CN102441160A - 一种胸腺肽α1药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制剂术领域，提供一种胸腺肽α1注射制剂药物组合物。这种胸腺肽α1注射制剂药物组合物，包括胸腺肽α1、药用辅料、缓冲液及适量pH调节剂。本发明同时还提供了该药物组合物的一种制备方法。根据本发明制备的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，稳定性显著增加，利于药品的流通及使用。

Description

一种胸腺肽α1药物组合物及其制备方法

技术领域：

本发明涉及胸腺肽α1制剂，尤其涉及一种胸腺肽α1注射制剂药物组合物。

背景技术：

胸腺肽α1(Thymosin α1)，结构式如(I)所示，是免疫增强剂，用于治疗慢性乙型肝炎和增强免疫系统反应性的作用机制已完全阐明。其氨基酸序列为：AC-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH。多项体外试验显示，本品通过刺激外周血液淋巴细胞丝裂原来促进T淋巴细胞的成熟，增加抗原或丝裂原激活后T细胞分泌的干扰素α、干扰素γ以及白介素2、白介素3等淋巴因子水平，同时增加T细胞表面淋巴因子受体水平。本品还可通过对CD4细胞的激活，增强异体和自体的人类混合淋巴细胞反应。本品可能增加前NK细胞的聚集，而干扰素可使其细胞毒性增强。

胸腺肽α1在普通的水溶液中稳定性很差，并且皮下注射后，患者会感觉不适，本发明所提供的胸腺肽α1药物组合物稳定性显著增加，利于药品的流通及使用，并为患者广泛接受。

发明内容：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种更加稳定的胸腺肽α1注射制剂药物组合物。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：包括胸腺肽α1 1-100mg/ml、辅料10-150mg/ml、缓冲液10-250mM及适量氢氧化钠或盐酸调节pH值为5.0-7.5，其中缓冲剂为硫酸盐、枸橼酸盐、磷酸盐、乳酸盐或其混合物。

其中，所述辅料包括赋形剂、抗氧化剂和局部止痛剂，赋形剂优选山梨醇与乳糖的混合物，抗氧化剂优选亚硫酸氢钠，局部止痛剂优选三氯叔丁醇，缓冲剂优选磷酸二氢钠，pH值优选6.0-7.0。

本发明还提供了制备含胸腺肽α1的注射剂药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将药用辅料溶于注射用水中，充分溶解；

(2)向步骤(1)中获得的水溶液中加入胸腺肽α1，并将其充分溶解；

(3)向步骤(2)中获得的水溶液中加入pH调节剂，调节至所需pH值；

(4)过滤并冷冻干燥步骤(3)制备的溶液。

本发明的有益效果：稳定性显著增加，利于药品的流通及使用，并为患者广泛接受。

具体实施方式：

本发明为了考察赋形剂的量、pH值、缓冲盐根离子对注射用胸腺肽α1注射剂药物组合物的稳定性影响，进行了大量实验研究。已经证实，两种填充糖组合物优于一种填充糖，具体结果如下：山梨醇+乳糖＞山梨醇+甘露醇＞山梨醇+蔗糖＞山梨醇＞甘露醇＞蔗糖。同时，对制剂的pH值范围也做了大量研究，结果表明最佳pH范围为6.0-7.5。

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。

实施例1

实施例1胸腺肽α1注射剂药物组合物配方为：1.6mg/ml胸腺肽α1，4mg/ml山梨醇，4mg/ml乳糖，10mg/ml亚硫酸氢钠，8mg/ml三氯叔丁醇，20mM磷酸二氢钠，醋酸调节pH为6.5。

其制备过程如下：向1000ml烧杯中加入4g山梨醇，4g乳糖，10g亚硫酸氢钠，8g三氯叔丁醇，加入注射用水充分溶解，加入胸腺肽α1，至其最终的定容浓度为1.6mg/ml，加入磷酸二氢钠至其浓度为20mM，并且用1NHCl将pH调节至6.5，加注射用水定容。在过滤前，注射液中加入12.5g活性碳，在搅拌下吸附热原30分钟，脱碳过滤。滤液经0.22μm钛棒过滤器过滤，再经0.22μm微孔滤膜除菌过滤。分装于10ml玻璃小瓶，冷冻干燥，压塞，扎盖，获得浓度为1.6mg/ml注射用胸腺肽α1制剂。

由实施例1制得注射用胸腺肽α1制剂1000支，通过加速试验对其稳定性进行了考察。通过动物血管刺激性、肌肉刺激性及过敏性实验，对局部刺激性进行了考察。通过与常用输液配伍，观察其外观、有关物质及含量变化考察了其在常用输液中的稳定性。

加速试验：

上市对照品与实施例1样品对比

分别将市售的注射用胸腺肽α1制剂对照品和实施例一的一批样品放入温度为40±2℃、相对湿度为75％±5％的恒温恒湿箱中进行考察，分别在0、1、2、3和6个月时取样测定，结果见表1-1和表1-2。

表1-1市售对照品加速试验结果

表1-2实施例1样品加速试验结果

通过表1-1和表1-2可以看出，经加速试验考察6个月，实施例1制备的注射用胸腺肽α1制剂与已上市的注射用胸腺肽α1制剂比较，外观色泽、pH、溶液澄清度指标相当，而已上市的供试品的杂质增加、含量下降明显，表明本发明制备的胸腺肽α1注射剂可于室温下保存，稳定性增加。

血管刺激性、肌肉刺激性、过敏性及溶血实验：

血管刺激性：

选取双耳无损伤的健康家兔6只，左侧耳缘静脉注射实施例1注射液1ml，右耳注射等容量5％葡萄糖注射液，每天1次，连续注射7天。

注射期间，每天定时观察耳缘静脉的刺激性反应。第8天处死家兔，取双侧耳缘静脉及周围组织，用甲醛固定，在注射部位近心端作常规组织切片，光镜下观察有无病理变化。

结果表明，家兔耳缘静脉注射实施例1注射液的刺激性，与5％葡萄糖注射液比较无明显差异。肉眼观察，未见血管充血、周围组织水肿等炎症反应。组织切片检查，未见血管结构异常、内皮损伤、血栓形成及其它病理变化，表明实施例1制备的注射用胸腺肽α1药物组合物无刺激性。

肌肉刺激性：

取健康家兔6只，每只家兔左侧股四头肌内注射实施例1注射液1ml，右侧注射同体积生理盐水。注射后观察注射部位肌肉有无充血、水肿等反应，半数动物48h后(第3天)放血处死，纵向切开皮肤，肉眼观察两侧注射部位有无充血、水肿等反应，并取其组织做病理检查。余下动物继续观察14d，于第18天放血处死后重复上述操作，然后评价该药的刺激反应。

结果表明，家兔左侧股四头肌内注射实施例1注射液后，肉眼观察注射部位肌肉无充血、水肿等反应，病理组织检查亦未见组织变性或坏死等明显性刺激反应，与生理盐水侧相比无显著差异。

对豚鼠的致敏作用：

选取健康豚鼠6只，每只腹腔注射实施例1注射液0.5ml，隔日注射1次，共注射3次。然后随机分为2组，分别在第1次给药后14或21天，静脉注射实施例1注射液1ml。观察豚鼠有无兴奋不安、呼吸困难等过敏症状。

结果两组豚鼠均活动正常，未见呼吸异常等。

血管刺激性、肌肉刺激性及过敏性实验表明，实施例1注射液无明显的刺激性、过敏性。

输液中稳定性实验：

以10ml纯化水稀释实施例1制备的注射用胸腺肽α1，分别吸取10ml，分别用常用输液：0.9％氯化钠注射液(0.9％NS)、5％葡萄糖注射液(5％GS)、稀释至200ml，使胸腺肽α1浓度为0.008mg/ml。分别于25℃，测定时间观察其外观、杂质、含量变化，结果见表1-3。

表1-3注射液稳定性实验

结果表明，实施例1制备的胸腺肽α1制剂与常用输液，0.9％氯化钠注射液(0.9％NS)、5％葡萄糖注射液(5％GS)配伍使用，稳定性都较好，因此，该实施例制得样品可以与这些输液配伍使用。

实施例2-实施例10

实施例2-实施例10配方如下表

实施例1胸腺肽α1注射剂药物组合物配方为：1.6mg/ml胸腺肽α1，4mg/ml山梨醇，4mg/ml乳糖，10mg/ml亚硫酸氢钠，8mg/ml三氯叔丁醇，20mM磷酸二氢钠，醋酸调节pH为6.5。山梨醇+乳糖＞山梨醇+甘露醇＞山梨醇+蔗糖＞山梨醇＞甘露醇＞蔗糖。

实施例2-实施例10的制备过程与实施例1的基本相同，均是先向1000ml烧杯中加入所有的药用辅料，加入注射用水充分溶解，加入胸腺肽α1至其最终定容浓度为1.6mg/ml，加入缓冲盐至其浓度，并且用1NHCl将pH调节至6.5，加注射用水定容。在过滤前，注射液中加入12.5g活性碳，在搅拌下吸附热原30分钟，脱碳过滤。滤液经0.22μm钛棒过滤器过滤，再经0.22μm微孔滤膜除菌过滤。分装于10ml玻璃小瓶，冷冻干燥，压塞，扎盖，获得浓度为1.6mg/ml注射用胸腺肽α1制剂。

由实施例2-实施例10制得注射用胸腺肽α1制剂1000支，通过加速试验对其稳定性进行了考察。通过动物血管刺激性、肌肉刺激性及过敏性实验，对局部刺激性进行了考察。通过与常用输液配伍，观察其外观、有关物质及含量变化考察了其在常用输液中的稳定性。

加速试验：

按实施例1的方法分别对实施例2-实施例10所得制剂组合物进行加速试验，结果见表2-1-10-1。

表2-1样品加速试验结果

表3-1样品加速试验结果

表4-1样品加速试验结果

表5-1样品加速试验结果

表6-1样品加速试验结果

表7-1样品加速试验结果

表8-1样品加速试验结果

表9-1样品加速试验结果

表10-1样品加速试验结果

通过表1-1和表2-3-表10-3对比可以看出，经加速试验考察6个月，实施例2-实施例10制备的注射用胸腺肽α1制剂与已上市的注射用胸腺肽α1制剂比较，外观色泽、pH、溶液澄清度指标相当，而已上市的供试品的杂质增加、含量下降明显，表明本发明制备的胸腺肽α1注射剂可于室温下保存，稳定性增加。

血管刺激性、肌肉刺激性、过敏性及溶血实验：

血管刺激性：

采用与实施例1相同的方法，结果显示，家兔耳缘静脉注射实施例2-实施例10注射液的刺激性，与5％葡萄糖注射液比较无明显差异。肉眼观察，未见血管充血、周围组织水肿等炎症反应。组织切片检查，未见血管结构异常、内皮损伤、血栓形成及其它病理变化。表明实施例2-实施例10制备的注射用胸腺肽α1药物组合物无刺激性。

肌肉刺激性：

采用与实施例1相同的方法，结果表明，家兔左侧股四头肌内注射实实施例2-实施例10注射液后，肉眼观察注射部位肌肉无充血、水肿等反应，病理组织检查亦未见组织变性或坏死等明显性刺激反应，与生理盐水侧相比无显著差异。

对豚鼠的致敏作用：

采用与实施例1相同的方法，结果表明，静脉注射实施例2-实施例10注射液后，结果两组豚鼠均活动正常，未见呼吸异常等。

血管刺激性、肌肉刺激性、体外溶血性及过敏性实验表明，实施例2-实施例10注射液无明显的刺激性、过敏性。

输液中稳定性实验：

按实施例1的方法分别对实施例2-实施例10所得制剂组合物进行输液中稳定性实验，结果见表2-4-10-4。

表2-4注射液稳定性实验

表3-4注射液稳定性实验

表4-4注射液稳定性实验

表5-4注射液稳定性实验

表6-4注射液稳定性实验

表7-4注射液稳定性实验

表8-4注射液稳定性实验

表9-4注射液稳定性实验

表10-4注射液稳定性实验

上述结果表明，实施例2-实施例10制备的胸腺肽α1制剂与常用输液，0.9％氯化钠注射液(0.9％NS)、5％葡萄糖注射液(5％GS)配伍使用，稳定性都较好，因此，该实施例制得样品可以与这些输液配伍使用。

实施例1-实施例10还表明，在加入抗氧化剂和局部止痛剂后其药用效果较市售制剂更加理想，减轻了患者注射时的不适感，更利于患者广泛接受。

Claims (10)

1.一种胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：包括胸腺肽α1 1-100mg/ml、辅料10-150mg/ml、缓冲液10-250mM及适量氢氧化钠或醋酸调节pH值为5.0-7.5，其中缓冲剂为硫酸盐、枸橼酸盐、磷酸盐、乳酸盐或其混合物。所述辅料包括赋形剂、抗氧化剂和局部止痛剂。

2.根据权利要求1所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：赋形剂选自山梨醇、甘露醇、乳糖、蔗糖或者其混合物，含量为1-50mg/ml。

3.根据权利要求2所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述赋形剂优选山梨醇与乳糖的混合物，含量优选1-10mg/ml。

4.根据权利要求1所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述抗氧化剂选自亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酚、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、叔丁基对羟基茴香醚或其混合物，含量为1-50mg/ml。

5.根据权利要求4所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述抗氧化剂优选亚硫酸氢钠，含量优选1-10mg/ml。

6.根据权利要求1所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述局部止痛剂选自常用的有苯甲醇、三氯叔丁醇和盐酸普鲁卡因等或其混合物，含量为1-50mg/ml。

7.根据权利要求6所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述局部止痛剂优选三氯叔丁醇，含量优选1-10mg/ml。

8.根据权利要求1所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：所述缓冲剂为硫酸氢钠、枸橼酸钠、磷酸钠、磷酸一氢钠、磷酸二氢钠、乳酸钠或其混合物，含量为10-250mM。缓冲剂优选磷酸二氢钠，其含量优选10-150mM。

9.根据权利要求1所述的胸腺肽α1注射制剂药物组合物，其特征在于：pH值为5.0-7.5，优选6.0-7.0。

10.权利要求11所述制剂，其制备工艺如下：

(1)将药用辅料溶于注射用水中，充分溶解；

(2)向步骤(1)中获得的水溶液中加入胸腺肽α1，并将其充分溶解；

(3)向步骤(2)中获得的水溶液中加入pH调节剂，调节至所需pH值；

(4)过滤并冷冻干燥步骤(3)制备的溶液。