸一铵或磷酸二铵;所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。
2.一种高有机质复合微生物冲施肥料的制备方法,其特征在于,它包含以下步骤:
步骤一、枯草芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏2.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L,葡萄糖3.0-5.0g/L,氯化钠2.0-5.0 g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,K2HPO4 0.3-0.5g/L,FeCl3 0.01-0.05g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度28-35℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆20.0-30.0g/L,豆饼粉30.0-50.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L,蔗糖5.0-8.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO4 0.5-1.0g/L,CaCl2·2H2O 0.1-0.5g/L,K2HPO4 0.3-0.5g/L,FeCl3 0.01-0.05g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到枯草芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤二、地衣芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,K2HPO4 0.1-0.3g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-45℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆15.0-30.0g/L,豆饼粉20.0-30.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L,蔗糖3-5g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO4 0.3-0.5g/L,CaCl2·2H2O.1-0.3g/L,K2HPO4 0.3-0.5g/L,pH 6.5-7.5,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到地衣芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤三、侧孢芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的地衣芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-30℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:蛋白胨10.0-15.0g/L、葡萄糖10.0-15.0g/L、氯化钠5.0-10.0g/L、牛肉膏5.0-8.0g/L、氯化钾1.0-5.0g/L、磷酸二氢钾1.0-2.0g/L、硫酸镁0.5-1.0g/L、硫酸亚铁0.01-0.05g/L的液体无菌培养基中,在20-40℃条件下,150-250r/min摇床48-72天后,菌种培养液的OD600值在2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;二级种子培养:按液体无菌培养基的体积比为5-10%的接种量,将一级种子接种到发酵罐中,在20-45℃条件下,搅拌速度为150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,摇床72-120天后,制得二级种子,根据二级种子培养的同样步骤和方法制得三级菌液,经过浓缩后,中低温烘干粉碎后菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤四、酵母菌的制备:将保存在-4℃环境下的酵母菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏8.0g/L,蛋白胨20.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为20-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖5.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-10.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,KCl 0.5-1.0g/L,MgSO4·7H2O0.8-1.0g/L,FeSO4 0.03-0.05g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.5-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:绿豆芽50.0-80.0g/L(煮成豆芽汁),土豆淀粉20.0-30.0g/L,蔗糖8.0-12.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,KCl 0.5-1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO40.3-0.5g/L,CaCl2·2H2O 0.1-0.3g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到酵母菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥100亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤五、胶质芽孢杆菌的制备:将保存在-4℃环境下的胶质芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h,挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3.0g/L,蛋白胨10.0g/L,氯化钠5.0g/L,pH 7.2-7.6,在温度为18-35℃的环境下培养24h后,得到所需接种液;将接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,种子培养基:葡萄糖8.0-10.0g/L,蛋白胨8.0-15.0g/L,酵母膏3.0-5.0g/L,蔗糖3.0-5.0g/L,牛肉膏2.0-5.0g/L,NaH2PO4 0.2-0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.2-0.5g/L,接菌量为5-10%,接菌后进行发酵,发酵的初始pH值6.8-7.5、温度20-40℃、转速150-250r/min,通气比例为1:0.6-1.6,当种子罐发酵30-50小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,发酵培养基:玉米浆20.0-30.0g/L,豆饼粉20.0-30.0g/L,酵母粉3.0-5.0g/L, MgSO4·7H2O 0.3-0.5g/L,NaH2PO4 0.2-0.5g/L,CaCl2·2H2 O.2-0.5g/L,K2HPO4 0.3-0.5g/L,pH 6.5-7.8,控制条件同种子罐,培养64-96小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,得到胶质芽孢杆菌发酵液;将其经过膜浓缩后,然后中低温干燥,将其粉碎后,菌体浓度≥50亿CFU/g固体粉末,备用;
步骤六、微生物菌剂配制:将上述制备的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌固体菌体粉末按照设计的重量比进行混合,备用;
步骤七、微生物吸附料的制备:0.2-5份黄腐酸钾、1-2.5份腐植酸、0.2-2份氨基酸肥料、0.01-0.1份中微量元素、0.2-2份改性生物质炭、0.05-0.1份蛋白胨按照设计的重量份额比混合均匀,备用;
步骤八、微生物的吸附和包埋:将浓缩生物发酵液先与配制好的微生物菌混合均匀,然后再与备用的微生物吸附料混合均匀,备用;
由于腐植酸和改性生物质炭对微生物起到吸附和包埋的作用,减少微生物与化学原料的接触,保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤九、化肥原料的包埋方法:将剩余的黄腐酸钾、腐植酸、氨基酸肥料、改性生物质炭、蛋白胨与化肥原料:硝酸钾、尿素、硫酸钾、全水溶磷酸铵、磷酸氢钾、中微量元素按照设计的重量份额比混合均匀,备用;
由于黄腐酸钾、氨基酸肥料和蛋白胨很容易吸湿粘稠的特征,可以将大部分的化学原料进行包埋,起到跟微生物的隔离作用,进一步有利于保持功能微生物的活性和延长功能微生物保质期;
步骤十、高有机质复合微生物冲施性肥料的配制:将步骤八吸附和包埋好的微生物菌剂混合物,与经过步骤九包埋好的化肥原料等混合均匀,即可制得高有机质复合微生物冲施性肥料。
3.根据权利要求1所述的一种高有机质复合微生物冲施肥料,它有以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾65份、硝酸钾5份、尿素3份、硫酸钾3份、磷酸一铵1份、磷酸氢二钾1份、腐植酸5份、氨基酸肥料10份、蛋白胨0.5份、浓缩生物发酵液0.5份、改性生物质炭2份、微生物菌剂4份、中微量元素1份;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比5份:5份:5份:5份:1份:0.1份进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌和胶质芽孢杆菌按照菌数比5份:5份:5份:1份:1份进行混合均匀,枯草芽孢杆菌的登记号为CICC 10275,地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946,侧孢芽孢杆菌ATCC10249,产朊假丝酵母菌ATCC22023,胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16,该微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g;所述全水溶磷酸铵为磷酸一铵;所述磷酸氢钾为磷酸二氢钾。
4.根据权利要求1所述的一种高有机质复合微生物冲施肥料,它有以下重量份数的原材料组成:黄腐酸钾60份、硝酸钾15份、尿素2份、硫酸钾4份、磷酸二铵5份、磷酸二氢钾2份、腐植酸2份、氨基酸肥料5份、蛋白胨0.5份、浓缩生物发酵液0.5份、改性生物质炭2份、微生物菌剂1份、中微量元素1份;所述的中微量元素为氨基酸螯合钙、硫酸镁、硫酸锌、硼砂、氨基酸螯合铁、铈硝酸稀土按照质量比2:2:2:2:1:0.05进行混合;所述的微生物菌剂为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌按照菌数比2:2:2:1:1进行混合均匀,枯草芽孢杆菌的登记号为CICC10275,地衣芽孢杆菌登记号为ATCC11946,侧孢芽孢杆菌ATCC10249,产朊假丝酵母菌ATCC22023,胶质芽孢杆菌登记号为GIM1.16,该微生物菌剂的有效菌含量≥100亿CFU/g;所述全水溶磷酸铵为磷酸二铵;所述磷酸氢钾为磷酸氢二钾。
5.根据权利要求1-4所述的一种高有机质复合微生物冲施肥料,其特征在于:所述生产的一种高有机质复合微生物冲施肥料作为辣椒追肥的实验方案和应用效果。
6.根据权利要求1-3、5所述的一种高有机质复合微生物冲施肥料,其特征在于:所述生产的一种高有机质复合微生物冲施肥料作为茄子追肥的实验方案和应用效果。
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