CN103958506A

CN103958506A - 用作突变idh抑制剂的3-嘧啶-4-基-噁唑烷-2-酮化合物

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Publication number: CN103958506A
Application number: CN201280058052.3A
Authority: CN
Inventors: Y·S·赵; J·R·莱维尔; B-B·托雷; F·杨; T·卡费罗; H·雷; F·勒努瓦; G·刘; M·G·巴勒莫; M·D·舒尔茨; T·史密斯; A·Q·科斯塔勒斯; K·B·普菲斯特; M·森齐克; C·谢弗; J·萨顿; Q·赵
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2011-09-27
Filing date: 2012-09-26
Publication date: 2014-07-30
Anticipated expiration: 2032-09-26
Also published as: TWI547493B; AU2012313888A8; AR088175A1; EA201490696A1; AU2012313888B2; NI201400026A; NZ624040A; IL231786A; TN2014000128A1; AU2012313888A1; CU24269B1; UY34352A; MX2014003752A; KR20140069235A; TW201321375A; BR112014007310A2; EP2771337A1; SG11201400989TA; CO6920291A2; AP2014007602A0

Abstract

本发明涉及式(I)化合物或其可药用盐，其中R¹-R⁶如本文中定义。本发明还涉及含有式(I)化合物的组合物和该化合物在抑制具有新变体活性的突变IDH蛋白质中的用途。本发明还涉及式(I)化合物在治疗与这类突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍、包括但不限于细胞增殖性障碍如癌症中的用途。

Description

用作突变IDH抑制剂的3-嘧啶-4-基-噁唑烷-2-酮化合物

发明领域

本发明涉及新的3-嘧啶基-4-基-噁唑烷-2-酮化合物、含有所述化合物的组合物、所述化合物在抑制具有新变体活性(neomorphic activit)的突变IDH蛋白质中的用途和在治疗与这类突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍、包括但不限于细胞增殖性障碍如癌症中的用途。

发明背景

异柠檬酸脱氢酶(IDH)是在细胞代谢中发现的关键酶家族。它们是酶类别EC1.1.1.42的NADP⁺/NAD⁺和金属依赖性氧化还原酶。野生型蛋白质催化异柠檬酸向α-酮戊二酸的氧化脱羧，在该过程中产生二氧化碳和NADPH/NADH。还已知它们将草酰琥珀酸盐转化为α-酮戊二酸。已经在多种癌症类型中鉴别出IDH1(胞质)和IDH2(线粒体)突变，所述癌症类型包括但不限于神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、急性髓性白血病(AML)、前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌、软骨肉瘤、胆管癌、外周T细胞淋巴瘤和黑素瘤(参见L.Deng等人,TrendsMol.Med.,2010,16,387；T.Shibata等人,Am.J.Pathol.,2011,178(3),1395；Gaal等人,J.Clin.Endocrinol.Metab.2010；Hayden等人,Cell Cycle,2009；Balss等人,Acta Neuropathol.,2008)。在活性位点的关键残基处或附近已经发现了突变：对IDH1而言的G97D、R100、R132、H133Q和A134D，对IDH2而言的R140和R172(参见L.Deng等人,Nature,2009,462,739；L.Sellner等人,Eur.J.Haematol.,2011,85,457)。

已经证明IDH的这些突变形式具有新变体活性(还称为功能获得活性)，将α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸(2-HG)(参见P.S.Ward等人,Cancer Cell,2010,17,225)。通常，2-HG的产生是对映异构体特异性的，导致产生D-对映异构体(还称为R对映异构体或R-2-HG)。正常细胞具有低天然水平的2-HG，而包含这些IDH1或IDH2突变的细胞显示出显著升高水平的2-HG。已经在包含突变的肿瘤中检测到高水平的2-HG。例如，已经在患有含突变IDH的AML的患者的血浆中检测到高水平的2-HG(参见S.Gross等人,J.Exp.Med.,2010,207(2),339)。高水平的2-HG与肿瘤发生高度相关。

突变IDH2还与罕见的神经代谢障碍II型D-2-羟基戊二酸尿症(II型D-2-HGA)相关。在15名II型D-2-HGA患者中在IDH2中的R140处发现了种系突变。患有该障碍的患者在他们的尿液、血浆和脑脊髓液中还始终如一地具有升高水平的D-2-HG(参见Kranendijk,M.等人,Science,2010,330,336)。最后，患有奥利埃病(Ollier Disease)和马富奇综合征(MafucciSyndrome)(两种容易罹患软骨肿瘤的罕见障碍)的患者已经被证明在身体上嵌入了IDH1和2突变并且呈现出高水平的D-2-HG(参见Amary等人,Nature Genetics,2011和Pansuriya等人,Nature Genetics,2011)。

因此，需要具有新变体活性的突变IDH蛋白质的小分子抑制剂用于治疗与这些蛋白质相关的疾病和障碍。

发明概述

在一个方面，本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐，

其中R¹-R⁶在本文中定义。

在第二个方面，本发明提供了包含式(I)化合物或其可药用盐以及包含可药用载体或赋形剂的药物组合物。

在第三个方面，本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐用作具有新变体活性、例如将α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸的新变体活性(2-HG新变体活性)的突变IDH蛋白质的抑制剂的用途。适宜地，本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐用作具有新变体活性、例如2-HG新变体活性的突变IDH1和/或具有新变体活性、例如2-HG新变体活性的突变IDH2的抑制剂。本发明还提供了式(I)化合物或其可药用盐用作在残基97、100或132处具有突变、例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L和R132V的IDH1的抑制剂的用途；和/或在残基140或172处具有突变、例如R172K、R172M、R172S、R172G和R172W的IDH2的抑制剂的用途。

在第四个方面，本发明提供了治疗与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用有效量的式(I)化合物或其可药用盐。在一项实施方案中，所述疾病或障碍是细胞增殖性障碍，例如癌症。在另一项实施方案中，癌症是脑癌，例如神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤和幕上原始神经外胚层肿瘤(pNET)；白血病，例如急性髓性白血病(AML)、骨髓发育不良综合征和慢性髓性白血病(CML)；皮肤癌症，包括黑素瘤；前列腺癌；甲状腺癌；结肠癌；肺癌；肉瘤，包括中央型软骨肉瘤、中央型和骨膜软骨瘤；和纤维肉瘤。在另一项实施方案中，所述疾病或障碍是D-2-羟基戊二酸尿症。

在第五个方面，本发明提供了与其它治疗剂组合的式(I)化合物或其可药用盐。

在下述的发明详述中进一步描述了本发明的这些和其它方面。

发明详述

本发明描述了式(I)化合物

式(I)化合物

其中：

R¹和R²各自独立地是氢、氘、卤素、羟基、NH₂、芳基、杂芳基或任选被取代的C_1-4烷基，

其中所述C_1-4烷基任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基和NH₂；

R^3a是氢、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，且

R^3b是氢、氘或C_1-6烷基；或者

R^3a和R^3b连接在一起形成任选被取代的3-7元环烷基环或任选被取代的4-7元杂环，

其中所述环烷基环和杂环各自任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、NH₂和C_1-3烷基；

R^4a是氢、C_1-6烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基(methylene-dibenzene)，

其中所述苯基、苄基和杂芳基环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-4烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b和-NR^bR^b，且

R^4b是氢、氘或C_1-3烷基；或者

R^4a和R^4b连接在一起形成任选被取代的3-7元环烷基环或任选被取代的4-7元杂环，

其中所述环烷基环和杂环任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、NH₂和C_1-3烷基，

条件是，R^3a和R^3b以及R^4a和R^4b中仅有一者连接在一起形成环；

R^5a是氢或氘；

R^5b是氢、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，且

R⁶是任选被取代的C_1-6烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环或任选被取代的C_3-10环烷基，

其中所述C_1-6烷基任选被一个取代基取代，所述取代基选自羟基、C_1-3烷氧基和-OR^a，

其中所述芳基、杂芳基、杂环和C_3-10环烷基任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自：卤素；羟基；氰基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3卤代烷基；C_1-3卤代烷氧基；C_1-6烷基；任选被一至三个取代基取代的C_3-6环烷基，所述取代基各自独立地选自羟基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基和C_1-3卤代烷基；任选被一至三个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b和-NR^bR^b；任选被一至三个取代基取代的5-6元杂芳基，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基；任选被一至三个取代基取代的5-6元杂环，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、NH₂和C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；-SO₂R^a；-SO₂R^b；NHC(O)R^a；-NHC(O)R^b；-C(O)NR^aR^b；-C(O)NHR^b；和-SO₂NR^bR^b；或者

R^5b和R⁶连接在一起形成任选被取代的C_3-7环烷基或任选被取代的式(a)基团：

其中n是1、2或3，且

所述C_3-7环烷基和式(a)基团任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苄氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b和-NR^bR^b；

R^a各自独立地是任选被取代的苯基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环或任选被取代的C_3-7环烷基，

其中所述苯基和杂芳基任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基和C_1-3烷基，

其中所述杂环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-4烷基、C_3-5环烷基、-C(O)R^b和-NR^bR^b；且

其中所述C_3-7环烷基任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基和C_1-3烷基；且

R^b各自独立地是氢或C_1-6烷基。

“烷基”指具有指定碳原子数的单价饱和烃链。例如，C_1-6烷基指具有1至6个碳原子的烷基。烷基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。烷基可以是直链或支链的。代表性的支链烷基具有一个、两个或三个分支。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基(正丙基和异丙基)、丁基(正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)、戊基(正戊基、异戊基和新戊基)和己基。

“烷氧基”指通过氧桥连接的任意烷基部分(即，-O-C_1-3烷基，其中C_1-3烷基如本文所定义)。这类基团的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基和丙氧基。

“芳基”指具有芳族环的烃环系统。芳基是单环系统或双环系统。单环芳基环指苯基。双环芳基环指萘基和其中苯基与乳本文定义的C_5-7环烷基环或C_5-7环烯基环稠合的环。芳基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。

“环烷基”指具有指定碳原子数的饱和烃环系统。环烷基是单环或双环系统。例如，C_5-10环烷基指具有5-10个碳原子的环烷基。环烷基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和金刚烷基。

“环烯基”指具有指定碳原子数和在环中具有碳-碳双键的不饱和烃环系统。例如，C_5-7环烯基指具有5-7个碳原子的环烯基。在一些实施方案中，环烯基在环中具有一条碳-碳双键。在其它实施方案中，环烯基在环中具有多于一条的碳-碳双键。环烯基不是芳香性的。环烯基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。

“卤素”或“卤代”指卤素基团氟、氯、溴和碘。

“卤代烷基”指其中至少一个与烷基内的碳原子连接的氢原子被卤素替换的烷基。卤素取代基的数目包括但不限于1、2、3、4、5或6个取代基。卤代烷基包括但不限于单氟甲基、二氟乙基和三氟甲基。

“卤代烷氧基”指通过氧桥连接的卤代烷基部分(即，-O-C_1-3卤代烷基，其中C_1-3卤代烷基如本文定义)。卤代烷氧基的实例有三氟甲氧基。

“杂芳基”指含有1-5个杂原子的芳族环系统。含有多于一个杂原子的杂芳基可以含有不同的杂原子。杂芳基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。杂芳基可以是单环系统或者是稠合双环系统。单环杂芳基具有5-6个环原子。双环杂芳基具有8-10个成员原子。双环杂芳基包括其中杂芳基环与苯基环稠合的那些环系统。杂芳基包括但不限于吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基(包括1,3,4-噁二唑基和1,2,4-噁二唑基)、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋咱基(furanzanyl)、噻吩基、三唑基、吡啶基(包括2-、3-和4-吡啶基)、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基(trazinyl)、四嗪基、四唑基(tetrzolyl)、吲哚基(indonyl)、异吲哚基、吲嗪基、吲唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、苯并吡喃基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、萘啶基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基等。

“杂原子”指氮、氧或硫原子。

“杂环”指含有1-4个杂原子的3-11元饱和或不饱和单环或双环。杂环系统不是芳香性的。含有多于一个杂原子的杂环基可以含有不同的杂原子。杂环包括其中硫原子被氧化形成SO或SO₂的环系统。杂环基可以任选被一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。杂环基包括单环、螺环或者稠合或桥连双环系统。单环杂环基具有3-7个环原子。单环杂环基的实例包括氧杂环丁烷(oxtanyl)、四氢呋喃基、二氢呋喃基、1,4-二噁烷基、吗啉基、1,4-二噻烷基、哌嗪基、哌啶基、1,3-二氧戊环基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡咯烷基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、氧杂硫杂环戊基、二硫杂环戊基、1,3-二噁烷基、1,3-二噻烷基、氧杂硫杂环己基、硫吗啉基、四氢噻喃1,1-二氧化物、1,4-二氮杂环庚基等。稠合杂环系统具有8-11个环原子，包括其中杂环与苯基环、杂芳基环或另一个杂环稠合的基团。稠合杂环的实例包括2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯基、八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氢吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氢吡咯并[3,4-c]吡咯基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、5,6,7,8-四氢-咪唑并[1,2-a]吡嗪基等。桥连杂环基的实例包括3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂-双环[4.2.0]辛基等。螺杂环基的实例包括4,7-二氮杂-螺[2.5]辛基等。

“4-7元杂环”指具有4-7个环原子并且含有1-4个杂原子的如上文定义的杂环基团。

“5-6元杂环”指具有5或6个环原子并且含有1-4个杂原子的如上文定义的杂环基团。

“任选被取代”表示基团如烷基、环烷基、杂芳基、杂环、苯基和苄基可以是未取代的或者基团可以一个或多个如式(I)中所定义的取代基取代。

“氧代基”指C＝O基团。

“可药用”指适于药物用途的化合物。适用于药物的本发明的化合物的盐和溶剂合物(例如水合物和盐的水合物)是其中抗衡离子或相关溶剂是可药用的那些。但是，具有不可药用的抗衡离子或相关溶剂的盐和溶剂合物也在本发明的范围内，例如用作制备本发明的其它化合物及其可药用的盐和溶剂合物的中间体。

涉及基团如烷基、苯基、苄基、杂芳基和杂环的“取代”表示一个或多个与基团内的原子连接的氢原子被取代基所替换，所述取代基选自所定义的取代基集合。可以理解，术语“取代”包括如下隐含条件：这类取代符合被取代原子和取代基所允许的价键，并且所述取代产生稳定的化合物(即，不自发地进行转化、例如通过水解、重排、环化或消除进行转化并且足够稳健以从反应混合物分离出的化合物)。当声称基团可以含有一个或多个取代基时，基团内的一个或多个(当适当时)原子可以被取代。另外，基团内的单一原子可以被多于一个取代基所取代，只要该取代符合原子所允许的价键。对于各个取代或任选被取代的基团定义了适宜的取代基。

本领域技术人员将理解，可以制备式(I)化合物的盐、包括可药用盐。这些盐可以在化合物的最终分离和纯化期间原位制备，或者通过使游离酸或碱形式的纯化化合物分别与适宜的碱或酸反应来分离地制备。

可以用无机酸和有机酸形成可药用的酸加成盐，例如乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱酸盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。

盐可以由其衍生的无机酸例如包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。

盐可以由其衍生的有机酸例如包括乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。可以用无机碱和有机碱形成可药用的碱加成盐。

盐可以由其衍生的无机碱例如包括铵盐和来自元素周期表的第I-XII栏的金属。在一些实施方案中，盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜；特别适宜的盐包括铵、钾、钠、钙和镁盐。

盐可以由其衍生的有机碱例如包括伯、仲和叔胺、取代的胺、包括天然存在的取代的胺、环胺、碱性离子交换树脂等。一些有机胺包括异丙胺、二苄乙二胺(benzathine)、胆碱酸盐(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨丁三醇。

本发明的可药用盐可以由碱性或酸性部分通过常规化学方法来合成。通常，这类盐可以通过使这些化合物的游离酸形式与化学计算量的适当碱(例如Na、Ca、Mg或K的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应来制备，或者通过使这些化合物的游离碱形式与化学计算量的适当酸反应来制备。这类反应通常在水或有机溶剂或这二者的混合物中进行。通常，当可行时,非水介质如(乙)醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈的使用是期望的。另外的适宜盐的目录可以例如在Remington's Pharmaceutical Sciences,第20版,马克(Mack)出版公司,Easton,Pa.,(1985)和Stahl和Wermuth的Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use(Wiley-VCH,Weinheim,德国,2002)中找到。

还可以制备式(I)化合物的溶剂合物、包括可药用溶剂合物。“溶剂合物”指溶质和溶剂形成的具有不同化学计算量的复合物。用于本发明的目的的这类溶剂不能干扰溶质的生物活性。适宜溶剂的实例包括但不限于水、MeOH、EtOH和AcOH。其中水是溶剂分子的溶剂合物通常称为水合物。水合物包括含有化学计算量的水的复合物以及含有可变量水的复合物。

式(I)化合物、包括其盐和溶剂合物可以以结晶形式、非结晶形式或其混合物存在。化合物或其盐或溶剂合物还可以呈现出多晶现象，即，能够以不同的结晶形式存在。这些不同的结晶形式通常称为“多晶型物”。多晶型物具有相同的化学组成，但是在结晶固体状态的堆积、几何安排和其它描述性性质方面不同。因此，多晶型物可以具有不同的物理性质如形状、密度、硬度、可变形性、稳定性和溶出性质。通常，多晶型物呈现不同的熔点、IR光谱和X-射线粉末衍射图，所有这些可以用于鉴定。本领域技术人员将理解，可以生产不同的多晶型物，例如通过改变或调整式(I)化合物结晶/重结晶所用的条件。

本发明还包括式(I)化合物的各种异构体。“异构体”指具有相同组成和分子量、但是物理和/或化学性质不同的化合物。结构差异可以是构造(几何异构体)或旋转偏振光的平面的能力(立体异构体)。关于立体异构体，式(I)化合物可以具有一个或多个不对称碳原子并且可以作为外消旋体、外消旋混合物和作为单独的对映异构体或非对映异构体而存在。所有这些异构形式、包括其混合物都包括在本发明内。如果化合物含有双键，则取代基可以是E或Z构型。如果化合物含有二取代的环烷基，则环烷基取代基可以具有顺式或反式构型。还意欲包括所有的互变异构形式。

式(I)化合物的任意不对称原子(例如碳等)可以以外消旋的或对映异构体富含的形式、例如以(R)-、(S)-或(R,S)-构型存在。在一些实施方案中，在(R)-或(S)构型中不对称原子各自具有至少50％对映异构过量、至少60％对映异构过量、至少70％对映异构过量、至少80％对映异构过量、至少90％对映异构过量、至少95％对映异构过量或至少99％对映异构过量。如果可能的话，在具有不饱和双键的原子处的取代基可以以顺式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。

因此，如本文所用的式(I)化合物可以是可能的异构体、旋转异构体、阻转异构体、互变异构体或其混合物之一的形式，例如作为基本上纯的几何(顺式或反式)异构体、非对映异构体、旋光异构体(对映体)、外消旋物或其混合物。

可以根据组分的物理化学差异、例如通过色谱法和/或分步结晶将任意的所得异构体混合物分离为纯的或基本上纯的几何或旋光异构体、非对映异构体、外消旋物。

可以通过已知方法将任意的所得终产物或中间体的外消旋物拆分为旋光对映体，例如通过分离用具有旋光活性的酸或碱得到的其非对映异构的盐并且释放具有旋光活性的酸性或碱性化合物来进行。特别是碱性部分可以由此用于将本发明的化合物拆分为其旋光对映体，例如通过将用具有旋光活性的酸所形成的盐进行分步结晶而进行拆分，所述的具有旋光活性的酸例如有酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二乙酰基酒石酸、二-O,O'-对-甲苯酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸。还可以通过手性色谱法、例如使用手性吸附剂进行的高压液相色谱法(HPLC)来拆分外消旋产物。

本发明包括式(I)化合物的未标记形式以及同位素标记的形式。同位素标记的化合物具有本文给出的式子所描绘的结构，例外的是一个或多个原子被具有所选原子质量或质量数的原子所代替。可以掺入本发明的化合物内的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、¹²⁵I。本发明包括各种同位素标记的如本文所定义的化合物，例如其中存在放射活性同位素如³H和¹⁴C的那些或者其中存在非放射活性同位素如²H和¹³C的那些。这类同位素标记的化合物可用于代谢研究(用¹⁴C)、反应动力学研究(用例如²H或³H)、检测或成像技术如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)、包括药物或底物组织分布分析或用于患者的放射性治疗。具体而言，¹⁸F或标记的化合物可以是PET或SPECT研究所特别希望的。同位素标记的式(I)化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于所附实施例和制备例中所述那些的方法、采用适当的同位素标记的试剂代替以前采用的未标记试剂来制备。

而且，用较重的同位素、特别是氘(即²H或D)取代可以提供一些治疗优势，这是由于代谢稳定性较高所致，例如体内半衰期增加或剂量需求减少或治疗指数改善。可以理解，本文中的氘被视为是式(I)化合物的取代基。该较重同位素、特别是氘的浓度可以通过同位素富集因子来定义。如本文所用的术语“同位素富集因子”表示指定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比值。如果本发明的化合物中的取代基是氘，则该化合物对各指定的氘原子而言具有的同位素富集因子为至少3500(在各指定的氘原子上52.5％氘掺入)、至少4000(60％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入)、至少6466.7(97％氘掺入)、至少6600(99％氘掺入)或至少6633.3(99.5％氘掺入)。

代表性实施方案

本文描述了本发明的各种实施方案。可以认识到，各实施方案中指定的特征可以与其它指定的特征组合以提供其它实施方案。

本发明的一项实施方案是如下定义的式(I)化合物，其中：

R^3a是氢、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，且

R^3b是氢、氘或C_1-6烷基；或者

其中所述环烷基环和杂环任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、NH₂和C_1-3烷基；

R^4a是氢、C_1-6烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基，

其中所述苯基、苄基和杂芳基环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b和NR^bR^b，且

R^4b是氢、氘或C_1-3烷基；或者

R^5a是氢或氘；

R^5b是氢、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，且

R⁶是任选被取代的C_1-6烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环或任选被取代的C_5-10环烷基，

其中所述C_1-6烷基任选被一个取代基取代，所述取代基选自羟基、C_1-3烷氧基和-OR^a；

其中所述芳基、杂芳基、杂环和C_5-10环烷基任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自：卤素；羟基；氰基；硝基；C_1-3烷氧基；C_1-3卤代烷基；C_1-3卤代烷氧基；C_1-6烷基；C_3-6环烷基；任选被一至三个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b和NR^bR^b；5-6元杂芳基；任选被一至三个取代基取代的5-6元杂环，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、NH₂和C_1-3烷基；-CH₂R^a；-OR^a；-C(O)R^a；-NR^aR^b；-COOR^a；-SO₂R^a；NHC(O)R^a；和-SO₂NR^bR^b；或者

其中n是1、2或3，且

所述C_3-7环烷基和式(a)基团任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苄氧基、COOR^b、SO₂R^b、NHC(O)R^b和NR^bR^b；

R^a各自独立地是任选被取代的苯基、任选被取代的杂芳基或任选被取代的4-7元杂环，

其中所述4-7元杂环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氧代基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基和C_1-3烷基；且

R^b各自独立地是氢或C_1-6烷基。

在本发明的另一项实施方案中，R¹是氢、卤素或任选被取代的C_1-4烷基。适宜地，R¹是氢、氟、氯或甲基。在另一项实施方案中，R¹是氢、氟或氯。适宜地，R¹是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R²是氢、卤素或任选被取代的C_1-4烷基。适宜地，R²是氢、氟、氯或甲基。在另一项实施方案中，R²是氢或氟。在本发明的另一项实施方案中，R²是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R¹和R²均是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R^3a是氢、C_1-6烷基或苯基。适宜地，R^3a是氢、甲基或苯基。适宜地，R^3a是氢或甲基。适宜地，R^3a是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R^3b是氢或甲基。适宜地，R^3b是氢。

在另一项实施方案中，R^3a和R^3b均是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R^3a和R^3b连接在一起形成氧杂环丁基或四氢-2H-吡喃基。

本发明的另一项实施方案是式(II)化合物。

在本发明的另一项实施方案中，R^4a是氢、C_1-6烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基，

其中所述苯基、苄基和杂芳基环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、-COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b和-NR^bR^b。

在本发明的另一项实施方案中，R^4a是氢、C_1-4烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基。适宜地，R^4a是氢、C_1-4烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的吡啶基或二苯基甲基。更适宜地，R^4a是氢、甲基、异丙基、异丁基、叔丁基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、苄基或二苯基甲基。在另一项实施方案中，R^4a是氢、甲基、乙基、异丙基、苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、联苯基、苄基或吡啶基。适宜地，R^4a是异丙基。

在本发明的另一项实施方案中，R^4b是氢或甲基。适宜地，R^4b是氢。

在另一项实施方案中，R^4a是异丙基且R^4b是甲基。在另一项实施方案中，R^4a是异丙基且R^4b是氢。

在本发明的另一项实施方案中，R^4a和R^4b连接在一起形成环戊基。

本发明的另一项实施方案是式(III)化合物。

在本发明的另一项实施方案中，R^5a是氢。在另一项实施方案中，R^5a是氘。

在本发明的另一项实施方案中，R^5b是氢、甲基、乙基或CF₃。适宜地，R^5b是甲基。

在本发明的另一项实施方案中，R⁶是异丙基、任选被取代的芳基、任选被取代的吡唑基、任选被取代的吡啶基、2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯基或任选被取代的C_5-10环烷基。适宜地，R⁶是异丙基、任选被取代的苯基、任选被取代的萘基、吡唑基、吡啶基、2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯基或C_5-10环烷基，其中所述苯基和萘基各自任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自氟、氯、溴、羟基、氰基、甲氧基、三氟甲基、甲基、叔丁基、苯基、吡咯基、哌啶基、4-甲基哌嗪基、吗啉基、苯氧基和-SO₂NH₂。

在本发明的另一项实施方案中，R⁶是任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂环或任选被取代的C_5-10环烷基。

在本发明的另一项实施方案中，R⁶是甲基、C_5-10环烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的吡啶基、任选被取代的嘧啶基、任选被取代的哒嗪基、任选被取代的吡嗪基、任选被取代的三唑基、任选被取代的吡唑基、任选被取代的噻唑基、任选被取代的1,3,4-噁二唑基、任选被取代的1,2,4-噁二唑基、任选被取代的异噁唑基、噻吩基、噁唑基、喹啉基、任选被取代的苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基、任选被取代的哌啶基、任选被取代的哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、任选被取代的四氢-噻喃1,1-二氧化物、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氢-苯并[1,4]二噁烯基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、4,5,6,7-四氢-苯并噻唑基或吲嗪基、其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三唑基、吡唑基、噻唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、异噁唑基、苯并咪唑基、哌啶基、哌嗪基和四氢-噻喃1,1-二氧化物各自任选被一个或两个如式(I)中定义的取代基取代。适宜地，R⁶是任选被一个或两个取代基取代的苯基。适宜地，R⁶是任选被取代的1,3,4-噁二唑基或1,2,4-任选被取代的噁二唑基。适宜地，R⁶是任选被一个取代基取代的嘧啶基。

在另一项实施方案中，R⁶任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自：卤素；羟基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3卤代烷基；C_1-3卤代烷氧基；C_1-6烷基；任选被一个取代基取代的C_3-6环烷基，所述取代基选自氰基、C_1-3烷基和C_1-3烷氧基；任选被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自氟、氯、甲基、氰基和甲氧基；和任选被一个或两个甲基取代的5-6元杂芳基(例如咪唑基、吡唑基、四唑基(trazolyl)和吡啶基)。

在另一项实施方案中，R⁶被一个-CH₂R^a、-C(O)R^a、-NHC(O)R^a、-NHC(O)R^b、-C(O)NHR^a、-C(O)NHR^b、-OR^a、-NR^aR^b、-SO₂NR^bR^b、-SO₂R^a或-SO₂R^b基团取代。适宜地，R⁶被一个-CH₂R^a、-C(O)R^a或-OR^a基团取代。

在另一项实施方案中，R⁶是苯基，被一个氟或氯基团和一个-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团取代，其中-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团处于苯基环的对位。适宜地，R⁶是苯基，被一个氟基团和一个-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团取代，其中-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团处于苯基环的对位。在另一项实施方案中，R⁶是苯基，在对位被一个-CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团取代。在另一项实施方案中，R⁶是苯基，在对位被-CH₂R^a取代。

在另一项实施方案中，R^a是任选被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自氟、氯和溴。

在另一项实施方案中，R^a是任选被取代的5-6元杂芳基。适宜地，R^a是任选被取代的吡啶基或任选被取代的嘧啶基。适宜地，R^a是吡啶基或嘧啶基，任选被一个三氟甲基取代。

在另一项实施方案中，R^a是C_5-7环烷基，各自任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自氟、羟基、甲基和C_1-3卤代烷氧基。

在另一项实施方案中，R^a是任选被取代的杂环。适宜地，R^a是哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢吡喃基、四氢-噻喃1,1-二氧化物、1,4-二氮杂环庚基、4,7-二氮杂-螺[2.5]辛基、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂-双环[4.2.0]辛基、八氢-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氢-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氢-吡咯并[3,4-c]吡咯基和5,6,7,8-四氢-咪唑并[1,2-a]吡嗪基，各自任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自羟基、氟、氨基、二甲基氨基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-3烷基和C_3-5环烷基。适宜地，R^a是哌啶基、哌嗪基或吗啉基，各自任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自羟基、氟、氨基、二甲基氨基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-3烷基和C_3-5环烷基。

在本发明的另一项实施方案中，R^5b和R⁶连接在一起形成任选被取代的C_3-7环烷基基团或任选被取代的式(a)基团。

在本发明的另一项实施方案中，R^b各自独立地是氢或甲基。

在另一项实施方案中，R¹是氢、R²是氟且R^3a、R^3b、R^4a和R^4b各自是氢。

本发明的另一项实施方案是式(IV)化合物。

本发明的另一项实施方案是式(V)化合物：

其中R^4a是苯基且R^4b是氢。

所选择的本发明的化合物包括：

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(2-基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

N-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯基)环己烷甲酰胺；

(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

2-氟-N-(4-羟基-4-甲基环己基)-4-((S)-1-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)乙基)苯甲酰胺；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-4-甲基-3-(2-((S)-1-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(6-苯基吡啶-3-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-苯甲酰基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(4S)-4-异丙基-3-(2-(1-(5-苯基嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

3-(5-氟-2-((1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(1-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氟苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(3-(间甲苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(3-(4-氟苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-{2-[(3-对甲苯基-[1,2,4]噁二唑-5-基甲基)-氨基]-嘧啶-4-基}-噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-异丙基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-异丁氧基-3-甲基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(4-异丁氧基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-异丁氧基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺；

(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺；

N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺；和

(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

所选择的本发明的化合物包括：

(S)-3-(2-(((S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(4-((4,4-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(5-氟-2-(1-(4-苯氧基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4-氟苯氧基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-(((S)-1-(5-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟苯氧基)吡嗪-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；和

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

所选择的本发明的化合物包括：

(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(6-氯-2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

2-氯-N-环戊基-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；

(S)-3-(5-氟-2-(((S)-1-(4-异丁氧基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；和

2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺。

列举的实施方案

实施方案1.式(I)化合物

其中：

R^3a是氢、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，且

R^3b是氢、氘或C_1-6烷基；或者

R^4b是氢、氘或C_1-3烷基；或者

R^5a是氢或氘；

R^5b是氢、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，且

R^5b和R⁶连接在一起形成任选被取代的C_3-7环烷基基团或任选被取代的式(a)基团：

其中n是1、2或3，且

R^b各自独立地是氢或C_1-6烷基；或其可药用盐。

实施方案2.根据实施方案1的化合物，其中R²是氢；或其可药用盐。

实施方案3.根据实施方案2的化合物，其中R¹是氢、卤素或任选被取代的C_1-4烷基；或其可药用盐。

实施方案4.根据实施方案3的化合物，其中R¹是氢、氟、氯或甲基；或其可药用盐。

实施方案5.根据实施方案4的化合物，其中R^3a是氢、C_1-6烷基、苯基或苄基，且R^3b是氢或C_1-6烷基；或其可药用盐。

实施方案6.根据实施方案5的化合物，其中R^3b是氢或甲基；或其可药用盐。

实施方案7.根据实施方案6的化合物，其中R^3a是氢、甲基或苯基；或其可药用盐。

实施方案8.根据实施方案7的化合物，其中R^4a是氢、C_1-6烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基，

R^4b是氢或C_1-3烷基；或其可药用盐。

实施方案9.根据实施方案8的化合物，其中R^4b是氢或甲基；或其可药用盐。

实施方案10.根据实施方案9的化合物，其中R^4a是氢、C_1-4烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基；或其可药用盐。

实施方案11.根据实施方案10的化合物，其中R^4a是氢、甲基、异丙基、异丁基、叔丁基、苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、苄基或二苯基甲基；或其可药用盐。

实施方案12.根据实施方案11的化合物，其中R^5a是H；或其可药用盐。

实施方案13.根据实施方案12的化合物，其中R^5b是氢、甲基、乙基或CF₃。

实施方案14.根据实施方案13的化合物，其中R⁶是异丙基、任选被取代的芳基、任选被取代的吡唑基、任选被取代的吡啶基、2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯基或任选被取代的C_5-10环烷基；或其可药用盐。

实施方案15.药物组合物，包含实施方案1的化合物或其可药用盐以及包含可药用载体或赋形剂。

实施方案16.治疗与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的实施方案1的化合物或其可药用盐。

实施方案17.治疗与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的实施方案1的化合物或其可药用盐以及其它治疗剂。

通用合成方法

本发明的化合物可以通过多种方法、包括标准化学制得。下文给出的流程中描绘了适宜的合成路线。

式(I)化合物可以通过有机合成领域已知的方法、部分地如以下合成流程中所给出的那样进行制备。在以下流程中，充分理解的是：当有必要时，按照通用原则或化学应用敏感性或反应活性基团的保护基。按照有机合成的标准方法(T.W.Greene和P.G.M.Wuts,"Protective Groups inOrganic Synthesis",第3版,Wiley,纽约1999)处理保护基。在化合物合成的方便阶段采用本领域技术人员容易清楚的方法除去这些基团。方法以及反应条件及其执行顺序的选择应当与式(I)化合物的制备相一致。

本领域技术人员将认识到式(I)化合物中是否存在立体中心。因此，本发明包括可能的立体异构体和不仅包括外消旋化合物、而且包括单独的对映异构体和/或非对映异构体。当希望化合物是单独的对映异构体或非对映异构体时，其可以通过立体有择合成或通过拆分终产物或任意方便的中间体来获得。终产物、中间体或原料的拆分可以通过本领域已知的任意适宜方法来进行。参见例如E.L.Eliel,S.H.Wilen和L.N.Mander的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley-Interscience,1994)。

本文所述的化合物可以由可购买获得的原料制得或采用已知的有机、无机和/或酶方法进行合成。

流程1

非商品化的氨基酸可以按照流程1的方法制得。酮1转化为相应的咪唑烷-2,4-二酮2，然后进行水解，得到氨基酸3。

流程2

当噁唑烷酮的前体氨基醇不可购买获得时，可以按照流程2的方法由氨基酸3制得。当R^3a＝R^3b时，将被保护的氨基酯5用适当的Grignard试剂处理，得到被保护的氨基醇6，其进行碱性或酸性脱保护步骤。当R^3a≠R^3b时，将被保护的氨基酸8转化为Weinreb酰胺9，随后将其用不同的Grignard试剂处理，得到被保护的氨基醇10。10进行碱性或酸性脱保护，得到11。采用如流程2所示的数种试剂、包括(但不限于)三光气、Et2CO3或N-N’-羰二咪唑在7或11中插入CO单元，得到噁唑烷酮12。

流程3

在NaH的存在下使噁唑烷酮12与二卤素-嘧啶13偶联，在如流程3所示的数种不同反应条件下将所得14用伯胺15进行处理，得到16。

流程4

或者，中间体14可以如下制得：使氨基醇11和二卤素-嘧啶13在碱如二异丙基乙基胺的存在下偶联，得到中间体17，可以将中间体17在碱如2，6-二甲基吡啶的存在下用三光气进行处理，得到中间体14。

使用方法

本发明的化合物是具有新变体活性的突变IDH蛋白质的抑制剂，因此可用于治疗与这类蛋白质相关的疾病或障碍、包括但不限于细胞增殖性障碍如癌症。

具有新变体活性的突变IDH蛋白质的实例有突变IDH1和突变IDH2。与突变IDH1和突变IDH2相关的新变体活性是产生2-羟基戊二酸(2-HG新变体活性)、特别是R-2-HG(R-2-HG新变体活性)的能力。与2-HG新变体活性、特别是R-2-HG新变体活性相关的IDH1中的突变包括在残基97、100或132处的突变，例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L和R132V。与2-HG新活性、特别是R-2-HG新变体活性相关的IDH2中的突变包括在残基140或172处的突变，例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G和R172W。

与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的细胞增殖性障碍包括但不限于癌症。这类癌症的实例包括成人急性原始淋巴细胞白血病；儿童急性原始淋巴细胞白血病；成人急性髓性白血病；肾上腺皮质癌；儿童肾上腺皮质癌；AIDS-相关性淋巴瘤；AIDS-相关性恶性病；肛门癌；儿童小脑星形细胞瘤；儿童大脑星形细胞瘤；肝外胆管癌；膀胱癌；儿童膀胱癌；骨癌，骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤；儿童脑干神经胶质瘤；成人脑肿瘤；脑肿瘤，儿童脑干神经胶质瘤；脑肿瘤，儿童小脑星形细胞瘤；脑肿瘤，儿童大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤；脑肿瘤，儿童室管膜瘤；脑肿瘤，儿童成神经管细胞瘤；脑肿瘤，儿童幕上原始神经外胚层肿瘤；脑肿瘤，儿童视通路和下丘脑神经胶质瘤；脑肿瘤，儿童(其它)；乳癌；乳癌和妊娠；儿童乳癌；男性乳癌；儿童支气管腺瘤/类癌；儿童类癌瘤；胃肠道类癌瘤；肾上腺皮质癌；胰岛细胞癌；原发灶未知的癌症；原发性中枢神经系统淋巴瘤；儿童小脑星形细胞瘤；儿童大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤；宫颈癌；儿童癌症；慢性淋巴细胞白血病；慢性髓性白血病；慢性骨髓增殖性疾病；腱鞘的明细胞肉瘤；结肠癌；儿童结肠直肠癌；皮肤T-细胞淋巴瘤；子宫内膜癌；儿童室管膜瘤；卵巢上皮癌；食管癌；儿童食管癌；肿瘤尤因家族；儿童颅外生殖细胞肿瘤；性腺外生殖细胞肿瘤；肝外胆管癌；眼癌，眼内黑素瘤；眼癌，视网膜母细胞瘤；胆囊癌；胃癌；儿童胃癌；胃肠道类癌瘤；儿童颅外生殖细胞肿瘤；性腺外生殖细胞肿瘤；卵巢生殖细胞肿瘤；妊娠滋养层肿瘤；儿童脑干神经胶质瘤；儿童视通路和下丘脑神经胶质瘤；多毛细胞白血病；头颈癌；成人(原发性)肝细胞(肝)癌；儿童(原发性)肝细胞(肝)癌；成人霍奇金淋巴瘤；儿童霍奇金淋巴瘤；妊娠霍奇金淋巴瘤；下咽癌；儿童下丘脑和视通路神经胶质瘤；眼内黑素瘤；胰岛细胞癌(内分泌胰腺)；卡波西肉瘤；肾癌；喉癌；儿童喉癌；成人急性原始淋巴细胞白血病；儿童急性原始淋巴细胞白血病；成人急性髓性白血病；儿童急性髓性白血病；慢性淋巴细胞白血病；慢性髓性白血病；多毛细胞白血病；唇和口腔癌症；成人(原发性)肝癌；儿童(原发性)肝癌；非小细胞肺癌；小细胞肺癌；成人急性原始淋巴细胞白血病；儿童急性原始淋巴细胞白血病；慢性淋巴细胞白血病；AIDS-相关性淋巴瘤；中枢神经系统(原发性)淋巴瘤；皮肤T-细胞淋巴瘤；成人霍奇金淋巴瘤；儿童霍奇金淋巴瘤；妊娠霍奇金淋巴瘤；成人非霍奇金淋巴瘤；儿童非霍奇金淋巴瘤；妊娠非霍奇金淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症；男性乳癌；成人恶性间皮瘤；儿童恶性间皮瘤；恶性胸腺瘤；儿童成神经管细胞瘤；黑素瘤；眼内黑素瘤；Merkel细胞癌；恶性间皮瘤；具有隐藏原发灶的转移性鳞状颈癌；儿童多发性内分泌肿瘤综合征；多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤；蕈样真菌病(Mycosis Fungoides)；骨髓发育不良综合征；慢性髓性白血病；儿童急性髓性白血病；多发性骨髓瘤；慢性骨髓增殖性疾病；鼻腔和鼻旁窦癌症；鼻咽癌；儿童鼻咽癌；成神经细胞瘤；成人非霍奇金淋巴瘤；儿童非霍奇金淋巴瘤；妊娠非霍奇金淋巴瘤；非小细胞肺癌；儿童口癌；口腔和唇癌；口咽癌；骨肉瘤(steosarcoma)/骨的恶性纤维组织细胞瘤；儿童卵巢癌；卵巢上皮癌；卵巢生殖细胞肿瘤；卵巢低度恶性倾向肿瘤；胰腺癌；儿童胰腺癌；胰岛细胞胰腺癌；鼻旁窦和鼻腔癌症；甲状旁腺癌；阴茎癌；嗜铬细胞瘤；儿童松果体和幕上原始神经外胚层肿瘤；垂体瘤；浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤；胸膜肺胚细胞瘤；妊娠和乳癌；妊娠和霍奇金淋巴瘤；妊娠和非霍奇金淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；成人原发性肝癌；儿童原发性肝癌；前列腺癌；直肠癌；肾细胞(肾脏)癌；儿童肾细胞癌；肾盂和输尿管移行细胞癌症；视网膜母细胞瘤；儿童横纹肌肉瘤；唾液腺癌；儿童唾液腺癌；肉瘤，尤因家族肿瘤；卡波西肉瘤；肉瘤(骨肉瘤)/骨的恶性纤维组织细胞瘤；肉瘤，儿童横纹肌肉瘤；成人软组织肉瘤；儿童软组织肉瘤；塞泽里综合征；皮肤癌症；儿童皮肤癌症；皮肤癌症(黑素瘤)；Merkel细胞皮肤癌；小细胞肺癌；小肠癌；成人软组织肉瘤；儿童软组织肉瘤；具有隐藏原发灶的转移性鳞状颈癌；胃癌；儿童胃癌；儿童幕上原始神经外胚层肿瘤；皮肤T-细胞淋巴瘤；睾丸癌；儿童胸腺癌；恶性胸腺癌；甲状腺癌；儿童甲状腺癌；肾盂和输尿管移行细胞癌；妊娠滋养层肿瘤；儿童的原发灶未知的癌症；儿童的罕见癌症；输尿管和肾盂移行细胞癌；尿道癌；子宫肉瘤；阴道癌；儿童视通路和下丘脑神经胶质瘤；外阴癌；瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症；和维尔姆斯肿瘤。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是脑癌，例如星形细胞肿瘤(例如纤维性星形细胞瘤、室管膜下巨细胞星形细胞瘤、弥漫性星形细胞瘤、多形性黄色星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤、星形细胞瘤、巨细胞成胶质细胞瘤、成胶质细胞瘤、继发性成胶质细胞瘤、原发性成人成胶质细胞瘤和原发性儿科成胶质细胞瘤)；少突胶质肿瘤(例如少突胶质瘤和间变型少突胶质瘤)；少突星形细胞肿瘤(oligoastrocytic tumor)(例如少突星形细胞瘤(oligoastrocytoma)和间变型少突星形细胞瘤)；室管膜瘤(例如粘液乳头状室管膜瘤(myxopapillaryependymoma)和间变型室管膜瘤)；成神经管细胞瘤；原始神经外胚层瘤、神经鞘瘤、脑脊膜瘤、meatypical脑脊膜瘤、间变型脑脊膜瘤；和垂体腺瘤。在另一项实施方案中，脑癌是神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤或幕上原始神经外胚层肿瘤(sPNET)。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是白血病，例如急性髓性白血病(AML)、骨髓发育不良综合征(MDS)、慢性髓性白血病(CML)、骨髓增殖性肿瘤(MPN)、MDS.MPN、包括慢性粒-单核细胞白血病、post MDS AML、post MPN AML、post MDS/MPNAML、del(5q)-相关性高风险MDS或AML、急变期慢性髓性白血病、血管免疫母细胞性淋巴瘤和急性原始淋巴细胞白血病。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是皮肤癌症，包括黑素瘤。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌或肺癌。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是肉瘤、包括中央型软骨肉瘤、中央型和骨膜软骨瘤和纤维肉瘤。

在另一项实施方案中，与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的癌症是胆管癌。

与具有R-2-HG新变体活性的突变IDH蛋白质相关的其它疾病或障碍是D-2-羟基戊二酸尿症。

与具有R-2-HG新变体活性的突变IDH蛋白质相关的其它疾病或障碍是奥利埃病和马富奇综合征。

如本文所用的术语“新变体活性”指野生型蛋白质没有以显著程度具有或呈现的新的蛋白质活性。例如，与IDH1和IDH2的突变形式相关的新变体活性是将α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸(即2-HG、特别是R-2-HG)的能力。野生型IDH1和IDH2不具有将α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸(即2-HG、特别是R-2-HG)的能力，或者，如果它确实具有该能力，则它不产生显著量(即有害的或引起疾病的)的2-HG。

如本文所用的术语“个体”指动物。通常，动物是哺乳动物。个体还指例如灵长类动物(例如人，男性或女性)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在一些实施方案中，个体是灵长类动物。在另一项实施方案中，个体是人。

如本文所用的就本发明的化合物而言的术语“治疗有效量”指在合理医学判断的范围内足以治疗个体的疾病或病症、但是足够低以避免严重副反应(以合理的利弊比)的化合物量。化合物的治疗有效量将根据如下因素而变化：所选择的具体化合物(例如考虑化合物的效力、功效和半衰期)；所选择的施用途径；所治疗的病症；所治疗病症的严重性；所治疗个体的年龄、尺寸、体重和身体状况；所治疗个体的医疗史；治疗持续时间；现有治疗的性质；预期治疗作用；等；并且可以由本领域技术人员常规地确定。

在一项实施方案中，如本文所用的术语任意疾病或障碍的“治疗”涉及改善疾病或障碍(即，减缓或停止或减轻疾病或其临床症状中的至少一种的发展)。在另一项实施方案中，“治疗”指缓解或改善至少一种身体参数、包括不能被患者辨别的那些。在另一项实施方案中，“治疗”指调节身体方面(例如稳定可辨别的症状)或生理方面(例如稳定身体参数)或此两个方面的疾病或障碍。在另一项实施方案中，“治疗”指阻止或延缓疾病或障碍的发作或发展或进展。

如本文所用的个体“需要”该治疗，如果该个体在生物学上、医学上或生活质量上将得益于该治疗。

本发明的化合物可以通过任意适宜的途径、包括口服和胃肠外施用来进行施用。胃肠外施用通常通过注射或输注进行，并且包括静脉内、肌内和皮下注射或输注。

本发明的化合物可以一次施用或者按照其中在不同的时间间隔施用剂量数目达到给定的时间段的给药方案进行施用。例如，剂量可以每天施用一次、两次、三次或四次。可以施用剂量直到获得预期的治疗作用或者不确定地维持预期治疗作用。适于本发明的化合物的给药方案取决于化合物的药物动力学性质，例如吸收、分布和半衰期，它们可以由本领域技术人员确定。另外，适于本发明的化合物的给药方案、包括该给药方案施用的持续时间取决于所治疗的疾病或病症、疾病或病症的严重性、所治疗个体的年龄和身体状况、所治疗个体的医疗史、现有治疗的性质、预期治疗作用和本领域技术人员知识和经验范围内的类似因素。本领域技术人员还将理解：鉴于个体患者对给药方案的响应或者随时间推移个体患者要求改变，可能要求调整适宜给药剂量。典型的日剂量可以根据所选择的特定途径而改变。给体重约70kg的人口服施用的典型日剂量将为约5mg至约500mg式(I)化合物。

本发明的一项实施方案提供了治疗与具有新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要该治疗的个体施用治疗有效量的式(I)化合物。在一项实施方案中，与具有新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍是细胞增殖性障碍。在另一项实施方案中，细胞增殖性障碍是癌症。在另一项实施方案中，癌症是与具有2-HG新变体活性的突变IDH1或具有2-HG新变体活性的突变IDH2相关的癌症。在另一项实施方案中，新变体活性是R-2-HG新变体活性。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基97、100或132处具有突变、例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L和R132V的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH1相关。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基140或172处具有突变、例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G和R172W的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH2相关。在另一项实施方案中，癌症是脑癌、白血病、皮肤癌症、前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌、肺癌或肉瘤。在另一项实施方案中，癌症是神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、急性髓性白血病、骨髓发育不良综合征、慢性髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲状腺、结肠、肺、中央型软骨肉瘤、中央型和骨膜软骨瘤肿瘤、纤维肉瘤和胆管癌。

本发明的另一项实施方案提供了治疗与具有R-2-HG新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的式(I)化合物，其中所述疾病或障碍是D-2-羟基戊二酸尿症、奥利埃病或马富奇综合征。

本发明的另一项实施方案提供了式(I)化合物在治疗中的用途。在另一项实施方案中，治疗是与具有新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍。在另一项实施方案中，治疗是与具有新变体活性的IDH突变形式相关的细胞增殖性障碍。在另一项实施方案中，治疗是癌症。在另一项实施方案中，治疗是与具有新变体活性的突变IDH蛋白质、例如具有2-HG新变体活性的突变IDH1或具有2-HG新变体活性的突变IDH2相关的癌症。在另一项实施方案中，新变体活性是R-2-HG新变体活性。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基97、100或132处具有突变、例如G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L和R132V的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH1相关。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基R140或172处具有突变、例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G和R172W的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH2相关。在另一项实施方案中，癌症是脑癌、白血病、皮肤癌症、前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌、肺癌或肉瘤。在另一项实施方案中，癌症是神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、急性髓性白血病、骨髓发育不良综合征、慢性髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲状腺、结肠、肺、中央型软骨肉瘤、中央型和骨膜软骨瘤肿瘤、纤维肉瘤和胆管癌。

本发明的另一项实施方案提供了式(I)化合物在治疗中的用途，其中治疗是D-2-羟基戊二酸尿症、奥利埃病或马富奇综合征。

本发明的另一项实施方案提供了式(I)化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与具有新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍。在一项实施方案中，与具有新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍是细胞增殖性障碍。在另一项实施方案中，细胞增殖性障碍是癌症。在另一项实施方案中，癌症是与具有新变体活性的突变IDH蛋白质、例如具有2-HG新变体活性的突变IDH1或具有2-HG新变体活性的突变IDH2相关的癌症。在另一项实施方案中，新变体活性是R-2-HG新变体活性。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基97、100或132处具有突变、例如

G97D、R100Q、R132H、R132C、R132S、R132G、R132L和R132V的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH1相关。在另一项实施方案中，癌症与具有在残基140或172处具有突变、例如R140Q、R140G、R172K、R172M、R172S、R172G和R172W的2-HG或R-2-HG新变体活性的突变IDH2相关。在另一项实施方案中，癌症是脑癌、白血病、皮肤癌症、

前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌、肺癌或肉瘤。在另一项实施方案中，癌症是神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、副神经节瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、急性髓性白血病、骨髓发育不良综合征、慢性髓性白血病、黑素瘤、前列腺、甲状腺、结肠、肺、中央型软骨肉瘤、中央型和骨膜软骨瘤肿瘤、纤维肉瘤和胆管癌。

本发明的另一项实施方案提供了式(I)化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与具有R-2-HG新变体活性的IDH突变形式相关的疾病或障碍，其中所述疾病或障碍是D-2-羟基戊二酸尿症、奥利埃病或马富奇综合征。

组合物

在另一方面，本发明提供了包含式(I)化合物和可药用载体或赋形剂的药物组合物。

本发明的药物组合物可以以散装形式进行制备和包装，其中可以取出治疗有效量的本发明的化合物、然后给予个体、例如给予个体粉末或糖浆剂。或者，本发明的药物组合物可以以单位剂量形式进行制备和包装，其中各个物理分散的单元含有治疗有效量的本发明的化合物。当制备成单位剂量形式时，本发明的药物组合物通常含有约5mg至500mg式(I)化合物。

如本文所用的术语“可药用载体或赋形剂”指例如参与赋予药物组合物以形式或稠度的可药用材料、组合物或溶媒。当混合时，各种赋形剂必须与药物组合物的其它成分相配伍，从而避免当施用于个体时将显著降低本发明的化合物的功效的相互作用和将产生不可药用的药物组合物的相互作用。另外，各种赋形剂当然必须具有足够的纯度以使得它是可药用的。

本发明的化合物和可药用载体或赋形剂通常将配制成适于通过预期施用途径施用于个体的剂量形式。例如，剂量形式包括适于如下的那些：(1)口服施用，例如片剂、胶囊剂、胶囊形片剂、丸剂、糖锭剂(troches)、散剂、糖浆剂、酏剂、混悬剂、溶液剂、乳剂、小药囊和扁囊剂；和(2)胃肠外施用，例如无菌溶液剂、混悬剂和用于重构的粉末。适宜的可药用赋形剂将根据所选择的具体剂量形式而改变。另外，可以为了它们可以在组合物中发挥的特定功能而选择适宜的可药用赋形剂。例如，可以为了它们有助于产生均匀剂量形式的能力而选择某些可药用赋形剂。可以为了它们有助于产生适宜剂量形式的能力而选择某些可药用赋形剂。可以为了它们有助于当本发明的一种或多种化合物施用于个体时将其从身体的一个器官或部分负载或转运至身体的另一个器官或部分的能力而选择某些可药用赋形剂。可以为了它们提高患者依从性的能力而选择某些可药用赋形剂。

适宜的可药用赋形剂包括以下类型的赋形剂：稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、填充剂、助流剂、制粒剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、助流剂、混悬剂、乳化剂、甜味剂、矫味剂、掩味剂、着色剂、防结块剂、保湿剂、螯合剂、塑化剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。

专业技术人员拥有本领域的知识和技巧以使他们能够选择适用于本发明的适当量的可药用载体和赋形剂。另外，专业技术人员可利用描述了可药用载体和赋形剂并且可用于选择适宜的可药用载体和赋形剂的若干资源。其实例包括Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack PublishingCompany)、The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower PublishingLimited)和The Handbook of Pharmaceutical Excipients(AmericanPharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)。

采用本领域技术人员已知的技术和方法制备本发明的药物组合物。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)中描述了一些本领域常用的方法。

在一个方面，本发明涉及包含治疗有效量的本发明的化合物和稀释剂或填充剂的固体口服剂量形式如片剂或胶囊剂。适宜的稀释剂和填充剂包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露醇、山梨醇、淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素)、硫酸钙和磷酸氢钙。口服固体剂型还可包含粘合剂。适宜的粘合剂包括淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸、西黄蓍胶、瓜尔胶、聚维酮和纤维素及其衍生物(如微晶纤维素)。口服固体剂量形式还可包含崩解剂。适宜的崩解剂包括交聚维酮、淀粉羟乙酸钠、交联羧甲基纤维素、海藻酸和羧甲基纤维素钠。口服固体剂量形式还可包含滑润剂。适宜的滑润剂包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石粉。

在适当时，可将用于口服施用的剂量单位制剂进行微囊包封。例如还可以通过包衣或将微粒原料包埋在聚合物、蜡等中来制备组合物以延长释放或缓慢释放。

本发明的化合物也可以与作为可靶标药物载体的可溶性聚合物偶联。这类聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺苯酚、聚羟基乙基天冬酰胺苯酚或聚环氧乙烷聚赖氨酸(被棕榈酰残基取代)。而且，本发明的化合物可以与可用于实现药物控制释放的生物可降解聚合物类别偶联，所述聚合物例如是聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸盐和水凝胶的交联或两性嵌段共聚物。

在另一方面，本发明涉及液体口服剂量形式。可以制备剂量单位形式的口服液体如溶液剂、糖浆剂和酏剂，以使给出的量含有预定量的本发明的化合物。可以通过将本发明的化合物溶于适宜矫味的水溶液中来制备糖浆剂；而酏剂通过采用无毒的醇性溶媒来制备。通过将本发明的化合物分散在无毒溶媒中可以配制混悬剂。也可以加入增溶剂和乳化剂如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚、防腐剂、香味添加剂如薄荷油或其它天然甜味剂或糖精或其它人工甜味剂等。

在另一方面，本发明涉及胃肠外施用。适于胃肠外施用的药物组合物包括水性和非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者的血液等张性的溶质；和水性和非水性无菌混悬剂，其可以包含助悬剂和增稠剂。组合物可以呈现在单位剂量或多剂量容器如密封安瓿和小瓶中，并且可以储存于冷冻干燥(冻干)条件中，在临用前仅需要加入无菌液体载体如注射用水。可以由无菌粉末剂、颗粒剂和片剂制备即用型注射溶液剂和混悬剂。

组合

本发明的化合物可以与一种或多种其它治疗剂同时、在其之间或在其之后进行施用。本发明的化合物可以通过相同或不同施用途径单独施用或者再与其它治疗剂相同的药物组合物中一起施用。

在一项实施方案中，本发明提供了包含式(I)化合物和至少一种其它治疗剂的产品作为组合制剂用于在治疗中同时、分别或依次使用。在一项实施方案中，治疗是与IDH突变形式相关的疾病或障碍的治疗。作为组合制剂提供的产品包括包含一起处于相同药物组合物中的式(I)化合物和其它治疗剂的组合物或者包含单独形式、例如药盒形式的式(I)化合物和其它治疗剂的组合物。

在一项实施方案中，本发明提供了包含式(I)化合物和其它治疗剂的药物组合物。任选地，药物组合物可以包含可药用赋形剂，如上文所述。

在一项实施方案中，本发明提供了包含两种或更多种单独药物组合物的药盒，其中所述药物组合物中至少有一种含有式(I)化合物。在一项实施方案中，药盒包含用于单独容纳所述组合物的装置，例如容器、分隔瓶或分隔箔袋。这类药盒的实例有如包装片剂、胶囊剂等所常用的泡罩包装。

本发明的药盒可用于施用不同的剂量形式如口服或胃肠外、用于在不同的剂量间隔施用单独组合物或者用于相对于另一种组合物逐渐增加单独组合物。为了帮助顺从性，本发明的药盒通常包含施用指导。

在本发明的组合治疗中，本发明的化合物和所述其它治疗剂可以通过相同或不同生产商来制备和/或配制。而且，本发明的化合物和所述其它治疗剂可以如下被一起带入组合治疗中：(i)在将组合产品发送给医生之前(例如就包含本发明的化合物和所述其它治疗剂的药盒而言)；(ii)在临施用前由医生自己(或在医生的指导下)；(iii)由患者自己、例如在依次施用本发明的化合物和所述其它治疗剂期间。

因此，本发明提供了式(I)化合物用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的用途，其中药物被制备用于与其它治疗剂一起施用。本发明还提供了其它治疗剂用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的用途，其中药物被制备用于与式(I)化合物一起施用。

本发明还提供了在用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法中使用的式(I)化合物，其中式(I)化合物被制备用于与其它治疗剂一起施用。本发明还提供了在用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法中使用的其它治疗剂，其中所述其它治疗剂被制备用于与式(I)化合物一起施用。本发明还提供了在用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法中使用的式(I)化合物，其中式(I)化合物与其它治疗剂一起施用。本发明还提供了在用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的方法中使用的其它治疗剂，其中所述其它治疗剂与式(I)化合物一起施用。

本发明还提供了式(I)化合物用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的用途，其中患者以前(例如24小时内)已经用其它治疗剂进行了治疗。本发明还提供了其它治疗剂用于治疗与IDH突变形式相关的疾病或障碍的用途，其中患者以前(例如24小时内)已经用式(I)化合物进行了治疗。

在一项实施方案中，所述其它治疗剂选自：血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂、平滑抑制剂(smoothen inhibitors)、烷化剂、抗肿瘤抗生素、抗代谢物、类视色素和其它细胞毒剂。

血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂的实例包括但不限于贝伐单抗(以商标由Genentech/Roche出售)、阿昔替尼(N-甲基-2-[[3-[(E)-2-吡啶-2-基乙烯基]-1H-吲唑-6-基]硫基]苯甲酰胺，还已知为AG013736和在PCT公开WO01/002369中记载)、丙氨酸布立尼布(Brivanib Alaninate)((S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙烷-2-基)2-氨基丙酸酯，还称为BMS-582664)、莫特塞尼(motesanib)(N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶基甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺和在PCT公开WO02/066470中有记载)、帕瑞肽(pasireotide)(还称为SOM230和在PCT公开WO02/010192中有记载)和索拉非尼(以商标出售)。

拓扑异构酶II抑制剂的实例包括但不限于依托泊苷(还称为VP-16和磷酸依托泊苷,以商标和出售)和替尼泊苷(还称为VM-26,以商标出售)。

烷化剂的实例包括但不限于替莫唑胺(以商标和由Schering-Plough/Merck出售)、放线菌素D(还称为放线菌素-D和以商标出售)、美法仑(还称为L-PAM、L-沙可来新和苯丙氨酸氮芥，以商标出售)、六甲三聚氰胺(还称为六甲蜜胺(HMM)，以商标出售)、卡莫司汀(以商标出售)、苯达莫司汀(以商标出售)、白消安(以商标和出售)、卡铂(以商标出售)、洛莫司汀(还称为CCNU，以商标出售)、顺铂(还称为CDDP，以商标和出售)、苯丁酸氮芥(以商标出售)、环磷酰胺(以商标和出售)、达卡巴嗪(还称为DTIC、DIC和咪唑甲酰胺，以商标出售)、六甲三聚氰胺(还称为六甲蜜胺(HMM),以商标出售)、异环磷酰胺(以商标出售)、丙卡巴肼(以商标出售)、氮芥(还称为盐酸氮芥，以商标出售)、链佐星(以商标出售)、塞替派(还称为硫代磷酰胺、TESPA和TSPA，以商标出售)。

抗肿瘤抗生素的实例包括但不限于多柔比星(以商标和出售)、博来霉素(以商标出售)、柔红霉素(还称为盐酸柔红霉素、道诺霉素和盐酸红比霉素，以商标出售)、柔红霉素脂质体(柠檬酸柔红霉素脂质体，以商标出售)、米托蒽醌(还称为DHAD，以商标出售)、表柔比星(以商标Ellence^TM出售)、依达比星(以商标出售)和丝裂霉素C(以商标出售)。

抗代谢物的实例包括但不限于克拉屈滨(claribine)(2-氯脱氧腺苷，以商标出售)、5-氟尿嘧啶(以商标出售)、6-硫代鸟嘌呤(以商标出售)、培美曲塞(以商标出售)、阿糖胞苷(还称为阿糖胞嘧啶(ARa-C)，以商标出售)、阿糖胞苷脂质体(还称为脂质体ARa-C，以商标DepoCyt^TM出售)、地西他滨(以商标出售)、羟基脲(以商标Droxia^TM和Mylocel^TM出售)、氟达拉滨(以商标出售)、氟尿苷(以商标出售)、克拉屈滨(还称为2-氯脱氧腺苷(2-CdA)，以商标Leustatin^TM出售)、甲氨蝶呤(还称为氨甲蝶呤、甲氨蝶呤钠(MTX)，以商标和Trexall^TM出售)和喷司他丁(以商标出售)。

类视色素的实例包括但不限于阿利维A酸(以商标出售)、维A酸(全反式视黄酸，还称为ATRa，以商标出售)、异维甲酸(13-顺式-视黄酸，以商标和出售)和贝沙罗汀(以商标出售)。

其它细胞毒剂的实例包括但不限于三氧化二砷(以商标出售)、天冬酰胺酶(还称为L-天冬酰胺酶和欧文氏菌属(Erwinia)L-天冬酰胺酶，以商标和出售)。

中间体和实施例

以下实施例仅用于阐述本发明，而不易任何方式限制本发明。除非另有指出，否则以下中间体和实施例采用来自Teledyne Isco,Inc的Rf柱、经由硅胶柱色谱法进行纯化。所用缩略语是本领域常规的那些或者是如下：

ACN 乙腈

BSA 牛血清清蛋白

C 摄氏度

CDI 1,1’-羰二咪唑

d 二重峰

dd 双二重峰

DAST 二乙氨基三氟化硫

DEAD 偶氮二甲酸二乙酯

DIPEA NN-二异丙基乙基胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

DTT 二硫苏糖醇

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

g 克

h 小时

HATU 2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六

氟磷酸盐

HEPES 4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸

HPLC 高压液相色谱法

Hunig’s碱 N,N-二异丙基乙胺

kg 千克

L 升

LC 液体色谱法

LCMS 液体色谱法质谱法联用

MeOH 甲醇

MS 质谱法

m 多重峰

min 分钟

mL 毫升

μM 微升

m/z 质荷比

nm 纳米

nM 纳摩尔

N 当量

NADPH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

NMP N-甲基吡咯烷酮

NMR 核磁共振

PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂ 1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷

复合物

pTsOH 对甲苯磺酸

rac 外消旋

Rt 保留时间

s 单峰

sat. 饱和的

t 三重峰

TBTU O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸

TCEP 三(2-羧基乙基)膦

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

TMS-CN 三甲基甲硅烷基-氰化物

仪器

LCMS：

采用Waters System(Acuity UPLC和Micromass ZQ质谱仪；柱：Acuity HSS C18 1.8微米,2.1x50mm；梯度：含0.05％TFA的5-95％乙腈水溶液，历经1.8分钟；流速1.2mL/min；分子量范围200-1500；锥孔电压20V；柱温50℃)记录了LCMS数据(在本文中还简单地作为MS报道)。所报道的所有质量是质子化母离子的质量，另有指示除外。

高分辨率质谱法(HRMS)：

HRMS方法A：采用具有电喷射离子化源的Synapt G2HDMS(TOF质谱仪,Waters)记录了ESI-MS数据。MS系统的分辨率为约15000。使用亮氨酸脑啡肽作为由lockspary探针输入的锁定质量(内标)。将化合物由样品探针通过UPLC(Acquity,Waters)输入质谱仪。在Acquity UPLC BEHC18 1x50mm柱上进行分离，流速为0.2mL/min，梯度为3分钟内由5％至95％。溶剂A为含0.1％甲酸的水，溶剂B为含0.1％甲酸的乙腈。用锁定质量发现系统的质量准确度为<5ppm。

HRMS方法B：在Acquity G2Xevo QT上记录LC-MS/ESI-MS数据，-Rs(FWHM)>20000准确度<5ppm。在Acquity CSH1.7μm2.1x50mm-50℃柱上进行分离，洗脱剂A：水+3.75mM乙酸铵。洗脱剂B：乙腈。梯度：在4.4分钟2-98％B-流速1.0mL/min。

在本文通篇中，HRMS方法A和B分别称为HRMS(A)或HRMS(B)。

中间体

中间体A：(R)-4-异丁基噁唑烷-2-酮

历经30分钟向(R)-2-氨基-4-甲基戊烷-1-醇(2.98g,25.4mmol)和三乙胺(7.6mL,54mmol,2.1当量)在CH₂Cl₂(80mL)中的冷却(4℃)溶液中滴加三光气(2.52g,8.49mmol,0.334当量)在10ml CH₂Cl₂中的溶液。将反应混合物于4℃搅拌15分钟，温热至室温，搅拌另外1小时。将混合物用饱和NH₄Cl(25mL)、然后CH₂Cl₂(50mL)处理，将所得混合物搅拌20分钟。分离各层，将有机层用水洗涤。合并的水层用CH₂Cl₂(50mL)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到(R)-4-异丁基噁唑烷-2-酮(3.22g)，产率为88％。将粗产物未经纯化用于下一反应。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ4.53-4.47(m,1H),4.00-3.92(m,2H),1.67(ddq,J＝13,8.0,6.5Hz,1H),1.56-1.48(m,1H),1.40-1.32(m,1H),0.95(d,J＝6.1Hz,3H),0.93(d,J＝6.1Hz,3H)。

通过与对制备中间体A所述类似的方法制备了表1的中间体。

表1

表2.表1列出的各中间体的化学名、NMR化学位移和LCMS信号

中间体M：4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮

步骤1：制备4-(氨基(苯基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-醇

向二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(1001mg,10mmol)和三乙胺(0.279mL,2.00mmol)中缓慢加入TMS-CN(1190mg,12.00mmol)[注意：放热反应]。搅拌1小时后，将混合物在减压下浓缩。将溶于二乙醚(10mL)中的残余物滴加至苯基溴化镁(3M在二乙醚中的溶液,4.33mL,13.00mmol)中。加入另外的～5mL二乙醚，将混悬液搅拌～4小时。向反应混合物中非常缓慢地加入MeOH(3.0mL)，然后小心和缓慢地分批加入NaBH₄(454mg,12.00mmol)和MeOH(12mL)(观察到产生气体)。将反应混合物搅拌过夜，小心加入水(～6mL)，然后加入10％HCl水溶液(～20mL)。将混合物剧烈搅拌4小时，加入二乙醚。将分离的有机层用10％HCl水溶液萃取(1x～20mL)。将合并的水层用二乙醚洗涤(2x)。通过添加6N NaOH水溶液使得酸性层呈碱性。将乳白色混合物用DCM(1x)、乙酸乙酯/THF(1:1；1x)和乙酸乙酯(2x)萃取。将有机层(独立的DCM和乙酸乙酯溶液)用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，在减压下浓缩，得到粗的4-(氨基(苯基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-醇，将其未经进一步纯化直接用于下一反应。

微黄色液体。产量：451mg。LCMS m/z208.2(M+H)⁺,Rt0.29分钟。

步骤2：制备4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮

向CDI(388mg,2.394mmol)在THF(1.5mL)中的混合物中缓慢加入4-(氨基(苯基)甲基)四氢-2H-吡喃-4-醇(451mg,2.176mmol)在THF(3mL)中的溶液。将混合物在氩气下搅拌～5小时。将混合物用饱和NaHCO₃水溶液和DCM稀释。将分离的水层用DCM(2x)萃取，将合并的有机层用0.5NHCl水溶液和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,12g,0-100％庚烷/乙酸乙酯]，得到4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮，为白色固体。产量：330mg。LCMS m/z234.1(M+H)⁺；Rt0.52分钟。

中间体N：(S)-4-(联苯-4-基)噁唑烷-2-酮

步骤1：制备乙烯基联苯

于0℃历经～20分钟向甲基三苯基溴化(5.10g,14.27mmol)在THF(26mL)中的混悬液中缓慢加入叔丁醇钾(1M在THF中的溶液,14.27mL)。将反应混合物温热至室温，搅拌10分钟。将混合物冷却至0℃，历经20分钟加入4-联苯基甲醛(2.0g,10.98mmol)在THF(9mL)中的溶液。将反应混合物温热至室温，搅拌～19小时。将混合物过滤，滤液在减压下浓缩。将残余物溶于/混悬于DCM中，经硅胶垫过滤，滤液在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,80g,EtOAc/庚烷]，得到乙烯基联苯(1.845g)，为白色固体。LCMS Rt0.79分钟。

步骤2：制备(S)-1-(联苯-4-基)-2-羟基乙基氨甲酸叔丁基酯

向氨甲酸叔丁基酯(2.82g,24.08mmol)在1-丙醇(30mL)中的溶液中加入NaOH水溶液(0.38M,61.5mL,23.36mmol)。将混合物搅拌5分钟，加入1,3-二氯-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮(2.351g,11.93mmol)。将混合物搅拌10分钟，加入溶于1-丙醇(30mL)中的(DHQ)₂PHAL(0.303g,0.388mmol)，然后加入乙烯基联苯(1.4g,7.77mmol)在1-丙醇(60mL)中的溶液。加入锇酸钾二水合物(0.114g,0.311mmol)在NaOH水溶液(0.38M,0.613mL,0.233mmol)中的混悬液，将混合物搅拌～16小时。将反应混合物用水(200mL)稀释，用EtOAc(3x200mL)萃取。合并的有机层用盐水(2x400mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,80g,EtOAc/庚烷]，得到(S)-1-(联苯-4-基)-2-羟基乙基氨甲酸叔丁基酯(609mg)。LCMS m/z258.2(M+H；失去t-Bu)⁺,Rt0.97分钟。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm7.62-7.56(m,4H),7.45-7.37(m,4H),7.34-7.2(m,1H),4.69(t,J＝5.8Hz,1H),3.76-3.63(m,2H),1.44(br.s.,9H)

步骤3：制备(S)-2-氨基-2-(联苯-4-基)乙醇

于室温向(S)-1-(联苯-4-基)-2-羟基乙基氨甲酸叔丁基酯(608mg,1.940mmol)在MeOH(3mL)中的溶液中加入HCl(4M二噁烷溶液,8mL)。将混合物搅拌1小时，在减压下浓缩。将残余物溶于DCM(10mL)/水(1.0mL)，和NaHCO₃一起搅拌1小时。滤出混合物，用DCM冲洗。将滤液经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩，得到(S)-2-氨基-2-(联苯-4-基)乙醇(171mg)，为白色固体。LCMS m/z214.2(M+H)⁺,Rt0.58分钟。

步骤4：制备(S)-4-(联苯-4-基)噁唑烷-2-酮

在氩气氛围下向(S)-2-氨基-2-(联苯-4-基)乙醇(171mg,0.802mmol)在THF(12mL)中的溶液中加入CDI(132mg,0.814mmol)。将溶液于室温搅拌2小时。混合物用饱和NaHCO₃水溶液(40mL)稀释，用EtOAc(2x30mL)萃取。合并的有机层用0.5M HCl水溶液(30mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物溶于DCM中，在减压下浓缩，得到粗的(S)-4-(联苯-4-基)噁唑烷-2-酮(156mg)，为浅褐色固体，将其未经进一步纯化进行使用。LCMS m/z240.1(M+H)⁺,Rt0.80分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm4.19(dd,J＝8.61,6.50Hz,1H)4.80(t,J＝8.73Hz,1H)5.05(dd,J＝8.78,6.48Hz,1H)7.31-7.38(m,1H)7.39-7.54(m,4H)7.55-7.71(m,4H)。

中间体P：4,4,5,5-四甲基噁唑烷-2-酮

步骤1：制备2-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基丙酸甲基酯

于室温向2-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基丙酸(10.03g,49.4mmol)在MeOH/DCM(60mL/140mL)中的溶液中滴加(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(37.0mL,74.0mmol)。将反应混合物搅拌30分钟。滴加乙酸以淬灭(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷。将反应混合物在减压下浓缩，得到预期产物，为白色固体(10.56g).LCMS m/z240.2(M+Na)⁺,Rt0.71分钟。

步骤2：制备3-羟基-2,3-二甲基丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯

于0℃向2-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基丙酸甲基酯(10.56g,48.6mmol)在THF(300mL)中的溶液中滴加甲基溴化镁(64.8mL,194mmol)。1小时后移去冷却浴。将反应物于20℃搅拌4小时。将反应物冷却返回至0℃，用饱和NH₄Cl溶液(10mL)淬灭。然后将反应混合物温热至室温，用EtOAc(100mL)和水(50mL)稀释。分离各相，将水层用EtOAc(2x100mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，浓缩。将残余物经硅胶快速色谱法纯化(0-20％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(9.02g)。LCMS m/z240.1(M+Na)⁺,Rt0.78分钟。

步骤3：制备4,4,5,5-四甲基噁唑烷-2-酮

向在THF(300ml)中的3-羟基-2,3-二甲基丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯(10.02g,46.1mmol)中分批加入2-甲基丙烷-2-酸钾(7.24g,64.6mmol)。将反应物搅拌5小时，用HCl(1M,66mL)萃取至pH＝2。然后将反应混合物真空浓缩至约1/3体积，用水(50mL)稀释。然后将水层用DCM(3x100mL)萃取。将合并的有机物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到粗产物，为淡褐色油(6.25g)。LCMS m/z144.1(M+H)⁺,Rt0.42分钟。

通过与对制备中间体P所述类似的方法制得表2b的中间体。

表2b

中间体1：(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮

将(R)-4-苯基噁唑烷-2-酮(2.9484g,18.07mmol)和2,4-二氯嘧啶(3.1872g,21.39mmol,1.184当量)在DMF(30mL)中的溶液用NaH(95％,0.4773g,18.89mmol,1.046当量)处理，然后将所得混合物(黄色至红色浑浊)于室温搅拌3小时。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用饱和NH₄Cl(75mL)和4％NaCl水溶液(2x100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0-40％)，得到(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(2.7020g,白色粘性固体)，46.9％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.47(d,J＝5.6Hz,1H),8.18(d,J＝6.1Hz,1H),7.38-7.30(m,5H),5.81(dd,J＝8.6,3.5Hz,1H),4.88(t,J＝8.6Hz,1H),4.37(dd,J＝8.6,3.5Hz,1H)；MS m/z276.4(M+H)⁺。

通过与对制备中间体1所述类似的方法制得表3的中间体。

表3.

表4.表3列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体31：(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

在氮气氛围下将2,4-二氟嘧啶(3.5mL,41mmol)和(S)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(5.3g,41mmol)在30mL DMF中的溶液冷却至0℃。缓慢加入NaH(2.1g60％混悬液,53mmol)。观察到起泡放热。内温保持低于5℃。5分钟后，移去冷却浴。使反应混合物(沙状混悬液)温热至室温，搅拌18小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，用(3x75mL)EtOAc萃取。将有机层用各50mL的水和盐水洗涤。经Na₂SO₄干燥，在硅胶上真空浓缩。进行柱色谱法(EtOAc/庚烷10至100％梯度)，得到3.1g(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(IV)，为结晶白色固体(33％).¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.50(dd,J＝5.8,2.2Hz,1H),8.19(dd,J＝5.8,3.8Hz,1H),4.79(dt,J＝8.1,3.5Hz,1H),4.48-4.34(m,2H),2.64(heptd,J＝7.0,3.6Hz,1H),1.01(d,J＝7.0Hz,3H),0.90(d,J＝6.9Hz,3H).MS m/z471.8和471.8(M+H)⁺。

通过对制备中间体1和31所述类似的方法制得表4b的中间体。

表4b.

表4c.表4b列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体46：(S)-4-(联苯-4-基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

在～5分钟内于室温(水浴)向2,4-二氯嘧啶(46.5mg,0.312mmol)和(S)-4-(联苯-4-基)噁唑烷-2-酮(74.7mg,0.312mmol)在DMF(700μL)中的溶液中分两批加入NaH(60％wt.,10.49mg,0.437mmol)[注意：放热；产生气体]。将反应将混合物搅拌1.5小时。将混合物用EtOAc(25mL)稀释，搅拌5分钟，然后用稀盐水(10mL；1:1盐水/水)缓慢稀释。将混合物倒入稀盐水(40mL)和EtOAc(25mL)中。将分离的有机相用稀盐水(3x40ml)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,40g,EtOAc/庚烷]，得到(S)-4-(联苯-4-基)-3-(2-氯嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(49.5mg)。LCMS m/z352.2(M+H)⁺,Rt1.06分钟。

中间体47：3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮

在氩气下向4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(300mg,1.286mmol)和2,4-二氯嘧啶(192mg,1.286mmol)在DMF(7mL)中的混合物中分两批加入NaH(60％wt.,67.9mg,2.83mmol)。将混合物搅拌～1小时。将反应混合物小心倒入冰冷却的0.25N HCl水溶液中。加入DCM和NaHCO₃水溶液。分离的水层用DCM(3x)和乙酸乙酯(1x)萃取。有机层(独立地含DCM和乙酸乙酯的层)用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，滤出。合并有机层，在减压下浓缩，得到粗的3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(330mg)，为微黄色液体，将其未经进一步纯化直接用于下一反应。LCMS m/z346.1(M+H)⁺,Rt0.83分钟。

中间体48：7-(2-氯嘧啶-4-基)-8-苯基-2,5-二氧杂-7-氮杂螺[3.4]辛烷-6-酮

采用与上文对3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮所述类似的方法、但是以氧杂环丁烷-3-酮为原料制得。LCMS m/z318.1(M+H)⁺,Rt0.78分钟。

中间体50：3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基噁唑烷-2-酮

步骤1

将2,4-二氯-5-氟嘧啶(2g,11.98mmol)在乙腈(10mL)中的溶液冷却至-40℃，避免冷冻。向该溶液中加入二异丙基胺(3.82mL,21.88mmol)，然后加入1-氨基-2-甲基丙烷-2-醇(1.5g,16.83mmol)。将反应混合物从冷却浴上移开，温热至室温，使之搅拌过夜(～18小时)。真空除去溶剂，将残余物加入少量二氯甲烷(～1.5-2mL)中，用庚烷稀释直至略微浑浊。将该混合物加入40g BioRad硅胶柱上。经快速色谱法纯化(Analogix System,20分钟梯度,0-25％甲醇/二氯甲烷,40mL/min.)，得到1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基氨基)-2-甲基丙烷-2-醇，为白色固体。LCMS m/z220.1,221.8(M+H)⁺,Rt0.49分钟。

步骤2

向1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基氨基)-2-甲基丙烷-2-醇(400mg,1.82)在DCM/乙酸乙酯(5mL)中的混悬液中加入2,6-二甲基吡啶(1mL,8.59mmol)。将反应物冷却至-78℃，一次性加入三光气(292mg,0.983mmol)。从冷却浴上移开反应物，温热至室温。此时，反应物为粉红色。LCMS显示原料耗尽和中间体1-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基氨基)-2-甲基丙烷-2-醇的氯甲酸酰基酯加合物的转化。将反应物密封，搅拌过夜。将反应物于室温搅拌过夜，得到中间体甲酸酰基酯向环状氨甲酸酯的仅部分闭合。然后将反应物(密封)于60℃搅拌～4小时直至中间体氯甲酸酰基酯耗尽。将反应物冷却至室温，用DCM(～50mL)稀释，用水(1x50mL)和NaHCO₃饱和溶液(1x50mL)洗涤。将水层用DCM(～50mL)反萃取。将合并的有机物经MgSO₄干燥，过滤，真空浓缩。将固体溶于DCM(～15mL)中，加入Celite(～4克)。将混合物浓缩，真空干燥，得到固体，将其预装填用于随后的纯化。经快速色谱法纯化(Analogix System,80克硅胶柱,25分钟,梯度0-25％甲醇/二氯甲烷,40mL/min)，得到3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基噁唑烷-2-酮，为白色固体。¹H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm1.58(s,8H)4.02(s,2H)8.59(d,J＝3.13Hz,1H)：LCMS m/z(M+H)⁺246.1,247.8.0,Rt0.61分钟

通过与制备中间体50所述类似的方法制得表4d的中间体。

表4d.

表4e.表4d列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体53：3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮

将4,4-二甲基噁唑烷-2-酮(0.103g,0.895mmol)和2,4,6-三氯嘧啶(0.181g,0.984mmol,1.10当量)在DMF(3mL)中的溶液用NaH(60％,0.0429g,1.07mmol,1.2当量)处理，然后将所得混合物(黄色)于室温搅拌1小时。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，用饱和NaCl水溶液(2x20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至40％)，得到3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮(0.146g,白色固体)，62.3％产率。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.14(s,1H),4.16(s,2H),1.74(s,9H)；LCMS m/z261.9(M+H)⁺,Rt0.91分钟。

通过与制备中间体53所述类似的方法制得表4f的中间体。

表4f.

表4g.表4f列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体56：4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)苯甲酸(S)-甲基酯

向4-(1-氨基乙基)苯甲酸(S)-甲基酯(4.9g,22.7mmol)在DCM(114mL)中的溶液中加入焦炭酸二叔丁基酯(5.95g,27.3mmol)和三乙胺(6.97mL,50mmol)。将溶液于室温搅拌16小时，然后用水和盐水洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至80％)，得到4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)苯甲酸(S)-甲基酯，为白色固体(6.35g,100％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.04-7.96(m,2H),7.40-7.33(m,2H),4.83(s,1H),3.91(s,3H),1.43-1.23(m,12H)；MS m/z224.0(M-56+H)。

中间体57：(S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

向4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)苯甲酸(S)-甲基酯(6.35g,22.7mmol)在THF(114mL)中的冷却(0℃)溶液中加入LAH在THF中的溶液(2.0M,13.64mL,27.3mmol)，将所得混合物于室温搅拌40分钟。添加1N NaOH溶液使反应混合物淬灭直至气体产生停止。将反应混合物过滤，用EtOAc洗涤。分离后，将水层用EtOAc(2x150mL)洗涤。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至100％)得到(S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(5.01g,84％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.35-7.23(m,4H),4.80-4.71(m,1H),4.67(s,2H),2.04(bs,1H),1.47-1.37(m,12H)；MS m/z196.0(M-56+H)。

中间体58：(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

向(S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(503mg,2mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(275mg,2.4mmol)和三乙胺(0.56mL,4mmol)。将溶液于室温搅拌16小时，然后用水和盐水洗涤。分离后，将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至80％)得到(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(254g,47.1％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.40-7.24(m,4H),4.79(s,1H),4.58(s,2H),1.50-1.30(br m,12H)；MS m/z214.0(M-56+H)。

中间体59：(S)-1-(4-((5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

将(S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(127mg,0.47mmol)、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(91mg,0.56mmol)和DIPEA(183mg,1.41mmol)在DMSO(2.3mL)中的溶液于80℃加热16小时。将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，用水(20mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(2x15mL)洗涤。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗产物未经进一步纯化用于下一步骤。

MS m/z358.3(M+H)

中间体60：(S)-1-(4-((5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙胺

于-78℃向(S)-1-(4-((5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(168mg,0.47mmol)在DCM(2mL)中的溶液中缓慢加入TFA(2mL,26mmol)。反应物于室温搅拌1小时，然后浓缩，用DCM(10mL)稀释。将溶液与3当量的MP-碳酸酯树脂(3.28mmol/g,Biotage)一起于室温搅拌1小时。过滤除去树脂，用DCM洗涤(2x5mL)，将滤液浓缩，将粗残余物未经进一步纯化用于下一步骤。

MS m/z258.2(M+H)。

中间体61：(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氟苯甲酸

向(S)-4-(1-氨基乙基)-2-氟苯甲酸(5g,22.76mmol)在水(66mL)和THF(66mL)中的溶液中加入焦炭酸二叔丁基酯(6.95g,31.9mmol)和碳酸钠(5.74g,68.3mmol)。将溶液于室温搅拌16小时，然后减压除去THF。将水性溶液用1N HCl酸化至pH3-4，用EtOAc(3x60mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到白色固体(1.94g,30.1％产率)。粗产物未经进一步纯化用于下一步骤。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ7.89(t,J＝7.8Hz,1H),7.20(dd,J＝8.2,1.7Hz,1H),7.13(dd,J＝12.0,1.6Hz,1H),4.70(d,J＝7.1Hz,1H),1.47-1.35(m,12H)；MS m/z282.0(M-H)。

中间体62：(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

将(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氟苯甲酸(1.416g,5mmol)、N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(732mg,7.5mmol)、HATU(2.85g,7.5mmol)和DIPEA(3.49mL,20mmol)在DMF(25mL)中的溶液于室温搅拌16小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用水洗涤。分离后，水相用EtOAc(2x75mL)洗涤。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷12至100％)得到(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.5g,92％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.40(t,J＝7.4Hz,1H),7.13(dd,J＝7.8,1.6Hz,1H),7.04(dd,J＝10.7,1.6Hz,1H),4.80(br s,1H),3.56(s,3H),3.34(s,3H),1.50-1.29(m,12H)；MS m/z327.1(M+H)。

中间体63：(S)-1-(3-氟-4-甲酰基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

操作1：向(S)-1-(3-氟-4-(甲氧基(甲基)氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(1.175g,3.6mmol)在THF(36mL)中的冷却(0℃)溶液中加入LAH在THF中的溶液(1.0M,18mL,18mmol)，将所得混合物于0℃搅拌20分钟。将反应混合物通过加入饱和Na₂SO₄溶液进行淬灭，直至气体产生停止。将反应混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷12至100％)得到(S)-1-(3-氟-4-甲酰基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(760mg,79％产率)。

操作2：将(S)-1-(4-溴-3-氟苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(318mg,1mmol)在无水THF(5mL)中的溶液冷却至-78℃。滴加BuLi(2.5M,840μL,2.1mmol)，将所得溶液于-78℃搅拌1小时。一次性加入DMF(232μL,3.00mmol)。将反应物于-78℃搅拌另外30分钟，然后用NH₄Cl饱和溶液淬灭。将反应物于室温搅拌另外30分钟，然后用EtOAc稀释，用水和盐水洗涤。分离的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至80％)得到(S)-1-(3-氟-4-甲酰基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(70mg,26.2％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.31(s,1H),7.87-7.80(m,1H),7.20(dd,J＝8.2,1.3Hz,1H),7.11(dd,J＝11.5,1.4Hz,1H),4.80(br s,1H),1.45(br s,12H)；MS m/z212.1(M-56+H)。

中间体64：(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

(用于还原性胺化的通用操作A)

将(S)-1-(3-氟-4-甲酰基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(267mg,1mmol)和1,2,2-三甲基哌嗪二盐酸盐(402mg,2mmol)在THF(5mL)中的溶液于室温搅拌1小时，用三乙酰氧基硼氢化钠(848mg,4mmol)处理。所得混合物于室温搅拌16小时。反应混合物用NaHCO₃饱和水溶液(15mL)淬灭，用EtOAc(3x25mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(MeOH/CH₂Cl₂0至10％)得到(S)-1-(3-氟-4-((3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(186mg,49％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.35(t,J＝7.7Hz,1H),7.03(dd,J＝7.9,1.9Hz,1H),6.95(dd,J＝11.1,1.8Hz,1H),4.77(s,1H),3.49(s,2H),2.56(br s,4H),2.24(br s,5H),1.42(br s,12H),1.04(s,6H)；MS m/z380.4(M+H)。

中间体65：(1S)-1-(4-((3,4-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

将(S)-1-(4-甲酰基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(84.1mg,0.337mmol)[按照Hashihayata,Takashi PCT国际申请2008081910,2008年7月10日的方法由(S)-1-(4-溴苯基)乙胺获得]和1,2-二甲基哌嗪(86.3mg,0.756mmol,2.24当量)在THF(1.5mL)中的溶液于室温搅拌65分钟，用三乙酰氧基硼氢化钠(277.2mg,1.308mmol,3.88当量)处理。所得混合物于室温搅拌16小时。反应混合物用NaHCO₃饱和水溶液(15mL)萃取，用EtOAc(5x15mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(MeOH/CH₂Cl₂0至20％)，得到(1S)-1-(4-((3,4-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(90.7mg)，34.5％产率。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.29(s,4H),4.68(br s,1H),3.54-3.47(m,2H),3.37(s,1H),2.84-2.74(m,3H),2.38(td,J＝12,2.5Hz,1H),2.31(s,3H),2.28-2.22(m,2H),1.94-1.89(m,1H),1.40(br s,9H),1.38(d,J＝6.9Hz,3H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H)；MS m/z348.2(M+H)

中间体66：(R,E)-2-甲基-N-((3-甲基-1H-吡唑-4-基)亚甲基)丙烷-2-亚磺酰胺

将3-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(2.03g,18.44mmol)溶于THF(30ml)中，加入(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.35,19.39mmol)，然后加入Ti(OEt)₄(8.41mmol,36.90mmol)。所得反应混合物于80℃搅拌18小时。LCMS主要显示了产物。反应混合物用EtOAc(300mL)稀释，用4％NaCl水溶液(2x150,2X50mL)洗涤。合并的水层用EtOAc(100ml)反萃取。合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。经柱色谱法纯化(REDI80g,EtOAc/庚烷,历经33分钟20-100％,7分钟100％)，得到标题化合物(2.25g,10.55mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.55(s,1H),2.53(s,3H),1.25(s,9H).MS214.2m/z(M+H)

中间体67：(R)-2-甲基-N-((S)-1-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺

将(R,E)-2-甲基-N-((3-甲基-1H-吡唑-4-基)亚甲基)丙烷-2-亚磺酰胺(2.25g,10.55mmol)溶于THF中，冷却至0℃。滴加甲基溴化镁(3M,12.5ml,37.5mmol)，将所得溶液搅拌1小时。移开冰浴，将反应物搅拌另外15小时。加入另外2.5当量甲基溴化镁MeMgBr(0℃)。LCMS没有显著变化。反应混合物用NH₄Cl饱和溶液淬灭，水层用THF(2X)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物(1.79g,7.80mmol)

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ7.48(s,1H),4.49(qd,J＝6.7,4.7Hz,1H),2.26(s,3H),1.57(dd,J＝6.5,1.3Hz,3H),1.23(s,9H).MS230.2m/z(M+H)

中间体68：(R)-N-((S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

将(R)-2-甲基-N-((S)-1-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(290mg,1.26mmol)溶于DMF(5ml)中，滴加至Cs₂CO₃(458mg,1.41mmol)在DMF(4ml)中的溶液中。所得反应混合物于室温搅拌15分钟。加入苄基溴(216mg,1.26mmol)，反应物于室温搅拌2小时。LCMS主要显示了产物和一些起始的吡唑。加入另外0.1ml BnBr和135mg Cs₂CO₃。于50℃搅拌另外24小时。反应混合物用EtOAc(300mL)稀释，用4％NaCl水溶液(2x150,2X50mL)洗涤。合并的水层用EtOAc(100ml)反萃取。合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。硅胶色谱法(EtOAc/庚烷20-80％)得到标题化合物(区域异构体的混合物,150mg,0.470mmol)。¹H NMR(400MHz,MeOD)δ7.54(s,0.6H),7.46(s,0.4H),7.36-6.99(m,5H),5.31(s,0.8H),5.21(s,1.2H),4.44(t,J＝6.9Hz,1H),2.21(2s,3H),1.54(2dt,3H),1.17(s,9H).MS320.2m/z(M+H)

中间体69:

(S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙胺盐酸盐

将(R)-N-((S)-1-(1-苄基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺溶于二噁烷(5ml)中，加入4N HCl在二噁烷中的溶液(1.2ml,10eq.)。于室温搅拌1小时。除去溶剂，用CH₂Cl₂共蒸发两次。通过NMR观察到一些叔丁基。再次接受反应条件和后处理，得到标题化合物。

¹H NMR区域异构体混合物(400MHz,MeOD)δ8.00(s,0.7H),7.80(s,0.3H),7.52-6.96(m,5H),5.40(s,0.6H),5.36(s,1.4H),4.47(q,J＝6.9Hz,1H),2.34(s,2.1H),2.32(s,0.9H),1.62(2d,J＝6.9Hz,3H)。

MS216.3m/z(M+H)

通过基本上与对制备中间体56-69所述类似的方法制得表4h的中间体。

表4h。

表4i.表4h列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体126：(S)-(4-(1-氨基乙基)-3-氟苯基)甲醇

向(S)-4-(1-氨基乙基)-3-氟苯甲酸甲基酯盐酸盐(0.109g,0.468mmol)在THF(15mL)中的冷却(0℃)混悬液中加入LAH在THF中的溶液(2.0M,1.05mL,2.10mmol,4.49当量)，所得混合物于0℃搅拌2小时20分钟，于室温搅拌2.5小时。将反应混合物通过加入Na₂SO₄十水合物和Celite(1:1重量比)的混合物进行淬灭，直至气体产生停止。将反应混合物过滤，用EtOAc洗涤。将滤液浓缩，未经纯化用于下一反应。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.43(t,J＝7.7Hz,1H),7.15(d,J＝8.1Hz,1H),7.08(d,J＝12Hz,1H),4.60(s,2H),4.32(q,J＝6.6Hz,1H),1.42-1.40(m,3H)。

中间体127：4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲醛

将(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(285mg,0.8mmol)和二氧化锰(2.78g,32mmol,40当量)在DCM(16mL)中的溶液于室温搅拌30分钟。将溶液经硅藻土垫过滤，用DCM洗涤。将滤液浓缩，未经进一步纯化用于下一步骤。

中间体128：4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯

向4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲醛(71mg,0.2mmol)和2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(47.1mg,0.22mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中加入乙酸(14.4mg,0.24mmol)和5-乙基-2-甲基吡啶硼烷复合物(27mg,0.2mmol,sigma aldrich)。溶液于50℃搅拌4小时，然后加入5滴水。溶液于室温搅拌另外2小时，然后用EtOAc(10mL)稀释，用水(10mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱色谱法(MeOH/EtOAc0至10％)纯化，得到4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯，为白色固体(80mg,72.4％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.18(br s,1H),7.44(d,J＝5.7Hz,1H),7.24-7.29(m,4H),5.46(br s,1H),5.03(br s,1H),4.59-4.63(m,1H),4.29(t,J＝8.7Hz,1H),4.22(dd,J＝9.1,3.1Hz,1H),3.44(br s,4H),2.40(s,2H),2.16(s,2H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H),1.45(s,9H),1.36(s,6H),0.80-0.57(m,6H)；MS m/z252.1(M+H)。

中间体129：1-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)-4-甲基哌啶-4-基氨甲酸叔丁基酯

通过与对制备中间体128所述类似的方法制得。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)8.17(d,J＝5.7Hz,1H),7.43(d,J＝5.7Hz,1H),7.26(br s,4H),5.40(br s,1H),5.02(br s,1H),4.60(dt,J＝8.2,3.1Hz,1H),4.34-4.19(m,3H),3.47(br s,2H),2.54(br s,2H),2.26(br s,2H),1.95(br s,3H),1.60(br s,2H),1.53(d,J＝6.9Hz,3H),1.43(s,9H),1.33(s,3H),0.69(br s,3H),0.63(br s,3H).MS m/z553.6(M+H)。

中间体130：(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯

向(S)-3-(2-((S)-1-(4-溴苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(1.62g,4mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入焦炭酸二叔丁基酯(1.31g,6mmol)、DMAP(49mg,0.4mmol)和DIPEA(1.40mL,8mmol)。溶液于50℃搅拌7天，然后在减压下浓缩。残余物用EtOAc(40mL)稀释，用水和盐水洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至80％)，得到(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.03g,50.9％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.57(d,J＝5.8Hz,1H),7.99(d,J＝5.8Hz,1H),7.44-7.39(m,2H),7.33-7.28(m,2H),5.63(q,J＝7.2Hz,1H),4.63(dt,J＝8.0,3.3Hz,1H),4.39-4.26(m,2H),2.47-2.39(m,1H),1.66(d,J＝7.1Hz,3H),1.30(s,9H),0.84(d,J＝7.0,3H),0.83(d,J＝7.0,3H)；MS m/z507.0(M+H)。

中间体131：4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)氨甲酸叔丁基酯

在5mL微波瓶中，将(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯(101mg,0.2mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(50mg,0.24mmol)、碳酸氢钠(0.2mL,0.4mmol,2M水溶液)在二噁烷(2mL)中的溶液充入N₂3分钟，然后加入Cl₂Pd(dppf)CH₂Cl₂(16mg,0.02mmol)。将加帽的试管于100℃加热16小时。冷却后，反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，用水(10mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc在庚烷中的12至100％溶液)，得到白色固体(50mg,49.3％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.57(d,J＝5.7Hz,1H),7.97(d,J＝5.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.59(s,1H),7.39(s,4H),5.71(q,J＝7.0Hz,1H),4.65(dt,J＝8.1,3.2Hz,1H),4.36-4.24(m,2H),3.94(s,3H),2.50-2.42(m,1H),1.71(d,J＝7.0Hz,3H),1.29(s,9H),0.82(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(d,J＝7.0Hz,3H)；MS m/z507.1(M+H)。

中间体132：(S)-1-(4-(环己烷甲酰氨基)苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯

在5ml微波反应小瓶中加入(S)-1-(4-溴苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯(101mg,0.2mmol)、环己烷甲酰胺(30mg,0.24mol)、碳酸铯(91mg,0.28mmol)、XANTPHOS(7mg,0.012mmol,strem chemicals)和Pd₂(dba)₃(4mg,0.02mmol)。将小瓶密封，抽真空，用干燥氮气冲洗三次，然后加入二噁烷(1.6mL)。将反应混合物在油浴中于100℃加热16小时。冷却后，将反应物用EtOAc(10mL)稀释，用水(10mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc在庚烷中的12至100％溶液)，得到白色固体(65mg,58.9％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(d,J＝5.8Hz,1H),7.95(d,J＝5.8Hz,1H),7.48-7.43(m,2H),7.38-7.32(m,2H),7.13(br s,1H),5.66(q,J＝7.1Hz,1H),4.64(dt,J＝8.2,3.2Hz,1H),4.38-4.26(m,2H),2.51-2.43(m,1H),2.20(tt,J＝11.8,3.5Hz,1H),1.95(d,J＝13.2,2H),1.87-1.81(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.60-1.47(m,2H),1.33-1.25(m,12H),0.85(d,J＝6.9Hz,3H),0.82(d,J＝6.9Hz,3H)；MS m/z552.1(M+H)。

中间体133：(S)-2-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)丙酸甲基酯

向(S)-2-氨基丙酸甲基酯(270mg,2.0mmol,1.2当量,在10ml DMSO中)和(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(430mg,1.8mmol,1.0当量)的溶液中加入DIPEA(805mg,6.23mmol,3.5当量)，将反应混合物于110℃加热120分钟。将反应混合物倒入水(40ml)中，用EtOAc(2x30mL)萃取，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(乙酸乙酯在庚烷中的10至80％溶液)，得到(S)-2-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)丙酸甲基酯(260mg,白色固体)，47.4％产率。LCMS m/z309.1(M+H)⁺RT＝1.53分钟。

中间体134：(S)-2-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)丙烷酰肼

向(S)-2-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)丙酸甲基酯(120mg,0.39mmol,在5ml MeOH中)的溶液中加入99％水合肼，将反应溶液于室温搅拌过夜(24小时)，除去溶剂，产生预期产物(99mg)，78％产率，将其未经纯化用于下一步骤。LCMS m/z309.1(M+H)⁺RT＝1.25分钟。

中间体135：(S)-(1-肼基-1-氧代丙烷-2-基)氨甲酸叔丁基酯

将肼溶液(234mg,7.31mmol,1.5当量,在8ml THF中)加入(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙酸甲基酯(1000mg,4.88mmol,1.0当量)中，将其在密闭试管中搅拌，回流(72℃)过夜(18小时)，除去溶剂，得到预期产物(880mg,白色固体)，84％产率。

中间体136：(S)-(1-(2-苯甲酰基肼基)-1-氧代丙烷-2-基)氨甲酸叔丁基酯

向(S)-(1-肼基-1-氧代丙烷-2-基)氨甲酸叔丁基酯(293mg,1.44mmol,1.0当量,在3ml DCM中)的溶液中加入苯甲酰氟(179mg,1.44mmol,在2ml DCM中)，将反应溶液于室温搅拌50分钟，除去溶剂，得到预期产物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.89-7.78(m,2H),7.54(t,J＝7.4Hz,1H),7.43(t,J＝7.6Hz,2H),5.32(b,1H),4.45(b,1H),1.46(s,9H)。

中间体137：(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)氨甲酸叔丁基酯

向(S)-(1-(2-苯甲酰基肼基)-1-氧代丙烷-2-基)氨甲酸叔丁基酯(155mg,0.5mmol,1.0当量,在5ml THF中)的溶液中加入Lawesson's试剂(36.4mg,0.5mmol,1.0当量)。反应混合物于回流搅拌3小时，将反应混合物过滤，除去溶剂，得到粗产物。进行硅胶柱色谱法(乙酸乙酯在庚烷中的10至50％溶液)，得到(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)氨甲酸叔丁基酯(114.6mg,白色固体)，70.7％产率。¹H NMR(400MHz,CD₂Cl₂)δ7.94-7.72(m,2H),7.52-7.26(m,3H),5.59(b,1H),5.11(b,1H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H),1.34(s,9H)。

中间体138：(S)-1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙胺

向(S)-(1-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基)乙基)氨甲酸叔丁基酯(110mg,0.4mmol,在5ml DCM中)的溶液中加入1ml TFA，反应混合物于室温搅拌3小时，除去溶剂，得到预期产物(52mg)，66.8％产率。LCMS m/z206.0(M+H)⁺RT＝0.97min。

中间体139：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮

将1-(5-溴嘧啶-2-基)乙酮(300mg,1.49mmol)、3-(三氟甲基)苯基硼酸(567mg,2.98mmol)、K₃PO₄(950mg,4.48mmol)、DavePhos配体[2-二环己基膦基-2′-(N,N-二甲基氨基)联苯](59mg,0.15mmol)和Pd(OAc)₂(17mg,0.075mmol)在6mL甲苯中的浑浊溶液于100℃加热1小时。混合物冷却至室温，经Celite过滤。滤饼用30mL EtOAc冲洗。滤液倒入20mL水中。分离各层，水层进一步用EtOAc(20mL)萃取。合并的有机物用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，直接在硅胶上浓缩。进行柱色谱法(10-100％EtOAc/庚烷)，得到0.26g1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮(V)，为黄褐色固体。MS m/z267.1(M+H)⁺.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.16(s,2H),7.93-7.69(m,4H),2.87(s,3H)。

采用与制备中间体139所述类似的方法制得以下中间体。采用分析型RP-HPLC柱＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm。柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：CAN。流速＝2mL/min。梯度＝0分钟5％B；1.70分钟5％至95％B；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)

中间体140：1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC tR＝1.17分钟。MS m/z266.9(M+H)⁺。中间体141：1-(5-(3-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC tR＝1.07分钟。MS m/z231.1(M+H)⁺。中间体142：1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC tR＝1.18分钟.MS m/z231.1(M+H)⁺。中间体143：1-(5-(5-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC tR＝1.16分钟。MS m/z231.2(M+H)⁺。

中间体144：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙酮

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.09(s,2H),7.52-7.41(m,2H),7.24-7.16(m,1H),2.85(s,3H),2.41(d,J＝2.0Hz,3H).分析型RP-HPLC tR＝1.20分钟.MS m/z231.0(M+H)⁺。

中间体145：1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙酮

分析型RP-HPLC tR＝1.15分钟。MS m/z267.9(M+H)⁺。

中间体146：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙酮

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.88(dd,J＝2.3,0.8Hz,1H),8.13(dd,J＝8.1,0.8Hz,1H),7.98(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),7.50-7.39(m,2H),7.21-7.12(m,1H),2.78(s,3H),2.42-2.36(m,3H).分析型RP-HPLC tR＝1.40分钟。MS m/z230.8(M+H)⁺。

中间体147：1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙胺

将1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2-基)乙酮(260mg,0.977mmol)、NH₄OAc(1.13g,14.6mmol)和NaBH₃CN(245mg,3.91mmol)加入8mL200proof EtOH中，在微波仪器中于120℃加热5分钟。将混合物浓缩以除去EtOH。将粗品加入30ml水+25mL EtOAc中。加入6N NaOH直至水性pH为～10。分离各层，用EtOAc(25ml)萃取。合并的有机层用25mL盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。过滤，减压浓缩，得到262mg黄色油粗品，将其未经进一步纯化直接装载。分析型RP-HPLC tR＝0.90分钟。(柱子＝InertsilC8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；1.70分钟5％至95％B；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z268.1(M+H)⁺。

采用与对制备中间体147所述类似的方法制得以下中间体。

中间体148：1-(5-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.09分钟(梯度：2-98％B,1.7分钟-流速1mL/分钟。洗脱剂A：水+3.75mM NH₄Ac+2％CAN。柱：Acquity CSH1.7μm2.1x50mm-50℃.)MS m/z268.4(M+H)⁺。

中间体149：1-(5-(3-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.99分钟。(梯度：2-98％B,1.7分钟-流速1mL/分钟。洗脱剂A：水+3.75mM NH₄Ac+2％CAN。柱：Acquity CSH1.7μm2.1x50mm-50℃.)MS m/z232.4(M+H)⁺。

中间体150：1-(5-(4-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.87分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z231.0(M)-。

中间体151：1-(5-(5-氟-2-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.79分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z232.0(M+H)⁺。

中间体152：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.81分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z231.9(M+H)⁺。

中间体153：1-(5-(2,3-二氯苯基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.01分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z269.0(M+H)⁺。

中间体154：1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)吡啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.92分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z230.9(M+H)⁺。

中间体155：1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

步骤1：将1-(5-氟嘧啶-2-基)乙酮(700mg,5.0mmol)和4-氟苯酚(616mg,5.50mmol)在6mL DMF中的溶液用碳酸钾(829mg,6.0mmol)处理，于50℃加热3.5小时。将反应混合物倒入20mL水中，用EtOAc(2x20mL)萃取。将有机物用各20mL的水、盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。将混合物过滤，在硅胶上浓缩。经柱色谱法(10-100％EtOAc/庚烷)得到295mg(25％)1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮，为白色固体，将其直接用于随后的步骤。MS m/z233.2(M+H)⁺.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(s,2H),7.23-7.07(m,4H),2.78(s,3H)。

步骤2：将1-(5-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮(290mg,1.25mmol)、NH₄OAc(1.9g,24.6mmol)和NaBH₃CN(314mg,5.00mmol)加入20mL200proof EtOH中，在微波仪器中于130℃加热3分钟。将混合物浓缩以除去EtOH。将粗品加入30ml水+25mL EtOAc中。加入6N NaOH直至水性pH为～10。分离各层，将水层用EtOAc(25ml)萃取。合并的有机层用25mL盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。过滤，减压浓缩，得到275mg黄色油粗品，将其未经进一步纯化直接装载。主要产物分析型RP-HPLC tR＝1.26分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z234.1(M+H)⁺。

采用与对制备中间体155所述类似的方法制得以下中间体。

中间体156：1-(5-(2,4-二氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.81分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z252.1(M+H)⁺。

中间体157：1-(5-(5-溴吡啶-3-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.29分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z297.3(M+H)⁺。

中间体158：1-(5-(3-氯-4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.40分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z268.0(M+H)⁺。

中间体159：1-(5-(吡啶-3-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.21分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z218.4(M+H)⁺。

中间体160：1-(5-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基氧基)嘧啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.16分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z285.4(M+H)⁺。

中间体161：4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈

在氮气氛围下将4-氯嘧啶-2-甲腈(0.63g,4.51mmol)和4-氟苯酚(0.51g,4.51mmol)在5mL DMF中的溶液冷却至0℃。缓慢加入NaH(0.217g60％混悬液,5.42mmol)。观察到起泡放热。内温保持低于5℃。15分钟后，移去冷却浴。使反应混合物温热至室温，搅拌8小时。将反应混合物用水(40mL)稀释，用(3x25mL)EtOAc萃取。将有机层用各40mL的水和盐水洗涤。经Na₂SO₄干燥，在硅胶上真空浓缩。进行柱色谱法(EtOAc/庚烷10至100％梯度)，得到0.72g(74％)(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈，为结晶白色固体。分析型RP-HPLC tR＝1.38分钟,梯度：2-98％B,1.7分钟-流速1mL/分钟。洗脱剂A：水+3.75mM NH₄Ac+2％ACN。柱：Acquity CSH1.7μm2.1x50mm-50℃.MS m/z216.1(M+H)⁺。

中间体162：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮

在氮气氛围下将4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-甲腈(450mg,2.09mmol)混悬于12mL无水乙醚中。将小瓶冷却至0℃。历经5分钟加入MeMgBr(3.1mL在丁基醚中的1.0M溶液,3.10mmol)。将黄绿色混悬液搅拌30分钟，然后用50mL饱和NH₄Cl溶液萃取。用浓HCl调节pH至～6。将混合物用(2x40mL)EtOAc萃取。用30mL盐水洗涤有机物，经Na₂SO₄干燥。过滤，在硅胶上浓缩。进行柱色谱法(EtOAc在庚烷中的10-100％溶液)，得到157mg(32％)1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮，为黄色的油。分析型RP-HPLC tR＝1.44分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z233.2(M+H)⁺。

中间体163：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇

将1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙酮(0.150g,0.646mmol)加入2.5mL4:1MeOH:DCM中，冷却至0℃。加入NaBH₄(49mg,1.30mmol)。观察到嘶嘶声。10分钟后，移开冷却浴，将反应物搅拌1小时。真空除去溶剂。将白色残余物加入10mL水中，用(2x10mL)EtOAc萃取。用10mL盐水洗涤有机物，经Na₂SO₄干燥。过滤，浓缩，得到143mg(95％)1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇，为无色油。分析型RP-HPLC tR＝1.38分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z235.1(M+H)⁺。

中间体164：2-(1-叠氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶

在氮气氛围下将1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙醇(140mg,0.598mmol)溶于3mL无水DCM中。加入三乙胺(0.175mL,1.26mmol)，将混合物冷却至0℃。加入MsCl(0.070mL,0.897mmol)，将混合物搅拌15分钟。在维持0℃的条件下，在氮气流下除去DCM溶剂。将残余物加入2mL干燥DMF中。加入NaN₃(78mg,1.19mmol)，将反应物于室温搅拌24小时。将混合物倒入20mL水中，用20mL EtOAc萃取。将有机层用20mL盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。过滤，浓缩，得到120mg(77％)2-(1-叠氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶，为黄色油¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.49(d,J＝5.7Hz,1H),7.16-6.90(m,4H),6.70(d,J＝5.7Hz,1H),4.34(q,J＝6.9Hz,1H),1.55-1.46(m,3H)。

中间体165：1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺

将2-(1-叠氮基乙基)-4-(4-氟苯氧基)嘧啶(120mg,0.463mmol)溶于2mL净EtOH中。加入24.6mg(0.023mmol)10％钯碳催化剂。在剧烈搅拌下，将反应小瓶抽真空，用H₂净化三次。将反应容器装上H₂气囊，搅拌2小时。将混合物经Celite过滤，真空浓缩，得到75mg(69％)1-(4-(4-氟苯氧基)嘧啶-2-基)乙胺，为褐色油。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.45(d,J＝5.7Hz,1H),7.13-6.92(m,4H),6.59(d,J＝5.7Hz,1H),4.00(q,J＝6.8Hz,1H),1.34-1.30(m,3H).分析型RP-HPLC tR＝1.18分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z234.2(M+H)⁺。

采用与对制备中间体161-165所述类似的方法制得以下中间体。

中间体166：1-(5-(4-氟苯氧基)吡啶-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝0.91分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z233.1(M+H)⁺。

中间体167：1-(5-(4-氟苯氧基)吡嗪-2-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.39分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z217.1(主要碎片+H)+。

中间体168：1-(2-(4-氟苯氧基)嘧啶-5-基)乙胺

分析型RP-HPLC tR＝1.20分钟。(柱子＝Inertsil C8柱,3.0μm,3.0x30mm.柱温＝50℃。洗脱剂＝A：水(5mM甲酸铵,2％ACN)；B：ACN。流速＝2mL/min.梯度＝0分钟5％B；5％至95％B,1.70分钟；0.3分钟95％B；2.1分钟1％B)MS m/z233.9(M+H)⁺。

中间体169：(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮

向化合物(S)-3-(2-氯-嘧啶-4-基)-4-异丙基-噁唑烷-2-酮(1.03g,4.3mmol)在DMSO(12mL)中的溶液中加入甲基-丙-2-炔基胺盐酸盐(450mg,4.3mmol)和二异丙基乙基胺(2.2mL,12.6mmol)。将反应物加热至110℃达18小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc/庚烷0至75％)，得到(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(360mg)，31％产率。

LC-MS m/z：275.1(M-Boc)+；RT.：1.33分钟。

中间体170：(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺

将2,4,6-三氟嘧啶(128.4mg,0.96mmol)和异丙基乙基胺(0.50mL,2.9mmol,3当量)在二噁烷(5mL)中的溶液在冰浴中冷却至0℃。30分钟后，移开冰浴，将反应物温热至室温。搅拌过夜后，将反应物浓缩为浅褐色油，经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc/庚烷0至100％)，得到(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺(151.2mg,白色固体)，45％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.35-7.40(m,2H),7.29-7.34(m,2H),7.20-7.26(m,1H),5.84(s,1H),5.08(q,J＝6.91Hz,1H),1.52(d,J＝7.04Hz,3H)；LCMS m/z236.1(M+H)⁺,R_t0.95分钟。

中间体171：(S)-4,6-二氟-N-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)嘧啶-2-胺

通过与对制备中间体170所述类似的方法制得中间体171。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)7.58(t,J＝7.63Hz,1H),7.34-7.48(m,2H),5.84(br.s.,1H),5.35(q,J＝6.91Hz,1H),1.54(d,J＝7.04Hz,3H).MS m/z321.9(M+H)⁺,Rt1.11分钟。

中间体172：3-羟基-2-甲基丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯

步骤1：制备1-(甲氧基(甲基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基氨甲酸叔丁基酯

将2-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基丙酸(6.62g,32.6mmol)、O,N-二甲基羟基胺盐酸盐(3.50g,35.8mmol)和HATU(14.86g,39.1mmol)在DMF(100mL)中合并。向该溶液中加入Hunig's碱(17.07mL,98mmol)。将反应物搅拌过夜(17小时)。然后将反应物真空浓缩，残余物用EtOAc(300mL)稀释，用水(2x80mL)洗涤。有机层用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(10-50％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(6.36g).LCMS m/z247.2(M+H)⁺,Rt0.61分钟。

步骤2：制备2-甲基-3-氧代丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯

向1-(甲氧基(甲基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基氨甲酸叔丁基酯(4.26g,17.30mmol)在THF(100mL)中的溶液中于-70℃滴加甲基锂(32.4mL,51.9mmol)。将冷却浴用-40℃浴替换，将反应物搅拌4小时。然后小心地加入饱和NH₄Cl溶液(10mL)以淬灭反应。然后将反应混合物温热至室温，用EtOAc(100mL)和水(50mL)稀释。分离各相，水层用EtOAc(2x100mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(10-50％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(2.36g)。LCMS m/z224.2(M+Na)⁺,Rt0.7分钟。

步骤3：制备3-羟基-2-甲基丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯

向2-甲基-3-氧代丁烷-2-基氨甲酸叔丁基酯(2.36g,11.73mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中于0℃分批加入NaBH₄(0.887g,23.45mmol)。移去冷却浴，反应物搅拌1小时。然后小心加入HCl溶液(1M,0.2mL)以淬灭反应。然后将反应混合物浓缩，用EtOAc(50mL)和水(10mL)稀释。分离各相，将水层用EtOAc(2x20mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(10-50％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(2.12g)。LCMS m/z204.1(M+H)⁺,Rt0.69分钟。

中间体173：((3S)-2-羟基-4-甲基戊烷-3-基)氨甲酸叔丁基酯

向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁酸(5.86g,27.0mmol)在DCM(100mL)中的溶液中于0℃分批加入二(1H-咪唑-1-基)甲酮(4.81g,29.7mmol)。移去冷却浴，将反应物于20℃搅拌30分钟。然后加入O,N-二甲基羟基胺盐酸盐(3.16g,32.4mmol)，然后缓慢加入三乙胺(3.28g,32.4mmol)。反应混合物于20℃搅拌过夜(18小时)，用DCM(200mL)稀释，用HCl(1M,2x50mL)和饱和NaHCO₃溶液(2x50mL)、H₂O(50mL)和盐水(50mL)洗涤。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩，得到粗产物(6.61g).LCMS m/z261.2(M+H)⁺,Rt0.77分钟。

步骤2：制备(S)-2-甲基-4-氧代戊烷-3-基氨甲酸叔丁基酯

向(S)-1-(甲氧基(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基氨甲酸叔丁基酯(4.23g,16.25mmol)在THF(100mL)中的溶液中于-70℃滴加甲基锂(1.071g,48.7mmol)。用-40℃浴(在干冰中的MeCN)替换冷却浴移开，将反应物搅拌4小时。然后小心地加入饱和NH₄Cl溶液(10mL)以淬灭反应。然后将反应混合物温热至室温，用EtOAc(100mL)和水(50mL)稀释。分离各相，将水层用EtOAc(2x100mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(10-50％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(3.01g)。LCMS m/z238.2(M+Na)⁺,Rt0.78分钟。

步骤3：制备3-羟基-2-甲基丁烷2-基氨甲酸叔丁基酯

向(S)-2-甲基-4-氧代戊烷-3-基氨甲酸叔丁基酯(2.65g,12.31mmol)在MeOH(30mL)的溶液中于0℃分批加入NaBH₄(0.931g,24.62mmol)。移去冷却浴，将反应物搅拌1小时。然后小心地加入HCl溶液(1M,0.3mL)以淬灭反应。然后将反应混合物浓缩，用EtOAc(50mL)和水(10mL)稀释。分离各相，将水层用EtOAc(2x20mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(10-50％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为白色固体(2.05g)。LCMS m/z240.2(M+Na)⁺,Rt0.69分钟。

中间体174：(S)-(1-环丙基-2-羟基乙基)氨甲酸叔丁基酯

向在MeOH(50mL)中的(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-2-环丙基乙酸(5.01g,23.28mmol)中滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(18.62ml,37.2mmol)直至没有气泡。将反应物搅拌30分钟，用数滴HOAc(0.1mL)萃取。然后将反应混合物在减压下浓缩，得到粗产物，为浅褐色油(5.35g).LCMS m/z252.1(M+Na)⁺,Rt0.77分钟。

步骤2：制备(S)-(1-环丙基-2-羟基乙基)氨甲酸叔丁基酯

向(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-2-环丙基乙酸甲基酯(5.35g,23.33mmol)在Et₂O(100ml)中的溶液中加入LiBH₄(0.762g,35.0mmol)，然后滴加甲醇(1.420ml,35.0mmol)。将反应物于40℃回流1小时。然后将反应混合物冷却至0℃，用HCl(1M)萃取直至水层的pH＝2。分离各相，将水层用DCM(3x100mL)萃取。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩，得到最终粗产物(4.16g)。LCMS m/z224.1(M+Na)⁺,Rt0.62分钟。

中间体175：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

步骤1

向具有搅拌棒的烘箱干燥的圆底烧瓶中加入4-溴-2-氟苯甲醛(5g,24.6mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.28g,27.1mmol)和DCE(49mL)。然后向该混合物中加入硫酸铜(II)(5.90g,36.9mmol)。将反应混合物在预热的油浴中加热至55℃达18小时。将反应混合物经硅藻土垫过滤，将固体用CH₂Cl₂洗涤。将滤液浓缩，得到(R,E)-N-(4-溴-2-氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的粘稠黄色油(7.73g,25.2mmol,103％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.27(s,9H)7.31-7.42(m,2H)7.87(t,J＝7.87Hz,1H)8.83(s,1H)。LCMS m/z307.9(M+H)⁺,Rt1.01分钟。

步骤2

在氮气下向冷却至0℃(水/冰浴)的(R,E)-N-(4-溴-2-氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7.73g,25.2mmol)在CH₂Cl₂(252mL)中的溶液中加入甲基溴化镁(33.7mL,101mmol)在Et₂O中的3M溶液。使反应混合物于0℃搅拌30分钟，然后逐渐温热至室温，于室温搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，然后缓慢加入饱和NH₄Cl溶液进行淬灭。将水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷40至100％)，得到(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.93g,15.3mmol,60％产率)，为白色结晶固体。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.20(s,9H)1.56(d,J＝6.70Hz,3H)3.34(br.s.,1H)4.77-4.87(m,1H)7.19-7.31(m,3H)。LCMS m/z324.0(M+H)⁺,Rt0.90分钟。

步骤3

向具有搅拌棒的微波小瓶中加入(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1g,3.10mmol)、异丙烯基硼酸频哪醇酯(1.51ml,8.07mmol)、DME(8ml)、碳酸钠(7.76ml,15.5mmol)(2.0M水溶液)和PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(0.127g,0.155mmol)。给小瓶盖上瓶盖，通过微波照射于100℃加热20分钟。将反应混合物用NH₄Cl饱和溶液稀释。水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷50至100％)，得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(830mg,2.93mmol,94％产率)，为浅棕色结晶。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ1.08-1.11(m,9H)1.47(d,J＝6.80Hz,3H)2.09(d,J＝0.54Hz,3H)4.61-4.71(m,1H)5.14(t,J＝1.32Hz,1H)5.43(d,J＝5.58Hz,1H)5.49(s,1H)7.24-7.30(m,1H)7.31-7.36(m,1H)7.41-7.47(m,1H)。LCMS m/z284.0(M+H)⁺,Rt0.93分钟。

步骤4

于0℃在氩气下向含有在DCE(13mL)中的(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.37g,1.31mmol)的圆底烧瓶中加入二乙基锌(在己烷中的1.0M溶液)(13.1mL,13.1mmol)，然后滴加氯碘甲烷(0.95mL,13.1mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，此时第二次加入二乙基锌(在己烷中的1.0M溶液)(13.1mL,13.1mmol)，然后加入氯碘甲烷(0.95mL,13.1mmol)。将反应混合物温热至室温，在氩气下搅拌18小时。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃，向冷的反应混合物中缓慢加入NH₄Cl饱和溶液。水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷20至100％)，得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺白色结晶(89mg,0.299mmol,22.92％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ0.75-0.79(m,2H)0.85-0.90(m,2H)1.20(s,9H)1.55(s,3H)1.57(d,J＝6.80Hz,1H)3.34(d,J＝5.23Hz,1H)4.75-4.85(m,1H)6.90(dd,J＝12.30,1.74Hz,1H)6.97(dd,J＝8.05,1.78Hz,1H)7.22(t,J＝7.97Hz,1H)。LCMS m/z298.1(M+H)⁺,Rt1.01分钟。

通过与制备中间体175中所述类似的方法制得表4k的中间体。

表4k

表4m.表4k列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体178：(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基环丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

步骤1

向具有搅拌棒的微波小瓶中加入(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(500mg,1.55mmol)，然后加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(1.12g,3.10mmol)、三乙胺(0.65ml,4.65mmol)和PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(63mg,0.078mmol)。向固体中加入甲苯(10ml)。给小瓶盖上瓶盖，在预热沙浴中于100℃加热1小时。将反应混合物装载到硅胶柱上。进行硅胶柱色谱法(MeOH/CH₂Cl₂0至10％,含1％NH₄OH缓冲液)，得到(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(498mg,1.59mmol,102％产率)，为棕色粘稠的油，将其静置结晶。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.20(s,9H)1.43(t,J＝6.97Hz,3H)1.58(d,J＝6.75Hz,3H)3.35(d,J＝4.74Hz,1H)3.92(q,J＝6.96Hz,2H)4.23(d,J＝2.79Hz,1H)4.65(d,J＝2.79Hz,1H)4.79-4.89(m,1H)7.16-7.20(m,1H)7.29-7.34(m,1H)7.39(dd,J＝8.07,1.66Hz,1H)。

步骤2

于0℃在氩气下向含有在甲苯(15mL)中的(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.49g,1.56mmol)和氯碘甲烷(1.14mL,15.6mmol)的圆底烧瓶中加入二乙基锌(1.0M,在己烷中)(15.6mL,15.6mmol)。反应混合物温热至室温，搅拌1小时。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃，向冷的反应混合物中缓慢加入NH₄Cl饱和溶液。水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(MeOH/CH₂Cl₂0至10％)，得到(R)-N-((S)-1-(4-(1-乙氧基环丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(145mg,0.44mmol,28％产率)，为粘稠棕色油。¹H NMR(300MHz,CDCL₃)δ0.93-0.99(m,2H)1.14-1.20(m,3H)1.21(s,9H)1.22-1.27(m,2H)1.57-1.61(m,4H)3.35(d,J＝4.98Hz,1H)3.45(q,J＝7.07Hz,2H)4.77-4.87(m,1H)6.98(dd,J＝7.58,1.43Hz,3H)7.00-7.03(m,4H)7.28-7.32(m,1H)。LCMS m/z328.1(M+H)⁺,Rt0.95分钟。

通过与对制备中间体178所述类似的方法制备表4n的中间体。

表4n.

表4p.表4n列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体182：(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰基环丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

步骤1

向具有搅拌棒的微波小瓶中加入(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(300mg,0.93mmol)、4-异噁唑硼酸频哪醇酯(218mg,1.12mmol)、PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(76mg,0.09mmol)、氟化钾(2.7mL,1.0M在水中,2.79mmol)和最后加入DMSO(9mL)。将反应混合物充入氮气进行脱气(3分钟)，给小瓶盖上瓶盖，在预热油浴中于130℃加热18小时。反应混合物用NH₄Cl饱和溶液稀释，用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷40至100％)，得到(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(136mg,0.48mmol,52％产率)，为粘稠棕色油。

¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.19(s,9H)1.57(d,J＝6.80Hz,3H)3.39(d,J＝4.35Hz,1H)3.74(s,2H)4.81-4.88(m,1H)7.04(d,J＝10.66Hz,1H)7.11(d,J＝7.97Hz,1H)7.38(t,J＝7.73Hz,1H)。LCMS m/z283.0(M+H)⁺,Rt0.72分钟。

步骤2

向含有(R)-N-((S)-1-(4-(氰基甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(86mg,0.31mmol)和搅拌棒的闪烁瓶中加入甲苯(2mL)。然后向该混合物中加入四丁基溴化铵(19mg,0.06mmol)，然后加入NaOH(1.52ml,1.0M(水溶液),1.52mmol)和1,2-二溴乙烷(0.11ml,1.22mmol)。给小瓶盖上瓶盖，将反应混合物于室温剧烈搅拌18小时。然后，加入1,2-二溴乙烷(0.11ml,1.22mmol)和四丁基溴化铵(19mg,0.06mmol)，将反应混合物搅拌另外18小时。第三次加入1,2-二溴乙烷(0.11ml,1.22mmol)，将反应混合物在预热铝盘中于50℃加热另外18小时。反应混合物用NH₄Cl饱和溶液淬灭，水性混合物用EtOAc萃取。合并有机物，用水、盐水洗涤两次，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩。将粗物质采用10％MeOH:90％DCM通过硅胶小塞以洗脱出产物。将溶液浓缩，得到(R)-N-((S)-1-(4-(1-氰基环丙基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的粘稠橙色油(23mg,0.08mmol,24％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCL3)1.20(s,9H)1.38-1.44(m,2H)1.56(d,J＝6.75Hz,3H)1.73-1.79(m,2H)3.37(d,J＝4.45Hz,1H)4.78-4.88(m,1H)6.94(dd,J＝11.35,1.91Hz,1H)7.09(dd,J＝8.07,1.91Hz,1H)7.34(t,J＝7.90Hz,1H)。LCMS m/z309.2(M+H)⁺,Rt0.83分钟。

中间体183：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-异丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(204mg,0.72mmol)和搅拌棒的圆底烧瓶中加入MeOH(7.2mL)。向该溶液中加入在MeOH(1mL)中的钯碳(77mg,10％,0.07mmol)。插入氢气气氛，将所得反应混合物于室温搅拌18小时，此时加入更多的在MeOH(5mL)中的钯碳(300mg)。再次插入氢气气氛，将反应混合物于室温搅拌另外18小时。将反应混合物通过注射器过滤器过滤，浓缩，得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-异丙基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的浅棕色粘稠油(149mg,0.52mmol,73％产率)，将其静置结晶。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.20(s,9H)1.24(d,J＝5.87Hz,6H)1.58(d,J＝6.70Hz,3H)2.89(dt,J＝13.79,6.90Hz,1H)3.35(d,J＝5.04Hz,1H)4.76-4.85(m,1H)6.90(dd,J＝12.03,1.52Hz,1H)6.98(dd,J＝7.90,1.54Hz,1H)7.24(t,J＝7.97Hz,1H)。LCMS m/z286.3(M+H)⁺,Rt1.01分钟。

中间体184：(R)-N-((S)-1-(4-环丙基-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向含有搅拌棒的微波小瓶中加入(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(100mg,0.31mmol)，然后加入环丙基三氟硼酸钾(459mg,3.10mmol)、碳酸铯(506mg,1.55mmol)和Pd(OAc)₂(7mg,0.03mmol)和二(1-金刚烷基)-正丁基膦(22mg,0.06mmol)、甲苯(2.6mL)和最后加入水(0.5mL)。给小瓶盖上瓶盖，通过微波照射于100℃加热20分钟，然后在预热铝盘中于100℃加热18小时。将反应混合物用NH₄Cl饱和溶液稀释。水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，得到(R)-N-((S)-1-(4-环丙基-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的黄色结晶(116mg,0.33mmol,106％产率)。LCMS m/z284.0(M+H)⁺,Rt0.90分钟。

中间体185：(R)-N-((S)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

通过与获得中间体184所用类似的方法制得(R)-N-((S)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。MS m/z267.1(M+H)⁺,Rt0.44分钟。

中间体186：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向具有搅拌棒的两个微波瓶中加入(R)-N-((S)-1-(4-溴-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,4.65mmol)、1-甲基-4-1H-吡唑硼酸频哪醇酯(2.91g,13.9mmol)、DME(20mL)、碳酸钠(11.6mL,23.3mmol,2.0M aq)和PdCl₂(dppf).CH₂Cl₂加合物(190mg,0.23mmol)，分入两个小瓶中。给小瓶盖上瓶盖，分别通过微波照射于100℃加热20分钟。合并反应混合物，用NH₄Cl饱和溶液和EtOAc稀释。分配各相，水相用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷40至100％)，得到橙色结晶(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.07g,3.31mmol,71％产率。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δppm1.21(s,9H)1.60(d,J＝6.80Hz,3H)3.36(d,J＝4.25Hz,1H)3.96(s,3H)4.79-4.91(m,1H)7.13(dd,J＝11.69,1.61Hz,1H)7.23(dd,J＝8.00,1.64Hz,1H)7.30-7.37(m,1H)7.60(s,1H)7.74(s,1H)。LCMS m/z324.0(M+H)⁺,Rt0.74分钟。

通过与对制备中间体186所述类似的方法制得表4q的中间体。

表4q.

表4r.表4q列出的各中间体的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

中间体190：(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

步骤1

向具有搅拌棒的烘箱干燥的圆底烧瓶中加入2-氟-4-(三氟甲基)苯甲醛(5g,26.0mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.47g,28.6mmol)和DCE(52mL)。然后向该混合物中加入硫酸铜(II)(6.23g,39.0mmol)。将反应混合物在预热油浴中加热至55℃达18小时。将反应混合物经硅藻土垫用DCE洗涤固体进行过滤。将滤液浓缩，得到(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的粘稠绿色油(7.3g,24.7mmol,95％产率)。将物质未经进一步纯化用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm1.29(s,9H)7.44(d,J＝10.08Hz,1H)7.51(d,J＝8.27Hz,1H)8.13(t,J＝7.46Hz,1H)8.92(s,1H)。LCMS m/z296.0(M+H)⁺,Rt1.02分钟。

步骤2

在氮气下向(R,E)-N-(2-氟-4-(三氟甲基)亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7.3g,24.7mmol)在CH₂Cl₂(247mL)中的冷却至0℃(水/冰浴)的溶液中加入在Et₂O中的3M甲基溴化镁溶液(33mL,99mmol)。使反应混合物于0℃搅拌30分钟，然后逐渐温热至室温，于室温搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，然后缓慢加入NH₄Cl饱和溶液进行淬灭。水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，在硅胶上浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷40至100％)，得到(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.68g,15.0mmol,61％产率)，为白色结晶固体。¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.22(s,9H)1.60(d,J＝6.80Hz,3H)3.38(d,J＝4.01Hz,1H)4.87-4.97(m,1H)7.33(d,J＝10.32Hz,1H)7.39-7.45(m,1H)7.49-7.55(m,1H)。LCMS m/z312.0(M+H)⁺,Rt0.92分钟。

中间体191：(R)-N-((S)-1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

采用与制备中间体190所用类似的方法制得(R)-N-((S)-1-(6-叔丁基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.22(s,9H)1.37(s,9H)1.57(d,J＝6.75Hz,3H)3.31(d,J＝3.37Hz,1H)4.56-4.65(m,1H)7.32(d,J＝8.22Hz,1H)7.57(dd,J＝8.24,2.23Hz,1H)8.54(d,J＝2.05Hz,1H).MS m/z283.1(M+H)⁺,Rt0.51分钟。

中间体192：(S)-1-(3-氯-4-(环戊基氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

步骤1

向具有搅拌棒的圆底烧瓶中加入4-((S)-1-氨基乙基-2-氯苯甲酸盐酸盐(1.05g,4.45mmol)，然后加入THF(40mL)。向该溶液中加入DIEA(1.86ml,10.7mmol)。反应混合物变成浑浊白色，然后加入焦炭酸二叔丁基酯(1.07g,4.89mmol)。将所得反应混合物于室温搅拌18小时。此时，然后将反应混合物在油浴中于60℃加热2小时。然后加入焦炭酸二叔丁基酯(1.07g,4.89mmol)和NMP(20ml)，将所得反应混合物于60℃搅拌2小时。除去挥发物。将所得油用NH₄Cl饱和溶液稀释，水性混合物用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤两次，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，得到(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氯苯甲酸的粘稠黄色油(2.32g,6.19mmol,139％产率)，其含有一些过量的焦炭酸二叔丁基酯和NMP。LCMS m/z284.9(M+H)⁺(甲酸碎片+CH₃CN加合物),Rt0.75分钟。

步骤2

向具有搅拌棒的圆底烧瓶中加入(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氯苯甲酸(450mg,1.20mmol)、环戊基胺(355μL,3.60mmol)、EDC HCl(460mg,2.40mmol)、1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(229mg,1.68mmol)和DMF(6mL)。然后向该混合物中加入DIEA(629μL,3.60mmol)。将反应混合物于室温搅拌18小时。反应混合物用水稀释，用EtOAc萃取。合并有机相，用水、盐水洗涤两次，干燥(Na₂SO₄)，过滤，浓缩，得到(S)-1-(3-氯-4-(环戊基氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯的棕色结晶(476mg,1.17mmol,97％产率)。LCMS m/z367.0(M+H)⁺,Rt0.90分钟。

通过与对制备中间体192所述类似的方法制得表4s的中间体。

表4s.

表4t.表4s列出的各个中间体的化学名称和LCMS信号

中间体195：(S)-1-(3-羟基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

将(S)-3-(1-氨基乙基)苯酚(1.188g,6.84mmol)和Boc₂O(1.747mL,7.53mmol)在DCM(17.10mL)中的浆液在氮气下于室温搅拌，同时缓慢加入DIEA(1.434mL,8.21mmol)。开始不溶的原料缓慢溶解。将溶液于室温搅拌16小时，然后浓缩。将油性残余物重新溶于EtOAc中，用饱和Na₂CO₃、然后用盐水洗涤。将原始水层用EtOAc再萃取，然后将其用眼熟盐水洗涤，与以前的EtOAc批次合并。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到2.4g澄清微黄色油粗品，将其通过硅胶柱色谱法纯化(EtOAc/庚烷0至30％)，得到(S)-1-(3-羟基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为澄清无色油，将其静置固化(1.79g,7.55mmol,110％产率).¹H NMR(400MHz,CDCL₃)δ1.44(br.s.,12H)4.08-4.18(m,1H)4.76(br.s.,1H)6.72(dd,J＝7.46,1.83Hz,1H)6.78(br.s.,1H)6.88(br.s.,1H)7.16-7.24(m,1H).LCMS m/z223.0/182.0(未观察到母体，仅仅是Boc碎片)(M+H)⁺,Rt0.71分钟。

中间体196：(S)-1-(3-(环戊基氧基)苯基)乙胺盐酸盐

步骤1：光延(Mitsunobu)反应A

于室温在氮气下向(S)-1-(3-羟基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(107.5mg,0.453mmol)、PPh₃(238mg,0.906mmol)和环戊醇(0.164ml,1.812mmol)在THF(2ml)中的溶液中滴加DEAD(0.143ml,0.906mmol)。将所得黄色溶液搅拌4小时，然后浓缩。将粘稠黄色油重新溶于DMSO中，通过反相HPLC纯化。将合并的产物级分通过在分液漏斗中加入等量的EtOAc和约250mgNa₂CO₃进行脱盐。分离各相，将有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，真空浓缩，得到(S)-1-(3-(环戊基氧基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(75.1mg,0.246mmol,54.3％产率)，为白色固体膜。LCMS m/z291.1/250.0(未观察到母体，仅仅是Boc碎片)(M+H)⁺,Rt1.07分钟。

步骤2

将(S)-1-(3-(环戊基氧基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(75.1mg,0.246mmol)溶于4M HCl在二噁烷中的溶液(1ml,4.00mmol)中，将所得混合物静置1小时，然后浓缩，得到(S)-1-(3-(环戊基氧基)苯基)乙胺，为盐酸盐(假定定量产率)。LCMS m/z206.1(M+H)⁺,Rt0.61分钟。

中间体197：(S)-1-(3-(环己基氧基)苯基)乙胺盐酸盐

步骤1：光延(Mitsunobu)反应B

于室温在氮气下向(S)-1-(3-羟基苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(100mg,0.421mmol)、环己醇(0.180ml,1.686mmol)和PPh₃(221mg,0.843mmol)在THF(2ml)中的溶液中滴加加入DEAD(0.133ml,0.843mmol)。将所得黄色溶液搅拌3小时，此时，于室温加入另一批环己醇(0.180ml,1.686mmol)、PPh₃(221mg,0.843mmol)和10分钟后加入DEAD(0.133ml,0.843mmol)。将反应混合物搅拌16小时，然后浓缩。将澄清油粗品重新溶于DMSO中，通过反相HPLC纯化。将合并的产物级分通过在分液漏斗中加入等量的EtOAc和约250mg Na₂CO₃进行脱盐。分离各相，将有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，真空浓缩，得到(S)-1-(3-(环己基氧基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(74.1mg,0.232mmol,55.0％产率)，为澄清无色膜。LCMS m/z305.0/264.0(未观察到母体，仅仅是Boc碎片)(M+H)⁺,Rt1.12分钟。

步骤2

将(S)-1-(3-(环己基氧基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(74.1mg,0.232mmol)溶于4M HCl在二噁烷中的溶液(1ml,4.00mmol)，将所得混合物静置1小时，然后浓缩，得到(S)-1-(3-(环己基氧基)苯基)乙胺，为盐酸盐(假定定量产率)。LCMS m/z220.1(M+H)⁺,Rt0.66分钟。

采用对制备中间体196或中间体197所述的方法制得表4v的中间体。

表4v.

中间体205：(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺

在20ml微波瓶中称重1-(吡啶-2-基)丙烷-2-酮配体(90mg,0.665mmol)、苯酚(407mg,4.32mmol)、CuBr(47.7mg,0.332mmol)和Cs₂CO₃(2166mg,6.65mmol)。向混合物中加入DMSO(5ml)和(S)-1-(3-溴苯基)乙胺(0.5ml,3.32mmol)。向试管中充入氮气，盖上瓶盖，将黑色混合物在油浴中于90℃加热18小时。将不均匀的混合物用EtOAc稀释，经玻璃烧结漏斗、用EtOAc和另外5ml DMSO洗脱进行过滤。然后真空除去挥发物，将棕色液体粗品经1μm PTFE滤器过滤，经反相HPLC纯化。将合并的产物级分通过在分液漏斗中加入等量的EtOAc和约250mg Na₂CO₃进行脱盐。分离各相，将有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，真空浓缩，得到(S)-1-(3-苯氧基苯基)乙胺(361.5mg,1.678mmol,50.5％产率)，为琥珀色油。LCMSm/z214.1(M+H)⁺,Rt0.61分钟。

中间体206：(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺

步骤1

向烘箱干燥的具有搅拌棒的圆底烧瓶中加入2,3-二氟苯甲醛(0.5g,3.52mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.469g,3.87mmol)和DCE(7.04mL)。然后向该混合物中加入硫酸铜(II)(0.842g,5.28mmol)。将反应混合物在预热油浴中加热至55℃达24小时。将反应混合物经过硅藻土垫、用DEC洗涤固体进行过滤。将合并的滤液浓缩，得到(R,E)-N-(2,3-二氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的粘稠黄色油(0.8007g,3.26mmol,93％产率)。LCMS m/z246.1(M+H)⁺,Rt0.91分钟。

步骤2

在氮气下向冷却至0℃(水/冰浴)的(R,E)-N-(2,3-二氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.800g,3.26mmol)在DCM(32.6mL)中的溶液中加入在二乙醚中的2M MeMgBr溶液(4.35mL,13.05mmol)。将反应混合物于0℃搅拌30分钟。然后逐渐温热至室温，于室温搅拌30分钟。将反应混合物冷却至0℃，然后缓慢加入NH₄Cl饱和溶液进行淬灭，用EtOAc稀释。分配各相，水相用EtOAc萃取，有机层合并，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，浓缩，得到(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.7868g,3.01mmol,92％产率)，为黄色固体。LCMS m/z262.0(M+H)⁺,Rt0.70分钟。

步骤3

向含有(R)-N-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(786.8mg,3.01mmol)的圆底烧瓶中加入二噁烷(10.000mL)。向该溶液中加入HCl在二噁烷中的4.0M溶液(1.505mL,6.02mmol)，将溶液于室温搅拌15分钟。将反应混合物浓缩，溶于Et₂O10ml中，再次浓缩。再次加入Et₂O，将所得混合物进行超声处理，将固体物质过滤，干燥，得到(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺(0.4213g,2.176mmol,72.3％产率)，为白色晶体盐酸盐。¹HNMR(400MHz,D2O)d ppm1.55(d,J＝6.99Hz,3H)4.71(q,J＝6.96Hz,1H)7.10-7.26(m,3H)；LCMS m/z158.0(M+H)⁺,Rt0.37分钟。

中间体207：(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺

步骤1：制备1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯

将4-溴-3-氟苯甲醛(2.03g,10mmol)和(二乙基氨基)三氟化硫(DAST；1.32mL,10mmol)小心地进行加热直至发生放热反应，然后于60℃加热15分钟，使之冷却至室温。将混合物用DCM(20mL)稀释，倒入冰/水(30mL)中。将混合物用NaHCO₃中和至～pH8。将分离的水层用DCM(20mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,40g,庚烷/乙酸乙酯]，得到1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯(0.845g)，为澄清无色油。

步骤2：制备4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛

于-78℃历经～5分钟向1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯(311mg,1.382mmol)在THF(2.99mL)中的的溶液中加入丁基锂(1.6M在己烷中的溶液；0.881mL,1.410mmol)。将反应混合物于-78℃搅拌30分钟，然后历经～1分钟滴加DMF(0.161mL,2.073mmol)。继续搅拌20分钟。将反应混合物用1M HCl水溶液/MeOH(2:1,3mL)萃取，温热至室温。混合物用5mL水稀释。分离的水层用乙醚(5mL)。合并的有机层用1M NaOH水溶液(10mL)和饱和盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，在减压下浓缩。用420mg1-溴-4-(二氟甲基)-2-氟苯重复反应，合并粗物质用于纯化。粗物质经柱色谱法纯化[SiO₂,24g,庚烷/乙酸乙酯]，得到4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛(162.8mg)，为黄色油。

步骤3：制备(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

向4-(二氟甲基)-2-氟苯甲醛(162mg,0.930mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(124mg,1.023mmol)在DCE(3mL)中的混合物中加入硫酸铜(223mg,1.396mmol)。将反应混合物在预热油浴中加热至55℃达38小时。使混合物冷却至室温，经硅藻土垫过滤，用DCE洗涤。合并的滤液在减压下浓缩，得到(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(266mg)，为黄色油，将其未经进一步纯化进行使用。LCMS m/z278.1(M+H)⁺,Rt0.98分钟。

步骤4：制备(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺

于0℃向(R,E)-N-(4-(二氟甲基)-2-氟亚苄基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(266mg,0.959mmol)在DCM(9.6mL)的溶液中加入甲基溴化镁(3M在二乙醚中；1.20mL)。将反应混合物于0℃搅拌30分钟,逐渐温热至室温，于室温搅拌1小时。将混合物冷却至0℃，小心地用饱和NH₄Cl水溶液淬灭(3mL)。分离的水相用DCM萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。粗物质经柱色谱法纯化[SiO₂,40g,庚烷/乙酸乙酯]，得到(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(160.5mg)，为白色固体。LCMS m/z294.5(M+H)⁺,Rt0.85分钟。

步骤5：制备(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺

向(R)-N-((S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(160mg,0.545mmol)中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(409μL)，得到黄色溶液。将所得混合物于室温搅拌～1小时。向混合物中缓慢加入二乙醚(～20mL)。将固体滤出，混悬于二乙醚中，过滤，用二乙醚冲洗，减压干燥，得到(S)-1-(4-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺(103mg)，为灰白色固体，将其未经进一步纯化进行使用。LCMS m/z190.1(M+H)⁺,Rt0.42分钟。

中间体208：(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺

步骤1：制备4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛

在氩气下向嘧啶-5-醇(500mg,5.20mmol)在DMF(5.20mL)中的溶液中加入4-氟苯甲醛(0.558mL,5.20mmol)、甲烷亚磺酸钠(133mg,1.30mmol)和碳酸钾(1.079g,7.81mmol)。将反应混合物于120℃加热3小时。将混合物冷却至室温，用水(25mL)稀释。混合物用EtOAc(2x25mL)萃取。合并的有机层用盐水(2x50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经柱色谱法纯化[SiO₂,24g,庚烷/乙酸乙酯]，得到4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛(666mg)，为黄色固体。LCMS m/z201.0(M+H)⁺,Rt0.52分钟。

步骤2：制备(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亚苄基)丙烷-2-亚磺酰胺

将4-(嘧啶-5-基氧基)苯甲醛(666mg,3.33mmol)、(R)-(+)-叔丁烷亚磺酰胺(450mg,3.71mmol)和无水硫酸铜(796mg,4.99mmol)在二氯乙烷(7.648mL)中的混合物在氩气下于55℃加热～21小时。将反应混合物冷却至室温。将浆液经硅藻土垫用DCM(5x10mL)洗脱进行过滤。合并的滤液在减压下浓缩，所得微黄色油经柱色谱法纯化[SiO₂,24g,庚烷/乙酸乙酯]，得到(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亚苄基)丙烷-2-亚磺酰胺(836mg)，为单色粘稠油。LCMS m/z304.0(M+H)⁺,Rt0.79分钟。

步骤3：制备2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺

将(R,E)-2-甲基-N-(4-(嘧啶-5-基氧基)亚苄基)丙烷-2-亚磺酰胺(830mg,2.74mmol)在DCM(6.72mL)中的溶液冷却至-40℃。历经10分钟向溶液中滴加甲基溴化镁(3M在二乙醚中；1.81mL)。加入另外DCM(5mL)以维持搅拌。将黄色混悬液于-40℃搅拌～30分钟，同时温热至-20℃。将混合物冷却至-40℃，加入另外的甲基溴化镁(3M在二乙醚中；1.8mL)。将混悬液搅拌～3小时，同时缓慢温热至-20℃。将混合物冷却至～-40℃，加入另外的甲基溴化镁(3M在二乙醚中；0.4mL)。将混悬液搅拌30分钟，温热至-10℃。历经10分钟用饱和NH₄Cl水溶液(10mL)将混合物进行淬灭。混合物用饱和NH₄Cl水溶液(30mL)和水(15mL)稀释。分离的水相用DCM萃取(2x75mL)。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经硅胶色谱法纯化[SiO₂,40g,庚烷/乙酸乙酯，然后5％MeOH在EtOAc中的溶液]，得到2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(55mg；纯度～87％)，为灰白色固体。LCMSm/z320.0(M+H)⁺,Rt0.69分钟。

步骤4：制备(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺

向2-甲基-N-((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(55mg,0.172mmol)中加入4M HCl在二噁烷中的溶液(800μL,3.20mmol)，得到白色混悬液。将所得混合物于室温搅拌～35分钟，在减压下浓缩，得到粗的(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺(44mg)，为HCl盐，将其未经进一步纯化进行使用。LCMS m/z217.1(M+H)⁺,Rt0.37分钟。

中间体209：5-氯-6-(1,1-二氟乙基)烟碱醛

步骤1：制备5,6-二氯烟酸乙基酯

于20℃向5,6-二氯烟酸(20.01g,104mmol)在EtOH(500mL)中的溶液中加入氯三甲基甲硅烷(132mL,1042mmol)。将反应物搅拌72小时。然后将反应混合物浓缩，用EtOAc(500mL)稀释，用饱和NaHCO₃(2x100mL)和盐水(100mL)洗涤。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩，得到最终粗产物(21.25g)。LCMS m/z220.1(M+H)⁺,Rt0.94分钟。

步骤2：制备6-乙酰基-5-氯烟酸乙基酯

向5,6-二氯烟酸乙基酯(5.26g,23.90mmol)和四乙基氯化铵(11.88g,71.7mmol)在MeCN(50mL)中的混悬液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(9.50g,26.3mmol)和PdCl₂(PPh₃)₂(0.671g,0.956mmol)。将反应物密封，于80℃加热5小时。产生深色澄清溶液。然后将反应混合物冷却至20℃，浓缩，用EtOAc(200mL)稀释，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到粗的5-氯-6-(1-乙氧基乙烯基)烟酸乙基酯。然后将残余物溶于THF(100mL)中，加入HCl(20mL,3M在H₂O中)。反应混合物于20℃搅拌5小时，加入饱和NaHCO₃溶液直至pH＝8。然后将混合物用EtOAc(200mL)和水(50mL)稀释。分离各相，将水层用EtOAc(2x50mL)萃取。合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到预期产物(3.56g)。LCMS m/z228.5(M+H)⁺,Rt0.83分钟。

步骤3：制备5-氯-6-(1,1-二氟乙基)烟酸乙基酯

向6-乙酰基-5-氯烟酸乙基酯(3.01g,13.22mmol)在CHCl₃(7mL)中的溶液中加入DAST(5.20mL,39.7mmol)和乙醇(0.061g,1.32mmol)。将反应物密封，于60℃加热24小时。产生深色澄清溶液。然后将反应混合物冷却至20℃，小型加入冷的浓NaHCO₃水溶液(50mL)。水层用DCM(2x100mL)萃取。然后将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，浓缩。残余物经硅胶快速色谱法纯化(0-20％EtOAc-己烷)，得到预期产物，为黄色油(2.88g)。LCMS m/z250.1(M+H)⁺,Rt0.99分钟。

步骤4：制备(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇

向5-氯-6-(1,1-二氟乙基)烟酸乙基酯(2.68g,10.74mmol)在Et₂O(40mL)中的溶液中加入LiBH₄(0.351g,16.10mmol)，然后滴加甲醇(0.653mL,16.10mmol)。将反应物于40℃回流1小时。然后将反应混合物冷却至0℃，用HCl(1M)淬灭直至水层的pH＝2。分离各相，将水层用DCM(3x50mL)萃取。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩，得到最终粗产物(2.12g)。LCMS m/z208.0(M+H)⁺,Rt0.63分钟。

步骤5：制备5-氯-6-(1,1-二氟乙基)烟碱醛

向(5-氯-6-(1,1-二氟乙基)吡啶-3-基)甲醇(2.12g,10.21mmol)在DCM(100ml)中的溶液中加入PCC(3.30g,15.32mmol)。反应物于20℃搅拌3小时。产生深色混悬液。LCMS显示完全转化为产物。然后将反应混合物经硅藻土垫过滤，用DCM(200mL)洗涤。然后将滤液浓缩，得到粗产物(1.78g)。LCMS m/z224.0(M+H2O+H)⁺,Rt0.72分钟。

中间体210：5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)烟碱醛

步骤1：制备5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)烟酸乙基酯

于-73℃向5,6-二氯烟酸乙基酯(6.28g,28.5mmol)和2,2,2-三氟乙醇(2.71ml,37.1mmol)在THF(90ml)中的溶液中加入NaHMDS(37.1ml,37.1mmol)。反应物于-73℃搅拌30分钟，然后于0℃搅拌5小时。将反应物用30mL饱和NH₄Cl溶液淬灭。然后将反应混合物倒入50mL盐水中，分离各相。水层用DCM(2x100mL)萃取。将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，浓缩。用100％庚烷至30％EtOAc在庚烷中的溶液进行硅胶色谱法，得到最终产物(7.51g)。LCMS m/z284.1(M+H)⁺,Rt1.07分钟。

步骤2：制备(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇

向5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)烟酸乙基酯(7.51g,26.5mmol)在Et₂O(200mL)中的溶液中加入LiBH₄(0.865g,39.7mmol)，然后滴加甲醇(1.611ml,39.7mmol)。将反应物于40℃回流1小时。然后将反应混合物冷却至0℃，用HCl(1M)淬灭直至水层的pH＝2。分离各相，将水层用DCM(3x200mL)萃取。然后将有机物干燥(Na₂SO₄)，在减压下浓缩，得到最终粗产物(6.31g)。LCMS m/z242.1(M+H)⁺,Rt0.77分钟。

步骤3：制备5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)烟碱醛

向(5-氯-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)甲醇(4.00g,16.56mmol)在EtOAc(15mL)中的溶液中加入氧化锰(IV)(16.93g,166mmol)。将反应物用微波于120℃加热30分钟。然后将混合物经硅藻土垫过滤，用EtOAc冲洗。将滤液浓缩，得到粗产物(3.38g)。

通过与对制备中间体210和192所述类似的方法制得表4w的中间体。

表4w.

中间体213：(S)-3-(2-((S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

向(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(71mg,0.2mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(27mg,0.24mmol)和DIPEA(0.070mL,0.4mmol)。将溶液于室温搅拌16小时，然后用水和盐水洗涤。分离后，有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗产物未经进一步纯化用于下一步骤。MS m/z373.4(M-H)。

中间体214：3-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)-3,8-二氮杂双环[4.2.0]辛烷-8-甲酸叔丁基酯

采用与制备中间体128所用相似的方法，但是采用4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲醛和3,8-二氮杂双环[4.2.0]辛烷-8-甲酸叔丁基酯，制得了标题化合物，为白色固体(64mg,58.1％产率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(dd,J＝5.9,0.9Hz,1H),7.42(d,J＝5.7Hz,1H),7.28-7.23(m,4H),5.39(br s,1H),5.02(br s,1H),4.62-4.59(m,1H),4.28(t,J＝8.7Hz,1H),4.21(dd,J＝9.0,3.2Hz,2H),3.89(td,J＝7.7,1.9Hz,1H),3.54-3.50(m,2H),3.03(d,J＝12.2Hz,1H),2.65-2.60(m,1H),2.54-2.40(m,2H),2.10(br s,1H),1.99-1.88(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.65(br s,1H),1.52(dd,J＝6.8,1.9Hz,3H),1.38(t,J＝7.7Hz,9H),0.71(br s,3H),0.66(br s,3H).MS m/z569.1(M+H)。

中间体215：1-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)哌啶-4-基氨甲酸叔丁基酯

采用与制备中间体128所用相似的方法，但是采用4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲醛和哌啶-4-基氨甲酸叔丁基酯，制得了标题化合物，为白色固体(32mg,59％产率)。MS m/z539.4(M+H)。

实施例

实施例1：(S)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-5,5-二甲基-4-苯基噁唑烷-2-酮(33.9mg,0.112mmol)和(S)-(-)-1-苯基乙胺(0.15mL,1.2mmol,10当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热140分钟。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(37.0m_g,白色固体)，85％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.06(d,J＝5.8Hz,1H),7.43(d,J＝5.8Hz,1H),7.31-7.24(m,3H),7.19-7.11(m,5H),7.01(br s2H),5.48(s,1H),4.86-4.80(m,1H),1.65(s,3H),1.43(d,J＝7.0Hz,3H),0.98(s,3H)；HRMS(B)m/z389.1987(M+H)⁺。

供选方法

实施例113：(S)-3-(2-((S)-1-(4-羟基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(42mg,0.17mmol)、(S)-4-(1-氨基乙基)苯酚盐酸盐(107mg,0.616mmol,3.5当量)和iPr₂NEt(0.121mL,0.695mmol,4.0当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热3小时，于130℃另外加热2小时。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至80％)得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-羟基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(3mg)，5％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.33(d,J＝5.8Hz,1H),7.12(d,J8.1Hz,2H),6.72-6.68(m,2H),4.95(q,J＝6.9Hz,1H),4.69-4.65(m,1H),4.35-4.28(m,2H),1.47(d,J＝7.1Hz,3H),0.75(br s,3H),0.62(br s,3H)；HRMS(B)m/z343.1776(M+H)⁺。

采用与对制备实施例1和113所述类似的方法制得表5的化合物。

表5.

表6.表5所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例170：(4S)-4-异丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(163mg,0.674mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(624mg,3.56mmol,5.3当量)和对甲苯磺酸一水合物(321mg,1.69mmol,2.5当量)在n-BuOH(3mL)中的溶液于110℃加热2小时，用另外的对甲苯磺酸一水合物处理(321mg,1.69mmol,2.5当量)，然后于110℃加热1¹/₂小时。冷却后，将固体反应混合物用MeCN处理，进行超声处理，过滤。将滤液浓缩，经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc/庚烷0至30％)，得到(4S)-4-异丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(65mg)，25％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.215(d,J＝6.1Hz,0.5H),8.212(d,J＝6.1Hz,0.5H),7.52(t,J＝7.1Hz,2H),7.46(dd,J＝5.8,3.8Hz,1H),7.43-7.34(m,3H),5.86(qd,J＝8.2,4.0Hz,1H),4.83-4.75(m,1H),4.42-4.33(m,2H),2.62(dtd,J＝14,7.0,3.8Hz,0.5H),2.28(br s,0.5H),1.02(d,J＝7.1Hz,1.5H),0.91(d,J＝7.1Hz,1.5H),0.88(d,J＝7.11Hz,1.5H),0.73(d,J＝7.1Hz,1.5H)；HRMS(B)m/z381.1545(M+H)⁺。

实施例171和172

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(106mg,0.439mmol)和1-(3-氟苯基)乙胺(196mg,1.41mmol,3.21当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例171第一个洗脱的产物(28mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.36-7.27(m,2H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),7.07(dt,J＝10,2.0Hz,1H),6.92-6.88(m,1H),4.98-4.93(m,1H),4.42(br s,1H),4.32(dd,J＝9.1,2.8Hz,1H),4.26(t,J＝8.7Hz,1H),2.64(dtd,J＝14,7.1,3.5Hz,1H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),0.98(d,J＝7.1Hz,3H),0.85(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z345.1729(M+H)⁺。

实施例172第二个洗脱的产物(22mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.36(d,J＝5.8Hz,1H),7.29(td,J＝8.1,6.1Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.06-7.04(m,1H),6.94-6.87(m,1H),5.03(q,J＝7.1Hz,1H),4.64(br s,1H),4.34-4.26(m,2H),1.79(br s,1H),1.50(d,J＝7.1Hz,3H),0.70(br s,3H),0.58(br s,3H)；HRMS(B)m/z345.1727(M+H)⁺。

实施例173和174

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(90mg,0.37mmol)、iPr₂NEt(0.455mL,2.61mmol,7.0当量)和1-(联苯-4-基)乙胺盐酸盐(87mg,0.37mmol)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热2小时。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(联苯-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(联苯-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例173第一个洗脱的产物(17mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.59-7.54(m,4H),7.43-7.28(m,6H),5.01(q,J＝6.8Hz,1H),4.49(br s,1H),4.32(dd,J＝9.1,3.0Hz,1H),4.26(t,J＝8.6Hz,1H),2.67(dtd,J＝14,7.0,3.5Hz,1H),1.55(d,J＝7.1Hz,3H),1.01(d,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z403.2141(M+H)⁺。

实施例174第二个洗脱的产物(21mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.14(d,J＝5.8Hz,1H),7.58-7.52(m,4H),7.42-7.28(m,6H),5.06(q,J＝7.1Hz,1H),4.63(br s,1H),4.34-4.25(m,2H),1.79(br s,1H),1.55(d,J＝7.1Hz,3H),0.65(br s,3H),0.53(br s,3H)；HRMS(B)m/z403.2139(M+H)⁺。

实施例175和176

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(96mg,0.40mmol)和1-(4-氯苯基)乙胺(204mg,1.31mmol,3.3当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热3小时。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(4-氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(4-氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例175第一个洗脱的产物(32mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.10(d,J＝5.8Hz,1H),7.36-7.28(m,5H),4.95(q,J＝6.7Hz,1H),4.45(br s,1H),4.35-4.26(m,2H),2.64(dtt,J＝11,7.0,3.4Hz,1H),1.50(d,J＝7.1Hz,3H),0.98(d,J＝7.1Hz,3H),0.85(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z361.1430(M+H)⁺。

实施例176第二个洗脱的产物(40mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.36-7.26(m,5H),5.00(q,J＝7.1Hz,1H),4,62(br s,1H),4.34-4.26(m,2H),1.77(br s,1H),1.50(d,J＝7.1Hz,3H),0.68(br s,3H),0.59(br s,3H)；HRMS(B)m/z361.1431(M+H)⁺。

实施例177和178

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(93mg,0.38mmol)和1-(3,4-二氯苯基)乙胺(73.1mg,0.385mmol,1.0当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(3,4-二氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例177第一个洗脱的产物(21mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.50(d,J＝2.0Hz,1H),7.44(d,J＝8.2Hz,1H),7.37(d,J＝5.8Hz,1H),7.28(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H),4.94-4.88(m,1H),4.43(br s,1H),4.35-4.26(m,2H),2.68-2.60(m,1H),1.50(d,J＝7.1Hz,3H),0.99(d,J＝7.1Hz,3H),0.85(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z395.1035(M+H)⁺。

实施例178第二个洗脱的产物(28mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.15(d,J＝5.8Hz,1H),7.47-7.42(m,2H),7.37(d,J＝5.8Hz,1H),7.25(dd,J＝8.1,2.0Hz,1H),5.01-4.96(m,1H),4.61(br s,1H),4.34-4.26(m,2H),1.72(br s,1H),1.50(d,J＝7.1Hz,3H),0.67(br s,3H),0.60(br s,3H)；HRMS(B)m/z395.1044(M+H)⁺。

实施例179和180

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(86mg,0.36mmol)和1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙胺(100mg,0.537mmol,1.5当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(3-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例179第一个洗脱的产物(14mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.45(t,J＝1.8Hz,1H),7.39-7.29(m,3H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),7.13(t,J＝2.0Hz,2H),6.25(t,J＝2.1Hz,2H),5.03-4.97(m,1H),4.46(br s,1H),4.31-4.20(m,2H),2.64(dtd,J＝14,7.0,3.8Hz,1H),1.56(d,J＝7.1Hz,3H),0.95(d,J＝7.1Hz,3H),0.84(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z392.2092(M+H)⁺。

实施例180第二个洗脱的产物(10mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.14(d,J＝5.7Hz,1H),7.42(br s,1H),7.38-7.28(m,3H),7.20(d,J＝7.6Hz,1H),7.12(t,J＝2.3Hz,2H),6.25(t,J＝2.0Hz,2H),5.09(q,J＝6.9Hz,1H),4.64(br s,1H),4.32-4.23(m,2H),1.84(br s,1H),1.55(d,J＝7.1Hz,3H),0.54(br s,6H)；HRMS(B)m/z392.2090(M+H)⁺。

实施例181和182

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(44mg,0.18mmol)和1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙胺(33.9mg,0.182mmol,1当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热2小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(4-(1H-吡咯-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例181第一个洗脱的产物(18mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.44-7.39(m,4H),7.35(d,J＝5.9Hz,1H),7.13(t,J＝2.2Hz,2H),6.24(t,J＝2.0Hz,2H),5.02-4.96(m,1H),4.49(br s,1H),4.34-4.25(m,2H),2.66(dtd,J＝14,7.0,3.3Hz,1H),1.53(d,J＝7.1Hz,3H),1.00(d,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z392.2089(M+H)⁺。

实施例182第二个洗脱的产物(9mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.14(d,J＝5.8Hz,1H),7.39(s,4H),7.35(d,J＝5.9Hz,1H),7.12(t,J＝2.2Hz,2H),6.25(t,J＝2.0Hz,2H),5.05(q,J＝7.1Hz,1H),4.64(br s,1H),4.34-4.26(m,2H),1.87(br s,1H),1.53(d,J＝7.1Hz,3H),0.68(br s,3H),0.57(br s,3H)；HRMS(B)m/z392.2082(M+H)⁺。

实施例183和184

将(4S)-3-(2-((1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(实施例118)的混合物在柱子(AS-H4.6x100mm)上采用30％iPrOH(在CO₂中)进行拆分，得到(S)-3-(2-((R)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(3,4-二甲氧基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例183第一个洗脱的产物(13mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.33(d,J＝5.8Hz,1H),6.97(br d,J＝1.5Hz,1H),6.92-6.88(m,2H),4.96(q,J＝6.7Hz,1H),4.61-4.55(m,1H),4.35-4.28(m,2H),3.803(s,3H),3.800(s,3H),2.63(dtd,J＝14,7.0,3.5Hz,1H),1.51(d,J＝7.1Hz,3H),0.99(d,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z387.2031(M+H)⁺。

实施例184第二个洗脱的产物(10mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.13(d,J＝5.8Hz,1H),7.32(d,J＝5.7Hz,1H),6.94(br d,J＝1.1Hz,1H),6.89-6.84(m,2H),4.99(q,J＝7.1Hz,1H),4.67-4.63(m,1H),4.36-4.26(m,2H),3.79(s,6H),2.01(br s,1H),1.51(d,J＝7.1Hz,3H),0.71(d,J＝7.1Hz,3H),0.63(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z387.2029(M+H)⁺。

实施例185和186

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(93mg,0.38mmol)和1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙胺(410mg,2.01mmol,5.2当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热2小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至100％)，得到(4S)-4-异丙基-3-(2-((1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(57mg)，36％产率。将(4S)-4-异丙基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮的混合物在柱子(AD-H4.6x100mm)上采用含0.2％Et₂NH(在CO₂中)的5-55％MeOH进行拆分，得到(S)-4-异丙基-3-(2-((R)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例185第一个洗脱的产物(16mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.10(d,J＝5.8Hz,1H),7.31(d,J＝5.8Hz,1H),7.24-7.20(m,2H),6.94-6.91(m,2H),4.93(q,J＝7.1Hz,1H),4.58-4.54(m,1H),4.34-4.27(m,2H),3.11-3.08(m,4H),2.63(dtd,J＝14,7.1,3.5Hz,1H),1.73-1.67(m,4H),1.60-1.54(m,2H),1.49(d,J＝7.1Hz,3H),0.98(d,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z410.2555(M+H)⁺。

实施例186第二个洗脱的产物(16mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.31(d,J＝5.8Hz,1H),7.20-7.16(m,2H),6.93-6.89(m,2H),4.98(q,J＝6.9Hz,1H),4.69-4.65(m,1H),4.36-4.26(m,2H),3.10-3.07(m,4H),2.07(br s,1H),1.73-1.67(m,J＝4H),1.60-1.54(m,2H),1.48(d,J＝7.1Hz,3H),0.75(d,J＝7.0Hz,3H),0.63(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z410.2556(M+H)⁺。

实施例187和188

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(96mg,0.40mmol)和1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙胺(387mg,2.97mmol,5.2当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷20至80％)得到(S)-4-异丙基-3-(2-((R)-1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例187第一个洗脱的产物(13mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.16(d,J＝5.8Hz,1H),8.10(s,1H),7.70-7.66(m,3H),7.48-7.43(m,2H),7.37(d,J＝5.7Hz,1H),7.32-7.28(m,1H),5.20(q,J＝6.6Hz,1H),4.75(dt,J＝7.7,4.0Hz,1H),4.40-4.33(m,2H),2.61(dtt,J＝11,7.0,3.6Hz,1H),1.60(d,J＝6.9Hz,3H),0.96(d,J＝7.1Hz,3H),0.87(d,J＝6.9Hz,3H)；HRMS(B)m/z393.2029(M+H)⁺。

实施例188第二个洗脱的产物(11mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.17(d,J＝5.8Hz,1H),8.03(s,1H),7.68-7.62(m,3H),7.48-7.43(m,2H),7.37(d,J＝5.8Hz,1H),7.32-7.27(m,1H),5.19(q,J＝7.1Hz,1H),4.74(dt,J＝8.5,3.6Hz,1H),4.38-4.29(m,2H),2.37-2.33(m,1H),1.60(d,J＝7.1Hz,3H),0.79(d,J＝7.1Hz,3H),0.73(s,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z393.2039(M+H)⁺。

实施例189和190

将(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(97mg,0.35mmol)、1-(联苯-4-基)乙胺盐酸盐(304mg,1.30mmol,3.7当量)和iPr₂NEt(0.307mL,1.76mmol,5.0当量)在DMSO(1mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时，于130℃加热20小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至50％)，得到(R)-3-(2-((R)-1-(联苯-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮和(R)-3-(2-((S)-1-(联苯-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮。

实施例189第一个洗脱的产物(12mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.10(d,J＝5.8Hz,1H),7.58-7.55(m,2H),7.44-7.37(m,6H),7.33-7.28(m,1H),7.24-7.14(m,6H),5.84(dd,J＝8.6,3.5Hz,1H),4.94(q,J＝6.7Hz,1H),4.81(t,J＝8.6Hz,1H),4.22(dd,J＝8.8,3.8Hz,1H),1.49(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z437.1981(M+H)⁺。

实施例190第二个洗脱的产物(11mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.10(d,J＝5.8Hz,1H),7.60-7.54(m,4H),7.44-7.28(m,11H),5.60(dd,J＝8.6,4.0Hz,1H),4.77-4.69(m,2H),4.19(dd,J＝8.6,4.0Hz,1H),1.25(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z437.1971(M+H)⁺。

实施例191和192

将(4S)-3-(2-(1-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯-6-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(实施例130,52mg)在柱子(IA4.6x100mm)上采用40％iPrOH(在CO₂中)进行拆分，得到(S)-3-(2-((R)-1-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯-6-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯-6-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例191第一个洗脱的产物(7mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.10(d,J＝5.6Hz,1H),7.33-7.31(m,1H),6.82-6.74(m,3H),4.88(q,J＝7.1Hz,1H),4.58-4.53(m,1H),4.34-4.28(m,2H),4.21-4.18(m,4H),2.63(td,J＝7.1,3.5Hz,1H),1.47(d,J＝7.1Hz,3H),0.99(d,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z385.1875(M+H)⁺。

实施例192第二个洗脱的产物(19mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.33-7.31(m,1H),6.78-6.72(m,3H),4.93(q,J＝6.7Hz,1H),4.68-4.64(m,1H),4.36-4.27(m,2H),2.08(br s,1H),1.47(d,J＝7.1Hz,3H),0.76(d,J＝7.1Hz,3H),0.65(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z385.1873(M+H)⁺。

实施例193和194

(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(83mg,0.30mmol)和1-(3,4-二氯苯基)乙胺(260mg,1.37mmol,4.5当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于110℃加热1¹/₂小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷0至40％)，得到(R)-3-(2-((R)-1-(3,4-二氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮和(R)-3-(2-((S)-1-(3,4-二氯苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮。

实施例193第一个洗脱的产物(13mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.11(d,J＝5.6Hz,1H),7.44-7.38(m,5H),7.35-7.31(m,1H),7.27-7.25(m,2H),7.18(dd,J＝8.3,2.3Hz,1H),5.53(dd,J＝8.8,3.8Hz,1H),4.76(t,J＝8.8Hz,1H),4.59-4.53(m,1H),4.18(dd,J＝8.8,4.3Hz,1H),1.22(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z429.0899(M+H)⁺。

实施例194第二个洗脱的产物(26mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.13(d,J＝5.6Hz,1H),7.41(d,J＝6.1Hz,1H),7.25-7.18(m,5H),7.09-7.06(m,2H),6.95-6.93(m,1H),5.78(dd,J＝8.6,3.5Hz,1H),4.89(q,J＝6.7Hz,1H),4.79(t,J＝8.6Hz,1H),4.18(dd,J＝8.8,3.8Hz,1H),1.42(d.J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z429.0887(M+H)⁺。

实施例195和196

将(4S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(实施例141,51mg)在柱子(IA4.6x100mm)上采用45％MeOH(在CO₂中)进行拆分，得到(S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-((S)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(S)-4-甲基-4-苯基-3-(2-((R)-1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例195第一个洗脱的产物(21.6mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.13(d,J＝5.8Hz,1H),7.41(d,J＝5.8Hz,1H),7.36-7.33(m,4H),7.32-7.26(m,1H),6.88-6.82(br m,4H),5.01(br s,1H),4.30(s,2H),3.16-3.13(m,4H),2.20(s,3H),1.76-1.57(br m,6H),1.37(d,J＝6.7Hz,3H)；HRMS(B)m/z458.2558(M+H)⁺。

实施例196第二个洗脱的产物(20.6mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.14(d,J＝5.8Hz,1H),7.50-7.27(m,6H),7.05(d,J＝8.6Hz,2H),6.96-6.92(br m,2H),5.27(br s,1H),4.22(s,2H),3.21-3.13(m,4H),1.78-1.76(brm,7H),1.63-1.57(br m,2H),1.07(d,J＝6.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z458.2559(M+H)⁺。

实施例197和198

将4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(实施例183,70mg)在柱子(IA4.6x100mm)上采用40％MeOH(在CO₂中)进行拆分，得到(S)-4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(R)-4,4-二甲基-3-(2-(1-(4-(哌啶-1-基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例197第一个洗脱的产物(23.8mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17(br d,J＝5.8Hz,1H),7.28-7.23(m,3H),6.93(br d,J＝7.7Hz,2H),5.44(br s,1H),4.97(br s,1H),4.05-3.99(m,2H),3.15-3.12(m,4H),1.77-1.70(m,8H),1.61-1.54(m,5H),1.32(br s,2H)；HRMS(B)m/z396.2413(M+H)⁺。

实施例198第二个洗脱的产物(22.3mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17(br d,J＝5.5Hz,1H),7.28-7.23(m,3H),6.94(br d,J＝7.5Hz,2H),5.48(br s,1H),4.97(br s,1H),4.05-3.99(m,2H),3.15-3.12(m,4H),1.77-1.70(m,8H),1.61-1.54(m,5H),1.31(br s,2H)；HRMS(B)m/z396.2410(M+H)⁺。

实施例199和200

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(98mg,0.41mmol)、1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙胺盐酸盐(502mg,2.08mmol,5.1当量)和iPr₂NEt(0.637mL,3.65mmol,9.0当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于110℃加热16小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷20至80％)得到(S)-3-(2-((R)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例199第一个洗脱的产物(49mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.16(d,J＝5.8Hz,1H),8.06(s,1H),7.71-7.67(m,3H),7.37(d,J＝5.9Hz,1H),7.22-7.16(m,2H),5.20(q,J＝6.6Hz,1H),4.74(dt,J＝7.6,3.8Hz,1H),4.40-4.34(m,2H),2.60(dtd,J＝14,7.0,3.5Hz,1H),1.59(d,J＝6.9Hz,3H),0.96(d,J＝7.1Hz,3H),0.87(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z411.1943(M+H)⁺。

实施例200第二个洗脱的产物(27mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.17(d,J＝5.8Hz,1H),8.00(s,1H),7.69-7.66(m,2H),7.61(s,1H),7.37(d,J＝5.9Hz,1H),7.22-7.16(m,2H),5.19(q,J＝6.7Hz,1H),4.73(dt,J＝8.1,3.5Hz,1H),4.39-4.30(m,2H),2.38-2.31(m,1H),1.59(d,J＝6.8Hz,3H),0.79(d,J＝7.1Hz,3H),0.73(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z411.1937(M+H)⁺。

实施例201和202

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(93mg,0.38mmol)、1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙胺盐酸盐(514mg,2.03mmol,5.3当量)和iPr₂NEt(0.605mL,3.46mmol,9.0当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于110℃加热16小时。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷10至70％)得到(S)-4-异丙基-3-(2-((R)-1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例201第一个洗脱的产物(17mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.15(d,J＝5.8Hz,1H),7.98(s,1H),7.63(s,1H),7.58-7.54(m,2H),7.37(d,J＝5.8Hz,1H),7.03-6.99(m,2H),5.19(q,J＝7.1Hz,1H),4.75(dt,J＝7.7,4.0Hz,1H),4.40-4.33(m,2H),3.83(s,3H),2.61(dtd,J＝14,7.1,3.5Hz,1H),1.59(d,J＝7.1Hz,3H),0.96(d,J＝7.1Hz,3H),0.87(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z423.2138(M+H)⁺。

实施例202第二个洗脱的产物(18mg)¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.16(d,J＝5.8Hz,1H),7.91(s,1H),7.58-7.53(m,3H),7.37(d,J＝5.9Hz,1H),7.03-6.99(m,2H),5.18(q,J＝6.7Hz,1H),4.76-4.72(m,1H),4.39-4.30(m,2H),3.83(s,3H),2.31(br s,1H),1.59(d,J＝7.1Hz,3H),0.80(d,J＝7.1Hz,3H),0.73(d,J＝7.1Hz,3H)；HRMS(B)m/z423.214(M+H)⁺。

实施例203和204

将4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(实施例54,62mg)在柱子(AD-H4.6x100mm)上采用用0.2％Et₂NH(在CO₂中)改性的30％MeOH进行拆分，得到(S)-4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(R)-4-(4-甲氧基苯基)-5,5-二甲基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

实施例203第一个洗脱的产物(22mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12(br d,J＝5.6Hz,1H),7.53(d,J＝5.7Hz,1H),7.37-7.24(m,5H),7.08-7.05(m,2H),6.92-6.89(m,2H),5.47(br s,1H),5.02(br s,1H),4.66(br s,1H),3.83(s,3H),1.50(s,3H),1.28(br d,J＝6.6Hz,3H),1.01(s,3H)；HRMS(B)m/z419.208(M+H)⁺。

实施例204第二个洗脱的产物(22.2mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.11(br d,J＝6.1Hz,1H),7.55(d,J＝5.8Hz,1H),7.28-7.22(m,3H),7.08(brs,2H),7.01(d,J＝8.6Hz,2H),6.79(d,J＝8.6Hz,2H),5.40(br s,1H),5.30(s,1H),4.83(br s,1H),3.78(s,3H),1.66(s,3H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H),1.04(s,2H)；HRMS(B)m/z419.2083(M+H)⁺。

实施例205

于-78℃向4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(78mg,0.14mmol)在DCM(1mL)中的溶液中缓慢加入TFA(1mL,12mmol)。反应物于室温搅拌1小时，然后浓缩，用DCM(10mL)稀释。将溶液与3当量MP-碳酸酯树脂(3.28mmol/g,Biotage)一起于室温搅拌1小时。过滤除去树脂，用DCM洗涤。将滤液浓缩，经HPLC纯化，得到(S)-3-(2-(((S)-1-(4-((3,3-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为白色固体(23mg,36％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.07(d,J＝5.8Hz,1H),7.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.26-7.18(m,4H),5.00(q,J＝6.9Hz,1H),4.62(br s,1H),4.36-4.16(m,2H),3.36(s,2H),2.81(br t,J＝5.1Hz,2H),2.30(br s,2H),2.10(br s,2H),1.82(br s,1H),1.45(d,J＝7.0Hz,3H),1.08(s,6H),0.67(br s,3H),0.52(brs,3H)；HRMS(B)m/z453.2969(M+H)⁺。

实施例206

将4-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苄基)哌嗪-1-甲酸苄基酯(190mg,0.34mmol)和10％Pd-C(40mg,0.038mmol)在乙醇(3.4ml)中的混合物在1个大气压的氢气下搅拌3小时。将混合物过滤，浓缩，得到(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮，为白色固体(97mg,67.2％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.08(d,J＝5.8Hz,1H),7.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.28-7.19(m,4H),5.01(q,J＝7.0Hz,1H),4.63(br s,1H),4.37-4.14(m,2H),3.44(s,2H),2.78(t,J＝5.0Hz,4H),2.39(br s,4H),1.89(br s,1H),1.45(d,J＝7.0Hz,3H),0.68(br s,3H),0.52(br s,3H)；HRMS(B)m/z425.2662(M+H)⁺。

实施例207

在5mL微波瓶中，将(S)-3-(2-((S)-1-(4-溴苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(86mg,0.21mmol)、吡啶-4-基硼酸(26mg,0.21mmol)、碳酸氢钠(0.21mL,0.42mmol,2M溶液)在二噁烷(1mL)中的溶液充入氮气3分钟，然后加入Cl₂Pd(dppf).CH₂Cl₂(17mg,0.021mmol)。将盖上瓶盖的试管于100℃加热16小时。冷却后，反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，用水(10mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc在庚烷中的12至100％溶液)，得到(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(2-基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮，为白色固体(27mg,30.5％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.35(d,J＝5.4Hz,1H),8.08(d,J＝5.9Hz,1H),7.64-7.60(m,2H),7.49(br d,J＝1.8Hz,1H),7.43-7.39(m,3H),7.30(d,J＝5.8Hz,1H),5.02(q,J＝6.8Hz,1H),4.55(br s,1H),4.27-4.18(m,2H),2.52(s,3H),1.65(br s,1H),1.49(d,J＝7.1Hz,3H),0.55(br s,3H),0.43(br s,3H)；HRMS(B)m/z418.2227(M+H)⁺。

实施例208

于-78℃向4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)氨甲酸叔丁基酯(45mg,0.09mmol)在DCM(1mL)中的溶液中缓慢加入TFA(1mL,12mmol)。反应物于室温搅拌1小时，然后浓缩，用DCM(10mL)稀释。将溶液用饱和NaHCO₃溶液和盐水洗涤。分离后，水相用DCM(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩，得到(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮，为白色固体(35mg,97％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.09(d,J＝5.9Hz,1H),7.86(s,1H),7.72(d,J＝0.8Hz,1H),7.45-7.41(m,2H),7.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.25(d,J＝7.9Hz,2H),4.97(q,J＝7.0Hz,1H),4.58(br s,1H),4.30-4.21(m,2H),3.86(s,3H),1.66(br s,1H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H),0.60(br s,3H),0.48(br s,3H)；HRMS(B)m/z407.2179(M+H)⁺。

实施例209

按照实施例208的上述操作，由(S)-1-(4-(环己烷甲酰氨基)苯基)乙基(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨甲酸叔丁基酯制得N-(4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯基)环己烷甲酰胺，为白色固体(45mg,92％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.08(d,J＝5.9Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.23-7.16(m,2H),4.95(q,J＝7.0Hz,1H),4.60(brs,1H),4.32-4.19(m,2H),2.30(tt,J＝11.8,3.3Hz,1H),1.89-1.72(m,4H),1.72-1.63(m,1H),1.54-1.39(m,5H),1.39-1.14(m,4H),0.67(br s,3H),0.54(br s,3H)；HRMS(B)m/z452.2636(M+H)⁺。

实施例210

向4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲醛(35mg,0.1mmol)和2-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯(14mg,0.11mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中加入乙酸(7.2mg,0.12mmol)和5-乙基-2-甲基吡啶硼烷复合物(14mg,0.1mmol,sigmaaldrich)。将溶液于50℃搅拌4小时，然后加入5滴水。溶液于室温搅拌另外2小时，然后用EtOAc(10mL)稀释，用水(10mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x10mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。粗物质经HPLC纯化，得到(4S)-4-异丙基-3-(2-(((1S)-1-(4-((5-甲基六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮，为白色固体(10mg,21.7％产率)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.07(d,J＝5.8Hz,1H),7.29(d,J＝5.8Hz,1H),7.25-7.20(m,4H),5.00(q,J＝7.0Hz,1H),4.63(br s,1H),4.31-4.23(m,2H),3.55-3.48(m,2H),2.68(dh,J＝13.6,4.3,3.7Hz,2H),2.64-2.48(m,4H),2.36-2.29(m,4H),2.28(s,4H),1.84(br s,1H),1.45(d,J＝7.0Hz,3H),0.68(br s,3H),0.52(br s,3H)；HRMS(B)m/z465.2975(M+H)⁺。

实施例211

将3-(2-氟嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(89.1mg,0.487mmol)、1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙胺(115.9mg,0.518mmol,1.06当量)和DIPEA(0.20mL,1.1mmol,2.4当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于110℃加热100分钟。反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(MeOH在CH₂Cl₂中的0至5％溶液)，得到3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(18.2mg,白色固体)，10.3％产率。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)8.21(br s,1H),8.00-7.97(m,2H),7.65-7.61(m,2H),7.30(br s,1H),5,28(br s,1H),4.44-4.38(br m,2H),4.14-4.08(m,1H),3.99(br s,0.5H),3.75(br s,0.5H),1.64(d,J＝7.0Hz,3H)；HRMS(B)m/z387.0962(M+H)⁺

实施例212

将(S)-1-(4-苯氧基苯基)乙胺盐酸盐(281mg,1.125mmol)、3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(103mg,0.379mmol)和DIPEA(0.331ml,1.896mmol)在DMSO中的溶液于110℃加热1小时。LCMS显示出少量产物。加热另外16小时。LCMS仍然显示出原料。加入另外5当量DIPEA和1当量KF。于110℃加热2小时。LCMS显示出产物。将反应混合物用EtOAc(8mL)稀释，用水(30mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(3x8mL)萃取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。经柱色谱法纯化(10％至50％EtOAc/庚烷)，得到(S)-1-(5-氟-2-(1-(4-苯氧基苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-3-氧杂-1-氮杂螺[4.4]壬烷-2-酮(62mg,0.138mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.25(d,J＝2.8Hz,1H),7.34(ddd,J＝8.7,4.9,2.3Hz,4H),7.16-7.04(m,1H),7.02-6.90(m,4H),4.96(q,J＝7.0Hz,1H),4.30-4.25(m,2H),2.38(dt,J＝13.1,8.4Hz,1H),2.02(br s,1H),1.80(ddd,J＝12.7,7.3,4.2Hz,1H),1.71-1.63(br m,2H),1.61-1.49(m,3H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H).HRMS(B)(M+H)449.1984计算值(M+H)449.1989

采用基本上与制备实施例1、113、211和212所述那些相似的方法制得表7的化合物。

表7.

表8.表7所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

采用基本上与制备实施例1、113和171-212所述那些相似的方法、包括手性分离以分离出两种非对映异构体，制得表9的化合物。

表9.

表10.表9所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移、手性分离条件和LCMS信号

实施例459

将(S)-(4-(1-氨基乙基)苯基)甲醇盐酸盐(4.0301g,21.47mmol,从NetChem购得)、(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(5.3648g,23.82mmol,1.11当量)和DIPEA(38.0mL,218mmol,10.1当量)在DMSO(40mL)中的溶液于110℃加热135分钟。反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用水(200mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(2x150mL)洗涤。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷30至100％)得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-(羟基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(6.42g)，84％产率。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.13(d,J＝5.8Hz,1H),7.36-7.28(m,5H),5.06(q,J＝7.0Hz,1H),4.68(br s,1H),4.58(s,2H),4.37-4.29(m,2H),1.80(br s,1H),1.52(d,J＝7.1Hz,3H),0.74(br s,3H),0.61(br s,3H)；MS m/z355.1(M-H)

实施例460

采用与制备实施例459所述类似的方法制得(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(羟基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.15(d,J＝5.9Hz,1H),7.51-7.49(m,1H),7.37(t,J＝7.7Hz,1H),7.11(d,J＝7.8Hz,1H),7.01(d,J＝11,Hz,1H),6.09(br s,1H),5.00(br s,1H),4.73(s,2H),4.61-4.55(m,1H),4.30(t,J＝8.7Hz,1H),4.25-4.21(m,1H),3.00(s,1H),1.89(br s,1H),1.54(d,J＝7.1Hz,3H),0.67(br s,6H)；MS m/z375.0(M+H)

实施例461

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(50mg,0.165mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(160mg,0.913mmol)和pTsOH(78mg,0.412mmol)在2-BuOH中的溶液于110℃加热2.5小时。LCMS显示出原料和产物。加入另外78mg pTsOH，然后加入98mg2,2,2-三氟-1-苯基乙胺，于110℃加热1.5小时。大部分产物一些SM。

冷却后，混合物固化。加入乙腈，进行超声处理。滤出固体(2,2,2-三氟-1-苯基乙胺的pTsOH盐)。将母液浓缩，经柱色谱法(0-40％EtOAc/庚烷)、然后反相HPLC(XBridge C18 5uM10-85％ACN/水,12分钟，含0.01％NH₄OH改性剂)纯化，得到(4R)-5,5-二甲基-4-苯基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(28mg,0.063mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.20(d,J＝5.8Hz,1H),7.58(dd,J＝11.4,5.8Hz,1H),7.51(br d,J＝6.8Hz,1H),7.40(dtd,J＝15.9,9.2,4.5Hz,5H),7.33-7.22(m,3H),7.10(br s,1H),5.50(s,0.5H),5.38(s,0.5H),5.29(br s,1H),1.70(s,1.5H),1.64(s,1.5H),1.04(s,1.5H),1.03(s,1.5H).HRMS(B)(M+H)443.1682计算值(M+H)443.1695

实施例462&463

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(163mg,0.674mmol)、2,2,2-三氟-1-苯基乙胺(624mg,3.56mmol,5.3当量)和对甲苯磺酸一水合物(321mg,1.69mmol,2.5当量)在n-BuOH(3mL)中的溶液于110℃加热2小时，用另外的对甲苯磺酸一水合物(321mg,1.69mmol,2.5当量)处理，然后于110℃加热1¹/₂小时。冷却后，将固体反应混合物用MeCN处理，进行超声，过滤。将滤液浓缩，经硅胶柱色谱法纯化(EtOAc/庚烷0至30％)，得到(4S)-4-异丙基-3-(2-(2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(65mg)，25％产率。HRMS(B)m/z381.1545(M+H)⁺.分析型RP-HPLC tR＝4.31//4.46分钟(1.0mL/min流速，梯度为5.00分钟的5％至15％乙腈(含0.05％甲酸)、然后5.00分钟至9.50分钟的15％至95％乙腈(含0.05％甲酸)，水相用0.1％甲酸改性。硅胶柱色谱法分离出两种非对映异构体，即(S)-4-异丙基-3-(2-((R)-2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮和(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-2,2,2-三氟-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

1^st峰：¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.23(d,J＝5.8Hz,1H),7.62-7.53(m,2H),7.50(d,J＝5.8Hz,1H),7.42(qt,J＝5.0,2.2Hz,3H),5.93-5.86(m,1H),4.80(dt,J＝7.5,3.9Hz,1H),4.48-4.33(m,2H),2.65(ddp,J＝10.4,7.0,3.4Hz,1H),1.05(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(d,J＝7.0Hz,3H)。

2^nd峰：¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.23(d,J＝5.8Hz,1H),7.55(dd,J＝7.3,2.1Hz,2H),7.49(d,J＝5.8Hz,1H),7.45-7.32(m,3H),5.92-5.86(m,1H),4.86-4.82(m,1H),4.44-4.38(m,2H),2.26(br s,1H),0.94(d,J＝7.0Hz,3H),0.74(br s,3H)。

实施例464

将(S)-3-(2-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(1055mg,4.68mmol)、1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙胺(1300mg,5.62mmol,1.2当量)和二异丙基乙基胺(908mg,7.03mmol,1.5当量)在DMSO(20mL)中的溶液于110℃加热1小时。将反应混合物倒入水(60mL)中，用EtOAc(2x50mL)萃取。合并的有机物用水(40mL),盐水(40mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，直接在硅胶上浓缩。进行硅胶色谱法，得到(S)-3-(2-(1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮的混合的非对映异构体(560mg)。用SFC(ID,5μm,20x250mm)、采用35％MeOH(在CO₂中)进行手性分离，得到(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(S)-3-(2-((R)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

实施例464第一个洗脱的产物(302mg)¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.87(s,2H),8.23(d,J＝5.8Hz,1H),7.49(d,J＝5.7Hz,1H),7.43-7.30(m,2H),7.21-7.11(m,1H),6.26(br s,1H),5.31(br s,1H),4.75(dt,J＝7.9,3.3Hz,1H),4.39-4.24(m,2H),2.38(s,3H),2.09(br s,1H),1.66-1.62(m,3H),0.90(dd,J＝9.8,6.0Hz,3H),0.78(br s,3H).HRMS(B)m/z437.2093(M+H)⁺。

实施例465

将(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(225mg,0.675mmol)、4-氟苯-1-磺酰氯(146mg,0.750mmol)和DIPEA(1ml)在CH₂Cl₂中的溶液于室温搅拌2小时。反应混合物用CH₂Cl₂稀释，用水洗涤。水层用CH₂Cl₂萃取。合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。将残余物经柱色谱法纯化，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯基磺酰基)哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(4.5mg,0.009mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.45(d,J＝6.0Hz,1H),8.23-8.15(m,2H),7.73-7.63(m,3H),5.13(dt,J＝7.4,3.7Hz,1H),4.78-4.69(m,2H),4.26(p,J＝6.7Hz,1H),4.17(dddd,J＝11.8,6.4,4.7,2.3Hz,2H),2.89(ddq,J＝10.7,7.1,3.5Hz,1H),2.69(tdd,J＝11.6,8.9,2.6Hz,2H),2.27-2.11(m,2H),1.82(dddt,J＝11.9,9.0,5.8,2.9Hz,1H),1.77-1.64(m,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H),1.30(d,J＝7.1Hz,3H),1.21(d,J＝6.9Hz,3H).HRMS(B)(M+H)492.2069计算值(M+H)492.2081

采用基本上与对实施例465所述那些相似的方法制得以下实施例。

实施例466

经柱色谱法(20％至100％EtOAc/庚烷)、然后经反相制备型色谱法(C18柱,10-85％ACN/水0.1％NH₄OH改性剂,历经12分钟)纯化，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(4-氟苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(12mg,0.026mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.51-7.41(m,2H),7.36(d,J＝5.8Hz,1H),7.25-7.15(m,2H),4.82(td,J＝5.9,3.6Hz,1H),4.68(br s,1H),4.41(d,J＝5.7Hz,2H),3.98(p,J＝6.7Hz,1H),3.78(br s,1H),3.12(br s,1H),2.82(br s,1H),2.60(pd,J＝7.1,6.5,3.7Hz,1H),1.92(br s,1H),1.80(dtd,J＝15.3,9.4,7.0,3.6Hz,2H),1.31(br s,2H),1.22(d,J＝6.8Hz,3H),0.99(d,J＝7.1Hz,3H),0.88(d,J＝6.9Hz,3H).HRMS(B)(M+H)456.2384计算值(M+H)456.2411

实施例467

经柱色谱法纯化(MeOH/CH₂Cl₂0至20％)，得到(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-4-羰基)哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(15mg,0.034mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.36(d,J＝5.8Hz,1H),4.81(td,J＝5.6,3.3Hz,1H),4.59(br s,1H),4.41(d,J＝5.7Hz,2H),4.13(br s,1H),3.96(ddd,J＝11.6,4.3,2.2Hz,3H),3.51(tq,J＝11.8,2.8Hz,2H),3.15-2.89(m,2H),2.69-2.48(m,2H),1.99-1.68(m,5H),1.61(ddt,J＝10.7,4.0,2.3Hz,2H),1.35-1.23(m,1H),1.21(d,J＝6.7Hz,3H),1.19-1.09(m,1H),0.98(dd,J＝7.0,1.5Hz,3H),0.88(d,J＝7.0Hz,3H).HRMS(B)(M+H)446.2748计算值(M+H)446.2767

实施例468

经柱色谱法纯化(50％至100％EtOAc/庚烷，然后0％至20％MeOH/CH₂Cl₂)，得到(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(1-(吗啉-4-羰基)哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(21mg,0.047mmol)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.36(d,J＝5.8Hz,1H),4.81(td,J＝5.8,3.4Hz,1H),4.41(d,J＝5.7Hz,2H),3.95(p,J＝6.8Hz,1H),3.84-3.70(m,2H),3.68-3.65(m,4H),3.26-3.23(m,4H),2.80(tt,J＝12.9,3.1Hz,2H),2.60(ddq,J＝10.4,7.0,3.5Hz,1H),1.88-1.73(m,2H),1.67(ddt,J＝18.5,10.4,3.5Hz,1H),1.37-1.23(m,2H),1.21(d,J＝6.8Hz,3H),0.99(d,J＝7.1Hz,3H),0.88(d,J＝7.0Hz,3H).HRMS(B)(M+H)447.2690计算值(M+H)447.2720

实施例469

经柱色谱法纯化，得到(S)-3-(2-((S)-1-(1-(环己烷羰基)哌啶-4-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.7Hz,1H),7.36(d,J＝5.6Hz,1H),4.80(dt,J＝5.8,2.9Hz,1H),4.59(br s,1H),4.40(d,J＝5.6Hz,2H),4.18-4.03(m,1H),3.95(p,J＝6.8Hz,1H),3.05(ddd,J＝14.1,10.1,6.6Hz,1H),2.58(td,J＝25.1,23.5,13.0Hz,3H),1.97-1.63(m,8H),1.54-1.08(m,7H),1.21(d,J＝6.8Hz,3H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H),0.88(d,J＝6.9Hz,3H).HRMS(B)(M+H)444.2953计算值(M+H)444.2975

实施例470

将(S)-3-(2-(((S)-1-(4-氨基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(100mg,0.30mmol)、苯磺酰氯(65mg,0.36mmol,1.2当量)和吡啶(35mg,0.45mmol,1.5当量)在DCM(5mL)中的溶液于室温搅拌15小时。反应混合物用MeOH淬灭，除去溶剂，得到粗产物，将其经硅胶柱色谱法纯化(EA:MeOH＝1:0至9:1)，除去溶剂，得到纯产物(46.8mg,白色固体)，31.5％产率。N-(4-((S)-1-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)乙基)苯基)苯磺酰胺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.18-7.90(m,2H),7.74(d,J＝7.8Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),7.39-7.35(m,2H),7.10(d,J＝8.1Hz,2H),6.96(d,J＝8.0Hz,2H),6.41(s,1H),4.99-4.79(m,1H),4.62-4.39(m,1H),4.28-3.99(m,2H),1.91-1.65(b,1H),1.40(d,J＝7.0Hz,3H),0.53(b,J＝21.1Hz,6H).HRMS(B)m/z482.1847(M+H)⁺.RT＝2.60分钟。

实施例471

将(三乙氧基甲基)苯(360mg,1.6mmol,5.0当量,在5mL苯和0.5mL冰AcOH中)的溶液加入(S)-2-((4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基)氨基)丙烷酰肼(99mg,0.30mmol,1.0当量.)中，反应混合物于回流搅拌1.5小时，除去溶剂，得到粗产物。进行硅胶柱色谱法(乙酸乙酯在庚烷中的10至90％溶液)，得到(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(5-苯基-1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(21.2mg,白色固体)，15.9％产率。HRMS(B)m/z395.1820,(M+H)⁺,RT＝2.42分钟

实施例472

向(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(5-(甲基硫基)-1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(102mg,0.28mmol,在1.5ml CH₃COOH中)的溶液中滴加KMnO₄溶液(66.4mg,0.42mmol,1.5当量,在2.5ml水中)。溶液于室温搅拌25分钟，将混合物用亚硫酸氢钠脱色，将所得溶液用DCM萃取，用饱和NaHCO₃洗涤，经Na₂SO₄干燥，除去溶剂，得到粗的预期产物，为白色固体。(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(5-(甲基磺酰基)-1,3,4-噁二唑-2-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(83mg,白色固体)，71％产率。HRMS(B)m/z397.1281(M+H)⁺.RT＝1.80分钟。

实施例473&474

将1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-乙酮(75mg,0.468mmol)、乙酸铵(722mg,9.36mmol,20.0当量)和氰基硼氘化钠(131mg,1.999mmol,4.25当量)在丙烷-2-醇(5ml)中合并，在红外照射下于130℃加热4分钟。反应物用EtOAc(15ml)和水(15ml)稀释，用6M NaOH溶液(1ml)处理至～10pH。将产物1-氘-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙胺未经进一步纯化用于下一步骤。

将3-(2-氟嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(99mg,0.441mmol)、1-氘-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙胺(72mg,0.441mmol,1.0当量)和DIEA(0.154mL,0.882mmol,2.0当量)在DMSO(1mL)中的溶液于130℃加热120分钟。反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，用水(10mL)洗涤，真空浓缩。将(4S)-3-(2-((1-氘-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮经手性SFC色谱法在AI柱上用40-50％MeOH/0.2％DEA/CO₂(v/v)洗脱进行拆分(75g/min,120巴,20x250mm)，得到(4S)-3-(2-(((R)-1-氘-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮和(4S)-3-(2-(((S)-1-氘-1-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

第一个峰473

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.10(s,1H),8.33(d,J＝2.2Hz,1H),8.21(d,J＝5.7Hz,1H),7.92(d,J＝2.3Hz,1H),7.46(d,J＝5.7Hz,1H),7.35(dd,J＝3.5,2.0Hz,1H),6.47(dd,J＝3.4,1.7Hz,1H),5.82(s,1H),1.66-1.58(m,3H),4.59(dt,J＝7.7,3.2Hz,1H),4.28(t,J＝8.8Hz,1H),4.19(dd,J＝9.2,3.1Hz,1H),3.51(s,1H),1.78(d,J＝28.5Hz,2H),1.30-1.15(m,1H),0.57(s,6H).LCMS m/z368.1(M+H)RT＝2.36分钟。

第二个峰474

LCMS m/z368.1(M+H)RT＝2.66分钟。

实施例475

将3-(2-氟嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(100mg,0.444mmol)、(3-(对甲苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)甲胺(84mg,0.444mmol,1.0当量)和TEA(0.186mL,1.332mmol,3.0当量)在丁烷-1-醇(2mL)中的溶液于100℃加热90分钟。加入丙烷-1-醇(1ml)，于150℃加热60分钟。将反应混合物真空浓缩。在快速柱(硅胶,24g)上用w/0-30％EtOAc/DCM洗脱，得到(S)-4-异丙基-3-{2-[(3-对甲苯基-[1,2,4]噁二唑-5-基甲基)-氨基]-嘧啶-4-基}-噁唑烷-2-酮(95mg,白色泡沫)，54.2％产率。HRMS(B)m/z394.17532.38分钟。

实施例476

向4-{(S)-1-[4-((S)-4-异丙基-2-氧代-噁唑烷-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-乙基}-哌啶-1-甲酸苄基酯(22mg)在甲醇(5mL)中的溶液中加入在碳上的氢氧化钯(7mg,0.05mmol)。然后将反应物于室温搅拌16小时。然后将反应物过滤，然后真空浓缩。然后将粗物质采用反相C18ODB柱水-乙腈0.1％TFA改性剂进行纯化，得到(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(11mg)，70％产率。

HRMS(B)m/z333.2165(M+H)⁺；RT.：1.09分钟。

实施例477

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(28mg,0.084mmol)在THF(2mL)中的溶液中加入环丁酮(14mg,0.20mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(28mg,0.13mmol)。将反应物于室温搅拌18小时。然后真空除去溶剂。然后将粗物质采用反相C18ODB柱水-乙腈0.1％TFA改性剂进行纯化，得到(S)-3-{2-[(S)-1-(1-环丁基-哌啶-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-异丙基-噁唑烷-2-酮(20mg)，62％产率。

HRMS(B)m/z388.2717(M+H)⁺；RT.：2.32分钟。

实施例478

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(20mg,0.060mmol)在THF(2mL)中的溶液中加入环丁酮(10mg,0.17mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(20mg,0.09mmol)。将反应物于室温搅拌18小时。然后真空除去溶剂。然后将粗物质采用反相C18ODB柱水-乙腈0.1％TFA改性剂进行纯化，得到(S)-4-异丙基-3-{2-[(S)-1-(1-异丙基-哌啶-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-噁唑烷-2-酮(20mg)，62％产率。

HRMS(B)m/z376.2705(M+H)⁺；RT.：1.24分钟。

实施例479

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(20mg,0.48mmol)在二氯甲烷(1mL)和DMF(1mL)中的溶液中加入HATU(23mg,0.06mmol)和DIPEA(0.03mL,0.18mmol)。将反应物于室温搅拌18小时。然后真空除去溶剂。然后将粗物质采用反相C18ODB柱水-乙腈0.1％TFA改性剂进行纯化，得到(S)-4-异丙基-3-(2-{(S)-1-[1-(吡啶-4-羰基)-哌啶-4-基]-乙基氨基}-嘧啶-4-基)-噁唑烷-2-酮(2mg)，8％产率。

HRMS(B)m/z438.2379(M+H)⁺；RT.：1.82分钟。

实施例480

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-哌啶-4-基-乙基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(16mg,0.48mmol)在二氯甲烷(1mL)和DMF(1mL)中的溶液中加入HATU(20mg,0.05mmol)和DiPEA(0.03mL,0.15mmol)。将反应物于室温搅拌18小时。然后真空除去溶剂。然后将粗物质采用反相C18ODB柱水-乙腈0.1％TFA改性剂进行纯化，得到(S)-4-异丙基-3-(2-{(S)-1-[1-(吡啶-4-羰基)-哌啶-4-基]-乙基氨基}-嘧啶-3-基)-噁唑烷-2-酮(2mg)，8％产率。

HRMS(B)m/z438.2379(M+H)⁺；RT.：1.83分钟。

实施例481&482

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(60mg,0.22mmol)和苄基叠氮化物(30mg,0.23mmol)在水(0.5mL)和DMSO(3mL)中的溶液中加入硫酸铜五水合物(56mg,0.23mmol)和L-抗坏血酸钠(45mg,0.23mmol)。将反应物于室温搅拌48小时。反应混合物用EtOAc(75mL)稀释，用水(15mL)和1N碳酸氢钠溶液(15mL)洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤，浓缩。然后将粗物质在反相上采用C18柱水-乙腈TFA作为改性剂进行纯化，其还进行了两种非对映异构体产物(S)-3-{2-[(S)-1-(1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-异丙基-噁唑烷-2-酮和(S)-3-{2-[(R)-1-(1-苄基-1H-[1,2,3]三唑-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-4-异丙基-噁唑烷-2-酮的分离。

第一个峰481：HRMS(B)m/z407.2070(M+H)⁺；RT.：2.26分钟。

第二个峰482：HRMS(B)m/z407.2070(M+H)⁺；RT.：2.32分钟。

实施例483&484

向(S)-4-异丙基-3-[2-((S)-1-甲基-丙-2-炔基氨基)-嘧啶-4-基]-噁唑烷-2-酮(82mg,0.30mmol)和叠氮基苯(36mg,0.30mmol)在水(0.5mL)和DMSO(3mL)中的溶液中加入硫酸铜五水合物(75mg,0.23mmol)和L-抗坏血酸钠(60mg,0.23mmol)。将反应物于室温搅拌48小时。反应混合物用EtOAc(75mL)稀释，用水(15mL)和1N碳酸氢钠溶液(15mL)洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤，浓缩。然后将粗物质在反相上采用C18柱水-乙腈TFA作为改性剂进行纯化，其还进行了两种非对映异构体产物(S)-4-异丙基-3-{2-[(S)-1-(1-苯基-1H-[1,2,3]三唑-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-噁唑烷-2-酮和(S)-4-异丙基-3-{2-[(R)-1-(1-苯基-1H-[1,2,3]三唑-4-基)-乙基氨基]-嘧啶-4-基}-噁唑烷-2-酮的分离。

第一个峰483：HRMS(B)m/z393.1913(M+H)⁺；RT.：2.31分钟。

第二个峰484：HRMS(B)m/z393.1913(M+H)⁺；RT.：2.40分钟。

实施例485

将3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5,5-二甲基噁唑烷-2-酮(30mg,0.122mmol)在DMSO(300μL)中的室温溶液用DIPEA(68μL,0.366mmol)处理，然后加入(S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙胺(41.4mg,0.2mmol)进行处理。将反应物密封，于95℃加热～18小时。经反相HPLC纯化，得到(S)-3-(5-氟-2-(1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-5,5-二甲基噁唑烷-2-酮的三氟乙酸盐(6.0mg,白色固体)。¹H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm1.44-1.58(m,12H)3.50-3.74(m,1H)3.88(d,J＝9.8Hz1H)5.29(d,J＝7.04Hz,1H)7.38-7.45(m,2H)7.6(t,J＝8.22Hz1H)8.16(d,J＝3.13Hz,1H)；HRMS(A)m/z417.1360(M+H)⁺,Rt2.29分钟。

采用于制备实施例485所述那些相似的方法制得表11的化合物。

表11.

表12.表11列出的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例508

将3-(2,6-二氯嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮(70.0mg,0.267mmol)、(S)-(-)-1-苯基乙胺(0.034mL,0.267mmol,1.0当量)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.070mL,0.401mmol,1.5当量)在DMSO(1.5mL)中的溶液于85℃加热2-4小时。经反相HPLC纯化，得到(S)-3-(6-氯-2-(1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮的三氟乙酸盐(20.0mg,白色固体)，16％产率。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.36(s,1H),7.33-7.31(m,4H),7.26-7.21(m,1H),5.48(br m,1H),4.02-3.94(m,2H),1.65(s,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,3H),1.26(s,3H)；HRMS(A)m/z347.1274(M+H)⁺,Rt2.32分钟。

采用与制备实施例508所述那些相似的方法制得表13的化合物。

表13.

表14.表13列出的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例514：

将(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基氨基)-6-氟嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮(29.0mg,0.053mmol)和1N盐酸(0.70mL)在1,4-二噁烷(0.7mL)中的溶液于100℃加热4小时。冷却至室温后，将反应混合物用二氯甲烷(10mL)稀释，用饱和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。经反相HPLC纯化，得到(S)-3-(2-(1-(3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)乙基氨基)-6-羟基嘧啶-4-基)-4,4-二甲基噁唑烷-2-酮的三氟乙酸盐(16mg,白色固体)，55％产率。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.00(d,J＝8.5Hz,2H),7.46(d,J＝8.5Hz,2H),6.71(br s,1H),5.33(brm,1H),4.02-3.99(m,2H),1.83(d,J＝7.1Hz,3H),1.68(s,3H),1.31(s,3H)；HRMS(A)m/z431.1245(M+H)⁺,Rt1.80分钟。

实施例515

步骤1

向含有(R)-N-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(87mg,0.29mmol)的圆底烧瓶中加入二噁烷(2mL)。向该溶液中加入氯化氢在二噁烷中的溶液(4.0M,0.15ml,0.59mmol)，将溶液于室温搅拌10分钟。除去挥发物。加入Et₂O(10mL)，将反应混合物进行超声处理。再次除去挥发物。再次加入Et₂O(10ml)，将混悬液进行超声处理。收集固体物质，用Et₂O洗涤，得到(S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙胺的盐酸盐(42mg,0.18mmol,63％产率)，为白色固体。LCMS m/z194.1(M+H)⁺,Rt0.60分钟。

步骤2

向具有搅拌棒的微波小瓶中加入(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(30mg,0.12mmol)和DMSO(1mL)。向该反应混合物中加入(S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙胺(51mg,0.22mmol)和DIEA(0.09ml,0.50mmol)。给小瓶盖上瓶盖，将反应混合物在预热油浴中于110℃加热18小时。将溶液通过反相HPLC进行纯化。将产物级分合并，冷冻和冻干，得到(S)-3-(2-((S)-1-(2-氟-4-(1-甲基环丙基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(3.3mg,6.3μmol,5％产率)，为TFA盐。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ0.58(br.s.,3H)0.77(td,J＝5.23,1.76Hz,5H)0.80-0.86(m,2H)1.38(s,3H)1.57(d,J＝6.94Hz,3H)4.34-4.41(m,2H)4.67(br.s.,1H)5.33(d,J＝7.97Hz,1H)6.95-7.05(m,2H)7.22(t,J＝7.97Hz,1H)7.67(d,J＝6.85Hz,1H)8.14(d,J＝6.65Hz,1H).LCMS m/z399.4(M+H)⁺,Rt0.93分钟。HRMS(A)m/z399.2202(M+H)⁺,Rt2.23分钟。

采用与对制备实施例515所述那些相似的方法制得表15的化合物。

表15.

表16.表15列出的各化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例547

将(S)-3-(2-((S)-1-(4-(氯甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(75mg,0.2mmol)和5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪(25mg,0.2mmol)在DMSO(2mL)中的溶液于80℃加热16小时。反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，用水(20mL)洗涤。分离后，水相用EtOAc(2x15mL)洗涤。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。进行硅胶柱色谱法(MeOH在CH₂Cl₂中的0至10％溶液)，得到(S)-3-(2-((S)-1-(4-((5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(58mg,白色固体)，62.8％产率。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝6.0Hz,1H),7.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.33(s,4H),6.99(d,J＝1.3Hz,1H),6.89(d,J＝1.4Hz,1H),5.07(q,J＝7.0Hz,1H),4.68(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),4.02(t,J＝5.5Hz,2H),3.72(s,2H),3.63(s,2H),2.90(td,J＝5.4,2.6Hz,2H),1.84(br s,1H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H),0.72(br s,3H),0.57(br s,3H)；HRMS m/z462.2606(M+H)⁺。

采用与对制备实施例205所述那些相似的方法制得以下化合物。

实施例548

(4S)-3-(2-((1S)-1-(4-(3,8-二氮杂双环[4.2.0]辛烷-3-基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12-8.08(m,1H),7.37-7.22(m,5H),5.10-5.01(m,1H),4.66(br s,1H),4.37-4.23(m,2H),3.92-3.89(m,1H),3.63-3.54(m,1H),3.54-3.47(m,1H),3.24-3.20(m,1H),3.11-2.95(m,1H),2.95-2.73(m,1H),.2.67-2.59(m,2H),2.49(ddd,J＝16.2,12.8,5.3Hz,1H),2.20-2.08(m,1H),1.99-1.68(m,3H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),0.72(br s,1H),0.56(br s,1H)；HRMS m/z451.2810(M+H)⁺。

实施例549

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-氨基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)d8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.27(q,J＝8.2Hz,4H),5.05(q,J＝7.0Hz,1H),4.67(s,1H),4.38-4.25(m,2H),3.48(s,2H),2.86(br d,J＝11.8Hz,2H),2.71(tt,J＝10.9,4.2Hz,1H),2.05(tt,J＝12.0,2.5Hz,2H),1.90-1.75(m,3H),1.54-1.37(m,5H),0.72(br s,4H),0.55(br s,3H)；HRMS m/z439.2805(M+H)⁺。

采用与对制备实施例210所述那些相似的方法制得以下化合物。

实施例550

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.7Hz,1H),7.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.27(t,J＝6.6Hz,4H),5.06(q,J＝6.8Hz,1H),4.67(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),3.51(d,J＝3.2Hz,2H),2.52(br s,2H),2.44(br s,2H),1.81(br s,1H),1.59(br s,4H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),1.19(s,3H),0.72(brs,3H),0.56(br s,3H)；HRMS m/z454.2816(M+H)⁺。

实施例552

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((3,3-二氟哌啶-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.35(d,J＝5.8Hz,1H),7.28(q,J＝8.2Hz,4H),5.06(q,J＝7.0Hz,1H),4.67(br s,1H),4.39-4.25(m,2H),3.55(d,J＝2.2Hz,2H),2.56(t,J＝11.5Hz,2H),2.51-2.40(m,2H),1.91-1.81(m,3H),1.78-1.70(m,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),0.71(br s,3H),0.56(br s,3H)；HRMS m/z460.2537(M+H)⁺。

实施例553

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-7-基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.32-7.24(m,4H),5.06(q,J＝7.0Hz,1H),4.68(br s,1H),4.37-4.26(m,2H),3.49(s,2H),2.89(t,J＝5.0Hz,2H),2.47(br s,2H),2.28(br s,2H),1.86(br s,1H),1.49(d,J＝7.0Hz,3H),0.72(br s,3H),0.64-0.49(m,5H),0.45(t,J＝3.2Hz,2H)；HRMS m/z451.2809(M+H)⁺。

实施例554

(S)-3-(2-((S)-1-(4-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-基甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.33(d,J＝5.8Hz,1H),7.24(q,J＝8.3Hz,4H),5.03(q,J＝7.0Hz,1H),4.67(br s,1H),4.37-4.25(m,2H),3.85(s,2H),2.85-2.65(m,6H),1.87(br s,1H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H),0.85-0.63(m,5H),0.63-0.46(m,5H)；HRMS m/z451.2810(M+H)⁺。

实施例555

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1-(4-((3,3,4,4-四氟吡咯烷-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。

HRMS m/z482.2161(M+H)⁺；RT＝2.78分钟。

实施例556

(S)-3-(2-((S)-1-(4-((4-乙酰基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮。

HRMS m/z467.2752(M+H)⁺；RT＝1.92分钟。

实施例557

于0℃将(S)-4,6-二氟-N-(1-苯基乙基)嘧啶-2-胺(48.8mg,0.21mmol)加入在DMF(2mL)中的NaH(95％,6.1mg,0.25mmol,1.2当量)中。5分钟后，加入(S)-4-异丙基-2-噁唑烷酮(27.9mg,0.22mmol,1.0当量)。将反应物于0℃搅拌10分钟，然后温热至室温。4小时后，将反应混合物用水淬灭，倒入稀盐水(1:1饱和盐水:水)和EtOAc中。将水相用EtOAc萃取，合并的有机层用稀盐水洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩为粉红色油。经反相HPLC、然后将含有产物的级分冷冻干燥，得到(S)-3-(6-氟-2-(((S)-1-苯基乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为白色固体(22.5mg,TFA盐)，31％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.27-7.39(m,4H),7.17-7.26(m,1H),6.92(s,1H),5.05(q,J＝7.04Hz,1H),4.63(br.s.,1H),4.19-4.41(m,2H),1.77(br.s.,1H),1.51(d,J＝7.04Hz,3H),0.44-0.78(m,6H)；LCMS m/z345.1(M+H)⁺.,R_t1.00分钟；UPLC R_t5.038分钟。

采用与对制备实施例557所述那些相似的方法制得表17的化合物。

表17.

表18：表17所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例559

将(R)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(55.3mg,0.20mmol)、(S)-1-环丙基乙基胺(40μL,0.26mmol,1.3当量)和iPr₂NEt(0.20mL,1.15mmol,5.7当量)在NMP(1mL)中的混合物在微波中于180℃加热20分钟。将反应混合物过滤，经反相HPLC纯化，得到(R)-3-(2-(((S)-1-环丙基乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮，为白色固体(8.8mg)，10％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.72(d,J＝6.26Hz,1H),7.29-7.43(m,6H),5.76(dd,J＝4.11,8.80Hz,1H),4.28(dd,J＝4.30,8.61Hz,1H),3.06-3.19(m,1H),1.39(dd,J＝3.52,6.65Hz,1H),0.88-0.97(m,1H),0.83(br.s.,3H),0.53-0.62(m,1H),0.50(dt,J＝4.11,8.51Hz,1H),0.33(qd,J＝4.78,9.54Hz,1H),0.26(td,J＝4.60,9.59Hz,1H)；HRMS(A)m/z325.1667(M+H)⁺,Rt1.54分钟；UPLC2.807分钟。

采用与对制备实施例559所述那些相似的方法制得表19的化合物。

表19.

表20：表19所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例563

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(43.2mg,0.18mmol)、(1S)-1-[4-(2-甲基丙氧基)苯基]乙烷-1-胺(84.0mg,0.37mmol,2.0当量)和iPr₂NEt(0.30mL,1.72mmol,4.7当量)在NMP(1mL)中的混合物于105℃加热24小时。将反应混合物过滤，经反相HPLC纯化，得到(S)-3-(2-(((S)-1-(4-异丁氧基苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为白色固体(5.3mg,TFA盐)，4％产率。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ7.68(d,J＝6.65Hz,1H),7.25(d,J＝8.61Hz,2H),6.90(d,J＝8.61Hz,2H),4.41(d,J＝5.87Hz,2H),3.74(d,J＝6.26Hz,2H),1.96-2.15(m,1H),1.58(d,J＝7.04Hz,3H),1.03(d,J＝6.65Hz,6H)；HRMS(A)m/z399.2399(M+H)⁺,Rt2.60分钟；UPLC4.223分钟。

采用与对制备实施例563所述那些相似的方法制得表21的化合物。

表21.

表22.表21所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例566

向具有搅拌棒的微波小瓶中加入在DMSO(1653μL)中的(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(24.96mg,0.103mmol)。向该反应混合物中加入(S)-1-(2,3-二氟苯基)乙胺(40mg,0.207mmol)和DIEA(144μL,0.826mmol)。给小瓶盖上瓶盖，于110℃加热过周末。将溶液过滤，然后经反相HPLC纯化。合并产物级分，冷冻和冻干，得到((S)-3-(2-((S)-1-(2,3-二氟苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(10.2mg,0.021mmol,10.26％产率)，为TFA盐。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm0.59(br.s.,3H)0.75(br.s.,3H)1.59(d,J＝6.99Hz,3H)1.69(br.s.,1H)4.37(d,J＝5.67Hz,2H)4.66(br.s.,1H)5.40(d,J＝7.38Hz,1H)7.06-7.23(m,3H)7.70(d,J＝6.90Hz,1H)8.14(d,J＝6.46Hz,1H)；LCMS m/z363.3(M+H)⁺,Rt0.77分钟；HRMS(A)m/z363.1642(M+H)⁺,Rt1.89分钟。

实施例567

采用与对制备实施例566所述相似的方法制得(S)-3-(2-(1-(2,3-二氟苯基)乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm1.50(d,J＝7.04Hz,3H)3.91(br.s.,1H)4.09-4.20(m,1H)4.42-4.56(m,2H)5.26(q,J＝6.68Hz,1H)6.99-7.12(m,2H)7.16(t,J＝7.48Hz,1H)8.13(d,J＝3.37Hz,1H).HRMS(A)m/z339.1075(M+H)⁺,Rt1.86分钟。

实施例568

2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺

步骤1：制备(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氟苯甲酸

向(S)-4-(1-氨基乙基)-2-氟苯甲酸(900mg,4.10mmol)中加入DCM(11ml)、Hunig's碱(2.147ml,12.29mmol)和BOC-无水物(1.998ml,8.61mmol)。然后加入NMP(11.00ml)以帮助溶解。将反应物进行超声处理10分钟，于室温搅拌22小时，然后进行LCMS。主要将DCM浓缩掉。然后向粗的反应物中加入120ml水，用10ml5M NaOH碱化。将碱性水溶液用2x50ml溶液(乙酸乙酯在庚烷中的15％溶液)萃取。然后向碱性水溶液(含产物)中加入150ml乙酸乙酯，在搅拌下用2M HCl水溶液酸化至约pH3。然后将乙酸乙酯萃取，保存，将酸性水再次用100ml乙酸乙酯萃取。合并有机层，用0.5M HCl水溶液1x40ml、水3x40ml洗涤，浓缩至质量恒定，得到1104mg(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氟苯甲酸，原样进行使用。LCMS m/z BOC模式为269.0(M+H-15碎片)和弱228.0(M+H-56碎片)，与预期的284.0(M+H)⁺相比,Rt0.72分钟。

步骤2：制备(S)-1-(3-氟-4-(反式-4-羟基环己基氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯

向(S)-4-(1-(叔丁氧羰基氨基)乙基)-2-氟苯甲酸(40.8mg,0.144mmol)中加入NMP(0.5ml)、反式-4-氨基环己醇(41.5mg,0.360mmol)、Hunig's碱(0.101ml,0.576mmol)和HATU(110mg,0.288mmol)。将反应物于室温搅拌6小时，然后进行LCMS。向反应物中加入0.5ml NMP，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到33mg(S)-1-(3-氟-4-(反式-4-羟基环己基氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯，为TFA盐。LCMS m/z381.1(M+H)⁺,Rt0.70分钟。

步骤3：制备4-((S)-1-氨基乙基)-2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)苯甲酰胺

向(S)-1-(3-氟-4-(反式-4-羟基环己基氨甲酰基)苯基)乙基氨甲酸叔丁基酯(33mg,0.087mmol)中加入HCl在二噁烷中的4M溶液(2mL,8.00mmol)和MeOH(0.2ml)。反应物于室温搅拌1小时，然后进行LCMS。将溶剂浓缩至残余物，得到4-((S)-1-氨基乙基)-2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)苯甲酰胺，定量产率(0.087mmol)，为HCl盐。LCMS m/z281.1(M+H)⁺,Rt0.33分钟。

步骤4：制备2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺

向4-((S)-1-氨基乙基)-2-氟-N-((1r,4S)-4-羟基环己基)苯甲酰胺(0.024g,0.087mmol)中加入(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(0.034g,0.139mmol)、DMSO(0.6ml)和Hunig's碱(0.053ml,0.305mmol)。反应物于100-105℃加热16小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5mlDMSO，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到10.1mg2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺，为TFA盐。LCMS m/z486.2(M+H)⁺,Rt0.57分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm8.13(d,J＝6.7Hz,1H),7.70(d,J＝6.7Hz,1H),7.64(t,J＝7.8Hz,1H),7.13-7.28(m,2H),5.16(br.s.,1H),4.67(br.s.,1H),4.37(d,J＝5.5Hz,2H),3.82(br.s.,1H),3.53(d,J＝3.9Hz,1H),1.97(dd,J＝5.1,3.1Hz,4H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H),1.38(t,J＝8.6Hz,4H),0.50-0.88(m,6H)；HRMS(A)m/z486.2523(M+H)⁺。

实施例569

(S)-3-(2-((S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(28mg,0.116mmol)中加入(S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙胺(46.7mg,0.174mmol)、DMSO(0.6ml)和Hunig's碱(0.071ml,0.406mmol)。反应物于105-110℃加热24小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5ml DMSO，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到7.1mg(S)-3-(2-((S)-1-(6-(4-氟苯氧基)吡啶-3-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为TFA盐。LCMS m/z438.2(M+H)⁺,Rt0.82分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm8.04(d,J＝6.3Hz,1H),8.01(d,J＝2.0Hz,1H),7.73(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.53(d,J＝6.3Hz,1H),6.94-7.10(m,4H),6.84(d,J＝8.6Hz,1H),5.05(d,J＝7.0Hz,1H),4.61(d,J＝3.9Hz,1H),4.28(d,J＝5.5Hz,2H),1.49(d,J＝7.0Hz,3H),0.51-0.78(m,6H)；HRMS(A)m/z438.1946(M+H)⁺。

实施例570

(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

向(S)-(4-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)(哌啶-1-基)甲酮(0.019g,0.076mmol)中加入(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(0.028g,0.114mmol)、NMP(0.5ml)和Hunig's碱(0.033ml,0.190mmol)。反应物于105-110℃加热16小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5ml NMP，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到4.0mg(S)-3-(2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为TFA盐。LCMSm/z456.1(M+H)⁺,rt0.74分钟。

¹H NMR(400MHz,)δppm8.13(d,J＝6.7Hz,1H),7.69(d,J＝7.0Hz,1H),7.30-7.38(m,1H),7.23-7.28(m,1H),7.20(d,J＝10.6Hz,1H),5.18(br.s.,1H),4.63-4.74(m,1H),4.33-4.42(m,2H),3.61-3.79(m,2H),1.61-1.76(m,5H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H),1.51(br.s.,2H),0.77(br.s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z456.2416(M+H)⁺。

实施例571

(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮

向(S)-(4-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)(哌啶-1-基)甲酮(0.019g,0.076mmol)中加入(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(0.030g,0.114mmol)、NMP(0.5ml)和Hunig's碱(0.033ml,0.190mmol)。反应物于105-110℃加热8小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5mlNMP，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到4.5mg(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(3-氟-4-(哌啶-1-羰基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮，为TFA盐。LCMS m/z474.2(M+H)⁺,Rt0.91分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm8.21(d,J＝2.7Hz,1H),7.22-7.33(m,2H),7.17(d,J＝11.0Hz,1H),4.97(q,J＝7.0Hz,1H),4.59(br.s.,1H),4.47(t,J＝8.8Hz,1H),4.20-4.32(m,1H),3.68(br.s.,2H),1.57-1.75(m,5H),1.48(d,J＝7.0Hz,5H),0.69(br.s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z474.2330(M+H)⁺。

实施例572

N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺

向(S)-4-(1-氨基乙基)-N-环己基-2-氟苯甲酰胺(16mg,0.061mmol)中加入(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(31.4mg,0.121mmol)、NMP(0.5ml)和Hunig’s碱(0.032ml,0.182mmol)。反应物于125℃加热4小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5ml NMP，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到2.5mg N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(5-氟-4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺，为TFA盐。

LCMS m/z488.2(M+H)⁺,Rt0.99分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm8.21(br.s.,1H),7.62(t,J＝7.8Hz,1H),7.24(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.16(d,J＝12.1Hz,1H),4.39-4.54(m,2H),4.23(t,J＝7.2Hz,1H),3.83(t,J＝10.4Hz,1H),1.86-1.97(m,2H),1.76(d,J＝12.9Hz,2H),1.64(d,J＝12.9Hz,1H),1.48(d,J＝7.0Hz,3H),1.12-1.42(m,6H),0.61(br.s.,6H)；HRMS(A)m/z488.2484(M+H)⁺

实施例573

N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺

向(S)-4-(1-氨基乙基)-N-环己基-2-氟苯甲酰胺(16mg,0.061mmol)中加入(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(29.3mg,0.121mmol)、NMP(0.5ml)和Hunig’s碱(0.032ml,0.182mmol)。反应物于125℃加热4小时或直至LCMS显示完成。将反应物放凉，加入0.5ml NMP，过滤，经制备型LC纯化，冷冻干燥，得到5.6mg N-环己基-2-氟-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺，为TFA盐。LCMS m/z470.2(M+H)⁺,Rt0.83分钟。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm8.12(br.s.,1H),7.57-7.73(m,2H),7.13-7.27(m,2H),5.15(br.s.,1H),4.66(br.s.,1H),4.36(d,J＝5.5Hz,2H),3.76-3.94(m,1H),1.87-1.99(m,2H),1.77(d,J＝12.9Hz,2H),1.65(d,J＝13.7Hz,1H),1.57(d,J＝7.0Hz,3H),1.12-1.50(m,6H),0.73(br.s.,3H),0.62(br.s.,3H)；HRMS(A)m/z470.2572(M+H)⁺

实施例574

(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(43mg,0.169mmol)在NMP(0.7mL)中的溶液中加入(S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙胺(41mg,0.169mmol)和DIEA(88μL,0.507mmol)。将棕色反应混合物于110℃搅拌2天。反应混合物用乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液稀释。分离的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。有机相经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。将残余物经反相柱色谱法纯化[C-18]，得到(S)-4-异丙基-3-(2-(((S)-1-(4-(嘧啶-5-基氧基)苯基)乙基)氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(7mg)，为其三氟乙酸盐。

MS m/z421.3(M+H)⁺,Rt0.68分钟。

HRMS(A)m/z421.1996(M+H)⁺,Rt1.54分钟。

实施例575

4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮

将粗的3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(330mg,0.954mmol)、(S)-1-苯基乙胺(810mg,6.68mmol)、Hunig’s碱(1.17mL,6.68mmol)在DMA(3.5mL)中的混合物在密闭试管中于80℃加热～16小时。使混合物冷却至室温，用DMSO稀释，经反相HPLC纯化。将所选择的级分合并，冷冻干燥，得到4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮，为其三氟乙酸盐，为白色固体。LCMS m/z431.2(M+H)⁺,Rt0.83分钟。

将固体溶于乙酸乙酯/饱和NaHCO₃水溶液中。分离的有机层用饱和NaHCO₃水溶液(2x)、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩，得到4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(120mg)。

实施例576&577

(S)-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮和(R)-4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮

将120mg4-苯基-3-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-1,8-二氧杂-3-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮溶于EtOH(10mL)中。

分析分离：

柱：CHIRALPAK AD-H(5um)100x4.6mm(Daicel Chemical Industries,LTD.)。

溶剂：正庚烷:乙醇＝70:30

流速：1.0mL/min；检测：UV＝220nm。

级分1：保留时间：5.84分钟。

级分2：保留时间：10.18分钟。

制备分离：

柱：CHIRALPAK AD-制备型(10um)2x25cm。

溶剂：正庚烷:乙醇＝70:30

流速：20mL/min；530psi；进样：4mL；检测：UV＝210nm。

在减压下浓缩级分。将残余物溶于乙腈中，经注射器滤器过滤，用水稀释，冷冻干燥。

实施例576：第1个峰：白色粉末。产量：52.0mg；de＝99％(UV,220nm)。LCMS m/z431.3(M+H)⁺,Rt0.81分钟。

实施例577：第2个峰：白色粉末。产量：47.8mg；de＝99％(UV,220nm)。LCMS m/z431.3(M+H)⁺,Rt0.81分钟。

实施例578和579

采用与对制备实施例576&577所述那些相似的方法制得

(R)-8-苯基-7-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-2,5-二氧杂-7-氮杂螺[3.4]辛烷-6-酮，和

(S)-8-苯基-7-(2-((S)-1-苯基乙基氨基)嘧啶-4-基)-2,5-二氧杂-7-氮杂螺[3.4]辛烷-6-酮。

表23.

采用与对制备实施例569所述那些相似的方法制得表24的化合物。

表24.

表25.表24所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

实施例583&584

(S)-4-异丙基-3-(2-((R)-1,1,1-三氟丙烷-2-基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

(S)-4-异丙基-3-(2-((S)-1,1,1-三氟丙烷-2-基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(40mg,0.166mmol)在2-丁醇中的溶液中加入1,1,1-三氟丙烷-2-胺(74.9mg,0.662mmol)和对甲苯磺酸一水合物(74.9mg,0.662mmol)。将混合物在氩气中在密闭试管中于115℃加热～7天。立即向(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(100mg,0.414mmol)在2-丁醇中的溶液中加入1,1,1-三氟丙烷-2-胺(187mg,1.655mmol)和对甲苯磺酸一水合物(157mg,0.828mmol)。将混合物在氩气中在密闭试管中于115℃加热～4天。将两批反应混合物合并，在减压下浓缩。残余物用DMSO和水(～10vol.％DMSO)稀释，经注射器滤器过滤，经反相HPLC纯化。收集所选择的级分并冷冻干燥，得到两种异构体，为白色固体，为它们的三氟乙酸盐。

第一个峰583：产量：29.1mg。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm0.90(d,J＝7.04Hz,3H)0.98-1.02(m,3H)1.45(d,J＝7.04Hz,3H)2.59(dtd,J＝13.89,6.95,6.95,3.52Hz,1H)4.43-4.47(m,2H)4.76-4.83(m,2H)7.70(d,J＝5.87Hz,1H)8.20(d,J＝6.26Hz,1H)

LCMS m/z319.3(M+H)⁺,Rt0.73分钟。HRMS(A)m/z319.1391(M+H)⁺,Rt1.89分钟

第二个峰584：产量：38.5mg。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm0.87(d,J＝7.04Hz,3H)0.98(d,J＝7.04Hz,3H)1.45(d,J＝7.04Hz,3H)2.48-2.60(m,1H)4.40-4.49(m,2H)4.88-4.95(m,2H)7.69(d,J＝5.87Hz,1H)8.20(d,J＝6.65Hz,1H)

LCMS m/z319.3(M+H)⁺,Rt0.73分钟。HRMS(A)m/z319.1385(M+H)⁺,Rt1.88分钟

实施例585

(4S)-4-苯基-3-(2-(1,1,1-三氟丙烷-2-基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮

将(S)-3-(2-氯嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(40mg,0.145mmol)、1,1,1-三氟丙烷-2-胺(82mg,0.725mmol)、Hunig’s碱(0.038mL,0.218mmol)在DMSO(0.4mL)中的混合物在氩气下于115℃加热～3天。然后将混合物冷却至室温。混合物用DMSO和水(～10vol.％DMSO)稀释，经注射器滤器过滤，经反相HPLC纯化。收集所选择的级分并冷冻干燥，得到(4S)-4-苯基-3-(2-(1,1,1-三氟丙烷-2-基氨基)嘧啶-4-基)噁唑烷-2-酮(两种异构体的比例:7/3)，为白色固体，为其三氟乙酸盐。LCMS m/z353.2(M+H)⁺,Rt0.78分钟。HRMS(A)m/z353.1231(M+H)⁺,Rt1.92/1.96分钟。

实施例586

(S)-3-(2-((S)-1-环丙基乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮

将(S)-3-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(40mg,0.136mmol)、(S)-1-环丙基乙胺(34.8mg,0.409mmol)、Hunig’s碱(0.119mL,0.681mmol)在DMSO(0.4mL)中的混合物在氩气下于105-115℃加热～18小时(或者：于120-135℃加热～90分钟)。然后使混合物冷却至室温。混合物用DMSO和水(～10vol.％DMSO)稀释，经注射器滤器过滤，经反相HPLC纯化。收集所选择的级分并冷冻干燥，得到(S)-3-(2-((S)-1-环丙基乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(26mg)，为白色固体，为其三氟乙酸盐。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm-0.14--0.05(m,1H)0.01-0.08(m,1H)0.23-0.31(m,1H)0.36-0.44(m,1H)0.78-0.86(m,1H)1.19(d,J＝6.65Hz,3H)3.05-3.14(m,1H)4.25-4.32(m,1H)4.89-4.90(m,1H)5.77(t,J＝8.61Hz,1H)7.32-7.39(m,5H)8.15(d,J＝3.52Hz,1H)。

LCMS m/z343.1(M+H)⁺,Rt0.88分钟。HRMS(A)m/z343.1577(M+H)⁺,Rt2.09分钟

采用与对制备实施例586所述那些相似的方法制得表26的化合物。

表26.

表27.表26所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

采用与对制备实施例568所述那些相似的方法制得表28的化合物。

表28.

表29.表28所列的各个化合物的化学名称、NMR化学位移和LCMS信号

生物学数据

突变IDH1生物化学分析：2-HG的LC-MS检测

采用2-HG(NADPH-依赖性α-KG还原反应的产物)的定量液体色谱法/质谱法(LC-MS)检测对突变IDH1R132H催化活性进行了监测。

更具体而言，采用30μL的最终反应体积和以下分析缓冲液条件在384-孔Greiner平底板(Costar,目录号781201)中于室温进行了生物化学反应：50mM HEPES pH7.4,10mM MgCl₂,50mM KCl,1mM DTT,0.02％BSA,5uM NADPH和100uMα-KG。

最终反应混合物含有3.3％DMSO和浓度为0.02-50μM的抑制剂。以0.25nM的终浓度使用IDH1酶。孵育45分钟后，将反应混合物通过加入10μL16％甲酸(含800nM5-碳标记的¹³C-2-HG)进行淬灭。然后加入2.5体积的乙腈、然后进行离心(3000xg,20分钟)使蛋白质沉淀。通过LC-MS(见下文)测定所述上清液中的2-HG浓度。

LC-MS方法。将反应混合物上清液在BiobasicAX柱(2.1mmx20mm,5μm粒度,Thermo Scientific Inc.)上进行色谱分离。色谱流动相为A)25mM碳酸氢铵和B)乙腈(0.1％氢氧化铵)。烟酰胺以1ml/min、采用历经0.9分钟的85-5％B梯度进行洗脱(Agilent1200SL LC洗脱,Thermofisher LX-4自动采样器)，在API4000QTR^ap质谱仪(ABSciex,Framingham,MA)上以正性电喷射离子化(ESI+)模式通过多反应检测(MRM)进行分析。2-HG和¹³C-2-HG的质量迁移分别为147→129和152→134。在不同抑制剂浓度测定相对响应(2-HG/¹³C-2-HG)，用于计算IC50抑制数值(标准化IC50回归曲线)。

R132蛋白质表达和纯化

采用限制位点XmaI/XhoI(其产生可用Prescission蛋白酶裂解的读框内N-末端His₆位点)将IDH1R132H克隆入pET47b载体中。该质粒转化入Rosetta^TM2(DE3)(Novagen)细胞中。在摇瓶中，将8L细胞在TerrificBroth(Teknova)(加有卡那霉素50μg/mL和氯霉素34μg/mL)中于37℃生长至OD₆₀₀为0.8，通过加入IPTG至0.20mM的浓度诱导蛋白质表达。随后将细胞于18℃生长18小时。

His₆-IDH1(R132H)未切割蛋白质

MAHHHHHHSAALEVLFQGPGMSKKISGGSVVEMQGDEMTRIIWELIKEKLIFPYVELDLHSYDLGIENRDATNDQVTKDAAEAIKKHNVGVKCATITPDEKRVEEFKLKQMWKSPNGTIRNILGGTVFREAIICKNIPRLVSGWVKPIIIGHHAYGDQYRATDFVVPGPGKVEITYTPSDGTQKVTYLVHNFEEGGGVAMGMYNQDKSIEDFAHSSFQMALSKGWPLYLSTKNTILKKYDGRFKDIFQEIYDKQYKSQFEAQKIWYEHR LIDDMVAQAMKSEGGFIWACKNYDGDVQSDSVAQGYGSLGMMTSVLVCPDGKTVEAEAAHGTVTRHYRMYQKGQETSTNPIASIFAWTRGLAHRAKLDNNKELAFFANALEEVSIETIEAGFMTKDLAACIKGLPNVQRSDYLNTFEFMDKLGENLKIKLAQAKL(终止)(SEQ ID NO：1)

IDH1(R132H)Prescission切割蛋白质(N-末端gpg是克隆人工制品)

GPGMSKKISGGSVVEMQGDEMTRIIVVELIKEKLIFPYVELDLHSYDLGIENRDATNDQVTKDAAEAIKKHNVGVKCATITPDEKRVEEFKLKQMWKSPNGTIRNILGGTVFREAIICKNIPRLVSGWVKPIIIGHHAYGDQYRATDFVVPGPGKVEITYTPSDGTQKVTYLVHNFEEGGGVAMGMYNQDKSIEDFAHSSFQMALSKGVVPLYLSTKNTILKKYDGRFKDIFQEIYDKQYKSQFEAQKIWYEHRLIDDMVAQAMKSEGGFIWACKNYDGDVQSDSVAQGYGSLGMMTSVLVCPDGKTVEAEAAHGTVTRHYRMYQKGQETSTNPIASIFAWTRGLAHRAKLDNNKELAFFANALEEVSIETIEAGFMTKDLAACIKGLPNVQRSDYLNTFEFMDKLGENLKIKLAQAKL(终止)(SEQ ID NO：2)

纯化

将细胞在含有蛋白酶抑制剂(cOmplete EDTA-free蛋白酶抑制剂片(Roche)，每50mL缓冲液1片)、DNAse和200μm PMSF的裂解缓冲液中匀化。裂解后，加入Triton X-100至0.1％，于4℃搅拌30分钟。

将澄清裂解物装载到2x5mL HisTrap FF粗柱(GE)上，用裂解缓冲液充分洗涤直至A₂₈₀稳定，用Ni洗脱缓冲液洗脱。峰洗脱级分浓缩至30mL，加入EDTA至1mM，加入GST-Prescission蛋白酶至3U/100μg的蛋白质。将样品于4℃用2L透析缓冲液I(MWCO50kDa)透析6小时，然后用2L透析缓冲液II透析至少6小时以上。将GST-Prescission切割样品与谷胱甘肽琼脂糖小球(Glutathione Agarose Beads)一起振摇，旋下，然后将上清液通过5mL HisTrap HP柱装载，收集流过物。

然后将流过物用冰冷的20mM Tris pH7.4和1mM TCEP稀释直至导电率降低至低于5mS/cm(大约3倍稀释)。然后将该样品流过HiTrap Q柱，将流过物浓缩至10mL，装载到平衡26/60Superdex200柱上，采用SEC缓冲液作为流动相。收集峰级分，将其浓缩和等分。

裂解缓冲液：50mM Tris pH＝7.4,500mM NaCl,20mM咪唑和1mMTCEP

Ni洗脱缓冲液：50mM Tris pH＝7.4,150mM NaCl,200mM咪唑和1mM TCEP

透析缓冲液I：20mM Tris pH＝7.4,150mM NaCl,1mM TCEP和50mM咪唑

透析缓冲液II：20mM Tris pH＝7.4,150mM NaCl和1mM TCEP

SEC缓冲液：20mM Tris pH＝7.4,150mM NaCl和1mM TCEP

表30给出了突变IDH1生物化学分析(mIDH R¹32H)的结果。一些实施例在分析中多次运行，因此IC₅₀值以活性的范围表达。

荧光生物化学分析

IDH1(R132H)突变催化还原形式的NADP+(NADPH)和α-酮戊二酸(α-KG)形成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)和R(-)-2-羟基戊二酸(2HG)。通过追踪NADPH至NADP+的氧化来动态地监测反应，所述氧化采用荧光、355nm激发和530nm发射波长进行测定。采用Perkin-ElmerEnvision,Model2101监测反应。更具体而言，采用20μL的最终反应体积和以下分析缓冲液条件在384-孔Greiner平底板(目录号781076)中于室温进行生物化学反应：50mM HEPES pH7.5,10mM MgCl₂,1mM DTT,0.02％BSA,0.02％Tween-20,10μM NADPH和100μMα-KG。最终反应混合物含有2.5％DMSO和浓度范围为0.0000008-25μM的测试化合物。IDH1(R132H)酶以10nM的最终浓度进行使用。在软件包DAVID的Helios模块中进行剂量响应的曲线拟合IC50测定。使用了4-参数逻辑模型：y＝分钟+((最大–最小)/1+(x/IC₅₀)^斜率)。

表30.LC-MS和荧光生物化学分析的结果

IDH细胞分析

IDH细胞分析由两个肩并肩比较分析组成：1)采用LC-MS的2HG癌代谢物检测分析(关于LC-MC检测细节，请参见突变IDH1生物化学分析)和2)细胞增殖分析以检测脱靶的细胞杀死和将2HG水平变化标准化。采用HCT-116细胞系(表达IDH1突变R132H的内源性水平，可获自HorizonDiscoveries X-Man等基因人细胞系,目录号HD104-013)进行IDH1细胞筛选。将细胞与10％胎牛血清(Gibco目录号10099)和1X非必需氨基酸(NEAA LONZA目录号13-114E)一起在DMEM(LONZA目录号12-540F)中生长。周期性地进行组分析以在具有不同内源性突变-HT1080(IDH1突变R132C,EMEM+10％FBS)、SNU-1079(IDH1突变R132C,RPMI+10％FBS+1％丙酮酸钠)和SW1353(IDH2mut R172S,RPMI+10％FBS+1％丙酮酸钠)的细胞系中测试化合物活性。

分析操作如下：

第1天：对于细胞增殖和2HG分析而言，将细胞在384-孔板(Corning目录号3707)接种，一式三份，于37℃、95％Rh、5％CO₂下孵育过夜。

第2天：将化合物系列稀释1:3(由在DMSO中的10mM溶液进行10稀释)，经声频分配器递送至细胞分析板，终浓度为30uM至1.5nM。在处理后将平板返回至孵育器中，孵育48小时。

第4天增殖分析：将CTG(cell-titer-glo,Promega part#G755B)加入分析板中，在读板器上读取发光信号。

第4天2HG分析：提取样品制备包括从分析板移取所有介质、加入70ul90％甲醇水溶液、干冰孵育15分钟、于2000rpm离心30分钟以确保所有颗粒沉淀和转移30ul上清液至LC-MS Ready Plates。LC-MS分析按照上述操作进行。

已经在IDH细胞分析中测试了本发明的一些化合物。

Claims

1.式(I)化合物

其中：

R^3a是氢、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，且

R^3b是氢、氘或C_1-6烷基；或者

R^4b是氢、氘或C_1-3烷基；或者

R^5a是氢或氘；

R^5b是氢、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，且

其中n是1、2或3，且

R^b各自独立地是氢或C_1-6烷基；或其可药用盐。

2.根据权利要求1的化合物，具有式(III)结构，

或其可药用盐。

3.根据权利要求2的化合物，具有式(IV)结构，

或其可药用盐。

4.根据权利要求3的化合物，其中R^3a和R^3b均是氢；或其可药用盐。

5.根据权利要求4的化合物，其中R^5a是氢且R^5b是氢、甲基、乙基或CF₃；或其可药用盐。

6.根据权利要求5的化合物，其中R^5b是甲基；或其可药用盐。

7.根据权利要求6的化合物，其中R¹是氢、氟或氯且R²是氢、氟、氯或甲基；或其可药用盐。

8.根据权利要求7的化合物，其中R¹和R²均是氢；或其可药用盐。

9.根据权利要求8的化合物，其中R^4a是氢、C_1-6烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基，

其中所述苯基、苄基和杂芳基环任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-3烷氧基、C_1-3卤代烷基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、5-6元杂芳基、5-6元杂环、苯氧基、COOR^b、-SO₂R^b、-NHC(O)R^b和-NR^bR^b；且

R^4b是氢或C_1-3烷基；或其可药用盐。

10.根据权利要求9的化合物，其中R^4b是氢或甲基；或其可药用盐。

11.根据权利要求10的化合物，其中R^4b是氢；或其可药用盐。

12.根据权利要求11的化合物，R^4a是氢、甲基、乙基、异丙基、苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、联苯基、苄基或吡啶基；或其可药用盐。

13.根据权利要求12的化合物，其中R^4a是异丙基；或其可药用盐。

14.根据权利要求1-13任一项的化合物，其中R⁶是甲基、C_5-10环烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的吡啶基、任选被取代的嘧啶基、任选被取代的哒嗪基、任选被取代的吡嗪基、任选被取代的三唑基、任选被取代的吡唑基、任选被取代的噻唑基、任选被取代的1,3,4-噁二唑基、任选被取代的1,2,4-噁二唑基、任选被取代的异噁唑基、噻吩基、噁唑基、喹啉基、任选被取代的苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、四唑并[1,5-a]吡啶基、咪唑并[2,1-b][1,3,4]噻二唑基、任选被取代的哌啶基、任选被取代的哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、任选被取代的四氢-噻喃1,1-二氧化物、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、2,3-二氢-苯并[1,4]二噁烯基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]四唑并[4,3-a]吡嗪基、4,5,6,7-四氢-苯并噻唑基、吲嗪基、环丙基、环戊基或环己基，其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三唑基、吡唑基、噻唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、异噁唑基、苯并咪唑基、哌啶基、哌嗪基和四氢-噻喃1,1-二氧化物各自任选被一个或两个如式(I)中定义的取代基取代。

15.根据权利要求14的化合物，其中R⁶任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自：卤素；羟基；硝基；C_1-4烷氧基；C_1-3卤代烷基；C_1-3卤代烷氧基；C_1-6烷基；任选被一个取代基取代的C_3-6环烷基，所述取代基选自氰基、C_1-3烷基和C_1-3烷氧基；任选被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自氟、氯、甲基、氰基和甲氧基；和任选被一个或两个甲基取代的5-6元杂芳基；或其可药用盐。

16.根据权利要求15的化合物，其中R⁶是任选被取代的1,3,4-噁二唑基或任选被取代的1,2,4-噁二唑基；或其可药用盐。

17.根据权利要求14的化合物，其中R⁶被一个-CH₂R^a、-C(O)R^a、-NHC(O)R^a、-NHC(O)R^b、-C(O)NHR^a、-C(O)NHR^b、-OR^a、-NR^aR^b、-SO₂NR^bR^b、-SO₂R^a或-SO₂R^b基团取代；或其可药用盐。

18.根据权利要求17的化合物，其中R^a是

(a)任选被一个或两个取代基取代的苯基，所述取代基各自独立地选自氟、氯和溴；

(b)任选被取代的5-6元杂芳基；

(c)C_5-7环烷基，任选被一个或两个取代基取代，所述取代基各自独立地选自氟、羟基、甲基和C_1-3卤代烷氧基；或者

(d)选自如下的杂环基团：哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢吡喃基、四氢-噻喃1,1-二氧化物、1,4-二氮杂环庚基、4,7-二氮杂-螺[2.5]辛基、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂-双环[4.2.0]辛基、八氢-吡咯并[1,2-a]吡嗪基、八氢-吡啶并[1,2-a]吡嗪基、八氢-吡咯并[3,4-c]吡咯基和5,6,7,8-四氢-咪唑并[1,2-a]吡嗪基，各自任选被一至三个取代基取代，所述取代基各自独立地选自羟基、氟、氨基、二甲基氨基、C_1-3卤代烷氧基、C_1-3烷基和C_3-5环烷基；或其可药用盐。

19.根据权利要求18的化合物，其中R⁶是任选被取代的苯基；或其可药用盐。

20.根据权利要求19的化合物，其中苯基在对位被一个CH₂R^a、-C(O)R^a或-C(O)NHR^a基团取代；或其可药用盐。

21.根据权利要求2的化合物，具有(V)结构

其中R^4a是苯基且R^4b是氢；或其可药用盐。

22.根据权利要求1的化合物，所述化合物选自：

(S)-3-(5-氟-2-((S)-1-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；或其可药用盐。

23.根据权利要求1的化合物，所述化合物选自：

(S)-3-(2-((S)-1-(5-(4-氟-3-甲基苯基)嘧啶-2-基)乙基氨基)嘧啶-4-基)-4-异丙基噁唑烷-2-酮；或其可药用盐。

24.根据权利要求1的化合物，所述化合物选自：

2-氟-N-(反式-4-羟基环己基)-4-((S)-1-(4-((S)-4-异丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)嘧啶-2-基氨基)乙基)苯甲酰胺；或其可药用盐。

25.根据权利要求1的化合物，其中

R^3a是氢、氘、C_1-6烷基、苯基或苄基，且

R^3b是氢、氘或C_1-6烷基；或者

R^4b是氢、氘或C_1-3烷基；或者

R^5a是氢或氘；

R^5b是氢、氘、甲基、乙基、CD₃、CF₃、CH₂F或CHF₂，且

其中n是1、2或3，且

R^b各自独立地是氢或C_1-6烷基；或其可药用盐。

26.根据权利要求25的化合物，其中

R¹是氢、氟、氯或甲基；

R²是氢；

R^3a是氢、甲基或苯基；

R^3b是氢或甲基；

R^4a是氢、C_1-4烷基、任选被取代的苯基、任选被取代的苄基、任选被取代的杂芳基或二苯基甲基；

R^4b是氢或甲基；

R^5a是H；和

R^5b是氢、甲基、乙基或CF₃；或其可药用盐。

27.根据权利要求26的化合物，其中R⁶是异丙基、任选被取代的芳基、任选被取代的吡唑基、任选被取代的吡啶基、2,3-二氢苯并呋喃基、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁烯基或任选被取代的C_5-10环烷基；或其可药用盐。

28.药物组合物，包含权利要求1的化合物或其可药用盐以及包含可药用载体或赋形剂。

29.治疗与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的权利要求1的化合物或其可药用盐。

30.治疗与具有新变体活性的突变IDH蛋白质相关的疾病或障碍的方法，该方法包括给需要其的个体施用治疗有效量的权利要求1的化合物或其可药用盐以及其它治疗剂。